Автореферат и диссертация по медицине (14.00.07) на тему:Сенсибилизация к металлам и возможные пути фитокоррекции (экспериментальное исследование)

ммшстерство здравоокмшия российской федерации

Саккт-П«ербургская Мелнциыекая Лкадездгя

пссльдащсдаого образования т-^-----

На правах рукописи

МАРТИНСОН Татьяна ГерСертсвна

СШСЩ'ЛИЗАЦЙЯ к июддш И ГЮЗ:.'02!ШЕ ПУТИ фстокоррекцй! (зксперт^ектальное исследование)

14.00.07 - гимена

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

) ; ^

, . ! Санкт-Петербург - 1993

Работа выполнена б Санкт-Петербургском научно-исследовательской институте питаны труда п профзаболевания а в Санкт-Петербургской ыедацинскса Акадеши последипломного образования.

Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор

ГШьсгроЙков | доктор медицинских наук, профессор Д.О.ЛоАт

Официальные огиснеяга: член-коррэспондент РАЕЙ, доктор медицинских паук, грофессор Г.В.Селшицкий кандидат биологических наук Л.Е.Дедкоза

Ведущая организации Санкт-Петербургский государственный санитарно-гигиенический медицинский институт Защита диссертации состоится СУс/я, 1993 года

в час. на заседаши СпзцийЛхацроваЕного Совета Д 072.16.05. при Санкт-Пзтербургскоа медацинскоЗ Дкадвкия носледотлсшого обрзковадая (193015, Саккт-ПетезСтрг, у я. Салтыков8-Л|эдриш!, 41 >.

С диссертацией можно ознашантьсч з ^тцдаменгальной библиотеке Академии. $ , , _ Автореферат разослан " ^ 1933 года.

Ученый секретарь Специализированного Совета, кандидат медицинских наук.

доцент - В.К.Иригодана

ОБЩАЯ Х/РАКТСТКСПИКА РАПОП: :

АКТУАЛЬНОСТЬ Т5Ш.В современный индустриальный век серьезную опасность дал здоровья населения представ,'ижт контз^ги человека с врэднвш зашичесгойвг вещества '¿я, «ovo/we происходят как на производстве , так и ji услоз5<ях загрягнегая окружающей среда. ЕолылоЯ щуплой промышленных .ядов, широко используеиьи в народном иоаяЗсгие, являются иехаллы. Их воздействию подЕс-ргявтся зна'слелыие контгтагеьгы Зочкх, кроме того, аташ металлов нерязрусгена и постепенно накапываются в окрузэщеа среде.

Расшренле масштабов производства и я>ла:енения в рроаы-' шленносгн тяглых металлов и нх соедивэякй приводит к уи9.ГД-чекшэ количества контактирующего с металлами населения. В ряде прокъпнлэь'но развнгах стран в настоящее Ерекя конце <-лра-цпя таких опасных тохсихантов как ртуть, свинец, кадмий, кобальт,цянк, никель и хром в округащей среде достигла критического уровня и хгредставляет реальнуй угрозу (гля здоровья (Н.И.Воронков и соавт., 1906; Б.В.Добрэзольс»»ЯД588; Dafour et al-, ¡988; Kaj АМтзп.ЧЭЭЭ). Такта; обрэзои, перед стгиеной возникла проблема "изталхпеского прессинга", кохоргя настолько серьезна,что трчйуег обязательного ее разрешения да! предотвращения нанесения вреда здоровы» людей и at потомству.

Оообув актуальна чть за последние годы приобрела нрэС'лега. влияния хиж«гческих загрязнителей округакг.ей среды на илшун-аую систему оргЕкязыа. Нгрудеше функции иииунитета ыогет сопровождаться различными эффекта!-и: снижением рззкстентаэсги организиа х икфекцнонвш заболеваниям, пошвгением опасности возшкновзшш злокачественных ноаообраговакяЯ, развитей ау-тоиымунноЗ а аллергопзтологаи. В литературе последах лэт имеются работы об ищут етоксиче ском действии многих металлов (Д.В.?ощин,1983; Л.А.ДуеваДЭоЗ, 1985; Г.И.Биноградов,198Э; Ю.А.Радцев,1Э8Э;Г.Й.Сидоревко и соавт.,1389; Dean et luster» 1984; Spreaiico et VeccM,1984). Вместе с теи, указывается на недостаточность разработка иетодсв рациональной пятоге-непгчв'жой терапии аллергозов, вызванных ыеталлвиа, Ддц лечения аллергических забсдавани. ньметалячческсй этиологии

- а -

используют некоторые холиноллпгтесоте средства, такие ках -атропина сульфат я ызтгцшз. Надставлялось хшгересныи испытать гншаназваяше препараты при сенсибилизации иеталлаш.

Одниы из возаогешх путей рациональной таращи в фар-цакопрэ£ядзк'лш1 профессиональных алларгогов является привлечение в арсенал врача-профпатологэ фитопрепаратов. Лекарстзенше расгегшд прзшеяялчсь в применяются кия леченая кеспецифаческих аллергически заболевашсЗ (Ы.Д.Маикозскиа, 15С5; С.Я.Соколов я И.П.Земотаев, 1930). Шесте с тем в доступной литературе не удалось обнаружить сведений ог использования средств растительного происхождения яри ыеталлоал-лергогах. Все вшлшзлозанное побудило нас заняться экспериментальная изучением пуге£ лечения и профилактики аллергических состояний, Еызвагшш ыеталлашг-аллергевагди.

