Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Сравнительная характеристика противогипоксической и анальгезирующей активности некоторых видов остролодочника

рГ Б он 22 «Г №

1 САНКТ-ПБШБУРТСКИЙ ШДИЦИНШЙ ИНСТИТУТ ИМЕНИ АКАДЕМИКА И.П.ПАШОВА

На оравах рукописи

КОНОПЛЕВА Елена Витальевна

СРАШЙГЕЯЬНАЯ ХАРАКГЕШСТИКА ПРОТИВОШШЖШЧВСЮЗЙ И АНАЛЪГЕЗИРУПЦЕЙ АКПШЮСТИ НЕКОТОРЫХ ЗЩОВ ОСТРОЛОДОЧНИКА

Специальность 14.00.25 - фагмгзологпл

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Салкт-Пет ер<5ург, 1994

Работа выполнена в Санкт-Петербургском хишко-фармацавггическом институте /Ректор профессор Г.П.Яковлев/

Научный руководитель: Заведующие .кафедрой фармахологии СЯХФИ доктор медицинских наук, профессор Л.В.Пастушенков Научный консультант: Кандидат фармацевтических наук, профессор К.Ф.Блинова

Официальные оппоненты: Доктор медицинских наук, профессор А.А.Зайцев Доктор медицинских наук, профессор Ю.И.Дьячук Ведущая организация: Санкт-Петербургский педиатрический медицинский институт

Защита состоится " " 1994г. в час. на заседании специализированного Совета К 074.37.02 при 1 Санкт-Петербургском медицинском институте имени академика И.П.Павлова, С-Петербург,ул.!ьва Толстого 6/8.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке 1 С-ШИ, С-Пвтербург,ул.Льва Толстого 6/8.

Автореферат разослан " " 1994г.

Ученый секретарь специализированного совета док* анских наук,

Э.Э.Звартау

-3-

Общая характеристика работы

Д^дльность те™. Разработка средств для устранения боли является весьма актуальной проблемой современной медицины и фармакологии, в частности. Наиболее перспективной следует считать разработку таких аиальгезпрующих средств, которые обладает обезболивающим и противог.щоксическин действием, поскольку гипокоия существенно усугубляет течение любого патологического процесса /Настушанков Л.В.,1939/.

В тибетской медицине э качестве обезболивающих оредогв используются некоторые виды рода остролодочник, которые в нашей стране произрастает в ЗабаШшлье /Асеева Т.Д. и соав?., 1985; Блинова К.Ф. и соавт.,1964, 1965, 1972, 1986/.

Изучению были подвергнуты следующие виды оотролодочпиковг лесной, наклоненный; тысячелистннй, железистый, длинноносый, ■зарстистый, шишковидный. Коряк, нодзеюгув часть, полое растение данных видов использовали в народной медицине индивидуально или в составе многокомпонентных смесей для лечения различных интоксикаций, водянки, болезней селезенки, коси.о-го мозга, острых инфекционных заболеваний / менингита, сибирской язвы, чумы, холеры, тулярегаш, оспы/. Остролодочники широко применяли в качестве противовоспалительных средств, при лечении кожных и венерических заболеваний, а так ае при зубной боли /Блинова К.Ф., Саканян Е.И., 1986/.

Однако, в научной медицине растения рода остролодочник до настоящего времени но используются. Это, вероятно, в определенной степени объясняется недостаточной фармакологической изученностью представителей данного рода. Сведения по фармакологическим свойствам некоторых тэтдов данного рода носят частный характер. Так, показано, что отва? о.тнеячелистного обладает антигиотаминной активностью, водно-спиртовой экстракт

0.шерстистого активен по отношению к паравирусу Сендай. Водно-спиртовой экотракт о,железистого обладает противовоспалительным и диуретичеоким действием. Кумарины о.остролистного обладают противоопухолевым аффектом.

Работами сотрудников кафедры фармакологии СПбХСЯ доказано обезболивающее, противогипоксическоо, антиаритгятческое действие полиэкстрактов остролодочников остролистного к лесного. Фармакологическое изучение остролодочников длинноносого, шишковидного, наклоненного ранее не проводилось.

