Роль иммунной системы в патогенезе рака молочной железы при комбинированном лечении

Стахеева, Марина Николаевна

Диссертации по медицине → Патологическая физиология

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.03) на тему:Роль иммунной системы в патогенезе рака молочной железы при комбинированном лечении

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Стахеева, Марина Николаевна Томск 2011 г.

Ученая степень: доктора медицинских наук

ВАК РФ: 14.03.03

Автореферат диссертации по медицине на тему Роль иммунной системы в патогенезе рака молочной железы при комбинированном лечении

005002125

На правах рукописи

СТАХЕЕВА МАРИНА НИКОЛАЕВНА

РОЛЬ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ В ПАТОГЕНЕЗЕ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ПРИ КОМБИНИРОВАННОМ ЛЕЧЕНИИ

14.03.03 - патологическая физиология 14.01.12 - онкология

1 7 НОЯ 2011

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Томск-2011

005002125

Работа выполнена в учреждении Российской академии медицинских наук научно-исследовательском институте онкологии СО РАМН

Научные консультанты:

доктор биологических наук, профессор Чердынцева Надежда Викторовна доктор медицинских наук, профессор Слонимская Елена Михайловна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук

доктор биологических наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ

доктор медицинских наук, профессор

Скурихин Евгений Германович

Ветлугина Тамара Парфеновна Дыхно Юрий Александрович

Ведущая организация: учреждение Российской академии наук Институт иммунологии и физиологии Уральского отделения РАН, г. Екатеринбург

Защита состоится «_»_2011 г. в_часов на

заседании диссертационного совета Д 001.031.01 при учреждении Российской академии медицинских наук научно-исследовательском институте фармакологии СО РАМН (634050, г. Томск, пр. Ленина, 3)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке учреждения Российской академии медицинских наук НИИ фармакологии СО РАМН

Автореферат разослан « -2 » И^ОЛ 2011г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук

Амосова Е.Н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы: Вопрос участия иммунной системы в патогенезе злокачественных новообразований стоит перед исследователями с момента открытия феномена иммунного ответа. Несмотря на богатый феноменологический материал [Барышников А.Ю., 2007, Бережная Н.М., Чехун В.М., 2005, Кадагидзе З.Г., 2005, Schiirmacher V. et al., 2002, Ben-Baruch A., 2003, Kurtenkov O. et al., 2005, DeNardo D.G., Coussens L.M., 2007, Curiel T.J., 2007 T.J., 2007, Swann J.B., Smyth M.J., 2007, DeNardo D.G. et al. 2008, Homychova H. et al., 2008, Standish L. et al. 2008, Gobert M., 2009, Nicolini A., Carpi A., 2009, Zitvogel L. et al., 2008, Bacacs T., Mehrishi J., 2010 и пр.] до настоящего времени суждения о роли иммунной системы в патогенезе большинства солидных злокачественных новообразований носят противоречивый характер [Swann J.B., Smyth M.J., 2007 Curiel T.J., 2007 T.J., 2007, Nicolini A., Carpi A., 2009]. С чем связана такая неоднозначная позиция в оценке влияния иммунной системы на опухолевый рост?

Во-первых, эволюционно взаимоотношения иммунной системы и опухоли складываются как амбивалентные [Бережная Н.М., Чехун В.М., 2005]. Активность иммунной системы в отношении злокачественных клеток находит выражение в реализации, как минимум, двух вариантов развития событий - элиминации опухоли или содействии ее росту и прогрессии [Ben-Baruch А., 2003, Nicolini A., Carpi А., 2009, Curiel T.J., 2007 T.J., 2007, Swann J.B., Smyth M.J., 2007]. Наличие противоопухолевой активности у иммунной системы при раке молочной железы (РМЖ) подтверждается тем, что снижение количества или функциональности специализированных эффекторов связано с более тяжелым клиническим течением заболевания, низкой эффективностью лечения и худшими показателями выживаемости. Подобная взаимосвязь показана как в отношении механизмов врожденного (NK-клетки, естественные антитела, полиморфизм генов TLR4) [Kurtenkov О. et al., 2005, Zitvogel L. et al., 2008], так и адаптивного иммунного ответа [Homychova H.et al., 2008, Schirrmacher V. et al., 2002].

Однако противоопухолевая активность иммунной системы во многих случаях неэффективна в результате ускользания опухоли из-под иммунологического контроля [Антонов В.Г., Козлов В.К., 2004, Curiel T.J., 2007, Swann J.B., Smyth M.J., 2007, Nicolini A., Carpi A., 2009]. При этом важное значение имеют механизмы толерантности, осуществляемые иммунной системой в отношении новообразования, возникающего, как известно, из клеток организма-хозяина Среди наиболее важных супрессорных эффекторов следует отметить Т-регуляторные клетки и цитокины IL-10 и TGF-P [Кадагидзе З.Г., 2005, Curiel T.J., 2007, Gobert M., 2009].

Способствующую опухолевой прогрессии активность иммунной системы у больных РМЖ, в основном, связывают с механизмами хронического воспаления, реализация которого обеспечивается продукцией широкого спектра факторов, содействующих инвазии, неоангиогенезу и метастазированию опухоли. Эти процессы обусловлены функционированием макрофагов 2 типа, формированием ТЪг-зависимого иммунного ответа, нарушением баланса про- и противовоспалительных цитокинов, хемокинов [Ben-Baruch А., 2003, DeNardo D.G., Coussens L.M., 2007, DeNardo D.G. et al., 2008, Standish L. et al., 2008]. При этом иммунная система активна, и ее функционирование направлено на создание условий для поддержания опухоли.

Современная концепция иммунологического редактирования злокачественного роста рассматривает эти состояния - контроль опухолевого роста иммунной системой, равновесие между активностью опухоли и иммунной системой и избегание опухолью иммуио-опосредованных защитных механизмов со стороны хозяина - как смену последовательных фаз [Swann J.B., Smyth M.J., 2007]. При этом предполагается, что иммунная система также последовательно меняет функциональную направленность от противоопухолевой к проопухолевой по мере генерализации процесса [Балдуева И.А., Семиглазов В.Ф., 1996], что подразумевает определенную детерминированность

состояния иммунной системы в зависимости от распространенности опухолевого процесса [Гранов A.M., Молчанов О.Е., 2008] и невозможность ее изменения.

Вторым аспектом, не позволяющим однозначно определить роль иммунной системы в патогенезе злокачественно роста, является множественность механизмов взаимо(противо)действия опухоли и иммунной системы [Swann J.B., Smyth MJ., 2007, Nicolini A., Carpi A., 2009]. Большинство исследований направлено на выявление какого-либо одного ключевого механизма, определяющего про- или противоопухолевое действие иммунной системы. К настоящему времени сменилось несколько основных претендентов на место ключевого механизма: фагоциты, цитотоксические Т-лимфоциты, лимфокин-активированные лимфоциты, NK, интерфероны как противоопухолевые эффекторы, с одной стороны [Kurtenkov О. et al., 2005, Zitvogel L. et al., 2008, Homychova H. et al., 2008, Schirrmacher V. et al., 2002], и опухолеассоциированные макрофаги, Т-регуляторные клетки, миелоидные супрессоры, провоспалительные цитокины как факторы содействия опухолевому росту, с другой стороны [Ben-Baruch А., 2003, DeNardo D.G., Coussens L.M., 2007, DeNardo D.G. et al., 2008, Standish L. et al., 2008]. Однако, само обилие выявляемых механизмов определенно указывает на существование многочисленных путей, направленных как на взаимо-, так и противодействие опухоли и иммунной системы. В каждую фазу взаимодействия одновременно функционируют механизмы той и другой направленности. Эффективное преобладание одной из них определяет общую стратегию иммунной системы. При изменении внешних или внутренних условий механизм, доминирующий на каком-либо этапе «естественной истории опухоли», может утратить свою значимость [Swann J.B., Smyth M.J., 2007], и тогда возможно обращение фазы взаимодействия «опухоль-организм».

Следующая причина неоднозначности в оценке роли иммунной системы в патогенезе злокачественных новообразований заключена в том, что влияние иммунной системы на опухолевый процесс рассматривают преимущественно на уровне эффектов непосредственно в опухолевом микроокружении [Ben-Baruch А., 2003, DeNardo D.G., Coussens L.M., 2007, DeNardo D.G. et al., 2008]. Иммунная система является одной из ключевых для поддержания гомеостаза организма и осуществляет жизненно важные функции, такие как обеспечение адаптации, естественной резистентности, противоинфекционной защиты, регуляции кроветворения и иммунопоэза, регенераторных возможностей [Абрамов В.В., Абрамова Т.Я., 1996, Гольдберг Е.Д. и др., 1996, Корнева Е.А., 2003,Чередеев А.Н., Ковальчук Л.В., 1997, Сепиашвили Р.И. и др., 2000, Ширинский B.C. и др., 2000, Юшков Б.Г. и др., 2010]. Вследствие этого иммунная система способна оказывать воздействие на злокачественный процесс опосредованно, изменяя клинический статус пациента. Системный принцип организации требует оценки морфофункционального состояния иммунной системы как комплекса взаимосвязанных разнонаправленных функций, осуществляемых ею в целом на разных уровнях функционирования [Li Y. et al., 2008].

Не вызывает сомнений, что функции иммунной системы в существенной мере определяются генотипом организма Индивидуальные различия связаны с нормальной генетической изменчивостью - полиморфизмом вовлеченных в функционирование иммунной системы генов, среди которых важное значение имеют гены основных медиаторов межклеточных взаимодействий - цитокинов [Баранов B.C., 2000, de Jong M., 2002, Wai C.T., 2003, Ben-Ari Z., 2003.]. На функциональную компетентность иммунной системы онкологического больного, наряду со злокачественным процессом и генетическими вариациями, также может влиять наличие иммунопатологических синдромов инфекционно-аллергической или аутоиммунной природы, приобретенных в онтогенезе [Swann J.B., Smyth M.J., 2007].

различных методов воздействия на опухоль с целью удаления первичного узла (неоадьювантная цитостагическая терапия, оперативное удаление опухоли) и профилактики метастазов (адьювантная химио-, радио- или гормонотерапия). Противоопухолевое лечение оказывает выраженное влияние как на опухоль, так и на организм, в связи с чем его следует позиционировать как фактор патогенеза [Zitvogel L. et al., 2008]. Рассматривая воздействие проводимого лечения на иммунную систему, можно выделить два аспекта. Первый аспект заключается в том, что цитостатические средства способны модифицировать ответ иммунной системы на злокачественное новообразование. В частности, под влиянием ряда химиопрепаратов селективно удаляются клоны клеток, обладающих иммуносупрессивной активностью. Транзиторная лимфопения, вызываемая цитостатическим лечением, приводит к индукции гомеостатической пролиферации иммунокомпетентных клеток [Zagozdzon R. et al., 2001, Ehrke M.J., 2003, Ostrand-Roseberg S. et al., 2004, Carson W.E., 2004, Lutsiak M.E. et al., 2005, Suzuki E., 2005]. Второй аспект связан с вовлечением механизмов иммунной системы как необходимого звена в реализацию эффектов цитостатического лечения [Apetoh L. et al., 2007, Zitvogel L. et al., 2008]. Недавно появились доказательства, вскрывающие механизм вовлечения эффекторов естественной резистентности в опухолевый надзор. Показано, что индукция сигнального пути в ответ на повреждение ДНК в клетке под влиянием экзогенных и эндогенных генотоксических агентов приводит к экспрессии NKG2D лигандов, которые распознаются натуральными клетками-киллерами (NK) и 7/5 Т-лимфоцитами, что приводит к запуску эффекторного NK, NKT и Т-клеточного ответа на трансформированные клетки [Bauer S. et al., 1999, Gasser S. et al., 2005]. Хроническая активация этого ответа, а также индукция еще целого ряда стресс-индуцированных молекул в опухолях при воздействии цитостатических агентов может вносить вклад в распознавание и уничтожение опухолевых клеток в процессе химиотерапии [Бережной А.Е. и др., 2008].

Амбивалентный характер взаимодействия иммунной системы с опухолью, множественность, разнонаправленносгъ и динамичность этих путей, системный принцип функционирования позволяют употребить термин «стратегия функционирования иммунной системы» при осуществлении ею программы сдерживания опухолевого роста или содействия ему. При этом объективным клиническим критерием направленности стратегии может выступать наличие или отсутствие прогрессирования заболевания.

Именно разнородность критериев оценки влияния иммунной системы на опухолевый процесс следует отметить в качестве еще одного объяснения неоднозначности сведений о ее роли в регуляции опухолевой прогрессии. Очевидно, что для корректного подтверждения участия иммунной системы в патогенезе онкологического заболевания необходимо при формировании групп сравнения нивелировать воздействие основных патогенетически значимых факторов злокачественного роста, которые по сути выступают стандартными критериями оценки прогноза клинического течения заболевания, и включают в себя распространенность процесса, биологические характеристики злокачественных клеток, а также клинико-анамнестические особенности пациента и мероприятия проведенного противоопухолевого лечения [Божок А.А. и др., 2005, Реши С.М. et al., 2000].

релевантность групп сравнения по основным патогенетическим характеристикам процесса, влияющим на исход заболевания. Следует учитывать, что условия, в которых происходит формирование про- или противоопухолевой стратегии иммунной системы обеспечиваются в совокупности свойствами организма, опухоли и применяемых средств и методов лечения. Поскольку противоопухолевое лечение позиционируется как значимый фактор патогенеза РМЖ, оценку направленности стратегии иммунной системы необходимо проводить на каждом из основных этапов лечебных мероприятий. Комплексный подход, включающий клинические и экспериментальные исследования, а также адекватный аппарат матемагической обработки больших массивов данных предоставили возможность изучить роль иммунной системы в патогенезе РМЖ на этапах комбинированного лечения и ее влияние на исход заболевания.

Цель исследования: Патогенетическое обоснование различных стратегий иммунной системы, сопряженных с особенностями клинического течения и исходом рака молочной железы (без прогрессирования, различные типы прогрессирования), и исследование механизмов про- и противоопухолевой направленности функционирования иммунной системы у больных РМЖ при проведении комбинированного лечения. Задачи исследования:

1. Обосновать методологический подход для исследования роли иммунной системы в патогенезе РМЖ.

2. Оценить взаимосвязь состояния иммунной системы как интегрированного целого с характером клинического течения и исходом РМЖ.

3. Исследовать механизмы, лежащие в основе про- и противоопухолевой стратегии, реализуемой иммунной системой у больных РМЖ до начала и на этапах специфического лечения.

4. Исследовать структуру факторов, определяющих различия в состоянии иммунной системы у больных РМЖ при проведении противоопухолевого лечения.

5. Исследовать роль генетической регуляции на основе оценки полиморфизма патогенетически значимых генов в формировании про- и противоопухолевой стратегии иммунной системы у больных РМЖ.

6. Исследовать влияние противоопухолевого лечения на состояние иммунной системы у больных РМЖ и оценить возможность изменения направленности функционирования (противоопухолевая или опухолестимулирующая стратегия) в процессе проводимых лечебных мероприятий.

7. Исследовать вовлечение механизмов иммунной системы в обеспечение различий в клиническом течении РМЖ в условиях применения препарата с адаптогенным действием.

8. Оценить информативную значимость оценки состояния иммунной системы до начала, во время проведения и после завершения комбинированного лечения в качестве дополнительного критерия прогноза клинического течения и исхода РМЖ.

Научная новизна. Создана и апробирована оригинальная модель оценки состояния иммунной системы на системном уровне функционирования. Модель основана на представлении состояния иммунной системы как многомерного наблюдения и его визуализации в пространстве многомерных признаков.

Впервые получены данные о различии в состоянии иммунной системы у больных РМЖ в зависимости от клинического течения и исхода заболевания при соблюдении принципа релевантности стандартных, патогенетически значимых признаков злокачественного процесса и проводимого противоопухолевого лечения в сравниваемых группах, что свидетельствует об участии системы иммунитета в патогенезе данного заболевания и влиянии на его исход.

Показано, что важную роль в изменении стратегии функционирования иммунной системы у больных РМЖ играет осуществляемое противоопухолевое лечение. Получены приоритетные данные, указывающие на динамичность состояния иммунной системы у больных РМЖ на различных этапах комбинированного лечения. Выявлено, что иммунная система в условиях противоопухолевой терапии способна изменить состояние от содействующего опухолевому процессу (проопухолевая стратегия) к обеспечивающему длительную клиническую ремиссию (противоопухолевая стратегия).

В условиях in vitro при воздействии апоптоз-индуцирующих агентов, таких как моноклональные антитела к CD95 для индукции Fas-опосредованного апоптоза, моноклональные антитела к CD3 для индукции акгивационного апоптоза и цитостатического препарата вепезида, оценены показатели клеточной гибели и связанных с этим механизмов активации и пролиферации мононуклеарных клеток периферической крови. Показаны существенные различия в свойствах клеток периферической крови групп пациентов с разным исходом заболевания: возможность благоприятного исхода РМЖ связана не столько с устойчивостью клеток иммунной системы к индукции клеточной гибели, сколько с пролиферативной активностью и способностью восстанавливать количественные потери, т.е. с механизмами гомеостатической пролиферации при проведении цитостатического лечения.

Впервые показано, что морфофункциональное состояние иммунной системы у больных РМЖ до начала лечения и через 1 год после его завершения формируется, в основном, под влиянием особенностей организма (генотип, адаптационный статус, иммунопатологические состояния), в процессе лечения - под влиянием опухолевого процесса (стадия, степень злокачественности). Влияние схемы, режима и объема проведенного лечения на состояние иммунной системы пациенток сохраняется после его завершения.

Впервые на основе оценки широкого спектра морфофункционапьных показателей иммунной системы, характеризующих ее эффекгорный и регуляторный потенциал, показано различие организации внутрисистемных процессов ее функционирования в зависимости от особенностей клинического течения злокачественного процесса. Получены новые данные о генетической компоненте регуляции функционирования иммунной системы у больных РМЖ, при этом структура регуляторного паттерна «ген-эффект» изменяется в зависимости от характера воздействий, применяемых на этапах противоопухолевого лечения.

Выявлено, что уровень продукции цитокинов у больных РМЖ до лечения находится под преобладающим влиянием генов провоспалительных цитокинов. На этапе неоадьювантной химиотерапии (НАХТ) регуляция продукции цитокинов зависит от генов CCR5, р53 и TGF-p. После завершения лечения наибольшее значение имеет ген противовоспалительного цитокина IL-10.

Показано, что использование препарата рекомбинантного IL-ip беталейкина у больных РМЖ приводит к улучшению адаптационного статуса в процессе противоопухолевого лечения и увеличению периода безрецидивной выживаемости у пациенток с выраженной лимфогенной распространенностью процесса N2 (патент на изобретение № 2304445 «Средство, обладающее адаптогенным действием, и Способ подготовки больных раком молочной железы к проведению специфического противоопухолевого лечения с включением полихимиотерапии»). При этом эффект применения беталейкина связан с его влиянием на состояние иммунной системы.

Практическая значимость. Предложен инструмент интегральной оценки состояния иммунной системы у больных РМЖ как содействующего опухолевой прогрессии, либо как сдерживающего опухолевый рост. Использование предложенного подхода позволяет осуществлять прогноз клинического течения РМЖ до начала, во время проведения и после завершения комбинированного лечения (положительное решение по заявке № 2010129630 от 3.05.2011, приоритет от 15. 07. 2010, «Способ прогнозирования

гематогенного метастазирования у больных раком молочной железы, основанный на оценке состояния иммунной системы при проведении противоопухолевого лечения»).

Показана потенциальная возможность регуляции состояния иммунной системы проведением комбинированного лечения с целью влияния на характер клинического течения РМЖ и индивидуализации противоопухолевых мероприятий. Обоснована возможность использования препаратов, обладающих адапгогенным действием, для регуляции состояния иммунной системы на этапах противоопухолевого лечения.

Полученные данные свидетельствуют о целесообразности оценки состояния иммунной системы на этапах противоопухолевого лечения и динамического наблюдения для прогноза клинического течения РМЖ, риска прогрессирования заболевания, а также для адекватного назначения методов и средств иммунокоррекции. Полученные данные являются основой для валидации параметров, необходимых для адекватной оценки состояния иммунной системы у больных РМЖ на каждом из этапов противоопухолевого лечения и динамического наблюдения.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. При РМЖ существуют различные варианты функционирования иммунной системы, патогенетически связанные с характером клинического течения и исходом заболевания. Про- или противоопухолевая стратегия иммунной системы при РМЖ реализуется на системном уровнем ее функционирования и представляет собой комплекс взаимосвязанных механизмов, действующих на разных уровнях организации системы.

2. Стратегическая направленность функционирования иммунной системы при РМЖ формируется в результате взаимодействия генетически детерминированных и функциональных параметров организма, клинико-патологических характеристик опухолевого процесса. Вариабельность иммунологических параметров у больных РМЖ, определяющая морфофункционапьные возможности системы, до начала противоопухолевого лечения и через 1 год после его завершения, в основном, связана с индивидуальными особенностями организма (генотипические вариации в продукции патогенетически значимых цитокинов, морфофункциональная асимметрия, адаптационный статус, иммунопатологические состояния), на этапах противоопухолевого лечения - с параметрами опухолевого процесса (стадия, биологические свойства опухолевых клеток).

3. Состояние иммунной системы при РМЖ динамично: проведение специфического лечения (неоадъювангная химиотерапия, оперативное удаление первичной опухоли) способствует изменению проопухолевой стратегии иммунной системы на противоопухолевую. Механизмы, определяющие стратегию функционирования иммунной системы у больных РМЖ, связаны с характером воздействий, осуществляемых на этапах специфического лечения.

4. Оценка состояния иммунной системы у больных РМЖ на этапах противоопухолевого лечения и динамического наблюдения может быть использована в качестве дополнительного критерия прогноза клинического течения РМЖ, риска прогрессирования заболевания, а также для адекватного назначения методов и средств иммунокоррекции.

форуме с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (С-Петербург, 2004, 2005, 2007), Всероссийской научно-практической конференции «Дни иммунологии в Сибири» (Красноярск, 2006), республиканской научной конференции «Создание новых лекарственных препаратов» (Томск, 2007), научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Сибири — 2008» (Томск, 2008), Четвертой всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов» (Новосибирск, 2009), Российской научно-практической конференции с международным участием «Проблемы современной онкологии» (Барнаул, 2009), Всероссийской научной конференции «Молекулярно-генетические основы функционирования цитокиновой сети в норме и при патологии» (Новосибирск, 2010), Siberian-Taiwan Forum: Tomsk Region and Taiwan: Experience of Scientific - Technical and Innovation Cooperation, 16-17 September (Tomsk, 2009), International conference 'Tumor and host: novel aspects of old problem" (Kyiv, 2010).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 73 работы, в том числе 16 - в центральных журналах, рекомендованных "Перечнем..." ВАК Минобрнауки, 2 в зарубежной печати. Получен патент на изобретение № 2304445 «Средство, обладающее адаптогенным действием, и Способ подготовки больных раком молочной железы к проведению специфического противоопухолевого лечения с включением полихимиотерапии» (заявлено 20.10.2004, опубликовано 20.08.2007, Бюл. № 23). Получено положительное решение по заявке № 2010129630 от 3.05.2011 (приоритет от 15. 07.2010) на изобретение «Способ прогнозирования гематогенного метастазирования у больных раком молочной железы, основанный на оценке состояния иммунной системы при проведении противоопухолевого лечения».

Внедрение результатов исследования. Выявленные критерии прогноза клинического течения РМЖ на основании оценки состояния иммунной системы внедрены для практического применения в лаборатории иммунологии и отделении общей онкологии НИИ онкологии СО РАМН. Результаты исследования используются в учебном процессе для преподавания раздела иммунологии опухолевого роста на кафедре иммунологии и аллергологии ГОУ ВПО СибГМУ.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 377 страницах машинописного текста и состоит из введения, восьми глав, включающих обзор литературы, материалы и методы исследования, шести глав с изложением собственных результатов, заключения, выводов, списка цитируемой литературы, содержащего 422 источника, из них 103 российских, 319 иностранных, приложения. Работа иллюстрирована 67 таблицами и 28 рисунками.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В настоящую работу включены наблюдения за 430 больными с впервые установленным РМЖ, стадии T1.4N0-3M0, находившимися на лечении в отделении общей онкологии НИИ онкологии СО РАМН г. Томска с 1999 по 2009 гг. Диагноз рака молочной железы в каждом случае установлен на основании данных клинического, маммографического и ультразвукового методов обследования и верифицирован морфологически в соответствии с «Гистологической классификацией опухолей молочной железы» (ВОЗ, Женева, 2003). Критериями исключения из исследования являлись признаки гематогенного метастазирования РМЖ на этапе установления диагноза.

Все больные прошли курс противоопухолевого лечения. Предоперационное лечение включало проведение 2-4 курса НАХТ по схемам: CMF (5-фторурацил 600 мг/м2 в/в в 1, 8 дни, метотрексат по 40 мг/м в/в в 1, 8 дни, циклофосфан по 100 мг/м2 в/м с 1 по 14 дни); FAC (5-фторурацил 500 мг/м2 в/в в 1 и 8 день, адриамицин 50 мг/м2 в/в в 1 день; циклофосфан 500 мг/м2 в/в в 1 и 8 день); CAF (адриамицин 30 мг/м2 в/в в 1, 8 дни,

5-фторурацил 500 мг/м2 в/в в 1, 8 дни, циклофосфан по 100 мг/м2 в/м с 1 по 14 дни). Хирургическое вмешательство выполнялось через 7-14 дней после окончания НАХТ в объеме радикальной мастэктомии, радикальной резекции или секторальной резекции с аксиллярной лимфаденэктомией. В послеоперационном периоде по показаниям проводилась адъювантная химиотерапия по стандартным схемам CMF, CAF, FAC, лучевая и гормональная терапия.

В соответствии с поставленными задачами были выделены 3 основные группы исследования (таблица 1).

Первая основная группа: Исследование состояния иммунной системы и выявление факторов, определяющих вариабельность иммунологических показателей на этапах противоопухолевого лечения и динамического наблюдения, выполнено у 198 больных. При изучении взаимосвязи состояния иммунной системы с характером клинического течения РМЖ первая основная группа была разделена на 2 подгруппы, иммунологические показатели которых составили обучающую (75 пациенток) и обучаемую (123 больные) выборки. Целью формирования обучающей выборки была процедура визуализации образов и построения классификационных дискриминантных функций, описывающих состояние иммунной системы у больных РМЖ на этапах противоопухолевого лечения как ассоциированное с благоприятным или неблагоприятным клиническим течением заболевания. В качестве критерия, отражающего характер клинического течения РМЖ, использовали показатель наступления прогрессирования заболевания в течение 3-х лет с момента установления диагноза. В подгруппу благоприятного течения вошли больные (п=31), которые пережили 3 года без признаков прогрессирования РМЖ. У 44 пациенток в течение 3-х лет отмечено прогрессирование РМЖ в форме гематогенных метастазов в отдаленные органы (п=35), рецидивов опухолевого роста (п=5) и одновременного гематогенного метастазирования и рецидивирования (п=4). Пациентки с выявленными признаками прогрессирования были включены в соответствующие отдельные подгруппы обучающей выборки. Группы сравнения по частоте встречаемости основных критериев прогноза [Божок А. А. и др., 2005; Pérou С. M. et al., 2000] и объему проведенного лечения были равноценны. Обучаемая выборка была использована для верификации полученной модели классификации состояния иммунной системы и прогноза РМЖ.

Исследование роли генетической регуляции в формировании про- и противоопухолевой стратегии иммунной системы и изучение взаимосвязи генетического полиморфизма генов цитокинов и гена белка-онкосупрессора р53 с механизмами прогрессии РМЖ (показателями безрецидивной выживаемости) выполнено у 382 пациенток, представляющих вторую основную группу. В число наблюдений данной группы частично вошли представительницы первой и третьей исследовательских групп (178 и 12 пациенток соответственно).

Третья основная группа (40 пациенток) была сформирована с целью исследования влияния препарата рекомбинантного интрелейкина-ip бетапейкина (НИИ ОЧБ, г. С.-Петербург) на адаптационный и иммунный статус у больных РМЖ при проведении противоопухолевого лечения. Группа пациенток, в схему лечения которых был включен бетапейкин, состояла из 21 человека. В контрольную группу вошли 19 больных РМЖ. Группы больных, вошедших в исследование, по возрасту, состоянию репродуктивной функции, размеру первичного опухолевого узла были репрезентативны.

Сроки наблюдения за больными в первой основной группе составили 4 года и более, во второй группе 2 года и более, в третьей - более 9 лет.

Работа проводилась с соблюдением принципов добровольности и конфиденциальности в соответствии с «Основами законодательства РФ об охране здоровья граждан» (Указ Президента РФ от 24.12.93 №2288), имеется разрешение локального комитета по биомедицинской этике НИИ онкологии СО РАМН.

Сведения об особенностях анамнеза и клинического течения заболевания, схеме, объеме и эффективности проведенного лечения, сроках наступления прогрессирования

Таблица 1 - Распределение больных РМЖ по группам наблюдения в соответствии с поставленными задачами и использованными методами

Группы наблюдения Задачи исследования Методы исследования

Первая группа п=198; из них обучающая выборка п=75; без прогрессирования более 3-х летп=31; гематогенные метастазы в течение 3-х лет п=35; рецидив п=5; одновременно рецидив и метастазы п=4; обучаемая выборка п=123 Исследование взаимосвязи состояния иммунной системы с характером клинического течения РМЖ; Исследование механизмов формирования различий в состоянии иммунной системы, значимых для клинического течения РМЖ; Прогноз течения РМЖ на основании оценки состояния иммунной системы. Методы оценки иммунного статуса 1 и 2 уровня; Визуализация состояния иммунной системы как интегрированного целого; Построение классификационных дискриминантных уравнений; Исследование организации внутренних процессов иммунной системы (факторный анализ); Исследование чувствительности МНПК к апоптоз-индуцирующим воздействиям in vitro; Прогнозирование риска прогрессирования заболевания; Дисперсионный анализ показателей иммунной системы

Вторая группа п=382 Оценка роли генетической регуляции в формировании про- и противоопухолевой стратегии иммунной системы у больных РМЖ. ПЦР и ПЦР-ПДРФ-анализ полиморфизма генов цитокинов и белка-онкосупрессора ТР53; Методы оценки иммунного статуса 1 и 2 уровня; Анализ безрецидивной выживаемости

Третья группа п=40; беталейкинп=21, контроль п=19 Изучение влияния препарата рекомбинантного 1Ь-1[} беталейкина на адаптационный и иммунный статус у больных РМЖ в динамике противоопухолевого лечения. Методы оценки иммунного статуса 1 и 2 уровня; Определение типа адаптационной реакции; Анализ безрецидивной выживаемости

РМЖ получены при анализе первичной медицинской документации - истории болезни и амбулаторных карт. Эффективность НАХТ оценивали по критериям ВОЗ инструментальными методами (УЗИ и маммография) и констатировали полную регрессию (100% уменьшение опухоли), частичную регрессию (50-99 %), стабилизацию (0-50 %) и прогрессирование (увеличение опухолевого узла), а также оценивали степень лекарственного патоморфоза опухолевых клеток. Анализировали основные клинико-морфологические факторы прогноза, такие как: возраст пациенток, менструальный статус, стадия (TNM), гистологический тип опухоли, степень дифференцировки, рецепторный статус опухолевых клеток, фоновая патология. Больные, вошедшие в группы исследования состояния иммунной системы, прошли процедуру опроса на выявление признаков иммунопатологических синдромов [ВетлугинаТ. П. и др., 2001].

