Автореферат и диссертация по медицине (14.00.53) на тему:Сигнальные молекулы как маркеры зрелости и старения плаценты у женщин разного возраста
- Ученая степень
- кандидата биологических наук
- ВАК РФ
- 14.00.53
Автореферат диссертации по медицине на тему Сигнальные молекулы как маркеры зрелости и старения плаценты у женщин разного возраста
На правахрукописи
ЛАПИНА Елизавета Александровна
СИГНАЛЬНЫЕ МОЛЕКУЛЫ КАК МАРКЕРЫ ЗРЕЛОСТИ И СТАРЕНИЯ ПЛАЦЕНТЫ У ЖЕНЩИН РАЗНОГО ВОЗРАСТА
14.00.53 — геронтология и гериатрия
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Санкт-Петербург - 2004
Работа выполнена в Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии Северо-Западного отделения РАМН, НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта РАМН
Научный руководитель:
доктор медицинских наук, профессор Кветной Игорь Моисеевич
Научный консультант:
доктор медицинских наук Полянин Альберт Альбертович
Официальные оппоненты:
доктор биологических наук Чалисова Наталья Иосифовна
доктор медицинских наук, профессор Смирнов Олег Алексеевич
Ведущее учреждение:
Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия МЗ РФ
Защита состоится часов на
заседании диссертационного совета Д601.601.01 при Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН по адресу: 197110, Санкт-Петербург, пр. Динамо, 3.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН (197110, Санкт-Петербург, пр. Динамо, 3).
Автореферат разослан 2004
г.
Ученый секретарь диссертационного сове кандидат биологических наук
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы
Результаты многолетних исследований показали, что здоровье новорожденного ребенка в значительной степени определяется течением антенатального периода. Нарушение функций плаценты — одна из основных причин перинатальной заболеваемости и смертности [Савельева и др., 1991]. Еще в середине XX века известный классик отечественной плацентологии А.И. Брусиловский писал: «...мы постепенно приближаемся к прочтению плаценты как визитной карточки плода...».
Важнейшей функцией плаценты является синтез и секреция широкого спектра биологически активных веществ. Многочисленные плацентарные пептиды (их верифицировано уже более 100) выполняют роль гормонов, ферментов, проферментов, ингибиторов, рецепторов, факторов роста, иммунорегуляторных агентов, транспортных и связывающих белков. Уникальность этого органа в плане механизмов интеграции выполняемых функций и присутствие в нем основных регуляторных нейропептидов позволют считать плаценту- одним из важных отделов диффузной нейроэндокринной системы, впервые описанной Pearse в конце 60-х годов XX века [Pearse, 1977].
Из плацентарных компонентов объектом нашего исследования был выбран ворсинчатый хорион, так как в силу особенностей строения он играет наиболее важную роль в осуществлении обменных процессов между кровью матери и плода. В настоящее время убедительно доказано, что наиболее активной тканью плаценты в метаболическом и функциональном плане является эпителий ворсинчатого хориона.
Широкие возможности в изучении гормонального статуса плаценты связаны с появлением ряда методов, позволяющих изучить не только особенности гистологического строения и состояния обменных процессов, но
РОС НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА СПгк| 09
"Зрим
3
и количественно оценить функциональное состояние различных структурных компонентов плаценты.
Расширению знаний способствует бурное развитие молекулярной микроскопии с помощью иммуноморфологических реакций на срезах на тканевом, клеточном и ультраструктурном уровнях исследования, позволяющих визуализировать макромолекулы гормонов, отдельных ферментов, рецепторов, коллагенов различных типов и т.п. Среди иммуногистохимических методов, широко применяемых как в клинической практике, так и в научно-исследовательской работе, одним из наиболее перспективных и высокочувствительных является авидин (или стрептавидин)-биотиновый (ABC) иммунопероксидазный метод.
В этой связи изучение гормональной активности плаценты с применением данного иммуногистохимического метода является актуальной и необходимой научно-практической задачей.
Анализ совремешюй литературы показал, что большинство авторов изучало развитие адаптационных механизмов при патологическом состоянии плаценты. Вместе с тем, необходимо отметить недостаточное внимание к вопросам развития компенсаторно-приспособительных реакций, степени их мобилизации в плацентах у женщин с нормальной физиологической беременностью в зависимости от их возраста. Имеются сведения, касающиеся степени структурных и функциональных сдвигов в плацентах у женщин различного возраста с нормальной физиологической беременностью, тогда как исследование нормальной плаценты ограничивалось лишь констатацией процессов, свидетельствующих о функциональном старении органа. Между тем от степени выраженности этих изменений зависит выключение больших или меньших участков из обменной поверхности плацентарной ткани.
Вышеизложенные обстоятельства, а также отсутствие подобных работ свидетельствуют об актуальности и необходимости проведения специального
исследования экспрессии гормонов и биологически активных веществ в ворсинчатом хорионе у беременных разного возраста.
Плацента уникальна и как объект для геронтологических исследований, поскольку ее онтогенез четко очерчен по времени гестации, а плацентарная ткань удобна для поиска четких, согласованных критериев старения на органном, тканевом, клеточном и субклеточном уровнях. Следует отметить, что в настоящее время убедительные морфологические доказательства истинного старения плаценты отсутствуют и вопрос «старения» плаценты остается дискуссионным. В литературе нами не найдено работ, касающихся изучения гормональной функции плаценты в связи со старением этого органа.
В основу клинической концепции «старения» плаценты положены исследования переношенной беременности. В этой связи исследование экспрессии гормонов при доношенной и переношешюй беременности также представляется актуальной темой для исследования.
Цель и задачи исследования
Целью диссертационного исследования является сравнительный анализ экспрессии гормонов и сигнальных молекул в ворсинчатом хорионе зрелой плаценты у беременных разного возраста, а также при доношенной - и переношенной беременности для оценки феномена «старения» плаценты.
Для достижения указанной цели были поставлены и последовательно решены следующие задачи:
1. Определить влияние возрастного фактора на качественные и количественные параметры экспрессии гормонов - пролактина и мелатонина.
2. Выявить особенности васкуляризации ворсинчатого хориона у женщин различных возрастных групп с помощью иммуногистохимического маркера эндотелиальных клеток СБ34.
3. Определить качественные и количественные параметры экспрессии фермента КО-синтазы в ворсинчатом хорионе как главного плацентарного вазодилататора у женщин различных возрастных групп.
4. Выявить особенности экспрессии маркеров НЬЛ-БЯ и СБ35 как маркеров иммунного статуса плаценты в ворсинах хориона у женщин разного возраста.
5. Оценить влияние фактора возраста беременной на пролиферативную активность клеток плодовой части плаценты с помощью апоптозного (р53) и антиапоптозного (Мс1-1) маркеров.
6. Провести сравнительный анализ экспрессии гормонов и биологически активных веществ при доношенной и переношенной беременности у женщин нормального репродуктивного возраста для выяснения вопроса о возможном «старении» плаценты.
Научная новизна работы
Впервые проведен сравнительный анализ экспрессии гормонов пролактииа и мелатоиина, а также маркеров СБ34, КО-синтазы, НЬЛ-БЯ, СБ35, р53, Мс1-1 в ворсинчатом хорионе зрелой плаценты у беременных разного возраста. Установлено влияние возраста беременной женщины на экспрессию всех исследуемых гормонов в ворсинчатом хорионе. Впервые выявлено снижение степени экспрессии пролактина, мелатонина, СБ34, N0-синтазы, р53, Мс1-1 клетками плодовой части плаценты в связи с увеличением возраста беременной женщины. Обнаружены отличия в степени экспрессии антиген-презентирующих молекул СБ35 и ШЛ-БЯ в плаценте у женщин разного возраста. Установлено снижение пролиферативной активности ворсинчатого хориона с увеличением возраста беременной женщины. На основании количественного и качественного анализа экспрессии гормонов пролактина, мелатонина, СБ34, КО-синтазы, СБ35, р53 и Мс1-1 не выявлено отличий в степени экспрессии этих гормонов в
ворсинчатом хорионе при доношенной и переношенной беременности, что свидетельствует о функциональной зрелости, а не «старении» плаценты.
Практическая значимость работы
Полученные результаты позволяют расширить представления о морфо-функциональных изменениях плаценты в связи с возрастом беременной, что следует учитывать в акушерско-гинекологической практике для повышения эффективности терапевтических мероприятий. Отсутствие различий в характере экспрессии гормонов при доношенной и переношенной беременности является убедительным контраргументом теории «старения» плаценты.
Положения, выносимые на защиту
1. Экспрессия пролактина, мелатонина, СБ34, КО-синтазы, р53, Мс1-1 в клетках ворсинчатого хориона прогрессивно уменьшается в связи с увеличением возраста беременной женщины.
2. Пролиферативная активность ворсинчатого хориона с увеличением возраста матери прогрессивно снижается.
3. Достоверные отличия в концентрации и характере экспрессии пролактина, мелатонина, СБ34, КО-синтазы, СБ35, р53 и Мс1-1 в ворсинчатом хорионе при доношенной и переношенной беременности отсутствуют, что свидетельствует о несостоятельности теории «старения» плаценты.
Связь с научно-исследовательской работой Института
Диссертационная работа является научной темой, выполняемой по основному плану НИР Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН.
Структура и объем диссертации
Диссертация состоит из введения, 7 глав, выводов и указателя литературы. Обзор литературы состоит из двух глав. Глава 1 представляет собой анализ данных литературы по особенностям онтогенеза ворсинчатого хориона. В главе 2 рассматриваются эндокринная и иммунологическая функции плаценты и влияние различных факторов на гормональный статус плаценты. Глава 3 посвящена описанию материалов и методов, используемых в данном исследовании. Главы 4-6 представляют собственные данные по изучению особенностей экспрессии исследуемых сигнальных молекул у беременных различных возрастных групп при доношенной беременности, а также сравнительный анализ экспрессии маркеров при доношенной и переношенной беременности. В главе 7 обсуждаются полученные результаты. Текст диссертации. изложен на 148 страницах, содержит 4 таблицы, иллюстрирован 29 рисунками. Список литературы содержит 248 источников, из них отечественных - 37, зарубежных- 211.
Публикации
По материалам диссертации опубликовано 9 печатных работ.
Апробация и реализация диссертации
Материалы диссертации доложены на Ш Российской медико-биологической научной конференции «Человек и его здоровье» (Санкт-Петербург, 2000);- Российской конференции Вавиловского общества генетиков (Санкт-Петербург, 2000); VII Российской медико-биологической научной конференции молодых ученых «Человек и его здоровье» (Санкт-Петербург, 2004); Первом Евро-Азиатском конгрессе «События года в акушерстве и гинекологии» (Санкт-Петербург, 2004).
Результаты исследований используются в научной, педагогической и практической деятельности Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН и НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта РАМН.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Объектом для морфо-функционального исследования был .избран ворсинчатый хорион 57 доношенных и 14 переношенных плацент, полученных при родах в родильном отделении ГУ НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта РАМН. При анализе морфо-функционального состояния исследуемых плацент использованы заключения патогистологических исследований последов, проведенных в лаборатории патоморфологии института.