Актуальность темы определяется выявлением и изучением антигипоксантов о обезболивающими свойствами среди представителей рода остролодочник.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исоледовательских работ Санкт-Петербургского химико-фарыапевтичеокого института по следующим тома:

"Изыскание и изучение новых видов растений -источноков .антигипоксантов"/Проблема 01.9.10 № Гос. регистрации 032493/

"Изучение лекарственной флоры СССР" /Проблема 10.06 * Гоо. регистрации 01.84 0 069518/.

Целью работы являлось сравнительное изучение обезболивающей и антигипоксической активности некоторых растоний рода остролодочник.

В задачи исследования входило:

1. Изучить характер влияния водных извлечений остролодочников на нопипептивную чувствительность и переносимость гипо-барической гипоксии.

2. Виявит.. вид, оптимально сочетающий вышеуказанные фармакологический эффекты.

3. Определить растительное сырье и способ приготовления вытяжек из него / воднш, водно-спиртовые/, обеспечивающих

наибольлую фармакологическую активность. 4* Изучить обезболивающее и антитапоксичвское действие наиболее активных видов остролодочника в зависимости от содержания в них биологически активных веществ.

Объекты и мдтодн исследования. Объектами исследования явились надземные части следующих остролодочников: наклоненного, железистого, длинноносого, тысячелистного; корни -шерстистого; все части - остролистного, лесного, шиаковид-ного. Всего изучали 8 видов остролодочника.

Материал для исследований был собран в период цветения в пиле 1986 и 1988г. в Читинской области.

Для сравнительного фармакологического изученил были использованы водные вьтяжки из надземных и подземных частей остролодочников шишковидного, лесного, остролистного; из надземных частей - длинноносого, железистого, тысячелистного, наклоненного; из корней - шерстистого. Исследовали водно-спиртовые вытяжки надземных частей остролодочников наклоненного и тысячелистного / экстрагент - этанол 40, 70 и 96% концентрации/. Изучали так же полиэкстракты из надземных частей остролодочников наклоненного, тысячелистного, полученные путем перколяции / экстрагент - этанол различных концентраций/ о последующей сушкой полученных водно-спиртовых вытяжек.

В ряде опытов изучали любезно предоставленные сотрудниками кифедры фармакогнозии СПбХ® полиэкстракты остролодочников остролистного, лесного, шишковидного, а так же полученные после обработки различными растворителями отдельные фракции / бутанольную, хлороформную, этилацетатнуто, водный остаток после обработки различными растворителями/

■ индивидуальные соединения, выделенные из остролодочников оотролистного ж лесного.

Опыты проведены на 840 белых иышах и 2130 крысах обоего

пола.

Оотрув пшобарическуг гипоксии моделировали в барокамере. Подъем осуществляли до "высоты" 11 ООО и для мышей и 12 ООО м для крыс. Влияние остролодочников на нопицептив-ныа реакции - тесты "горячая пластинка", "уксусные корчи" -проводили в опытах на иышах ; теоты "отдергивания хвоста", определение порога вокализации при электростимуляции корня хвоста изучали в опытах на крысах. Седативные проявления опэнивахи по отепеяи подавления спонтанной двигательной и поисковой активности в тестах "открытое поде" и "норковый рефлекс".

Препаратами сравнения служили анальгетики морфина гидрохлорид и анальгин и антягипоксант гутимин / Пастушэнков Л.В., 1966/, Все исследуемые вещества вводили в диапозоне доз 1/60 - 1/10 ЛДвд внутрибршинно за 30 шш до начала опыта. Предварительно определяли

При обработке результатов использовали традиционные статистические методы. Расчитывали средние арифметические, оаибхи средних, доверительные интервалы при Р<0,05. Статистическую значимость различий определяли о помощью t-критерия Стьюданта.

Научная иовиднн . Шервыэ выявлено обезболивающее и антя-гипохенчеоков действие 11 водных вытяжек и 11 водно-спирто-вих витяхах остролодочников.

Показано, что активное противогипоксичеокое и обезболивающее дейотвяе присуще водный и водно-спиртовым извлечениям остролодочников деоного, остролиотного, шишковидного, тысяче*

листного.

Доказаны преимущества использования полиэкстрактов данных видов в качестве антипшоксантов с анальгезкругщвй активностью.

Впервые выявлено депримирующее действие алкалоида« олеоно-вой кислоты, {-ситосторкна; антигипоксическое действие свойственно флавоновым агликонам, алкалоиду, олеоновой кислоте, выдолен-ным из надземных частей остолодочников остролистного и лесного.