Методика применения препарата рекомбинантного IL-Iß беталейкина. Препарат беталейкин, созданный в НИИ ОЧБ (г. С-Петербург, Россия), вводили до начала предоперационной химиотерапии. Курс лечения состоял из 5 ежедневных капельных внутривенных инфузий в дозе 5 нг/кг массы тела пациента на 500 мл изотонического раствора натрия хлорида. Продолжительность инфузии варьировала от 60 до 180 мин.

Материалом для исследования состояния иммунной системы и генетических особенностей у больных РМЖ служила периферическая кровь, взятая утром натошак из локтевой вены. Состояние иммунной системы исследовали до начала противоопухолевого лечения, после завершения 2 курсов НАХТ, после 3-4 курсов НАХТ, через 10-12 дней после оперативного удаления первичного опухолевого узла, через 1 год после завершения противоопухолевого лечения. Генетические исследования осуществляли однократно.

Для оценки иммунологических показателей фракцию мононуклеарных клеток из периферической крови выделяли общепринятым методом наслаивания на градиент плотности фиколла и верографина (р=1,077) с последующим центрифугированием [BoyumA., 1968].

Определение Фенотипа мононуклеарных клеток периферической крови (МНПК) осуществляли иммуноцитохимическим методом с использованием моноклональных антител к антигенам CD3, CD4, CD8, CD56, CD22, CD25, CD95, HLA-DR (Novocastra Lab Ltd, UK) [Тотолян A.A. и др., 2001].

Оценку апоптоза мононуклеарных клеток периферической крови осуществляли методом суправитального окрашивания с использованием флюоресцентного красителя Hoechst 33342 - бисбензимида, обладающего свойством пермеабшшзации клеточной мембраны и связывающегося Ъ тимином или аденином ДНК [Zhang X. et al., 2001, Stridh H. et al., 2002]. Для индукции апоптоза клеток периферической крови in vitro использовали следующие агенты:

1) моноклональные антитела к CD95, клон LOB3-17 (NovoCastra, Великобритания) - 250 нг/мл, индуцирующие апогггоз по классическому Fas-FasL механизму [Stridh Н. et al., 2002., Кайдашев И.П. и др., 2006.];

2) моноклональные антитела к CD3, клон UCHT1 (NovoCastra, Великобритания) -2,5 мкг/мл, обеспечивающие активацию Т-лимфоцитов при взаимодействии с TCR-рецептором и приводящие к активационному апоптозу [Леплина О.Ю. и др., 2000];

3) цитостатик вепезид (этопозид/VP-16-213, «Bristol-Myers Squibb», Италия) -4,5 мкг/мл в физиологическом растворе, неспецифический апоптоген [Потапнев М.П. и др., 2005].

Спонтанную и стимулированную митогенами продукцию ингерлейкинов (IL) 1, 2, 4, 10, фактора некроза опухоли-а (TNF-а), интерферона-у (IFN-y) МНПК исследовали с использованием наборов для иммуноферментного анализа (ООО «Цитокин», Санкт-Петербург, Россия).

ПролиФеративную активность лимфоцитов периферической крови оценивали по включению 3Н-тимидина в ДНК клеток в реакции бластгрансформации лимфоцитов (РБТЛ) [Хоробрых В.В. и др., 1983, Levesque В.М. et а!., 2000].

Функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов определяли в тесте восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) по их способности восстанавливать активные формы кислорода [Нестерова И.В. и др., 1999]. Содержание сывороточных факторов, находящихся в циркуляции, таких как иммуноглобулины классов М, A, G (IgM, IgA, IgG) и растворимые формы рецептора sFas (CD95) и его лиганда sFas-L исследовали с использованием наборов для иммуноферментного анализа (ЗАО «Вектор-Бест», Россия). Активность системы комплемента и уровень циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови определяли методом нефелометрии.

Выделение ДНК осуществляли стандартным методом фенол-хлороформным экстракции. Анализ полиморфных вариантов специфических участков генома проводили с использованием методов полимеразной цепной реакции и анализа полиморфизма длин ресгрикционных фрагментов, используя специфическую структуру праймеров и соответствующие ферменты рестрикции (таблица 2).

Продукты амплификации подвергали рестрикции соответствующими эндонуклеазами (таблица 2). Продукты рестрикции разделяли с помощью электрофореза в 2%-ном агарозном геле, содержащем 0,5 мг/мл бромида этидия и визуализировали в УФ-свете при помощи УФ-трансиллюминатора «Vilber Lourmat» (Франция). Иммуногистохимическое исследование проводили по стандартной методике. Для исследования экспрессии рецепторов эстрогенов на опухолевых клетках использовали антитела фирмы «Dako» (клон 1D51, готовые к применению, мышиные), рецепторов прогестерона (клон PgR63l\ готовые к применению, мышиные), онкопротеина с-егЬВ-2(кроличьи), KÍ67 (клон MIB-1, мышиные) и для белка-онкосупрессора ТР53 применяли антитела фирмы "NovoCastra" (клон СМ1). Экспрессию рецепторов к онкопротеину c-erbB, ТР53, KÍ67 оценивали в процентном содержании положительно окрашенных клеток в паренхиматозном компоненте первичной опухоли. Экспрессию рецепторов к половым гормонам оценивали по 3-балльной шкале (слабая, средняя и выраженная степени).

Тип адаптационной реакции определи по процентному содержанию лимфоцитов в лейкоцитарной формуле и их отношению к содержанию сегментоядерных нейгрофилов [Гаркави Л.Х.идр„ 1998].

Статистическую обработку данных проводили с использованием стандартного пакета программ «Statistica» (версия 6.1, серия 1203d, StatSoft tac.) и «NovoSpark® Visualizer 2.1» (Канада). Для проверки законов распределения исследуемых переменных на нормальность использовали критерий Колмогорова-Смирнова. Для оценки значимости различий выборок использовали непараметрические критерии Манна-Уитни, Вилкоксона, Краскала-Уоллеса. Различия считали значимыми при р<0,05. При проведении попарного сравнения частот аллелей и генотипов полиморфных вариантов генов, а также частоты встречаемости прочих изучаемых признаков в анализируемых группах использовали критерий i с поправкой Йетса на непрерывность и/или точный критерий Фишера. С целью исследования основных факторов, организующих морфофункционапьную структуру иммунной системы у больных РМЖ на этапах проведения противоопухолевого лечения, был применен факторный анализ [Иберла К., 1980, Боровиков В.П., 1998]. Дня классификации и описания состояния иммунной системы у больных РМЖ с различным клиническим течением был использован метод дискриминантного анализа Статистическую значимость мощности дискриминации между совокупностями отражала величина лямбды Уилкса: чем ниже ее значение, тем сильнее дискриминация [Дж.-О. Ким и др., 1989].

Принцип метода визуализации многомерных данных. В проведенном исследовании состояние иммунной системы, характеризуемое большим количеством показателей (п=55), у каждой пациентки, было рассмотрено как многомерное измерение. Для такого

Таблица 2 - Структура праймеров и ферменты рестрикции для анализа полиморфных вариантов генов цитокинов и белка-оикосупрессора ТР53

Ген Полиморфизм Структура праймеров Фермент рестрикции

IL-4 590СТ 5' -actaggcctcacctgatacg-З' 5'-gttgtaatgcagtcctcctg-3' BsmFI

IL-10 592СА 5'- atccaagacaacactactaa -3' 5*- taaatatcctcaaagttcc -3' Rsa I

TNFA 308AG 863АС 238AG 5'-agg-caa-tag-gtt-ttg-agg-gcc-at-3' 5'-aca-ctc-ccc-atc-ctc-ccg-gct-3' Bspl9I BstBAI Msp I

IL-lp -31СТ F: agaagcttccaccaatactc R: agcacctagttgtaaggaag Alul

+3954СТ F: ctcaggtgtcctcgaagaaatcaaa R: gcttttttgctgtgagtcccg TaqI

TGF(51 509СТ F: cagtaaatgtatggggtcgcag R: ggtgtcagtgggaggaggg Bsu36I Eco81I

CCR5 CCR5del32 5'-aaggtcttcattacacctg-3' 5'-agaattcctggaaggtgttc-3'

р53 G199C ctggtaaggacaagggttgg actgaccgtgcaagtcacag BstFNI

GAPDH F: aggctggggctcatttgcagg R: tagccaaattcgttgtcataccag

Примечание: F - прямой праймер, R - обратный праймер, С, А и G - аллель-специфические праймеры

представления был использован метод визуализации многомерных данных NovoSpark Corporation (Канада). Визуализация состояния биосистемы, как единого целого, предполагает отображение совокупности всех показателей, описывающих состояние системы, в одном «интегральном» образе [Кистенев Ю. В. и др., 2011].

Рассматриваемый метод визуализации многомерных объектов и процессов основан на изометричности двух пространств, где объекты одного пространства (пространства данных) считаются оригиналами, в то время как объекты другого играют роль изображений. Основой выявления сходства или различия в оригинальных данных является визуальная близость соответствующих этим данным образов, выражаемая в расстоянии Махалонобиса [Eidenzon D. et al. http://www. tsu.ru].

Одной из важных функций программы NovoSpark является выбор информативных показателей, который сводится к получению визуально различимых образов (форма кривой) и/или визуально непересекающихся образов, упорядоченных по величине расстояния оригиналов от выбранной точки отсчета, например, многомерного центра координат или многомерного среднего контрольного набора данных. С точки зрения визуализации идентификация закономерностей многомерных измерений тесно связана с выбором информативных показателей и приводит к результатам, достигаемым при использовании количественных методов [Eidenzon D.V., Volovodenko V.A., 2009].

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ II ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Дискуссия о роли иммунной системы в противоопухолевой защите организма длится уже более ста лет. В настоящее время существуют концепции, отрицающие какое-либо значение иммунологических механизмов в противоопухолевой защите организма [Антонов В.Г., Козлов В.К., 2004, Абелев Г.И., 2000]. Ряд авторов отводит иммунной системе определенную роль в контроле ограниченного ряда злокачественных новообразований, таких как опухоли лимфатической системы [Klein G., 2009]. Наиболее адекватной и аргументированной представляется концепция иммунологического редактирования опухолевого роста, рассматривающая роль иммунной системы как амбивалентную и зависящую от фазы взаимодействия «опухоль - иммунная система» [Гранов A.M. и др., 2008, Swann J.B., Smyth M.J., 2007, Nicolini A., Caipi А., 2009].

Обоснованием для концепции иммунологического редактирования опухолевого роста являются накопленные к настоящему времени многочисленные экспериментальные и клинические данные. Одни из источников указывают на существование иммунологических механизмов элиминации злокачественных клеток и сдерживание опухолевого роста при уже возникшем процессе [Бережная Н.М., Чехун В.М., 2005, Бережной А.Е. и др., 2008]. Другие авторы приводят факты содействия опухолевой прогрессии [Curiel T.I., 2007, Ben-Baruch А., 2003, Luboshits G. et al., 1999]. Несмотря на достигнутый концептуальный компромисс в теории иммунологического редактирования злокачественного роста, остается нерешенной главная проблема: признавая двойственное участие механизмов иммунной системы в возникновении и развитии опухолевого процесса, необходимо выяснить патогенетические особенности, отличающие стратегию иммунной системы, направленную на сдерживание злокачественного роста, от стратегии, содействующей опухолевой прогрессии. Важно понять, как эти отличия реализуются у конкретно го больного на различных этапах противоопухолевого лечения и динамического наблюдения.

Исследование системного уровня функционирования иммунной системы у больных РМЖ с разным клиническим течением заболевания. Накопленный к настоящему времени феноменологический материал о взаимосвязи отдельных иммунологических показателей с клинико-морфологическими параметрами опухолевого процесса, эффективностью лечения и прогнозом не дает однозначного ответа на поставленные выше вопросы. Одной из причин такой неоднозначности, на наш взгляд, является тот факт, что в подавляющем большинстве исследований не учитывается системный принцип организации и функционирования иммунной системы. Согласно системному подходу, существенными для живой системы являются свойства целого, которыми не обладает ни одна из его частей. Новые свойства системы возникают из взаимосвязей между частями. При системном подходе свойства отдельных элементов могут быть выведены только из организации целого [Капра Ф., 2002]. Таким образом, для адекватной интерпретации выявленных отличий на уровне отдельных показателей необходима их интеграция в контекст функционирования целой системы, а, в идеале, всего живого организма [Гольдберг Е. Д. и др., 1996].

Возможность и необходимость системного подхода в изучении иммунной системы высказывается в работах [Чередеев А.Н., Ковальчук Л.В., 1997, Гельфгат Е.Л. и др., 2002, 2003, Li Y.et al., 2008., Genser В., 2007]. В нашей работе для решения данной проблемы -исследования состояния иммунной системы как единого комплекса взаимосвязанных одновременно протекающих событий - был применен разработанный компанией NovoSpark (Канада) метод визуализации многомерных данных [Eidenzon D.V., Volovodenko V.A., 2009].

Состояние иммунной системы, охарактеризованное путем оценки 55 показателей, было принято за многомерное измерение и представлено в виде двумерной кривой. Основой выявления сходства или различия в оригинальных данных является близость

соответствующих этим данным образов, измеряемая расстоянием Махаланобиса, а также схожесть кривых по форме. Если два наблюдения характеризуются близкими по значениям наборами иммунологических показателей, то отражающие эти состояния кривые по форме похожи друг на друга и располагаются в близких областях условного пространства многомерных признаков. Если наблюдения отличаются, то и кривые будут различны [Кистенев Ю.А. и др., 2011].

Для оценки взаимосвязи состояния иммунной системы, как интегрированного целого, с характером течения РМЖ, из 198 пациенток в зависимости от наступившего исхода были сформированы следующие подгруппы: больные РМЖ, пережившие 3 года и более от момента установления диагноза без признаков прогрессирования заболевания (п=31), пациентки с развившимися в эти сроки гематогенными метастазами (п=35), с местными рецидивами (п=5) и одновременным метастазированием и рецидивированием (п=4). Выделенные подгруппы были равноценны по частоте встречаемости основных кпинико-морфологических факторов прогноза, объему и схемам проведенного противоопухолевого лечения, т.е. тех параметров, которые патогенетически значимы для опухолевой прогрессии и вносят существенный вклад в исход заболевания (критерии сравнения Фишера и х2)- Равноценное присутствие, обеспечивающее, следовательно, и одинаковое влияние данных факторов в группах пациенток с различным исходом, предоставило нам возможность оценить взаимосвязь течения РМЖ именно с особенностями состояния иммунной системы.

Оценка состояния иммунной системы как целостной системы выявила статистически значимые различия у больных РМЖ без прогрессирования заболевания в течение 3-х лет с момента установления диагноза по сравнению с пациентками, у которых в эти сроки отмечено развитие гематогенных метастазов (рисунок 1). Указанные различия представлены расположением визуальных образов состояния иммунной системы, характерных для данных групп, в непересекающихся областях условного пространства многомерных признаков. Оказалось, что различия в состоянии иммунной системы в группах с разным течением РМЖ наблюдались также на этапах его проведения и последующего динамического наблюдения (рисунок 1).

Следует отметить, что у больных с развившимися местными рецидивами и одновременным рецидивированием и метастазированием в отдаленные органы, несмотря на малую численность выборки, состояние иммунной системы также имело отличия, нашедшие выражение в различной форме кривых визуализации.

Таким образом, выявленные различия в расположении визуальных образов, отражающих системный уровень функционирования иммунной системы у больных РМЖ с признаками прогрессирования заболевания и без таковых, свидетельствует о важном вкладе иммунной системы в определение исхода РМЖ и о вовлечении иммунологических механизмов в патогенез данного заболевания.

Механизмы, лежащие в основе про- и противоопухолевой стратегии иммунной системы у больных РМЖ. Применение метода визуализации, помимо констатации качественных различий в состоянии иммунной системы у больных РМЖ ассоциированных с характером клинического течения заболевания, позволило выявить параметры и связанные с ними механизмы, определяющие отмеченную дискриминацию стратегии иммунной системы (таблица 3). Этот комплекс показателей послужил основой для построения классификационных дискриминантных уравнений, описывающих состояние иммунной системы у больных РМЖ на каждом из этапов противоопухолевого лечения в двух вариантах: как ассоциированного с длительной клинической ремиссией или как сопряженного с прогрессированием - гематогенным метастазированием - в течение 3-х лет с момента установления диагноза. Лямбда Уилкса для дискриминантных функций, описывающих состояние иммунной системы у больных РМЖ до начала лечения, составила 0,059, после 2 курсов НАХТ - 0,014, после 3-4 курсов НАХТ - 0,029, после операции - 0,043, через 1 год после завершения лечения - 0,131.

Рисунок 1 - Области расположения визуальных образов, соответствующих состоянию иммунной системы, как интегрированного целого, у больных РМЖ без прогрессирования заболевания более 3-х лет (темно-серый цвет) и у пациенток с развившимся гематогенным метастазированием (светло-серый цвет); А - до начала противоопухолевого лечения, Б - 2 курса НЛХТ, В - 3-4 курса НАХТ, Г - после операции, Д - через 1 год после специфического лечения

Таблица 3 - Параметры, определяющие статистически значимые различия в состоянии иммунной системы у больных РМЖ без прогрессирования и с развившимися гематогенными метастазами в течение 3-х лет

До начала лечения После 2 курсов НАХТ После 3-4 курсов НАХТ После операции 1 год после лечения

CD4/ CD8 CD4/ CD8 CD4/CD8 активность нейтрофилов, % С04/ СБ8

Ig М, г/л активность нейтрофилов, % Ig А, г/л А, г/л активность нейтрофилов, %

С08+клетки,% Ig М, г/л С08+клетки,% активность нейтрофилов, у.е. активность нейтрофилов, у.е.

Ig А, г/л активность нейтрофилов, у.е. активность нейтрофилов, V.e. С04/С08 С08+клетки,%

Ig G, г/л Ig А, г/л СШ5+клетки,% М, г/л М, г/л

С04+клетки,% С04+клетки,% С056+клетки,% СОЗ+клетки,% С04+клетки,%

С022+клетки,% С056+клетки,% С022+клетки,% 1й в, г/л СШ5+клетки,%

резерв нейтрофилов, % резерв нейтрофилов, % С04+клетки,% резерв нейтрофилов, % 1$ А, г/л

С056+клетки,% CD3+tuiemi,% апоптоз, % С04+клетки,% СОЗ+клетки,%

С095+клетки,% Ig G, г/л С095*клетки,% С022+клетки,% С095+клетки,%

ЦИК С022+клетки,% ЦИК С08+клетки,% 1й б, г/л

резерв нейтрофилов, у.е. С095+клетки,% резерв нейтрофилов, У.е. резерв нейтрофилов, %

активность нейтрофилов, % ИСФГА С022+клетки,%

ILl-PipS, пг/мл резерв нейтрофилов, у.е. ЦИК

ILl-p, пг/мл С025+клетки,% резерв нейтрофилов, у.е.

активность нейтрофилов, у.е. апоптоз, % С056+клетки,%

TNF-a, пг/мл С08+клетки,% РБТЛ с ФГА

Комплемент,у.е

ЦИК

РБТЛ

РБТЛ с ФГА

Примечание - Параметры иммунной системы представлены в убывающем порядке, соответствующем величине связанных с ними коэффициентов дискриминантных уравнений

По величине коэффициента, стоящего перед переменной в дискриминантных уравнениях, возможно судить, насколько значим данный иммунологический показатель и связанный с ним механизм для различения состояния иммунной системы, как интегрированного целого, на определенном этапе исследования [Боровиков В.П., 1998]. Так, до начала противоопухолевого лечения статистическую значимость различий определяло вовлечение практически всех звеньев адаптивного и врожденного иммунитета (таблица 3). Наиболее важное значение имело состояние Т-клеточного звена, с которым связывают реализацию противоопухолевой активности [Hornychova Н. et al., 2008, Schirrmacher V. et al., 2002]. Об этом свидетельствовал максимальный коэффициент, стоящий перед показателем иммунорегуляторного индекса CD4/CD8.

После проведения 2 курсов НАХТ состояние Т-клеточного иммунитета сохраняло ведущее значение для дискриминации про- и противоопухолевой стратегии иммунной системы. Об этом говорили высокие значения коэффициентов перед показателями иммунорегуляторного индекса CD4/CD8 и процентным количеством С04+клеток (таблица 3). Однако возрос вклад функциональной активности нейтрофилов, а также гуморального иммунитета (IgA, IgM). Поскольку известно, что форменные элементы системы кроветворения оказываются мишенями цитостагического лечения, то закономерно, что после 2 курсов НАХТ значение для дискриминации в стратегическом направлении функционирования иммунной системы у больных РМЖ приобрела пролиферативная активность лимфоцитов периферической крови, связанная, вероятно, с механизмом компенсации клеточных потерь (таблица 3). Очевидно, что наличие пролиферативного ресурса у клеток периферической крови может создать преимущество при апоптоз-индуцирующих воздействиях со стороны опухоли и противоопухолевого лечения, обеспечивать более полноценный режим функционирования иммунной системы, который, в свою очередь, способствует увеличению длительности периода без прогрессирования РМЖ.

После завершения НАХТ (3-4 курса) важной чертой, отличающей состояние иммунной системы у больных с различным клиническим течением РМЖ, выступает появление такого показателя, как количество клеток периферической крови с морфологическими признаками апоптоза (таблица 3). Если на этапе 2 курсов НАХТ одним из критических механизмов, определяющих стратегию иммунной системы, был пролиферагивный потенциал лимфоцитов, то при продолжении цитостатического лечения (более 2 курсов) значение приобрела непосредственно клеточная гибель.

Данные дискриминатного анализа, касающиеся особенностей состояния иммунной системы у больных РМЖ при проведении НАХТ, нашли подтверждение в экспериментах in vitro по изучению чувствительности мононуклеарных клеток крови у больных РМЖ к апоптоз-индуцирующим воздействиям различной природы. В качестве индукторов апоптоза использовали моноклональные антитела к CD95 (Fas-зависимый апоптоз), CD3 (активационный апоптоз), цитостатик вепезид (апоптоз, связанный с клеточным стрессом). Уровень апоптоза в 24-часовой культуре клеток зависел от этапа противоопухолевого лечения. Для больных, состояние которых характеризовалось длительной клинической ремиссией, максимальные значения клеточной гибели отмечены на этапе НАХТ, для пациенток с развившимся впоследствии прогрессированием РМЖ -после завершения лечения. Однако наиболее выраженным отличием группы больных без прогрессирования заболевания являлось высокое количество клеток после инкубации in vitro в течение 24 часов. Данный показатель в большинстве случаев находился на уровне пассажа (1х106 клеток/мл) и выше, в то время как у пациенток с неблагоприятным исходом количество клеток в культуре после инкубации снижалось. Отмеченный факт, на наш взгляд, связан с достаточной пролиферативной активностью лимфоцитов и моноцитов, восполнявшей количественные потери в результате клеточной гибели.

После оперативного удаления первичного опухолевого узла в формирование генеральной стратегии, реализуемой иммунной системой, максимальный вклад вносили

показатели спонтанной активности нейтрофилов и уровень иммуноглобулина А в сыворотке крови больных (таблица 3). У пациенток, чье состояние иммунной системы было классифицировано как неблагоприятное, выраженное значение дня дискриминации имели показатели иммунорегуляторного индекса.

После завершения противоопухолевого лечения (через 1 год) генеральная стратегия иммунной системы вновь была связана с показателями основных звеньев: Т-клеточного ответа (CD4\ CD8+, CD4/CD8), гуморального ответа (IgM), спонтанной активности нейтрофилов (таблица 3). Одним из важных параметров, вносящих вклад в дискриминацию про- и противоопухолевой стратегии иммунной системы на этапе динамического наблюдения, является количество С025+клеток периферической крови (таблица 3). С одной стороны, этот показатель отражает уровень активации иммунной системы и может указывать на продолжающийся, но клинически не манифестируемый опухолевый рост или метастазирование. С другой стороны, увеличение С025+клеток может свидетельствовать о циркуляции Т-регуляторных клеток - эффекторов одного из наиболее значимых механизмов иммуносупрессии, способствующих опухолевой прогрессии [Кадагидзе З.Г. и др., 2006, Ярилин А.А., Донецкова А.Д., 2006, Свиридова B.C. и др., 2010, Gobert М. et al., 2009].

Таким образом, несмотря на то, что в реализацию противоопухолевой или опухолестимулирующей стратегии иммунной системы вовлечены фактически все ее звенья, в зависимости от этапа лечения комплекс данных параметров и ведущие механизмы реализации функциональной направленности претерпевали изменения.

Одним го ведущих принципов организации системы, в том числе и иммунной, является взаимосвязь отдельных морфологических и функциональных элементов, создающая обладающее новыми свойствами целое [Капра Ф., 2002]. Методом исследования внутренних взаимосвязей, организующих систему, был выбран факторный анализ [Боровиков В.П., 1998]. Основная цель факторного анализа заключается в том, чтобы обнаружить скрытые общие факторы, объясняющие связи между наблюдаемыми признаками (параметрами) объекта. Выделяемые факторы являются гипотетическими, однако их смысл связан с определенным вектором функционирования иммунной системы.

До начала противоопухолевого лечения наиболее значимые векторы в структуре морфофункциональной организации иммунной системы у больных РМЖ отражали состояние Т-клеточного звена, его функциональную активность, уровень активации, механизмы обеспечения количественного гомеостаза (таблица 4). Функциональная активность нейтрофилов также была представлена в структуре иммунных процессов у пациенток с РМЖ на этапе установления диагноза.

Для пациенток из группы длительной клинической ремиссии после 2 курсов НАХТ функциональная активность нейтрофилов была тесно связана с показателями гуморального иммунитета (ЦИК, IgM, IgA) и механизмами индукции апоптота (число клеток, несущих на своей мембране Fas-лигэнд). Вероятно, наличие подобной функциональной взаимосвязи обусловлено вовлечением циготоксических механизмов иммунной системы в деструкцию злокачественных клеток после цитостатического воздействия химиотерапевтических агентов [Zitvogel L. et al., 2008] и последующей необходимостью их утилизации (фагоцитозом, опсонизацией, агглютинацией, преципитацией). У больных с прогрессированием РМЖ такого вектора отмечено не было. Специфические особенности структуры иммунологических параметров у пациенток этой группы проявились в присутствии особой функциональной единицы, связывающей показатели содержания иммуноглобулинов классов G, М, А, что является подтверждением литературных сведений о содействии гуморального ответа опухолевой прогрессии [Бережной А.Е. и др., 2008, Tan Т. Т., Coussens L. М., 2007]. Подобная структура организации внутренних процессов функционирования иммунной системы у больных РМЖ с различным характером клинического течения сохранялась и при продолжении НАХТ - 3-4 курса (таблица 4).

Таблица 4 - Структура морфофуикциональной организации иммунной системы у больных РМЖ на этапах противоопухолевого лечения

Этап лечения Вектор I Вектор II Вектор III

без прогрессирования метастазы без прогрессирования метастазы без прогрессирования метастазы

до лечения Сй 95+ СР8+ СБ4+ СИ4+ СВ22+ СБ8+ С025+ Сй56+ Уровень пролиферации лимфоцитов СР56+ Сй22+ Резерв нейтрофилов Уровень пролиферации лимфоцитов ЦИК Резерв нейтрофилов ИСФГА С095+ СЭ56+

НАХТ Спонтанная активность нейтрофилов ЦИК 1ёМ Спонтанная активность нейтрофилов СЭ4* С04/С08 С04/С08 СБ4+ ^А Спонтанная активность нейтрофилов 1§А

операция Уровень пролиферации лимфоцитов НЬА-ОЯ+ НЬА-ОН+ Уровень пролиферации лимфоцитов Резерв нейтрофилов Раз-Ь+ ЦИК РаБ-Ь* Уровень пролиферации лимфоцитов сФГА Уровень пролиферации лимфоцитов сЛПС Резерв нейтрофилов

1 год после лечения Спонтанная активность нейтрофилов Резерв нейтрофилов Спонтанная активность нейтрофилов 1ёА 1ёМ Апоптоз Резерв нейтрофилов СМ/С08 Апоптоз Резерв нейтрофилов ^С!

На этапе хирургического лечения у больных РМЖ с благоприятным клиническим течением наиболее значимое место в структуре внутренних взаимосвязей занимали механизмы, ассоциированные с пролиферативной активностью лимфоцитов периферической крови (таблица 4). Отдельный фактор у больных РМЖ характеризовал клеточную цитотоксичность: количество клеток крови, несущих Fas-лиганд на поверхности и способных индуцировать апоггтоз иммунокомпетенгных клеток, и функциональный резерв нейтрофилов, также обладающих выраженным цитотоксическим потенциалом [Di Carlo Е., 2001]. У пациенток с неблагоприятным течением РМЖ отмечена отрицательная взаимосвязь количества Fas-L+ мононуклеарных клеток периферической крови с их пролиферативной активностью, которая может отражать проявление иммуносупрессии, индуцированной операционным стрессом, что в последующем находит реализацию в прогрессировании заболевания [Baltrush H.J. et al., 1991, Pant S., Ramaswamy В., 2009].

Для пациенток с благоприятным течением заболевания через 1 год после завершения противоопухолевого лечения была характерна обособленность различных звеньев системы иммунитета в отдельные функциональные векторы (нейтрофилы в I вектор, гуморальный ответ во И, апоптоз в III). Для больных РМЖ с последующим прогрессированием было отмечено объединение в один фактор параметров, характеризующих различные морфофункциональные звенья (таблица 4).

Обобщая результаты факторного анализа, следует заключить, что при исследовании механизмов, организующих функционирование иммунной системы у больных РМЖ, как до начала лечения, так и при его проведении и спустя год после завершения, ведущее место занимает активность Т-клеточного звена. Проведение НАХТ ассоциировано с увеличением влияния процессов пролиферации, апоптоза и утилизации циркулирующих антигенов в структуре внутрисистемной организации. Основным отличием организации функционирования иммунной системы у больных РМЖ характеризующихся благоприятным течением заболевания, является выраженный вектор цитотоксических эффекторных реакций. Неблагоприятное течение РМЖ связано с активностью гуморального звена при проведении противоопухолевого лечения.

