Автореферат и диссертация по медицине (14.00.23) на тему:Структура терминальных звеньев желчного русла и их холангиоцитарного эпителя в норме и при нарушении оттока желчи

В0Ш04ВДИВДНСКАЯ АКАДЕМИЯ

РГБ~ОИ-

г э я«в1йВ

На правах рукописи

ДРОБЛВНКОВ Андрей Всеволодович

СТРУКТУРА ТЕРМИНАЛЬНЫХ ЗВЕНЬЕВ ЗЕДЧЕОГО РУСЛА И И1 ХОЛАШМОВДТАРНОГО ЭПИТЕЛИЯ В НОРЫЕ И ПРИ НАРУШЕНИИ ОТТОКА ЖВ1ЧИ

14.00.23 - гистология, дитологзи, эмбриология

АВТОРЕОВРДТ

диссертации па соискание учЗноЗ степени кандидата кэдацинсках паук

Санкт-Петор<Зург 1996

Работа выпрлнена в Санкт-Петербургской Государственной мэдицинской академии ни. И.И.Мечникова

Научный руководитель -доктор медицинских наук, профессор В. К. ВЕРШ.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Г. С. КА1ИНА0, кандидат медицинских наук, доцент В. Г. ГОЛОЖШОВ.

Ведущая рецензионная организация: С.-Петербургский институт экспериментальной медицины, отдел морфологии.

Защита состоится &1996 года ъ'/У часов на заседании диссертационного совета Д.106.03.07 в Военно-медицинской академии (194Г75, Санкт-Петербург, ул. Лебедева,

д.6).

С диссертацией исшно ознакомиться в фундаментальной библиотеке Военно-мэдицинской академии.

Автореферат разослан1996 года.

Учёный секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, доцент В. С. СВДОРИН

ОЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Известно,что нарушение оттока желчи, т.е. внепечёночный холестаз, вызывает наиболее выраженные воспалительные изменения тканей междольковых желчных протоков и желчных проточков (дуитул), которые образуют терминальный отдел желчного русла печени. Звенья этого терминального отдела.и их холангиоци-тарный эпителий, особенно в сравнении о гепатоцитарной тканью, во многом ещё остаются слабоизученными, а потому являются предметом противоречий и диокуссий по ряду важных и даже основополагающих вопросов гепатологии.

Во-первых, отсутствует однозначное видение топографии, структуры, а также унифицированная терминология звеньев; в Международной гистологической номенклатуре 1980 и 1987 гг. нр отражены и не всеми признаётся существование канальцев Геринга. Поэтому не ясно, которые из звеньев разрастаются при холеотазе, вмещая заотойную желчь, и как реагируют на холеотаз другие звенья.

Во-вторых, не ясен вопрос об источниках разрастания желчных ходов. В связи с этим оотаётся дискуссионным вопрос о метаплазии печёночных эплтелиев, а имеющиеся, пусть недостаточные, сведения о камбии самого холангиоцитарного эпителия в отечественной литературе не освещены вообще.

В-третьих, - это вопроо о налетай атипичных дуктулярных структур, описанных прп холестазо.

В-четвёртых, слабо изучены проявления дистрофических и нек-робиотических изменений холангиоцитарного эпителия.

В-пятых, не ясен вопроо об участии описанных ещё в конце прошлого века Герингом канальцев в процессе реактивных изменений печёночных эпителиев, т.к. эти канальцы в эксперименте не изучались.

Наконец, слабо изучена направленность реактивных изменений холангиоцитарного эпителия печени в динамике холестаза (от междольковнх желчных протоков к канальцам Геринга или наоборот).

Целью настоящей работы является изучение топографии а отроения терминальных звеньев желчного русла, а также структурной организации их холангиоцитарного эпителия у интактных организмов и в условиях эксперимента.

Задачи исследования:

- топографо - морфологическое описание терминальных звеньев желчного русла печени (междолъковых желчных протоков, дуктул в канальцев Геринга) и изучение специфики реактивных изыене;шй каждого из них в динамике холестаза;

- характеристика клеточного соотава холангиоцитарного эпителия желчных терминалей в норда и эксперименте;

- изучение гепатоцит - холангиоцитарных стыков как наиболее вероятных источников метаплазии эпителнев печени;

- морфологическая оценка атипичных (лишённых чёткого просвета) дуктулярных структур в норме и эксперименте);

- определение направленности реактивных изменений в терминальных желчных путях.

Научная новизна» Предпринятое впервые изучение отличительных морфологических свойств междольковых желчных протоков и дук-тул в норме и патологии, а также структуры канальцев Геринга при холестазе позволило осветить специфические особенности их реактивных изменений.