Изучение функциональной активности ворсинчатого хориона в зависимости от возраста беременной проводили на иммуногистохимических препаратах, приготовленных из образцов доношенных плацент женщин различного возраста. Были отобраны плаценты первородящих женщин со срочными родами без осложнений. В ходе проведения исследования материал был распределен на 5 групп в зависимости от возраста женщин (табл. 1). В качестве группы сравнения нами была выбрана группа 2 -плаценты женщин нормального репродуктивного возраста (возраст от 18 до 28 лет).
Таблица 1
Распределение плацент по группам в зависимости от возраста
женщин
№ группы Возраст женщин Число обследованных женщин Процент от числа обследованных женщин в каждой группе
I группа до 18 лет 8 14%
II группа 18-28 лет 22 38,5 %
1П группа 29-35 лет 13 22,5 %
IV группа 36 - 40 лет. 9 16%
V группа Старше 40 лет 5 9%
Для оценки функциональной активности плацент были использованы антитела к следующим иммуногистохимическим маркерам:
• мелатонину и пролактину - для оценки гормонального статуса плаценты;
• CD34 - маркеру эндотелия - для оценки степени васкуляризации ворсин;
• эндотелиальной NO-синтазе как антиоксиданту и регулятору сосудистого тонуса, кровотока и артериального давления;
• HLA-DR и CD35 - для оценки иммунологического статуса плаценты; антитела к Мс1-1 (антиапоптозному) и р53 (апоптозному) маркерам — для оценки пролиферативной активности плаценты.
Кусочки плаценты объемом 1 см3 фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине (рН 7,2), обезвоживали и заливали в парафин согласно общепринятой схеме. Для обзорной окраски использовали гематоксилин и эозин.
Иммуногистохимическое исследование проводили с использованием моноклональных мышиных антител к пролактину человека (1:200, Novocastra), эндотелиальной NO-синтазе (1:150, NOVOCASTRA), маркеру дендритных клеток CD35 (1:100, Novocastra), антигену главного комплекса гистосовместимости II класса HLA-DR (1:100, Novocastra), маркеру эндотелиальпых клеток CD34 (1:100, Novocastra) человека, антиапоптозному белку Мс1-1 (1:100, Novocastra), проапоптозному белку р53 (1:75, Novocastra). Для визуализации экспрессии мелатонина использовали ультраспецифичные кроличьи антитела к мелатонину (1:100, CIDtech Res. Сотр.) В качестве вторых антител использовали универсальный набор, содержащий биотинилированные антимышиные и антикроличьи иммуноглобулины. Визуализацию окрасок проводили с применением комплекса авидипа с биотинилированной пероксидазой (ABC-kit), с последующим проявлением пероксидазы хрена диаминобензидином (все реагенты от Novocastra).
Морфометрическое исследование проводили с использованием системы компьютерного анализа микроскопических изображений, состоящей из микроскопа Nikon Eclipse Е400, цифровой камеры Nikon DXM1200, персонального компьютера на базе Intel Pentium 4 и программного обеспечения «Видеотест-Мррфология 4.0». В каждом случае измерение проводили в 10 полях зрения при увеличении 400. Оптическую плотность экспрессии выявленных продуктов измеряли в условных единицах. Также определяли площадь их экспрессии (которая представляла собой отношение площади, занимаемой иммунопозитивными клетками к общей площади клеток в поле зрения), выражаемую в процентах. Указанные параметры отражают интенсивность синтеза или накопления исследуемых гормонов и сигнальных молекул.
Результаты исследований обрабатывали с помощью компьютерных программ EXCEL и STATISTICA 5.0 (Statsoft).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Иммуногистохимическое исследование доношенных плацент
На всех иммуногистохимических препаратах была отмечена выраженная экспрессия исследуемых маркеров: мелатонина, пролактина, СБ34, КО-синтазы, ША-БЯ, СБ35, Мс1-1, р53.
Экспрессия мелатошша была выявлена во всех структурных элементах ворсинчатого хориона: синцитиотрофобласте, синщггиокапиллярных мембранах, синцитиальных почках и узлах, единичных клетках стромы и эндотелии сосудов.
Площадь экспрессии мелатонина в 1,3,4 и 5 группах была достоверно меньше, чем в группе 2 - группе сравнения (р<0,05) (рис.- 1). Между возрастом матери и значениями площади экспрессии мелатонина выявлена положительная корреляция (к=0,06).
Рис. 1. Площадь экспрессии мелатонина в плацентах беременных различных возрастных групп.
Оптическая плотность мелатонина достигает максимального значения во 2-ой группе (0,34±0,01 у.е.), у женщин старше 36 лет (4 и 5 группа) наблюдается достоверное снижение этого показателя (р<0,05) (рис.2).
Рис. 2. Оптическая плотность экспрессии мелатонина в плацентах беременных различных возрастных групп.
Пролактин-иммунопозитивные клетки обнаружены в синцитиотрофобласте, в том числе и в синцитиокапиллярных мембранах, а также в эндотелии сосудов. Оптическая плотность в 1, 2, 3 и 4 группах достоверно не отличается; достоверно меньшая величина оптической плотности наблюдалась в плацентах у женщин старше 40 лет (р<0,05) (рис. 3). Площадь экспрессии пролактина в плаценте у женщин старше 29 лет достоверно .уменьшается (р<0,05) (рис. 4), что свидетельствует о сокращении числа иммунопозитивных клеток к пролактину.
возрастные группы
Рис. 3. Оптическая плотность экспрессии пролактина в плацентах беременных различных возрастных групп.
Рис. 4. Площадь экспрессии пролактина в плацентах беременных различных
возрастных групп.
Полученные данные свидетельствуют о снижении гормональной активности в плодовой части плаценты в связи с возрастом беременной.
Положительная иммуногистохимическая реакция с антителами к CD34 наблюдалась на всех препаратах в эндотелии капилляров ворсин хориона. Степень экспрессии CD34 у женщин нормального репродуктивного возраста (2 группа) значительно превышает уровень экспрессии этого маркера в остальных возрастных группах, как по площади экспрессии, так и по показателям оптической плотности (рис. 5, 6). Между показателями оптической плотности и возрастом женщин выявлена корреляционная связь (к=0,23).
возрастные группы
Рис. 5. Оптическая плотность экспрессии СБ34 в плацентах беременных различных возрастных групп.
возрастные группы
Рис. 6. Площадь экспрессии СБ34 в плацентах беременных различных возрастных групп.
Полученные результаты свидетельствуют о прямом влиянии возраста матери на степень васкуляризации ворсинчатого хориона.
Среди местных плацентарных вазодилататоров наибольшая роль отводится эндотелиальной КО-синтазе. Проведенные иммуно-гистохимические исследования показали, что синцитиотрофобласт, синцитиокапиллярные мембраны, эндотелий капилляров ворсин давали иммунопозитивную реакцию с антителами к эндотелиальной КО-синтазе. Оптическая плотность и площадь экспрессии еКО8 достоверно меньше у женщин моложе и старше 18—28 лет (р<0,05) (рис. 7, 8).
возрастные группы
Рис. 7. Оптическая плотность экспрессии КО-синтазы в плацентах беременных различных возрастных групп.
возрастные группы
Рис. 8. Площадь экспрессии КО-синтазы в плацентах беременных различных
возрастных групп.
Для оценки состояния иммунной системы плаценты в связи с различным возрастом беременных использовали маркер фолликулярных дендритных клеток СБ35 и антиген II класса главного комплекса гистосовместимости НЬЛ-ВЯ.
Единичные СВ35-содержащие клетки локализуются преимущественно в строме стволовых и промежуточных ворсин, а также в просветах стромальных каналов. При оценке площади экспрессии данного маркера выявлены достоверные отличия между 4 и 2, а также 5 и 2 группами (р<0,05) (рис. 10), в то время как в значениях оптической плотности не найдено статистически достоверных отличий между группами (рис. 9). Проведенный анализ показал наличие корреляции между возрастом беременных и значениями площади экспрессии СБ35 (к=0,37),что указывает на увеличение
15
активности CD 35-презентирующих клеток в связи с возрастом беременной женщины.
возрастные группы
Рис. 9. Оптическая плотность экспрессии CD35 в плацентах беременных различных возрастных групп.
Рис. 10. Площадь экспрессии CD35 в плацентах беременных различных возрастных групп.
Экспрессия антигена главного комплекса гистосовместимости II класса HLA-DR наблюдалась в строме, капиллярах ворсин, а также в синцитии. Обнаружена положительная корреляция между значениями площади экспрессии HLA-DR и возрастом беременных (к=0,39) (рис. 12). Достоверных отличий в значениях оптической плотности не было обнаружено (рис. 11).
? 0.6$ 0-4 Е
о
ё 0.2
I ■ ■■■
возрастные группы
Рис. 11. Оптическая плотность экспрессии HLA-DR в плацентах беременных различных возрастных групп.
возрастные группы
Рис 12. Площадь экспрессии HLA-DR в плацентах беременных различных
возрастных групп.
Таким образом нами выявлены неоднозначные отличия в экспрессии иммунокомпетентных антиген-презентируюпщх молекул в плацентах у женщин разного возраста. Обнаружена тенденция к увеличению экспрессии CD35 и уменьшению экспрессии HLA-DR с увеличением возраста беременной.
Иммунопозитивное окрашивание к Мс1-1 наблюдалось практически во всех структурах ворсинчатого хориона: синцитиальном трофобласте, синцитиокапиллярных мембранах, клетках стромы, эндотелии сосудов, что свидетельствует о высокой пролиферативной активности этих элементов даже на поздних сроках беременности.
Межгрупповых различий в значениях оптической плотности Мс1-1 нами не выявлено (рис. 13), однако была показана положительная корреляция между значениями оптической плотности и возрастом беременных (к=0,27). Площадь экспрессии Мс1-1 максимальна в плацентах женщин нормального репродуктивного возраста (7,81=ь0,07%). У женщин 1 группы площадь экспрессии составляет 6,9±0,03%, между этими величинами обнаружены достоверные отличия (р<0,05). Площадь иммунопозитивно окрашенных клеток в 3, 4 и 5 группе достоверно ниже, чем в группе 2 (рис.14)
возрастные группы
Рис 13. Оптическая плотность экспрессии Мс1-1 в плацентах беременных различных возрастных групп.
возрастные группы
Рис. 14. Площадь экспрессии Md-1 в плацентах беременных различных возрастных групп.
Единичные клетки, вступившие в апоптоз и экспрессирующие протеин р53, встречаются в синцитиотрофобласте и в строме ворсин хориона. Значения оптической плотности и площади экспрессии этого белка прогрессивно увеличиваются с возрастом беременной (рис. 15, 16). Возраст беременной положительно коррелирует с площадью экспрессии белка р53 (к=0,43) и оптической плотностью (к=0,25).
возрастные группы
Рис. 15. Площадь экспрессии р53 в плацентах женщин различных возрастных групп.
возрастные группы
Рис. 16. Оптическая плотность экспрессии р53 в плацентах беременных различных возрастных групп.
Полученные результаты позволяют сделать вывод о снижении пролиферативной активности плаценты и увеличении числа клеток, вступивших в апоптоз в связи с возрастом беременной.