Основною положения лиссертатгпп.

1. Впервые выявлена обезболивающая и антигипокоическая актива ; нооть водных извлечений остролодочников остролистного, лесного, шерстистого, шишковидного, наклоненного.длинноносого, тысячо-листного, железистого.

2. Впервые доказано наличие обезболивающей и антигнпокснческой активности водно-спиртовнх вытякек ост. олодочииков наклононно-го, длинноносого, тнсячелистного.

Практическая значимость работа»

Фармакологические исследования водно-сплртогах ютяяеп, полиэкотрактов, индивидуальных соединений остролодочников позволяют расширить арсенал антигипоксических я обезболивающих средств, которые могут быть использованы практически во воех областях медицины. Впервые обнаружены противогипоксичеокие п * анальгезирутощие свойства у ранее не исследовавшихся видов' остролодочников: шишковидного, тнсячелистного, наклоненного. .Докг-зано наличие обезболивающих и противопшоксичеоких свойств у биологически активных веществ, выделенных из надземных частей остролодочников тысячалистного, лесного, шишковидного, наклоненного, остролистного. Доказано преимущество использования полиэкстрактов перед отдельными биологически активными веществами, выделенными из надземных частей остролодочников изучаемых видов.

Изучение зависимости меаэду обезболивающей, антипшокеичео-кой, депримируицей активностью, токсичностью изучении гадов

остролодочников позволило рекомендовать для пеленоправленного фармакологического исследования полиэкстракты остролодочников лесного и шишковидного.

Апробапия ряботн и птбликашт; .Материалы диссертации изложены на научно-практической конференции молодых ученых России, посвященной 70-летию декрета о национализации аптек/ноябрь,1988;К2£й-бышев/; на Всесоюзной конфсрекшивФармакологическаа коррекция гипоксическпх состояний",Москва, 1988р.¡на Республиканской карг-ной конференции"Синтоз п изучение физиологически шегитых веществ",Вильнус,1988;на заседаниях Ленинградского фаршЕОоеогачао-кого общества,1989.;на международной конференции, посвященной 100-лотию со дня рождения акад.С.В.Аничкова,С-Детербург,1992г.

Основные материалы диссертации изложены в 6 публикациях.

Обт>ам и структура тапсглугатап; .Работа изложена на 163стр. и состоит из введения, обзора литерагурыД глава/,экспериментальной части/7 глаэ.обсуждения результатов,выводов,списка литературы. Текст иллюстрирован 49 таблицами и 16 рисунками. Список ял тературы содержит 176 отечественных и 49 икостранных источников.

В обзоре литературы даны сведения о применении разных видов остролодочников в тибетской и народной медицине, даннца о химическом составе, фврмакологической активности и указаны перспективы их дальнейшего изучения.

В экспериментальной части изложены методы получения водных и водно-спиртовых извлечений, сравнительное исследование антигипок сического и анальгезирутацего действия изучаемых видов остролодоч ников, отдельных фракций и индивидуальных веществ,выделенных из надземных частей остролодочников остролистного и лесного.

СОдаКАНИЕ РАБОТЫ Исследование острой токсичности

В опытах по изучению острой токсичности водных извлечений била выявлена их хорошая переносимость.Результаты представлены в таблице 1.

Таблпш 1.

ДД^водннх вытяжек некоторых видов остролодочник» «ери внутрибродинном введении мышам

Вщ Исследуемая ЛД^.г/кг

остролодочника часть

наклоненный трава 6,45*0,14

жплезиогый трава 2,12£0,26

шерстистый корни 1,92+0,32

длинноносый трава 4.4&±0,19

тысячедя стный трава 8,83±0,13 .

остролистный трава 3,0710,19

корни 2,49Ю,14

шиплю видный трава 4,94±0,13

корни 4,94+0,13

лесной трава 1.6±0,19

корни 1,67+0,54

Результаты исследован'/д острой токсичности водно-спиртовых извлечений представлены в таблице 2.

Таблица 2.