Впервые для изучения структуры и томографии холангиоцитов современные метода исследования применены в едином комплексе. Клетки исследовали методами световой и электронной микроскопии, микроскопии серий последовательных полутонких срезов, ыорфомет-рии на светооптическоы уровне, количественной гистоавторадиогра-фии, счёта количества клеток б динамике эксперимента. Полученные новые данные подтверждают прежние малоизвестные сведения некоторых зарубежных авторов, обнаруживших базальнне камбиальные клетки во многих однослойных эпителиях. Установлено, что такие низ-.спе клетки имеются в составе эпителия междольковых желчных протоков и дуктул (в дуктулах они обнаруживаются только при холестазе) . Представление о базальных холангиоцитах как о своеобразном камбии уточняет и развивает существующее ныне знание биологии и регенерации данного вида энтеродермального. эпителия, . сложившееся на основе фундаментальных трудов лаборатории Н.Г.Хлопи-на.

Изучение холангиоцитарного эпителия свидетельствует также о его глубокой детерминированности н биологической устойчивости б внешним воздействиям различной интенсивное!«, в связи о чей возникает вопроо о пересмотре распространённого в патоыорфологичэс-кой литературе мнения о наличия атипичных образований ! холангиоцитарного эпителия.

Теоретическое и практическое значение работы. Данные об отличительных особенностях строения терминальных звеньев желчного русла печени и о специфике их изменений при холэстазе могут быть попользованы в учебном процессе морфологических кафедр ВУЗ'ов, а также в науччых исследованиях строения и функции печёночных эпителиев. Результаты исследования могут быть использованы в качестве морфологических критериев при изучении патогенеза болезней печени и в патоморфологической практике. Поиск и количёственное изучение ба-зальных камбиальных клеток во всей холангиоцитарной выстилке, а так-ае в других однослойных эпителиях позволили бы охарактеризовать в сравнительном аспекте регенераторные потенции эпителиев.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены н обсуждены на Всероссийской научной гистологической конференции "Ре-актиЕность и регенерация тканей" (Л., BMA, 1990), на 807-ом заседании Ленинградского отделения научного общества анатомов, гистологов и эмбриологов (Л., ЛСП.51, 1991), на 34 и 35-ой научных конференциях студентов и аспирантов морфологических кафедр и лабораторий Санкт-Петербургских ВУЗ'ов и НИИ (СПб, BMA, 1991 п 1992), на Всероссийской научной гистологической конференции "Морфология ра-павожо процесса" (СПб, BMA, 1993), на Всероссийской научной гиото-«огаческсЗ конференции "Гистогенез п регенерация тканей" (СПб.БМА, 1995). йо тема диссертации опубликованы 7 научных работ, из которых 2 принята к печати.

Объём а структура диссертации. Диссертация изложена на IS4 страницах шшшопнсного текста и состоит из введения, 5 глав (обзор литературы, описание материала и методов исследования, 2 глава собственных данных,.обсуждение результатов), выводов и указателя литература, содераащэго 167 источников (43 отечественных и 124 иностранных). Иллвстрациа представлены 39 графиками, 8 таблицами н 46 рпсункаш!.

Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором.

Основные пол оденет, вннойнкыэ на защиту.

I. ХолангноцигарпыЗ эпителий в терминальной отделе гэлчного русла Bisjoie о элегзптамп соединительной тпапп образует стенку мез-дольковых гелчных протоков, моадолькоЕых (т.9. ннтрапорталышх), вокругдольковнх (т.о. пэржортальпнх) и вщгтрздольковнх аелчннх проточков (дуктул) п частично (вмэсте о гепатоцитакн) - аелчннх

канальцев (канальцев Геринга). Эпителий междольковых желчных протоков, а также дуктул в условиях холестаза содержит базальнда клетки, которые, по-видимому, являются камбиальными.

2. При экспериментальном холестазе в терминальном отделе желчного русла развиваются воспалительные изменения, направленные на создание дополнительных ёмкостей, вмещающих новые порции желчи в замкнутом пространстве. В общем, они проявляются разрастанием дуктул, гипертрофией и пролиферацией холангиоцитов, их водяночной дистрофией (точнее, обезвоживанием) и некробиозом. Холангиоциты желчных терминалей (как и гепатоциты в гепатоцит-холангиоцитарных стыках) во все периоды холестаза обнаруживают устойчивость в сохранении своей морфологической специфичности.