ЦЕЛЬ К БАД&ЧИ КССЛ2Д0ВА1Ш. Цель работы заключалась в Сравнении тиу норе активных свойств ряда наиболее распространенных в прошаяенности металлов, разработке адекватней экспериментальной подели сенсибилизации к металлам и оценке некоторую способов сниженич сенсибилизирующего действия метал-лов-0ллергенов.

Для достижения поставленной цели решались следувдае задачи:

- скринлнговая оценка сенсибилизирующего действия солей калия, ыеди, магния, цинка, кадмия, Сария, алккиния, свинца, хрсщз, марганца, яелеза, кобальта и никеля в острой токсикологической Бксперииэнте;

- разработка экспериментальной модели сенсибилизации к металлам, пре.яв-шшциа выраженное аллергенное действие, и пригодней дтя скрининга деиенсибилизируюезк срадств;

-оценка десенсибилиЕХфущего действия антихолинергическнх препаратов - атропина и ыетацина при «¡нсибшш&ации зроиои;

- испытание десенсибилизирующего эффекта лекарственных средств растительного происхсвдешя при сенсибилизации хроиоы в никелем.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые в единых иетодических условиях проведено сравне.'ше сенсибилизирувдего действия трвзаддати

широко прменяемых о прошпленноати кеталчоа. Разработана новг.я экспериментальная модель сенсибплизагда к неталлвм-аллергенам, пригодная для использования в токсмколого-ш* гиеническсад эксперименте и для енрокого скрининга десен-сибилмзяру средстз. Эпс-пегмиеятально изучат пл-:»г.-;1т ггаадию ргзлнтаыа пути десенсибилизации ранее не использовавшаяся с Э'гой цзлью. Выявлено шрашшее дес е не к б ш •1:с-рующее действие при сенсибилизации к хро:„т и никелю сбора лекарственных растений (N1) .Установлено »что лекарственаие растения -горец птичий,фиалка трехцветная, лэбазнак еязо-лист:пй1 и тысячелисгаих обыкновенный,а так^е сборы N 2 к У 3 снизаот сенсибилизацию к хрэыу у подопытных ттотнах. Высказано предположение о механизмах десекскбилизкр;/гзего действия препаратов растительного пронехоздешя.

ПРАКШЧЕС'САЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Сравнительная оценка изменений показателей нгиуштета прл действии металлов сваде-тельствует о налачин специфических сенсибилизирующих свойств у хроиа, шдкеля, келеза, кобальта, каддяя, бария, иеда и марганца. Получено авторское свидетельство ( К 1504668 ) на "Способ моделирования аллергии к металлап", который иояно широко использовать в тс::сиколого-гагиешческои эксп&ргиекто и для скрининга десенсибилизируащйх средств. Рекомендована схема лечешя аллергодерматозов у детей сборок 133 лекарственных растаний (патент N 1793927). Материалы диссертационной работы вклвчеш» в лекционный курс и практические загятия слушателей кафедра токсикологии Панкт-Петербургско! Ш10.

АПР0БЛ1МЯ РАБОТУ. Материалы диссертации долотены и об-судденн на:

- Республиканской научно-нракпгческоа конференции "Задачи токсикологов Госскйско? федерации на :ш пятилетку по ускорению наушо-техничьского прогресса (Вороне«, 1985);

- первой Всесоюьцсм съезде токсикологов "Проблэыы охрьна здоровья населения я защиты окружающей среда от химически вредных факторов" (Ростов-на-Дону,1986);

- конференции молодых учета я специалистов Ленинградского ВЖ гигиены труда и профзаболеваний (Ленинград,1?8£);

учредительно]!» конференции Перискс^о областного общество токсикологов (Пермь,1987); ... .....

- Всесоюзной научной конференции "Ускерзнные неходи сашггар-но-гигленнчеихого нормирования вредных веществ в воздухе рабочей зоны" (Бревен,1988);. ........... ......

- кокфзреэдяи "Рационализация к изобретательство в гигиене.'. труда и профлатологаГ (Ленинград,IS8b); ...............

- плеууие секции молодых j jeiiu и специалистов, Дробленной.,, ксаксыиа "Научные оскоач гигиены .труда и. профлатологии" (Пераьг.158Э): .....

- заседа н ня Сзнкт-Петербургского общества .. токсикологов (Санкт-Петербург. 1991).

ПУБЛИКАЦИЯ, По. теме диссер-raipii опубликовано 13 работ. ССНОННШ ШШШШ, ВНОСИМЫЕ IIA ЭДШ*.

1. В острой токсикологическом эксперименте на призере металлов показана возгоякость оцзвкг влияния хшичгских Ееществ еь нниунную смитеи? организма. . .

2. СрвЕнателькая оценка изненешй показателей лшунитета при действии гогроко распросгракекных в прошилекности металлов свадыельстзуег о наяпш вырааенных сенсибилщщрущих свойств у ipoua, никеля, железа, кобальта, кадмия, баркя, «еда и иартанца.

3. Елрокий скрининг десексибияизирувдих средств , х ¡иеталлан, обладающим аллергенным действи™, Еозцолен на нчшех при испо-•дъзстанин разработанной наин кодели.

