Структурно-функциональные особенности стенки артерий в развитии иммунного воспаления в атерогенезе

Бобрышев, Юрий Вениаминович

Диссертации по медицине → Патологическая физиология

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.03) на тему:Структурно-функциональные особенности стенки артерий в развитии иммунного воспаления в атерогенезе

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Бобрышев, Юрий Вениаминович Москва 2012 г.

Ученая степень: доктора биологических наук

ВАК РФ: 14.03.03

Автореферат диссертации по медицине на тему Структурно-функциональные особенности стенки артерий в развитии иммунного воспаления в атерогенезе

На правах рукописи

Бобрышев Юрий Вениаминович

Структурно-функциональные особенности стенки артерий в развитии иммунного воспаления в атерогенезе

14.03.03- патологическая физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

МОСКВА-2012

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении «Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины» Северо-западного отделения РАМН и Федеральном государственном бюджетном учреждении «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии» РАМН

Научные консультанты:

Доктор медицинских наук, профессор, академик РАМН I Нагорнев Владимир Анатольевич I Доктор биологических наук, профессор Орехов Александр Николаевич

Официальные оппоненты: Репин Вадим Сергеевич

Доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАМН

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научно-исследовательский

институт общей патологии и патофизиологии» РАМН

Главный научный сотрудник лаборатории клеточной биологии и патологии развития Кухарчук Валерий Владимирович

Доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАМН

Научно-исследовательский институт клинической кардиологии им. A.JL Мяснтасова,

Российский кардиологический научно-производственный комплекс

Минздравсоцразвития Российской Федерации

Руководитель отдела проблем атеросклероза

Кошелев Владимир Борисович

Доктор биологических наук, профессор

Государственное учебно-научное учреждение Факультет фундаментальной медицины Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова Заведующий кафедрой физиологии и общей патологии

Ведущая организация: Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего лрофессиоиального образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Защита состоится « 2012 года в У» часов на заседании

Диссертационного совета^ Д 001.003.01 при Федеральном государственном бюджетном учреждении «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии» Российской Академии Медицинских Наук, по адресу: 125315, Москва, ул. Балтийская, д.8.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института. -Автореферат разослан

012 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат медицинских наук Скуратовская Лариса Николаевна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Атеросклероз и его осложнения продолжают оставаться наиболее частой причиной смертности и инвалидности трудоспособного населения во всех развитых странах. В связи с этим понятны усилия, направленные на изучение механизмов пато - и морфогенеза этого заболевания. Несмотря на значительный прогресс в исследовании атеросклероза и многочисленные гипотезы, объясняющие его возникновение и течение, ряд ключевых моментов пато - и морфогенеза заболевания остаются дискуссионными и недостаточно изученными. В частности, это касается роли структурно-функциональной гетерогенности клеточных элементов интимы артерий и значимости межклеточных взаимодействий в атерогенезе.

В патогенетических механизмах атеросклероза, особенно в начальных

стадиях, все большее значение придается иммунному воспалению артерий

(Нагорнев В.А., 2006). Основанием для таких взглядов являются результаты

исследований, демонстрирующие присутствие активированных лимфоцитов в

ранних и продвинутых атеросклеротических поражениях человека, а также

присутствие в крови и в сосудистой стенке антител "атеросклеротического

происхождения". Вовлеченность иммунных реакций в развитие

атеросклеротических поражений подтверждена в экспериментальных моделях,

утилизирующих экспериментальных животных. Наибольшее количество

информации получено при исследовании мышей с различными генетически-

индуцированными дефектами. Несмотря на очевидную ценность полученной

информации, эти модели лишь частично отражают многообразие процессов,

имеющих место при атеросклерозе у человека, и не могут быть полностью

использованы для объяснения механизмов развития атеросклеротических

поражений (Нагорнев В.А., 2005). Стоит лишь отметить, что в отличие от артерий человека, которые характеризуются "толстой" многослойной интимой, содержащей разнообразные клеточные элементы, интима артерий мышей, представлена только эндотелием, располагающимся на внутренней эластической мембране и отделенной от последней лишь тонкой прослойкой соединительно-тканного матрикса, практически не содержащего клеточных элементов.

Ряд классических исследований, выполненных на аутопсийном и биопсийном материале, позволил установить, что интима артерий представлена гетерогенной клеточной популяций (Аничков H.H., 1947; Нагорнев В.А., 2006; Ross R., 1999). Морфологическая разнородность клеточных популяций артерий была подвергнута изучению и основные клеточные элементы, включая эндотелиальные клетки, гладкомышечные клетки, моноциты-макрофаги, лимфоциты, перициты и тучные клетки, были распознаны. Показано, что в атеросклеротически пораженных артериях человека гладкомышечные клетки претерпевают фенотипическую модификацию. Однако до настоящего времени не проведена комплексная морфофункциональная характеристика фенотипической модуляции гладкомышечных клеток артерий человека и не доказан факт участия этих клеток в развитии патологического процесса на ранних стадиях атеросклероза. Кроме того, не выяснено, какие изменения в сосудах предшествуют появлению измененных гладкомышечных клеток.

Интима артерий и внутренняя часть медии не имеет нервных окончаний, и поддержание гомеостаза осуществляется исключительно за счет межклеточных взаимодействий. К настоящему времени накоплен большой объем информации о различных факторах, способных регулировать деятельность клеток артерий в in vitro условиях, однако структурные аспекты взаимодействия клеток в интиме артерий человека и их роль в развитии атеросклеротических поражений недостаточно изучены.

Проведенные до настоящего времени исследования морфологической

гетерогенности интимы артерий человека, в основном, не носили системный

характер и не позволили связать фенотипическую модуляцию клеточных элементов интимы с локальностью возникновения атеросклеротических поражений в артериях, что затрудняет понимание значимости структурно-функциональной гетерогенности клеток в патогенезе атеросклероза. Взаимосвязь фенотипической модуляции клеточных элементов интимы с иммунно-воспалительных реакциями при атеросклерозе также не получила достаточного внимания.

Все вышесказанное свидетельствовало о необходимости проведения комплексного и многопланового исследования с использованием новых методических подходов и современных морфологических методов для анализа аутопсийного и биопсийного материала, которое позволили бы понять морфологическую сущность патофизиологических процессов, вовлеченных в развитие атеросклероза.

Цель настоящей работы

Работа посвящена проблеме раскрытия фундаментальных патогенетических механизмов атеросклероза и изучению структурных особенностей развития атеросклеротических поражений.

Целью настоящей работы являлось изучение роли иммунного воспаления в развитии атеросклероза у человека. В процессе исследования было показано присутствие в интиме артерий антиген-представляющих дендритных клеток и проведено изучение характеристик и роли этих клеток в атеросклерозе.

Основные задачи исследования

В соответствии с указанной целью были определены следующие основные задачи исследования:

1. Изучить изменение клеточной композиции интимы артерий человека на

самых ранних стадиях развития атеросклеротических поражений и роль

иммунно-воспалительных реакций в инициации атеросклеротического процесса.

2. Изучить клеточную композицию артерий человека на "продвинутых" стадиях атеросклеротического поражения с учетом значимости иммунного воспаления в прогрессировании атеросклеротического процесса.

3. Исследовать особенности участия различных клеточных элементов интимы в развитии атеросклеротических поражений.

4. Исследовать структурные особенности межклеточных взаимодействий в интиме артерий человека и определить их значимость в формировании атеросклеротических поражений.

5. Исследовать возможность появления фенотипически измененных клеток в атеросклеротических поражениях артерий человека и определить возможную взаимосвязь воспалительных реакций с фенотипической модуляцией клеток артерий.

Научная новизна

Проведено комплексное исследование структурных особенностей интимы артерий человека в норме и при развитии атеросклеротических поражений.

Впервые выявлено присутствие в артериях человека клеток, принадлежащих семейству антиген-представляющих дендритных клеток. Показано, что дендритные клетки являются обязательным элементом артерий человека в норме. Охарактеризована ультраструктура дендритных клеток нормальных артерий человека и распознаны два фенотипа, один из которых является вариантом клеток Лангерганса. Показано, что посредством клеточных отростков дендритные клетки формируют локальные клеточные "сети" в интиме артерий, обеспечивая взаимосвязь различных типов клеток. Выявление системы клеточных взаимодействий, обеспечиваемых присутствием дендритных клеток в артериальной стенке, позволило составить более полное представление о механизмах поддержания гомеостаза в артериях человека.

При сравнении предрасположенных и резистентных к поражению атеросклерозом участков визуально неповрежденной аорты была показана вовлеченность дендритных клеток в иммунное воспаление с самых ранних стадий развития атеросклероза. Показано, что система клеточных взаимодействий, свойственная нормальной интиме, нарушается, в частности, в результате формирования дендритными клетками непосредственных контактов с лимфоцитами и макрофагами. Показана активация дендритных клеток в участках аорты, предрасположенных к поражению атеросклерозом.

Изучены особенности топографического распределения дендритных клеток в различных типах атеросклеротических поражений. Показана преимущественная аккумуляция дендритных клеток в плечевых зонах атеросклеротических бляшек. Показано, что увеличение числа дендритных клеток в плечевых участках происходит параллельно с трансформацией "стабильных" атеросклеротических бляшек в "нестабильные". Показано присутствие кластеров зрелых дендритных клеток с активированными Т-лимфоцитами в плечевых зонах бляшек, обогащенных присутствием микрососудов, связанных с неоваскуляризацией бляшек.

Показана повышенная эндоцитозная активность эндотелиапьных клеток в участках аорты человека, предрасположенных к поражению атеросклерозом. В этих же участках обнаружены скопления моноцитов-макрофагов, Т-лимфоцитов и активированных дендритных клеток. Морфометрически доказаны локальность и постоянство инфильтрации интимы моноцитами-макрофагами, которые вовлечены в воспалительные реакции и способны влиять на изменения фенотипа гладкомышечных клеток.

Исследование атеросклеротических поражений артерий человека позволило

выявить существование ранее неизвестных фенотипов клеточных элементов, в

частности, существование различных фенотипов гладкомышечных клеток. В

участках нормальной интимы и в ранних атеросклеротических поражениях

артерий человека детально изучены характеристики "синтетического" и

"сократительного" фенотипов гладкомышечных клеток. Показано, что в

"зрелых" атеросклеротических бляшках, в дополнение к "синтетическому" и "сократительному" фенотипам, существуют ранее неизвестные модификации гладкомышечных клеток, обозначенные нами как "остеоидный" и "хондроцитоидный" фенотипы. "Остеоидный" и "хондроцитоидный" фенотипы гладкомышечных клеток были обнаружены в атеросклеротических бляшках аорты, коронарных и сонных артерий человека, что свидетельствует о стереотипе структурно-функциональных перестроек в артериях мышечно-эластического и эластического типов при атеросклерозе.

Перечисленные новые факты позволили уточнить последовательность морфогенетических процессов, происходящих при атеросклерозе в артериях человека, и выяснить участие различных клеточных элементов интимы в атерогенезе. В работе детально изучены структурные аспекты межклеточных взаимодействий в интиме артерий и показана значимость иммунного воспаления в инициации и прогрессировании атеросклероза.

Теоретическая и практическая значимость

Практическая ценность данной работы состоит в том, что она, являясь фундаментальным исследованием, дает набор базовых сведений для последующих исследований архитектоники артерий и открывает новые подходы в изучении пато - и морфогенеза атеросклероза.

Выявленные особенности структурной организации интимы артерий человека имеют общебиологическое значение.

Выявление присутствия дендритных клеток в интиме артерий привело к развитию самостоятельного направления исследований в области изучения морфо - и патогенеза атеросклероза.

также исследований роли дендритных клеток в разнообразных хирургических интервенциях, направленных на коррекцию функции сосудов.

Исследования, продемонстрировавшие вовлеченность дендритных клеток в атерогенез, могут оказать помощь в разработке поиска новых методов, направленных на регуляцию иммунных процессов в атеросклерозе.

Полученные в результате исследования новые данные могут быть использованы в учебном процессе на кафедрах гистологии, патологической анатомии, общей патологии и патологической физиологии медицинских ВУЗов и институтов Усовершенствования врачей, а также в работах научно-исследовательских институтов, занимающихся проблемами

сердечнососудистой патологии человека.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Иммунно-воспалительные реакции в атеросклерозе связаны с изменениями клеточной композиции клеток интимы и их фенотипической модуляцией.

2. В интиме сосудистой стенки артерий человека существует сложная система межклеточных взаимодействий, опосредованная присутствием в интиме дендритных клеток.

3. Участки артерий, предрасположенные к развитию атеросклеротических поражений, характеризуются нарушением системы межклеточных взаимодействий.

4. Иммунно-воспалительные реакции, опосредованные активированными дендритными клетками, играют ключевую роль в инициации самых ранних этапов развития атеросклеротических поражений.

5. Иммунно-воспалительные реакции, опосредованные активированными дендритными клетками, вовлечены в прогрессирование атеросклероза.

6. Прогрессирование атеросклеротических поражений является результатом нарушения межклеточных взаимодействий и сопровождается изменением морфофункциональных свойств клеточных элементов интимы.

Реализация результатов работы

Диссертация является итоговым обобщением результатов, полученных при выполнении грантовых тем: "Изменения фенотипа гладкомышечных клеток артерий человека при атеросклерозе" (1989-1991 гг.), "Исследование морфофункциональных особенностей клеток и межклеточных взаимодействий в интиме аорты человека при раннем атеросклеротическом поражении" (19911992 гг.) и "Регуляция фенотипа гладкомышечных клеток артерий человека при атеросклерозе и в эксперименте" (1993-1995 гг), "Воспаление и атеросклероз" (2010-2011 гг). Начиная с 1995 г. и по 2012 г. исследования также финансировались St. Vincent's Hospital и St. Vincent's Clinic Foundation, Сидней, Австралия, и представленные в диссертации результаты были получены при выполнении следующих грантовых тем: "Investigation of the nature of vascular dendritic cells and their involvement in atherosclerosis", "Investigation of the role of intercellular contacts in development of atherosclerotic lesions", "Investigation of maturation of vascular dendritic cells in atherosclerotic lesions"; "Investigation of association between dendritic cell maturation and T cell activation in human atherosclerotic lesions", "Analysis of the expression of co-stimulatory molecules by dendritic cells accumulating in atherosclerotic lesions", "Investigation of structural and functional characteristics of vascular dendritic cells in situ and in vitro" и "Phenotyping dendritic cells in vulnerable atherosclerotic plaque". Финансирование работы также осуществлялось из "Vascular Research Fund", Surgical Professorial Unit, St. Vincent's Hospital, Сидней.

Полученные новые данные о присутствия дендритных клеток в интиме артерий и их участия в развитии атеросклероза привели к развитию самостоятельного направления исследований в области изучения морфо - и патогенеза атеросклероза. Идентификация дендритных клеток в нормальных артериях человека также способствовала инициации исследований,

направленных на выяснение возможной вовлеченности дендритных клеток в другие заболевания сердечнососудистой системы.

Апробация результатов диссертации

Материалы диссертации были представлены в виде докладов и тезисов на следующих научных мероприятиях: "Липопротеиды и атеросклероз" (Симпозиум, посвященный 110-летию со дня рождения Н.Н. Аничкова)" (Санкт-Петербург, 1995), "5th St Vincent's Campus Research Symposium" (Sydney, 1995), "Surgical Research Society of Australia and New Zealand (Auckland, 1995), "Joint Conference on Arteriosclerosis, and Vascular Biology" (Salt Lake City, 1996), "Annual Scientific Congress" (Melbourne, 1996), "4th World Congress on Heart Failure - Mechanisms and Management" (Jerusalem, 1996), "36th Conference on Cardiovascular Disease Epidemiology and Prevention" (San Francisco, 1996), "The 23rd World Congress of the International Society for Cardiovascular Surgery" (London, 1997), "Annual Scientific Congress, Royal Australasian College of Surgeons" (Sydney, 1998; Melbourne, 2000; Brisbane, 2003; Kuala Lumpur, 2012), "Third Congress of the Asian Vascular Society (CAVS1 98)" (Beijing, 1998), "Vascular Symposium" (Singapore, 1998), "Vascular Biology Society and International Vascular Biology Meeting" (Cairns, 1998; Sydney, 2008), "55th Annual Meeting of the Society for Vascular Surgery" (Baltimore, 2001), "48th Annual conference of Indian Association of Cardiovascular & Thoracic Surgeons" (Chennai, 2002), "Joint 17th Annual Meeting of the European Association for Cardio-thoracic Surgery and the 11th Annual Meeting of the European Society of Thoracic Surgeons" (Vienna, 2003), "3rd International AIDS Society Conference on HIV Pathogenesis and Treatment" (Rio de Janeiro, 2005), "International Meeting of the Institute of Human Virology" (Baltimore, 2005), "7th World Congress on Inflammation" (Melbourne, 2005), "14th Meeting of the International Society of Atherosclerosis" (Rome, 2006), "40th Japan Atherosclerosis Society Annual Meeting" (Tsukuba, 2008), "Актуальные вопросы медицинской биологии и

паразитологии (Юбилейная научно-практическая конференция, посвященная 200-летию кафедры биологии имени академика Е.Н. Павловского, ВМА)" (Санкт-Петербург, 2009), VII Всероссийская конференция с международным участием "Механизмы функционирования висцеральных систем" (Санкт-Петербург, 2009), "1st AMDI-Intemational Biohealth Science Conference (IBSC)" (Penang, 2010), "45th Congress of the European Society for Surgical Research"(Geneva, 2010), "2nd Annual Health Conference, Global Healthcare: Differing Perspectives and Dimensions in Healthcare" (Kuala Lumpur, 2011), "79th European Atherosclerosis Society Congress" (Gothenburg, 2011), "2011 National Histotechnology Conference" (Sydney, 2011), "XVI International Symposium on Atherosclerosis ISA2012" (Sydney, 2012), "European Atherosclerosis Society (EAS)" (Milan, 2012).

Публикации по теме диссертации

По результатам исследований опубликовано 104 работы в отечественных и международных журналах, одна глава в монографии и одна монография.

Структура и объем диссертации

использованной литературы содержит 414 источников. Текст иллюстрирован 61 рисунком, преимущественно в виде блоков (Приложение на 35 страницах) и 3 таблицами.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материал

Результаты исследований, включенные в настоящую работу, получены в основном при изучении тканевых сегментов артерий человека. Работа выполнена с использованием срочного аутопсийного и материала (аорта и коронарные артерии) и тканевых образцов полученных в результате биопсий (аорта, коронарные и сонные артерии), полученных на базе ВКНЦ, Москва; патологоанатомическом отделении клиник 1-го Ленинградского Медицинского Института, Ленинград (Санкт-Петербург); St Vincent's Hospital Sydney, Австралия; Tsukuba University Hospital, University of Tsukuba, Япония; и Institute of Forensic Medicine, Сидней, Австралия, в течение 1989-2008 годов.

Для изучения структурных особенностей "здоровых" артерий и наиболее ранних стадий формирования атеросклеротических поражений использовали тканевые образцы грудного отдела аорты, полученные в результате срочных аутопсийных вскрытий на базе ВКНЦ. Из грудного отдела аорты выделяли фрагмент (около 20 см длиной), промывали его в культуральной среде 199 или в забуференном физиологическом растворе. Сосуд вскрывали продольно по задней стороне между двумя рядами межреберных артерий. В соответствии рекомендациями Bhagwat and Roberstson (1973), Cornhill and Roach (1976) и Svendsen and Eide (1980) различали предрасположенные к поражению (ПП) атеросклерозом участки, локализованные вдоль ряда устий 3-9 пары межреберных артерий, и резистентные к поражению (РП) атеросклерозом участки, расположенные на том же уровне по передней поверхности аорты. В каждом случае, часть тканевого материала использовали для последующей

электронной микроскопии, другую же часть погружали в OCT compound и хранили при -70°С для последующего иммуногистохимического анализа. Часть материала фиксировали, заливали в парафин и окрашивали гематоксилин-эозином, а оставшуюся часть сосуда использовали для приготовления пленочных ("Hautchen") гистопрепаратов и для электронной микроскопии.

Помимо изучения наиболее ранних изменений интимы при атеросклерозе, исследовали также атеросклеротические поражения, анализируя различные стадии атеросклеротического процесса. Для количественных исследований, использовали поперечные серийные срезы центральной части атеросклеротических поражений. В сформированных атеросклеротических бляшках диаметр бляшки определяли как отрезок прямой от внутренней поверхности интимы до внутренней эластической мембраны, проходящий через центр липидного ядра. Толщину фиброзного покрова бляшки определяли как часть вертикального диаметра от внутренней поверхности интимы до липидного ядра. Согласно рекомендациям Virmani et al. (2003, 2006), бляшки с липидными ядрами, составляющими не менее 30% площади среза бляшки, были рассортированы в две группы: 1) бляшки с фиброзный покровом толщиной более 100 мкм (стабильные бляшки); 2) бляшки с фиброзный покровом толщиной менее 100 мкм (нестабильных бляшки).

Для in vitro экспериментов использовали тканевые образцы, полученные преимущественно в результате биопсий. Образцы крови для последующих in vitro экспериментов были получены от здоровых доноров на базе St Vincent's Hospital Sydney, Сидней, и на базе National University Hospital, National University of Singapore, Сингапур.

В диссертационную работу включены также данные исследований тканевых образцов аорт, полученных от животных с экспериментальным атеросклерозом (крысы и ano E-дефицитные мыши).

Методы

В зависимости от задач работы были использованы методы анализа, наиболее соответствующие целям исследования. В наибольшем объеме в диссертационной работе представлены данные, полученные при анализе тканевых образцов, изученных посредством морфологических методов, таких как электронная микроскопия и иммуногистохимический аиализ. В зависимости от свойств используемых первичных антител, иммунную окраску осуществляли либо на криостатных срезах, либо на срезах, полученных из тканевых образцов, заключенных в парафин. Иммуногистохимический анализ осуществляли, используя как рутинный иммунопероксидазный метод анализа, так и многоступенчатые методы с использованием разнообразных коммерческих китов. При использовании коммерческих китов, процедуры осуществлялись согласно рекомендациям производителей. Негативные контроли были выполнены во всех сериях иммунных окрасок. При выполнении двойного иммуногистохимического окрашивания использовали комбинации различных вторичных антител и комбинации различных субстратов. Некоторые иммунные окраски были выполнены с использованием компьютеризированной автоматической установки для иммунных окрасок "Ventana system" на базе Laboratory of Immunopathology, St Vincent's Hospital Sydney. В количественных исследованиях использовали компьютеризированный анализ экспрессии антигенов с применением Image-Pro Plus image analysis program, Media Cybernetics. В диссертационной работе были использованы методы электронной микроскопии и электронно-микроскопической иммуноцитохимии. Для электронно-микроскопических иммуноцитохимических исследований образцы заключали в LR-White resin или ловикрил посредством использования метода Progressive Lowering of Temperature technique (PLT). Для анализа ультраструктурных характеристик клеточных элементов был использованы стереометрический компьютерной анализ и метод лазерной захватывающей

микродиссекции иммуноокрашенных срезов, сопряженный с последующим электронно-микроскопическим анализом.

Помимо морфологических методов были использованы методы культуры клеток, поточная цитометрия и другие методы. Диссертационная работа содержит детальное описание использованных методов.

Для оценки полученных результатов проводилась статистическая обработка материала посредством использования общепринятых методов статистического анализа.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

КЛЕТОЧНЫЙ СОСТАВ АРТЕРИЙ ЧЕЛОВЕКА В НОРМЕ И НА РАННЕЙ СТАДИИ РАЗВИТИЯ АТЕРОСКЛЕРОЗА

В работе исследована структурная целостность эндотелия аорты человека. Исследование посредством сканирующей микроскопии поверхности РП и в ПП участков визуально нормальной аорты не выявило присутствия зон со структурным повреждением эндотелиального монослоя. Анализ неспецифического эндоцитоза показал, что объем занимаемый везикулами в цитоплазме эндотелиальных клеток был статистически выше в ПП участках по сравнению с этим показателем в ПР участках аорты (3,57+0,13% и 3,09+0,11% соответственно; разница достоверна при р < 0,01). С помощью набора антител, специфически связывающихся с определенными типами клеток сосуда, был исследован клеточный состав ПП и РП участков аорты. Этот анализ показал, что интима сосудов содержала гладкомышечные клетки, моноциты-макрофаги и Т-лимфоциты. Морфометрический анализ гистопрепаратов, окрашенных двойным иммунофлуоресцентным методом, показал, что во всех исследованных случаях число моноцитов-макрофагов в ПП участках было выше, чем в РП участках тех же сосудов. Так в ПП участках доля моноцитов-

макрофагов была в 2-6 раз выше, чем РП участках, варьируя от 8% до 19%, тогда как в РП участках доля моноцитов-макрофагов не превышала 5% от общего числа клеток интимы. Электронная микроскопия позволила выявить выраженный полиморфизм ультраструктуры гладкомышечных клеток. Кроме типичных гладкомышечных клеток "сократительного" типа, большая часть цитоплазмы которых была заполнена миофиламентами, присутствовали гладкомышечные клетки, цитоплазма которых была заполнена хорошо развитым гранулярным эндоплазматическим ретикулумом и аппаратом Гольджи при незначительном количестве миофиламентов, оттесненных к периферии клетки ("синтетический" фенотип).

Исследование ультратонких срезов выявило присутствие "необычных" клеток (рисунок 1).

По ультраструктурным признакам эти клетки нельзя было отнести ни к одному из типов клеток, присутствие которых было известно в артериальной стенке. При анализе параллельных ультратонких срезов было обнаружено, что необычные клетки характеризовались присутствием клеточных отростков,

Рисунок 1. Параллельные ультратонкие срезы интимы аорты, демонстрирующие клетку (VDC),

характеризующуюся наличием длинных отростков (звездочки), связь которых с «телом» клетки может быть не очевидной. Отмечается контакт этих отростков с эндотелиальной клеткой (Е) и гладкомышечной клеткой (SMC). Mn/Mph -моноцит-макрофаг. Трансмиссионная электронная микроскопия (ТЭМ).