3. Для каждого звена терминального желчного русла характерна специфика реактивных изменений. Эпителий меадольковых желчных протоков вслед за непродолжительным периодом пролиферации, обнаруживает признаки гипертрофии, дистрофии и некробиоза холангиоци-тов. Дуктулы разрастаются на протяжении всего эксперимента. Их эпителий гипертрофируется и пролиферирует особенно интенсивно с 3-их по 14-е сутки холестаза. Холангиоциты канальцев Геринга на ранних сроках не изменены, затем гипертрофированы, а через 2 недели начинают делиться.

В механизме пролиферации холангиоцитарного эпителия участвуют базальные клетки.

МАТЕРИАЛ И МЕТОШ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалом для исследования служила печень беспородных белых крыс - самок массой 120 - 130 г. Животные были разделены на 4 группы. Первая группа (5 крыс) была контрольной. Вторая груша животных (25 крыв) была подопытной. Для получения экспериментального холестаза этим крысам накладывалась двойная лигатура г перерезался общий желчный проток. Животных декапитировали через 24 часа, а также на 5, 14, 30 и 45-е сутки эксперимента (по '5 крыс на срок). Третья группа животных (15 крыс), которым производилась ложная лапаротомия, служила дубль-контролем. Этих животных умерщвляли вместе о экспериментальными (по 3 крысы на срок).

Для выявления и исследования камбиальных клеток применялась количественная гисгоавторадиография пролиферирупцйх элементов холангиоцитарного эпителия печени. С этой целью у животных четвертой группы (70 крыс) вызывали внепечёночный холестаз (как и у крыс

второй группы) в изучали ях по 3 за сутки на протяжении двух педаль а 2 этапа. Оперированных на 1-ои этапе 42 крысы брали вопит через кавдые 8 часов. За I чао дг< этого однократно внутрибрютн-по крысам вводили нзотса ^-тимидин о активноотьп I микрокпри на I г веса по общепринятой методика. На втором этапе оперировали 28 крно (по ¿-к? в 3-иу животному да сутки) в те часы, когда, по .гдтши 1-го этапа опыта, течение клеток било «аксниалышм.

Кусочка печени фиксировала в 10% нейтральном з ad умеренной формалине и аздкооет Буэна. Применяли обзорную окраску пара-бановых срезов гекатоксплином-эозиноа. Контрастное окрашивание производили при помощи азанового иэтода (при это« отчётливо заявлялась адвентиция, холангиоциты окравивались слабо базофильно, а гепатоциты - в оранзово-гёлтый цвет).

Для уточнения структуры базальных холангиоцитов в эпителии сказанных поперечно дуктуд изучала кяеточнно границы з сериях посгэдовательных полутонках (одномикронных) срезов. Срезы окра-пиваяз по общепринятой гатодкко - глзтиленовш синий.

Для уточнения функций холангиоцитов, полико гаотозшторада-огрс&зя, производила окрашванпо клеток по гатоду oriaollus (дет того, т",обы отличить базальные (панЗиальныо?) клэтки от аргяро-Сзлышх эндокрнноцитоэ), иуцштргжшоу (дет определения олизтзтах пялггаопжй) и четырЗхскасьэ ccinvi (дш внявлэпия а холангиоцзтах пз защрогяшпп срезах вяявчонлЗ лппддоэ).

Дел злэктронноитросзоппческого изучешп кусочка печени Сзкхяровали в 2% глутаральдегаде, постфиксирозала а 1% растэоро чэгырЗхокаса ссыня по Канадцу я заливали в аралдит. Уяьтратсз-кгэ срази готовила па ультрато:гэ LKB-3, контрастировали о ура-шнэдэтатэ я просматривали па электронной микроскопе JRJ-7A.

3 работа учитывала только то тер^зпазьЕнэ згэнья, которого спрэ делилась па срезах з строго пеперзчнез езче за а шэла одет

«¿s3 дросеэт.

Количественный анализ. I - подсчитывала долэ еэздольксзпх соячиых протонов п дуптул (пэ tsjneo 100 подсчетов по каадсиу зз-лотпему); канальца Горзхга подечташаля з 10 произвольно выбргщ-гиз участках догоз sa агсуот среза 2,9 i™^ (уиеличешэ 630)? за гептролыша цп$ри условно прилгала колачостзо шнальцэз гг концу порпл суток сянта, тто связано с трудностью ах пдзнтЕфикацга з гзтгзтной почзпп. 2 - епрэделялз дола разновидностей хоаглгпеда-. ?сз з ->пнтздая гзддагькешх гэлчшсс щютезез п дуктуя» 3 - сиро-

- а -

деляли индексы меченых %-тимндаом типичных и базальных холан-гаоцятов.

