Автореферат и диссертация по медицине (14.00.23) на тему:Структурно-функциональные основы реакции мезентериальных лимфатических узлов при экспериментальном хроническом токсическом гепатите и пути ее коррекции

со

СП СП

-е; .министерство здравоохранения республики узбекистан и-|

6=1 второй ташкентский

ш государственный медицинский институт

На правах рукописи УДК 616.36—002.2—099:616.428—076.5—08

АЗ И 30 В Еркин Хусановнч

СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСНОВЫ РЕАКЦИИ МЕЗЕНТЕРИАЛЬНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ХРОНИЧЕСКОМ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ И ПУТИ ЕЕ КОРРЕКЦИИ

14.00.23 — гистология, цитология, эмбриология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Ташкент — 1996

Работа выполнена на кафедре гистологии, цитологии, эмбриологии Второго Ташкентского Государственного медицинского института.

Научный руководитель: Доктор медицинских наук, профессор К. Р. ТУХТАЕВ Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор К. И. РАСУЛЕВ Доктор медицинских наук А. Ф. САДРИДДИНОВ

Ведущее учреждение, давшее отзыв о научно-практической ценности работы: Ташкентский педиатрический медицинский институт.

Защита состоится « » 1996 г. в « »

часов на заседании специализированного Совета Д. 087.09.02 при Втором Ташкентском Государственном медицинском институте по адресу: 700109, Ташкент, ул. Фароби, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Второго Ташкентского Государственного медицинского института.

Автореферат разослан « ¿е » 1996 года.

Ученый секретарь <\

специализированного Совета И Л доктор медициских наук, профессор ^ А. А. БАТЫРБЕКОВ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность гемм. За последние юды проянлнстся существенна^ тсн/:снц;;я i: росту токсических поражении печени, которые, на фоне перенесённого острого вирусного гематита или без пего, часто способствуют развитию хронического гепатита и циррозов (А.С.Логипов, 1991; С.Д.Подымона, iÖDl; Е.А.Рысс с coairr., 1991; Ш.Я.Закирходжасв, 1992).

Хронические гепатиты, нередко заканчивающиеся циррозом печени и печеночной недостаточностью, янлмютгя одной из актуальных проблем клинической гематологии. Широкие применение различных химических соединении н биту, промышленности и нес подрастающее загрязнение ими окружающей среды способствуют значительному росту заболеваемост ., обозначаемой как "хронические токсические гепатиты". В этиологии хронических токсических гепатиток существенное место занимают лекарственные препараты, метаболи:;нрук)1чиеся в печени и обладающие определён!,ими оргапотронпыми свойствами; алкоголизм, токсикомания и другие.

В патогенезе развития хронических гсиатитон и циррозов печепи велика роль иммунной системы. Об этом свидетельствуют многочисленные клинико-иммунологические исследования, указывающие па тс или иные нарушения в иммунной системе при хронических гепатитах и циррозах печени (М.М.Зотина, 1983; Э.Ш.Коцвадзе с соант., 1984; В.В.Серов, 1985; Р.А.Тухтлска, 1991).

Отмечено, что при хронических токсических поражениях печепи происходит своеобразный дисбаланс » и чуппой системе, проявляющийся в виде количественных сдвигов Т-лимфоцитов и их субпопуляций, изменений п системе гуморального иммунитета (Р.В.Петров с соавт., 1987; 1989), а также повышенным образованием аутоаигител против собственных гепатоцитои (П.А.Кашпшев, 1990).

Исследованию различных звеньев клеточного и гуморального иммунитета при хронических- гепатитах и циррозах печени посвящен ряд исследований (А.С.Логинов, ГО.Е.Влок, 1987; С.Д.Подымона с соавт., 1988; Н.А.Нурмухамедова, 1992). Вместе с тем, морфологические основы иммунологических единю» при хронических гепатитах и циррозах печени токсической этиологии остаются недостаточно выясненными. Сведения о структурных изменениях в центральных и перифг-ических органах иммунной системы при хронических активных гепатитах и циррозах

единичны и нротшшречинм (Bli.Ccpou, 1985; С.И.Панлонич с соант., 1987; К.Р.Тухтас» с солит., 1993, 1995).

li этой сияли колиикла необходимость поиска способом избирательного нолдсистпия на отдельные .шепья иммуногенеза, которая и определила сущность никого папраилепия п клиническом иммунологии - иммупо-коррекции (Р.Н.Иетроз, 1 <.)87 ). Илыскапие попых нещестн, обладающих иммупомодулирующим дгчетпием па конкретное лиечо иммунной системы, открынает большие перспсктииы патогенетического лечения многих нажпеиших заболыиний пнутропичх органон: хронические гепатиты, гломерулоиефриты, хронические нсснецифичсские ннснмопии и другие. Накоплен определённый омыт испольлоиапня иммупомодулирукщих препарагоа при комплексном лечении изнепой болезни 12-перстнон кишки и хро1Ш"секнх гепатитои (ИЛО.Касымои с солит., 1991; Х.Я.Каримои, Ф.Ю.Гарнб, 1992). К сожалению. клеточные и субклеточные механизмы плияния иммупомоду/нфуыщих прсплратон па структурно-функциональное состояние органон иммунной системы при тех или иных иммуподефицигных состояниях до настоящего нремепи недостаточно ныяспеиы.

Изложенное обуслонлинает актуальность и сноспременпость исследования структурных особенностей органон иммунной системы при хроническом генагнте и поиска оптимальных путей коррекции иолникающих иммунi н>!х перестроек.

