Автореферат диссертации по медицине на тему Растворимые формы мембранных белков клеток иммунной системы при бронхиальной астме у детей
На правах рукописи
Максимова Анна Владимировна
РАСТВОРИМЫЕ ФОРМЫ МЕМБРАННЫХ БЕЛКОВ КЛЕТОК ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ПРИ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЕ У ДЕТЕЙ
14.0036 — аллергология и иммунология
Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Нижний Новгород, 2006
Работа выполнена на кафедре молекулярной биологии и иммунологии Государственного образовательного учреждения высшего
профессионального образования «Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского» Федерального агентства по образованию
Научный руководитель:
доктор биологических наук, профессор В.В. Новиков Официальные оппоненты:
доктор медицинских наук, профессор Л.И. Краснопрошина, доктор биологических наук, профессор В.Я. Арион
Ведущая организация:
Государственное образовательное учреждение высшего
профессионального образования «Российский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию
Защита состоится 2006 года в « ^^ » часов на
заседании Диссертационного совета К 208.046.01 при ФГУН «Московский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора по адресу: 125212, Москва, ул. Адмирала Макарова, д. 10.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУН «Московский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора.
Автореферат разослан « ^ » С-Я^'С ^^у-^ЭРб года
Ученый секретарь
Диссертационного Совета кандидат медицинских наук
Л.И. Новикова
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы
Бронхиальная астма служит классическим примером иммунопатологии и является частым хроническим заболеванием легких у детей. В течение последних десятилетий во всем мире отмечен рост ее распространенности, а также увеличение числа детей с тяжелыми формами заболевания. Среди школьников России частота астмы составляет 3-12% [Научно-практическая программа «Бронхиальная астма у детей: диагностика, лечение и профилактика», 2004]. Многими специалистами признается потенцирующая роль респираторной вирусной и бактериальной инфекции в утяжелении бронхиальной астмы, развитии ее обострений [Балаболкин И.И., 2003, Балкарова Е.О., Чучалин А.Г., 1998, Федосеев Г.Б., 1996]. В частности, это относится к таким патогенам как цитомегаловирус и Mycoplasma pneumoniae. Инфицированность микоплазмами детей с астмой составляет 66-88%, а смешанная, вирусно-микоплазменная инфекция отмечается у 40-42% больных детей. Инфекционные микроорганизмы часто персистируют в слизистой оболочке дыхательных путей и могут влиять на функциональное состояние иммунной системы больных бронхиальной астмой [Вишнякова Л.А., 1990, Кузьменко Л.Г. и др., 1999, Овсянников Д.Ю. и др., 2002].
Широкая распространенность бронхиальной астмы обусловливает актуальность детального исследования молекулярных механизмов иммунного ответа при различных формах данного заболевания у детей. Это относится и к изучению роли растворимых форм мембранных белков клеток иммунной системы в патогенезе астмы.
Мембранные белки клеток иммунной системы играют важную роль в активации, регуляции, кооперации этих клеток и реализации иммунного ответа в целом. Известно, что мембранные протеины могут иметь растворимые изоформы, образующиеся за счет шеддинга или альтернативного сплайсинга матричной РНК. Получены данные о том, что они могут выполнять функции ограничителей иммунных реакций или же выступать в роли активаторов иммунологических процессов [Новиков В.В. и
др., 2005, Adamashvili I. et al., 2002, Drummer R. et al., 1992].
Оценка сывороточного уровня отдельных антигенов и иммунофенотипирование мононуклеарных клеток крови могут быть полезны как в теоретическом аспекте для определения их роли в патогенезе различных заболеваний (в том числе и бронхиальной астмы), так и в практической медицине для мониторинговых и прогностических целей. Цель исследования
Изучить характер изменения сывороточного уровня растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы во взаимосвязи с популяционным составом мононуклеарных клеток крови детей, больных бронхиальной астмой. Задачи
1. Исследовать относительное содержание клеток периферической крови, несущих на своей поверхностной мембране гликопротеины CD4, CD8 и CD 16 у детей, больных бронхиальной астмой.
2. Определить сывороточное содержание растворимых CD25, CD95, CD38, CD50, CD54, HLA-I, HLA-DR антигенов и относительное содержание положительных по этим антигенам мононуклеарных клеток периферической крови у детей, больных астмой разной степени тяжести.
3. Определить уровень вышеприведенных растворимых антигенов сыворотки крови и популяционный состав мононуклеарных клеток в периоды обострения и ремиссии астмы.
4. Оценить характер изменения сывороточного содержания растворимых форм CD25, CD95, CD38, CD50, CD54, HLA-I, HLA-DR антигенов и CD25+, CD95+, CD38+, CD50+, CD54+, HLA-f, HLA-DR* мононуклеарных клеток крови при бронхиальной астме, ассоциированной с инфицированием цитомегаловирусом и/или Mycoplasma pneumoniae.
5. Исследовать возможность существования корреляционных взаимоотношений между сывороточным уровнем тестированных растворимых антигенов, популяционным составом мононуклеарных клеток крови и проходимостью бронхов у детей.
Научная новизна
Показано, что развитие бронхиальной астмы у детей сопровождается изменением сывороточного содержания растворимых форм ряда мембранных антигенов клеток иммунной системы. Сывороточный уровень антигенов адгезии sCDSO1*' и sCD54, а также содержание растворимых форм активационных антигенов CD25, HLA-DR и опосредующего апоптоз белка sCD95, повышается по мере нарастания степени тяжести заболевания, что свидетельствует об их возможном участии в патогенетических механизмах формирования иммунных реакций у детей при бронхиальной астме. У детей при различных вариантах течения бронхиальной астмы выявлены изменения иммунофенотипа мононуклеарных клеток периферической крови, несущих на своей поверхностной мембране рецепторы CD25, CD38, CD50, CD54 и HLA-DR.
Впервые продемонстрировано влияние возбудителей оппортунистических инфекций (цитомегаловируса и Mycoplasma pneumoniae) на уровень растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы у детей с астмой. Отмечено, что как моноинфицирование цитомегаловирусом (ЦМВ) или микоплазмой, так и микст-инфицирование (ЦМВ+микоплазма) сопровождаются повышением сывороточного содержания антигенов sCD25 и sHLA-DR. У микст-инфицированных детей, больных бронхиальной астмой обнаружен также рост сывороточного уровня растворимых антигенов адгезии CD50, CD54 и снижение уровня SCD38 антигена. Выявлено, что моноинфицирование цитомегаловирусом ассоциировано у больных детей с уменьшением уровня антигена sCD50 и понижением относительного количества CD54+, HLA-DR+ и HLA-I+ мононуклеарных клеток крови, определяемых в реакции иммунофлуоресценции. Сравнительное сопоставление показало, что микст-инфицирование сопровождается наиболее
r> sCD25, sCD95, sCD38, sCDSO, sCD54, sHLA-I, sHLA-DR - растворимые формы CD25, CD95, CD38, CD50, CD54 мембранных белков клеток иммунной системы и молекул главного комплекса гистосовместимости I и II классов.
выраженными изменениями уровня тестированных антигенов. Эти изменения отражают вариабельность иммунологических реакций организма в зависимости от вида инфицирования.
Практическая значимость
Содержание растворимых ICAM-1 и HLA-DR антигенов в сыворотке крови может быть использовано в качестве дополнительных показателей тяжести бронхиальной астмы и выраженности бронхообструкции, и рассматриваться как возможный мониторинговый показатель неблагоприятного течения астмы у детей.
Увеличение сывороточной концентрации растворимой формы антигена адгезии ICAM-1 у детей при бронхиальной астме взаимосвязано со снижением проходимости средних бронхов (величиной коэффициента МОС5о). Увеличение уровня HLA-DR-положительных клеток и растворимых HLA-DR антигенов ассоциировано с усилением обструкции мелких и средних бронхов (параметры МОС75 и МОС50), соответственно.
Определение уровня растворимых форм CD25, CD95, CD54, HLA-DR антигенов клеток иммунной системы может применяться для прогнозирования тяжести течения бронхиальной астмы у детей (в том числе и ассоциированной с инфицированием цитомегаловирусом и микоплазмой) в аллергологических и пульмонологических педиатрических службах.
Полученные сведения применяются в работе врачами аллергологического центра детской городской клинической больницы №27 «Айболит», а также используются в курсе лекций по иммунологии для студентов биологического факультета ННГУ им. Н.И. Лобачевского.
Положения, выносимые на защиту
1. Бронхиальная астма у детей сопровождается изменением сывороточного содержания растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы, относящихся к различным функциональным группам белков.
2. Инфицированность больных бронхиальной астмой детей цитомегаловирусом и/или Mycoplasma pneumoniae ассоциирована с модуляцией уровня растворимых форм мембранных антигенов.
3. Содержание в крови растворимых форм антигенов CD54 и HLA-DR, а также HLA-DR-положительных мононуклеарных клеток отрицательно коррелирует с проходимостью бронхов у детей, больных бронхиальной астмой.
Апробация работы
Работа была апробирована 2 марта 2005 года на совместном расширенном заседании кафедры молекулярной биологии и иммунологии Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского, Нижегородского отделения Российского научного общества иммунологов, Нижегородского отделения Российского научного общества биохимиков и молекулярных биологов.
Результаты работы представлены на Международной научно-практической школе-конференции «Цитокины. Воспаление. Иммунитет», (Санкт-Петербург, 2002); VII и IX Нижегородской сессии молодых ученых (Н. Новгород, 2002, 2004); Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов, 2004»; Научной конференции, посвященной 75-летию Нижегородского НИИЭМ «Новые технологии в профилактике, диагностике, эпиднадзоре и лечении инфекционных заболеваний», (Н. Новгород, 2004); 3-м российском конгрессе «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии», (Москва, 2004); Молодежной школе-конференции «Актуальные аспекты современной микробиологии», 2005; 15-ом Национальном конгрессе по болезням органов дыхания и 1-м Учредительном конгрессе Евроазиатского респираторного общества, (Москва, 2005).
Публикации
По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ.
Структура и объем диссертации
Диссертационная работа в объеме 155 страниц состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных результатов и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы. Диссертация иллюстрирована 16 рисунками и 23 таблицами.
Библиографический указатель включает 340 источников литературы (79 отечественных и 261 иностранных авторов).
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования
Материалом для исследования служили образцы цельной периферической крови и сыворотки крови детей, больных бронхиальной астмой в возрасте 314 лет, наблюдавшихся в Аллергологическом центре Детской городской клинической больницы №27 «Айболит» г. Нижнего Новгорода. Диагноз бронхиальной астмы, тяжесть течения и период заболевания был установлен врачами больницы (доц. Т.А. Богданова, Е.В. Ермолаева) в соответствии с рекомендациями национальной программы «Бронхиальная астма у детей. Стратегия лечения и профилактика» (1997 г.).
При оценке состояния иммунитета у детей с разной степенью тяжести бронхиальной астмы был проведен анализ образцов гепаринизированной крови и сыворотки крови 117 детей в возрасте 7-14 лет. Группу контроля составили 24 клинически здоровых ребенка того же возраста без признаков бронхиальной астмы и аллергических реакций.
Исследование на маркеры цитомегаловирусной, микоплазменной и хламидийной инфекций проводилось совместно с к.б.н. Н.И. Кубышевой (ДГКБ №27 «Айболит») и включало в себя определение в крови IgG антител к антигенам Cytomegalovirus, Mycoplasma pneumoniae и Clamidophila pneumoniae с помощью иммуноферментного анализа. Определение фрагментов генома Cytomegalovirus, Mycoplasma pneumoniae, Clamidophila pneumoniae, Herpes simplex virus 1, 2 в крови, моче, слюне, слезе детей методом полимеразной цепной реакции осуществлялось сотрудниками Нижегородского НИИЭМ им. И.Н. Блохиной (к.б.н. В.Н. Мазепа). При определении состояния иммунитета детей, больных астмой, положительных по маркерам инфицированности цитомегаловирусом и/или Mycoplasma pneumoniae, тестировали образцы гепаринизированной крови и сыворотки крови 95 больных в возрасте 3-14 лет. Группу контроля составили 22
клинически здоровых ребенка соответствующего возраста, отрицательных по маркерам инфицированности тестированными патогенами.
Исследование функции внешнего дыхания у детей осуществлялось врачом-аллергологом ДГТСБ №27 Ермолаевой Е.В. с помощью спирографа «Vitalograf-alfa» (Англия).
Определение уровня растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы проводили с помощью иммуноферментных методов с использованием поликлональных антител, специфичных к мембранным антигенам мононуклеарных клеток крови человека и моноклональных антител (МКА) серии ИКО [Новиков, 1988]. Определение сывороточного уровня растворимых CD25, CD95, CD50, CD54, CD38, HLA-DR антигенов проводили с применением МКА ИКО-105, ИКО-160, ИКО-бО, ИКО-184, ИКО-20, ИКО-1, соответственно. Для определения сывороточного уровня растворимых молекул главного комплекса гистосовместимости I класса использовали МКА ИКО-53 и ИКО-216.
Иммунофенотипирование мононуклеарных клеток крови выполняли методом непрямой иммунофлуоресценции с применением соответствующих МКА серии ИКО. МКА были получены из Российского онкологического научного центра РАМН, г. Москва (проф. Барышников А.Ю.).
Статистический анализ осуществляли с использованием критериев Крускала-Уоллиса, Данна, Стьюдента с поправкой Бонферонни и критерия ранговой корреляции Спирмена.
Результаты и их обсуждение
В общей группе больных астмой детей обнаружено достоверное снижение относительного содержания CD4+ мононуклеарных клеток крови, а также выявлена тенденция к повышению числа CD16+ клеток при не изменяющемся содержании CD8+ Т-лимфоцитов. То есть, относительное количество Т-хелперов уменьшалось, а содержание цитотоксических лимфоцитов и натуральных киллеров оставалось в пределах нормы. Аналогичные изменения отмечены при повышении степени тяжести бронхиальной астмы (БА) и у больных в период ремиссии заболевания. Период обострения
сопровождался снижением относительного числа Т-хелперов (р<0,05) и нормализацией уровня CD 16-положительных клеток.
Известно, что БА у детей нередко сопровождается инфицированием оппортунистическими патогенами, такими как цитомегаловирус и микоплазмы [Федосеев Г.Б., 2001; Балаболкин И.И., 2004].
В настоящем исследовании обнаружено, что при моноинфицировании детей, больных бронхиальной астмой, цитомегаловирусом отмечается снижение относительного количества CD16+ клеток в 1,3 раза (р<0,05) по сравнению с содержанием этих клеток у больных астмой без маркеров тестированных инфекций. Сравнение с контролем позволило выявить у детей при бронхиальной астме уменьшение относительного числа Т-хелперов периферической крови, как при моноинфицировании ЦМВ (р<0,05) или Mycoplasma pneumoniae (р>0,05), так и при отсутствии маркеров ЦМВ и микоплазмы (р<0,05), а также достоверный рост уровня CD16+ клеток при смешанном инфицировании и при отсутствии инфицирования.
Важная роль в механизмах иммунного ответа принадлежит CD25 (IL-2R) и CD95 (Fas) антигенам [Ярилин А.А., 1999; Mellery J. et al., 2002; Vaux D.L. et al., 1999]. У детей при БА выявлено достоверное повышение сывороточного уровня sCD25 и sCD95 антигенов и относительного количества CD95+ мононуклеарных клеток крови, возрастающие при усилении тяжести астмы (табл. 1).
Таблица 1
Уровень бСВ25 и бС095 антигенов в сыворотке крови детей при бронхиальной астме разной степени тяжести
Показ атель, (U/ml) Контроль БА (общая группа) Легкая БА Средне тяжелая БА Тяжелая БА
sCD25 95,1±18,1 270,3±46,1 * 179,8±99,1 272,0±37,5 * 401,8±86,5*
SCD95 378,7±58,6 611,3±88,3 ♦ 447,2±117,7 633,2±90,1 * 724,5±123,б*
* — достоверные различия по сравнению с контролем, (р<0,05).
Известно, что высокий уровень данных антигенов ассоциируется с активацией иммунной системы; вместе с тем растворимые формы участвуют в процессах ограничения активности иммунных реакций. В частности, sCD25 антиген связывает интерлейкин-2 и ограничивает, таким образом, пролиферацию Т-лимфоцитов, а также активность эозинофилов у больных детей. Апоптоз, являясь физиологической формой клеточной смерти, играет важную роль в разрешении воспаления. Ингибирование Fas-зависимого апоптоза путем блокады С095-клеточного рецептора растворимым Fas антигеном, способствует хронизации воспаления [Vignola, 2000].
Как в период обострения, так и в период ремиссии у детей при бронхиальной астме среднее содержание sCD25 и sCD95 антигенов было повышено относительно нормы (табл. 2).
Таблица 2
Сывороточное содержание растворимых антигенов у детей при
бронхиальной астме в период ремиссии и обострения
Показатель, (U/rol) Контроль Бронхиальная астма
Обострение Ремиссия
sCD25 95,3±18,1 241,8±53,4* 327,7±88,6*
sCD95 378,7±58,6 576,6±111,6 688,6±143,6*
sCD50 236,0±33,4 522,0±88,9* 494,8±133,4*
sCD54 39,1±5,6 78,4±16,2* 75,0±23,9
sHLA-I 921,5*221,0 785,0±279,7 753,5±220,7
sHLA-DR 99,5±12,5 299,7±58,8* 269,7±83,7*
* — достоверные различия по сравнению с контролем, (р<0,05).
У больных астмой среднетяжелого и тяжелого течения в период обострения отмечался статистически значимый рост уровня зС025 антигена' в 3 раза в сравнении с нормой, у детей при тяжелой БА в период ремиссии он был выше нормы в 4,9 раза (р<0,05). Уровень растворимого Раз-антигена достоверно возрастал в 1,9 раза при тяжелой астме в период обострения заболевания.