4. Лекарственные растения горец птичий, фиика трехцветная, лабазник влз&листныа, адслчелястник обыкновенной и сборы лекарственных растешь окалываит выраленное десенсибшшзи-рущее дейставе при еекс;[0илизац«ш к хрому в h>hsjw.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА РЖКШ. Диссертация состоит из введения, 5 глаз, выводив, практических рекомендаций, съедений о внедрении результатов в практику, сгаскг литературы, ышдащего 260 историков,из вах 168 отечественных а 112 sspy^saHUX авторов. Диссертация нзловеяа на 175 страницах мжинописного текста включает 20 таблиц и приложения.. ■' .

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

ОБЪЕМ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. Исследования шполнекы на нелинейных Oujxjc мыжах-самцах, массой 18-2? г.мляах-саицщ линии С57Ы.СЗА, CCS7W и линии С57Вг, массой 18-20 г и я£ карских свкнках самцах и самках, ыассоЯ 300-400 г. Все гашотшз были получена из пита/кика "Рапшдовои,нх содержали в стандартных условиях вивария на обычной рационе.Во всех сзриях экспериментов цситогдао прозодшшрь тралпельназ измерения показателей у контрольных и подоштиых етвотных.Всего жепользсЕа-но 1080 беспородных и 370 Ядкейных шш.ей и ISO морских сышок.

Оценку шшушодо статуса оргакизуа кнвоткых проводили в различите срс.и после сенсибилизации в зэвисиизсти от поставленных ."»адач. Продолжительность некоторых экспериментов достигала 70 суток, регистращпо показателей гоагуостете при этом проводит чераз кэздые 5-7 дней. Кровь для постановки иммунологических тестов брали у пышем из ретроорбитального венозного синуса,у морских свинок - пушщией сердца.

Оценка функционального состояния иг улокошетентных клеток л показателей сенсибилизации проведена на оскозанта след/гадах тбсаов: конных проб, реакции специфического /лзиса .гейкоучтоз С|?СЛЛ) и эритроцитов (РСЛЭ), ояределе.чия количества Еутобляшкообразугщих клеток (АБОК), реакции специфетес-кого гемолиза (РСГ), определена абсолютного колнчестьа зо-зинофояов, .реакции тройного розегкообразозания и определения проце:гга эашодатоза. При наблвдекш за яивотныыи обращали внимание на их хшешьД вид , общее состояние и изменение фа-зиологичес-чт^ фушщай организма.

Пэстановг^ коанк.г проб у мышей проводили по методу А.ДЛерноусоза (1937), начисляя индекс ГЗТ (лшерчувстнитель-ности замедленного тили),у морских свинок - по методу О.Г. Алексеевой и Л.А.Дуевой (1970/. РСЛЛ проводалк иеланхервш способом,РСЛЭ оценивали, используя собственную модафгшгцип Срац. предложение N 282). Определение АБОК проводили такага о использованием собственной модификации (рац.прэдло*екие N 28k!). РСГ ставили по А.Рык с соавторами (1980), абсолютное каппестро зозяаоСлдов определяла аетодоч И.С.Пиралшшили

(I9G2). Геаюрш трехного розеткэобразовакия ставили по Т.Ф. Хклько и С.Г.Алексеевой (1985). Процент эхиноцитоза определял? по И.П.Терещенко с соавторами (1982).

Бее данные обработай! статистически, достоверность определена с использованием пзраиетрлческих - критерий "fCTbD-дента и непаранетрических - точный метод Фанера - методов. Обработкт данных производилась на прогрюя^фуеыои никрокаль-кулятсре "Б3-34" .ЬйогофакторкгД дисперсионный анализ резуль-результатов исследования выполнялся с применением пакета прикладных программ "Stat graphics" на персональной компьютере ГСМ PC/A".

В качества металлов-сенсибилизаторов для разработки подели, пригодной для широкого скрининга десенси&ишзирунцих средств, был выбраны хрои и никель, как одни из наиболее ак-тизных и распространенных аллергенов (О.В.Карпзнко, 1978; Л.А.йгева,1983; Н1Л et al., 197S). Использовали растворы бихроиата калия (KgCr^) и сульфата никеля (NiSO^).

Ядеальшш яивотспщи для скринкнтовых исследований являются мши. Они доступны для кассовых испытаний и на ких постоянно выполняются основные иммунологические эксперименты (И.С.Гущин и соавт.,1936; Sanders et al.,1982). В настоящее время для выявления аллэргеяной активности химических соединений традиционными хзазотныма считаат морских свинок (Л.С.РзОен и соавг., 1970; О.Г./лексаеьл и Л.А.Дуева, 1978; Ptik et al., 1S80; Haguir, 1985). Однако, морские свинки заг°,отные дорогие, требующие весьма тщательного угода, чувствительные к услозияы содержания - клетки, питание (К.П.Западник н соавт., IS33). Пизтоиу для скрининга, при которой необходимо больаоэ количество аквотшх, морские свинки мало пригодны и предпочтительнее мази.

При разработке модели использовали ряд способов введения металлов-сенсибилизаторов:первый - яликутанная сенсибилизация 2,5% раствороч бихроиата кэлия поверхности спины мшей; второй - эпнкуташяя сенсибилизация IX раствором бихроиата калия поверхности тавота шшей и третий - внутривенная сенсибилизация 0,01Х рсстворам:! бихроиата калия и сульфста никеля.

На третий способ моделирования - внутривенное введение солей металлов получено авторское свидетельство (1Т 1504668).

