Автореферат и диссертация по медицине (14.03.09) на тему:Иммунологический и цитокиновый статус в патогенетическом обосновании применения полисахаридов из бурых водорослей у пациентов облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей

На правах рукописи

Майстровский Кирилл Валерьевич

Иммунологический и цитокиновый статус в патогенетическом обосновании эффективности применения полисахаридов из бурых водорослей у пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей

14.03.09 - клиническая иммунология, аллергология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

17 АПР 2014

Владивосток - 2014

005547348

005547348

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении «Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Г.П.Сомова» Сибирского отделения Российской академии медицинских наук

Научный руководитель:

доктор медицинских наук Запорожец Татьяна Станиславовна Официальные оппоненты:

Авдеева Жанна Ильдаровна - доктор медицинских наук, профессор, главный эксперт Управления экспертизы качества аллергенов, цитокинов и других иммуномодуляторов Центра экспертизы контроля медицинских иммунобиологических препаратов ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздрава России, г. Москва. Силаев Андрей Анатольевич — кандидат медицинских наук, заведующий отделением анестезиологии, реанимации и интенсивной терапии Медицинского центра Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Дальневосточный федеральный университет»

Ведущая организация: Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт терапии и профилактической медицины" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук

Защита состоится » ^г-г-с^. с? г. в ^^ часов на заседании

диссертационного совета ДКМ208.007.02 при ГБОУ ВПО Тихоокеанский Государственный Медицинский Университет Министерства здравоохранения РФ: 690002, г. Владивосток, ГСП, проспект Острякова, 2 (главный корпус)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО Тихоокеанский государственный медицинский университет Министерства Здравоохранения Российской Федерации» по адресу: 690002, г. Владивосток, ГСП, проспект Острякова, 2 (корпус 3)

Автореферат разослан » ^г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, доцент

ета,

Скляр Л.Ф.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность работы: Сердечно- сосудистые заболевания, вызванные развитием атеросклероза, являются главной причиной смертности в экономически развитых странах и России. Облитерирующий атеросклероз сосудов нижних конечностей (ОАСНК) - один из вариантов атеросклероза, при котором поражаются преимущественно крупные артерии. По данным эпидемиологических исследований число больных с ОАСНК в общей популяции составляет 2-3% населения в целом, распространённость заболевания у пациентов старше 50 лет - более 20%. При этом в действительности ОАСНК страдают гораздо большей число людей: субклинические (асимптомные) формы встречаются в 3-4 раза чаще, чем клинические проявления (перемежающаяся хромота) (Fowkes F. et al., 1996; Meijer W.T. et al., 1998). К 2015 году прогнозируется увеличение смертности от атеросклероза еще на 10% (Душкин М.И., 2006).

В настоящее время общепризнанно, что ведущим механизмом формирования атеросклеротического поражения сосудов является хроническое иммунное воспаление, на разных стадиях которого происходит активация клеток иммунной системы (Нагорнев В.А. с соавт., 2000; Binder С. et al., 2002; Hansson G. et al., 2006). Локальное воспаление протекает непосредственно в артериях и определяет динамику процессов, происходящих в атеросклеротической бляшке, прежде всего ее стабильность и возможность разрушения. Системное воспаление, проявляющееся накоплением в крови хемокинов и цитокинов, растворимых форм их рецепторов, молекул адгезии, активацией клеточных элементов, в отличие от локального, более демонстративно и доступно для исследования в условиях клиники. Доказана, в частности, сопряженность манифестации клинических симптомов атеросклеротической болезни и содержания активированных Т-лимфоцитов, растворимых молекул адгезии и проатерогенных цитокинов при ишемической болезни сердца, инфаркте миокарда, стабильной и нестабильной стенокардии (J.Parissis et al., 2002; Е. Zourdidakis et al., 2004). В то же время проявления системного воспаления, отражающие участие иммунной системы в патогенезе ОАСНК, изучены недостаточно, а данные о взаимосвязи количественного и функционального состояния циркулирующих Т-лимфоцитов и проатерогенных медиаторов воспаления - цитокинов, хемоадгезивных молекул, молекул адгезии, с тяжестью основного и сопутствующих заболеваний при ОАСНК немногочисленны и противоречивы. Проблематичной остается и оценка степени выраженности воспалительной реакции при этом заболевании, несмотря на обилие работ,

посвященных использованию маркеров воспаления в качестве прогностических критериев при атеросклерозе.

В настоящее время основным методом лечения больных хроническими облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей является консервативная терапия. Доказана важность амбулаторного этапа, уточнена стратегия консервативной терапии, в частности, необходимость ее непрерывности для всех больных ОАСНК, независимо от стадии артериальной недостаточности [Бырихин Н.И., 2002; Кошкин, В. М., 2005). Ссовременный тактический подход к лечению больных с ОАСНК должен обеспечивать рациональное сочетание комплекса методов направленных, в числе прочего, на коррекцию липидного и углеводного обмена, тромбоцитарного гемостаза и иммунных нарушений (Кошкин, В. М., 2005; Баркаган, 3. С., 2003). Однако на практике у большинства пациентов с ОАСНК за рамками терапии остается терапия, направленная на подавление активации Т-лимфоцитов, гиперпродукции цитокинов и свободных радикалов. Реализация этих направлений становится возможной при использовании фармакологических средств, обладающих

многокомпонентным действием. Среди природных соединений несомненный интерес представляют гликаны морского происхождения, в частности полисахариды из морских бурых водорослей, обладающие противовоспалительными, антикоагулянтными, антитромботическими, иммуномодулирующими, антиадгезивными, антидислипидемическими, антиоксидантными свойствами (Pomin Н., 2014; Hart, G. et al.2010; Cumashi A. et al., 2007; Janet, H„ 2011; 2007; Хотимченко М.Ю., 2011).

Настоящая работа посвящена исследованию возможности коррекции дисфункции иммунной и цитокиновой системы, эндотелия, липидного обмена и гемостаза у пациентов с ОАСНК при включении в комплекс терапевтических мероприятий полисахаридов из бурых водорослей, а также перспективности использования метода оценки хронического системного воспаления с помощью интегральных показателей для регистрации наличия и характера системной воспалительной реакции у пациентов с ОАСНК..

