Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему:Процессы перекисного окисления липидов и простагландины серии Е в злокачественных и доброкачественных опухолях яичников

РГ6 - 8

ОД ОНТ 1996

На правах рукописи

КЕРИМОВА Ггоняш Ибад-кызы

ПРОЦЕССЫ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И ПРОСТАГЛАНДИНЫ СЕРИИ Е В ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ И ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЯХ ЯИЧНИКОВ

14.00.14-онкология

АВТОРЕФЕРАГ диссертации на соискание учено» степени кандидата медицинских наук

Москва-1996

Работа выполнена в Азербайджанском медицинском университете им.Н.Нариманова и в Онкологическом научном центре им. H.H. Блохина Российской Академии медицинских наук.

Научные руководители:

доктор медннннскпх паук, профессор А.Т.Амирасланов доктор медицинских наук, профессор Н.Е.Кушлннскнп

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Л.Н.Горбачева доктор медицинских наук К.И.Жордашш

Ведущее учреждение: Московский научно-исследовательский онкологический институт им.П.А.Герцена МЗМП России.

¡С/ у/

Защита состоится " ' 7 " л'_1996 г. в 14.00 часов на

заседании специализированного совета К.0(М.17.01. при Онкологическом Научном Центре Российской АМН (115478, Москва, Каширское шоссе, 24).

Автореферат разослан "<Л0 " ___]99в г.

Ученый секретарь специализированного совета доктор медицинских паук, профессор В.С.Турусов

ВВЕДЕН И Е

Актуальность проблемы. Рак яичников является одним из распространенных онкологических заболеваний репродуктивной системы, составляя свыше 20% всех новообразований женской половой сферы (В.М. Мера-бишвили и соавг., 1992; К.И.Жордания, 1995; O.K. Долматова. 1995; Barber H.R.K., 1993).

Это заболевание объединяет группу различных морфологических вариантов опухолей, которые встречаются преимущественно у женщин молодого и среднего возраста. Достигнутые за последние десятилетия успехи в-совершенствовании методов диагностики и терапии рака яичников, к сожалению, не улучшили отдаленных результатов лечения (B.C. Свинциц-кий. 1992; Л.Г. Блюменберг, 1995).

Большинство больных поступают в лечебные учреждения лишь в 3 и 4 стадиях заболевания. Поданным H.H. Трапезникова и соавт. (1995), из всех впервые заболевших раком яичников в 4 стадии в 1990 году выявлено 27,7%, в 1494 i оду-30%. В связи с этим результаты лечения весьма неутешительны - и течение 5 лег выживает менее 20% больных. В то же время у больных раком яичников 1-2 стадии пятилетняя выживаемость достигает 60-70% (Aisaka и соавг., 1995).

Среди всех опкогннскологичсских заболеваний рак яичников имеет наихудший прогноз и является основной-причиной летальности (И.Д. Нечаева. 1987). Позднее распознавание, скрытое течение заболевания, отсутствие патогпомоничпых для ранних стадий симптомов осложняет раннюю диагностику и ухудшает результаты лечения.

В связи с этим особое значение приобретают исследования биохимических процессов у больных раком яичников, выявление и коррекция которых могут определить принципиально новые подходы к лечению этого заболевания.

В последние годы появились работы (Е.Б.Бурлакова и Н.П.Пальмина, 1982; Gomdzanskaya.E.. Kushlinsky N. el al.. 1995; Mikhaevitch O. et al.. 1995), которые указывают на нарушение регуляции процессов псрекисного окис-

ления липидов при злокачественном росте. Одной из причин интенсификации перекисного окисления липидов при развитии злокачественною процесса может быть дефицит антиоксидантов и, в частности, а-токоферола и ретинола как наиболее мощных биоантиоксидантов, регулирующих перс-кисное окисление липидов. Установлено, что активация процесса перекисного окисления липидов нарушает проницаемость клеточной мембраны, что приводит в конечном итоге к гибели клетки. Взаимодействие активных форм кислорода с клеточными соединениями, главным образом, с полиненасыщенными жирными кислотами липидного слоя мембран, нарушает структуру и функциональное состояние клеток органов и тканей, снижая резистентность организма к опухолевому росту и оказывая неблагоприятное влияние на результаты лечения. Непременными структурными компонентами клеточных мембран являются линолевая и арахидоновая кислоты, служащие исходным субстратом для синтеза "тканевых гормонов" - проста-гландинов, тесно связанных с процессами роста, дпфферепцироикп н пролиферации клеток (51ги^Ге11о\у О., 1984; Тка А. е1 а1., 1989). Нарушение свободными радикалами слоя мембран, затрагивающее обмен незаменимых жирных кислот, может оказать влияние па процесс биосинтеза прост аглан-динов, что в свою очередь приводит к расстройству регуляции и дифферен-цировки клетки, способствующих развитию опухолевой трансформации.