длина которых часто превышала диаметр клеточного "тела". Необычные клетки характеризовались цитоплазмой, матрикс которой был низкой электронной плотности и относительно гомогенным. Клетки содержали свободные рибосомы, распределенные по всей цитоплазме, и крайне немногочисленные органеллы, включая митохондрии и хорошо развитые цистерны гладкого эндоплазматического ретикулума, зачастую врастающие "концентрическими кольцами" из перинуклеарного пространства в клеточные отростки. В цитоплазме практически не выявлялись наличие каких-либо филаментов. Вокруг клеток отсутствовала базальная мембрана. Обнаружение необычным клеток, формирующих длинные клеточные отростки, определило необходимость проведения дальнейшего реконструктивного анализа интимы артерий посредством исследования серийных ультратонких срезов.

Анализ серийных срезов позволил составить представление о существовании сложной системы клеточных коммуникаций в интиме, не известной ранее. Организация такой "коммуникационной" системы базируется на существовании сложной системы межклеточных контактов, образуемых отростками вновь распознанных клеток, диссеминированных по всей толще интимы. Наибольшая "концентрация" таких клеток была выявлена в субэндотелиальном слое. Как показал реконструктивный анализ, эти клетки имеют несколько клеточных отростков, радиально отходящих в разные стороны подобно отросткам нейронов в нервной системе и поэтому в несерийных срезах, как правило, можно было видеть лишь поперечные срезы клеточных отростков. Изучение серий последовательных ультратонких срезов позволило установить, что длина отростков таких клеток зачастую в 3-5 раз, а иногда и значительно более, превышала размер клеточного тела. Как показал анализ, хотя бы один из клеточных отростков обязательно имел контакт с аналогичной клеткой. Часть отростков были значительно короче, составляя 2-5 мкм по длине, и заканчивались свободно, не контактируя с другими клетками. Однако большинство отростков имело конечные "клетки-мишени" в пределах интимы, формируя непосредственные контакты с последними. Клеточные

отростки вновь выявленных клеток были обнаружены в непосредственном контакте с клетками различной природы, включая гладкомышечные клетки, эндотелиальные клетки, лимфоциты, макрофаги и тучные клетки. В межклеточных "стыках" не удалось обнаружить каких-либо специализированных структур.

Поскольку интима не иннервируема, было логично предположить, что интима может иметь уникальную клеточную коммуникационную систему, образуемую особым вариантом "примитивных" нейронапьных (нейрапьных) клеток, которые локализованы в интиме. Сегменты неповрежденных атеросклерозом участков аорт, а также атеросклеротические поражения аорт и сонных артерий были иммуногистохимически окрашены с антителами, выявляющими нейральные элементы, включая антитела к различным нейрофиламентам (ЫР-Н, ЫР-Ь, ОТ-М, ЫР-М/Н) и в-100. Из перечисленных маркеров только экспрессия Б-ЮО протеина была выявлена в интиме. Некоторые 8-100+ клетки характеризовались присутствием длинных клеточных отростков и могли бы быть описаны как "звездчатые" клетки. Анализ литературы показал, что помимо нейрональных клеток, 8-100 протеин интенсивно экспрессируется в клетках из семейства специализированных антиген-представляющих дендритных клеток. Поскольку дендритные клетки в коже (в частности, клетки Лангерганса) и дендритные клетки в лимфатических узлах также специфически экспрессируют молекулу СО 1а, были проведены иммунохимические окраски, в которых параллельные тканевые срезы аорты и сонных артерий были окрашены с антителами против 8-100 протеина, С01а и НЬА-ЭЯ.

Результаты такого исследования показали, что артериальная интима

действительно содержит клетки, которые одновременно экспрессируют Э-ЮО

протеин, СО 1а и НЬА-ОЯ. Ультраструктура вновь распознанных клеток была

почти идентична ультраструктуре описанных ранее в литературе дендритных

клеток, присутствующих в коже и в лимфатических узлах. Таким образом,

данные наших электронно-микроскопических и иммуногистохимических

наблюдений, вместе взятые, позволили считать, что дендритные клетки присутствуют в интиме нормальных артерий. Повсеместное присутствие дендритных клеток в артериях человека было подтверждено анализом многочисленных образцов аорт, сонных и коронарных артерий сердца. Как результат этих наблюдений было постулировано, что дендритные клетки являются обязательным элементом интимы здоровых артерий человека.

Анализ дендритных клеток, присутствующих во всех перечисленных выше типах артерий, показал, что дендритные клетки характеризуются аналогичными во всех типах артерий ультраструктурными характеристиками. В частности было показано, что дендритные клетки в интиме содержат ряд специфических структур, включая атипичные гранулы и гранулы Бирбека, а также уникальную для дендритных клеток трубчато-везикулярную систему. Было показано, что гранулы Бирбека в дендритных клетках в интиме артерий представляют собой овально-вытянутые структуры с нефрагментированным центрально-расположенным электронно-плотным стержнем (рисунок 2).

Рисунок 2. Атипичные гранулы и гранулы Бирбека в дендритных клетках в интиме аорты (А. Б). Б -деталь рис А. ТЭМ.

Было показано, что гранулы Бирбека образуются из атипичных гранул.

Атипичные гранулы морфологически отличаются от лизосом наличием

электронно-прозрачного ореола, разделяющего наружную мембрану гранулы

от ее центральной зоны. Трубчато-везикулярная система представляет собой

модифицированный и гипертрофированный конгломерат комплекса Гольджи и

гладкого эндоплазматического ретикулума. Иммунохимическими маркерами

дендритных клеток в интиме артерий, также как и в других тканях, являются

фасцин и СО 1а. Как было сказано выше, 8-100 протеин, продуцируемый

дендритными клетками, также интенсивно экспрессируется нейрональными

/ Ё,

0 ,1

клетками. Однако интима артерий лишена иннервации и поэтому Б-100 протеин является удобным маркером для идентификации дендритных клеток в артериях. Гранулы Бирбека выявляются в одном из типов дендритных клетках (клетках Лангерганса) с помощью Лаг-антитела, специфичного для клеток Лангерганса; использование антитела к Лаг-антигену позволило выявить Лаг+ клетки в интиме артерий. Присутствие дендритных клеток, специфически окрашивающихся антителом к СО 1а, также было продемонстрировано в первичной культуре клеток интимы аорты человека (рисунок 3).

Рисунок 3. СО!а+ клетка в первичной культуре ткани интимы аорты (А, Б). А: Стрелки показывают клеточные отростки. Б: Электронно-микроскопическое иммуноцитохимическое выявление распределения СО 1а молекул по поверхности дендритной клетки с использованием вторичных антител, меченных коллоидным золотом (стрелки). 9

?• т Д»Рисунок 4. Сеть,

* * формируемая С01а+ дендритными клетками в субэндотелиальном слое интимы аорты, я*. Пленочный препарат ' интимы аорты человека.

Иммуногистохимия.

Сравнительный анализ ПП и РП участков аорты показал, что система коммуникаций, формируемая дендритными клетками в интиме (рисунок 4), различается в ПП и РП участках (рисунок 5). Было установлено, что в РП участках дендритные клетки формируют контакты между собой, а также с эндотелиальными и гладкомышечными клетками. В ультратонких срезах ПП участков отростки дендритных клеток встречались значительно чаше, чем в РП участках и, помимо контактных взаимодействий, обнаруженных в ПП участках,

отростки дендритных клеток были обнаружены в непосредственном контакте с макрофагами и тучными клетками.

AR area

АР area

Рисунок 5. Схема, иллюстрирующая контактные взаимодействия, опосредованные дендритными клетками (VDC) в резистентных к поражению атеросклерозом (РП; AR-area) и предрасположенных к атеросклерозу (ПП; АР-area) участках визуапьно нормальной аорты. Е - эндотелиальная клетка; SMC - ГМК; Mph - макрофаг; Т— Т-клетка; В - В-клетка; М- тучная клетка; К— клетка, проникающая из просвета сосуда.

Отростки дендритных клеток были также обнаружены в контакте с лимфоцитами, причем в некоторых случаях можно было видеть формирование контактов несколькими лимфоцитами с одним и тем же отростком дендритной клетки. В некоторых отростках дендритных клеток, контактирующих с Т-лимфоцитами, были обнаружены структурные признаки деструктивных изменений. В ПП участках аорты были обнаружены контакты между плазматическими клетками и отростками дендритных клеток. В ПП участках клеточные отростки некоторых дендритных клеток, контактирующие с

эндотелиальными клетками и лимфоцитами, содержали гипертрофированные цистерны трубчато-везикулярной системы, в других же дендритных клетках, клеточные отростки были как бы набухшими и содержали "гомогенно-крупинчатый" материал низкой электронной плотности. Тучные клетки, которые были обнаружены в контакте с дендритными клетками в ПП участках аорты, содержали электронно-прозрачные гранулы, что могло означать процесс освобождения содержимого гранул во внеклеточное пространство. В ПП участках аорты также был выявлен феномен кластрации дендритных клеток между собой; при этом клеточные "тела" дендритных клеток плотно прилежали друг к другу вдоль значительной протяженности плазмолемм контактирующих клеток.

В субэндотелиальном пространстве ПП и РП участков аорты, были обнаружены низкодифференцированные дендритные клетки.

Низкодифференцированные дендритные клетки сходны в структурном отношении с лимфоцитами, но в отличие от последних содержат единичные профили цистерн трубчато-везикулярной системы, выявляемые в ультратонких срезах. Были прослежены последовательные стадии дифференцировки дендритных клеток в интиме и на основании ультраструктурных характеристик были выявлены два фенотипа дендритных клеток (рисунок 6).

VDC precursor

Рисунок 6. Схема, иллюстрирующая существование двух фенотипов дендритных клеток (VDC) в интиме артерий и возможную взаимосвязь между ними. VDC precursor - клетка предшественник; Type I VDC - 1-й фенотип; Type II VDC - 2-й фенотип.

Type I VDC

Туре II VDC

Дендритные клетки 1-го фенотипа характеризуются присутствием хорошо развитой трубчато-везикулярной системой, в то время как атипичные гранулы и гранулы Бирбека отсутствуют в цитоплазме. В противоположность дендритным клеткам 1-го фенотипа, дендритные клетки 2-го фенотипа содержат атипичные гранулы и гранулы Бирбека. Трубчато-везикулярная система хотя и присутствует в дендритных клетках 2-го фенотипа обычно относительно слабо развита. Являются ли эти два фенотипа различными стадиями дифференцировки дендритных клеток, либо представляют собой клеточные типы с различной функциональной предназначенностью, пока не выяснено. Оба описанных выше фенотипа дендритных клеток были обнаружены как в ПП, так и РП участках аорты.

При окраске параллельных срезов интимы антителами к НБР70 и к различным типам клеток, а также посредством двойной иммуноокраски срезов, было показано, что в интиме с признаками отека протеин Н8Р70, продукция которого как известно является выражением клеточного стресса, экспрессируется исключительно дендритными клетками. Электронно-микроскопический анализ артериальных сегментов с визуально непораженной атеросклерозом интимой, в которых была выявлена экспрессия Н8Р70, показал, что трубчато-везикулярная система в дендритных клетках крайне гипертрофированна, в особенности в их отростках, контактирующих с эндотелиальными клетками. Подобной гипертрофии трубчато-везикулярной системы не было отмечено в дендритных клетках, присутствующих в неповрежденных атеросклерозом сегментах сосудов, в которых экспрессия Н5Р70 не была зарегистрирована.

ИССЛЕДОВАНИЕ ХАРАКТЕРИСТИК ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК В ЛИПИДНЫХ ПЯТНАХ И АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИХ БЛЯШКАХ

В ранних атеросклеротических поражениях (липидные пятна и полоски),

незрелые и зрелые дендритные клетки были обнаружены в субэндотелиальном

слое артерий, иногда в непосредственном тесном контакте с эндотелиальными клетками. Отмечалось увеличение количеств дендритных клеток в липидных пятнах по сравнению с неповрежденной атеросклерозом интимой; так в липидных пятнах сонной артерии было выявлено значительное увеличение числа S-100+ дендритных клеток (7,9 ± 1,2 клеток в стандартной площади [ст.пл.] среза) по сравнению с количеством дендритных клеток в прилежащих неповрежденных участках интимы (2,6 ± 0,3 клеток/ст.пл.) (р < 0.001).

Иммунохимический анализ показал, что по мере формирования атеросклеротических бляшек, содержащих выраженное липидно-некротическое ядро, значительно менялось распределение дендритных клеток и появлялись "излюбленные" зоны локализации дендритных клеток в поражениях. Так наиболее часто дендритные клетки были обнаружены в плечевых зонах бляшек. По мере прогрессирования атеросклероза, выражающегося в "объемном росте" атеросклеротических бляшек, структура бляшек усложняется в результате врастания в атеросклеротическую интиму капилляров (неоваскуляризации), происходящих из микрососудов vasa vasorum, проникающих из адвентиции через истонченную среднюю оболочку артерий. Было установлено, что эндотелиальные клетки, формирующие неоваскуляризацию, экспрессируют VE-кадгерин, а в зонах врастания капилляров в интиму была выявлена интенсивная экспрессия VEGF. Картирование распределения дендритных клеток в атеросклеротических поражениях позволило установить, что в зрелых атеросклеротических бляшках дендритные клетки преимущественно локализованы в зонах неоваскуляризации (рисунок 7).

Характеристики дендритных клеток в атеросклеротических бляшках были детально исследованы. Анализируя иммуноокрашенные параллельные срезы, а также используя метод двойной иммуноокраски, была показана экспрессия S-100+ дендритными клетками антигенов CD la, CDIc, CDld и молекул CD83, CD80, CD86 и DC-SIGN. Анализ также выявил, что в атеросклеротических поражениях присутствуют клетки, специфически окрашивающиеся антителами

против BDCA-1 и BDCA-2 (миелоидные и плазмоцитоидные дендритные клетки, соответственно).

Plaque

Адвентиция

Интима

Медия

Рисунок 7. Схема, показывающая зоны преимущественной локализации дендритных клеток (звездочки) и Т-лимфоцитов (кружочки) в атеросклеротической бляшке. Plaque - бляшка; - Fibrous cap - фиброзная покрышка; Necrotic core - некротическое ядро; - Neovascularization — неоваскуляризация.

Было показано, что дендритные клетки экспрессируют CD40, VCAM-1, ICAM-1, CDllc, NKR-1 и содержат ганглиозид GM3, GM3 синтазу, фосфолипазу А2 (тип II) и Clq; однако экспрессия этих антигенов обнаруживается также и в других клеточных типах, таких как Т-лимфоциты, макрофаги и эндотелиальные клетки неоваскуляризации и таким образом указанные выше молекулы не являются специфичными для выявления дендритных клеток. Было выяснено, что в атеросклеротических бляшках экспрессия HSP70 также не присуща только дендритным клеткам; в частности, макрофаги интенсивно экспрессируют HSP70 в атеросклеротических бляшках.

Двойное иммуноокрашивание дендритных клеток и Т-лимфоцитов в срезах атеросклеротических бляшек показало, что дендритные клетки и Т-лимфоциты формируют клеточные кластеры, в которых дендритные клетки экспрессируют CD40, CD80, CD86 и CD83. Было обнаружено, что в кластерах, формируемых дендритными клетками и Т-лимфоцитами, дендритные клетки экспрессируют

не только повышенный уровень НЬА-ЭЯ, но также молекулы СЭ1а, СЭ1Ь и молекулу презентации антигенов липидной природы СБЫ. Было показано, что Т-лимфоциты в клеточных кластерах представлены СЭ4+ и С08+ субпопуляциями и что некоторые из этих лимфоцитов экспрессируют антигены СЭ27 и СЭ28.

Подсчет количеств дендритных клеток в бляшках с истонченными фиброзными покрышками, толщина которых менее 100 мкм (нестабильные бляшки), и в бляшках, характеризующихся более толстой фиброзной покрышкой (стабильные бляшки), позволил установить, что нестабильные бляшки содержат большее число дендритных клеток, чем стабильные бляшки. Так в нестабильных бляшках сонных артерий число дендритных клеток в плечевых зонах в 1,5 раз выше чем, в стабильных бляшках (27,8 ± 2,8 и 18,8 ± 2,0 клеток/ст.пл., соответственно, р < 0.01). Было найдено, что более 50% дендритных клеток, находящихся в плечевых зонах нестабильных бляшек, экспрессируют маркеры зрелости С083, СЭ80 и СЭ86. Более того, была выявлена интенсивная кластрация дендритных клеток с Т-лимфоцитами в нестабильных бляшках (рисунок 8).

Анализ также показал, что в нестабильных бляшках дендритные клетки, экспрессирующие СЭ1с1 антиген, формируют контакты не только с "обычными" Т-лимфоцитами (СОЗ+/СБ4+ и СОЗ+/СБ8+), но также с №СТ-

г #

Рисунок 8. Клеточные кнастеры (показаны стрелками),

сформированные CD83+ дендритными метками (коричневого цвета) и CD3+ Т клетками (розового цвета) в плечевой зоне атероскперотической бляшки в зоне неоваскуляризаг^и. Двойная иммуноокраска; комбинация ДАБ и Fast Red субстратов.

клетками (СЭЗ+/СВ161+). Структурные особенности контактных взаимодействий между дендритными клетками и лимфоцитами в этих зонах были изучены посредством электронно-микроскопического анализа, который показал, что цистерны трубчато-везикулярного комплекса в контактирующих дендритных клетках гипертрофированы.

В атеросклеротических артериях дендритные клетки были обнаружены не только в интиме. Дендритные клетки были обнаружены также между гладкомышечными клетками в медиальном слое, прилежащем к участкам интимы с атеросклеротическими бляшками, а также в зонах адвентиции, находящимися под этими атеросклеротическими бляшками и структурно связанных с бляшками посредством неоваскуляризации. Сравнительный анализ численности дендритных клеток в лимфатических узлах, прилежащих к сегментам аорт с атеросклеротическими бляшками с численностью дендритных клеток в лимфатических узлах, прилежащих к непораженным атеросклерозом сегментам, показал, что количество дендритных клеток в лимфатических узлах, прилежащих к сегментам аорты, пораженным атеросклерозом, в 1,9 раз превышает количество дендритных клеток в лимфатических узлах, прилежащих к неповрежденным атеросклерозом сегментам сосудистой стенки (р < 0.01).

Было отмечено, что в атеросклеротических поражениях некоторые из дендритных клеток претерпевают дегенеративные альтерации, выражающиеся в нарушении целостности плазмолеммы, а смерть этих клеток сопровождается формированием больших количеств микровезикулярных структур, высвобождающихся в межклеточное пространство. В этих же зонах интимы наблюдали признаки кальцификации внеклеточного матрикса, формирующихся на базе микровезикулярных структур. Материалы, представленные в диссертационной работе, позволяют полагать, что микровезикулярные структуры, происходящие из разрушающихся дендритных клеток, содержащих "мощный" кальций-связывающий протеин 8-100, являются структурной основой для процессов, связанных с начальными стадиями формирования

кальциевых отложений в артериальной стенке. Один из разделов работы посвящен проблеме кальцификации артерий.

Поскольку в последние годы развитие атеросклероза часто связывают с инфекционными агентами, в частности с Chlamydia pneumoniae (Campbell L.A. and Kuo С.С., 2004), другой раздел диссертационной работы посвящен роли инфекции в атерогенезе. Ультраструктурный анализ позволил идентифицировать присутствие в дендритных клетках включений, типичных для С. pneumoniae (присутствие С. pneumoniae было подтверждено в этих артериях также и другими методами). Анализ взаимодействия С. pneumoniae с дендритными клетками in vitro показал, что С. pneumoniae может успешно развиваться в цитоплазме дендритных клеток.

Выявление присутствия дендритных клеток в интиме артерий способствовало развитию ряда новых направлений исследований, направленных на изучение роли дендритных клеток как в осложнениях атеросклероза при вирусных инфекциях, так и в разнообразных сосудистых заболеваниях, включая аневризму аорты и болезнь Такаясу, а также в хирургических интервенциях, направленных на коррекцию функции сосудов.

ВЫЯВЛЕНИЕ ВОВЛЕЧЕННОСТИ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК В РАЗВИТИЕ АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ

В диссертационную работу включен раздел, посвященный исследованию вовлеченности дендритных клеток в развитие атеросклеротических поражений у экспериментальных животных, включая апо Е-дефицитных мышей и крыс с экспериментальной гиперхолестеринемией. В работе впервые показано, что дендритные клетки присутствуют в атеросклеротических поражениях апо Е-дефицитных мышей и крыс с экспериментальной гиперхолестеринемией и обсуждаются возможности использования экспериментальных моделей для изучения функций дендритных клеток в сосудистой патологии.

ИЗУЧЕНИЕ ФЕНОТИПИЧЕСКОЙ МОДУЛЯЦИИ ГЛАДКОМЫШЕЧНЫХ КЛЕТОК В АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИХ БЛЯШКАХ

Исследование интимы артерий у человека показало, что основные клеточные элементы атеросклеротических поражений, включая гладкомышечные клетки и макрофаги, представлены гетерогенными популяциями. В отношении гладкомышечных клеток было показано, что количественные соотношения между "синтетическим" и "сократительным" фенотипами различны в различных типах атеросклеротических поражений, однако во всех типах атеросклеротических поражений "сократительный" фенотип является превалирующим.

Помимо известных ранее фенотипов гладкомышечных клеток, проведенный анализ позволил выявить существование фенотипов гладкомышечных клеток, существенно отличающихся от "сократительного" и "синтетического" фенотипов. Были идентифицированы и охарактеризованы "остеоидный" и "хондроцитоидный" фенотипы гладкомышечных клеток, оба из которых характерны для атеросклеротических бляшек, но отсутствуют в нормальной интиме артерий.

Одним из редких феноменов, связанных с развитием атеросклероза, является формирование костеобразных структур в сосудистой стенке. Исследуя костеобразные структуры с использованием антитела против специфического фактора остеобластов Cbfal (osteoblast-specific factor-2/core binding factor-1; Osf2/Cbfal) было выявлено присутствие в интиме Cbfal + клеток, располагающихся вне костеобразных структур. Как правило, присутствие Cbfal + клеток отмечалось в глубоких слоях интимы атеросклеротически-пораженных артерий, в то время как в ранних атеросклеротических поражениях Cbfal+ клетки не были обнаружены. Исследование характеристик Cbfal+ клеток с использованием набора разнообразных антител позволило установить, что Cbfal + клетки содержат гладкомышечный а-актин (a-SMA), хотя в

некоторых Cbfal+ клетках количество гладкомышечного а-актина незначительно. Было установлено, что Cbfal+ клетки экспрессируют остеокалцин и проколлаген 1-го типа (Туре 1 procollagen). Cbfal+ клетки, которые интенсивно окрашивались с антителом к гладкомышечному а-актину, были выделены из бляшек посредством лазерной захватывающей микродиссекции и последующее ультраструктурное исследование этих клеток позволило подтвердить, что такие Cbfal+ клетки являются гладкомышечными клетками. Так Cbfal+ клетки содержали миофиламенты и "плотные тельца" вдоль хорошо развитой базальной мембраны. Cbfal+ клетки, характеризующиеся незначительной экспрессией гладкомышечного а-актина, также были выделены из бляшек посредством лазерной захватывающей микродиссекции и ультраструктурное исследование выявило присутствие вдоль их базальной мембраны электронно-плотного материала, типично присутствующего вокруг остеобластов в других анатомических локализациях. Было отмечено, что Cbfal+ клетки характеризуются присутствием гипертрофированного шероховатого эндоплазматического ретикулума и наличием единичных миофиламентов. Cbfal+/a-SMA+ клетки были поименованы как "остеоидный" фенотип гладкомышечных клеток.

"Хондроцитоидный" фенотип гладкомышечных клеток был изначально

выявлен в результате электронно-микроскопических исследований клеточного

состава атеросклеротической интимы. Анализ ультратонких срезов выявил

присутствие клеток с ультраструктурными признаками хондробластов.

Хондробласто-подобные клетки, обнаруживаемые в интиме, были окружены

внеклеточным матриксом, образующим коконы-лакуны, подобные тем, что

типичны для хондробластов в других анатомических локализациях.

Использование специфического маркера для выявления хондробластов sox-9

показало присутствие в атеросклеротических поражениях sox-9+ клеток. Далее

было показано, что некоторые из гладкомышечных клеток (a-SMA+) в

атеросклеротических бляшках экспрессируют sox-9. Было выяснено, что

внеклеточный матрикс вокруг sox-9+ клеток содержит коллаген 2-го типа (Туре

II collagen). Изучение ультраструктуры этих клеток показало присутствие миофиламентов и "плотных" телец в цитоплазме. Ультраструктурное исследование позволило проследить последовательные этапы трансформации "типичных" гладкомышечных клеток в "хондроцитоидный" фенотип гладкомышечных клеток.

CD56+/CD3- КК-КЛЕТКИ В АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИХ БЛЯШКАХ

В диссертационной работе впервые показано, что клетки экспрессирующие CD56 присутствуют в атеросклеротических бляшках артерий человека. Хотя CD56+ клетки и обнаруживаются в поверхностном слое фиброзной выстилки, часто в непосредственной близости к эндотелию, CD56+ клетки преимущественно локализованы в плечевых зонах бляшек. Использование метода двойной иммуногистохимический окраски позволило выявить, что по крайней мере некоторые из экспрессирующих CD56 клеток не окрашиваются одновременно с антителом против CD3. Было выяснено, что этот клеточный тип (CD56+/CD3- клетки; "натуральные киллеры" - natural killer cells - NK-клетки) является минорной клеточной популяцией, составляя порядка 0,5% от общей клеточной популяции в плечевых зонах зрелых бляшек. Были выявлены контакты между NK-клетками и эндотелиальными клетками, а также контакты между NK-клетками и макрофагами. Электронная микроскопия позволила выявить клетки, достаточно сходные по ультраструктуре с лимфоцитами, но содержащими в цитоплазме значительное число электронно-плотных гранул, располагающихся, как правило, вдоль наружной клеточной мембраны. Результаты морфологического анализа позволяют полагать, что в зонах непосредственных контактов NK-клеток с другими клеточными типами интимы происходит освобождение содержимого гранул из NK-клеток, ведущее к локальным повреждениям в контактируемых клетках.

выводы

1. Интима здоровых артерий человека содержит клетки, которые являются разновидностью дендритных клеток. Дендритные клетки обнаружены в аорте, коронарных и сонных артериях, что позволяет считать дендритные клетки обязательным элементом архитектоники артерий человека.

2. В интиме здоровых артерий человека популяция дендритных клеток неоднородна. На основании ультраструктурных характеристик представляется рациональным выделить два фенотипа, один из которых является вариантом клеток Лангерганса.