Цель исследования: на основании комплексной оценки иммунного статуса, цитокинового профиля и элементов гомеостаза пациентов с ОАСНК установить патогенетическую эффективность применения полисахаридов из бурых водорослей для оптимизации базисной терапии.

Задачи исследования: 1. Исследовать состояние врожденного и адаптивного иммунитета у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей в зависимости от степени тяжести заболевания.

2. Изучить особенности функционирования системы цитокинов у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей в зависимости от степени тяжести заболевания. Оценить перспективность использования плазменных уровней цитокинов для характеристики хронического системного воспаления у пациентов с ОАСНК, определения эффективности проводимой терапии и прогнозирования возможных осложнений.

3. Изучить состояние системы гемостаза, липидного обмена и адгезивной функции эндотелия у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей в зависимости от степени тяжести заболевания.

4. Изучить влияние полисахаридов из бурых водорослей на состояние иммунной и цитокиновой системы, липидного обмена, гемостаза и адгезивной функции эндотелия у пациентов с ОАСНК

Научная новизна: установлены особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с ОАСНК II и III стадий ишемии по Фонтейну-Покровскому, выражающиеся в изменении функциональной активности нейтрофилов (усиление продукции АФК, снижение фагоцитарной активности и функционального резерва), активации гуморальных и клеточных факторов адаптивного иммунитета, усиливающихся по мере прогрессирования заболевания. Установлено, что состояние цитокиновой системы у пациентов с ОАСНК II и III стадий ишемии по Фонтену-Покровскому характеризуется дисбалансом сывороточных цитокинов с поляризацией иммунного ответа по ТЫ-типу (повышением уровня проатерогенных интерлейкинов (1Р^), снижением уровня противовоспалительных цитокинов (1Ь-10 и 1Ь-4), выраженным увеличением хематтрактанта 1Ь-8. Увеличение концентрации растворимых молекул адгезии в сыворотке крови (зУСАМ-1, з1САМ-1, БЕ-Бексйп, зР-5с1ес1лп) отражает активацию адгезивной функции эндотелия у пациентов с ОАСНК. Количественные параметры, характеризующие соотношение субпопуляций лимфоцитов, уровень проатерогенных цитокинов, выраженность активационных процессов Т-системы и эндотелия, нарушения системы гемостаза зависят от степени тяжести основного и сопутствующих заболеваний, и усиливаются по мере прогрессирования заболевания.

Доказана иммуно-патогенетическая эффективность применения полисахаридов из бурых водорослей, применяемых в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК: снижение экспрессии активационных антигенов на лимфоцитах, нормализация уровня 1§0, сдерживание продукции проатерогенных цитокинов, модуляция окислительно-восстановительного потенциала и функционально-метаболических резервов нейтрофилов, нормализация распределения холестерина между фракциями липопротеидов, снижение гиперкогуляционного потенциала крови.

Практическая значимость: Обоснована целесообразность применения полисахаридов из бурых водорослей для коррекции иммунной дисфункции, нормализации свободнорадикальных процессов и липидного обмена, снижения гиперкогуляционного потенциала крови у пациентов с ОАСНК. Разработана и внедрена в практическое здравоохранение Приморского края (ГБУЗ Краевая клиническая больница № 1 и ГБУЗ Городская клиническая больница № 2 (г. Владивосток) методика применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК, (методические рекомендации «Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК» (утверждены Департаментом здравоохранения администрации Приморского края). Определена возможность использования плазменных уровней цитокинов с помощью интегральных показателей для регистрации наличия и характера развития хронического системного воспаления у пациентов с ОАСНК, оценки риска развития осложнений и осуществления мониторинга проводимой терапии.

Апробация материалов работы: Результаты работы были представлены на научно - практических конференциях и симпозиумах международного, российского и регионального уровня: II Объединенном иммунологическом форуме (Санкт-Петербург, 2008); IV Всероссийской конфренции по клинической гемостазиологии и гемореапогии в сердечно-сосудистой хирургии с международным участием (Москва,2009), VIII Конференции иммунологов Урала (Сыктывкар, 2010); VII Дальневосточном региональном конгрессе с международным участием «Человек и лекарство» (Владивосток, 2010). Методика применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК апробирована и внедрена в практику в отделениях сердечно-сосудистой хирургии ГБУЗ Краевая клиническая больница № 1 и ГБУЗ Городская клиническая больница № 2 (г. Владивосток).

Публикации: Основные результаты диссертационной работы опубликованы в 10 печатных работах, в том числе — 5 статьей - в журналах, включенных в перечень рецензируемых научных журналов, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для публикации основных положений диссертации.

Объем и структура диссертационной работы: Диссертация изложена на 166 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзор литературы, описания материалов и методов исследования, 4 глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, указателя литературы, включающего 287 источников, из них 62 отечественных и 225 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 37 таблицами и 3 рисунками.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Состояние иммунной системы у пациентов ОАСНК характеризуется активацией провоспалительных механизмов иммунной системы и сопутствующей интенсификацией оксидативного стресса: высокой частотой обнаружения повышенных уровней сывороточного №N7 и 1Ь-8, фибриногена, маркеров активации адгезивной функции эндотелия (растворимые молекулы адгезии) и лейкоцитов (активационные антигены), усилением продукции АФК, отсутствием развития 1Ь-10-зависимых механизмов.

2. Количественные параметры, характеризующие соотношение субпопуляций лимфоцитов, уровень проатерогенных цитокинов, выраженность активационных процессов Т-системы и адгезивной функции эндотелия, нарушения системы гемостаза зависят от степени тяжести основного и сопутствующих заболеваний и усиливаются по мере прогрессирования заболевания.

3. Интегральные показатели системной воспалительной реакции -коэффициент реактивности и уровень реактивности, рассчитанные на основе сывороточного содержания пяти цитокинов (1Ь-6, 1Ь-8, 1Ь-10, ТОТа и №N7) являются более эффективными критериями оценки системной воспалительной реакции при сопоставлении с частными признаками и могут использоваться для регистрации наличия и характера системной воспалительной реакции, оценки риска осложнений и мониторинга терапии у пациентов с ОАСНК.

4. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК оказывает иммуномодулирующее действие на факторы врожденного и адаптивного иммунитета, нормализует распределение холестерина между фракциями липопротеидов и снижает гиперкогуляционный потенциал крови.

Личный вклад автора: Планирование исследований, анализ данных отечественной и зарубежной литературы по теме диссертации, сбор материала для исследований, участие в клиническом обследовании и исследовании иммунного статуса пациентов с ОАСНК, анализ историй болезни, статистическая обработка полученных результатов и их анализ, подготовка публикаций, написание диссертации выполнены лично автором.

СОДЕРЖАНИЕ, РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ РАБОТЫ

Клиническая часть работа выполнена на базе кафедры госпитальной хирургии ТГМУ в отделении сосудистой хирургии ГБУЗ Приморская Краевая больница №1 г. Владивостока (заведующий кафедрой д.м.н, профессор, главный сосудистый хирург Приморского края Раповка В.Г.). Иммунологические исследования выполнены в лаборатории иммунологии ФГБУ «НИИЭМ имени Г.П.Сомова» СО РАМН (заведующая лабораторией д.м.н. Кузнецова Т.А.).Все исследования проведены с разрешения Комитета по биомедицинской этике ФГБУ «НИИЭМ им. Г.П.Сомова» СО РАМН (протокол №5 от 05.12.2007 г.)

Контингент, материалы и методы: Обследовано 60 мужчин находившихся на стационарном лечении в отделении сосудистой хирургии ГБУЗ " Приморская краевая клиническая больница №1" г. Владивостока в период с 2008 по 2010 годы. Диагноз ОАСНК выставлялся на основании клинической картины заболевания в соответствии с классификацией Фонтейна-Покровского с учетом клинической картины, данных лабораторных исследований (клинический анализ крови, биохимический анализ крови, анализ свёртывающей и антисвёртывающей системы), а также результатов инструментальных методов (аускультация, термометрия, измерение лодыжечного-плечевого индекса, ультразвукового дуплексного исследования сосудов). Критерии включения: мужской пол; возраст от 40 до 65 лет, ОАСНК II-III стадии по Фонтейну-Покровскому. Критерии исключения: сахарный диабет, системное инфекционное заболевание, почечная или печёночная недостаточность, злокачественное новообразование любой локализации, сердечная недостаточность III-IV ст. по NYHA, включение в комплекс лечения пациентов иммуномодулирующих препаратов. Исследование было открытым контролируемым проспективным сравнительным рандомизированным. Распределение пациентов проводилось в два этапа: первоначальное разделение на группы по степени тяжести заболевания с последующей рандомизацией вручную с помощью метода «запечатанных конвертов». В результате были сформированы 4 группы пациентов (рис.1).

Рис.1. Дизайн исследования

По 15 пациентов с II и III стадией заболевания были объединены в контрольную (п=30) и опытную (п=30) группы. Пациенты контрольной группы получали только базисное лечение, включающее охранительный режим, лечебное питание, дезинтоксикационную терапию, антикоагулянты, антигипоксанты антиагреганты, ангиопротекторы, средства, улучшающие трофику тканей. Пациенты опытной группы в комплексе с базисной терапией получали «Фуколам»'по 1 капсуле, содержащей 100 мг фукоидана из Fucus evanescens и 400 мг солей альгиновых кислот из бурых водорослей, внутрь два раза в сутки в течение 28 дней. С целью сравнения исследуемых показателей использовали кровь 30 здоровых доноров. Исследования выполнялись дважды: до начала лечения и после его окончания.

Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью пакета программы «Statistica-7» и «Exel». Использовались следующие методы статистического анализа: проверка нормальности распределения количественных признаков при малом числе наблюдений с использованием W-критерия Шапиро-Уилка, основанная на регрессии порядковых статистик [28], проверка равенства генеральных дисперсий с помощью критерия Фишера. Для оценки значимости различий при нормальном распределении количественных признаков использовали t-критерий Стьюдента (для независимых выборок и для двух связанных между собой вариационных рядов), двусторонние доверительные интервалы; при ненормальном распределении количественных признаков использовали непараметрический критерий W- Вилкоксона (применяемого для сравнения выборок с попарно связанными вариантами) и непараметрический критерий Манна-Уитни (для сравнения двух попарно не связанных между собой вариационных рядов). Наличие связей между показателями определяли, используя коэффициент корреляции Пирсона и Спирмена (г). Выборочные параметры, приводимые далее в таблицах, имеют следующие обозначения: W - критерий Shapiro-Wilk, средняя арифметическая (М), медиана (Me), (LQ-UQ) -25-75 перцентили, стандартное отклонение (о), объем анализируемой подгруппы (п), (г) -коэффициент корреляции, р - достигнутый уровень значимости. Уровень доверительной вероятности был задан равным 95%, т.о. нулевые гипотезы отвергались в том случае, когда достигнутый уровень значимости Р используемого статистического критерия принимал значения менее 5%.

1 Свидетельство Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека о государственной регистрации (№77.99.23.3.У.739.1.06 от 30.01.06)

Таблица 1

Направления, методы и объем проведенных исследований

№ Направления исследования Методы исследования Объем исследо ваний

1 Комплексное клинико-инструментально-лабораторные исследования 1.Анкетирование пациентов 2.Комплексное клиническое обследование больных в динамике 3.Расширенный мониторинг клинико-лабораторных и инструментальных (лодыжечно-плечевой индекс, УЗИ, дуплексное сканирование сосудов) показателей 60 чел. 60 чел. 60 чел.