Относительное содержание CD25+ мононуклеарных клеток крови у детей в среднем соответствовало норме при обострении астмы и имело тенденцию к повышению при ремиссии заболевания. Относительное количество CD95+ мононуклеарных клеток периферической крови также имело лишь тенденцию к повышению во всех группах больных астмой.
Наряду с оценкой сывороточного уровня растворимых антигенов CD25, CD95 и относительного количества CD25+, CD95+ мононуклеарных клеток крови у детей при бронхиальной астме разной степени тяжести, нами проведено изучение характера изменения этих показателей у больных астмой детей, инфицированных ЦМВ и/или Mycoplasma pneumoniae (рис. 1).
Рис. 1. Сывороточное содержание sCD25 (ряд 1) и sCD95 (ряд 2) антигенов у детей положительных по маркерам инфицированности ЦМВ и/или Mycoplasma pneumoniae при бронхиальной астме.
1 — контроль; 2 — БА без инфекции (больные БА, отрицательные по маркерам Cytomegalovirus, Mycoplasma pneumoniae, Clamidophila pneumoniae, Herpes simplex virus 1,2); 3 — БА+ЦМВ (больные БА, положительные по маркерам Cytomegalovirus); 4 — БА+микоплазма (больные БА, положительные по маркерам Mycoplasma pneumoniae); 5 — БА+ЦМВ+микоплазма (больные БА, положительные по маркерам Cytomegalovirus и Mycoplasma pneumoniae). * - достоверные различия по сравнению с контролем, (р<0,05); ** — достоверные различия по сравнению с неинфицированными больными, (р<0,05).
Сывороточное содержание растворимого CD25 антигена в крови детей, больных бронхиальной астмой, отрицательных по маркерам тестированных
инфекций, имело тенденцию к повышению. Наблюдался достоверный рост уровня sCD25 антигена у детей с астмой, положительных по маркерам 1ДМВ и/или микоплазмы, как относительно нормы, так и относительно группы больных бронхиальной астмой, не инфицированных данными патогенами. Статистически достоверное повышение относительного содержания CD25-положительных клеток по сравнению с нормой было обнаружено при инфицировании детей, больных астмой, микоплазмой и при смешанном инфицировании ЦМВ и микоплазмой.
Выраженное (в 2,4 раза) статистически значимое повышение сывороточного уровня sCD95 антигена было отмечено у детей при бронхиальной астме, ассоциированной одновременно с цитомегаловирусным и микоплазменным инфицированием. В остальных группах обнаружена тенденция к росту содержания sCD95. При оценке относительного количества CD95* мононуклеарных клеток в периферической крови детей, больных астмой, положительных по маркерам инфицированности ЦМВ и/или микоплазмы, не выявлено изменений данного показателя ни в одной из групп.
Важными участниками иммунного ответа являются адгезивные гликопротеины поверхности клеток [Александров А.В. и др., 1997; Harris E.S. et al., 2000]. В связи этим, для исследования были выбраны представители молекул адгезии - ICAM-1 (CD54) и ICAM-3 (CD50), а также CD38 антиген.
CD38 антиген является антигеном адгезии, участвующим одновременно в механизмах активации клеток [Deaglio S. et al., 2001; Pfister M. et al., 2001]. В сыворотке крови детей при бронхиальной астмой разной тяжести не выявлено изменений в содержании растворимой формы этого антигена, как в период обострения, так и в период ремиссии. В то же время у детей, больных бронхиальной астмой и одновременно инфицированных ЦМВ и микоплазмой, обнаружено статистически достоверное снижение сывороточного уровня sCD38 антигена по сравнению с нормой и с больными астмой без маркеров тестированных инфекций.
Также обнаружен рост относительного количества CD38+ мононуклеарных
клеток крови при легкой БА в период обострения и у детей с астмой, моноинфицированных ЦМВ или микоплазмой (р<0,05).
Сывороточная концентрация бС050 и бС054 антигенов адгезии у больных общей группы, включающей детей с бронхиальной астмой разной тяжести, была выше нормальных значений в среднем в 2 раза (р<0,05). Более детальный анализ уровня этих антигенов показал, что повышение степени тяжести бронхиальной астмы сопровождалось увеличением сывороточного содержания антигенов адгезии (табл. 3). Достоверный рост уровня зС050 антигена был отмечен у больных со среднетяжелым течением заболевания, а рост уровня бСВ54 антигена - у детей со среднетяжелой и тяжелой астмой.
Относительное содержание С054+ мононуклеарных клеток у больных детей при увеличении степени тяжести астмы менялось противоположным образом. В среднем оно было достоверно снижено в 1,9 раза по сравнению со здоровыми детьми. Количество СБ50+ клеток крови у детей при бронхиальной астме в общей группе достоверно уменьшалось в 1,4 раза.
Таблица 3
Уровень бСВ50 и бС054 антигенов в сыворотке детей при бронхиальной астме разной тяжести
Показатель, (U/ml) Контроль БА (общая группа) Легкая БА Средне тяжелая БА Тяжелая БА
sCD50 236,0±33,4 488,1± 97,4* 242,7± 79,3 472,0±65,7* 725,9±210,9
sCD54 39,1±5,б 77,2±12,5* 32,4±6,3 76,б±11,9* 117,1*26,5*
* — достоверные различия по сравнению с контролем, (р<0,05).
Был проведен анализ сывороточного содержания вС050 и вСВ54 антигенов у детей, больных бронхиальной астмой в стадии обострения и ремиссии (табл. 2). Отмечен однонаправленный характер изменения содержания антигенов бС050 и бСВ54 в стадии обострения и ремиссии легкой, среднетяжелой и тяжелой астмы. Бронхиальная астма легкого течения отличалась нормальным уровнем бСП50 и бС054 антигенов при обострении и повышением их содержания в период ремиссии.
Среднетяжелая астма сопровождалась тенденцией к увеличению содержания данных растворимых антигенов адгезии в период обострения относительно периода ремиссии. При тяжелой астме содержание sCD50 и sCD54 антигенов оставалось одинаково высоким в оба периода заболевания. Однако средний сывороточный уровень этих молекул адгезии у больных (в общей группе БА) был увеличен относительно нормы приблизительно в 2 раза.
Определяли также относительное количество CD50* и CD54+ мононуклеарных клеток периферической крови при обострении и ремиссии бронхиальной астмы у детей. Оба периода заболевания сопровождались уменьшением уровня положительных по этим антигенам клеток по сравнению с контрольными значениями.
Был проведен анализ корреляционных взаимоотношений между сывороточным содержанием растворимых антигенов адгезии CD50, CD54, CD38, относительным количеством CD50, CD54, CD38 антиген-положительных клеток и параметрами максимальной объемной скорости выдоха (МОС). Параметры МОС используются в качестве критериев, определяющих выраженность бронхообструкции. Они являются одними из показателей функции внешнего дыхания и регистрируют степень проходимости крупных (МОС25), средних (MOC5q) и мелких (МОС75) бронхов [Баранов B.JL, 2002]. Выявлена отрицательная достоверная корреляционная связь между величиной МОС50 и сывороточным уровнем sCD54 антигена (r=s-0,71, р<0,05). То есть, увеличение сывороточной концентрации sICAM-1 антигена у детей, больных бронхиальной астмой, связано со снижением проходимости средних бронхов.
Повышение сывороточного уровня sCD54 антигена при возрастании тяжести БА и тесная корреляционной взаимосвязь между его уровнем и величиной коэффициента МОС50 демонстрируют важную роль растворимой молекулы ICAM-1 в развитии воспалительных процессов при астме у детей. Рост сывороточного уровня sCD50 антигена у детей при БА, вероятно, обусловлен сходом CD50 антигена с поверхности эпителиальных клеток, что приводит к нарушению процессов инициации иммунного ответа.
Определяли уровень ICAM-1 и ICAM-3 антигенов в крови детей, больных астмой, положительных по маркерам инфицированности ЦМВ и/или Mycoplasma pneumoniae.
Обнаружено, что сывороточный уровень sCD50 антигена в группе больных астмой лиц без изучаемых инфекций был увеличен в 2,5 раза относительно нормы (р<0,05) (рис. 2). При наличии маркеров микоплазменного инфицирования сывороточное содержание sCD50 имело ярко выраженную тенденцию к повышению. Обращает на себя внимание, что при бронхиальной астме, ассоциированной с наличием маркеров ЦМВ, содержание sCD50 антигена находится в пределах нормы. Наличие у больных одновременно маркеров инфицированности ЦМВ и микоплазмы приводило к увеличению содержания sCD50 в 4,4 раза в сравнении с нормой и в 1,8 раза по сравнению с больными астмой, не инфицированными этими патогенами (р<0,05).
Рис. 2. Сывороточное содержание sCD50 антигена у детей положительных по маркерам инфицированности ЦМВ и/или Mycoplasma pneumoniae при бронхиальной астме.
1 - контроль; 2 - БА без инфекции; 3 - БА+ЦМВ; 4 - БА+микоплазма; 5 -БА+ЦМВ+микоплазма.
* — достоверные различия по сравнению с контролем, (р<0,05);
** — достоверные различия по сравнению с неинфицированными больными,
(р<0,05).
Инфицирование больных детей ЦМВ и/или микоплазмой было ассоциировано также с повышением уровня бС054 антигена. Инфицирование ЦМВ сопровождалось достоверным повышением концентрации бСВ54 антигена в 1,8 раза, а смешанное инфицирование ЦМВ и микоплазмой — повышением в 3,6 раза относительно нормы (р<0,05) (рис, 3). В отличие от уровня растворимых эСП50 и зС054 антигенов, относительное содержание СБ50+ и С054+ мононуклеарных клеток имело тенденцию к понижению при БА, ассоциированной с инфицированием ЦМВ и/или микоплазмой. Наибольшее снижение относительного количества С050+ и СЭ54+ мононуклеарных клеток крови было выявлено у больных детей, положительных по маркерам инфицированности ЦМВ. Полученные результаты свидетельствуют о преимущественном влиянием
цитомегаловируса, а не микоплазмы на адгезивные процессы у инфицированных детей, больных бронхиальной астмой.
', sCD54, I (U/ml)
140
120
100
80
60
40 Л
70
0 1/ , , 1 1
Группы
Рис. 3, Сывороточное содержание sCD54 антигена у детей положительных по маркерам инфицированности ЦМВ и/или Mycoplasma pneumoniae при бронхиальной астме.
1 — контроль; 2 — БА без инфекции; 3 — БА+ЦМВ; 4 — БА+микоплазма; 5 — БА+ЦМВ+микоплазма.
* - достоверные различия по сравнению с контролем, (р<0,05);
** — достоверные различия по сравнению с неинфицированными больными,
(р<0,05).
Ведущая роль в реализации иммунного ответа в норме и при патологии принадлежит молекулам главного комплекса гистосовместимости, которые могут выступать как в роли мембранных белков, презентирукяцих антиген, так и в роли растворимых молекул, регулирующих иммунные реакции [Хаитов Р.М., Алексеев Л.П., 2001; Рирро Б. ег а1., 1997; РоеЫаи Б. ег а1., 2000].
Исследование характера изменения сывороточной концентрации зНЬА-1 и относительного содержания выявляемых в реакции иммунофлуоресценции НЬА-Г мононуклеарных клеток периферической крови, не показало достоверных изменений в их содержании при бронхиальной астме разной тяжести (табл. 4). Однако обнаружено достоверное снижение сывороточного уровня молекул зНЬА-1 в период ремиссии при тяжелой астме и уменьшение относительного числа НЬА-1+ мононуклеарных клеток крови при обострении заболевания легкого и среднетяжелого течения.
В отличие от уровня зНЬА-1 молекул, сывороточное содержание бНЬА-БК. антигенов при астме в целом, в общей группе больных детей, было повышено в 2,7 раза. Нарастание тяжести заболевания сопровождалось повышением сывороточного уровня зНЬА-ВЙ. антигенов относительно контроля. Легкая астма характеризовалась тенденцией к нарастанию уровня зНЬАЛЖ, среднетяжелая и тяжелая — достоверным ростом уровня бНЬА-ОК антигенов в 3,0 и 4,3 раза, соответственно (табл. 4).
Таблица 4
Уровень зНЬА-1 и бНЬА-ОК антигенов в сыворотке детей при бронхиальной астме разной тяжести
Показа тель, (и/т1) Контроль БА (общая группа) Легкая БА Средне тяжелая БА Тяжелая БА
зНЬА-I 921,5± 221,0 763,8± 172,6 1334,2± 712,3 671,6±132,2 537,5±82,1
бНЬА-БК 99,5±12,5 290,1±47,6* 116,2±36,4 302,0±45,2* 425,9±77,1*
* - достоверные различия по сравнению с контролем, (р<0,05).
Содержание sHLA-DR антигенов в общей группе больных БА детей было повышено относительно нормы при обострении и ремиссии заболевания, соответственно, в 2,7 и 3,0 раза (р<0,05) (табл. 2). При этом прослеживалось нарастание содержания sHLA-DR антигенов при утяжелении астмы, как в период ремиссии, так и в период обострения. Статистически значимым этот рост являлся в период обострения среднетяжелой и тяжелой БА, а также при ремиссии тяжелой астмы. Возможно, высокий сывороточный уровень sHLA-DR антигенов у лиц с БА обусловлен сходом молекул гистосовмеегимости с поверхности активированных макрофагов, B-лимфоцитов, Т-хелперов, а также эндотелиальных, эпителиальных и тучных клеток. Биологический смысл такого явления может заключаться в ограничении пролиферации клеток иммунной системы и угнетении гуморального ответа детей с астмой.
Относительное содержание HLA-DR+ клеток было статистически достоверно повышено у больных в среднем в 1,6 раза независимо от степени тяжести астмы, а также в период обострения и ремиссии в 1,5 раза. Достоверные изменения были выявлены на стадии обострения легкой БА и на стадии ремиссии у больных среднетяжелой и тяжелой астмой.
Был проведен корреляционный анализ между сывороточным уровнем молекул гистосовместимости I, II классов, относительным содержанием HLA-Г, HLA-DR* мононуклеарных клеток крови и параметрами МОС. Важно отметить, что у детей, больных БА, увеличение уровня растворимых HLA-DR антигенов и HLA-DR-положительных клеток оказалось связанным с усилением обструкции средних (МОС50) и мелких (МОС75) бронхов, соответственно (rs=-0,71, р<0,05; rs=-0,67, р<0,05).
Полученные результаты позволяет говорить об ассоциации повышенного уровня sHLA-DR с усилением воспалительного процесса у таких больных. С нашей точки зрения, повышенное сывороточное содержание sHLA-DR антигенов можно рассматривать как возможный мониторинговый показатель неблагоприятного течения БА.
Проведена оценка сывороточного уровня молекул sHLA-I у больных астмой детей, положительных по маркерам инфицированности ЦМВ и/или Mycoplasma pneumoniae (рис. 4). Обнаружено, что присутствие ЦМВ
сопровождается статистически достоверным снижением уровня молекул зНЬА-1 и относительного числа НЬА-Г мононуклеарных клеток крови у больных по сравнению с нормой. Аналогичные изменения обнаружены у детей при БА, инфицированных ЦМВ и микоплазмой. В группе больных БА, инфицированных только микоплазмой, уровень исследуемых показателей не изменен относительно нормы. Вероятно, при смешанном инфицировании снижение уровня бНЬА-1 молекул и относительного содержания НЬА-1+ клеток преимущественно связано с присутствием ЦМВ. Это может быть обусловлено способностью вируса цитомегалии ингибировать функциональную активность молекул НЪА I класса или белков, принимающих участие в транспортировке молекул НЬА I класса из эндоплазматического ретикулума к мембране зараженной клетки.
Рис. 4. Сывороточное содержание sHLA-DR (ряд I) и sHLA-I (ряд 2) антигенов у детей положительных по маркерам инфицированности ЦМВ и/или Mycoplasma pneumoniae при бронхиальной астме.
1 — контроль; 2 - БА без инфекции; 3 — БА+ЦМВ; 4 — БА+микоплазма; 5 — БА+ЦМВ+микоплазма.
* — достоверные различия по сравнению с контролем, (р<0,05);
** — достоверные различия по сравнению с неинфицированными больными,
(р<0,05).
При астме, ассоциированной с цитомегаловирусным и/или микоплазменным инфицированием, выявлены также изменения сывороточного уровня sHLA-DR антигенов и относительного содержания HLA-DR+ моноиуклеарных клеток (рис. 4). Моноинфицирование ЦМВ или микоплазмой приводило к достоверному повышению в сравнении с нормой сывороточного содержания sHLA-DR антигенов в 2,0 раза и 2,2 раза, соответственно. Смешанное инфицирование сопровождалось повышением уровня sHLA-DR антигенов в 6,3 раза (р<0,05). Во всех трех случаях различия были статистически достоверны не только в сравнении с нормой, но и с больными бронхиальной астмой без маркеров инфицирования ЦМВ и микоплазмой.
Относительное содержание положительных по HLA-DR антигенам моноиуклеарных клеток периферической крови повышалось в 1,6-1,9 раза по сравнению с нормой во всех группах больных БА, как отрицательных, так и положительных по маркерам тестируемых инфекций (р<0,05).
Обобщая полученные результаты, можно заключить, что при бронхиальной астме у детей среди тестированных нами показателей наиболее выраженные изменения были обнаружены для sCD54 и sHLA-DR антигенов. Их уровень возрастал при усилении степени тяжести заболевания, при уменьшении проходимости средних бронхов и при ассоциации астмы со смешанным инфицированием ЦМВ и микоплазмой. В связи с этим, сывороточное содержание растворимых sICAM-1 и sHLA-DR антигенов может быть использовано в качестве дополнительных показателей тяжести бронхиальной астмы и выраженности бронхообструкции у детей.