3. В интиме здоровых артерий существует сложная система межклеточных взаимодействий, опосредованная присутствием в интиме дендритных клеток. Посредством клеточных отростков дендритные клетки формируют локальные клеточные "сети" в интиме артерий, обеспечивая взаимосвязь различных типов клеток.

4. На основании морфологического сравнения предрасположенных и резистентных к поражению атеросклерозом участков визуально неповрежденной аорты человека можно считать, что предрасположенные к поражению участи аорты характеризуются изменением свойств клеток и нарушением системы межклеточных взаимодействий.

5. Показана повышенная эндоцитозная активность в эндотелиальных клетках в участках аорты человека, предрасположенных к поражению атеросклерозом. В этих же участках обнаружены скопления моноцитов-макрофагов, Т-лимфоцитов и активированных дендритных клеток. Морфометрически доказаны локальность и постоянство инфильтрации интимы моноцитами-макрофагами, которые вовлечены в воспалительные реакции и способны влиять на изменения фенотипа гладкомышечных клеток.

6. В участках аорты человека, предрасположенных к поражению атеросклерозом, система клеточных взаимодействий, свойственная нормальной

интиме, нарушается, в частности, в результате формирования дендритными клетками непосредственных контактов с лимфоцитами и макрофагами.

7. Обнаружение непосредственных контактов между дендритными клетками, лимфоцитами и макрофагами в предрасположенных к поражению атеросклерозом участках визуально неповрежденной аорты позволяет считать, что очаги иммунного воспаления существуют уже в визуально неповрежденных участках сосудов. Структурно-функциональное состояние интимы, наблюдаемое в предрасположенных к поражению атеросклерозом участках визуально нормальных артерий, может рассматриваться как предатеросклеротическая стадия, поскольку клетки в таких участках находятся в состоянии активации.

8. Иммунно-воспалительные реакции при развитии атеросклероза протекают на фоне изменений клеточной композиций и топографического распределения клеток в интиме. В частности, при развитии ранних атеросклеротических поражений популяция дендритных клеток становится более гетерогенной и меняется топографическое распределение дендритных клеток, сопровождающееся преимущественной локализацией дендритных клеток в "плечевых" зонах развивающихся атеросклеротических бляшек.

9. Количество дендритных клеток в плечевых участках возрастает параллельно с ростом и трансформацией "стабильных" атеросклеротических бляшек с толстой фиброзной покрышкой в "нестабильные" бляшки, характеризующиеся истонченной фиброзной покрышкой. Плечевые зоны бляшек становятся обогащенными микрососудами неоваскуляризации и характеризуются присутствием клеточных кластеров, формируемых контактирующими зрелыми дендритными клетками с Т-лимфоцитами, представленными "типичными" лимфоцитами (СЭ4+; СЭ8+) и ЖТ-клетками (СВ161+/СБЗ+). В этих зонах выявляется также присутствие ЫК-клеток (С056+/С03-). Обнаружение изменений в клеточной композиции по мере роста и дестабилизации атеросклеротических бляшек дает основание полагать, что прогрессирование

атеросклероза сопровождается, а возможно и определяется, интенсификацией иммуно-воспапительных процессов.

10. Изменения клеточного состава и матрикса артерий, протекающие на фоне воспаления при атеросклерозе, создают благоприятные условия для формирования кальциевых отложений в интиме. Разрушение дендритных клеток, цитоплазма которых содержит мощный кальций-связывающий протеин S-100, может инициировать процесс формирования кальциевых отложений в артериальной стенке.

11. В артериях, содержащих Chlamydia pneumoniae, микроорганизм может инфицировать дендритные клетки. В цитоплазме дендритных клеток, присутствующих в атеросклеротических поражениях, выявляется присутствие в различных стадиях развития С. pneumoniae. Можно предположить, что инфицирование дендритных клеток в атеросклеротических поражениях может вести к изменению направленности и интенсивности иммуно-воспапительных процессов.

12. Показано, что атеросклеротические поражения апо Е-дефицитных мышей и крыс с экспериментальной гиперхолестеринемией содержат дендритные клетки. Хотя результаты, полученные при анализе артерий животных, утилизируемых в качестве экспериментальных моделей атеросклероза, не могут быть безоговорочно использованы для объяснения процессов разыгрывающихся при атеросклерозе у человека, использование таких моделей оправдано при изучении вопросов морфо- и патогенеза атеросклероза, которые трудноразрешимы или вообще не разрешимы при использовании аутопсийного материала.

13. Интенсификация иммунного воспаления при прогрессировании атеросклероза у человека сопровождается фенотипической модуляцией клеток в атеросклеротических поражениях. В частности это касается гладкомышечных клеток. Так в зрелых атеросклеротических бляшках, в дополнение к "синтетическому" и "сократительному" фенотипам гладкомышечных клеток,

отмечается дифференциация двух особых фенотипов гладкомышечных клеток, обозначенных нами как "остеоидный" и "хондроцитоидный" фенотипы.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1) Рассматривать дендритные клетки как обязательный структурный элемент архитектоники здоровых артерий человека.

2) Рассматривать вовлеченность дендритных клеток в развитие атеросклеротических поражений артерий как важный компонент морфо - и патогенеза атеросклероза.

3) Рассматривать дендритные клетки в качестве инструмента при поиске новых подходов, используемых в иммунотерапии атеросклероза.

4) Использовать данные, касающиеся присутствия и функционирования дендритных клеток в артериях, в учебном процессе на кафедрах гистологии, патологической анатомии, общей патологии и патофизиологии медицинских ВУЗов и институтов Усовершенствования врачей, а также в работах научно-исследовательских институтов, занимающихся проблемами сердечнососудистой патологии человека.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Публикации в журналах

1. Нагорнев В.А., Журавлева Т.Б. Бобрышев Ю.В. Структурно-функциональная характеристика внутренней поверхности коронарных артерий сердца человека при атеросклерозе // Архив патологии. - 1989. -Т.51., №3. -С. 15-23.

2. Бобрышев Ю.В., Кузнецов А.С. Структурный анализ взаимодействия липопротеидов низкой плотности с клетками интимы артерий при атеросклерозе// Архив патологии. - 1989. - Т. 51., №9. -С. 20-26.

3. Бабаев В.Р., Бобрышев Ю.В., Стенина О.В., Тарарак Э.М. Фенотипические варианты гладкомышечных клеток в атероматозной бляшке аорты человека // Архив патологии. - 1990. -Т.52., №5. - С. 16-21.

4. Babaev V.R., Bobryshev I.V., Stenina O.I., Tararak E.M., Gabbiani G. Heterogeneity of smooth muscle cells in atheromatous plaque of human aorta // American Journal of Pathology. - 1990.-Vol. 136., №5.-P. 1031-1042.

5. Бабаев В.P., Сухова Г.К., Бобрышев Ю.В., Сироткин В.Н., Скорова Н.Е., Тарарак Э.М. Моноцитарно-макрофагальная инфильтрация в участках ранних атеросклеротических поражений аорты человека // Архив патологии. - 1991.-Т. 53., №10. - С. 48-53.

6. Бобрышев Ю.В., Сухова Г.К., Бабаев В.Р., Казанцева И.А. Межклеточные контакты в участках раннего атеросклеротического поражения аорты человека // Архив патологии. - 1991. -Т.53., № 11.- С. 38-42.

7. Нагорнев В.А., Бобрышев Ю.В., Ивановский Ю.В., Богачев Ю.В. Роль моноцитов-макрофагов в атерогенезе // Архив патологии. - 1991. -Т.53., №6. - С. 23-29.

8. Babaev V.R., Bobryshev Y.V., Sukhova G.K., Kasantseva l.A. Monocyte-macrophage accumulation and smooth muscle cell phenotypes in early atherosclerotic lesions of human aorta// Atherosclerosis. - 1993. -Vol. 100., №2. - P. 237-248.

9. Bobryshev Y.V., Lord RSA. S-100 positive cells in human arterial intima and in atherosclerotic lesions // Cardiovascular Research. -1995. - Vol. 29., №5. -P. 689-696.

10. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A Ultrastructural recognition of cells with dendritic cells morphology in human aortic intima. Contacting interactions of Vascular Dendritic Cells in athero-resistant and athero-prone areas of the normal aorta // Archives of Histology and Cytology. -1995. - Vol. 58., №3. - P. 307-322.

11. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Detection of vascular dendritic cells and extracellular calcium-binding protein S-100 in foci of calcification in human arteries // Acta Histochemica et Cytochemica. - 1995. - Vol. 28., №2. - 371380.

12. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Warren B.A. Calcified deposit formation in intimal thickenings of the human aorta // Atherosclerosis. - Vol. 118., №1. - P. 9-21.

13. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Structural heterogeneity and contacting interactions of vascular dendritic cells in early atherosclerotic lesions of the human aorta // Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology. - 1996. -Vol. 28., №1,-P. 49 -60.

14. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Langhans cells of human arterial intima: uniform by stellate appearance but different by nature. // Tissue & Cell. - 1996. - Vol. 28., №2.-P. 177-194.

15. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Rainer S., Jamal O.S., Munro V.F. Vascular dendritic cells and atherosclerosis // Pathology, Research and Practice. - 1996., Vol. 192., №5.-P. 462-467.

16. Bobryshev Y.V., Crazier J.A., Lord R.S.A., Tran D„ Jamal O.S., Parsson H.N., Scott K.F. Expression of secretory group II phospholipase A2 by CDla positive cells in human atherosclerotic plaques // Atherosclerosis. - 1996. -Vol. 127., №2.-P. 283-285.

17. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Rainer S., Munro V.F. VCAM-1 expression and network of VCAM-I positive vascular dendritic cells in advanced atherosclerotic lesions of carotid arteries and aortas // Acta Histochemica. -1996. - Vol. 98., № 2. - P. 185-194.

18. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Gap junctional vesicles in intimal smooth muscle cells in human atherosclerotic arteries // Ultrastructural Pathology. - 1997. -Vol. 21. -№!.- P. 93-94.

19. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Vascular dendritic cells express intercellular adhesion molecule-1 in atherosclerotic plaques // Biomedical Research-Tokyo. - 1997.-Vol. 18., №1,-P. 179-182.

20. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Watanabe T. Structural peculiarities of vascular dendritic cell tubulovesicular system in human atherosclerotic aorta // Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology. - 1997. - Vol. 29,-№4.-P. 553561.

21. Bobryshev Y.V., Babaev V.R., Lord R.S.A., Watanabe T. Cell death in atheromatous plaque of the carotid artery occurs through necrosis rather through apoptosis // In Vivo. - 1997. - Vol. 11., №6. - P. 441-452.

22. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Golovanova N.K., Gracheva E.V., Zvezdina N.D., Sadovskaya V.L., Prokazova N.V. Incorporation and localisation of ganglioside GM3 in human intimai atherosclerotic lesions // Acta Biochimica et Biophysica. - 1997. - Vol. 1361., №3. - P. 287-294.

23. Bobryshev Y.V., Watanabe T. Ultrastructural evidence for association of vascular dendritic cells with T-lymphocytes and with B-cells in human atherosclerosis // Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology. -1997. -Vol. 29., №2-P. 209-221.

24. Bobryshev Y.V., Watanabe T. Subset of vascular dendritic cells transforming into foam cells in human atherosclerotic lesions // Cardiovascular Pathology. -1997. - Vol. 6., №1. - P. 321-331.

25. Bobryshev Y.V., Ikezawa T., Watanabe T. Formation of Birbeck granule-like structures in vascular dendritic cells in human atherosclerotic aorta. Lag-antibody to epidermal Langerhans cells recognizes cells in the aortic wall // Atherosclerosis.- 1997,- Vol. 133., №2.-P. 193-202.

26. Niederhoffer N., Bobryshev Y.V., Lartaud-ldjouadiene I., Giummelly P. Involvement of S-100 protein and S-100(+) cells in aortic medial calcification. //FASEB Journal. - 1997,-Vol. 11.,№11.-P. 895.

27. Niederhoffer N., Bobryshev Y.V., Lartaud-Idjouadiene I., Giummelly P., Atkinson J. Aortic calcification produced by vitamin D3 plus nicotine // Journal of Vascular Research. - 1997. - Vol. 34., №5. - P. 386-398.

28. Bobryshev Y.V., Lord RSA. Detection of vascular dendritic cells accumulating calcified deposits in their cytoplasm // Tissue & Cell. -1998. -Vol. 30., №3. -P. 383-388.

29. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Mapping of vascular dendritic cells in atherosclerotic arteries suggests their involvement in local immune-intlammatory reactions // Cardiovascular Research. - 1998. - Vol. 37., №3. -P. 799-810.

30. Ozmen J., Lord R.S.A., Bobryshev Y.V., Ashwell K.W.S, Munro V.F. S100 protein is expressed in induced atherosclerotic lesions of hypercholesterolaemic rats // Biomedical Research. - 1998. -Vol. 19., №1. - P. 279-287.

31. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Watanabe T. Ikezawa T. The cell adhesion molecule E-cadherin is widely expressed in human atherosclerotic lesions // Cardiovascular Research. - 1998. - Vol. 40., №1. - P. 191-205.

32. Bobryshev Y. V., Lord RSA, Parsson H.N. Immunophenotypic analysis of the aortic aneurysm wall suggests that vascular dendritic cells are involved in immune responses // Cardiovascular Surgery. - 1998. - Vol. 6., №3. - P. 240349.

33. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Accumulation of co-localised unesterified cholesterol and neutral lipids within vacuolised elastin fibres in athero-prone areas of the human aorta // Atherosclerosis. - 1999. - Vol. 142., № 1. - P. 121131.

34. Bobryshev Y.V., Babaev V.R., Iwasa S., Lord R.S.A., Watanabe T. Atherosclerotic lesions of apolipoprotein E deficient mice contain cells expressing S100 // Atherosclerosis. - 1999. -V. 143. -№2. - P. 451-454.

35. Prokazova N.V, Golovanova N.K., Gracheva E.V., Zvezdina N.D., Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Incorporation, localization and possible biological function

of glycosphingolipids in human arteries in atherosclerosis // Angiology and Cardiovascular Surgery. - 1999. - Vol. 5., №1. - P. 151-166.

36. Wang A.Y., Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Liang H„ Inder S.J., Lord R.S.A., Ashwell K.W.S., Farnsworth A.E. Structural features of cell death in atherosclerotic lesions affecting long term aortocoronary saphenous vein bypass grafts // Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology. - 1999. -Vol. 31, №3,-P. 423-432.

37. Cherian S.M, Bobryshev Y.V., Inder S.J., Lord R.S.A., Reddi K.H., Farnsworth A.E, Tran D, Munro V.F, Ashwell K.W.S. Involvement of dendritic cells in long term aortocoronary saphenous vein bypass graft failure // Cardiovascular Surgery. - 1999. - Vol. 7, №5. - P. 508-518.

38. Cherian S.M, Bobryshev Y.V, Inder S.J, Lord R.S.A, Ashwell K.W.S. Dendritic cells in venous pathologies // Angiology. - 1999. - Vol. 50, №5. -P. 393-402.

39. Bobryshev Y.V, Konovalov H.V, Lord R.S.A. Ultrastructural recognition of dendritic cells in the intimal lesions of aortas of chickens with Marek's disease. Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology. - 1999. - Vol. 31, №2. -P. 179-185.

40. Linton M.F, Babaev V.R, Bobryshev Y.V, Oates J.A, Fazio S. Cyclooxygenase-2 expression in human and mouse atherosclerotic lesions. // Circulation. - 1999. - Vol. 100, Suppl. 2146. - P. 408.

41. Lord R.S.A, Bobryshev Y.V. Clustering of dendritic cells in athero-prone areas of the aorta // Atherosclerosis. - 1999. - Vol. 146,№1.-P. 197-199.

42. Bobryshev Y.V, Cherian S.M, Inder S.J, Lord R.S.A. Neovascular expression of VE-cadherin in human atherosclerotic arteries and its relation to intimal inflammation // Cardiovascular Research. - 1999. - Vol. 43, №4. - P. 10031017.

43. Bobryshev Y.V, Lord R.S.A. 55 kDa actin-bundling protein (p55) is a specific marker for identifying vascular dendritic cells // Journal of Histochemistry and Cytochemistry. - 1999. - Vol. 47, №11. - P. 1481-1486.

44. Bobryshev Y.V., Babaev V.R., Lord R.S.A., Watanabe T. Ultrastructural identification of cells with dendritic cell appearance in atherosclerotic aorta of apolipoprotein E deficient mice // Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology. - 1999. - Vol. 31., №4. - P. 527-531.

45. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Vascular-associated lymphoid tissue (VALT) involvement in aortic aneurysm // Atherosclerosis. - 2000. - Vol. 154., №1. -P. 15-21.

46. Wang A.Y., Bobryshev Y.V., Liang H., Cherian S.M., Inder S.J., Ashwell K.W.S., Farnsworth A.E., Lord R.S.A. Electron-microscopic detection of apoptotic and necrotic cell death in non-atherosclerotic areas of stenotic aortocoronary saphenous vein bypass grafts // Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology. - 2000. - Vol. 32., №2. - P. 209-219.

47. Cherian S.M., Bobryshev Y.V., Inder S.J,Wang A.Y., Lord R.S.A., Farnsworth A.E. Dendritic cells in aortocoronary saphenous vein bypass grafts // Heart, Lung and Circulation. - 2000. - Vol. 9., №1. - P. 40-42.

48. Inder S.J., Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Lord R.S.A., Masuda K„ Yutani C. Accumulation of lymphocytes, dendritic cells and granulocytes in the aortic wall affected by Takayasu's disease // Angiology. - 2000. - Vol. 51., №7. - P. 565-579.

49. Inder S.J., Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Wang A.Y., Lord R.S.A., Masuda K., Yutani C. Immunophenotypic analysis of the aortic wall in Takayasu's arteritis: The involvement of lymphocytes, dendritic cells and granulocytes in immuno-inflammatory reactions // Cardiovascular Surgery.- 2000. - Vol. 8., №2.-P. 141-148.

50. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. CD1 expression and the nature of CD1 expressing cells in human atherosclerotic plaques // American Journal of Pathology.-2000.-Vol. 156, №4.-P. 1477-1478.

51. Bobryshev Y.V. Dendritic cells and their involvement in atherosclerosis // Current Opinion in Lipidology. - 2000. - V. 11, №5. - C. 511-517.

52. Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Inder S.J., Lord R.S.A., Tran D. Identification of HIV-1 in the aortic wall of AIDS patients // Atherosclerosis. - 2000. - Vol. 152.,№2.-P. 529-530.

53. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Golovanova N.K., Gracheva E.V., Zvezdina N.D., Prokazova N.V. Phenotype determination of anti-GM3 positive cells in atherosclerotic lesions of the human aorta. Hypothetical role of ganglioside GM3 in foam cell formation // Acta Biochimica et Biophysica. - 2001. - Vol. 1535., №2.-P. 87-99.

54. Ozmen J., Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. CD40 co-stimulatory molecule expression by dendritic cells in primary atherosclerotic lesions in carotid arteries and stenotic aortocoronary saphenous vein bypass grafts // Cardiovascular Surgery. - 2001. - V. 9., №4. - P. 162-166.

55. Inder S.J., Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Lord R.S.A., Wang A.Y. Identification of dendritic cells in ePTFE grafts explanted from humans // Cardiovascular Surgery. - 2001. - Vol. 8., №4. - P. 265-273.

56. Bobryshev Y.V., Inder S.J., Cherian S.M., Lord R.S.A., Ao P.Y., Hawthorne W.J., Fletcher J.P. Colonisation of prosthetic grafts by immunocompetent cells in a sheep model // Cardiovascular Surgery. - 2001. - Vol. 9.. №2. - P. 93-99.

57. Cherian S.M., Bobryshev Y.V., Liang H., Inder S.J.,Wang A.Y., Lord R.S.A., Tran D., Pandey P., Halaz P., Farnsworth A.E. Immunohistochemical and ultrastructural evidence that dendritic cells infiltrate stenotic aortocoronary saphenous vein bypass grafts // Cardiovascular Surgery - 2001. - Vol. 9., №2. -P. 41-47.

58. Wang A.Y., Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Liang H„ Tran D„ Inder S.J., Lord R.S.A., Ashwell K.W.S., Farnsworth A.E. Expression of apoptosis-related proteins and structural features of cell death in explanted aortocoronary saphenous vein bypass grafts // Cardiovascular Surgery. - 2001. - Vol. 9., №4. -P. 144-153.

59. Bobryshev Y.V., Farnsworth A.E, Lord R.S.A. Expression of vascular endothelial growth factor in aortocoronary saphenous vein bypass grafts // Cardiovascular Surgery.- 2001. - Vol. 9., №5. - P. 492-498.

60. Bobryshev YV, Taksir T, Lord RSA, Freeman MW. Evidence that dendritic cells infiltrate atherosclerotic lesions in apolipoprotein E-deficient mice // Histology and Histopathology. - 2001. - Vol. 16., №3. - P. 801-808.

61. Santiago F.S., Lowe H.C., Bobryshev Y.V., Khachigian L.M. Induction of the transcriptional repressor Yin Yang-1 by vascular cell injury. Autocrine/paracrine role of endogenous fibroblast growth factor-2 // Journal of Biological Chemistry. - Vol. 276., №44 - P. 41143-41149.

62. Bobryshev Y.V. Can dendritic cells be exploited for therapeutic intervention in atherosclerosis? // Atherosclerosis. - 2001. - Vol. 154., .№2. - P. 511-512.

63. Ozmen J., Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Ashwell K.W. Identification of dendritic cells in aortic atherosclerotic lesions in rats with diet-induced hypercholesterolaemia // Histology and Histopathology. - 2002. - Vol. 17., №1. - P. 223-237.

64. Lord R.S.A., Bobiyshev Y.V. Hallmarks of atherosclerotic lesion development with special reference to immune inflammatory mechanisms // Cardiovascular Surgery. - 2002. - Vol. 10., №4. - P. 405-414.

65. Bobryshev Y.V, Lord R.S.A. Expression of heat shock protein-70 by dendritic cells in the arterial intima and its potential significance in atherogenesis // Journal of Vascular Surgery. - 2002. -V. 35., № 2,- P. 368-375.

66. Al-Fakhri N., Wilhelm J., Hahn M, Heidt M., Hehrlein H.W., Endisch A.M., Hupp T., Cherian S.M., Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Katz N. Simultaneous upregulation of disintegrin metalloproteinases ADAMs 9 and 15 with integrins a5Bl and avfl3 in human atherosclerosis compared with normal arteries // Journal of Cellular Biochemistry. - 2003. - Vol. 89., №4. - P. 808-23.

67. Cao W, Bobryshev Y.V, Lord R.S.A, Oakley R.M.E, Lee S.H, Lu J. Dendritic cells in the arterial wall express Clq: Potential significance in atherogenesis // Cardiovascular Research. - 2003. - Vol. 60, №1. - P. 175-86.

68. Bobryshev, Y.V., Cao W, Phoon M.C., Tran D., Chow V.T.K., Lord R. S.A., Lu J. Detection of Chlamydophilia pneumoniae in dendritic cells in atherosclerotic lesions // Atherosclerosis. - 2004. - Vol. 173., №2. - P. 185195.

69. Bobryshev Y.V. Transdifferentiation of smooth muscle cells into chondrocytes in atherosclerotic arteries in situ: Implications for diffuse intimal calcification // Journal of Pathology. -2005. - Vol. 205., №5. - P. 641-650.

70. Bobryshev Y.V, Lord R.S.A. Identification of Natural Killer cells in human atherosclerotic plaque // Atherosclerosis. - 2005. - Vol. 180., № 2 - P. 423427.

71. Bobryshev Y.V, Lord R.S.A. Co-accumulation of Dendritic Cells and Natural Killer T cells within rupture-prone regions in human atherosclerotic plaques. Journal of Histochemistry and Cytochemistry. - 2005. - Vol. 53., №6-P. 781785.

72. Bobryshev Y.V. Natural killer T cells in atherosclerosis // Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology. - 2005. - Vol. 25., № 5.- P. e40.

73. Yan W.X., Rahimi F., Bobryshev Y.V., Song C.J., Hsu K„ Geczy C. Roles of S100A12 in atherosclerosis // Inflammation Research. - 2005. - Vol. 54., №3. -P. S205.

74. Mujawar Z, Rose H., Morrow M., Orenstein J., Bobryshev, Y., Sviridov D., Bukrinsky M. YesHIV impairs reverse cholesterol transport from macrophages: A possible mechanism of atherogenic effect of HIV-1 infection //Retrovirology. - 2005. -Vol.2., Suppl. l.-P. S151.

75. Bobryshev Y.V. Subset of cells immunopositive for neurokinin-! receptor identified as arterial interstitial cells of Cajal in human large arteries // Cell and Tissue Research. - 2005. - Vol. 321., №1. - P. 45-55.

76. Bobryshev Y.V. Intracellular localization of oxidized low density lipoproteins in atherosclerotic plaque cells revealed by electron microscopy combined with Laser Capture Microdissection // Journal of Histochemistty and Cytochemistry. -2005. - Vol. 53, №6. - P.793-797.

77. Bobryshev Y.V. Calcification of elastic fibers in human atherosclerotic plaque // Atherosclerosis. - 2005. - Vol. 180., №2. - P. 293-303.

78. Bonello M.R., Bobryshev Y.V., Khachigian L.M. Peroxide-Inducible Ets-1 Mediates Platelet-Derived Growth Factor Receptor-{alpha} Gene Transcription in Vascular Smooth Muscle Cells // American Journal of Pathology.-2005.-Vol. 167., №4. -P. 1149-1159.

79. Bobryshev Y.V. Dendritic cells in atherosclerosis: Current status of the problem and clinical relevance II European Heart Journal. - 2005. - Vol. 26., №17.-P. 1700-1704.

80. McCormick M.M., Rahimi F., Bobryshev Y.V., Gaus K., Zreiqat H„ Cai H„ Lord R.S.A., Geczy C.L. S100A8 and S100A9 in human arterial wall: Implications for atherogenesis // Journal of Biological Chemistry. - 2005. -Vol. 280., №50,- P. 41521-41529.

81. Bobryshev Y.V. Monocyte recruitment and foam cell formation in atherosclerosis // Micron. - 2006. - Vol. 37., №3,- P. 208-222.