2 Исследование показателей иммунного статуса 1.Определение субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови методом проточной цитометрии (Qouzi A.A. et al., 2002) 2. Исследование основных классов иммуноглобулинов в сыворотке крови (IgG, IgM, IgA) методом радиальной иммунодиффузии (Manchini G. et al., 1964) 3.Исследование фагоцитарной активности нейтрофилов крови в латекс-тесте, НСТ-тесте (Лебедев К.А., 1990 150 проб 150 проб 300 проб

Исследование показателей цитокинового статуса Исследование концентрации цитокинов в сыворотке крови методом твердофазного иммуноферментного анализа с помощью диагностических наборов ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург) согласно прилагаемой инструкции 150 проб

5 Исследование уровня растворимых молекул адгезии Исследование концентрации sICAM-1, sVCAM-1, sP-selectin, sE-selectin (пг/мл) в сыворотке крови методом мультплексного анализа (Multiplex assay) с использованием проточной цитометрии и коммерческого набора «Human adhesion plex Kit» (Bender MedSystems, Австрия) в соответствии с прилагаемыми инструкциями. 150 проб

6 Исследование показателей липидного обмена Определение содержания общего холестерина (ОХС), триглицеридов (ТГ), липопротеидов низкой (ЛПНП), очень низкой (ЛПОНП) и высокой плотности (ЛПВП), коэффициента атерогенности на анализаторах с помощью набора реактивов фирмы «Витал Диагностике СПб» (Россия) в соответствии с прилагаемыми инструкциями. 150 проб

7 Исследование показателей системы гемостаза Определение показателей протромбинового индекса (ПТИ), тромбинового времени (ТВ), активированного парциального тромбопластинового времени (АПТВ), содержания фибриногена на анализаторе Amelung 4KS delta с помощью наборов Helena Biosciences Europe в соответствии с прилагаемыми инструкциями. 150 проб

8 Математическ ая обработка данных Методы описательной, параметрической и непараметрической статистики Shapiro-Wilk тест Стьюдента, Wilcoxon, MannWhitney, Pearson и Spearman критерии [31] с использованием программы «Statistica 7.0» Все показат ели

Результаты исследований.

Адаптивный иммунитет при ОАСНК. При комплексной оценке иммунного статуса пациентов с ОАСНК установлено, что до начала терапии в усредненной выборке (все пациенты) общее количество лейкоцитов, а также относительное содержание и абсолютное количество лимфоцитов периферической крови значимо превышало показатели в группе здоровых доноров. Показатели, характеризующие структуру основных субпопуляций лимфоцитов констатировали удовлетворительную функцию иммунной системы и находились в границах значений диапазона показателей у здоровых доноров, включающих по одному среднему квадратическому отклонению от среднего значения (М±1 а), а при ненормальном распределении - между 25-м и 75-м процентилями (Ме (25-75%) (рис.2).

90 КО 70 <50

I

Рис.2. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови здоровых доноров и пациентов с АОСНК (серые столбики - значения диапазона показателей основных субпопуляций лимфоцитов периферической крови у здоровых доноров (размах М±1а, при ненормальном распределении от 25 до 75 перцентиля, и М±2а, до при ненормальном распределении от 5 до 95 персентиля.)

Количественные параметры, характеризующие соотношение субпопуляций лимфоцитов, зависели от степени тяжести и усиливались по мере прогрессирования заболевания. У пациентов с заболеванием III стадии относительное содержание С03+С04+-Лимфоцитов (48,6±3,1%) и иммунорегуляторный индекс (ИРИ), характеризующий напряженность Т-клеточного иммунитета (2,4±0,5), а также относительное содержание клеток с цитотоксическим потенциалом - 1МК-клеток (15,9±4,1%), 1ЧКТ-клеток (7,50(3,00-12,00), превышали показатели у пациентов с II стадией (41,1±4,5% и 1,1±0,2, 12,0±5,4, 5,00(2,00-8,00) соответственно, р=0,000). У пациентов с ОАСНК были выявлены признаки хронической Т-клеточной активации, сопряженной с увеличением количества циркулирующих Т-лимфоцитов, экспрессирующих ранние и поздние активационные антигены - СЭ25, НЬА-ЭЯ, С095/Ра,ч. Выраженность активационных процессов циркулирующих активированных Т-лимфоцитов также зависела от степени тяжести заболевания (рис.3).

CD25+

Рис.3. Уровень экспрессии активационных маркеров ЛПК у здоровых доноров и пациентов с ОАСНК II и III стадий (в % по отношению к контролю, принятому за 100%).

CD3+HLA -DR

HLA-DR

CD+CD25

CD9S*-

........ здоровые доноры

---- ОАСНК II стадия

_ ОАСНК Шстадия

При этом у пациентов с ОАСНК как П,так и III стадиями (у последних при более высоком уровне активационных антигенов) процессы активации клеток доминировали над процессами естественной гибели, поддерживая воспаление: индексы соотношения CD25+/CD95+ (0,9±0,14 и 0,9±0,15), отражающие готовность лимфоцитов (вся популяция), а также Т-лимфоцитов CD3+CD25+/ CD3+CD95+ (1,0±0,12 и 1,2±0,10) к пролиферации-дифференцировке и апоптозу, превышали значения таковых у здоровых доноров (0,6±0,10 и 1,0±0,13 соответственно, ^><0,01)).

Врожденный иммунитет при ОАСНК. Исследование функциональной активности нейтрофилов крови пациентов с ОАСНК выявило признаки одновременной активации и истощения функций клеток, нарастающих по мере прогрессирования заболевания. Показатели активности спонтанного НСТ-теста (45,5±11,3), отражающего уровень продукции нейтрофилами супероксидного аниона in vivo, а также активность индуцированного НСТ-теста (64,8±8,8) повышались (контроль -15,3±4,5, р<0,01), функциональный резерв снижался (1,4±1,3, контроль - 2,2±2,0). Фагоцитарный показатель, а также способность нейтрофилов к поглощению также снижались. Эти изменения свидетельствуют о развивающейся недостаточности эффекторных функций нейтрофилов и связаны с истощением функциональных резервов клеток на фоне длительной активации.

Цитокиновый статусу пациентов с ОАСНК.

До начала терапии у пациентов с ОАСНК наблюдалось статистически значимое увеличение уровня проатерогенных цитокинов - IFNy, IL-6, выраженное увеличение концентрации IL-8. Содержание TNFa значимо не отличалось от такового у здоровых доноров. По мере прогрессирования заболевания от II к III стадии концентрация провоспалительных цитокинов в сыворотке крови увеличивалась (табл.2).

