Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Роль HLA - антигенов I класса в привычном невынашивании беременности

/

МИНСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ

^ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

УДК 618.296-02:575.1

ДОВЕАН

Светлзнз Рудольфовна

РОЛЬ НЬА - АНТИГЕНОВ I КЛАССА В ПРИВЫЧНОМ НЕВШАЛИВАНИИ БЕРЕМЕННОСТИ

14.00.36. - аллергология и иммунология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Минск - 1997

Работа выполнена в Белорусском научно-исследовательском институте охраны материнства и детства.

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор,

Л.П.Титов

Научный консультант: кандидат медицинских наук

А.Н.Шилко

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук

П.П.Мурзенок

кандидат биологических наук Н.А.Кузовкова

Оппонирующая организация:

Белорусский государственный институт усовершенствования врачей

Защита состоится ¿!< ^1997 года в часов на

заседании совета по защите'диссертаций Д 03.18.05. в Минском государственном медицинском институте (221168, г.Минск, проспект Дзержинского, 83).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Минского государственного медицинского института.

Автореферат разослан

1 ("у

//"¿Шщ/-) 1997 Г.

Ученый секретарь совета по защите диссертаций доцент

И.А.Крылов

0Б1ДАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы диссертации

Репродукция и продолжительность лизни людей - тесно связанные биологические процессы. От того каким рождается потомство, во многом зависит его способность адаптации к факторам окружающей среды. В репродуктивном процессе важные функции выполняет иммунная система, которая осуществляет контроль за развитием плода и обеспечивает сохранение вида. Развитие алло-генного плода в утробе матери обеспечивается сложной деятельностью гормонов репродуктивного назначения и одновременно им-муномодулирующего действия, а также факторов супрессорного характера, которые обеспечивают особые локальные иммунобиологические условия развития плода (Говадло В.И.,1987; Дудлей Д., 1990).

Наиболее частым осложнением течения беременности является преждевременное ее прерывание. Частота этой патологии колеблется от 10 до 251 к числу беременностей и не имеет в настоящий момент выраженной тенденции к снижению (Васильева З.П., Шабалин В.Н., 1986; Дитфурц М., 1990).

Несмотря на полиэтиологичную природу спонтанных выкидышей, ведущими механизмами этиологии и патогенеза привычного невынашивания беременности в подавляющем большинстве являются имму-но-нейроэндокринные нарушения, которые могут быть обусловлены генетическими факторами, в частности экспрессией генов главного комплекса гистосовместимости.

На протяжении последних десятилетий достигнут значительный прогресс в изучении антигенов системы НЬА, понимание роли которых чрезвычайно важно для медицинской практики. Одной из актуальных клинических проблем является изучение состояния трансплантационных антигенов у беременных женщин, а также поиск взаимосвязи их эффективной экспрессии с патологией репродуктивной функции. Все вышесказанное определяет настоятельную необходимость в разработке методов, позволяющих своевременно и правильно прогнозировать исход будущей беременности у женщин с различной степенью риска невынашивания для проведения комплекса эффективных, профилактических мероприятии, обеспечивающих благоприятное завершение беременности в срок (Говалло В.И., СвдельникоЕа В.М., 1986; КузникБ.И., Васильев Н.В., 1989; Ко-Еальчук Л.В., Чередеев А.Н., 1990).

Цель исследования

Изучить иммуногенетические маркеры главного комплекса гистосовместимости и состояние иммунной и гормональной систем женского организма при привычном невынашивании беременности с целью разработки критериев прогнозирования течения и исхода беременности.

Задачи исследования

1.Провести сравнительный анализ распределения HLA-антигенов локусов А, В и С среди женщин с привычным невынашиванием беременности различного эндокринного генеза и физиологическим ее течением.

2.Изучить возможную взаимосвязь степени совместимости супружеских пар по антигенам системы HLA и невынашиванием беременности гормональной этиологии.

3.Изучить влияние изосенсибилизации женского организма к антигенам гистосовместимости на течение и исход беременности.

4.Провести иммунокорригирущую терапию в группах женщин с невынашиванием беременности гормональной этиологии и изучить ее влияние на степень изосенсибилизации женского организма к антигенам системы HLA.

5.Изучить гормональный статус беременных с невынашиванием различного эндокринного генеза во взаимосвязи с иммуногенети-ческими параметрами (HLA-антигенами, HLA-антителами).

Научная новизна работы

Проведен сравнительный анализ распределения HLA-антиге-нов. Установлены достоверные различия в распределении отдельных антигенов системы HLA у женщин с невынашиванием беременности различного эндокринного генеза (адреногенитадьный синдром - антигены А2, В13, В14, В41, Cl, С5; недостаточность лю-теиновой фазы менструального цикла - антигены А2, А28, В13, В18, Ci, С5; недостаточность фолликулиновой фазы менструального цикла - антигены AI, А2, А28, В13, В17, В41, Cl, С5; ги-перпролактинемия - антигены А2, В13, В14, В41, С1) и физиологически протекающей беременностью.