Таким образом, мы показали, что состояние иммунной системы у больных РМЖ характеризуется вариативностью, которая связана с различным характером клинического течения заболевания, определяющим сроки наступления прогрессирования. Отмеченные различия наблюдаются на системном уровне функционирования иммунной системы, реализуются через определенные взаимосвязи морфофункциональных звеньев системы, могут быть связаны с конкретными молекулярно-клеточными механизмами, создающими преимущество или дефицит жизнеобеспечения организма больной в условиях злокачественного роста и противоопухолевого лечения. Очевиден вопрос: в результате чего формируется та или иная стратегия иммунной системы, ассоциированная с клиническим течением заболевания и его исходом?

Механизмы, формирующие стратегическую направленность функционирования иммунной системы у больных РМЖ при проведении противоопухолевого лечения. Для решения поставленного вопроса нами было предпринято исследование влияния значительного числа факторов, отражающих индивидуальные особенности организма, клинико-морфологические и молекулярные характеристики опухолевого процесса, объем и схему проведенного противоопухолевого лечения (таблица 5) на дисперсию иммунологических показателей, важных для дискриминации состояния иммунной системы. По сути, необходимо выявить, какие факторы значимо определяют изменения иммунологических показателей в группах с различным исходом.

Нами было отмечено, что вариабельность состояния иммунной системы у больных РМЖ обеспечивается влиянием как организма, так и опухоли. До начала лечения и через 1 год после его завершения доминирует влияние особенностей организма (доля иммунологических показателей, зависевших от параметров организма 71 % и 65%

Таблица 5 - Факторы, включенные в исследование дисперсии показателей иммунной системы у больных РМЖ

Факторы, отражающие Факторы, отражающие Факторы, отражающие

опухолевый процесс особенности организма параметры лечения

- стадия - возраст - проведение НАХТ

- размер первичного узла - менструальный статус - эффективность НАХТ

- распространенность - адаптационный статус - схема НАХТ

процесса до лечения - количество курсов НАХТ

- клиническая форма - адаптационный статус на - предоперационная ЛТ

- гистологический тип этапе лечения - вид операции

- фоновая патология - сторона поражения - проведение ИОЛТ

- степень злокачественности - локализация - проведение АЛТ

- чувствительность к - наличие ИПС - проведение AXT

цитостагикам - аутоиммунный ИПС - схема AXT

- рецепторы прогестерона - аллергический ИПС - количество курсов AXT

- рецепторы эстрогенов - инфекционный - проведение ГТ

- НЕК2/пеи комбинированный ИПС

- Ш67+клетки опухоли -инфекционно-

- ТР53+клетки опухоли - гуморальный ИПС

- инфекционно-клеточный

ИПС

- онкологическая

наследственная

отягощенность

- наследственная

отягощенность РМЖ

- полиморфизм генов:

р53

ССЯ5(1е132

1ЫР(-31)С/Т

ПЛР(+3954)С/Т

ТЫРа 308С/А

Т№а 238С/А

ТОТа 8630/А

1Ь-10592 С/А

11^4 590 С/Т

ТСрр 509 С/Т

Тврр 29 С/Т

соответственно), в процессе лечения - характеристики опухолевого процесса (55 % после завершения НАХТ). Влияние проведенного лечения на состояние иммунной системы у пациенток сохраняется после его завершения (65 % показателей иммунной системы).

Исследование комплекса иммунологических параметров-откликов при воздействии факторов дисперсии показало их структурную схожесть с векторами внутренней организации функционирования иммунной системы, выявленную при помощи факторного анализа. Формирование той или иной взаимосвязи различных звеньев и эффекторов иммунной системы в единый функциональный механизм может быть обусловлено конкретными особенностями организма, опухолевого процесса или проведенного лечения, составляющими фактическую природу гипотетических векторов внутренней организации иммунной системы (таблица б).

Таблица б - Соответствие факторов, влияющих на вариабельность состояния иммунной системы, с векторами ее морфофункциональной организации_

Этап наблюдения Факторы вариабельности состояния (дисперсионный анализ) Векторы внутрисистемной организации (факторный анализ)

до лечения сторона поражения: CD4+, CD8* клетки, активность нейтрофилов, продукция IL-lß I вектор: функциональная активность МНПК CD4+, CD8+, CD25+, CD56+, CD95+, CD22+, HLA-DR* клетки

2 курса НАХТ биологические свойства опухоли (рецепторный статус, Ki67, ТР53, степень злокачественности): IgG, IgA, IgM III вектор: гуморальный ответ IgG, IgA, IgM

3-4 курса НАХТ НАХТ (эффективность, лекарственный патоморфоз опухоли): IgG, IgA, ЦИК III вектор: гуморальный ответ IgG, IgA, ЦИК

клинические параметры опухолевого процесса (стадия, размер первичного узла, клиническая форма):С04/СЦ8, ЦИК III вектор: CD4/CD8 + ЦИК

операция НАХТ (эффективность, лекарственный патоморфоз опухоли): функциональный резерв нейтрофилов, ЦИК II вектор: функциональный резерв нейтрофилов + FAS-L+

1 год после лечения наличие ИПС: активность нейтрофилов, ЦИК I вектор: активность нейтрофилов + ЦИК

генетический полиморфизм (IL-lß(-31)CT, CCR5del32): функциональный резерв нейтрофилов, CD4/CD8 II вектор: функциональный резерв нейтрофилов, CD4/CD8, апоптоз

предоперационная JIT: функциональный резерв нейтрофилов, IgA III вектор: функциональный резерв нейтрофилов + IgA

цитостатическое лечение (AXT, ЛТ): активность нейтрофилов I вектор: активность нейтрофилов

биологические свойства опухоли (рецепторный статус, Ki67, ТР53, степень злокачественности): IgA, IeG II вектор: гуморальный ответ IgA, IgG, IgM, ЦИК

Примечание - жирным шрифтом выделены иммунологические показатели у больных РМЖ, общие для структуры факторов дисперсионного анализа и векторов внутрисистемной организации

Сторона поражения опухолью являлась наиболее часто встречаемым фактором при исследовании дисперсии иммунологических показателей до начала противоопухолевого лечения. Совокупность иммунологических показателей, для которых отмечена дисперсия значений в сочетании с параметром «сторона поражения», в определенной мере (С08+клетки, С04+клетки) совпадает со структурой I вектора, связанного с функциональной активностью иммунной системы (таблицы 4, 6). Можно предположить, что уровень функциональности иммунной системы связан со стороной расположения опухоли и подчеркивает важность регуляторной асимметрии организма [Абрамов В.В., 1998].

Проведение 2 курсов НАХТ вызвало значительное увеличение как числа факторов, вызывающих дисперсию, так и количества самих иммунологических показателей, демонстрировавших вариативность своих значений. Наибольшим влиянием обладали параметры, отражавшие биологические свойства злокачественных клеток, такие как экспрессия рецепторов половых гормонов, факторов роста HER2/neu, пролиферативный потенциал (экспрессия Ki67), экспрессия мутантного белка р53, степень злокачественности опухоли. Комплекс иммунологических показателей, значения которых варьировали под влиянием биологических свойств опухоли, близок к вектору, ассоциированному с гуморальным ответом у больных с неблагоприятным течением РМЖ (таблицы 4, 6). Следовательно, вектор действия гуморального ответа определяется биологическими свойствами злокачественных клеток.

На этапе завершения НАХТ выделялись три группы факторов, значимо влияющие на вариативность состояния системы иммунитета. Наиболее выраженное воздействие оказывали факторы нормальной генетической изменчивости: полиморфизм генов цитокинов IL-lß (-31)СТ, TGF-ß 509СТ, TNF-a 863СА и факт наличия среди кровных родственников больных со злокачественными новообразованиями. Вторая группа связана с эффективностью НАХТ, оцененной как клинически, по уменьшению размера опухолевого узла, так и морфологически - по степени лекарственного патоморфоза опухолевых клеток. Третья группа параметров, влияющая на вариабельность иммунного статуса, отражала клинические характеристики опухолевого процесса - стадию, размер первичного узла, клиническую форму заболевания. Состав показателей, ассоциированный со второй и третьей группой параметров, имеет сходство с III вектором, организующим функционирование иммунной системы у больных с неблагоприятным и благоприятным течением РМЖ соответственно после 3-4 курсов НАХТ (таблица б).

Параметры эффективности НАХТ оказывали преобладающее влияние на вариабельность состояния иммунной системы у больных РМЖ после оперативного удаления злокачественного узла. Показатели, подвергавшиеся дисперсии при воздействии НАХТ (активность нейтрофилов в НСТ-тесте), соотносимы со II вектором морфофункциональной организации иммунной системы у больных с благоприятным течением РМЖ, отмеченным на послеоперационном этапе. Данный вектор был связан нами с механизмами цитотоксичности, к проявлению которой наряду с молекулой Fas-L+ способны нейтрофилы (таблицы 4,6).

Через 1 год после завершения противоопухолевого лечения наследственные особенности организма оказались ведущим комплексом параметров, влияющих на разнообразие статуса иммунной системы. Определяемая ими функциональная взаимосвязь эффекторов иммунной системы имеет сходство с такими векторами, как «активность нейтрофилов» и «апоптоз» (таблицы 4, б). Кроме этого, функциональная активность нейтрофилов связана с влиянием цитостатического лечения (НАХТ, лучевая терапия) и наличием ИПС. Биологические свойства опухолевых клеток определяли гуморальный ответ больных РМЖ (таблица б).

Выявление причины формирования патогенетически неблагоприятного вектора реагирования иммунной системы, с одной стороны, позволит формировать группы повышенного риска раннего прогрессирования. С другой стороны, при возможной коррекции неблагоприятного варианта действующего фактора предоставляется возможность манипулировать иммунной системой и влиять на клиническое течение заболевания.

Влияние генетических факторов на состояние иммунной системы у больных РМЖ в динамике противоопухолевого лечения. В последнее время большое внимание в качестве перспективных критериев для формирования групп повышенного онкологического риска, прогнозирования клинического течения и эффективности лечения злокачественных новообразований привлекают генетические маркеры [Имянитов E.H., 2009]. Генетические нарушения играют важную роль в этиологии и патогенезе РМЖ.

Известны наследственные формы РМЖ, связанные с мутациями высокопенетрантных генов BRCA [Харченко В.П. и др., 2007, Ford D. et al„ 1998]. Особое место в картине нарушений при РМЖ занимают повреждения гена белка-онкосупрессора р53, который играет ключевую роль в ответе клетки на различные повреждения [Vogelstein В. et al., 2000]. Одним из возможных механизмов реализации генетической предрасположенности к злокачественным новообразованиям могут служить морфологические и функциональные особенности иммунной системы. При этом регуляторы иммунных процессов - цитокины - занимают важное место в модуляции состояния иммунной системы. В свою очередь, биологический эффект конкретного цитокина определяется уровнем его продукции и взаимодействия с рецептором-мишенью. Концентрация регуляторного белка зависит от аллельных вариантов гена, которые определяют высокую или низкую экспрессию.

С целью исследования патогенетически значимых генов в прогрессии РМЖ нами был предпринят анализ 3-летней безрецидивной выживаемости у 382 больных РМЖ (Ti^NmMo) в зависимости от аллельных вариантов генов цитокинов, а также гена р53. Исследованы следующие полиморфизмы IL-1P(-31)C/T, 11Л(+3954)С/Т, JL-4 590 С/Т, IL-10 592СА, TGF-P 509 С/Т, TGF-(5 29 Т/С, TNF 308 G/A, TNF 308 G/A, TNF863CA, CCR5del32, p53Arg72Pro. Полиморфизм 2 генов цитокинов IL-10 и TGF-P оказывал влияние на длительность безрецидивной выживаемости пациенток с РМЖ на уровне тенденции (р=0,09 и р=0,08 соответственно). Лучшие показатели безрецидивной выживаемости отмечены у носительниц гомозиготных вариантов TGF 509 СС (низкая экспрессия и менее выраженная иммуносупрессия) и IL-10592 АА (высокая экспрессия). Генотип TGF 509 СС характеризуется низкой экспрессией цитокина, обладающего выраженным иммуносупрессивным эффектом [Nakamura К. et al., 2001]. Возможно, увеличение периода безрецидивной выживаемости связано с меньшим угнетением противоопухолевых механизмов иммунной системы. Кроме того, известна ключевая роль TGF-P в реализации эпителиально-мезенхимального перехода, который обеспечивает диссеминацию опухоли fThiery J.P 1999, Petersen O.W. et al., 2001, Huber M.A. et al., 2004]. Есть сведения о связи ир-регуляторных аллелей TGF-P с неблагоприятным исходом РМЖ [Gorelik L. et а1.,2002]. Влияние IL-10 на опухолевую прогрессию неоднозначно. С одной стороны, он также обладает иммуносупрессивным действием, но, с другой стороны, способен сдерживать неоангиогенез, как один из факторов прогрессии [Brower V., 2005].

Далее мы провели исследование взаимосвязи полиморфизма генов цитокинов и белка-онкосупрессора р53 с изменениями в состоянии иммунной системы. Из исследованных факторов, связанных с генетическими особенностями организма, наибольшим влиянием на вариабельность показателей иммунной системы у больных РМЖ оказывал полиморфизм гена IL-4 590 СТ. Его влияние отмечено на всех этапах лечения, а также динамического наблюдения. Полиморфизм гена IL-10 вызывал дисперсию таких показателей, как количество щгготоксических Т-клеток (CD8*) и уровень пролиферации лимфоцитов периферической крови при стимуляции ФГА после завершения противоопухолевых мероприятий. Носительство высокоактивных полиморфных вариантов гена TNF-a -308А, -238AG и -863АС при проведении НАХТ было ассоциировано с низкими значениями уровня клеточных субпопуляций - CD3+, CD4* и CD25+ клеток соответственно. Можно предположить, что сниженные значения количества клеток на фоне химиотерапии являются следствием их предшествующей активации под воздействием TNF-a, в результате чего они стали мишенями цитостатичеекого воздействия. С-аллель IL-ip(-31)CT, для которого мы отметили более высокую продукцию IL-1P, связан с повышенным уровнем активности иммунной системы у пациенток с РМЖ. Поскольку TGF-p обладает выраженным иммуносупрессивным действием, то закономерно, что у носительниц генотипа TGF-pi 509 ТТ, ассоциированного с высоким уровнем цитокина в сыворотке крови, были снижены количественные показатели субпопуляций лимфоцитов и функциональная

активность нейтрофилов после завершения лечения. Влияние делеции в 32 позиции гена CCR5 у больных РМЖ выражалось в более низком количестве С1Э4+клеток, но высоком уровне функционального резерва нейтрофилов через 1 год после лечения.

Ключевое значение гена р53 в регуляции апоптоза и ответа на генотоксический стресс как механизма поддержания генетической стабильности, распространяется и на иммунную систему. В проведенном нами исследовании полиморфизм 4 экзона гена р53 оказывал влияние на дисперсию показателей иммунной системы только на фоне цитосташческого лечения (2 курса НАХТ). У больных РМЖ с генотипом Pro/Pro отмечены значительно более низкий уровень пролиферации лимфоцитов при стимуляции ФГА и высокая спонтанная активность нейтрофилов.

Полученные результаты позволяют говорить, что в ряде случаев иммунологические механизмы в качестве посредников включены в патогенетическую связь между наследственной предрасположенностью к злокачественным новообразованиям и их клинической манифестацией. Однако изменения иммунологических показателей, связанные с полиморфизмами того или иного гена, не всегда напрямую определяются биологическими эффектами кодируемого им цитокина. Более того, проведенное нами исследование взаимосвязи полиморфных вариантов генов и уровня продукции цитокинов у больных РМЖ на этапах противоопухолевого лечения выявило, что лишь продукция TNF-a зависела от полиморфизмов гена, кодирующего этот цигокин: TNF-a308 GA и TNF-a238 GA (р=0,08 и р=0,03 соответственно). Для полиморфизмов прочих генов у больных РМЖ не выявлено статистически значимого влияния на продукцию «собственных» цитокинов.

В проведенном исследовании уровень продукции цитокинов у больных РМЖ находился под влиянием не только своего гена, но комплекса генов цитокинов близкой или противоположной функциональной направленности, что является отражением существования цитокиновой сети [Симбирцев A.C., 2003, Козлов В.А., 2003]. До начала противоопухолевого лечения с генетическими факторами была связана дисперсия лишь противовоспалительного цитокина IL-10 (рисунок 2). При проведении противоопухолевого лечения число цитокинов, вариабельность продукции которых определялась генетическими особенностями организма, возрастало. На фоне НАХТ генотип определял дисперсию факторов роста лимфоцитов, что может являться критическим механизмом для иммунотоксических эффектов цитостатического лечения.

После операции отмечена генетическая детерминированность уровня продукции провоспалительных цитокинов. После завершения специфического лечения уровень продукции практически всех исследованных цитокинов зависел от генетических особенностей организма (рисунок 2).

Комплекс генов, влияющих на экспрессию цитокинов, также претерпевал изменения в зависимости от этапа лечения. До начала лечения преобладает влияние генов провоспалительных цитокинов. На этапе НАХТ включаются гены хемокинов (CCR5), ген-онкосупрессор р53. Возрастает влияние гена TGF-ß. После завершения лечения наибольшее значение для модуляции продукции цитокинов из всех исследованных генетических факторов имел ген противовоспалительного цитокина 11^10 (рисунок 2).

Таким образом, полиморфизм генов цитокинов влияет не только на продукцию своего цитокина, но и на индукцию других, функционально с ним связанных цитокинов, что обеспечивает многосторонний и многоэтапный уровень контроля подчиненных механизмов, в том числе, состояния иммунной системы в условиях злокачественного роста.

Помимо генетических факторов наблюдалась выраженная взаимосвязь вариабельности иммунологических показателей с адаптационным статусом у больных РМЖ на этапах противоопухолевого лечения.

До лечении

--^^ и-щ-зуст

С 1И0 Л

V 4 И-1в(+3954)СТ

Операция ТЫГа863СА

Рисунок 2 - Генетическая регуляция продукции цитокинов клетками периферической крови у больных РМЖ на этапах противоопухолевого лечения Примечания

1 Сплошная линия -влияние полиморфизма гена с р<0,05,

2 Пунктирная линия - влияние полиморфизма гена с р<0,1.

Механизмы действия препарата рекомбинантного 1Ь-1р беталейкина при применении у больных РМЖ. В проведенном нами исследовании было показано, что адаптационный статус пациентки до начала противоопухолевого лечения является параметром, статистически значимо влияющим на безрецидивнную и безметастатическую выживаемость у больных РМЖ (р=0,001). На протяжении нескольких десятилетий направленная модуляция адаптационной реакции организма рассматривалась как один из перспективных методов неспецифической терапии и реабилитации онкологических больных [Гаркави Л.Х. и др., 1998, Лазарев Н.В., 1962, Пашинский В.Г., Яременко К.В., 1983]. В основе процесса адаптации организма к меняющимся условиям внешней и внутренней среды лежит функционирование трех основных регуляторных систем организма - нервной, эндокринной и иммунной [Абрамов В.В., 1998, Корнева Е.А., 2003]. Поскольку показано наличие рецепторов на клетках одной системы к медиаторам других систем [ЬаШгег И., \Vollman Е., 1998, Ьасо$(а 5. « а1., 2000], то в настоящее время не вызывает сомнений возможность их взаиморегуляции. Вышесказанное свидетельствует о том, что механизмы иммунной системы являются важным посредником осуществления того или иного типа адаптации организма к разнообразным воздействиям, включая патологические состояния.

Нами было проведено исследование применения рекомбинантного 1Ь-1Р беталейкина (НИИ особо чистых биопрепаратов, г. Санкт-Петербург) с целью увеличения резервов системы естественной резистентности организма (приобретения состояния неспецифически повышенной сопротивляемости) у больных РМЖ при проведении противоопухолевого лечения. Выявлено, что беталейкин обладает свойствами адаптогеш, которые выражались в улучшении типа адаптационной реакции при проведении НАХТ у пациенток, получавших препарат, по сравнению с группой без биотерапии.

Отмеченные свойства беталейкина резонно связать с наличием у 1Ь-1(! центральных эффектов на ось гипоталамус-гипофиз-надпочечники и влиянием на состояние вегетативной нервной системы [Ковальчук Л.В. и др., 2001]. С другой стороны, беталейкин обладает выраженным иммуномодулируюпшм влиянием [Гершанович М.Л. и др., 1996, 1998]. Учитывая, что иммунная система является одной из трех регуляторных систем, то воздействие на нее может привести к модуляции функционального потенциала других регуляторных систем и изменить характер адаптации. Таким образом, именно модуляция состояния иммунной системы может быть одним из основных механизмов действия беталейкина как адаптогена. Подтверждение этому было получено в нашем исследовании. Использование в предоперационном периоде беталейкина практически не оказало влияния на иммунологические показатели у пациенток с более благоприятным клиническим течением (распространенность опухолевого процесса менее 4-х регионарных лимфатических узлов N0-1), которые исходно были близки к показателям нормы. Для этой группы не отмечено какого-либо влияния беталейкина на длительность безрецидивного периода по сравнению с контролем.

У пациенток с более агрессивным опухолевым процессом (N2, вовлечение в процесс более 4 регионарных лимфоузлов) исходно измененные по сравнению с практически здоровыми лицами значения иммунного статуса после биотерапии нормализовались. Более того, применение беталейкина у таких больных РМЖ сопровождалось тенденцией к улучшению показателей безрецидивной выживаемости в отличие от группы без применения беталейкина (р=0,09). 60% пациенток в группе применения беталейкина пережили 55 месяцев без признаков прогрессирования заболевания. В группе контроля соответствующий показатель составил 32 месяца.

Интересным оказался тот факт, что при вовлечении в патологический процесс более 4-х регионарных лимфатических узлов, адаптогенный эффект рекомбинантного цитокина проявлялся лишь у тех пациенток, у которых был отмечен ответ иммунной системы. Длительное наблюдение выявило следующую взаимосвязь: в группе длительной клинической ремиссией (более 6 лет) оказались пациентки, у которых при проведении

лечения бетапейкином иммунная система отвечала изменением большинства исследованных показателей (33 из 34). Для больных с прогрессированием заболевания после применения беталейкина без статистически значимой динамики по сравнению с исходными значениями остался 21 показатель (х2=26,48, р=0,00). Иными словами, если беталейкин не оказывал влияния на состояние иммунной системы, то его применение было неэффективным для улучшения показателей безрецидивной выживаемости, которую следует рассматривать как показатель адаптации организма к опухолевому росту и проводимому лечению.

Иммунологические механизмы противоопухолевого лечения. В настоящее время на основании клинических и экспериментальных наблюдений высказывается мнение, что механизмы иммунной системы вносят существенный вклад в обеспечение эффективности противоопухолевого лечения [Zitvogel L. et al., 2008]. Механизмы адаптивного и врожденного иммунного ответа являются эффекгорным звеном опухолевой циторедукции на фоне цитостатического лечения. Значимым является тот факт, что конвенциональное лечение оказывается тем инструментом, который возвращает иммунной системе противоопухолевую стратегию [Ehrke M.J., 2003]. На фоне специфического лечения происходит суммация циторедуктивного действия конвенциональных методов с восстановленными цитотоксическими эффектами собственной иммунной системы, что выражается в увеличении эффективности лечебных мероприятий и улучшении показателей выживаемости [MacLean G.D. et al., 1996, Dudley M.E. et al., 2005, Wrzesinski C. et al., 2007].

Нами показано, что на фоне проводимого противоопухолевого лечения состояние иммунной системы у определенной доли пациенток с РМЖ изменяется в сторону ассоциированного с благоприятным клиническим течением заболевания. Более 30 % пациенток характеризовались расположением визуальных образов в области длительного клинического благополучия (рисунок 3 Б, В, Г), и соответственно благоприятного состояния иммунной системы по сравнению с 5% до начала противоопухолевого лечения (рисунок 3 А). Именно при проведении цитостатического лечения вовлечение механизмов иммунной системы имело наибольшее значение для того, как будет дальше развиваться злокачественный процесс. Об этом свидетельствовало число переменных, входящих в дискриминантные уравнения, описывающие состояние иммунной системы на этапах проведения НАХТ (таблица 3). Ответ на вопрос, почему именно на фоне цитостатического лечения возрастает значимость состояния иммунной системы в детерминации различных вариантов клинического течения РМЖ, очевидно, связан с участием иммунологических механизмов в реализации эффектов химиотерапии.

Помимо увеличения количества параметров, определяющих различие в состоянии иммунной системы у больных РМЖ, связанного с клиническим течением, при проведении НАХТ возрастала вариабельность иммунологических показателей. Причем основную роль факторов дисперсии играли биологические особенности злокачественных клеток и клинические параметры опухолевого процесса. По-видимому, проведение цитостатического лечения модифицирует биологические свойства опухолевых клеток, что приводит к увеличению и разнообразию реакций со стороны иммунной системы.

Таким образом, на фоне противоопухолевого лечения состояние иммунной системы способно обрести статус ассоциированного с благоприятным клиническим течением РМЖ. Изменения в иммунном статусе связаны с увеличением вариабельности иммунных реакций в ответ на биологические свойства опухоли, модифицированные цитостатическим воздействием. Максимальное вовлечение иммунологических механизмов в дискриминацию дальнейшего клинического течения РМЖ на этапе НАХТ указывает на значение этих механизмов для эффективности проводимой химиотерапии и возможный синергизм противоопухолевых эффектов лечения и иммунной системы.

Рисунок 3 - Расположение визуальных образов, соответствующих состоянию иммунной системы у больных РМЖ с неизвестным исходом (черный штрих) на этапах противоопухолевого лечения, относительно группы больных без прогрессирования более 3-х лет (темно-серый цвет) и с развившимся метастазированием (светло-серый цвет); А - до начала противоопухолевого лечения, Б - 2 курса НАХТ, В - 3-4 курса НАХТ, Г - после операции, Д - через 1 год после специфического лечения

Оценка состояния иммунной системы как критерий прогноза клинического течения РМЖ. Наиболее сильным аргументом, подтверждающим, что механизмы иммунной системы имеют значение для характера течения РМЖ и эффективности его лечения, является возможность прогнозировать исход заболевания на основании оценки ее состояния. В опубликованной в 2008 г. работе О.Е.Молчанова и А.М.Гранова представлен подход для оценки прогноза метастатического почечноклеточного рака на основе комплекса иммунологических показателей (субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови и концентрация цитокинов в сыворотке и плазме) [Молчанов О. Е., 2008]. При этом выделялись группы с благоприятным, относительно благоприятным и неблагоприятным прогнозом. Авторы показали, что прогноз, основанный на имеющихся сдвигах в иммунной системе, не всегда соответствует общепризнанным прогностическим критериям. Так, в группу с относительно благоприятным прогнозом иногда попадают больные с множественными метастазами, а в группу с неблагоприятным прогнозом - с единичными метастатическими очагами. Тем не менее, у первых часто удается достичь длительной стабилизации процесса, а у вторых болезнь неуклонно прогрессирует, несмотря на проводимое лечение.

На основании оценки системного уровня функционирования иммунной системы до начала, во время проведения и через 1 год после завершения противоопухолевого лечения, мы осуществили процедуру прогноза развития метастазов РМЖ в отдаленные органы. Полученные результаты прогнозирования были сопоставлены с документированным впоследствии исходом больных по данным объективного клинико-инструментального исследования. Чувствительность подхода (случаи с реально развившимися метастазами были предсказаны на основании показателей иммунной системы у больных РМЖ) в зависимости от этапов исследования составляла от 80% до 100 %. Отмечен высокий уровень прогностической значимости отрицательного результата (отсутствия риска развития метастазов в ближайшие 3 года от момента установления диагноза) от 89 % до 100%.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о существенной патогенетической роли иммунной системы в прогрессии РМЖ и определении исхода заболевания. При этом длительная клиническая ремиссия или прогрессировала заболевания (гематогенное метастазирование) в течение 3-х лет с момента установления диагноза ассоциированы с различной стратегией функционирования иммунной системы (рисунок 4). Статус иммунной системы и реализуемая ею стратегия формируются как результат интеграции свойств опухоли и особенностей организма и могут быть изменены в процессе проводимого противоопухолевого лечения. Иммунологические механизмы оказывают влияние на эффективность лечебных мероприятий, таких как специфическая противоопухолевая терапия и воздействия, направленные на увеличение резервов системы общей неспецифической резистентности организма. Оценка состояния иммунной системы до начала, при проведении и после завершения противоопухолевого лечения может быть использована в качестве дополнительного критерия прогноза РМЖ.

Противоопухолевая стратегия

Клинические параметры Эффективность Цитостатическое Биологические опухолевого процесса НАХТ лечение свойства опухоли

Биологические свойства опухоли

Эффективность НАХТ

Полиморфизм генов И-10, ССЯ5

До лечения

2 курса НАХТ

Про опухо лев а я стратегия

3-4 курса Операция

НАХТ

Предоперационная ЛТ

Гуморальный ответ

Нейтрофилы

Нейтрофилы + ИРИ /Нейтрофилы +ЦИК

Нейтрофилы+ 1ЙА

1 год после лечения

Рисунок 4 - Основные механизмы, определяющие различия про- и противоопухолевой стратегии иммунной системы у больных РМЖ на этапах комбинированного лечения

ВЫВОДЫ:

1. Обоснованием для исследования роли иммунной системы в патогенезе РМЖ является оценка системного уровня ее функционирования у больных с различным исходом заболевания и равноценность групп сравнения по частоте присутствия основных факторов, определяющих характер клинического течения заболевания.

2. Оценка системного уровня функционирования иммунной системы позволила выявить существенные различия, ассоциированные с благоприятным (состояние без признаков прогрессировать более 3-х лет с момента установления диагноза) и неблагоприятным (развитие гематогенного метастазирования в эти же сроки) течением заболевания. Различия в состоянии иммунной системы наблюдались до начала противоопухолевого лечения, на этапах его проведения (НАХТ, оперативное вмешательство) и через 1 год после завершения лечебных мероприятий.

3. При исследовании внутрисистемной организации иммунной системы у больных РМЖ показано ведущее значение активности Т-клегочного звена на всех этапах исследования. Проведение НАХТ ассоциировано с увеличением влияния процессов пролиферации, апоптоза и утилизации циркулирующих антигенов в структуре внутрисистемной организации. Основным отличием организации функционирования иммунной системы у больных РМЖ, характеризующихся благоприятным течением заболевания, является выраженный вектор цитотоксических эффекторных реакций. Неблагоприятное течение РМЖ связано с обособлением в отдельный функциональный вектор гуморального звена системы иммунитета при проведении противоопухолевого лечения.

4. В условиях моделирования in vitro индукции апоптоза моноклональными антителами к CD3, CD95 и цигостатиком вепезидом было показано, что у больных с длительным периодом без прогрессирования заболевания максимальные значения клеточной гибели отмечены на этапе НАХТ, для пациенток с развившимся впоследствии прогрессированием РМЖ - после завершения лечения. Обеспечение длительного периода без прогрессирования заболевания связано с более высоким пролиферативным потенциалом мононуклеарных клеток периферической крови, а не их чувствительностью к апопгоз-индуцирующим воздействиям со стороны опухоли и противоопухолевого лечения.