Таблица 2

Содержание цитокинов в периферической крови пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей II и III стадий

Показатель Подгруппа W1 M±a (Me) (LQ-UQj P

IFNy II 0,862 31,9(15,27; 36,00) 0,000

III 0,862 35,43(28,40; 41,00) 0,000

Здоровые 0,94 21,8±3,1

TNFä II 0,892 2,77(2,00;4,26) 0,860

III 0,842 2,91(2,00;4,93) 0,792

Здоровые 0,95 3,2±1,7

IL-4 II 0,882 3,72(2,7;4,56) 0,000

III 0,812 2,00(2,00;2,12) 0,000

Здоровые 0,92 4,2±0,8

IL-10 II 0,852 2,65 (0,21;2,87) 0,000

III 0,95 2,40 (1,13;2,93) 0,000

Здоровые 0,88 5,4±1,3

IL-8 II 0,882 36,85(14,00;45,86) 0,000

III 0,92 45,00(25,50;59,00) 0,000

Здоровые 0,96 12,0±2,2

IL-6 II 0,832 4,70 (3,87; 7,70) 0,039

III 0,92 7,24 (5,00; 9,07) 0,005

Здоровые 0,90 5,2±2,1

Примечание: - V/ - йЬар^о-У/Пк, - р<0,05 - уровень значимости, соответствующий данному критерию XV (при р<0,05 параметр имеет отклонение от нормального распределения); р-значимость различий показателей по сравнению с здоровыми донорами

При анализе пропорций оппозитных пулов провоспалительных и противовоспалительных цитокинов наиболее выраженные нарушения обнаружены в соотношении IFNy и IL-4, отражающем состояние баланса Thl/Th2- клеток и девиацию иммунного ответа в сторону Thl. Индекс IFNy/IL-4 во всей выборке (12,2±1,3) значимо отличался от такового у здоровых доноров (5,1±1,1), ¿>=0,000. У пациентов с заболеванием III стадии индекс IFNy/IL-4 (18,8±1,4) значительно превышал таковой у пациентов с II стадией (7,9±1,3) (р=0,000), свидетельствуя о нарастании активации Thl-иммунного ответа, способствующего прогрессированию воспаления в стенке сосуда. Аналогичная закономерность характеризовала соотношение IFNy и IL-10, превышающее таковое у здоровых доноров более, чем в 2 раза и увеличивающееся от II стадии к III стадии заболевания, демонстрируя угнетение синтеза противовоспалительного ТЬ2-цитокина - IL-10.

С целью изучения перспективности использования метода оценки ХрСВ у пациентов с ОАСНК с помощью интегральных показателей (Гусев Е.Ю. 2008), использовали плазменные уровни IL-6, IL-8, IL-10, TNFa и IFNy. Расчёт и анализ значений коэффициента реактивности (KP) (сумма трёх

наибольших индексов реактивности (ИР), соответствующих дозовым диапазонам цитокинов), классифицированного до определённого уровня реактивности (УР), показал, что для пациентов с ОАСНК II стадии характерно наличие первой стадии ХрСВ (компенсированной), при ОАСНК III стадии системное воспаление приобретает характер неустойчивой компенсации (2 стадия ХрСВ), а наличие сопутствующих заболеваний сердечно-сосудистой системы у части пациентов сопровождается развитием субкомпенсированных (3-я стадия) форм ХрСВ (табл.3). Корреляционный анализ, проведённый между маркёрами ХрСВ и интегральными коэффициентами реактивности выявил преимущество последних: степень корреляции между отдельными маркёрами была низкой (0,2-0,29) либо отсутствовала, в то время как коэффициент реактивности структурировал все параметры, увеличивая число связей высокой (0,6-0,7) степени корреляции.

Экспрессия молекул адгезии у пациентов с ОАСНК. Уровень растворимых форм молекул адгезии является чувствительным индикатором степени атеросклеротического повреждения артерий (Collins R. et. al., 2000; Luc G. et al., 2003). Нами установлено увеличение концентрации sVCAM-1, sICAM-1, sP-selectin, sE-selectin в сыворотке крови пациентов с по сравнению с показателями у здоровых доноров. Уровень sICAM-1 и sVCAM-1 нарастал от 327,3±96,1 нг/мл и 428,3±81,0 нг/мл у пациентов с II стадией ОАСНК до 385,4±70,2 нг/мл и 533,7±,7 нг/мл у пациентов с III стадией соответственно (р=0,000). Концентрация sP-селектина (284±121,7 нг/мл) и sE-селектина (59,5±9,7) у пациентов с III стадией ишемии была значимо выше, чем у пациентов с II стадией (216,3±111,0 нг/мл, />=0,027) и 52,3±14,0 (/>=0,025). Полученные данные, подтверждают связь этих маркеров с прогрессированием атеросклероза, отражая степень воспаления в стенке артерий.

Иммуно-патогенетическая эффективность применения полисахаридов бурой водоросли в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК Прием Фуколама пациентами с ОАСНК не оказывал влияние как на общее количество лейкоцитов периферической крови у пациентов (до начала 7,3±1,3 х109/л, после начала терапии 7,4±1,8 х109/л, (р=0,746), так и на показатели клеточного звена иммунитета (CD3+, CD4+" CD8+, CD3" CD16+CD56+, CD3+CD16+CD56+, CD19+), а также на соотношение субпопуляций С04+-лимфоцитов/С08+-лимфоцитов. Экспрессия CD25+ на всех лимфоцитах и на Т-лимфоцитах - снижалась, хотя и не достигала значений нормы, в то время как в контрольной группе пациентов показатель не изменялся (табл.4). Экспрессия антигенов главного комплекса гистосовместимости II класса (HLA-DR), играющих ключевую роль в антигенной стимуляции CD4 Т-клеток, на Т-лимфоцитах у пациентов контрольной группы увеличивалась, тогда как в опытной группе значимо не изменялась. Значения проапототического маркера CD95/Fas после окончания лечения в контрольной группе оставались повышенными по сравнению с

таковыми у здоровых лиц, тогда как у пациентов опытной группы снижались по отношению к показателям, зарегистрированным до начала лечения, но не достигали значений показателей в группе здоровых доноров (табл.4).

