Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Растворимые дифференцировочные антигены и молекулы гистосовместимости у ВИЧ-инфицированных, имеющих маркеры сопутствующих инфекций
- Ученая степень
- кандидата биологических наук
- ВАК РФ
- 14.00.36
Оглавление диссертации Худякова, Наталья Евгеньевна :: 2004 :: Нижний Новгород
ВВЕДЕНИЕ.
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Растворимые формы дифференцировочных антигенов.
1.2. Характеристика антигенов главного комплекса гистосовместимости человека.
1.2.1. Комплекс Н1.А I класса - р2-микроглобулин.
1.2.2. Н1.А II класса.
1.3. Характеристика антигенов межклеточной адгезии.
1.3.1. Характеристика С054 антигена (1САМ-1).
1.3.2. Характеристика С050 антигена (ЮАМ-З).
1.4. Характеристика Сй38 антигена.
1.5. Характеристика Сй25 антигена.
1.6. Характеристика Сй95 (РаБ/АроИ) антигена.
1.7. Растворимые формы мембранных антигенов крови человека при ВИЧ-инфекции.
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Исследуемые образцы и объем наблюдений.
2.2. Используемые моноклональные антитела.
2.3. Получение козьих поликлональных антител, специфичных к поверхностным антигенам мононуклеарных клеток крови человека.
2.4. Перийодатный метод синтеза конъюгата.
2.5. Иммуноферментные методы определения растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы.
2.6. Статистическая обработка данных.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.
3.1. Разработка и апробация иммуноферментного метода выявления растворимой формы Н1А-РК антигена.
3.2. Анализ распространенности сопутствующих инфекций у ВИЧ-инфицированных лиц.
3.3. Исследование содержания растворимых форм антигенов главного комплекса гистосовместимости I и II классов при ВИЧ-инфекции
3.4. Исследование содержания растворимых форм молекул адгезии при ВИЧ-инфекции.
3.5. Исследование сывороточного содержания растворимых форм С095 (Раэ/АРСМ) антигена.
3.6. Исследование содержания растворимой формы СР25 антигена
Введение диссертации по теме "Аллергология и иммулология", Худякова, Наталья Евгеньевна, автореферат
Актуальность проблемы
В России, как и в большинстве стран мира, ВИЧ-инфекция остается одной из главных проблем здравоохранения. По экспертным оценкам ВОЗ в мире в настоящее время насчитывается более 36 млн. ВИЧ-инфицированных. По данным Российского Федерального научно-методического центра по профилактике и борьбе со СПИД на октябрь 2003 г. в России было более 250 тысяч ВИЧ-инфицированных [30].
В конце 90-х гг. основным путем заражения ВИЧ в России являлось инфицирование при внутривенном употреблении психоактивных веществ. Вследствие этого значительная часть ВИЧ-инфицированных лиц одновременно несет маркеры вирусных гепатитов В, С, С и других инфекций. [2, 10, 22, 45]. Патогенез смешанной инфекции, вызываемой сочетанием этих вирусов, изучен мало, что определяет актуальность детального исследования молекулярных механизмов иммунного ответа при данных социально-значимых вирусных заболеваниях.
Важную роль в регуляции иммунного ответа играют растворимые формы поверхностных протеинов клеток иммунной системы, образующиеся за счет шеддинга или альтернативного сплайсинга матричной РНК. Получены данные о том, что они могут выполнять функции ограничителей иммунных реакций или же выступать в роли активаторов иммунологических процессов. Кроме того, сывороточный уровень отдельных белков является мониторинговым показателем течения патологического процесса при ряде заболеваний, в том числе и при ВИЧ-инфекции [55, 96, 122]. Информация о наличии и функциональной роли растворимых форм получена лишь для немногих из более 240 идентифицированных в настоящее время дифференцировочных антигенов. Таким образом, исследование количественного содержания растворимых форм (э-форм) мембранных белков клеток иммунной системы имеет как практическое, так и теоретическое значение.
Цель исследования
Изучить характер изменения уровня растворимых форм Сй25, С038, С050, СР54, СР95 антигенов и растворимых антигенов ША класса I и II в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц, имеющих маркеры сопутствующих вирусных инфекций.
Задачи
1. Разработать иммуноферментный метод определения растворимой формы ША-ОР антигенов.
2. Исследовать сывороточное содержание этих протеинов при хроническом гепатите С, цитомегаловирусной инфекции, при коинфицировании вирусами гепатитов В и С, у носителей молекулярно-генетических и иммунологических маркеров вирусного гепатита в.
3. Определить сывороточный уровень растворимых молекул Н1А I класса, Н1А-ОР, Сй38, С050, С054, СР95 антигенов при моноинфицировании ВИЧ.
4. Оценить характер изменения сывороточного содержания молекул ША I и II класса, растворимых форм С025, СР38, СР50, СР54 и С095 антигенов при наличии у ВИЧ-инфицированных лиц маркеров вирусных гепатитов В, С, в и цитомегаловирусной инфекции в различных сочетаниях.
Положения, выносимые на защиту
1. Присутствие маркеров других вирусных инфекций у ВИЧ-инфицированных сопровождается изменением сывороточного содержания растворимых форм С025, С038, СЭ50, С054, СЭ95 антигенов, И1А I и II класса.
2. Основным фактором, влияющим на содержание исследованных растворимых антигенов у ВИЧ-инфицированных лиц, несущих маркеры сопутствующих инфекций, является инфицирование вирусом гепатита С.
Научная новизна
Установлено, что уровень бША-ОР увеличивается у ВИЧ-инфицированных лиц, положительных по антителам к вирусу гепатита С, независимо от наличия маркеров других тестируемых инфекций, в то время как концентрация растворимых антигенов Н1А I класса статистически достоверно возрастает у ВИЧ-инфицированных лиц, имеющих маркеры вирусного гепатита С и цитомегаловирусной инфекции, а также у лиц, кроме того несущих НВб антиген. Статистически достоверно повышенный уровень вСОбО у ВИЧ-инфицированных лиц ассоциирован с одновременным инфицированием организма вирусами гепатитов В и С. Более высокое содержание вСОбО антигена зарегистрировано при дополнительном наличии антител класса 1дМ против цитомегаловируса.
Обнаружено, что сывороточный уровень бС054 антигена у ВИЧ-инфицированных лиц статистически достоверно повышается при наличии антител против белков вируса гепатита С, а также в присутствии дополнительно антител класса 1дМ против цитомегаловируса, но не маркеров вирусных гепатитов В и в.
Установлено, что преимущественное влияние на сывороточное содержание суммарного бС038 антигена оказывает наличие инфицирования ВИЧ. Обнаружено статистически достоверное повышение концентрации димерной фракции данного антигена при моноинфекции ВИЧ. Присутствие антител к вирусу гепатита С, НВб антигена или антител к Е2 протеину вируса гепатита в приводит к дополнительному увеличению уровня димерного бС038 антигена.
Показано повышение концентрации эС025 антигена в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц при наличии антител к вирусу гепатита С и одновременном инфицировании вирусом гепатита В или цитомегаловирусом, а также при одновременном обнаружении антител против Е2-протеина НС\/.
Характер изменения уровня олигомерного бС095 антигена при ВИЧ-инфекции отличается от характера изменения сывороточного содержания суммарного бС095 антигена. Сывороточный уровень суммарного вСРЭб антигена при моноинфицировании ВИЧ имеет тенденцию к повышению, тогда как содержание олигомерной формы SCD95 антигена статистически достоверно снижается.
Установлено, что при инфицировании организма вирусом гепатита G повышается сывороточный уровень растворимой формы HLA-DR антигенов. Содержание sHLA-DR нормализуется при освобождении организма от вируса. Показано увеличение сывороточного содержания sHLA-DR антигенов при ци-томегаловирусной инфекции.
Полученные данные расширяют знания о роли растворимых форм мембранных антигенов в реализации иммунного ответа при вирусных инфекциях.
Практическая значимость работы
С использованием моноклональных и поликлональных антител разработан иммуноферментный метод определения суммарной фракции растворимых HLA-DR антигенов в биологических жидкостях. Метод применим для изучения роли этих белков в молекулярных механизмах иммунных реакций, а также для определения дифференциально-диагностической значимости уровня растворимых форм данных антигенов при различных заболеваниях. Примененные в работе методические подходы к определению сывороточного уровня растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы потенциально могут быть использованы в качестве методов оценки прогноза течения ВИЧ-инфекции, осложненной вирусными гепатитами.
Апробация работы
Результаты работы представлены на ll(IV) Конгрессе специалистов клинической лабораторной диагностики (Москва, 2000); VII Нижегородской сессии молодых ученых (Н.Новгород, 2002); VI Всероссийской научной конференции с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (С.Петербург, 2002); Научной конференции и VIII съезде Итало-Российского общества по инфекционным болезням «Проблема инфекции в клинической медицине» (С.-Петербург, 2002); Научно-практической международной конференции, посвященной памяти академика РАМН и РАМТН И.Н. Блохиной «Фундаментальные и прикладные проблемы медицинской биотехнологии»
Москва, 2002); I научно-практической конференции Приволжского федерального округа «Актуальные вопросы эпидемиологии, клиники, диагностики, лечения и профилактики ВИЧ-инфекции/СПИДа в Приволжском федеральном округе» (Ижевск, 2003); Научно-практической конференции «Актуальные проблемы ВИЧ-инфекции» (Астрахань, 2003); Межрегиональной научной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения акад. АМН СССР С.П.Карпова (Томск, 2003); III Всероссийской научной конференции с международным участием по вопросам ВИЧ/СПИД и вирусных гепатитов (Суздаль, 2003); Научно-практической конференции с международным участием «Актуальные аспекты инфекционной патологии и деятельности госсанэпидслужбы» (Омск, 2003).