Ыорфоцетрия. Определяли площадь поперечного сечения клеток п их ядерно-цатоплазгатичеокоа отношение. Учитывали типичные иба-зальные холангиоциты мэвдолъковых желчных протоков н дуктул, хо-лангиоциты дуктул, лишённых видимого просвета, а также холангиоциты и гепатоциты канальцев Геринга.

Площадь сечения типичных холангиоцитов иеадольковых келчных протоков и дуктул определяли по формуле площади части кольца. Площадь сечения базальных холангиоцитов, холангиоцятов дуктул, лишённых видимого просвета, холангиоцитов и гепатоцитов канальцев Геринга, а также площадь сечения ядер всех клеток вычисляли по формуле площади эллипса.

Для определения ядерно-цитоплазматического отношения измеряли величины ядер в связь между их малыми и большими диаметрами. Ядра о наиболее аагатным несоответствием большого и малого попе- . речных диаметров, определяемых графически, а такге слизком мэлкиэ ядра, "вырвавшиеся" из общего роя и принимаемые за "горбуше", были из дальнейших рассчётов исключены. Ядерно-цитоплазматическое отношение оценивали по сопоставлению площадей ядер и цитоплазмы.

Ошибку средней вычисляли по формуле

аХ

J р гр. + и 1-5* \ 5

где

- оиибка групповой средней, irp. - групповая дисперсия признака, SX - средняя индивидуальная дисперсия признака по каждому из пяти (или трёх) крыс в группе, 5 - количество крыс в группе.

Значимость различий определяли по критерии Стьвдента, вычисляемого по формуле M - Ыо

- -------1 " - - , где

Узх12 " Вх22

г- величина критерия; М^ - среднее арифметическое,, характеризующее признав в одной груше животных; ^ - среднее арифметическое, характеризующее признак в другой группе животных, - стандартная сшибка средней арифметической выборки одной группы животных; вх2 ~ стандартная ошибка средней арифметической другой группы крыс. Различие признаков считалось значимым при Р*0,05.

Исследование топографии и структуры звеньев терминального* гэлчяого' русла1 позволило уточнить их классификацию, предложенную соавтора;,та Шэндународной гистологической номенклатуры по печени (Bapti'irt* А. о соавт., 1983).

Нзгздольковнй аелчный проток - один (реже два), выстлан холан-гиоцитами (па поперечном срезе не менее 8 клеток) и округ8н ад-вентицлей. Он прилежит к меядольковым артериоле и венуле п тает самый крупный диаметр п сшлый широкий просвет 'из всех терминальных звеньев.

Мездольковый аелчный проточек (янтрапортальная дуктула) — первая ветвь протока (описан наш впервые; особенно зататен в крупных портальных трактах о развитой соединительной тканью). Он выстлан максимум 10' холангжшдтами (на поперечном срезе) л окрупЗн непрерывной адвентпцяей, прилепит только п одному из сосудов триады. Он тоет меньший, чем гаядольковый желчный проток, диататр я более узкий просвет.

Вокругдольковый желчный_проточек (перипортальная дуктула) -вторач ветвь протока. Он окрусЗп адвентшшей только оо стороны портального тракта.

Вяутридольковый пелчный проточек (плтралобуляряая дуктула) -третья ветвь протока. Он скружЗн прерывистой тончайгой адвентпцн-еЗ только в участках, пограничных с гемо капиллярам.

ЕелчныЗ каналец (каналец Герзпга) образован Г - 3 холангно-цатакп л I - 3 гсяатсцзткгз, сдругетзз обищй просвет.

ЯёлчныЗ капилляр - ультраиикроскопическое пространство, образованное билиарнкга поверхностями гепатоцитов.

В 0ТЯПЧП9 от stoinor J.3., Carruthera J.3. (I9SI),Daeao W.2. (ISSI), к терминальному яелчпс:,г7 руслу га относим но только внут-рздодысоЕкэ гэлчпые so ли, по п L-зздольковне желчные протоки. Это обусловлено тем, что ноги данные, развпЕазощпэ представления chrio-iofíaraoa Poulaea Н. (IS70), ПараЗ I.A. (1970), УлышовоЭ 3. В. о соавт. (1977) п др., позволяет думать о протоках но просто, о сгзгзтсм о дуктулгса звено, a лак сб ясточшпо дуктулярннх разрастаний.

~:ю тзг:-толста stoinor «ГЛ., Carrutbera J.3. (ISSI). "Serniaua" (лат.) - грспсцз. Тоггзшьшэ зиснья-граничщпэ с гзпагмскп^з.