ЛДзд водно-спиртовых извлечений остролодочников наклоненного и тысячелистного при вяутрибртиином введении мышам

Вид остролодочника Экстрагент спирт,% ЛДс^г/кг экстракта

наклоненный 40 2,33^0,01

70 2,24+0,01

96 1,73+0,01 40+70+96/полиэкст ..акт/1,48±0,01

тысячелистннй 40 1,31±0,01

70 1,56^0,01

96 1,99+0,01

40+70+%/полиэкстракт/2.15±Р,01

По величине ДД50 изучаете водные и водно-спиртовые извлечешш могут быть отнесены к малотоксичным препаратам, Ьлестс о том, картина отравления при вводении обсолютно токсичншс доз водных и водно-спиртовых извлечений была сходной: снижение физической активности животных, боковое по-локение.о неравномерным дыханием, клонико-тонические судороги.

Сравнительное исследование ачтигипоксического лейстрщ остролодочников.

В опытах на мышах настои остролодочников наклоненного, длинноносого, тысячелистного, шишковидного, лесного, отвары ост.олодочников остролистного, шишковидного, лесного повышают выживаемость животных в условиях острой щюбарической гипоксии. Наибольшей противогипоксической активностью обладает настой о.остролистного, превосходящий на 40$ по данному виду фармакологической активности препарат сравнения гутншн.

В экспериментах на крысах антигипоксическое действие водных извлечений выражено менее значительно, за исключением отвара корней о,остролистного, антипшоксическая активность которого на 20£ превышает пктивность препарата сравнения. Данные представлены на рис. 1 А.

Рис. 1 Б иллюстрирует противогипоксическую активность водно-спиртовых извлечений из надземных частей б.наклоненного и о.тысячелистного. Антипшоксическая активность водно-спиртовых извлечений выпе, чем у воднтпе вытяяек. Эффект вытяжек, полученных путем порколяпии, вкстрагент 405? этанол сравним о действием гутимина. Наибольший антигипокоичеокий эфф кт выявлен при введении экстрактов, получе: ных при использовании этанола выооких концентраций. Так, экстракт,о.наклоненного, подученный при использовании этанола и О.тыоя-челиотного- 96^ этанола в 2,5 раза активнее гутимина. Эффект полиэкстрактов сравним с действием гутимина.

%

100

50

А

%

100 50

В У Ь У 10 11 12 Ш

п

-с®

I

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 йю.1. Влияние иоследуемых водных /А/ и водяо-оггартовнх /Б/

извлечений остролодочников на переносимость крысаии

острой гипобарической гипоксии.

Исследуемые водные вытяжки вводили в дозах, равных 1/10 ДДзд. Рис. 1 /А/: 1-контроль, 2-гутимин 50 кг/кг, 3-настоЯ ©.наклоненного,4-настой о.жолезиотого, Б-отвар о.шерстиотого, 6-на-стой о.длинноносого, 7-настой о.тысячелиотного, 8-наотой о.остролистного,9-отвар о.остролистного, 10-настой о.шишковидного, Ц-отвар о.шишковидного,12-настой о.лесного,13-от-взр о.лесного.

Б: 1—контроль,2—гутимин 50мг/кг, Водно—спиртовые, вытяжки о.наклонанного-экотрагент этанол 3-4056,4-70*,5-96*у 6-поли-экстракт; водно-спиртовнэ извлечения о.тысячелиотного -»отрагент -7-402, 8-7$, 9-96?,э1анол, 10-полиэкстракт. По оои ординат - выживаемость крыс в условиях острой гипоба-' рической гипоксии.

Кружок - отличия от контроля отатистичеоки значимы, Р<0,05.

Исояедование анальгезирующих свойств водных и водно-

спиртовых извлечений исследуемых видов остролодочника.

Анальгетические свойства исследованных водных вытяжек отчетливее проявляются в тесте химического нопипэптивного воздействия. В данной тесте по обезболивающей активности водные извлечения остролодочников длинноносого /трава/, шерстистого /корни/, шишковидного /трава/, тнсячелистного /трава/, достоверно превышают анальгетическую активность анальгина.

Значительно удлиняют латентный период отдергивания хвоста крыс отвар о.шерстистого, настои о.длинноносого, о.лесного, о.шишковидного, однако активность вышеуказанных извлечений не превышает активность препаратов сравнения в данном тесте. Приуменьшении дозы анальгетическая активность значительно снижается шш утрачивается. Полученные результаты иллгаотри-

Игвт рио.г.

Длительность пребывания мышей на горячей пластинке в наи-больаей степени удлиняют настой о.длинноносого, отвары о.шерстистого, о.лесного, о.остролистного. Анальгезирующая активность других водных извлечений остролодочника невысока.