Установлена достоверная взаимосвязь гомозиготности супружеских пар по двум и более HLA-антигенам в сочетании с перекрестно реагирующими антигенами (кросс-антигены) и невынашиванием беременности гормональной этиологии, что позволило ввести

- з -

дополнительный статистический критерий в систему прогнозирования невынашивания беременности.

В НЬА-фенотипе женщин с привычным невынашиванием беременности гормональной этиологии выявлено наличие комбинаций антигенов: А1А2, А1В13, А1В14, В13В14, которые достоверно связаны с патологией репродуктивной функции.

Наличие в сыворотке крови беременных женщин лимфоцито-токсических НЬА-антител является благоприятным прогностическим признаком течения и исхода беременности.

Образование в сыворотке крови беременных женщин в процессе иммунокорригирующей терапии лимфоцитотоксических НЬА-антител и нормализация гормонального статуса беременных женщин, является критерием определяющим необходимость и кратность им-мунокорригируещей терапии. •

Практическая значимость полученных результатов

Полученные данные о достоверной взаимосвязи иммуногенети-ческих маркеров главного комплекса гистосовыестимости и невынашиванием беременности гормональной этиологии дают основание рекомендовать проведение иммуногенетического обследования у женщин с привычным невынашиванием беременности (НЬА-типирова-ние). При выявлении у вышеуказанного контингента антигенов "повышенного риска" по невынашиванию своевременно провести корригирующую терапию.

Внедрение в практику специализированных лечебных учреждений определение НЬА-фенотипа мужа и жены для выявления степени гетерозиса супружеских пар по антигенам гистосовместимости позволит улучшить диагностику иммунозависимых форм невынашивания беременности, что в свою очередь способствует концентрации усилий на создание комплекса лечебных мероприятий в бездетных семьях.

Выявление гомозиготности супружеских пар по 2-3 антиге-системы НЬА способствует значительному повышению качества проводимой иммунокорригирующей терапии (подбор соответствующего донора), что повысит вероятность успешного завершения беременности.

Выявление в сыворотке крови беременных женщин лимфоцитотоксических НЬА-антител во взаимосвязи с оценкой гормонального статуса женского организма позволяет определить необходимость

и кратность гормональной и иммунокорригирующей терапии.

Основные положения выносимые на защиту

1. Ряд антигенов системы HLA AI, А2, А28, В13, В14, В17, В18, В41, С1, С5 могут служить биологическими маркерами для прогнозирования патологии репродуктивной функции, в частности невынашивания беременности гормональной этиологии.

2. Гомозиготность супружеских пар по двум-трем HLA-антигенам в сочетании с кросс-реактивностью достоверно взаимосвязана с привычным невынашиванием беременности гормональной этиологии.

3. Наличие в сыворотке крови беременных женщин лимфоцито-токсических HLA-антител является благоприятным прогностическим признаком течения и исхода беременности.

4. Эффективность и кратность проведения иммунокорригирующей терапии определяется диаметром внутрикожных проб и наличием или отсутствием в сыворотке крови беременных женщин лимфо-цитотоксических HLA-антител.

Личный вклад соискателя

Соискателем лично проведен отбор и формирование групп женщин для обследования, забор материала и его статистическая обработка. Выполнение всех указанных в диссертации методов исследования осуществлены соискателем совместно с сотрудниками лаборатории радиоиммунного анализа и гормональной адаптации новорожденных Бел Нии ОВД и сотрудниками лаборатории типирова-ния органов и тканей Республиканской станции переливания крови. Вклад соавторов в совместные исследования, результаты которых вошли в диссертацию, состоял в консультативной помощи при интерпритации полученных данных по смежным (акушерство-гинекология, эндокринология) с основной дисциплинам.

Апробация работы

Основные положения диссертации были доложены:

1. на Научно-практической конференции молодых ученых и специалистов Бел НИИ СВД. г. Минск, 1988г.

2. на III Республиканской конференции молодых ученых и специалистов " Медико-биологические аспекты повреждения и компенсации. " г.Гродно, 1989г.

3. на I Иммунологическом сьезде Белоруссии "Экологические проблемы иммунологии и аллергологии", г.Минск, 1990г.

4. на Международной научно-практической конференши "Репродукция, планирование и экстрогенитальная патология", г.Бобруйск, 1993г.

5. на Научней конференши, посвященной 60-ти летию Витебского медицинского института, г.Витебск, 1994г.

5. на Научной конференции ¡иммунологов, г.Минск, 1997г.

Публикация работы

По материалам диссертации опубликовано 12 печатных работ, в том числе 5 статей, 1 методические рекомендации и 6 тезисов, подана 1 заявка на изобретение 'N4863212/14 от 31.08.90г. положительное решение от 20.03.92г.)