По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ.
Апробация диссертации состоялась на расширенной межлабораторной конференции Нижегородского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н. Блохиной 16 октября 2003 года.
Структура и объем диссертации
Диссертационная работа в объеме 140 листов состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных результатов и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы: Диссертация иллюстрирована 15 рисунками и 10 таблицами. Библиографический указатель включает 234 источника литературы (48 отечественных и 186 иностранных авторов).
Заключение диссертационного исследования на тему "Растворимые дифференцировочные антигены и молекулы гистосовместимости у ВИЧ-инфицированных, имеющих маркеры сопутствующих инфекций"
ВЫВОДЫ
1. Разработан иммуноферментный метод определения растворимой формы Н1-А-0К антигенов. С помощью данного метода продемонстрировано повышение содержания растворимых Ш-А-РК молекул у больных цитомегало-вирусной инфекцией и у лиц, имеющих в крови РНК вируса гепатита С.
2. При моноинфицировании ВИЧ происходит повышение сывороточного уровня суммарной и димерной фракции растворимого СР38 антигена. Обнаружен дисбаланс между сывороточным содержанием суммарного и олигомер-ного вСОЭб антигена.
3. Наличие у ВИЧ-инфицированных антител к вирусу гепатита С сопровождается статистически достоверным увеличением сывороточной концентрации растворимых Н1А-ОР, СР38 и СР54 антигенов в сравнении с ВИЧ-моноинфицированными лицами. Дополнительное присутствие анти-Е2 Нв\/ не оказывает влияния на уровень данных антигенов.
4. У лиц, имеющих одновременно антитела против ВИЧ, антитела против вируса гепатита С и НВв антиген, сывороточная концентрация растворимых форм Н1-А-ОК, СР50, димерного С038 и С025 антигенов увеличивается по сравнению с нормой и моноинфицированными ВИЧ, но не в сравнении с анти-НС\/-положительными ВИЧ-инфицированными.
5. Присутствие антител против вируса гепатита С и антител класса 1дМ против цитомегаловируса у ВИЧ-инфицированных сопровождается повышением сывороточной концентрации форм растворимых антигенов Н1.А I и II классов, СР50, СР54, СЭ25.
6. При наличии у ВИЧ-инфицированных лиц одновременно, антител против вируса гепатита С, антител класса 1дМ против цитомегаловируса и НВэ антигена происходит статистически достоверное повышение содержания растворимых антигенов Н1.А-1 и СР50 в сравнении с нормой.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В основе иммунного ответа лежат межклеточные и межмолекулярные взаимодействия, в реализации которых важную роль играют мембранные белки клеток иммунной системы, а также их растворимые формы, образующиеся как путем шеддинга, так и за счет альтернативного сплайсинга матричной РНК. Растворимые формы мембранных белков клеток иммунной системы осуществляют чаще всего многофункциональное воздействие. Нарушение их равновесного содержания приводит к блокаде межклеточных мембранных взаимодействий и ограничению иммунного ответа [8]. В настоящей работе мы исследовали содержание растворимых форм семи мембранных антигенов клеток иммунной системы, относящихся к разным функциональным группам белков в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц с маркерами других вирусных инфекций. В качестве представителей молекул адгезии мы исследовали содержание растворимых форм СР50 антигена (1САМ-3) и СР54 антигена (1САМ-1). Поскольку в механизмах реализации иммунного ответа на вирусные инфекции важную роль играют молекулы главного комплекса гистосовме-стимости, мы оценили уровень растворимой формы антигенов гистосовме-стимости I и II класса. В качестве маркера, отражающего уровень активации, было выбрано содержание растворимой формы рецептора 11-2 С025 антигена. Также был определен уровень растворимого С038 антигена, являющегося как активационным антигеном, так молекулой адгезии. Было исследовано содержание суммарной фракции бС038 антигена и сывороточный уровень ди-мерной молекулы вС038. И, наконец, представителем последней функциональной группы белков был выбран С095 антиген, растворимая форма которого блокирует РаБ-зависимый путь апоптоза [167]. Определялся суммарный пул эСОЭб антигена и содержание его олигомерной формы.
С применением моноклональных и поликлональных антител был разработан новый метод определения сывороточного содержания растворимых антигенов НЬА-РК. В работе также использованы разработанные ранее методы определения растворимых С050, СР38, С095 антигенов, олигомерного С095 антигена [33], метод определения растворимых молекул HLA I класса [9], методы определения растворимых CD54, CD25 и димерного CD38 антигенов [14].
Уровень суммарного sCD38 антигена был статистически достоверно увеличен в сравнении с нормой в 1,7 раза у ВИЧ-инфицированных лиц без маркеров других тестированных инфекций. Увеличение сывороточного содержания sCD38 антигена при ВИЧ-инфекции, вероятно, происходит благодаря шеддингу мембранного предшественника с поверхности активированных клеток иммунной системы. Повышенный уровень sCD38 антигена у ВИЧ-инфицированных лиц может быть следствием специфической активации иммунной системы, ведущей к анергии, и свидетельствует о вероятном участии растворимого CD38 антигена в патогенетических механизмах развития ВИЧ-инфекции. Подъем содержания sCD38 антигена может ограничивать иммунный ответ на ВИЧ-инфекцию. Четырехкратное увеличение уровня димерного sCD38 антигена в сыворотке крови ВИЧ-моноинфицированных лиц свидетельствует о преимущественном вовлечении данной функциональной формы антигена в патогенез ВИЧ-инфекции.
В группе ВИЧ-инфицированных лиц, не имеющих тестированных маркеров сопутствующих инфекций, наблюдалась тенденция к повышению среднего уровня sHLA-l. Сывороточное содержание sHLA-DR антигена и sCD50 антигена также стремилось к повышению. Средняя концентрация sCD25 антигена была повышена более чем в 7 раз по сравнению со здоровыми донорами. Однако ни в одном случае повышение не было статистически достоверным из-за значительной гетерогенности групп.
Рядом исследователей ранее также было продемонстрировано, что сывороточные уровни растворимых антигенов HLA класса I и II, а также sCD50 и sCD25 антигенов повышены при ВИЧ-инфекции и увеличиваются по мере про-грессирования заболевания. Кроме того, сывороточные уровни sHLA-l и sHLA-DR могут служить прогностическими маркерами течения инфекции [88, 175]. Отсутствие выраженного повышения сывороточного уровня данных антигенов в наших исследованиях вероятно связано с ранними стадиями заболевания, поскольку были исследованы образцы сыворотки крови ВИЧ-инфицированных лиц, в первый раз прошедших тестирование на наличие антител к ВИЧ.
Установлено, что при ВИЧ-моноинфекции наблюдается тенденция к повышению уровня суммарной фракции бС095 антигена, однако сывороточное содержание олигомерного бС095 антигена статистически достоверно снижается. Таким образом, при ВИЧ-инфекции изменяется соотношение сывороточного уровня суммарной и олигомерной фракции растворимого С095 антигена. Следовательно, можно предположить, что при ВИЧ-инфекции значительный дисбаланс наблюдается не только в системе «СР95 и его лиганд», но и в соотношении мономерных и агрегированных растворимых форм СР95 антигена.
В связи с широким распространением ВИЧ-инфекции среди потребителей наркотических препаратов от 50 до 90% ВИЧ-инфицированных лиц одновременно несет маркеры вирусных гепатитов [10, 22]. В наших исследованиях среднее сывороточное содержание бШ-А-! антигенов у ВИЧ-инфицированных лиц, несущих антитела к вирусу гепатита С, обнаруживало более выраженную тенденцию к повышению, чем при моноинфицировании ВИЧ. Сывороточный уровень бША-ОК в группе анти-НС\/+ ВИЧ-инфицированных был статистически достоверно повышен в 38,5 раз в сравнении со здоровыми донорами и в 21 раз в сравнении с лицами, моноинфицированными ВИЧ. Эти данные свидетельствуют о том, что при смешанном инфицировании ВИЧ и НС\/ дополнительное воздействие на уровень циркулирующих антигенов Н1А-ОК оказывает инфицирование вирусом гепатита С.
Сравнение уровня бС050 антигена у ВИЧ-инфицированных, имеющих или не имеющих маркеры вирусного гепатита С, показало существование статистически достоверных различий между этими группами. Повышение сывороточной концентрации бС050 антигена при смешанном инфицировании вирусом гепатита С и ВИЧ можно соотнести с ростом содержания данного антигена при хроническом гепатите С [39]. Присутствие вируса гепатита С оказывает стимулирующее влияние на уровень бСР50 антигена у ВИЧ-инфицированных лиц. Вероятно, повышение содержания данного антигена при вирусном гепатите С, протекающем на фоне ВИЧ-инфекции, происходит с помощью тех же механизмов, что и при хроническом гепатите С.