П"Л1. и :;ал:1чи исслр.'юи.'ишн. Целью исследования яиилось ныяснеиие закономерностей структурно-функциональных перестроек лимфатических узлоп п динамике экспериментального хр( нческого токсического гематита и изыскание путей фармакологической их коррекции.

Для достижении этой цели ностанлепы следующие ладачн:

- исследоиать структурно-функциональные параметры мезеп'.ериалыплх лимфатических узлоь н динамике хронического гелишриноного :спатнта;

— оцепить 11Л1ЫШК и.чмупомодулпруюпп'Х препаратом (лакпшии, тммалин, спленин, айкафосфат) ни структурно-функциональное состояние лимфатических узлоп при экспериментальном хроническом гепатите с целью кыбор:; оптимального способа иммупокоррекции.

Научная_понизил работы. II работе пперные установлены

структурно-функциональные особенности мезентернальпых лимфатических узлом при хроническом токсическом гепатите, |:ь:знанпом гелпотрнпом: выраженная гиперплазия В-лакиснмых лоп, функциональное напряжение цммуиокомпстептпых клеток и клеток микроокружения; гипоплазия Т-записимых зон, обуслонлеппля усилением деструкции и снижением

пролифсратинпои активности клеток :пнх :;оп. Сравнительный анализ влияния различных иммупокоррсгирующих препаратов (тактишш, тим : ии, сплепип, айкафосфат) на структурно-функциональное состояние мсзентермальчых лимфатических узлов и условиях хронического гепатита позволил установить: препараты тимуса, особенно тактивип, способствуют восстановлению Т-зависимых зон, повышению пролиферации их клеток и снижеии:о степени деструктивных изменений иммупокомнетентных и стромальпых клеток. Действие сплспипа и айкафосфата на структурное состояние органа выражено незначительно и не имеет определенной закономерности

Практическая помнит» полученных данных заключается и том, что они углубляют представление о структурных механизмах иммупш'Х нарушений при хроническом поражении печени. Результаты исследования могуг служить обоснованием к использованию препаратов тимуса для коррекции вторичного иммунодефицита при хронических гепатитах.

Апробация. Материалы диссертации доложены па: Международном симпозиуме "Проблемы сапогеппогг и патогенного эффектов экзоэкологических воздействий на нпутрешпога среду организма" (Чолпоп-Ата, 1993); IV съезде терапентои Республики Узбекистан (Ташкент, 1995); объединённом заседании кафедр гистологии, нормальной, топографической анатомии, патологической физиологии, отдела морфологии и иммунологии ЦНИЛ Второго TaciTocMH (Ташкент, 19%); XIII Национальном Конгрессе гастроэнтерологон Турции (Апталия, 199fi).

Публикации. По теме диссертации опубл и копано 7 работ.

Объём и структура работы. Дисг-отация изложена на 145 страницах машинописного текста, содержит 70 рисупкон, 17 таблиц. Состоит из введения, обзора литературы, материала и методоп исследования, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов. Список использованной литературы включает 173 отечественной и 70 иностранных источника.

Основные положепмя диссертации, выносимые на защиту.

1. Структурно-функциональные перестройки лимфатических узлов в динамике хронического токсического гепатита характеризуются гиперплазией Н-зависимых зон при прогрессирующей гипоплазии Т-занисимых зон органа.

2. Иммупокоррегируюище препараты (тактивиц, тнчалип, сплетши, айкафосфлт) неодинаково кличют па структурно-функциональное состояние лимфатических узлов в условиях хронического токсического

гепатита. Наиболее ныражеппмй эффект оказынают препараты тимуса, которые способстнуют iiocciaiioiuiciiiiio Т-занисимых зон, замедлению гиперплазии Н-заииси.чых зон органа.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В работе испольло! чи 156 белых лабораторных полоиозрелых крыс--самцои линии "Вистар" массой 150-200 г. Ike шшчтшо до начала эксперимента находились и течение педели на карантине и далее, после исключении соматических или инфекционных лаболенапий, иереиодились па обычный лабораторный режим.

Модель хронического токсического гепатита ноенроилнодили многократным апедеписм |слиотрина и течение (> педели и доле 0,05 мг/r по схеме (Х.Я.Каримоа, 1979).

На 40-е сугки эксперимента у жииогных н печени обнаружены «се морфологические нрояилении хронического актпниого гепатита. Сосуды портального тракта были расширены и кроаспаполнспы. 1) междолысоиой соединительной ткани ныяилилнп. крупные очаги инфильтрации мопопуклеарнымн клетками. 1! генатоцитах обнаружены яилепия белконой д1!стро(|>пи. В дальнейшем, уже по прекращению лчедепия голнотрппа, яилепия хронического гепатита продолжали прогрессировать. Инфильтрации портальных тракт«» на 60-е сутки опытом приобрела ещё-более ныражеииый характер. Наблюдалось кмрагксннос увеличение числа фнбробластон ii зиёздчатых эндотелиальных клеток Куафера niiy;,.it долек. Одиопремепио с этим отмечалось пониление грубых прослоек соединительной ткани, особенно иокруг междолькоиых артерий и пен. Па 90-е сутки опытов и печени обнаружена типичная морфологическая картина цирроза. Паренхима печени нрс.чстакчялагь уменьшенными и размерах дольками, окружёнными мощными пучками соединительной гкаии. Обращало на себя аниманис формиронаиж' "ложных" долек н результате ннтспси иного фиброза.

Таким образом, ii результате многократного инсдспня гелиотрина разминался хронический актинпын гепатит, который, несмотря на прекращение дачи гепатотроиного яда. ирогресснронал и пршюднл к разамтию цирроза печени.