В связи с этим, анализ показателей перекисного окисления липидов с одновременным определением уровня просгагландипов серии Б в злокачественных и доброкачественных опухолях яичников и сравнение них данных с результатами, полученными при исследовании нормальных яичников позволит выяснить их .связь с особенностями клинического течения рака яичников и прогнозом заболевания.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ - проведение сравнительною анализа интенсивности процесса перекисного окисления липидов в злокачественных и доброкачественных опухолях яичников, определение их связи с содержанием простагландннов серии Е и оценка их связи с основными клипи-ко-морфологическими характеристиками заболевания.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Определить интенсивность процесса псрскисного окисления чипидов по уровню малопового диальдегида, образованного ферментативным и не-фсрмснгатнпным путем, а также изучить активность антиоксидантных ферментов (супсроксиддисмутазы и катализы) в злокачественных опухолях яичников в зависимости от гистологического строения, степени мор-фолщ ичсской дифферепцировки и клинической стадии заболевания.

2. Определи п. уровень основных биоаптиоксидантов а-токоферола и ретинола в злокачественных и доброкачественных опухолях яичников.

3. Изучить уровень простагландинов серии Е в опухолях яичников с учетом основных клинико-морфологическнх показателей.

4. Провести сравнительный анализ показателей нерекиспого окисления ли-пидов и уровня простагландинов серии Е в злокачественных и доброкачественных опухолях яичников, а также в нормальной ткани яичников.

5. Изучии. активность процесса нерекиспого окисления липидов и уровня простагландинов серии Е в асцнтичсской жидкости больных раком яичников.

6. Сопоставить и определить зависимость интенсивности перекисного окисления липидов от уровня биоаптиоксидантов и содержания простагландинов серии Е в злокачественных и доброкачественных опухолях яичников.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые проведено сравнительное исследование интенсивности процесса псрскисного окисления липидов и уровня простагландинов серии Е у больных опухолями яичников. Установлено снижение аш поксидантной защитной системы как в злокачественных, та к и в доброкачественных опухолях. Обнаружена зависимость исследованных показателен от степени дифферепцировки опухолей. Показано, что активизация процесса перекисного окисления липидов сопровождается повышением уровня просгагландинов серии Е.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ. Полученные данные о снижении активности антиокендантпой системы в злокачественных опухолях яичников позволяют рекомендовать включение антноксидаптов в схему комплексного лечения больных раком яичников. Предполагается, чго нормализация процессов перекисного окисления липидов может способствовать понижению уровня простагландинов серии Е, одной из функции коюрых является участие в регуляции опухолевого роста.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Диссертация апробирована па межотделенческой конференции Онкологического научною центра им. H.H. Бло-хина 25 июня 1996 г., а также апробирована на межотдслснческой конференции Азербайджанского Медицинского Университета им. Н. Нариманова 3 сентября 1996 г.

ПУБЛИКАЦИИ. По материалам диссертации опубликованы 2 научные работы.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ РАБОТЫ. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментального раздела (включая описание материалов и методов), результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и указателя литературы. Общий обьем диссертации 115 листов машинописного текста. Указатель литературы содержит 55 работ отечественных и 125 работ зарубежных авторов. Дпсссрищия иллюстрирована 20 таблицами и 5 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Краткая харакгернстика больных н материала. В основу исследования положено Изучение состояния перекисного окисления липидов и уровня про-стагландинов серии Е в опухолях 96 больных злокачественными и доброкачественными новообразованиями яичников, которые получали лечение в Онкологическом научном центре РАМН за период 1993-1995 п.

Из 43 больных первичным раком яичников нами выделено 2 no;u рун-пы: 1 подгруппа - больные раком яичников без асцита, в 1-2 стадиях заболевания, в возрасте от 40 - 60 лет; 2 подгруппа - больные раком яичников с асцитом, в 3-4 стадиях заболевания, в возрасте о г 40 до 76 лет.

В ¡руппу с доброкачественными опухолями яичников были включены 20 нацистов в возрасте от 22 до 73 лег.

Кроме того, проведено определение состояния перекисного окисления лпппдов и уровня простагландинов серии Е в асцигической жидкости, полученной от 21 больной раком яичников в 3-4 стадиях заболевания.

Также изучалась нормальная ткань яичииков у 12 здоровых женщин, которые погибли ненасильственной смертью (от несчастного случая).

Методы исследования, которые использовались в настоящей работе представлены в таблице I.

Таблица I

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ, ИСПОЛЬЗОВАННЫЕ В НАСТОЯЩЕЙ

РАБОТЕ

Иссл еду с м ы е п о к а зател и Материал для исследования Применяемая методика

Малоиовый днальдегид Ткань яичника, опухоль, асцитн-ческая жидкость Метод Ychiama М. (1978); основан на образовании окрашенного триметинового комплекса в результате реакции МДА с тно-барбитуровой кислотой

Супероксиддисмут аза Ткань яичника, опухоль, асцити-чсская жидкост ь Метод Fridovich J. (1971); для генерирования супероксидного радикала использовали фермен-татапвную систему ксанти-ксантиноксидаза

Каталаза Ткань яичника, опухоль, асцити-ческая жидкость Метод Beers R. and Siser J. Активность каталазы определяли по уменьшению концентрации перекиси водорода