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 118 страницах, содержит 99 страниц основного текста, 20 таблиц-и 14 рисунков. Состоит из введения, 6 глав, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Библиографический указатель включает 199 наименований печатных работ (117 на русском и 82 на иностранных языках) .

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Объем и методы исследования

Краткая характеристика обследованных групп женщин

В условиях Республиканской консультации по вопросам семьи и брака, отделении патологии беременности 7-ой городской клинической больницы г.Минска, акушерского отдела Белорусского научно-исследовательского института охраны материнства и детства и женской консультации N 27 г.Минска в 1993-1994 годах взято под наблюдение и обследовано 176 супружеских пар. На основании акушерского анамнеза, особенностей репродуктивной функции и в зависимости от характера проводимой терапии, направленной на пролонгирование беременности, все обследованные женщины были разделены на две группы.

I. Контрольную группу составили 56 женщин с нормально протекающей беременностью.

II. Основную группу составили 120 беременных женщин, страдающих приЕычныы невынашиванием и получавших иммунокорри-гирующую терапию лимфовзвесью мужа или донора в различные сроки беременности. Беременные основной группы в зависимости от вида эндокринной патологии были распределены следующим обра-

- б -

зом: I группа - 30 женщин с адреногенитальным синдромом, 11 группа - 30 женщин с недостаточностью фолликулиновой фазы менструального цикла, 111 группа - 30 женщин с недостаточностью лютеиновой фазы менструального цикла, IV группа - 30 женщин с гиперпролактинемией.

Методы исследования

Забор крови для иммуногенетических и гормональных исследований у 56 беременных контрольной группы проводили однократно, у 120 беременных основной группы вышеуказанные манипуляции проводились однократно, у 40 из них сыворотку крови получали после каждого курса иммунокорригирующей терапии. Забор крови у мужей обследованных женщин проводили однократно.

Лимфоциты получали методом градиентного центрифугирования с применением раствора фиколл-верографина с удельной плотностью 1,077 кг/м и рН=7,2 (Зарецкая Ю.М., 1983).

Идентификацию HLA антигенов I класса супружеских пар проводили в двухступенчатом тесте микролимфоцитотоксичности по методу Terasaki панелью из 120 тестовых гистотипирующих сывороток, "открывающих" 43 антигена.

Для выявления в сыворотке крови обследованных женщин лим-фоцитотоксических HLA-антител использовался тест комплементза-висимого лизиса лимфоцитов (Зарецкая Ю.М., 1983).

Изучение содержания гормонов в крови включало радиоиммунологическое определение эстриола, эстрадиола, прогестерона, тестостерона, кортизола, плацентарного лактогена стандартными наборами Института биоорганической химии АН РБ (ИБОХ).

Иммунокорригирущая терапия

Всем женщинам основной группы начиная с 7-8 недель и до 35 недель беременности были проведены курсы иммунокорригирующей терапии (от 1 до 5 раз) методом подкожного введения лимфоцитов мужа или донора (Говалло В.И., Сидельникова В.М., 1986). Разведение лейковзвеси производилось в 2 мл стерильного физиологического раствора, в дозе от 90 до 150 млн. мононуклеаров. Лимфоциты получали из венозной крови мужа или донора в день введения. Пипеткой Сали забирали 0,02 мл взвеси клеток для подсчета количества лимфоцитов. Окончательная концентрация лимфоцитов в физиологическом растворе составляла 90-150 млн. в 1 мл. Клетки вводили беременной женщине сразу после приготов-

ления суспензии.

Внутрикожные тесты с мононуклеарами периферической крови

С целью оценки активности специфических иммунологических реакций, протекающих непосредственно в сенсибилизированном организме женщины, одновременно с проведением каждого курса им-мунокорригирующей терапии внутрикожно вводилось в верхнюю треть ладонной поверхности предплечья 0,1 мл взвеси донорских мононуклеароЕ, выделенных из лейковзвеси, используемой для им-мунокоррекции. Доза вводимых лимфоцитов для проведения внутри-кожного теста, составляла 4-6 млн. клеток. Выраженность локальных иммунологических процессов учитывалась путем измерения наибольшего поперечного диаметра пятна гиперемии и инфильтрата через 20 минут с момента введения антигена (Титов Л.П., Шилко А.Н., Милько-Черноморец Ю.В.., 1992).

Статистическая обработка данных

Полученные результаты обрабатывались методами вариационной и корреляционной статистики с применением пакета статистических программ "Statgraphics", а также дисперсионного и диск-риминантного анализов (Иванов Ю.И., Погорелюк О.П., 1990).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Учитывая многофакторность патологии репродуктивной функции, в частности невынашивания беременности, нами проведен анализ иммуногенетической и гормональной взаимосвязи между функциональным состоянием HLA-антигенов и патологией репродуктивной функции гормональной этиологии.

Для оценки частоты распределения антигенов системы HLA проведено HLA-типирование лимфоцитов крови по антигенам субло-кусов А, В, Су 120 женщин основной и 56 контрольной групп.