Иммуногистохимическое исследование «старения» плаценты
В основу клинической концепции «старения» плаценты положены исследования переношенной беременности [Fox, 1978]. В связи с этим для изучения феномена «старения» плаценты были исследованы 14 плацент, полученных при переношенной беременности у женщин 18-28 лет и проведен сравнительный анализ экспрессии исследуемых маркеров в зрелой и переношенной плаценте.
Экспрессия пролактина, мелатонина, CD34, NO-синтазы, CD35, Мс1-1 и р53 была выявлена на всех препаратах при переношенной беременности.
Все исследуемые маркеры были визуализированы в плаценте при переношенной беременности в тех же структурах ворсинчатого хориона, что и при срочной беременности. Проведенный статистический анализ данных не выявил значимых отличий в показателях оптической плотности и площади экспрессии всех иммуногистохимических маркеров в плацентах при доношенной и переношенной беременности.
Таким образом, результаты проведенного нами исследования свидетельствуют о сохранении функциональной зрелости плаценты при переношенной беременности. По-видимому, «старение» плаценты обусловлено в большей степени общим состоянием организма беременной, нежели сроком гестации, иными словами, старение плаценты, как и любого органа в организме беременной женщины, происходит соответственно ее биологическому возрасту.
выводы
1. Установлены достоверные корреляции между возрастом матери и степенью экспрессии гормонов и сигнальных молекул - пролактина, мелатонина, CD34, Ш-синтазы, HLA-DR, CD35, р53, Mcl-1 в ворсинчатом хорионе зрелой плаценты.
2. Экспрессия пролактина и мелатонина в тканях ворсинчатого хориона прогрессивно снижается с увеличением возраста беременной.
3. Снижение васкуляризации ворсин хориона наблюдается как у юных рожениц, так и у рожениц, старше 29 лет.
4. Параметры экспрессии эндотелиальной NO-синтазы в ворсинчатом хорионе достоверно снижаются у юных первородящих и беременных старше 29 лет по сравнению с таковыми у женщин нормального репродуктивного возраста.
5. Параметры экспрессии антиген-презентирующих молекул CD35 и HLA-DR в плаценте у женщин разного возраста неодинаковы. Площадь экспрессии маркера дендритных клеток CD35 в ворсинчатом хорионе достоверно увеличивается с возрастом беременной. Площадь экспрессии антигена главного комплекса гистосовместимости П класса HLA-DR в ворсинчатом хорионе достоверно больше у беременных нормального репродуктивного возраста по сравнению с юными первородящими и беременными старше 29 лет.
6. Пролиферативная активность ворсинчатого хориона снижается в связи с увеличением возраста беременной. Максимальная площадь экспрессии антиапоптозного белка МсЫ обнаружена в плацентах у женщин нормального репродуктивного возраста. Число клеток, вступивших в апоптоз, прогрессивно увеличивается с возрастом беременной.
7. Отсутствие отличий в экспрессии гормонов и сигнальных молекул в плацентах при доношенной и переношенной беременности свидетельствует о сохранении функциональной зрелости, а не о старении плаценты при увеличении продолжительности сроков гестации.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Айламазян Э.К. «Старение» плаценты / ЭК. Айламазян, ЕА. Лапина, И.М.
. Кветной //Журнал акушерства и женских болезней. - 2004. - Т. 53.- С. 4-10.
2. Лапина ЕА Изучение пролиферативной активности цитотрофобласта ворсинчатого хориона эмбрионов человека / ЕАЛапина, Т.В. Кузнецова //Тезисы докладов на Ш Российской медико-биологической научной конференции молодых ученых. - Санкт-Петербург. - 2000. - С. 85.
3. Лапина ЕА. Особенности пролиферации цитотрофобласта ворсинчатого хориона плаценты человека / ЕА. Лапина, Т.В. Кузнецова //Тезисы докладов на Российской конференции Вавиловского общества генетиков. - Санкт-Петербург, 2000. - Т.1. - С. 240-241.
4. Лапина ЕА. Р53 и Мс1-1 как регуляторы апоптоза в плаценте беременных разных возрастных групп / ЕА. Лапина, И.М. Кветной, С.С. Коновалов // Альманах «Геронтология и гериатрия». - 2004. - С. 82-84.
5. Лапина ЕА. р53 и Мс1-1 как регуляторы клеточного цикла в плаценте человека // Тезисы докладов на VU Российской медико-биологической конференции молодых ученых. - Санкт-Петербург, 2004. - С. 155-156.
6. Лапина ЕА. Флюоресцентно-микроскопическое исследование связывания эпиталона тканями матери и плода у кроликов в норме и в условиях плацентарной недостаточности / ЕА.Лапина, Л А. Назарова, О.П. Петрова, ДА.
' Сибаров, Л.Б. Зубжицкая, Н.Г. Павлова, НИ. Константинова, Я.С. Коновалов, А.В. Арутюнян, И.М. Кветной, Е.И. Григорьев // Бюлл. экспер. биологии и медицины - 2004. - Т. 137, № 9. - С. 948-953.
7. Lapina E. A. Epitalon binds maternal and fetal tissues of rabbits in norm and in placental deficiency: Fluorescent microscopy study / E. A. Lapina, LA. Nazarova, O.P. Petrova, t>. A. Sibarov, L.B. Zubzhitskaya, N.G. Pavlova, N.N. Konstantinova, Y. S. Konovalov, A.V. Arutyunyan, I. M. Kvetnoy, E.I. Grigoriev // Neuroendocrinology Letters - 2004. - V 25. - P. 605-611.
8. Kolobov A. .The expression of CD35 gene in villous chorion in women's placentas with sexually transmitted diseases / A. Kolobov, E. Lapina // Abstract l" Euro-Asian Congress 'Year's Event in Obstetrics and Gynecology". - Saint-Petersburg. - 2004. -P. 21.
9. Lapina E. The expression ofp53 and Mcl-1 genes in placentas from pregnant women of different age / E. Lapina, A. Kolobov // Abstract 1st Euro-Asian Congress 'Year's Event in Obstetrics and Gynecology". - Saint-Petersburg. - 2004. - P. 28.
Лапина Е.Л. Сигнальные молекулы как маркеры зрелости и старения плаценты у женщин разного возраста // Автореф. дис... канд. биол. наук: 14.00.53. - СПб., 2004. - 22 с.
Формат 60x84 1/8, Объем Усл. Печ. Л. 1.0. Тираж 100 экз. Зак. Бесплатно. Подписано в печать 20.07.2004
Отпечатано с готового оригинал-макета Издательство «Система»
04 - 1 582 7-
Оглавление диссертации Лапина, Елизавета Александровна :: 2004 :: Санкт-Петербург
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.
ВВЕДЕНИЕ.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
Глава 1. НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ ЭМБРИОГЕНЕЗА
ВОРСИНЧАТОГО ХОРИОНА.
1.1. Формирование и развитие ворсинчатого хориона в первой половине беременности.
1.2. Строение ворсинчатого хориона во второй половине беременности.
1.3. Плацентарный рост и функциональная активность плаценты в конце беременности.
1.4. «Старение» плаценты.
Глава 2. ЭНДОКРИННАЯ ФУНКЦИЯ ПЛАЦЕНТЫ.
2.1. Плацента как железа внутренней секреции.
2.2. Синтез и секреция «классических» гормонов плаценты.
2.2.1. Хорионический гонадотропин человека.
2.2.2. Кортикотропный рилизинг-фактор.
2.2.3. Стероидные гормоны: прогестерон и эстрогены.
2.2.3.1. Прогестерон.
2.2.3.2. Эстрогены.
2.2.4. Плацентарный лактоген.
2.2.5. Пролактин.
2.3. Синтез и секреция некоторых биологически активных сигнальных молекул плаценты.
2.3.1. Плацентарный лептин.
2.3.2. Факторы роста.
2.3.2.1. Эпидермальный фактор роста.
2.3.2.2. Инсулиноподобный фактор роста.
2.3.2.3. Активины и ингибины.
2.3.3. Некоторые вазоактивные пептиды плаценты.
2.3.3.1. Эндотелины.
2.3.3.2 Система ренин-ангиотензин.
2.3.3.2.1. Ренин.
2.3.3.2.2. Ангиотензины.
2.3.3.3. NO-синтаза.
2.3.4. Мелатонин.
2.3.5. Маркеры апоптоза в плаценте.
2.3.5.1. Белок р53.
2.3.5.2. Семейство Вс1-2.
2.4. Плацента как иммунокомпетентный орган.
2.4.1. Иммунокомпетентные клетки плаценты.
2.4.2. Иммуномаскирующие факторы плаценты.
2.4.3. Особенности экспрессии молекул главного комплекса гистосовместимости в плаценте.
2.5. Влияние различных факторов на гормональный статус плаценты.
2.5.1. Гормоны и биологически активные вещества как маркеры различных патологических состояний беременности.
2.5.1.1. Хорионический гонадотропин человека
2.5.1.2. Кортикостероидный рилизинг-фактор.
2.5.1.3. Прогестерон.
2.5.1.4. Эстрогены.
2.5.1.5. Плацентарный лактоген.
2.5.1.6. Пролактин.
2.5.1.7. Плацентарный лептин.
2.5.1.8. Факторы роста.
2.5.1.9. Вазоактивные пептиды.
2.5.1.10. NO-синтаза.
2.5.1.11. Мелатонин.
2.5.1.12. Маркеры апоптоза.
2.5.2. Влияние различных факторов на морфо-функциональный статус плаценты.
2.5.3. Влияние возраста беременной женщины на функциональную морфологию плаценты.
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.
Глава 3. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
3.1. Исследуемый материал.
3.2. Методы исследования.
3.2.1. Гистологические методы.
3.2.2. Иммуногистохимические методы.
3.2.3. Морфометрические методы и компьютерный анализ микроскопических изображений.
3.2.4. Статистическая обработка результатов.
Глава 4. ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
ДОНОШЕННЫХ ПЛАЦЕНТ.
4.1. Экспрессия гормонов - мелатонина и пролактина в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста.
4.2. Экспрессия эндотелиального маркера CD34 в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста.
4.3. Экспрессия эндотелиальной NO-синтазы в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста.
4.4. Экспрессия HLA-DR и CD35 в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста.
4.5. Экспрессия маркеров Mcl-1 и р53 в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста.
Глава 5. АНАЛИЗ МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЬНОГО
СОСТОЯНИЯ ДОНОШЕННЫХ ПЛАЦЕНТ.
Глава 6. ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
СТАРЕНИЯ» ПЛАЦЕНТЫ.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
Глава 7. СИГНАЛЬНЫЕ МОЛЕКУЛЫ КАК МАРКЕРЫ
ЗРЕЛОСТИ И СТАРЕНИЯ ПЛАЦЕНТЫ У ЖЕНЩИН РАЗНОГО ВОЗРАСТА.
7.1. Особенности синтеза и секреции гормонов плодовой части плаценты.
7.2. Влияние возраста беременной на структурно-функциональные особенности плаценты.
7.3. Изучение феномена «старения» плаценты.