Учитывая незначительную анальгеэирупцую активность водных извлечений, исследовали водно-спиртовые извлечения на наличие обезболивающей активности. Результаты представлены на рис.3.

В тесте отдергивания хвоста наибольшая обезболивающая активность выявлена при исследовании водно-спиртовых извлечений при экстракции этанолом высоких концентраций, причем эффект сопоставим с действием морфина гидрохлорида в доге 5 ыг/кг. В тесте вокализапии ¡обезболивающее действие значительно меньше, чем у морфина гидрохлорида в дозе 5 иг/кг, и определяется при исследовании водно-спиртовых извлечений

%

200

100

ч-

1

ш

¿4-

Ш

л

I

П

а

I

Г*|~1 1'М

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Рло.2. Влиянпо годных пзвлечопнй остролодочника на величину латентного периода отдергивания хсоста крно /Ш/ при локальном тормпчоском воздействии

в дозах, раишх 1/10 ЛД^д а 1/20 Д%0

□

Нивотннм вводили: 1-контрольпкм нивотнны вводили физиологический раствор, 2-морфина гпдрохлорид 5 кг/кг, З-анашшн 50 иг/кг, Л-пастой о.наклоненного, 5-настой о.железистого, 6-отвар о.шэротиотого, 7-настой о. длинноносого, 8-настой о.тнсячелистного, 9-иаотой о.остролистного, 10-отвар о.остролистного, 11-настой о.шишковидного, 12-отвар о.пишковидного, 13-наотой о,лаоного, 14-отвар о.лесного. Кружок - отличия от контроля статистически значимы, Р<0,05,

%

100

12 3 4 5 6 ? 8 9 10 11

200

100

mt4St

10

—i—

11

Jtec.3. Влияние иооледуемых водно-спиртовых извлечений на А-величияу латентного периода отдергивания хвоста крыо /ДП/ при локальном термическом воздействии; Б-величину порога вокализации крыс /ПВ/ nui элпктро-стимулшдаи корня хвоста.

о.тнсячалистного.'зстрагент адшЗЖ^ OT^Ai^b1^^«0^^?1^0« - отличия от контроля

огатистичеоки.значимы, JR0,05.

при экстракт!« этанолом низких концентраций и полиэкстракта

о.наклон<?нного.

Таким образом, воднио îi водно-спиртовые извлечения остролодочников исслэдует-шх видов одновременно проявляют анальгезпрующее п антигипоксическо'3 действие, активность

водно-спиртовых извлечений в данных видах фармакологической активности вмше, чем у водных извлечений.

Наибольшее антитапоксическое действие проявляется при использовании водно-спиртошх извлечений, полученных этанолом высоких концентраций, как и анальгетическая активность в тесто "отдергив-даш хвоста", наибольшая анальгезируэдая активность при определении "порога вокалпзагп'п" выявлена при использования в качестве зкстрагента спирта низкой концентрации.

Полкэкстраяты кссл ду-мых видов остролодочников удачно со»

потеп? выраяенйый лптигипоксический п анальгезнвущий эффекты.

Изучение некоторых фармакологических свойств вод-mix и водно-спиртовых извлечений остролодочников.

Противогипокспческпя активность таено связана с седатив-ной. Это характерно для всех вэществ с деприм".:рующим действием. Не установлено прямой связи депримирущего эффакта о противогипокепчеекпм действием настоев исследуемых видов остролодочников. Так, отвар о.шерстистого, вызывающий у мы-сей наиболее выраженное депримирутацее действия, не обладает противогипонспчоской активностью. Влесто с тем отвар о.остролистного проявил менее выраженное депрнмирупщее действие, однако ему присущ максимальный антигипоксический эффект среди всех изучаемых роднях извлечений.

Аналогичное отсутствие прямой взаимосвязи меяду депри-мнрующим, обезболивающим, антигипоксическим действием выявлено при исследовании водно-спиртовых извлечений.

Наотой и отвар о.лесного, настои о.шишковидного, о.даин-ноиосого, проявляющие противогипоксическуп активность, повышают устойчивость животных к перегреванию.

