Автореферат и диссертация по медицине (14.01.01) на тему:Реализация программы вспомогательных репродуктивных технологий у пациентов с микроделецией azf локуса хромосомы y

На правах рукописи

БЕЛЯЕВА Надежда Анатольевна

РЕАЛИЗАЦИЯ ПРОГРАММЫ ВСПОМОГАТЕЛЬНЫХ РЕПРОДУКТИВНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ У ПАЦИЕНТОВ С МИКРОДЕЛЕЦИЕЙ ЛОКУСА ХРОМОСОМЫ У

14.01.01 -акушерство и гинекология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

2 3 МДП

Москва-2014

005549362

005549362

Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном учреждении «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Научные руководители:

Официальные оппоненты:

Серебренникова Клара Георгиевна - доктор медицинских наук, профессор, ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Минздрава России, кафедра семейной медицины с курсом экстрагенитальной патологии в акушерстве и гинекологии, профессор

Краснопольская Ксения Владиславовна - доктор медицинских наук, профессор, ГБУЗ МО «Московский областной научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии», руководитель отделения репродуктологии

Ведущая организация: ГБОУ ВПО «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Минздрава России

Защита состоится «17» июня 2014 года в 13:00 часов на заседании диссертационного совета Д. 208.125.01 на базе ФГБУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» по адресу 117997, г. Москва, ул. Академика Опарина, д.4.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке и на сайте http://sciense.ncagp.ru/upfiles/pdf/Diss_BelyaevaNA.pdf федерального

государственного бюджетного учреждения «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Автореферат разослан «_» мая 2014 г.

доктор медицинских наук Калинина Елена Анатольевна

доктор биологических наук Глинкина Жанна Ивановна

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук

ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы Проблема бесплодного брака была и остается приоритетной в наше время (Серебренникова КГ, 2010; Калинина ЕА, 2012). По данным статистики примерно 15% супружеских пар в популяции бесплодны, при этом на долю мужского фактора приходится около 50% случаев (Сухих Г.Т., Божвдомов ВА, 2009; Вартанян ЭБ, Петрин АН, 2010; Poongpthai J., 2009; McLachlan R.I, 2010).

Микроделеции AZF локуса хромосомы Y (del AZF) — одна из главных генетических причин мужского бесплодия (Mafia FA, 2011; Fu L, 2012; Li D, 2012; Totonchi M, 2012). Распространенность данной мутации среди мужчин с выраженными отклонениями в показателях спермограммы широко варьирует в различных популяциях (Вартанян ЭВ, Петрин АН, 2010, Ferlin А, 2007; Fu L, 2012; Chellat D, 2013; Choi DK, 2013,), в среднем составляет 7,6% (Stouffi К, 2005).

По данным многочисленных исследований доказано, что делеции AZF локуса хромосомы Y могут передаваться от отца сыну, что впоследствии может привести к нарушению репродуктивной функции у потомства (Ferlin А, 2007; Gambera L, 2010; Dai RL, 2012). Рад исследователей предполагают, что наличие микроделеции в AZF локусе хромосомы Y приводит к общей нестабильности этой хромосомы и впоследствии может явшься пусковым механизмом в возникновении анеуплоидии у эмбрионов таких пациентов (интерхромосомный эффект). Результаты проведенных исследований указывают на то, что пациенты с del AZF входят в группу риска по рождению ребенка с хромосомной патологией вследствие наличия у них высокого уровня нуллисомии и дисомии плюсом в сперматозоидах (Ceylan С, 2010; Palrat С, 2010; Li L, 2013).