В отличие от традиционного мнения об нзоиорфии холангиоцитар-ного эпителия, в междольковых желчных протоках и дуктулах мы выявили популяции типичных, базальных, многоядерных и дегенерирующих холангиоцитов. Дуктулы интактной печени были почтя полностью лишены баэальных элементов (рис. I).

Типичные холангиоциты - крупные, граничащие о поверхностью эпителии микровороинчатые клетки.

Базальные клетки на плоскости прежде была описаны во многих однослойных епителиях. Их видели в ходангиоцитарной выстилке терминального желчного русла (Stelnar J.»., Carruthara J.е., I961), в эпителии желчного пузыря (Badar о., 1965 в др.),в епителии выводных протоков поджелудочной хелевы (кговраоЪаг в., 1924), в почечном эпителии. Авторы пишут о простоте их структурной организации в предполагают, а иные - утверждает, что она являются камбиальными. Таким образом, эти клетки исследовались только «а рубежом в начала в оередине века. В настоящее время о них «вбили, оставив непрора -ботаиными многие вопроси кх топографии, структуры в функции.

По вашим данным, базальные холанги<"аты образуют в 9 пи те лил нижний клеточный ряд в часто располагаются в своеобразной нише, образованной базальиой меиЗ раной, в прилежат в сосудам михроциркули-0X2. По ультраструктуре многие вз ихх отличаются низкой дшЮерев-цврованноотью. Таюш образом, популяция базальта клеток гетеро-ыорфна. Самые мелкие, малодифференцированные - низкие базальные -в серии полутонках срезов во всех плоскостях оечелия располагались под типичными. Более крупные, дифференцированные - высокие баааль-вые - в части среаов сообщалась о поверхностью епвтелия. При холэ-стазе (в пик пролиферации апигелия протоков в дуктул) среда бе-зальных матов наблюдалось много интоаов, втв клетки также отличали оь повшейным жидевоом мечеивя ^Н-твиидвиоы, е значит, и более мнтенсивяоВ пролиферацией, чем типичные клетки (рис. 2). По давши световой морфоиетржи, в в контроле, в при холвстаае pasuep базаль-» них китов бил почти вдвое кхжа, а ядерио-цитамааматвческое отяо-аение - почти вдвое выве, чем у типичных (рис. 3). Количество б*-вальных клеток в пик пролиферации протокового в хукту .тарного епв-гелия (I - Б-e в 3 - 14-о сутки холеотаза соответственно) бидо са-кгтм высоким в сравнении о контролем в отдалЕниши сроками ашгеь (см. рио. I).

Итак, впервые предпринятое целенаправленное иссхадова&вв (Завальных ходангиоцитоэ комплексом методов позволяют думать о шп:,

как о локализованном камбии данного эпителия.

Многоядернне холангиоцитн, кроме количества ядер п более круп-пых размеров, ничем не отличались от типичных. Увеличение их численности в пик пролиферации эпителия, безусловно, отражает усиление ого внутриклеточной регенерации.

Дегенерирующие холангиоцитн в пелчннх тершшалях прежде были списаны только при холостазо. Мы наблюдали их п в интактной печени. Эта клетки даолн много прозрачных везикул в цитоплазм, не воспри-ппмавдих красок на муцшш п аир, часто тлели тйшгыо ядрапцптсплаз-му, выбухаодую в просвет хода. Дистрофия эпителия вряд ля, однако, связана с набуханием клеток, пак считает О.Я.Картаиова (1971). ТТо нашим данным, принимаемое за набухание увеличение ра£лераз холетгно-цптов при холестаза вызвано гипертрофией я гиперплазией ор^анелл пязнеспособных клеток, что отражает но дистрофические, а кошенса-торпо-приспособительныэ пзглнення эштелпя в ответ на заотоЗ яелчп. Дистрофия .те проявляется, в основной, ростом члслэпностя догонерз-руаддх клеток, которые торявт плеточную влагу, темнеют н потончалт-ся, прорастают гзлчными капиллярами п слуцпваэтся в просвет зля рассасываются в базальном ряду эпителия.

Учпт изменений плеточного состава, данных гпотоавторадпогрсфяп .холангзоцптарного зшиолпя з звеньях терминального галчного русла, структура которых ваш уточнена, подчеркивает сдещфзяу их воспагэ-ния прп холестазе.

Для тканей ¿зздольковях -элчшд протоков характерны 3 этапа -стартовый пик пролгфэращш п гшертрсфзя холангяоцзтоз, стабилизация щяишфзрацшх п нарастание дистрофических л Еэпробпотпчеокях нз-1ЭНОШЙ в знп то лип.