5. Преобладающее влияние опухоли, организма или мероприятий лечения на вариабельность показателей иммунной системы у больных РМЖ зависит от этапа наблюдения. До начала лечения и через 1 год после его завершения доминировало влияние особенностей организма (морфофункционапьная асимметрия, генотип, адаптационный статус, наличие иммунопатологического синдрома): доля иммунологических показателей, дисперсия которых зависела от параметров организма, составляла 71 % и 65 % соответственно. В процессе лечения наибольшее воздействие оказывали характеристики опухолевого процесса (влияние на 55 % показателей после завершения НАХТ). Эффект проведенного лечения на состояние иммунной системы пациенток был наиболее выражен после его завершения (65 % показателей иммунной системы).

6. Полиморфизм генов цитокинов IL-10592CA и TGF-p509CT оказывает влияние на длительность безрецидивной выживаемости у пациенток с РМЖ на уровне тенденции (р=0,09 и р=0,08 соответственно). Более высокие показатели безрецидивной выживаемости отмечены у носительниц гомозиготных вариантов TGF 509 СС и IL-10592 АА.

7. Регуляция продукции цитокинов у больных РМЖ осуществляется как на уровне аллельных вариантов кодирующих генов, так и комплекса патогенетически значимых для РМЖ генов цитокинов близкой или противоположной функциональной направленности. До лечения преобладает влияние гена провоспалительного цитокина 1Ир. На этапе НАХТ уровень продукции цитокинов зависит от аллельного

полиморфизма генов ССЯ5, р53 и ТОИ-р. После завершения лечения доминирует регуляторное влияние гена противоспалительного цитокина НЛО.

8. Наибольшая вариабельность показателей иммунной системы у больных РМЖ на всех этапах лечения и в период динамического наблюдения связана с полиморфизмом генов 1Ь-4 590СТ и ТСИП 509СГ. У носительниц генотипа ТСИ-Р ТТ, ассоциированного с высоким уровнем экспрессии данного иммуносупрессорного цитокина, снижены количественные показатели субпопуляций лимфоцитов (СР22+ до лечения, С05б+ после 2 курсов НАХТ, СБ8+ после операции) и функциональная активность нейтрофилов после завершения лечения.

9. Проведение специфической терапии способствует изменению проопухолевой стратегии иммунной системы на противоопухолевую. Наибольшая доля пациенток, характеризовавшихся благоприятным для длительной клинической ремиссии состоянием иммунной системы, отмечена при проведении НАХТ (38% после 2 курсов и 29% после 3-4 курсов) и удалении первичного опухолевого узла (32%). Изменение стратегии иммунной системы связано с увеличением вариативных возможностей механизмов, связанных с эффекторами иммунной системы (СЮ4/С08, СЭ4, СЭ56, СШ5, пролиферативная активность, ^А, ^М) в ответ на модификацию биологических свойств опухоли (экспрессия рецепторов, степень злокачественности, чувствительность к цитостатическим воздействиям) под влиянием цитосгатических воздействий.

10. Через 1 год после окончания противоопухолевого лечения у большинства (81%) больных РМЖ состояние иммунной системы вновь обретает статус ассоциированного с риском развития гематогенного метастазирования.

11. Включение в схему противоопухолевого лечения препарата рекомбинантного цитокина 1Ь-1р беталейкина способствует улучшению адаптационного статуса у больных РМЖ: по окончании НАХТ доля неблагоприятных реакций переактивации и стресса у пациенток, получавших беталейкин, составила 18% по сравнению с 50% в контрольной группе (р<0,01). Применение препарата у больных РМЖ с неблагоприятным прогнозом (вовлечение в опухолевый процесс более 4-х регионарных лимфатических узлов) приводило к увеличению периода безрецидивной выживаемости в отличие от контрольной группы: 60%-ная безрецшшвная выживаемость в группе применения беталейкина составила 55 месяцев по сравнению с 32 месяцами в группе контроля. Данный эффект препарата был связан с его влиянием на состояние иммунной системы.

12. На основании оценки состояния иммунной системы возможен индивидуальный прогноз развитая гематогенного метастазирования у больных РМЖ в течение 3-х лет с момента установления диагноза и его коррекция на этапах противоопухолевого лечения. Чувствительность модели прогноза составляет 67 -100 % в зависимости от этапа, уровень прогностической значимости отрицательного результата - отсутствия риска развития метастазов в ближайшие 3 года от момента установления диагноза -от 89 % до 100%.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ:

1. При определении варианта клинического течения и вероятного исхода РМЖ необходимо принимать во внимание особенности функционирования иммунной системы у больных данным заболеванием.

2. При проведении комбинированного противоопухолевого лечения прогноз РМЖ необходимо корректировать с целью обеспечения адекватного индивидуализированного курса лечебных мероприятий, используя для этого оценку состояния иммунной системы у больных на этапах лечения. При этом особое значение имеют следующие показатели:

- до начала лечения: CD4/CD8, Ig М, CD8, Ig А;

после завершения 2 курсов НАХТ: CD4/CD8, спонтанная активность нейгрофилов, Ig М, Ig А;

- после завершения 3-4 курсов НАХТ: CD4/CD8, Ig A, CD8;

после оперативного удаления первичного опухолевого узла: спонтанная активность нейтрофилов, Ig A, CD4/CD8.

3. Процедуру оценки стратегической направленности функционирования иммунной системы следует включить в комплекс мероприятий динамического наблюдения у больных РМЖ с целью своевременного выявления признаков прогрессирования заболевания.

ПЕРЕЧЕНЬ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Стахеева М.Н. Показатели клеточного иммунитета у больных раком легкого с различными типами адаптационных реакций в процессе проведения полихимиотерапии [текст] / М.Н. Стахеева, ИЛ. Дизер, Е.С. Смольянинов, В.Е. Гольдберг, Е.В. Новицкий, Е.Ю. Шерстобоев, М.Ю. Хлусова // Вопросы онкологии. -1998. - № 2. - С. 164-167.

2. Слонимская Е.М. Сравнительная продукция цитокинов мононуклеарными клетками крови у больных с пролиферативными заболеваниями молочной железы [текст] / Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева, H.H. Бабышкина, Е.Ю. Гарбуков, Е.А. Афримзон, М.Н. Стахеева // Материалы 8-й Международной конференции «СПИД, рак и родственные проблемы». Русский журнал ВИЧ/СПИД и родственные проблемы. -2000. - Том 4, №1.-С. 118.

3. Стахеева М. Н. Структура адаптационных реакций и показателей системы иммунитета у больных предопухолевыми заболеваниями и раком молочной железы [текст] / М. Н. Стахеева, Е. Ю. Гарбуков, Е. М. Слонимская, Н.В. Чердынцева, Н. Н. Бабышкина, Е. А. Афримзон II Физиология организмов в нормальном и экстремальном состояниях: материалы Всероссийской конференции, посвященной памяти и 95-летию В. А. Пегеля. - Томск. - 2001. - С. 116 - 118.

4. Слонимская Е.М. Функциональная активность иммунокомпетентных клеток у больных с мастопатией, фиброаденомой и раком молочной железы [текст] / Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева, H.H. Бабышкина, Е.Ю. Гарбуков, ЕА. Афримзон, М.Н. Стахеева // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2000. - Том 129, Прил. 1. - С. 71-74.

5. Стахеева М.Н. Структура адаптационных реакций у больных раком молочной железы при включении в схему лечения беталейкина [текст] / М.Н. Стахеева, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева, A.C. Симбирцев, A.A. Кладиев, H.H. Бабышкина // Тезисы докладов 4-го съезда физиологов Сибири. - Новосибирск. - 2002. - С. 268.

6. Бабышкина H.H. Продукция цитокинов иммунокомпетентными клетками у больных раком молочной железы [текст] / H.H. Бабышкина, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева, Е.Ю. Гарбуков, М.Н. Стахеева, Е.А. Афримзон II Материалы региональной научно-практической конференции «Рак репродуктивных органов: профилактика, диагностика, лечение». - Томск. - 2002. - С. 20.

7. Стахеева М.Н. Структура адаптационных реакций у больных с опухолевой патологией молочной железы [текст] / М.Н. Стахеева, Е.Ю. Гарбуков, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева, H.H. Бабышкина // Материалы региональной научно-практической конференции «Рак репродуктивных органов: профилактика, диагностика, лечение». - Томск. - 2002. - С. 125.

8. Шишкин Д.А. Иммунологические аспекты первично-множественных опухолей [текст] / Д.А. Шишкин, Л.В. Гердт, М.Н. Стахеева, Я.В. Кухарев, С.К. Заподовников // Иммунология Урала: Материалы II конференции иммунологов Урала. - 2002. - №. 1.

-С. 105-106.

9. Бабышкина H.H. Функциональная активность иммунокомпетентных клеток у больных с патологией молочной железы с редким аллелем гена рецептора хемокина CCR5 del32 [текст] / H.H. Бабышкина, Н.В. Чердынцева Е.М. Слонимская, М.Н. Стахеева // Материалы VI ежегодной Российской онкологической конференции - Москва. - 2002. - С. 176.

10. Бабышкина H.H. Показатели системы иммунитета у больных с пролиферативными заболеваниями молочной железы в зависимости от выраженности патологического процесса [текст] / H.H. Бабышкина, М.Н. Стахеева, Е.Ю. Гарбуков, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева, Е.А. Афримзон // Актуальные проблемы рака молочной железы. -Кемерово. - 2003. - Выпуск VII. - С. 8-10.

11. Чердынцева Н.В. Роль цитокинов в патогенезе рака молочной железы [текст] / Н.В. Чердынцева, М.Н. Стахеева, H.H. Бабышкина, Н.С. Юдин, В.А. Белявская, Е.М. Слонимская, Т.М. Исаева, Н.В. Севостъянова, JI.H. Уразова, А.Г. Ромашенко, М.И. Воевода // Медицинская иммунология: материалы VI Всероссийского научного форума. - Санкт-Петербург. - 2003. - Том 5, № 3-4. - С. 445.

12. Бабышкина H.H. Продукция цитокинов иммунокомпетентными клетками у больных раком молочной железы [текст] / H.H. Бабышкина, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева, Е.Ю. Гарбуков, М.Н. Стахеева, Е.А. Афримзон // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической онкологии: Тезисы докладов VI конференции молодых онкологов Украины. - Киев, 2003. - С. 4.

13. Бабышкина H.H. Параметры системы иммунитета у больных раком молочной железы с благоприятным и неблагоприятным исходом [текст] / H.H. Бабышкина, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, М.Н. Стахеева // Материалы VII Российского онкологического конгресса - Москва - 2003. - С. 248.

14. Чердынцева Н.В. Иммунологические показатели у больных раком молочной железы при включении беталейкина в схему комбинированного противоопухолевого лечения [текст] / Н.В. Чердынцева, М.Н. Стахеева, Е.М. Слонимская, H.H. Бабышкина A.C. Симбирцев, A.A. Кладиев // Russian Journal of Immunology. - Екатеринбург. -2004.-Vol. 9, Spl. 1.-C.291.

15. Бабышкина H.H. Уровень продукции цитокинов у больных с пролиферативными заболеваниями молочной железы в зависимости от выраженности патологического процесса [текст] / H.H. Бабышкина М.Н. Стахеева Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева, Е.Ю.Гарбуков, Е.А. Афримзон // Современное состояние и перспективы развития экспериментальной и клинической онкологии: материалы научно-практической конференции, посвященной 25-летию НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН. - Томск. - 2004. - С. 44.

16. Стахеева М.Н. Влияние беталейкина на адаптационный и иммунологический статус больных РМЖ при включении его в схему противоопухолевого лечения [текст] / М.Н. Стахеева Е.М. Слонимская, H.H. Бабышкина Н.В. Чердынцева A.C. Симбирцев, A.A. Кладиев // Современное состояние и перспективы развития экспериментальной и клинической онкологии: материалы научно-практической конференции, посвященной 25-летаю НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН. - Томск. - 2004. - С. 244.

17. Стахеева М.Н. Влияние беталейкина на иммунологические показатели и эффективность противоопухолевого лечения у больных РМЖ в зависимости от распространенности метастатического процесса [текст] / М.Н. Стахеева Е.М. Слонимская, H.H. Бабышкина, Н.В. Чердынцева A.C. Симбирцев, A.A. Кладиев // Медицинская иммунология: материалы VIII Всероссийского научного форума «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге». - Санкт-Петербург. - 2004. - Том б, № 3-5. -С. 465.

18. Стахеева М.Н. Иммунологические показатели у больных раком молочной железы при включении в схему комбинированного лечения беталейкина [текст] /

М.Н. Стахеева, Е.М. Слонимская, H.H. Бабышкина, Н.В. Чердынцева, A.C. Симбирцев, A.A. Кладиев // Медицинская иммунология. - 2005. - Том 7, №1.-С. 63-72.

19. Кологривова E.H. Анализ корреляционных связей показателей иммунограммы и адаптационного индекса у больных раком различной локализации и здоровых доноров [текст] / E.H. Кологривова, Я.В. Кухарев, Д.А. Шишкин, М.Н. Стахеева, С.К. Заподовников // Сибирский онкологический журнал. - 2005. - № 2. -С. 30-33.

20. Стахеева М.Н. Уровень апоптоза мононуклеарных клеток периферической крови у больных РМЖ при проведении НХТ в зависимости от степени регионарного метастазирования [текст] / М.Н. Стахеева, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева, H.H. Бабышкина // Материалы Второй Международной ежегодной онкологической конференции «Проблемы лечения и диагностики рака молочной железы». - Санкт-Петербург. - 2005. - С. 138.

21. Стахеева М.Н. Уровень апоптоза мононуклеарных клеток периферической крови у больных раком молочной железы при проведении неоадьювантной химиотерапии [текст] / М.Н. Стахеева, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, H.H. Бабышкина // Материалы IX Всероссийского научного форума с международным участием имени акад. В.И.Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге «Молекулярные основы иммуиорегуляции, иммунодиагностики и иммунотерапии». Медицинская иммунология. - 2005. - Том 7, № 2-3. - С. 210.

22. Стахеева М.Н. Чувствительность мононуклеарных клеток периферической крови у больных РМЖ к апоптоз-индуцирующему действию [текст] / М.Н. Стахеева, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, H.H. Бабышкина//Материалы IIМеждународной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность». - Москва. - 2005. -С. 58.

23. Бабышкина H.H. Функциональная активность лимфоцитов и продукция цитокинов у больных с предопухолевой и опухолевой патологией молочной железы в зависимости от аллельного полиморфизма гена хемокинового рецептора CCR5 [текст] / H.H. Бабышкина, П.А. Гервас, Е.В. Денисов, М.Н. Стахеева, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева // Цитокины и воспаление. - 2005. - Том 4., № 2. - С. 78.

24. H.H. Бабышкина Распределение генотипов хемокинового рецептора CCR5 и уровень экспрессии CCR5 у больных раком молочной железы [текст] / H.H. Бабышкина, П.А. Гервас, Е.В. Денисов, М.Н. Стахеева, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева // Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 15-летнему юбилею Красноярского краевого центра по профилактике и борьбе со СПИД и др. инфекционными заболеваниями. - Красноярск. - 2005. - С. 76-77.

25. Чердынцева Н.В. Полиморфизм генов цитокинов и особенности иммунологического статуса у больных раком молочной железы [текст] / Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, В.А. Белявская, H.H. Бабышкина, П.А. Гервас, М.Н. Стахеева, Н.В. Литвяков, Е.А. Денисов, М.И. Воевода // Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 15-летнему юбилею Красноярского краевого центра по профилактике и борьбе со СПИД и др. инфекционными заболеваниями. - Красноярск. - 2005. - С. 97-98.

26. Гервас П.А. Исследование полиморфизма 72 кодона гена р53 у больных раком молочной железы [текст] / ПЛ. Гервас, H.H. Бабышкина, Е.М. Слонимская, Е.В. Денисов, М.Н. Стахеева, Н.В. Чердынцева // Материалы конференции «Актуальные вопросы здравоохранения регионов Сибири». - Красноярск. - 2005. - С. 299.

27. Авдеев C.B. Ксеноновая анестезия в комплексе комбинированного лечения больных раком молочной железы [текст] / C.B. Авдеев, Е.М. Слонимская, В.М. Одышев, М.Н. Стахеева, С.Л. Стуканов // Материалы IV съезда онкологов и радиологов СНГ. -Баку.-2006.-С. 277.

28. Стахеева М.Н. Показатели апоптоза мононукпеарных клеток периферической крови у больных раком молочной железы при проведении НХТ в зависимости от степени регионарного метастазирования [текст] / М.Н. Стахеева, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, H.H. Бабышкина, Я.В. Кухарев// Медицинская иммунология: материалы X Всероссийского научного форума «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге». - 2006. -Том 8,№2-3.-С. 351-352.

29. Литвяков Н.В. Экспрессия гена хемокинового рецептора CCR5 в лимфоцитах периферической крови больных раком молочной железы в процессе лечения [текст] / Н.В. Литвяков, A.A. Пономарева, М.Н. Стахеева, П.А. Гервас, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, Е.Ю. Гарбуков, H.H. Бабышкина, Е.В. Денисов // Медицинская иммунология: материалы X Всероссийского научного форума «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге». - 2006. - Том. 8, № 2-3. - С. 354-355.

30. Чердынцева Н.В. Хемокины и прогрессия злокачественных новообразований [текст] / Н.В. Чердынцева, П.А. Гервас, Н.В. Литвяков, М.Н. Стахеева, В.А. Белявская, Е.В. Денисов, H.H. Бабышкина, Е.М. Слонимская, Я.В. Кухарев, С.А. Тузиков, Н.В. Севостьянова, М.И. Воевода // Медицинская иммунология: материалы X Всероссийского научного форума «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге». - 2006. -Том 8,№2-3.-С. 355-356.

31. Бабышкина НЛ1. Иммунологические параметры и уровень продукции цитокинов у больных с пролиферативными заболеваниями и раком молочной железы [текст]/ H.H. Бабышкина, М.Н. Стахеева, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева, Е.Ю. Гарбуков // Цитокины и воспаление. - 2006. - Том 5, № 1. -С. 37-43.

32. Стахеева М.Н. Показатели пролиферации и апоптоза мононуклеарных клеток периферической крови у больных раком молочной железы при проведении неоадъювашной химиотерапии [текст] / М.Н. Стахеева, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, Е.Ю. Гарбуков, H.H. Бабышкина, М.Р. Галимуллина // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Дни иммунологии в Сибири» -Красноярск. - 2006. - С. 148-149.

33. Литвяков Н.В. Экспрессия рецептора хемокинов в лимфоцитах крови больных раком молочной железы: взаимосвязь с показателями иммунитета и клинико-морфологическими параметрами [текст] / Н.В. Литвяков, М.Н. Стахеева, A.A. Пономарева, Е.Ю. Гарбуков, Н.В. Чердынцева // «Вестник ТГУ»: материалы Всероссийской научной конференции «Механизмы индивидуальной адаптации». -Томск.-2006.-С. 35.

34. Кухарев Я.В. Особенности иммунологических показателей у больных раком молочной железы с различными адаптационными реакциями [текст] / Я.В. Кухарев, М.Н. Стахеева, E.H. Кологривова, A.B. Сорокина // «Вестник ТГУ»: материалы Всероссийской научной конференции «Механизмы индивидуальной адаптации». -Томск.-2006.-С. 32.

35. Чердынцева Н.В. Исследование связи полиморфизма генов онкосупрессора р53, гена хемокинового рецептора CCR5 и их сочетаний с риском развития и прогрессированием рака молочной железы [текст] / Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, В.Л. Белявская, H.H. Бабышкина, НА. Сметанникова, ПА. Гервас, Е.В. Денисов, М.Н. Стахеева, Е.Ю. Гарбуков, ЕА. Малиновская, Н.В. Литвяков, М.И. Воевода // Молекулярная медицина. - 2007. -№ 1. - С. 23-31.

36. Чердынцева Н.В. Механизмы опухолевой прогрессии: роль генов апоптоза и цитокинов [текст] / Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, Н.В. Литвяков, М.Н. Стахеева, H.H. Бабышкина, Е.Ю. Гарбуков, Е.А. Малиновская, Е.В. Денисов, A.B. Дорошенко, H.A. Красулина // Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике/ Ред. А. Б.Масленникова. - Новосибирск. - 2007. - Выпуск 11. -С. 28-39.

37. Литвяков H.B. Взаимосвязь уровня экспрессии рецептора хемокинов CCR5 в лейкоцитах крови с показателями иммунитета при раке молочной железы [текст] / Н.В. Литвяков, М.Н. Стахеева, Е.Ю. Гарбуков, A.A. Пономарева, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева // Медицинская иммунология: материалы XI Всероссийского научного Форума с международным участием им. академика В. И. Иоффе "Дни иммунологии в Санкт-Петербурге". - 2007. - Том 9, № 2/3. - С. 279-280.

38. Стахеева М.Н. Влияние степени регионарного метастазирования на показатели количественного гомеостаза клеток иммунной системы у больных раком молочной железы [текст] / М.Н. Стахеева, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, H.H. Бабышкина, Е.Ю. Гарбуков, Я.В. Кухарев, М.Р. Галимуллина // Профилактика и лечение злокачественных новообразований в современных условиях: материалы Российской научно-практической конференции с международным участием.- Барнаул. - 2007. -С. 256-257.

39. Чердынцева Н.В. Подходы генетической эпидемиологии: от оценки риска до прогнозирования исхода злокачественных новообразований [текст] / Н.В. Чердынцева, П.А. Гервас, Е.А. Малиновская, H.H. Бабышкина, Н.В. Литвяков, Е.В. Денисов, Е.М. Слонимская, М.Н. Стахеева, С.А. Тузиков, В.А. Белявская, М.И. Воевода, В.М. Перельмутер // Basic Science for medicine: 3rd international conference. - Novosibirsk. - 2007. - C. 81.

40. Стахеева М.Н. Влияние беталейкина на состояние адаптационного статуса и системы иммунитета у больных местно-распространенным раком молочной железы [текст] / М.Н. Стахеева, Я.В. Кухарев, Е.М. Слонимская, Е.Ю. Гарбуков, H.H. Бабышкина,

A.B. Дорошенко, Н.В. Чердынцева // Создание новых лекарственных препаратов: материалы республиканской научной конференции. - Томск. - 2007. - С. 59-61.

41. Стахеева М.Н. Показатели апогггоза, пролиферации и продукции цитокинов мононуклеарными клетками периферической крови у больных РМЖ [текст] / М.Н. Стахеева, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, Е.Ю. Гарбуков, H.H. Бабышкина, Я.В. Кухарев, М.Р. Галимуллина // Медицинская иммунология: материалы XI Всероссийского научного Форума с международным участием им. академика

B. И. Иоффе "Дни иммунологии в Санкт-Петербурге". - 2007. - Том 9, № 2/3. -

C. 289.

42. Стахеева М.Н. Эффективность неоадьювантной химиотерапии и показатели иммунного статуса у больных раком молочной железы [текст] / Я.В. Кухарев, М.Н. Стахеева, E.H. Кологривова, A.B. Черников, A.B. Сорокина, Ч.К. Серенот, Е.Ю. Гарбуков, A.B. Дорошенко, H.A. Красулина, Ю.Л. Кокорина, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская // Материалы четвертой международной ежегодной онкологической конференции «Проблемы лечения и диагностики рака молочной железы». - Санкт-Петербург. - 2007. - С. 75-76.

43. Стахеева МЛ. Исследование связи параметров иммунной системы с эффективностью неоадъвантной химиотерапии у больных раком молочной железы [текст] / М.Н. Стахеева, Я.В. Кухарев, Е.Ю. Гарбуков, Н.В. Литвяков, H.H. Бабышкина, АЛ. Медюхина, A.B. Дорошенко, ЮЛ. Кокорина, Е.М. Слонимская, E.H. Кологривова, Н.В. Чердынцева // Сибирский медицинский журнал. - 2008. - №3 (выпуск 1). - С. 39 - 43.

44. Одышев В.М. Влияние анестезии ксеноном и закисью азота на адаптационный статус больных раком молочной железы [текст]/ В.М. Одышев, С.В. Авдеев, Е.М. Слонимская, М.Н. Стахеева, A.B. Стреж // Сибирский онкологический журнал. - 2008. - № 4 (28). - С. 32 - 35.

45. Стахеева М.Н. Особенности состояния иммунной системы до начала лечения у больных РМЖ с прогрессированием заболевания [текст] / М.Н. Стахеева, Я.В. Кухарев, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, Е.Ю. Гарбуков, H.H. Бабышкина, Ю.А. Кокорина, A.B. Дорошенко // Сибирский медицинский журнал: материалы

научной конференции с международным участием "Дни иммунологии в Сибири -2008". - Томск. - 2008. - № 3. - С. 116 - 117.

46. Денисов Е.В. Мутации в гене-супрессоре ТР53 и их связь с особенностями клинического течения рака молочной железы [текст]/ Е.В. Денисов, Н.В. Литвяков, М.Н. Стахеева, Е.Ю. Гарбуков, Е.М. Слонимская, Е.А. Малиновская, H.H. Бабышкина, В.Н. Сгегний, Н.В. Чердынцева // Сибирский онкологический журнал. - 2008. - № 2 (26). - С. 33-36.

47. Кухарев Я.В. Связь параметров иммунной системы с клинико-морфологическими характеристиками опухоли у больных раком молочной железы [текст] / Я.В. Кухарев, М.Н. Стахеева, E.H. Кологривова, Н.В. Литвяков, H.H. Бабышкина, Е.Ю. Гарбуков, A.B. Дорошенко, Ю.А. Кокорина, АЛ. Медюхина // Сибирский медицинский журнал: материалы научной конференции с международным участием "Дни иммунологии в Сибири - 2008". - Томск. - 2008. - № 3. - С. 106.

48. Литвяков Н.В. Экспрессия генов CCR5 и RANTES в лейкоцитах крови и опухоли больных раком молочной железы [текст] / Н.В. Литвяков, Е.Ю. Гарбуков, A.A. Пономарева, М.Н. Стахеева, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева // Сибирский медицинский журнал: материалы научной конференции с международным участием "Дни иммунологии в Сибири - 2008". - Томск. - 2008. - № 3. - С. 102 - 103.

49. Чердынцева Н.В. Иммунная система у больных раком молочной железы: связь с прогрессией и эффективностью цитостатической терапии [текст] / Н.В. Чердынцева, М.Н. Стахеева, Н.В. Литвяков, H.H. Бабышкина, Е.А. Малиновская, Я.В. Кухарев, Е.Ю. Гарбуков, Е.М. Слонимская // Сибирский медицинский журнал: материалы научной конференции с международным участием "Дни иммунологии в Сибири -2008". - Томск. - 2008. -№ 3. - С. 123 -124.

50. Бабышкина H.H. Изучение связи полиморфных вариантов генов CCR5 и Р53 с лимфогенным метастазированием у больных раком молочной железы [текст] / H.H. Бабышкина, Е.А. Малиновская, Е.В. Денисов, М.Н. Стахеева, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева И Сибирский онкологический журнал. - 2008. - Прил. 2. - С. 25-26.

51. Стахеева М.Н. Неадъювантная химиотерапия как фактор модуляции активности иммунной системы у больных раком молочной железы или прогрессировании заболевания [текст] / М.Н. Стахеева, Я.В. Кухарев, Е.Ю. Гарбуков, Е.М. Слонимская, H.H. Бабышкина, Ю.Л. Кокорина, A.B. Дорошенко, Н.В. Чердынцева И Сибирский онкологический журнал. - 2008. - Прил. 2. - С. 82-83.

52. Бабышкина H.H. Взаимосвязь полиморфных вариантов гена-онкосупрессора Р53 и гена хемокинового рецептора CCR5 с риском возникновения и прогрессированием рака молочной железы [текст] / H.H. Бабышкина, Е.А. Малиновская, Е.В. Денисов, М.Н. Стахеева, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская // Материалы Всероссийской конференции с международным участием «Молекулярная онкология». -Новосибирск. - 2008. - С. 77-78.

53. Кухарев Я.В. Особенности иммунного статуса у больных раком молочной железы с клиническими проявлениями иммунной недостаточности [текст] / Я.В. Кухарев, М.Н. Стахеева, E.H. Кологривова, A.B. Черников, A.B. Сорокина, Е.М. Слонимская, Е.Ю. Гарбуков, A.B. Дорошенко, H.A. Красулина, Ю.Л. Кокорина И Российский аллергологический журнал: материалы VIII Конгресса РААКИ. - Москва. - 2008. -№1,Прил. 1.-С. 149-150.

54. Кухарев Я.В. Взаимосвязь эффективности неоадьювантной химиотерапии и параметров иммунного статуса у больных раком молочной железы [текст] / Я.В. Кухарев, М.Н. Стахеева, E.H. Кологривова, Е.М. Слонимская, A.A. Медюхина, Е.Ю. Гарбуков, A.B. Дорошенко, H.A. Красулина, Ю.Л. Кокорина, Н.В. Чердынцева // Российский иммунологический журнал: материалы Объединенного иммунологического форума. - Санкт-Петербург. - 2008. - Том 2(11), № 2-3. - С. 310.

55. Чердынцева H.B. Иммунная система вносит вклад в эффективность цитостатической терапии рака [текст] / Н.В. Чердынцева, М.Н. Стахеева, Н.В. Литвяков, H.H. Бабышкина, Е.М. Слонимская, Е.А. Малиновская, Е.В. Денисов, Я.В. Кухарев, Е.Ю. Гарбуков, H.H. Бабышкина // Российский иммунологический журнал: материалы Объединенного иммунологического форума. - Санкт-Петербург. - 2008. -Том 2(11), №2-3.-С. 316.

56. Odyshev V. On the influence of xenon anesthesia and nitrous oxide on immune status on patients with cancer of the breast [text] / V. Odyshev, M. Staheeva, S. Avdeev, E. Slonimskaya // 21st Interaatinal Congress of Israel Society of Anesthesiologists. - Tel Aviv. -2008. -P. 180.

57. Перельмутер B.M. Генетические и клинико-патологические особенности рака молочной железы у больных с сохраненной менструальной функцией и в менопаузе [текст] / В.М. Перельмутер, М.В. Завьялова, C.B. Вторушин, Е.М. Слонимская, Н.Г. Крицкая, Е.Ю. Гарбуков, Н.В. Литвяков, МЛ. Стахеева, H.H. Бабышкина, Е.А. Малиновская, Е.В. Денисов, Е.С. Григорьева, М.С. Назаренко, C.B. Сенников, Е.П. Горева, ВА. Козлов, МЛ. Воевода,

B.Н. Максимов, ВА. Белявская, Н.В. Чердынцева // Успехи геронтологии. - 2008. - Том 21, № 4. - С. 643-653.

58. Завьялова М.В. Взаимосвязь чувствительности опухоли к неоадъювантной химиотерапии с морфологическим строением первичного опухолевого узла при уницентрическом инфильтрирующем протоковом раке молочной железы [текст] / М.В. Завьялова, Н.В. Литвяков, Е.Ю. Гарбуков, C.B. Вторушин, М.Н. Стахеева, О.В. Савенкова, Н.В. Крицкая, В.М. Перельмутер, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева // Сибирский онкологический журнал. - 2008. - № 5. - С. 30-35.