82. Mujawar Z., Rose H., Morrow M.P., Pushkarsky T., Dubrovsky L., Mukhamedova N., Fu Y., Dart A., Orenstein J.M., Bobryshev Y.V., Bukrinsky M., Sviridov D. Human immunodeficiency virus impairs reverse cholesterol transport from macrophages // PLoS Biology. - 2006. - Vol. 4., № 11. - P. 1970-1983.

83. Bobryshev Y.V., Golovanova N.K., Tran D., Samovilova N.N., Gracheva E.V., Efremov E.E., Sobolev A.Y., Yurchenko Y.V., Lord R.S.A., Cao W., Lu J., Saito M., Prokazova N.V. Expression of GM3 synthase in human atherosclerotic lesions // Atherosclerosis. - 2006. - Vol. 184., №1. - P. 63-71.

84. Bobiyshev Y.V., Lord R.S.A., Tran D. Chlamydia pneumoniae in foci of 'early' calcification of the tunica media in arteriosclerotic arteries: An incidental presence? // American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. - 2006. - Vol. 290., №4 .- C. H1510-1519.

85. Bobryshev Y.V., Killingsworth M.C., Huynh T.G., Lord R.S., Grabs A.J., Valenzuela S.M. Are calcifying matrix vesicles in atherosclerotic lesions of

cellular origin? // Basic Research in Cardiology. - 2007. - Vol. 102, №2. - P. 133-143.

86. Bobryshev Y.V, Killingsworth M.C, Tran D, Lord R. Amalgamation of Chlamydia pneumoniae inclusions with lipid droplets in foam cells in human atherosclerotic plaque // Virchows Archiv. - 2008. - Vol. 453, №1. - P. 69-77.

87. Bobryshev Y.V, Killingsworth M.C, Lord R.S.A. Spatial distribution of osteoblast-specific transcription factor Cbfal and bone formation in atherosclerotic arteries // Cell and Tissue Research. - 2008. - Vol. 333, №2. -P. 225-235.

88. Bobryshev Y.V, Killingsworth M.C, Lord R.S.A, Grabs A.J. Matrix vesicles in the fibrous cap of atherosclerotic plaque: Possible contribution to plaque rupture // Journal of Cellular and Molecular Medicine. - 2008. - Vol. 12, №5B.- P. 2073-2082.

89. Kavurma M.M, Schoppet M, Bobryshev Y.V, Khachigian L.M, Bennett M.R. TRAIL stimulates proliferation of vascular smooth muscle cells via activation ofNF-kappaB and induction of insulin-like growth factor-1 receptor // Journal of Biological Chemistry. - 2008. - Vol. 283., №12. - P. 7754-7762.

90. Goyette J, Yan W.X, Yamen E„ Chung Y.M, Lim S.Y, Hsu K, Rahimi F„ Di Girolamo N, Song C, Jessup W, Kockx M, Bobryshev Y.V, Freedman S.B, Geczy C.L. Pleiotropic roles of S100A12 in coronary atherosclerotic plaque formation and rupture // Journal of Immunology. - 2009. - Vol. 183, №1,-P. 593-603.

91. Бобрышев Ю.В, Лорд P.C. А, Нагорнев В .А. Дендритные клетки и их роль в атеросклерозе. // Медицинский Академический Журнал. - 2009. -Т. 9.-С. 11-24.

92. Cherian S, Bharati S, Bobryshev Y, Nayar S, Jagannath B. Association of Chlamydia pneumoniae within calcified coronary atherosclerosis // British Journal of Surgery. - 2010. - Vol. 97, Suppl. 4. - P. S20.

93. Bobryshev Y.V. Dendritic cells and their role in atherogenesis // Laboratory Investigation. - 2010. - Vol. 90, №7,- P. 970-984.

94. Orekhov A.N, Andreeva E.R, Andrianova I.V., Bobryshev Y.V. Peculiarities of cell composition and cell proliferation in different type atherosclerotic lesions in carotid and coronary arteries // Atherosclerosis. - 2010. - Vol. 212, №2.-P. 436-443.

95. Bobryshev Y.V. Vitamin D3 suppresses immune reactions in atherosclerosis, affecting regulatory T cells and dendritic cell function // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. - 2010. -Vol. 30, №12. - P. 2317-2319.

96. Бобрышев Ю.В, Карагодин В.П, Ковалевская Ж.И, Мясоедова В.А, Шапырина Е.В, Салямов В.И, Каргополова Ю.М, Галактионова Д.Ю, Мельниченко A.A., Орехов А.Н. Численность и клеточная пролиферация в интиме различных артерий человека // Цитология. - 2011. - Т. 53, №10. -С. 815-825.

97. Perrins C.J, Bobryshev Y.V. Current advances in understanding of immunopathology of atherosclerosis // Virchows Archiv. - 2011. - Vol. 458, №2.-P. 117-123.

98. Bobryshev Y.V, Tran D, Botelho N.K, Lord R.V.N, Orekhov A.N. Musashi-1 expression in atherosclerotic arteries and its relevance to the origin of arterial smooth muscle cells: Histopathological findings and speculations // Atherosclerosis.-2011.-Vol. 215. ,№2.-P. 355-365.

99. Bobryshev Y.V, Andreeva E.R, Mikhailova I.A., Andrianova I.V., Moisenovich M.M, Khapchaev S, Agapov I.I, Sobenin I.A., Lusta K.A, Orekhov A.N. Correlation between lipid deposition, immune-inflammatory cell content and MHC class II expression in diffuse intimal thickening of the human aorta//Atherosclerosis. - 2011.-Vol. 219, №1,-P. 171-183.

100. Bobryshev YV, Orekhov AN, Killingsworth MC, Lu J. Decreased expression of Liver X Receptor-a in macrophages infected with Chlamydia pneumoniae in human atherosclerotic arteries in situ // Journal of Innate Immunity. - 2011. -Vol.3, №5.-P. 483-494.

101. Bobryshev Y.V, Karagodin V.P, Kovalevskaya Z.I, Myasoedova V.A, Shapyrina E.V., Salyamov V.I, Kargapolova Y.M, Galaktionova D.Y,

Melnichenko A. A., Orekhov A. N. The number of cells and the cell proliferation in intima of various human arteries // Cell and Tissue Biology. -2012.-Vol. 6., №1.-P. 29-39.

102. Chistiakov D.A., Sobenin I.A., Bobryshev Y.V., Orekhov A.N. Mitochondrial dysfunction and mitochondrial DNA mutations in atherosclerotic complications in diabetes // World Journal of Cardiology. - 2012. - Vol. 4., №5.-P. 148-156.

103. Bobryshev Y.V., Moisenovich M.M., Pustovalova O.L., Agapov 1.1., Orekhov AN. Widespread distribution of HLA-DR-expressing cells in macroscopically undiseased intima of the human aorta: A possible role in surveillance and maintenance of vascular homeostasis // Immunobiology. - 2012. - Vol. 217., №5.-P. 558-568.

104. Bobryshev Y.V., Killingsworth M.C., Orekhov A.N. Increased shedding of microvesicles from intimal smooth muscle cells in athero-prone areas of the human aorta: Implications for understanding of the pre-disease stage // Pathobiology. - 2013. - Vol. 80., №1. - P. 24-31.

Глава в монографии

Bobryshev Y.V. Dendritic cells in atherosclerosis. In: Dendritic cells: Biology and Clinical Applications / Eds. M.T. Lotze, A.W. Thomson / San-Diego, Acad. Press. - 2001. - PP. 547-557.

Монография

Бобрышев Ю.В., Орехов A.H. Клеточные механизмы атеросклероза: Архитектоника атеросклеротических поражений и роль дендритных клеток. LAP LAMBERT Academic Publishing GmbH & Co. KG, Saarbrücken, Germany, - 2012. - 172 с.

Bobryshev Yuri Veniaminovich

Structural and functional peculiarities of arteries at immune inflammation in

atherogenesis

Abstract

Atherosclerosis and vascular disorders which result from atherosclerosis represent one of the major problems in the modern medicine and public health. Despite the enormous investments in investigation of atherosclerosis have been made, the mechanisms that initiate the development of this disease and changes in the cell compositions in affected arteries remain not well understood. The initial aim of the present thesis was to elucidate the structural and functional aspects of the development of atherosclerosis in humans, with special attention to the role of immune inflammation. During the analysis of human arterial tissue specimens, a new cell type was found and, eventually, it was understood that this cell belongs to the family of antigen-presenting dendritic cells. The studies summarized in the present thesis show that vascular dendritic cell is an essential element of human normal arteries. The thesis shows that, by means of their cellular processes, dendritic cells form local cellular networks in the intima of the arterial wall, allowing the relationship between different cell types. The identification and characterization of cellular interactions provided by vascular dendritic cells allows lis a better understanding of the mechanisms that maintain homeostasis in normal human arteries. In the studies outlined in this thesis, the features and the topographic distribution of dendritic cells in the normal arterial wall and different types of atherosclerotic lesions are detailed. In advances atherosclerotic plaques, preferential accumulations of dendritic cells were found to be the shoulder areas of lesions. An increase in numbers of dendritic cells in the plaque shoulder areas was found to occur in parallel with the transformation of stable atherosclerotic plaques to unstable plagues. The formation of multiple clusters of mature CD83+ dendritic cells with activated T-lymphocytes in the shoulder regions was found to characterize unstable plagues.

The results of the analysis that are provided in the thesis give a comprehensive picture of the cellular mechanisms of immune inflammation which are involved in the initiation of early atherosclerotic lesions and the formation and destabilization of atherosclerotic plaques.

Подписано в печать:

20.09.2012

Заказ № 7623 Тираж -100 экз. Печать трафаретная. Типография «11-й ФОРМАТ» ИНН 7726330900 115230, Москва, Варшавское ш., 36 (499) 788-78-56 www.autoreferat.ru

2- 22.850

2012351384

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Бобрышев, Юрий Вениаминович, автореферат

Актуальность проблемы.8

Цель настоящей работы.10

Основные задачи исследования.11

Научная новизна.11

Теоретическая и практическая значимость.13

Основные положения, выносимые на защиту.14

Реализация результатов работы.15

Апробация результатов диссертации.17

Публикации.18

Структура и объем диссертации.18

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.19

1.1 КЛЕТОЧНЫЙ СОСТАВ АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЙ. 19

1.1.1 Вводные положения обзора.19

1.1.2.Атеросклероз: Воззрения на проблему и теории патогенеза.20

1.1.3 Клеточной состав стенки артерий и роль различных типов клеток в атерогенезе.27

1.1.4 Роль межклеточные взаимодействий и клеточного микроокружения в фенотипической модуляции клеток и в воспалительных реакциях при атеросклерозе.42

1.1.5 Заключение.45

1.2. Нерешенные вопросы и проблемы и подходы к их разрешению.46

2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.47

2.1 Материал.47

2 1.1 Секционный материал.47

2.1.2 Биопсийный материал.49

2.1.3 Образцы крови человека.51

2.1.4 Образцы аорт полученных от экспериментальных животных.51

2.2 Методы.52

2.2.1 Иммуноморфологические методы анализа и характеристика использованных антител.52

2.2.2 Электронная микроскопия.61

2.3 In vitro исследования.67

2.3.1 Выделение и культивирование клеток интимы артерий.67

2.3.2 Получение и анализ дендритных клеток in vitro.68

2.3.3 Иммунная окраска клеток и последующая конфокальная микроскопия .70

2.3.4 Анализ взаимодействия С. pneumoniae с дендритными клетками in vitro.70

2.4 Статистические методы анализа результатов исследования.70

3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.72

3.1 клеточный состав артерий человека в норме и на ранней стадии развития атеросклероза.72

3.1.1 Сравнительный анализ клеточного состава интимы аорты в участках предрасположенных и резистентных к повреждению атеросклерозом.72

3.1.2 Фенотипическая модуляция и контакты клеток в интиме.78

3.1.3 Идентификация дендритных клеток в артериальной интиме.79

3.1.4 Обсуждение полученных данных.86

3.2. ИССЛЕДОВАНИЕ СОСТАВА И ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ КЛЕТОК В АТЕРОСКЛЕРОТИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЯХ.105

3.2.1.Особенности распределения клеточных элементов в различных типах атеросклеротических поражений человека и их характеризация.105

3.2.2 Пролиферация, клеточная смерть и синтетическая активность клеток в атеросклеротических поражениях.113

3.2.3 Ассоциация дендритных клеток с Chlamydia pneumoniae в атеросклеротических поражениях артерий человека. Анализ взаимодействия Chlamydia pneumoniae с дендритными клетками in vitro .116

3.2.4 Кальцификация артерий человека и вовлеченность дендритных клеток в этот процесс.117

3.2.5 Идентификация и характеризация дендритных клеток в атеросклеротических поражениях аорты экспериментальных животных .119

3.2.6 Обсуждение полученных данных.120

4. ОБШЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ.137

4.1 Особенности иммунного воспаления при атеросклерозе.137

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АЕС - З-амино-9 этил-карбазол ВИЧ - вирус иммунодефицита ГМК - гладкомышечные клетки ДАБ - 3,3' диаминобензидин ЛП — липопротеиды

ЛПНП - липопротеиды низкой плотности ЛПОНП - липопротеиды очень низкой плотности Мн-Мф - моноциты-макрофаги

ПП участки - предрасположенные к поражению атеросклерозом участки

РП участки - резистентные к поражению атеросклерозом участки

СПИД - синдром приобретенного иммунного дефицита

ТРИТЦ - тетраметилродаминизотиоцианат

ФИТЦ - флуоресцеинизотиоцианат

С. pneumoniae - Chlamydia pneumoniae

HLA-DR - молекула гистосовместимости класса II

PCNA - Ядерный антиген пролиферирующих клеток

GM3 synthase - GM3 синтетаза

GM3 - Ганглиозид GM3

NF- Нейрофиламенты

GFAP - Глиальный фибриллярный белок

GM-CSF -гранулоцито-макрофагальный колоне-стимулирующий фактор

Neurokinin 1 receptor - Рецептор 1 нейрокинина

VEGF - эндотелиальный ростовой фактор сосудов

PLA-2 - Фосфолипаза А2, тип II

ICAM-1 - Межклеточная молекула адгезии-1

VCAM-1 - Молекула адгезии клеток сосудов-1

FGF - Фактор роста фибробластов

PAP - пероксидаза-анти-пероксидаза TNF-a - фактор некроза опухоли-a

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы

Атеросклероз и его осложнения продолжают оставаться наиболее частой причиной смертности и инвалидности трудоспособного населения во всех развитых странах [210]. В связи с этим понятны усилия, направленные на изучение механизмов пато- и морфогенеза этого заболевания. Несмотря на значительный прогресс в исследовании атеросклероза и многочисленные гипотезы, объясняющие его возникновение и течение, ряд ключевых моментов пато- и морфогенеза заболевания остаются дискуссионными и недостаточно изученными. В частности, это касается роли структурно-функциональной гетерогенности клеточных элементов интимы артерий и значимости межклеточных взаимодействий в атерогенезе.

В патогенетических механизмах атеросклероза, особенно в начальных стадиях, все большее значение придается иммунному воспалению артерий [46,221,22,266]. Основанием для таких взглядов являются результаты исследований, демонстрирующие присутствие активированных лимфоцитов в ранних и продвинутых атеросклеротических поражениях человека [218224,364,365], а также присутствие в крови и в сосудистой стенке антител "атеросклеротического происхождения" [46,247-249].

Вовлеченность иммунных реакций в развитие атеросклеротических поражений подтверждена в экспериментальных моделях, утилизирующих экспериментальных животных [96,200,289,358,392]. Наибольшее количество информации получено при исследование мышей с различными генетически-индуцированными дефектами. Несмотря на очевидную ценность полученной информации, эти модели лишь частично отражают многообразие процессов, имеющих место при атеросклерозе у человека, и не могут быть полностью использованы для объяснения механизмов развития атеросклеротических поражений [96,200,289,358,392]. Стоит лишь отметить, что в отличие от артерий человека, которые характеризуются "толстой" многослойной интимой, содержащей разнообразные клеточные элементы, интима артерий мышей, представлена только эндотелием, располагающимся на внутренней эластической мембране и отделенной от последней лишь тонкой прослойкой соединительно-тканного матрикса, практически не содержащего клеточных элементов.

Ряд классических исследований, выполненных на аутопсийном и биопсийном материале, позволил установить, что интима артерий представлена гетерогенной клеточной популяций. Морфологическая разнородность клеточных популяций артерий была подвергнута изучению и основные клеточные элементы, включая эндотелиальные клетки, гладкомышечные клетки, моноциты-макрофаги, лимфоциты, перициты и тучные клетки, были распознаны. Было показано, что подавляющая часть клеток сосудистой стенки имеет гладкомышечную природу, пролиферация и секреция ими компонентов экстрацеллюлярного матрикса которыми является ранним и важным этапом развития атеросклероза. Выявлено также присутствие в атеросклеротически пораженных артериях человека фенотипически измененных гладкомышечных клеток [179,229,233,339]. Однако до настоящего времени не была дана комплексная морфофункциональная характеристика фенотипической модуляции гладкомышечных клеток артерий человека и не доказан факт участия этих клеток в развитии патологического процесса на ранних стадиях атеросклероза. Кроме того, не выяснено, какие изменения в сосудах предшествуют появлению измененных гладкомышечных клеток. В последние десятилетия было установлено, что формирование атеросклеротических поражений связано с "инфильтрацией" моноцитов крови в сосудистую стенку [198,199,337], однако, структурно-функциональные особенности дифференцировки моноцитов, проникших в интиму, не получили достаточного внимания. Накапливающаяся информация дает основание считать, что популяция макрофагов в атеросклеротических повреждениях неоднородна

46,204,205,300,303,399], но гетерогенность интимальных макрофагов изучена недостаточно.

Проведенные до настоящего времени исследования морфологической гетерогенности интимы артерий человека, в основном, не носили системный характер и не позволили связать фенотипическую модуляцию клеточных элементов интимы с локальностью возникновения атеросклеротических поражений в артериях, что затрудняет понимание значимости структурно-функциональной гетерогенности клеток в патогенезе атеросклероза. Взаимосвязь фенотипической модуляции клеточных элементов интимы с иммунно-воспалительных реакциями при атеросклерозе также не получила достаточного внимания.

Все вышесказанное свидетельствует о необходимости проведения комплексного и многопланового исследования с использованием новых методических подходов и современных морфологических методов для анализа аутопсийного и биопсийного материала.

Цель настоящей работы

Основные задачи исследования

В соответствии с указанной целью были определены следующие основные задачи исследования:

1. Изучить изменение клеточной композиции интимы артерий человека на самых ранних стадиях развития атеросклеротических поражений и роль иммунно-воспалительных реакций в инициации атеросклеротического процесса.

Научная новизна

Проведено комплексное исследование структурных особенностей интимы артерий человека в норме и при развитии атеросклеротических поражений. Впервые выявлено присутствие в артериях человека клеток, принадлежащих семейству антиген-представляющих дендритных клеток. Показано, что дендритные клетки являются обязательным элементом артерий человека в норме. Охарактеризована ультраструктура дендритных клеток нормальных артерий человека и распознаны два фенотипа, один из которых является вариантом клеток Лангерганса. Показано, что посредством клеточных отростков дендритные клетки формируют локальные клеточные "сети" в интиме артерий, обеспечивая взаимосвязь различных типов клеток. Выявление системы клеточных взаимодействий, обеспечиваемых присутствием дендритных клеток в артериальной стенке, позволило составить более полное представление о механизмах поддержания гомеостаза в артериях человека.

Изучены особенности топографического распределения дендритных клеток в различных типах атеросклеротических поражений. Показана преимущественная аккумуляция дендритных клеток в "плечевых" зонах атеросклеротических бляшек. Показано, что увеличение числа дендритных клеток в плечевых участках происходит параллельно с трансформацией "стабильных" атеросклеротических бляшек в "нестабильные". Показано присутствие кластеров зрелых дендритных клеток с активированными Т-лимфоцитами в плечевых зонах бляшек, обогащенных присутствием микрососудов, связанных с неоваскуляризацией бляшек.

Показана повышенная эндоцитозная активность эндотелиальных клеток в участках аорты человека, предрасположенных к поражению атеросклерозом. В этих же участках обнаружены скопления моноцитов-макрофагов, Т-лимфоцитов и активированных дендритных клеток. Морфометрически доказаны локальность и постоянство инфильтрации интимы моноцитами-макрофагами, которые вовлечены в воспалительные реакции и способны влиять на изменения фенотипа гладкомышечных клеток.

Исследование атеросклеротических поражений артерий человека позволило выявить существование ранее неизвестных фенотипов клеточных элементов, в частности, существование различных фенотипов гладкомышечных клеток. В участках нормальной интимы и в ранних атеросклеротических поражениях артерий человека детально изучены характеристики "синтетического" и "сократительного" фенотипов гладкомышечных клеток. Показано, что в "зрелых" атеросклеротических бляшках, в дополнение к "синтетическому" и "сократительному" фенотипам, существуют ранее неизвестные модификации гладкомышечных клеток, обозначенные нами как "остеоидный" и "хондроцитоидный" фенотипы. "Остеоидный" и "хондроцитоидный" фенотипы гладкомышечных клеток были обнаружены в атеросклеротических бляшках аорты, коронарных и сонных артерий человека, что свидетельствует о стереотипе структурно-функциональных перестроек в артериях мышечно-эластического и эластического типов при атеросклерозе.

Теоретическая и практическая значимость

Выявленные особенности структурной организации интимы артерий человека имеют общебиологическое значение.

Выявление присутствия дендритных клеток в интиме артерий способствовало развитию новых направлений исследований, направленных на изучение роли дендритных клеток в разнообразных сосудистых заболеваниях, включая аневризму аорты, болезнь Такаясу (Takayasu's arteritis), а также исследований роли дендритных клеток в разнообразных хирургических интервенциях, направленных на коррекцию функции сосудов.

Основные положения, выносимые на защиту

Реализация результатов работы

Annual conference of Indian Association of Cardiovascular & Thoracic Surgeons" (Chennai, 2002), "Joint 17th Annual Meeting of the European Association for Cardio-thoracic Surgery and the 11th Annual Meeting of the European Society of Thoracic Surgeons" (Vienna, 2003), "3rd International AIDS Society Conference on HIV Pathogenesis and Treatment" (Rio de Janeiro, 2005), "International Meeting of the Institute of Human Virology" (Baltimore, 2005), "7th World Congress on Inflammation" (Melbourne, 2005), "14th Meeting of the International Society of Atherosclerosis" (Rome, 2006), "40th Japan Atherosclerosis Society Annual Meeting" (Tsukuba, 2008), "Актуальные вопросы медицинской биологии и паразитологии (Юбилейная научно-практическая конференция, посвященная 200-летию кафедры биологии имени академика Е.Н. Павловского, ВМА)" (Санкт-Петербург, 2009), VII Всероссийская конференция с международным участием "Механизмы функционирования висцеральных систем" (Санкт-Петербург, 2009), "1st AMDI-International Biohealth Science Conference (IBSC)" (Penang, 2010), "45th Congress of the European Society for Surgical Research"(Geneva, 2010), "2nd Annual Health Conference, Global Healthcare: Differing Perspectives and Dimensions in Healthcare" (Kuala Lumpur, 2011), "79th European Atherosclerosis Society Congress" (Gothenburg, 2011), "2011 National Histotechnology Conference" (Sydney, 2011), "XVI International Symposium on Atherosclerosis ISA2012" (Sydney, 2012), "European Atherosclerosis Society (EAS)" (Milan, 2012).

Материалы диссертации были также представлены в виде докладов на заседаниях Faculty of Medicine, University of New South Wales, Sydney (1997, 2003, 2007), на совместном научном заседании Отдела общей и частной морфологии и Отдела биохимии НИИ Экспериментальной медицины РАМН (2009), на заседании Laboratory of Immunopathology St Vincent's Hospital Sydney (2009) и на заседании Института атеросклероза, Инновационный центр Сколково (2012). участием "Механизмы функционирования висцеральных систем" (Санкт-Петербург, 2009), "1st AMDI-International Biohealth Science Conference (IBSC)" (Penang, 2010), "45th Congress of the European Society for Surgical Research"(Geneva, 2010), "2nd Annual Health Conference, Global Healthcare: Differing Perspectives and Dimensions in Healthcare" (Kuala Lumpur, 2011), "79th European Atherosclerosis Society Congress" (Gothenburg, 2011), "2011 National Histotechnology Conference" (Sydney, 2011), "XVI International Symposium on Atherosclerosis ISA2012" (Sydney, 2012), "European Atherosclerosis Society (EAS)" (Milan, 2012).

Публикации

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 208 страницах машинописного текста и состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материал и методы, результаты и их обсуждение, заключение и выводы. Библиографический список использованной литературы содержит 414 источников. Текст иллюстрирован 61 рисунком, преимущественно в виде блоков (Приложение на 35 страницах) и 3 таблицами.

Заключение диссертационного исследования на тему "Структурно-функциональные особенности стенки артерий в развитии иммунного воспаления в атерогенезе"

5. ВЫВОДЫ

6. В участках аорты человека, предрасположенных к поражению атеросклерозом, система клеточных взаимодействий, свойственная нормальной интиме, нарушается, в частности, в результате формирования дендритными клетками непосредственных контактов с лимфоцитами и макрофагами.

9. Количество дендритных клеток в плечевых участках возрастает параллельно с ростом и трансформацией "стабильных" атеросклеротических бляшек с толстой фиброзной покрышкой в "нестабильные" бляшки, характеризующиеся истонченной фиброзной покрышкой. Плечевые зоны бляшек становятся обогащенными микрососудами неоваскуляризации и характеризуются присутствием клеточных кластеров, формируемых контактирующими зрелыми дендритными клетками с Т-лимфоцитами, представленными "типичными" лимфоцитами (СЭ4+; СЭ8+) и МСТ-клетками (С0161+/СБЗ+). В этих зонах выявляется также присутствие ЫК-клеток (С056+/С03-). Обнаружение изменений в клеточной композиции по мере роста и дестабилизации атеросклеротических бляшек дает основание полагать, что прогрессирование атеросклероза сопровождается, а возможно и определяется, интенсификацией иммуно-воспалительных процессов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

4. ОБШЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ

4.1 Особенности иммунного воспаления при атеросклерозе

Проведенное исследование свидетельствуют о сложности механизмов, вовлеченных в пато- и морфогенез атеросклероза. Результаты исследования позволяют рассматривать атеросклеротическое поражение интимы артерий как очаг хронического воспаления, в которое вовлечены иммунокомпетентные клетки и клетки неспецифического воспаления, подобно тому, как это обстоит при воспалении в других анатомических местоположениях.