Введение диссертации по теме "Геронтология и гериатрия", Лапина, Елизавета Александровна, автореферат
Актуальность темы
Результаты многолетних исследований показали, что здоровье новорожденного ребенка в значительной степени определяется течением антенатального периода. Нарушение функций плаценты — одна из основных причин перинатальной заболеваемости и смертности (Савельева и др., 1991). Еще в середине XX века известный классик отечественной плацентологии А.И. Брусиловский писал: «.мы постепенно приближаемся к прочтению плаценты как визитной карточки плода.».
Важнейшей функцией плаценты является синтез и секреция широкого спектра биологически активных веществ. Многочисленные плацентарные пептиды (их верифицировано уже более 100) выполняют роль гормонов, ферментов, проферментов, ингибиторов, рецепторов, факторов роста, иммунорегуляторных агентов, транспортных и связывающих белков. Уникальность этого органа в плане механизмов интеграции выполняемых функций и присутствие в нем основных регуляторных нейропептидов позволяют считать плаценту одним из важных отделов диффузной нейроэндокринной системы, впервые описанной Pearse в конце 60-х годов XX века (Pearse, 1977).
Из плацентарных компонентов объектом нашего исследования был выбран ворсинчатый хорион, так как в силу особенностей строения он играет наиболее важную роль в осуществлении обменных процессов между кровью матери и плода. В настоящее время убедительно доказано, что наиболее активной тканью плаценты в метаболическом и функциональном плане является эпителий ворсинчатого хориона.
Широкие возможности в изучении гормонального статуса плаценты связаны с появлением ряда методов, позволяющих изучить не только особенности гистологического строения и состояния обменных процессов, но и количественно оценить функциональное состояние различных структурных компонентов плаценты.
Расширению знаний способствует бурное развитие молекулярной микроскопии с помощью иммуноморфологических реакций на срезах на тканевом, клеточном и ультраструктурном уровнях исследования, позволяющих визуализировать макромолекулы гормонов, отдельных ферментов, рецепторов, коллагенов различных типов и т.п. Среди иммуногистохимических методов, широко применяемых как в клинической практике, так и в научно-исследовательской работе, одним из наиболее перспективных и высокочувствительных является авидин (или стрептавидин)-биотиновый (ABC) иммунопероксидазный метод.
В этой связи изучение гормональной активности плаценты с применением данного иммуногистохимического метода является актуальной и необходимой научно-практической задачей.
Анализ современной литературы показал, что большинство авторов изучало развитие адаптационных механизмов при патологическом состоянии плаценты. Вместе с тем, необходимо отметить недостаточное внимание к вопросам развития компенсаторно-приспособительных реакций, степени их мобилизации в плацентах у женщин с нормальной физиологической беременностью в зависимости от их возраста. Имеются сведения, касающиеся степени структурных и функциональных сдвигов в плацентах у женщин различного возраста с нормальной физиологической беременностью, тогда как исследование нормальной плаценты ограничивалось лишь констатацией процессов, свидетельствующих о функциональном старении органа. Между тем от степени выраженности этих изменений зависит выключение больших или меньших участков из обменной поверхности плацентарной ткани.
Вышеизложенные обстоятельства, а также отсутствие подобных работ свидетельствуют об актуальности и необходимости проведения специального исследования экспрессии гормонов и биологически активных веществ в ворсинчатом хорионе у беременных разного возраста.
Плацента уникальна и как объект для геронтологических исследований, поскольку ее онтогенез четко очерчен по времени гестации, а плацентарная ткань удобна для поиска четких, согласованных критериев старения на органном, тканевом, клеточном и субклеточном уровнях. Следует отметить, что в настоящее время убедительные морфологические доказательства истинного старения плаценты отсутствуют и вопрос «старения» плаценты остается дискуссионным. В литературе нами не найдено работ, касающихся изучения гормональной функции плаценты в связи со старением этого органа.
В основу клинической концепции «старения» плаценты положены исследования переношенной беременности. В этой связи исследование экспрессии гормонов при доношенной и переношенной беременности также представляется актуальной темой для исследования.
Цель и задачи исследования
Целью диссертационного исследования является сравнительный анализ экспрессии гормонов и сигнальных молекул в ворсинчатом хорионе зрелой плаценты у беременных разного возраста, а также при доношенной и переношенной беременности для оценки феномена «старения» плаценты.
Для достижения указанной цели были поставлены и последовательно решены следующие задачи:
1. Определить влияние возрастного фактора на качественные и количественные параметры экспрессии гормонов - пролактина и мелатонина.
2. Выявить особенности васкуляризации ворсинчатого хориона у женщин различных возрастных групп с помощью иммуногистохимического маркера эндотелиальных клеток CD34.
3. Определить качественные и количественные параметры экспрессии фермента NO-синтазы в ворсинчатом хорионе как главного плацентарного вазодилататора у женщин различных возрастных групп.
4. Выявить особенности экспрессии маркеров HLA-DR и CD35 как маркеров иммунного статуса плаценты в ворсинах хориона у женщин разного возраста.
5. Оценить влияние фактора возраста беременной на пролиферативную активность клеток плодовой части плаценты с помощью апоптозного (р53) и антиапоптозного (Мс1-1) маркеров.
6. Провести сравнительный анализ экспрессии гормонов и биологически активных веществ при доношенной и переношенной беременности у женщин нормального репродуктивного возраста для выяснения вопроса о возможном «старении» плаценты.
Научная новизна работы
Впервые проведен сравнительный анализ экспрессии гормонов пролактина и мелатонина, а также маркеров CD34, NO-синтазы, HLA-DR, CD35, р53, Мс1-1 в ворсинчатом хорионе зрелой плаценты у беременных разного возраста. Установлено влияние возраста беременной женщины на экспрессию всех исследуемых гормонов в ворсинчатом хорионе. Впервые выявлено снижение степени экспрессии пролактина, мелатонина, CD34, NO-синтазы, р53, Мс1-1 клетками плодовой части плаценты в связи с увеличением возраста беременной женщины. Обнаружены отличия в степени экспрессии антиген-презентирующих молекул CD35 и HLA-DR в плаценте у женщин разного возраста. Установлено снижение пролиферативной активности ворсинчатого хориона с увеличением возраста беременной женщины. На основании количественного и качественного анализа экспрессии гормонов пролактина, мелатонина, CD34, NO-синтазы, CD35, р53 и Мс1-1 не выявлено отличий в степени экспрессии этих гормонов в ворсинчатом хорионе при доношенной и переношенной беременности, что свидетельствует о функциональной зрелости, а не «старении» плаценты.
Практическая значимость работы
Полученные результаты позволяют расширить представления о морфо-функциональных изменениях плаценты в связи с возрастом беременной, что следует учитывать в акушерско-гинекологической практике для повышения эффективности терапевтических мероприятий. Отсутствие различий в характере экспрессии гормонов при доношенной и переношенной беременности является убедительным контраргументом теории «старения» плаценты.
Положения, выносимые на защиту
1. Экспрессия пролактина, мелатонина, CD34, NO-синтазы, р53, Мс1-1 в клетках ворсинчатого хориона прогрессивно уменьшается в связи с увеличением возраста беременной женщины.
2. Пролиферативная активность ворсинчатого хориона с увеличением возраста матери прогрессивно снижается.
3. Достоверные отличия в концентрации и характере экспрессии пролактина, мелатонина, CD34, NO-синтазы, CD35, р53 и Mcl-1 в ворсинчатом хорионе при доношенной и переношенной беременности отсутствуют, что свидетельствует о несостоятельности теории «старения» плаценты.
Связь с научно-исследовательской работой Института
Диссертационная работа является научной темой, выполняемой по основному плану НИР Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН.
Структура и объем диссертации
Диссертация состоит из введения, 7 глав, выводов и указателя литературы. Обзор литературы состоит из двух глав. Глава 1 представляет собой анализ данных литературы по особенностям онтогенеза ворсинчатого хориона. В главе 2 рассматриваются эндокринная и иммунологическая функции плаценты и влияние различных факторов на гормональный статус плацентыГлава 3 посвящена описанию материалов и методов, используемых в данном исследовании. Главы 4-6 представляют собственные данные изучения особенностей экспрессии исследуемых сигнальных молекул у беременных различных возрастных групп при доношенной беременности; а также сравнительный анализ экспрессии маркеров при доношенной и переношенной беременности. В главе 7 обсуждаются полученные результаты. Текст диссертации изложен на 149 страницах, содержит 4 таблицы, иллюстрирован 29 рисунками. Список литературы содержит 248 источников, из них отечественных - 37, зарубежных -211.
Заключение диссертационного исследования на тему "Сигнальные молекулы как маркеры зрелости и старения плаценты у женщин разного возраста"
ВЫВОДЫ
Установлены достоверные корреляции между возрастом матери и степенью экспрессии гормонов и сигнальных молекул - пролактина, мелатонина, CD34, NO-синтазы, HLA-DR, CD35, р53, Mcl-1 в ворсинчатом хорионе зрелой плаценты.
Экспрессия пролактина и мелатонина в тканях ворсинчатого хориона прогрессивно снижается с увеличением возраста беременной.
Снижение васкуляризации ворсин хориона наблюдается как у юных рожениц, так и у рожениц, старше 29 лет. Параметры экспрессии эндотелиальной NO-синтазы в ворсинчатом хорионе достоверно снижаются у юных первородящих и беременных старше 29 лет по сравнению с таковыми у женщин нормального репродуктивного возраста. Параметры экспрессии антиген-презентирующих молекул CD35 и HLA-DR в плаценте у женщин разного возраста неодинаковы. Площадь экспрессии маркера дендритных клеток CD35 в ворсинчатом хорионе достоверно увеличивается с возрастом беременной. Площадь экспрессии антигена главного комплекса гистосовместимости II класса HLA-DR в ворсинчатом хорионе достоверно больше у беременных нормального репродуктивного возраста по сравнению с юными первородящими и беременными старше 29 лет.
Пролиферативная активность ворсинчатого хориона снижается в связи с увеличением возраста беременной. Максимальная площадь экспрессии антиапоптозного белка Mcl-1 обнаружена в плацентах у женщин нормального репродуктивного возраста. Число клеток, вступивших в апоптоз прогрессивно увеличивается с возрастом беременной. Отсутствие отличий в экспрессии гормонов и сигнальных молекул в плацентах при доношенной и переношенной беременности свидетельствует о сохранении функциональной зрелости, а не о старении плаценты при увеличении продолжительности сроков гестации.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Анализ проведенных нами исследований влияния возраста беременной на функциональную активность плаценты и изучение функционирования плаценты при переношенной беременности позволяет нам предложить собственную гипотезу «старения» плаценты. Согласно ей, «старение» плаценты обусловлено в большей степени общим состоянием организма беременной, нежели сроком беременности, иными словами, старение плаценты, как и любого органа в организме беременной женщины, происходит соответственно ее биологическому возрасту.
Подтверждением этого тезиса служат многочисленные морфологические «находки» плацентологов у беременных пожилого возраста, о которых упоминалось выше: увеличенное содержание фибриноида, истончение эпителиального покрова ворсин и другие, а также выявленное нами снижение экспрессии гормонов и биологически активных веществ в связи с увеличением возраста беременной. Наиболее низкие показатели исследуемых нами гормонов и биологически активных веществ были выявлены у женщин старше 40 лет, а самые высокие — у женщин нормального репродуктивного возраста.