Для оценки шшяпия некоторых иммупомо;(улирующих прспаратон па течение хронического токсического гепатита на (¡0-е сутки эксперимента жиш/шмм подкожно виодили тактииин (1,4 мкг/кг и течение 10 дней),

тималин (0,14 мг/кг и течение 10 дней), снлснин (0,1 мл/кг » течение 10 дней) и айкафосфаг (!• mi/кг и течение 10 дней). Группа, получ иная стерм.и-нмй физиологический раствор внутрь или подкожно, служила контролем. Эти животные исследовались на 71-72-е сутки эксперимента. Таким образом, псе животные были распределены на 8 групп:

I - хронический гелиотриповый гепатит - 40 дней;

II - хронический гелиотриповый гепатит - (¡0 дней;

III - хронический гслиотшшовый гепатит - 90 дней;

IV - хроьичсскии гелиотриповый гепатит + тактинин;

V - хронический гелиотриповый гепатит + тималип;

VI - хронический гелиотриповыи гематит + снлснин;

VII - хронический гелиотриповый гепатит +- айкафосфат;

VIII - контрольная.

Забой как контрольных, так и опытных животных проводили в соответствующие сутки, в утренние часы, натощак, под эфирным наркозом.

ДЛя светоонтьческих исследоеппий мезептериальпые лимфатические узлы фиксировали ь жидкостях Карпуа Пуэпа и после соответствующей И|мшодки залипали в парафин. Дспарафинизированные срезы окрашивали гематоксилином и эозином. IIa парафиновых срезах, проходящих па уровне порот узла, морфомстрически методом по Г.А.Автаидилову с модификациями (Р.А.Стропус, 197(5; К.Р.Тухтаси, У.Д.Джалалов, 1987) определяли:

- абсолютную (я кик2) и относительную (и %) площадь различных структурно-функциональных зон мезептерилаьных лимфатических узлов и соединительнотканных компонентов (с н"чо1ш>ю морфометричсской сетки);

- абсолютное количество лимфатических фолликулов мезентериальных лимфатических узлов па срезах, проходящих на уровне ворот органа.

Посчёт клеточных элементов структурных зон мезептериальных лимфатических узлов осуществляли на нолутонких (1 мкм) апалдитовых срезах, окрашенных метилеповым сипим и основным фуксином.

Для изучении мролифератииной активности клеток различных зон мезептериальных лимфатических узлов использовали метод радиоавтографии. В вышеуказанные сроки опытов утром, натощак, как контрольным, так и опытным животным впутрибрюшиппо вводили Н-*-тимидин из расчёта 0,5 мкКюри на 1 г массы. Через 1 час после инъекции животные забивались декапитацией под эфирным наркозом. Дспарафипи.чироваппые срезы толщиной 5-7 мкм покрывали жидкой фотоэмульсией типа "М" и экспонировали в течение 21 суток в темноте.

После экспозиции срезы проявлял и в амидоловом проявителе и окрашивали гематоксилином-оозшшм. Результаты выражали ц процентах и обозначали как индекс меченых ядер (ИМЯ). Для морфометричсских и радиоавтографических исследовании использовано но 5 животных из каждой группы.

Для электронномикроскопнчеоких исследований кусочки меземтерпальных лимфатических узлов фиксировали в 1,25% растворе глутартвого альдегида с дофиксацием в 1% растворе осмиевой кислоты. После обезвоживания материал заливали н аралдит или оном. Ультратонкие срсзп, изготовленные на ультрамикротоме ЬК1М80(), контрастировали урапнл-ацетагом и цитратом синиц.1 и просматривали в электронном микроскопе ЛНМ-7.

Нее цифровые данные обрабатывали ■ по критериям Фишсра--Стыодспта; достоверными считались различия, удовлетворяющие 1><0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Наши исследования показали, что, начиная с 40-х суток хронического токсического гепатита, суцсствеппо изменяются морфологические и морфо.четричсские показатели мезсп тсриальных лимфатических узлов. Общая площадь лимфатических узлов прогрессивно возрастает и достигает своего максимума па У0-с сутки эксперимента. Одновременно с этим наблюдается возрастание (во сравнению с контролем) в 2-3 раза числа лимфатических фолликулов с круыплчи герминативными центр, и. При нсследоваьии в динамике эксперимента различных структурпо--функциональпых зон нами установлена определённая закономерность: прогрессивно увеличивается абсолютная площадь 15-занисимых зон (лимфатические фолликуллы, мозговые тяжи), уменьшается абсолютная и относительная площадь Ч'-'.>»1»и:ммих зон (коркс.ное плато, паракортикальпан зова). При этом усыновлена тенденция к во::¡тетанию площади стромальнмх комнонсичов и некоторому опикчп'едьиому уменьшению площадей краевых и мозговых синусов.

Хронический токсический гепатит, по нашим данным, сопровождается также и существенными изменениями числа клеток в различных структурпо--функцмональных зонах мсзсптсриальнмх лимфатических узлов. При подсчете установлено достоверное новьпнснис абсолютною числа лимфобластов и иролимфоцитои ь В-запнсимых зонах, которое достигает своего максимума на РО-УО-с сутки хронического токсического гепатита. В

Т-зависимых ломах, напротив, наблюдается прогрсссшшсс уменьшение клеток, способных к митотичсскому делению. Практически по всех зонах наблюдается достопорпое увеличение числа тканевых базофилон и эолипофильпых граиулоциточ. Следует отметит», что общее число клеток и Т-заииснмых зонах прогрессивно снижается, спидстельстнуя об уменьшении плотности распределения клеток н этих зонах.