Таблица 4

Активационные маркеры ЛПК у здоровых доноров и пациентов с ОАСНК II и III стадий до и после терапии (на всех лимфоцитах и на Т-лимфоцитах)_

Показатели Контрольная группа Опытная группа Доноры М±а

ОАСНК III стадия М±а ОАСНК II стадия М±а ОАСНК III стадия М±о ОАСНК II стадия М±а

CD25+ % ДО лечения 21,0±5,2 13,4±1,4 24,1 ±2,2 12,4±3,3 10,6±2,4

после лечения 20,5±3,7 р=0,938 17,4±4,2 р=0,370 18,0±1,9 р=0,040 12,3±2,2 р=0,980

CD95+% до лечения 25,6±4,1 14,4±2,2 29,4±1,6 16,4±3,8 17,5±4,7

после лечения 23,6±6,5 р=0,786 14,2±2,8 р=0,969 25,4±1,9 р=0,048 15,4±3,3 Р=0,843

CD3+ D25+ % ДО лечения 18,0±2,2 11,4±1,9 18,2±3,3 10,6±1,1 6,9±1,9

после лечения 18,6±3,7 р=0,890 10,8±3,3 р=0,875 15,3±2,5 р=0,469 8,8±2,0 р=0,434

CD3+CD95+ % ДО лечения 15,0±5,2 10,9±2,6 15,7±2,8 11,8±1,9 6,7±1,4

после лечения 17,0±4,2 р=0,882 10,8±3,1 р=0,980 16,7±4,7 р=0,856 10,2±2,8 Р=0,638

Индекс соотношения CD3+CD25+/CD3+CD95+ в контрольной группе оставался повышенным, демонстрируя нарушение равновесия между процессами пролиферации и естественной гибели клеток. В опытной группе у пациентов с ОАСНК III стадии индекс соотношения CD3+CD25+/ CD3+CD95+ снижался с 1,2±0,11 до 0,9±0,08, свидетельствуя о восстановлении нарушенного равновесия между процессами пролиферации-дифференцировки и апоптозом (ростом и гибелью клеток). У пациентов с ОАСНК II стадии исходно менее выраженные процессы активации Т-клеток также снижались на фоне доминирования процессов апоптоза. Таким образом, включение в схему консервативной терапии полисахаридов бурых водорослей уменьшает экспрессию активационных процессов на клетках периферической крови, что является отражением процессов, способствующих подавлению активации Т-лимфоцитов и дифференциации Т—хелперов 1-типа, приводящих, в конечном итоге, к снижению воспалительного ответа.

В группе пациентов, получавших полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисным лечением, отмечено более выраженное снижение концентрации IgG в сыворотке крови до уровня средне-нормальных значений

с 14,7±2,1 г/л до 12,8±2,1 г/л (р=0,008) (в контрольной группе -с 14,6±1,4 г/л до 13,5±1,2г/л (р=0,002).

У пациентов контрольной группы на фоне лечения сохранялся высокий уровень продукции АФК, тогда как включение полисахаридов из бурых водорослей в комплекс с базисной терапией приводило к модуляции окислительно-восстановительного потенциала и функционально-метаболических резервов нейтрофилов - снижению показателей спонтанного и индуцированного НСТ-теста, свидетельствующихоб увеличении резервного потенциала нейтрофилов.

Таблица 26

Функциональная активность фагоцитарных клеток у пациентов с ОАСНК, получавших в комплексе лечения Фуколам_

Здоровые Контрольная Опытная группа

Показатель доноры (п=30) группа (п=30) (п=30)

М±а М±ст M±aj

Фагоцитарный показатель 78±2,4 60±4.2 58±3.4

(ФП %) 59±2,8 68±3,0*

Фагоцитарное число (ФЧ) 4,8±0,4 3,1 ±0,4 3,4±0.4

2,9±0,8 4,6±0,6*

НСТ-тест (спонтан.(00х10 J) 15,3±4,5 44,2±14.3 46.9±17.8

53,5±11,6* 26,7±14,8*

НСТ-тест (индуцир.(СШх 10 32,4±9,0 53.5±9.8 51.2±8.8

59,3±8,8 34,6±5,7*

Функциональный резерв (ФР) 2,2±2,0 1.2±0.5 1.1±0.4

1,1±0,5 1,3±0,6*

Примечание: в числителе - показатели до начала лечения, в знаменателе - показатели после лечения; * - значимость различий (р<0,001)между показателями до и после лечения

Содержание проатерогенных цитокинов в сыворотке крови пациентов контрольной группы оставалось повышенным, отражая состояние баланса ТЫ- и ТЬ2-клеток и девиацию иммунного ответа в сторону ТЫ. У пациентов опытной группы, получавших в комплексе с базовой терапией 4-недельный курс Фуколама, не обнаружено значимых различий в содержании Т№а, 1Ь-4, 1Ь-10, 1Ь-8 в сыворотке крови (по сравнению с показателями до начала терапии. В то же время в отличие от пациентов контрольной группы, у которых наблюдалось увеличение содержания 1Ь-б и №N7 в сыворотке крови, концентрация этих цитокинов, а также индекс соотношения 1РЫу/1Ь-4 и №N7 /1Ь-10 у пациентов опытной группы не увеличивались. Таким образом, включение полисахаридов бурых водорослей в комплекс базовой терапии пациентов с ОАСНК сдерживает продукцию проатерогенных цитокинов (рис.3).

30

25

20

15 •

10 5 • ■ ^ 1

Контрольная | Опытная группа; Контрольная \ Опытная группа группа группа До лечения

| 11>>чуЛХ.-4 1КЫу [1.-10 1РМуЛ1.-10

Рис.3. Соотношение ТЫ/ТИ2 цитокинов у пациентов с ОАСНК после лечения

Изменений в содержании растворимых молекул адгезии у пациентов опытной группы не выявлено.

Активация системы гемостаза в ответ на повреждение эндотелия является одним из пусковых моментов атеросклеротического поражения сосудистой стенки различными агентами. В то же время, изменения в системе гемостаза являются не только следствием атеросклеротического процесса, но и активными участниками его развития и прогрессирования, отражая состояние дисфункции эндотелия. Установлено, что у пациентов с ОАСНК нарушения гемостаза сопровождаются активацией внутреннего каскада прокоагулянтного звена (снижение АПТВ (34,5±3,1 сек.), увеличение концентрации фибриногена (3,8±0,7 г/л), укорочение ТВ (12,2±1,5 сек) по сравнению с показателями у здоровых доноров (3,1±0,6 сек., 3,1±0,6г/л, 15,2±3,4 сек. соответственно, />=0,000) Включение полисахаридов бурых водорослей в схему консервативной терапии приводило к снижению гиперкогуляционного потенциала крови (снижению ПТИ (значения показателя оставались при этом в границах физиологической нормы), удлинению ТВ с 12,2±1,5 сек. до 13,9±1,6 сек. (р=0,03).