Снижение пролиферативной активности плаценты и увеличение клеток с программированной клеточной гибелью также свидетельствует о дегенеративных процессах в этом органе, прогрессивно возрастающих с увеличением возраста беременной.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2004 года, Лапина, Елизавета Александровна
1. Брусиловский А.И. Развитие и строение тканей хориона в раннем онтогенезе человека // Автореф. дис.канд. мед. наук. Новосибирск, 1963.-21 с.
2. Брусиловский А.И. Функциональная морфология плацентарного барьера человека. Киев, «Здоровье», 1976. - 129 с.
3. Волкова О.В., Тарабрин С.Б. Эмбриогенез человека и его регуляция. -М., 1973.-143 с.
4. Глуховец Б.И., Глуховец Н.Г. Патология последа. Санкт-Петербург, «Грааль», 2002. - 448 с.
5. Говорка Э. Плацента человека. Варшава, Польское государственное медицинское издательство, 1970. - 470 с.
6. Григорьев М.Ю., Имянитов Е.Н., Хансон К.П. Апоптоз в норме и патологии // Медицинский академический журнал. 2003. - Т. 3, № 3. -С. 3-11.
7. Зыбина Е.В. Цитология трофобласта. Л.: «Наука», 1986. - 192 с.
8. Калашникова Е.П., Зубжицкая Л.Б. Иммунолюминесцентное исследование плаценты при нормальной и патологической беременности Труды Ленингр. науч. о-ва патологоанатомов, 1976 — вып. 17.-С. 272-277.
9. Карева И.В. Факторы генетического и акушерского риска в пренатальной диагностике хромосомных болезней // Автореф. дис.канд. мед. наук. Санкт-Петербург, 1999. - 23 с.
10. Кащенко Н. Эпителий человеческого хориона и его роль в гистогенезе последа. Харьков, 1884. - 33 с.
11. И. Кветная Т.В., Князькин И.В. Мелатонин: роль и значение в возрастной патологии. СПб.: ВМедА, 2003. - 93 с.
12. Кнорре А.Г. Краткий очерк эмбриологии человека. Л.: «Медгиз», 1959.-223 с.
13. Князев Ю.А., Беспалова В.А. Проблемы перинатальной эндокринологии // Педиатрия. 1984. - № 4. - С. 59-64.
14. Кобозева Н.В., Гуркин Ю.А. Перинатальная эндокринология. Руководство для врачей. Л: Мед., 1986. - 311 с.
15. Колесников С.И. Периферический цитотрофобласт плаценты человека // Автрореф. дис. канд. мед. наук. Симферополь, 1973. -22 с.
16. Маисая Г.И. К вопросу о некоторых гистохимических особенностях плаценты и плацентарной площадки матки женщины в разные сроки беременности. Тбилисси, 1979. - 45 с.
17. Мануйлова И.А. Баграмян Э.Р. Эндокринология беременности // Вопросы охраны материнства и детства. 1972. - Т. 17, № 11. - С. 3842.
18. Милованов А.П. Патология системы мать — плацента плод. Руководство для врачей. - М., «Медицина», 1999. - 448 с.
19. Милованов А.П., Курик Е.Г. Функциональная морфология вневорсинчатого (преферического) трофобласта плаценты человека // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1990. - № 10. - С. 7782.
20. Михайлова Н.П. Гистоэнзиматические особенности плаценты в норме и при некоторой акушерской патологии. Горький, Горьковский медицинский институт, 1977 - 73 с.
21. Пальцев М.А., Волощук И.Н., Демидова Е.М., Мещерякова А.В., Носов В.Б. Иммунологические аспекты материнско-плодовых взаимоотношений // Вестник РАМН 1999. - № 5. - С. 32-36.
22. Пальцев М.А., Иванов А.А. Межклеточные взаимодействия. М., «Медицина», 1995. - 224 с.
23. Рыков В.А. Распределение а2-макроглобулина, ассоциированных сбеременностью протеина-А и а2 гликопротерина в плаценте человека // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1990. - № 10. - С. 7476.
24. Савельева Г.М., Федорова М.В., Клименко П.А., Сичинаева Л.Г. Плацентарная недостаточность. М., «Медицина», 1991. - 276 с.
25. Степанов С.А., Исакова М.И., Миронов и др. Введение в клиническую морфологию плаценты человека. Саратов, 1991. 168 с.
26. Субботин М.Я., Донских Н.В., Брусиловский А.И., Новиков В.Д.в
27. Плацента человека // Сборник научных статей: «Гистофизиология и гистопатология внезародышевых органов человека и млекопитающих». Новосибирск, 1971. - С. 67-71.
28. Таболин А.А., Лукина Л.И. Актуальные проблемы перинатальной эндокринологии//Педиатрия.- 1981.-№2.-С. 5-8.
29. Федорова М.В., Калашникова Е.П. Плацента и ее роль при беременности. Москва, «Медицина», 1986 - 256 с.
30. Цинзерлинг А.В. Современные инфекции. Патологическая анатомия и вопросы патогенеза. — Санкт-Петербург., «Сотис», 1993. 363 с.
31. Цинзерлинг В.А., Мельникова В.Ф. Перинатальные инфекции. Вопросы патогенеза, морфологической диагностики и клиникоморфологических сопоставлений. Практическое руководство. —
32. Санкт-Петербург., «Элби СПб», 2002. 352 с.
33. Цирельников Н.И. Гистофизиология хориона в системе мать — плацента плод на различных сроках беременности // Автореф. дис. доктора мед. наук. - Новосибирск, 1974. - 34 с.
34. Цирельников Н.И. Гистофизиология плаценты человека. — Новосибирск: «Наука», 1980. 184 с.
35. Шорлуян А.П. Морфо-микроскопическое строение плаценты юных рожениц // Актуальные вопросы практического здравоохранения. — Ставрополь. 1984.- С 43-44.
36. Abraham S., Indrasingh I., Vettivel S. Gross morphology and ultrastructure of dendritic cells in the normal human decidua // Clin. Anat. 2000. - V. 13, №3.-P. 177-80.
37. Aherne W., Dunnill M. S. Quantitative aspects of placental structure // J. of Pathol. Bacterial. 1966. - V. 91. - P. 123-139.
38. Al-Hijji J., Andolf E., Laurini R., Batra S. Nitric oxide synthase activity in human trophoblast, term placenta and pregnant myometrium // Reprod Biol Endocrinol 2003. - V. 1, № 1. - P. 1-11.
39. Ashworth C.J., Hoggard N., Thomas L. Placental leptin // Reviews of reproduction. 2000. - V. 5. - P. 18-24.
40. Asmussen I. infrastructure of the villi and fetal capillaries in placentas from smoking and nonsmoking mother // Brit J Obstet and Gynecol -1980. V. 87, № 3. - P. 239-245.
41. Bazan JF. Haemopoietic receptors and helical cytokines // Immunol Today- 1990.-V. 11.-P. 350-354.
42. Benirschke K., Kaufmann P. // Patology of the Human Placenta. 3rd ed. -New York: Springer-Verlag, 1990. - 720 p.
43. Bern HA, and Nicoll CA. The comparative endocrinology of prolactin //
44. Rec Prog Horm Res 1968. - V. 24. - P. 681-720.
45. Bigazzi M., Pollicino G., Nardi E. Is human decidua a specializedendocrine organ? // J Clin Endocrinol Metab. 1979. - V. 49, № 6. - P.847.850.
46. Bocconi L., Mauro F., Maddalena S.E. Insuline-like growth factor 1 in controls and growth-retarded fetuses // Fetal Diagnosis and Therapy. — 1998. -V. 13. P. 192-196.
47. Boyd J.D., Hamilton W.J. The human placenta. Cambrige, Heffer, 1970.- 183p.
48. Boyd P.A. Quantitative studies of the normal human placenta from 10 weeks of gestation to term // Early Hum. Devel. 1984. - Vol. 9. - p. 297307.
49. Braithwaite GD, Glascock RF, and Riazuddin S. Studies on the transfer of calcium across the ovine placenta and incorporation into the foetal skeleton // Br J Nutr 1972. - V. 27. - P. 417-424.
50. Bukovsky A, Cekanova M, Caudle MR et al. Variability of placental expression of cyclin E low molecular weight variants // Biol Reprod. -2002. Vol. 67, № 2. - p. 568-74.п
51. Bulmer JN, Morrison L, Smith JC. Expression of class II MHC gene products by macrophages in human uteroplacental tissue. // Immunology. 1988. -V. 63, № 4. P. 707-714.
52. Buskila D, and Shoenfeld Y. Prolactin, bromocriptine and autoimmune diseases // Isr J Med Sci 1996. - V. 32. - P.23-27.
53. Cano A, Rivera J. Demonstration of P29, an oestrogen receptor-associated tumor marker, in human term placenta // Placenta. 1991 - V. 12, № 2 -P. 153-160.
54. Challis JR, Smith SK. Fetal endocrine signals and preterm labor // Biol Neonate.-2001.-V. 79,№3-4-P. 163-167.
55. Chan J.S., Nie Z.R., Seidah N.G., Chretien M. Purification of ovine placental lactogen (oPL) u sing high-performance liquid с hromatography. Evidence for two of oPL // FEBS Lett 1986. - V.199, № 2.- P. 259 -264.
56. Chao H-S, Myer S.E., Handwerger S. Endothelins inhibits basal and stimulated release of prolactin by human deciduals cells // Endocrinology -1994.-V. 133.-P. 505-510.
57. Cheville J.C., Robinson R.A., Benda J.A. p53 expression in placentas with hydropic change and hydatidiform moles // Mod Pathol. 1996. - V 9, № 4.-P 392-396.
58. Clapp C, and De la Escalera GM. Prolactins: novel regulators of angiogenesis // News Physiol Sci 1997. - V. 12. - P. 231-237.
59. Clavero-Nunez J.A. Patologa-placentario // Rev. Esp. Obstet. Gynecol. -1962.-V. 20.-P. 208-215.
60. Clements J, Whitfeld P, Cooke N, Healy D, Matheson B, Shine J, and Funder J. Expression of the prolactin gene in human decidua-chorion // Endocrinology 1983. - V. 112. - P. 1133-1134.
61. Cooke N.E., Coit D., Shine J., Baxter J.D., Martial J.A. Human prolactin cDNA structural analysis and evolutionary comparisons // J Biol Chem -1981. V. 256. - P. 4007-4016.
62. Cook M., G raham С., К avet R. M orning u rinary a ssessment of noctural melatonin secretion in older woman // J. Pineal Res.-2000.-Vol. 28. P. 4147.
63. Cronier L., Bastide. Gap junctional communication during human trophoblast differentiation: influence of human chorionic gonadotropin // Endocrinology. 1994. - V. 135 (1), № 6 - P. 402-408.
64. Csikos Т., Gallinat S., Unger T. Extrarenal aspects of angiotensin II function // Eur J Endocrinol 1997. - V. 136. - P. 349-358.
65. Daniel I., Linzer H., Fisher S.J. The placenta and the prolactin family of hormones:, regulation of the physiology of pregnancy. // Molecular Endocrinology. 1999. - V. 13, № 6. - P.837-840.