Обнаружены статистически достоверные различия в сывороточном уровне бС054 антигена между ВИЧ-моноинфицированными и НС\/-коинфицированными лицами. Это предполагает, что увеличение уровня бС054 антигена в сыворотке крови второй группы ВИЧ-инфицированных лиц также происходит под влиянием вируса гепатита С.
Содержание бС038 антигена у ВИЧ-инфицированных,имеющих в крови антитела к НС\/, было повышено в сравнении с нормой в той же степени, что и у ВИЧ-моноинфицированных лиц, но в меньшей, чем при хроническом гепатите С [36]. Это предполагает наличие ингибирующего воздействия ВИЧ-инфекции на развитие процессов активации при смешанной ВИЧ и НС\/ инфекции и согласуется с данными других авторов относительно супрессирую-щего воздействия ВИЧ на иммунный ответ против вируса гепатита С [20]. Необходимо отметить, что сывороточный уровень димерного бС038 антигена был повышен более значительно, чем содержание суммарной фракции. Это предполагает различную роль димерной и мономерной формы бС038 в механизмах иммунного ответа.
Сывороточная концентрация растворимого Сй50 антигена и суммарного бС095 антигена при наличии НВб антигена у ВИЧ-инфицированных лиц имела тенденцию к повышению. Присутствие НВв-антигена в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц также характеризовалось тенденцией к увеличению уровня суммарного бС038. Заметим, что моноинфицирование ВИЧ приводит к статистически достоверному повышению уровня суммарного бС038 антигена в сравнении с нормой. В то же время известно, что при вирусном гепатите В также наблюдается выраженное увеличение сывороточного содержания растворимого СР38 антигена [36]. Гораздо меньший подъем сывороточной концентрации исследуемого антигена, выявленный при ВИЧ-инфекции, осложненной гепатитом В, может свидетельствовать о супрессии иммунной системы. Полученные результаты подтверждают данные других авторов о подавлении клеточного иммунного ответа при сочетанном течении ВИЧ-инфекции и вирусного гепатита В [7].
У ВИЧ-инфицированных лиц, имеющих в сыворотке крови одновременно антитела против HCV и HBs антиген, сывороточное содержание sHLA-l практически не отличалось от нормы, но уровень sHLA-DR был статистически достоверно повышен в сравнении с донорами, с ВИЧ-моноинфицированными и имел тенденцию к повышению в сравнении с лицами со смешанным инфицированием ВИЧ и HCV. Таким образом, наблюдался суммирующий эффект влияния ВИЧ-инфекции и вирусных гепатитов на уровень sHLA-DR.
Присутствие в крови ВИЧ-инфицированных лиц и анти-HCV, и HBs-антигена приводило к статистически достоверному увеличению концентрации SCD50 антигена. Статистически достоверные различия обнаружены также при сравнении этой группы с ВИЧ-моноинфицированными. Однако при сравнении группы ВИЧ-инфицированных лиц, несущих одновременно маркеры вирусных гепатитов В и С, с ВИЧ-инфицированными лицами, имеющими либо анти-HCV, либо HBs антиген, статистически достоверных отличий не выявлено. Более высокий средний уровень растворимого CD50 антигена, более высокая медиана и высокий процент лиц, имеющих повышенный уровень данного антигена, позволяет сделать заключение, что наличие одновременно маркеров гепатитов В и С при ВИЧ-инфекции оказывает выраженное воздействие на иммунную систему ВИЧ-инфицированных, проявляющееся в увеличении концентрации sCD50 антигена.
Присутствие HBs-антигена в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных лиц характеризовалось тенденцией к увеличению уровня суммарного sCD38 антигена. В то же время в исследованиях других авторов при гепатите В было обнаружено более значительное увеличение сывороточного содержания растворимого CD38 антигена [36]. Так как уровень растворймого CD38 антигена в сыворотке крови является отражением активации иммунной системы организма в ответ на вирусную инфекцию, то гораздо меньший подъем сывороточной концентрации исследуемого антигена, выявленный при ВИЧ-инфекции, осложненной гепатитом В, может свидетельствовать о подавлении иммунных механизмов, протекающих с участием CD38 антигена. Результаты находятся в соответствии с данными других авторов о подавлении клеточного иммунного ответа при сочетанном течении ВИЧ-инфекции и острого гепатита
В, выражающееся в снижении иммунорегуляторного индекса, уровня Сй4-положительных клеток и их функциональной способности к бласттрансфор-мации [7]. Это также предполагает вероятную отрицательную регуляцию человеческим вирусом иммунодефицита иммунного ответа на вирус гепатита В.
Средняя концентрация вСРЗв димера у ВИЧ-инфицированных лиц с маркерами гепатитов В и С была увеличена в 116 раз. Существенное изменение уровня димерного бС038 антигена по сравнению с уровнем общей фракции зСР38 антигена предполагает особую роль Сй38 димера в молекулярных механизмах иммунного ответа при вирусных инфекциях. В данной группе ВИЧ-инфицированных лиц обнаружено статистически достоверное увеличение среднего содержания зС025 антигена в сравнении с нормой. Однако сравнение с ВИЧ-моноинфицированными и анти-НСХ/* ВИЧ-инфицированными лицами статистически достоверных различий не выявило. Возможно, присутствие двух гепатотропных вирусов при ВИЧ-инфекции приводит к кумулятивному эффекту усиления иммунного ответа организма человека на инфицирование, тогда как повышение уровня растворимого Сй25 антигена играет роль ограничителя противовирусного иммунного ответа, сдерживая цитотоксическое поражение печени при ВИЧ-инфекции.
При ВИЧ-инфекции, осложненной вирусными гепатитами В и С, концентрация олигомерного эСОЭб антигена имела выраженную тенденцию к увеличению. При смешанном гепатите В+С ранее обнаружено статистически достоверное повышение уровня олигомерной фракции бСОЭБ антигена в сравнении с моноинфекциями [40]. Следовательно, поражение организма сразу двумя гепатотропными вирусами в большей степени влияет на уровень олигомерного зС095 антигена. В то же время, наличие инфицированности вирусом иммунодефицита человека является фактором, уменьшающим уровень растворимой олигомерной формы Сй95 антигена у ВИЧ-инфицированных с маркерами вирусных гепатитов В и С, что проявляется лишь в наличии тенденции к поI вышению сывороточного уровня олигомерного эСОЭб.
Хорошо известно, что активная репликация цитомегаловируса происходит только у лиц с выраженной супрессией иммунной системы, в частности, при ВИЧ-инфекции [5]. Практически у всех исследованных нами лиц, несущих антитела класса 1дМ против цитомегаловируса, одновременно выявлялись антитела против вируса гепатита С. В этой группе ВИЧ-инфицированных наблюдалось достоверное увеличение сывороточных уровней молекул гисто-совместимости. Сывороточный уровень бШ-А-! был статистически достоверно повышен в 1,8 раза. Повышение уровня бШ-А-ОК антигена было более значительным, чем содержание антигенов главного комплекса гистосовместимости I класса (в 52 раза). Статистически достоверные различия наблюдались между этой группой и здоровыми донорами, а также ВИЧ-моноинфицированными, но не лицами со смешанным инфицированием ВИЧ и НС\Л Полученные данные, вероятно, являются отражением дисбаланса между Т-хелперами первого и второго типа и свидетельствуют о сдвиге равновесия в сторону ТЬ2.
Наличие маркеров цитомегаловирусной инфекции в присутствие антител к вирусу гепатита С повышает уровень растворимых форм молекул адгезии С050 и СР54 в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных. Однако достоверных различий с группой ВИЧ-инфицированных лиц, несущих только антитела к вирусу гепатита С, т.е. дополнительного влияния цитомегаловируса не обнаружено. Уровень эС038 димера был в 40 раз выше нормы, но на треть ниже, чем содержание бС038 димера у ВИЧ-инфицированных лиц, имеющих в крови только анти-НС\Л Это предполагает что инфицирование вирусом гепатита С вносит более существенный вклад в изменение сывороточного уровня эС038.
Средний сывороточный уровень растворимого С025 антигена у ВИЧ-инфицированных, имеющих маркеры вирусного гепатита С и цитомегаловирусной инфекции, был статистически достоверно повышен в сравнении с нормой. Однако в сравнении с лицами, моноинфицированными ВИЧ, и анти-НС\Г ВИЧ-инфицированными была выявлена лишь тенденция к повышению сывороточного содержания эС025 антигена. Характер изменения сывороточного уровня бС025 также свидетельствует о более выраженном влиянии НС\Л инфицирования на степень активации иммунных процессов.
У ВИЧ-инфицированных лиц, несущих антитела против вирусов гепатитов Сив, наблюдалось либо статистически достоверное повышение сывороточного содержания растворимых антигенов (Н1А-ОР, С038 димер, С025), либо тенденция к увеличению уровня в сравнении с нормой (эС054 антиген). Однако при сравнении групп анти-НСХГ ВИЧ-инфицированных, имеющих или не имеющих антитела против вируса гепатита С, достоверные различия не наблюдались ни в одном случае. Это позволяет заключить, что увеличение сывороточного уровня исследуемых растворимых антигенов у ВИЧ-инфицированных лиц данной группы связано, главным образом, с присутствием вируса гепатита С.