Сравнительная оценка полученных результатов позволила установить, что у женщин с привычным невынашиванием беременности гормональной этиологии достоверно повышена частота встречаемости антигенов системы HLA А1.А2, В13, В14, В18, С1, в сравнении с женщинами с физиологически протекающей беременностью (рис.1).

Для доказательства специфичности частоты распределения антигенов гистосовместимости при невынашивании беременности гормональной этиологии нами исследовались различные комбинации антигенов системы HLA. Отмечено, что в HLA-фенотипе беременных

осноеной группы выявлены комбинации антигенов (А1А2, А1В13, А1В14, В13В14), которые отсутствуют у женщин с физиологически протекающей беременностью (рис.2). С другой стороны, у женщин с физиологически протекающей беременностью выявлены комбинации антигеноЕ системы HLA: А2А11, В14В21, АЗС1 и В16С1, которые отсутствуют у беременных основной группы.

Анализ распределения антигенов системы HLA в каждой группе беременных женщин (АТС, НИ, НЛФ, Г) и сопоставление полученных результатов дисперсионного и дискриминантного анализов показал наличие антигенов "повышенного риска" по невынашиванию: А2, В13, В14, В41, CI, С5 в группе женщин с адреногени-тальным синдромом; AI, А2, А28, В13, В17, В41, CI, С5 - в группе женщин с недостаточностью фолликулиновой фазы менструального цикла; А2, A2S, В13, BIS, CI, С5 - в группе женщин с недостаточностью лютеиновой фазы менструального цикла и антигенов А2, В13, В14, В41, С1 - в группе женщин с гиперпролакти-неыией.

Результаты, полученные при изучении концентрации половых гормонов в сыворотке крови беременных с различной эндокринной патологией (АТС, НФФ, НЛФ, Г) и их связи с "антигенами повышенного риска" по невынашиванию указывают на достоверную (р < 0,01) связь вышеуказанных антигенов со степенью выраженности

Рис. 1. Распределение IILA-антигенов" повышенного рис»«" у беременных с Ком&ммцм аитигеж*, иьл-фемотяле беременных с щ

привычным невынашиванием н женщин с фнэиалогичесхи протекающей жамишиммясмм ноннни сфммоиопмесхнв] беременностью

той или иной патологии эндокринной системы, что подтверждается особенностями гормонального статуса обследованных женщин. У беременных с адреногенитальным синдромом наряду с наличием в НЬА-фенотипе антигенов "повышенного риска" по невынашиванию (В13, В14), ЕыяЕлено достоверное возрастание в сыворотке крови

концентрации ксртизола и тестостерона по сравнению с женщинами, в HLA-фенотипе которых указанные антигены отсутствуют. В группах женщин с недостаточностью лютеиновой и фолликулиновой фаз менструального цикла на фоне наличия в HLA-фенотипе антигенов В13, BIS (НЛФ) и антигенов В13, В17 (НФФ) отмечено достоверное снижение концентрации эстрогенов, прогестерона и плацентарного лактогена по сравнению с беременными, в HLA-фенотипе которых данные антигены отсутствуют.

Полученные результаты свидетельствуют о генетически детерминированной взаимосвязи антигенов главного комплекса гисто-совместимости и процессов синтеза и секреции половых гормонов при невынашивании беременности гормональной этиологии. Мы полагаем, что наличие у женщин в HLA-фенотипе антигенов "повышенного риска по невынашиванию" позволяет прогнозировать возможность развития той или иной патологии репродуктивной функции. Данные антигены выступают патогенетическими маркерами невынашивания беременности различного эндокринного генеза, а указанные гормоны, вероятно, обеспечивают их эффективную экспрессию.

При изучении степени гетерозиса супружеских пар по антигенам системы HLA и невынашиванием беременности, нами установлено, что у беременных основной группы наблюдается тенденция к увеличению степени сходства супругов по антигенам гистосовместимости. Так, среди супружеских пар основной группы совместимость по двум антигенам системы HLA составляла 28,3% случаев, по трем - 9,2%, тогда как в контрольной группе супружеских пар, совместимых по двум HLA-антигенам выявлено только в 3,6% случаев, совместимых по трем HLA-антигенам - не выявлено.

Оценка HLA-фенотипа (дисперсионный анализ) в группах женщин с различной патологией эндокринной системы указывает на разную степень совместимости супругов по антигенам системы HLA в зависимости от гормональных нарушений. В группе женщин с ад-реногенитальным синдромом гомозиготность мужа и жены по двум HLA-антигенам выявлена только в 10% случаев, супружеских пар совместимых по трем HLA-антигенам в данном случае не выявлено. С другой стороны, в группах женщин с эстрогеновой, прогестеро-новой недостаточностью и гиперпролактинемией установлено нади-

чие совместимости супругов по двум НЬА-антигенам в 40% (НФФ) случаев, в 36,7% (НЛФ) и в 26,7% (Г) случаев, по трем - в 20% (НЮ и в 16,7% (НЛФ) случаев соответственно, что достоверно (Р < 0,05) отличается от контроля.