(i-Токоферол Ткань яичника, опухоль, аецнти-ческая жидкость Метод de Lumen В.О., Lubin В., Chinetal D. (1982); основан на флуорпметричсском определении а-токоферола в гексановой фазе после омыления гомогена-та

Ретинол Ткань яичника, опухоль, асцити-ческая жидкость Аналогичен методу определения и-токоферола

Просгагландины серии Е Ткань яичника, опухоль, асцити-ческая жидкость Радиоиммунологический метод Karmali R. и соавт. (1983)

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОК И УРОВЕНЬ ПРОСТА-ГЛАНДИНОВ СЕРИИ Е В ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ И ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЯХ ЯИЧНИКОВ

Перекнсное окисление липидов было изучено в 43 злокачественных опухолях: рак яичников с асцигом - 32 и рак яичников без асцита - 11; в ас-цитической жидкости у 21 больной раком яичников, а также в 20 доброкачественных опухолях яичников и 12 нормальных яичниках.

1.1. СОДЕРЖАНИЕ МАЛОНОВОГО ДИАЛЬДЕГИДА, ИНИЦИИРОВАННОГО ФЕРМЕНТАТИВНЫМ И НЕФЕРМЕНТАТИВНЫМ ПУТЕМ

Активность процесса перекисного окисления липидов оценивали по содержанию малонового диальдсгида, образованною ферментаишнмм и неферментативным путем. Состояние системы аптиоксидаптной защиты клетки определяли по активности ферментов супсрокси;(дпсмутазы и к:па-лазы, а также по уровню природных биоантиоксидантов «-токоферола и ретинола, осуществляющих неферментативную регуляцию процесса.

В табл.2 представлены средние уровни аскорбатзавнсимою малонового диальдсгида (МДА-А) с учетом клинической стадии заболевания и морфологической дифференцировки опухоли. При исследовании содержания аскорбатзависимового малонового диальдегида в злокачественных и доброкачественных опухолях яичников обнаружено его повышение в 1.5 раза по сравнению с нормальными яичниками.

В доброкачественных новообразованиях яичников содержание МДА-А было выше нормы па 35%, по ниже, чем в злокачественных опухолях. Следует также отметить тенденцию к повышению МДА-А в зависимости от стадии заболевания и степени дифференцировки опухоли. Наиболее высокие показатели наблюдались при 4 стадии заболевания и п нпжо-дифференцированных аденокарциномах яичников.

ч

Данная закономерность в равной степени относится и к содержанию малоповою диальдегида инициированного ферментативным путем (МДА-F). Проведенные ранее исследования активности перекисного окисления липндов указывали па низкое содержание перекисей и нормальную скорость процесса пероксидации в быстрорастущих экспериментальных опухолях (В.'З.Ланкин, 1985; Chcesman R. et al., 1984). Данные настоящего исследования предполагают высокую скорость процессов перекисного окисления липндов в злокачественных опухолях яичников, что выражается в высоком содержании МДА, подавлении активности ферментов ан-тиоксидангной защиты и согласуется с данными других авторов, указывающих на стимуляцию процессов перекисного окисления липндов в злокачественных новообразованиях других локализаций (Т.С.Морозкина, 1989; Micliacvitcli О. ct al., 1995; Capel 1.. 1984; Hietanen E. et al., 1987).

1.2. АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ АНГИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ

Интенсификация процесса перекисного окисления липидов может зависеть от нарушений в механизме пнгиоксидантной защиты, которые заключаются в снижение активности ферментов - супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы. В связи с этим большой интерес представляет изучение активности СОД и катализы в нормальном яичнике и в опухо.чях яичников с учетом стадии заболевания и степени морфологической дифференцировки опухоли. Активность СОД и каталазы в злокачественных опухолях яичников была достоверно ниже, чем в доброкачественных опухолях и в нормальной ткани яичников.

Из данных, представленных в табл.3, в яичниках здоровых женщин активность СОД составляла 559.5141,4 м'кг/г ткани, активность каталазы -достигала 1,02±0.18 Ед/г ткани, тогда как в. злокачественных опухолях яичников СОД и каталаза были достоверно ниже и составляли: СОД -251.6112.05 мкг/пкани, что на 56% ниже нормы; каталаза - 0,8810,7 Ед/г ткани, что на 24"-» ниже нормы.

Особых изменений активности каталазы в злокачественных опухолях яичника с асцит ом (0.8910,09 Ед/г ткани) и без асцита (0,8510,12 Ед/г тка-

ни) нс отмечалось. Однако активность СОД в I. подгруппе была достоверно (Р<0.05) ниже, чем в опухолях 2 подгруппы. Эго соответствует данным литературы о снижении активности СОД, связанной со степенью злокачественности опухоли (ОЬеНеу I.., ВиеПпсг С., 1979).