В целом, можно заключить, что при моноинфицировании ВИЧ наблюдается статистически достоверное повышение уровня суммарного и димерного зСР38 антигенов, причем изменение эСРЗв димера носит более выраженный характер. Содержание растворимых молекул ША I и II класса, вСРбО, зС025, суммарного зСР95 антигенов имеет выраженную тенденцию к увеличению. Присутствие антител к вирусу гепатита С у ВИЧ-инфицированных лиц оказывает дополнительное воздействие, приводящее к более существенному росту сывороточного уровня исследованных антигенов. Инфицирование организма наряду с ВИЧ и НС\/, вирусом гепатита В и цитомегаловирусом, либо присутствие антител против вируса гепатита Э в различных сочетаниях приводит к еще более выраженному подъему сывороточного уровня растворимых форм исследованных антигенов, однако основным фактором', влияющим на содержание исследованных растворимых молекул, является инфицирование вирусом гепатита С.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2004 года, Худякова, Наталья Евгеньевна
1. Абдурахимова З.К., Ибадова Г.А., Назмитдинова Ч.Р. Вирусные гепатиты в клинике ВИЧ/СПИД. // Тез. науч. конф. «Проблема инфекции в клинической медицине». С.-Петербург. - 2002. - С. 3-4.
2. Баринский И.Ф., Шубладзе А.К., Каспаров A.A., Гребенюк В.Н. Цитомега-ловирусная инфекция человека // В кн.: Герпес: этиология, диагностика, лечение. Москва. - 1986. - 218 с.
3. Барышников А. Ю., Блохина Н. Г., Кадагидзе 3. Г и др. Моноклональные антитела ИКО-1 против константной части la-подобных антигенов // Экспе-рим. онкология. -1984. Т. 6. - № 4. - С. 12-17.
4. Воробьев В.Г., Новиков В.В., Лебедева А.И. Иммунодиагностика острых лейкозов. Нижний Новгород: Изд-во НГМА. - 1998. - С. 8.
5. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика. - 1999. - 450 с.
6. Довгалюк Т.И., Чернобровый В.Ф., Федоровых Л.П. и др. Парентеральные вирусные гепатиты у ВИЧ-инфицированных больных. // Тез. докл. V Росс, научно-практ. конф. «Гепатит В, С и D проблемы диагностики, лечения и профилактики». - М. - 2003. - С. 80-81.
7. Егоров A.M., Осипов А.П., Дзантиев Б.Б. и др. Теория и практика иммуноферментного анализа. М.: Высшая школа. - 1991. -288 с.
8. Егорова Н.И., Курников Г.Ю., Бабаев A.A., Новиков В.В. Сывороточный уровень растворимых молекул межклеточной адгезии при урогенитальном хламидиозе. // Цитокины и воспаление. 2003. - Т. 2. - № 2. - С. 32-36.
9. Зайцева H.H., Альтова Е.Е., Носов H.H. и др. Эпидемическая ситуация по ВИЧ-инфекции в Приволжском федеральном округе. / /Вестник Нижегородского университета, Сер. Биология. 2001. - №.1(3). - С. 76-78.
10. Козлов И.Г., Горлина Н.К., Чередеев А.Н. Рецепторы контактного взаимодействия. // Иммунология. 1995. - № 4. - С. 14-24.
11. Лебедев М.Ю., Крыжанова М.А., Кораблев С.Б. и др. Растворимый CD38 антиген информативный показатель состояния иммунной системы при ожоговой болезни. // Нижегородский медицинский журнал. - 2000. - № 2. -С. 10-14.
12. Мелешко Л А, Быкова В.М., Бруцкая С.И., Ждановская О.М. ВИЧ-инфекция и парентеральные гепатиты среди лиц, потребляющих наркотики инъекционно в республике Беларусь. // ЖМЭИ. 2000 - № 4 - С. 44-45.
13. Михальцов А.Н., Ковеленов А.Ю., Буланов Ю.И. и др. Клинико-иммунологическая характеристика пациентов с ВИЧ-инфекцией и вирусным гепатитом С. Тез. науч. конф. "Проблема инфекции в клинической медицине". С.-Петербург. 2002, 215-215.
14. Михайлов М.И. Гепатит G проблемы изучения. // Вирусные гепатиты: достижения и перспективы. - 1997. - № 1. - С. 3-11.
15. Муляр Н.Ф. Маркеры вирусных гепатитов В и С у ВИЧ-инфицированных лиц. // Тез. докл. V научно-практ. конф. «Гепатит В, С и D проблемы диагностики, лечения и профилактики». - М. - 2003. - С. 198-199.
16. Никонова М.Ф., Литвина М.М., Варфоломеева М.И. и др. Апоптоз и пролиферация как альтернативные формы ответа Т-лимфоцитов на стимуляцию. // Иммунология. 1999. - № 2. - С. 20-23.
17. Новиков В.В. Характеристика и биотехнология моноклональных антител против лимфоцитарных антигенов. Автореф. докт. дисс. - М. - 1994. - 48 с.
18. Новиков В.В. Диагностическая значимость при вирусных инфекциях мембранных и растворимых форм дифференцировочных антигенов клеток иммунной системы. // Гематология и трансфузиология. 1996. - N9 6. - С. 4043.
19. Новиков В.В., Алясова A.B., Варшавская Л.В. и др. Прогностическое значение уровня растворимого CD38 антигена при раке молочной железы. // Аллергология и иммунология. М. -2001. - Т. 2. - № 2. - С. 116.
20. Новиков В.В., Барышников А.Ю. Растворимые формы мембранных белков клеток иммунной системы как компоненты глобальной иммунологической сети. // Тезисы научн. докладов III Съезда биохимического общества. -С.-Пб. 2002. - С. 196-197.
21. Новиков В.В., Трофимова М.Н., Андреев A.B. и др. Очистка моноклональ-ных антител с помощью стафилококкового реагента, содержащего белок А. //Лабораторное дело. 1987. - № 6. - С. 606-610.
22. Отмахова И.А., Корочкина О.В., Птицына Ю.С. Новиков В.В. Значение растворимых форм дифференцировочных антигенов (sCD38 и sHLA I ß2-m) при острой и хронической формах вирусного гепатита С. // Мир вирусных гепатитов. - 2002. - № 4. - С. 6-9.
23. Покровский В.И., Покровский В.В., Юрин О.Г. Клиническая классификация ВИЧ-инфекции. // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2001. - № 1. -С. 7-10.
24. Птицына Ю.С. Сывороточный уровень растворимых форм мембранных антигенов клеток иммунной системы при вирусных гепатитах В, С и G. // Автореферат канд. дисс. М. - 2003. - 24 с.
25. Птицына Ю.С., Борнякова И.А., Мартынова Т.Г. и др. Растворимый и мембранный Fas/Apo-1 (CD95) антиген в крови больных гепатитами В и С. // Клиническая лабораторная диагностика. 2000. - № 10. - С. 10-11.
26. Птицына Ю.С., Борнякова И.А., Новиков В.В. и др. Содержание растворимой формы CD38 антигена в сыворотке крови больных гепатитами В и С. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. -1999.-Т. 9.-№1.-С. 75.
27. Птицына Ю.С., Дерябина Е.М., Борнякова И.А. и др. Сравнительный анализ экспрессии растворимой и мембранной форм CD38 антигена в кровибольных гепатитом В. // Росийский гастроэнтерологический журнал. 1999.- № 4.-С. 148-149.
28. Птицына Ю.С., Новиков Д.В., Мартынова Т.Г. и др. Повышенное содержание растворимой формы CD50 антигена (ICAM-1) в сыворотке крови больных вирусным гепатитом G. // Аллергология и иммунология. 2000. -Т. 1. - № 2. - С. 107-108.
29. Рахманова А.Г., Ахтырская H.A., Сизова Н.В. Динамика течения ВИЧ-инфекции у пациентов с сопутствующими ЗППП и вирусными гепатитами, выявленными в Санкт-Петербурге в 1997 1998 гг. //ЖМЭИ. - 2000. - № 4.- С. 36-38.
30. Самохвалов Е.И., Новиков Д.В., Пименов В.К. и др. Частота обнаружения HGV-инфекции у здорового населения и в группе риска. // В сб. «Гепатит В, С и D проблемы диагностики, лечения и профилактики». - 1999. - С. 201201.
31. Фримель Г. Иммунологические методы. М.: Медицина. - 1987. - 472 с.
32. Хаитов P.M., Алексеев Л.П. Физиологическая роль главного комплекса гистосовместимости человека. // Иммунология. 2001. - № 3. - С. 4-12.
33. Abdalla A., Sheesha А.А., Shokeir М. et al. Serum intercellular adhesion molecule-l in children with chronic liver disease: relationship to disease activity. // Dig. Dis. Sci. 2002. - Vol. 47. - № 6. - P. 1206-1208.
34. Antonaci S., Jirillo E., Schiraldi O. Soluble HLA class I antigens in chronic hepatitis C: a disease-associated manifestation or molecules modulating immunoresponsiveness? // Immunopharmacol. Immunotoxicol. 1999. - Vol. 21.-№4. -P. 727-738.
35. Arimilli S., Astafieva I., Mukku P.V. et al. Peptide binding inhibits aggregation of soluble MHC class II in solution. // IUBMB Life. 1999. - Vol. 48. - № 5. - P. 483-491.