D пгз пролпферащш (о I - х по 5 - о сутет) резко увзлпчзваяксь чзслзнноств базальпш: плотен (см. рпо. I), пндоко ютзнпя тшя-jt^icm (c"j. рло. 2) п ядерно-цитоллазттпчоскоа отнозеше (см. рпс.3)

Э: я-зрзодо парасгшпи дистрофических л нэкробнотпчоскпх из1~га-'EZ3 ЭП2Т0ЛЗХ (о 15-2 ПО 45-0 оуткп) многие ГЛЭЗДОЛЬКОВКЭ ПЭЛЧПКЭ гг/отопа бшп разрупопн в результата досква'лаяпи эпителия а сладопш c™3ncíi • В эпителии осташпхся протоков тпппчшлэ холангиоцитн : были розко уплодмш п обезвогэяц, т.о. находились з погранично:* о даст-pcrfaeS состоянии, что' было особенно загатно в сравнении о гглертро-Гнровашшм эпнтолзоа.дуктуляршсс' разраскзтаЗ. Болсэ чем па чэт-взрть эпителий состоял из дэголзрщщщях л расаадэдлхся златой. *

Для тканей дуктул, в отличие от протоков, характерен процесс непрерывного новообразования. Разрастется, прежде всего, интра-и перинорталыше дуктулы, замещающие собой гепатоциты от периферии долек к центру.

Источником дуктулярных-разрастаний можно считать междольковые желчные протоки в связи со следующими наблюдениями. В интактной печени протоковый эпителий отличался содержанием базальных камбиальных клеток, в отличие от дуктул (см. рис. I). Клетки протоко-вого эпителия, по данным цитоморфометрии, характеризовались более низкой дифферешщрованностью, чей в дуктулах (см. рис. 3). Стартовый пик пролиферации холангиоцитов наблюдался именно в эшивлии протоков, тогда как дуктулярные клетки отличались отсроченной пролиферацией (см. рис. 2). Первичное увеличение численности дуктул наблюдалось именно вблизи междольковых желчных протоков.

Источником дуктулярных разрастаний являются и сами новообразованные дуктулы'по мере их появления. Об этом свидетельствуют следующие наблюдения. На фоне не прекращающегося разрастания дуктул на отдалённых сроках холестаза исчезает большинство протоков, а в эпителии сохранившихся протоков наблюдаются выраженные дасгрофичвс-кие и некробиотические изменения. Высокая численность базальных клеток (сы. рис. I) и высокая митотическая активность базальных и типичных холангиоцитов дуктул (сы. рис. 2) сохраняются во время затухания пролиферации протоковых клеток. Типичные и базальные клетки дуктулярного эпителия на протяжении всего эксперимента сохраняют морфометрические особенности как. наименее дифференцированные (см. рис. 3), в то время как клетки дистрофически изменённого эпителия протоков через месяц и более выражали признаки более диф-' ференвдрованных.

Конкретным источником дуктулярных разрастаний, по-видимому, является локализованный камЗий - базальные холангиоциты, имещиеся изначально в маадольковых желчных цротоках и появлящиеся при холе стазе в новообразованных дуктулах. Очевидно, как сйедуетиз схемы, составленной по данным микроскопии образующихся дуктул (рис. 4), вначале из базал^ной клетки (А.,Б) формируется регенераторная почка (В), между клетками которой образуется просвет (Г). Возможно также, что первоначально над баэальной клеткой появляется микропросвет (Д), вокруг которого происходит пролиферация базальных элементов (Б), приводящая к расширению просвета я появлению дочер-. ней дуктулы (Ж). .

В канальцах Геринга воспалительным изменениям подвергаются, в основном, холангиоциты. В динамике холестаза эти измэненин этапнн. На ранних сроках холангиоциты не изменены,затем гипертрофированы, в отдалённый период - пролиферируют.

Данные микроскопии и морфоютрии (рис. 5) стыкующихся холангиоцитов и гепатоцитов в стенке канальцев Геринга и в участках инт-ралобулярных дуктул, лишённых адвентицив, свидетельствуют о высокой степени различия в структуре холангиоцитов и Гепатоцитов ннтактной п холестатической печени, об отсутствии переходных клеточных фора, а значит, и об отсутствии метаплазии гепатоцитов. Наличие отдельных холангиоцитов в печёночных балках (ключевой аргумент сторонников штаплаэии - з!г1оа а., ШИаав т., 1992 и др.) на означает мэа-клеточную (гепатоцнт-холавгпоцитарнув) трансформацию, а ознетает, что их наблпдалп в составе шлоизвэстшх канальцев Геринга - облн-гатных терминальных звеньев пнтактной и холестатпческой печони. Количество гэ этих канальцев в хода развитая холестаза заметно снпаа-отся, замещаясь дуктулярнши разрастаниями, что по наблюдалось бы в случае штаплазии гепатоцитов.