59. Шевченко A.B. Полиморфизм промоторного региона генов IL-4, 11-6 и IL-10 у пациенток с раком молочной железы [текст] / A.B. Шевченко, О.В. Голованова, М.Ю. Коломейчук, В.И. Коненков, Е.Ю. Гарбуков, М.Н. Стахеева // Медицинская иммунология. - 2009. - Том 11, № 1. - С. 21-28.

60. Гервас П.А. Влияние полиморфизма генов апоптоза и репарации на эффективность неоадъювантной химиотерапии злокачественных новообразований [текст] / ПЛ. Гервас, Н.В. Литвяков, М.Н. Стахеева,

C.B. Миллер, AJO. Добродеев, Е.Ю. Гарбуков, H.H. Бабышкина, Я.В. Кухарев, М.В. Васильева, Е.М. Слонимская, ВА. Белявская, СЛ. Тузиков, Н.В. Чердынцева //Сибирский онкологический журнал. - 2009. - № 4. - С. 41-47.

61. Чердынцева Н.В. Генетические полиморфизмы в риске формирования и прогрессии рака молочной железы в Сибирском регионе России [текст] / Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, В.М. Перельмутер, М.В. Завьялова, C.B. Вторушин, Л.Ф. Гуляева,

B.О. Пустыльняк, Е.Ю. Гарбуков, Н.В. Литвяков, М.Н. Стахеева, H.H. Бабышкина, Е.А. Малиновская, Е.В. Денисов, Е.С. Григорьева, И.Н. Лебедев, М.С. Назаренко,

C.B. Сенников, А.Н. Силков, A.C. Жовмер, Е.П. Горева, А.Ю. Гришанова, О.Б. Горева, Т.А. Середина, В.О. Талабан, В.В. Ляхович, О.В. Голованова,

A.B. Шевченко, М.Ю. Салахутдинова, В.Н. Максимов, М.И. Воевода, В.И. Коненков,

B.П. Пузырев, В.А. Козлов // Опыт научно-технического и инновационного сотрудничества Томской области и Тайваня: материалы Сибирско-Тайваньского форума - Томск. - 2009. - Том 2. - С. 19-25.

62. Бабышкина H.H. Взаимосвязь полиморфных вариантов генов ангиогенеза с инфильтрирующим протоковым раком молочной железы [текст] / H.H. Бабышкина, В.Н. Максимов, М.И. Воевода, М.Ю. Салахутдинова, A.B. Шевченко, В.И. Коненков, ЕА. Малиновская, М.Н. Стахеева, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская // Опыт научно-технического и инновационного сотрудничества Томской области и Тайваня: материалы Сибирско-Тайваньского форума - Томск. - 2009. - Том 2. - С. 97-99.

63. Стахеева М.Н. Состояние иммунной системы у больных РМЖ и его взаимосвязь с эффективностью НАХТ и исходом заболевания [текст] / М.Н. Стахеева, Я.В. Кухарев, Е.М. Слонимская, Е.Ю. Гарбуков, H.H. Бабышкина, Ю.Л. Кокорина,

A.B. Дорошенко, М.Р. Патышева, Н.В. Чердынцева // Проблемы современной онкологии: материалы Российской научно-практической конференции с международным участием. - Барнаул. - 2009. -С. 138.

64. Стахеева М.Н. Динамика состояния иммунной системы у больных раком молочной железы при проведении противоопухолевого лечения как показатель его эффективности [текст] / М.Н. Стахеева, Я.В. Кухарев, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, Е.Ю. Гарбуков, H.H. Бабышкина, ЮЛ. Кокорина, A.B. Дорошенко, H.A. Тарабановская, М.Р. Патышева // Сибирский онкологический журнал. - 2009, Прил. № 2. - С. 184-185.

65. Стахеева М.Н. Функциональные резервы цитокин-продуцирующей и пролиферативной активности иммунной системы у больных РМЖ с различным исходом [текст] / М.Н. Стахеева, Я.В. Кухарев, Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, H.H. Бабышкина, Е.Ю. Гарбуков, М.Р. Патышева, A.B. Дорошенко, Ю.Л. Кокорина, H.A. Тарабановская // Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов: материалы четвертой Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. - Новосибирск. - 2009 - С. 247.

66. Свиридова B.C. Иммунорегуляторные субпопуляции Т-клеток при опухолевом росте и аллергических заболеваниях [текст] / B.C. Свиридова, В.В. Климов, АЛ. Денисов, М.Н. Стахеева, М.В. Васильева, Н.В. Чердынцева //Сибирский онкологический журнал. - 2010. - Том 39, № 3. - С. 38-48.

67. Cherdyntseva N.V, Age-related function of tumor suppressor gene TP53: contribution to cancer risk and progression [text] / N.V. Cherdyntseva, P.A. Gervas, N.V. Litvyakov, M.N. Stakcheeva, A.A. Ponomareva, A.Yu. Dobrodeev, E.V. Denisov, V.A. Belyavskaya, E.L. Choinzonov // Experimental oncology. - 2010. - Vol. 32, Spl. -P. 205-208.

68. Бабышкина H.H. Роль трансформирующего ростового фактора TGF-ßl в патогенезе рака молочной железы [текст] / H.H. Бабышкина, ЕЛ. Малиновская, М.Н. Стахеева, В.В. Волкоморов, A.A. Уфандеев, Е.М. Слонимская //Сибирский онкологический журнал. - 2010. - № 6. - С. 63-70.

69. Stakheyeva M.N. Immune system factor organization with respect to breast cancer outcome [text] / M.N. Stakheyeva, D. Eidenzon, E.M. Slonimskaya, J.V. Kukharev, EJ. Garbukov, N.V. Cherdyntseva // International conference 'Tumor and host: novel aspects of old problem". - Kyiv. - 2010. - Experimental oncology. - 2010. - Vol. 32, Spl. - P. 101-102.

70. Стахеева М.Н. Взаимосвязь уровня продукции IL-lß клетками периферической крови у больных раком молочной железы с различным исходом [текст] / М.Н. Стахеева, Е.М. Слонимская, Я.В. Кухарев, Е.Ю. Гарбуков, Е.П. Горева, C.B. Сенников,

B.А. Козлов, Н.В. Чердынцева // Цитокины и воспаление: материалы Всероссийской научной конференции «Молекулярно-генетические основы функционирования цитокиновой сети в норме и при патологии». - Новосибирск. - 2010. - Том 9, № 3. -

C. 72-73.

71. Чердынцева Н.В. Цитокины в патогенезе злокачественных новообразований [текст] / Н.В. Чердынцева, М.Н. Стахеева, Н.В. Литвяков, H.H. Бабышкина, Е.А. Малиновская, Е.М. Слонимская // Цитокины и воспаление: материалы Всероссийской научной конференции «Молекулярно-генетические основы функционирования цитокиновой сети в норме и при патологии». - Новосибирск. - 2010. - Том 9, № 3. - С. 74.

72. Babyshkina N. Association of functional -509C>T polymorphism in the TGF-ßl gene with infiltrating ductal breast carcinoma risk in a Russian Western Siberian population [text] / N. Babyshkina, E. Malinorskaya, M. Stakheyeva, V. Volkomorov,

E. Slonimskaya, V. Maximov, N. CherdyntsevaJ/ Cancer Epidemiology. DOI: 10.1016/j.canep.2011.02.002. 73. Стахеева M.H. Взаимосвязь состояния иммунной системы как интегрированного целого с клиническим течением рака молочной железы / М.Н. Стахеева, Д. Эйдензон, Е.М. Слонимская, Я.В. Кухарев, Е.Ю. Гарбуков, Н.Н. Бабышкина, Н.В. Чердынцева // Сибирский онкологический журнал. - 2011. - № 2. - С. 11-19.

ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Средство, обладающее адалтогенным действием, и Способ подготовки больных раком молочной железы к проведению специфического противоопухолевого лечения с включением полихимиотерапии [текст] / Н.В. Чердынцева, Е.М. Слонимская, А.С. Симбирцев, М.Н. Стахеева, Н.Н. Бабышкина // Патент № 2304445 Российская Федерация. - заявл. 20.10.2004, опубл. 20.08.2007, Бюл. № 23.

2. Способ прогнозирования гематогенного метастазирования у больных раком молочной железы, основанный на оценке состояния иммунной системы при проведении противоопухолевого лечения / М.Н. Стахеева, Д. Эйдензон, Е.М. Слонимская, Н.В. Чердынцева, Е.Ю. Гарбуков, Я.В. Кухарев. - положительное решение о выдаче патента на изобретение от 3.05.2011. - Заявл. 15.07.2010 № 2010129630.

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор выражает глубокую признательность и благодарность д.б.н., профессору Н. В. Чердынцевой, д.м.и., профессору Е. М. Слонимской, к.т.н, Д. Эйдензону, академику РАМН В. А. Козлову, академику РАМН В. И. Коненкову, академику РАМН В. П. Пузыреву, члену-корреспонденту РАМН М. И. Воеводе, д.м.н., профессору А. С. Симбирцеву, д.м.н., профессору В. М. Перельмутеру, д.б.н., профессору JI. Ф. Гуляевой, д.м.н., профессору С. В. Сенникову, д.б.н., профессору В. В. Ляхович, д.б.н. И. Н. Лебедеву, д.м.н. В. Н. Максимову, д.м.н. М. В. Завьяловой, д.б.н. А. Ю. Гришановой, к.б.н. О. В. Головановой, к.б.н. А. В. Шевченко, к.м.н. Е. Ю.Гарбукову, к.б.н. О. Б. Горевой, к.м.н. С. В. Вторушину, к.б.н. Н. В. Литвякову, к.м.н. Н. Н. Бабышкиной, к.м.н. П. А. Гервас, к.б.н. Е. А. Малиновской, к.б.н. М. А. Булдакову, к.б.н. Е. В. Денисову, к.б.н. В. О. Пустыльняк, к.б.н. М. С. Назаренко, к.б.н. А. Н. Силкову, Я. В. Кухареву, Ю. Л. Кокориной, А. В. Дорошенко, Н. А. Тарабановской, А. С. Жовмер, Е. П. Горевой, Т. А. Серединой, В. О. Талабан, М. Ю. Салахутдиновой, сотрудникам клинической группы лаборатории иммунологии к.м.н. Л. В. Гердт, М. Г. Клебан и О. Г. Ермоленко за помощь, оказанную при проведении исследований и обсуждении результатов.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

АЛТ - адъювантная лучевая терапия АХТ - адъювантная химиотерапия ГТ - гормональная терапия ИОЛТ - интраоперационная лучевая терапия ИПС - иммунопатологический синдром ИРИ - иммунорегуляторный индекс ЛПС- липополисахарид ЛТ - лучевая терапия

МНПК - мононуклеарные клетки периферической крови ПАХТ - неоадьювантная химиотерапия

НСТ - нитросиний тетразолий РБТЛ - реакция бластсрансформации лимфоцитов РМЖ - рак молочной железы ФГА - фитогемагтлютинин ЦИК - циркулирующие иммунные комплексы САР - циклофосфан-адриамицин-5-фторурацил ССЛ - рецептор хемокина СО - кластер дифференцировки СМР - циклофосфан-метотрексат-5-фторурацил РАС - 5-фторурацил-адриамицин-цикпофосфан НЕЙ - рецептор эпителиального фактора роста человека 1Ш - интерферон - иммуноглобулин интерлейкин ЫК - естественные клетки-киллеры Ть - Т-хелперы

ТСР-р - трансформирующий фактор роста Р ТОТ-а - фактор некроза опухоли альфа

Тираж 100 экз. Заказ 1053. Томский государственный университет систем управления и радиоэлектроники. 634050, г. Томск, пр. Ленина, 40. Тел.(3822)533018.

Оглавление диссертации Стахеева, Марина Николаевна :: 2011 :: Томск

Введение.

ГЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1. Феномены и концепции участия иммунной системы в патогенезе РМЖ.

1.1.1. Противоопухолевая активность иммунной системы при РМЖ

1.1.2. Механизмы неэффективности противоопухолевой активности иммунной системы при РМЖ.

1.1.3 . Участие иммунной системы в прогрессии РМЖ.

1.1.4. Цитокины в патогенезе РМЖ.

1.1.5. Концепция иммунологического редактирования злокачественного роста.

1.1.6 Влияние противоопухолевого лечения на функционирование иммунной системы у больных РМЖ.

1.2. Системный уровень функционирования иммунной системы и его роль в патогенезе РМЖ.

1.2.1. Обеспечение антигенного гомеостаза организма.

1.2.2. Иммунная система - третья регуляторная система организма.

1.2.3. Подходы к оценке системного уровня функционирования иммунной системы.

1.3. Факторы прогноза РМЖ. заболеваний.

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 2.1. Клиническая характеристика больных.

2.2. Методы и схемы лекарственного лечения больных РМЖ.

2.2.1. Схемы конвенционального лечения.

2.2.2. Характеристика препарата беталейкина (рекомбинантного интерлейкина-1Р).

2.3. Методы исследования.•.

2.3.1. Методы исследования состояния иммунной системы.

2.3.2. Методы исследования полиморфизма генов.

2.4. Морфологическая характеристика опухолей, экспрессия рецепторов на опухолевых клетках.

2.5. Методы статистического анализа данных.

2.5.1. Метод визуализации многомерных данных.

2.5.2. Факторный анализ.

2.5.3. Дискриминантный анализ.

ГЛАВА 3. Исследование взаимосвязи состояния иммунной системы с клиническим течением РМЖ.

3.1. Обоснование модели исследования состояния иммунной системы у больных с различным клиническим течением РМЖ.

3.1.1. Гипотеза участия механизмов иммунной системы в исходе РМЖ.

3.1.2. Исследование показателей прогрессирования РМЖ.

3.1.3. Выявление факторов, влияющих на безрецидивную и безметастатическую выживаемость у больных РМЖ.

3.1.4. Оценка частоты встречаемости факторов, влияющих на длительность безрецидивного и безметастатического периода у больных РМЖ, в группах с различным исходом.

3.2. Различия в состояний иммунной системы как интегрированного целого у больных РМЖ в зависимости от клинического течения заболевания.

3.2.1. Обоснование необходимости целостного подхода в биологических исследованиях.

3.2.2. Сравнение многомерных образов, отражающих состояние иммунной системы у больных РМЖ без прогрессирования заболевания более 3-х лет и пациентов с развившимся в этот период метастазированием.

3.2.3. Механизмы, определяющие различия в состоянии иммунной системы у больных РМЖ<в зависимости от клинического течения заболевания.

3.3. Факторы внутренней организации морфофункционального состояния иммунной системы у больных РМЖ с различным клиническим течением заболевания.

3.3.1. Факторы, организующие функционирование иммунной системы у больных РМЖ до начала противоопухолевого лечения.

3.3.2. Факторы, организующие функционирование иммунной системы у больных РМЖ после 2 курсов НАХТ.

3.3.3. Факторы, организующие функционирование иммунной системы у больных РМЖ после завершения НАХТ.

3.3.4. Факторы, организующие функционирование иммунной системы у больных РМЖ после операции. лечения.1 / /

4.1. Факторы, определяющие различия в состоянии иммунной системы у больных РМЖ.

4.2. Структура факторов, влияющих на дисперсию показателей иммунной системы у больных РМЖ при проведении противоопухолевого лечения.

4.3. Структура иммунологических показателей, подвергавшихся дисперсии под воздействием факторов организма, опухоли и лечения.

4.4. Характеристика наиболее важных факторов, влияющих на вариативность состояния иммунной системы у больных РМЖ на этапах противоопухолевого лечения.

ГЛАВА 5. Генетическая регуляция функционирования иммунной системы у больных РМЖ.

5.1. Взаимосвязь полиморфизма генов цитокинов и белка-онкосупрессора Р53 с уровнем показателей иммунной системы у больных РМЖ при проведении противоопухолевого лечения.

5.2. Влияние генетического полиморфизма на уровень продукции цитокинов мононуклеарными клетками периферической крови у больных РМЖ на этапах противоопухолевого лечения.

ГЛАВА 6. Механизмы действия препарата рекомбинантного IL-ip беталейкина при применении у больных РМЖ.

6.1. Адаптогенные свойства беталейкина.

6.2. Влияние беталейкина на состояние иммунной системы у больных РМЖ на этапах противоопухолевого лечения.

6.3. Влияние беталейкина на показатели безрецидивной выживаемости у больных РМЖ.

ГЛАВА 7. Иммунологические механизмы противоопухолевого лечения.

ГЛАВА 8. Патогенетическое обоснование возможности использования оценки состояния иммунной системы для прогноза

8.1. Прогноз развития гематогенных метастазов у больных РМЖ.

8.2. Эффективность дискриминантной модели прогноза гематогенного метастазирования у больных РМЖ.

8.3. Клинические примеры.

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Стахеева, Марина Николаевна, автореферат

Актуальность проблемы:

Вопрос участия иммунной системы в патогенезе злокачественных новообразований стоит перед исследователями с момента открытия феномена иммунного ответа. Несмотря на богатый феноменологический материал [14, 15, 44, 45, 133, 139, 177, 182, 183, 245, 250, 255, 317, 347, 377, 380, 422] до настоящего времени суждения о роли иммунной системы в патогенезе большинства солидных злокачественных новообразований носят противоречивый характер [177, 317, 377]. С чем связана такая неоднозначная позиция в оценке влияния иммунной системы на опухолевый рост?

Во-первых, эволюционно взаимоотношения иммунной системы и опухоли складываются как амбивалентные [15, 16, 17]. Активность иммунной системы в отношении злокачественных клеток находит выражение в реализации, как минимум, двух вариантов развития событий - элиминации опухоли или содействии ее росту и прогрессии [139, 177, 317, 377]. Наличие противоопухолевой активности у иммунной системы при раке молочной железы (РМЖ) подтверждается тем, что снижение количества или функциональности специализированных эффекторов связано с более тяжелым клиническим течением заболевания, низкой эффективностью лечения и худшими показателями выживаемости. Подобная взаимосвязь показана как в отношении механизмов врожденного (NK-клетки, естественные антитела, полиморфизм генов TLR4) [250, 257], так и адаптивного иммунного ответа [245, 380].

Однако противоопухолевая активность иммунной системы во многих случаях неэффективна в результате ускользания опухоли из-под иммунологического контроля [10, 177, 317, 377]. При этом важное значение имеют механизмы толерантности, осуществляемые иммунной системой в отношении новообразования, возникающего, как известно, из клеток организма-хозяина. Среди наиболее важных супрессорных эффекторов следует отметить Т-регуляторные клетки и цитокины IL-10 и TGF-(3 [44, 177, 347].

Способствующую опухолевой прогрессии активность иммунной системы у больных РМЖ, в основном, связывают с механизмами хронического воспаления, реализация которого обеспечивается продукцией широкого спектра факторов, содействующих инвазии, неоангиогенезу и метастазированию опухоли. Эти процессы обусловлены функционированием макрофагов 2 типа, формированием Независимого иммунного ответа, нарушением баланса про- и противовоспалительных цитокинов, хемокинов [139, 183, 184, 255]. При этом иммунная система активна, и ее функционирование направлено на создание условий для поддержания опухоли.

Современная концепция иммунологического редактирования злокачественного роста рассматривает эти состояния - контроль опухолевого роста иммунной системой, равновесие между активностью опухоли и иммунной системой и избегание опухолью иммуно-опосредованных защитных механизмов со стороны хозяина - как смену последовательных фаз [377]. При этом предполагается, что иммунная система также последовательно меняет функциональную направленность от противоопухолевой к проопухолевой по мере генерализации процесса [12], что подразумевает определенную детерминированность состояния иммунной системы в зависимости от распространенности опухолевого процесса [33] и невозможность ее изменения.

Вторым аспектом, не позволяющим однозначно определить роль иммунной системы в патогенезе злокачественно роста, является множественность механизмов взаимо(противо)действия опухоли и иммунной системы [177, 377]. Большинство исследований направлено на выявление какого-либо одного ключевого механизма, определяющего про-или противоопухолевое действие иммунной системы. К настоящему времени сменилось несколько основных претендентов на место ключевого механизма: фагоциты, цитотоксические Т-лимфоциты, лимфокин-активированные лимфоциты, ЫК, интерфероны как противоопухолевые эффекторы, с одной стороны [245, 250, 257, 380], и опухолеассоциированные макрофаги, Т-регуляторные клетки, миелоидные супрессоры, провоспалительные цитокины как факторы содействия опухолевому росту, с другой стороны [139, 183, 184, 255]. Однако, само обилие выявляемых механизмов определенно указывает на существование многочисленных путей, направленных как на взаимо-, так и противодействие опухоли и иммунной системы. В каждую фазу взаимодействия одновременно функционируют механизмы той и другой направленности. Эффективное преобладание одной из них определяет общую стратегию иммунной системы. При изменении внешних или внутренних условий механизм, доминирующий на каком-либо этапе «естественной истории опухоли», может утратить свою значимость [377], и тогда возможно обращение фазы взаимодействия «опухоль-организм».

Следующая причина неоднозначности в оценке роли иммунной системы в патогенезе злокачественных новообразований заключена в том, что влияние иммунной системы на опухолевый процесс рассматривают преимущественно на уровне эффектов непосредственно в опухолевом микроокружении [139, 183, 184]. Иммунная система является одной из ключевых для поддержания гомеостаза организма и осуществляет жизненно важные функции, такие как обеспечение адаптации, естественной резистентности, противоинфекционной защиты, регуляции кроветворения и иммунопоэза, регенераторных возможностей [4, 37, 56, 78, 100]. Вследствие этого иммунная система способна оказывать воздействие на злокачественный процесс опосредованно, изменяя клинический статус пациента. Системный принцип организации требует оценки морфофункционального состояния иммунной системы как комплекса взаимосвязанных разнонаправленных функций, осуществляемых ею в целом на разных уровнях функционирования [374].

Не вызывает сомнений, что функции иммунной системы в существенной мере определяются генотипом организма. Индивидуальные различия связаны с нормальной генетической изменчивостью -полиморфизмом вовлеченных в функционирование иммунной системы генов, среди которых важное значение имеют гены основных медиаторов межклеточных взаимодействий - цитокинов [30, 180, 226, 414]. На функциональную компетентность иммунной системы онкологического больного, наряду со злокачественным процессом и генетическими вариациями, также может влиять наличие иммунопатологических синдромов инфекционно-аллергической или аутоиммунной природы, приобретенных в онтогенезе [377].

В настоящее время комбинированное противоопухолевое лечение является стандартом для большинства злокачественных новообразований. Лечение больных с операбельными формами РМЖ включает сочетанное или последовательное применение различных методов воздействия на опухоль с целью удаления первичного узла (неоадьювантная цитостатическая терапия, оперативное удаление опухоли) и профилактики метастазов (адьювантная химио-, радио- или гормонотерапия) [85, 86]. Противоопухолевое лечение оказывает выраженное влияние как на опухоль, так и на организм, в связи с чем его следует позиционировать как фактор патогенеза [257]. Рассматривая воздействие проводимого- лечения на иммунную систему, можно выделить два аспекта. Первый аспект заключается в том, что цитостатические средства способны модифицировать ответ иммунной системы на злокачественное новообразование. В частности, под влиянием ряда химиопрепаратов селективно удаляются клоны клеток, обладающих иммуносупрессивной активностью. Транзиторная лимфопения, вызываемая цитостатическим лечением, приводит, к индукции гомеостатической пролиферации иммунокомпетентных клеток [118, 167, 204, 223, 264, 420]. Второй аспект связан с вовлечением механизмов иммунной системы как необходимого звена в реализацию эффектов цитостатического лечения [256, 390]. Недавно появились доказательства, вскрывающие механизм вовлечения эффекторов естественной резистентности в опухолевый надзор. Показано, что индукция сигнального пути в ответ на повреждение ДНК в клетке под влиянием экзогенных и эндогенных генотоксических агентов приводит к экспрессии №С02Б лигандов, которые распознаются натуральными клетками-киллерами (№С) и у/8 Т-лимфоцитами, что приводит к запуску эффекторного ЫК, №СТ и Т-клеточного ответа на трансформированные клетки [106, 388]. Хроническая активация этого ответа, а также индукция еще целого ряда стресс-индуцированных молекул в опухолях при воздействии цитостатических агентов может вносить вклад в распознавание и уничтожение опухолевых клеток в процессе химиотерапии [64].

Амбивалентный характер взаимодействия иммунной системы с опухолью, множественность, разнонаправленность и динамичность этих путей, системный принцип функционирования позволяют употребить термин «стратегия функционирования иммунной системы» при осуществлении ею программы сдерживания опухолевого роста или содействия ему. При этом объективным клиническим критерием направленности стратегии может выступать наличие или отсутствие прогрессирования заболевания.

Таким образом, для адекватной оценки роли иммунной системы в патогенезе РМЖ следует учесть все выше перечисленные моменты. Стратегию иммунной системы следует оценивать на системном уровне функционирования, т.е. как интегрированного целого, включающего в себя * весь комплекс осуществляемых ею на разных уровнях функций. Для классификации про- или противоопухолевой стратегии, реализуемой иммунной системой у больных РМЖ, ее состояние должно быть исследовано во взаимосвязи с клинически подтвержденным исходом, а именно, благоприятным (без признаков прогрессирования) или неблагоприятным (прогрессирование, основным фатальным проявлением которого является гематогенное метастазирование [113]). При этом должна быть обеспечена релевантность групп сравнения по основным патогенетическим характеристикам процесса, влияющим на исход заболевания. Следует учитывать, что условия, в которых происходит формирование про- или противоопухолевой стратегии иммунной системы обеспечиваются в совокупности свойствами организма, опухоли и применяемых средств и методов лечения. Поскольку противоопухолевое лечение позиционируется как значимый фактор патогенеза РМЖ, оценку направленности стратегии иммунной системы необходимо проводить на каждом из основных этапов лечебных мероприятий. Комплексный подход, включающий клинические и экспериментальные исследования, а также адекватный аппарат математической обработки больших массивов данных предоставили возможность изучить роль иммунной системы в патогенезе РМЖ на этапах комбинированного лечения и ее влияние на исход заболевания.

Задачи исследования:

1. Обосновать методологический подход для исследования роли иммунной системы в патогенезе РМЖ.

5. Исследовать роль генетической регуляции на основе оценки полиморфизма патогенетически значимых генов в формировании про-и противоопухолевой стратегии иммунной системы у больных РМЖ.

В условиях in vitro при воздействии апоптоз-индуцирующих агентов, таких как моноклональные антитела к CD95 для индукции Fas-опосредованного апоптоза, моноклональные антитела к CD3 для индукции активационного апоптоза и цитостатического препарата вепезида, оценены показатели клеточной гибели и связанных с этим механизмов активации и пролиферации мононуклеарных клеток периферической крови. Показаны существенные различия в свойствах клеток периферической крови групп пациентов с разным исходом заболевания: возможность благоприятного исхода РМЖ связана не столько с устойчивостью клеток иммунной системы к индукции клеточной гибели, сколько с пролиферативной активностью и способностью восстанавливать количественные потери, т.е. с механизмами гомеостатической пролиферации при проведении цитостатического лечения.

Впервые на основе оценки широкого спектра морфофункциональных показателей иммунной системы, характеризующих ее эффекторный и регуляторный потенциал, показано различие организации внутрисистемных процессов ее функционирования в зависимости от особенностей клинического течения злокачественного процесса. Получены новые данные о генетической компоненте регуляции функционирования иммунной системы у больных РМЖ, при этом структура регуляторного паттерна «ген-эффект» изменяется в зависимости от характера воздействий, применяемых на этапах противоопухолевого лечения.

Выявлено, что уровень продукции цитокинов у больных РМЖ до лечения находится под преобладающим влиянием генов провоспалительных цитокинов. На этапе неоадъювантной химиотерапии (НАХТ) регуляция продукции цитокинов зависит от генов ССЯ5, р53 и ТОБ-р. После завершения лечения наибольшее значение имеет ген противовоспалительного цитокина 1Ь-10.

Показано, что использование препарата рекомбинантного 1Ь-1|3 беталейкина у больных РМЖ приводит к улучшению адаптационного статуса в процессе противоопухолевого лечения и увеличению периода безрецидивной выживаемости у пациенток с выраженной лимфогенной распространенностью процесса N2 (патент на изобретение № 2304445 «Средство, обладающее адаптогенным действием, и Способ подготовки больных раком молочной железы к проведению специфического противоопухолевого лечения с включением полихимиотерапии»). При этом эффект применения беталейкина связан с его влиянием на состояние иммунной системы.

Показана потенциальная возможность регуляции состояния иммунной системы проведением комбинированного лечения с целью влияния на характер клинического течения РМЖ и индивидуализации противоопухолевых мероприятий. Обоснована возможность использования препаратов, обладающих адаптогенным действием, для регуляции состояния иммунной системы на этапах противоопухолевого лечения.

Основные положения, выносимые на защиту:

2. Стратегическая направленность функционирования иммунной системы при РМЖ формируется в результате взаимодействия генетически детерминированных и функциональных параметров организма, клинико-патологических характеристик опухолевого процесса. Вариабельность иммунологических параметров у больных РМЖ, определяющая морфофункциональные возможности системы, до начала противоопухолевого лечения и через 1 год после его завершения, в основном, связана с индивидуальными особенностями организма (генотипические вариации в продукции патогенетически значимых цитокинов, морфофункциональная асимметрия, адаптационный статус, иммунопатологические состояния), на этапах противоопухолевого лечения - с параметрами опухолевого процесса (стадия, биологические свойства опухолевых клеток).

3. Состояние иммунной системы при РМЖ динамично: проведение специфического лечения (неоадъювантная химиотерапия, оперативное удаление первичной опухоли) способствует изменению проопухолевой стратегии иммунной системы на противоопухолевую. Механизмы, определяющие стратегию функционирования иммунной системы у больных РМЖ, связаны с характером воздействий, осуществляемых на этапах специфического лечения.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на Всероссийской конференции, посвященной памяти и 95-летию со дня рождения В.А.Пегеля (Томск, 2001), Всероссийской конференции «Компенсаторно-приспособительные процессы: фундаментальные и клинические аспекты» (Новосибирск, 2002), Обществе онкологов в (Томск 2003, 2005, 2007), на Объединенном Иммунологическом Форуме (Екатеринбург, 2004), на VIII, IX, XI Всероссийском научном форуме с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (С-Петербург, 2004, 2005, 2007), Всероссийской научно-практической конференции «Дни иммунологии в Сибири» (Красноярск, 2006), республиканской научной конференции «Создание новых лекарственных препаратов» (Томск, 2007), научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Сибири — 2008» (Томск, 2008), Четвертой всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов» (Новосибирск, 2009), Российской научно-практической конференции с международным участием «Проблемы современной онкологии» (Барнаул, 2009), Всероссийской научной конференции «Молекулярно-генетические основы функционирования цитокиновой сети в норме и при патологии» (Новосибирск, 2010), Siberian-Taiwan Forum: Tomsk Region and Taiwan: Experience of Scientific - Technical and Innovation Cooperation, 16-17 September (Tomsk, 2009), International conference "Tumor and host: novel aspects of old problem" (Kyiv, 2010).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 73 работы, в том числе 16 - в центральных журналах, рекомендованных "Перечнем." ВАК Минобрнауки, 2 в зарубежной печати. Получен патент на изобретение 2304445 «Средство, обладающее адаптогенным действием, и Способ подготовки больных раком молочной железы к проведению специфического противоопухолевого лечения с включением полихимиотерапии» (заявлено 20.10.2004, опубликовано 20.08.2007, Бюл. № 23). Получено положительное решение по заявке № 2010129630 от 3.05.2011 (приоритет от 15. 07. 2010) на изобретение «Способ прогнозирования гематогенного метастазирования у больных раком молочной железы, основанный на оценке состояния иммунной системы при проведении противоопухолевого лечения».