Сравнительное фармакологическое исследование обезболивающей и антигипоксичеокой активности полиэкстрактов остролодочника В целях.выявления наиболее эффективного и малотоксичного растения провалено сравнительное исследование обезболивающей с антигипоксичеокой активности полиэкстрактов остролодочников наклоненного, тысячелистного, остролистного, лесного, шишковидного. Предварительно оценивали острую токсичность исследуелгах полиэкстрактов. Результаты сравнительной оценки обезболиващзй в антигипоксичеокой активности полиэкстрактов представлены в таблице 3.

Комплексный подход к изучению обезболивающего действия окстрактов кшточад. региотрапию показателей, характеризующих реакцию крио на коцицептивное воздействие различного генеза с учетом иоторкж, эмоциональных проявлений, а так же общую рмопаональиую реактивность, мышечный тонус, соотояние спи-падьных рефлексов* Изменение поведения животных, соматического статуса является важным критерием эффективности болауго-дяющих оредстЕ.

На емошюналышй компонент болевой реакции, оцениваемой по порох? вошшзаяни крыо, полнэкотракты влияют незначительно,

. Ра8шваадаяся в первую очередь реакция торможения отдергивания хвоста позволяет предположить прямое дейотвие поли-окотрактов остролодочника на сегментарный механизм регуляции болевой чувствительности. Реакция отдергивания хвоста оценивается у врио как ноцицептивный сегментарный рефлекс, в обеспечении которого принимают участив мотонейроны диоталь-

уравнительная антигипоксическая и анальгетическая характеристика полиэкстрактов остролодочника

Полиэкстракты ДЦ с^.г/кг остролодочников Используемая доза,г/кг Антигипокси-ческий яффект усл.ед. Анальгети"еский г>ф*ект "отдергивания хростл", усл.ед. в тестях "рокализациг" усл-еп.

гутимин 0,05 1,0 - -

морфина гицрохл^риц 0,005 - 1,0 1,0

наклоненного 1,479.0,012 0,15 1,0 0,52 0,3 Дн

■гысячелистного 2,I48_0,0II 0,2 1,0 • 0,98 0

остролистного 3,748_0,013 0,38 1.5 0,54 0,16

пгишкоеидного I,996_0,012 0,2 2,5 0,73 0,41

лесного 3,263_0,013 0,33 2,5 0,95 0,13

Примечание^-) -не определялось; (0)-отсутствие эффекта;анальгетическяя активность морфине, гидрсхлсрида к антипшоксическая активность гутимина принята за еданкцу.

инх сегментов спинного мозга. Все изучаемые полиэкстракты эффективнее девствуют при исходно высокой двигательной активности*

Вое изучаемые полиэкстракты по антигипоксической активности превышают препарат сравнения гутимин, наиболее значи- . тельно полиэкстракты остролодочников лесного и шишковидного.

В результате сравнительного исследования обезболивающей и противогипоксической активности установлено, что для дальнейших исследований наиболее перспективны полиэкстракты остролодочников шишковидного, остролистного, лесного, тысячелиотного.

Изучение аптигипоксичеокого и анальгезирующего дейотиш в зависимости от биологически активных веществ, входящих в оостав полиэкотрактов оотролодочников оотролиотного и лесного.

Дяя определения обезболивающего и антигипоксического действия биологичеоки активных соединений, содержащихся в раотениях рода оотролодочник, проведены исследования суммарных зкотрактов, отдельных фракций и выделенных биологически активных соединений.

Предварительно оценивали острую токсичность отдельных фракций. Результаты исследования острой токсичности предотав-лены в таблице 4.

Таблипа 4.

ДИ^отдеяышх фракций о.остролистного к о.лесного при внутрибрюшинном введении мышам.

Вщ остролодочника Фракция ЛД^.г/кг

лесной хлороформная 899,6+10,81

бутанальная 1035+11,3G

этилапетатная 894,6+11,68 '

водный остаток 2823+11,89

остролистный хлороформная 839,6+11,?

бутанальная 1196±11,23

этилапетатная 994,9^11,5

водный остаток 3657^18,39

При изучении острой гипобарической гипоксии установлено, что на фона сум-прннх экстрактов -выживаомость животных на "высоте" 120QQ ц более20 win составила 80$ для по^таэкстракта о.лесного и 60% для полиэкстракта о.остролистного. Отдельные фргиаии сохраняли противогипокспческую активность, но в меньшей степени, чем суммарные экстракты. Фракции О.лесного, извлеченные этилацетатом на 60*>, водный экстракт на 40%-, фракции о.остролистного, извлеченные хлорофосом на 40%, водный остаток- на 40$ повышают переносимость животными гипоксической гипоксии.