Электропномикроскопические исследования позволяют установить признаки функциональной напряжённости иммупокомиетептпых клеток, нарушения гемо- и лимфоциркуляцин, а также деструктивные изменения клеток лимфоцито-макрофагальпого рядои и микроокружепчи. На 40-е сутки эксперимента наблюдаются многочисленные плазматические клетки, образующие островки. Н отдельных нлазмоцитах обпаружинаются явления вакуолизации цитоплазмы и обралоиапие миелиноиодобных структур. На 60-90-е сутки ультраструктурные признаки функциональной напряжённости клеток лимфо-нлазмоцитарпого рядои, макрофагои и стромальных клеток возрастают. .• П этот период но исех зонах, наиболее часто п иаракортикальной зоне, обнаруживаю-ся лимфоциты и плазмоциты с признаками лиг-иса ядра и цитоплазмы, которые находятся о межклеточном веществе или фагоцитированы макрофагами.

Таким образом, и динамике хронического гелиотринового гепатита наблюдается гиперплазия Н-лависимых зон мспентериальпых лимфатических узлои при прогрессирующей гипоплазии Т-записимых зон органа. Механизм иммуиоморфологических перестроек в мезентериальных лимфатических узлах при токсических поражениях печени не может быть объяснен однозначно. ¡! серии г-'бот, нроиедённых А.И.Конопля, Л.Г.Прокопенко с соавторами (1988), показано, что при экспериментальных токсических поражениях печени, вызнанных действием СС1^ н кропи животных появляется ряд факторов, которые обладают как иммуностимулирующими, так и иммупосуп рессорным и свойстпами. По споей химической природе эти факторы могут быть отнесены к гликопротсидам или рибонуклеонротсидам. Происхождение

иммупорегулирующих фа кто рол при токсических поражениях печени остаётся не выясненным. Они могут быть продуктом жизнедеятельности клеток -селезёнки (так называемый хслперный фактор) или же они образуются в результате пыдслснин большой» количества протеаз из деструктивных л«зосом гс-патпцитон (Л.Г.Прокоиенко, 1985; А.И.Копонля с соанторами, 1989). Так или иначе, можно считать доказанным существование факторов, обладающих способностью окалыпать щ.1 раженный

стимулирующий эффект на Н-систсму иммунитета при иммуносупрсссорпом дсйстнии на Т-клеточпое зиспо имунной системы. Высоким содержанием этих факторои при нирусных и токсических поражениях печени, по--индимому и объясняются наблюдаемые дисбалансы и Т- и В-системах иммунитета при хронических паболенаниях печени и клинике и н эксперименте (Л.С.Логиион, 1987; Ш.Я.Закирходжае», 1992; Р.Л.Нурмухамедоиа, 1992\

Исследуя субпопуляции лимфоцитон у крыс с хроническим гелиотриноным гепатитом Д.М.Хакбердиена (1982) обнаружила ныражеппое снижение 1сак абсолютного, так и относительного числа Т-лимфоцитоа. Содержание Н-лимфоцитон при атом попыталось. Результаты многочисленных клинических исследонаний также у капы па ют на достоьерное снижение общего числа Т-лимфоцитон при хронических актшшых гепатитах и циррозах печ<ч1и (Ш.Я.Закирходжасн, 1992; Р1.Кашагн$№ с1 а1., 1981). Хроническое затяжное течение процесса наиболее часто сопропождается пырахепнмм снижением субпопуляции Т-супрсссорон па ■ фоне незначительного уменьшении количества Т-хелнерон (Л.И.Николае» с соант., 1990; О.С.Махмудон с соаит., 1991 ;11.Каша1Н51п е1 а|., 1981). Именно субпопуляции Т-сунрессорон-киллерон обладает регулирующим илнянием на нроцесы нлалмоцитопоэзл и антитслогепеза (Р.И.Петрон, Р.М.Хаитои, 1983). Дефицит этих клеток нрниодит к бссконт|)олыюй пролиферации клеток В-снстемы иммунитета г. последующим их прсьращснисм и аптитслообразующие клетки нлазмоцитарпого ряда. Этим, оченидпо, и объясняются иысокие н казатели гамма-глобулишмюй фракции белкой и иммуноглобулишш класса 1^0 ири хронических злболенапиях печени у больных и экспериментальных жинотпых (Т.И.Осроиа с соаиг., 1988; О.Н.Яхоптоиа, 1990).

Возникает нон рос - прогин кого же ншранлепы иммуноглобулины, образующиеся и избытке при хроническом поражении печени? Ещё н 70-х годах и работах Г.С.Леиипа и солите рои (1972) было показано сущестпсипое возрастание титра аутоантитсл прогин и иагоцитоь ь динамике хронического гелиотрипоного гепатита. Клипшсо-лабораторпымн иселедопаниями доказана иажпая роль циркулирующих иммунных комплексен н патогенезе ионреждешш генагощггоп при хронических лаболенапиях печени (О.И.Яхонтопа и др., 1989; 1992). Они, как пранило, образуются за счёт глобулинопых фракций кроки и прежде исего иммуноглобулишш класса 1£0 (В.А.Лищенко и др., 1988).

Па оспопапии этих данных можно сделать следующее заключение:

1. Гиперплазия В-:;аиисимых зон мезептериальпых лимфатических ■•зло« при хроническом гепатите обусловлена усиленной продукцией биологически активных веществ, окапывающих стимулиру:ощии эффект на В-систему иммунитета;

2. Снижение площадей и плотности распределения клеток в Т-зависимых зонах мезептериальпых лимфатических узлов при хроническом токсическом поражении печени является морфологическим субстратом вторичного дефицита Т-клсточного звена иммунитета, и, вероятно, происходит о результате действия иммупосупрессориых факторов, образующихся при токсическом поражении гсиатоцитов;

3. Гиперплазии В-зависнмых зон сопровождается появлением большого количества плазматических клеток, однако вырабатываемые ими иммуноглобулины, прежде всего, направлены против генатоцитов и их субклеточных оргапелл с образованием циркулирующих иммунных комплексов.