В настоящее время доказана ведущая роль холестерина агрессивных липидных фракций - ЛПНП, ЛПОНП и триглицеридов в патогенезе атеросклероза (Б. Ногкко, 2000; 1Кеагпеу,2000). В нашем исследовании уровень общего холестерина, в сыворотке крови пациентов с ОАСНК, варьировал от нормальных значений (<5,2 ммоль/л) до высоких (>6,2 ммоль/л), средние значения в группах до начала исследования находились в пределах 5,2±0,8 ммоль/л. Неблагоприятное распределение ОХС между фракциями липопротеидов и накопление его в ЛПОНП и ЛПНП приводило к увеличению индекса атерогенности у пациентов с ОАСНК III (3,78±1,06), значимо отличавшихся от такового у здоровых доноров (2,4±0,2, р=0,000). По окончании базового лечения концентрация ОХС в сыворотке крови пациентов (5,1±0,6 ммоль/л) не изменялась по сравнению с исходными

значениями (5,2±0,8 ммоль/л) (/>=0,686). Аналогичная динамика была характерна и для показателей ЛПНП, ЛПОНП и триглицеридов, уровень которых оставался на прежнем уровне. У пациентов, получавших Фуколам, наблюдалась отчетливая динамика нормализации липидного обмена: на фоне снижения уровня общего холестерина наблюдалась нормализация его распределения между фракциями липопротеидов: концентрация ЛПВП в сыворотке крови увеличивалась с 1,0±0,1 ммоль/л до 1,3±0,3ммоль/л, значимо отличаясь от показателя до начала лечения (р=0,000), концентрация ЛПНП - снижалась с 2,9±0,6 ммоль/л до 2,2±0,4 ммоль/л, (р=0,000), что приводило к снижению индекса атерогенности с 4,1±0,4 до 2,3±0,6, (р=0,001).

Оценка эффективности базовой терапии с помощью интегральных критериев выявила толерантность хронического системного воспаления у пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей к проводимому лечению. Системная воспалительная реакция, оцениваемая по коэффициенту и уровню реактивности, у пациентов контрольной группы со II стадией ишемии не изменялась, у лиц с III стадией заболевания коэффициент реактивности значимо увеличивался. У пациентов опытной группы значения КР по окончании терапии характеризовали, в среднем, меньшую выраженность СВР по сравнению таковыми в контрольной группе: (на фоне включения в схему лечения фукоидана мы отметили снижение с 60% до 46,6 % количества пациентов с коэффциентом реактивности 4, у пациентов с коэффициентом реактивности 5 после проведённой терапии он становился равным 3). У пациентов опытной группы с ишемией II стадии после базового курса лечения с включением Фуколама зарегистрировано значимое снижение КР с 3,57±1,45 до 3,00±1,03 (р=0,03). У пациентов опытной группы с ишемией III степени значимых изменений коэффициента реактивности не выявлено. ВЫВОДЫ

1. Установлены особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с ОАСНК II и III стадий ишемии по Фонтейн-Покровскому, выражающиеся в изменении функциональной активности нейтрофилов (усиление продукции АФК, снижение фагоцитарной активности и функционального резерва), активации гуморальных и клеточных факторов адаптивного иммунитета, усиливающихся по мере прогрессирования заболевания.

2. Состояние цитокиновой системы у пациентов с ОАСНК II и III стадий ишемии по Фонтейн-Покровскому характеризуется дисбалансом сывороточных цитокинов с поляризацией иммунного ответа по ТЫ-типу (повышением уровня проатерогенных интерлейкинов (ШЫу), снижением уровня противовоспалительных цитокинов 1Ь-10 и 1Ь-4), выраженным увеличением хематграктанта 1Ь-8.

3. Значимыми прогностическими маркерами, отражающими выраженность хронического воспаления у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей, являются концентрация IFNy, IL-8 в сыворотке крови и уровень экспрессии активационных антигенов CD25 и HLA-DR на циркулирующих лимфоцитах.

4. Увеличение концентрации растворимых молекул адгезии в сыворотке крови (sVCAM-1, sICAM-1, sE-selectin, sP-selectin) отражает активацию адгезивной функции эндотелия у пациентов с ОАСНК.

5. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК оказывает иммуномодулирующее действие на факторы врожденного и адаптивного иммунитета, сопровождающееся снижением экспрессии активационных антигенов на лимфоцитах, нормализацией уровня IgG, модуляцией окислительно-восстановительного потенциала и функционально-метаболических резервов нейтрофилов, сдерживанием продукции проатерогенных цитокинов.

6. Полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК нормализуют распределение холестерина между фракциями липопротеидов и снижают гиперкогуляционный потенциал крови.

7. Для пациентов с ОАСНК с ишемией II стадии характерно наличие первой стадии хронического системного воспаления (компенсированной), при ишемии III стадии системное воспаление приобретает характер неустойчивой компенсации (2 стадия), наличие сопутствующих заболеваний сердечнососудистой системы у части пациентов сопровождается развитием субкомпенсированных (3-я стадия) форм хронического системного воспаления.

8. Метод оценки хронического системного воспаления с помощью интегральных показателей СВР может использоваться для регистрации наличия и характера развития ХрСВ у пациентов с ОАСНК, оценки риска развития осложнений и осуществления мониторинга проводимой терапии.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ В МЕДИЦИНСКУЮ НАУКУ И ПРАКТИКУ

1. На основании оценки иммуно-патогенетической эффективности полисахаридов из бурых водорослей рекомендовано включение БАД "Фуколам" в комплекс с базисной терапии пациентов ОАСНК с целью коррекции дисфункции иммунной системы, нормализации липидного обмена и снижает гиперкогуляционный потенциал крови.. Режим приема -по 1 капсуле 2 раза в день в течение 30 дней в комплексе с базисной терапией.

2. Рекомендуется использовать метод оценки хронического системного воспаления с помощью интегральных показателей для регистрации наличия и характера системной воспалительной реакции, оценки риска осложнений и мониторинга терапии у пациентов с ОАСНК.