Таблица 2

СОДЕРЖАНИЕ МДА-А И МДАТ В ОПУХОЛЯХ ЯИЧНИКОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ

Клипико-морфологические Число на- Показа!ели перекисного окисления

показатели блюдений лнпилов

МДА-Л (мкмоль/г ткани) МДА-Г (мкмоль/г гкани)

Рак яичников 43 0.28+0.013 0.7810.040

а) с асцитом 32 0.30±0.016 0.8210.049

б) без асци га 11 0.2710.020 0.7410.070

Клинические стадии

1 9 0.2210.040 0.6910.090

2 4 0.2010.020 0.7110.009

3 15 0.2810.050 0.8210.061

4 15 0.3510.023 0.8510.053

Морфологическая дифферен-

цировка опухоли в. 6 0.2310.050 0.7310.130

О; 11 0.2510.020 0.7810.070

Сз 10 0.3010.025 0.8810.094

Гистологическая структура

опухоли Аденокарцинома а)серозная 19 0.2610.03 0.79 010

б) серозно-сосочковая 10 0.2810.01 0.7510.050

в)эндометриоидная 8 0.28+0.06 0.7610.091

Прочие злокачественные 6 0.3010.05 0.7410.02

опухоли яичников

Размеры опухоли £10 см 12 0.2510.02 0.79+0.080

>10 см 20 0.2610.02 0.7910.059

Доброкачественные опухоли 20 0.2410.03 0.7010.05

яичников

Контрольная группа (яичники здоровых женщин) 12 0.18+0.02 0.66+0.01

Р Р=0.05 Р>0.05

При сравнительном анализе показателей СОД в злокачественных опухолях и нормальной ткани яичников были обнаружены значительные различия. Так, СОД в нормальных яичниках у практически здоровых лиц составила 559,5±41,4 мкг/г ткани, тогда как в злокачественных опухолях ее активность была снижена более, чем в 2 раза и равнялась 251,6±12,05 мкг/г ткани. При этом в 1 подгруппе (рак яичников с асцитом) снижение актив-нос! и СОД было на 59%, а по 2 подгруппе (рак яичников без асцита) - на 44% по сравнению с нормальными величинами. В доброкачественных новообразованиях яичников активность СОД составила 349,9±12,2 мкг/г ткани и была ниже, чем в норме, но выше, чем в злокачественных опухолях.

При изучении показателей перекненого окисления липйдов в зависимости от клинической стадии заболевания выявлено следующее. При про-грессированни заболевания, активность СОД в карциномах яичников по сравнению с яичниками здоровых лиц, снижалась в 2 раза и в 1 стадии она составляла 266,6±30,03 мкг/г ткани, тогда как в 4 стадии достигала 182,7±14.6 мкг/г ткани. При прогрессировании заболевания, отмечалось также снижение уровня активности каталаэы, который при 1 стадии составлял 0,94±0,21 Ед/г ткани, а в 4 стадии он достигал 0,62±0,14 Ед/г гкани.

При анализе изучаемых показателей в опухолях с учетом степени морфологической дифференцировки также обнаружены сдвиги, которые заключались в снижении активности каталазы. В то же время достоверных отличий в активности фермента между опухолями различной степени дифференцировки не наблюдалось. Гак, активность СОД в высокодифференци-рованпых аденокарциномах (п=6) в среднем составила 233,1 ±36.5 мкг/г ткани и колебалась в пределах от 133,7 до 308,8 мкг/г ткани; в умеренно-дифференцированных (п=11) - в среднем составила 228,3±20,4 мкг/г ткани (пределы колебания 162,1-294,0 мкг/г ткани), а в низкодиффереициро-ванных (п=10) - в среднем составила 180.05±23,1 мкг/г ткани и колебалась в пределах от 146.5 до 294.0 мкг/г ткани.

Таким образом, показатели активности СОД во всех стадиях дифференцировки ракл яичников оказались в 2 раза ниже по сравнению с нормой (55(>.5±41,4 мкг/г т кани) и прак тически не изменялись.

Активность катализы в высокодифференцированных аденокарципо-мах (п=6) в среднем составила 0,79±0,28 Ед/г ткани, со значительным колебанием активности фермента (0,413-1,1 Ед/г ткани). В группе (п=11) умерен-нодифферснцировапных аденокарцином яичников активность каталазы колебалась от 0,413 до 1,8 Ед/г ткани и в среднем составила 0,60±0,14 Ед/г ткани. При анализе полученных результатов в низкодиффсрснцировапных аденокарциномах (п=10) активность каталазы в среднем равнялась о,52±0.12 Ед/г ткани. Таким образом, отмечено снижение активности каталазы по мере снижения степени дифференцировки злокачественных новообразований яичников.

При изучении показателей активности СОД между доброкачественными опухолями и контрольной группой, имеются достоверные различия на 43% (349,8±12,2 мкг/г ткани; 559,5±41,4 мкг/г ткани, соответственно). Активность каталазы в доброкачественных опухолях в среднем составила 1,02±0,12 Ед/г ткани и не отличалась от активности фермента в яичниках здоровых лиц - 1,02±0,18 Ед/г ткани (табл.3).

При анализе полученных данных в зависимости от I пеголо! ичсскои структуры опухоли достоверных различий в показа!елях акшвносги СОД и каталазы не выявлено.

