Сравнительное фармакогностическое исследование крушины ломкой и крушины слабительной

Шмыгарева, Анна Анатольевна

Диссертации по медицине → Фармацевтическая химия, фармакогнозия

Автореферат и диссертация по медицине (14.04.02) на тему:Сравнительное фармакогностическое исследование крушины ломкой и крушины слабительной

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Шмыгарева, Анна Анатольевна Самара 2012 г.

Ученая степень: кандидата фармацевтических наук

ВАК РФ: 14.04.02

Автореферат диссертации по медицине на тему Сравнительное фармакогностическое исследование крушины ломкой и крушины слабительной

На правах рукописи

Шмыгарева Анна Анатольевна

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КРУШИНЫ ЛОМКОЙ И КРУШИНЫ СЛАБИТЕЛЬНОЙ

14.04.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

1 1 О KT. 2012

Самара-2012

005053034

Диссертационная работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель:

Кур кип Владимир Александрович - доктор фармацевтических наук, профессор

Официальные оппоненты:

Киселева Татьяна Леонидовна - профессор кафедры фармакогнозии Государственною бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М.Сеченова» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации, доктор фармацевтических наук, профессор

Буланова Анджела Владимировна - профессор кафедры физической химии и хроматографии Федерального бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Самарский государственный университет», доктор химических наук, профессор

Ведущая организация:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Защита состоится «ОЛ » ноября 2012 г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 208.085.06 при Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по адресу: 443079, г. Самара, пр. К.Маркса, 165 Б.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (г. Самара, ул. Арцыбушевская, 171).

Автореферат разослан «Л » 09 2012 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат фармацевтических наук,

доцент

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время интерес к лекарственным средствам на основе растительного сырья по-прежнему велик, причем в Государственном реестре лекарственных средств Российской Федерации наблюдается тенденция к увеличению удельного веса препаратов растительного происхождения (Самылина И.А., 2006; Киселева Т.Л., 2010; Куркин В.А., 2007). На отечественном фармацевтическом рынке группа слабительных лекарственных средств в основном представлена препаратами на основе сырья сенны или кассии. Что же касается зарегистрированной в РФ номенклатуры препаратов крушины ломкой и крушины слабительной (жостера слабительного), то она хотя и разнообразна («Рамнил», «Викаир», «Викапин», «Сироп крушины», «Холагол», «Желудочный сбор № 3», «Проктофитол», фиточай «Целебная поляна № 3» для похудения и др.), однако ее реальный ассортимент в аптечных организациях представлен в основном сырьем коры крушины ломкой и плодами жостера слабительного.

Одной из важнейших предпосылок создания лекарственных препаратов на основе коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного является необходимость глубокоего изучения химического состава, а также совершенствования методов стандартизации. Дело в том, что литературные данные относительно химического состава коры крушины ломкой не лишены противоречивости. Кроме того, фитохимические аспекты показателей качества сырья крушины ломкой и жостера слабительного также нуждаются в дальнейшем изучении. Так, раздел «Качественные реакции» в фармакопейной статье (ФС) «Кора крушины ломкой» (Государственная фармакопея СССР XI издания) включает только пробирочные реакции, хотя в этом плане перспективным методом является тонкослойная хроматография (ТСХ). Методика количественного определения суммы антраценпроизводных в коре крушины является многостадийной, включает такие стадии, как кислотный гидролиз, многократную экстракцию сырья, обработку диэтиловым эфиром -легкокипящим огнеопасным растворителем. При этом расчет содержания суммы производных антрацена осуществляется на отсутствующий в сырье истизин, причем с использованием построения калибровочного графика раствора кобальта хлорида. Что же касается плодов жостера слабительного, то в разделе «Качественные реакции» ФС представлены лишь пробирочные реакции, при этом раздел «Количественное определение» отсутствует. Актуальна также задача по изучению коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного в сравнительном плане.

Решение проблемы совершенствования химической стандартизации новых лекарственных средств (ЛС) связано с разработкой объективных и унифицированных методов анализа сырья и препаратов, причем с использованием стандартных образцов (Арзамасцев А.П. и др., 2000; Самылина И.А. и др., 1994; 2006).

Цель и задачи исследования. Сравнительное фармакогностическое исследование коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного в плане совершенствования методов стандартизации сырья данных растений.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Сравнительное изучение химического состава коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного.

2. Разработка новых подходов к стандартизации сырья коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного.

3. Сравнительное исследование анатомо-гистологических признаков коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного для уточнения диагностических особенностей данного лекарственного растительного сырья.

4. Разработка методик качественного анализа коры крушины ломкой.

5. Разработка методик качественного анализа плодов жостера слабительного.

6. Разработка методики количественного определения суммы антрацен-производных в коре крушины ломкой.

7. Разработка методики количественного определения суммы антрацен-производных в плодах жостера слабительного.

8. Разработка и оформление проектов нормативной документации (НД) на сырье «Крушины ломкой кора» и «Жостера слабительного плоды».

Научная новизна. В результате изучения химического состава коры крушины ломкой (Frangula alnus Mill.) и плодов жостера слабительного (Rhamnus cathartica L.) выделены и идентифицированы с использованием УФ-, 'Н-ЯМР-, ИК-спектроскопии и масс-спектрометрии, а также результатов химических превращений 5 индивидуальных соединений, среди которых доминирующие антраценпроизводные вещества (франгулин А и франгулин В) и флавоноидное вещество (З-О-рутинозид рамнетина) впервые описаны в РФ для данных растений. Показана целесообразность проведения стандартизации сырья коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного по антраценпроизводным (ведущая группа БДС) с использованием стандартного образца франгулина А.

Разработаны подходы к стандартизации, заключающиеся в обнаружении диагностического доминирующего антраценпроизводного - франгулина А в коре крушины ломкой и доминирующего флавоноида - З-О-рутинозида рамнетина в плодах жостера слабительного с использованием ТСХ-анализа, УФ-спектроскопии.

Практическая значимость. Разработаны методики качественного анализа коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного с использованием ТСХ и УФ-спектроскопии. Разработана методика количественного определения суммы антраценпроизводных в коре крушины ломкой с использованием спектрофотометрии (аналитическая длина волны - 524 нм) и методического подхода, исключающего такие стадии, как кислотный гидролиз, многократную экстракцию сырья, обработку диэтиловым эфиром, построение калибровочного графика раствора кобальта хлорида. Разработана методика количественного определения суммы антраценпроизводных в плодах жостера слабительного.

В проекты ФС «Крушины ломкой кора» и «Жостера слабительного плоды» предложено ввести новые разделы «Качественные реакции» и «Количественное определение» и числовые показатели «Содержание суммы антраценпроизводных не менее 5,0%» для коры крушины и «Содержание суммы антраценпроизводных не менее 2,5%» для плодов жостера.

Разработаны проекты ФСП «Крушины ломкой кора» и «Жостера слабительного плоды», которые рекомендованы для включения в Государственную Фармакопею Российской Федерации XII издания.

Результаты исследований используются в научных изысканиях и в учебном процессе на кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Самарского государственного медицинского университета (акты внедрения от 07.09.2012 г.). Получено рационализаторское предложение «Методика количественного определения суммы антраценпроизводных в лекарственном растительном сырье — плодах жостера слабительного» (2012 г.).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Результаты анатомо-гистологического исследования коры крушины ломкой.

2. Результаты анатомо-гистологического исследования плодов жостера слабительного.

3. Результаты сравнительного изучения химического состава коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного.

4. Результаты исследований по разработке подходов к стандартизации ЛРС - коры крушины ломкой, плодов жостера слабительного.

5. Методики качественного анализа ЛРС «Крушины ломкой кора» с использованием PCO франгулина А, ТСХ, спектрофотометрии и ВЭЖХ.

6. Методики качественного анализа ЛРС «Жостера слабительного плоды» с использованием PCO франгулина А, ТСХ, спектрофотометрии и ВЭЖХ.

7. Методики количественного определения антраценпроизводных ЛРС «Крушины ломкой кора» с использованием спектрофотометрии и стандартного образца франгулина А.

8. Методики количественного определения антраценпроизводных в ЛРС «Жостера слабительного плоды» с использованием спектрофотометрии и стандартного образца франгулина А.

Связь задач исследования с планами научных работ. Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по темам: «Комплексные исследования по проблеме создания новых лекарственных препаратов природного и синтетического происхождения» (№ Государственной регистрации 01200900658) и «Фармакогностическое и химико-фармацевтическое исследование лекарственных растений и фитопрепаратов (№ Государственной регистрации 01200405620), а также соответствует тематике Проблемной комиссии по химико-фармацевтическим наукам

Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.

Апробация работы и публикации. Материалы работы доложены и обсуждены на 4-ой Всероссийской с международным участием научно-методической конференции «Фармобразование 2010» («Научные основы создания новых лекарственных средств», Воронеж, 2010); на межвузовской конференции «Аспирантские чтения» (Самара, 2010, 2011, гг.); на Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 75-летию со дня рождения В.В. Кормачева «Современные проблемы химической науки и образования» (Чебоксары, 2012); на II Международном конгрессе «Физическое и духовное здоровье: традиции и инновации» (Москва, 2012).

Основное содержание диссертации опубликовано в 12 научных работах, из них 6 статей в журналах, рекомендуемых ВАК РФ.

Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 148 страницах машинописного текста, содержит 18 таблиц, 38 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, пяти глав, отражающих результаты собственных экспериментальных исследований, их обсуждение, общих выводов, приложения и списка литературы, включающего 138 источников, из которых 48 на иностранных языках.