66. Dilioglou S., Cruse J.M., Lewis R.E. Costimulatory function of umbilical cord blood CD14(+) and CD34(+) derived dendritic cells // Exp. Mol. Pathol. 2003. - V. 75, № 1. - P. 18-33.
67. Douglas GC, King BF. Isolation of pure villous cytotrophoblast from term human placenta using immunomagnetic microspheres // J Immunol Methods. 1989. - V. 119, № 2. - P. 259-268.
68. Dragovich Т., Rudin C.M., Thompson C.B. Signal transduction pathways that regulate cell survival and cell death //Oncogene. 1998. - V. 24, №17(25)-P. 3207-3213.
69. Duncan K.G., Haidar M.A., Baxter J.D., Reudelhuber T.L. Regulation of human renin expression in chorion cell primary cultures // Proc Natl Acad Sci USA. 1990. - V. 87. - P.7588-7592.
70. Ether J.-F., Findlay J.K. Roles of activin and its signal transduction mechanisms in reproductive tissues // Reproduction. 2001. - V. 121. - P. 667-675.
71. Florio P., Cobellis L., Luisi S. Changes in ingibins and activin secretion in healthy and pathological pregnancies // Mol Cell Endocrinol 2001. - V. 30.-P. 123-130.
72. Fox H. Pathology of the placenta // Clin. Obstet. Gynecol. 1986. - V. 13, №3.-P. 501-519.
73. Fox H. Aging of the placenta // Arch Dis Child Fetal Neanatal Ed. 1997. -V. 77.-P. 171-175.
74. Fox H., Agrafojo-Blauco A. Scaningelectron microscopy of the human placenta in normal and abnormal pregnancies // Eur. J. Ostet. Gyn. Reprod. Biol. 1974. - V. 4. - P. 45-50.
75. Fox H., Page Fack W. The human placenta as an experimental model // Clin Endocrin. Metaboll. 1981. - V. 10, № 1. - P. 57-72.
76. Frame L. Т., Wiley L., Rogol A.D. Indirect immunofluorescent localization of prolactin to the cytoplasm of decidua and trophoblast cells in human placental membranes at term // J Clin Endocrinol Metab. 1979. -V. 49, №3.-P. 435-437.
77. Frank H-G., Malekzadeh F., Kertschanska S. Immunohistochemistry of two different types of placental fibrinoid // Acta Anat. 1994. - V. 150 — P. 55-68.
78. Freeman, Marc E., Bela Kanyicska, Anna Lerant, and Gyorgy Nagy. Prolactin: Structure, Function, and Regulation of Secretion // Physiol. Rev. 2000.-V. 80.-P. 1523-1631.
79. Fulop V., Мок S.C., Genest D.R., Gati I., Doszpod J., Berkowitz R.S. p53, p21, Rband mdm2 oncoproteins. Expression in normal placenta, partial and complete mole, and choriocarcinoma // J Reprod Med. 1998. -V. 43, №2-P. 119-27.
80. Garcia J.F., Piris M.A., Lloret E., Orradre J.L., Murillo P.G., Martinez J.C.p53 expression in CMV-infected cells: association with the alternativeexpression of the p53 transactivated genes p21/WAFl and MDM2. //
81. Histopathology 1997. - V 30, №2. - P. 120-125.
82. Garcia-Lloret M.I., Yui J., Winkler-Lowen В., Guilbert L.J. Epidermalgrowth factor ingibits cytokine-induced apoptosis of primary humantrophoblast // J Cell Physiol 1996. - V. 167. - P. 324-332.
83. Geier G., Schuhman R., Kraus H., Regional unterschliedliche Zellproliferation innerhalb der Placentome reifer menschlicher Placenten:autoradiographische Untersuchungen // Arch Gynacol. 1975. - V. 218. -P. 31-37.
84. Goland R.S., Wardlaw S.L., Stark R.I. High levels of corticotropin-releasing hormone immunoreactivity in maternal and fetal plasma during pregnancy // J. Clin Endocrinol Metab 1986. - V. 63. - P. 1199-1203.
85. Golander A., Hurley Т., Barrett J., Handwerger S. Synthesis of prolactin by human decidua in vitro // J Endocrinol. 1979. - V. 82, № 2. - P. 263267.
86. Goldman B.D. Pattern of melatonin secretion mediates transfer of photoperiod information from mother to fetus in mammals // Sci STKE. — 2003.-V. 22.-P. 29.
87. Goldstein J, Braverman M, Salafia C, Buckley P. The phenotype of human placental macrophages and its variation with gestational age // Am J Pathol. 1988. - V. 133, № 3. - P. 648-659.
88. Grattan D.R. The actions of prolactin in the brain during pregnancy and lactation // Prog Brain Res 2001. - V. 133. - P. 153-171.
89. Haidacher S., Blaschitz A., Desoye G., Dohr G. Immunohistochemical evidence of p53 protein in human placenta and choriocarcinoma cell lines // Hum Reprod. 1995. -V. 10, № 4. - P. 983-988.
90. Halperin R., Peller S., Sandbank J., Bukovsky I., Schneider D. Expression of the p53 gene and apoptosis in gestational trophoblastic disease // Placenta. 2000. - V. 21, № 1 - P. 58-62.
91. Hambartsoumian E., Srivastara R.K., Seibel M.M. Differential expression and regulation of inducible nitric oxide synthase (iNOS) mRNA in humantrophoblast in vitro // Am J Reprod Immunol. 2001. - V. 45, № 2. - P. 78-85.
92. Handwerger S., Markoff E., Richards R. Regulation of the synthesis and release of decidual prolactin by placental and autocrine/paracrine factors // Placenta.-1991.-V. 12, №2.-P. 121-130.
93. Hassink S.G., de Lancey E., Shelow D.V. Placental leptin: an important new growth factor in intrauterine and neonatal development? // Pediatrics. 1997.-V. 100.-E1-E7.
94. Healy D.L. The clinical significance of endometrial prolactin. // Aust N Z J Obstet Gynaecol. 1984. - V. 24. - N. 2. - P. 111-116.
95. Healy D.L., Burger H.G., Muller H.K. Hypothesis: placental membranes produce prolactin // Mol Cell Endocrinol. 1978. - V. 11, № 1. - P. 1-6.
96. Heap R.B. Paracrine and autocrine functions of the placenta: a key to the success of viviparity? // Exp Clin Endocrinol 1994. - V. 102, № 3. - P. 262-268.
97. Henson M.C., Swan K.F., O'neil J.S. Expression of placental leptin and leptin receptor transcripts in early pregnancy and at term // Obstet Gynecol. 1998. - V. 92. - P. 1020-1028.
98. Hill J.A., Choi B.C. Maternal immunological aspects of pregnancy success and failure // J. Reprod. Fertil. Suppl. 2000. - V. 55. - P.91-97.
99. Hill D.J., Petrik J., Arany E. Growth factors and the regulation of fetal growth // Diabetes Care. 1998. - V. 21 (Supplement 2) B60-B69.
100. Hill N.C., Rivera J, Lopez Bernal A., MacKenzie I.Z. The effect of RU 38,486 on progesterone and oestrogen receptor concentrations in the decidua and placenta in early pregnancy // Hum Reprod. 1990. - V.5, № 4. p. 464-467.
101. Hirohashi Т., Hoshino A., Sudo Y. Dynamics of various peptide hormone receptors in human placental cell membranes // Nippon Sanka Fujinka Gakkai Zasshi 1984. - V. 36, № 6. - P. 904-910.
102. Hocker I., Briese V., Richter D.U. Investigations on regulation of CRH, ACTH and Cortisol in trophoblast cells in vitro // Zentralbl Gynakol. 2003-V. 125, №10-P. 409-14.
103. Hofman G.E., Rao C.V., Brown M.J. Epidermal growth factor in uterin of nonpregnant women and pregnant women throughout pregnancy and at delivery // Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 1988. -V.66.-P. 119-123.
104. Huppertz , Frank H-G, Kingdom J.C.P., Reister F., Kaufinann P. Villous cytotrophoblast regulation of the syncytial apoptotic cascade in the human placenta // Histochemistry and Cell Biology 1999. - V 110, № 5. - P.495.508.
105. Iggnarro LJ. Signal transdoction mechanisms involving nitric oxide // Biochem Pharmacol. 1991. - V. 41. - P. 485-490.
106. Inoe A., Yanagisawa M., Kimura S. The human endothelin family: Three structurally and pharmacological profile of a potent and selective endothelin B-receptor antagonist // Proc Natl Acad Sci USA 1989. - V. 86. - P.2863-2867.
107. Iorio D.R., Marinoni E., Cosmi E.V. New peptides, hormones and parturition // Gynecol Endocrinol 1998. - V. 12, № 6. - 429-434.
108. Iverson I.E., Farsund T. Flow cytometry in the assessment of human placental growth // Acta Obstet Scand. 1985. - V. 64. - P. 605-607.
109. Jackson M.R., Mayhew T.M., Boyd P.A. A quantitative description of the elaboration and maturation of villy from 10 weeks of gestation to term // Placenta. 1992. - V. 13. - P. 357-370.
110. Jaikihara H., Poisner A.M., Hirsch R., Handwerger S. Human uterine decidual macrophages express renin // J Clin Endocrinol Metab 1995. — V. 80.-P. 1273-1277.
111. John M., Rajalekshmy T.N., Nair M.B. et al. Expression of epidermal growth factor in gestational trophoblastic disease (GTD) // Journal of Experimental Clinical Cancer Research 1997. - V. 16. - P. 129-134.
112. Jones S .А., С hallis J .R.G. L ocal s timulation о f prostaglandin production by cortocotropin-releasing hormone in human fetal membranes and placenta // Biochem Biophys Res Commun 1989. - V. 159. - P 192-199.
113. Kalenga M.K., de GasparoM., Thomas K., De Hertogh R. Angiotensin II stimulates estradiol secretion from human placenta explants through AT-1 receptor activation // J Clin Endocrinol Metab 1995. - V.80. - 12331237.
114. Kammerer U., Schoppet M., McLellan A. Human decidua contains potent immunostimulatory CD83(+) dendritic cells // Am. J. Pathol. 2000. - V. 157, № 1.-P.159-169.
115. Kara S.A., Toppare M.F., Avsar F., Caydere M. Placental aging, fetal prognosis and fetomaternal Doppler indices. // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 1999. - V. 82, № 1. - P. 47-52.
116. Karlsson C., Lindell K., Svensson E. Expression of functional leptin receptors in the human ovary // J Clin Endocrinol Metab. 1997. - V. 82. P. 4144-4148.
117. Kasai K., Shik S.S., Yoshida Y. Production and localization of human prolactin in placenta and decidua in early and term normal pregnancy // bit Biol Res Pregnancy. 1982. - V. 3, № 1 - P. 25-29.
118. Kaufmann P., Luckhard N., Leiser P. Three-dimensional representation of the fetal vessel system in the human placenta // Trophoblast Res. 1988. -V.3.-P. 113-137.
119. Kay H.H., Grindle K.M., Magness R.R. Ethanol exposure oxidative stress and impairs nitric oxide availability in the human placental villi: a possiblemechanism of toxicity // Am J Obstet Gynecol 2000. - V. 182, № 3. - P. 682-688.