Дяя внутривенного введения металла использовали нелинейных шпей, предпочтительнее самцов, шссоЯ 18-20 г,без признаков заболеваний, важно отсутствие повреддений хвоста, содержащихся в обычных лабораторных условиях, как правлю, по 10 яивотных в клетке. Мышь фиксировали корнцангом и.пи в тесной домике,хвост массировал!! для усиления регионарного кровотока, накаадыяали мягкий легкий заяим-мгняету на корень хвоста и з набухшу» латеральную хвостовую вену с поыодьи тонкой инъекционной кглы для вну1рикоякых инъекций туберкулиновый шприцем медленно, со скоростью 0,2 ыл/шгн, вводили подогретой до 37*С раствор металла. Для шгьекцФ готовили О,OIS раствор бихроыата калия и сульфита никеля на физиологическом растворе (0,9% раствор NaCl). Дозу подбирали эмпирическим путем, вводя различные объемы приготовленного раствора. В таблица I показана выраженность сенсибилизации в зависимости от доз, которые представлены в долях от средиеслертельной.

Таблица I

Выраяенность сенсибилизации после внутривенного вводеюш металла-аллергена в зависимости от дозы

Вещество, доза

Показатели

АБОК (М*я),Х

РСЛЛ

Кохкыэ пробы

KgCrgO,^ 1/1000 DI

1/500 DL, 1/200 DL,

1/1оо DL;

Контроль

"50 '50 '50 50

11.3t2,23 9,34*2,35 0/10

13,8*1,96** 10,5±2,07 * 5/10

14,3*1,08*** 12,6x1,38*** 10/10

14,б±2,09** 9,62±1,46* 8/10

7,17*0,492 5,57±0,687 0/10

Продолжение таблицы I

1/1000 Р15С 1/500 Ш,50 1/20С Щс 1/100 0Ь50 Контроль

2 3 4

9,84»0,91б 8,87±1,23 0/10

11,8±1,32* 12,842,28* 4/10

14,81-1,24*** 13,2±1,66** 9/10

12,941,19** 12,4*1,6.-)** 7/10

7,54±1,34 6,12*1,09 0/10

Примечания: I- - р < 0,05; - р < 0,01; ***- р < 0,001 лра сравнении с контролен;

?.. АьОК процент аутобдяшкообразупаих клетох переферической крови;

3. РСЛЯ - процент лейкоцитов кровл, подвергшихся сеакцда специфического лейколизяса;

4. Ксшше пробы показаны дробью: в числителе -количество ягаотшх с положительными козгныш пробила, в знаиензтеле - общее количзство кивотшх, использованных в опыте.

Гезул'-таты, прнводэнаае в таблице I, показывают, что введение как. хроиз, так и никеля в диапазоне доз от 1/100 до 1/200 Ю50 достоверно повышает показатели иммунитета по сргвнеюпо с котрольной группой зивотных. Таиш обрезоц, иоано утверждать,что предлагаемый способ вадеико моделирует иллершю к хрот^у и никелю.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБОТДЕНЕЗ

ВшолненЕыа наш исследования сравнительной оценки действия солей различных металлов на изшунную систему подтверждает предоолоЕешя о взаимосвязи хкшческой структура соединенна с их биологический действдви.

Дисперсионный анализ полученных результатов для кавдой серии экспериментов показал, что варьирование величины ¿БОК нч 50,6 - 58,0 % ,в зависимости от серии эксперимента, было обусловлено дейстъиец солей металлов ва величину этого показателя (р<0,0001). Пра этой сроки проведения анализа (I иди 7 сутки) практически не оказывали влияния ва его величину (р= 0,168-0,08). Эффект взаимодействия факторов также был статистически незначгш.

Влияние солей различных «етеллов на варьирование процен-

та эххшоцгттов в разлачкчх сериях иясьержентов составляло 22 -20,?% (р<0,0001). Срокл исследования оказывая« bjmimo яа вежгдшу показателя лишь в одной из трех серий зкспориа^нтов и составили 5,3 % (р<0,0007), Бзакисдайсг.чие факторов било кезнгчини« so йсех сериях зкаперг пантов.

На основании дзетах дисперсионного анализа установлено, что более предоочттельна оценка влияния на ¡тцуунную спсте»лу ■ по величине ДБОК негзлч по проценту yxiitfoiiv-ов. реакция ияг/шой сис?е»£Ы по ве.и жне АБ01С ярко виразеыа уяе на I сутки после знутрибргслошсго введшшя .еьц'-сгв и сохраняется таковой на 7 оут;:и. При оцзнке ншлушой систеш но взличине ; ЛБОК влчлше кекомролг^уешх, случайных факторов значительно яеньае по сравнении с оценкой по количеству эхикощггов.

Вместе с теп, каядай из этих показателей отрезает свои тонкие взаимодействуя солей иетеииюв с биологичзсыш субстратом организма.

По силе вшга: ш на величину показателя ¿В01С я тре^ сериях экспериментов соли иеталлов распологали« ло убыванию i слодухЕ¡¡ей порядке (* при р<0,03 по ср^Ееняю с коггроле«): на пзрше сутки исследования - 1^Сг20?*> 1Ц304* >Ff,C13* > СйС12* >CdCl2* >BaCJ.2* > CuClg > ZnS04> b!gCI^> A1C13> MnS04> PbS04> KCl; на ссдеши сутки исследования - KgCrgOn.* > ШЬ0Д* > FeCl3*> СоС12*> 13aCl?*> CdCl2*> CuCl* > «taSC>4w> A1C.13> LigCl^ ZnS04> KCl >PbS'J4.