ВЫВОДЫ
1. Показано, что в крови детей, больных бронхиальной астмой, повышается относительное содержание моноиуклеарных клеток, несущих на своей мембране антигены CD25, CD95, HLA-DR, падает содержание CD4+, CD50+ клеток, от стадии к стадии заболевания снижается относительное содержание CD54+ клеток.
2. Обнаружено, что у детей с нарастанием степени тяжести бронхиальной астмы увеличивается сывороточное содержание растворимых CD25, CD95, CD50, CD54, HLA-DR антигенов клеток иммунной системы.
3. Продемонстрировано, что в периоды ремиссии и обострения при бронхиальной астме легкого, среднетяжелого и тяжелого течения наблюдаются разнонаправленные изменения тестированных показателей иммунитета. Чаще всего статистически достоверные различия между ними в периоды ремиссии и обострения обнаруживаются при бронхиальной астме легкого течения.
4. Выявлено, что моноинфицирование детей с бронхиальной астмой цитомегаловирусом или Mycoplasma pneumoniae ассоциировано с достоверным ростом сывороточного содержания растворимого антигена CD25 и молекул HLA-DR. Моноинфицирование цитомегаловирусом у больных астмой связано с нормализацией повышенного уровня антигена sCD50, увеличением относительного количества CD38+ клеток и уменьшением числа CD54+ и HLA-Г мононуклеарных клеток крови.
5. Обнаружено, что смешанное инфицирование больных астмой детей цитомегаловирусом и ' Mycoplasma pneumoniae сопровождается ростом сывороточного уровня антигенов sCD50, sCD54, sHLA-DR и снижением содержания растворимой формы белка CD38.
6. Показано, что уровень растворимых молекул CD54, HLA-DR в сыворотке и относительное содержание HLA-DR-положительных клеток в периферической крови отрицательно коррелируют с параметрами МОС50 и MOC7J, отражающими проходимость средних и мелких бронхов.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Богданова Т.А., Кубышева Н.И., Максимова А.В., Мазепа В.Н., Ермолаева Е.В, Лазарева Л.Г., Новиков В.В. Иммунологическая реактивность детей, больных бронхиальной астмой, отягощенной цитомегаловирусной и микоплазменной инфекциями // Сборник научных трудов "Здоровье населения Нижегородской области" (Итоги региональной программы). — Н. Новгород. - 2002. - С. 101-105.
2. Богданова Т.А., Кубышева Н.И., Максимова A.B., Новиков В.В., Мазепа В.Н., Ермолаева Е.В, Лазарева Л.Г. Состояние иммунитета у детей, больных бронхиальной астмой, ассоциированной с оппортунистической флорой // Сборник научных работ «Актуальные вопросы педиатрии, перинатологии и репродуктологии». — Н. Новгород. - 2002. - Вып. 1. - С. 2022.
3. Кубышева Н.И., Богданова Т.А., Ермолаева Е.В., Лазарева Л.Г., Постникова Л.Б., Петров А.Б., Максимова A.B. Взаимосвязь функционального состояния клеток воспаления и содержания цитокинов у больных бронхиальной астмой // Материалы Международной научно-практической школы-конференции «Цитокины. Воспаление. Иммунитет». — Санкт-Петербург. - 2002. - С. 97-97.
4. Максимова A.B. Особенности клеточного и медиаторного звеньев иммунитета у детей, больных бронхиальной астмой, отягощенной внутриклеточной инфекцией // Сборник тезисов докладов седьмой Нижегородской сессии молодых ученых. - Н. Новгород. - 2002. — С. 266-267.
5. Максимова A.B., Кубышева Н.И., Богданова Т.А., Ермолаева Е.В., Лазарева Л.Г., Мазепа В.Н., Новиков В.В., Павлова С.М. Влияние цитомегаловируса и микоплазмы на иммунитет детей, больных бронхиальной астмой // Цитокины и воспаление. - 2002. - № 2. - С. 119-120.
6. Максимова A.B. Участие молекул адгезии в аллергическом воспалении // Сборник тезисов докладов девятой Нижегородской сессии молодых ученых. - Н. Новгород. - 2004. - С. 222-223.
7. Максимова A.B., Кубышева Н.И., Богданова Т.А., Птицына Ю.С., Лазарева Л.Г., Новиков В.В. Сывороточный уровень растворимых молекул гистосовместимости и особенности экспрессии молекул HLA на мононуклеарных клетках крови при бронхиальной астме // Материалы научной конференции, посвященной 75-летию Нижегородского НИИЭМ «Новые технологии в профилактике, диагностике, эпиднадзоре и лечении инфекционных заболеваний». — Н. Новгород. —2004.— С. 154-158.
8. Максимова A.B., Кубышева Н.И., Ермолаева Е.В, Богданова Т.А., Лазарева Л.Г., Новиков В.В. Исследование содержания Fas-антигенов в
периферической крови детей с бронхиальной астмой // Сборник научных работ «Актуальные вопросы педиатрии, перинатологии и репродуктологии». - Н. Новгород. - 2004. - Вып. 2. - С. 82-85.
9. Кубышева Н.И., Постникова Л.Б., Максимова A.B., Ермолаева Е.В, Лазарева Л.Г. Участие растворимых и мембранных форм антигенов адгезии и гистосовместимости у больных бронхиальной астмой // Пульмонология. Сборник тезисов 15-ого Национального конгресса по болезням органов дыхания и 1-ого Учредительного конгресса Евроазиатского респираторного общества. — Москва. — 2005. — С. 35-35.
10. Максимова A.B., Кубышева Н.И., Ермолаева Е.В, Постникова Л.Б., Чеснокова Т.В., Лазарева Л.Г., Новиков В.В. Сывороточное содержание растворимых антигенов адгезии и молекул гистосовместимости у детей с бронхиальной астмой // Аллергология. — 2005. - № 4. — С. 30-34.
Автор выражает искреннюю благодарность и признательность за плодотворное совместное научное сотрудничество и помощь в проведении диссертационной работы Новикову В.В., Кубышевой Н.И., Богдановой Т.А., Ермолаевой Е.В., Лазаревой Л.Г., Мазепе В.В., Птицыной Ю.В.
Подписано к печати &¿>- О б Бумага газетная. Формат 60x90 1/16 Печать трафаретная. Уч. изд. л. /. . Усл. печ. л. 1,3 . Тираж 100 экз. Заказ № £ 3 ¿Г
Нижегородский государственный архитектурно-строительный университет, 603950, Н. Новгород, Ильинская, 65
Полиграфцентр ННГАСУ, 603950, II. Новгород, Ильинская, 65
Оглавление диссертации Максимова, Анна Владимировна :: 2006 :: Нижний Новгород
ВВЕДЕНИЕ.
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Иммунологические аспекты патогенеза бронхиальной астмы.
1.2. Иммунный ответ при цитомегаловирусной инфекции.
1.3. Иммунный ответ при микоплазменной инфекции.
1.4. Характеристика CD25 и CD95 активационных антигенов.
1.5. Характеристика CD5О, CD54, CD38 белков адгезии.
1.6. Молекулы главного комплекса гистосовместимости
HLAI класса и HLAII класса.
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Исследуемые образцы и объем наблюдений.
2.2. Используемые моноклональные антитела.
2.3. Реакция непрямой иммунофлуоресценции.
2.4. Получение поликлональных антител, специфичных к г ^ поверхностным антигенам мононуклеарных клеток крови человека.
2.5. Перйодатный метод синтеза конъюгата.
2.6. Иммуноферментные методы определения растворимых форм мембранных белков клеток иммунной системы.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.
3.1. Относительное содержание CD4+, CD8+, CD16+ лимфоцитов в периферической крови у детей при астме.
3.2. Сывороточный уровень растворимых антигенов CD25 и
CD95 у детей, больных бронхиальной астмой.
3.3. Сывороточное содержание растворимых белков адгезии
CD50, CD54, CD38 у детей при астме.
3.4. Сывороточное содержание растворимых молекул гистосовместимости I и II классов в периферической крови детей с бронхиальной астмой.
3.5. Взаимосвязь сывороточного уровня растворимых антигенов
ICAM и HLA с максимальной объемной скоростью выдоха.
Введение диссертации по теме "Аллергология и иммулология", Максимова, Анна Владимировна, автореферат
Актуальность проблемы
Бронхиальная астма служит классическим примером иммунопатологии и является частым хроническим заболеванием легких у детей. В течение последних десятилетий во всем мире отмечен рост ее распространенности, а также увеличение числа детей с тяжелыми формами заболевания. Среди школьников России частота астмы составляет 3-12% [37]. Многими специалистами признается потенцирующая роль респираторной вирусной и бактериальной инфекции в утяжелении бронхиальной астмы, развитии ее обострений [5, 6, 60]. В частности, это относится к таким патогенам как цитомегаловирус и Mycoplasma pneumoniae. Инфицированность микоплазмами детей с астмой составляет 66-88%, а смешанная, вирусно-микоплазменная инфекция отмечается у 40-42% больных детей. Инфекционные микроорганизмы часто персистируют в слизистой оболочке дыхательных путей и могут влиять на функциональное состояние иммунной системы больных бронхиальной астмой [14, 30,44].
Широкая распространенность бронхиальной астмы обусловливает актуальность детального исследования молекулярных механизмов иммунного ответа при различных формах данного заболевания у детей. Это относится и к изучению роли растворимых форм мембранных белков клеток иммунной системы в патогенезе астмы.
Мембранные белки клеток иммунной системы играют важную роль в активации, регуляции, кооперации этих клеток и реализации иммунного ответа в целом. Известно, что мембранные протеины могут иметь растворимые изоформы, образующиеся за счет шеддинга или альтернативного сплайсинга матричной РНК. Получены данные о том, что они могут выполнять функции ограничителей иммунных реакций или же выступать в роли активаторов иммунологических процессов [40, 81,138].
Оценка сывороточного уровня отдельных антигенов и иммунофенотипирование мононуклеарных клеток крови могут быть полезны как в теоретическом аспекте для определения их роли в патогенезе различных заболеваний (в том числе и бронхиальной астмы), так и в практической медицине для мониторинговых и прогностических целей. Цель исследования
Изучить характер изменения сывороточного уровня растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы во взаимосвязи с популяционным составом мононуклеарных клеток крови детей, больных бронхиальной астмой. Задачи
1. Исследовать относительное содержание клеток периферической крови, несущих на своей поверхностной мембране гликопротеины CD4, CD8 и CD 16 у детей, больных бронхиальной астмой.
2. Определить сывороточное содержание растворимых CD25, CD95, CD38, CD50, CD54, HLA-I, HLA-DR антигенов и относительное содержание положительных по этим антигенам мононуклеарных клеток периферической крови у детей, больных астмой разной степени тяжести.
3. Определить уровень вышеприведенных растворимых антигенов сыворотки крови и популяционный состав мононуклеарных клеток в периоды. обострения и ремиссии астмы.
4. Оценить характер изменения сывороточного содержания растворимых форм CD25, CD95, CD38, CD50, CD54, HLA-I, HLA-DR антигенов и CD25+, CD95+, CD38+, CD50+, CD54+, HLA-I+, HLA-DR+ мононуклеарных клеток крови при бронхиальной астме, ассоциированной с инфицированием цитомегаловирусом и/или Mycoplasma pneumoniae.
5. Исследовать возможность существования корреляционных взаимоотношений между сывороточным уровнем тестированных растворимых антигенов, популяционным составом мононуклеарных клеток крови и проходимостью бронхов у детей.
Научная новизна
Показано, что развитие бронхиальной астмы у детей сопровождается изменением сывороточного содержания растворимых форм ряда мембранных антигенов клеток иммунной системы. Сывороточный уровень антигенов адгезии sCD50 и sCD54, а также содержание растворимых форм активационных антигенов CD25, HLA-DR и опосредующего апоптоз белка sCD95, повышается по мере нарастания степени тяжести заболевания, что свидетельствует об их возможном участии в патогенетических механизмах формирования иммунных реакций у детей при бронхиальной астме. У детей при различных вариантах течения бронхиальной астмы выявлены изменения иммунофенотипа мононуклеарных клеток периферической крови, несущих на своей поверхностной мембране рецепторы CD25, CD38, CD50, CD54 и HLA-DR.
Впервые продемонстрировано влияние возбудителей оппортунистических инфекций (цитомегаловируса и Mycoplasma pneumoniae) на уровень растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы у детей с астмой. Отмечено, что как моноинфицирование цитомегаловирусом (ЦМВ) или микоплазмой, так и микст-инфицирование (ЦМВ+микоплазма) сопровождаются повышением сывороточного содержания антигенов sCD25 и sHLA-DR. У микст-инфицированных детей, больных бронхиальной астмой обнаружен также рост сывороточного уровня растворимых антигенов адгезии CD50, CD54 и снижение уровня sCD38 антигена. Выявлено, что; моноинфицирование цитомегаловирусом ассоциировано у больных детей с уменьшением уровня антигена sCD50 и понижением относительного количества CD54+, HLA-DR+ и HLA-I+ мононуклеарных клеток крови, определяемых в реакции иммунофлуоресценции. Сравнительное сопоставление показало, что микст-инфицирование сопровождается наиболее выраженными изменениями уровня тестированных антигенов. Эти изменения отражают вариабельность иммунологических реакций организма в зависимости от вида инфицирования.
Практическая значимость
Содержание растворимых ICAM-1 и HLA-DR антигенов в сыворотке крови может быть использовано в качестве дополнительных показателей тяжести бронхиальной астмы и выраженности бронхообструкции, и рассматриваться как возможный мониторинговый показатель неблагоприятного течения астмы у детей.
Увеличение сывороточной концентрации растворимой формы антигена адгезии ICAM-1 у детей при бронхиальной астме взаимосвязано со снижением проходимости средних бронхов (величиной коэффициента МОС50). Увеличение уровня HLA-DR-положительных клеток и'растворимых HLA-DR антигенов ассоциировано с усилением обструкции мелких и средних бронхов (параметры МОС75 и МОС50), соответственно.
Определение уровня растворимых форм CD25, CD95, CD54, HLA-DR антигенов клеток иммунной системы может применяться для прогнозирования тяжести течения бронхиальной астмы у детей (в том числе и ассоциированной с инфицированием цитомегаловирусом и микоплазмой) в аллергологических и пульмонологических педиатрических службах.
Полученные сведения применяются в работе врачами аллергологического центра детской городской клинической больницы №27 «Айболит», а также используются в курсе лекций по иммунологии для студентов биологического факультета ННГУ им. Н.И. Лобачевского.
Положения, выносимые на защиту
1. Бронхиальная астма у детей сопровождается изменением сывороточного содержания растворимых форм мембранных антигенов клеток; иммунной системы, относящихся к различным функциональным группам белков.
2. Инфицированность больных бронхиальной астмой детей цитомегаловирусом и/или Mycoplasma pneumoniae ассоциирована с модуляцией уровня растворимых форм мембранных антигенов.
3. Содержание в крови растворимых форм антигенов CD54 и HLA-DR, а также HLA-DR-положительных мононуклеарных клеток отрицательно коррелирует с проходимостью бронхов у детей, больных бронхиальной астмой.
Апробация работы
Результаты работы представлены на Международной научно-практической школе-конференции «Цитокины. Воспаление. Иммунитет», (Санкт-Петербург, 2002); VII и IX Нижегородской сессии молодых ученых (Н. Новгород, 2002, 2004); Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов, 2004»; Научной конференции, посвященной 75летию Нижегородского НИИЭМ «Новые технологии в профилактике, диагностике, эпиднадзоре и лечении инфекционных заболеваний», (Н. Новгород, 2004); 3-м российском конгрессе «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии», (Москва, 2004); Молодежной школе-конференции «Актуальные аспекты современной микробиологии», 2005; 15-ом Национальном конгрессе по болезням органов дыхания и 1-м Учредительном конгрессе Евроазиатского респираторного общества, (Москва, 2005).
Диссертация была апробирована 2 марта 2005 года на совместном расширенном заседании кафедры молекулярной биологии и иммунологии Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского, Нижегородского отделения Российского научного общества иммунологов, Нижегородского отделения Российского научного общества биохимиков и молекулярных биологов.
Публикации
По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ.
Структура и объем диссертации ?
Диссертационная работа в объеме 155 страниц состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных результатов и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы. Диссертация иллюстрирована 16 рисунками и 23 таблицами. Библиографический указатель включает 340 источников литературы (79 отечественных и 261 иностранных авторов).
Заключение диссертационного исследования на тему "Растворимые формы мембранных белков клеток иммунной системы при бронхиальной астме у детей"
выводы
1. Показано, что в крови детей, больных бронхиальной астмой, повышается относительное содержание мононуклеарных клеток, несущих на своей мембране антигены CD25, CD95, HLA-DR, падает содержание CD4+, CD50+ клеток, от стадии к стадии заболевания снижается относительное содержание CD54+ клеток.
2. Обнаружено, что у детей с нарастанием степени тяжести бронхиальной астмы увеличивается сывороточное содержание растворимых CD25, CD95, CD50, CD54, HLA-DR антигенов клеток иммунной системы.
3. Продемонстрировано, что в периоды ремиссии и обострения при бронхиальной астме легкого, среднетяжелого и тяжелого течения наблюдаются разнонаправленные изменения тестированных показателей иммунитета. Чаще всего статистически достоверные различия между ними в периоды ремиссии и обострения обнаруживаются при бронхиальной астме легкого течения.
4. Выявлено, что моноинфицирование детей с бронхиальной астмой цитомегаловирусом или Mycoplasma pneumoniae ассоциировано с достоверным ростом сывороточного содержания растворимого антигена CD25 и молекул HLA-DR. Моноинфицирование цитомегаловирусом у больных астмой связано с нормализацией повышенного уровня антигена sCD50, увеличением относительного количества CD38+ клеток и уменьшением числа CD54+ и HLA-I+ мононуклеарных клеток крови.