Нас иитсресовлл вопрос о том, каковы же механизмы гипоплазии Т-зависимых поп мезептериальпых лимфатических узлов при хроническом токсическом гепатите? Проведенные радиоавтографические исследования выявили, что уже на 40-е сутки экспериментов абсолютное число ДНК-сиптезирующих клеток н Н-занисимых зонах более чем в 2 раза превышает показатели контроля. На (iO и 90-е сутки эксперимента абсолютное число меченых клеток в этих зонах повышается в 4-5 раз по сравнению с контролем. Пролифсративвая активность клеток Т-зависимых зон, прежде всего паракортикалыюй зоны, существенно не изменяется но сравнению с контролем. В динамике хронического гелиотрнпового гепатита практически во всех зонах лимфоузлов значительно возрастает степень деструкции и фагоцитоза клеток лимфоидного ряда. Наиболее высокая степень гибели клеток па 60-90-с сутки экспериментов отмечена в паракортикальпои зоне я корковом плато. Если В-зависимые зоны отвечают па усиление деструкции своих клеток повышением пролиферативной активности, то этою не наблюдалось в Т-зависимых зонах. Изложенное дает основание предположить, что при хроническом гелиотриновом гепатите образуются определённые биологически активные вещества, ипгибнрующис пролиферативную активность клеток Т-систсмы иммунитета. Это предположение подтверждается данными пашей лаборатории, свидетельствующими о снижении пролиферативной активности клеток тимуса и гипоплазии Т-зависимых зон других периферических органов

иммунной системы при хроническом токсическом гепатите в эксперименте (К.1'.Тухтаеп с соант., 1992, 1У!М).

Следовательно, образование при хроническом токсическом гепатите ипгибпрующих 'Г-систему факторов первоначально приводит к снижению функциональных потенций тимуса, что проявляется к виде его гипоплазии и понижения секреторной активности. Это, и спою очередь, отражается на Т-зависикых зонах нериф'чщчсскнх орга!'ои иммунной системы, вызывая в них гипонлл.шю клеток, снижение их иролифератншюй активность и усиление степени деструкции.

Выявленный нами выраженный дисбаланс н иммунной системы (нарушение процессов пролиферации, дифференцироики и усиление гибели клеток Т-завион.чых зон) послужил основанием к использованию различных способов коррекции нммупоморфологических нарушении в мсэенкфиальпых лимфатических узлах при хроническом токсическом гепатите. Она была проведена н разгаре хронического токсического гепатита (па (¡0-е сутки эксперимента) препаратами тимуса (такткниц, тималин), селезёнки (сплеьип) и синтетическим гепатопротекторпым веществом, обладающим умеренным иммупомодулиэующим действием (айкафосфат).

'Гактшши представляет собой комплекс пептидов, выделенных из тимуса телят (И.Я.Лриоп, 19,42). Наиболее высокой биологической активностью обладает шестая фракции тактивииа, которая оказывает нммупомодулирукнцсе действие на Т-снстему иммунитета (Д.П.Линдпер,

H.Я.Лрион, 1985; Ю.Л.Гринспич, И.Ф.Чеботарев, 1989). Этот препарат достаточно широко использовался при первичных и I' >ричпых пммуподефицитных состояниях, где оказывал выраженный нммунокоррегнрующии :х)х|н' кг (Л. 1'.'1учалнп, 1989; Т.П.Сучкова с соавт.,1989; (".Л.Максимов с соант., 1990). Имеются данные о стимуляции Т-системы иммунитета под действием тактивииа у больных и экспериментальных животных с хроническими заболеваниями печепи (Л.С.Логштн с соант., 1985; С.Л.Максимов с соант., 1990; Ш.Я.Злкмрходжасн, 1992).

Другим нммупомодулирукниим препаратом тимуса телят является тималин, биологически активное начало которого представлено полинентидом с молекулярной массой около 5 тыс.Дальтон (П.Х.Хувинсоп,

I.'.'82). Он обладает снособп<н:тыо индуцировать и рол иферацню, дис|>фсрспциронку и функциональную активность субпопуляций 'Г-лимфоциток (П.И.Морозов, Н.Х.Хапипсов, 1981; И.И.Грнпцевнч с соат\,19НО Положительный эффект тималина получен при ряде

заболеваний, протекающих черничными или вторичными им.чупод<;фицитами (Н.В.Гользаид с соаи.\, 1!)М>; О.И.Яхонтова, 1989). î-lciioyi i.:mnaiino тималпна и тактипипа у больных с хронически, ш заболеваниями печени способствовало пош.ппсиию содержания Т-лимфоцитов, нормализации соотношения Т-сунрсссорои-хелиероп (Ф.С.Харламова, Т.Н.Чередниченко, 198-1; Х.А.Ташпу.татои, 1991). Вместе с гея, структурные основы иммуномодулирующего действии полннептндоп из тимуса оставались не выясненными.