В ряду металлов на I я 7 сутки произошли незначительные изменения :сЕое влияния в дополнение г иета-плаи с дс.товергшш значениями величины АЕОХ на I сутки, на 7 сутки проявили ¿ишь хлорид леди и сульфат марганца.

По сила влияния на показатель эхиводитоаа у мшей в трех сериях экспериментов согм металлов располагались в следующей порядке: на первые сутки н и цования; »1S04*> СоС12*> Ci01z*> ВаС12*> P'oS04*> K?cr207> MgCl2> АЮ1?> Fe01r СиОЦ> шпЗС4> ZnS04> KCl; на седьмые сутки l ладозатч: С<1С12 > H1S04*> ugülz*> СоС12*> ПаС12*> PbS04* > KgCr^ > Л1С13> РвС13> СиС12> ZnS04> JIoS04> KCl.

По сравнению с I суткам« на(*пвдс;ая на 7 сутки шягилось

изменение порядка распо.гогенш солей устаддов в раду, а '¿агав достоверное влияние хлорада магния аз величину показателя вроцечт ЗХЕНСЦИТОВ.

СспоогаЕяенке рядов по оценке силы влияния на величину показателей /¡БОК н эхкноцктов у вше3 гоказ.ывает, что имещи-еся рэзлячля обусловлены характером связи металла с биологически,1! субс1?-агог«': б первом случае при ияхроокшт ш&зляли зоны аучожа^ниого геиоллза - "бляшки", во второй - эритроциты с йзькшеьдаш а результате швгуннах реакций ыембралами. Аналогичные данные лолучеш на шшах дивки СБА, С57Вг, С57В1 с СС57Ег.

Изучение десенсьбилнзарукцего зффекта, стобраняых для испытания препаратов С антихолинергаческих - атропина и ыета-цанз , и хекарстзекгах средств растьтелъкого происхоадешя), проводилось на разработанной каш иодели в скркшнгошх опытах на ььмпх. Для сравнения пшосенсйбшизкрущего эффекта был мсаользовлн тасегал, который применяется в клинической практике при различная аллергических заболеваниях в качестве актигяетамшшого средства.

Для изучения пшосенсабшшзирующего действия лекарственная средств растительного происхождения 0им испытаны обора (1,2 я 3) лекарственных растений и отдельные вида растений, которые вочин в зти сбора. Подбор растений в сборы: был направлен на рад патогенетических факторов, иьеидо. место при хроюагл гатоксшсациях и нетадлоаляергсзах. Поэтоиу растекш, входздце в сборк,обладают десеасибшшзхруЕага: и противовоспалительный действием,улучшает деятельность велудочпо-кшечного тракта, печеш, почек, активируют легочную венталяцшэ и оказывает общеурраошшцее действие.Дозы лекарственных растений взяты общепринятые в фитотерапии: на 1С г сырья 200 ил горячей кипяченой вода (10:2С0). Разовые дозы в среднэы I стакан (200 мл) в день. В пересчета на хшзотшх (мышь массой в средьем 20 г): отвар (1:400; по 2 ил яа яизотное в день.

В таблице 2 представ пека динамика изменений показателей сенсябализвцки после лечения тдай сборыя ле>шрсшенных растений, атропином и гавепиои (*- р < 0,05).

Таблица 2

Сравнительная характеристика десенетбялгзируадего аффекта сборов лакарсгвеккых растений, атропина и тазега-ча Показатели (И 1 т)