5. Обнаружено, что смешанное инфицирование больных астмой детей цитомегаловирусом и Mycoplasma pneumoniae сопровождается ростом сывороточного уровня антигенов sCD50, sCD54, sHLA-DR и снижением содержания растворимой формы белка CD38.
6. Показано, что уровень растворимых молекул CD54, HLA-DR в сыворотке и относительное содержание HLA-DR-положительных клеток в периферической крови отрицательно коррелируют с параметрами МОС50 и МОС75, отражающими проходимость средних и мелких бронхов.
Заключение
Бронхиальная астма является классическим примером иммунопатологии и характеризуется, прежде всего, иммунологическим фоном (предрасположенностью), на котором происходит развитие данного заболевания [8]. Астма определяется как хроническое персистирующее воспалительное заболевание дыхательных путей, при котором ведущую роль играют тучные клетки, эозинофилы и Т-лимфоциты [19].
Бронхиальная астма у детей сопровождается рядом изменений иммунологической реактивности, которые связаны со степенью тяжести, периодом заболевания или наличием сопутствующего инфицирования. Эти изменения касаются множества мембранных белков-рецепторов, осуществляющих и регулирующих межклеточные взаимодействия, а также их растворимых форм. Растворимые формы мембранных белков клеток иммунной системы осуществляют чаще всего многофункциональное воздействие. Нарушение их равновесия может приводить к блокаде межклеточных мембранных взаимодействий и ограничению иммунного ответа.
В настоящей работе мы исследовали у детей, больных бронхиальной астмой относительное содержание основных субпопуляций лимфоцитов - CD4+ Т-хелперов, CD8+ цитотоксических лимфоцитов, CD16+ натуральных киллеров, а также относительное число CD25-, CD95-, CD38-, CD50-, CD54-, HLA-I-, HLA-DR-положительных мононуклеарных клеток периферической крови и уровень их сывороточных аналогов, находящихся в растворимой форме.
Было обнаружено, что бронхиальная астма у детей сопровождается достоверным снижением относительного содержания CD4+ Т-хелперов периферической крови, тенденцией к росту относительного числа CD16+ натуральных киллеров при не изменяющемся содержании CD8+ цитотоксических Т-лимфоцитов. У детей с бронхиальной астмой выявлено достоверное повышение сывороточного уровня sCD25 и sCD95 антигенов, возрастающее при усилении тяжести бронхиальной астмы, и относительного количества CD95+ мононуклеарных клеток крови, высокий уровень которых ассоциируется с активацией иммунной системы. Вместе с тем, растворимые формы данных антигенов участвуют в процессах ограничения активности иммунных реакций. В частности, sCD25 антиген связывает ИЛ-2, и ограничивает, таким образом, пролиферацию Т-лимфоцитов, а также активность эозинофилов у больных детей. Апоптоз, являясь физиологической формой клеточной смерти, играет важную роль в разрешении воспаления. Ингибирование Fas-зависимого апоптоза путем блокады CD95-клеточного рецептора растворимым Fas антигеном способствует хронизации воспаления.
Важным регулятором почти всех видов иммунного и воспалительного ответа являются адгезивные гликопротеины поверхности клеток, в связи с чем для исследования были выбраны представители молекул адгезии - ICAM-1 (CD54) и ICAM-3 (CD50), а также CD38 антиген. CD50 антиген, наряду с широко известной молекулой CD54, является лигандом LFA-1 антигена, экспрессирующегося на всех типах лейкоцитов. Но, в отличие от CD54, мембранная экспрессия которого индуцируется при воздействии многих факторов и, в первую очередь, при воспалении, CD50 антиген характеризуется конститутивной экспрессией. Уровень экспрессии этого антигена не чувствителен к медиаторам воспаления [259].
Отмечен статистически значимый рост уровня растворимых молекул адгезии ICAM-1 и ICAM-3 в сыворотке лиц при Б А; относительное количество положительных по этим антигенам клеток крови, напротив, было понижено у больных детей по сравнению с нормой. При проведении корреляционного анализа было выявлено, что увеличение сывороточной концентрации sICAM-1 антигена у детей, больных бронхиальной астмой, ассоциируется со снижением проходимости средних бронхов (величиной коэффициента МОС50).
В литературе существуют указания на то, что экспозиция аллергена в организме человека приводит к усилению экспрессии ICAM-1 молекул на поверхности эпителиальных и эндотелиальных клеток, причем повышенная экспрессия ICAM-1 сопровождается сопутствующим освобождением его растворимой формы. Возможно, высокий уровень sCD54 антигена в сыворотке детей, больных астмой, обусловлен шеддингом ICAM-1 молекул с этих клеток или синтезом растворимой формы путем альтернативного спалайсинга мРНК. Как было описано выше в главе «Результаты и обсуждение», растворимый антиген адгезии CD54 может выполнять в организме как провоспалительную, так и противовоспалительную функцию. Однако, выявленная нами взаимосвязь роста сывороточного уровня sCD54 антигена со снижением проходимости средних бронхов у лиц с БА, а также увеличение уровня sCD54 у таких больных при возрастании тяжести заболевания, позволяет говорить о том, что в условиях аллергического воспаления у детей с астмой молекула ICAM-1 играет провоспалительную роль.
Рост сывороточного уровня sCD50 антигена у детей при бронхиальной астме может приводить к нарушению инициации иммунного ответа и антигенной презентации, в первую очередь, дендритными клетками. Он, обусловлен сходом растворимой формы CD50 антигена с поверхности эпителиальных клеток либо альтернативным сплайсингом.
Снижение относительного количества CD50+ и CD54+ мононуклеарных клеток крови у детей с БА, вероятно, связано с миграцией этих клеток в очаг воспаления в дыхательные пути. Отсутствие достоверной корреляционной зависимости между относительным числом этих клеток и уровнем sCD50, sCD54 антигенов указывает на то, что мононуклеарные клетки периферической крови не вносят существенного вклада в пополнение пула растворимых антигенов адгезии ICAM-1 и ICAM-3.
Средние значения уровня sCD38 антигена и процентного количества CD38+ клеток у детей при Б А достоверно не отличались от нормальных.
Ведущая роль в презентации чужеродного антигена и формировании иммунного синапса принадлежит молекулам гистосовместимости I и II классов. Так, иммунная система индивидуумов с БА способна к распознаванию и выработке иммунного ответа даже на крайне низкие концентрации ингалируемого антигена. Это осуществляется за счет взаимодействия молекул HLA II класса, несущих пептидный фрагмент аллергена, с рецептором CD4+ Т-хелперов, что приводит к Т-клеточной активации и продукции цитокинов, характерных для аллергической реакции.
Исследование у пациентов с БА содержания антигенов HLA позволило отметить отсутствие статистически значимых отличий от нормы в уровне молекул sHLA-I и в относительном числе HLA-I+ мононуклеарных клеток периферической крови, определяемых в реакции непрямой иммунофлуоресценции. Однако было выявлено достоверное многократное увеличение сывороточного уровня sHLA-DR антигенов и процентного содержания HLA-DR+ клеток в крови детей, больных астмой. Кроме того, обнаружено, что увеличение уровня растворимых HLA-DR антигенов и HLA-DR-положительных клеток ассоциируется с усилением обструкции средних (МОС50) и мелких (МОС75) бронхов, соответственно.
Исходя из полученных результатов, можно заключить, что антигены HLA-I класса не принимают значимого участия в реализации аллергического воспаления при бронхиальной астме у детей.
В то же время антигены HLA-DR, напротив, вносят существенный вклад в патогенез БА. Так, известно, что растворимые молекулы HLA II класса способны блокировать функциональную активность Т-хелперов, связываясь с С04-рецептором на лимфоцитах. Как следствие - торможение стимуляции антигенпрезентирующих клеток, осуществляемое при реализации иммунного ответа посредством Т-хелперов. Кроме того, показано, что антигены HLA-DR определяются на поверхности активированных макрофагов, В-лимфоцитов, Т-хелперов, а также эндотелиальных, эпителиальных и тучных клеток. При бронхиальной астме, как правило, данные клетки активированы. Можно предположить, что высокий сывороточный уровень sHLA-DR антигенов у лиц с астмой обусловлен сходом молекул гистосовместимости с поверхности данных активированных клеток. Биологический смысл такого явления может заключаться в ограничении пролиферации клеток иммунной системы и угнетении гуморального ответа детей с астмой.
Таким образом, увеличение сывороточного уровня sHLA-DR антигенов, выявленное нами у больных при возрастании степени тяжести бронхиальной астмы, и взаимосвязь роста содержания sHLA-DR с нарушением проходимости средних бронхов позволяет говорить об ассоциации повышенного уровня sHLA-DR с усилением воспалительного процесса при бронхиальной астме. С нашей точки, зрения повышенное сывороточное содержание sHLA-DR антигенов можно рассматривать как возможный мониторинговый показатель неблагоприятного течения бронхиальной астмы у детей. Для проверки подобного предположения необходимы дополнительные исследования.
Разделение лиц, больных БА на группы по тяжести течения заболевания позволило обнаружить, что наиболее выраженные отличия от нормы в уровне исследуемых растворимых молекул и антигенположительных клеток крови встречаются у детей со среднетяжелой и, особенно, с тяжелой астмой, в то время как у больных с легким течением заболевания различия с группой сравнения были выявлены только однажды (рост относительного количества CD38+ мононуклеарных клеток).
Обращает на себя внимание отсутствие, в большинстве своем, межгрупповых различий между величиной исследуемых показателей у детей в стадию ремиссии и обострения астмы. Это связано с персистирующим характером воспалительного процесса при бронхиальной астме и свидетельствует о сохранении характерных для болезни изменений в период клинической ремиссии.
Стоит отметить разнонаправленный характер изменений исследованных иммунологических показателей у детей при бронхиальной астме в стадии ремиссии и обострения при разной степени тяжести заболевания. Так, при легкой БА в период обострения у больных отмечается достоверный рост относительного количества CD8+ и падение количества CD16+ лимфоцитов крови по сравнению с периодом ремиссии. В то же время у детей со среднетяжелой и тяжелой астмой относительное содержание этих клеток в крови не отличается в различные периоды заболевания. Обострение у больных астмой легкого течения сопровождается многократным снижением уровня sCD25 (р>0,05) и sCD95 (р<0,05) антигенов относительно периода ремиссии; у детей со среднетяжелым течением заболевания период обострения отличается тенденцией к увеличению уровня sCD25 и sCD95 антигенов по сравнению с ремиссией; а при обострении тяжелой астмы наблюдается вновь лишь тенденция к снижению уровня sCD25 и повышению sCD95 антигенов.
Подобные разнонаправленные изменения, выраженные в виде тенденций, были выявлены при исследовании уровня антигенов адгезии sCD50 и sCD54. У детей с легкой БА в период обострения обнаружено недостоверное уменьшение сывороточного уровня sCD50 и sCD54 антигенов относительно периода ремиссии, у больных со среднетяжелой БА - отмечена тенденция к увеличению уровня этих антигенов, а у лиц с астмой тяжелого течения сывороточный уровень sCD50 и sCD54 был одинаков в периоды обострения и ремиссии.
Период обострения легкой астмы сопровождался ростом относительного количества CD38+ (р<0,05) и HLA-DR+ (р>0,05) мононуклеарных клеток по сравнению периодом ремиссии. У больных со среднетяжелой и тяжелой БА изменений аналогичной направленности выявлено не было. Сывороточный уровень растворимых антигенов CD38, HLA-I, HLA-DR существенно не изменялся в разные периоды заболевания при всех степенях тяжести БА. Можно подчеркнуть лишь общую тенденцию к росту уровня sHLA-DR при обострении астмы по сравнению с ремиссией у детей, как с легким, так и со среднетяжелым и тяжелым течением заболевания.
Таким образом, дети, больные легкой БА имеют картину иммунологической реактивности, отличающуюся от реактивности больных среднетяжелой и тяжелой БА. Она менее всего отличается от нормы, но сопровождается противоположной направленностью изменений ряда исследуемых показателей в стадии обострения и ремиссии болезни по сравнению с группой больных бронхиальной астмой среднетяжелого и тяжелого течения.
Вероятно, при среднетяжелом и тяжелом течении БА в организме больных детей уже произошли и носят устойчивый характер перестройки, связанные с заболеванием (в частности, ремоделирование дыхательных путей, изменение цитокинового профиля и т.д.). Иммунная система у таких лиц находится в состоянии постоянной гиперреактивности, которая, тем не менее, имеет условно «сбалансированный» характер, и в реализации механизмов гиперреактивности задействованы многие звенья иммунной системы. Это подтверждается наличием многочисленных достоверных корреляционных зависимостей исследованных иммунологических параметров у больных со среднетяжелой и тяжелой астмой. При легкой БА патологические изменения (морфологические, иммунологические), сопровождающие заболевание, еще менее выражены. Реакция иммунной системы на антиген у детей с легким течением носит условно «несбалансированный» характер. На это указывают как широкий разброс индивидуальных показателей, так и разнонаправленные изменения в периоды обострения и ремиссии. Кроме того, у детей с легкой астмой выявляется очень небольшое число корреляционных взаимосвязей между тестированными в настоящей работе иммунологическими показателями.
В настоящее время все большее внимание направлено на изучение проблемы участия инфекционных агентов в развитии воспалительного процесса и патогенезе БА. Персистенция инфекционных агентов у больных астмой детей обусловливает возникновение сложного многофакторного воспалительного процесса, в котором существуют черты как инфекционного, так и аллергического воспаления. Доказано, что воспаление, обусловленное бактериальной, микоплазменной или вирусной инфекцией, может играть существенную роль как в дебюте, так и прогрессировании Б А [5, 14, 124]. Поэтому, в представленной работе проведено исследование ряда иммунологических показателей у детей, больных бронхиальной астмой, ассоциированной с наличием маркеров инфицированности цитомегаловирусом и/или Mycoplasma pneumoniae.
Установлено, что наличие у детей с бронхиальной астмой маркеров оппортунистических инфекций ассоциируется с дополнительными изменениями в уровне исследованных растворимых антигенов и в популяционном составе мононуклеарных клеток периферической крови. Наиболее показательными оказались различия между состоянием иммунитета инфицированных ЦМВ и/или микоплазмой детей с бронхиальной астмой и больных астмой детей, у которых маркеры тестированных инфекций обнаружены не были. Так, можно отметить рост уровня sCD25 и sHLA-DR антигенов в крови детей, больных БА, ассоциированной с ЦМВ и/или микоплазменным инфицированием, относительно нормы и больных, не инфицированных данными патогенами. Выявленные различия указывают на' способность инфекционных агентов (ЦМВ и микоплазмы) усиливать и без того повышенную гиперреактивность иммунной системы у больных детей и, -возможно, нарушать процессы презентации антигенов.
В зависимости от инфицирования тем или иным возбудителем выявлены отличительные особенности изменения уровня растворимых антигенов и антигенположительных клеток в крови у детей при БА. Так, персистенция цитомегаловируса, помимо описанных в предыдущем абзаце изменений, характерных для всех больных БА, инфицированных ЦМВ и/или микоплазмой, ассоциирована с повышением относительного количества CD16+ и HLA-Г мононуклеарных клеток крови, а также со снижением сывороточного содержания sCD50 антигена по сравнению с группой больных без маркеров тестированных инфекций. Сравнение с нормой позволило обнаружить снижение содержания CD4+, HLA-I+ клеток крови и повышение сывороточного уровня sCD54 и sHLA-I антигенов при астме, отягощенной инфицированием ЦМВ.
Моноинфицирование микоплазмой не приводило у больных астмой детей к статистически значимым изменениям исследованных показателей, за исключением сывороточного уровня растворимых CD25 и HLA-DR антигенов и относительного количества CD25 и HLA-DR положительных мононуклеарных клеток.
Наиболее выраженные изменения уровня тестированных иммунологических показателей выявлены у детей при бронхиальной астме, ассоциированной со смешанным инфицированием ЦМВ и микоплазмой. Для этой группы больных характерно достоверное многократное увеличение сывороточного уровня sCD25, sCD50, sCD54, sHLA-DR антигенов и снижение уровня sCD38 антигена относительно здоровых детей и детей с астмой, отрицательных по маркерам тестированных инфекций. Можно сделать вывод о том, что одновременное присутствие двух видов возбудителей оппортунистических инфекций в наибольшей степени влияет на уровень исследуемых растворимых антигенов, что, вероятно, обусловливается кумулятивным эффектом изменения иммунного ответа организма больного ребенка на инфицирование сразу несколькими патогенами.
Таким образом, можно заключить, что бронхиальная астма у детей, наряду с другими изменениями, сопровождается выраженным увеличением сывороточного уровня растворимых CD54 и HLA-DR антигенов. Причем их уровень возрастает при усилении степени тяжести заболевания, при уменьшении проходимости средних бронхов и при ассоциации астмы с наличием маркеров микст-инфицирования ЦМВ и микоплазмой. В связи с этим, сывороточное содержание растворимых ICAM-1 и HLA-DR антигенов может быть использовано в качестве комплекса дополнительных показателей тяжести бронхиальной астмы и выраженности бронхообструкции у детей.
131
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2006 года, Максимова, Анна Владимировна
1. Аббасова С.Г., Липкин В.М., Трапезников Н.Н. и др. Система Fas-Fas L в норме и патологии // Вопр. биол., мед. фарм. химии. 1999. - №3. - С. 3-17.
2. Александров А.В., Джексон A.M., Румянцев А.Г. Анализ механизма модуляции межклеточных молекул адгезии ICAM // Иммунология.1997. -№1.-С. 4-13.
3. Алясова А.В., Королева В.В., Крыжанова М.А. и др. Исследование содержания растворимых антигенов CD38, CD25, CD 18 у больных лимфогранулематозом // Клиническая лабораторная диагностика. -2000.-№9.-С. 40.
4. Бабаев А.А., Ежова Г.П., Добротина Н.А., Новиков В.В. Белки. Н. Новгород: Изд-во ННГУ, 2004. - 101 с.