Заключение диссертационного исследования на тему "Роль иммунной системы в патогенезе рака молочной железы при комбинированном лечении"

ВЫВОДЫ:

Обоснованием для исследования роли иммунной системы в патогенезе РМЖ является оценка системного уровня ее функционирования у больных с различным исходом заболевания и равноценность групп сравнения по частоте присутствия основных факторов, определяющих характер клинического течения заболевания.

Оценка системного уровня функционирования иммунной системы позволила выявить существенные различия, ассоциированные с благоприятным (состояние без признаков прогрессирования более 3-х лет с момента установления диагноза) и неблагоприятным (развитие гематогенного метастазирования в эти же сроки) течением заболевания. Различия в состоянии иммунной системы наблюдались до начала противоопухолевого лечения, на этапах его проведения (НАХТ, оперативное вмешательство) и через 1 год после завершения лечебных мероприятий.

При исследовании внутрисистемной организации иммунной системы у больных РМЖ показано ведущее значение активности Т-клеточного звена на всех этапах исследования. Проведение НАХТ ассоциировано с увеличением влияния процессов пролиферации, апоптоза и утилизации циркулирующих антигенов в структуре внутрисистемной организации. Основным отличием организации функционирования иммунной системы у больных РМЖ, характеризующихся благоприятным течением заболевания, является выраженный вектор цитотоксических эффекторных реакций. Неблагоприятное течение РМЖ связано с обособлением в отдельный функциональный вектор гуморального звена системы иммунитета при проведении противоопухолевого лечения. В условиях моделирования in vitro индукции апоптоза моноклональными антителами к CD3, CD95 и цитостатиком вепезидом было показано, что у больных с длительным периодом без прогрессирования заболевания максимальные значения клеточной гибели отмечены на этапе НАХТ, для пациенток с развившимся впоследствии прогрессированием РМЖ - после завершения лечения. Обеспечение длительного периода без прогрессирования заболевания связано с более высоким пролиферативным потенциалом мононуклеарных клеток периферической крови, а не их чувствительностью к апоптоз-индуцирующим воздействиям со стороны опухоли и противоопухолевого лечения.

5. Преобладающее влияние опухоли, организма или мероприятий лечения на вариабельность показателей иммунной системы у больных РМЖ зависит от этапа наблюдения. До начала лечения и через 1 год после его завершения доминировало влияние особенностей организма (морфофункциональная асимметрия, генотип, адаптационный статус, наличие иммунопатологического синдрома): доля иммунологических показателей, дисперсия которых зависела от параметров организма, составляла 71 % и 65 % соответственно. В процессе лечения наибольшее воздействие оказывали характеристики опухолевого процесса (влияние на 55 % показателей после завершения НАХТ). Эффект проведенного лечения на состояние иммунной системы пациенток был наиболее выражен после его завершения (65 % показателей иммунной системы).

6. Полиморфизм генов цитокинов 1Ь-10592СА и Т0р-[3509СТ оказывает влияние на длительность безрецидивной выживаемости у пациенток с РМЖ на уровне тенденции (р=0,09 и р=0,08 соответственно). Более высокие показатели безрецидивной выживаемости отмечены у носительниц гомозиготных вариантов ТвР 509 СС и 1Ь-10 592 АА.

7. Регуляция продукции цитокинов у больных РМЖ осуществляется как на уровне аллельных вариантов кодирующих генов, так и комплекса патогенетически значимых для РМЖ генов цитокинов близкой или противоположной функциональной направленности. До лечения преобладает влияние гена провоспалительного цитокина 1Ь-1[3. На этапе НАХТ уровень продукции цитокинов зависит от аллельного полиморфизма генов CCR5, р53 и TGF-J3. После завершения лечения доминирует регуляторное влияние гена противовоспалительного цитокина IL-10.

8. Наибольшая вариабельность показателей иммунной системы у больных РМЖ на всех этапах лечения и в период динамического наблюдения связана с полиморфизмом генов IL-4 590СТ и TGFB1 509СТ. У носительниц генотипа TGF-|3 ТТ, ассоциированного с высоким уровнем экспрессии данного иммуносупрессорного цитокина, снижены количественные показатели субпопуляций лимфоцитов (CD22+ до лечения, CD56+ после 2 курсов НАХТ, CD8+ после операции) и функциональная активность нейтрофилов после завершения лечения.

9. Проведение специфической терапии способствует изменению проопухолевой стратегии иммунной системы на противоопухолевую. Наибольшая доля пациенток, характеризовавшихся благоприятным для длительной клинической ремиссии состоянием иммунной системы, отмечена при проведении НАХТ (38% после 2 курсов и 29% после 3-4 курсов) и удалении первичного опухолевого узла (32%). Изменение стратегии иммунной системы связано с увеличением вариативных возможностей механизмов, связанных с эффекторами иммунной системы (CD4/CD8, CD4, CD56, CD25, пролиферативная активность, IgA, IgM) в ответ на модификацию биологических свойств опухоли (экспрессия рецепторов, степень злокачественности, чувствительность к цитостатическим воздействиям) под влиянием цитостатических воздействий.

11. Включение в схему противоопухолевого лечения препарата рекомбинантного цитокина IL-lp беталейкина способствует улучшению адаптационного статуса у больных РМЖ: по окончании НАХТ доля неблагоприятных реакций переактивации и стресса у пациенток, получавших беталейкин, составила 18% по сравнению с 50% в контрольной группе (р<0,01). Применение препарата у больных РМЖ с неблагоприятным прогнозом (вовлечение в опухолевый процесс более 4-х регионарных лимфатических узлов) приводило к увеличению периода безрецидивной выживаемости в отличие от контрольной группы: 60%-ная безрецидивная выживаемость в группе применения беталейкина составила 55 месяцев по сравнению с 32 месяцами в группе контроля. Данный эффект препарата был связан с его влиянием на состояние иммунной системы.

12. На основании оценки состояния иммунной системы возможен индивидуальный прогноз развития гематогенного метастазирования у больных РМЖ в течение 3-х лет с момента установления диагноза и его коррекция на этапах противоопухолевого лечения. Чувствительность модели прогноза составляет 67 - 100 % в зависимости от этапа, уровень прогностической значимости отрицательного результата - отсутствия риска развития метастазов в ближайшие 3 года от момента установления диагноза - от 89 % до 100%.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ:

- до начала лечения: CD4/CD8, Ig М, CD8, Ig А; после завершения 2 курсов НАХТ: CD4/CD8, спонтанная активность нейтрофилов, Ig М, Ig А; - после завершения 3-4 курсов НАХТ: CD4/CD8, Ig A, CD8; после оперативного удаления первичного опухолевого узла: спонтанная активность нейтрофилов, Ig A, CD4/CD8. 3. Процедуру оценки стратегической направленности функционирования иммунной системы следует включить в комплекс мероприятий динамического наблюдения у больных РМЖ с целью своевременного выявления признаков прогрессирования заболевания.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Стахеева, Марина Николаевна

1. Акмаев, И. Г. Взаимодействие нервных, эндокринных и иммунных механизмов мозга / И. Г. Акмаев // Журнал невропатологии и психиатрии.-2001.-Т. 21, №3.-С. 16-18. '

2. Анализ молекулярного взаимодействия в системе IL-1(3 IL-IRA - IL-1R / Л. В. Ковальчук, Б. H. Соболев, Л. В. Ганковская, А. А. Юдин. // Иммунология. - 2001. -№ 1. - С. 6-10.

3. Анализ фармакологических средств на модели апоптоза лимфоцитов человека in vitro в норме и при иммунопатологии / Л. В. Ковальчук, А. С. Павлюк, А.А. Каспаров и др. // Аллергология и иммунология. 2000. -Т. 1, № 1. - С. 24-30.

4. Арзуманов, А. С. Современная лучевая диагностика и комплексное лечение больных раком молочной железы с высоким риском прогрессирования / А. С. Арзуманов. СПб., 2002. - 40 с.

5. Атауллаханов, Р. И. Иммунитет и инфекция: динамическое противостояние живых систем / Р. И. Атауллаханов, А. Л. Гинзбург // Детские инфекции. 2005. - Т. 4, № 1. - С. 11-21.

6. Балицкий, К. П. Стресс и метастазирование злокачественных опухолей / К. П. Балицкий, Ю. П. Шмалько. Киев: Наукова думка, 1987. - 248 с.

7. Барышников, А. Ю. Иммунологические проблемы апоптоза / А. Ю. Барышников, Ю. В. Шишкин. М.: Эдиториал УРСС, 2002. - 320 с.

8. Бережная, Н. М. Иммунология злокачественного роста / Н. М. Бережная, В. Ф. Чехун. Киев: Наукова думка, 2005. - 791 с.

9. Бережная, Н. М. Интерлейкины и формирование иммунологического ответа при злокачественном росте / Н. М. Бережная // Аллергология и иммунология. 2000. - Т. 1., № 1. - С. 45-56.

10. Бережная, Н. М. Система интерлейкинов и рак / Н. М. Бережная, В. Ф. Чехун. Киев: Наукова думка, 1998. - 189 с.

11. Боровиков, В. П. STATISTICA® Статистический анализ и обработка данных в среде Windows® / В. П. Боровиков, И. П. Боровиков. - М.: Информационно-издатальский дом «Филинъ», 1998. - 608 с.

12. Ветлугина, Т. П. Методика определения иммунных комплексов в сыворотке крови больных шизофренией: Методические рекомендации / Т. П. Ветлугина. Томск, 1986. - 10 с.

13. Ветлугина, Т.П. Клиническая иммунология в психиатрии и наркологии / Т. П. Ветлугина, С. А. Иванова, Т. И. Невидимова. Томск, 2001. - 92 с.

14. Влияние длительного введения синтетического дипептида на функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов в эксперименте in vivo / И. В. Нестерова, Н. В. Колесникова, А. С. Симбирцев, JI. В. Ломатидзе // Иммунология. 1999. - №6. - С.40-43.

15. Влияние иммунологических параметров на эффективность системной и локо-регионарной иммунотерапии больных диссеминированным раком почки / А. М. Гранов, О. Е. Молчанов, М. И. Карелин и др. // Вопросы онкологии. 2009. - Т. 55, № 5. - С. 580-585.

16. Влияние ладастана на пролиферативную активность и апоптоз Т-лимфоцитов периферической крови / Ю. В. Вахитова, С. В. Сибиряк, Н. Н. Курчатова, С. Б. Середенин // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2002. - Т. 65, № 6. - С. 49-52.

17. Воспалительная форма рака молочной железы (предсказывающие и прогностические факторы эффективности первичной химиотерапии) / В. Ф. Семиглазов, К. Ю. Зернов, А. А. Божок и др. // Вопросы онкологии. 2007. - Т. 53, № 1. - С. 21 - 25.

18. Гадецкая, H.A. Субпопуляции B-лимфоцитов у больных раком молочной железы: ЬЕ°-специфичные В-клетки. / Н. А. Гадецкая, Л. Ю. Гривцова, 3. Г. Кадагидзе // Маммология. 2006. - № 2. - С. 63-67.

19. Гаркави, Л. X. Антистрессорные реакции и активационная терапия. Реакция активации как путь к здоровью через процессысамоорганизации / JI. X. Гаркави, Е. Б. Квакина, Т. С. Кузьменко. М.: «ИМЕДИС», 1998. - 658 с.

20. Геном человека и гены предрасположенности: Введение в предиктивную медицину / В. С. Баранов, Е. В.Баранова, Т. Э. Иващенко и др. СПб.: Интермедика, 2000. - 272с.

21. Гольдберг, Е. Д. Препараты из растений в комплексной терапии злокачественных новообразований / Е. Д. Гольдберг, Е. П. Зуева. -Томск: Издательство Томского университета, 2000. 130 с.

22. Гранов, А. М. Канцерогенез и иммунобиология опухоли. Фундаментальные и клинические аспекты / А. М. Гранов, О. Е. Молчанов // Вопросы онкологии. 2008. - Т. 54, № 4. - С. 401-409.

23. Действие интерлейкина-2 на апоптоз и функциональную активность лимфоцитов человека в условиях воздействия цитостатиков in vitro // М. П. Потапнев, Е. П, Вашкевич, В. П. Савицкий и др. // Вопросы онкологии . 2005. - Т. 51, № 6. - С. 697-702.

24. Железнякова, Г. Ф. Инфекция и иммунитет: стратегии обеих сторон / Г. Ф. Железнякова // Медицинская иммунология. 2006. - Т. 8, № 5-6. -С. 597-614.

25. Завьялова, М. В. Особенности течения рака молочной железы в зависимости от морфологического варианта опухоли и фоновыхдисплатсических процессов: авторефер. дис. канд. мед. наук / М. В. Завьялова. Томск, 2004. - 21 с.

26. Закономерности структурной организации систем жизнеобеспечения в норме и при развитии патологического процесса / Е. Д. Гольдберг, А. М. Дыгай, В. В. Удут и др. Томск: Издательство Томского университета, 1996. - 304 с.

27. Иберла, К. Факторный анализ. Математико-статистические методы за рубежом / К. Иберла. М.: Статистика, 1980. - 398 с.

28. Иммунологические параметры и уровень продукции цитокинов у больных с пролиферативными заболеваниями и раком молочной железы / Н. Н. Бабышкина, М. И. Стахеева, Е. М. Слонимская и др. // Цитокины и воспаление. 2006. - Т.5, №1. - С. 37-43.

29. Иммунорегуляторные субпопуляции Т-клеток при опухолевом росте и аллергических заболеваниях / В. С. Свиридова, В. В. Климов, А. А. Денисов и др. // Сибирский онкологический журнал. 2010. - Т. 39, № З.-С. 38-48.

30. Имянитов, Е. Н. Молекулярные механизмы опухолевого роста / Е. И. Имянитов // Вопросы онкологии. 2010. - Т. 56, № 2. - С. 117-128.

31. Ингибиторные рецепторы лимфоцитов и их роль в противоопухолевом иммунтитете / И. Р. Закеева, А. Е. Бережной, И. В. Гнучев и др. // Вопросы онкологии. 2007. - Т. 53, № 2. - С. 140-149.

32. Использование интерлейкина-1(3 для местного лечения больных с трофическими язвами нижних конечностей венозной этиологии / С. В. Петров, А. С. Симбирцев, Н. А. Бубнова и др. // Медицинская иммунология. 2001. - Т. 3, № 4. - С.533-539.

33. Кадагидзе, 3. Г. Иммунорегуляторные СБ25+СБ4+ Т-клетки / 3. Г. Кадагидзе, А. И. Черткова, Е. Г. Славина // Российский биотерапевтический журнал. 2006. - Т. 5, № 2. - С. 13-20.

34. Кадагидзе, 3. Г. Цитокины / 3. Г. Кадагидзе. // Практическая онкология. -2003.-Т. 4., № 3. С.131-139.

35. Каира, Ф. Паутина жизни. Новое научное понимание живых систем / Ф. Капра. К.: София; М.: ИД «Гелиос», 2002. - 336 с.

36. Кетлинский, С. А. Современные аспекты изучения цитокинов / С. А. Кетлинский // Russian Journal of Immunology. 1999. - Vol. 4. - P. 4652.

37. Ким, Дж.-О. Факторный, дискриминантный и кластерный анализ / Дж.-О. Ким, Ч. У. Мьюллер, У. Р. Клекка. М.: Финансы и статистика, 1989.-216 с.

38. Кистенев, Ю. В. Интегральная оценка газовыделений биосистем / Ю. В. Кистенев, В. А. Фокин, Д. В. Эйдензон. Томск: Издательство ТГУ, 2011. - в печати.

39. Клиническая иммунология и аллергология: учебно-методическое пособие / В. В. Климов, Е. Н. Кологривова, Н. А. Черевко, А. А. Денисов. Томск: «Иван Федоров», 2006. - 180 с.

40. Клиническая психонейроиммунология / В. Я. Семке, Т. П. Ветлугина, Т. И. Невидимова и др. Томск: РАСКО, 2003. - 300с.

41. Козлов, В. А. Гомеостатическая пролиферация лимфоцитов в аспекте иммунопатогенеза различных заболеваний / В. А. Козлов // Иммунология. 2006. - № 6. - С. 378-382.

42. Козлов, В. А. Некоторые аспекты проблемы цитокинов / В. А. Козлов // Цитокины и воспаление. 2002. - № 1. - С. 5-9.

43. Комплексное изучение значимости факторов прогноза, характеризующих иммунный ответ и опухоль при раке желудка / В. В. Бугров, О. В. Абсалямова, Р. Ф. Савкова, Н. М. Козлова // Вопросы онкологии. 2006. - Т. 52, № 3. - С. 301-304.

44. Корнева, Е. А. Введение в иммунофизиологию / Е. А. Корнева. СПб.: ЭЛБИ-СПб., 2003. -310 с.

45. Краткосрочная рестимуляция in vitro как модель активационного апоптоза периферических Т-клеток человека / О. Ю. Леплина, М. А. Тихонова, Л. В. Сахно и др. // Иммунология. 2000. - № 1. - С. 30-32.

46. Лазарев, Н. В. Сопоставление неспецифических защитных реакций, влияющих на генерализацию инфекций и метастазирование опухолей / Н. В. Лазарев // Вопросы онкологии. 1962. - № 11. - С. 20-28.

47. Ланг, Н. Р. Стимуляция лимфоцитов / Н. Р. Ланг. М.: Медицина, 1976. -288 с.

48. Лихтенштейн, А. В. Рак как программируемая гибель организма / А. В. Лихтенштейн // Биохимия. 2005. - Т. 70, № 9. - С. 1277-1288.

49. Меньшиков, В. В. Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник / В. В. Меньшиков. М.: Медицина. - 1987. - 367 с.

50. Методы постановки реакции бласттрансформации в микромодификации / В. В. Хоробрых, А. В. Пронин, А. Ф. Киркин, А.

51. B. Санин // Иммунология. 1983. - № 3. - С. 76-79.

52. Михайлова, Н. Б. Беталейкин (rhIL-1) как протектор гемопоэза при интенсивной полихимиотерапии / Н. Б. Михайлова, С. А. Кетлинский, А. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. 2003. - Т. 2, № 3. - С. 2831.

53. Молекулярные механизмы взаимодействия опухоли и иммунной системы / А. Е. Бережной, Н. В. Гнучев, Г. П. Георгиев и др. // Вопросы онкологии. 2008. - Т. 54, № 6. - С. 669-683.

54. Молчанов, О. Е. Прогнозирование эффективности лечения диссеминированных форм почечноклеточного рака на основе молекулярного мониторинга / О. Е. Молчанов, А. М. Гранов // Материалы XII Российского онкологического конгресса. М., 2008.1. C. 11-16.

55. Нейромедиаторы мозга в контроле иммунного ответа. Фармакологический анализ пре- и постсинаптических механизмов / JI. В. Девойно, Г. В. Идова, Е. А. Альперина, М. А. Чейдо // Бюлл. СО РАМН. 1992. - -№1. - С. 74-79.

56. Неравномерное вовлечение CD4+ и CD8+ и высокая чувствительность к нему СОЗО+клеток крови здоровых лиц и больных с иммунопатологией / Т. Ю. Григорьева, М. Ф. Никонова, М. И. Варфоломеева и др. // Иммунология. 2002. - № 5. - С. 262-267.

57. Нервная и иммунная система в канцерогенезе / В. В. Абрамов, Д. Н. Егоров, В. К. Вардосанидзе, В. А. Козлов. Новосибирск: Издательство СО РАМН, 1998.-102с.

58. Окулов, В. Б. Роль макрофагов в опухолевом росте / В. Б. Окулов, Б. О. Войтенков // Вопросы онкологии. 1990. - Т.36, №10. - С. 1170-1178.

59. Онкогенетические аспекты рака молочной железы / В. П. Харченко, В.

60. B. Кешелава, Г. О. Шайхаев, О. С. Ходорович // Маммология. 2007. -№ 1. - С. 8-9.

61. Оптимизация оценки иммунного статуса человека на основе применения метода главных компонент/ Е. JI. Гельфгат, А. А. Останин, Е. Р.Черных, В. И. Коненков // Медицинская иммунология. 2002. -Т.4, № 1.-С. 65-73.

62. Пат. 2128706 Россия C12N15/24, C12N15/25, А61К38/20, А61К45/05, C12N15/25, C12R1:19. Иммуномодулирующий препарат «Беталейкин» /

63. C. А. Кетлинский, А. С. Симбирцев, А. М. Ищенко и др. (Россия); НИИ ОЧБ (Россия) № 98107188/13; Заявлено 23.04.1998; Опубл. 10.04.1999.

64. Пат. 20090252436 США. Method for visualization of multidimensional data / D. V. Eidenzon, V. A. Volovodenko (Канада); NovoSpark Corporation (Канада). 2009.

65. Пашинский, В. Г. Проблемы онкологической фармакотерапии / В. Г. Пашинский, К. В. Яременко. Томск: Издательство Томского университета, 1983. - 204 с.

66. Полиморфизм промоторного региона генов IL-4, IL-6 и IL-10 у пациенток с раком молочной железы / А. В. Шевченко, О. В. Голованова, М. Ю. Коломейчук и др. // Медицинская иммунология. -2009.-Т. 11, № 1.-С. 21-28.

67. Проблемы диагностики и классификации вторичных иммунодефицитов / В. С. Ширинский, Н. М. Старостина, Ю. А.Сенникова, О. А. Малышева // Аллергология и иммунология. 2000. - Т. 1, № 1. - С. 6270.

68. Прогностические и предсказательные факторы при раке молочной железы / А. А. Божок, В. Ф. Семиглазов, В. В. Семиглазов и др. // Вопросы онкологии. 2005. - Т. 51, № 4. - С.434-443.

69. Регуляторные Т-клетки при доброкачественных и злокачественных опухолях яичников / Е. В. Курганова, М. А. Тихонова, Е. Г.Ласкавая и др. // Иммунология. 2009. - № 6. - С. 349-355.

70. Резникова, Л. С. Комплемент и его значение в иммунологических реакциях / Л. С. Резникова. М.: Медицина. - 1967. - 272 с.

71. Роль макрофагов в регуляции процесса миграции гемопоэтических стволовых клеток в системе костный мозг периферическая кровь / Б. Г. Юшков, И. Г. Данилова, И. А. Пашина и др. // Медицинская иммунология. - 2010. - Т. 12, № 1-2. - С. 7-12.

72. Селье, Г. Очерки об адаптационном синдроме / Г. Селье. М.: МЕДГИЗ, 1960.-254 с.

73. Семиглазов, В. Ф. Меняющаяся роль хирургического и системного лечения операбельного рака молочной железы / В. Ф. Семиглазов // Материалы VI ежегодной Российской онкологической конференции. -М., 2002.-С.10-12.

74. Семиглазов, В. Ф. Неинвазивные и инвазивные опухоли молочной железы / В. Ф. Семиглазов, В. В. Семиглазов, А. Е. Клецель. СПб., 2006. - С. 6-266.

75. Симбирцев, А. С. Цитокины новая система регуляции защитных реакций организма / А. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. -2002.-Т. 1, № 1. - С. 9-16.

76. Симбирцев, А. С. Цитокины семейства интерлейкина-1: новые возможности системной и местной иммунотерапии / А. С. Симбирцев // Иммунология Урала: материалы II конференции иммунологов Урала. -2002. -№ 1.-С. 58.

77. Содержание сывороточных цитокинов у онкологических больных при иммуно- и полихимиотерапии с применением альфа-фетопротеина человека / С. Ю. Родионов, В. А. Черешнев, Е. Г. Орлова и др. // Цитокины и воспаление. 2007. - Т. 6, № 3. - С.36-39.

78. Стандартизация методов иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга человека / А. А. Тотолян, И. А. Балдуева, JI. Н. Бубнова и др.// Клинич. лабор. дагностика. 2001. - № 8. - С. 38-45.

79. Стимулирующее и протекторное влияние рекомбинантного интерлейкина-1 ß (беталейкина) на лейкопоэз при химиотерапии злокачественных опухолей / М. JI. Гершанович, С. А. Кетлинский, JI. В. Филатова и др.// Вопросы онкологии 1996. - Т. 42, № 6. - С. 13-18.

80. Суспицын, E.H. Повреждение хромосомы 17 в билатеральных опухолях молочной железы: дис. .канд. мед. наук. / Е. Н. Суспицын-М., 2002. -19 с.

81. Таксаны в неоадъювантной химиотерапии рака молочной железы / А.

82. A. Божок, В. Ф. Семиглазов, А. Е. Клецель и др. // Вопросы онкологии. -2006.-Т. 52, № 1.-С. 7-11.

83. Телетаева, Г. М. Цитокины и противоопухолевый иммунитет / Г. М.Телетаева // Практическая онкология. 2007. - Т.8, № 4. - С. 211218.

84. Тугуз, А. Р. Соотношение основных цитокинов в крови онкологических больных и здоровых доноров / А. Р. Тугуз, Н. Ю. Анисимова, М. В. Вершинина // Иммунология. 2003. - Т.З. - С. 184-186.

85. Фрейдлин, И. С. Регуляторные Т-клетки: происхождение и функции / И. С. Фрейдлин // Медицинская иммунология. 2005. - Т. 7, № 4. - С. 347-354.

86. Хайленко, В. А. Ранняя диагностика рака молочной молочной железы /

87. B. А. Хайленко // Материалы VI ежегодной Российской онкологической конференции. М., 2002. - С. 1 - 3.

88. Хмелевский, Е. В. Альтернативные (не цитотоксические) стратегии противоопухолевой терапии / Е. В. Хмелевский, В. П. Харченко // Вопросы онкологии. 2006. - Т. 52, № 2. - С. 215-222.

89. Цитокин-зависмые механизмы Т-клеточных дисфункций при хирургическом сепсисе / Е. Р. Черных, Е. В. Курганова, В. В. Сенюков и др. // Цитокины и воспаление. 2005. - № 2. - С. 45-53.

90. Чередеев, А. Н. Развитие патогенетического принципа оценки иммунной системы человека / А. Н. Чередеев, JI. В. Ковальчук // Журнал микробиологии. 1997. -№ 6. - С. 89-92.

91. Швембергер, И. Н. Апоптоз: роль в нормальном онтогенезе и патологии / И. Н. Швембергер, JI. Б. Гинкул // Вопросы онкологии. -2002. Т. 48, № 2. - С. 153-158.

92. Ярилин, А. А. Естественные регуляторные Т-клетки и фактор FOXP3 / А. А. Ярилин, А. Д. Донецкова // Иммунология. 2006. - № 3. - С. 176188.

93. Ярилин, А. А. Основы иммунологии: Учебник / А. А. Ярилин. М.: Медицина, 1999. - 608с.

94. Abercrombie, М. Contact inhibition in tissue culture / M. Abercrombie // In Vitro. 1970. - № 6. - P. 128-142.

95. A comparative study between T regulatory type 1 and CD4+CD25+ T cells in the control of inflammation / A. Foussat, F. Cottrez, V. Brun et al. // J. Immunol.-2003.-Vol. 171.-P. 5018-5026.

96. Activation of NK cells and T cells by NKG2D, a receptor for stress-inducible MICA / S. Bauer, V. Groh, J. Wu et al. // Science. 1999. - Vol. 285.-P. 727-729.

97. Aguirre-Ghiso, J.A. Models, mechanisms and clinical evidence for cancer dormancy / J.A. Aguirre-Ghiso // Nat. rev. cancer. 2007. - Vol. 7. - P. 834-846.

98. Ahmad, A. HIV's evasion of host's NK cell response and novel ways of its countering and boosting anti-HIV immunity / A. Ahmad, R. Ahmad // Current fflV Res. 2003. - Vol. 1, № 3. - P. 295-307.

99. Alterations of Smad signaling in human breast carcinoma are associated with poor outcome: a tissue microarray study / W. Xie, J. Mertens, D. Reiss et al. // Cancer Research. 2002. - Vol. 62. - P. 497-505.

100. American Cancer Society. Breast Cancer Facts and Figures 2003-2004 / Atlanta GA, USA. 2004. - P. 5.

101. An activating immunoreceptor complex formed by NKG2D and DAP 10 / J. Wu, Y. Song, A. D. Bakker et al. // Science. 1999. - Vol. 285. - P. 730 -732.

102. Andrada-Mena, C. E. Inhibition of y-interferon synthesis by cathecholamines / C. E. Andrada-Mena // J. Neuroimmunol. 1997. - Vol. 76, № 1-2. -P.10-14.

103. Anisman, H. Cytokines, stress and depressive illness: brain-immune interactions. / H. Anisman, Z. Merali / Ann Med. 2003. - Vol. 35, № 1. -P. 2-11.

104. A novel functional polymorphism in the transforming growth factor-beta2 gene promoter and tumor progression in breast cancer / J. Beisner, M. Buck, P. Fritz et al. // Cancer Res. 2006. - Vol. 66, No. 15. - P.7554-7561.

105. Antagonists of tumor-specific immunity: tumor-induced immune suppression and host genes that co-opt the anti-tumor immune response / S.

106. Ostrand-Rosenberg, P. Sinha, E. A. Danna et al. // Breast. Dis. 2004. -Vol. 20.-P. 127-35.

107. Antigen-dependent intrathecal antibody synthesis in the normal rat brain: Tissue entry and local retention of antigen-specific B cells / P. M. Knopf, Ch. Harling-Berg, H. F. Cserr et al.// J. Immunol. 1998. - Vol. 161. - №2. -P. 692-701.

108. Antigen-driven oligoclonal expansion of tumor-infiltrating B cells in infiltrating ductal carcinoma of the breast / J. A. Coronelía, C. Spier, M. Welch et al. // J. Immunol. 2002. - Vol. 169. - P. 1829-1836.

109. Antimetastatic and antitumor activities of interleukin 10 in a murine model of breast cancer / N. Kundu, T. Beaty, M. Jackson, A. Fulton // J. Natl. Cancer Inst. 1996. - Vol.88. - P.536-541.

110. Antitumor cytotoxic T-lymphocyte response in human lung carcinoma: identification of a tumor-associated antigen / F. Mami-Chouaib, H. Echchakir, G. Dorothee et al. // Immunol. Rev. 2002. - Vol. 188. - P. 114121.