ЯИВОТЕЫХ наблюдения £БОК,% РСЛЛД Масса тела,Г

I 2 3 4 5

Сенсиби- фон 0,33*0,05 3,7710,01 22,5*0,58

лизиро- 7 13,3±0,77 18,413,83 24,1*0,52

ванные 14 17,2*2,17 17,5±3,17 23,8*0,48

21 14,4*0,70 17,513,95 23.6i0.40

28 15,9*1,96 13,31?,, 79 23,4*0,40

Сенскби- фон 8,56*0,68 3,63*0,72 21 ,.4*0,63

лпзпро- 7 15,3±0,50 5,60*0,92* 22,б±0,С>5

вашше+ 14 11,7*0,75 6,8211.12* : 22,2*0,46

сбор № 21 6,93*0,92* 5,73*1,46* 21,9*0,43

28 9,03*0,64* 3,8410,60* 21,6*0,45

Сенсиба- фон 0,31+0,05 3,39*0,52 22,6*0,49

днзиро- 7 10,141,13 8,1412,79* 23,6*0,45

ва ннке+ 14 - 9,36*1,07* 8,2511.63* 23,6*0,53

сбор N2 21 7,5610,98* 6,40*1,68* 24,0*0.73

28 7,18*0,03* 7,8911,55 24,3*0,96

Сенсиби- фон 7,9210,99 3,48*0,63 22,9*0,60

лизиро- 7 П, 210,50 6,22*1.12* 23,7*0,49

ванные+ и 9,8410,98* 6,62±1.12* 24,8*0,58

сбор ИЗ 21 7,6510,85* 7,24*1,35* 25,3*0,99

28 8,1210,52* 6,92*1,32* 26,0*1,23

Сенсибн- фон 8,2310,66 3,25*0,71 23,410,56

янзиро- 7 14,310,84 15,1*4,25 24,7*0,63

ваннш+ 14 14,7*0,54 18,3*2,86 24,0*0,53

атропин 21 11,710,95 18,5*2,02 24,0*0,53

(0,05ЯГ/КГ)28 9,2213, ГЗ* И,7*1.78 24,3*0,59

Сенсиби- фон 7,8210,59 3,2710,52 21,110,53

лизиро- 7 11,310,82 14,713,33 22,5*0,60

ванные* 14 13,710,99 10,811,62 21,3*0,55

тавегал 21 7.0511,53* 12,7*1,94 22,1*0,58

(О Лиг/кг )28 14.Э±1,19 9.17*1,60 22.4*0.58

; . - Ы -

Представленные в таблица данные показывают, что введение фитоарепарь 1'ов значительно снижает меточную реакцию иммунной систеш, что проявляется в достоверной снижении вели-' чины показателя РСЛЛ. Так, у азотных, получшшх после сенсибилизации сборы №11. и 3, этот показатель был достоверно нйяа, чем у сексиошшзированных яивотшх на 7-е, 14-е и 21-е сутки, а для сборов NN 1 и 3 достоверная разница сохраняется И на 28-е "зутки исследования.

| Дисперсионный анализ показал, что на величину' показателя РСЛЛ оказывают влияние как сенсибилизирующие и десенсибилизирующие средства - 11,655 (р<0,0001), гак и сроки их действия - 16,935 (р<0,0001). Совместное влияние атих факторов составило 8,5% и было незначимым (р=0,0109). Влияние неконгролируемих факторов составило 63Я.

Достоверное сложение количества ¿БОК наблюдается при применении сборов )МН 1,2 и 3 на 14-е, 21-е, 28-е и 40-е сутки после сенсибилизации, при применении атропина - на 28-е и 50-е сутки, тавегила - на 21-е и 70-е сутки наблюдения. Влияние лекарственных средств на величину АБОК оценивалось в 10,3% (р<0,0001), сроки воздействия -15,355 (р<0,0001). Эффект, воздействия лекарственных средств тесно Взаимосвязан со сроком их действия. Взаимодействие данных факторов составило 22,3% (р<0,0001). Совместное влияние указаншх факторов составило 47,9%, при этом на долю неконтролируемых факторов приходится 52,1%.

Таким образом, на основании дашод дисперсионного анализ а РСЛЛ а АБОК иояво угверздать, что аршенеьие сборов NN1,2 и 3 предупреждает развитие иммунной реакции на введение сенсибилазирувдего агента и превышает десенсибилизирующий аффект атропина и тавегила.

Итак, аналлз динашки показателей ЛЗОК, РСЛЛ и .-массы тела юшотных позволяет сделать <*ывод о том, .то по значимости двсввонбилааярущего эффекта лекарственные средства можно расподот гь в следующем порядке: соор N1 > сбор N3 > сбор кг > тавегил > атропин. Лекарственные сборы более аффективны ранние сроки лечения, чем тавегил в атропин.

- 15 -

Как показали наш исследования у сенсибилизированных бихроиатои халзя белых шшей пэказагели иммунитета АБОК, РСЛЛ приходим в норму к 40-50 дна, тогда как у ятотных, получавшие лечение - к 7-14 даю.

Аналогичные результаты были получены на ыодели аллергического контактного дерматита на морских свинках.

Представляла несомненный интерес апробация десенсибилизирующих растений и их сборов в клинической практике. В поликлинике N 83 Ленинграда было проведано лезвие детей, больных атопичесыш дерыатитоы (лечение ггооеодилоь^ доктором Э.Д.Ко-лосовсиш). Длл уиеньсения козных лорахенмй и сокращения сроков их проявления у детей путей усиления десенсибилизирующего эффекта использовали сбор КЗ, з не отдельно взятые растения.

Проведено сопоставление лечебного действия череды трех-раздельной н сбора лекарственных растений по эффективности лечения 115 детей, страдающих атонический деруатитом, в возрасте от 2 нес. до 12 лет обоих полов. В комплексной лечении 37 кз них получали череду, 78 - сбор в возрасти« терапевтических дозировках. Обратное развитие козшых поразешй, клас-сифищрущееся кэк "полное лздоролление" наступало у детей, получавших сбор уте на 14 сутки (2,7%), достигая 72% к концу лечения, т.е. на 28 сутки. Полное выздоровление детей, получавших череду, наступало линь у 21,6% к 28 дню лечения.

Приведенные данные свидетельствуют о том, что использование сбора значительно уиеньпает выраженность п сроки обратного развития когных поракений по сравнению с чередой.

В таблице 3 представлены данные о растениях, входящих в сбора и об основных точках приложения их действия. Очевидно, что применение указанных растений приводят к активации практически всех путей выведения чузеродошх соединений из организма. Кроне того, эти растения в той плз шей мера обладязт? десенсибшшзиругарщ или противовоспалительны!! действием.

Таким образе«!, применение лекарственных средств растительного происхожденияt не только активизирует процессы внутренней ващити организма ст избыточного поступления металлов, но и окрзывает значительную помощь в дйтокснкзции, связывании и выведении из организма чужеродных соединений.