120. Kleim. Proliferative activity in ectopic trophoblastic tissue // Hum. Reprod. 1995 - V. 10, № 9 - P. 2441-2444.
121. Kudo Т., Izutsu Т., Sato T. Telomerase activity and apoptosis as indicators of ageing in placenta with and without intrauterine growth retardation. // Placenta. 2000. - V. 21, № 5-6. - P. 493-500.
122. Kvetnoy I.M. Extrapineal melatonin: location and role within diffuse neuroendocrine system // The Histochemical Journal. 1999. — V.31. - P. 1-12.
123. Kvetnoy I.M. Extrapineal melatonin in pathology: new perspectives for diagnosis, prognosis and treatment of illness // Neuroendocrinol Lett. -2002.-V. 23(1).-P. 92-96.
124. Lauszus F.F., Klebe J.G., Flyvbierg A. Macrosomia associated with maternal serum insulin-like growth factor-I and -II in diabetic pregnancy // Obstetrics and gynecology. 2001. - V. 97. - P. 734-741.
125. Lea R.G., Hannah L., Blades J. et al. Placental leptin in normal and abnormal pregnancies // Journal of Reprodaction and Fertility. Abstract Series V. 21. - Abstract 41.
126. Lea R.G., Riley S.C., Antipatis C. et al., Cytokines and the regulation of apoptosis in reproductive tissues: a rewiew // Am J Reprod Immunol -1999. -V. 42.-P. 100-109.
127. Leontic EA, Tyson JE. Prolactin and fetal osmoregulation: water transport across isolated human amnion // Am J Physiol Regulatory Integrative Comp Physiol 1977. - V. 232. - P. 124-127.
128. LeeY.S. p53 expression in gestational trophoblastic disease // Int J Gynecol Pathol. 1995. - V 14, № 2. - P. 119-124.
129. Lepercq J., Cauzac M., Lahlou N. Oveexpression of placental leptin in diabetic pregnancy // Diabetes 1998. - V. 47. - P. 847-860.
130. Lessin DL, Hunt J S, King CR, Wood GW. Antigen expression by cells near the maternal-fetal interface// Am J Reprod Immunol Microbiol. -1988.-V. 16,№ l.-P. 1-7.
131. Levy R, Smith S.D., Yusuf K. Trophoblast apoptosis from pregnancies complicated by fetal growth restriction is associated with enhanced p53 expression // Am J Obstet Gynecol. 2002. -V. 186, № 5 - P 1056-1061.
132. Li Y., Zhu H. A study on the relation between nitric oxide and abnormal development of embryos // Wei Sheng Yan Jiu. 1997. - V. 26, № 3. - P. 162-166.
133. Li R.H., Zhuang L.Z. Study of reproductive endocrinology of human placenta culture of highly purified cytotrophoblast cell in serum-free hormone supplement medium // Sci CHINA В - 1991. - V. 34, № 8. - P. 938-946.
134. Linzer D.I.H., Fisher S.J. The placenta and the prolactin familyof hormones: regulation of the physiology of pregnancy // Molecular endocrinology 1999. - V. 13, № 6. - P. 837-840.
135. Liu J.P., Baker J., Perkins A.S. Mice carrying null mutations of the genes encoding insulin-like growth factor I (Igf-1) and type 1 IGF receptor (Igf lr) // Cell. V. 75. - P.59-72.
136. Maaskant R.A., Bogie L.V., Gilger S. The human prolactin receptor in the fetal membranes, decidua, and placenta // J Clin Endocrinol Metab. 1996. - V. 81, № 1.-P. 396-405.
137. Maggi M., Vannellini G.B., Fantoni G. Endothelin in the human uterus during pregnancy // J Clin Endocrinol Metab 1994. - V. 142. - P. 385396.
138. Malassine A., Cronier L., Mondon F. Localization and production of immunoreactive endothelin in the trophoblast of human placenta // Cell Tissue Res 1993. - V.271. - P.491-497.
139. Malassine A., Cronier L. Hormones and human trophoblast differentiation: a review. // Endocrine. 2002. - V. 19, № 1. - P. 3-11.
140. Manku M.S., Mtabaji J.P., Horrobin D.F. Effect of Cortisol, prolactin and ADH on the amniotic membrane // Nature 1975. - V. 258. - P. 78-80.
141. Masaki T. Endothelins: Homeostatic and compensator actions in the circulatoty and endocrine systems // Endocrin Rev 1993. - V. 14. - P. 256-275.
142. Marzusch K., Ruck P., Horny H.P., Dietl J., Kaiserling E. Expression of the p53 tumour suppressor gene in human placenta: an immunohistochemical study // Placenta 1995. - V 16, № 1 - P. 101-104.
143. Masuzaki H., Ogawa Y., Sagawa N. Nonapidose tissue production of leptin: leptin as a novel placenta-derived hormone in humans // Nat Med. -1997. V. 3, № 9. - P. 952-953.
144. McLean M., Smith R. Corticotropin-releasing hormone in human pregnancy and parturition // Trends in Endocrinology and Methabolism -1999. -V.10.- P. 174-178.
145. Mellon S .H., V audry H. В iosynthesis о f neurosteroids a nd r egulation о f their synthesis // Int Rev Neurobiol. 2001. - V. 46 - P. 33-78.
146. Moncada S., Palmer R.M.J., Higgs E.A. Nitric oxide: physiology, pathophysiology and pharmacology // Pharmacol Rev 1991. - V.43. -P.109-142.
147. Mondon F., Malassine A., Robaut C. et al. Endothelin-1 binding sites on trophoblast and blood vessels of human placenta. // J Clin Endocrinol Metab 1993. - V. 76. - P. 237-244.
148. Morrish D.W. Epidermal growth factor induces differentiation and secretion of human chorionic gonadotropin and placental lactogen in normal human placenta // Clin Endocrinol Metab. 1987. - V.65, № 12. -P. 1292-1290.
149. Muttukrishna S., Knight P.G., Groome N.P. Activin A and ingibin A as possible endocrine markers for preeclampsia // Lancet 1997. - V. 349. -P. 1285-1288.
150. Myatt L., Eis A.L., Brockman D.E. Inducible (type II) nitric oxide synthase in human placental villous tissue of normotensive, preeclamptic and intrauterine growth-restricted pregnancies. // Placenta 1997. - V. 18, №4.-P. 261-268.
151. Neidhart M. Prolactin in autoimmune diseases // Proc Soc Exp Biol Med -1998.-V. 217.-P. 408-419.
152. Nelson D.M. Apoptotic changes occur in syncytiotrophoblast of human placental villi where fibrin type fibrinoid is deposited at discontinuities in the villous trophoblast // Placenta. 1996. - V. 17, № 7 - P. 387-391.
153. Ni X., Chan E.C., Fitter J.T., Smith R. Nitric oxide inhibits corticotropin-releasing hormone exocytosis but not synthesis by cultured trophoblast // J Clin Endocrinol Metab. 1997. - V. 82, № 12. - P. 4171-4175.
154. Ota H., Igarashi S., Oyama N. Optimal levels of nitric oxide are crucitial for implantation in mice // Reprod Fertil Dev. 1999. - V. 11, № 3. - P. 183-188.
155. Otani Т., Minami S., Kokawa K. Immunohistochemical localization of activin A in human endometrial tissues during the menstrual cycle and in erly pregnancy // Obstetrics and Gynecology. 1998. - V. 91 - P. 685692.
156. Owerbach D., Rutter W.J., Cooke N.E., Martial J.A., Shows T.B. The prolactin gene is located on chromosome 6 in humans // Science 1981. -V. 212.-P. 815-819.
157. Page N.M., Kemp C.F., Butlin D.J., Lowry P.J. Placental peptides as markers of gestational disease // Reproduction. 2002. - V. 123. - P. 487495.
158. Parmley T. Placental senescence. // Adv Exp Med Biol. 1984. - V. 176. -P. 127-132
159. Pearse A.G. The diffuse neuroendocrine system and the apud concept: related "endocrine" peptides in brain, intestine, pituitary, placenta and anuran cutaneos glands // Med Biol 1977. - V. 55, № 3. - P. 115-125.
160. Pepe G.J., Albrecht E.D. Actions of placental and fetal adrenal steroid hormones in primate pregnancy // Endocr. Rev. —1995. V. 16, № 5. - P. 608-648.
161. Pepe G.J., Albrecht E.D. Regulationof functional differentiation of the placental villous syncytiotrophoblast by estrogen during primature pregnancy // Steroids 1999. - V. 64, № 9. - P. 624-627.
162. Persaud V., Ganjei P., Nadji M. Cell proliferative activity and mutation of P53 suppressor gene in human gestational trophoblastic disease.// West Indian Med J. 1993 -V. 42, № 4 - P. 142-143.
163. Petit A., Belisle. Stimulation of intracellular calcium concentration by adenosine triphosphate and uridine 5-triphosphate in human term placental cells: evidence for purinergic receptors // J Clin Endocrinol Metab 1995. -V. 80,№6.-P. 1809-1815.
164. Petraglia F., Florio P., Gallinelli A. Secretion and putative role of activin and CRF in human parturition // Annals of the New York Academy of Sciences 1994. - V. 734. - P. 380-386.
165. Petraglia E., Sawchenko P.E., Rivier J., Vale W. Evidence for local stimulation of ACTH secretion by corticotropin-releasing factor in human placenta // Nature 1987. - V. 328.-P. 717-719.
166. Pezzani I., Reis F.M., Leonardo C. Influence of non-gonadotrophic hormones on gonadal function // Mol Cell Endocrinol 2000. - V. 30, № 161.-P. 37-42.
167. Poisner A.M. The human placental renin-angiotensin system // Frontiers in neuroendocrinology. 1998. - V. 19. - P. 232-252.
168. Poisner A.M., Downing G.J. Renin-angiotensin system in placenta. In: Sastry BVR, Placental Toxicology. Boca Raton: CRC Press, Inc., 1995. -P.175-196.
169. Poisner A.M., Wood G.W., Poisner R., Inagami T. Localization of renin in trophoblasts in human chorion laeve at term pregnancy // Endocrinology -1981.-V. 109.-P. 1150-1155.
170. Purcel T.L., Buhimschi I.A., Given R. Inducible nitric oxide synthase in present in the rat placenta at the fetal-maternal interface and decreases prior to labour // Mol Hum Reprod. 1997. - V.3, № 6. - P. 485-491.
171. Qiao S., Nagasaka Т., Harada Т., Nakashima N. p53, Bax and Bcl-2 expression and apoptosis in gestational trophoblast of complet hydatiform mole // Placenta 1998. - V. 19. - P. 361-369.
172. Rajagopal M., Moodley J., Chetty R. Nitric oxide: does it have an etiological role in pre-eclampsia? // Acta Obstet Gynecol Scand. 2003.1. V. 82, №3. p. 216-219.
173. Ranta Т., Wahlstron Т., Rutanen E.M. Setrum prolactin levels and immunohistochemical 1 ocalization о f prolactin in trophoblastic disease // Acta Pashol Microbiol Scand. 1981. - V. 89, № 3. p. 235-239.