111. A polymorphism of the interleukin-1 gene influences survival in pancreatic cancer / M. D. Barber, J. J. Powell, S. F. Lynch et al. // Br. J. Cancer. -2000. -V.83.- P. 1443-1447.

112. Apoptosis resistant bronchoalveolar lavage (BAL) fluid lymphocytes in sarcoidosis / H. Stridh, A. Planck, D. Gigliotti et al. // Thorax. 2002. -Vol. 57.-P. 897-901.

113. Apoptotic signaling through the beta-adrenergic receptor. A new Gs effector pathway / C. Gu, Y. C. Ma, J. Benjamin et al. // J. Biol. Chem. 2000. -Vol. 275, № 27. - P. 20726-20733.

114. Association of accelerated erosive rheumatoid arthritis with a polymorphism that alters NF-kappaB binding to the TNF promoter region / I. Udalova, A. Richardson, A. Ackerman et al. // Rheumatology. 2002. - Vol. 41. - P. 830-831.

115. Association of interleukin IB gene polymorphism and gastric cancers in high and low prevalence regions in China / Z-R. Zeng, P-J. Hu, S. Hu et al. // Gut. 2003. - Vol.52. - P. 1684-1689.

116. Association of interleukin-6 and other biologic variables with depression in older people living in the community / A. N. Dentino, C. F. Pieper, M. K. Rao et al. // J. Am. Geriatr. Soc. 1999. - Vol. 47. - P. 6-11.

117. Association of macrophage infiltration with angiogenesisand prognosis in invasive breast carcinoma / R. D. Leek, C. E. Lewis, R. Whithouse et al. // Cancer Res. 1996. - Vol. 56. - P. 4625-4629.

118. Association of tumour necrosis factor alpha and its receptors with thymidine Phosphorylase expression in invasive breast carcinoma / R. Leek, R. Landers, S. Fox et al. // Br. J. Cancer. 1998. - Vol.77. - P.2246-2251.

119. Association of a tumor necrosis factor promoter polymorphism with susceptibility to alcoholic steatohepatitis / J. Grove, A. Daly, M. Bassendine, C. Day // Hepatology. 1997. - Vol.26. - P.232233.

120. Autoantibodies in breast cancer: their use as aid to early diagnosis / C. Chapman, A. Murrey, J.Chakrabarti et al. // Annals of oncology. 2007. -Vol. 18, № 5.-P. 868-873.

121. Bacacs, T. Breast and other cancer dormancy as a therapeutic endpoint: speculative recombinant T cell receptor ligand (RTL) adjuvant therapy worth considering? / T. Bacacs, J. N. Mehrishi // BMC Cancer. 2010. -Vol. 10.-P. 251 -256.

122. Balkwill, F. Inflammation and cancer: back to Virchow? / F. Balkwill, A Mantovani // Lancet. 2001. - Vol. 357. - P. 539-545.

123. Balkwill, F. Tumor necrosis factor or tumor promoting factor? / F. Balkwill // Cytokine Growth Factor Rev. 2002. - Vol. 13. - P. 135-141.

124. Barnes, K. Parasite evolution and the immune system / K. Barnes // Allergy clin. Immunol. Int. J. World Allergy Org. - 2005. - Vol. 7. - P. 29-236.

125. Basu, S. Dopamine, a neurotransmitter, influences the immune system / S. Basu, P. S. Dasgupta // J Neuroimmunol. 2000. - Vol. 102, № 2.-P. 11324.

126. B cells inhibit induction of T cell dependent tumor immunity / Z. Qin, G. Richter , T. Schuler et al. / Nature Med. 1998. - Vol. 4. - P. 627-630.

127. Ben-Baruch, A. Inflammatory cells, cytokines and chemokines in breast cancer proression: reciprocal tumor-microenvironment interactions/ A. Ben-Baruch // Breast Cancer Res. 2003. - Vol. 5. - P. 31-36.

128. Benson, J. Role of TGFb in the anti-estrogen response/resistance of human breast cancer / J. Benson, M. Baum, A. Colletta // J. Mamm. Gland. Biol. Neoplasia. 1996. - Vol. 1, № 4. - P.381-389.

129. Bergquist, J. Identification of catecholamines in the immune system by electrospray ionization mass spectrometry / J. Bergquist, J. Silberring // Rapid Commun. Mass Spectrom. 1998. - Vol. 12. - P. 683-688.

130. Beta-catenin regulates the expression of the matrix metalloproteinase-7 in human colorectal cancer / T. Brabletz, A. Jung, S. Dag et al. // Am. J. Pathol. -1999.-Vol.155.-P.1033-1038.

131. Bianchi, M. E. High-mobility group box 1 (HMGB1) protein at the crossroads between innate and adaptive immunity / M. E. Bianchi, A. A. Manfredi // Immunol. Rev. 2007. - Vol. 220. - P. 35-46.

132. Binder, R. J. Peptides chaperoned by heat-shock proteins are a necessary and sufficient source of antigen in the cross-priming of CD8+ T cells / R. J. Binder, P. K. Srivastava // Nature Immunol. 2005- Vol.6. - P. 593-599.

133. Bohn, J. Are natural antibodies involved in tumor defence? / J. Bohn // Immunol. Lett. 1999. - Vol. 69. - P. 317-320.

134. Boon, T. Human tumor antigens recognized by T lymphocytes / T. Boon, P. van der Bruggen // J. Exp. Med. 1996. - Vol. 183. - P. 725-729.

135. Boshoff, C. AIDS-related malignancies / C. Boshoff, R. Weiss // Nat. Rev. Cancer. 2002. - Vol. 2. - P. 373-382.

136. Boyum, A. Separation of leukocytes from blood and bone marrow / A. Boyum // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1968. - Vol. 21, Spl. 97. - P. 1-9.

137. Breast cancer vaccines: a clinical reality or fairy tale? / G. Curigliano , G. Spitaleri , E. Pietri et al. // Ann. Oncol. 2006. - Vol. 17, № 5. - P. 750762.

138. Broad tumor-associated expression and recognition by tumor-derived gamma delta T cells of MICA and MICB / V. Groh, H. R. Rhine, H. Secrist et al.// Proc. Natl. Acad. Sci. (USA). 1999. - Vol. 96. - P. 6879 - 6884.

139. Brodsky, M. Stealth, sabotage and exploitation / M. Brodsky // Immunol. Rev. 1999.-Vol. 168.-P. 5-11.

140. Brower, V. Researchers attempting to define role of cytokines in cancer risk / V. Brower // Journal of the National Cancer Institute. 2005. - Vol.97, № 16.-P. 1175-1177.

141. Buyru, N. P53 codon 72 polymorphism in breast cancer / N. Buyru, H. Tigli, N. Dalay // Oncol. Rep. 2003. - Vol.10. - P.711-714.

142. Calreticulin exposure dictates the immunogenicity of cancer cell death / M. Obeid, A. Tesniere , F. Ghiringhelli et al.// Nature Med. 2007. -Vol. 13. P. 654-661.

143. Calreticulin exposure is required for the immunogenicity of y-irradiation and UVC lightinduced apoptosis / M. Obeid, T. Panaretakis , N. Joza et al. // Cell Death Differ. 2007. - Vol. 14. - P. 1848-1850.

144. Cancer chemotherapy-induced lymphocytosis: a revolutionary discovery in the medical oncology / P. Lissoni, L. Fumagalli, F. Brivio et al. // J. Biol. Regul. Homeost. Agents. 2006. - Vol. 20, № 1-2. - P. 29-35.

145. Cancer regression and autoimmunity in patients after clonal répopulation with antitumor lymphocytes / M. E. Dudley, J. R. Wunderlich, P. F. Robbins et al. // Science. 2002. - Vol. 298. - P. 850-854.

146. Cancer regression in patients after transfer of genetically engineered lymphocytes / R. A. Morgan, M. E. Dudley, J. R. Wunderlich et al. // Science. 2006. - Vol. 314, № 5796.-P. 126-129.

147. Cancer risk after renal transplantation in the Nordic countries 1964 1986 / S. A. Birkeland, H. H. Storm, L. U. Lamm et al. // Int. J. Cancer. - 1995. -Vol. 60.-P. 183-189.

148. Caspase-dependent immunogenicity of doxorubicin-induced tumor cell death / N. Casares, M. O. Pequignot , A. Tesniere et al. // J. Exp. Med. -2005.-Vol. 202.-P. 1691-1701.

149. Catecholamines are synthesized by mouse lymphocytes and regulate function of these cells by induction of apoptosis / E. Josefsson, J. Bergquist, R. Ekman, et al. // Immunology. 1996. -Vol. 88. - P. 140-146.

150. CC-chemokine receptor CCR5-del32 mitation as a modifying patogenetic factor in type I diabetes /1. Kalev, K. Oselin, P. Parlist et al. // J. Diabetes Complications. -2003. Vol.17, No.6. - P. 387-391.

151. CCR5 expression influences the progression of human breast cancer in a p53- dependent manner / S. Manes, E. Mira, R. Colomer et al. // J. Exp. Med. 2003. - Vol.198, № 9. p.1381-1389.

152. Cell stress-regulated human major histocompatibility complex class I gene ezpressed in gastrointestinal epithelium / V. Groh, S. Bahram, S. Bauer et al.// Proc. Natl. Acad. Sci.(USA). 1996. - Vol. 93. - P. 12445 - 12450.

153. Cell-surface calreticulin initiates clearance of viable or apoptotic cells through transactivation of LRP on the phagocyte / S. J. Gardai, K. A. McPhillips, S. C. Frasch et al. // Cell. -2005. Vol. 123. - P. 321-334.

154. Cellular immunity in breast cancer patients completing taxane treatment / W. E. Carson 3rd, C. L. Shapiro, T. R. Crespin et al. // Clin. Cancer Res. -2004. Vol. 10. - P. 3401-3409.

155. Chan, O. T. The immunological effects of taxanes./ O. T. Chan, L. X. Yang // Cancer Immunol. Immunother. 2000. - Vol. 49. - P. 181-185.

156. Circadian rhythm of leucocytes and lymphocyte subsets and its possible correlation with the function of the autonomic nervous system / S. Suzuki, S. Toyabe, T. Moroda et al // Clin, and Exp. Immunol. 1997. - Vol. 110, № 3.-P. 500-508.

157. Clinical relevance of HER-2 amplification and overexpresion in human cancers / F. J. Esteva, L. Pusztai, W. F. Symmans et al. // Ref. Gynecol. Obstet. 2000. - Vol. 7. - P. 267-276.

158. Colombo, M. P.Targeting myelomonocytic cells to revert inflammation-dependent cancer promotion / M. P. Colombo, A. Mantovani // Cancer Res. 2005. - Vol. 65. - P. 9113-9116,

159. Combination of imatinib mesylate with autologous leukocyte-derived heat shock protein and chronic myelogenous leukemia / Z. Li, Y. Qiao, B. Liu et al. // Clin. Cancer Res. 2005,- Vol. 11. - P. 4460-4468.

160. Competitive prognostic value of clinicopathologic and bioimmunologic factors in primary breast cancer / K. Hacene, A. Desplaces, M. Brunet et al. // Cancer. 1986. - Vol. 57. - P. 245-250.

161. Conditional overexpression of active transforming growth factor betal in vivo accelerates metastases of transgenic mammary tumors / R. Muraoka-Cook, H. Kurokawa, Y. Koh et al. // Cancer Res. 2004. - Vol.64, No.24. -P.9002-9011.

162. Correlation between plasma transforming growth factor-beta 1 and second primary breast cancer in a chemoprevention trial / A. Decensi, R. Torrisi, V. Fontana et al. // Eur. J. Cancer. 1998. - Vol.34, No.7. - P.999-1003.

163. Correlation of stress factors with sustained depression of natural killer cell activity and predicted prognosis in patients with breast cancer / S. Levy, R. Herberman, M. Lippman, T. d'Angelo // J. Clin. Oncol. 1987. - Vol. 5. -P. 348-353.

164. Curiel, T. J. Treg and rethinking cancer immunotherapy / T. J. Curiel // The Journal of Clinical Investigation. 2007. - Vol. 117, № 5. - P. 1167-1174.

165. Cytokine gene polymorphisms and breast cancer susceptibility and prognosis / K. C. Smith, A. C. Bateman, H. M. Fussell, W. M. Howell // Eur. J. Immunogenet. 2004. - Vol.31. - P. 167-173.

166. Cytokine gene polymorphisms, cancer susceptibility, and prognosis / W. M. Howell, M. J. Rose-Zerilli // J. Nutr. 2007. - Vol. 137. - P. 194S-199S.

167. Cytokine gene polymorphisms in patients infected with hepatitis B virus / Z. Ben-Ari, E. Mor, O. Papo et al. // Am. J. Gastroenterol. 2003. - Vol. 98, № 1. - P.144-150.

168. Dantzer, R. Molecular mechanisms of fever: the missing links / R. Dantzer, E. Wollman // Eur. J. Netw. 1998. - Vol. 9, № 1. - P.27-31.

169. DeNardo, D. G. Inflammation and breast cancer. Balancing immune response: crosstalk between adaptive and innate immune cells during breast cancer progression / D. G. DeNardo, L. M. Coussens // Breast Cancer Res. -2007. Vol. 9, № 4. - P. 212-220.

170. DeNardo, D. G. Immune cells as mediators of solid tumor metastasis D. G. DeNardo, M. Johansson, L. M. Coussens // Cancer Metastasis Rev. 2008. -Vol. 27, № l.-P. 11-18.

171. Dendritic cells fused with allogeneic breast cancer cell line induce tumor antigen-specific CTL responses against autologous breast cancer cells / Y. Zhang, B. Ma, Y. Zhou et al. // Breast Cancer Res. Treat. 2007. - Vol. 105, №3-P. 277-286.

172. Dendritic cells loaded with killed breast cancer cells induce differentiation of tumor-specific cytotoxic T lymphocytes / E.-M. Neidhardt-Berard, F. Berard, J. Banchereau, A. K. Palucka // Breast Cancer Res. 2004. - Vol. 6, № 4 - P. 322-328.

173. Determination of TGFbetal protein level in human primary breast cancers and its relationship with survival / S. Desruisseau, J. Palmari, C. Giusti et al. // Br. J. Cancer. 2006. - Vol.94, No.2. - P.239-246.

174. Different transcriptional activity and in vitro TNF-alpha production in psoriasis patients carrying the TNF-alpha 23 8A promoter polymorphism / W. Kaluza, E. Reuss, S. Grossmann et al. // J. Invest. Dermatol. 2000. -Vol.114.-P.1180-1183.

175. Dinarello, C. A. Interleukin-1, interleukin-1 receptors and interleukin-1 receptor antagonist / C. A. Dinarello // Int. Rev. Immunol. 1998. - Vol. 16, №5-6.-P. 457-499.

176. Dinarello, C.A. IL-18: A TH1-inducing, proinflammatory cytokine and new member of the IL-1 family / C.A. Dinarello // J. Allergy Clin. Immunol. -1999.-Vol. 103, № l.-P. 11-24.

177. Dinarello, C.A. Interleukin-18 / C.A. Dinarello // Methods. 1999. - Vol. 19. - P. 121-132.

178. Dinarello, C. A. Therapeutic strategies to reduce IL-1 activity in treating local and systemic inflammation / C. A. Dinarello // Curr. Opin. Pharmacol. -2004,-№4.-P. 378-385.

179. Dinarello, C. A. Blocking IL-1 in systemic inflammation / C. A. Dinarello // J. Exp. Med. 2005. - Vol.201, № 9. - P. 1355-1359.

180. Disruption of the antiproliferative TGF-beta signaling pathways in human pancreatic cancer cells / A. Villanueva, C. Garcia, A. Paules et al. // Oncogene. 1998. - Vol. 17. -P. 1969-1978.

181. Dopamine D2-like receptors on human peripheral blood lymphocytes: a radioligand binding assay and immunocytochemical study / F. Amenta, E. Bronzetti, L. Felici, et al. // J. Auton. Pharmacol. 1999. - Vol. 19. - P. 151-159.

182. Dopamine Dl-like receptor subtypes in human peripheral blood lymphocytes / A. Ricci, E. Bronzetti, F. Mignini et al. // J. Neuroimmunol. 1999. - Vol. 96. - P. 234- 240.

183. Dopamine receptor expression on human T- and B-lymphocytes, monocytes, neutrophils, eosinophils and NK cells: a flow cytometric study / F. McKenna, P. J. McLaughlin, B. J. Lewis et al. // J. Neuroimmunol. 2002. -Vol. 132.-P. 34-40.

184. Duffy, M. J. Predictive mareks in breast and other cancers: a review / M. J. Duffy // Clinical Chemistry. 2005. - Vol. 51, № 3. - P. 494-503.

185. Ecto-calreticulin in immunogenic chemotherapy / M. Obeid, A. Tesniere, T. Panaretakis et al.// Immunol. Rev. 2007. - Vol. 220. - P. 22-34.

186. Effects of infiltrating lymphocytes and estrogen receptor on gene expressionand prognosis in breast cancer / A. Calabro, T. Beissbarth, R. Kuner et al. //

187. Breast Cancer Research & Treatment. 2009. - Vol. 116, № 1. -P. 69-77. i '

188. Effects of a polymorphism in the human tumor necrosis factor alpha promoter on transcriptional activation / A. G. Wilson, J. A. Symons, T. L. McDowell et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. - Vol.94, № 7. - P. 3195-3199.

189. Effects of relaxation and stress on the capsaicin-induced local inflammatory response / S. K. Lutgendorf, H. Logan, L. Kirchneret et al // Psychosomatic. Medicine. 2000. - Vol. 62. - P. 524-534.

190. Ehrke, M. J. Immunomodulation in cancer therapeutics / M. J. Ehrke // International Immunopharmacology. 2003. - Vol. 3, № 8. - P. 1105-1119.

191. Eidenzon, D. Multidimensional data visualization and analysis with NovoSpark® Visualizer / D. Eidenzon, D. Shamroni, V. Volovodenko.

192. Электрон. дан. Режим доступа:http://www.tsu.ru/storage/iro/k020410/s4/s4.doc.

193. Elevated expression of the CC chemokine regulated on activation, normal T cell expressed and secreted (RANTES) in advanced breast carcinoma / G. Luboshits, S. Shina, O. Kaplan et al. // Cancer Res. 1999. - Vol.59. -P.4681-4687.

194. Elevated Fas expression is related to increased apoptosis of circulating CD8+ T cell in patients with gastric cancer / T. Yoshikawa, H. Saito, T. Osaki et al. // J. Surg. Res. 2008. - Vol. 148, № 2. - P. 143-151.

195. Elevated serum interleukin-6 (IL-6) and IL-6 receptor concentrations in posttraumatic stress disorder following accidental man-made traumatic events / M. Maes, A. H. Lin, L. Delmeire et al. // Biol. Psychiatry. 1999. -Vol. 45.-P. 833-839.

196. Emens, L. A. Breast cancer vaccines: maximizing cancer treatment by tapping into host immunity / L.A. Emens, R.T. Reilly, E.M. Jaffee // Endocrine Related cancer. 2005. - Vol. 12. - P. 1-17.

197. Emergence of antitumor cytolytic T cells is associated with maintenance of hematologic remission in children with myeloid leukemia / D. Montagna, R. Maccario, F. Locatelli et al. // Blood. 2006. - Vol. 108, N. 12. - P. 38433850.

198. Endotoxin-induced serum factor that stimulates gamma interferon production / K. Nakamura, H. Okamura, M. Wada et al. // Infect. Immun. -1989. Vol.57, № 2. - P. 590-595.

199. Estradiol and progesterone strongly inhibit the innate immune response of mononuclear cells in newborns / E. Giannoni, L. Guignard, R. M. Knaup et al. // Infect. Immun. 2011. - Vol. 79, № 7. - P. 2690-2698.

200. Estrogen receptor determination and long term survival of patients with carcinoma of the breast / J. P. Crowe Jr, N. H. Gordon, C. A. Hubay et al. //

201. Surg. Gynecol. Obstet. 1991. - Vol. 173. - P. 273-278.

202. Evidence for immune defects in breast and lung cancer patients /1. Caras, A. Grigorescu, C. Stavaru et al. // Cancer Immunol. Immunother. 2004. - Vol. 53, № l.-P. 1146-1152.

203. Evidence that continued remission in patients treated for acute leukaemia is dependent upon autologous natural killer cells / M. W. Lowdell, R. Craston, D. Samuel et al. // Br. J. Haematol. 2002. - Vol. 117. - P. 821-827.

204. Evidence that stress and surgical interventions promote tumor development by suppressing natural killer cell activity / S. Ben-Eliyahu, G. G. Page, R. Yirmiya, G. Shakhar // Int. J. Cancer. 1999. - Vol. 80. - P. 880-888.

205. Expression of interleukin-lbeta in human breast carcinoma / L. Jin, R. Yuan, A. Fuchs et al. // Cancer. 1997. - Vol.80, № 3. - P.421-434.

206. Feldman, J. D. Immunological enhancement: a study of blocking antibodies / J. D. Feldman // dv. Immunol. 1972. - Vol. 15. - P. 167-214.

207. Fibbe, W.E. Regulation of hematopoesis by interleukin-1 / W.E. Fibbe, J. H. F. Falkenburg // Biotherapy. 1990. - Vol. 2. - P. 1-19.

208. Frequency and nature of cytokine gene polymorphisms in hepatocellular carcinoma in Hong Kong Chinese / M. Heneghan, P. Johnson, M. Clare et al. // Int. J. Gastrointest. Cancer. 2003. - Vol.34, No.l. - P. 19-26.

209. Functional analysis of linker-scan mutants spanning the -376, -308, -244, and -238 polymorphic sites of the TNF-alpha promoter / J. P. Bayley, H. de Rooij, P. J. van den Elsen et al. // Cytokine. 2001. - Vol.14. -P.316-323.

210. Functional variants in the promoter of interleukin-lbeta are associated with an increased risk of breast cancer: a case-control analysis in a Chinese population / J. Liu, X. Zhai, G. Jin et al. // Int. J. Cancer. 2006. - Vol.118, № 10.-P.2554-2558.

211. Gemcitabine selectively eliminates splenic Gr-l+/CDllb+ myeloid suppressor cells in tumor-bearing animals and enhances antitumor immune activity / E.Suzuki, , V. Kapoor, A. S. Jassar et al. // Clin. Cancer Res. -2005. Vol. 11.-P. 6713-6721.

212. Gene expression patterns of breast carcinomas distinguish tumor subclasses with clinical implications / T. Sorlie, C.M. Perou, R. Tibshirani et al.// Proc Natl. Acad. Sci. USA. 2005. - Vol. 98. - P. 10869-10874.

213. Gene expression profiling predicts clinical outcome of breast cancer/ L. J. Van't Veer, H. Dai, M. J. van de Vijver et al. // Nature. 2002. - Vol. 415.-P. 530-536.

214. Genes other than BRCA1 and BRCA2 involved in breast cancer susceptibility / M. M. de Jong, I. M. Nolte, G. J. le Meerman et al. // J. Med. Genet. 2002. - V.39. - P.225-242.

215. Genetic heterogeneity and penetrance analysis of the BRCA 1 and BRCA 2 genes in breast cancer families / D. Ford, D. Easton, M. Stratton et al. // Am. J. Hum. Genet. 1998. - Vol.62. - P. 676-89.

216. Genetic polymorphisms in the TGF-B1 gene and breast cancer survival / X-O. Shu, Y-T. Gao, Q. Cai et al. // Cancer Research. 2004. - Vol.64. - P. 836-839.

217. Genetic polymorphisms of selected DNA repair genes, estrogen and progesterone receptor status, and breast cancer risk / K. M. Lee, J.Y. Choi, C. Kang et al. // Clin. Cancer Res. 2005. - Vol. 11, № 12. - P. 4620^1626.

218. Genetic polymorphisms of the transforming growth factor-betal gene and breast cancer risk: a possible dual role at different cancer stages / A. Shin, X. O. Shu, Q. Cai et al. // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2005. - Vol. 14, №6.-P. 1567-1570.

219. Genetic restriction of HIV-1 infection and progression to AIDS by a deletion allele of the CRR5 structural gene / M. Dean, M. Carrington, C. Winkler et al.//Science. 1996.-Vol. 273.-P. 1856-1862.

220. Genetic variation at the chemokine receptors CCR5/CCR2 in myocardial infarction / P. Gonzalez, R. Alvarez, A. Batalla et al. // Genes Immun. -2001.-Vol. 2.-P. 191-195.

221. Genetic variation in the tumor necrosis factor-alpha promoter region and in the stress protein hsp70-2: susceptibility and prognostic implications inbreast carcinoma / S. Mestiri, N. Bouaouina, S. Ahmed et al. // Cancer. -2001.-Vol. 91.-P. 672-678.

222. Genetic variation in tumor necrosis factor and lymphotoxin-alpha (TNF-LTA) and breast cancer risk / M. M. Gaudet, K. M. Egan, J. Lissowska et al. // Hum. Genet. 2007. - Vol. 121. - P. 483-490.

223. Glucocorticoid upregulation of interleukin 1 receptor expression in a glioblastoma cell line / P. E. Gottschall, K. Koves, K. Mizuno et al. // Am. J. Physiol. 1991. - Vol. 261, № 3. - P. 362-368.

224. Gooch, J. L. Interleukin 4 inhibits growth and induces apoptosis in human breast cancer cells / J. L. Gooch, A. V. Lee, D. Yee // Cancer Res. 1998. -Vol. 58. - P.4199-4205.

225. Gorelik, L. Mechanism of transforming growth factor beta-induced inhibition of T helper type 1 differentiation / L. Gorelik, S. Constant, R. Flavell // J. Exp. Med. 2002. - Vol. 195. - P. 1499-1505.

226. Hadden, J. W. The immunology and immunotherapy of breast cancer: an update / J. W. Hadden // Int. J. Immunopharmacol. 1999. - Vol. 21. - P. 79-101.

227. Hadden, J. W. Immunodeficiency and cancer: prospects for correction / J. W. Hadden // Int. Immunopharmacol. 2003. - Vol. 3, № 8. - P. 10611071.

228. HER-2/neu in node-negative breast cancer: prognostic significance of overexpression influenced by the presence of in situ carcinoma / D. C. Allred, G. M. Clark, A. K. Tandon et al. // J. Clin. Oncol. 1992. - Vol. 10. -P. 599-605.

229. High incidence of interleukin 10 mRNA but not interleukin 2 mRNA detected in human breast tumours / E. Venetsanakos, I. Beckman, J. Bradley, J. Skinner // Br. J. Cancer. 1997. - Vol. 75, № 12. - P. 1826-1830.

230. Homozygous defect in HIV-l-coreceptor accounts for resistance of some multiply-exposed individuals to HIV-1 infection / R. Liu, W. Paxton, S. Choe et al. // Cell. 1996. - Vol. 86. - P. 367-377.

231. Horlock, C. The effects of trastuzumab on the CD4+CD25+FoxP3+ and CD4+IL17A+ T-cell axis in patients with breast cancer /C. Horlock, B. Stott, P. J. Dyson // Br. J. Cancer. 2009. - Vol. 100, № 7. - P. 1061-1067.

232. Hornychova, H. Tumor-infiltrating lymphocytes predict response to neoadjuvant chemotherapy in patients with breast carcinoma / H. Hornychova, B. Melichar , M. Tomsova // Cancer Invest. 2008. - Vol. 26, № 10.-P. 1024-1031.

233. Houghton, A. N. Immune recognition of self in immunity against cancer / A. N. Houghton, J. A. Guevara-Patico // J. Clin. Invest. 2004. - Vol. 114. -P. 468-471.

234. HPLC-ED measurement of endogenous catecholamines in human immune cells and hematopoietic cell lines / M. Cosentino, R. Bombelli, M. Ferrari, et al. // Life Sci. 2000. - Vol. 68. - P. 283-295.

235. Human breast cancer: correlation of relapse and survival with amplification of the HER-2/neu oncogen / D. J. Slamon, G. M. Clark, S. G. Wong et al. // Science. 1987.-Vol. 235.-P. 177-182.

236. Humoral immunity to human breast cancer: antigen definition and quantitative analysis of mRNA expression / M. J. Scanlan, I. Gout, C. M. Gordon et al. // Cancer Immun. 2000. - Vol. 1. - P. 4-20.

237. IL-lbeta suppresses prolonged Akt activation and expression of E2F-1 and cyclin A in breast cancer cells / W. H. Shen, S. T. Jackson, S. R. Broussard et al. // J. Immunol. 2004. - Vol.172, No. 12. - P.7272-7281.

238. IL-2 immunotoxin therapy modulates tumor-associated regulatory T cells and leads to lasting immune-mediated rejection of breast cancers in neu-transgenic mice / K. L. Knutson, Y. Dang, H. Lu et al. // J. Immunol. 2006. -Vol. 177.-P. 84-91.

239. IL-18 regulates IL-1-beta-dependent hepatic melanoma metastasis via vascular cell adhesion molecule-1 / F. Vidal-Vanaclocha, G. Fantuzzi, L. Mendoza et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. 2000. - Vol. 97. - P.734-739.

240. Immune changes in patients with advanced breast cancer undergoing chemotherapy with taxanes / N. Tsavaris, C. Kosmas, M. Vadiaka et al. // Br. J. Cancer. 2002. - Vol. 87. - P. 21-27.

241. Immune defects in breast cancer patients after radiotherapy / L. J. Standish, C. Torkelson, F. A. Hamill et al. // J. Soc. Integr. Oncol. 2008. - Vol. 6, № 3.-P. 110-121.

242. Immune dysfunction and micrometastases in women with breast cancer / M. J. Campbell, J. Scott, H. T. Maecker et al. // Breast Cancer Res. Treat. -2005.-Vol. 91.-P. 163-171.

243. Immunological aspects of cancer chemotherapy / L. Zitvogel, L. Apetoh, F. Ghiringhelli, G. Kroemer // Nature reviews immunology. 2008. - Vol. 8. -P. 59-73.

244. Imyanitov, E. N. Mechanisms of breast cancer / E. N. Imyanitov, K. P. Hanson // Drug discovery today: disease mechanisms. 2004. - Vol. 1, № 2. -P. 235-245.

245. Increased serum IL-6 and IL-1 receptor antagonist concentrations in major depression and treatment resistant depression / M.Maes, S. Masson, S. Lyoumi et al. // Cytokine. 1995. - Vol. 9. - P. 853-858.

246. Increase of regulatory T cells in the eripheral blood of cancer patients / A. M. Wolf, D. Wolf, M. Steurer et al. // Clinical Cancer Research. 2003. -Vol. 9. P. 606-612.

247. Induction chemotherapy for breast carcinoma: predictive markers and relation with outcome / F. Penault-Llorca, A. Cayre, F. Bouchet Mishellay et al. // Int. J. Oncol. 2003. - Vol. 22. - P. 1319-1325.

248. INF-gamma-inducing factor/IL-18 administration mediates IFNgamma and IL-12-independent antitumor effects / T. Osaki, J. Peron, Q. Cai et al. // J. Immunol. 1998. - Vol.160. -P.1742-1749.