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Запорожец, Т.С. Роль Т-клеточной дисфункции в развитии атеросклероза сосудов нижних конечностей и возможности ее коррекции / Т.С. Запорожец, К.В. Майстровский, В.Г. Раповка, А.К. Гажа, Т.П. Смолина, Т.Н. Звягинцева // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2009. - № 3. - С. 100-106.

2. Майстровский, К.В. Коррекция липидного обмена у пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей сульфатированным полисахаридом из бурой водоросли Fucus evanescens / К.В. Майстровский, Т.С. Запорожец, В.Г. Раповка, Т.Н. Звягинцева, Н.М. Шевченко // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2010. - № 4.- С. 47-50.

3. Запорожец, Т.С. Особенности иммунного и цитокинового статуса у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей /Т.С. Запорожец, К.В. Майстровский, В.Г. Раповка, Л.А. Иванушко,

A.К. Гажа, Т.П. Смолина //Цитокины и воспаление. - 2011.- Т.Ю.-№ 3.- С.68-75.

4. Майстровский, К.В. Влияние иммуномодулятора фукоидана из бурых водорослей Fucus evanescens на показатели антиоксидантной системы, липидного и углеводного обмена у мышей /К.В. Майстровский, Т.С. Запорожец. Л.Н. Федянина, Т.К. Каленик, Е.В. Моткина. Т.И. Имбс // Тихоокеанский медицинский журнал. -2009. - № 3.- С. 97-100.

5. Запорожец, Т.С. Оценка системной воспалительной реакции у пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей / Т.С. Запорожец, К.В. Майстровский, В.Г. Раповка, Л.А. Иванушко, А.К. Гажа, Т.П.Смолина, А.К. Гажа, Н.Н.Беседнова // Тихоокеанский медицинский журнал.- 2012.- № 1.- С.72-77.

6. Майстровский, К.В Значение иммунной активации в прогрессировании атеросклероза сосудов нижних конечностей /К.В. Майстровский,

B.Г. Раповка, Л.А.Иванушко, А.К. Гажа, Т.П. Смолина// VIII Конференция иммунологов Урала, Сыктывкар, 28-30 июня 2010,

«Вестник Уральской медицинской академической науки» 2010. - № 2 (29).- С. 166-167.

7. 4. Майстровский, К.В. Влияние фукоидана на прокоагулянтное звено системы гемостаза больных облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей/ Майстровский К.В., Раповка В.Г., Шевченко H.M.//VIII Конференция иммунологов Урала, Сыктывкар, 28-30 июня 2010, «Вестник Уральской медицинской академической науки» - 2010 -№2(29).- С. 167-168.

8. Майстровский, К.В. Коррекция липидного и углеводного обмена у больных облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей сульфатированным полисахаридом из бурой водоросли Fucus evanescens / К.В. Майстровский, Ю.В. Раповка, Т.С. Запорожец, Т.Н. Звягинцева, Т.И. Имбс //Тезисы Объединенного иммунологического форума, СПб, 2008, 30 июня-5 июля //Российский иммунологический журнал,- 2008. -Т. 2 (11). - № 2-3. С. 323.

9. Майстровский, К.В. Коррекция гемостаза у больных облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей сульфатированным полисахаридом из бурой водоросли Fucus evanescens / К.В. Майстровский, Т.С.Запорожец, Ю.В. Раповка, Т.Н.Звягинцева, Т.И. Имбс, В.Г.Раповка // Тезисы IV Всероссийской конференции по клинической гемостазиологии и гемореалогии в сердечно-сосудистой хирургии (с международным участием), Москва, 2009, 4-6 февраля. -С. 124.

Ю.Майстровский, К.В. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей /К. В. Майстровский, Т.С. Запорожец, В.Г.Раповка, Т.Н.Звягинцева // Методические рекомендации. Владивосток, 2013. 20 с.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

Al И В - активированное парциальное тромбопластиновое время

АФК - активные формы кислорода

БАД - биологически активная добавка к пище

ИБС - ишемическая болезнь сердца

ИРИ - иммунорегуляторный индекс

КР - коэффициент реактивности

ЛПИ - лодыжечно-плечевой индекс

ЛПК - лимфоциты периферической крови

ЛПВП - липопротеиды высокой плотности

ЛПНП - липопротеиды низкой плотности

мЛПНП - модифицированные липопротеиды низкой плотности

НСТ - нитросиний тетразолий

ОАСНК - облитерирующий атеросклероз сосудов нижних конечностей

ОХС - общий холестерин

СВР - системная воспалительная реакция

ТВ - тромбиновое время

ТГ - триглицериды

УР - уровень реактивности

ФГ - фибриноген

ФП - фагоцитарный показатель

ФЧ - фагоцитарное число

ХрСВ - хроническое системное воспаление

CD - cell differentiation antigen или claster definition - антигены

кластеров дифференцировки клеток HLA - human leukocyte antigens — антигены лейкоцитов человека

IFN - interferon — интерферон

IL - interleukin- интерлейкин

Ig - immunoglobulin — иммуноглобулин

NK - normal killer - нормальные киллеры

NKT - Т-лимфоциты с функцией натуральных киллерных клеток

Thl, 2 - T-helper-1, 2- субпопуляции CD4+ Т-лимфоцитов (хелперов) TNF - tumor necrosis factor - фактор некроза опухолей

sE-selectin - sE-селектин

sICAM-1 - soluble ntercellular adhesion molecules type 1 — растворимая

молекула межклеточной адгезии 1 типа sP-selectin - sP-селектин

sVCAM-1 - soluble vascular cell adhesion molecule type 1 - растворимая молекула адгезии сосудистого эндотелия 1-го типа

Майстровский Кирилл Валерьевич

Иммунологический и цитокиновый статус в патогенетическом обосновании эффективности применения полисахаридов из бурых водорослей у пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Подписано в печать 02.04.2014. Формат 60x84/16. Бумага писчая. Уч.- изд. л. 1,0. Тираж 100 экз.

Отпечатано в типографии ООО "Литера V", 690091, г. Владивосток, ул. Светланская, 31В e-mail: litera_v@mail.ru