Таким образом, выявленные в настоящем исследовании достоверно низкие уровни активности СОД и каталазы у больных раком яичников, подтверждаю!ся экспериментальными данными других авторов (В.С.Шапот и соавт., 1988), которые также обнаружили снижение акшвнопп вышеуказанных ферментов при опухолях, что указывает на угнетение сишсза СОД и каталазы в опухолях. В табл.3 отмечена тенденция к снижению акшвносги СОД и каталазы в зависимости ог стадии заболевания и степени диф-ференцировки рака яичников. Наибольшая их активность отмечена при I стадии заболевания и в высоколифферснцнрованных аденокарциномах яичников.

ИНТЕНСИВНОСТЬ ПРОЦЕССА ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИ-ПИДОВ В ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ И ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЯХ ЯИЧНИКОВ С УЧЕТОМ КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ

Клииико-морфоло! ичсскис Число на- Показатели иерекисного окисле-

показатели блюдении ния липидов

СОД Кагалаза

(мкг/г ткани) (Ед/г ткани)

Рак яичников 43 251.60+12.05 0.88+0.072

а) с асци юм 32 231.60+13.40 0.89+0.089

б) без асцита II 310.07116.80 0.85+0.120

Клинические стадии -

1 9 266.60+30.03 0.94+0.210

2 4 297.60± 17.70 0.89+0.240

3 15 247.90+9.40 0.6510.085

4 15 182.80114.60 0.6210.142

Морфоло! пчсскаи дифферен-

иировка опухоли О: 6 233.10+36.5 0.79+0.28

с> II 228.30+20.4 0.6010.14

С, 10 180.05+23.1 0.52+0.12

Гистологическая сгр>к!ура

опухоли Адснокарцниома а)серозная 19 243.1+24.5 0.72+0.15

б) серозио-сосочкопая 10 232.2±27.0 0.75+0.21

в)эпдомефиоидная 8 249.0129.3 0.62+0.13

Прочие злокачественные 6 247.2+32.4 0.67+0.18

опухоли яичников

Размеры опухоли 5 К) см 12 285.6125.4 0.7410.130

>10 см 20 250.0+15.8 0.8510.103

Доброкачсс 1 пенные опухоли 20 349.9112.2 1.02+0.12

яичников

Контрольная 1 руин» 12 559.5+41.4. 1.0210.18

(яичники здоровых женщин)

Р Р<0.01 Р>0.05

1.3. СОДЕРЖАНИЕ а-ТОКОФЕРОЛЛ И РЕТИНОЛА В ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ И ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЯХ ЯИЧНИКОВ

Интенсивность процесса перекнсного окисления линидов в равной мере зависит ог уровня ангиоксидангов. Как известно, важное мепо в регуляции перекисного окисления линидов, осуществляет система неферментативной антноксидантной защиты, причем способность непосредст венно реагировать с псрскисными радикалами липидов обладает только природный антноксидант. В связи с этим представляет интерес изучение содержания а-токоферола и ретинола в опухолях яичников. Анализ в настоящем исследовании уровней «-токоферола и ретинола в опухолях яичников и в нормальной их ткапи подтверждается данными ряда исследователей, котрмс выявили низкий уровень ангиоксидангов в опухолях по сравнению с нормальными тканями (Т.С.Морозкина. 1489). Нами выявлены достоверно высокие уровни «-токоферола и ретинола в контрольной группе но сравнению с больными раком яичников (1абл.4).

Из данных, представленных в табл.4, следуе!. что содержание а-токоферола и ретинола в яичниках здоровых женщин выше, чем в опухолях. Так, содержание а-токоферола в злокачественных опухолях составляло 12,01 ±0,728 мкмоль/г ткани, что па 52"/» ниже нормы, а в доброкачественных опухолях - 14,24± 1,04 мкмоль/г ткапи, что на 43"» ниже нормы. В яичниках здоровых женщин содержание а-токоферола было равно 24,9±1.0 мкмоль/г ткани.

Уровень ретинола в яичниках здоровых женщин составил 21,9±0,09 мкмоль/г ткани и был достоверно выше, чем в злокачественных опухолях яичников (7,74±0,26 мкмоль/г ткани). В тоже время, а в доброкачественных опухолях яичников содержание ретинола было незначительно выше по сравнению со злокачественными новообразованиями и достигало 9.08±0.6 мкмоль/г ткани.

При изучении содержания показателей «-токоферола и репшола с учетом клинической стадии рака яичников обнаружено следующее. При

прш рсссированпн опухолсвот процесса, активность «-токоферола и ретинола снижалась: при 1 стадии уровень а-токоферола составлял 13.5310,96 мкмо:п./| ткани, а репшола - 9.18±0,55 мкмоль/г гкани. В 4 стадии активность «-токоферола снижалась до 11,07±0,948 мкмоль/г ткани, а уровень ретинола доходил до 7,54+0,42 мкмоль/г ткани.