Об общности атеросклероза и воспаления свидетельствуют единые гуморальные и клеточные реакции, вовлеченные в эти процессы. Оба процесса формируют одни и те же клетки, включая клетки эндотелия, моноциты, макрофаги, Т-лимфоциты, В-лимфоциты, дендритные клетки и тучные клетки. Воспалительный процесс при атеросклерозе является следствием универсальной ответной реакции клеток интимы на повреждающее действие различных по природе повреждающих факторов, известных как факторов риска, и, возможно, некоторых инфекционных агентов. Однако воспалению при атеросклерозу свойственны и специфические черты, такие как нарушение липидного обмена, блокада рецепторного поглощения макрофагами модифицированных ЛПНП и, как следствие, образование пенистых клеток, формирующих некротическое ядро развивающейся атеросклеротической бляшки.

Иммунное воспаление при атеросклерозе регулируется сложным каскадом молекулярных и клеточных механизмов с вовлечением "звездчатых"' клеток - дендритных клеток. Присутствие звездчатых клеток в сосудистой стенке известно с 1866, когда Лангханс [258] впервые описал присутствие отростчатых клеток в интиме артерий. С тех пор природа звездчатых клеток является предметом научного интереса [65,312,330]; однако, природа звездчатых клеток окончательно не выяснена. Представляется рациональным считать, что дендритные клетки, распознанные в настоящем исследовании, являются субпопоуляцией звездчатых клеток в интиме артерий [111].

В настоящее время общеизвестно, что дендритные клетки являются профессиональными сенсорами иммунной системы, способными распознавать антиген посредством сложных клеточных механизмов, вовлекающих расшифровку и интеграцию различных сигналов, полученных в рецептор-зависимой манере. Накоплен существенный объем информации демонстрирующий, что дендритные клетки играют роль не только в поддержании гомеостаза, но также вовлечены в ряд заболеваний, включая инфекционные заболевания и рак. Обнаружение присутствия дендритных клеток в артериях требует критического изучения и осмысления их роли в развитии атеросклероза [101, 409-414].

Результаты настоящего исследования позволяют считать, дендритные клетки вовлечены в воспаление при атеросклерозе с самых ранних стадий развития этого заболевания. Присутствие клеточных кластеров состоящих из дендритных клеток и лимфоцитов, позволяет полагать, что активация лимфоцитов может происходить непосредственно в сосудистой стенке.

Перечисленные новые факты, полученные в настоящем исследовании, позволили уточнить последовательность морфогенетических процессов, происходящих в сосуде человека при атеросклерозе, и прояснить участие различных клеточных элементов интимы в атерогенезе. Проведенное исследование подтвердило, что атеросклероз представляет собой хроническое иммуно-воспалительное заболевание, проявляющееся в сосудистой стенке в виде атеросклеротических поражений. Проведенное исследование показало, что морфогенез атеросклеротических поражений интимы артерий человека характеризуется резким изменением клеточного состава и межклеточных взаимодействий. Иммунное воспаление при атеросклерозе регулируется сложным каскадом клеточных механизмов с активным участием дендритных клеток. По нашему мнению, все клетки, присутствующие в атеросклеротических поражениях, вовлечены в той или иной мере в процесс воспаления. Фенотипическая модуляция интимальных клеток при атеросклерозе является отражением и результатом иммунного воспаления.

4.2 Возможности использования дендритные клеток в иммуно-терапевтических разработках, направленных на борьбу с атеросклерозом (практическая значимость работы)

В настоящее время разрабатываются различные подходы, направленные на поиск вакцин, которые могут быть использованы против атеросклероза [97,188,223,311,375]. Иммуномодуляция представляется перспективной стратегией [97,188,223,311,375]. Несмотря на сложность и неоднозначность находок вскрывающих природу и функции дендритных клеток, отмечается постоянно растущий интерес к возможности их использования для иммунотерапии заболеваний, в которых вовлечены иммунные реакции [93,319,361,362]. Способность дендритных клеток управлять иммунными процессами, а также успехи в разработке систем для культивации дендритных клеток с заданными параметрами, привели к их использованию в иммуно-терапевтических интервенциях против рака, аутоиммунных заболеваний и в трансплантологии [93,319,361,362]. В настоящее время дендритных клетки тестируются в качестве иммуномодулятора уже в клинических испытаниях, направленных на интервенцию против рака [283,359,361,362,367].

Не исключено, что дендритные клетки могут быть использованы для регуляции иммунных реакций, вовлеченных в развитие и прогрессированию атеросклероза [100], подобно тому как дендритные клетки используются в иммунотерапии рака и ряда аутоиммунных заболеваний. Утилизации дендритных клеток для иммуномодуляции при атеросклерозе могут способствовать существенные успехи, достигнутые в течение последних лет по "конструированию" дендритных клеток с заданными качествами, используя генетические подходы и иммунологические методы [93,319,361,362].

Один из подходов, используемых при иммунотерапии рака, включает методику, в которой дендритные клетки изолированные из периферической крови пациента, подвергаются активации ex vivo посредством их культивирования с соответствующим антигеном и затем возвращаются в кровеносное русло того же пациента [274,283,367]. В ряде раковых заболеваний выявлены специфические антигены, против которых усиление иммунного ответа необходимо. При атеросклерозе, не существует единственного специфического антигена и поэтому, инкубация дендритных клеток с гомогенатом атеросклеротических бляшек, возможно, позволит дендритным клеткам быть проактивированными спектром антигенов, присутствующих в гомогенате ткани атеросклеротической бляшки. Такой подход может быть особенно успешным, если атеросклеротическая ткань получена от того же самого пациента, например, при эндартерэктомии. В пациентах с раком, обработка дендритных клеток с антигеном позволяет стимулировать иммунный ответ. В отличие от рака, при атеросклерозе иммунные реакции должны быть не стимулированы, а наоборот - заглушены. Последнее может быть достигнуто, используя специфическую особенность активации Т-клеток дендритными клетками, требующую одновременного присутствия на поверхности дендритных клеток не только антигенного элемента в комплексе с i антиген-представляющей молекулой, но также и ко-стимуляторных молекул, таких как СБ80 и СБ86. Известно, что ко-стимуляторные молекулы активируются на поверхности дендритных клеток как следствие захвата и обработки антигена. Однако, если ко-стимуляторные молекулы блокированы на поверхности дендритных клеток, например посредством инкубации дендритных клеток с антителами против С080 и СБ86 антигенов, контакт таких активированных дендритных клеток с Т-клетками ведет не к активации Т-клеток, а наоборот, к подавлению активности Т-клеток или даже их апоптозу [274,283,367]. Используя эти свойства, дендритные клетки взятые из периферической крови больных с атеросклерозом и прокультивированные с гомогенатом атеросклеротической ткани, должны быть возвращены в кровяное русло пациента после их культивации с антителами направленными против ко-стимуляторных молекул. Естественно, усилия должны быть направлены на активацию дендритных клеток, определяющую желаемый ТЫ/ТЪ2 баланс.

Стоит здесь также отметить, что интересные результаты были получены при иммунизации против атеросклероза с использованием модифицированных ЛПНП, и в частности окисленных Л11Н11, и с определенными эпитопами апо-В [188,311,375,410]. Не исключено, что иммунизация дендритными клетками, пульсированными модифицированными ЛПНП или эпитопами апо-В, может позволить избежать нежелательных эффектов прямой вакцинации.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Бобрышев, Юрий Вениаминович

1. Автандилов Г Г. Динамика атеросклетотического процесса у человека. // М. Мед 1970.

2. Авцын А П. Ведение в географическую патологию. // М.: Мед., 1972.

3. Анастеади В X, Нагорнев В А. Морфогенез атеросклероза. // Кишинев: Штиинца, 1982.

4. Анестеади В X, Нагорнев В А. Ультраструктурные основы атеросклероза артерий. //Кишинев: Штиинца, 1983.

5. Анестеади ВХ, Нагорнев В А. О пато- и морфогенезе атеросклероза (клинико-экспериментальные аспекты). // Арх. пат. 1984. - Т.46., №3. -С. 10-13.

6. Аничков Н Н. Сосуды. В кн: Частная патологическая анатомия. // М.: Мед., 1947, С. 262-557.

7. Аничков Н Н. О начальных стадиях развития атеросклероза артерий. // Современные проблемы кардиологии. М.: Мед., 1960, С. 7-18.

8. Аничков Н Н. Основные теоретические положения к дальнейшему изучению проблемы атеросклероза. // Атеросклероз. Л.: Мед., 1965, С. 14-21.

9. Аничков Н Н, Цинзерлинг В Д. Современное состояние проблемы атеросклероза. // Атеросклероз. М.: Мед., 1953, С. 7-18.

10. Антонов А С, Крушинский А В, Николаева И А, Флегель X Т, Репин В С. Первичная культура клеток эндотелия пупочной вены человека. Идентификация и характеристика растущих и конфлуентных клеток. // Цитология. 1988. - Т.22. - С. 1159-1162.

11. Бабаев В Р. Изменение фенотипа гладкомышечных клеток артерий человека при атеросклееозе.// Автореферат дис .докт. мед. наук, М., 1992.

12. Бабаев В Р, Сухова Г К, Бобрышев Ю В. Сироткин В Н, Тарарак Э М. Моноцитарно-макрофагальная инфильтрация в участках раннихатеросклеротических поражений аорты человека. // Арх. пат. 1991. -Т.10.-С. 48-53.

13. Бабаев В Р, Бобрышев Ю В, Стенина О И, Тарарак Э М. Фенотипические варианты гладкомышечных клеток в атероматозных бляшках человеческой аорты. // Арх. пат 1990. - Т.52. - №5. -С. 16-21.

14. Бобрышев Ю В, Нагорнев В А, Климов А Н. Стереологический анализ неспецифического эндоцитоза липопротеидов эндотелием аорты на ранних стадиях экспериментального атеросклероза у кроликов // Арх. пат. 1984. - Т.46. - №10. -С. 36-41.

15. Бобрышев Ю В, Кузнецов А С. Структурный анализ взаимодействия липопротеидов низкой плотности с клетками интимы артерий при атеросклерозе // Арх. пат. 1989. - Т.51. - №9. С. 20-26.е

16. Бобрышев Ю В, Сухова Г К, Бабаев В Р, Казанцева И А. Межклеточные контакты в участках раннего атеросклеротического поражения аорты человека // Арх. пат. 1991. - Т.53. - №11. -С. 38-42.

17. Бобрышев Ю В., Лорд Р С А, Нагорнев В А. Дендритные клетки и их роль в атеросклерозе // Мед. акад. ж. 2009. - Т.9. - №2. -С. 11-24.

18. Ватутин Н Т, Чупина В А. Инфекция как фактор развития атеросклероза и его осложнений // Кардиология 2000. - Т.2. -С. 13-22.

19. Восканьнц А Н, Нагорнев В А. Пролиферация клеток стенки артерий человека при атеросклерозе как фактор проявления иммунного воспаления // Цитокины и воспаление. 2004. - Т.З. - №4. -С. 15-19.

20. Вотяков В И, Амвросьева Т В. О роли вирусных антигенов в индукции атерогенеза с позиций этиопатогенетических аспектов медленных инфекций и ассоциации атеросклероза с вирусами // Вестн. АМН СССР. -1991. -Т.5. С. 59-64.

21. Вихерт А М. Ритмические структуры аорты у детей и лиц молодого возраста // Арх. пат. 1987. - Т.5. - С. 16-21.

22. Вихерт A.M., Розинова В.Н. Морфогенез ранних долипидных стадий атеросклероза // Арх. пат. 1983. - Т.45. - №6. - С. 3-12.

23. Вихерт A.M., Розинова В.Н. Эндотелий артерий при атеросклерозе у человека // Бюлл. ВКНЦ АМН СССР.- 1981. Т.4. - №1. -С. 9-14.

24. Вихерт A.M., Жданов B.C. Атеросклероз при различных заболеваниях // М.: Мед., 1976, С. 208-210.

25. Вихерт A.M., Жданов B.C. Роль возрастных и приспособительных изменений сосудистой стенки в атерогенезе в свете учения академика И.В.Давыдовского об атеросклерозе // Арх. пат. 1988. - Т.50. - №3. -С. 8-16.

26. Давыдовский И.В. Атеросклероз как проблема возраста // Труды 1У Всесоюзного съезда патологоанатомов. М.: Мед., 1967, С.10-15.

27. Денисенко А.Д., Виноградов А.Г., Нагорнев В.А. и др. Взаимолействие макрофагов с аутоиммунным комплексом липопротеид-антитело // Иммунология 1989. - Т.2. - С. 32-35.

28. Долгов В.В., Преображенский С.Н., Войно-Ясенецкая Т.А., Репин B.C. Динамика морфофункциональных изменений эндотелиального покрова аорты и сонной артерии при гиперхолестеринемии у кроликов // Арх. пат.-1982.-Т.44.- №11.-С. 51-55.

29. Жданов B.C. Морфологические особенности развития и течения коронарного атеросклероза // Кардиология. 1989. - Т. 11. - С. 43-46.

30. Иоффе В.И., Зубжиикий Ю.Н., Нагорнев В.А., Климов А.Н. Иммунологическое исследование экспериментального атеросклероза // Бюлл. экспер. биол. 1973. - В. 6. - С. 72-76.

31. Климов А.Н. Причины и условия развития атеросклероза.// В кн.: Биохимические основы патогенеза атеросклероза. Л.: Мед., 1980, С 3-45. .

32. Климов А.Н. Предпосылки аутоиммуной теории патогенеза атеросклероза. // Иммунореактивность и атеросклероз. Л.: Мед., 1986, С. 184.

33. Климов А.Н. Иммунореактивность и атеросклероз. JL Мед, 1986, с. 192.

34. Климов А.Н. Аутоиммунная теория атерогенеза и концепция модифицированных липопротеидов // Вестн. АМН СССР. 1990. - Т.11-С. 30-36. ' •

35. Климов А.Н., Нагорнев В.А. Методические аспекты этиологии и патогенеза атеросклероза // Кардиология. 1993. - Т.З.- С. 5-10.

36. Климов А.Н., Нагорнев В.А., Денисенко А.Д. Изучение иммунологических механизмов развития атеросклероза и новые методы его диагностики и лечения // Мед. акад. ж. Т.5. - №2. - С. 18-32.

37. Климов А.Н, Нагорнев В.А, Денисенко А.Д., Константинов В.О. Аутоиммунная теория патогенеза атеросклероза и новые пути его лечения // Вестник РАМН. 2003. - Т. 12. - С. 29-34.

38. Климов A.B., Никуличева Н.Г. Липопротеиды, дислипопротеидемйи и атеросклероз. // Л.: Мед,, 1984.

39. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения // СПб: Питер. Ком., 1999, С. 134.

40. Ланкин В.З., Вихерт A.M. Перикисное окисление липидов в этиологии и патогенезе атеросклероза // Арх. пат. 1989. - Т.51. - №1. - С. 80-85.

41. Лобзин Ю.В., Рудакова A.B. Роль инфекционно-воспалительного фактора в развитии атеросклероза // Мед. акад. ж. 2003. - Т.1. - №2. - С. 80-89.

42. Нагорнев В.А. Кинетика клеточных элементов сосудистой стенки при атеросклерозе. // Арх. пат. 1988. - Т. 10. - С. 89-95.

43. Нагорнев В.А. Атерогенез и иммунное воспаление // Бюл. экспер. биол. -1996. -Т.7.-С. 4-6.

44. Нагорнев В А. Кинетика клеток сосудистой стенки и атерогенез. // Арх. пат.- 1998. Т.1. - С. 39-43.

45. Нагорнев В.А. Методология в изучении проблемы атеросклероза.// Мед. акад. ж. 2005. - Т.5. - №3. - С. 121-133.

46. Нагорнев В.А. Патогенез атеросклероза // СПб.: ЗАО Хромис, 2006., С.280.

47. Нагорнев В.А., Бобрышев Ю.В., Попов A.B., Виноградов А.Г. Транспорт бета-липопротеидов через эндотелий при экспериментальной гиперхолестеринемии (электронно-радиоавтографическое исследование) // Арх. пат.-1982.-Т.44.- №1.-С. 10-17.

48. Нагорнев В.А., Бобрышев Ю.В., Ивановский Ю.В., Кузнецов A.C. Роль моноцитов в развитии атеросклеротических поражений аорты у кроликов, //Арх. пат.-1983.-Т.45.- №6.-С. 19-26.

49. Нагорнев В.А., Попов А.В, Плесков В.М, Бобрышев Ю.В. Ультраструктурные особенности трансформации макрофаговв пенистые клетки в опытах in vitro // Бюлл. эксперим. биол. мед. 1985. - Т.99. -№5.-С. 617-619.

50. Нагорнев В.А., Ивановский Ю.В, Бобрышев Ю.В. и др. Современные представления о морфогенезе атеросклероза и развитие идей H.H. Аничкова // Актуальные проблемы патогенеза атеросклероза. Л.: Мед., 1985, С. 3-25.

51. Нагорнев В.А., Пигаревский П.В, Огурцов Р.Г., Денисенко А.Д. Атеросклероз и система иммунитета // Арх. пат. 1985. - Т.47. - №4. - С. 15-22.

52. Нагорнев В.А., Журавлева Т.Б., Бобрышев Ю.В. Структурно-функциональная характеристика внутренней поверхности коронарных артерий сердца человека при атеросклерозе // Арх. пат. 1989. - Т.51- С. 15-23.

53. Нагорнев В.А., Бобрышев Ю.В, Ивановский Ю.В., Богачев Ю.В. Роль моноцитов-макрофагов в атерогенезе. // Арх. пат. 1991. - Т.53. - №3. -С. 23-29.

54. Нагорнев В.А., Кетлинский С А. Клеточномолекулярные механизмы становления и развития атерогенеза (С040-С040Ь-иммунорегуляторный сигнал) // Бюл. экспер. биол. 1999. - Т.10 - С. 364-371.

55. Нагорнев В.А., Мальцева С.В. Роль инфекции в развитии иммунного воспаления и патогенезе атеросклероза // Арх. пат. 2000. - Т.6. - С. 5359.

56. Нагорнев В.А., Анестиади В.Х., Зота Е.Г. Атерогенез // Кишинев: СПб., 2001, С 330.

57. Нагорнев В.А., Яковлева О.А., Рабинович В С. Атерогенез и воспаление // Мед. акад. ж. -2001. -Т.1. -№1. -С. 139-150.

58. Нагорнев В.А., Пигаревский П.В., Восканьянц А.Н., Яковлева сО.А. Современные взгляды на проблему патогенеза атеросклероза с позиций инфекционной патологии // Вестник РАМН. 2002. - Т. 12 — С. 9-15.

59. Нагорнев В.А., Восканьянц А.Н., Виноградов А.Г и др. // Цитотоксический эффект липопротеидов низкой плотности // Бюлл. экспер. биол.-2003.-Т. 135.- №1.-С. 107-109.

60. Нагорнев В.А., Мальцева С.В., Восканьяни А.Н. Эволюиия взглядов на роль макрофагов в атерогенезе от Н.Н. Аничкова до наших дней. // Арх. пат. 2003. - Т.65. - №2. - С. 8-12.

61. Нагорнев В.А., Мальцева С.В., Пигаревский П.В и др.//Роль Chlamydia pneumoniae в патогенезе атеросклероза // Мед. акад. ж. 2002. - Т.2. -№3. - С. 18-28.

62. Нагорнев В.А., Мальцева С.В., Селиверстова В.Г. и др. Chlamydia pneumoniae как патогенетический фактор риска в развитии атеросклероза и его осложнений // Арх. пат. 2004. - Т.66. - №2. - С. 52-59.

63. Нагорнев В.А., Восканьяни А.Н. Атерогенез как иммуновоспалительный процесс. // Вестник РАМН. 2004. - Т.7. - С. 3-11.

64. Нагорнев В.А., Мальцева С.В. Аутоиммунные и воспалительные механизмы развития атеросклероза // Арх. пат. 2005. - Т.5. - С. 6-15-.

65. Орехов А.Н. Роль субэндотелиальных клеток интимы в развитии атеросклероза. Автореферат дис.докт. биол. наук, СПб: 1998.

66. Пигаревский П.В., Мальцева C.B., Селиверстова В.Г. Иммунокомпетентная система, атеросклероз и персистируюшая инфекция. // Вестник РАМН. 2005. - Т.2.- С. 17-22.

67. Попов A.B. Превращения плазменных липопротеидов в артериальной стенке.//Автореферат дис.докт. мед наук, JI, 1983.

68. Репин B.C., Долгов В.В., Зайкина О.Э., Поздняков О.И. Полиморфизм и повреждения эндотелия. Количественная оценка методом сканирующей электронной микроскопии. // В кн: Стенка сосудов в атеро- и тромбогенезе. М.\ Мед., 1983, С. 14-31.

69. Репин В С, Смирнов В Н. Клеточные механизмы атеросклероза.// Бюлл. ВКНЦ АМН СССР. 1983. - Т.5. - С. 5-23.

70. Розинова В.Н. Долипидные стадии атеросклероза и формирование атеросклеротической бляшки у детей и лиц молодого возраста// Автореф.канд мед наук, М., 1982.

71. Романов Ю.А. Гетерогенность эндотелия сосудов человека : связь сатеросклерозом и механизм возникновения // Автореферат дис.кандмед наук, М., 1989

72. Саркисов Д.С., Колокольчикова Е.Г, Варава Б.Н., Принцева О.Ю., Тюрин A.B. К вопросу о морфогенезе утолщения интимы, наблюдаемых при неспецифическом аортоартериите // Бюлл. экспер. биол. мед. 1986. -Т.8.-С. 233-235.

73. Саркисов Д.С., Пожарисский K.M., Аничков Н.М. H.H. Аничков. // М.: Мед., 1989, С. 81. ' •

74. Стенина О.И., Захарова O.C., Репин B.C. Повреждения эндотелия и их роль в патологии сосудистой стенки. // В сб: Успехи науки и техники. Физиология человека и животных. 1989. - Т.38. - С. 89-133.

75. Струков А.И. Некоторые вопросы изучения об ишемической болезни сердца // Кардиология. 1973. - 1973. - Т. 10. - С. 5-17.

76. Султаналиев А.Н., Жданов B.C. Липоидоз интимы коронарных артерий сердца у новорожденных и детей первого года жизни. // Арх. пат. 1985. -Т.47. - №10.-С. 36-42.

77. Abedin М., Tintut Y., Demer LL. Mesenchymal stem cells and the artery wall // Circ Res. 2004. - Vol. 95. - P. 671-676.

78. Aicher A., Heeschen C., Mohaupt M., Cooke JP., Zeiher A.M., Dimmeler S. Nicotine strongly activates dendritic cell-mediated adaptive immunity: potential role for progression of atherosclerotic lesions // Circulation. 2003. -Vol. 107.-P. 604-611.

79. Ait-Oufella.H., Salomon B.L., Potteaux S., Robertson A.K., Gourdy P., Zoll J. Natural regulatory T cells control the development of atherosclerosis in mice // Nat Med.-2006.-Vol. 12.-P. 178-180.

80. Angeli V., Llodra J., Rong J.X., Satoh K., Ishii S., Shimizu T. et al. Dyslipidemia associated with atherosclerotic disease systemically alters dendritic cell mobilization // Immunity. 2004. - Vol. 21. - P. 561-574.

81. Aschoff L. Atherosclerosis, in lectures on pathology. // Hoeber.: NY, 1924, P. 131-153.

82. Auffray C., Sieweke M.H., Geissmann F. Blood monocytes: development, heterogeneity, and relationship with dendritic cells // Annu Rev Immunol.-2009. Vol. 27. - P. 669-692.

83. Aukrust P., Otterdal K., Yndestad A., Sandberg W.J., Smith C., Ueland T., 0ie E., Damas J.K., Gullestad L., Halvorsen B. The complex role of T-cell-based immunity in atherosclerosis // Curr Atheroscler Rep. 2008. - Vol. 10. - P. 236-243.

84. Babaev V.R., Bobryshev Y.V., Stenina O.V., Tararak E.M., Gabbiani G. Heterogeneity of smooth muscle cells in atheromatous plaque of human aorta // Am J Pathol.-1990.-Vol. 136.-P. 1031-1042.

85. Babaev V.R., Bobryshev Y.V., Sukhova G.K., Kasantseva I.A. Monocyte/macrophage accumulation and smooth muscle cell phenotypes in early atherosclerotic lesions of human aorta // Atherosclerosis. 1993. - Vol. 100.-P. 237-248.

86. Bacci S., Pieri L., Buccoliero A.M., Bonelli A., Taddei G., Romagnoli P.t>

87. Smooth muscle cells, dendritic cells and mast cells are sources of TNF alpha and nitric oxide in human carotid artery atherosclerosis // Thromb Res. 2008. -Vol. 122.-P. 657-667.

88. Banchereau J., Steinman R.M. Dendritic cells and control of immunity // Nature. 1998. - Vol. 392. - P. 245-252.

89. Bauriedel G., Hutter R., Welsch U., Bach R., Sievert H., Luderitz B. Role of smooth muscle cell death in advanced coronary primary lesions: implications for plaque instability // Cardiovasc Res. 1999. - Vol. 41. - P. 480-488.

90. Benditt E.P. Implications of the monoclonal character of human atherosclerotic plaques // Am J Pathol. 1997. - Vol. 86. - P. 693-702.

91. Benditt E.P. The origin of atherosclerosis // Sci Am. 1997. - Vol. 236. - P. 74-85.

92. Benko S., Magyarics Z., Szabo A., Rajnavolgyi E. Dendritic cell subtypes as primary targets of vaccines: the emerging role and cross-talk of pattern recognition receptors // Biol Chem. 2008. - Vol. 389. - P. 469-485.

93. Bhagwat A.G., Roberstson A.L. Distribution and severity of atherosclerosis in the human thoracic aorta // Angiology. 1973. - Vol. 24. - P. 181-190.

94. Bielecka-Dabrowa A., Barylski M., Mikhailidis D.P., Rysz J., Banach M. HSP 70 and atherosclerosis—protector or activator?// Expert Opin Ther Targets. -2009.-Vol. 13.-P. 307-317.