Во введении обоснована актуальность темы, сформулированы цель и задачи исследования, отмечена новизна и практическая значимость полученных результатов, а также изложены положения, выносимые на защиту. Глава 1 содержит аналитический обзор отечественной и зарубежной литературы по современному состоянию исследований крушины ломкой и жостера слабительного, в котором обобщены и систематизированы сведения по изучению химического состава растения, фармакологической активности, применению в медицинской практике. В главе 2 представлены характеристика объектов и методов исследования. Приведены методики химического, физического и физико-химического изучения лекарственного сырья и индивидуальных веществ. В главе 3 обсуждаются результаты сравнительного анатомо-морфологического исследования коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного. В главе 4 приведены результаты сравнительного химического исследования коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного. В главе 5 рассматриваются результаты сравнительного исследования компонентного состава коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии. В главе 6 приводятся результаты исследования методов по совершенствованию методов стандартизации коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного. В главе 7 представлены результаты исследований по разработке проектов нормативной документации на сырье «Крушины ломкой кора» и «Жостера слабительного плоды».

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

1. Сравнительное анатомо-морфологическое исследование коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного

Исследования морфолого-анатомического строения изучаемого сырья (рис. 1- 4) проводили с использованием цифрового микроскопа МоНс БМШ (с кратностью увеличения 4x10; 10x10; 40x10; 100x10) и цифрового стереоскопического микроскопа Мои с ОМ-39С-Кт9СтО-А (возможность увеличения; х20; х40). Приготовление микропрепаратов проводили в соответствии с ГФ СССР XI издания.

Рис. 1. Поперечный срез двухлетнего побега Рис. 2. Схизогенное вместилище

крушины ломкой (х40) в первичной коре стебля крушины ломкой

(окраска раствором сернокислого анилина) (х400)

Обозначения:

I - покровные ткани;

II -ткани первичной коры;

III - ткани вторичной коры (луб);

IV - древесина;

V -сердцевина;

Обозначения:

1 - клетки паренхимы;

2 — выстилающие клетки вместилища;

3 - полость;

4 - первичные механические волокна.

1 - пробка;

2 - колленхима;

3 - слизесодержащие вместилища

в паренхиме первичной коры;

4 - мягкий луб;

5 - первичные волокнистые пучки;

6 - сосуды древесины;

7 — слизесодержащее вместилище

в паренхиме сердцевины.

Микроскопическое исследование коры крушины (рис. 1 и 2) позволило выявить диагностические признаки сырья, заключающиеся в наличии темно-красного широкого слоя пробки; пластинчатой колленхимы; паренхимы, состоящей из овальных клеток и содержащей большое количество друз оксалата кальция. Характерны слизесодержащие вместилища в паренхиме первичной коры; одно-, двух-, трехрядные изогнутые сердцевинные лучи с желтым содержимым; мягкий луб; первичные волокнистые пучки; сосуды древесины; группы желтоватых одревесневших лубяных волокон с толстыми стенками, окруженными кристаллоносной обкладкой; слизесодержащее вместилище в паренхиме сердцевины.

Рис. 3. Поперечный срез двухлетнего побега жостера слабительного (х 40)

Рис. 4. Поперечный срез коры жостера слабительного (хЮО)

Обозначения:

I - покровные ткани;

II -ткани первичной коры;

III - ткани вторичной коры (луб);

IV - древесина;

V - сердцевина;

Обозначения:

1 - фрагмент чечевички;

2 - пробка;

3 - колленхима;

4 - первичные механические волокна;

5 - луб.

1 - пробка;

2 — колленхима;

3 - первичные волокнистые пучки;

4 - разрывы паренхимы первичной коры;

5 - твердый луб;

6 - сосуды;

7 - древесина;

8 - клетка сердцевины.

Основной диагностический признак, отличающий кору крушины ломкой (рис. I и 2) от коры жостера слабительного (рис. 3 и 4), - наличие слизесодержащих вместилищ в паренхиме первичной коры только у крушины ломкой. Необходимо отметить, что указанный диагностический признак отсутствует в ФС № 2. С целью усовершенствования раздела «Микроскопия» в ФС на плоды жостера слабительного проводились сравнительные исследования их анатомии и гистологии с плодами крушины ломкой. Важно подчеркнуть, что плоды крушины являются примесью к плодам жостера, при этом морфологически имеют схожее строение, не позволяющее отличить их на макроскопическом уровне. Были подтверждены имеющиеся в тексте ФС анатомические и гистологические признаки плодов, заключающиеся в особенностях строения экзо- и мезокарпия, а также особенностях строения кожуры семени (рис. 5 и 6).

Из-за особенностей морфологии плода плодоножка остается на нем. В большинстве случаев она попадает в сырье, ввиду чего является постоянным компонентом сырья и может быть использована для его диагностики.

Необходимо отметить тот факт, что особенности анатомии плодоножки ранее не использовались в диагностике изучаемых нами видов. Поперечные срезы плодоножек неоднородны, нами в анализе плодоножки использованы срезы апикальной и базальной части. При первичном рассмотрении общей картины поперечный срез плодоножки жостера имеет строго округлую форму, а у крушины он неравномерно-ребристый. Отличительным признаком являются также особенности гистологии первичной коры. Особенности заключаются в наличии пигмента красно-фиолетового цвета в клетках паренхимы плодоножек жостера на фоне отсутствия такового у крушины. Паренхима

Рис. 5. Поперечный срез плодя жостера слабительного (х40)

Рис. 6. Поперечный срез плода крушины ломкой (х-Ю)

плодоножек крушины в свою очередь отличается от жостера наличием слизесодержащих вместилищ (рис. 7 и 8).

По результатам проведенных исследований нами выявлены отличительные особенности плодов жостера от плодов близкородственного вида крушины ломкой, а также усовершенствован раздел «Микроскопия» в ФС на плоды жостера.

2. Сравнительное исследование химического состава коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного

2.1. Фитохимическое исследование лекарственного растительного сырья коры крушины ломкой

В результате изучения химического состава коры крушины ломкой выделены и идентифицированы 3 индивидуальных соединения, относящиеся к антраценпроизводным, среди которых впервые в Российской Федерации выделены франгулин А и франгулин В (табл. 1).

Для установления структуры выделенных веществ использованы данные ТСХ-анализа, УФ-, 'Н-ЯМР-спектров, масс-спектрометрии, ИК-спектрометрии, результаты химических превращений, а также непосредственное сравнение с достоверными образцами веществ. В частности, в 'Н-ЯМР-спектре франгулина А (1) обнаруживаются два однопротонных синглетных сигнала при 11.85 и 12.00 м.д., принадлежащих 5-ОН—и 8-ОН группам (рис. 9), что свидетельствует о присоединении рамнозы к 6-ОН-группе франгула-эмодина (3). Наличие рамнозы в молекуле франгулина А подтверждается результатами кислотного гидролиза, а также характерным трехпротонным дублетным сигналом 'Н-ЯМР спектре с 3 = 6 Гц при 1.14 м.д. (СНз рамнозы) и уширенным синглетом при 5.60 м.д. (Н-11 рамнопиранозы).

Рис. 7. Поперечный срез плодоножки жостера слабительного (х100)

Рис. 8. Поперечный срез плодоножки крушины ломкой (х100)

Таблица 1

Физико-химические константы веществ, выделенных из коры крушины ломкой

№ Название, химическая формула Состав М+ Т.пл.,°С ^•тах(ЕЮН), НМ

1. Франгулин А он о он «1 А А1 н3с 11 II Лз но^^^Ууу^сНз он С21Н20О9 270 (М+ агли-кона) 227-230 225, 262, 285, ЗООпл, 434

2. Франгулин В он о он ^Лгуу-снз нон2с он С20Н1 кОс) 270 (М+ агли-кона) 184-187 224, 263, 285, ЗООпл, 434

3. Эмодин он о он АЛ но у у т сн, 5 о С15Н10О5 270 254-255 222, 250, 268, 290, 439, 461

Рис. 9. 'Н-ЯМР-спектр франгулина А в дейтернровапном ДМСО

2.2. Фитохимическое исследование лекарственного растительного сырья плодов жостера слабительного

В результате изучения химического состава плодов жостера слабительного выделены 3 индивидуальные вещества, относящиеся к антраценпроизводным (франгулин А, 1-О-Р-О-глюкопиранозид эмодина) и флавоноидам (З-О-рутинозид рамнетина) (табл. 2).

Для установления структуры выделенных веществ использованы данные ТСХ-анализа, УФ-, 'Н-ЯМР-спектров, результаты химических превращений, а также непосредственное сравнение с достоверными образцами веществ.

Таблица 2

Физико-химические константы веществ, выделенных из плодов жостера слабительного

№ Название, химическая формула Состав М+ Т.пл.,°С ^-тах(ЕЮН), НМ

1. Франгулин А ОН О он 'А А X1 'ММГТ н3с 11 II Ь но^^лгуу-снз он С21Н20О9 270 (М+ агли-кона) 227-230 225, 262, 285, ЗООпл, 434

2. З-О-рутинозид рамнетина он А/ОН сн} о ^о^у.! Г I О- С1с—О— К11Л ОНО С28Н32О16 318 (М+ агли-кона) 193-195 264, 272 пл. 368 нм

3. 1 -О-р-О-глюкопиранозид эмодина ОН О О—С1с А Л1 1ММГт Но У г у сн, 5 о С21Н20О10 270 (М+ агли-кона) 225-229 229, 271, 422

На основании данных УФ-спектров можно сделать выводы лишь об относительной схожести данных лекарственных растений (рис. 10 и 11).