При анализе исследуем!,ix показателей в опухолях яичников с учетом степени их морфологической дифференцировки были обнаружены следующие закономерности. Наиболее высокий уровень а-токоферола выявлен в высокоднффсрснцпрованпых адспокарц'ипомах, в среднем составлял 13,23±1,48 мкмоль/г ткани (пределы колебания от 8,23 до 18,56 мкмоль/г ткапп) и был достоверно ниже нормы. Наиболее низкий уровень а-токоферола выявлен в пизкодифферепиированных адснокарщиюмах ( 10,46±0.69 мкмоль/г ткани, пределы колебания от 7,1 до 14,17 мкмоль/i ткани). что в 2 раза (на 58"") ниже нормы. В умерепноднфференцироваппых адспокарпиномах содержание а-токоферола в среднем равнялось 12,86±2,17 мкмоль/i т капп, а уровни его колебались в пределах от 7 до 27 мкмоль/г ткани. что в 2 раза (па 48" ;>) ниже нормы.

При изучении уровня ретинола в злокачественных опухолях яичников установлено, что в высокодиффсренцированных аденокарципомах содержание ретинола в среднем сост авило 8,41 ±0,78 мкмоль/г ткани (предел!.! колебания от 6.3 до 11,52 мкмоль/г ткани) и было более, чем в 2 раза (на 62%) ниже норм!,!. Содержание репшола в умеренполифференцированных опухолях равнялось 7.75±0.62 мкмоль/г ткани (пределы колебания от 5.2 до 11.01 мкмоль/i ткани) и было также бЛлее, чем 2 раза (на 65"") ниже нормы. Уровень репшола в нпзкодпфферепциропаппых адспокарпиномах в среднем составил 7.6210.471 мкмоль/г !капн и также был ниже нормы.

Не выявлено ¡аппенмостп между уровнями а-токоферола. репшола и IHCTO.MO! и чески м строением рака япчпнкоп

СОДЕРЖАНИЕ « ТОКОФЕРОЛА И РЕТИНОЛА В ОПУХОЛЯХ ЯИЧНИКОВ С УЧЕТОМ ОСНОВНЫХ КЛЛНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ЗАБОЛЕВАНИЯ

Клинико-морфологические Число на- Содержание аптиокендантов в опу-

показатели блюдений холях

а-Токоферол Ретинол

(мкмоль/г ткани) (мкмоль/г ткани)

Рак яичников 43 12.01+0.728 7.7410.260

а) с асцитом 32 12.54±0.740 8.26+0.530

б) без асцита 11 11.82+0.955 7.5510.295

Клнннческпе стадии

I 9 13.53+0.960 9.1810.550

2 4 12.84+1.270 8.0110.460

3 15 11.93± 1.625 7.5310.467

4 15 11,07±0.948 7.07+0.42

Морфологическая дифферен-

цнровка опухоли (

С,, 6 13.23± 1.480 8.4110.780

о. 11 12.86+2.170 7.75+0.620

вз 10 10.46±0.693 7.62+0.471

Гистологическая структура

опухоли

Адеиокарцинома

а) серозная 19 12.7±1.<)6 7.6410.34

б) серозно-сосочковая 10 8.4±0.79 6.70+0.57

в)эндометриоидная 8 13.5±0.86 8.1610.51

Прочие злокачественные 6 10.310.61 7.6010.42

опухоли яичников

Размеры опухоли

зЮ см 12 13.05+1.640 7.3010.540

>10 см 20 12.0111.082 7.7410.359

Доброкачественные опухоли 20 14.2411.04 9.08+0.60

янчников

Контрольная группа 12 24.911.0 21.910.09

(яичники здоровых женщин)

Р Р<0.0! Р<0.0()1

При изучение показателей «-токоферола и ретинола между доброкачественными опухолями яичников и контрольной группой, также наблюда-

лнсь достоверные различия (Р < 0.05). Так, в доброкачественных новообразованиях яичников содержание «-токоферола достигало - 14,24± 1,04 мкмоль/г iKaiiii. что па 43"" ниже, нормы, а ретинола - 9,08±0,6 мкмоль/г ткани, чю па 59" и ниже нормы, тогда как в яичниках у здоровых лиц уровни «-токоферола и ретинола были выше (24,9±1,0 и 21,9±0,09 мкмоль/г ткани,-

COOIBCTCIBCHHO).

Таким образом, более низкие уровн'и «-токоферола и ретинола в злокачественных опухолях яичников по сравнению с доброкачественными новообразованиям» и содержанием нх в здоровых яичниках подтверждают мнение ряда исследователей об интенсификации процесса перекисного окисления липндов у больных злокачественными опухолями.

Исследование показателей процессов перекисного окисления липндов в асцнгпчсской жидкости выявило низкую активность каталазы при полном отсутствии акипшости СОД. Содержание «-токоферола и репшола в аецн-IHMccKoii жндкост и также было значительно ниже, чем в опухолях яичников.

1.4. СОДЕРЖАНИЕ ПРОСТАГЛАНДИНОВ СЕРИИ Е В ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ И ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЯХ ЯИЧНИКОВ

Высокие показатели смертности, низкая эффективность методов терапии рака яичников вызывает повышенное внимание исследователей к иато-1епезу т ки о заболевания. Широкое поле для исследования метаболитов арахидоновой кислоты было открыто в онкологии после тою, когда стало известно, чю простагландипы серии Г, принимают акцизное участие в процессах роста, пролйферацнн и мстастазированпя ряда опухолей. Доказательством зюму служат' серия публикации и специальных исследований в этой области (Т.П.Ключаревл и соавт., 1993; G.Deichman et al., 1996; Ambrossioiii. 1993; Quiroga, 1993; Hanson, 1996).