95. Binder C.J., Chou M.Y., Fogelstrand L., Hartvigsen K., Shaw P.X., Boullier A., Witztum J.L. Natural antibodies in murine atherosclerosis // Curr Drug' Targets. 2008. - Vol. 9. - P. 190-195.

96. Binder C.J., Hartvigsen K., Witztum J.L. Promise of immune modulation to inhibit atherogenesis // J Am Coll Cardiol. 2007. - Vol. 50. - P. 547-550.

97. Blanco P., Palucka A.K., Pascual V., Banchereau J. Dendritic cells and cytokines in human inflammatory and autoimmune diseases // Cytokine Growth Factor Rev. 2008. - Vol. 19. - P. 41-52.

98. Bobryshev Y.V. Dendritic cells and their involvement in atherosclerosis // Curr Opin Lipidol. 2000. - Vol. 11. - P. 511 -517.t

99. Bobryshev Y.V. Can dendritic cells be exploited for therapeutic intervention in atherosclerosis? // Atherosclerosis. 2001. - Vol. 154. - P. 511-512.

100. Bobiyshev Y.V. Dendritic cells in atherosclerosis: current status of the problem and clinical relevance // Eur Heart J. 2005. - Vol. 26. - P. 1700-1704.

101. Bobryshev Y.V. Natural killer T cells in atherosclerosis // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2005. - Vol. 25. - P. e40.

102. Bobryshev Y.V. Intracellular localization of oxidized low density lipoproteins in atherosclerotic plaque cells revealed by electron microscopy combined with Laser Capture Microdissection // J Histochem Cytochem. 2005. - Vol. 53. -P. 793.-797.

103. Bobryshev Y.V. Transdifferentiation of smooth muscle cells into chondrocytes in atherosclerotic arteries in situ: implications for diffuse intimal calcification // J Pathol. 2005. - Vol. 205. - P. 641-650.

104. Bobryshev Y.V. Monocyte recruitment and foam cell formation in atherosclerosis // Micron. 2006. - Vol. 37. - P. 208-222.

105. Bobryshev Y.V., Lord R.S. S-100 positive cells in human arterial intima and in atherosclerotic lesions // Cardiovasc Res. 1995. - Vol. 29. - P. 689-696.

106. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Detection of vascular dendritic cells and extracellular calcium-binding protein S-100 in foci of calcification in human arteries // Acta Histochem Cytochem. 1995. -Vol. 28. -P. 371-380. * > 1

107. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Warren B.A. Calcified deposit formation in intimal thickenings of the human aorta // Atherosclerosis. 1995. - Vol. 118.-P. 9-21.

108. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Structural heterogeneity and contacting interactions of vascular dendritic cells in early atherosclerotic lesions of the human aorta // J Submicrosc Cytol Pathol. 1996. - Vol. 28. - P. 49-60.

109. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Langhans cells of human arterial intima: uniform by stellate appearance but different by nature // Tissue Cell. 1996. - Vol. 28. -P. 177-194.

110. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Rainer S., Jamal O.S., Munro V.F. Vascular dendritic cells and atherosclerosis // Pathol Res Pract. 1996. - Vol. 192. - P. 462-467.

111. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Rainer S., Munro V.F. VCAM-1 expression and network of VCAM-1 positive vascular dendritic cells in advancedeatherosclerotic lesions of carotid arteries and aortas // Acta Histochem. 1996. -Vol. 98.-P. 185-194.

112. Bobryshev Y.V., Crozier J.A., Lord R.S.A., Tran D., Jamal O.S., Parsson H.N., Scott K.F. Expression of secretory group II phospholipase A2 by CD la positive cells in human atherosclerotic plaques // Atherosclerosis. 1996. -Vol. 127.-P. 283-285.

113. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Watanabe T. Structural peculiarities of vascular dendritic cell tubulovesicular system in human atherosclerotic aorta // J Submicrosc Cytol Pathol. 1997. - Vol. 29. - P. 553-561.

114. Bobryshev Y.V., Babaev V.R., Lord R.S.A., Watanabe T. Cell death in atheromatous plaque of the carotid artery occurs through necrosis rather through apoptosis // In Vivo. 1997. - Vol. 11. - P. 441-452.

115. Bobryshev Y.V., Watanabe T. Ultrastructural evidence for association of vascular dendritic cells with T-lymphocytes and with B-cells in human atherosclerosis // J Submicrosc Cytol Pathol. 1997. - Vol. 29. - P. 209-221.

116. Bobryshev Y.V., Watanabe T. Subset of vascular dendritic cells transforming into foam cells in human atherosclerotic lesions // Cardiovasc Pathol. 1997. -Vol. 6.-P. 321-331.

117. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Detection of vascular dendritic cells accumulating calcified deposits in their cytoplasm // Tissue Cell. 1998. -Vol. 30.-P. 383-388.

118. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Mapping of vascular dendritic cells in atherosclerotic arteries suggests their involvement in local immune-inflammatory reactions // Cardiovasc Res. 1998. - Vol. 37. - P. 799-810.

119. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Watanabe T., Ikezawa T. The cell adhesion molecule E-cadherin is widely expressed in human atherosclerotic lesions //Cardiovasc. 1998. -Vol. 40. -P. 191-205.

120. Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Inder S.J., Lord R.S.A. Neovascular expression of VE-cadherin in human atherosclerotic arteries and its relation to intimal inflammation // Cardiovasc Res. 1999. - Vol. 43. - P. 1003-1017.

121. Bobryshev Y.V., Babaev V.R., Lord R.S.A., Watanabe T. Ultrastructural identification of cells with dendritic cell appearance in atherosclerotic aorta of apolipoprotein E deficient mice // J Submicrosc Cytol Pathol. 1999. - Vol. 31.-P. 527-531.

122. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. 55 kDa actin-bundling protein (p55) is a specific marker for identifying vascular dendritic cells // J Histochem Cytochem. -1999.-Vol. 47.-P. 1481-1486.

123. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. CD1 expression and the nature of CD1 expressing cells in human atherosclerotic plaques // Am J Pathol. 2000. -Vol. 156.-P. 1477-1478.

124. Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Inder SJ., Lord R.S.A., Tran D. Identification of HIV-1 in the aortic wall of AIDS patients // Atherosclerosis. 2000. - Vol. 152.-P. 529-530. 0 •

125. Bobryshev Y.V., Taksir T., Lord R.S.A., Freeman M.W. Evidence that dendritic cells infiltrate atherosclerotic lesions in apolipoprotein E-deflcient mice // Histol Histopathol. 2001. - Vol. 16. - P. 801-808.

126. Bobryshev Y.V. Dendritic cells in atherosclerosis // In: Dendritic cells: Biology and Clinical Applications / Eds. M.T. Lotze, A.W. Thomson / San-Diego: Acad. Press, 2001, P. 547-557.

127. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Expression of heat shock protein-70 by dendritic cells in the arterial intima and its potential significance in atherogenesis // J Vase Surg. 2002. - Vol. 35. - P. 368-375.

128. Bobryshev Y.V., Cao W., Phoon M.C., Tran D., Chow V.T.K., Lord R.S.A., Lu J. Detection of Chlamydia pneumoniae in dendritic cells in atherosclerotic lesions//Atherosclerosis. -2004.-Vol. 173.-P. 185-195.

129. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Identification of Natural Killer cells in human atherosclerotic plaque // Atherosclerosis. 2005. - Vol. 180. - P. 423-427.

130. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Co-accumulation of Dendritic Cells and Natural Killer T cells within rupture-prone regions in human atherosclerotic plaques //. J Histochem Cytochem. 2005. - Vol. 53. - P. 781-785.

131. Bobryshev Y.V. Subset of cells immunopositive for neurokinin-1 receptor identified as arterial interstitial cells of Cajal in human large arteries // Cell Tissue Res. 2005. - Vol. 321. - P. 45-55.

132. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Tran D. Chlamydia pneumoniae in foci of 'early' calcification of the tunica media in arteriosclerotic arteries: An incidental presence? // Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2006. - Vol. 290. -P. H1510-H1519.

133. Bobryshev Y.V., Killingsworth M.C., Huynh T.G., Lord R.S.A., Grabs A.J., Valenzuela S.M. Are calcifying matrix vesicles in atherosclerotic lesions of cellular origin? // Basic Res CardioW. 2007. - Vol. 102. - P. 133-143.

134. Bobryshev Y.V., Killingsworth M.C., Tran D., Lord R.S.A. Amalgamation of Chlamydia pneumoniae inclusions with lipid droplets in foam cells in human atherosclerotic plaque // Virchows Arch. 2008. - Vol. 453. - P. 69-77.

135. Bobryshev Y.V., Killingsworth M.C., Lord R.S.A. Spatial distribution of osteoblast-specific transcription factor Cbfal and bone formation in atherosclerotic arteries // Cell Tissue Res. 2008. - Vol. 333. - P. 225-235.

136. Bobryshev Y.V., Killingsworth M.C., Lord R.S.A., Grabs A.J. Matrix vesicles in the fibrous cap of atherosclerotic plaque: Possible contribution to plaque rupture // J Cell Mol Med. 2008. - Vol. 12. - P. 2073-2082.

137. Bjorkerud S.U. Mechanisms of atherosclerosis // Pathobiol Annu. 1979. -Vol. 9.-P. 277-301.

138. Bocan T.M., Guyton J.R. Human aortic fibrolipid lesions. Progenitor lesions for fibrous plaques, exhibiting early formation of the cholesterol-rich core // Am J Pathol. -1985.-Vol. 120.-P. 193-206.

139. Bocan T.M., Schifani T.A., Guyton J.R. Ultrastructure of the human aortic fibrolipid lesion. Formation of the atherosclerotic lipid-rich core // Am J Pathol. 1986. - Vol. 123. - P. 413-424.

140. Bochaton-Piallat M.L., Gabbiani G. Modulation of smooth muscle cell proliferation and migration: role of smooth muscle cell heterogeneity // Handb Exp Pharmacol. -2005.-Vol. 170.-P. 645-663.

141. Bonello M.R., Bobryshev Y.V., Khachigian L.M. Peroxide-inducible Ets-1 mediates platelet-derived growth factor receptor-alpha gene transcription in vascular smooth muscle cells // Am J Pathol. 2005. - Vol. 167. - P. 11491159.

142. Bosco M.C., Puppo M., Blengio F., Fraone T., Cappello P., Giovarelli M., Varesio L. Monocytes and dendritic cells in a hypoxic environment: Spotlightson chemotaxis and migration // Immunobiology. 2008. - Vol. 213. - P. 733749.

143. Bouhlel M.A., Derudas B., Rigamonti E., Dievart R., Brozek J., Haulon S. PPARgamma activation primes human monocytes into alternative M2 macrophages with anti-inflammatory properties // Cell Metab. 2007. - Vol. 6. -P. 137-143.

144. Brevetti G., Schiano V., Chiariello M. Endothelial dysfunction: a key to the pathophysiology and natural history of peripheral arterial disease? // Atherosclerosis. 2008. - Vol. 197. - P. 1-11.

145. Brigl M., Brenner M.B. CD1: antigen presentation and T cell function // Annu Rev Immunol. 2004. - Vol. 22. - P. 817-890.

146. Burke A.P., Farb A., Malcom G.T., Liang Y.H., Smialek J., Virmani R. Coronary risk factors and plaque morphology in men with coronary disease who died suddenly // N Engl J Med. 1997. - Vol. 336. - P. 1276-1282.

147. Campbell G.R., Campbell J.H., Manderson J.A., Horrigan S., Rennick R.E. Arterial smooth muscle. A multifunctional mesenchymal cell // Arch Pathol Lab Med. 1988. - Vol. 112. - P. 977-986.

148. Campbell G.R., Campbell J.H. Smooth muscle phenotypic changes in arterial wall homeostasis: implications for the pathogenesis of atherosclerosis // Exp Mol Pathol. 1985. - Vol. 42. - P. 139-162.

149. Campbell L.A., Kuo C.C. Chlamydia pneumoniae an infectious risk factor for atherosclerosis? // Nat Rev Microbiol. - 2004. - Vol. 2. - P. 23-32.

150. Cao W., Bobryshev Y.V., Lord R.S., Oakley R.E., Lee S.H., Lu J. Dendritic cells in the arterial wall express Clq: potential significance in atherogenesis // Cardiovasc Res. 2003. - Vol. 60. - P. 175-186.

151. Carallo C., Irace C., Pujia A., De Franceschi M.S., Crescenzo A., Motti C., Cortese C., Mattioli P.L., Gnasso A. Evaluation of common carotid hemodynamic forces. Relations with wall thickening // Hypertension. 1999. -Vol. 34.-P. 217-221.

152. Carr S., Farb A., Pearce W.H., Virmani R., Yao J.S. Atherosclerotic plaque rupture in symptomatic carotid artery stenosis // J Vase Surg. 1996. - Vol. 23.-P. 755-765.

153. Castellano G., Woltman A.M., Schena F.P., Roos A., Daha M.R., van Kooten C. Dendritic cells and complement: at the cross road of innate and adaptive immunity // Mol Immunol. 2004. - Vol. 41. - P. 133-140.0

154. Chamley-Campbell J.H., Campbell G.R. What controls smooth muscle phenotype? // Atherosclerosis. 1981. - Vol. 40. - P. 347-357.

155. Cheng G.C., Loree H.M., Kamm R.D., Fishbein M.C., Lee R.T. Distribution of circumferential stress in ruptured and stable atherosclerotic lesions. A structural analysis with histopathological correlation // Circulation. 1993. -Vol. 87.-P. 1179-1187.

156. Cheng X., Yu X., Ding Y.J., Fu Q.Q., Xie J.J., Tang T.T., et al. The Thl7/Treg imbalance in patients with acute coronary syndrome // Clin Immunol. 2008. -Vol. 127.-P. 89-97.0

157. Choi J.H., Do Y., Cheong C., Koh H., Boscardin S.B., Oh Y.S., Bozzacco L., Trumpfheller C., Park C.G., Steinman R.M. Identification of antigen-presenting dendritic cells in mouse aorta and cardiac valves // J Exp Med. -2009. Vol. 206. - P. 497-505.

158. Clarke M., Bennett M. The emerging role of vascular smooth muscle cell apoptosis in atherosclerosis and plaque stability // Am J Nephrol. 2006. -Vol. 26.-P. 531-535.

159. Combadiere C., Potteaux S., Gao J.L., Esposito B., Casanova S., Lee E.J., et al. Decreased atherosclerotic lesion formation in CX3CRl/apolipoprotein E double knockout mice // Circulation. 2003. - Vol. 107. - P. 1009-1016.

160. Constantinides P. The morphological basis for altered endothelial permeability in artherosclerosis // Adv Exp Med Biol. 1997. - Vol. 82. - P. 969-974.

161. Constantinides P. The role of arterial wall injury in atherogenesis and arterial thrombogenesis // Zentralbl Allg Pathol. 1989. - Vol. 135. - P. 517-530.

162. Cornhill J.F., Roach M.R. Quantitative method for the evaluation of atherosclerotic lesions // Atherosclerosis. 1974. - Vol. 20. - P. 131-136.

163. Cornhill J.F., Roach M.R. A quantitative study of the localization of atherosclerotic lesions in the rabbit aorta // Atherosclerosis. 1976. - Vol. 23. -P. 489-501.

164. Cornhill J.F., Herderick E.E., Stary H.C. Topography of human aortic sudanophilic lesions //Monograph. Atherosclerosis. Karger. 1990. - Vol. 15. -P. 13-19.

165. Davies P.F. Vascular cell interactions with special reference to thepathogenesis of atherosclerosis // Lab Invest. 1986. - Vol. 55. - P. 5-24.

166. Davies P.F., Robotewskyj A., Griem M.L., Dull R.O., Polacek D.C. Hemodynamic forces and vascular cell communication in arteries // Arch Pathol Lab Med. 1992; 116: 1301-1306.-1992.-Vol. 116.-P. 1301-1306.

167. Doherty T.M., Fisher E.A., Arditi M. TLR signaling and trapped vascular dendritic cells in the development of atherosclerosis // Trends Immunol. -2006. Vol. 27. - P. 222-227.

168. Doran A.C., Meller N., McNamara C.A. Role of smooth muscle cells in the initiation and early progression of atherosclerosis // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2008. - Vol. 28. - P. 812-819.

169. Dubsky P., Ueno H., Piqueras B., Connolly J., Banchereau J., Palucka A.K. Human dendritic cell subsets for vaccination // J Clin Immunol. 2005. - Vol. 25.-P. 551-572.

170. Dworacka M., Winiarska H., Borowska M., Abramczyk M., Bobkiewicz-Kozlowska T., Dworacki G. Pro-atherogenic alterations in T-lymphocyte subpopulations related to acute hyperglycemia in type 2 diabetic patients // Circ J. 2007. - Vol. 71. - P. 962-967.

171. Erbel C., Sato K., Meyer F.B., Kopecky S.L., Frye R.L., Goronzy J.J., Weyand C.M. Functional profile of activated dendritic cells in unstable atherosclerotic, plaque // Basic Res Cardiol. 2007. - Vol. 102. - P. 123-132.

172. Faggiotto A., Ross R. Studies of hypercholesterolemia in the nonhuman primate. II. Fatty streak conversion to fibrous plaque // Arteriosclerosis. -1984.-Vol. 4.-P. 341-356.

173. Farrugia P.M., Lucariello R., Coppola J.T. Human immunodeficiency virus and atherosclerosis // Cardiol Rev. 2009. - Vol. 17. - P. 211-215.

174. Frantz S., Ertl G., Bauersachs J. Mechanisms of disease: Toll-like receptors in cardiovascular disease // Nat Clin Pract Cardiovasc Med. 2007. - Vol. 4. - P. 444-454.

175. Fuster V., Moreno P.R., Fayad Z.A., Corti R., Badimon J,J. Atherothrombosis and high-risk plaque: part I: evolving concepts // J Am Coll Cardiol. 2005. -Vol. 46.-P. 937-954.

176. Galkina E., Ley K. Immune and inflammatory mechanisms of atherosclerosis // Annu Rev Immunol. 2009. - Vol. 27. - P. 165-197.

177. Galkina E., Ley K. Leukocyte influx in atherosclerosis // Curr Drug Targets. -2007. Vol. 8. - P. 1239-1248.

178. Geer J.C., Catsulis C., McGill H.C Jr., Stron J.P. Fine structure of the baboon aortic fatty streak // Am J Pathol. 1968. - Vol. 52. - P. 265-286.

179. Gelin C-, Sloma I., Charron D., Mooney N. Regulation of MHC II and CD1 antigen presentation: from ubiquity to security // J Leukoc Biol. 2009. - Vol. 85.-P. 215-224.

180. George J. Mechanisms of disease: The evolving role of regulatory T cells in atherosclerosis // Nat Clin Pract Cardiovasc Med. 2008. - Vol. 5. - P. 531540.

181. Gerrity R.G. The role of the monocyte in atherogenesis: I. Transition of blood-borne monocytes into foam cells in fatty lesions // Am J Pathol. 1981. - Vol. 103.-P. 181-190. ' •

182. Gerrity R.G. The role of the monocyte in atherogenesis: II. Migration of foam cells from atherosclerotic lesions // Am J Pathol. 1981. - Vol. 103. - P. 191200.

183. Getz G.S. Overview of murine atherosclerosis series // Curr Drug Targets. -2007.-Vol. 8.-P. 1144-1149.

184. Glass C.K., Witztum J.L Atherosclerosis. The road ahead // Cell. 2001. -Vol. 104.-P. 503-516.

185. Goldstein J.L., Brown M.S. The low-density lipoprotein pathway and its relation to atherosclerosis // Annu Rev Biochem. 1997. - Vol. 46. - P. 897930.

186. Goldstein J.L., Brown M.S. Atherosclerosis: the low-density lipoprotein receptor hypothesis // Metabolism. 1977. - Vol. 26. - P. 1257-1275.

187. Gordon S., Taylor P.R. Monocyte and macrophage heterogeneity // Nat Rev Immunol. 2005. - Vol. 5. - P. 953-964.

188. Gordon S. Macrophage heterogeneity and tissue lipids // J Clin Invest. 2007. -Vol. 117.-P. 89-93.

189. Gotsman I., Gupta R., Lichtman A.H. The influence of the regulatory T9lymphocytes on atherosclerosis // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2007. -Vol. 27.-P. 2493-2495.

190. Gotsman I., Sharpe A.H., Lichtman A.H. T-cell costimulation and coinhibition in atherosclerosis 11 Circ Res. 2008. - Vol. 103. - P. 1220-1231.

191. Gown A.M., Tsukada T., Ross R. Human atherosclerosis. II. Immunocytochemical analysis of the cellular composition of human atherosclerotic lesions // Am J Pathol. 1986. - Vol. 125. - P. 191-207.

192. Grant K., Jerome W.G. Laser capture microdissection as an aid to ultrastructural analysis // Microsc Microanal. 2002. - Vol. 8. - P. 170-175.

193. Granucci F., Zanoni I., Ricciardi-Castagnoli P. Central role of dendritic cells in the regulation and deregulation of immune responses // Cell Mol Life Sci. -2008.-Vol. 65.-P. 1683-1697.

194. Guzman M.A., McMahan C.A., McGill H.C Jr., Strong J.P., Tejada C., Restrepo C., Eggen D.A., Robertson W.B., Solberg L.A. Selected methodologic aspects of the International Atherosclerosis Project // Lab Invests 1968. - Vol. 18. - P. 479-497.

195. Halayko A.J., Solway J. Molecular mechanisms of phenotypic plasticity in smooth muscle cells // J Appl Physiol. 2001. - Vol. 90. - P. 358-368.

196. Halvorsen B., Otterdal K., Dahl T.B., Skjelland M., Gullestad L., 0ie E, Aukrust P. Atherosclerotic plaque stability what determines the fate of a plaque? // Prog Cardiovasc Dis. - 2008. - Vol. 51. - P. 183-194.e

197. Han J.W., Shimada K., Ma-Krupa W., Johnson T.L., Nerem R.M., Goronzy J.J., et al. Vessel wall-embedded dendritic cells induce T-cell autoreactivity and initiate vascular inflammation // Circ Res. 2008. - Vol. 102. - P. 546553.

198. Hansson G.K., Jonasson L., Lojsthed B., Stemme S., Kocher O., Gabbiani G. Localization of T lymphocytes and macrophages in fibrous and complicated human atherosclerotic plaques // Atherosclerosis. 1998. - Vol. 72. - P. 135141.

199. Hansson G K., Holm J., Jonasson J. Detection of activated T lymphocytes in the Human Atherosclerotic Plaque // Amer J Pathol. 1989. - Vol. 135. - P. 169-175.

200. Hansson G K., Libby P., Schonbeck U., Yan Z.Q. Innate and adaptive immunity in the pathogenesis of atherosclerosis // Circ. Res. 2002. - Vol. 91. -P. 281-291.

201. Hansson G.K. Inflammation, atherosclerosis, and coronary artery disease // N Engl J Med. -2005.-Vol. 352.-P. 1685-1695.

202. Hansson G.K., Libby P. The immune response in atherosclerosis: A double-edged sword // Nat Rev Immunol. 2006. - Vol. 6. - P. 508-519.

203. Hansson G.K., Nilsson J. Vaccination against atherosclerosis? Induction of atheroprotective immunity // Semin Immunopathol. 2009. - Vol. 31. - P. 95101.0

204. Hansson G.K. Atherosclerosis-an immune disease: The Anitschkov Lecture 2007 // Atherosclerosis. 2009. - Vol. 202. - P. 2-10.

205. Hao H., Gabbiani G., Bochaton-Piallat M.L. Arterial smooth muscle cell heterogeneity: implications for atherosclerosis and restenosis development // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2003. - Vol. 23. - P. 1510-1520.

206. Heeneman S., Lutgens E., Schapira K.B., Daemen M.J., Biessen E.A. Control of atherosclerotic plaque vulnerability: insights from transgenic mice // Front Biosci. -2008.-Vol. 13.-P. 6289-6313.

207. Hennerici M.G. The unstable plaque // Cerebrovasc Dis. 2004. - Vol. 17., Suppl.3. - P. 40-42.

208. Hilt D.C., Kligman D. The S-100 protein family: a biochemical and functional overview // In: C.W. Heizmann, Editor, Novel calcium-binding proteins: fundamentals and clinical implications. Springer-Verlag, New York. 1991, pp. 65-103.

209. Hinz B., Phan S.H., Thannickal V.J., Galli A., Bochaton-Piallat M.L., Gabbiani G. The myofibroblast: one function, multiple origins // Am J Pathol. 2007. -Vol. 170.-P. 1807-1816.

210. Hoefsmit E.C., Duijvestijn A.M., Kamperdijk E.W. Relation between Langerhans cells, veiled cells, and interdigitating cells // Immunobiology. -1982.-Vol. 161.-P. 255-265.

211. Hoff H.F., Heideman C.L., Gotto A.M Jr., Gaubatz J.W. Apolipoprotein B retention in the grossly normal and atherosclerotic human aorta // Circ Res. -1997.-Vol. 41.-P. 684-690.

212. Hoff H.F., Heideman C.L., Gaubatz J.W., Scott D.W., Titus J.L., Gotto A.M Jrv Correlation of apolipoprotein B retention with the structure of atherosclerotic plaques from human aortas // Lab Invest. 1987. - Vol. 38. - P. 560-567.

213. Iyemere V.P., Proudfoot D., Weissberg P.L., Shanahan C.M. Vascular smooth muscle cell phenotypic plasticity and the regulation of vascular calcification // J Intern Med. 2006. - Vol. 260. - P. 192-210.

214. Jonasson L., Holm J., Hansson G.K. Smooth muscle cells express la antigens during arterial response to injury // Lab Invest. 1988. - Vol. 58. - P. 310-315.

215. Jonasson L., Holm J., Scalli O., Bondjers G., Hanson G.K. Regional accumulations of T cells, macrophages and smooth muscle cells in the human atherosclerotic plaque // Atherosclerosis. 1986. - Vol. 6. - P. 131-138.

216. Jonasson L., Holm J., Claesson-Welsh L.M.H.C. antigen expression in the atherosclerotic plaque: Smooth muscle cells express HLA- DR, HLA-DQ, and the invariant gamma chain // Clin Exp Immunol. 1986. - Vol. 64. - P. 261268.