36. Arnold P.Y., Mannie M.D. Vesicles bearing MHC class II molecules mediate transfer of antigen from antigen-presenting cells to CD4+ T cells. // Eur. J. Immunol. 1999. - Vol. 29. - № 4. - P. 1363-1373.
37. Bauernhofer Т., Kuss I., Friebe-Hoffmann U. et al. Role of prolactin receptor and CD25 in protection of circulating T lymphocytes from apoptosis in patients with breast cancer. // Br. J. Cancer. 2003. - Vol. 88. - № 8. - P. 1301-1309.
38. Beld M., Penning M., Lukashov V. et al. Evidence that both HIV and HIV-induced immunodeficiency enhance HCV replication among HCV seroconverters. //Virology. 1998. - Vol. 244. - № 2. - P. 504-512.
39. Bjercke S., Gaudernack G. Dendritic cells and monocytes as accessory cells in T-cell responses in man. II. Function as antigen-presenting cells. // Scand. J. Immunol. 1985. - Vol. 21. - № 5. - P. 501-508.
40. Bleijs D.A., Geijtenbeek T.B., Figdor C.G. et al. DC-SIGN and LFA-1: a battle for ligand. // TRENDS in Immunology. 2001. - Vol. 22. - № 8. - P. 457-463.46
41. Brieva J.A., Villar L.M., Leoro G. et al. Soluble HLA class I antigen secretion by normal lymphocytes: relationship with cell activation and effect of interferon-gamma. // Clin. Exp. Immunol. 1990. - Vol. 82. - № 2. - P. 390-395.
42. Brockmeyer C., Ulbercht M., Schendel D.J. et al. Distribution of cell adhesion molecules (ICAM-1, VCAM-1, ELAM-1) in renal tissue during allograft rejection.// Transplantation. -1993. Vol. 55. - № 3. - P. 610-615.
43. Brown J.H., Jardetzky T.S., Gorga J.C. et al. Crystal structure of the human class-ll histocompatibility antigen HLA-DR1. // Nature. 1994. - Vol. 364. - P. 215-221.
44. Camilleri J.P., Amos N. Williams B.D. et al. Serum soluble interleukin 2 receptor levels and radiological progression in early rheumatoid arthritis. // J. Rheumatol. 2001. - Vol. 28. - № 12. - P. 2576-2578.
45. Capobianchi M.R. Induction of lymphomonocyte activation by HIV-1 glycoprotein gp120. Possible role in AIDS pathogenesis. // J. Biol. Regul. Homeost. Agents. 1996. - Vol. 10. - № 4. - P. 83-91.
46. Carbone E., Terrazzano G., Colonna M. et al. Natural killer clones recognize specific soluble HLA class I molecules. // Eur. J. Immunol. 1996. - Vol. 26. - № 3. - P. 683-689.
47. Carpen O., Pallai P., Staunton D.E., Springer J.A. Association of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) with actin-containing cytoskeleton and alpha-actinin. // Ibid. -1992. -Vol. 118. №-5.-P. 1223-1234.
48. Cascino I., Fiucci G., Papoff G. et al. Three functional soluble forms of the human apoptosis-inducing Fas molecule are produced by alternative splicing. // The Journal of Immunology. 1995. - Vol. 154. - P. 2706-2713.
49. Charles A., Janeway Jr., Travers P. et. al. Immunobiology. London: Current Biology Ltd. - 1994. - P. 222 - 227.
50. Claus R., Bittorf T., Walzel H. et al. High concentration of soluble HLA-DR in the synovial fluid: generation and significance in "rheumatoid-like" inflammatory joint diseases. // Cell. Immunol. 2000. - Vol. 206. - № 2. - P. 85-100.
51. Claus R., Hausmann S., Zavazava N. et al. In vitro effects of solubilized HLA-DR-role in immunoregulation? // Cell. Immunol. 1994: - Vol. 155. - № 2. - P. 476-485.
52. Cresswell P. Assembly, transport, and function of MHC class II molecules. // Ann. Rev. Immunol. 1994. - Vol. 12. - P. 259-293.
53. De Pita O., Frezzolini A., Cianetti A. Squamous cell carcinoma-related antigen (SCCr-Ag), slCAM-1 and beta 2-microglobulin are useful markers of disease activity in psoriasis. // Acta. Derm. Venereol. 1999. - Vol. 79. - № 2. - P. 132135.
54. Deaglio S., Mehta K., Malavasi F. Human CD38: a (r)evolutionary story of enzymes and receptors. // Leukemia Research. 2001. - Vol. 25.- P. 1-12.
55. Deaglio S., Morra M., Mallone R. et al. Human CD38 (ADP ribosyl cyclase) is a counter-receptor of CD31, an Ig superfemily member. // J. Immunol. 1998. -Vol. 160.-№1.-P. 395-402.
56. Dejica D. Serum soluble IL-2 receptor as a marker of lymphocyte activation in some autoimmune diseases. Effect of immunosuppressive therapy. // Roum. Arch. Microbiol. Immunol. 2001. - Vol. 60. - № 3. - P. 183-201.
57. DeVito-Haynes L.D., Jankowska-Gan E., Heisey D.M. et al. Soluble HLA class I in epithelial lining fluid of lung transplants: associations with graft outcome. // Hum. Immunol. 1997. - Vol. 52. - № 2. - P. 95-108.
58. Ditschkovski M., Kreuzfelder E., Rebmann V. et al. HLA-DR expression and soluble HLA-DR levels in septic patients after trauma.// Ann. Surg. 1999. -Vol. 229. - № 2. - P. 246-254.
59. Duran I., Martinez-Caceres E.M., Rio J. et al. Immunological profile of patients with primary progressive multiple sclerosis. // Brain. 1999. - Vol. 122. - P. 2297-2307.
60. Ferreira A., Garcia Rodriguez M.C., Omenaca F. et al. Soluble class I histocompatibility antigens (s-HLA) and beta 2-microglobulin at delivery. // Clin. Exp. Immunol.-1991.-Vol. 84. № 1.-P. 167-169.
61. Ferreira A., Villar M.L., Alvarez Cermeno J.C. et al. Quantification of soluble serum HLA class I antigens in healthy volunteers and AIDS patients. // Clin. Chim. Acta. 1988. -Vol. 174. -№ 2. - P. 207-211.
62. Filaci G., Contini P., Brenci S. et al. Increased serum concentration of soluble HLA-DR antigens in HIV infection and following transplantation. // Tissue Antigens. 1995. - Vol. 46. - № 2. - P. 117-123.
63. Filaci G., Contini P., Brenci S. et al. Soluble HLA class I and class II molecule levels in serum and cerebrospinal fluids of multiple sclerosis patients. // Hum. Immunol. 1997. - Vol. 54. - № 1. - P. 54-62.
64. Frode T.S., Tenconi P., Debiasi M.R., Medeiros Y.S. Tumour necrosis factor-alpha, interleukin-2 soluble receptor and different inflammatory parameters in patients with rheumatoid arthritis. // Mediators Inflamm. 2002. - Vol. 11. - № 6. - P. 345-349.
65. Fukuda Y., Nakano I., Katano Y. et al. Serum levels of soluble intercellular adhesion molecule-1 and soluble vascular cell adhesion molecule-1 in asymptomatic carriers of hepatitis C virus. // J. Int. Med. Res. 1998. - Vol. 26. -№ 6.-P. 313-318.
66. Funaro A., Morra M., Calosso L. et al. Role of the human CD38 molecule in B cell activation and proliferation. // Tissue Antigens. 1997. - Vol. 49. - P. 7-15.
67. Fushimi M., Furukawa F., Tokura Y. et al. Membranous and soluble forms of Fas antigen in cutaneous lupus erythematosus. // J. Dermatol. 1998. - Vol. 25. - № 5. - P. 302-308.
68. Gaddi E., Balbaryski J., Cantisano C. et al. Soluble intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) levels in HIV infected children. // Medicina (B Aires). -1999. -Vol. 59. -№ 4. -P. 351-354.
69. Gaddi E., Laucelia S., Balbaryski J. et al. Prognostic value of soluble intercellular adhesion molecuie-1 (s-ICAM-1) in HIV-infected children. // Scand. J. Immunol. 2000. - Vol. 52. - № 6. - P. 628-633.
70. Galhardo M.C., de Carvalho M.G., Georg I. et al. Nutritional status impairments in HIV-infected patients are associated with increased TNF-alpha and IL-6 serum levels but not with viral load. // Infection. 2001. - Vol. 29. - № 5.-P. 257-261.
71. Ge C.J., Hu S.J., Zheng X. et al. Serum levels of soluble Fas soluble Fas ligand and soluble IL-2 receptor in patients with coronary heart disease. // Zhejiang Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 2002. - Vol. 31. - № 5. - P. 337-339.
72. Ghio M., Contini P., Mazzei C. et al. Soluble HLA class I, HLA class II, and Fas Ligand in blood components: a possible key to explain the immunomodulatory effects of allogeneic blood transfusions. // Blood. 1999. -Vol. 93. - № 5. - P. 1770-1777.
73. Giacomelli R., Passacantando A., Parzanese I. et al. Serum levels of soluble CD30 are increased in ulcerative colitis (UC) but not in Cronhn s disease (CD). // Clin. Exp. Immunol. 1998. - Vol. 111. - № 3. - P. 532-535.