5. Балаболкин И.И. Бронхиальная астма у детей. М.: Медицина, 2003. -320 с.
6. Балкарова Е.О., Чучалин А.Г. Бронхиальная астма и респираторная вирусная инфекция // РМЖ. Том 6. - №17. - 1998. - С. 1092-1103.
7. Баранов В.Л., Куренкова И.Г., Казанцев В.А. Исследование функции внешнего дыхания. СПб.: Элби-СПб., 2002. - 302 с.
8. Бережная Н.М. Противоопухолевая защита и механизмы формирования аллергических заболеваний // International J. On Immunorehabilitation.1998. -№10.-P. 127-136.
9. Борхсениус C.H., Чернова O.A. Микоплазмы: молекулярная и клеточная биология, патогенность, диагностика. Л.: Наука, 1989. - 156 с.
10. Ю.Бронхиальная астма / Под ред. А.Г. Чучалина. М.: Агар, 1997. - Т. 2. -400 с.
11. И.Бронхиальная астма / Под ред. Г.Б. Федосеева. С.Пб.: Медицинское информационное агентство, 1996. - 464 с.
12. Батурина Т.В., Сергеева Т.В. Цитокины и адгезивные молекулы в патогенезе хронического гломерулонефрита // Нефрология и диализ. -2002.-Т. 4.-№3.-С. 51-53.
13. Вирусология / Под ред. Б. Филдса, Д. Найпа, Р. Челнока и др. М.: Мир, 1989.-Т. 3.-452 с.
14. Вишнякова Л.А. Роль различных микроорганизмов и инфекционных процессов в возникновении и течении бронхиальной астмы // Тер. архив. 1990. - Т. 70. - №11. - С. 59-62.
15. Воробьев В. Г., Новиков В.В., Лебедева А.И. Иммунодиагностика острых лейкозов. Н. Новгород: Изд-во НГМА, 1998. - 67 с.
16. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика, 1998. - 459 с.
17. Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы / Под ред. А.Г. Чучалина-М.: Изд-во «Атмосфера», 2002. 160 с.
18. Гордиенко Г.И. Значение синдрома нейтропении при цитомегаловирусной инфекции у детей первых месяцев жизни // Педиатрия. 1999.-№1.-С. 11-14.
19. Гущин И.С. Аллергическое воспаление и фармакологический контроль. М.: Медицина, 1998. - 252 с.
20. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б. и др. Теория и практика иммуноферментного анализа. -М.: Высшая школа, 1991.-288 с.
21. Егорова Н.И., Курников Г.Ю., Бабаев А.А., Новиков В.В. Сывороточный уровень растворимых молекул межклеточной адгезии при урогенитальном хламидиозе // Цитокины и воспаление. 2003. - Т. 2-№2.-С. 32-36.
22. Иммунопатология и аллергология. Алгоритмы диагностики и лечения / Под ред. P.M. Хаитова. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. - 112 с.
23. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врача. СПб.: Гиппократ, 1998. - 156 с.
24. Клиническая иммунология и аллергология / Под ред. JI. Иегера Т.1. -М: Медицина, 1990. - 528 с.
25. Ковальчук Л.В., Чередеев А.Н. Апоптогенные механизмы возникновения иммунодефицитных заболеваний // ЖМЭИ. 1999. -№5.-С. 48-51.
26. Кузьменко Л.Г., Соколов А. Д., Капустин И.В. и др. Инфицированность детей с бронхиальной астмой цитомегаловирусом и возбудителями микоплазмоза, пневмоцистоза, хламидиоза // Педиатрия. 1999. - №1. -С. 15-20.
27. Лебедев М.Ю., Крыжанова М.А., Кораблев С.Б. и др. Растворимый CD 38 антиген новый информативный показатель состояния иммунной системы при ожоговой болезни // Нижегородский мед. журнал. - 2000. -№2.-С. 10-14.
28. Мамонова Т.В., Кайдашев И.П. Состояние CD95-, МНС I- и МНС II-опосредованного апоптоза у больных атопической бронхиальной астмой // Иммунология. 2004. - №4. С. 198-201.
29. Маянский А.Н. Микробиология для врачей (очерки патогенетической микробиологии). Н. Новгород: НГМА, 1999. - 400 с.
30. Медицинская микоплазмология / Под ред. С.В. Прозоровского, И.В. Раковского, Ю.В. Вульфович. М.: Медицина, 1995. - 228 с.
31. Медуницин Н.В. Цитокины и аллергия, опосредованная IgE // Иммунология. 1993. - №5. - С. 11-13.
32. Механизмы воспаления бронхов и лёгких и противовоспалительная терапия / Под ред. Г.Б. Федосеева СПб.: Нордмед-издат, 1998. - 686 с.
33. Научно-практическая программа «Бронхиальная астма у детей: диагностика, лечение и профилактика». Москва. - 2004. - 46 с.
34. Национальная программа «Бронхиальная астма у детей. Стратегия лечения и профилактика». Москва. - 1997. - 93 с.
35. Немцов В.И., Федосеев Г.Б. Формирование и роль биологических дефектов в возникновении и развитии бронхиальной астмы // Пульмонология. 1999. - №2. - С. 79-85.
36. Новиков В.В., Алясова А.В., Уткин О.В. и др. Растворимые антигены CD38 и CD95 при раке молочной железы // Российский биотерапевтический журнал. 2005. - № 4. - С. 46-51.
37. Новиков В.В., Трофимова Н.М., Жильцова М.А. и др. Сравнение действия иристана и неполного адъюванта Фрейнда на формирование асцита мышей-носителей гибридомных клеток // Антибиотики и химиотерапия. 1988. - №7. - С. 530-532.
38. Новикова Н.А, Новиков В.В., Добротина Н.А., Мазепа В.Н. Вирусология. Н. Новгород: Изд-во ННГУ. - 2002. - 241 с.
39. Пальцев М.А., Иванов А.А. Межклеточные взаимодействия. М.: Медицина, 1995. - 26 с.
40. Польнер А.А., Минин Д.С., Польнер С.А. Роль молекул адгезии в аллергическом воспалении при бронхиальной астме, аллергическом рените и других заболеваниях // Иммунология. 1998. - №2. - С. 13-17.
41. Порядин Г.В., Салмаси Ж.М., Макарков А.И. Особенности экспрессии активационных маркеров лимфоцитами больных бронхиальной астмой
42. Актуальные вопросы пульмонологии. Сб. научных трудов / Под ред. А.Г. Чучалина. М.: Медицина, 2000. - с. 216-225.
43. Практическая пульмонология детского возраста / Под ред. В.К. Таточенко. М.: Медицина, 2000. - 268с.
44. Птицина Ю.С. Сывороточный уровень растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы при вирусных гепатитах В, С и G: Автореф. дисс . канд. биол. наук. -М., 2003. -23 с.
45. Птицына Ю.С., Борнякова И.А., Мартынова Т.Г. и др. Растворимый и мембранный Fas/Apo-1 (CD95) антиген в крови больных гепатитами В и С // Клиническая лабораторная диагностика. 2000. -№10. - С. 10-11.
46. Путов Н.В., Яковлева Н.В., Походзей И.В. Респираторная вирусная . инфекция и иммунная реактивность у больных различными формамибронхита // Тер. архив. 1990. - №3. - С. 49-52.
47. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. М.: Мир, 2000. - 581 с.
48. Рыжов С.В., Новиков В.В. Современные представления о механизмах апоптоза // Российский биотерапевтический журнал. 2002. - №3. - С. 5-11.
49. Самохин П.А. Цитомегаловирусная инфекция у детей. М.: Медицина, 1987.- 140 с.
50. Семенов Б.Ф., Варгин В.В. Иммуномодуляция при вирусных инфекциях и вакцинации // Итоги науки и техн., Сер. Вирусология. М.: ВИНИТИ, 1989. -Т.17. -С. 1-163.
51. Симбирцев А.С. Интерлейкин-2 и рецепторный комплекс интерлейкина-2 в регуляции иммунитета // Иммунология. 1998. - №6. - С. 3-8.
52. Система HLA и патология человека / Под ред. А.А. Баранова, Б.С. Каганова, С.А.Шер и др. М.: Издательский Дом «Династия», 2003. -152 с.
53. Утешев Д.Б., Корабиненко А.А., Прокофьев П.С. и др. Влияние противоастматических препаратов на пролиферацию и апоптоз периферических мононуклеаров человека in vitro // Пульмонология. -1999,-№2.-С. 16-20.
54. Федосеев Г.Б. Бронхиальная астма. СПб.: Нордмед-издат, 1996. 464 с.
55. Федосеев Г.Б., Минеев В.Н. Современная концепция диагностики и лечения бронхиальной астмы // Врач. дело. 1992. - №6. - С. 13-20.
56. Фримель Г. Иммунологические методы. М.: Медицина, 1987. - 472 с.
57. Хаитов P.M., Алексеев Л.П. Физиологическая роль главного комплекса гистосовместимости человека // Иммунология. 2001. - №3. - С. 4-12.
58. Худякова Н. Е. Растворимые дифференцировочные антигены и молекулы гистосовместимости у ВИЧ-инфицированных, имеющих маркеры сопутствующих инфекций: Автореф. дисс . канд. биол. наук. -М., 2004.-24 с.
59. Худякова Н.Е., Новиков В.В., Кравченко Г.А. и др. Уровень растворимых антигенов HLA I и II классов в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2004. - № 1. - С. 42-45.
60. Худякова Н.Е., Птицына Ю.С., Вязьмина Е.С. и др. Влияние цитомегаловирусной инфекции на уровень растворимых антигенов HLA I и II классов у ВИЧ-инфицированных лиц // Сборник "Актуальные проблемы медицины и биологии". Томск. - 2003. - Вып. 2. - С. 230.
61. Частная аллергология / Под ред. Г.Б. Федосеева СПб.: Нордмед-издат, 2001.-464 с.
62. Чеснокова Т.В. Манакова Э.А. Сывороточный уровень растворимых антигенов гистосовместимости I и II классов при токсоплазмозе и цитомегаловирусной инфекции // IX Нижегородская сессия молодых ученых. Тезисы докладов. 2004. - С. 167.
63. Чешик С.Г., Малышева Н.А., Иванова JI.A. и др. Цитомегаловирусная инфекция у женщин репродуктивного возраста с отягощенным акушерским анамнезом // ЖМЭИ. 1996. - №6. - С. 48-49.
64. Шахгильдян В.И. Цитомегаловирусная инфекция //Новый медицинский журнал. 1997. - №2. - С. 2-6.
65. Шубич М.Г., Авдеева М.Г., Вакуленко А.Д. Адгезивные межклеточные взаимодействия // Тер.архив. 1997. - №6. - С. 3-9.
66. Ялфимов Е.Ю., Деева А.В., Пронин А.В., Раковская И.В. Влияние суперантигена Mycoplasma frthritidis на иммунногенез при трансплантарном инфицировании // ЖМЭИ. 1999. - №4. - С. 60-62.
67. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах // Иммунология.- 1996. №6-С. 10-12.
68. Ярилин А.А. Основы иммунологии. -М.: Медицина, 1999. 608 с.
69. Ярилин А.А., Добротина Н.А. Введение в современную иммунологию. -Н. Новгород: ННГУ, 1997. 238 с.
70. Abramson М., Pearson L., Kutin J. et al. Allergies, upper respiratory tract infections and asthma // J. Asthma. 1994. - №5. - P. 367-374.
71. Adamashvili I., Pressly Т., Gebel H. et al. Soluble HLA in saliva of patients with autoimmune rheumatic diseases // Rheumatol. Int. 2002. - Vol. 22. -P. 71-76.
72. Adamashvili I., Wolf R., Aultman D. et al. Soluble HLA-I (s-HLA-I) synthesis in systemic lupus erythematosus // Rheumatol. Int. 2003. - Vol. 23.-P. 294-300.
73. Albanese J., Meterissian S., Kontogiannea M. et al. Biologically active Fas antigen and its cognate ligand are expressed on plasma membrane-derived extracellular vesicles // Blood. 1998. - Vol. 91. - P. 3862-74.
74. Alderson M.R. Fas and FasL in the homeostatic regulation of immune responses // Immunol. Today. 1995. - Vol. 16. - №12. - P. 569-74.
75. Alessio M., Roggero S., Funaro A. et al. CD38 molecule: structural and biochemical analysis on human T lymphocytes, thymocytes, and plasma cells // J. Immunol. 1990. - Vol. 145. - P. 878-84.
76. Allen-Mersh T.G., Glover C., Fordy C. et al. Relation between depression and circulating immune products in patients with advanced colorectal cancer // J. R. Soc. Med. 1998. - Vol. 91. - P. 408.
77. Alvarez-Ossorio L., Johannsen M., Russlies M. et al. HLA-dependent heterogeneous T cell response to Mycoplasma arthritidis-derived superantigen (MAS) // Med. Microbiol. Immunol. 1997. - Vol. 185. - P. 245-251.
78. Amirghofran Z., Sheikhi A.K., Kumar P.V. et al. Soluble HLA class I molecules in malignant pleural and peritoneal effusions and its possible role on NK and LAK cytotoxicity // J. Cancer. Res. Clin. Oncol. 2002. - Vol. 128.-P. 443-448.
79. Arase H., Arase N., Saito T. Fas-mediated cytotoxicity by freshly isolated natural killer cells//J. Exp. Med. 1995.-Vol. 181.-P. 1235-8.
80. Bagnato G., Gulli S., Altavilla D. et al. Circulating adhesion molecules in bronchial asthma // J. Investig. Allergol. Clin. Immunol. 1998. - № 8 (2). -P. 105-8.
81. Banchereau J., Steinman R.M. Dendritic cells and the control of immunity // Nature. 1998. - Vol. 392. - P. 245-252.
82. Barnes P.J. Reactive oxygen species and airway inflammation // Free Radical. Biol. And Med. 1990. - Vol. 9. - P. 235-243.
83. BartkowiakM., KoleckiP., AlkiewiczJ. Activation of T lymphocytes and severity of atopic bronchial asthma in children // Pneumonol. Alergol. Pol. -1995.-Vol. 63.-P. 490-7.
84. Baud L., Fouqueray В., Belloqo A. Switching off renal inflammation by antiinflammatory mediators: The facts, the promise and the hope // Kidney Int. -1998.-Vol. 53.-P. 1118-1126.
85. Baum M., Liesen H., Enneper J. Leukocytes, lymphocytes, activation and cell adhesion molecules in middle-distance runners under different conditions // Int. J. Sports Med. 1994. - Vol. 15. -P. S122-S126.
86. BedaM.V., PavliukA.S., VeselovaA.V. et al. A comparative study of the expression of activation markers on T-lymphocyte subpopulations in different forms of bronchial asthma // Ter. Arkh. 1995. - Vol. 67. - P. 26-9.
87. Begh В., Padoan M., Moss C.T., Barton S.J. Lack of association of HLA class I genes and TNF a-308 polymorphism in toluene diisocyanate-induced asthma // Allergy. 2004. - Vol. 59. - P. 61-64.
88. Bendelja K., Gagro A., Bace A. et al. Predominant type-2 response in infants with respiratory syncytial virus (RSV) infection demonstrated by cytokine flow cytometry// Clin. Exp. Immunol. 2000. - Vol. 121.-P. 332-338.
89. Ben-Menachem G., Mousa A., Brenner T. et al. Choline deficiency induced by Mycoplasma fermentans enhances apoptosis of rat astrocytes // Microbiology Letters. 2001. - Vol. 201. - P. 157-162.
90. Benz C., Hengel H. MHC class I subversive gene functions of cytomegalovirus and their regulation by interferons - an intricate balance // Virus Genes. - 2000. - Vol. 21:1/2. - P. 39-47.
91. Biaze El.M., Boniface S., Koscher V. et al. T cell activation, from atopy to asthma: more a paradox than a paradigm // Allergy. 2003. - Vol. 58.-P. 844-853.
92. Biron C.A., Byron K.S., Sullivan J.S. Severe herpes virus infections in an adolescent without natural killer cells // New Engl. J. Med. 1989. - Vol. 320.-P. 1731-1735.
93. Bleijs D.A., Geijtenbeek T.B., Figdor C.G. et al. DC-SIGN and LFA-: a Battle for ligand // Trends in Immunology. 2001. - Vol. 22. - №8. - P. 457-463.
94. Borodyansky L., Li Y.Z., Pardee A. B. et al. Apoptosis in non-proliferating cells: implications for viral infection and tumourigenesis // Apoptosis. 1998. - Vol. 3. - P. 381-385.
95. Boyano M.D., Garcia-Vazquez M.D., Gardeazabal J. et al. Serum-soluble IL-2 receptor and IL-6 levels in patients with melanoma // Oncology.- 1997.-Vol. 54.-P. 400.
96. Bruggeman C.A. Cytomegalovirus and latency: an overview // Virchows Arch. B-Cell. Pathol. Mol. Pathol. 1993. - Vol. 64. - P. 325333.
97. Brutkiewicz R.R., Welsh R.M. Major histocompatability complex class I antigens and the control of viral infections by natural killer cells // J. Virol.- 1995. Vol. 69. - P. 3967-3971.
98. Bukowski J.F., Woda B.A., Welsh R.M. Pathogenesis of murine cytomegalovirus infection in natural killer cell-depleted mice // J. Virol. -1984.-Vol. 52.-P. 119-128.
99. Bush T.J.V., Rosenbusch R.F. Characterization of the immune response to Mycoplasma bovis lung infection // Veterinary Immunology and Immunopathology. 2003. - Vol. 94. - P. 23-33.
100. Carlos T.M., Harlan J.M. Leukocyte endothelial adhesion molecules // Blood. - 1994. - Vol. 84. - P. 2068-2101.
101. Carrasco Y.R., Fleire S.J., Cameron T. et al. LFA-l/ICAM-1 interaction lowers the threshold of В cell activation by facilitating В cell adhesion and synapse formation // Immunity. 2004. - Vol. 20. - Iss. 5. - P. 589-599.