Проведение преимплшггационной генетической диагностики (ПГД) в рамках программы вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) с исследованием не только комплекса подовых хромосом, но и аутосом, с целью выбора для переноса в матку эмбрионов женского попа без генетической патологии может способствовать повышению эффективности программы ВРТ у таких пациентоа

В настоящее время литературные данные относительно исходов программ ВРТ у супружеских пар с del AZF немногочисленны, представлены на малых выборках, освещены недостаточно полно и противоречивы (Van Golde R.TJ., 2001; Gambera L, 2010; Patrat С, 2010; Wu W., 2011; Kim MJ, 2012). Поэтому представляется актуальной комплексная оценка исходов программ ЭКО/ИКСИ и определение целесообразности применения ПГД для оптимизации программы ВРТ у данного контингента пациентов.

Цель исследования: оптимизация программы ЭКО/ИКСИ у супружеских пар с микроделецией AZF локуса хромосомы Y.

Задачи исследования

1. Оценить распространенность и структуру микроделеций AZF локуса хромосомы Y у пациентов с патозооспермией, планирующих проведение программы ЭКО/ИКСИ.

2. Провести сравнительную оценку параметров клинического и гормонального статуса у супружеских пар с делецией в AZF локусе хромосомы Y и без нее.

3. Изучить особенности фолликуло-, оогенеза и раннего эмбриогенеза у супружеских пар с микроделецией AZF локуса хромосомы Y и без нее.

4. Оценил, хромосомный набор эмбрионов (частоту и структуру распространенных анеуплоидий) у супружеских пар с микроделецией AZF локуса хромосомы Y и без нее и выявить возможные корреляции с применяемыми протоколами стимуляции суперовуляции.

5. Провести сравнительную оценку результатов программ ЭКО/ИКСИ и исходов беременностей у супружеских пар с мутацией в AZF локусе хромосомы Y три проведении ПГД и без нее и определить роль ПГД в оптимизации исходов программы ВРТ у данной категории пациентов.

6. Разработать практические рекомендации по реализации программы ВРТ у данного контингента больных.

Научная новизна

По результатам проведенного исследования тучно обоснована необходимость персонифицированного подбора протоколов для стимуляции функции яичников у супружеских пар с del AZF. Проведен анализ влияния протоколов стимуляции суперовуляции на развитие анеуплоидии у эмбрионов таких больных.

Определена частота хромосомных нарушений и получены новые данные о структуре ансуплощдаи хромосом 13,18,21 и гоносом у эмбрионов супружеских пар с del AZF и без нес. Методом бинарной логистической регрессии впервые установлены факторы, достоверно влияющие на выживаемость эмбрионов у данной категории пациентов.

Проведена сравнительная оценка результативности программ ЭКО/ИКСИ и исходов беременностей у супружеских пар с del AZF с проведением ПГД и без нее. Представлена и научно обоснована целесообразность проведения ПГД в рамках программы ВРТ у данного контингента больных.

Практическая значимость На основании проведенного исследования определена необходимость проведения медико-генетического консультирования с исследованием AZF локуса хромосомы Y на этапе подготовки к программе ВРТ всем супружеским парам с бесплодием, обусловленным мужским фактором.

В результате исследования выявлена высокая частота хромосомной патологии (как половых хромосом, так и аутосом) у эмбрионов супружеских пар с del AZF, что определяет целесообразность проведения ПГД в рамках программы ВРТ у данной категории пациентов.

Полученные данные по эффективности программ ЭКО/ИКСИ выявили высокий риск самопроизвольного прерывания беременности у супружеских пар с del AZF. Анализ результатов исследования показал, что применение ПГД в рамках программы ЭКО/ИКСИ у данной категории пациентов позволяет достоверно снизил, частоту репродуктивных потерь и увеличить частоту родоа

Адекватное проведение стимуляции функции яичников с персонифицированным подбором протоколов стимуляции и последующим проведением ПГД с переносом в матку эмбрионов женского пола без распространенных анеуплоидий для оптимизации программы ВРТ способствуют повышению результативности программы и увеличивают вероятность рождения здорового ребенка у супружеских пар с del AZF. Разработаны практические рекомендации по реализации программы ВРТ у таких пациентов.