74. Gruener N.H., Lechner F., Jung M.C. et al. Sustained dysfunction of antiviral CD8+ T lymphocytes after infection with hepatitis C virus. // J. Virol. 2001. -Vol. 75. - № 12. - P. 5550-5558.
75. Grungreiff K., Reinhold D., Ansorge S. Serum concentrations of slL-2R, IL-6, TGF-beta1, neopterin, and zinc in chronic hepatitis C patients treated with interferon-alpha.//Cytokine. -1999.-Vol. 11.-№12.-P. 1076-1080.
76. Grutters J.C., Fellrath J.M., Mulder L. et al. Serum soluble interleukin-2 receptor measurement in patients with sarcoidosis: a clinical evaluation. // Chest. 2003. - Vol. 124. - № 1. - P. 186-195.
77. Hagihara M., Hosoi K., Kagawa T. et al. Serum soluble HLA-DR antigens in autoimmune hepatitis. //Autoimmunity. 1999. - Vol. 31. - № 2. - P. 85-93.
78. Hagihara M., Shimura T., Takebe K. et al. Serum concentrations of soluble HLA class I and CD8 forms in patients with viral hepatic disoders. // J. Gastroenterol. -1997. - Vol. 32. - № 3. - P. 338-343.
79. Hausmann S., Claus R., Buchwald S. et al. Quantitation of soluble HLA-DR antigens in human serum and other body fluids // Beitr. Infusionsther Transfusionsmed. 1994. - Vol. 32. - P. 281-287.
80. Hausmann S., Claus R., Falk U., Wegener S. Influence of anticoagulants on the level of soluble HLA class I and class II antigens measured in blood samples. //J. Immunoassay. 1996. - Vol. 17. - № 3. - P. 257-275.
81. Hayashi N., Mita E. Fas system and apoptosis in. viral hepatitis. // J. Gastroenterol. Hepatol. 1997. - Vol. 12. - P. 223-226.
82. Heaney M.L., Golde D.W. Soluble cytokine receptors. // Blood. 1996. - Vol. 87. - № 3. - P. 847-857.
83. Henkei R., Bratt G., Holmberg V. et al. Indicators of T-cells activation: correlation between quantitative CD38 expression and soluble CD8 levels in asymptomatic HIV* individuals and healthy controls. // Cytometry. 1998. - Vol. 33.-№2.-P. 115-122.
84. Horenstein A.L., Stockinger H., Imnof B.A. et al. CD38 binding to human myeloid cells is mediated by mouse and human CD31. // Biochem. J. 1998. -Vol. 330.-P. 1129-1135.
85. Hosaka N. Oyaizu N. Than S. et al. Correlation of loss of CD4 T cells with plasma levels of both soluble form Fas (CD95) Fas ligand (FasL) in HIV-infected infants. // Clin. Immunol. 2000. - Vol. 95. - № 1. - P. 20-25.
86. Hosaka S., Shah M.R., Pope R.M. et al. Soluble forms of P-selectin and intercellular adhesion molecule-3 in synovial fluids. // Clin. Immunol. Immunopathol. -1996. Vol. 78. - № 3. - P. 276-282.
87. Hosoi K., Hagihara M., Kagawa T. et al. The serum soluble HLA-DR antigens as a predictive marker of the response to interferon-alpha treatment in patients with chronic hepatitis C. // Tokai. J. Exp. Clin. Med. 2000. - Vol. 25. - № 3. -P. 117-124.
88. Housset C., Lamas E., Courgnaud V. et al. Presence of HIV-1 in human parenchymal and non-parenchymal liver cells in vivo. // J. Hepatol. 1993. -Vol. 19.-№ 2.-P. 252-258.
89. Hufert F.T., Schmitz J., Schreiber M. et al. Human Kupffer cells infected with HIV-1 in vivo. // J. Acquir. Immune Defic. Syndr. 1993. - Vol. 6. - № 7. - P. 772-777.
90. Inostroza J., Ferrada J., Navarrete C., Sorensen R.U. Soluble histocompatibility class I antigens and beta 2-microglobulin in pregnant females and cord blood samples. // Hum. Immunol. 1997. - Vol. 54. - № 1. - P. 63-68.
91. Jackson D.G., Bell J.I. Isolation of a cDNA encoding the human CD38 (T10) molecule, a cell surface glycoprotein with an unusual discontinuous pattern of expression during lymphocyte differentiation. // J. Imunol. 1990. - Vol. 144. -P. 2811.
92. Jia H., Du J., Zhu S. et al. Clinical observation of serum IL-18, IL-10 and sIL-2R levels in patients with chronic hepatitis C pre- and post antiviral treatment. // Chin. Med. J. (Engl). 2003. - Vol. 116. - № 4. - P. 605-608.
93. Jun C.D., Carman C.V., Redick S.D. et al. Ultrastructure and function of dimeric, soluble intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1). // J. Biol. Chem. -2001. Vol. 276. - № 31. - P. 29019-29027.
94. Knolle P.A., Eckardt A.J., Protzer-Knolle U. et al. Circulating ICAM-1(sCD54) and LFA-3 (sCD58) in chronic hepatitis B A longitudinal study in patients treated with interferon-alpha. // Z. Gastroenterol. - 1997. - Vol. 35. - № 6. - P. 459-467.
95. Krams S.M., Fox S.K., Beatty P.R. et. al. Human hepatocytes produce an isoform of FAS that inhibits apoptosis. // Transplantation. 1998. - Vol. 65. - P. 713-721.
96. Kurachi T., Morita I.-, Murota S. Involvement of adhesion molecules LFA-1 and ICAM-1 in osteoclast development. // Biochim. Biohis. Acta. 1993. - Vol. 1178. - № 3. - P. 259-266.
97. Laemmly U.K. Cleavage of structural protein during the assembly of the head of bacteriophage T4. // Nature. 1970. - Vol. 227. - № 4258. - P. 680-685.
98. Laskus T., Radkowski M., Wang L.F. et al. Hepatitis C virus quasispecies in patients infected with HIV-1: correlation with extrahepatic viral replication. // Virology. 1998. - Vol. 248. - № 1. - P. 164-171.
99. Levacher M., Hulstaer F., Tallet S. et al. The significance of activation markers on CD8 lymphocytes in human immunodeficiency syndrom: staining and prognostic value. // Clin. Exp. Immunol. 1992. - Vol. 90. - P. 376.
100. Li X., Jeffers L.J., Garon C. Persistence of hepatitis C virus in a human megakaryoblastic leukaemia cell line. // J. Viral Hepat. 1999. - Vol. 6. - № 2. -P. 107-114.
101. Lien E., Aukrust P., Sundan A. et al. Elevated levels of serum-soluble CD14 in human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) infection: correlation to disiase progression and clinical events. // Blood. 1998. - Vol. 92. - № 6. - P.2084-2092.
102. Linnen J., Wages J., Zhang-Keck Z. et al. Molecular cloning and disease association of hepatitis G virus: A transfusion-transmissible agent. // Science. -1996. Vol. 271.-P. 505-508.
103. Lo lacono O., Garcia-Monzon C., Almasio P. et al. Soluble adhesion molecules correlate with liver inflammation and fibrosis in chronic hepatitis C treated with interferon-alpha. // Aliment. Pharmacol. Ther. 1998. - Vol. 12. - № 11.-P. 1091-1099.
104. Lund F.E., Cockayne D.A., Randall T.D. et al. CD38: a new paradigm in lymphocyte activation and sigmal trunsduction. // Immunol. Rev. 1998. - Vol. 161.-P. 79-93.
105. Malavasi F., Funaro A., Rogerro S. et al. Human CD38: a glycoprotein in search of a function. // Immunol. Today. 1994. - Vol. 15. - P. 95-97.
106. Mallone R., Ferrua S.f Morra M. et al. Characterization of a CD38-like 78-kilodalton soluble protein released from B cell lines derived from patients with X-linked agammaglobulinemia. // J. Clin. Invest. 1998. - Vol. 101. - № 12. - P. 2821-2830.
107. Marks M.S., Cresswell P. Invariant chain associates with HLA class II antigens via its extracytoplasmic region. // J. Immunol. 1986. - Vol. 136. - № 7. - P. 2519-2525.
108. Martin S., Rieckmann P. et al. Circulating forms of ICAM-3 (clCAM-3). Elevated levels in autoimmune diseases and lack of association with clCAM-1. // J. Immunol. 1995. - Vol. 154. - №4.- P. 1951-1955.
109. Mastroianni C.M., Lichtner M. et al. Changes in circulating levels of soluble cell adhesion molecules following highly active antiretroviral treatment of HIV-1-infected patients. // Clin. Immunol. 2000. - Vol. 95. - № 3. - P. 212-217.
110. McDonald J.C., Adamashvili I., Hayes J.M. Soluble HLA class II concentrations in normal individuals and transplant recipients. Comparison with soluble HLA class I concentrations. // Transplantation. --1994. Vol. 58. - № 11. -P. 1268-1272.
111. McDonald J.C., Gelder F.B., Aultman D.F. et al. HLA in human serum -quantitation of class I by enzyme immunoassay. // Transplantation. 1992. -Vol. 53. № 2. - P. 445-9.