Как в крушине ломкой, так и в жостере содержатся антраценпроизводные, что обусловливает их медицинское применение. Однако в плодах жостера, в отличие от коры крушины, где доминирующим веществом является фран-

Рис. 10 . Электронные спектры раствора водно-спиртового извлечения коры крушины ломкой (1), испытуемого раствора (2) и раствора франгулина А (в присутствии щелочно-аммиачного раствора) (3)

Рис. 11. Электронные спектры раствора водно-спиртового извлечения плодов жостера слабительного (1), щелочно-аммиачного раствора плодов жостера слабительного (2)

В результате сравнительного исследования компонентного состава водно-спиртовых извлечений коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного методом ИК-спектрометрии определено, что в случае крушины ломкой диагностическое значение имеют антрагликозиды франгулин А и франгулин В

(в ИК-спектрах франгулина А и В, в структуре которых имеются две карбонильные группы, обнаруживаются две характерные интенсивные полосы поглощения в области 1625-1620 см'1), тогда как в случае жостера слабительного - флавоноидное соединение З-О-рутинозид рамнетина, который является доминирующим компонентом сырья данного растения.

Полученные результаты ИК-спектрометрии могут быть использованы для целей стандартизации сырья и препаратов близкородственных растений (раздел «Качественные реакции»).

3. Сравнительное исследование компонентного состава коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии

Принимая во внимание то обстоятельство, что химический состав коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного имеет как общие, так и отличительные признаки, нами предпринята попытка изучить возможности использования высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для целей стандартизации сырья и препаратов данных растений.

Сравнительное исследование компонентного состава водно-спиртовых извлечений из коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного методом ВЭЖХ осуществляли с использованием веществ, выделенных из сырья данных растений, а именно: франгулин А (6-0-а-Ь-рамнопиранозид франгула-эмодина), франгулин В (ó-O-P-D-апиофуранозид франгула-эмодина), франгула-эмодин, или эмодин (1,6,8-тригидрокси-З-метилантрахинон), 1-O-P-D-глюкопиранозид эмодина, 8-0-Р-0-глюкопиранозид эмодина и З-О-рутинозид рамнетина (3,5,3',4'-тетрагидрокси-7-метоксифлавон).

Полученное извлечение анализировали методом обращенно-фазовой ВЭЖХ на хроматографе (колонка «Себсил» С-18, «Jasco» в изократическом режиме, стационарная фаза - «Separon С-18», подвижная фаза - смесь ацетонитрила и воды (4:6) с добавлением 1% ледяной уксусной кислоты, скорость потока - 0,1 мл/мин), детекцией веществ при длине волны 420 нм (антраценпроизводные) и 260 нм (флавоноиды).

Исследование показало, что доминирующим компонентом водно-спиртовых извлечений из коры крушины ломкой является франгулин А (антрагликозид) (рис. 12), время удерживания которого практически совпадает с таковым на хроматограмме франгулина А и обнаруживается также на хроматограмме водно-спиртовых извлечения из плодов жостера слабительного (рис. 13). В случае водно-спиртовых извлечения из плодов жостера слабительного доминирует З-О-рутинозид рамнетина (флавоноид) (рис. 13), время удерживания которого практически совпадает с таковым на хроматограмме З-О-рутинозида рамнетина. Что касается других компонентов, то с точки зрения диагностической значимости в коре крушины ломкой представляет интерес франгулин В, хотя обнаруживаются и другие вещества, в частности, 8-О-глюкопиранозид франгула-эмодин и эмодин. В случае плодов жостера слабительного диагностическим компонентом следует считать флавоноидное соединение - З-О-рутинозид рамнетина, который является доминирующим компонентом.

2 00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14 ООииш)

Рис. 12. Схема хроматограммы ВЭЖХ водно-спиртового извлечения из коры крушины ломкой (длина волны -420 нм)

Обозначения пиков веществ:

1- франгулин В; 2 - 8-0-р-В-глюкопиранозид эмодина; 3 - франгулин А; 4 - эмодин.

Рис. 13. Схема хроматограммы ВЭЖХ водно-спиртового извлечения из плодов жостера слабительного (длина волны -260 нм)

Обозначения пиков веществ'.

1- З-О-рутинозида рамнетина + франгулин В; 2- 1-О-Р-О-глюкопиранозид эмодина;

3 - 8-О-р-О-глюкопиранозид эмодина; 4 - франгулин А.

4. Исследование по совершенствованию методов стандартизации коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного

Наряду с определением внешних и микроскопических диагностических признаков значительное место в комплексной оценке подлинности и качества ЛРС занимает фитохимический анализ. Согласно современным требованиям нормативной документации (НД) на ЛРС, фитохимический анализ включает задачи качественного и количественного анализа ЛРС по содержанию ведущих групп БАС, обеспечивающих фармакологическую активность.

В настоящее время для целей стандартизации существует методика количественного определения коры крушины ломкой с методом фотоэлектроколориметрии (ГФ СССР XI издания), однако данная методика громоздкая и многостадийная. Она включает гидролиз и многочисленную экстракцию диэтиловым эфиром, что нельзя признать целесообразным с точки зрения точности методики и неизбежной потери антраценпроизводных, растворимых в вышеперечисленных растворителях. Что касается плодов жостера слабительного, то в нормативной документации на плоды жостера слабительного отсутствует раздел «Количественное определение». 4.1. Качественный анализ сырья крушины ломкой и жостера слабительного

Для определения подлинности коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного разработана методика тонкослойной хроматографии (ТСХ) и спектрофотометрии.

2ШНМ

4.1.1. Тонкослойная хроматография

В задачу исследования входил подбор системы растворителей и способа детектирования зон адсорбции на хроматограмме, позволяющих идентифицировать антраценпроизводные и флавоноиды. Разделение антраценпроизводных и флавоноидов было оптимальным в системе растворителей: хлороформ - метанол - вода (26:14:3) («8ПиК>1 иУ 254») («Сорбфил ПТСХ-П-А-УФ», «Сорбфил ПТСХ-АФ-А-УФ»), В данных условиях четко разделяются антраценпроизводные и флавоноидные соединения. Для обнаружения веществ на хроматограмме использовали детекцию в УФ-свете (254 нм и 366 нм).

Рис. 14. Хроматографический профиль водно-спиртовою извлечения из коры крушины ломкой

Обозначения:

1 - водно спиртовое извлечение сырья;

2 - франгулин А;

3 - франгулин В;

4 - франгула-эмодин:

5 - глюкофрангулин А;

6 - глюкофрангулин В.

Рис. 15. Хроматографический профиль водно-сниртового извлечении из плодов жостера слабительного

Обозначения:

1 - водно спиртовое извлечение сырья;

2 - франгулин А;

3- ЬО-Р-О-глюкопиранозид эмодина;

4 - З-О-рутинозид рамнетина;

5 - эмодин.

При просмотре хроматограммы крушины в УФ-спектре при длине 254 нм б-О-а-Ь-рамнопиранозид франгула-эмодина обнаруживается в виде доминирующего пятна с оранжево-красной флуоресценцией (Яг около 0,7) (рис. 14).

На хроматограмме водно-спиртового извлечения из плодов жостера в УФ-спектре при длине 254 нм З-О-рутинозид рамнетина обнаруживается в виде доминирующего пятна с ярко желтой флуоресценцией (Rf около 0,6), 6-О-а-Ь-рамнопиранозид франгула-эмодина обнаруживается в виде пятна с оранжево-красной флуоресценцией (Rf около 0,7) (рис.15). Для обнаружения веществ хроматограммы просматривали в видимом свете, УФ-свете (254 и 366 нм) и после проявления с раствором диазобензолсульфокислоты.

4.1.2. Спектрофотомерия

Электронные спектры антраценпроизводных соединений и суммарных извлечений из J1PC, содержащих антраценпроизводные, характеризуются максимумом поглощения при длине волны X тах = 524± 2 нм (антраценпроизводные) (рис. 10 и 11). При исследовании УФ-спектров водно-спиртового извлечения из плодов жостера слабительного максимум поглощения в коротковолновой и длинноволновой области спектра находится при X max = 260 + 2 нм и 410 нм ± 2 нм (рис.11).

4.2.1. Количественное определение суммы антраценпроизводных в коре крушины ломкой

В ходе разработки методики количественного определения суммы антраценпроизводных в коре крушины ломкой изучены УФ-спектры водно-спиртовых извлечений из данного сырья. Регистрацию спектров проводили с помощью спектрофотометра Specord 40 (Analytik Jena).

Исследование УФ-спектров показало, что максимум поглощения щелочно-аммиачного раствора водно-спиртового извлечения из коры крушины ломкой в длинноволновой области спектра находится при 524+2 нм (рис.10). В длинноволновой области электронного спектра щелочно-аммиачного раствора франгулина А также наблюдается четкий максимум поглощения при 524+2 нм (рис. 10). Следовательно, в качестве аналитической длины волны может быть использовано значение 524 нм, а стандартным образцом может служить доминирующий антрагликозид - франгулин А, причем в случае отсутствия стандарта в расчетной формуле может быть использовано теоретическое значение удельного показателя поглощения (Ei™) - 180. Интересно, что в Европейской фармакопее также предусмотрено использование значения EÎ™ (204), но для глюкофрангулина А (аналитическая длина волны - 515 нм).

Содержание антраценпроизводных в коре крушины находится в диапазоне 5,87-9,02 %.