102. Cascino I., Fiucci G., Papoff G. et al. Three functional soluble forms of the human apoptosis-inducing Fas molecule are produced by alternative splicing//J.Immunol.- 1995. -Mar. 15.-№ 154 (6).-P. 2706-13.
103. Cengizlier R., Demirpolat., Tulek N. et al. Circulating ICAM-1 levels in bronchial asthma and the effect of inhaled corticosteroids // Ann Allergy Asthma Immunol. 2000. - Vol. 84. - P. 539-41.
104. CeyhanB.B., SungurM., Celikel Т., Ozgiin S.S. Role of the adhesion molecule ICAM-1 in asthma // J. Asthma. 1995. - Vol. 32. - P. 419-27.
105. Chambaud I., Wroblewski H., Blanchard A. Interactions between mycoplasma lipoproteins and the host immune system // Trends in microbiology. 1999. - Vol. 7. - № 12. - P. 493-499.
106. Cheng J., Zhou Т., Liu C. et al. Protection from Fas-mediated apoptosis by a soluble form of the Fas molecule // Science. 1994. - Vol. 263. - P. 1759-62.
107. Chihara J., Yamamoto Т., Kurachi D. et al. Soluble ICAM-1 in sputum of patients with bronchial asthma // Lancet. 1994. - Vol. 343. - P. 1108.
108. Cho S.H., Stanciu L.A., Begishivili T. et al. Peripheral blood CD4+ and CD8+ T cell type 1 and type 2 cytokine production in atopic asthma and normal subjects // Clin. Exp. Allergy. 2002. - Vol. 32. - P. 427-433.
109. Cinatl J., Cinatl J., Vogel J.U. et al. Persistent human cytomegalovirus infection induces drug resistance and alteration of programmed cell death in human neuroblastoma cells // Cancer Res. 1998. - Vol. 58. - P. 367-372.
110. Contini P., Ghio M., Poggi A. et al. Soluble HLA-A,-B,-C and -G molecules induce apoptosis in T and NK CD8+ cells and inhibit cytotoxic T cell activity through CD8 ligation // Eur. J. Immunol. 2003. - Vol. 33. - № l.-P. 125-134.
111. Corrigan C.J., Kay A.B. CD4 T-lymphocyte activation in acute severe asthma. Relationship to disease severity and atopic status // Am. Rev. Respir. Dis.-1990.-Vol. 141.-P. 970-977.
112. Coyle A.J., Erard F., Bertrand C. et al. Virus-specific CD8+ cells can switch to interleukin 5 production and induce airway eosinophilia // J. Exp. Med.- 1995.-Vol. 181.-P. 1229-33.
113. Cypcar D., Busse W. W. Role of viral infections in astma // Immunol. Allergy Clin. North. Am. 1993. - Vol. 13. - №14. - P. 745-767.
114. Dalovich J., Hargreave F.E., Jordana M. et al. Late phase airway reaction and inflammation // J. Allergy Clin. Immun. 1989. - Vol. 83. - P. 521-524.
115. Damle R.N., Wasil Т., Fais F. et al. V gene mutation status and CD38 expression as novel prognostic indicators in chronic lymphocytic leukemia // Blood.- 1999.-Vol. 94.-P. 1840-7.
116. De Barbeyrac В., Bernet-Poggi C., Febrer F. et al. Detection of Mycoplasma pneumoniae and Mycoplasma genitalium in clinical samples by polymerase chain reaction // Clin. Infect. Dis. 1993. - Vol. 17. - P. S83-S89.
117. De Jong M.D., Galasso G.J., Gazzard B. et al. Summary of the II International Symposium on Cytomegalovirus // Antiviral Research. 1998. -Vol. 39.-P. 141-162.
118. De Maar E.F., Verschuuren E.A.M., Harmsen M.C. et al. Pulmonary involvement during cytomegalovirus infection in immunosuppressed patients // Transplant. Infectious Disease. 2003. - Vol. 5. - №3. - P. 112-120.
119. De Maria R., Testa U., Luchetti L. et al. Apoptotic role of Fas/Fas ligand system in the regulation of erythropoiesis // Blood. 1999. - Vol. 93. -P. 796-803.
120. Deaglio S., Mehta K., Malavasi F. Human CD38: A revolutionary story of enzymes and receptors // Leukemia Research. 2001. - Vol. 25. - P. 1-12.
121. Debatin K.M., Goldman C.K., Bamford R. et al. Monoclonal antibody mediated apoptosis in adult T cell leukaemia//Lancet. 1990.-Vol. 335.-P. 447.
122. Dhein J., Waiczak H., Baumier C. et al. Autocrine T-cell suicide mediated by APO-l/(Fas/CD95) // Nature. 1995. - Vol. 373. - P. 438-441.
123. Di Lorenzo G., Pelliteri M.E., Drago A. et al. Effects of in vitro treatment with fluticasone propionate on natural killer and lymphokine-induced killer activity in asthmatic and healthy individuals // Allergy. 2001. -Vol. 64.-№3.-P. 323-327.
124. Dobbe L.M., Stam N.J., Neeljes J.J. et al. Biochemical complexity of serum HLA class I molecules // Immunogenetics. 1998. - Vol. 27. - P. 203 (7\31).
125. Drach J., McQueen Т., Engel H. et al. Retinoic acid-induced expression of CD38 antigen in myeloid cells is mediated through retinoic acid receptor-alpha // Cancer. Res. 1994. - Vol. 54. - P. 1746-52.
126. Druilhe A., Wallaert В., Tsicopoulos A. et al. Apoptosis, proliferation and expression of BCL-2, Fas and Fas-ligand in bronchial biopsies from asthmatics // Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 1998. - Vol. 19. - №5. - P. 747-757.
127. Dustin M.L., Rothlein R., Bhan A.K. et al. Induction by IL-1 and interferon-gamma: Tissue distribution, biochemistry and function of a natural adherence molecule (ICAM-1) // J. Immunol. 1986. - Vol. 137. - P. 245251.
128. Ebnother M., Schoenenberger R.A., Perruchoud A.P. et al. Severe bronchiolitis in acute Mycoplasma pneumoniae infection // Virchows Arch. -2001.-Vol.439.-P. 818-822.
129. El-Radhi A.S., Hogg C.L., Bungre J.K. et al. Effect of oral glucocorticoid treatment on serum inflammatory markers in acute asthma // Arch. Dis. Child.-2000.-Vol. 83.-P.158-162.
130. El-Sawy I.H., Badr-El-Din O.M., El-Azzouni O.E. et al. Soluble intercellular adhesion molecule-1 in sera of children with bronchial asthma exacerbation // Int. Arch. Allergy. Immunol. 1999. - № 119 (2). - P. 12632.
131. Ennis M., Turner G., Schock B.C. et al. Inflammatory mediators in bronchoalveolar lavage samples from children with and without asthma // Clin. Exp. Allergy. 1999. - Vol. 29. - P. 362-366.
132. Filaci G., Contini P., Brenci S. et al. Soluble HLA class I and class II molecule levels in serum and cerebrospinal fluids of multiple sclerosis patients // Hum. Immunol. 1997. - Vol. 54. - № 1. - P. 54-62.
133. Fish K.N., Britt W., Nelson J.A. A novel mechanism for persistence of human cytomegalovirus in macrophages // J. Virol. 1996. - Vol. 70. - P. 1855-1862.
134. Fleischer В., Mittriicker H.W. Evidence for T cell receptor-HLA class II molecule interaction in the response to superantigenic bacterial toxins // Eur. J. Immunol.-1991.-Vol. 21.-P. 1331-1333.
135. Floege J., Eng E., Young B.A. et al. Heparin suppressis mesangial cell proliferation and matrix expansion in experimental mesangioproliferative glomerulonephritis // Kidney Int. 1993. - Vol. 43. - P. 369-370.
136. Forster J., Tacke U., Krebs H. et al. Respiratory syncytial virus infection: its role in aeroallergen sensitization during the first two years of life // Pediatric. Allergy. Immunol. 1996. - Vol. 7. - P. 55-60.
137. Fortunato T.A., McElroy A.K., Sanchez V. et al. Exploitation of cellular signalling and regulatory pathways by human cytomegalovirus // Trends in microbiology. 2000. - Vol. 8. - №3. - P. 111-118.
138. Frew A.J., St-Pierre J., Teran L.M. et al. Cellular and mediator responses twenty-four hours after local endobronchial allergen challenge of asthmatic airways // J. Allergy Clin. Immunol. 1996. - Vol. 98. - P. 13343.
139. Frick O.L. Effect of respiratory and other virus infections on IgE immunoregulation // J. Allergy. Clin. Immunol. 1986. - Vol. 78. - P. 10131018.
140. Funaro A., De Monte L.B., Dianzani U. et al. Human CD38 is associated to distinct molecules which mediate transmembrane signaling in different lineages // Eur. J. Immunol. 1993. - Vol. 23. - P. 2407-11.
141. Galle P.R., Hofmann W. J., Walczak H. et al. Involvement of the CD95 (APO-l/Fas) receptor and ligand in liver damage // J. Exp. Med. 1995. -Vol. 182.-№5.-P. 1223-1230.
142. Garin E.H. Circulating mediators of proteinuria in idiopathic minimal lesion nephrotic syndrome // Pediatr. Nephrol. 2000. - Vol. 14 (8-9). - P. 872-878.
143. Gearing A.J.H., Newman W. Circulating adhesion molecules in disease //Immunol. Today. 1993.-№ 14 (10). - P. 506-512.
144. Gebauer G., Rieger M., Jager W. et al. Prognostic relevance of soluble interleukin-2 receptors in patients with ovarian tumors // Anticancer Res. -1999.-Vol. 19.-P. 2509.
145. Ginevri F., Nocera A., Bonato L. et al. Cytomegalovirus infection is a trigger for monoclonal immunoglobulins in pediatric kidney transplant recipients // Transplantation Proceedings. 1998. - Vol. 30. - P. 2079-2082.
146. Giordano C., De Maria R., Stassi G. et al. Defective expression of the apoptosis-inducing CD95 (Fas/APO-1) molecule on T and В cells in IDDM // Diabetologia. 1995. - № 38 (12). - P. 1449-54.
147. Grefte A., van der Giessen M., van Son W. et al. Circulating cytomegalovirus (CMV)-infected endothelial cells in patients with an active CMV infection // J. Infect. Dis. 1993. - Vol. 167. - P. 270-277.
148. Griffith T.S., Ferguson T.A. The role of FasL-induced apoptosis in immune privilege // Immunol. Today. 1997. - Vol. 18. - P. 240-244.
149. Griffitths C.E., Boffa M.J., Gallatin W.M. et al. Elevated levels of circulating intercellular adhesion molecule-3 (cICAM-3) in Psoriasis // Acta. Derm. Venerol. 1996. - Vol. 76. - № 1. - P.2-5.
150. Grimaldi J.C., Balasubramanian S., Kabra N.H. et al. CD38-mediated ribosylation of proteins // J. Immunol. 1995. - Vol. 155. - P. 811-817.
151. Hagihara M., Hosoi K., Kagawa T. et al. Serum soluble HLA-DR antigens in autoimmune hepatitis // Autoimmunity. 1999. - Vol. 31. - № 2. -P. 85-93.
152. Hagihara M., Shimura Т., Yamamoto K. et al. Clinical significance of serum soluble HLA class I antigens in systemic lupus erythematosus. // Tokai J. Exp. Clin. Med. 1993. - Vol. 18. - № 1-2. - P. 61-64.
153. Hahn S., Stalder Т., Wernli M. et al. Down-modulation of CD4+ T helper type 2 and type 0 cells by T helper type 1 cells via Fas/Fas-ligand interaction // Eur. J. Immunol. 1995. - Vol. 25. - № 9. - P. 2679-85.
154. Haier J., Nasralla M., Franco R.A. et al. Detection of mycoplasmal infections in blood of patients with rheumatoid arthritis // Rheumatology. -1999.-Vol. 38.-P. 504-9.
155. Harris E.S., Mclntyre T.M., Prescott S.M. et al. The leukocyte integrins // J. Biol. Chem. 2000. - Vol. 275. - P. 23409-23412.
156. Harty J.T., Tvinnereim A.R., White D.W. CD8|, T cell effector mechanisms in resistance to infection // Annu. Rev. Immunol. 2000. - Vol. 18.-P. 275-308.
157. Hashimoto S., Imai K., Kobayashi T. et al. Elevated levels of soluble ICAM-1 in sera from patients with bronchial asthma // Allergy. 1993. -Vol. 48.-P. 370-2.
158. Hauss P., Selz F., Cavazzana-Calvo M. et al. Characteristics of antigen-independent and antigen-dependent interaction of dendritic cells with CD4+T cells // Eur. J. Immunol. 1995. - Vol. 25. - P. 2285-2294.
159. Hayakawa M., Taguchi H., Kamiya S. et al. Animal model of Mycoplasma pneumoniae infection using germ-free mice // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2002. - Vol. 9. - P. 669-676.
160. Hebert M.J., Masse M., Vigneault N. et al. Soluble Fas is a marker of coronary artery disease in patients with endstage renal disease // Am. J. Kidney.Dis.-2001.-Vol. 38.-P. 1271-6.
161. Heise M.T., Pollock J.L., Oguin A. et al. Murine cytomegalovirus infection inhibits IFN gamma-induced MHC class II expression on macrophages: the role of type I interferon // Virology. 1998. - Vol. 241. -P. 331-344.
162. Henderson B. Therapeutic modulation of cytokines // Annals. Rheumatic. Disease. 1995. - Vol. 54. -№ 6. - P. 519-523.
163. Hengel H., Brune W., Koszinowski U.H. Immune evasion by cytomegalovirus survival strategies of a highly adapted opportunist // Trends in microbiology. - 1998. -Vol. 6. - № 5. - P.190-197.
164. Hogg N., Henderson R., Leitinger B. et al. Mechanisms contributing to the activity of integrins on leukocytes // Immunological Reviews. 2002. -Vol. 186. -P.164-171.
165. Holtzman M. J., Green J. M., Jayaraman S. et al. Regulation of T cell apoptosis // Apoptosis. 2000. - Vol. 2 - P. 459-471.
166. Hoshino S., Kukimoto I., Kontani K, et al. Mapping of the catalytic and epitopic sites of human CD38/NAD1 glycohydrolase to a functional domain in the carboxyl terminus // J. Immunol. 1997. - Vol. 158. - P. 741747.
167. Hovarth P.H. The airway inflammatory response in allergic asthma and its relationship to clinical disease // Allergy. 1995. - Vol. 50. - P. 13-21.
168. Huang A., Quinn H., Glover C. et al. The presence of interleukin-2 receptor alpha in the serum of colorectal cancer patients is unlikely to result only from T cell up-regulation // Cancer Immunol. Immunother. 2002. -Vol. 51.-P. 53-57.
169. Huang J.L., Ou L.S., Tsao C.H. et al. Reduced expression of CD69 and adhesion molecules of T lymphocytes in asthmatic children receiving immunotherapy // Pediatr. Allergy. Immunol. 2002. - Vol. 13. - P. 426433.
170. Hudson J.B. The murine cytomegalovirus as a model for the study of viral pathogenesis and persistent infections // Arch. Virol. 1979. - Vol. 62. -P. 1-29.
171. Ito M., Watanabe M., Ihara T. et al. Fas antigen and bcl-2 expression on lymphocytes cultured with cytomegalovirus and varicella-zoster virus antigen // Cell. Immbnol. 1995. - Vol. 160. - №2. - P. 173-7.
172. Itoh N., Yonehara S., Ishii A. et al. The polypeptide encoded by the cDNA for human cell surface antigen Fas can mediatal poptosis // Cell. -1991.-Vol. 66.-P. 233-243.
173. Iwamoto G.F.K., Monick M.M., Clark B.D. et al. Modulation of interleukin-1 beta gene expression by the immediate early genes of human cytomegalovirus//J. Clin. Invest. 1990.-Vol. 85.-P. 1853-1857.
174. Iwamoto M., Makiyama K., Koji Т., et al. Expression of Fas and Fas-ligand in epithelium of ulcerative colitis // Nippon-Rinsho. 1996. - Vol. 54. (7).-P. 1970-4.
175. Jayaraman S., Castro M., O'Sullivan M. et al. Resistance to Fas-mediated T-cell apoptosis in asthma // J. Immunol. 1999. - Vol. 162. - P. 1717-1722.
176. Jenks S.A., Miller J. Inhibition of IL-4 responses after T cell priming in the context of LFA-1 co-stimulation is not reversed by re-stimulation in the presence of CD28 co-stimulation // J. Immunol. 2000. - Vol. 164. - P. 72-78.
177. Jones H.P., Tabor L., Sun X. et al. Depletion of CD8j, cells exacerbates CD4j, Th cell-associated inflammatory lesions during murine mycoplasma respiratory disease // J. Immunol. 2002. - Vol. 168. - P. 3493-350.
178. Jonjic S., Pavic I., Polic B. et al. Antibodies are not essential for the resolution of primary cytomegalovirus infection but limit dissemination of recurrent virus//J. Exp. Med.-1994.-Vol. 179.-P. 1713-1717.
179. Jungi T.W., Krampe M., Sileghem M. et al. Differential and strain-specific triggering of bovine alveolar macrophage effector functions by mycoplasmas // Microb. Pathog. 1996. - Vol. 21. - P. 487-498.
180. Kas-Deelen A.M., Harmsen M.C., de Maar E.F. et al. The acute rejection before cytomegalovirus infection enhances von willebrand factor and soluble VCAM-1 in blood // Kidney International. 2000. - Vol. 58 (6). -P. 2533-2542.
181. Kay A.B. Asthma and cell inflammation // J. Allergy. Clin. Immun. -1991.-№5.-P. 893-909.
182. Keatings V.M., O'Conner B.J., Wright L.G. et al. Late response to allergen is associated with increased concentrations of tumor necrosis factor-a and IL-5 in induced sputum // J. Allergy Clin. Immunol. 1997. - Vol. 99. -№5.-P.693-698.