217. Jongstra-Bilen J., Haidari M., Zhu S.N., Chen M., Guha D., Cybulsky M.I. Low-grade chronic inflammation in regions of the normal mouse arterial intima predisposed to atherosclerosis // J Exp Med. 2006. - Vol. 203. - P. 20732083.

218. Kamperdijk E.W.A , P. Nieuwenhuis and E.C.M. Hoefsmit, Editors, Dendritic cells in fundamental and clinical immunology// Advances in Experimental Medicine and Biology vol. 329, Plenum Press, New York. 1993.

219. Karaflou M., Lambrinoudaki I., Christodoulakos G. Apoptosis in atherosclerosis: a mini-review // Mini Rev Med Chem. 2008. - Vol. 8. - P. 912-918.e

220. Kashihara M., Ueda M., Horiguchi Y., Furukawa F., Hanaoka M., Imamura S. A monoclonal antibody specifically reactive to human Langerhans cells // J Invest Dermatol. 1986. - Vol. 87. - P. 602-607.

221. Kawahara I., Kitagawa N., Tsutsumi K., Nagata I„ Hayashi T., Koji T. The expression of vascular dendritic cells in human atherosclerotic carotid plaques // Hum Pathol. 2007. - Vol. 38. - P. 1378-1385.

222. Keita M., Magy L., Richard L., Piaser M., Vallat J.M. LR white post-embedding colloidal gold method to immunostain MBP, P0, NF and SI00 inglutaraldehyde fixed peripheral nerve tissue // J Peripher Nerv Syst. 2002. -Vol. 7.-P. 128-133.

223. Kis Z., Pallinger E., Endresz V., Burian K., Jelinek I., Gonczol E., Valyi-Nagy I. The interactions between human dendritic cells and microbes; possible clinical applications of dendritic cells // Inflamm Res. 2004. - Vol. 53. - P. 413-423.

224. Kleemann R., Zadelaar S., Kooistra T. Cytokines and atherosclerosis: a comprehensive review of studies in mice // Cardiovasc Res. 2008. - Vol. 79.--P. 360-376.

225. Klimov A.N., Denisenko A.D., Popov A.V. Lipoprotein-antibody immune complexes. Their catabolism and role in foam cell formation // Atherosclerosis. 1985.-Vol. 58.-P. 1-5.

226. Klimov A.N., Nagornev V.A. Evolution of cholesterol concept of atherogenesis from Anitchkov to our days // Pediatr Pathol Mol Med. 2002. -Vol. 21.-P. 307-320.

227. Kobayashi M., Asano H., Fujita Y., Hoshino T. Development of ATPase-positive, immature Langerhans cells in the fetal mouse epidermis and their maturation during the early postnatal period // Cell Tissue Res. 1987. - Vol. 248.-P. 315-322.

228. Kocher O., Gabbiani G. Cytoskeletal features of normal and atheromatous human arterial smooth muscle cells // Human Pathol. 1986. - Vol. 17. - P. 875-880.

229. Kockx M.M., De Meyer G.R., Muhring J., Jacob W., Bult H., Herman A.G. Apoptosis and related proteins in different stages of human atherosclerotic plaques // Circulation. 1998. - Vol. 97. - P. 2307-2315.

230. Kofler S., Schlichting C., Jankl S., Nickel T., Weis M. Dual mode of HjVTG-CoA reductase inhibition on dendritic cell invasion // Atherosclerosis. 2008. -Vol. 197.-P. 105-110.

231. Kohl J. Self, non-self, and danger: a complementary view // Adv Exp Med Biol. 2006; 586: 71-94. 2006. - Vol. 586. - P. 71-94.

232. Kolodgie F.D., Burke A.P., Farb A., Gold H.K., Yuan J., Narula J., Finn A.V., Virmani R. The thin-cap fibroatheroma: a type of vulnerable plaque: the major precursor lesion to acute coronary syndromes // Curr Opin Cardiol. 2001. -Vol. 16.-P. 285-292.

233. Kovanen P.T. Mast cells and degradation of pericellular and extracellular matrices: potential contributions to erosion, rupture and intraplaque haemorrhage of atherosclerotic plaques // Biochem Soc Trans. 2007. - Vol. 35.,Pt.5. - P. 857-861.

234. Langhaas {Langhans}, Th. Beitrage zur normalen and pathologishe Anatomy der Arterien // Virchows Arch. 1886. - Vol. 36. - P. 187-226.

235. Lechmann M., Zinser E., Golka A., Steinkasserer A. Role of CD83 in the immunomodulation of dendritic cells //Int Arch Allergy Immunol. 2002. -Vol. 129.-P. 113-118.

236. Lee J., Zhuang Y., Wei X., Shang F., Wang J., Zhang Y., Liu X., Yang Y., Liu L., Zheng Q. Contributions of PD-1/PD-L1 pathway to interactions of myeloid DCs with T cells in atherosclerosis // J Mol Cell Cardiol. 2009. - Vol. 46. -P. 169-176.

237. Leinonen M., Saikku P. Evidence for infectious agents in cardiovascular disease and atherosclerosis // Lancet Infect Dis. 2002. - Vol. 2. - P. 11-17.

238. Leitinger N. The role of phospholipid oxidation products in inflammatory and autoimmune diseases: evidence from animal models and in humans // Subcell Biochem. 2008. - Vol. 49. - P. 325-350.

239. León B., Ardavín C. Monocyte-derived dendritic cells in innate and adaptive immunity// Immunol Cell Biol. 2008. - Vol. 86. - P. 320-324.

240. Ley K., Reutershan J. Leucocyte-endothelial interactions in health and disease // Handb Exp Pharmacol. 2006. - Vol. 176.,Pt.2. - P. 97-133.

241. Libby P. Inflammation in atherosclerosis // Nature. 2002. - Vol. 420. - P. 868-874.

242. Liu P., Yu Y.R., Spencer J.A., Johnson A.E., Vallanat C.T., Fong A.M. CX3CR1 deficiency impairs dendritic cell accumulation in arterial intima and reduces atherosclerotic burden // Arterioscler Thromb Vase. 2008. - Vol. 28. -P. 243-250.

243. Liuzzo G., Kopecky S.L., Frye R.L., O'Fallon W.M., Maseri A., Goronzy J.J. Perturbation of the T-cell repertoire in patients with unstable angina // Circulation. 1999.-Vol. 100.-P. 2135-2139.

244. Llodra J., Angelí V., Liu J., Trogan E., Fisher E.A., Randolph G.J. Emigration of monocyte-derived cells from atherosclerotic lesions characterizes regressive,but not progressive, plaques // Proc Natl Acad Sci USA. 2004. - Vol. 101. -P. 11779-11784.

245. Loppnow H., Werdan K., Buerke M. Vascular cells contribute to atherosclerosis by cytokine- and innate-immunity-related inflammatory mechanisms // Innate Immun. 2008. - Vol. 14. - P. 63-87.

246. Lord R.S., Bobryshev Y.V. Clustering of dendritic cells in athero-prone areas of the aorta // Atherosclerosis. 1999. - Vol. 146. - P. 197-198.

247. Lord R.S., Bobryshev Y.V. Hallmarks of atherosclerotic lesion development with special reference to immune inflammatory mechanisms // Cardiovasc Surg. -2002.-Vol 10.-P. 405-414.

248. Loree H.M., Kamm R.D., Stringfellow R.G., Lee R.T. Effects of fibrous cap thickness on peak circumferential stress in model atherosclerotic vessels // Circ Res. 1992. - Vol. 71. - P. 850-858.

249. Lotze M.T., Thomson A.W. Dendritic cells: Biology and Clinical Applications // 2nd edition, San Diego, Academic Press, CA, 2001.

250. Luo Y., Liang C., Xu C., Jia Q., Huang D., Chen L., Wang K., Wu Z., Ge J. Ciglitazone inhibits oxidized-low density lipoprotein induced immune maturation of dendritic cells // J Cardiovasc Pharmacol. 2004. - Vol. 44. - P. 381-385.

251. Lusis A. J. Atherosclerosis // Nature. 2000. - Vol. 407. - P. 233-241.

252. Mallat Z., Ait-Oufella H., Tedgui A. Regulatory T-cell immunity in atherosclerosis // Trends Cardiovasc Med. 2007. - Vol. 17. - P. 113-118.

253. Mallat Z., Taleb S., Ait-Oufella H., Tedgui A. The role of adaptive T cell immunity in atherosclerosis // J Lipid Res. 2009. - Vol. 50.,Suppl. - P. S364-S369.

254. Margariti A., Zeng L., Xu Q. Stem cells, vascular smooth muscle cells and atherosclerosis // Histol Histopathol. 2006. - Vol. 21. - P. 979-985.

255. Markiewicz M.A., Kast W.M. Progress in the development of immunotherapy of cancer using ex vivo-generated dendritic cells expressing multiple tumor antigen epitopes // Cancer Invest. 2004. - Vol. 22. - P. 417-434.

256. McCormick M.M., Rahimi F., Bobiyshev Y.V., Gaus K., Zreiqat H., Cai H., Lord R.S., Geczy C.L. S100A8 and S100A9 in human arterial wall. Implications for atherogenesis // J Biol Chem. 2005. - Vol. 280. - P. 4152141529.

257. McGill H.C Jr., Strong J.P. The geographic pathology of atherosclerosis //Ann NYAcadSci. 1968.-Vol. 149.-P. 923-927.

258. Mehta A.B., Shah S. Unstable or High Risk Plaque: How Do We Approach It? // MJAFI. 2006. - Vol. 62. - P. 2-7.

259. Meier P., Meier R., Blanc E. Influence of CD4+/CD25+ regulatory T cells on atherogenesis in patients with end-stage kidney disease // Expert Rev Cardiovasc Ther. 2008. - Vol. 6. - P. 987-997.

260. Melian A., Geng Y.J., Sukhova G.K., Libby P., Porcelli S.A. CD1 expression in human atherosclerosis. A potential mechanism for T cell activation by foam cells // Am J Pathol. 1999. - Vol. 15. - P. 775-786.

261. Mestas J., Hughes C.C. Of mice and not men: Differences between mouse and human immunology // J Immunol. 2004. - Vol. 172. - P. 2731-2738.

262. Mestas J., Ley K. Monocyte-endothelial cell interactions in the development of atherosclerosis // Trends Cardiovasc Med. 2008. - Vol. 18. - P. 228-232.

263. Methe H., Brunner S., Wiegand D., Nabauer M., Koglin J., Edelman ER.9

264. Enhanced T-helper-1 lymphocyte activation patterns in acute coronary syndromes // J Am Coll Cardiol. 2005. - Vol. 45. - P. 1939-1945.

265. Millonig G., Malcom G.T., Wick G. Early inflammatory-immunological lesions in juvenile atherosclerosis from the Pathobiological Determinants of Atherosclerosis in Youth (PDAY)-study // Atherosclerosis. 2002. - Vol. 160. P. 441-448.

266. Millonig G., Niederegger H., Rabl W., Hochleitner B.W., Hoefer D., Romani N., et al. Network of vascular-associated dendritic cells in intima of healthyyoung individuals // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2001. - Vol. 21. - P.0503.508.

267. Minick C.R., Stemerman M.B., Insull W Jr. Role of endothelium and hypercholesterolemia in intimal thickening and lipid accumulation // Am J Pathol. 1979; 95: 131-158.-1979.-Vol. 95.-P. 131-158.

268. Minick C.R. Endothelial cell abnormalities // Mt Sinai J Med. 1982. - Vol. 49.-P. 194-207.

269. Mitra A.K., Dhume A.S., Agrawal D.K. "Vulnerable plaques"-ticking of the time bomb // Can J Physiol Pharmacol. 2004. - Vol. 82. - P. 860-871.

270. Mor A., Luboshits G., Planer D., Keren G., George J. Altered status of CD4(+)CD25(+) regulatory T cells in patients with acute coronary syndromes // Eur Heart J. Vol. 27. - P. 2530-2537.

271. Mor A., Planer D., Luboshits G., Afek A., Metzger S., Chajek-Shaul T., et al. Role of naturally occurring CD4+ CD25+ regulatory T cells in experimental atherosclerosis // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2007. - Vol. 27. - P. 893900.

272. Mortellaro A., Conforti-Andreoni C., Fric J., Ricciardi-Castagnoli P. Dendritic cells as sensors of environmental perturbations // Microbes Infect. 2008. -Vol. 10.-P. 990-994.

273. Mosser D.M., Edwards J.P. Exploring the full spectrum of macrophage activation // Nat Rev Immunol. 2008. - Vol. 8. - P. 958-969.

274. Mussa F.F., Chai H., Wang X., Yao Q., Lumsden A.B., Chen C. Chlamydia pneumoniae and vascular disease: an update // J Vase Surg. 2006. - Vol. 43. -P. 1301-1307.

275. Nagornev V.A., Maltseva S.V. The phenotype of macrophages which are not transformed into foam cells in atherogenesis // Atherosclerosis. 1996. - Vol. 121.-P. 245-251.

276. Naik S.H., Metcalf D., van Nieuwenhuijze A., Wicks I., Wu L., O'Keeffe M., Shortman K: Intrasplenic steady-state dendritic cell precursors that are distinct from monocytes // Nat Immunol. 2006. - Vol. 7. - P. 663-671.

277. Newby A.C. Metalloproteinases and vulnerable atherosclerotic plaques // Trends Cardiovasc Med. 2007. - Vol. 17. - P. 253-258.

278. Niederhoffer N., Bobryshev Y.V., Lartaud-Idjouadiene I., Giummelly P., Atkinson J. Aortic calcification produced by vitamin D3 plus nicotine // J Vase Res. 1997 - Vol. 34. - P. 386-398.

279. Niessner A., Shin M.S., Pryshchep O., Goronzy J.J., Chaikof E.L., Weyand

280. C.M. Synergistic proinflammatory effects of the antiviral cytokine interferonealpha and Toll-like receptor 4 ligands in the atherosclerotic plaque // Circulation. 2007. - Vol. 116. - P. 2043-2052.

281. Nilsson J., Hansson G.K. Autoimmunity in atherosclerosis: a protective response losing control? // J Intern Med. 2008. - Vol. 263. - P. 464-478311. Nilsson J., Nordin Fredrikson G., Schiopu A., Shah P.K., Jansson B., Carlsson

282. R. Oxidized LDL antibodies in treatment and risk assessment of atherosclerosis and associated cardiovascular disease // Curr Pharm Des. 2007. - Vol. 13. -P. 1021-1030.

283. Orekhov A.N., Andreeva E.R., Krushinsky A.V., Novikov I.D., Tertov V.V.,0

284. Nestaiko G.V., Khashimov KhA., Repin V.S., Smirnov V.N. Intimal cells ancf atherosclerosis. Relationship between the number of intimal cells and major manifestations of atherosclerosis in the human aorta // Am J Pathol. 1986. -Vol. 125.-P. 402-415.

285. Orlandi A., Bochaton-Piallat M.L., Gabbiani G., Spagnoli L.G. Aging, smooth muscle cells and vascular pathobiology: implications for atherosclerosis // Atherosclerosis. -2006.-Vol. 188.-P. 221-230.

286. Osborn M., Caselitz J., Piischel K., Weber K. Intermediate filament expression in human vascular smooth muscle and in arteriosclerotic plaques // Virchows9

287. Arch A Pathol Anat Histopathol. 1987. - Vol. 411. - P. 449-458.

288. Owens G.K. Regulation of differentiation of vascular smooth muscle cells // Physiol Rev. 1995. - Vol. 75. - P. 487-517.

289. Ozmen J., Bobryshev Y.V., Lord R.S. CD40 co-stimulatory molecule expression by dendritic cells in primary atherosclerotic lesions in carotid arteries and in stenotic saphenous vein coronary artery grafts // Cardiovasc Surg. -2001.-Vol. 9.-P. 329-333.

290. Ozmen J., Bobryshev Y.V., Lord R.S., Ashwell K.W. Identification of dendritic cells in aortic atherosclerotic lesions in rats with diet-induced hypercholesterolaemia // Histol Histopathol. 2002. - Vol. 17. - P. 223-237.

291. Palucka A.K., Ueno H., Fay J.W., Banchereau J. Taming cancer by inducing immunity via dendritic cells // Immunol Rev. 2007. - Vol. 220. - P. 129150.

292. Perrin-Cocon L., Coutant F., Agaugue S., Deforges S., Andre P., Lotteau V. Oxidized low-density lipoprotein promotes mature dendritic cell transition from differentiating monocyte // J Immunol. 2001. - Vol. 167. - P. 37853791.

293. Pryshchep O., Ma-Krupa W., Younge B.R., Goronzy J.J., Weyand C.M. Vessel-specific Toll-like receptor profiles in human medium and large arteries // Circulation. 2008. - Vol. 118. - P. 1276-1284.

294. Raines E.W. The extracellular matrix can regulate vascular cell migration, proliferation, and survival: relationships to vascular disease // Int J Exp Pathol. -2000.-Vol. 81.-P. 173-182. • .

295. Rakesh K., Agrawal D.K. Cytokines and growth factors involved in apoptosis and proliferation of vascular smooth muscle cells // Int Immunopharmacol. -2005.-Vol. 5.-P. 1487-1506.J

296. Randolph G.J., Beaulieu S., Lebecque S., Steinman R.M., Muller W.A. Differentiation of monocytes into dendritic cells in a model of transendothelial trafficking 11 Science. 1998. - Vol. 282. - P. 480-483. . .

297. Randolph G.J., Ochando J., Partida-Sánchez S. Migration of dendritic cell subsets and their precursors // Annu Rev Immunol. 2008. - Vol. 26. - P. 293316.

298. Randolph G.J. Emigration of monocyte-derived cells to lymph nodes during resolution of inflammation and its failure in atherosclerosis // Curr Opin Lipidol. 2008. - Vol. 19. - P. 462-468.

299. Ranjit S., Dazhu L., Qiutang Z., Yibo F., Yushu L., Xiang W., Shen C.L., Yuan T. Differentiation of dendritic cells in monocyte cultures isolated from patients with unstable angina // Int J Cardiol 2004. - Vol. 97. - P. 551 -555. .

300. Rehli M. Of mice and men: Species variations of Toll-like receptor expression // Trends Immunol. 2002. - Vol. 23. - P. 375-378.

301. Rekhter M.D., Andreeva E.R., Mironov A.A., Orekhov A.N. Three-dimensional cytoarchitecture of normal and atherosclerotic intima of human aorta // Am J Pathol. 1991. - Vol. 138. - P. 569-580.

302. Rennick R E., Campbell J H., Campbell G.R. Vascular smooth muscle phenotype and growth behaviour can be influenced by macrophages in vitro // Atherosclerosis. 1988. - Vol. 71. - P. 35-43.

303. Robertson A.K., Hansson G.K. T cells in atherogenesis: for better of for worse? // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2006. - Vol. 26. - P. 2421-2432.

304. Rokitansky C von. A manual of pathological anatomy // Vol. 4, Sydenham, London, 1852.

305. Ross R., Glomset J.A. Atherosclerosis and the arterial smooth muscle cell: Proliferation of smooth muscle is a key event in the genesis of the lesions of atherosclerosis//Science. 1973.-Vol. 180.-P. 1332-1339.

306. Ross R., Glomset J.A. The pathogenesis of atherosclerosis // N Engl J Med. -1976. Vol. 295. - P. 369-377.

307. Ross R., Glomset J., Harker L. Response to injury and atherogenesis // Am J Pathol. 1997. - Vol. 86. - P. 675-684.

308. Ross R. Atherosclerosis: An inflammatory disease // N Engl J Med. 1999. -Vol. 340.-P. 115-126.

309. Ruco L.P., Uccini S., Baroni CD. The Langerhans' cells // Allergy. 1989. -Vol. 44.,Suppl.9. - P. 27-30.

310. Rzucidlo E.M., Martin K.A., Powell R.J. Regulation of vascular smooth muscle cell differentiation // J Vase Surg. 2007. - Vol. 45.,Suppl.A.'- P.-A25-A32.

311. Sakaguchi S., Yamaguchi T., Nomura T., Ono M. Regulatory T cells and immune tolerance // Cell. 2008. - Vol. 133. - P. 775-787.

312. Sakaguchi S., Sakaguchi N., Shimizu J. Immunologic tolerance maintained by CD25+CD4+ regulatory T cells: their common role in controlling autoimmunity, tumor immunity, and transplantation tolerance// Immunol Rev. -2001.-Vol. 182.-P. 18-32.

313. Santambrogio L., Sato A.K., Fischer F.R., Dorf M.E., Stern L.J. Abundant empty class II MHC molecules on the surface of immature dendritic cells // Proc Natl Acad Sei USA. -1999.-Vol. 96.-P. 15050-15055.

314. Schäfer A., Bauersachs J. Endothelial dysfunction, impaired endogenous platelet inhibition and platelet activation in diabetes and atherosclerosis // Curr Vase Pharmacol. 2008. - Vol. 6. - P. 52-60

315. Schwartz S.M., Galis Z.S., Rosenfeld M.E., Falk E. Plaque rupture in humans and mice // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2007. - Vol. 27. - P. 705-713.

316. Schwartz S.M., Campbell G.R., Campbell J.H. Replication of smooth muscle cells in vascular disease //Circ Res. 1986. - Vol. 58. - P. 427-444.

317. Schwartz S.M., Heimark R.L., Majesky M.W. Developmental mechanisms underlying pathology of arteries // Physiol Rev. 1990. - Vol. 70. - P. 11771209. . .

318. Shah P.K. Mechanisms of plaque vulnerability and rupture // J Am Coll Cardiol. 2003. - Vol. 41. - P. S15-S22.

319. Shaposhnik Z., Wang X., Weinstein M., Bennett B.J., Lusis A.J. Granulocyte macrophage colony-stimulating factor regulates dendritic cell content of atherosclerotic lesions // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2007. - Vol. 27. -P. 621-627.

320. Shi H., Ge J., Fang W., Yao K., Sun A., Huang R. Peripheral-blood dendritic cells in men with coronary heart disease // Am J Cardiol. 2007; 100: 593-597 -2007. Vol. 100. - P. 593-597. • .

321. Shibata N., Glass C.K. Regulation of macrophage function in inflammation and atherosclerosis // J Lipid Res. 2009. - Vol. 50., Suppl. - P. S277-S281.

322. Shimada K. Immune system and atherosclerotic disease. Heterogeneity of Leukocyte Subsets Participating in the Pathogenesis of Atherosclerosis // Circ J. -2009.-Vol. 73.-P. 994-1001.

323. Shortman K., Naik S.H. Steady-state and inflammatory dendritic-cell development // Nat Rev Immunol. 2007. - Vol. 7. - P. 19-30.

324. Sima A.V., Stancu C.S., Simionescu M. Vascular endothelium in atherosclerosis // Cell Tissue Res. 2009. - Vol. 335. - P. 191-203.

325. Smid J., Berger A., Braun-Dullaeus R., Gawaz M., Langer H.F. Impact of dendritic cells on vascular biology // Curr Hypertension Rev. 2009. - Vol. 5. -P. 49-53.

326. Sobue K., Hayashi K., Nishida W. Expressional regulation of smooth muscle cell-specific genes in association with phenotypic modulation // Mol Cell Biochem. 1999.-Vol. 190.-P. 105-118.

327. Soehnlein O., Weber C. Myeloid cells in atherosclerosis: initiators and decision shapers // Semin Immunopathol. 2009. - Vol. 31. - P. 35-47.

328. Soliman A., Kee P. Experimental models investigating the inflammatory basis of atherosclerosis // Curr Atheroscler Rep. 2008. - Vol. 10. - P. 260-271.

329. Steinman R.M., Banchereau J. Taking dendritic cells into medicine // Nature. -2007. Vol. 449. - P. 419-426.

330. Steinman R.M., Cohn Z.A. Identification of a novel cell type in peripheral lymphoid organs of mice. I. Morphology, quantification, tissue distribution // J Exp Med.-1973.-Vol. 137.-P. 1142-1162.

331. Steinman R.M. Dendritic cells: versatile controllers of the immune system // Nat Med. -2007.-Vol. 13.-P. 1155-1159.e

332. Steinman R.M. Dendritic cells in vivo: a key target for a new vaccine science // Immunity. -2008.-Vol. 29.-P. 319-324.

333. Stemerman M.B. Effects of moderate hypercholesterolemia on rabbit endothelium // Arteriosclerosis. 1981. - Vol. 1. - P. 25-32.

334. Stemme S., Rymo L., Hansson G.K. Polyclonal origin of T lymphocytes in human atherosclerotic plaques // Lab Invest. 1991. - Vol. 65. - P. 654-660.

335. Stemme S., Faber B., Holm J., Wiklund O., Witztum J.L., Hansson G.K. T lymphocytes from human atherosclerotic plaques recognize oxidized low density lipoprotein // Proc Natl Acad Sci USA. 1995. - Vol. 92. - P. 3.8933897.

336. Svendsen E., Eide T.J. Distribution of atherosclerosis in human descending thoracic aorta. A morphometric study // Acta Pathol Microbiol Scand A. -1980.-Vol. 88.- P. 97-101.

337. Timmerman J.M., Levy R. Dendritic cell vaccines for cancer immunotherapy // Annu Rev Med. 1999. - Vol. 50. - P. 507-529.

338. Tintut Y., Alfonso Z., Saini T., Radcliff K., Watson K., Bostrom K., Demer L.L. Multilineage potential of cells from the artery wall // Circulation. 2003. -Vol. 108.-P. 2505-2510.

339. Torsney E., Mandal K., Halliday A., Jahangiri M., Xu Q. Characterisation of progenitor cells in human atherosclerotic vessels // Atherosclerosis. 2007. -Vol. 191.-P. 259-264.

340. Ueno H., Klechevsky E., Morita R., Aspord C., Cao T., Matsui T., Di Pucchio T., Connolly J., Fay J.W., Pascual V., Palucka A.K., Banchereau J. Dendritic cell subsets in health and disease // Immunol Rev. 2007. - Vol. 219. - P. 118-142.

341. Valladeau J., Dezutter-Dambuyant C., Saeland S. Langerin/CD207 sheds light on formation of Birbeck granules and their possible function in Langerhans cells // Immunol Res. 2003. - Vol. 93. - P. 93-107.

342. Vanhoutte P.M. Endothelial dysfunction // Circ J. 2009. - Vol. 73. - P. '595-601.

343. Velican D., Velican C. Study of fibrous plaques occurring in the coronary arteries of children. // Atherosclerosis. 1979. - Vol. 33. - P. 201-205.