Таблица 3

Рас?епия, воггдме в сборн, и основные точки прилогегшя их действия

Название растений Десексиби- Противо- Сокогокчое влияние на келезистнй аппарат

лизирдкдее воспали-------------------------------------------------------

действие тельное 2елвдо'шо-кивечкый тракт

действие Почки ---------------------------------------------

1елудок Подвел^- Печень Тонкий Толстый дочная кишечник кизечник

«елеза

Аир болотный + +++ + . ++ + + + ++

Береза повислая +++ +++ ++ ++ ++ ++ +

Валериана

лекарственная t+ ++ ++ ++

Горец птичий ++ ++ + + ++ 4- *

Крапива двудомная ++ +++ ++ +

Лабаэчик вязолистный ++ ++ +++ + ++ т +

Мята перечная + +++ +++ +++ ++ +

Крдошз ломкая + +++

Подооояник больвой + +++ ++ + + +

Ромавка аптечная +++ +++ ++ ++ + + + ++

Тысячелистник

обыкновенный ++ ++ ++ ++ ++ +

Фиалка трехцветная ++ ++ ++ +

Череда трехраэдельная +Т + ++ ++ +

Примечание: количество "плюсов" обозначает степень ввравенности действия лекарственного

-растения (+ слабое: ++ умеренное: +++ сильное)

В И В О Д и

I. Разработана новая экспериментальная модель сенсибилизации к металлам, пригодная для использозагзш в токсмколо-го-гагаешпескои эксперхшэнте и для широкого скрининга десенсибилизирующих средств.

1. Наиболее чупствительныи и зкокошчосхи виго^иш ие-тодои оценки сенсибилизации лабораторных животных по дашпш дисперсионного анализа является метод аутобляшкообразования в периферической крови.

3. При сравнительной оценке действия на нчмунн/о систему тринадцати различных металлов выраженные сонсибилиз'лру»-щле свойства выявлены у восьми металлов, эффект которых уиеньиается в рчду: Сг > М1 > Ре > Со > Сй > Ва > Си > Кй.

4. Применение акт;5хслпнергических препаратов (атропин а ыетацик) при сенсибилизации к металлам не приводит к сни-зекк» проявлений сенсибилизации, а в отдельных случаях дала оказывает усиление аллергического действия.

5. Экспериментальными токсиколого-пшшначестгш исследованиями показана созио:теость фатокоррекции нарушений иммунологической раактивности организма при сенсибилизации к натаяла«.

6. Примеи-зкяе лабазника вязолистного, тысячелистника обыкновенного, горца птичьего, фиалки трехцветной и сборов лекарственных растений оказывает выраженное десенсибилизирующее действие при сенсибилизации к г.рохг/ а никель».

^ 7. Сенсибилизация к хрому и никелю с?1цестБепно уыекьпт-вт рекоиэндуеыно сбора лекарственных растений, вклвчак^-о траву череда трехраздельной, горца птичьего, тысячелистника обыкновенного, фиалки трехцветной, листья березы, подороз-викч большого, пяти порочной, крашгоы двудошгсй, корневища аира болотного, валериана лекарственной, цветки рошшта аптечной а лабсзннка влзолистного.

8. Разрвботвшшй сбор лекарственных растений (ГО), обладаний дзсеисибилиэируяязш действием, эффективен и при атонической дерматите у дзтей, что подтверждается ггаблвдэ-штш в клинике.

- xa -

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕЗЩМЩ Результаты исследований направлена в кмшлексе с другими оздоровительный! мероприятиями на охрану и укрепление' здоровья, у лиц, страдащах яллергаческкш заболеваниями и контактируэдих с различными металлами аа производстве и в Ситу.

С целью выявления аллергенного действия химических соединений разработана метода оценки сенсибилизации организма . Указанные метода; атрофирована в опытах на лабораторных животных и подтверждены результатами наблюдений на людях (рац. предложения N262 от 10.01.SS; II 282 от 23.10.86).

Разработанная модель сенсибилизации к металл ал рекомендована дня использования в токсиколого-гигиенических исследованиях для выявления сенсибилизации и для широкого скрининга профилактических и лечебных средств (A.c. H 1504668).

Для фитокоррекции состояния сенсибилизации рекомендованы сборы лекарственных растении.

Сбор лекарственных растений N 3 рекомендован для лечения атонического дерматита у детей (патент N1793927).

Пропаси сборов лекарственных растений, рекомендуемых при аллергических заболеваниях: Сбор N 1

1. Трава череда - Hería Biâentis -- 1.0

2. Трава горца птичьего - Herba Polygoni avlcularis -1.0 .

3. Трава тысячелистника - Herba Milleíolíl -1.0

4. Трава фиалки трехцветной - Herba Viole Xrlcolorie - 1.0

5. Цветка лабазника вязолистного - Plores Ulmarii - 1.0

6. Лист подорожника - Folium Plantaginie raajorla - 1.0

7. Лист березы - Follvn Betulae - 0.5

8. Кора крушины - Cortex ïrangulae - 0.5

9. Лист мяты перечной - Folium Mentha® piperitas - 1.0-

10.Лист крапивы - Folium Urtica« - 1.0 11 .Кордашада аира - RHizoraa Calami - 0.5

12.Корнешвде залериаш-пЫгогга сш wuucibus У&1ег1апав~0,Б

13. Цветки роцавки - Flores ШшпютШав - 1.0

M.I.Speeles

, D.S. Применяется по I стапаау настоя утром яатоц&к и вечером перед устном при аллерпгческом хромовом и никелевой дерматите■ Сбор M 2

1. Трава череда - Herba Bldentls - 1.0

2. Трава горца птичьего - Herta Polygonl avicularie - 1.0

3. Цветки лабазника вязолисткого - Р1огев Ulmarll - 1,0

U.i.Speeles

D.S. Применяется по 1/3 - 1/2 стакана настоя 3 раза а день до еда при аллергическом хромовом дерматите Сбор H 3

1. Трава череда - Herba Bidentls - 1,0

2. Трава горца птичьего - Herba Polygonl avlcuIarlB - 1,0 1 .