Метрологические характеристики методики количественного определения коры крушины ломкой методом спектрофотометрии представлены в таблице 3. Результаты статистической обработки проведенных опытов свидетельствуют о том, что ошибка единичного определения антраценпроизводных в коре крушины с доверительной вероятностью 95% составляет ± 4,07 %.

Таблица 3

Метрологические характеристики методики количественного определения суммы

антраценпроизводных в коре крушины

{■ X Б Р,% дх Е,%

10 9,02 0,1646 95 | 2,23 ±0,367 ±4,07

4.2.2. Количественное определение суммы антраценпроизводных в плодах жостера слабительного

В результате разработки методики количественного определения суммы антраценпроизводных в плодах жостера слабительного изучены УФ-спектры водно-спиртовых извлечений из данного сырья (рис. 11). Исследование УФ-спектров плодов жостера слабительного показало, что максимум поглощения щелочно-аммиачного раствора водно-спиртового извлечения из плодов жостера слабительного находится при 410+2 нм (рис. 11), что подтверждает высокое содержание флавоноидов в сырье жостера слабительного. Второй четкий максимум находится в области 524+2 нм, что соответствует максимуму поглощения щелочно-аммиачного раствора франгулина А. Несмотря на высокое содержание флавоноидов в плодах жостера слабительного, целесообразнее рассчитывать количественное содержание антраценпроизводных, так как плоды в медицине используются в качестве слабительного средства. В качестве аналитической длины волны может быть использовано значение 524 нм, а стандартным образцом может служить антрагликозид - франгулин А.

Содержание антраценпроизводных в плодах жостера слабительного варьирует от 2,63 % до 5,30 %.

Метрологические характеристики методики количественного определения антраценпроизводных в плодах жостера слабительного методом дифференциальной спектрофотометрии представлены в таблице 4.

Таблица 4

Метрологические характеристики методики количественного определения суммы

антраценпроизводных в плодах жостера

/ X 5 р, % ' (Р,0 АХ Е, %

10 5,40 0,1131 95 2,23 +0,252 +4,67

ВЫВОДЫ

1. В результате сравнительного фармакогностического исследования сырья близкородственных видов семейства Крушиновые (Rhamnaceae) - коры крушины ломкой (Frangula alnns Mill.) и плодов жостера слабительного (Rhammis cathartica L.) выявлены как общие, так и отличительные диагностические анатомо-гистологические и химические признаки.

2. При анатомо-морфологическом исследовании сырья «Жостера слабительного плоды» определены морфолого-анатомические особенности строения экзо- и мезокарпия, а также особенности строения кожуры семени, которые положены в основу разделов «Внешние признаки» и «Микроскопия» проекта ФСП «Жостера слабительного плоды».

3. Сравнительное анатомо-диагностическое исследование коры крушины ломкой и коры жостера слабительного позволило выявить, что их главным отличительным признаком является наличие слизевых вместилищ в паренхиме коры крушины ломкой.

4. В результате сравнительного анатомо-диагностического исследования плодов жостера слабительного и плодов крушины ломкой, а также плодоножек жостера слабительного и крушины ломкой определены главные отличительные особенности плодоножек: срез плодоножки жостера имеет строго округлую форму, а у крушины неравномерно-ребристую форму; наличие пигмента красно-фиолетового цвета в клетках паренхимы плодоножек жостера и отсутствие такового у крушины; наличие слизевых вместилищ в паренхиме коры крушины ломкой.

5. В ходе изучения химического состава коры крушины ломкой впервые в Российской Федерации выделены антрагликозиды франгулин А и франгулин В, идентификация которых осуществлялась с помощью УФ-, 'Н-ЯМР-спекгроскопии, масс-спектрометрии, а также результатов химических превращений.

6. В результате изучения химического состава плодов жостера выделены три индивидуальных вещества: З-О-рутинозид рамнетина (флавоноид), франгулин А, l-O-P-D-глюкопиранозид эмодина (антраценпроизводные), причем установлено, что выделенный флавоноид является доминирующим компонентом сырья данного растения.

7. Разработаны методики качественного анализа сырья «Крушины ломкой кора» и «Жостера слабительного плоды» с использованием стандартного образца франгулина А, ТСХ, спектрофотометрии и ВЭЖХ.

8. Обоснована целесообразность стандартизации сырья «Жостера слабительного плоды» по содержанию суммы антраценпроизводных в пересчете на франгулин А с использованием метода дифференциальной спектрофотометрии при аналитической длине волны 524 нм.

9. Разработаны методики количественного определения суммы антраценпроизводных в сырье «Крушины ломкой кора» и «Жостера слабительного плоды» с использованием стандартного образца франгулина А, а также методического подхода, исключающего такие стадии, как кислотный гидролиз, многократную экстракцию сырья, обработку диэтиловым эфиром, построение калибровочного графика.

10. На основе результатов фармакогностического исследования разработаны проекты ФСП «Крушины ломкой кора» и «Жостера слабительного плоды» с целью рекомендации включения данной НД в Государственную фармакопею Российской Федерации XII издания.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Шмыгарева, A.A. Сравнительное морфолого-анатомическое исследование коры крушины ломкой и жостера слабительного / A.A. Шмыгарева, В.А. Кур-кин // Медицинский альманах.-2010.-№ 3 (12).-С. 206-209.

2. Куркин, В.А. Фитохимическое исследование коры крушины ломкой / В.А. Куркин, A.A. Шмыгарева // Медицинский альманах. - 2012. - № 1 (20). -С. 218-220.

3. Шмыгарева, A.A. Определение антраценпроизводных в коре крушины / В.А. Куркин A.A. Шмыгарева // Фармация. - 2010. - Т. 58, № 8. - С. 9-12.

4. Шмыгарева, A.A. Сравнительное фитохимическое исследование коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного / В.А. Куркин, A.A. Шмыгарева //Традиционная медицина. -2012.-№ 5.-С. 23-25.

5. Куркин, В.А. Антрагликозиды коры крушины ломкой (Frangida alnas Mill.) / В.А. Куркин, A.A. Шмыгарева, Е.Д. Даева, В.И. Каденцев // Химия растительного сырья. - 2012. - № 1. С. 83-86.

6. Шмыгарева, A.A. Разработка новых подходов к стандартизации плодов жостера слабительного / В.А. Куркин A.A. Шмыгарева // Фармация. -2012.-№ 6. -С. 10-14.

7. Шмыгарева, A.A. Сравнительное фитохимическое исследование коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного // В.А. Куркин, A.A. Шмыгарева, А.Н. Саньков // Оренбургский медицинский вестник. - 2012. - № 1 — С. 5-8.

8. Шмыгарева, A.A. Современные подходы к стандартизации коры крушины ломкой / A.A. Шмыгарева // Аспирантские чтения. - Самара, 2010. -С.279-282.

9. Шмыгарева, A.A. Анализ номенклатуры слабительных лекарственных препаратов, представленных на российском рынке / A.A. Шмыгарева // Аспирантские чтения. - Самара, 2011. - С.340-342.

10. Шмыгарева, A.A. Методика количественного определения суммы антраценпроизводных в коре крушины ломкой / A.A. Шмыгарева //«Современная фармацевтическая наука и практика: традиции, инновации, приоритеты»: материалы Всероссийской научно-практической конференции. -Самара, 2011.-С.89-91

11. Шмыгарева, A.A. Новые подходы к химической стандартизации сырья коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного / A.A. Шмыгарева // Современные проблемы химической науки и образования: материалы Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 75-летию со дня рождения В.В. Кормачева. - Чебоксары, 2012. - Т.П. - С. 165.

12. Шмыгарева, A.A. Сравнительное морфолого-анатомическое исследование коры крушины ломкой и жостера слабительного / В.А. Куркин, A.A. Шмыгарева // «Фармобразование 2010»: тезисы 4-ой Всероссийской с международным участием научно-методической конференции. - Воронеж, 2010. - С. 462.

Заказ №5701 Тираж 120 экз. Подписано в печать 26.09.2012 г.

JIP №063109 от 04.02.1999 г. Отпечатано в ООО «Агентство «Пресса» ИНН/КПП 5610056518/561001001 460015, г. Оренбург, ул. Комсомольская, 45, тел. 63-68-42, e-mail: presal999@mail.ru

Оглавление диссертации Шмыгарева, Анна Анатольевна :: 2012 :: Самара

Введение.

Глава 1. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ИССЛЕДОВАНИИ КОРЫ КРУШИНЫ ЛОМКОЙ И ПЛОДОВ ЖОСТЕРА СЛАБИТЕЛЬНОГО (Обзор литературы).

1.1 Историческая справка.

1.2 Ботаническое описание крушины ломкой.

1.3 Ботаническая характеристика видов рода Крушина.

1.4 Ботаническое описание крушины слабительной.

1.5 Ботаническая характеристика видов рода Жостер.

1.6 Ареал крушины ломкой и жостера слабительного.

1.7 Микроскопия коры крушины ломкой.

1.8 Микроскопия плодов жостера слабительного.

1.9 Химический состав крушины ломкой.

1.10 Химический состав жостера слабительного.

1.11 Числовые показатели коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного. 1.12 Заготовка и первичная обработка коры крушины ломкой.

1.13 Заготовка и первичная обработка плодов жостера слабительного.

1.14 Применение коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного в научной и народной медицине.

Выводы I с главе Р'^.ийпм11*' г.^лсм '1*1./.й^лшмц мми^ > .(^ллч '52« »С л

Глава 2 ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. 53 '

2.1 Объекты исследования.

2.2 Методы исследования.

2.2.1 Исследование анатомического строения коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного.