На основании полученных данных можно предположить, что не у каждой женщины с генетической совместимостью по антигенам системы НЬА первая беременность закончится прерыванием, но с каждой последующей беременностью вероятность самопроизвольного выкидыша или преждевременных родов возрастает, что указывает на тесную взаимосвязь гормональной и иммуногенетической патологии в невынашивании беременности.

В процессе беременности в сыворотке крови женщин накапливаются антитела к антигенам различных систем, в том числе и к антигенам НЬА. Иммунизация происходит в результате сенсибилизации организма матери антигенами плода, унаследованными от отца.

При оценке степени выраженности антилейкоцитарной сенсибилизации организма матери НЬА-антигенами плода, унаследован-ныыи от отца, нами отмечено, что несмотря-на большое количество беременностей, в сыворотке крови женщин.с патологией репродуктивной функции не обнаружено антител к антигенам системы НЬА. У женщин с физиологическим течением беременности лимфоци-тотоксические антитела выявлены у 18% беременных, что, по-нашему мнению, является благоприятным прогностическим признаком течения и исхода беременности.

Можно предположить, что процесс образования у беременных лимфоцитотоксических НЬА-антител не несет в себе отрицательного эффекта, а напротив более характерен для физиологически протекающей беременности. Определенный уровень противолейкоци-тарных антител даже необходим для регуляции формообразовательных процессов в эмбриогенезе. Такие антитела могут предохранять плод от повреждающего действия Т-клеточных механизмов иммунной системы женского организма.

Основываясь на вышеприведенных данных с целью терапии угрозы самопроизвольного выкидыша был использован метод коррекции иммунного статуса женского организма подкожной иммунизацией донорскими лимфоцитами. В результате проведенной иммунокор-рекции в сыворотке крови женщин с адреногенитальным синдромом

(АТС) были выявлены лимфоцитотоксические Ю-антитела.

Нами отмечено, что у беременных с АТС (позитивных по ША-антителам) после проведенной терапии исчезают симптомы и некоторые маркеры угрозы досрочного прерывания беременности: концентрация половых гормонов в сыворотке крови резко возрастает, увеличивается Т-клеточный иммунный ответ на лимфоциты донора при постановке внутрикожных проб (рис.3).

С другой стороны, у женщин с эстрогеновой (НФФ) и прогес-тероновой недостаточностью (НЛФ), негативных по НЬА-антите-лам, несмотря на проводимую терапию, явления угрозы досрочного прерывания беременности полностью не исчезли: 1)концентрация эстрогенов и плацентарного лактогена не превышала нижней границы нормы; 2)концентрация прогестерона - продолжала оставаться низкой для данного срока беременности; 3)диаметры внутри-кожных проб к лимфоцитам уменьшались или оставались на исходном уровне. В дальнейшем, беременность у этих женщин протекала с явлениями угрозы досрочного ее прерывания, что предопределило необходимость проведения дополнительных курсов иммунокорри-гирующей терапии (рис.4).

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о наличии достоверной (р < 0,05) взаимосвязи между показателями половых гормонов и диаметром внутрикожных проб, в зависимости от наличия в сьторотке крови беременных женщин лимфоцитотокси-ческих НЬА-антител после проведеной иммунокорригируицей терапии.

С целью подтверждения вышесказанного был проведен корреляционный анализ у беременных основной группы, в результате которого выявлены сильные достоверные корреляционные связи среди вышеуказанных параметров: половыми гормонами и внутри-кожными пробами; внутрикожными пробами и антителами; антителами и половыми гормонами.

Таким образом, проведенные исследования свидетельствуют о наличии достоверной корреляционной взаимосвязи между гормональным обеспечением беременности и специфической иммунологической реактивностью женского организма на фоне проведения им-мунокорригирующей терапии, что подтверждается клиническими проявлениями течения беременности. Кроме того, отмечено, что данные корреляции взаимосвязаны с видом эндокринной патологии.

При изучении возможной взаимосвязи антигенов системы НЬА со степенью риска угрозы досрочного прерывания беременности, осложненной невынашиванием, эндокринного генеза нами отмечено, что высокая степень антигенного различия достоверно чаще наблюдается у супружеских пар, в которых у женщин в процессе им-мунокорригирующей терапии выработались лимфоцитотоксические НЬА-антитела. В группе женщин с отсутствием НЬА-антител отмечено достоверное возрастание количества супружеских пар, совместимых по двум-трем НЬА-антигенам.

Полученные данные дают возможность предположить, что совпадение родителей по двум-трем антигенам гистосовместимости способствует снижению реактивности иммунной системы женского организма, из-за недостаточной иммуногенности НЬА-гаплотипа отца, когда материнский организм не способен развить адекватную иммунологическую реакцию с выработкой блокирующих иммунный ответ НЬА-антител, что в свою очередь, существенно отражается на благоприятном течении беременности.