3. Трава фиалки трехцветной - Herba Viola trlcolorlB - 1,0 ! 4. Корневища аира - Rhlzoraa Calerai - 0,5

5. Лист крапивы - Folium TJrtlcal - 0,5

6. Почки березы - Gemm&e Betulae - 0,25

И. i.Speeles

- D.S. Приценяется в возрастных терапевтических дозироаках.

ШВДЕШБ РЕЗУЛЬТАТОВ РАБОТЫ В ПРАКТИГ

1. На основании проведенных исследований разработаны н внедрены в практику метода оценки первичных зашунопатологиче-ских сдвигов при действии малорэстворишх промышленных апро-золей, нааедша отражение в "Методических рекомендациях для прогнозирования безопасных уровней воздействия налсраствори-1ШХ промышленных аэрозолей".- Даамбул, 1990.-314с.

2. Результат исследований внедрены и используются в клинике профессиональных заболеваний СГЗ НИИ ГТиГО.

3. Основные теоретические и практические полоаения работы используется в учебной работ« в последипломном обучении специалистов иедико-профачактнческого профиля на квфедре профилактической токсикологии СПЗ МАЛО.

4. Материалы диссертационной работы используются в лекционном в практическом курсе кафедры гигиенн труда СПС1Ш, разработанная модель аллергии (A.c. N 15046П8) использует-

ся для оценки сенсибилизации при проведении науччных исследований, связанных с нормированием химических веществ.

5. Проведены с полоштельнш эффектом клинические испы- ' тешя средства для лечения атонического дерматита у детей.

6. Результаты работа долозекы и обсуад&ны из Всесоюзном съезде токсикологов, на республиканских конференциях, симпозиумах и совещание, посвящешхых актуальнш проблемам гигиены, экологии и охраны окруяашщей среды.

1

СПИСОК РАБОТ ОПУВЛЙКОВАКШ ПО TSE ДИССЕРТАЦИИ

1. Фориакологические свойства галеновых препаратов из цветков Fllipendula ulrraria (L.) Maxira. //Растительные ресурсы. -I979.-Т.XV.-С.39С-407. (В соавторстве с О.Д.Баряауловыы, И.Г.Болдиной.В.В.Галутко и др.).

2. Изучение феномена бляшкообразованяя с аутологичныыи эритроцитами у мышей при дейстзии солей некоторых металлов. //Гигаешческая токсикология металлов: Науч.труды.~М.,1983. -С.67-77.(В соавторстве с Ю.Н.Стройковым).

3. Использование реакции специфического гемолиза для оценки аллергенного действия химических вецеств//3адачи токсикологов Российской федерации на XII пятилетку по' ускорению научно-технического прогресса: Тез, докт. Республиканской научно-практической конференции.- Воронен,1985.-С.35.

4. Активация иммунитета на ранних стадиях интоксикации сопят некоторых металлов //Проблемы охраны здоровья населения и защита окруващей срзды от химических вредных факторов: Тез. докл. I Всесоюзного съезда токсикологов.-Ростов-на-Дону, 1986.-С.2Б9.

5. Экспериментальное обоснование фагопрофилактики профессиональных аллерх'озов //Учредительная конференция Пермского областного общества токсикологов: Тез.докл.13-15 окт.1987.-Пермь,1987.-С.41-42.

6. Влияние фитопрепаратов на течение экспериментального аллергического дерматита у морских свинок /Материалы конференции молодых ученых и специалистов, ЛаяНИИ гашены труда и профзаболеваний ( 24-25 декабри 1986г.)-Я. ,1988.-Деп.в НПО

"Союзкедиифори"19.09.88,Н 161?Э;С.52-53. .....

7. Экспериментальная терашгя хромовой сенсибилизации //Актуальные проОлеиы теоретической, и практичесгоЗ токсикологии. -М..1988.-С.137-146.

8. Изучение состояния шыунной реактивности организма при воздейств!щ вредш'х веществ экспресс-иетодаии //Ускоренные методы санитарно-гигиенического нормирования Ереданх веществ в воздухе 'рабочей зош:Материалы Всесоюзной науч. конф.-(13-15 сентября 1938).-Ереван,1988.-СЛ44-145.

9. Использование реавдзг специфического гемолиза для определения сенсибилизации оргашзыа к профессиональны» аллергенам /Л!атериалы конф."Рационализация и изобретательство в гигиене труда и нрофпатологки"(16 ноября 1988 г.)-Л., 1908,57с. (Рукопись деп.во ВШЕШ № СССР N15930-08).-С.18-23.(В соавторстве с Л.Ф.Будановой и В.Н.Макаровой).

10. Способ моделирования аллергии к металлам.А.С.Н 1504668 от I иая 1Э89 г. (В соавторстве с О.А.КовалеЕык и М.ЕШые-евыи).

11. Рекомендации для прогнозирования безопасных уровней воздействия иалораствориных аэрозолей (Методические рекоме-вдации).-Дкацбул,1990 г.-14с.(В соавторстве с А.Д.Фроловой, М.П.Чекуновой и др.).

12. Влияние активации иетаболизирушедей системы • на сенсибилизирующее действие хрома//Гигиена и санитария.-1990.-И 11. -С.64-66.(В соавторстве с И.И.Михеевыы).

13. Средство для лечения апотического дерматита у детей. Патент N 1793927. (В соавторстве с 0.А.Ковалевым и Э.Д.Коло-совскпм).