Против стеши о гепатоцпт-холаягаоцятаряоЗ кэтаплазш свидетельству!^' тага» дапнкз световой, элонтрсняоЗ гзяросяошш я гюрфокэт-рзз дуктул, лишённых ззданого просвета, поторно шогсо считают ати-Ш1ЧШ2Ш. Вопреки, ЩПршэр, ЩЭНИЮ Накапиаа и. ^ О^а 0.(1986), считавших таксе дузтулн щюявлотгаи штаплазш, яаля дашшэ дскагнвая? здэнтпчность структуры хояангноцнтсз всех новообразованных дуктул (табл. I).

Таблица I

Морфогэ трнчо сзая характеристика холаптоцзтсо дуктул ш тридцатка сутки холестаза.3

Объект гззрфойэтрпз Тешпнкэ холангиоциты

Изучаошэ структура дупгулн о чЗт-из.! просзотсм атшшчшкз дуктулз

Площадь сочбшя (кзц2) 61,20 ± 1,71 57,31 ± 4,30

Ядерно-пдтошгазккшсэ отпссэппэ 1,69 ± 0,03 1,71 ± 0,24

3 Различи.': ссаоотавляотлпс срэддзх пэдостоворзо (Р>0,05).

Итак, ни наше целенеправленное исследование гепатоцит-холан-гиоцитарных стыков, ни данные других морфологических исследований печени, вопреки мнению зарубежных авторов,* не позволяют думать, что дуктулярные разрастания появляются в результате мэтаплазии соседних гепатоцитов.

Таким образом, неизоморфный холангиоцитарный эпителий в терминальном отдела желчного русла характеризуется устойчивыми и специфическими дня данной ткани морфологическими и биологическими особенностями, а также реактивностью, отличными от гепатоцитарной ткани, что подтверждает и развивает классическое представление Н. Г. Хдоаина о раннем дивергентном гистогенезе эпителиев печени как в фило-, так н в онтогенезе позвоночных (Хлошш Н.Г., 1946).

* Butrón U.M. о соавт. (1984), Hakamuaa И,,«»'«. '<19863 а др. думают, что обнаружение отдельных биохимических гаркёрав хоэшйгао-цптов в гепатоцитах может означать, как да .начальную (функциональную) фазу мэтаплазии эпителиев.

о/ _

......................... типичные холангиоциты

Рисунса I. Егшпосгсепнш гелзшнпя популяций холангпоцитов з данаизшэ затасгаза. А - пзнзпонпя клэточнсго состава эпителия ■шздольковнх сазгетге проток оз.

% типичные холангиодаты

базальныа холангиоциты

Риоунок I. Количественнно изменения популяций холангиоцитов в динамике холестаза. Б - изменения клеточного состава эпителия дуктул.

Рисунск 2. Изменение шдекса метания базальных и типичных холапгиоцптов междольковнх желчных протоков (А) и дуктул (Б) в динамике холестаза. Звездочкой отмэченн статистически значимые различия шжду этика клетками (р<0,05).

типичные холангиоциты протоков базальные холангиоциты протоков

Рисунок 3. Изшнешш корфоыэтрических показателей типичных Лазашшх холангаодатов ьэддольковых селчных протоков п дук-I. А - изменения площадей! поперечного сзчешш.

и«., тапгпшо холангдоцнти протоков

— баааяьнкэ холангаоцнты протоков

i » » » 11 » ..........>

0 10 14 СО оутеа 46

Рпсупоз 3. HaiszercM иэрфеатрячэспгг показатэлоЗ тешпшос п багоапнх голздгпсютоа г^адольяог:гх газлчшп протоков п дув-тул» 3 - т;~п2.т:я шзрзонсхтоасм^тачаскиз отцоеэшй.

Рлсуноз 4. ГшогатетзсглЕ охвш новообразования дуктул путЗн дэлвщя п двфферэнцировкЕ

йапгльшпс ттангнодЕтаз (объяснение d тексте).

Ш12 230"

280" 230200'

60-1 40

кзпгчинэ холеншоцзтн дуктул

холангаоцнтц канальцзз Геркнга - топатоцзгн панальцэз Гаранта

20-1 ----

—■ |„ | .

О I

14

50 оутгл 45

сутки 45

Рисунок б. Нзкэненця иср$о:зтрпческлх показателей холангио-цятов дуктул, холангаопзтоз и гепатоцатов канальцев Геринга в динашкэ холестаза. А- пловддн сэчешг. Б- ядзрно-цитошшзиати-часкне отнопения, ф - различия кэлду параметрами клеток по вертикали достоверны (р<0,05).

ВЫВОДЫ

1. Терминальное желчное русло печени нредотавлоно: а) мвя-дсмьковыми желчными протоками, б) мождольковнми (кнтрапортальтами) , в) вокругдольковыми (перипортальшши) и г) внутридольковн-ми желчными проточками (дуктулами), х) желчными канальцами (канальцами Геринга) и е) желчными капиллярами.

2. Холангиоцитарный епитолив терминального желчного русла состоит из типичних, низких н высоких баэальинх, многоядерных ж дегенерирущкх клеток. Базальные клева характеризуются структурой и свойствами камбиальных элемэнтов.

3. При внепечбночноы холе стазе в тканях терминального езлч-ного русла развиваются воспалительные изменений, проявляющиеся, : общем: а) пролиферацией холангиоцитов н соединительнотканных кое ток, разрастанием дуктул, б) гипертрофией холангиоцитов, в) дистрофическими и некробиотическими изменениями эпителия.

4. Дуктулярные разрастания обусловлены пролиферацией базаль ных и типичных холангиоцитов междольковых селчннх протоков (на ранних сроках холеотааа) н холангиоцитов сашх новообразованных дуктул.

5. Холангиоцитарный епителнЗ на поздних сроках холостоаа претерпевает водяночную дистрофию, внрагащуюся ростоа числон-кости дагенерирующих клеток.

6. Воспаление тканей терминального хэлчного р} ела и шгатш их холангиоци тарной внстллки выэет цаитролобулщжую направяэн-нооть (от мэядольковых келчных протоков к селчнш -.сапшгляраи).

7. "Атщ]"'шые" дуктулы, лишённые видимого просвета и наблюдаемые как в интаятной, так и в хоитвстатической печеьи, являются обычными дуктулярными структурами, среэанныш касательно.

6. Канальцы Геринга, как наиболее терминальные н уникальнш звенья, характеризуются отсроченностью и 8тайностью изюпоннй, касающихся, в основной, только холангвоцитсо.

9. Полученные новые вкспертлонтальныэ даннкэ об устойчивое тканевой специфич ости холангиоцитарного эпителия терашнального желчного русла подтверждают и развивают влассячаскее прэдотос-лелие Н.Г.Хлопина о раннем дивергентной гнетогеновз гепатоцнтар-ного и холангиоцатарного ешталиев почзпп в §ило- н онтогокэзо позвоночных.

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Дробленков A.B. (В соавт. с ВвриншВ.К.). Сравнительный анализ реактивных изменений и регенерации гепато- и холангиоци-тарного эпителиев печени млекопитающих // Тезисы 10-й науч. конференции "Реактивность и регенерация тканей". Л.: изд-во BMA,

1990. -43.13.

2. Дробленков A.B. Морфометрическое исследование холангио-цитов печени интактных крыс и при экспериментальном холестазе // Тезьеы ХХХ1У конференции студентов и аспирантов морфологических кафедр и лабораторий Ленинградских ВУЗ'ов и НИИ. -Л.: изд-во BUA,

1991. -C.H-I2.

3. Дробленков A.B. К вопросу об источниках дуктулярной гиперплазии при холестазах // Тезисы ХХХУ конференции студентов и аспирантов морфологических кафэдр и лабораторий Санкт-Петербургских ВУЗ'ов и НИИ. -СПб.: изд-во BMA, 1992. -С.14.

4. Дробленков A.B. Особенности гистотопографии и морфологии терминальных звеньев внутршечйночного желчного русла крыс // Тезисы ХЛУП конференции студентов и аспирантов морфологических кафедр и лабораторий Санкт-Петербургских ВУЗ'ов и НИИ. -СПб.: изд-во ВЫА, 1994. -<З.Г7.

5. Дробленков A.B. Назальные холангиоциты и их роль в регенерации желчных проточков печени // Тезисы научн. конференции, поев, памяти А.А.Клишова "Гистогенез и регенерация тканей".-СПб.: йзд-во BMA, 1995. -<3.69-70.

6. Дробленков A.B. Гиперплазия дуктул при экспериментальном холе стазе / Ред. проф. В.А,Горшков. Сб. науч. трудов СПбША. В печати.

7. Дробленков A.B. Структура терминального желчного русла печени и дуктулярная гиперплазия // Морфология. -СПб. В печати.