Снижают порог болевой чувствительности в большей степени экстракты о.лесного, причем наиболее активна фракция, извлеченная эти лап от атом.

При введении полиэкстрактов и отдельных фракций имело место выраженное снижение горизонтальной и вертикальной активности, угнетение "норкового рефлекса". Наибольшее депримирупщее действие выявлено при введении суммарных эк-

страктов, хлороформной Фракшм обоих видов остролодочника •

Из литературных источников известно, что полиэкстракг о.остролистного содержит не ыонее 12 флавоноидных соединений и 4 феноксикйслотн. Полиэкстракт о.лесного - не менее 20 флавоноздных соединений и 6 феноксиккслот. Флавоно-идныа соединения относятся к производным флавоиола и присутствуют как свободные агликоны, так и гликозиды, для последних характерно преобладание моногликозидов. Агли-конагда являются флавонолы кемпферол, кверцетин, рамнегин, изораынетин и рамназий. Из витяяки в хлороформную фракцию перешли свободные агликоны, некоторые фенольные кислоты, в этилацетатной фракпии содержатся агликоны, шло- и дагли-козиды, фенолокпслОщ. Водный остаток после обработки раз, личными растворителями содержит следы флавоноздов и фено-локислот /р.-сисмбензойной, хлорогеновой, ванилиновой/. Еутанольна^ фракция содержит алкалоид наиболее вероятной структуры 2-фенил-изоиндол-1,3-даон, содержаться исключительно в растениях рода Остролодочник.

Результаты сравнительного фармакологического изучения антигипоксической, обезболивающей, активности полиэкстрактов отдельных фракций и выделенных биологически активных соединений, представленных иам для исследований, приводятся в таблице 5.

При исследовании выделенных веществ было установлено, что антигипоксическое действие обусловлено комплексом фенольных ооединений, к которым относятся фт-нольные кислоты, ФЛавоноидныо соединения / агликоны, гликозиды/, алкалоидом, р-ситоотерином. Обезболивающий аффект связан о наличием алкалоида, fi-ситоотерина, холестерола, тритерпенового генина. С алкалоидом .связано и изменение двигательной активности, что подтверждается исследованием содержащих его фракций.

Таблица 5.

Сравнительная активность фракций нолиэкстрактов и выделениях иа надземных частой остролодочников <?стролнстного и лесного, воществ.

используе-Антигипоксп-АнальготическиЯ мая доза, чески!! эффект в тестах эффект, "отдэр-"вокали-г/га* ппашгя запии",

усл.од хв)ста" усл.ед. усл. д.

1 2 3 4 5

гуташш 0.05 1.0 _ —

морфина гидрохлорид 0,005 - 1,0 1.0

фракции полиэкстракта о.лесного

хлороформная 0,09 0,5 0,86 1.2

буталояъная ■ 0.11 0 0,45 0,83

оталацэтатная 0,09 1.5 0,59 1.0

водный остаток 0,2 1.0 0,34 0,43

фракции подиэкстракта о.остролистного

хлороформная 0,08 0.5 0,79 1,27

бутанольная 0,12 0 0,59 0,25

этилацетатная 0,1 1.0 0 0,77

водный остаток 0,37 1,0 0,76 1.22

вощеотва, выделенные из надземных частей остролодочников остролистного 31 лесного

алкалоид 0,005 2,0 0,44 0,39

олеоновая кислота 0,005 2,0 0 0,13

сумма агликонов 0,02 2,0 0 0

рамнетип 0,005 1,0 0 0

изорамнетин 0,005 1,5 0 0

кемпферол 0,005 1.0 0 0

Фракции и вещества

Продолжокио таблицы 5.

1 2 3 4 5

р-ситостерин 0,005 2.0 1,18 0

холестерол 0.1 0 0,81 0,18

тритерпеновый генин 0,001 0 0,39 0

Примечание: /й/. не последовали; /0/ - отсутствие эффекта; анальгетичеокая активность морфина гидрохлорида и антигипок-сическая - гутишна принята за единицу.

ВЫВОДЫ

1.Проведено сравнительное изучение обезболивающей и анти-гипокснчеокой активности 11 водных и 11 водно-спиртовых извлечений 8 видов растений рода остролодочник.