183. Kemeny D.M., Diaz-Sanchez D., Holmes В,J. CD8+ T cells in allergy // Allergy. 1992. - Vol. 47. - P. 12-21.
184. Khan M.A., Gaylor V., Latif N. et al. Cytomegalovirus encodes a Bcl-2 homologue that binds Bax // FASEB J. 1997. - Vol. 11. - P. 56.
185. Kobayashi Т., Hashimoto S., Imai K. et al. Elevation of serum soluble intercellular adhesion molecule-1 (sICAM-1) and sE-selectin levels in bronchial asthma // Clin. Exp. Immunol. 1994. - Vol. 96. - P. 110-5.
186. Konenkov V.I., Prokofev V.F., Glazycheva I.Iu. et al. Changes in the levels of soluble HLA antigens and their light chains (beta 2 microglobulin) in rheumatoid arthritis and systemic lupus erythematosus // Ter. Arkh. -1986. Vol. 58. - №7. - P. 57-59.
187. Krause D.C., Balish M.F. Cellular engineering in a minimal microbe: structure and assembly of the terminal organelle of Mycoplasma pneumoniae // Molecular Microbiology. 2004. - Vol. 51. - №4. - P. 917-924.
188. Krause D.C., Balish M.F. Structure, function, and assembly of the terminal organelle of Mycoplasma pneumoniae // Microbiology Letters. -2001.-Vol. 198.-P. 1-7.
189. Krueger A., Fas S.C., Baumann S., Krammer P.H. The role of CD95 in the regulation of peripheral T-cell apoptosis // Immunological Reviews. -2003.-Vol. 193.-P. 58-69.
190. Kulidjiant A.A., Inman R., Isserutz T. Rodent models of lymphocyte migration // Sem. Immunol. 1999. - Vol. 11 (2). - P. 85-93.
191. Kuryliszyn-Moskal A. Cytokines and soluble CD4 and CD8 molecules in rheumatoid arthritis: relationship to systematic vascultis and microvascular capillaroscopic abnormalities // Clin. Rheumatol. 1998. - Vol. 17. - P. 489495.
192. Lai C.K., Chan C.H., Leung J.C., Lai K.N. Serum concentration of soluble interleukin-2 receptor in asthma. Correlation with disease activity // Chest. 1993. - Vol. 103 - P. 782-786.
193. Lara-Marquez M.L., Moan M.J., Cartwright S., Listman J. et al. Atopic asthma: differential activation phenotypes among memory T helper cell // Clinical & Experimental Allergy. -2001. -№8. -P. 1232-1241.
194. Lebedev M.Yu., Sholkina V.N., Kryzhanova M.A. et al. Peripheral blood lymphocytes immunophenotype and serum concentration of soluble HLA class I in burn patients // Burns. 2003. - Vol. 29. - № 2. - P. 123-128.
195. Lechner H., Amort M., Steger M. et al. Regulation of CD95 (APO-1) expression and the induction of apoptosis in human T cells: changes in old age // Int. Arch. Allergy. Immunol. 1996. - Vol. 110. - №3 - P. 238-43.
196. Levrat С., Larrick J.W., Wright S.C. Tumor necrosis factor induces activation on mitochondrial succinate dehydrogenase // Life Sci. 1991. -Vol. 49.-P. 1731-1737.
197. Liles W.C., Kiener P.A., Ledbetter J.A. et al. Deferential expression of Fas (CD95) and Fas ligand on normal human phagocytes. Implications for the regulation of apoptosis in neutrophils // J. Exp. Med. 1996. - Vol. 184. -P. 429-440.
198. Lin S.J., Chang L.Y., Yan D.C. et al. Decreased intercellular adhesion molecule-1 (CD54) and L-selectin (CD62L) expression on peripheral blood natural killer cells in asthmatic children with acute exacerbation // Allergy. -2003.-Vol. 58.- P. 67-71.
199. Lin Y.C., Lu C.C., Su H.J. et al. The association between tumor necrosis factor, HLA-DR alleles, and IgE-mediated asthma in Taiwanese adolescents // Allergy. 2002. - Vol. 57. - P. 831 -834.
200. Litter A.J., Buckley C.D., Wordsworth P. et al. A distinct profile of six soluble intercellular adhesion molecules (ICAM -1, ICAM-3, VCAM-1, E-selectin, L-selectin and P-selectin) in rheumatoid arthritis // Br. J. Rheum. -1997.-№36.-P. 164-169.
201. Liu Y., Cigola E., Cheng W. et al. Myocyte nuclear mitotic division and programmed myocyte cell death characterize the cardiac myopathy induced by rapid ventricular pacing in dogs // Lab. Invest. 1995. - № 73 (6).-P. 771-87.
202. Lo S.K., Lee S., Ramos R.A. Endothelial-leukocyte adhesion molecule 1 stimulates the adhesive activity of leukocytes integrin CR3 (CD1 lb/CD 18, Mac-1 amb2) on human neutrophils // J. Exp. Med. 1991. - Vol. 173. - P. 493-500.
203. Lomax K. J., Malech H.L., Gallin J.I. The molecular biology of selected phagocyte detects // Blood Revs. 1989. - Vol. 3. - P.94-105.
204. Lopez-Botet L., Llano M., Ortega M. Human cytomegelovirus and natural killer-mediated surveillance of HLA class I expression: a paradigm of host-pathogen adaptation // Immunological Reviews. 2001. - Vol. 181. -№1. - P. 193-202.
205. Lopez-Botet M., Angulo A., Guma M. Natural killer cell receptors for major histocompatibility complex class I and related molecules in cytomegalovirus infection // Tissue Antigens. 2004. - Vol. 63 (3). - P. 195203.
206. Lund F., Solvason N., Grimaldi J.C., Michael R.E. Parkhouse and maureen howard murine CD38: an immunoregulatory ectoenzyme // Immunology Today. 1995. - Vol. 16. - №10. - P. 469.
207. MacCormac L.P., Grundy J.E. Human cytomegalovirus induces an Fc Q receptor (FcQR) in endothelial cells and fibrobroblasts that is distinct from the human cellular FcQRs // J. Infect. Dis. 1996. - Vol. 174. - P. 11511161.
208. Makino S., Fukuda T. Eosinophils and allergy in asthma // Allergy Proc. 1995.-№1.-P. 13-21.
209. Mallone R., Ferrua S., Morra M. et al. Characterization of a CD38-like 78-kDa soluble protein released from В cell lines derived from patients with X-linked agammaglobulinemia // J. Clin. Invest. 1998. - Vol. 101. - P. 2821-2830.
210. Manger В., Weiss A., Weyand C. et al. T cell activation: differences in the signals required for IL-2 production by nonactivated and activated T cells // J. Immunol. 1985. - Vol. 135. - №6. - P. 3669-3673.
211. Marrack P., Kappler J. The staphylococcal enterotoxins and their relatives // Science. 1990. - Vol. 248. - P. 705-711.
212. Mauri-Hellweg., Bettens F., Mauri D. Activation of drug-specific CD4+ and CD8 T cells in individuals allergic to sulfonamides, phenytoin, and carbamazepine // The Journal of Immunology. 1995. - Vol. 155. - № 1. - P. 462-472.
213. Metze J.D., Meyer U., Joos U. et al. Radiation induces increase of adhesion molecules and accumulation of p2-integrin-expressing cells in humans // Int. J. Radiation Oncology Biol. Phys. 1999. - Vol. 45. - №2. -P. 475-481.
214. Miyawaki Т., Uehara Т., Nibu R. et al. Differential expression of apoptosis-related Fas antigen on lymphocyte subpopulations in human peripheral blood // J. Immunol. 1992. - Vol. 149. - P. 3753-3758.
215. Montefort S., Lai C.K.W., Kapahi P. et al. Circulating adhesion molecules in asthma // Am. J. Respir. Crit. Care. Med. 1994. - Vol. 149. -P. 1149-52.
216. Moore C., EhlayelM., InostrozaJ. et al. Elevated levels of soluble HLA class I (sHLA-I) in children with severe atopic dermatitis // Ann. Allergy. Asthma. Immunol. 1997. - Vol. 79. - P. 113-8.
217. Motojima S., Hirata A., Kushima A. et al. Serum levels of soluble interleukin-2 receptor in asthma patients // J. Asthma. 1995. - Vol. 32 - P. 151-158.
218. Muller G.A., Muller С.A., Markovic-Lipkovski J. Adhesion molecules in renal diseases // Ren. Failure. 1996. - Vol. 18. - P. 711-724.
219. Nakata В., Chung K.H., Kato Y. et al. Serum soluble interleukin-2 receptor level as a prognostic indicator in gastric cancer // Br. J. Cancer. -1998.-Vol. 77.-P. 1820.
220. Nata K., Sugimoto Т., Yonekura H. & Okamoto H. Synthesis and hydrolysis of cyclic ADP-ribose by human leukocyte antigen CD38 and inhibition of the hydrolysis by ATP // J. Biol. Chem. 1993. - Vol. 268. - P. 26052-26054.
221. Newell M.K., Desbarats J. Fas ligand: receptor or ligand? // Apoptosis. 1999.-Vol. 4.-P. 311-315.
222. Nicolson G.L., Gan R., Haier J. Multiple co-infections (Mycoplasma, Chlamydia, human herpes virus-6) in blood of chronic fatigue syndrome patients: association with signs and symptoms // APMIS. 2003. - Vol. 111. -P. 557-566.
223. Nishirari K., Minatoguchi S., Seishima M. et al. Plasma Fas ligand, an inducer of apoptosis, and plasma soluble Fas, an inhibitor of apoptosis, in patients with chronic congestive heart failure // JACC. 1997. - Vol. 29. -№6. - P. 1214-20.
224. Nocito M., Montalban C., Gonzalez-Porque P. et al. Increased soluble serum HLA class I antigens in patients with lymphoma // Hum. Immunol. -1997. Vol. 58. - № 2. - P. 106-136.
225. Nordoy I., Muller F., Nordal K.P. et.al. Chemokines and soluble adhesion molecules in renal transplant recipients with cytomegalovirus infection // Clin. Exp. Immunol. 2000. - Vol. 120 (2). - P. 333-7.
226. Numazaki K., Asanuma H., Ikehata M., Chiba S. Detection of cytokines and cytomegalovirus DNA in serum as test for congenital infection // Early Human Development. 1998. - Vol. 52. - P. 43-48.
227. Oda Т., Kimura M., Hishida A. et al. Cell-to-cell interaction is required to induce proteinuria in in situ immune complex glomerulonephritis // J. Lab. Clin. Med.-1998.-Vol. 132 (2).-P. 112-123.
228. Oh J.W., Shin J.C., Jang S.J. et al. Expression of ICAM-1 on conjunctival epithelium and ECP in tears and serum from children with allergic conjunctivitis // Ann. Allergy. Asthma. Immunol. 1999. - Vol. 82 (6).-P. 579-85.
229. Ohta K., Yamashita N. Apoptosis of eosinophils in allergic inflammation // J. Allergy Clin. Immunol. 1999. - Vol. 104. - №1. - P. 1421.
230. Ott V., Seidl C., Westhoff U. et al. Soluble HLA class I and class II antigens in patients with multiple sclerosis // Tissue Antigens. 1998. - Vol. 51.-№3.-P. 301-304.
231. Papadopoulos N.G., Stanciu L.A., Papi A. et al. A defective type 1 response to rhinovirus in atopic asthma // Thorax. 2002. - Vol. 57. - P. 328-332.
232. Partida-Sanchez S., Goodrich S., Kusser K. et al. Lund regulation of dendritic cell trafficking by the ADP-ribosyl cyclase CD38. Impact on the development of humoral immunity // Immunity. 2004. - Vol. 20. - Iss. 3 -P. 279-291.
233. Penner J.D., Jacobson E.R., Brown D.R. et al. A novel Mycoplasma sp. associated with proliferative tracheitis and pneumonia in a Burmese python (Python molurus bivittatus) // J. Сотр. Pathol. 1997. - Vol. 117. - P. 283288.
234. PerichonB., Krishnamoorthy R. Asthma and HLA system // Allerg. Immunol. (Paris). 1991. - Vol. 23. - P. 301-7.
235. Peteiro-Cartelle F.J., Alvarez-Jorgeb A. Dynamic profiles of interleukin-6 and the soluble form of CD25 in burned patients // Burns. -1999.-Vol. 25-P. 487-491.
236. Pfister M., Ogilvie A., da Silva K. et al. NAD degradation and regulation of CD38 expression by human monocytes/macrophages // Eur. J. Biochem. -2001. Vol. 268. - P. 5601-5608.
237. Pigott R., Dillon L.P., Hemingway I.H. et al. Soluble forms of E-selectin, ICAM-1 and VCAM-1 are present in the supernatants of cytokine activated cultured endothelial cells // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1992. Vol. 187 (2). - P. 584-590.
238. Pino-Otin M.R., Vinas O., Fuente M.A., et al. Existence of soluble form of CD50 (intercellular adhesion molecule-3) produced upon human lymphocyte activation // J. Immunol. 1995. - Vol. 154 - №6. - P. 30153024.
239. Plaeger S., Bass H.Z., Nishanian P. et al. The prognostic significance in HIV infection of immune activation represented by cell surface antigen and plasma activation marker changes // Clin. Immunol. 1999. - Vol. 90 (2). -P. 238-46.
240. Pober J.S., Gimbrone M.A.Jr., Lapierre L.A. et al. Overlapping patterns of activation of human endothelial cells by interleukin 1, tumor necrosis factor and immune interferon // J. Immunol. 1986. - Vol. 137. - P. 1893-1897.
241. Poehlau D., Kiltz M., Riekb M. et al. Therapeutic immunoadsorption increases the level of circulating soluble HLA molecules // Immunohaematology. 2000. - Vol. 78. - P. 119-121.
242. Ptitsyna Yu.S., Bornyakova I.A., Baryshnikov A.Yu. et al. A soluble form of Fas/Apo-1 (CD95) antigen in the serum of viral hepatitis patients // Int. J. Immunorehabilitetion. 1999. - №14. - P. 110-111.
243. Puppo F., Scudeletti M., Indiveri F., Ferrone S. Serum HLA class I antigens: markers and modulators of an immune response? // Immunology Today.- 1995.-Vol. 18.-№3.-P. 124-127.
244. Ramaschi G., Torti M., Festetics E.T. et al. Expression of cyclic ADP-ribose-synthesizing CD38 molecule on human platelet membrane // Blood.1996.-Vol. 87.-P. 2308-13.
245. Razin S., Yogev D., Naot Y. Molecular biology and pathogenicity of mycoplasmas // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 1998. - Vol. 62. - P. 10941156.
246. Razvi E.S., Welsh R.M. Apoptosis in viral infections // Adv. Virus. Res.-1995.-Vol. 45.-P. 1-60.
247. Rea M., Mcnerlan S.E., Alexander H.D. CD69, CD25, and HLA-DR activation antigen expression on CD3+ lymphocytes and relationship to serum TNF-a, IFN-y and sIL-2R levels in aging // Experimental Gerontology. -1999. Vol. 34. - №1. - P. 79-93.
248. Rebmann V., Kreuzfeider E., Majtshak M. et al. Plasma levels of soluble HLA molecules in patients after polutrauma // Immunol. Letters.1997.- June. -P.139.
249. Redondo P., Solano Т., Vazquez V. et al. Fas and Fas ligand: expression and soluble circulating levels in cutaneous malignant melanoma // British Jolirnal of Dermatology. 2002. - Vol. 147. - P. 80-86.
250. Reinherz E.L., Kung P.C., Goldstein G. et al. Discrete stages of human intrathymic differentiation: analysis of normal thymocytes and leukemic lymphoblasts of T-cell lineage // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1980. - Vol. 77.-P. 1588-92.
251. Renzi P.M., Turgeon J.P., Marcotte J.E. et al. Reduced interferon-gamma pro-duction in infants with bronchiolitis and asthma // Am. J. Resp. Crit. Care. Med. 1999. - Vol. 159. - P. 1417-1422.
252. Ricci M., Rossi O., Bertoni M., Matucci A. TH2-like cells in the apthogenesis of airway allergic inflammation // Clin.Exp.Allergy. 1993. -Vol. 23. -P.360-369.
253. Ricci-Vitiani L., Conticello C., Zeuner A., De Maria R. CD95/CD95L interactions and their role in autoimmunity // Apoptosis. 2000. - Vol. 5 - P. 419-424.
254. Rink L., Nicklas W., Alvarez-Ossorio L. et al. Differential induction of tumor necrosis factor alpha in murine and human leukocytes by Mycoplasma arthritidis-derived super-antigen // Infect. Immun. 1994. - Vol. 2. - P. 462467.
255. Roman M., Calhoun W.J., Hinton K.L. et al. Respiratory syncytial virus infection in infants is associated with predominant Th-2-like response // Am. J. Resp. Crit. Care. Med. 1997. - Vol. 156. - P. 190-195.
256. Romero-Rojas A., Reyes-Esparza J., Estrada-Parra S., Hadden J.W. Lymphocyte stimulation and cytokine production by Mycoplasma pulmonis products//Int.Immunopharmacol.-2001.-Vol. l.-P. 1699-1707.
257. Rose-John S., Heinrich P.C. Soluble receptors for cytokines and growth factors: generation and biological function // Biochem. J. 1994. -Vol.300.-P. 281-290.
258. Rossetti G., Collinge M., R.Bender J. et al. Integrin-dependent regulation of gene expression in leukocytes // Immunological Reviews.2002.-Vol. 186.-P. 189-207.
259. Rothlein R., Mainoff E.A., Czajkowski M. et al. A form of circulating ICAM-1 in human serum // J. Immunol. 1991. - Vol. 147 (11). - P. 37883793.