Па ссюдняшнпй день изучение npociai лапдипов серии Б в злокачественных новообразованиях яичников позволит определить их связь со сте-

пепыо злокачественности опухоли. что имеет большое значение в оценке метастатического потенциала и прогнозе болезни.

Способность злокачественных новообразований продуцировать повышенное количество простагландннов серии Е было доказано рядом экспериментальных и клинических исследований на некоторых вида опухолей (8ту1Ые5,1979; Н.Е.Кушлинский и соавг., 1988; 1993). Поэтому интерес представляло изучение содержания простагландннов серии Е в опухолях яичников с учетом основных клинико-морфологических характеристик новообразования.

Таблица 5

СОДЕРЖАНИЕ ПРОСТАГЛАНДИНОВ- СЕРИИ Е В ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ И ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЯХ ЯИЧНИКОВ

Образцы исследования Средние значения III'1С (нг/г т кани)

Рак яичников без асцита 52.3+15.3'

Рак яичников с асцитом 47.2±5.52

Доброкачественные 21.8110.61

опухоли яичников

Асцитическая жидкость 19.2+0.34(нг/мл жидкости)

Р l vs 3 и 4<0.05

2 vs 3 и 4<0.05

Из данных, представленных в табл.5 следует, что средний уровень простагландннов серии Е в первичных злокачественных опухолях яичников без асцита был наиболее высоким (52,3±15,3 нг/г ткани) по сравнению с доброкачественными новообразованиями (21,8± 10,6 нг/гткапн).

Самый низкий уровень простагландннов серии Е обнаружен в асциги-ческой жидкости и составил 19.2 ± 0,3 иг/мл жидкости. Следует ошеммь. что средняя концентрация простагландннов серии Е досювсрно отличалась между доброкачественными и злокачественными опухолями яичников (с асцитом и без асцита). При этом, наиболее широкие пределы колебаний уровня простагландннов серии Е выявлены в первичном раке яичников без асцита и в среднем равнялись 52,3±15,3 нг/г ткани.

Также выявлены достоверно выс(экис показатели простагландннов серии Е в образцах карцином яичников без асцита и с асцитом, по сравне-

пию с доброкачественными опухолями и асцитической жидкостью (Р < 0.05).

Содержание простагландинов серии Е в опухолях яичников с учетом, стадии заболевания характеризовалось следующими особенностями. Уровни проспи ландпиов серии Е были наиболее высокими во 2 и 4 стадиях болезни и равнялись 69,9±19,7 и 57,4±7,5 нг/г ткани. Показатели простагландинов серии Е в опухолях у больных при 1 и 2 стадиях не различались и в среднем составляли, соответственно, 39,7± 15,3 п 33,5±7,3 пг/г ткани.

Данные средних значений простагландинов серии Е в опухолях яичников и в непораженном яичнике представлены в табл.6.

Таблица 6

СОДЕРЖАНИЕ ИГЕ В ОПУХОЛЯХ ЯИЧНИКОВ С УЧЕТОМ СТАДИИ ЗАБОЛЕВАНИЯ

Стадии заболевании Число наблюдений Среднее значение ПГЕ (нг/г ткани)

1 стадия 9 39.7±15.3'

2 стадия 4 69.9±19.72

3 стадия 15 33.5+7.3*

4 стадия 15 57.4±7.54

Р 2 vs 3 <0.05

Таблица 7

СОДЕРЖАНИЕ ИГЕ В ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ И ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЯХ И НЕПОРАЖЕННОЙ ОПУХОЛЬЮ ТКАНИ ЯИЧНИКОВ

Исследованные образцы Число наблюдений Среднее значение ПГЕ (нг/г ткани)

Злокачественные опухоли 43 48.40+5.40"

Доброкачест венные опухоли 20 2I.80+I0.602

Непораженный опухолью яичник 12 3.64+0.3 Р

Р 1 vs 2 <0.05 1 vs3 <0.001

Из данных, приведенных в табл.7 следует, что уровни npociaiландпиов серии F. в злокачественных опухолях яичников колебались в широких пределах oi 4.7 - 96,3 iii/i ткани, в среднем по группе составили 48,4±5,4

нг/г ткани. При этом уровни простагландинов серии Е в злокачественных новообразованиях яичников оказались наиболее высокими по сравнению с таковым показателем в доброкачественных новообразованиях яичников (21,8± 10,6 нг/г ткани; число наблюдений - 20).

Анализ полученных результатов показал, что средние уровни просгагландинов серии Е в злокачественных опухолях и в доброкачественных новообразованиях яичников достоверно отличались между собой (Р<0,05) и были достоверно вьцие (Р<0.001), чем в неизмсненой ткани яичника (3,64 ± 0,31 нг/г ткани). Данный факт указывает .на то, что клетки злокачественных опухолей обладают повышенной способностью к синтезу простагландинов серии Е по сравнению с доброкачественными новообразованиями.