344. Velican C., Velican D. The precursors of coronary atherosclerotic plaques in subjects up to 40 years old // Atherosclerosis. 1980. - Vol. 37. - P. 33-46.

345. Velican C., Velican D. Progression of coronary atherosclerosis from adolescents to mature adults // Atherosclerosis. 1983. - Vol. 47. - P. 131144.

346. Virchow R. Die Cellularpathologie. // 4th ed., Hirschwald, Berlin, 1871. '

347. Virmani R., Burke A.P, Kolodgie F.D., Farb A. Pathology of the thin-cap fibroatheroma: a type of vulnerable plaque // J Interv Cardiol. 2003. - Vol. 16.-P. 267-272.

348. Virmani R., Burke A.P., Farb A., Kolodgie F.D. Pathology of the vulnerable plaque // J Am Coll Cardiol. 2006. - Vol. 47.,Suppl.8 - P. C13-C18.

349. Virmani R., Ladich E.R., Burke A.P., Kolodgie F.D. Histopathology of carotidatherosclerotic disease // Neurosurgery. 2006. - Vol. 59.,Suppl.3. - P. S219-S227.

350. Waltner-Romen M., Falkensammer G., Rabl W., Wick G. A previously unrecognized site of local accumulation of mononuclear cells. The vascular-associated lymphoid tissue // J Histochem Cytochem. 1998. - Vol. 46. - P. 1347-1350.

351. Wang L., Li D., Yang K., Hu Y., Zeng Q. Toll-like receptor-4 and mitogen-activated protein kinase signal system are involved in activation of dendriticcells in patients with acute coronary syndrome // Immunology. 2008. - Vol.125.-P. 122-130.

352. Weber C., Zernecke A., Libby P. The multifaceted contributions of leukocyte subsets to atherosclerosis: Lessons from mouse models // Nat Rev Immunol. -2008.-Vol. 8.-P. 802-815.e

353. Weis M„ Schlichting C.L., Engleman E.G., Cooke J.P. Endothelial determinants of dendritic cell adhesion and migration: new implications for vascular diseases // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2002. - Vol. 22. - P. 1817-1823.

354. Weyand C.M., Younge B.R., Goronzy J.J. T cells in arteritis and atherosclerosis // Curr Opin Lipidol. 2008. - Vol. 19. - P. 469-477.

355. Wick G., Knoflach M., Xu Q. Autoimmune and inflammatory mechanisms in atherosclerosis // Annu Rev Immunol. 2004. - Vol. 22. - P. 361-364.

356. Wick G., Romen M., Amberger A., Metzler B., Mayr M., Falkensammer G., Xu Q. Atherosclerosis, autoimmunity, and vascular-associated lymphoid tissue // FASEB J.-1207. -1997.-Vol. 11.-P. 1199-1207.

357. Yamashita H., Shimada K., Seki E., Mokuno H., Daida H. Concentrations of interleukins, interferon, and C-reactive protein in stable and unstable angina pectoris//Am J Cardiol.-2003.-Vol. 91.-P. 133-136.

358. Yamazaki S., Steinman R.M. Dendritic cells as controllers of antigen-specific Foxp3+ regulatory T cells // J Dermatol Sci. 2009. - Vol. 54. - P. 69-75.

359. Yan Z.Q., Hansson G.K. Innate immunity, macrophage activation, and atherosclerosis // Immunol Rev. 2007. - Vol. 219. - P. 187-203.

360. Yilmaz A., Weber J., Cicha I., Stumpf C., Klein M., Raithel D., Daniel W.G., Garlichs C.D. Decrease in circulating myeloid dendritic cell precursors in coronary artery disease // J Am Coll Cardiol. 2006. - Vol. 48. - P. 70-80.

361. Yilmaz A., Schaller T., Cicha I., Altendorf R., Stumpf C., Klinghammer L., et al. Predictive value of the decrease in circulating dendritic cell precursors in stable coronary arteiy disease // Clin Sci (Lond). 2009. - Vol. 116. - P. 353363.

362. Zand T., Underwood J.M., Nunnari J.J., Majno G., Joris I. Endothelium and "silver lines". An electron microscopic study // Virchows Arch A Pathol Anat Histol. 1982. - Vol. 395. - P. 133-144.

363. Zernecke A., Shagdarsuren E., Weber C. Chemokines in atherosclerosis: An update //Arterioscler Thromb Vase Biol. 2008 - Vol. 28. - P. 1897-1908.

364. Zhu W.G., Li S., Lin L.Q., Yan H., Fu T., Zhu J.H. Vascular oxidative stress0

365. Zitvogel L., Kroemer G. Introduction: the immune response against dying cells //Curr Opin Immunol. 2008. - Vol. 20. - P. 501-503.

366. Bobryshev Y.V. Dendritic cells and their role in atherogenesis // Lab Invest. -2010.-Vol. 90.-P. 970-984.

367. Van Vre E.A., Van Brussel I., Bosmans J.M., Vrints C.J., Bult H. Dendritic cells in human atherosclerosis: from circulation to atherosclerotic plaques // Mediators Inflamm. 2011: №941396.

368. Thorp E., Subramanian M., Tabas I. The role of macrophages and dendritic cells in the clearance of apoptotic cells in advanced atherosclerosis // Eur J Immunol. 2011. - Vol. 41. - P. 2515-2518.

369. Butcher M.J., Galkina E.V. Phenotypic and functional heterogeneity of macrophages and dendritic cell subsets in the healthy and atherosclerosis-prone aorta // Front Physiol. 2012. - Vol. 3. - P. 44. '

370. Koltsova E.K., Ley K. How dendritic cells shape atherosclerosis // Trends Immunol. 2011. - Vol. 32. - P. 540-547.1. ПОСЛЕСЛОВИЕ

371. В настоящем разделе работы автор использует возможность поблагодарить всех сотрудников и коллег, которые способствовали выполнению, осмыслению и написанию данной работы.

372. Автор признателен руководствам ФГБУ «НИИ экспериментальной медицины» СЗО РАМН и ФГБУ «НИИ общей патологии и патофизиологии» РАМН за поддержку в инициации и завершении написания работы.

373. СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ1. Публикации в журналах

374. Нагорнев В А., Журавлева Т.Б. Бобрышев Ю.В. Структурно-функциональная характеристика внутренней поверхности коронарных артерий сердца человека при атеросклерозе // Архив патологии. 1989. -Т.51. -№3. -С. 15-23.

375. Бобрышев Ю.В., Кузнецов A.C. Структурный анализ взаимодействия липопротеидов низкой плотности с клетками интимы артерий при атеросклерозе // Архив патологии. 1989. - Т. 51. - №9. - С. 20-26.

376. Бабаев В.Р., Бобрышев Ю.В., Стенина О.В., Тарарак Э.М, Фенотипические варианты гладкомышечных клеток в атероматозной бляшке аорты человека // Архив патологии. 1990. -Т.52. - №5. - С. 1621.

377. Babaev V.R., Bobryshev I.V., Stenina O.I., Tararak E.M., Gabbiani G. Heterogeneity of smooth muscle cells in atheromatous plaque of human aorta // American Journal of Pathology. 1990. - Vol. 136. - №5. - P. 1031-1042.

378. Бабаев B.P., Сухова Г.К., Бобрышев Ю.В., Сироткин В.Н.,Скорова Н.Е., Тарарак Э.М. Моноцитарно-макрофагальная инфильтрация в участках ранних атеросклеротических поражений аорты человека // Архив патологии. 1991. - Т. 53. - №10. - С. 48-53.

379. Бобрышев Ю.В., Сухова Г.К., Бабаев В.Р., Казанцева И.А. Межклеточные контакты в участках раннего атеросклеротического поражения аорты человека // Архив патологии. 1991. - Т.53. - № 11- С. 38-42.

380. Нагорнев В.А., Бобрышев Ю.В., Ивановский Ю.В., Богачев Ю.В. Роль моноцитов-макрофагов в атерогенезе // Архив патологии. 1991. -Т.53. -№6.-С. 23-29.

381. Babaev V.R., Bobryshev Y.V., Sukhova G.K., Kasantseva I.A. Monocyte-macrophage accumulation and smooth muscle cell phenotypes in early atherosclerotic lesions of human aorta // Atherosclerosis. 1993. -Vol. 100. -№2.-P. 237-248.

382. Bobryshev Y.V., Lord RSA. S-100 positive cells in human arterial intima and in atherosclerotic lesions // Cardiovascular Research. -1995. Vol. 29. - №5. -P. 689-696.

383. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A Ultrastructural recognition of cells with dendritic cells morphology in human aortic intima. Contacting interactions of Vascular Dendritic Cells in athero-resistant and athero-prone areas of the normal aorta I I9

384. Archives of Histology and Cytology. -1995. Vol. 58. - №3. - P. 307-322.

385. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Detection of vascular dendritic cells and extracellular calcium-binding protein S-100 in foci of calcification in human arteries // Acta Histochemica et Cytochemica. 1995. - Vol. 28. - №2. - 371380.

386. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Warren B.A. Calcified deposit formation in intimal thickenings of the human aorta // Atherosclerosis. Vol. 118. -№1. -P. 9-21.

387. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Structural heterogeneity and contacting0interactions of vascular dendritic cells in early atherosclerotic lesions of the human aorta // Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology. 1996. -Vol. 28. — №1. — P. 49 -60.

388. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Langhans cells of human arterial intima: uniform by stellate appearance but different by nature. // Tissue & Cell. 1996. - Vol. 28. -№2. - P. 177-194.

389. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Rainer S., Jamal O.S., Munro V.F. Vascular dendritic cells and atherosclerosis // Pathology, Research and Practice. 1996. - Vol. 192. - №5. p. 462-467.

390. Bobryshev Y.V., Crozier J.A., Lord R.S.A., Tran D., Jamal O.S., Parsson H.N., Scott K.F. Expression of secretory group II phospholipase A2 by CD la positive cells in human atherosclerotic plaques // Atherosclerosis. 1996. -Vol. 127. - №2. - P. 283-285.

391. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Rainer S., Munro V.F. VCAM-1 expression and network of VCAM-1 positive vascular dendritic cells in advanced atherosclerotic lesions of carotid arteries and aortas // Acta Histochemica. -1996. Vol. 98. - № 2. - P. 185-194.

392. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Gap junctional vesicles in intimal smooth muscle cells in human atherosclerotic arteries // Ultrastructural Pathology. 1997. -Vol. 21.-№1.-P. 93-94.

393. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Vascular dendritic cells express intercellular adhesion molecule-1 in atherosclerotic plaques // Biomedical Research-Tokyo. 1997.-Vol. 18. -№1. -P. 179-182.

394. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Watanabe T. Structural peculiarities of vascular dendritic cell tubulovesicular system in human atherosclerotic aorta // Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology. 1997. - Vol. 29. - №4. - P. 553561.

395. Bobryshev Y.V., Babaev V.R., Lord R.S.A., Watanabe T. Cell death in atheromatous plaque of the carotid artery occurs through necrosis rather through apoptosis // In Vivo. 1997. - Vol. 11.- №6. - P. 441-452.

396. Bobryshev Y.V., Watanabe T. Ultrastructural evidence for association of vascular dendritic cells with T-lymphocytes and with B-cells in human atherosclerosis // Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology. -1997. -Vol. 29. №2 - P. 209-221.

397. Bobryshev Y.V., Watanabe T. Subset of vascular dendritic cells transforminginto foam cells in human atherosclerotic lesions // Cardiovascular Pathology. -1997.-Vol. 6. — №1. — P. 321-331.

398. Niederhoffer N., Bobryshev Y.V., Lartaud-Idjouadiene I., Giummelly P. Involvement of S-100 protein and S-100(+) cells in aortic medial calcification. // FASEB Journal. 1997. - Vol. 11. - №11. - P. 895.0

399. Niederhoffer N., Bobryshev Y.V., Lartaud-Idjouadiene I., Giummelly P., Atkinson J. Aortic calcification produced by vitamin D3 plus nicotine // Journal of Vascular Research. 1997. - Vol. 34. - №5. - P. 386-398.

400. Bobryshev Y.V., Lord RSA. Detection of vascular dendritic cells accumulating calcified deposits in their cytoplasm // Tissue & Cell. -1998. -Vol. 30. JV23. — P. 383-388.

401. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Mapping of vascular dendritic cells in atherosclerotic arteries suggests their involvement in local immune-inflammatory reactions // Cardiovascular Research. 1998. - Vol. 37. - №3.e1. P. 799-810.

402. Ozmen J., Lord R.S.A., Bobryshev Y.V., Ashwell K.W.S., Munro V.F. SI00 protein is expressed in induced atherosclerotic lesions of hypercholesterolaemic rats // Biomedical Research. 1998. -Vol. 19. - №1. -P. 279-287.

403. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Watanabe T. Ikezawa T. The cell adhesion molecule E-cadherin is widely expressed in human atherosclerotic lesions // Cardiovascular Research. 1998. - Vol. 40. - №1. - P. 191-205.

404. Bobryshev Y.V., Lord RSA, Pärsson H.N. Immunophenotypic analysis of the aortic aneurysm wall suggests that vascular dendritic cells are involved inimmune responses // Cardiovascular Surgery. 1998. - Vol. 6. - №3. - P. 240349.

405. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Accumulation of co-localised unesterified cholesterol and neutral lipids within vacuolised elastin fibres in athero-prone areas of the human aorta // Atherosclerosis. 1999. - Vol. 142. - № 1. - P. 121-131.

406. Bobryshev Y.V., Babaev V.R., Iwasa S., Lord R.S.A., Watanabe T. Atherosclerotic lesions of apolipoprotein E deficient mice contain cells expressing S100 // Atherosclerosis. 1999. - V. 143. - №2. - P. 451-454.

407. Wang A.Y., Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Liang H., Inder S.J., Lord R.S.A.,e

408. Ashwell K.W.S., Farnsworth A.E. Structural features of cell death in atherosclerotic lesions affecting long term aortocoronary saphenous vein bypass grafts // Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology. 1999. -Vol. 31.-№3.-P. 423-432.

409. Cherian S.M., Bobryshev Y.V., Inder S.J., Lord R.S.A., Ashwell K.W.S. Dendritic cells in venous pathologies // Angiology. 1999. - Vol. 50. - №5. -P. 393-402.

410. Bobryshev Y.V., Konovalov H.V., Lord R.S.A. Ultrastructural recognition of dendritic cells in the intimal lesions of aortas of chickens with Marek's disease. Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology. 1999. - Vol. 31. -№2. -P. 179-185.

411. Linton M.F., Babaev V.R., Bobryshev Y.V., Oates J.A., Fazio S. Cyclooxygenase-2 expression in human and mouse atherosclerotic lesions. // Circulation 1999. - Vol. 100. -Suppl. 2146. - P. 408.

412. Lord R.S.A., Bobryshev Y.V. Clustering of dendritic cells in athero-prone0areas of the aorta // Atherosclerosis. 1999. - Vol. 146. - №1. - P. 197-199.

413. Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Inder S J., Lord R.S.A. Neovascular expression of VE-cadherin in human atherosclerotic arteries and its relation to intimai inflammation // Cardiovascular Research. 1999. - Vol. 43. - №4. - P. 10031017.

414. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. 55 kDa actin-bundling protein (p55) is a specific marker for identifying vascular dendritic cells // Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 1999.-Vol. 47. -№11. -P. 1481-1486.

415. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. Vascular-associated lymphoid tissue (VALT) involvement in aortic aneurysm // Atherosclerosis. 2000. - Vol. 154. - №1. -P. 15-21.

416. Cherian S.M., Bobryshev Y.V., Inder S.J.,Wang A.Y., Lord R.S.A., Farnsworth A.E. Dendritic cells in aortocoronary saphenous vein bypass grafts // Heart, Lung and Circulation. 2000. - Vol. 9. -№1. - P. 40-42.

417. Inder S.J., Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Lord R.S.A., Masuda K., Yutani C. Accumulation of lymphocytes, dendritic cells and granulocytes in the aorticwall affected by Takayasu's disease // Angiology. 2000. - Vol. 51.- №7. - P. 565-579.

418. Bobryshev Y.V., Lord R.S.A. CD1 expression and the nature of CD1 expressing cells in human atherosclerotic plaques // American Journal of Pathology. 2000. - Vol. 156. - №4. - P. 1477-1478.

419. Bobryshev Y.V. Dendritic cells and their involvement in atherosclerosis // Current Opinion in Lipidology. 2000. - V. 11., №5. - C. 511-517.

420. Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Inder S.J., Lord R.S.A., Tran D. Identification of HIV-1 in the aortic wall of AIDS patients // Atherosclerosis. 2000. - Vol. 152.-№2.-P. 529-530.

421. Inder S.J., Bobryshev Y.V., Cherian S.M., Lord R.S.A., Wang A.Y. Identification of dendritic cells in ePTFE grafts explanted from humans // Cardiovascular Surgeiy. 2001. - Vol. 8. - №4. - P. 265-273.

422. Bobryshev Y.V., Inder S.J., Cherian S.M., Lord R.S.A., Ao P.Y., Hawthorne W J., Fletcher J.P. Colonisation of prosthetic grafts by immunocompetent cells in a sheep model // Cardiovascular Surgery. 2001. - Vol. 9. - №2. - P. 93-99.

423. Bobryshev Y.V., Farnsworth A.E., Lord R.S.A. Expression of vascular endothelial growth factor in aortocoronary saphenous vein bypass grafts // Cardiovascular Surgery.- 2001. Vol. 9., №5. - P. 492-498.

424. Bobryshev YV, Taksir T, Lord RSA, Freeman MW. Evidence that dendritic cells infiltrate atherosclerotic lesions in apolipoprotein E-deficient mice // Histology and Histopathology. 2001. - Vol. 16. - №3. - P. 801-808.

425. Bobryshev Y.V. Can dendritic cells be exploited for therapeutic intervention in atherosclerosis? // Atherosclerosis. 2001. - Vol. 154. - №2. - P. 511-512.

426. Ozmen J, Bobryshev YV, Lord RSA, Ashwell KW. Identification of dendritic cells in aortic atherosclerotic lesions in rats with diet-induced hypercholesterolaemia // Histology and Histopathology. 2002. - Vol. 17. -№1. - P. 223-237.

427. Lord R.S.A., Bobryshev Y.V. Hallmarks of atherosclerotic lesion development with special reference to immune inflammatory mechanisms // Cardiovascular Surgery. 2002. - Vol. 10. - №4. - P. 405-414.

428. Bobryshev Y.V, Lord R.S.A. Expression of heat shock protein-70 by dendritic cells in the arterial intima and its potential significance in atherogenesis // Journal of Vascular Surgery. 2002. - V. 35. - № 2,- P. 368-375.

429. Journal of Cellular Biochemistry. 2003. - Vol. 89. - №4. - P. 808-23.

430. Cao W., Bobryshev Y.V., Lord R.S.A., Oakley R.M.E., Lee S.H., Lu J. Dendritic cells in the arterial wall express Clq: Potential significance in atherogenesis // Cardiovascular Research. 2003. - Vol. 60. -№1. - P. 175-86.

431. Bobryshev, Y.V., Cao W., Phoon M.C., Tran D., Chow V.T.K., Lord R. S.A., Lu J. Detection of Chlamydophilia pneumoniae in dendritic cells in atherosclerotic lesions // Atherosclerosis. 2004. - Vol. 173. - №2. - C. 185195.

432. Bobryshev Y.V. Transdifferentiation of smooth muscle cells into chondrocytes in atherosclerotic arteries in situ: Implications for diffuse intimal calcification // Journal of Pathology. 2005. - Vol. 205. - №5. - C. 641-650.

433. Bobryshev Y.V, Lord R.S.A. Identification of Natural Killer cells in human atherosclerotic plaque // Atherosclerosis. 2005. - Vol. 180. - № 2 - C. 423427.

434. Bobryshev Y.V, Lord R.S.A. Co-accumulation of Dendritic Cells and Natural Killer T cells within rupture-prone regions in human atherosclerotic plaques. Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 2005. - Vol. 53. - №6 - P. 781-785.

435. Bobryshev Y.V. Natural killer T cells in atherosclerosis // Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology. 2005. - Vol. 25. - № 5 - P. e40.

436. Yan W.X., Rahimi F., Bobryshev Y.V., Song C.J., Hsu K., Geczy C. Roles of S100A12 in atherosclerosis // Inflammation Research. 2005. - Vol. 54. -№3. - P. S205.

437. Bobryshev Y.V. Subset of cells immunopositive for neurokinin-1 receptor identified as arterial interstitial cells of Cajal in human large arteries // Cell and Tissue Research. 2005. - Vol. 321. -№1. - P. 45-55.

438. Bobryshev Y.V. Calcification of elastic fibers in human atherosclerotic plaque // Atherosclerosis. 2005. - Vol. 180., №2. - P. 293-303.

439. Bonello M.R., Bobryshev Y.V., Khachigian L.M. Peroxide-Inducible Ets-1 Mediates Platelet-Derived Growth Factor Receptor-{alpha} Gene Transcription in Vascular Smooth Muscle Cells // American Journal of Pathology.-2005.-Vol. 167.-№4.-P. 1149-1159.

440. Bobryshev Y.V. Dendritic cells in atherosclerosis: Current status of the9problem and clinical relevance // European Heart Journal. 2005. - Vol. 26. -№17.-P. 1700-1704.

441. McCormick M.M., Rahimi F., Bobryshev Y.V., Gaus K., Zreiqat H., Cai H., Lord R.S.A., Geczy C.L. S100A8 and S100A9 in human arterial wall: Implications for atherogenesis // Journal of Biological Chemistry. 2005. -Vol. 280. -№50.-P. 41521-41529.

442. Bobryshev Y.V. Monocyte recruitment and foam cell formation in atherosclerosis // Micron. 2006. - Vol. 37. - №3,- P. 208-222.

443. Bobryshev Y.V., Killingsworth M.C., Huynh T.G., Lord R.S., Grabs A.J., Valenzuela S.M. Are calcifying matrix vesicles in atherosclerotic lesions of cellular origin? // Basic Research in Cardiology. 2007. - Vol. 102. - №2. - P. 133-143.

444. Bobryshev Y.V., Killingsworth M.C., Tran D., Lord R. Amalgamation of Chlamydia pneumoniae inclusions with lipid droplets in foam cells in human atherosclerotic plaque // Virchows Archiv. 2008. - Vol. 453. -№1. - P. 6977.

445. Bobryshev Y.V., Killingsworth M.C., Lord R.S.A. Spatial distribution of osteoblast-specific transcription factor Cbfal and bone formation in atherosclerotic arteries // Cell and Tissue Research. 2008. - Vol. 333. - №2. -P. 225-235.

446. Bobryshev Y.V., Killingsworth M.C., Lord R.S.A., Grabs A.J. Matrix vesicles in the fibrous cap of atherosclerotic plaque: Possible contribution to plaque rupture // Journal of Cellular and Molecular Medicine. 2008. - Vol. 12. -№5B. - P. 2073-2082.

447. Бобрышев Ю.В., Лорд P.C.А., Нагорнев B.A. Дендритные клетки и их роль в атеросклерозе. // Медицинский Академический Журнал. 2009. -Т. 9.-С. 11-24. ' •

448. Cherian S., Bharati S, Bobryshev Y., Nayar S., Jagannath B. Association of Chlamydia pneumoniae within calcified coronary atherosclerosis // British Journal of Surgery. 2010. - Vol. 97. - Suppl. 4. - P. S20.

449. Bobryshev Y.V. Dendritic cells and their role in atherogenesis // Laboratory Investigation. 2010. - Vol. 90. - №7.- P. 970-984.

450. Orekhov A.N., Andreeva E.R., Andrianova I.V., Bobryshev Y.V. Peculiarities of cell composition and cell proliferation in different type atherosclerotic lesions in carotid and coronary arteries // Atherosclerosis. 2010. - Vol. 212. -№2.-P. 436-443. ' '

451. Bobryshev Y.V. Vitamin D3 suppresses immune reactions in atherosclerosis, affecting regulatory T cells and dendritic cell function // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2010. -Vol. 30. - №12. - P. 2317-2319.

452. Бобрышев Ю.В., Карагодин В.П., Ковалевская Ж.И., Мясоедова В.А., Шапырина Е.В., Салямов В.И., Каргополова Ю.М., Галактионова Д.Ю.,о

453. Мельниченко A.A., Орехов А.Н. Численность и клеточная пролиферация в интиме различных артерий человека // Цитология. 2011. - Т. 53. -№10.-С. 815-825.

454. Perrins C.J., Bobryshev Y.V. Current advances in understanding of immunopathology of atherosclerosis // Virchows Archiv. 2011. - Vol. 458. -№2.-P. 117-123.

455. Bobryshev YV, Orekhov AN, Killingsworth MC, Lu J. Decreased expression of Liver X Receptor-a in macrophages infected with Chlamydia pneumoniae in human atherosclerotic arteries in situ II Journal of Innate Immunity. -2011.91. Vol. 3.-№5. -P. 483-494.

456. Chistiakov D.A., Sobenin I.A., Bobryshev Y.V., Orekhov A.N. Mitochondrial dysfunction and mitochondrial DNA mutations in atheroscleroticcomplications in diabetes // World Journal of Cardiology. 2012. - Vol. 4. -№5.-P. 148-156.

457. Bobryshev Y.V. Dendritic cells in atherosclerosis. In: Dendritic cells: Biology and Clinical Applications / Eds. M.T. Lotze, A.W. Thomson / San-Diego: Acad. Press. 2001. - P. 547-557.1. Монография

458. Бобрышев Ю.В., Орехов A.H. Клеточные механизмы атеросклероза: Архитектоника атеросклеротических поражений и роль дендритных клеток. LAP LAMBERT Academic Publishing GmbH & Co. KG.: Saarbrücken, Germany, 2012. -С. 172.

459. Bobryshev Yuri Veniaminovich

460. Structural and functional peculiarities of arteries at immune inflammation inatherogenesis1. Abstract

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.03) на тему:Структурно-функциональные особенности стенки артерий в развитии иммунного воспаления в атерогенезе

Автореферат диссертации по медицине на тему Структурно-функциональные особенности стенки артерий в развитии иммунного воспаления в атерогенезе

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Бобрышев, Юрий Вениаминович, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "Структурно-функциональные особенности стенки артерий в развитии иммунного воспаления в атерогенезе"

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Бобрышев, Юрий Вениаминович

Похожие научные работы

Каталог диссертаций