249. Inhibition of CCR5 Expression by IL-12 Through Induction of (3-chemokines in Human T Lymphocytes / J. Wang, E. Guan, G. Roderiquez et al. // The Journal of Immunology. 1999. - Vol. 163. - P. 5763-5769.

250. Inhibition of CD4+25+T regulatory cell function implicated in enhanced immune response by low-dose cyclophosphamide / M. E Lutsiak, R. T. Semnani, R. de Pascalis et al. // Blood. 2005. - Vol. 105. - P. 28622868.

251. Inhibitory effect of Toll-like receptor 4 on fusion between phagosomes and endosomes/lysosomes in macrophages / A. Shiratsuchi, I. Watanabe, O. Takeuchi et al. // J. Immunol. 2004. -Vol. 172. - P. 2039-2047.

252. Inman, G. Stoichiometry of active smad-transcription factor complexes on DNA / G. Inman, C. Hill // J. Biol. Chem. 2002. - Vol. 277. - P. 5100851016.

253. Innate immune surveillance of spontaneous B cell lymphomas by natural killer cells and gammadelta T cells / S. E. Street, Y. Hayakawa, Y. Zhan et al. // J. Exp. Med. 2004. - Vol. 199. - P. 879-884.

254. Interleukin gene polymorphisms and breast cancer: a case control study and systematic literature review / S. Balasubramanian, I. Azmy, S. Higham et al. // BMC Cancer. 2006. - Vol. 188, № 6.- P. 188.

255. Interleukin-1 and interleukin-6 gene polymorphisms and the risk of breast cancer in women / L. A. Hefler, C. Grimm, T. Lantzsch et al. // Clin. Cancer Res.-2005.-Vol.15.-P.5718-5721.

256. Interleukin-18 gene promoter polymorphisms and the risk of esophageal squamous cell carcinoma / Y. Wei, Y. Lan, Y. Liu et al. // Acta Oncol. -2007. Vol. 46, № 8. - P. 1090-1096.

257. Intratumoral delivery of encapsulated IL-12, IL-18 and TNF-alpha in a model of metastatic breast cancer / M. S. Sabel , G. Su , K. A. Griffith , A. E. Chang // Breast Cancer Res. Treat. 2010. - Vol. 122, № 2. - P. 325-336.

258. Involvement of catecholamines in recall of the conditioned NK cell response / C. M. Hsueh, J. S. Kuo, S. F. Chen et al.// J Neuroimmunol. 1999. - Vol. 94, № 1-2.-P. 172-181.

259. Involvement of p38 MAP kinase in TGF-beta-stimulated VEGF synthesis in aortic smooth muscle cells // T. Yamamoto, O. Kozawa, K. Tanabe et al. // J. Cell Biochem.-2001.-Vol. 82.-P. 591-598.

260. Jacobs, E. J. Polymorphisms in the vascular endothelial growth factor gene 0 and breast cancer in the Cancer Prevention Study II cohort / E. J. Jacobs, H. S. Feigelson, E. B. Bain // Breast Cancer Research. 2006. - Vol. 8, №2.

261. Juang, C. M. Regulatory T cells: potential target in anticancer immunotherapy / C. M. Juang, C. F. Hung, J. Y. Yeh // Taiwan. J. Obstet. Gynecol. 2007. - Vol. 46, № 3. - P. 215-221.

262. Kabelitz, D. Features and functions of gamma delta T lymphocytes: focus on chemokines and their receptors / D. Kabelitz, D. Wesch // Crit. Rev. immunol. 2003. - Vol. 23. - P. 339-370.

263. Kang, D. H. Significant impairment in immune recovery after cancer treatment / D. H. Kang, M.T. Weaver, N. J. Park // Nurs. Res. 2009. - Vol. 58, №2.-P. 105-114.

264. Klein, G. Toward a genetics of cancer resistance / G. Klein // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2009. - Vol. 106. - P. 859-863.

265. Lacosta, S. Central monoamine activity following acute and repeated systemic interleukin-2 administration / S. Lacosta, Z. Merali, H. Anisman // Neuroimmunomodulation. 2000. - Vol. 8, № 2. - P. 83-90.

266. Lewis, C. E. Distinct role of macrophages in different tumor microenvironments / C. E. Lewis, J. W. Pollard // Cancer Res. 2006. -Vol. 66, №2.-P. 605-612.

267. Local radiation therapy of B16melanoma tumors increases the generation of tumor antigen-specific effector cells that traffic to the tumor / A. A. Lugade, J. P. Moran, S. A. Gerber et al. // J. Immunol. 2005. - Vol. 174. - P. 75167523.

268. Low natural cytotoxicity of peripheral blood mononuclear cells in individuals with high familial incidences of cancer / D. R. Strayer, W. A. Carter, S. D. Mayberry et al. // Cancer Res. 1984. - Vol. 44. - P. 370-374.

269. Lymphocyte subpopulations in patients with advanced breast cancer submitted to neoadjuvant chemotherapy / E. F. Murta, J. M. de Andrade, R. P. Falcao, S. Bighetti // Tumori. 2000. - Vol. 86, № 5. - P. 403-407.

270. Lytic effector cell activity and major depressive disorder in patients with breast cancer: a prospective study / G. Sachs, S. Rasoul-Rockenschaub, H. Aschauer et al. // J. Neuroimmunol. 1995. - Vol. 59. - P. 83-89.

271. MacDonald, S. Prognostic factors for local control after breast conservation: does margin status still matter? / S. MacDonald, G. A. Taghian // Journal of Clinical Oncology. 2009. - Vol. 27, № 30. - P. 4929-4930.

272. Madden, K.S. Catecholamine influences and sympathetic neural modulation of immune responsiveness / K. S. Madden, V. M. Sanders, D. L. Felten // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 1995. - Vol.35. - P.417-448.

273. Makrigiannis, A. P. Regulation natural killer function / A. P. Makrigiannis, S. K. Andeerson // Cancer Biology & Therapy. 2003. - Vol. 2, № 6. - P. 610-616.

274. Martin, G.S. Cell signaling and cancer / G. S. Martin // Cancer Cell. 2003. -Vol. 4.-P. 167-174.

275. Matera, L. Endocrine, paracrine and autocrine actions of prolactin on immune cells / L. Matera // Life Sci. 1996. - Vol. 59, № 8. - P. 599-614.

276. Mehrishi, J. N. Some aspects of the recombinantly expressed humanized superagonist anti-CD28 mAb, TGN1412 trial catastrophe lessons to safeguard mAbs and vaccine trials / J. N. Mehrishi, M. Szabo, T. Bacacs // Vaccine. 2007. - Vol. 25. - P. 3517-3523.

277. Melief, C. J. Lessons from T cell responses to virus induced tumours for cancer eradication in general / C. J. Melief, W. M. Kast // Cancer Surv. -1992.-Vol. 13.-P. 81-99.

278. Méndez, I. Prolactin in the immunological system: synthesis and biological effects /1. Méndez, C. Cariño, L. Diaz // Rev. Invest. Clin. 2005. - Vol. 57, №3,-P. 447-456.

279. MHC class I chain-related gene A transmembrane polymorphism in Spanish women with breast cancer / R. Lavado-Valenzuela , M. Benavides , F. Carabantes et al. // Tissue Antigens. 2009. - Vol. 74, № i. p. 46-49.

280. Microenvironmental influence on macrophage regulation of angiogenesis in wounds and malignant tumors / M. Crowther, N. J. Brown, E. T. Bishop et al. // J. Leuk. Biol. 2001. - Vol. 70. - P. 478-490.

281. Modulatory role of the epinergic system in the neuroendocrine-immune system function / A. Giovambattista, A. N. Chisari, R. C. Gaillard, E.

282. Spinedi // Neuroimmunomodulation. 2000. - Vol.8, № 2. - P. 98-106. »

283. Mohanty, I. Cell mediated immune status in carcinoma of the breast / I. Mohanty, M. Nayak, B. K. Nanda // Indian J. Pathol. Microbiol. 1991. -Vol. 34.-P. 1-6.

284. Molecular characterization of the tumor microenvironment in breast cancer / M. Allinen, R. Beroukhim, L. Cai et al. // Cancer Cell. 2004. - Vol. 6. - P. 17-32.

285. Molecular portraits of human breast tumors / C. M. Perou, T. Sorlie, M. B. Eisen et al. // Nature. 2000. - Vol. 406. - P. 747-752.

286. Montero, A. Immunological properties of prolactin / A. Montero, A. G. Giovannoni, L. Sen . // Medicina (B Aires). 2000. - Vol. 60, № 4. - P. 515-520.

287. Muñoz-Cruz, S. Non-reproductive effects of sex steroids: their immunoregulatory role / S. Muñoz-Cruz, C. Togno-Pierce, J. Morales-Montor//Curr. Top Med. Chem.-2011.-Vol. 11,№ 13.-P. 1714-1727.

288. Mutational inactivation of transforming growth factor beta receptor type II in microsatellite stable colon cancers / W. M. Grady, L. L. Myeroff, S. E. Swinler et al. // Cancer Res. 1999. - Vol.59. - P.320-324.

289. Nagai, S. Interleukin-4 and breast cancer / S. Nagai, M. Toi // Breast Cancer. 2000. - Vol. 7, № 3. - P.181-186.

290. Nakamura, K. Cell contact-dependent immunosuppression by CD4(+)CD25(+) regulatory T cells is mediated by cell surface-bound transforming growth factor beta / K. Nakamura, A. Kitani, W. Strober // J. Exp. Med. 2001. - Vol. 194. - P. 629-644.

291. Natural cytotoxicity of peripheral blood lymphocytes and regional lymph node cells in breast cancer in women / S. Cunningham-Rundles, D. A. Filippa, D. W. Braun Jr. et al. // J Natl. Cancer Inst. 1981. - Vol. 67. - P. 585-590.

292. Natural killer cell activities of patients with breast cancer against different target cells / G. Hamilton, A. Reiner, B. Teleky et al. // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 1988. - Vol. 114. - P. 191-196.

293. Neuroendocrine-immune interactions and responses to exercise / M. S. Fragala, W. J. Kraemer, C. R. Denegar et al. // Sports Med. 2011. - Vol. 41, №8. -P. 621-639.

294. NF-kappaB is essential for epithelial-mesenchymal transition and metastasis in a model of breast cancer progression / M. A. Huber, N. Azoitei, B. Baumann et al. // J. Clin. Invest. 2004. - Vol. 114. - P. 569-581.

295. Nicolini, A. Immune Manipulation of Advanced Breast Cancer: An Interpretative Model of the Relationship Between Immune System and Tumor Cell Biology / A. Nicolini, A. Carpi // Medical Research Reviews. -2009.-Vol. 29, №3.-P. 436-471.

296. NK-cell and T-cell functions in patients with breast cancer: effects of surgery and adjuvant chemo- and radiotherapy / F. Mozaffari, C. Lindemalm, A. Choudhury et al. // Br J Cancer. 2007. - Vol. 97, № 1. - P. 105-11.

297. North, R. J. Cyclophosphamide-facilitated adoptive immunotherapy of an established tumor depends on elimination of tumor-induced suppressor T cells / R. J. North // J. Exp. Med. 1982. - Vol. 155. - P. 1063-1074.

298. Novel interleukin 1 polymorphism increased the risk of gastric cancer in a Korean population / K-A. Lee, C-S. Ki, H-J. Kim et al. // J. Gastroenterol. -2004.-Vol. 39. P.501-503.

299. Nowak, A. K. Gemcitabine exerts a selective effect on the humoral immune response: implications for combination hemoimmunotherapy / A. K. Nowak,

300. B. W. Robinson, R. A. Lake // Cancer Res. 2002. -Vol. 62. - P. 23532358.

301. Number of treatment cycles influences development of cytotoxic T cells in metastatic breast cancer patients a phase I/II study / S. E. Wright, K. A. Rewers-Felkins, I. S. Quinlin et al. // Immunol. Invest. - 2010. - Vol. 39, №6.-P. 570-586.

302. Optimization of a self antigen for presentation of multiple epitopes in cancer immunity / J. A. Guevara-Patino, M. E. Engelhorn, M. J. Turk et al. // J.Clin. Invest. 2006. - Vol. 116. - P. 1382-1390.

303. Penn, I. Posttransplant malignancies /1. Penn // Transplant. Proc. 1999. -Vol. 31.-P. 1260-1262.

304. Polymorphisms and haplotype structures in genes for transforming growth factor betal and its receptors in familial and unselected breast cancers / Q. Jin, K. Hemminki, E. Grzybowska et al. // Int. J. Cancer. 2004. - Vol. 112. - P. 94-99.

305. Preferential apoptosis of CD56dim natural killer cell subset in patients with cancer // T. Bauernhofer, I. Kuss, B. Henderson et al. // Eur. J. Immunol. -2003.-Vol. 33, № l.-P. 119-124.

306. Prehn, R. An immunostimulation theory development / R. Prehn, M. Lappe // Transplant. Rev. 1971. - Vol. 7, № 1. - P. 26-51.

307. Prevalence of regulatory T cells is increased in peripheral blood and tumor microenvironment of patients with pancreas or breast adenocarcinomas / U. K. Liyange, T. T. Moore, H.-G. Joo et al. // Journal of Immunology. -2002. Vol. 169. - P. 2756-2761.

308. Primary tumor tissue lysates are enriched in heat shock proteins and induce the maturation of human dendritic cells / S. Somersan, M. Larsson, J. F. Fonteneau et al. // J. Immunol. 2001. - Vol. 167. - P. 4844-4852.

309. Prognostic implications of p53 and bcl-2 expression in 108 women with stage two breast cancer / R. McLaughlin, D. O'Hanlon, T. McHale et al. // Int. J. Med. Sci.-2001.-Vol. 170, № l.-P. 11-13.

310. Prognostic significance of PAI-1 and uPA in cytosolic extracts obtained from node-positive breast cancer patients / Grondahi-Hansen J, HilsenbeckSG, Christensen IJ et al. //Breast Cancer Res Treat 1997; 43: 153163.

311. Prognostic significance of TGF beta 1 and TGF beta 3 in human breast carcinoma / A. Ghellal, C. Li, M. Hayes et al. // Anticancer Res. 2000. -Vol. 20.-P. 4413-4418.

312. Prolactin and autoimmunity / A. de Bellis , A. Bizzarro , R. Pivonello et al.//Pituitary. 2005. - Vol. 8, № 1. - P. 25-30.

313. Pross, H. F. Natural killer cell activity in women at "high risk" for breast cancer, with and without benign breast syndrome / H. F. Pross, E. Sterns, D. R. MacGillis // Int. J. Cancer. 1984. - Vol. 34. - P. 303-308.

314. Psychoneuroimmunology and psychosomatic medicine: back to the future J. K. Kiecolt-Glaser, L. McGuire, T. F. Robles, R. Glaser // Psychosom Med. -2002. Vol. 64, № 1. - P. 15-28.

315. Purohit, A. The role of cytokines in regulating estrogen synthesis: implications for the etiology of breast cancer / A. Purohit, P. S. Newman, M. J. Reed // Breast Cancer Res. 2002. - Vol. 4. - P. 65-69.

316. Quantitation of polymorphic epithelial mucin: a challenge for biochemists and immunologists / J. Hilgers, S. von Mensdorff-Pouilly, A. A. Verstaeten et al. // Scand. J. Clin. Lab. Invest. Suppl. 1995. - Vol. 221. - P. 81-86.

317. Regulation of cutaneous malignancy by gammadelta T cells / M. Girardi, D. E. Oppenheim, C. R. Steele et al. // Science. 2001. - Vol. 294. - P. 605609.

318. Regulation of Smad7 gene by TGF-beta 1 in process of malignant transformation / Y. Huo, K. Zhang, B. Li et al. // Ai Zheng. 2002. - Vol. 21, № 2. - P. 117-121.

319. Repeated observation of breast tumor subtypes in independent gene expression data sets / T. Sorlie, R. Tibshirani, J. Parker et al.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003. - Vol. 100. - P. 8418-8423.

320. Reversal of tumor-mediated immunosuppression / J. Vieweg, Z. Su, P. Dahm, S. Kusmartsev // Clin. Cancer Res. 2007. - Vol. 13, № 2. - P. 727732.

321. Rinner, I. Adrenergic/cholinergic immunomodulation in the rat model in vivo Veritas? / I. Rinner // Dev. Immunol. - 1998. - Vol. 6, № 3-4. - P. 245252.

322. Rosenberg, S. A. Progress in the development of immunotherapy for treatment of patients with cancer / S. A. Rosenberg // J. Intern. Med. 2001. -Vol. 250.-P. 462-475.

323. Rosenberg, S.A. Progress in human tumour immunology and immunotherapy / S. A. Rosenberg// Nature. 2001. - Vol. 411. - P. 380384.

324. Roy, D. Levels of IL-1 beta control stimulatory/inhibitory growth of cancer cells / D. Roy, S. Sarkar, Q. Felty // Front. Biosci. 2006. - № 1. - P. 889898.

325. Sanz, L. Antibody-based antiangiogenic cancer therapy / L. Sanz, L. Alvarez-Vallina // Expert. Opin. Ther. Targets. 2005. - Vol. 9. - P. 12351245.

326. Savanger, P. Leaving the neighborhood: molecular mechanisms involved during epithelial-mesenchymal transition / P. Savanger // BioEssays. 2001. -Vol. 23.-P. 912-923.

327. Sensi, M. Unique tumor antigens: evidence for immune control of genome integrity and immunogenic targets for T cell-mediated patient-specific immunotherapy / M. Sensi, A. Anichini // Clinical Cancer Research. 2006. -Vol. 12.-P. 5023-5032.

328. Sepah, S. C. Positive affect and inflammation during radiation treatment for breast and prostate cancer / S. C. Sepah, J. E. Bower // Brain behave. Immune. 2009. - Vol. 23, № 8. - P. 1068-1072.

329. Shevach, E. M. CD4+ CD25+ suppressor T cells: more questions than answers / E. M. Shevach // Nat. Rev. 2002. - Vol. 2. - P. 389-400.

330. Should estrogen receptor (ER) negativity alone be an indication for chemotherapy in T1N0 breast cancer? / P. Ravdin, I. A. Olivotto, C. Speers et al. // Ibid. 2003. - Vol. 22 (abstr. 55).

331. Sica, A. Altered macrophage differentiation and immune dysfunction in tumor development / A. Sica, V. Bronte // The Journal of Clinical Investigation. 2007. - Vol. 117, № 5. - P. 1155-1166.

332. Significant reduction in breast cancer risk for japanese women with interleukin IB -31 CT/TT relative to CC genotype / L. S. Ito, H. Iwata, N. Hamajima et al. // Jpn. J. Clin. Oncol. 2002. - Vol. 32, № 10. - P. 398402.

333. Simultaneous production of T helper-1-like cytokines and cytolytic activity by tumor-specific T cells in ovarian and breast cancer / P. S. Goedegebuure, C. C. Douville, J. M. Doherty et al. // Cell Immunol. 1997. - Vol. 175, № 2.-P. 150-156.

334. Singletary, S. E. Breast cancer staging: working with the sixth edition of the AJCC cancer staging manual / S. E. Singletary, J. L. Connoly // CA Cancer J. Clin. 2006. - Vol. 56. - P. 37-47.

335. Siveke, J. T. T helper 1 and T helper 2 cells respond differentially to chemokines / J. T. Siveke, A. Hamann // J. Immunol. 1998. - Vol. 160. -P. 550-554.

336. Slonimskaya, E. Immune parameters in patients with proliferative diseases and breast cancer: a comparative study / E. Slonimskaya, N. Tcherdyntseva, E. Afrimzon // Archive of oncology. 1999. - Vol. 7, № 2. - P. 59-62.

337. Spiotto, M.T. Bystander elimination of antigen loss variants in established tumors / M. T. Spiotto, D. A. Rowley, H. Schreiber / Nature Med. 2004. -Vol. 10.-P. 294-298.

338. Spontaneous apoptosis of circulating T lymphocytes in patients with head and neck cancer and its clinical importance / T. K. Hoffmann, G. Dworacki,

339. Т. Tsukihiro et al. // Clin. Cancer Res. 2002. - Vol. 8, № 8. - P. 25532562.

340. Srivastava, P. K. Immunotherapy for human cancer using heat shock protein-peptide complexes / P. K. Srivastava // Curr. Oncol. Rep. 2005. -Vol. 7.-P. 104-108.

341. Steroid hormone receptors as prognostic ondicators in primary breast cancer / S. M. Thorpe, C. Rose, В. B. Rasmussen et al. // Breast cancer res. Treat. -1986.-Vol. 7.-P. 91-98.

342. Stewart, Т. H. M. Immunological enhancement of breast cancer / Т. H. M. Stewart, G. H. Heppner // Parasitology. 1997. - Vol. 115. - P. 141-153.

343. Stober, D. IL-12/IL-18-dependent IFN-gamma release by murine dendritic cells / D. Stober, R. Schirmbeck, J. Reimann // J.Immunol. 2001. - Vol. 167, №2.-P. 957-965.

344. Stress, corticotropin-releasing hormone, glucocorticoids, and the immune/inflammatory response: acute and chronic effects / I. J. Elenkov, E. L. Webster, D. J. Torpy, G. P. Chrousos // Ann. N.- Y. Acad. Sci. 1999. -Vol. 876.-P. 1-11.

345. Sun, J. М. Clinical relevance of HER-2 expression in node-negative breast cancer patients / J. M. Sun, W. Han, D. W. Kim // Proc. Amer. Soc. Clin. Oncol. 2004. - Vol. 23.(abstr. 568).

346. Swann, J. B. Immune surveillance of tumors / J. B. Swann, M. J. Smyth // The Journal of Clinical Investigation. 2007. - Vol. 117, № 5. - P. 11371146.

347. Sykulev, Y. The law of mass action governs antigen-stimulated cytolytic activity of CD8+ cytotoxic T lymphocytes / Y. Sykulev, R. J. Cohen, Y. N. Eisen // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. - Vol. 92. - P. 11990-11992.

348. Taub, D. D. Chemokine-leukocyte interactions. The voodoo that they do so well / D. D. Taub // Cytokine Growth Factor Rev. 1996. - Vol. 7, № 4. -P. 355-376.

349. T cell memory, anergy and immunotherapy in breast cancer / V. Schirrmacher, M. Feuerer, P. Beckhove et al. // J.Mammary Gland Biol. Neoplasia. 2002. - Vol. 7, № 2. - P. 201-208.

350. T cells survey the stability of the self: a testable hypothesis on the homeostatic role of TCR-MHC interactions / T. Bakacs, J. N. Mehrishi, T. Szabados et al. // Int Arch Allergy Immunol. 2007. - Vol. 144, № 2. - P. 171-182.

351. TGFB1 polymorphisms are associated with risk of late normal tissue complications in the breast after radiotherapy for early breast cancer / C. Andreassen, J. Alsner, J. Overgaard et al. // Radiother. Oncol. 2005. -Vol. 75, № l.-P. 18-21.

352. The (-590 C/T) polymorphism in the interleukin-4 gene is associated with increased risk for early stages of corolectal adenocarcinoma / A. Yannopoulos, N. Nikiteas, A. Chatzitheofylaktou, C. Tsigris // In Vivo. -2007.-Vol. 21, №6.-P. 1031-1035.

353. The CC chemokine RANTES in breast carcinoma progression: regulation of expression and potential mechanisms of promalignant activity / E. Azenshtein, G. Luboshits, S. Shina et al. // Cancer Res. 2002. - Vol. 62. -P. 1093-1102.

354. The chemokine receptors CXCR3 and CCR5 mark subsets of T cells associated with certain inflammatory reactions / S. Qin, J. Rottman, P. Myers et al. // J. Clin. Invest. 1998. - Vol. 101. - P. 746-754.

355. The collaboration of both humoral and cellular HER-2/neu-expressing tumors / R. T. Reilly, J. P. Machiels, L. A. Emens et al. // Cancer Research. -2001.-Vol. 61.-P. 880-883.

356. The delta32 deletion of CCR5 receptor in rheumatoid arthritis / S. Cooke, G. Forrest, P. Venables et al. // Arthritis Rheum. 1998. - Vol. 41. - P. 1135-1136.

357. The DNA damage pathway regulates innate immune system ligands of the NKG2D receptor / S. Gasser, S. Orsulic, E. J. Brown, D. H. Raulet // Nature. 2005.-Vol. 436.-P. 1186-1190.389. . The effects of surgery on tumor growth: a century of investigations /

358. R. Demicheli, M. W. Retsky, W. J. M. Hrushesky et al. // Ann. Oncol. -2008.-Vol. 19, № 11.-P. 1821-1828.

359. The interaction between HMGB1 and TLR4 dictates the outcome of anticancer chemotherapy and radiotherapy / L. Apetoh, F. Ghiringhelli ,

360. A. Tesniere et al. // Immunol. Rev. 2007. - Vol. 220. - P. 47-59.

361. The interleukin-1 family of cytokines and receptors in human breast cancer: implications for tumor progression / A. G. Pantschenko, I. Pushkar, K. H. Anderson et al. // J. Oncol. 2003. - Vol. 23, № 2. - P. 269-284.

362. The intriguing role of polymorphonuclear neutrophils in antitumor reactions / E. di Carlo, G. Forni, P. Lollini et al. // Blood. 2001. - Vol. 97, № 2. - P. 339-346.

363. The origin and function of tumor-associated macrophages/ A. Mantovani,

364. B. Bottazzi, F. Colotta, et al. // Immunol.Today. 1992. - Vol. 13. - P. 265270.

365. The peripheral generation of CD4+ CD25+ regulatory T cells / A. N. Akbar, L. S. Taams, M. Salmon, M. Vukmanovic-Stejic // Immunology. 2003. -Vol. 109.-P. 319-325.

366. The plasticity of human breast carcinoma cells is more than epithelial to mesenchymal conversion / O. W. Petersen, H. L. Nielsen, T. Gudjonsson et al. // Breast Cancer Res. 2001. - Vol. 3. - P. 213-217.

367. The predictive value of HLA class I tumor cell expression and presence of intratumoral Treg for chemotherapy in patients with early breast cancer / E. M. de Kruijf, J. G. van Nes, A. Sajet et al. // Clin. Cancer Res. 2010. -Vol. 16, №4.-P. 1272-1280.

368. The role of CD 8+ T cell in immunoglobulin E production / D. M. Kemeny, A. Noble, B. J. Holmes et al.// Allergy. 1995. - Vol. 50, № 25. - P. 9-14.

369. The sympathetic nervean integrative interface between two supersystems: the brain and the immune system / I. J. Elenkov, R. L. Wilder, G. P. Chrousos, E. S. Vizi // Pharmacol. Rev. 2000. - Vol. 52, № 4. - P. 595638.

370. The TP53 codon 72 polymorphism may affect the function of TP53 mutations in breast carcinomas but not in colorectal carcinomas / A. Langerod, I. Bukholm, A. Bregard et al.// Cancer Epidemiology Biomarkers & Prevention. 2002. - Vol. 11.-P. 1684-1688.

371. Thiery, J. P. Epithelial-mesenchymal transitions in tumour progression / J. P. Thiery // Nature Reviews Cancer. 2002. - Vol. 2 - P. 442-454.

372. Thiery, J. P. Epithelial cell plasticity in development and tumor progression J. P. Thiery, D. Chopin // Cancer Metastasis Rev. 1999. - Vol. 18 - P.31-42.

373. Toll-like receptor 4-dependent contribution of the immune system to anticancer chemotherapy and radiotherapy / L. Apetoh, F. Ghiringhelli , A. Tesniere et al. // Nature Med. 2007. - Vol. 13. - P. 1050-1059.

374. TNF alpha promoter polymorphisms analysis in benign and malignant breast lesions / M. Sirotkovic-Skerlev, T. Cacev, S. Krizanac et al. // Exp. Mol. Pathol. 2007. - Vol. 83. - P. 54-58.

375. Tumour susceptibility to innate and adaptive immunotherapy changes during tumour maturation / T. J. Stewart, G. J. Fernando, I. H. Flazer, G. R. Leggatt // Immunol. Cell. Biol. 2004. - Vol. 82. - P. 455-461.

376. Two polymorphic variants of wild-type p53 differ biochemically and biologically / M. Thomas, A. Kalita, S. Labrecque et al. // Mol. Cell. Biol. -1999.-Vol.19.-P. 1092-1100.

377. Vascular endothelial growth factor levels do not predict efficacy of systemic adjuvant treatment as assessed in 1127 breast cancer patients / P. Manders, L. V. Beex, V. C. Tjan-Heijen et al.// Int. J. Oncol. 2004. - Vol. 25, № 2. -P. 511-517.

378. Vascular endothelial growth factor polymorphisms in relation to breast cancer development and prognosis / Q. Jin, K. Hemminki, K. Enquist et al. // Cancer Res. 2005. - Vol. 65. - P. 3647-3652.

379. Veltri, S. Interleukin 1 trials in cancer patients: a review of the toxicity, antitumor and hematopoietic effects / S. Veltri, J. W. Smith // Stem cells. -1996. Vol. 14, № 2. - P. 164-176.

380. Wai, C. T. Cytokine gene polymorphisms in chronic hepatitis B: a step up the immunology ladder / C. T. Wai, R. J. Fontana // Am. J. Gastroenterol. -2003.-Vol. 98, № l.-P. 6-8.

381. Walser, T. C. The role of chemokines in the biology and therapy of breast cancer / T. C. Walser, A. M. Fulton // Breast Dis. 2004. -Vol. 20. - P. 137143.

382. Waterston, A. TNF and cancer: good or bad? / A. Waterston, M. Bower // Cancer Therapy. 2004. - Vol. 2. - P. 131-148.

383. Weiner, H. L. Treatment of multiple sclerosis with cyclophosphamide: critical review of clinical and immunologic effects / H. L. Weiner, J. A. Cohen // Mult. Scler. 2002. - Vol. 8. - P. 142-154.

384. Whiteside, T. L. Immune suppression in cancer: effects on immune cells, mechanisms and future therapeutic intervention / T. L. Whiteside // Semin. Cancer Biol. 2006. - Vol. 16, № 1. - P. 3-15.

385. Yu, P. Tumor-infiltrating T lymphocytes: friends or foes? / P. Yu, Y.-X. Fu // Laboratory Investigation. 2006. - Vol. 86. - P. 231-245.

386. Zagozdzon, R. Immunomodulation by anticancer chemotherapy: more is not always better (review) / R. Zagozdzon, J. Golab // Int. J. Oncol. 2001. -Vol. 18, №2.-P. 417-424.

387. Zhang, X. Hoechst 33342-induced apoptosis is associated with decreased immunoreactive topoisomerase I and topoisomerase I-DNA complex formation / X. Zhang, F. Kiechle // Annals of Clinical & Laboratory Science. 2001. - Vol. 31, №. 2. - P. 187-198.

388. Zitvogel, L. Cancer despite immunosurveillance: immunoselection and immunosubversion / L. Zitvogel, A. Tesniere, G. Kroemer // Nature Rev. Immunol. 2006. - № 6. - P. 715-727.