Таблица 8

СОДЕРЖАНИЕ ПГЕ В ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЯХ ЯИЧНИКОВ У БОЛЬНЫХ С АСЦИТОМ И БЕЗ АСЦИТА

Рак яичников Число наблюдений Средние уровни 11ГК (нг/г ткани)

С асцитом 32 47.1±5.5

Без асцита 11 52.2±15.2

Анализ уровней простагландинов серии Е в опухоли яичников у больных с наличием асцита и без него, не выявил достоверных различий.

У 27 больных раком яичников представлялось возможным изучить уровни простагландинов серии Е с учетом степени днфферепцировки опухоли.

Содержание простагландинов серии F. в низкодифференцированных аденокарциномах яичников равнялось в среднем 61,2±8,8 нг/г ткани (пределы колебания от 25,4 до 95,2 нг/г ткани), было наиболее высоким и достоверно отличалось от таковых показателей как в высокодифференци-рованных , так и в умереннодифференцироваипых аденокарциномах яичников (30,1 ± 16,0 и 32,2±11,3 нг/г ткани, соответственно).

ПРОСТАГЛАНДИНЫ СЕРИИ Е В ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЯХ ЯИЧНИКОВ С УЧЕТОМ СТЕПЕНИ ИХДИФФЕРЕНЦИРОВКИ

Степень дифференцировки опухоли яичников Число наблюдении Средние уровни ПГЕ в опухоли (нг/г ткани)

Высокодифференцированиая 6 30.Ш6.0'

Умереннодифференцнрованная 11 32.2111.32

Низкодифферепцированная К) 61.218.8'

Р 1 уз 3 <0.05 2 3 <0.05

Кроме Ю1 о, достоверно высокие уровни проспи ландинов серии Е (Р<0.05) обнаружены в адснокарциномах яичников (51,615,9 пг/г ткани; число наблюдений 30; пределы колебаний - 6.3-96,3 иг/г ткани) по сравнению с другими гистологическими вариантами рака яичников 20,7±8,4 иг/г ткани (число наблюдений 7; пределы колебаний - от 2.8 до 41,5 иг/г ткани). В г руппу последних входили следующие опухоли: карпиносаркома (1), эн-дометриоидный рак - (1), свеглоклеточпый рак (1), серозный рак (1). сосоч-копып рак (I) и шпкодифференцироваппый рак яичников (2).

В Ы ВО д ы

I. В злокачественных опухолях яичников содержание природных антиокси-дантов ((1-юкоферола и ретинола) значительно ниже, чем в нормальной' ткани яичников здоровых женщин. Пониженный уровень биоантиокси-дангов сопровождается интенсификацией процесса перекисного окисления липидов, что выражается в снижении активности ферментативного звена анУноксидашпой защиты клеюк (суисроксиддисмутза и катализа) п в повышении уровня малоповою диальдегнда. образованного как фермешашвным, так и нсфермешаппшым путем. ?. Изменения в показателях активности процесса пероксидации в злокачс-СТВСНП1.1Х опухолях яичников не зависели от гистологического их строения. но зависели от степени их дифференцировки и стадии заболевания. I. При сравник'лыюм изучении показателей лигшдной пероксидации злокачественных, доброкачественных новообразований и нормальной ткани

яичников обнаружена активизация -»того процесса на фоне снижения содержания а-токоферола и ретинола, выраженная в меньшей степени в доброкачественных опухолях, *1ем в злокачественных по сравнению с контролем.

4. В асцитической жидкости больных раком яичников выявлено высокое содержание малонового диальдегида и низкая активность катализы. Активность супероксиддисмутазы практически не определялась. Содержание а-токоферола и ретинола было незначительным.

5. Содержание простагландинов серии Е в злокачественных опухолях было значительно (в 12-14 раз) выше, чем в норме. В доброкачественных новообразованиях уровень простагландинов серии Е был значительно ниже, чем в злокачественных.

6. Повышение содержания просгагландинов серии Е в опухолях с одновременной интенсификацией процесса перекисного окисления липидов позволяет предположить возможную связь этих процессов, зависящую от нарушения обмена арахидоновой кислоты, являющейся структурным компонентом клеточной мембраны и принимающей непосредственное участие в синтезе простагландинов серии Е.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

С целыо регуляции механизма антиоксидантной защиты и снижения

уровня простагландинов серии Е целесообразно включить комплекс ан-

тиокендантов в схему лечения больных раком яичников.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Перскиснсс окисление липидов в злокачественных и доброкачественных опухолях яичников/ Г.И. Керимова, Т.'Ю. Харитиди. Э.Г. Горожанская/ Материалы I съезда онкологов стран СНГ.-Москва.-1996.-е. 110.

2. Содержание простагландинов серии Е в первичной опухоли, метастазах в большой сальник и в асцитической жидкости больных раком яичников/ Н.Е.Кушлннский, К.П.Лактиопов, Ю.И.Поднстов, И.В.Бабкина, Г.И Керимова/Бюлл. экспер. биол. mc;i.-1996.-N.I2.-c.872-876.