Положения, выносимые на защиту

1. Наличие мшфоделеции в А2Р локусе хромосомы У у мужчин супружеских пар с бесплодием оказывает влияние на развише эмбрионов уже в период первых трех суток после ИКСИ, вследствие чего 31,5% эмбрионов, потенциально пригодных для переноса в матку или для проведения генетической диагностики, останавливаются в своем развиши, что влияет на эффективность программы ЭКО/ИКСИ.

2. Пациенткам из супружеских пар с деяециями в А22 локусе хромосомы У следует персонифицировано подбирать протоколы стимуляции в рамках программы ЭКО/ИКСИ. Основной принцип выбора протокола заключается в получении большего количества фолликулов и ооцигов «хорошего» качества с целью увеличения количества эмбрионов для диагностики и переноса в матку при минимизации побочных эффектов и циклов с отменой переноса эмбрионов.

3. Выявленный у эмбрионов супружеских пар с мутацией А2Т локуса хромосомы У высокий уровень анеупловдии (59,7%) с преобладанием в структуре патологии мутаций, при которых эмбрионы имеют высокий потенциал к имплантации и дальнейшему развиппо, а также отсутствие взаимосвязи между морфологическими характеристиками эмбриона и наличием у него хромосомной патологии, свидетельствуют о необходимости проведения ПГД в рамках программы ВРТ для исключения переноса в матку эмбрионов с анеуплоидией по исследованным хромосомам и минимизации риска рождения больного ребенка

4. Перенос эмбрионов женского пола без распространенных анеуплоидий в рамках ПГД у супружеских пар с мутацией в АЗ7 локусе хромосомы У способствует повышению эффективности программы ВРТ и увеличению количества родов в 7 раз, что указывает на целесообразность использования данной методики у таких пациентов.

Личный вклад автора

Автор непосредственно участвовал в выборе направления исследования, разработке цели и задач исследования, обобщении, анализе, статистической обработке полученных результатов. Автором лично произведено обследование супружеских пар и участие во всех этапах лечения методом ЭКО, в анализе результатов генетической диагностики эмбрионов.

Соответствие диссертации паспорту полученной специальности Научные положения диссертации соответствуют формуле специальности 14.01.01 — «акушерство и гинекология». Результаты проведенного исследования соответствуют области исследования специальности, конкретно пунктам 4 и 5 паспорта акушерства и гинекологии.

Апробация материалов диссертации Основные положения диссертации и результаты работы представлены и доложены на 4th Asia Pacific Congress on Controversies in Obstetrics Gynecology and Infertility (COGI): Building Consensus in Gynecology, Infertility and Perinatology (BCGIP) (Bangjtok, 2011); VI Международном конгрессе по репродуктивной медицине (Москва, 2012 г.); ХШ Всероссийском научном Форуме «Мать и Дитя» (Москва, 2012); научно-практческой конференции «Прошлое, настоящее и будущее ВРТ (памяти профессора БВ. Леонова)» (Москва, 2013). Работа обсуждена на межклинической конференции отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия (22.112013) и заседании апробационной комиссии ФГЪУ «НЦАГиП им. В.И. Кулакова» Минздрава России (02.122013).

Внедрение результатов исследования в практику Исследование AZF локуса хромосомы Y у супружеских пар с бесплодием, обусловленным мужским фактором, и применение ПГД в рамках программы ВРТ у данного контингента пациентов внедрены в пракгаческую деятельность отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия ФГБУ «НЦАГиП им Вй Кулакова» Минздрава России.

По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ, из которых 4 статьи в рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК.