174. Reiter RJ. The pineal and its hormones in the control of reproduction in mammals // Endocr. Rev. 1980. - V. 1. - P. 109-131.
175. Reiter R.J., Tan D.X., Cabrera J., Arpa D., Sainz R.M., Mayo J.C., Ramos
176. Riley S.C., Walton J.C., Herlick J.M., Challis J.R.G.The lokalization and9 distributionof corticotropin-releasing hormone in the human placenta andfetal membranes throught gestation // J Clin Endocrinol Metab. 1991. -V. 72.-P. 1001-1007.
177. Robinson B. G., Emanuel R. L., Frim D. M., Majzoub J.A. Glucocorticoid stimulates expression of corticotropin-releasing hormone in human placenta // Proc Natl Acad Sci USA 1988. - V. 85. - N. 5244-5248.
178. Rossellini M., Keller P. J., Dubey R.K. Role of nitric oxide in the biology, physiology and pathophysiology of reproduction // Hum Reprod Update -1998. V.4, № l.p. 3-24.
179. Rosso P. Placenta as an ageing organ // Curr Concept Nutr 1976. - V. 4 -P. 23-41.
180. Rossmanith W.G., Hoffmeister U., Wolfahrt S. Expression and functional analysis of endothelial nitric oxide synthase (eNOS) in human placenta // Mol Hum Reprod. 1999. - V. 5. - №. 5. p. 487-494.
181. Rutherford R.A., Wharton J., McCarthy A. Differential localization of endothelium ETA ETB binding sites in human placenta // Br J Pharmocol1993.-V. 109.-P.544-552.
182. Sadowsky D.W., Yellon S., Mitchell M.D., Nathanielsz P.W. Lack of effect of melatonin on myometrial electromyographic activity in the pregnant sheep at 138-142 days gestation (term= 147 days gestation) // Endocrinology.-1991.-V. 128, №4.-P. 1812-1818.
183. Saijonmaa O., Laatikainen Т., Wahlstrom T. Corticotropin-releasing factor in human placenta: localization, concentration and release in vitro // Placenta. 1988. - V. 9 - P. 373-385.
184. Sakbun V., Koay E.S., Bryant-Greenwood G.D. Immunocytochemical localization of prolactin and relaxin C-peptide in human decidua and placenta // J Clin Endocrinol Metab. 1987. - V. 65. - №.2 - P. 339-343.
185. Sands J., Dobbing J. Continuing growth and development of third trimester human placenta // Placenta 1985. - V. 6. - P. 13-22.
186. Sanyal M., Nag T.S., Das C. Localization of nitric oxide synthase in human trophoblast cells: role of nitric oxide in trophoblast proliferation and differentiation. // Am J Reprod Immunol 2000. - V. 43. - № 2. - P. 70-77.
187. Satoh S. Immunohistochemical studies of the localisation of prolactin in human term chorion laeve // Nippon Naibunpi Gakkai Zasshi 1992. - V. 68.-P. 557-567.
188. Schenker S., Yang Y., Perez A., Acuff R.V., Papas A.M., Henderson G., Lee M.P. Antioxidant transport by the human placenta // Clin. Nutr. -1998.-V. 17, №4.-P. 159-167.
189. Sessa V.C. The nitric oxide synthase family of protein // J Vase Res1994.-V. 31.-P. 131-143.
190. Sham K.J., Do Y.S., Kjos S. Human decidua is a major sourse of renin // J Clin Invest 1989. - V.83. - P. 2085-2092.
191. Shen W., Yang M., Lu Y. Expression of endothelial nitric oxide synthase mRNA in human placenta // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi. 1999. - V. 34, №3.-P. 150-152.
192. Shennan DB. Regulation of water and solute transport across mammalian plasma cell membranes by prolactin // J Dairy Res 1994. - V. 61. - P. 155-166.
193. Shonfelder G., John M., Hopp H. Expression of inducible nitric oxide synthase in placenta of women with gestational diabetes // FASEB J.1996.-V. 10,№. 7.-P. 777-784.
194. Shurbing C., Kiess W., Englaro P. Levels of leptin in maternal serum, amniotic fluid, and arterial and venous cord blood: relation to neonatal and placental weight // Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism.1997.-V. 82.-P. 1480-1483.
195. Shukovski L., Findlay J.K. Activin A inhibits oxitocin and progesteron production by preovulatory bovine granulosa cells in vitro // Endocrinology. 1990. - V. 126. - P. 2222-2224.
196. Sierra-Honigmann M.R., Nath A.K., Murakami C. Biological action of leptin as an angiogenetic factor // Science. —1998. V. 281. - P. 16831686.
197. Singh H.J. Rahman A., Larmie E.T., Nila A. Endothelin-I in fetoplacental tissues from normotensive pregnant women and women with preeclampsia // Acta Obstetrics Gynaecology of Scandinavica. 2001. - V. 80.-P. 99-103.
198. Sim M.K., Seng K.M. Development of angiotensin converting enzyme in fetal lung and placenta of the rat and human // Clin Exp Pharmacol Physiol 1984. -V. 11.-P. 497-501.
199. Sirotkin A.V., Schaeffer H-J., Direct regulation of mammalian reproductive organs by serotonin and melatonin // Journal of Endocrinology. 1997. - V. 154. - P. 1-5.
200. Skreenathan R.N., Padmanabhan R. Singh Shamer. Structural changes of placenta following maternal administration of acetaldegyde in rat // Z. Mikrosk. Anat. Forch - 1984. - V. 98. - P. 594-604.
201. Smith S.C., Baker P.N., Symonds E.M. Placental apoptosis in normal human pregnancy // Am J Obstet Gynecol 1997. - V. 177, № 1. - P. 5765.
202. Stojilkovic S.S., Catt K.J. Expression and signal transduction pathways of endothelin receptors in neuroendocrine cells // Frontiers in neuroendocrinology. 1996. - V. 17. - P. 327-369.
203. Sutton L, Gadd M, Mason DY, Redman CW. Cells bearing class II MHC antigens in the human placenta and amniochorion // Immunology. 1986. -V. 58, № l.-P. 23-29.
204. Symonds E.M., Stanley M.A., Skinner S.L. Production of renin by in vitro cultures of human chorion and uterine mescle // Nature 1968. - V. 217. -P. 1152-1153.
205. Tadokoro N., Koibuchi N., Ohtake H. Expression of prolactin gene in human decidua during pregnancy studied by in situ hybridization histochemistry // Endocr J. 1995. - V. 42, №. 4. - P. 537-543.
206. Takahashi N., Waelput W., Guisez Y. Leptin is an andogenous protective protein against the toxicity exerted by tumour necrosis factor a // Journal of Experimental Medicine. 1999. - V. 189. - P. 207-212.
207. Tartaglia L.A., Dembski M., Weng X. Identification and expression cloning of a leptin receptor, OB-R. // Cell. 1995. - V. 83. - P. 12631271.
208. Teasdale F. Gestational changes in the functional structure of the human placenta in relation to fetal growth. A morphometric study // Am J. Obstetr. Gynecol. 1980. - V. 137. - P. 560-568.
209. Thomas L., Drew J.E., Abramovich D.R., Williams L.M. The role of melatonin in the human fetus // Int. J. Mol. Med. 1998. - V. 1, № 3. - P. 539-543.
210. Thomson A.J., Telfer J.F., Kohnen G. Nitric oxide syntase activity and localization do change in uterus and placenta during human parturition // Hum Reprod 1997. - V. 12, №. 11. - P. 2546-2552.
211. Toth M. Role of tetrahydrobiopterin in the regulation of activity of human placental nitric oxide synthase in normal and pre-eclamptic pregnancies. // Orv Hetil. 2002. - V. 143, №. 8. - P. 391-398.
212. Trainer PJ. Corticosteroids and pregnancy. // Semin Reprod Med. 2002. -V. 20, №.4-P. 375-380
213. Trayhurn P., Hoggard N., Mercer J.G., Rayner D.V. Hormonal and neuroendocrine regulation of energy balance the role of leptin // Archives of Tierernahr - 1998. - V. 51. - P. 177-185.
214. Varvarigou A., Mantzoros C.S., Beratis N.G. Cord blood leptin conxentrations in relation to intrauterine growth // Clinical Endocrinology (Oxford)-l999.-V. 50.-P. 177-183.
215. Vincient R.A., Huang P.C., Parmley Т.Н. Proliferative capacity of cell cultures derived from the human placenta // In vitro. 1976. - V. 32. - P. 649-653.
216. Voight S., Kaufmann P., Schweikhart G. Zur Abcrenzung normoler, artifizieller und patologischen Plazentazotten. II. Morphometrishen Untersuchengen zum Einfluss ous Fixationsmodes // Arch. Gynak. 1978. - Bd 226. - S. 347-362.
217. Vorherr H. Placental insufficiency in relation to posterm pregnancy and fetal postmaturity: evaluation of fetoplacental function: management of the postterm gravida // Am J Obstet Gynecol 1975. - V. 123. - P. 67-103.
218. Waston, Palmer, Burton. Human chorionic gonadotropin release and tissue viability in placental organ culture // Hum. Reprod. 1995. - V.10, № 8 -P. 2159-2164.
219. Williams L.M., Martinoli M.G., Titchener L.T., Pelletier G. The ontogeny of central melatonin binding sites in the rat // Endocrinology. 1991. — V. 128., №4.-P. 2083-2090.
220. Winick M, Coscia A., Noble A. Cellular growth in human placenta. 1. Normal cellular growth // Pediatrics 1967. - V. 39. - P. 248-251.
221. Wu X., Fan Z., Masui H. et al. Role for Bcl-XL in the regulation of apoptosis by EGF and TGF-1 in c-myc overexpressing mammary epithelial cells // J Clin Invest 1995. - V. 95. - P. 1897-1905.
222. Yagel. Characterization of pure human first trimester cytotrophoblast cells in low term culture: growth pattern, markers and hormon production // Am. J. Obstet Gynecol. 1989. - V. 160, № 4 - P. 938-945.
223. Yuen B.H., Moon Y.S., Shin D.H. Ingibition of human chorionic gonadotropin production by prolactin from term human trophoblast // Am J Obstet Gynecol. 1986. - V. 154, №. 2. - P. 336-340.
224. Zhang N.M. Modulation by benzda I pyrene of epidermalgrowht factor receptor, cell proliferation and secretion of human chorionic gonadotropin in human placental cell lines // Biochem Pharmacol. 1995. - V.50, №. 8. -P. 1171-1180.
225. Zhang Z., Lin Y., Tan H. Histochemical locaization of nitric oxide synthase in the human placenta // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi 1997. -V. 32, №. 11.-P. 662-665.
226. Zhou R., Ao S.Z. A Novel cDNA Encoding Ubiquitin-conjugating Enzyme of Homo sapiens // Sheng Wu Hua Xue Yu Sheng Wu Wu Li Xue Bao (Shanghai) 1998. - V. 30, №2 - P. 125-131.
227. Zhou R., Li W., Cao Z. The changes and significance of transcription of endothelial nitric oxide synthase-mRNA in placental tissue from cases of pregnancy indused hypertension // Zhonghua Fu Ke Za Zhi 1998. - V. 33,№ 12.-P. 709-710.