2.Исследованные водные извлечения малотоксичны, обладает деприммрующим, антигипоксическим и обезболивающим действием. Наибольшая антигипокоическая активность выявлена у отвара корней остролодочника остролистного. Наотой травы остролодочника шишковидного наиболее выраженно подавляет перпеп-тивный компонент ноцицептивной' реакпии. Эмоциональную реакцию на боль в большей степени подавляет наотой травы остролодочника тысячелистного.

3.Преимущественно проявляют обезболивающую и антигипок-сическую активнооть водно-спиртовые извлечения, Доказано преимущество полиэкстрактов в качестве препаратов, сочетающих активное антигипокскческое и анальгезирувдва действие.

4.Все исследованные полиэкотракты по антигипоксическому действию превосходят активность препарата сравнения гутишна. Особенно - полиэкстракты остролодочников лесного и

иишковидного.

5.На еегмвнтарннв моханизмн ноцицептивной чувствительности на уровне эффекта морфина гидрохлорида в дозе 5 мг/кг влияют полиэкстракты остролодочников тьсячелистного и лесного. На эмоциональный компонент болевой реакции все полиэкстракты влияют незначительно.

6.Антигипоксическое действие в основном связано о комплексом фенольных ооединоний, к которш относятся фонольные кио-лотн» флавоновые агликонн и их гллкозкды; алкалоидом,й-сито-стерияом. Обезболивающий эффект спязая с наличием /алкалоида,

. £>-ситостерина, холестерола, триторпенового генкпа,

7.Дяя пшрокого фармакологического изучения в качестве эффективных антигипоксантов о анальгезнрувдей активностью рекомендуем полиэкстракты остролодочников лесного и щитовидного.

СПИСОК РАБОТ, 'ОПУБЛИКОВАН 1ЫХ ПО ТШ ДИССЕРТАЦИИ

1.Коноплева Е.В.Сравнительная характеристика обезболивающего и противогипоксического действия суммарных экстрактов и отдельных фракшй остролодочника остролистного и остролодочника ле сного.//Тез.докл.Всерос.науч.-практ.копф.молодых ученых, посвящ.70-летию декрета о национализации аптак/ноябрь 1988г./-Куйбнш9В-1988-С.197-133.

2.Яковлев Г.П., Блинова К.Ф., Саканян Е.И., Коноплева Е.В., Лесиовская Е.Е., Паотушенков Л.В.Антигипоксические свойства некоторых растоний//Фармакологичоская коррекция гипокспческнх состояний":Тез.докй Всесоюзной конф.,27-28 япв.1988г.-Айск-ва,-1В88.-С.149.

ЗДесиовская Е.Е., Пастуиенков Л.В., Коноплева Е.В., Раа-кулиева Е.Р. Аритмогенность комплекса экстремальных факторов и пути ее фармакологической коррекции// Синтез и изучение

физиол.акт.веществ:Тез.докл.Респ.н~уч.конф.ДЗокт.1988г.-Вильнус,1988«-С.78.

4.Лесиовская Е.Е., Коноплева Е.Б., Пономарева И.В., Богданова И.Л., Пастушенков Л,В. Поиск психотропных средств с учетом индивидуального психофизиологическое статуса//Синтез и клнгогч.аспекты новых психотропных и сердечно-сосудистых вецеотв:Тез.докл.ыежресп.науч.-практ.конф.,24-26 мая 1988г. Волгоград, 1988.-С.140.

б.Пастушонков Л.В., Блинова К.Ф., Лесиовская Е.Е., Сака-вяя Е.И., Коноплева Е.В. Сравнительная характеристика обезболивающего и противопгаоксического действия экстрактов и их фракдай из надземных частей Оукори оурИуСи^С)®^ к 0- ^Сг/ШсО- (Рв/ЦФС.. Раст.ресурсы,вып.4,Т.25,-1989-. С.569-575.

6.Пастушенков Л. В., Лесиовская Е.Е., Харламова С.М., Коноплева Е.В., Саканян Е.И. К вопросу о спектре психотропной активности остролодочника остролистного/УНейрофармаколопш на рубеже двух Тысячелетий:Тез.докл.меад.конф.,посвяц.100-летио со дня рождения академика Сергея Викторовича Аничкова, 6-8окт,1992г.-СЛетербург,1992.-ч.1.-С.123.