Структура и объем диссертации Диссертация изложена на 159 страницах компьютерного текста и состоит га введения, четырех глав, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа иллюстрирована 27 таблицами и 49 рисунками. Список литературы включает 27 источников на русском и 112 на иностранных языках.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материал и методы исследования В соответствии с цедао исследования и поставленными для ее решения задачами в рамках отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия (руководитель отделения - д.м.н. Калинина Е А) и лаборатории репродуктивной генеппси (руководитель отделения - д.б л. Глинкина Ж.И) ФГБУ «НЦАГи П им. В Л Кулакова» Минздрава России было обследовано 439 супружеских пар с бесплодием, обусловленным мужским или сочеганным фактором, обратившихся для проведении программы ЭКО/ИКСИ в период с октября 2010 г. по март 2013 г По результатам проведенного обследования на основании кригериев включения и исключения д ля исследования были отобраны 84 супружеские пары.

Супружеские пары, включенные в исследование, были разделены на три группы в зависимости от наличия/отсутствия микроделеций в А/Я7 локусе хромосомы У и особенностей проведения программы ВРТ- с или без 111Д (рис. 1).

439 супружеских пар с патозооспермией у мужей

72 супружеские пары с

V1

del AZF у мужей

-—чг 367 супружеских пар без —1 ЗТаП—i/ del AZF у мужей

Исследуемая группа (основная группа)

24 супружеские пары с del AZF у мужей

пгд

Группа сравнения II

22 супружеские пары с del AZF у мужей без ПГД

39 циклов ЭКО/ИКСИ

Группа сравнения I

38 супружеских пар без del AZF у мужей

пгд

II этап

Рисунок 1. Схема распределения обследованных супружеских пар по группам

Основная группа - 24 супружеские пары с del AZF, 41 цикл ЭКО/ИКСИ+ПГД Груша сравнения 7-38 супружеских пар без del AZF, 44 цикла ЭКО/ИКСИ+ПГД Группа сравнения П - 22 супружеские пары с del AZF, 39 циклов ЭКО/ИКСИ без ГИД

Исследование AZF локуса хромосомы Y проводили методом мПЦР амплификации (15 STS-маркеров). Всем супружеским парам проюдилось цитогенетичесюе исследование лимфоцитов периферической крови.

Сшмуляция функции яичниюв проводилась по «длинному» протоколу с ашнистами гонадспропин - релизинг гормона и по протоколу с антагонистами гонадогропин - релизинг гормона Культивирование эмбрионов осуществляли да стацдартазированной методике. 111Д проводилась FISH методом (зонды к хромосомам X, Y, 13,18,21) на 3-й день культивирования эмбрионов. Перенос эмбрионов, поспрансферный период и диагностику беременности проводили по стацдартазированной методике.

Статистическая обработка данных выполнена с использованием пакета прикладных программ «Statistica for Windows» v. 7.0. Для сравнительного анализа данных в исследуемых группах применялись непараметрические методы (тест Краскела-Усялиса) и метод у2.

Результаты собственных исследований и их обсуждение

По результатам проведенного исследования общая распространенность микроделеций AZF локуса хромосомы У среди мужчин с различными отклонениями в показателях спермограммы составила 16,4%, при этом 94,4% микроделеций локализовались в AZFc субрегионе. Наиболее часто мутации выявлялись при необструкгавной азооспермии, а также при олигоастенотератозооспермии и астенотератозооспермии.

Анализ возрастных характеристик супружеских пар, включенных в исследование, не выявил статистически значимых различий по возрасту женщин в исследованных группах, однако были выявлены статистически значимые различия по возрасту мужчин (р=0,001). Медиана возраста женщин составила 31 год (22-36 лег), медиана возраста мужчин - 34 года (22-56лег).

При оценке репродуктивной функции пациентов выявлены статистически значимые различия в распределении случаев первичного и вторичного бесплодия в исследуемых группах. Так, у супружеских пар с del AZF первичное бесплодие диагностировалось примерно в 80% случаев, в то время как в группе сравнения I наиболее часто отмечалось вторичное бесплодие (р<0,05).

Анализ патоэооспермии показал, что наиболее часто в исследуемых группах

выявлялась алигоастетотерагозооспермия. В основной группе и группе сравнения П также встречалась необструкпшная азооспермия, в 83% и 18,2% случаев, соответственно.