260. Salmon M., Scheel-Toellner D., Huissoon A.P. et al. Inhibition of T cell apoptosis in the rheumatoid synovium // J. Clin. Invest. 1997. - Vol. 99.-P. 439-446. &
261. Saraclar Y., Mcqeady S.J., Mansmann H.C. Lymphocyte subpopulations of atopic children and effect of therapy upon them // J. Allergy and Clin. Immunol. 1977. - Vol. 60. - №5. - P. 301-305. „
262. Sarandakou A., Protonotariou E., Rizos D. et al. Soluble Fas antigen and soluble Fas ligand in early neonatal life // Early Human Development.2003.-Vol. 75-P. 1-7.
263. Sata M., Walsh K. TNF-a regulation of Fas ligand expression on the vascular endothelium modulates leukocyte extravasation // Nat. Med. 1998. -Vol. 4-P. 415-20.
264. Schmal H., Czermak B.J., Lentsch A.B. et al. Soluble ICAM-1 activates lung macrophages and enhances lung injury // J. Immunol. 1998. -Vol. 161.-P. 3685-3693.
265. Shahgasenpour S., Woodroje S.B., Garnett H.M. Alterations in the expression of ELAM-1, ICAM-1 and VCAM-1 after in vitro infection of endothelial cells with a clinical isolate of human cytomegalovirus // Microbiol. Immunol. 1997. -Vol. 41. -P. 121-129.
266. Shanley J.D. Murine models of cytomegalovirus-associated pneumonitis // Transpl. Proc. 1991. - Vol. 23 (S3). - P. 12-16.
267. Shi H.Z., Sun J.J., Pan H.L. et al. Alterations of T-lymphocyte subsets, soluble IL-2 receptor, and IgE in peripheral blood of children with acute asthma attacks // J. Allergy Clin. Immunol. 1999. - Vol. 103. - P. 388-394.
268. Shijubo N., Imai K., Shigehara K., Hirasawa M. Abe Soluble intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) in sera and bronchoalveolar lavage (BAL) fluids of extrinsic allergic alveolitis // Clin. Exp. Immunol. -1995.-Vol. 102(1).-P. 91-7.
269. Sigurs N., Bjarnason R., Sigurbergsson F., Kjellman B. Respiratory syncytial virus bronchiolitis in infancy is an important risk factor for asthma and allergy at age 7 // Am. J. Resp. Crit. Care. Med. 2000. - Vol. 161. - P. 1501-1507.
270. Simon H.U., Blaser K. Inhibition of programmed eosinophil death: A key pathogenic event for eosinophilia? // Immunol. Today. 1995. - Vol. 16. -P. 53-55.
271. Simon H.U., Yousefi S., Schranz C. et al. Direct demonstration of delayed eosinophil apoptosis as a mechanism causing tissue eosinophilia // J. Immunol. 1997. - Vol. 158. - P. 3902-3908.
272. Sinzger C., Jahn G. Human cytomegalovirus cell tropism and pathogenesis // Intervirology. 1996. - Vol. 39. - P. 302-319.
273. Smith P.D., Saini S.S., Rajeld M. et al. Cytomegalovirus induction of tumor necrosis factor-a by human monocytes and mucosal macrophages // J. Clin. Invest. 1992. - Vol. 90. - P. 1642-1648.
274. Sotnikova N.Y., Antsiferova Y.S., Petrunin D.D. et al. Regulation of expression of lymphocyte activation markers by neutrophil factors secreted during pregnancy // Russian Jornal of Immunology. 1998. - Vol. 3. - №2 -P. 134-140.
275. Spaggiari G.M., Contini P., Dondero A. et al. Soluble HLA class I induces NK cell apoptosis upon the engagement of killer-activating HLA class I receptors through FasL-Fas interaction // Blood. 2002. - Vol. 100 -№ 12.-P. 4098-4107.
276. Spinozzi F., Fizzotti M., Agea E. et al. Defective expression of Fas messenger RNA and Fas receptor on pulmonary T-cells from patients with asthma // Ann. Inter. Med. 1998. - Vol. 128. - №5. - P. 363-369.
277. Springer T.A. Adhesion receptors of the immune system // Nature. -1990.-Vol. 346.-P. 425-34.
278. Springer T.A. Traffic signals for lymphocyte recirculation and leukocyte emigration: The multistep paradigm // Cell. 1994. - Vol. 76. - P. 301-314.
279. Springer T.A. Traffic signals on endothelium for lymphocyte recirculation and leukocyte emigration // Annu. Rev. Physiol. 1995. - Vol. 57.-P. 827-872.
280. States D.J., Walseth T.F., Lee H.C. Similarities in amino acid sequences of Aplysia ADP-ribosyl cyclase and human lymphocyte antigen CD38 // Trends Biochem. Sci. 1992. - Vol. 17. - P. 495.
281. Stewart M., Hogg N. Regulation of leukocyte integrin function: affinity vs. avidity //J. Cell. Biochem. 1996. - Vol. 61. - P. 554-561.
282. Stoddart C.A., Cardin R.D., Boname J.M. et al. Peripheral blood mononuclear phagocytes mediate dissemination of murine cytomegalovirus // J. Virol. 1998. -№10. - P. 6243-6253.
283. Suda Т., Okasaki Т., NaitoY. et al. Expression of the Fas ligand in T-cell-line age // J. Immunol. 1995. - Vol. 154. - P. 3806-13.
284. Sweet C. The pathogenicity of cytomegalovirus // FEMS Microbiology Reviews. 1999. - Vol. 23. - P. 457-482.
285. Tanaka H., Honma S.I., Abe S., Tamura H. Effects of interleukin-2 and cyclosporin A on pathologic features in mycoplasma pneumonia // Am. J. Respir. Crit. Care. Med. 1996. - Vol. 154. - P. 1908-1912.
286. Tanaka K., Nakazawa H., Okada K. et al. Nitric oxide mediates murine cytomegalovirus-associated pneumonitis in lungs that are free of the virus // J. Clin. Invest. 1997.-Vol. 100.-P. 1822-1830.
287. Tanaka M., Suda Т., Haze K. et al. Fas ligand in human serum // Nat. Med. 1996. - Vol. 2. - P. 317-22.
288. Taylor-Wiedeman J., Sissons P., Sinclair J. Induction of endogenous human cytomegalovirus gene expression after dijerentiation of monocytes from healthy carriers // J. Virol. 1994. - Vol. 68. - P. 1597-1604.
289. Thacker E.L., Halbur P.G., Ross R.F., et al. Mycoplasma hyopneumoniae potentiation of porcine reproductive and respiratory syndrome virus-induced pneumonia // J. Clin. Microbiol. 1999. - Vol. 37. -P. 620±627.
290. Thacker E.L., Thacker B.J., Kuhn M. et al. Mucosal and systemic characteristics of protective activity of a Mycoplasma hyopneumoniae bacterin // Am. J. Vet. Res. 2000. - Vol. 61. - P. 1384±1389.
291. Trautmann A., Akdis M., Blaser K., Akdis C.FA. Role of dysregulated apoptosis in atopic dermatitis // Apoptosis. 2000. - Vol. 5. - P. 425-429.
292. Tsuchiya N., Shiota M., Yamaguchi A., Ito K. Elevated serum level of soluble HLA class I antigens in patients with systemic lupus erythematosus // Arthritis Rheum. 1996. - Vol. 39 - № 5. - P. 792-796.
293. Van Benten I.J., KleinJan A., Neijens H.J. et al. Prolonged nasal eosinophilia in all allergic patients after common cold // Allergy. 2001. -Vol. 56 (10).-P. 949-956.
294. Van Kooyk Y., Geijtenbeek TBH. A novel adhesion pathway that regulates dendritic cell trafficking and T cell interactions // Immunological Reviews. 2002. - Vol. 186. - P. 47-56.
295. Vanden Bush T.J., Rosenbusch R.F. Mycoplasma bovis induces apoptosis of bovine lymphocytes // FEMS Immunol. Med. Microbiol. 2002. -Vol. 32.-P. 97-103.
296. Vaux D.L., Korsmeyer S.J. Cell death in development // Cell. 1999. -Vol. 96.-P. 245-254.
297. Vignola A.M., Chiappara G., Gagliardo R. et al. Apoptosis and airway inflammation in asthma // Apoptosis. 2000. - Vol. 5. - P. 473-485.
298. Vignola A.M., Campbell A.M., Chanez P. et al. HLA-DR and ICAM-1 expression on bronchial epithelial cells in asthma and chronic bronchitis // Am. Rev. Respir. Dis. 1993. - Vol. 148. - P. 689-94.
299. Vilella R., Mila J., Lozano F. et al. Involvement of the CDw50 molecule in allorecognition // Tissue Antigens. 1990. - Vol. 36. - P. 203210.
300. Waldman W.J., Knight D.A., Huang E.H., Sedmak D.D. Bidirectional transmission of infectious cytomegalovirus between monocytes and vascular endothelial cells : an in vitro model // J. Infect. Dis. 1995. - Vol. 171. - P. 263-272.
301. Wang L.S., Chow K.C., Li W.Y. et al. Clinical significance of serum soluble interleukin 2 re-ceptor-alpha in esophageal squamous cell carcinoma // Clin. Cancer Res. 2000. - Vol. 6. - P. 1445.
302. Wang Т., Chunming D., Stevenson S.C. et al. Overexpression of soluble Fas attenuates transplant arteriosclerosis in rat aortic allografts // Circulation. 2002. - Vol. 106. - P. 1536-42.
303. Warner J.O., Marguet C., Rao R. et al. Inflammatory mechanisms in childhood asthma // Clin. Exp. Allergy. 1998. - Vol. 28. - P. 71-75.
304. Webb B.J., Bochan M.R., Montel A. et al. The lack of Ж cytotoxicity associated with fresh HUCB may be due to the presence of soluble HLA inл the serum//Cell. Immunol.-1994.-Vol. 159.-P. 246-261.
305. Wegner C.D., Gundel R.H., Reilly P. et al. Intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) in the pathogenesis of asthma // Science. 1990. -Vol.247.-P. 456-9.
306. Wolf R.E., Adamashvili I.M., Gelder F.B. et al. Soluble HLA-I in rheumatic diseases // Hum. Immunol. 1998. - Vol. 59. - № 10. - P. 644649.
307. Wolkerstorfer A., Savelkoul H.F., J. de Waard van der Spek F.B. et al. Soluble E-selectin and soluble ICAM-1 levels as markers of the activity of atopic dermatitis in children // Pediatr. Allergy. Immunol. 2003. - Vol. 14. -P. 302-306.
308. Wu C.A., Puddington L., Whiteley H.E. et al. Murine cytomegalovirus infection alters Thl/Th2 cytokine expression, decreases airway eosinophilia,and enhances mucus production in allergic airway disease // J. Immunol. 2000. Vol. 167. - P. 2798-807.
309. Yamada Y., Endo S., Nakae H. et al. Examination of soluble Fas (sFas) and soluble Fas ligand (sFasL) in patients with burns // Burns. 2003. - Vol. 29.-P. 799-802.
310. Zavazava N., Wobst В., Ferstl R., Muller-Ruchholtz W. Soluble MHC class I molecules in human body fluids // J. Clin. Lab. Anal. 1994. - Vol. 8. -P. 432-436.
311. Zavazova N., Bottcher H., Ruchholtz W.M. Solubl MHC class I antigens (sHLA) and anti-HLA antibodies in heart and kidney allograft recipients // Tissue Antigens. 1993. - Vol. 42. - P. 20-26.
312. Zilber M.T., Gregory S., Mallone R. et al. CD38 expressed on human monocytes: a coaccessory molecule in the superantigen-induced proliferation // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. - Vol. 97. - P. 2840-2845.
313. Zorn U., Dallmann I., Grobe J. et al. Soluble interleukin 2 receptors abrogate IL-2 induced activation of peripheral mononuclear cells // Cytokine. -1994.-Vol. 6.-P. 358.
314. Корреляционный анализ относительного содержания антигенположительных мононуклеарных клетоккрови у больных бронхиальной астмой детей (7-14 лет)
315. Показатель CD4+ CD8+ CD16+ CD25+ CD95+ CD38+ CD50+ CD54+ HLA-Г1. CD8+ r=0,10 p>0,05
316. CD16+ r=0,18 p>0,05 r=0,16 p>0,05
317. CD25+ r=0,22 p>0,05 r=0,41 p<0,001 1=0,33 p<0,03
318. CD95+ r=0,17 p>0,05 r=0,14 p>0,05 r=-0,02 p>0,05 r=0,40 p<0,001
319. CD38" r=0,20 p>0,05 P=0,01 p>0,05 r=-0,14 p>0,05 r=-0,01 p>0,05 г=0,11 p>0,05
320. CD50" r=0,12 p>0,05 r=0,39 p<0,002 r=0,35 p<0,01 r=0,62 p<0,00 r=0,07 p>0,05 r=-0,03 p>0,05
321. CD54" r=0,03 p>0,05 r=-0,10 p>0,05 r=0,06 p>0,05 r=0,12 p>0,05 r=0,10 p>0,05 r=-0,06 p>0,05 r=-0,01 p>0,05
322. HLA-Г r=0,03 p>0,05 r=0,22 p>0,05 r=0,52 p<0,00 r=0,13 p>0,05 r=0,10 p>0,05 r=-0,02 p>0,05 r=0,42 p<0,001 r=0,03 p>0,05
323. HLA-DR+ r=0,40 p<0,001 r=0,15 p>0,05 r=0,07 p>0,05 r=0,32 p<0,03 r=0,16 p>0,05 r=0,32 p<0,03 r=0,30 p<0,05 r=0,13 p>0,05 r=0,17 p>0,05rs коэффициент корреляции Спирмена; р — достоверность корреляции
324. Корреляционный анализ уровней растворимых антигенов и относительного содержания антигенположительных мононуклеарных клетоккрови у больных бронхиальной астмой детей (7-14 лет)
325. CD4+ CD8+ CD16+ CD25+ CD95+ CD38+ CD50+ CD54+ HLA-1+ HLA-DR+ SCD25 sCD95 SCD38 sCD50 sCD54 sHLA-I
326. SCD25 г=0,06 p>0,05 r=-0,17 p>0,05 r=-0,05 p>0,05 r=0,13 p>0,05 r= 0,004 p>0,05 r=-0,17 p>0,05 r=- 0,002 p>0,05 r=0,20 p>0,05 r=0,24 p>0,05 r=0,16 p>0,05
327. SCD95 r=0,06 p>0,05 r=-0,15 p>0,05 r=-0,01 p>0,05 r=0,09 p>0,05 r=-0,10 p>0,05 r=-0,28 p>0,05 r=0,17 p>0,05 r=0,10 p>0,05 r=0,20 p>0,05 r=0,10 p>0,05 r=0,80 p-0,00
328. SCD38 r=- 0,005 p<0,05 r=-0,06 p>0,05 r=-0,17 p>0,05 r=0,06 p>0,05 r=0,04 p>0,05 r=-0,04 p>0,05 r=0,10 p>0,05 r=0,40 p<0,001 r=0,08 p>0,05 r=0,25 p>0,05 r=0,22 p>0,05 r=0,l 1 p>0,05
329. SCD50 r=-0,006 p<0,05 r=0,06 p>0,05 r=0,03 p>0,05 r=-0,04 p>0,05 r=-0,05 p>0,05 r=-0,36 p<0,01 r=0,27 p>0,05 r=-0,03 p>0,05 r=0,29 p>0,05 r=0,18 p>0,05 r=0,68 p=0,00 r=0,80 p=0,00 r=-0,17 p>0,05
330. Корреляционный анализ уровней растворимых антигенов и относительного содержания антигенположительных мононуклеарных клетоккрови у здоровых детей (7-14 лет)
331. CD4+ CD8+ CD16+ CD25+ CD95+ CD38+ CD50+ CD54+ HLA-+ HLA-DR+ SCD25 sCD95 SCD38 SCD50 SCD54 sHLA-I1. CD8+ r=-0,38 p>0,05
332. CD16+ r=-0,42 p>0,05 r=0,19 p>0,05
333. CD25+ r=0,15 p>0,05 r=0,51 p>0,05 r=-0,09 p>0,05
334. CD95+ r=-0,49 p>0,05 r=0,49 p>0,05 r=0,37 p>0,05 r=0,08 p>0,05
335. CD38+ r=0,26 p>0,05 r=0,27 p>0,05 r=-0,56 p>0,05 r=0,29 p>0,05 r=0,70 p<0,02
336. CD50+ r=0,51 p>0,05 r=0,42 p>0,05 r=-0,56 p>0,05 r=0,28 p>0,05 r=-0,19 p>0,05 r=-0,46 p>0,05
337. CD54+ r=-0,76 p<0,01 r=-0,50 p>0,05 r=0,73 p<0,02 r=-0,59 p>0,05 r=0,29 p>0,05 r=0,39 p>0,05 r=-0,39 p>0,05
338. HLA-I+ r=-0,12 p>0,05 r=-0,39 p>0,05 r=0,50 p>0,05 r=-0,57 p>0,05 r=-0,17 p>0,05 r=-0,44 p>0,05 r=0,37 p>0,05 r=0,41 p>0,05
339. HLA-DR* r=-0,35 p>0,05 r=-0,09 p>0,05 r=0,44 p>0,05 r=0,16 p>0,05 r=0,31 p>0,05 r=0,33 p>0,05 r=-0,79 p=0,005 r=0,41 p>0,05 r=-0,49 p>0,05
340. SCD50 r=0,59 p>0,05 r=0,27 p>0,05 r=-0,24 p>0,05 r=0,42 p>0,05 r=0,24 p>0,05 r=-0,60 p>0,05 r=0,82 p>0,005 r=-0,33 p>0,05 r=0,32 p>0,05 r=-0,12 p>0,05 r=0,15 p>0,05 r=0,13 p>0,05 r=0,21 p>0,05