112. Mehta K., Malavasi F. Human CD38 and related molecules. Basel: Karger. -2000.-P. 99-116.
113. Migliaresi S., Bresciani A., Ambrosone L. et al. Increased serum concentrations of soluble HLA- class I antigens in hepatitis C virus related mixed cryoglobulinaemia. //Ann. Rheum. Dis. 2000. - Vol. 59. - № 1. - P. 20-25.
114. Minguela A., Torho A., Marhn L. et al. Implication of soluble and membrane HLA class I and serum IL-10 in liver graft acceptance. //. Hum. Immunol. 1999. - Vol. 60. - № 6. - P.500-509.
115. Nakanishi K., Kobayashi T., Komatsu Y. Et al. Synchronous decline of serum-soluble HLA class I antigen and beta-cell function in insulin-dependent diabetes mellitus. // Clin. Immunol. Immunopathol. 1997. - Vol. 85. - № 3. - P. 246-252.
116. Nakata B., Chung K.H., Kato Y. Serum soluble interleukin-2 receptor level as a prognostic indicator in gastric cancer. // Br. J. Cancer. 1998. - Vol. 77. - № 11. -P. 1820-1824.
117. Nano R., Capelli E., Facoetti A., Gerzeli G. Evaluation of serum levels of cytokines and intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) in astrocytic tumours. // Cell. Mol. Biol. (Noisy-le-grand). 2003. - Vol. 49. - № 4. - P. 525-528.
118. Nocito M., Montalban C., Gonzalez-Porque P. Et al. Increased soluble serum HLA class I antigens in patients with lymphoma. // Hum. Immunol. 1997. - Vol. 58.-№2.-P. 106-111.136.
119. Nordoy I., Aukrust P., Muller F., Froland S.S. Abnormal levels of circulating adhesion molecules in HIV-1 infection with characteristic alterations in opportunistic infections. // Clin. Immunol. Immunopathol. 1996. - Vol. 81. - № 1.-P. 16-21.
120. Okuyama M.f Yamaguchi S., Nozari N. et al. Serum levels of soluble forms of Fas molecule in patients with congestive heart failure. // Amer. J. Cardiol. -1997. Vol. 79. - № 12. - P. 1698-1701.
121. Orditura M., De Vita F., Roscigno A. et al. Soluble interleukin-2 receptor and soluble CD8 antigen levels in serum from patients with solid tumors. // Int. J. Mol. Med. 1998. - Vol. 2. - № 1. - P. 75-79.
122. Ott V., Seidl C„ Westhoff U. et al. Soluble H LA class I and class II antigens in patients with multiple sclerosis. // Tissue Antigens. 1998. - Vol. 51. - № 3. - P. 301-304.
123. Papoff G., Cascino I., Eramo A. et al. An terminal domain shared by Fas/Apo-1 (CD95) soluble variant prevents cell death in vitro. // The Journal of Immunology. 1996. - Vol. 25. - P. 4625-4630.
124. Park C.W., Song H.C., Shin Y.S. et al. Urinary soluble H LA class I antigen in patients with minimal change disease: a predictor of steroid response. // Nephron. 1998. - Vol. 79. - № 1. - P. 44-49.
125. Park C.W., Yun S.N., Yang C.W. et al. Serum and urine soluble H LA class I antigen concentrations are increased in patients with hemorrhagic fever with renal syndrome. // Korean J. Intern. Med. 1997. - Vol. 12. - № 1. - P. 52-57.
126. Peter M.E., Krammer P.H. Mechanisms of CD95 (APO-1/Fas)-mediated apoptosis. // Current Opinion in Immunology. 1998. - Vol. 10. - P. 545-551.
127. Piazzolla G., Tortorella C., Fiore G. et al. Immunoresponsiveness in chronic hepatitis patients: correlation between tissue and serum findings. // Immunopharmacol. Immunotoxicol. 1998. - Vol. 20. - № 3. - P. 337-354.
128. Pickl W.F., Majdic O., Fae I. et al. The soluble pool of beta 2-microglobulin free HLA class I alpha-chains. Qualitative and quantitative characterization. // J. Immunol. 1993.-Vol. 151. - № 5. - P. 2613-2622.
129. Pizzolo G., Vinante F., Morosato L. et al. High serum level of the soluble form of CD30 molecule in the early phase of HIV-1 infection as an independent predictor of progression to AIDS. // AIDS. 1994. - Vol. 8. - № 6. - P. 741-745.
130. Pizzolo G., Vinante F., Nadali G. et al. High serum level of soluble CD30 in acute primary HIV-1 infection. // Clin. Exp. Immunol. 1997. - Vol. 108. - № 2. -P. 251-253.
131. Plaeger S., Bass H.Z., Nishanian P. et al. The prognostic significance in HIV infection of immune activation represented by cells surfase antigen and plasma activation marker changes. // Clin. Immunol. 1999. - Vol. 90. - № 2. - P. 238246.
132. Ptitsyna Yu.S., Bornyakova I.A., Baryshnikov A.Yu. et al. A soluble form of Fas/Apo-1 (CD95) antigen in the serum of viral hepatitis patients. // Int. J. Immunorehabilitetion. 1999. - № 14. - P. 110-111.
133. Puppo F., Brenci S., Lanza L. et al. Increased level of serum HLA class I antigens in HIV infection. Correlation with disease progression. // Hum. Immunol.- 1994. Vol. 40. - № 4. - P. 259-266.
134. Puppo F., Ghio M., Contini P. et al. Immunoregulatory role of soluble HLA molecules: a new skin for an old subject? // Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz).- 1998. Vol. 46. - № 3. - P. 157-160.
135. Puppo F., Picciotto A., Brenci S. et al. Behavior of soluble HLA class I antigensin patients with chronic hepatitis C during interferon therapy: an early predictormarker of response? // J. Clin. Immunol. 1995. - Vol. 15. - № 4. - P. 179-184.
136. Raposo G., Nijman H.W., Stoorvogel W. et al. B lymphocytes secrete antigen-presenting vesicles. // J. Exp. Med. 1996. - Vol. 183. - № 3. - P. 1161 -1172.
137. Rebmann V., Dornmair K., Grosse-Wilde H. Biochemical analysis of plasma-soluble invariant chains and their complex formation with soluble HLA-DR. // Tissue Antigens. 1997. - Vol. 49. - № 5. - P. 438-442.
138. Rey D., Vidinic-Moularde J., Meyer P. et al. High prevalence of GB virus C/hepatitis G virus RNA and antibodies in patients infected with humanimmunodeficiency virus type 1. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2000. -Vol. 19.-№ 9.-P. 721-724.
139. Rhynes V.K., McDonald J.C., Gelder F.B. et. al. Soluble HLA class I in the serum of transplant recipients. // Ann. Surg. 1993. - Vol. 217. - № 5. - P. 485489.
140. Riizzardi G.P., Marriott J.B., Cookson S. et al. Tomour necrosis factor (TNF) and TNF-related molecules in HIV-1+ individuals: relationship with in vitro Th1/Th2-type response. // Clin. Exp. Immunol. 1998.- Vol. 114. - № 1. - P. 61-65.
141. Rokita E., Menzel E.J. Characteristics of CD14 shedding from human monocytes. Evidence for the competition of soluble CD14 (sCD14) with CD14 receptors for lipopolysaccharide (LPS) binding. // APMIS. 1997. - Vol. 105. -№ 7.-P. 510-518.
142. Rubin L.A., Nelson D.L. The soluble interleukin-2 receptor: biology, function, and clinical application. // Ann. Intern. Med. 1990. - Vol. 113. - № 8. - P 619627.
143. Sacco R., Leuci D., Tortorella C. et al. Transforming growth factor betal and soluble Fas serum levels in hepatocellular carcinoma. // Cytokine. 2000. - Vol. 12.-№ 6.-P. 811-814.
144. Sack U., Burkhardt U., Borte M. et al. Age-dependent levels of select immunological mediators in sera of healthy children. // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1998. - Vol. 5. - № 1. - P. 28-33.
145. Santoso S.f Kiefel V.t Volz H„ Mueller-Eckhardt C. Quantitation of soluble HLA class I antigen in human albumin and immunoglobulin preparations for intravenous use by solid-phase immunoassay. // Vox Sang. 1992. - Vol. - 62.- № 1. P. 29-33.
146. Savarino A., Pugliese A., Martini C. et al. Investigation of the potential role of membrane CD38 in protection against cell death induced by HIV-1. // J. Biol. Regul. Homeost. Agents. 1996. - Vol. 10. - № 1. - P. 13-18.
147. Sawayama Y., Hayashi J., Kawakaml Y. et al. Serum soluble interleukin-2 receptor levels before and during interferon treatment in patients with chronic hepatitis B virus infection. // Dig. Dis. Sci. 1999. - Vol. 44. - № 1. - P. 163-169.
148. Seekamp A., Mulligan M.S., Till G.O. et al. Role of beta 2 integrins and ICAM-1 in lung injury following ischemia-reperfusion of rat hind limbs.// Amer. J. Path.- 1993. Vol. 143. - № 2. - P. 464-472.
149. Seidl C., Lee J.S. Expression of alternatively spliced HLA class II transcripts in lymphoid and nonlymphoid tissues. // Immunogenetics. 1992. Vol. 35. - P. 385-390.