Для стимуляции суперовуляции «длинный» протокол применяли в 73,2% случаев в основной группе, в 46,2% в группе сравнения Пив 38,6% в группе сравнения I (р=0,004). По параметрам фолликуло- и оогенеза, количеству полученных эмбрионов исследуете группы были сопоставимы Однако доля эмбрионов 3 суток развития от общего числа зрелых ооцигов у супружеских пар с делецией AZF локуса была статистически значимо ниже, чем у пациентов без делеции (р<0,001), и составила в основной группе и в группе сравнения П 68,5% и 69,9%, соответственно, в то время как в группе сравнения 1-82,5%.

Аналго морфологических характеристик эмбрионов 3 суток развития выявил статистически значимые различия между группами (р<0,0001). Так, доля эмбрионов «плохого» качества в основной группе и группе сравнения П составила 57% и 61,9%, соответственно, в группе сравнения I -25,6%.

Результаты FISH анализа ядер бластомеров эмбрионов в группах с ПГД показали, что уровень анеуплоидии в ядрах был статистически значимо выше в основной группе—59,7% (из 159 исследованных бластомеров), чем в группе сравнения I — 41,4% (из 186 исследованных бластомеров) (р=0,001). В структуре хромосомных нарушений у эмбрионов в основной группе преобладала сочетанная анеуплоидия—28$%, данный вид патологии встречался в 2 раза чаще в этой группе, чем в группе сравнения I -12,9% (р<0,001). Частота встречаемости анеуплоидии только поносом у эмбрионов в основной группе была в 3 раза выше, чем в группе сравнения I, и составила 14,5% и 4,8%, соответственно (р<0,001). Кроме того, анализ данных по отдельным аутосомам выявил статистически значимые различия в частоте встречаемости анеуплоидии хромосомы 18 между группами — в основной группе — 32,1%, в группе сравнения 1—21,5% (р<0,05).

Следует отметить, что у значительной части эмбрионов в основной группе выявлялись анеуплоидии, при которых эмбрионы являются жизнеспособными и могут иметь высокий потенциал к имплантации и развитию, что может привести к рождению детей с генегаческой патологией. Частота встречаемости моносомии хромосомы X и патологии гоносом, соответствующей синдрому Клайнфельтсра, составила 113%, дисомии хромосомы Y—8,8%.

Частота трисомии хромосомы 13 составила 6,3%, хромосомы 18 — 14,5%, хромосомы 21 — 8,8% случаев.

Анализ связи между морфологическими характеристиками эмбрионов третьего дня развитая и наличием у них анеуплоидии не выявил корреляции между этими показателями в грушах с ПГД (рХ),05). Так, в основной группе у 66,2% эмбрионов «хорошего» качества была выявлена хромосомная патология, 46,3% эмбрионов «плохого» качества не имели патологии по исследованным хромосомам. Также не было выявлено корреляции между наличием анеуплоидии у эмбрионов и примененными протоколами стимуляции (р>0,05).

На заключительном этапе работы был проведен сравнительный анализ исходов прогрымм ЭКО/ИКСИ в исследованных группах (табл. 1).

Таблица 1

Сравнение результативности программ ЭКО/ИКСИ в исследованных группах

Показатель Основная группа Группа сравненияI Группа сравненияП

Циклы с переносом эмбрионов 31(75,6%)* 42(95,5%)* 35(89,7%)

Циклы без переноса эмбрионов 10(24,4%)* 2(4,5%)* 4(10,3%)

Частот имплантации 16%* 39,3%* 14,7%

Частота наступления беременноспйдакл стмуляции 19,5%* 40,9%* 23,1%

Чалога наступления беремеиносшЬеренос эмбрионов 25,8% 42,9% 25,7%

Чалогарепродукивных потерь 12,5%* 11,1% 88,9%*

Частота родэв 87,5%* 88,9% 11,1%*

*- различия между выделенными параметрами статистически значимы (р< 0,05), определены относительно результатов в основной группе (dd AZF с ПГД)