2.2.2 Метод колоночной хроматографии.

2.2.3 Метод тонкослойной хроматографии.

2.2.4 Метод спектрофотометрии.

2.2.5 I-1—-1-—- Н-ЯМР-спектроскопия и масс-спектрометрия.

2.2.6 Химические методы, использованные для идентификации ^рупп БАС и индивидуальных соединений.

2.2.7 Количественное определение антраценпроизводных в коре крушины ломкой по ФС.

Глава 3 СРАВНИТЕЛЬНОЕ АНАТОМО-МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КОРЫ КРУШИНЫ ЛОМКОЙ И ПЛОДОВ ЖОСТЕРА СЛАБИТЕЛЬНОГО.

3.1 Сравнительное анатомо-гистологическое исследование строения коры крушины ломкой и коры жостера слабительного.

3.2 Сравнительное анатомо-гистологическое исследование строения плодов жостера слабительного и плодов крушины

3.2.1 Плоды жостера слабительного.

3.2.2 Плоды крушины ломкой.

3.2.3 Сравнительное анатомо-гистологическое исследование плодоножек плодов крушины и жостера.

Выводы к главе 3.

Глава 4 СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА КОРЫ КРУШИНЫ ЛОМКОЙ И ПЛОДОВ ЖОСТЕРА СЛАБИТЕЛЬНОГО.

4.1 Получение суммы биологически активных веществ из сырья «Кора крушины ломкой» и их хроматографическое разделение

4.2 Получение суммы биологически активных веществ из сырья «Плоды жостера слабительного» и их хроматографическое разделение.

4.3 Физико-химическая характеристика выделенных соединений и их производных.

4.4 ИК-спектрометрия коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного.

Выводы к главе 4.

Глава 5,. ПИ" С*«-'« „СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ , , . (1,, КОМПОНЕНТНОГО СОСТАВА КОРЫ КРУШИНЫ ЛОМКОЙ И ПЛОДОВ ЖОСТЕРА СЛАБИТЕЛЬНОГО С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ. •лмДО'

Выводы I с главе 5.

Глава 6 ИССЛЕДОВАНИЕ ПО СОВЕРШЕНСТВОВАНИЮ МЕТОДОВ СТАНДАРТИЗАЦИИ КОРЫ КРУШИНЫ ЛОМКОЙ И ПЛОДОВ ЖОСТЕРА СЛАБИТЕЛЬНОГО.

6.1 Качественный анализ коры крушины ломкой.

6.1.1. Методика качественного анализа коры крушины ломкой по содержанию антраценпроизводных.

6.1.2. Ультрафиолетовый спектр.

6.1.3. Качественные реакции.

6.1.4. Методика ТСХ-анализа коры крушины ломкой.

6.2. Качественный анализ плодов жостера слабительного.

6.2.1. Методика качественного анализа плодов жостера слабительного по содержанию антраценпроизводных.

6.2.2. Ультрафиолетовый спектр.

6.2.3. Качественные реакции.

6.2.4. Методика ТСХ-анализа плодов жостера слабительного.

6.3. Количественное определение суммы антраценпроизводных в коре крушины ломкой.

6.3.1 Методика количественного определения суммы антраценпроизводных в коре крушины ломкой.

6.4. Количественное определение суммы антраценпроизводных в плодах жостера слабительного.

6.4.1. Методика количественного определения суммы антраценпроизводных в плодах жостера слабительного.

Выводы к главе 6.

Глава 7 РАЗРАБОТКА НОРМАТИВНОЙ ДОКУМЕНТАЦИИ НА СЫРЬЕ «КРУШИНЫ ЛОМКОЙ КОРА» И «ЖОСТЕРА СЛАБИТЕЛЬНОГО ПЛОДЫ».

Выводы к главе 7.

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия, фармакогнозия", Шмыгарева, Анна Анатольевна, автореферат

Актуальность темы. В настоящее время интерес к лекарственным средствам на основе растительного сырья по-прежнему велик, причем в Государственном реестре лекарственных средств Российской Федерации наблюдается тенденция к увеличению удельного веса препаратов растительного происхождения (Самылина И.А., 2006; Киселева Т.Л., 2010; Куркин В.А., 2007). На отечественном фармацевтическом рынке группа слабительных лекарственных средств в основном представлена препаратами на основе сырья сенны или кассии. Что же касается зарегистрированной в РФ номенклатуры препаратов крушины ломкой и крушины слабительной (жостера слабительного), то она хотя и разнообразна («Рамнил», «Викаир», «Викалин», «Сироп крушины», «Холагол», «Желудочный сбор № 3», «Проктофитол», фиточай «Целебная поляна № 3» для похудения и др.), однако ее реальный ассортимент в аптечных организациях представлен в основном сырьем коры крушины ломкой и плодами жостера слабительного.

Одной из важнейших предпосылок создания лекарственных препаратов на основе коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного является необходимость глубокого изучения химического состава, а также совершенствования методов стандартизации. Дело в том, что литературные данные относительно химического состава коры крушины ломкой не лишены противоречивости. Кроме того, фотохимические аспекты показателей качества сырья крушины ломкой и жостера слабительного также нуждаются в дальнейшем изучении. Так, раздел «Качественные реакции» в фармакопейной статье (ФС) «Кора крушины ломкой» (Государственная фармакопея СССР XI издания) включает только пробирочные реакции, хотя в этом плане перспективным методом является тонкослойная хроматография (ТСХ). Методика количественного определения суммы антраценпроиз-водных в коре крушины является многостадийной, включает такие стадии, как кислотный гидролиз, многократную экстракцию сырья, обработку диэтиловым эфиром - легкокипящим огнеопасным растворителем. При этом расчет содержания суммы производных антрацена осуществляется на отсутствующий в сырье истизин, причем с использованием построения калибровочного графика раствора кобальта хлорида. Что же касается плодов жостера слабительного, то в разделе «Качественные реакции» ФС представлены лишь пробирочные реакции, при этом раздел «Количественное определение» отсутствует. Актуальна также задача по изучению коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного в сравнительном плане.

Решение проблемы совершенствования химической стандартизации новых лекарственных средств (JIC) связано с разработкой объективных и унифицированных методов анализа сырья и препаратов, причем с использованием стандартных образцов (Арзамасцев А.П. и др., 2000; Самылина И.А. и др., 1994; 2006). 1 ¡и л f,;» 1 > I i',,!1.'! и'),.,. ■ » i'< ¿V/»}) I,

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. Сравнительное изучение химического состава коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного.

2. Разработка новых подходов к стандартизации сырья коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного.

4. Разработка методик качественного анализа коры крушины ломкой.

5. Разработка методик качественного анализа плодов жостера слабительного.

6. Разработка методики количественного определения суммы антраценпроизводных в коре крушины ломкой.

7. Разработка методики количественного определения суммы антраценпроизводных в плодах жостера слабительного.

Научная новизна. В результате изучения химического состава коры крушины ломкой (Frangula alnus Mill.) и плодов жостера слабительного (Rhamnus cathartica L.) выделены и идентифицированы с использованием УФ-, !Н-ЯМР- ИК-спектроскопии и масс-спектрометрии, а также результатов химических превращений 5 индивидуальных соединений, среди которых доминирующие антраценпроизводные вещества (франгулин А и франгулин В) и флавоноидное вещество (З-О-рутинозид рамнетина) впервые описаны в | >РФ и «для данных^ .« растений. ■ Показана целесообразность' проведения ' ' ' ^:,!1 стандартизации сырья коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного по антраценпроизводным (ведущая группа БАС) с использованием стандартного образца франгулина А.

Разработаны подходы к стандартизации, заключающиеся в обнаружении диагностического доминирующего антраценпроизводного - франгулина А в коре крушины ломкой и доминирующего флавоноида - З-О-рутинозид а рамнетина в плодах жостера слабительного с использованием ТСХ-анализа, УФ-спектроскопии.

524 нм) и методического подхода, исключающего такие стадии, как кислотный гидролиз, многократную экстракцию сырья, обработку диэтиловым эфиром, построение калибровочного графика раствора кобальта хлорида. Разработана методика количественного определения суммы антраценпроизводных в плодах жостера слабительного. В проекты ФС «Крушины ломкой кора» и «Жостера слабительного плоды» предложено ввести новые разделы «Качественные реакции» и «Количественное определение» и числовые показатели «Содержание суммы антраценпроизводных не менее 5,0%» для коры крушины и «Содержание суммы антраценпроизводных не менее 2,5%» для плодов жостера.

Результаты исследований используются в научных изысканиях и в учебном процессе на кафедре фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии Самарского государственного медицинского университета (акты внедрения от 07.09.2012 г.). Получено рационализаторское предложение «Методика количественного определения суммы антраценпроизводных в лекарственном растительном сырье - плодах жостера слабительного» (2012 г.).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Результаты анатомо-гистологического исследования коры крушины ломкой.

2. Результаты анатомо-гистологического исследования плодов жостера слабительного.

4. Результаты исследований по разработке подходов к стандартизации JIPC коры крушины ломкой, плодов жостера слабительного.

5. Методики качественного анализа JIPC «Крушины ломкой кора» с использованием PCO франгулина А, ТСХ, спектрофотометрии и ВЭЖХ.

6. Методики качественного анализа JIPC «Жостера слабительного плоды» с использованием PCO франгулина А, ТСХ, спектрофотометрии и ВЭЖХ.

7. Методики количественного определения антраценпроизводных JIPC

Крушины ломкой кора» с использованием спектрофотометрии и стандартного образца франгулина А.