150. Seigneur M., Constans J.f Blann A. et al. Soluble adhesion molecules and endothelial cell damage in HIV infected patients. // Thromb. Haemost. 1997. -Vol. 77. - № 4. - P. 646-649.
151. Seth R., Raymond F.D., Makgoba M.W. Circulating ICAM-1 isoforms: diagnostic prospects for inflammatory and immune disorders. // Lancet. 1991.- Vol. 338. № 8759. - P. 83-84.
152. Shimaoka Y., Hidaka Y., Okumura M. et al. Serum concentrations of soluble Fas in patients with autoimmune thyroid diseases. // Thyroid. 1998. - Vol. 8. -№ 1. - P. 43-47.
153. Shimura T., Hagihara M., Yamamoto K. et al. Quantification of serum-soluble HLA class I antigens in patients with gastric cancer. // Hum. Immunol. 1994. -Vol. 40. - № 3. - P. 183-186.
154. Simpson K.J., Jones A.L., Forbes Howie A., Hayes P.C. Soluble adhesion molecules and interleukin-2 receptor concentrations in patients with autoimmune chronic hepatitis. // Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. 1995. - Vol. 7. - № 5. - P. 455-460.
155. Sipsas N.V., Sfikakis P.P., Touloumi G. et al. Elevated serum levels of soluble immune activation markers are associated with increased risk for death in HAART-naive HIV-1-infected patients. // AIDS Patient Care STDS. 2003. -Vol. 17.-№ 4.-P. 147-153.
156. Skubitz K.M., Khalil A. Campbell K.D. et al. CD50 (ICAM-3) is phosphorylated on tyrosine and is associated with tyrosyne kinase activity in human neutrophils. // J. Immunol. 1995. - Vol. 154. - P. 2888-2895.
157. Soriano V., Garcia-Samaniego J., Valencia E. et al. Impact of chronic liver disease due to hepatitis viruses as a cause of hospital admission and death in HIV-infected drug users. // Eur. J. Epidemiol. 1999. - Vol. 15. - P. 1-4.
158. Spaggiari G. M., Contini P., Dondero A. et al. Soluble HLA class I induces NK cell apoptosis upon the engagement of killer-activating HLA class I receptors through FasL-Fas interaction. // Blood. 2002. - Vol. 100. - № 12. - P. 40984107.
159. Staunton D.E., Marlin S.D., Stratowa C. et al. Primary structure of ICAM-1 demonstrates interaction between members of the immunoglobulin and integrin supergene families. // Cell. 1988. - Vol. 52. - № 6. - P. 925-933.
160. Stevenson F.K., George A.J., Walters M.T., Hamblin T.J. Analysis of soluble HLA class II antigenic material in patients with immunological diseases using monoclonal antibodies. // J. Immunol. Methods. 1986. - Vol. 86. - № 2. - P. 187-190.
161. Strieker K., Knipping E., Bohler T. et al. Anti-CD95 (APO-1/Fas) autoantibodies and T cell depletion in human immunodeficiency virus Type 1 (HlV-l)-infected children. // Cell. Death. Differ. 1998. - Vol. 5. - № 3. - P. 222230.
162. Suda T., Hashimoto H., Tanaka M. et al. Membrane .Fas ligand kills human peripheral blood T lymphocytes, and soluble Fas-ligand blocks the killing. // J. Exp. Med. 1997. - Vol. 186. - P. 2045-2050.
163. Thomas D.L., Shin J.W., Alter H.J. et al. Effect of human immunodeficiency virus on hepatitis C virus infection among injecting drug users. // J. Infect. Dis. -1996. Vol. 174. - P. 690-695.
164. Tillmann H.L., Heiken H., Knapik-Botor A. et al. Infection with GB virus C and reduced mortality among HIV-infected patients. // N. Engl. J. Med. 2001. - Vol. 345.-№10.-P. 715-724.
165. Tokano Y., Miyake S., Kayagaki N. et al. Soluble Fas in patients with systemic Lupus Erythematosus. // J. Clin. Immunol. 1996. - Vol. 16. - P. 261-265.
166. Toyoda M., Kakizaki S., Horiguchi N. et al. Role of serum soluble Fas/soluble Fas ligand and TNF-alpha on response to interferon-alpha therapy in chronic hepatitis C. // Liver. 2000. - Vol. 20. - № 4. - P. 305-311.
167. Toyozaki T., Hiroe M., Saito T. et al. Levels of soluble Fas in patients with myocarditis, heart failure of unknown origin, and in healthy volunteers. // Am. J. Cardiol. 1998. - Vol. 81. - № 6. - P. 798-800.
168. Tsuchiya N, Shiota M, Yamaguchi A, Ito K. Elevated serum level of soluble HLA class I antigens in patients with systemic lupus erythematosus. // Arthritis Rheum. 1996. Vol. 39 - № 5. P. 792-796.
169. Tsukamoto S., Ishikawa S., Yamauchi A., Saitou S. Serum soluble interleukin-2 receptor levels in patients with renal cell carcinoma: a comparison of values before and after surgery. // Hinyokika Kiyo. 2000. - Vol. 46. - № 10. - P. 695699.
170. Turowski G., Gociski I., Gieracka D. et al. Soluble class HLA antigens in serum of patients with brain tumors. // Pol. Merkuriusz. Lek. 1996. - Vol. 1. - № 6. -P. 410-411.
171. Ueno T., Toi M., Tominaga T. et al. Circulating soluble Fas concentration in breast cancer patients. // Clin. Cancer Res. 1999. - Vol. 5. - № 11. - P. 35293533.
172. Verbruggen L.A., Dumarey N., Van de Velde H. et al. Soluble HLA-DR antigen levels in serum correlate with rheumatoid arthritis disease activity and the presence of disease-associated epitopes. // Tissue Antigens. 2000. - Vol. -56. - № 5. - P. 436-440.
173. Vives M., Soldevila G., Alcalde L. et a!. Adhesion molecules in human islet beta-cells. De novo induction of ICAM-1 but not LFA-3. // Diabetes. 1991. -Vol. 40. - № 11. - P. 1382-1390.
174. Volpes R., Van den Oord J.J., Desmet V.J. Vascular adhesion molecules in acute and chronic liver inflammation. // Hepatology. 1992. - Vol. 15. - P. 269275.
175. Vuoristo M.S., Laine S., Huhtala H. et al. Serum adhesion molecules and interleukin-2 receptor as markers of tumour load and prognosis in advanced cutaneous melanoma. // Eur. J. Cancer. 2001. - Vol.'37. - № 13. - P. 16291634.
176. Vyasmina E.s., Ptytsina Yu.S., Matveeva E.M. et al. Soluble form of HLA class I in HIV-infected persons and patients with syphilis and/or hepatitis C // Rus. J. HIV/AIDS and related problems. -2001. Vol. 5. - № 1.r- P. 136-137.
177. Wakao D., Murohashi I., Tominaga K. et al. Serum thymidine kinase and soluble interleukin-2 receptor predict recurrence of malignant lymphoma. // Ann. Hematol. 2002. - Vol. 81. - № 3. - P. 140-146.
178. Walczak H., Krammer P. The CD95 (APO-1/Fas) and the TRAIL (APO-2L) Apoptosis Systems. // Experimental Cell Research. 2000. - Vol. 256. - P. 5866.
179. Wen C.P., Fan Y.S., Li X.M. Effect of langchuangding on serum soluble interleukin-2 receptor and neopterin level in patients of systemic lupus erythematosus. //Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 2001. - Vol. 21. - № 5. -P. 339-341.
180. Weyand C.M., Jendro M., Goronzy J.J. Soluble HLA-D.R molecules in patienrs with HLA class II versus class I associated disorders. // Autoimmunity. 1991. -Vol. 8. - P. 85-93.
181. Wolf R.E., Adamashvili I.M., Gelder F.B. et al. Soluble HLA-I in rheumatic diseases. // Hum. Immunol. 1998. - Vol. 59. - № 10. - P. 644-649.
182. Woska J.R., Morelock M.M. Durham D.J. et al. Molecular comparison of soluble intercellular adhesion molecule (slCAM)-1 and slCAM-3 binding to Lymphocyte Function-associated Antigen-1. // J. Biol. Chem. 1998. - Vol. 273. - № 8. - P. 4725-4733.
183. Xiang J., Wunschmann S., Diekema D.J. et al. Effect of coinfection with GB virus C on survival among patients with HIV infection. // N. Engl. J. Med. 2001. -Vol. 345. - № 10. - P. 707-714.
184. Yang S.S., Tsai G„ Wu C.H., Chen D.S. Circulating soluble intercellular adhesion molecule-1 in type C viral hepatitis. II Hepatogastroenterology. 1996. -Vol.43. -№ 9.-P. 575-581.
185. Yao H.P., Xia D.J., Zhang L.H., Liu K.Z. Serum levels of sFas, slCAM-1, IL-18 in patients with chronic hepatitis C and their clinical significance. // Zhejiang Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 2002. - Vol. 31. - № 1. - P. 2-5.
186. Zavazava N. Soluble HLA class I molecules: biological significance and clinical implications. // Mol. Med. Today. 1998. - Vol. 4. - № 3. - P. 116-121.
187. Zavazava N. Kronke H. Soluble HLA class I molecules induce apoptosis in alloreactive cytotoxic T lymphocytes. // Nature Med. 1996. - Vol. 2. - P. 10051007.