Самый большой процент циклов с отменой переноса эмбрионов диагностировался в основной группе - 24,4%, что было обусловлено отсутствием эмбрионов без генетической патологии по итогам ПГД

Показатели частоты имплантации были сопоставимы у супружеских пар с del AZF в группах с ПГД и без нее, однако этот показатель был в 2 раза выше в группе сравнения I — 393% (р=0,007). Более низкая частота имплантации у супружеских пар с del AZF может бьпь связана с наличием у эмбрионов анеуплоидии хромосом, анализ которых не производился в рамках ПГД

Показатели частоты наступления беременности статистически значимо не различались у супружеских пар с del AZF в группах с проведением ПГД и без нее. Частота наступления беременности на перенос эмбрионов составила 25,8% и 25,7%, соответственно. В группе сравнения I эти показатели были почта в 2 раза выше, достигнув уровня статистической значимости в расчете на цикл стимуляции (р=0,03).

Частота репродуктивных потерь у супружеских пар с del AZF в группе без ПГД была в 7 раз выше, чем с ПГД и составила 88,9% против 12,5% (р=0,007), что может бьпь обусловлено наличием анеуплоидии у эмбрионов.

Частота родов у супружеских пар с del AZF в перерасчете на циклы с переносом эмбрионов была в 8 раз выше в группе с ПГД чем без нее, и составила 22,6% и 2,9%, соответственно (р=0,014). Частот родов от общего числа беременностей в основной группе составила 87,5%, в группе сравнения П—11,1%. Показатели частоты репродуктивных потерь и родов в основной группе и группе сравнения I были сопоставимы, что свидетельствует о высокой эффективности ПГД как меры профилактики прерывания беременности на ранних сроках. У супружеских пар в основной группе родилось 9 живых детей, в группе сравнения П— 1, в группе сравнения 1-24 ребенка.

Полученные в ходе проведения исследования данные свидетельствуют о том, что супружеские пары с мутацией AZF локуса хромосомы Y составляют особую группу пациентов и требуют иццивцдуализации стратегий лечения бесплодия.

вывода

1. Распространенность мутаций в AZF локусе хромосомы Y у пациентов с бесплодием и различными отклонениями в показателях сперметраммы составляет 16,4%. В структуре мутаций преобладают микроделеции AZFc субрегиона, на долю которых приходится 94,4% случаеа Супружеские пары с делециями AZF локуса хромосомы Y входят в труппу высокого риска по возникновению генетической патологии у эмбрионов.

2. Показатели клинического, гормонального статуса, процессов фолликуло- и оогенеза, а также применяемые протоколы стимуляции не оказывают влияния на развигае хромосомной патологии у эмбрионов супружеских пар с мутацией AZF локуса

хромосомы У, что может свидетельствовать о роли мужского фактора (наличие делеции) в данном процессе.

3. При исследовании 5 хромосом (X, У, 13, 18, 21) у эмбрионов супружеских пар с микроделецией /\7Т локуса хромосомы У различные типы анеуплоидии выявлены в 59,7% случаев. Частота встречаемости сочетанной хромосомной патологии у эмбрионов составляет 28,9%; анеуплоидии аугосом - 16,4%, поносом - 14,5%. В структуре анеуплоидии преобладают мутации, при которых эмбрионы могут иметь высокий потенциал к имплантации и дальнейшему развитию.

4. Наличие микроделеции в А2Т локусе хромосомы У у мужчин супружеских пар с бесплодием оказывает влияние на ранние этапы развития эмбрионов, что приводит к снижению их выживаемости на 30% в период первых трех суток после ИКСИ, при этом доля эмбрионов «плохого» качества составляет 61,9%. Не выявлена взаимосвязь между морфологическими характеристиками эмбрионов и наличием у них анеуплоидии (66,2% эмбрионов «хорошего» качества содержат хромосомную патологию, 463% эмбрионов «плохого» качества не имеют патологии по исследованным хромосомам).