Учитывая тот факт, что беременные основной группы (негативные и позитивные по НЬА-антителам), различаются по виду эндокринной патологии, нам представляется целесообразным у этих женщин провести анализ распределения антигенов "повышенного риска" по невынашиванию.

В результате проведенных исследований установлено, что в группе женщин с эстрогеновой и прогестероновой недостаточностью (негативных по НЬА-антителам), на фоне низкой концент-

- «-

xO

рации половых гормонов и неблагоприятного течения беременности, в HLA-фенотипе достоверно повышена частота встречаемости антигенов "повышенного риска" по невынашиванию В13, В17, В18, и С1 по сравнению с контролем и женщинами с адреногенитадьным синдромом. С другой стороны, В HLA-фенотипе беременных с адреногенитадьным синдромом (позитивных по HLA-антителам), распределение вышеуказанных антигенов системы HLA достоверно не отличается от контроля.

Полученные результаты свидетельствуют о достоверной взаимосвязи и взаимообусловленности иммуно-нейроэндокринных нарушений в этиологии и патогенезе привычного невынашивания беременности гормональной этиологии, которые, по-нашему мнению обусловлены генетическими факторами, в частности экспрессией генов главного комплекса гистосовыестиыости.

Таким образом, из полученных нами данных становится очевидной диагностическая и прогностическая ценность иммуногене-тических параметров, позволяющих правильно оценить степень риска планируемой беременности, эффективность проводимой имму-нокорригирующей терапии, индивидуальность схемы ее проведения за счет подбора более оптимального донора и уточнения интервалов лечения для каждой больной, получать своевременную достоверную информацию о течении беременности, а также прогнозировать ее исход, существенно опережая клинические проявления самопроизвольного выкидыша.

Кроме того, проведенные исследования позволяют дифференцированно диагностировать гормональные нарушения при невынашивании беременности, выделить группы риска по развитию невынашивания того или иного эндокринного генеза, что может иметь значение в диагностике эндокринных нарушений и в разработке профилактических мероприятий.

ВЫВОДЫ

1. Выявлены ассоциативные связи между отдельными антигенами системы HLA и невынашиванием беременности различного эндокринного генеза.

2. Установлена достоверная взаимосвязь гомозиготности супружеских пар по двум и более антигенам гистосовместимости и привычным невынашиванием беременности гормональной этиологии.

3. Антигены системы HLA AI, А2, А28, В13, В14, В17, В18, В41, С1 и С5 могут рассматриваться как антигены "повышенного риска" при прогнозировании невынашивания беременности гормональной этиологии.

4. В HLA-фенотипе женщин с ПНБ выявлены комбинации антигенов: А1А2, А1В13, А1В14, В13В14, которые могут служить биологическими маркерами для прогнозирования патологии репродуктивной функции. Среди женщин контрольной группы данные комбинации антигенов не выявлены.

5. Особенностью патологического течения беременности у женщин с патологией репродуктивной функции является отсутствие антител к антигенам системы HLA, в то время как у женщин с физиологическим течением беременности они выявлены в 18%.

6. В результате проведения курса имыунокорригирующей терапии угрозы досрочного прерывания беременности в сыворотке крови женщин с адреногенитальным синдромом выявлены HLA-антитела, что является критерием, позволяющим определить эффективность и кратность иымунокорригирующей терапии.

7. У женщин с привычным невынашиванием беременности на фоне проведения иымунокорригирующей терапии нормализуется концентрация половых гормонов.

8. Установлена достоверная корреляционная взаимосвязь изменения концентрации половых гормонов в течении беременности с интенсивностью внутрикожных аллергических реакций на введение лимфоцитов и образованием в сыворотке крови женщин с ПНБ HLA-антител на фоне иммунокорригирующей терапии.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Женщинам с привычным невынашиванием беременности необходимо проводить идентификацию HLA-антигенов I класса (сублокусы А, В, С) с целью выявления антигенов "повышенного риска" по невынашиванию, которые могут служить иммуногенитеческими маркерами угрозы досрочного прерывания беременности эндокринного генеза.

2. С целью оценки степени риска невынашивания беременности показано определение степени гетерозиса супружеских пар по антигенам системы HLA и выявление в сыворотке крови беременных антител к антигенам гистосовместимости.

3. Женщинам с привычным невынашиванием беременности необходимо

включать е комплекс лечебных мероприятий подкожное введение дснорских лимфоцитов в следующих случаях: 1) иммуногенети-ческая совместимость супружеских пар по 2-3 антигенам системы НЬА; 2) отсутствие в сьторотке крови беременных лимфоцитотоксических НЬА-антител; 3) наличие в НЬА-фенотипе беременных антигенов "повышенного риска" по невынашиванию: А1, А2, А23, В13, В14, В17, В18, В41, С1 и С5. 4. Показаниями для проведения срочного (2-4 нед.) повторного курса иммунокорригирующей терапии с подбором оптимального донора являются низкая концентрация половых гормонов (эстрогенов, прогестерона и плацентарного лактогена) и интенсивность внутрикожных аллергических реакций на введение лимфоцитов (через 20 мин. от момента введения антигена) менее 3,5см, а также отсутствие в сыворотке крови беременных НЬА-антител в ответ на иммунокорригирующую терапию.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Довбан С.Р. Прогностическое значение антигенов системы НЬА при нарушении репродуктивной функции у женщин //Тезисы докладов III Республиканской конференции молодых ученых и специалистов. - Гродно, 1989. - С.186.

2. Довбан С.Р, Шилко А.Н., Левин В.И. Частота встречаемости антигенов НЬА-системы у женщин с патологией репродуктивной функции гормональной этиологии //Тезисы докладов I сьезда иммунологов Беларуси. - Минск, 1990. - С.165.

3. Довбан С.Р., Шилко А.Н., Левин В.И. Прогноз нарушений репродуктивной функции у девочек //Тез. докл. II Всесоюзн. конф. по гинекологии детей и подростков. - Минск, 1990. -С. 83.

4. Милько-Черноморец Ю.В., Шилко А.Н., Довбан С.Р. Иммунотерапия привычного невынашивания беременности //Здравоохранение Беларуси. - 1994. - N 11. - С.9-12.

5. Довбан С.Р. НЦ\-антитела и их значение при беременности //Здоровье матери и ребенка в современных экологических условиях: Материалы пленума науч.-мед. общества детстких врачей Беларуси. - Минск, 1995. - С.33-34.

6. ДоЕбан С. Р., Титов Л. П., Шилко А. Н., Лещинская Т. М. Иммунологический метод диагностики и прогнозирования патологии репродуктивной функции //Здравоохранение Беларуси. -

1995. - N 2. - С. 23 - 25.

7.Шилко А.Н., Искрицкий A.M., Ленинская Т.М., Довбан С.Р. Особенности иммунологического статуса беременных женщин, проживающих в условиях длительного воздействия малых доз ионизирующей радиации // Тез.докл. в кн: Актуальные проблемы иммунологии и аллергологии.- Гродно, 1995, с.107.

8.Milko-Chernomorets J.V.; Shilko A.N.; Titov L.P.; Dovban S.R. Evalution of the effectiveness of immunotherapy and prediction of pregnancy outcome on the basis of parameters of cellular immunity in women with habitual abortion //Gematol Transfuziol, 1995, Jul-Aug, p.46.

9.Довбан С. P., Титов Л. П., Шилко А. Н., Лещинская Т. М. Влияние антигенов тканевой совместимости на течение беременности у женщин с привычным невынашиванием // Здравоохранение Беларуси. - 1996. - N 9. - С. 10 - 12.

10.Лещинская Т.М., Зубович В.К., Шилко А.Н., Довбан С.Р. Влияние иммунокорригирующей терапии на гормональный статус беременной и новорожденного ребенка //Охрана материнства и детства в условиях воздействия последствий катастрофы на Чернобыльской АЭС: Сб. науч.тр. Бел.НИИ ОЩ. - Минск, 1996. -4.1. - С. 167 - 174.

11.Довбан С. Р., Титов Л. П., Шилко А. Н., Лещинская Т.М. Влияние иммунокорригирующей терапии при невынашивании беременности на изменение иммунного и гормонального статусов беременных женщин // Охрана материнства и детства в условиях воздействия последствий катастрофы на Чернобыльской АХ: Сб. науч. тр. / НИИ охраны материнства и детства. - Минск, 1996. -4.1. - С. 83 - 90.

12.Шилко А.Н., Титов Л.П., Милько-Черноморец Ю.В., Довбан С.Р., Лещинская Т.М. Диагностика и терапия привычного невынашивания беременности иммунного генеза (Методические рекомендации МЗ РБ). - МИНСК: 1997. - 8 с.

ЗАЯВКА НА ИЗОБРЕТЕНИЕ

1.Милько-Черноморец Ю.В., Титов Л.П., Шилко А.Н., Довбан С. Р. Способ прогнозирования по параметрам клеточного иммунитета течения беременности у женщин с привычным невынашиванием беременности /N 4863212/14 от 31.VIII.90г.

Р Э 3 ¡0 м э Доубан Святлана Р/дольфауна РОЛЯ НЬА-АНТЫГЕНАУ I КЛАСУ У ПРЫЕЫЧНЫМ НЕЕЫНОШЕАННI ЦЯЯАРНАСЦ1

Ключавыя словы: невыношванне цяжарнасщ, НЬА-с1стэма, трансплантацыйныя антыгены, 1ммунакарыг1руючая тэрап1я, го-маз1готнасць, антыгены "павышанай рызыга.", Л1ыфацытатакс1чныя НЬА-антыцелы, гарманальны статус.