8. Методики количественного определения антраценпроизводных в JIPC

Жостера слабительного плоды» с использованием спектрофотометрии и стандартного образца франгулина А. Связь задач исследования с планами научных работ. Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ Государственного бюджетного м образовательного1 учреждения " высшего профессионального образования ' «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по темам: «Комплексные исследования по проблеме создания новых лекарственных препаратов природного и синтетического происхождения» (№ Государственной регистрации 01200900658) и «Фармакогностическое и химико-фармацевтическое исследование лекарственных растений и фитопрепаратов (№ Государственной регистрации 01200405620), а также соответствует тематике Проблемной комиссии по химико-фармацевтическим наукам Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.

Апробация работы и публикации. Материалы работы доложены и обсуждены на 4-ой Всероссийской с международным участием научно-методической конференции «Фармобразование 2010» («Научные основы создания новых лекарственных средств», Воронеж, 2010); на межвузовской конференции «Аспирантские чтения» (Самара, 2010, 2011, гг.); на Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 75-летию со дня рождения В.В. Кормачева «Современные проблемы химической науки и образования (Чебоксары, 2012); на II Международном конгрессе «Физическое и духовное здоровье: традиции и инновации» (Москва, 2012).

Заключение диссертационного исследования на тему "Сравнительное фармакогностическое исследование крушины ломкой и крушины слабительной"

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. В результате сравнительного фармакогностического исследования сырья близкородственных видов семейства Крушиновые (Rhamnaceae) - коры крушины ломкой (.Frangula alnus Mill.) и плодов жостера слабительного (Rhamnus cathartica L.) выявлены как общие, так и отличительные диагностические анатомо-гистологические и химические признаки.

УФ-, 'Н-ЯМРспектроскопии, масс-спектрометрии, а также результатов химических превращений.

6. В результате изучения химического состава плодов жостера выделены три индивидуальных вещества: З-О-рутинозид рамнетина (флавоноид), франгулин А, 1 -О-Р-Э-глюкопиранозид эмодина (антраценпроизводные), причем установлено, что выделенный флавоноид является доминирующим компонентом сырья данного растения.

2. Разработаны методики количественного определения суммы антраценпроизводных в сырье «Крушины ломкой кора» и «Жостера слабительного плоды» с использованием стандартного образца франгулина А, а также методического подхода, исключающего такие стадии, как кислотныи гидролиз, многократную экстракцию сырья, обработку диэтиловым эфиром, построение калибровочного графика.

3. На основе результатов фармакогностического исследования разработаны проекты ФСП «Крушины ломкой кора» и «Жостера слабительного плоды» с целью рекомендации включения данной НД в Государственную фармакопею Российской Федерации XII издания.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Шмыгарева, Анна Анатольевна

1. Абаимов, В.Ф. Дендрология/ В.Ф. Абаимов. Оренбург: Издательский центр ОГАУ, 2005. - С. 302-303.

2. Агафонов, А.Д. Организация заготовок дикорастущих плодов, ягод, грибов и лекарственных трав / А.Д. Агафонов, Б.В. Андрест. М., 1975. -С. 82-83; С. 97.

3. Андреев, С.З. Дикорастущие лекарственные растения Смоленской области / С.З. Андреев, В.А. Баринов // Московский рабочий. -1974.-С. 40-41.

4. Атлас ареалов и ресурсов лекарственных растений СССР. М., 1980. - С.239. С.253.

5. Атлас «Фармакогнозия» / И.А. Самылина, В.А. Ермакова, Н.В. Бобкова, О.Г Аносова. М.: Гэотар-медиа, 2009. - Т. 3.- С. 258-261.

6. Арзамасцев, А.П. Основные аспекты совершенствования фармакопейного анализа / А.П. Арзамасцев, В.Л. Багирова, ЕЙ. Садчикова // Хим.- фарм. журн. 2000. - Т.34, № 5. - С.47-48.

7. Арзамасцев, А.П. Валидация аналитических методов / А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, ЮЯ. Харитонов // Фармация. 2006. - Т.54, № 4. - С.8-12.

8. Беликов, В.В. Химизм комплексообразования флавоноидов с хлоридом алюминия // Тезисы Четвертого Всесоюзного симпозиума по фенольным соединениям. Ташкент, 1982. - С. 11-34.

9. Беленький, Б.Г. Тонкослойная хроматография. В кн.: Успехи хроматографии. К 100-летию со дня рождения М.С. Цвета. / Б.Г. Беленький. -М., 1972.-С. 134-162.

10. Березовская, Т.П. Методы микроскопического анализа ботанических объектов / Т.П. Березовская, Н.В. Дощинская, Е.А. Серых. Томск, 1978. -113 с.

11. Бородина, H.A. Деревья и кустарники СССР / H.A. Бородина, В.И. Некравов, Н.С. Некрасова Москва, 1966. - 479 с.

12. Брезгин, H.H. Лекарственные растения Верхневолжья / H.H. Брезгин Ярославль: Верхнее Волжское книжное издательство, 1984. - 320 с.

13. Валягина-Малютина, Е.Т. Деревья и кустарники зимой. Определитель древесных и кустарниковых пород по побегам и почкам в безлистном состоянии / Е.Т. Валягина-Малютина. М.: издательство КМК, 2001.- С. 196-197.

14. Вопросы диагностики и лечения запоров: Методические рекомендации Минздрава РСФСР. Москва, 1976. - 16 с.

15. Высокоэффективная тонкослойная хроматография / А. Златкиса и P.E. Кайзера (пер. с англ. под ред. д.х.н., проф. В.Г. Березкина). М.: Мир, 1979.-245 с.

16. Гаммерман, А.Ф. Лекарственные растения (растения-целители): Справочник пособие. 3-е изд., переработка и дополнение / А.Ф. Гаммерман, Г.Н. Кадаев, A.A. Яценко-Хмелевский - М.: Высшая школа, 1984. - 400 с.

17. Гаммерман, А.Ф. Дикорастущие лекарственные растения СССР / А.Ф. Гаммерман, И.И. Гром. М., 1976. - 288 с.

18. Георгиевский, В.П. Физико-химические методы анализа биологически активных веществ растительного происхождения / В.П. Георгиевский, H.A. Казаринов, М.О. Каррыев Ашхабад: Ылым, 1976. - 239 с.

19. Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комисаренко, С.Е. Дмитрук. Новосибирск: Наука, Сибирское отд., 1990. - 333 с.

20. Гоциридзе, A.B., Содержание антрахинонов в коре видов крушины и жостера, произрастающих в Грузии / A.B. Гоциридзе, Э.П. Кемертелидзе //Растительные ресурсы. 1977. - Т. 13, вып. 1. - С. 64-68.

21. Голышенков, П.П. Лекарственные растения и их использование. / П.П. Голышенков. Саранск: Мордовское книжное издательство, 1982. - 312 с.

22. Голышенков, П.П. Лекарственные растения и их использование / П.П. Голышенков. Саранск: Мордов. Кн. Изд. Управление по печати при Совете Министров МАССР, 1971. - 380 с.

23. Государственный реестр лекарственных средств. Т. 1. Официальное издание. - М.: ООО «Информационно-издательское агентство «Ремедиум», 2008. - 1398 с.

24. Государственная Фармакопея СССР X издания. М.: Медицина, 1968.-С.1080.

25. Государственная Фармакопея СССР. Одиннадцатое издание / МЗ СССР. Вып.2. - М.: Медицина, 1990. - 400 с.

26. Дайронас, Ж.В., Природные нафтохиноны: преспективы медицинского применения / Ж.В. Дайронас, И.Н. Зилфикаров МО, Щёлково: Издатель Мархотин П.Ю., 2011. - 252 с.

27. Дикорастущие полезные растения России / А.Л. Буданцев, Е.Е. Лесиовская. СПб.: Издательство СПХФА, 2001. - 663 с.

28. Долгова, A.A. Руководство к практическим занятиям по фармакогнозии / A.A. Долгова, Е.Я. Ладыгина. М.: Медицина, 1977. - 137140 с.

29. Дрозд, Г.А. Ограничения и противопоказания для лекарственного растительного сырья: Информационно-аналитическое пособие по побочным эффектам лекарственных растений / Г.А. Дрозд. Курск: КГМУ, 2006. - 59 с.

30. Дрозд, Г.А. Безопасность использования лекарственного растительного сырья / Г.А. Дрозд, Н.Г. Лищук // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции. Пятигорск, 2007. - С. 467468.

31. Жидкостная колоночная хроматография / Под ред. 3. Дейла, К. Мацека, Я. Янака (пер. с англ.). М.: Мир, 1978. - 428 с.

32. Завражнов, В.И. Лекарственные растения центрального церноземья / В.И. Завражнов, В.А. Китаева, К.Ф. Хмелев Воронеж: Изд-во ВГЦ, 1977. - 448 с, 174 с, 316 с.

33. Землинский, С.Е. Лекарственные растения СССР / С.Е. Землинский. Москва: Государственное издательство медицинской литературы, 1958. - С. 126-127; С. 164-166.

34. Каукин, А. Целебная кора (текст) /А. Каукин// Будь здоров! -2006. № 8. - С. 42-47.

35. Кемертелидзе, Э.П. Физико-химические методы анализа некоторых биологически активных веществ растительного происхождения / Э.П. Кемертелидзе, В.П. Георгиевский Тбилиси: Мецниереба, 1976. - 222 с.

36. Клиническая фармакология / В.В. Закусов. М.: Медицина, 1998.- 608 с.