5. У супружеских пар с делецией АШ локуса хромосомы У проведение процедуры биопсии бластомера в рамках ПГД не оказывает отрицательною влияния на выживаемость эмбрионов, частоту имплашации и наступления беременности в программе ЭКО/ИКСИ. Обшдя выживаемость эмбрионов после ПГД составляет 51,2%; выживаемость до стадии морулы/бластоцисты - 45,7%. Частота наступления беременности на цикл стимуляции в программе ВРТ с ПГД и без нее составляет 19,5% и 23,1%, соответственно; частота наступления беременности на перенос эмбрионов — 25,8% и 25,7% случаев, соответственно.

6. Перенос эмбрионов без распространенных анеуплоидий у супружеских пар с мутацией в А7Р локусе хромосомы У в рамках программы ВРТ с ПГД снижает риск самопроизвольного прерывания беременности в 7 раз и приводит к увеличению количества родов у данной категории пациентов до 87,5%. Общая частота репродуктивных потерь в I и II триместрах беременности после проведения ПГД-12,5%, без ПГД- 88,9%.

7. Супружеские пары, в которых мужчины являются носителями мутации в РЛс локусе хромосомы У, входят в группу высокого риска по неудачам имплантации, невынашиванию беременности и рождению ребенка с хромосомной патологией.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Супружеским парам с бесплодием, обусловленным мужским фактором, на этапе подготовки к программе ЭКО/ИКСИ необходимо проведение медико-генепмеского консультирования с исследованием А2Р локуса хромосомы У.

2. Супружеским парам, в которых мужья являются носителями делеций в А2Р локусе хромосомы У, целесообразно проведение ПГД в рамках программы ВРТ с исследованием у эмбрионов не только комплекса половых хромосом, но и аутосом, при этом спектр изучаемых аутосом должен быть максимально расширен Перенос эмбрионов в матку без определения их генетического профиля на основании оценки только морфологических характеристик снижает эффективность программы ВРТ и может привести к самопроизвольному прерыванию беременности или рождению ребенка с хромосомной патологией.

3. Пациенткам из супружеских пар с мутацией А2У локуса хромосомы У следует персонифицировано подбирать протоколы стимуляции в рамках программы ЭКО/ИКСИ. Основной принцип выбора протокола заключается в получении большего количества фолликулов и ооцшов «хорошего» качества с целью увеличения выборки эмбрионов д ля переноса при минимшации побочных эффектов и количества циклов с отменой переноса

4. Супружеским парам с делецией А7Р локуса хромосомы У с целью профилактики передачи мутации потомству мужского пола, повышения результативности программы ЭКО/ИКСИ и вероятности рождения здорового ребенка рекомендуется проведение ПГД не только с выбором эмбрионов женского пола, но и с анализом часто встречающихся анеуплоцдий, и последующим проведением инвазивной пренагальной диагностики.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Роль преимплантационной диагностики у супружеских пар в программе ЭКО/ИКСИ / Калинина ЕА, Лебедева ОЕ, Беляева НА, Губаева ЗМ, Киндарова ЛБ, Кузьмичев ЛН. // Проблемы репродукции: материалы V Международного конгресса по репродуюивной медицине. - 2011.-С.34-35.

2. Роль медико-генетческого консультировш ия у пациентов с нарушениями репродуктивной функции / Глинкина ЖИ, Калинина ЕА, Кузьмичев ЛН, Киндарова ЛБ., Мамонова ВВ., Бугай Т.В., Микаелян В.Г., Белоконь ИЛ, Губаева ЗМ, Беляева НА // Тезисы докладов Всероссийского Конгресса с международным участием <Амбулаторно-поликлиническая практика: проблемы и перспективы». -2011. - С. 19-20.