У цяперашн1 час вядучая роля у этыялогп 1 патэгенезе пры-вычнага невыношвання цяжарнасвд належыць парушэнням 1мму-на-нзйраэндакрынных уэаемасувязей у с1стэме мащ-плацэн-та-плод. Гэтыя парушэнн1 могуць быць абгрунтаваны генетычньши фактарам!, а манав1та генам1 галоунага комплексу гчстасумяш-чальнасщ..

Атрыманы еын!к1, як1я сведчаць аб генетычна дэтэрм1н1рава-най узаемасувязг антыгенау галоунага комплексу гд.стасумяшчаль-насщ (НЬА-с1стэма) 1 працэсау с1нтэзу и сакрэщп палавых гар-монау у выпадку невыношвання цяжарнасщ гарманальнай этыяло-гП. Прысутнасць у жанчын у Н1_А-фенатыпе антыгенау "павышанай рызык1 па невыношванню" дазваляе прагназграваць магчымасць разв1цця той або хншай паталогП рэпрадукцыйнай функцы! гзрма-нальнай этыялогП.

Палавыя гармоны 1 л1мфацытатакс1чныя НЬА-антыцелы падауля-юць гммунную рэактыунасць мацз.. Стымулятарам1 блак1руючых 1м-мунны адказ фактарау, нак!раваных на П{муналаг1чную ахову пла-да, з'яуляюцца антыгены тканкавай сумяшчалънасщ.. У выпадках 1х недастатковасгц (пры гомаз1готнасхц шлюбных пар) блак1рую-чыя мехашзмы аслаблены, вьппкам чаго з'яуляецца 1 гарманаль-ная недастатковасць, якая разв1ваецца паралельна. Дадатковая спецыфгчная антыгенная стымуляцыя цяхарных жанчын у тагах выпадках аднауляе пзрушаную раунавагу и садзешпчае нармал!зацы1 генэзу цяжарнасцх.

РЕЗЮМЕ

Довбан Светлана Рудольфовна Роль HLA-антигенов I класса в привычном невынашивании беременности

Клкчевые слсвз: невынашивание беременности, система-HLA, трансплантационные антигены, иммунокорригирующая терапия, го-мозиготность, антигены "повышенного риска", лимфоцитотокси-ческие KLA-антитела, гсрмоналъный статус.

Е настоящее время ведущая роль в этиологии и патогенезе привычного невынашивания беременности принадлежит нарушениям иммуно-нейроэндскринных взаимосвязей в системе мать-плацен-та-плсд, которые могут быть обусловлены генетическими факторами, в частности генами главного комплекса гистосовместимости.

Получении результаты, свидетельствующие о генетически детерминированной взаимосвязи антигенов главного комплекса гистосовместимости (HLA-система) и процессов синтеза и секреции половых гормонов при невынашивании беременности гормональной этиологии. Наличие у женщин в HLA-фенотипе антигенов "повышенного риска" по невынашиванию позволяет прогнозировать возможность развития той или иной патологии репродуктивной функции гормональной этиологии.

Половые гормоны -и лимфоцитотоксические HLA-антитела подавляют иммунную реактивность матери. Стимуляторами блокирующих иммунный ответ факторов, направленных на иммунологическую охрану плода, являются антигены тканевой совместимости. В случаях их недостаточности (при гомозиготности супружеских пар) блокирующие механизмы ослаблены, следствием чего является и параллельно развивающаяся гормональная недостаточность. Дополнительная специфическая антигенная стимуляция беременных в таких случаях восстанавливает нарушенное равновесие и способствует нормализации генеза беременности.

AESTRACTS Dovban Svetlsna Roodolfovna THE ROLE OF THE I CLASS HLA-ANTIGEU INPREGMAMCY MISCARRIAGE

Key words: miscarriage, HLA-system, transplantation antigens, immunccorrective therapy, homosigosity, "high risk" antigens, lymphotoxic HLA-antibodies, hormonal status.

At present the leading role in etiology and pathogenesis of habitual miscarriage belongs to certain immuncendccrine relation disorders in the system mother-placenta-fetus. These disorders may occur due to the genetic factors, in particular to the gens of the main histocompatibility complex.

Data were received indicating the genetically determined relationship between the main histocompatibility complex antigens (HLA-system) and the processes of synthesis and secretion of sex hormones in the case of miscarriage of hormonal etiology. Prevalence of "high miscarriage risk" antigens in HLA-phenotype women allows to predict the risk of development of either reproductive function pathology of hormonal etiology.

Sex hormones and lymphotoxic HLA-antibodies suppress mother's immune reactivity. Tissue compatible antigens act as stimulators of blocking immune response factors, directed to immunologic defence of fetus. In case of their defficiency (homosigosity of matrimonial couples) blocking mechanisms are reduced, and this results in the development of concomitant hormonal defficiency. In these cases an additional specific antigen stimulation of pregnant women reconstitutes the impaired balance and promotes the normalization of pregnancy genesis.