37. Котельников, Г.П. Доказательная медицина. Научно обоснованная медицинская практика: Монография / Г.П. Котельников, A.C. Шпигель // МЗ РФ, СамГМУ. Самара, 2000. - 150 с.

38. Куркин, В.А. Проблемы рационального использования лекарственных и пищевых растений в научной и народной медицине / В.А.

39. Куркин // Материалы международной научно-практической конференции «Самара в контексте мировой культуры». Самара, 2001. - С. 15-25.

40. Куркин, В.А. Современные аспекты химической классификации биологически активных соединений лекарственных растений / В.А. Куркин // Фармация. 2001. - Т. 50, № 2. - С. 8-16.

41. Куркин, В.А. Современная фармакогнозия: приоритеты и новые возможности / В.А. Куркин // Материалы II Всероссийского съезда фармацевтических работников. Сочи, 2005. С.96-98.

42. Куркин, В.А. Антрагликозиды коры крушины ломкой (Frangula alnus1."<i ' 1 ' I* 1 'и '■< , У' 1 , ' ",■■>' 'ii'"',1' 1 !'<Г< * Y 1 ' Uiii '.Л >i IK "' "'iMi^t'i

43. Mill.) / В.А. Куркин, A.A. Шмыгарева, Е.Д. Даева, В.И. Каденцев // Химиярастительного сырья. 2012. - № 1. - С. 83-86.

44. Куркин, В.А. Фармакогнозия: Учебник. 2-е изд., перераб.и доп. / В.А. Куркин. - Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ», 2007. - С. 794-799.

45. Куркин, В.А. Фитохимическое исследование коры крушины ломкой / В.А. Куркин, А.А Шмыгарева // Медицинский альманах. 2012. -№ 1.- С. 218-220.

46. Куркин, В.А. Сравнительное морфолого-анатомическое исследование коры крушины ломкой и жостера слабительного / В.А. Куркин, А.А Шмыгарева // Медицинский альманах. 2010. - № 3. - С. 206-209.

47. Куркин, В. А. Определение антраценпроизводных в коре крушины / В.А. Куркин, A.A. Шмыгарева//Фармация. 2010. - №8. - С. 912.

48. Куркин, В.А. Основы фитотерапии: Учебное пособие для студентов фармацевтических вузов. Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава», 2009. - 963 с.

49. Куркин, В.А Сравнительное фитохомическое исследование коры крушины ломкой и плодов жостера слабительного / В.А. Куркин, A.A. Шмыгарева // Традиционная медицина. 2012. - № 5. - С. 56-58.

50. Куркин, В.А. Разработка новых подходов к стандартизации плодов жостера слабительного/ В.А. Куркин, A.A. Шмыгарева // Фармация. 2012. -Т. 60, №6. -С. 10-14.

51. Курочкин, Е.И. Лекарственные растения Среднего Поволжья / Е.И. Курочкин.-Куйбышев: Кн. изд-во, 1984. С. 94-97.

52. Кущ, Н.Л. Запоры у детей / Н.Л. Кущ. Киев: Здоровья, 1976. -176 с.

53. Химический анализ лекарственных растений: Учебное пособие для фармацевтических вузов / Е.Я. Ладыгина, Л.Н. Сафронич, В.Э. Отряшенкова. М.: Высш. школа, 1983. - С. 67-81.

54. Лекарственные препараты, разрешенные к применению в СССР / М.А. Клюев, Э.А. Бабаян и др. М.: Медицина, 1979. - 352 с.

55. Лекарственные растения в научной и народной медицине / Б.Г. Волынский, К.И. Бендер, С.Л. Фрейдман, С.И. Богословская, К.В. Воронинаи др. Саратов: Изд-во Саратовского университета, 1967. - С. 113-114; С. 115-116.

56. Лекарственные средства из растений (опыт ВИЛАР): Научное издание / С.А. Вичканова, В.К. Колхир, Т.А. Сокольская, И.В. Воскобойникова, В.А Быкова. М.: АДРИС, 2009. - 432 с.

57. Литвиненко, В.И. Биогенез и классификация флавоноидов / В.И. Литвиненко// Тезисы докладов Пятого всесоюзного симпозиума по фенольным соединениям. Таллин, 1987. С.53-55.

58. Лекарственные растения Государственной фармакопеи. Фармакогнозия / И.А. Самылина, В.А. Северцева. М.: АНМИ, 2003. - 534 с.

59. Лесиовская, Е.Е. Фармакотерапия с основами фитотерапии: учебное пособие. 2-е изд. / Е.Е. Лесиовская, Л. В. Пастушенков. М., 2003.

60. Мансуров, Х.Х. Хронические запоры в «Каноне врачебной науки» Абуали Ибни Сино и современное состояние проблемы / Х.Х. Мансуров // Здравоохранение Таджикистана. 1979. - № 2. - С. 5-9.

61. Маркова, И.В. Слабительные средства / И.В. Маркова, В.Н. Саляев, Б.С Утешев. М., Медицина, 1979. - 584 с.

62. Максютина, Н.П. Растительные лекарственные средства / Н.П. Максютина, Н.Ф. Комиссаренко, А.П. Прокопенко.— Киев: Здоровья, 1985. -280 с.

63. Минина, С.А. Химия и технология фитопрепаратов: Учебное пособие. 2-е изд., перераб. и доп. / С.А. Минина, И.Е. Каухова- М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 560 с.

64. Минчик, О.Ю. Методы получения сухих экстрактов из лкарственного растительного сырья / О.Ю. Минчик // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции. Пятигорск, 2004.-Вып. 59.- С.101-102.

65. Муравьева, Д.А. Фармакогнозия: Учебник / Д.А. Муравьева, И.А. Самылина, Г.П. Яковлев. М.: Медицина, 2002. - 656 с.

66. Никитин, A.A., Панков И.А. Анатомический атлас полезных и некоторых ядовитых растений / A.A. Никитин, И.А. Панков. JL: Наука, 1982.-С. 370-372.

67. Пастушенков, JI.B. Фармакотерапия с основами фитотерапии / Л.В. Пастушенков, Е.Е. Лесиовская Ч. I, II. - С.-Пб.: СПХФИ, 1995.

68. Попов, А.П. Лесные целебные травы / А.П. Попов. Москва: Изд-во «Лесная промышленность», 1973. - С. 31; С. 33-34.

69. Племенков, В.В. Введение в химию природных соединений / В.В. Племенков. Казань, 2001. - 376 с.

70. Правила сбора и сушки лекарственных растений (сборник инструкций). М.: Медицина, 1985. 104-106 с.

71. Правдивцева, O.E. Исследование динамики накопления флавоноидов и антраценпроизводных в зверобоя траве / O.E. Правдивцева, 1 В.А. Куркин, Л.Н. Зимина // Материалы конференции «Фармация и общественное здоровье». Екатеринбург, 2008. - С. 262-264.

72. Пустырский, И.Н., Прохоров В.Н. Универсальная энциклопедия лекарственных растений / И.Н. Пустырский, В.Н. Прохоров М.: Махаон, 2000. - С. 138-139; С. 169-172.

73. Рабинович, М.И. Лекарственные растения ветеринарии / М.И. Рабинович. М.: Россельхозиздат, 1981. - С. 59-60.

74. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейство ЯШасеае Е1аеа^асеае. - Л.: Наука, 1988.-С. 182-186.

75. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Нус1гащеасеае Haloragaceae. -Л.: Наука, 1987. -326 с.

76. Самылина, И. А. Пути использования лекарственного растительного сырья и его стандартизация / И.А. Самылина, И.А Баландина // Фармация. 2004. - Т. 52, № 2. - С. 39-41.

77. Саньков, А.Н. Лекарственные травы Оренбуржья / Саньков А.Н. Оренбург: Изд-во «Южный Урал», 2001. -С. 127; С. 129.

78. Соколов, С.Я. Справочник по лекарственным растениям / С.Я. Соколов, И.П. Замотаев М.: Медицина, 1990. - 206 с.

79. Соколов, С.Я. Фармакотерапия и фитофармакология. Руководство для врачей. М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2000. - 976 с.

80. Справочник по гастроэнтерологии / Под ред. В.Х . Василенко, -М.: Медицина, 1976. 384 с.

81. Тихонов, В.Н. Лекарственные растения, сырье и фитопрепараты Учебное пособие. Часть II. / В.Н. Тихонов, Г.И. Калинкина, Е.И. Сальникова. -Томск, 2004.-С. 18-20.

82. Тлехас, Г.И. Лекарственные растения Оренбургской области / Г.И. Тлехас. Челябинск: Южно-Уральское кн. Изд-во, 1974. - С. 131-135.

83. Турова, А.Д. Лекарственные растения СССР и их применение / А.Д. Турова, Э.Н. Сапожникова- Медицина, 1984. С. 184-187.

84. Фролькис, А.В. Запор и его лечение / А.В. Фролькис Клин. Мед.- 1979.-№3.-С.112-117.

85. Энциклопедический словарь лекарственных растений и продуктов животного происхождения: Учебное пособие / Г.П. Яковлев и К.Ф. Блинова и др. СПб.: Специальная литература, 1999. - 407 с.

86. Adzet, Т. Polyphenolic compounds with biological and pharmacological activity Herbs Spices Medicinal Plants / T. Adzet. 1986. - No. 1. - P.167-184.

87. Baars, A.J. Gas chromatographic determination of the laxative 1,8-dihidroxyantraquinone in urine and faeces / A.J. Baars, R.J. Vermeulen, D.D. Breimer//J. Chomatogr. 1976. - Vol. 120, No. 1 - P. 217-220.