Введение нами интактным животным тактипмпа и тималина вызывает умер"-'111100 уиелнчение площадей Т-заннсимых зон мезептерилаьпых лимфатических узлов, а также некоторое усиление пролиферации клеток и них. Иммупокоррскция тактивипо.м при хроническом токсическом юпатнтс «■цособсгвует достонермому увеличению площадей Т-:пниеимых зон, плотноеги распределении клеток в них и снижению степени деструкции клеток и этих зонах. Одномрсмспно с атим значительно снижается число плазматических клеток и мак| офагон. Радиоавтографичоски устаноплсно достоверное повышение абсолютного числа Д1 ! К-снптч'.чиру.снцих клеток в napauopi икальнон зоне и и кордоном плато. ?)лсктронш>мнкроскопичссЮ1 отмечает«-« значительное спижлпн: частоты вмявлмемости клеток с признаками «рункциопалмшго напряжения м деструктнпимми изменениями субклеточных орта пел л.

Лнал.н нчш.к: морфологические и морфомсгричсггсис перестройки наблюдаются при иммупокоррстчрутнней и'ранпи тнмалином животных с хроническим токсическим гепатитом. Однако степень выраженности указанных перестроек ьыртксиа знача к-льпо меньше по сравнению с иммунной коррекцией тактивипо.м.

Таким образом, при хроническом гелиот риноном гепатите препараты ти...уса оказывают отчетливое стиму тирующее члиипие lia лролиферацшо и ди<*)фер«-пцировку клеток Т-занисимых зон мс.ич! тсриальпых лимфатических узлан, зиа П'ельио снижают признаки фуикчиомальпего напряжения II деструкции субклточиых органелл.

Механизм стимулирующего влияния полипептидон тимуса на Т-завиеимыс зоны лимфатически* узлов может быть обьяспёп «. нескольких позиции, lio-14'рпых, будучи бпологичсч'Ки активными всчцестиами, тактивин и тималнн и нанестной .мере счособст ьуют восстановлению нарушенной функции тимуса при хронических токсич«ч:ких гепатитах (Л.Г.Чучалин с соант., 19'!7, Л.П.Дринон, 198!)). Во-вторых, под влиянием »тих препаратов усиливается 1!|х>ли<|>ерация и ди(|>фср<ч1цнроика ¡слеток Т-системы

иммунитета. Это способствует восстановлению нарушенного иммунного дисбаланса (II.И.Ковалевская с соавт., 1 984; А.Г.Чучалии, 1У89). Кроме того, положительное действие тактикипа и тималипа па микроциркуляторное русло я дстоксикациошюе свойство печени также может способствовать снижению воспалительно-деструктивных изменений гепаищитов и восстановлению мопоокси,смазной ферментной системы при хроническом токсическом гепатите (И.В.Гользапд с, соавг., 1986; В.Г.Бугай с соавт., 1990; В.Б.Кузьмицкий с соапг., 1990).

Изложенное указывает на разпопапранлспностъ действия полипептидов тимуса при вторичных иммуподефнцитах, наблюдаемых при хронических повреждениях печени.

Нами проведено сравнительное изучение действия енлепина па структурно-функциональное состояние мезеитсриальпых лимфатических узлов при хроническом токсическом гепатите.. Сплепии как биологический активный фактор селезёнки обладает выраженными гепатотроппыми свойствами, стабилизирует мембраны генатоциток, усиливает антитоксическую функцию печени (Н.И.Аплетова, 1983; А.В.Шсвчснко, Н.М.Дорошенко, 1988). Он также оказывает регуляторное влияние на имупнме реакции организма, в частости стабилизирует показатели Т- и В-системы иммунитета (Д.У.Махмудова, 1995).

Под влиянием енленина нами установлено достоверное увеличение числа лимфатических фолликулов с герминативными центрами, а площадь Т-зависимых зон остаётся без существенных изменений но сравнению с группой животных без иммунной коррекции. Сплепии при хроническом токсическом гепатите приводит 1С дальнейшему повышению числа плазматических клеток. Клетки мопоцито-макрофагальпого ряда достоверно возрастают и мозговых тяжах и корковом нлато при некотором снижении в лимфатических фолликулах. Примечательно, что коррекция спленииом приводит к снижению числа деструктивных клеток, преимущественно в Т-зависимых -зонах мсзсптсриа. ьных лимфатических узлов. Сплепип не оказывает существенного влияния па иролиферативвую активность клеток различных зон органа, что было выявлено при радиоавтографических исследованиях.

Таким образом, ври хроническом токсическом гепатите коррекция иммуноморфологических сдвигов сплспином не вызывает определёпп; * закономерных изменений и лимфатических узлах. Гиперплазия клеток В-системы иммунитета сохраняется или даже прогрессирует па фоне выраженной гипоплазии Т-зависимых зон. Неоднородное действие

снленина, пероятпо, объясняется тем, что и экстракте селезёнки содержатся биологически актшшыс нещестна, одни из которых облагают иммуностимулирующим, другие же, папротип, иммупосупрессорным эффектом (Л.И.Конопля, Л.Г.Прокопенко, 1988, 198i); ».А.Борисом, 1990). Некоторое снижение степени деструкции юкг. к иод нлияпием енленипа смидетельстиует о нозможном цитонротекторпом и

мембрапостабилпзирующем эффекте препарата. Силсиии та.окс приводит к умеренному снижению поспалительпо-деструктшшых изменений и печени и улучшению её метаболических функций при хроническом гелиотрнпоном гепатите (Д.У.Махмудона, 1995).

Лйкафосфат япляется произнодпым пуриионого оспомапии пучлеотида 4-амиио-5-имндазол-карбоксамида. Согласно литературным данным, он обладает пыражепным протипоиоспалительпым и мембрапостабилизирующим эффектом при хронических заболеваниях печени нируспой или алкогольной этнологии, аналогично ленамизолу оказыиает также умеренный иммуиомодулирующий эффект (Ю.Е.Плок с соант., 1990).

При хроническом токсическом гепатите айкафосфат оказыиает незначительное шшяпие па морфоло! нческие и морфометрические показатели мезептериальных лимфатических узлом. Он умеренно уменьшает площадь лимфатических фолликулин с герминатизпыми центрами и не оказыиает нлилние па ; злмисимыс зоны органа. Степень деструкции клеток и функциональная напряжённость субклеточных структур по иссх зонах сохраняется па мысоком ypoii.ie. Пролифератинпая актимпость ¡слеток различных зон лимфатических узлом тагже сущесгпеппо не изменяется по срампепию с группой жимогпых без иммунной коррекции, lice это снидетельстиует о незначительном нммупомодул'фукпцем эффекте айкафосфпта на '•труктурпо-функциопа.'п.пое состояние мезентериальпых лимфатических узлоп при хропач.:ском токсическом гепатите.

Таким образом, происдеппыми исследонапиям! установлено ралмитис определённых структурно-функциональных перестроек и ме::сптериалЫ!ых лимфатических узах и динамике хронического гелиогрипозого гепатита. Они ныражаются, прежде исего, н гипоплазии Т-ламисимых зон при прогрессирующей гиперплазии Н-заиисимых зон, и иозрлстании функциональной напряжённости и деструктимпых изменений органелт клеток микроокружения и лилч|ю-мопоцнтарпоп> рядом практически но всех зонах. Сранннте.'н.ный анализ дейс.иим различных иммупокоррегирующих препаратом па структурпо-фупкционалынн состояние мезептериальиых

и

лимфатических узлов и условиях хронического токсического гепатг позволяет установить наиболее выраженный положительный эф<]>ект препаратом тимуса, осооспно тактиинна. Они способствуют восстановлению клсгочпости Т-зависвмых зон, замедлению гиперплазии В-зависимых зон органа. Пммупомодулирующий эффект силепипа и айкафосфата незначительный, не имеет определённых закономерностей.

ВЫВОДЫ

1. Экспериментальный гслпотриповын хронический токсический гепатит вызывает но всех зс.пах мезентериальпых лимфач ических узлов структурно-функциональные перестройки, свидетеле ну кицие о дисбалансе в иммунной системе организма.

2. При хроническом токсическом гепатите наблюдается прогрессирующая • гиперплазия В-зависимых зон (лимфатические фолликулы, мозговые тя :и) мезентериальпых лимфатических узлов, высока» функциональная активность макрофагов и плазматических клеток, которые и целом укалывают па напряжённость аутоиммунного процесса. Гипоплазия Т-записимых зон наиболее выражена на 60-90-е сутки и является результатом усиленной деструкции и гибели клеток этих .>он при низкой их пролиферативнои активности.

3. В условиях химического токсического гепатита иммуиокоррегирующие препараты оказывают неодинаковое влияние па структурно-функциональное состояние мсзентсриальных лимфатических узлов:

а) тактивин более, чем ти малин, снособстиует восстановлению Т-зависимых зон лимфатических узлов, снижению степени деструктиипых изменений и повышению пролиферативнои активности их клеток;

б) сплснин и айкафосфат не оказывают закономерного ' иммупомодулнруютего влияния па Т- и В-зависимыс зоны лимфатических узлов при хроническом токсическом гепатите.

4. Введевие биологически активных препаратов тимуса при хроническом токсическом гепатите способствует значительному восстановлению иммуноморфологичсских нарушений в организме и их использование является перспективным для нужд клинической гематологии.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. К.Р.Тухтасн, Ф.Х.Азизоиа, Ё.Х.Азизо». H.'iияпис некоторых иммупомодулнрующих препаратом па структуру органов иммунном системы имтактиых крыс. // Сб.трудов "Патогенез иммунозаиисимых заболевании и иммунокоррекци»" - Ташкент, 1 993. - С.58-61.

2. А.П.Сагдуллаена, Е.Х.Азизов, Р.А.Тухтаева. Структурные взаимоотношения сосуд«»» микроциркуляюрпого русла и паренхимы органов периферической иммунной системы и динамике хронического токсического гепатита. // Материалы Международного симпозиума по проблеме сапогемпого и патогенного эффектом экыэкологических воздействий па внутреннюю среду организма. - Чолпоп-Ата, 1993.

- С. 1 <>1-195.

3. КЛ'.Тухтгсп, М.Абдурахмаиов, Ё.Х.Азизо». Действие иммуномодулмрующих препаратом па структурно-(|>ункциональнос состояние органом пумуво-эндокрннпои системы при хроническом токсическом гематите. // Тез IV съезда терапевтов Республики Узбекистан. - Ташкент, 1995. - С. 170.

1. Н.Х.Аппзом, М.Абдурахманои, М.Ф.Маматназарика. Цитологическая характеристика Т-заиисичых зон органов иммуногенеза при хронических интоксикациях. //' У-'бекскнй бмо.ич'ичеекий журнал, 1996, №1-2.

- С.72-75.

5. К.Р.Тухтаев, М.Абдурахманоч, i'.A.Tyxгаева, Р.Х.Азизов. Морфологические особенности органом иммунной и эндокринной систем при экспериментальном хроническом гепатите па фоне чммунокоррекцни. //' Сборные научных работ, "Актуэлпые вопросы иммунологии и а.тлерю.чоп'и". - Тап.кеит, Н-9(>, Т.8. - С.133-139.

fi. Й.Х.Лзнчов, П.Х.Хотамов. Денетмие :'Ммунок:>ррсгирующсй терапии па мопфолс мческне п ультраструкгурпые показатели меземтериальпых лимфатических узлов при хоопи'.ееком токсическом гепатите. // "Диагностика, ichciihc и профилактика региональных заболеваний в Узбекистане", - Ташкент, 1!)9(>. - C.5-Ü.

7. M.AirJurahinanov, Yo.Kn.A/i/ov, U.A.Tiiklitaeva. T!ie influence of iinmunocorreclioii on the sLruclMre of immune organs at the chronic Hepatitis. // 13-i.h Nat'oaal Gastroenterology Congress, Antalya, Turkey, 1996. - P.352.

мклнптигилл лимфа тугунларипипг сурункали

эгсспмчшшгглл токсик гнплтит жлрлЕнидл

структур-фуикциоилл у:!глри111ллр11 г.л уларии ТУ»лтп! I! 11II11Г Й ул л Л1' И.

Ё.Х.Лзизов

X У л о с л

Ушбу ишпинг асосий ма^сади суру!¡кали экспсриментал токсик гепатит жараёпида лимфа тугупларьда кузатиладиган структур-функционал узгаришларнинг цонуниятларини апицлаш па уллрни фармакологии усуллар билан тузатиш йулларини излашдир. Тажрибалар огирлнги 150-200 г булган 156 оц каламушларда олиб борилди. Сурупкали гепатит 6 з^афта мобайнида гелпотрин (0,05 мг/г) юбориш нули билап чацирилди. Бир гуру* каламушлчр тажрибанинг 40,60 ва 90 кунларида текширилди. К°лган гурузуир эса 60 кундан бошлаб 10 кун мобайнида турли моддалар билан даволанди (тактивин 1,4 мкг/кг; тималин 0,14 мг/кг; сплснии 0,1 мл/кг; айкофосфат 9 мг/кг). Текширишлар бу ^айвонларда тажрибанинг 71-72 кунларида утказидди. Барча курсатилган муддатларда мезентериал лимфа тугунларч морфометрии, электрон микроскопия ва радиоавтография усуллари ёрдамида урганилди. Утказилган тажрибалар сурункали токсик гепатит лимфа тугунларининг барча зоналарида чу:^ур узгаришларга олиб келишини курсатди. Бунда тугунларнинг барча В-га тобе зопаларининг кучайиб борувчи гиуерплазияси, бу зоналарда цужайралар пролиферацчясининг ошиши, макрофаглар ва плазматик Хужайраларнинг ута ю^ори фаоллиги .кузатилди. Т-га тобе зоналарда эса, аксннча, пролиферация жараёнининг пастлиги ва ^ужайралар деструкциясининг кучайганлиги ^айд этилди. Курсатилган узгаришлар тажрибанинг 60-90 кунларида айницса падол намоён булди. Сингб курилган коддаларнннг сурункали гепатит жараёнида лимфа тугунларининг структур--функциопал лолатига турлича тат^сир курсатиши аницланди. Бу борада тимусдан олинган тактивин ва тималин иоддаларинниг ижобий таъсири кайд этилди. Уларнкпг таьсирида т-г4 табе зоналарнинг тикланиши, бу зоналарда *ужайра пролиферациясинипг ошиши ва деструкция жараёнларининг сусайиши кузатилди. Шу билан бирга спленин ва айкафосфатнинг лим,, 1 тугуиларидаги уз- ришларга унчалик таъсири йу^лиги аницланди. Тимусдан олинган пренаратларни сурункали гепатитларни' дав.олашда цуллаш клиник гепатология учун нстицболли йуналишлардан бири эканлиги таъкидлакди.

STRUCTURAL AND FUNCTIONAL PRINCIPLES OF THE REACTIONS OF MESENTl IIIRIAL LYMPH NODES AT THE EXPERIMENTAL TOXIC C! IRONIC HEPATITIS AND THEIR CORRECTION

Azi/.'iv Yorkin Khusanovich

SUMMARY

Tlic aim of lilis work was to sUuly of (lie structural and functional changes of the lymph nodes at the chronic toxic hepatitis and to devise some ways of their correction. The experiment« wen: carried out on 15(> white rats »villi weight of body ¡50-200 ¡4. The chronic hepatitis in rats was induced by repealed injections of heliolrin (0,05 nig/g) dunng (i weeks. The first group i:ot real¡iiont. rats were sludied 011 the 40, Mi and !.'0 days of experiments and used as control. Other groups of rats beginning from (¡0 days of experiments had g->t taklivm (1,4 mkg/kg). or thyinnlin (0,14 mg/kg), or splenin (0,i ml/kg), or aikaphosphat (9 nig/kg) during 10 days. The mesentherial lymph nodes al! the rats were sludied using morplioinethnc, electrone microscopic aiul r;idio:u;logrnpluc methods. It was showed. iliat the chronic hepatitis is ;.ceiiii)|)anietl with marked'y changes in all /ones of lymph nodes. In the U-depeiu'ent /ones cell ;-.-o|i feral ion was ¡ikT.M.j'il, which results to hy|>erplasy (if these /ones. I'ig'i (unit i.'nal activity 01 macrophages and plasmocyies was also found. In contrast, 111 the T-dependenl /ones decreased cell proliferation ami increased cell destruction processes were noted. These changes were particularly expressed on (>0-i)0 days ol e> peroneals. Used agents showed different influeaee on the stri'Clure of Ivinph nodes ¡11 the chronic hepatitis. T! thymic peptides takliviu and thymalm showed markedly posiLive effect. In these cases markedly resloraiion of T-7ones, caused by increased cell prol;ii rat io'- and decreased destruction processes was found. The effect 01 tlic splenin and .lilsuphnsphat was iasignilieanl. I! v.as concluded, thai, application of the thymic pepiides in liio irealmen! ol chrenic hepatitis is most perspective for clinical hepalo. ,gy.