3. Изучение вероягаости возникновения пагозооспермии в зависимости от возраста мужчины у супружеских пар, включенных в программу ЭКО/ИКСИ / Лебедева О.Е., Глинкина ЖИ, Калинина ЕА, Киндарова ЛБ., Микаелян ВГ, Беляева НА, Губаева ЗМ. // Материалы ХП Российского Форума «Мать и Дитя». -2011. - С. 347-348.

4. Профилактика наследования делеций в АНе локусе хромосомы У потомством супружеских пар, включенных в программу ЭКО/ИКСИ / Глинкина ЖИ, Калинина Е А, Кицдарова ЛБ., Микаелян ВТ., Беляева НА, Губаева ЗМ. // Тезисы к IX научной конференции «Генетика человека и патология. Аюуальные проблемы современной цигогенетики»-2011.-С. 27-28.

5. Преимпла! ггационная диагностика у супружеских пар с мутацией А2Р локуса хромосомы У и полиморфизмом гена СПИ у мужей / Беляева НА, Глинкина ЖИ., Калинина Е А, Сокур СА, Губаева ЗМ // Проблемы репродукции: материалы VI Международного конгресса по репродуктивной медицине. - 2012. - С. 28-29.

6. Особенности стимуляции суперовуляции у пациентов с хромосомными транслокациями в кариогипе / Глинкина ЖИ, Микаелян ВГ, Алиева КУ, Кивдарова ЛБ, Беляева НА, Губаева ЗМ, Сокур С А, Калинина Е А // Тезисы докладов Всероссийского Конгресса с международным участием «Амбулаторно-поликлиническая практика - в эпицентре женского здоровья»-2012.-С. 186-187.

7. Применение преимплангационной диагностики в рамках программы вспомогательных репродуктивных технологий у супружеских пар с сочетанием мутаций в AZF локусе хромосомы Y и полиморфизма гена CFTR у мужей / Беляева IIA, Глинкина Ж.И., Сокур СА, Губаева ЗМ, Долгушина КВ., Калинина ЕА // Акушерство и Гинекология. -2012.—№4-1.-С. 54-58.

8. Зависимость результатов стимуляции суперовуляции и количества полученных эмбрионов в рамках программы экстракорпорального оплодотворения от типа хромосомной аберрации в кариотипе пациента / Микаелян ВГ, Глинкина Ж.И., Долгушина НВ, Киндарова ЛБ, Беляева НА, Губаева ЗМ, Сокур С А, Насхлегашвили ИВ, Калинина ЕА// Акушерство и Гинекология,—2012,—№4-2—С. 57-61.

9. Анализ частоты и типов анеугаювдии в сперматозоидах у мужчин с патозооспермией в программах вспомогательных репродуктивных технологий / Сокур С А, Глинкина Ж.И., Долгушина НВ, Беляева НА, Калинина ЕА // Материалы ХШ Всероссийского научного Форума «Мать и Дитя». -2012. - С. 478.

10. Современные аспекты проблемы мужского бесплодия, ассоциированного с мутацией AZF локуса хромосомы Y / Беляева НА, Глинкина ЖЛ, Калинина Е А // Акушерство и Гинекология.-2012. -№&-2. -С. 21-27.

11. Диагностика мужского бесплодия, ассоциированного с микроделециями в локусе AZF хромосомы Y / Барков ИЮ, Сорока НЕ, Попова АЛО, Гамвдов СИ, Беляева НА, Глинкина ЖИ., Калинина ЕА, Трофимов ДЮ, Сухих Г.Т. // Акушерство и гинекология.-2014.-№1.-С.59-64.

Подписано в печать: 14.04.14

Объем: 1,0 п.л. Тираж: 120 экз. Заказ № 239 Отпечатано в типографии «Реглет» г. Москва, Ленинский проспект, д.2 (495) 978-66-63, www.reglet.ru