88. Bedevian, AK. Illustrated polyglottic dictionary of plant names in Latin, Arabic, Armenian, English, French, German, Italian and Turkish languages / AK. Bedevian. Cairo, Argus & Papazian Press, 1936.

89. Beubler, E. PGE-mediated effect of diphenolic laxatives / E. Beubler, H. Guan // Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol. 1978. - Vol. 302, Suppl. P. 47.

90. Beubler, E. The effect of diphenolic laxatives mediated via release of prostaglandin E? / E. Beubler, H. Guan // Experientia. 1978. - Vol. 34, No. 3 - P. 386-387.

91. Bisset, NG. Herbal drugs and phytopharmaceuticals / NG Bisset. -Boca Raton, FL, CRC Press, 1994. P. 463-469.

92. Bonati, A. Analysis by HPLC of anthraquinone drugs and relevant extracts. Part 1. Rhamnus frangula L. / A. Bonati, G. Forni // Phytoterapia. -1977. Vol. 48, No. 4 - P. 159-165.

93. Breimer, D.D. Pharmacokinetics and metabolism of anthaquinone laxatives / D.D. Breimer, AJ. Baars. Pharmacology, 1976. - Vol. 14, Suppl. 1. -P. 30-47.

94. Bruneton, J. Pharmacognosy, phytochemistry, medicinal plants / J. Bruneton. Paris, Lavoisier, 1995.

95. Dean, P D G, Johnson W S, Middle F A , Ed Affinity Chromalographyi. A Practical Approach IRL Press. / P D G Dean, W S Johnson, F A Middle. -Oxford, England, 1985. - P. 215.

96. De Witte, P. Metabolism and pharmacokinetics of the anthranoids. / P. De Witte. Pharmacology, 1993,47 (Suppl. 1). - P. 86-97.

97. Dreessen, M. The metabolism of sennosides A and B by the intestinal microflora: in vitro and in vivo studies on the rat and the mouse / M. Dreessen, H. Eyssen, J. Lemli // J. Pharm. Pharmacol. 1981. - Vol. 33, No. 10. - P. 679-681.

98. Ebel, S. Differenzierte Bestimmung von Anthrachinonderivaten und Glycosiden / S. Ebel, M. Kaal // Planta Medica. 1977. - Vol. 32, No. 1. - P. 2729.

99. Ebel, S. Zur Analytik von Anthrachinondrogen. I. Hydrolyse der Glycoside direct auf der DC-Platte / S. Ebel, M. Kaal // Planta Medica. 1980. -Vol. 40, No. 3. - P. 271-277.

100. European Pharmacopoeia. 4-th Ed. - Rockville: United States Pharmacopoeial Convention, Inc., 2002. - P. 1224-1225.

101. Fairbairn, J.W. Biological assay and its relations to chemical structure / J.W. Fairbairn. Pharmacology, 1976. - Vol. 14, Suppl. 1. - P. 48-61.

102. Forgacs, E. Molecular Bases of Chromatographic Separation / E. Forgacs, T. Cserhati. Springer-Verlag, Heidelberg, Germany, - 1997. - P. 288.

103. Forth, W. Allgemeine and spezielle Pharmakologie und Toxikiligie. 2 Auff. B.I. / W. Forth, D. Henschler, W. Rummer. Wissen-schaftsverlag, Mannheim, 1977. - S. 49.

104. Godding, EW. Therapeutics of laxative agents with special reference to the anthraquinones.Pharmacology / EW Godding. 1976. - 14 (Suppl. 1). -P.78-101.

105. Godwin, H. Frangula alnus Miller (Rhamnus frangula L.) / H. Godwin//No. 368. Journal ofEcology. 1943. - Vol. 31. P. 77-92.

106. Godwin, H. 1943. Rhamnaceae: Rhamnus cathartica L., Frangula alnus Miller {Rhamnus frangula L.) / H. Godwin // Nos. 367-368. Journal of Ecology. 1943. - Vol. 31. - P. 66-67.

107. Investigations on anthrachinonglycosides of Rhamnus species. V. Emodin-8-O-ß-gentiobioside, a new O-glycoside from Rhamnus frangula / G. i ■■■■ Demuth, H. Hinz, O. Seligmann, H. Wagner // Planta Medica. 1978. - Vol. 33,1. No. 1.- P. 53-56.

108. Kommereil, B. Unerwünschte Arzneiwerkungen bei Laxantienabus / B. Kommerell. Therapiewoche, 1979. - Bd 29. - S. 4667-4668; 4671-4672.

109. Kubiak, M. Dynamika gromadzenia antrazwiazkow w korze kruszyny pospolitej {Rhamnus frangula L.) / M. Kubiak. Herba Polonica. - 1977. -Vol.23,No. 4.-P. 307-312.

110. Labadie, R.P. Enzymatic hydrolysis of anthraglycosides on thin layer chromatograms / R.P. Labadie, M.B.M. Morrien // Pharm. Weekbl. 1978. - Vol. 113, No. l.-P. 1-9.

111. Lemmens, L. Determination of dihydroxydianthrones by densitometry after thin-layer chromatographic separation / L. Lemmens // J. Chromatogr. 1977. - Vol. 132, No. 2. - P. 363-365.

112. McClain, Bill. 1996. Rhamnus frangula-smooth or glossy buckthorn. In: Randall, John M.; Marinelli, Janet, eds. Invasive plants: Weeds of the global garden / Bill. McClain. Handbook 149. Brooklyn, NY: Brooklyn Botanic Garden: 65.

113. Leung, AY. Encyclopedia of common natural ingredients used in food, drugs, and cosmetics, 2nd ed. / AY. Leung , S. Foster. New York, NY, John Wiley & Sons, 1996.

114. Mabry, T.J. The Systematic Identification of Flavonoids / T.J. Mabry, K.R. Markham, M.B. Thomas. Berlin; Heidelberg; New York, 1970. - 354 p.

115. Muzychkina, R.A. Natural Anthraquinones. Biological properties and physicochemical characteristics. /Ed. by G.A. Tolstikov. Moscow: PHASIS, 1998. 864 p.

116. Post, Thomas W.; Klick, Kenneth F. One-year study of fire effects on Rhamnus frangula L. // Natural Areas Journal. 1988. - Vol. 8, No. 2. P. 120-121.

117. Post, Thomas W.; McCloskey, Elizabeth; Klick, Kenneth F. Two- i year study of fire effects on Rhamnus frangula L. // Natural Areas Journal. 1989. Vol. 9, No. 3. - P. 175-176.

118. Quercia, V. HLPC in the determination of some anthraquinone glycosides/ V. Quercia//Pharmacology. 1980. - Vol. 20, Suppl. 1. - P. 76-82.

119. Rai, P.P. Thin-layer densitometric determination of individual dehydroxyanthraquinone derivatives / P.P. Rai // Chromatographia. 1980. - Vol. 13,No. 12.-P. 763-764.

120. The standard addition methodology for evaluation of results in chromatographic analysis / M.G. Bagur, D. Gazguer, M. Sanchervinas etc. // Analysis. 1997. - Vol.24, No. 9-10.- P. 374-380.

121. Thompson, W.G. Laxatives: clinical pharmacology and rational use / W.G. Thompson.- Drugs, Basel, 1980. Vol. 19, No. 1. - P. 49-58.

122. Touchslone, J.C. Practice of Thin Layer Chromatography, 3rd Ed / J.C. Touchslone. John Wiley & Sons, New York. U.S.A, 1992 - P.416.

123. Trease, Evans W.C. Pharmacognosy. 16th edition. Edinburgh -London - New York - Philadelphia - St. Louis Sydney - Toronto: Saunders Elsevier, 2009. - 603 p.

124. Tyler, V.E. The new honest herbal / V.E. Tyler. George F. Stickley Company, Philadelphia, 1987.

125. Van, Os F.H.L Anthraquinone derivatives in vegetable laxatives / Os F.H.L Van. // Pharmacology. 1976. - Vol. 14, Suppl. 1. - P. 7-17.

126. Van, Os F.H.L. Some aspects of the pharmacology of antharaquinone drugs / Os F.H.L Van. Pharmacology, 1976. - Vol.14, Suppl. 1. - P. 18-29.

127. Wagner, H. Plant Drug Analysis. A Thin Layer Chromatography Atlas / H. Wagner, S. Bladt. Berlin Heidelberg New York: Springer Verlag, 1996. -384 p.

128. Wagner, H. Pharmazeutische Biologie. Drogen und ihre Inhaltsstoffe / H. Wagner. Stuttgart-New York: Gustav Fischer Verlag, 1993. - 522 p.

129. WHO monographs on selected medicinal plants. Vol. I. Geneva, World Health Organization, 1999.

130. Youngken, HW. Textbook of pharmacognosy, 6th ed. Philadelphia / Youngken, HW. PA, Blakiston, 1950.

131. Zwaving, J.N. Recent developments in the analysis of anthraquinone derivatives / J.N. Zwaving // Pharmacology 1980. - Vol.20, Suppl. 1. - P. 65-75.

Автореферат и диссертация по медицине (14.04.02) на тему:Сравнительное фармакогностическое исследование крушины ломкой и крушины слабительной

Автореферат диссертации по медицине на тему Сравнительное фармакогностическое исследование крушины ломкой и крушины слабительной

Оглавление диссертации Шмыгарева, Анна Анатольевна :: 2012 :: Самара

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия, фармакогнозия", Шмыгарева, Анна Анатольевна, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "Сравнительное фармакогностическое исследование крушины ломкой и крушины слабительной"

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2012 года, Шмыгарева, Анна Анатольевна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций