Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему:Применение индуктора интерферона дс-РНК-ларифана в комплексном лечении больных раком прямой кишки

11)1 3 &

АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК СССР

НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ОНКОЛОГИИ ТОМСКОГО НАУЧНОГО ЦЕНТРА

На правах рукописи

СКВОРЦОВА Ираида Ивановна

ПРИМЕНЕНИЕ ИНДУКТОРА ИНТЕРФЕРОНА дс-РНК-ЛАРИФАНА В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ РАКОМ ПРЯМОЙ кишки

14.00.14 — онкология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

ТОМСК—1992

Работа выполнена в Алтайском государственном медицинском институте имени Ленинского комсомола.

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор С. М. Шнхман; доктор медицинских наук, профессор X. М. Векслер.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Б. М. Клячкин; кандидат медицинских наук Е. С. Смольянинов.

Ведущая организация — Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П. А. Герцена МЗ РСФСР.

Защита диссертации состоится «__» ______ 1992 г.

в _ ч. на заседании специализированного совета К 001.34.01 по защите кандидатских диссертаций в научно-исследовательском институте онкологии Томского научного центра АМН СССР (г. Томск, пер. Кооперативный, 5).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НИИ онкологии ТНЦ АМН СССР (пер. Кооперативный, 5).

Автореферат разослан «_» _ 1992 г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат медицинских наук,

старший научный сотрудник В. И. ТИХОНОВ

; Актуальность проблемы

f 3

тд-;- |Рак прямой кипки характеризуется постоянно возрастающей зе-^^•юяераемостьп и запущенностью, поэтому представляет важную социальную и медицинскую проблему.Эфбективность лечения рака прямой кишки невысока из-за невозиодаости проведения а большинстве случаев радикальной операции,а также недостаточной терапевтической активности лучевого и шпростатического воздействия. Как указывает sischy 3. и соавт.(Ï986).несмотря на совершенствование техники операций, основной причиной неудач при раке прямой кишки является местные репидивы с отдаленными метастазами. Наиболее угрожавшими учвстяшя рецидива пронесся являются пресакральнос пространство, боковая стенка таза» лреддрггмокккэоная клетчатка. Этот факт свидетельствует о необходимое?» проведения локальной терапии, а такие исеяедоваяпя наиболее оф^екгквньа срздсгз воздействия на опуг.ояовиг клегки.

На фоко прзгсдшоЯ терапии нередко возникает вырэяеняые побочные реякйиц, обусловяегмые угневедисм жзлуниой система организма» в so 'зремя иак терепезтическяй эф$зк? лечения в больной степени определяется и^'укохсгшетекгностьо больнис.

Позтсну прздставляс-гсл падая! разработать критерии.контроля за состояние« систеш шиухзпгетз и црзшлшо содобрать кмаунокор-рнгнруетуэ терзшга, которая бы уяучвала рззуяьтати комплексного

лслслия ояеояоптассзих сольгпк.

Дл«1 отой cwss »ça г;;;ро в синологической практике приценился «однг'лкатсру биологически- раакшй, одгяо! из которых являемся ¡эдтсрфзрс". Известно, «то различные тппи икгерферсна обладает ян?ипрод:г£ерагпвньм и ^»я^шсг^дулиругазнм действием. Противоопухолевый згафекг интерферона светяи с его способностью усиливать ш-тотоксическяй потенциал р'ззяичгазг популяпвй "иллегоп, модуливо-еать влмочнуа да<55ереншоовку v. лксновсс.ю ангигсноп рак ип onv-

холэеых клетках,так и не клетках противоопухолевой защиты <йоклик В.К., 1989).

Доказано,что терапевтический эффект увеличивается за счет синергизма резличньк типов эндогенного интерферона,а не экзогенного ( жиулек с.и. и соавт. ,1938). Образование эндогенного интерфероне способны стимулировать различные индукторы, одним из которых является природная двуспиральная РНК-ларибан. Препарат получен в Институте микробиологии им.А.Кирхенштейна Академии наук Латвии и применяется нами ,с 1988 г. в комплексном лечении больных раком прямой кишки с различной степенью распространенности опухолевого пропесса.

Сказанное вше определило пель и задачи данного исследования. Цель и эвдечи работы. Целью настоящего исследования явилось изучение роли иммунокорригирувдей терапии с использованием двухспиральной РНК - ларифана в комплексной лечении больных раком прямой кишки. ""

Для достижения поставленной цели в работе определены следу»-вие задачи:

- выяснить характер нарушений иммунного статуса у больных раком прямой кишки в пропессе комплексного лечения;

- определить прогностические возможности показателей системы иммунитета у больных ракш прямой кишки;

- изучить влияние лврифена на состояние системы иммунитета в процессе комплексного лечения, а также на частоту развития осложнений, возникающих в период терапии;

- разработать схемы иыкунокоррекгши с учетом характера иммунологических нарушений.

Научная новизне. Уточнен, говреедега»;

иммунных механизмов при рвке прямой кжс-ь8 ь сроаессс его

лечения.

Вйервые изучено влияние ларифана не соотношение различных субпопуляциЯ Т-лимфопитов у больных раком прямой кишки и,что наиболее важно, на клеточное звено иммунного ответа с помощью реакции ГЗГ к стафилококковому анатоксину. Установлено, что дс-РНК(лари-фак) обладает ишуномодулируящкш свойствами и активирует клеточное звено иммунитета.

Наыи доказано, что нет достоверной раэнины между показателями системы иммунитета при различны* методах введения препарата С внутримышечном, пресакральном, интратуморальнсм). При всех способах введения ларифана уровень эндогенного интерферона увеличивается через 6-8 часов после инъекции.

Отмечено свойство ларифана уменьшать количество осложнений, возникак::« в проаессе специальной терапии.

Практическая значимость. Рекомендованы для клинического применения методы предварительной оценки распространенности и прогнозирования течения рака прямой кишки, разг

работана и внедрена в практику схема ишунокоррекшга лари фан ом и тесты оценки её эффективности.

Апробация работы. Основные положения работы доложены на научной конференции молодых ученых и специалистов Алтайского края (Барнаул, 1989), иа республиканской научной конференции молодых ученых и специалистов "Теоретические науки практическому здравоохранении" (Уфа, 1990), на заседании проблемной комиссии "Лекарственные методы лечения злокачественных опухолей" (Калининград,1950), на межнефедралънои совещании кафедр онкологии, клинической иммунологии, хирургических болезней № 2 Алтайского государственного медицинского института в 1991 г., представлены на Всесоюзной конференции "Актуальные вопроса проктологии"

(Красноярск,1991), Европейском конгрессе онкологов (Италия,1991).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 работ, одна принята в печать.

Результаты работы внедрены в практику отделения абдоминальной хирургии Алтайского краевого, Барнаульского и Йовокузкештго городских онкологических диспансеров и в учебный процесс на кафедре онкологий АГШ1.

Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на страницах машинописного текста и со-

стоит из введения,обзора литературы, описания материалов и методов исследования, собственных данных, заключения, выводов и списка литературы. Работа иллюстрирована 31 рисунком и 34 таблицами. Библиографический указатель вкявчает 231 источников, из них 56 отечественных и Г?5 зарубежных авторов.

МАТЕРИМ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Было обследовено 236 больных ракои прямой кишки,19 больных полнпвми прямой кишки, 32 практически здоровых человека. Все больные были разделены на четыре группы:

1 - пациенты с доброкачественными опухолями прямой кишки (полипы) -

19 человек; "

2 - больные ракоы прямой кишки, у которых опухоль не выходит зе

пределы кизечной стенки ( мо ^ ~ человек;

3 - пациенты с местнораспроитраненной формой заболевания

( тэ::т1Л0 , ?:с ) - 84 человеке;

4 - больные" раком прямой кишки с отделенными метастазами С1' I- 4 ко-2

) _ 77 человек. Группы мало отличались по возрасту и половому составу. Иммунологический статус наследовали в ;-;саент поступления больных, на этапах комплексного лечения и поел-? п^утрпаетечког.;

- в -

и локального введений ларифана.

Методы исследования иммунологического статуса

Для'опенки факторов клеточного »гуморального иммунного ответа и неспедафической резистентности определяли следующие показатели:

- общее количество лимфоцитов (т£-Р0К, кЕ-РОК, вЕ-РСК, рЕ-РОК, сЕ-РОК), показатель функпии тимуса по методу В.П.Лозового и соавт. (1986);

- уровня сывороточных иммуноглобулинов G, А, М по методу G.Mar.cini (1965);

- количество гшрнулирумих иммунных комплексов (ЦИК) по методу Т.Hasoova и оозвт. (1978);

- фагоцитарная и функционально-метаболическая активность нейтро-филов по методу Park з.н. (1968) в модификации С.М.Гордиенко (1983);'

- определение активности Интерферона биологическим методом с использованием перевиваемой клеточной культуры l - 41 (клетки

■ г ,

про ей больного подастрой моноштаврноЯ лейкемией) и вируса эн-цефаломиокардитв. Тестирование проводилось в лаборатории молекулярной иммунологии Института микробиологии ш. Августа Кир-хснштейна Академии наук Латвии.

Полученные результата бши подвергнуты статистической обработке по методам, предложенным Г.Й.Лакиньм (1980) с использованием ЭШ ЕС-1841 в ИВД Алтайского мединститута.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Согласно поставленным задачам, в первой серии исследований изучали изменение иммунологических показателей у больных раком прямой кишки до начала лечения.

Показано, что иммунологические нарушения у больных ракш

прямой кишки зависели от.распространенности опухолевого процесса. В частности, выявлено, что исходные изменения у больных локализованный р а к о ы прямой к и ш-к и СТк0 1Г0 ) характеризовались увеличением ,малодифференш-рованных форм ли>-фыитов (относительное содержание - 15,17+1,В1%, абсолютное - 0,265+0,03, в контрольной группе - 3,7+0,492, 0,55+0,08) и показателя функции тимуса (1,04+0,03, у здоровых лзз-дей - 0,93+0,03).

Обнаружено значительное увеличение субпопулший Т-хелперов/ индукторов и Т-супрзссоров/ киллеров, соотношение ке этих клеток было снккено по сравнению с контролем (таблица I),

Таблице I

Содержание шмунорегуляторных клеток у обследованных больных раком прямой киши

Контроль ! Б^иые раком прямой кишки п •» 32 ? локализован*® местнораспро-Тгенерализован-

Показатель

форма

я и

1страненная !ная форма 75 'Ф^п«^ | я к 77

?-хелперц/ 35,03+1,04 45,66+Г.М , 44,33+1,13 . 2о.7%0,93

индукторы 0,63+0,034 0,78+0,054к"

Т-сулрессоры/28, Г3+1,35 45,76+1,8

киллеры

йммунорегу-ляторный индекс

0,333+0,023 48,29+1,5

* ч- *

0,54+0,038 0,753+0,041 1,26+0,048 1,073+0,046

0,689^0,047 24,62+0,7»

С>353*0,021 0,67+0,042*

1,84+0,076 0,568+0,02

Примечание: В числителе - проиеитное, в знаменателе - абсолютное содержание клеток ( хЮ®/л) ' Достоверность различий с контролем: к- - Р-^0,05 .

Отмечено достоверное увеличение содержания мгмуноглобудша А (3,17+0,33 г/л; у здоровых лодей 2,2+0,15) Ц.1К в сыворотке кро-

ви. Если в контрольной группе количество ЦИК составило 21,25+ +2,7 у.е., го у паииентоа с локализованным опухолевым процессом -43,7%3,32 у.е., Р<0,001. '

По сравнения с показателями у здоровых людей и больных полипами прямой кишки у группы пациентов с локализованным опухолевым процессом снижен окислительно-восстановительный резерв нейтрон-лов наряду с повышенной фагоцитарной активностью (таблица 2).

Таблица 2

Фагоцитарный индекс и НСГ-тест нейтро^лов крови у больных полипами и раком прямой кишки и здоровых людей

jКонтроль

Больные раком прямой кишки

Показатель ! п«32 !локализован--! местнорасп|ад*?генерэлизо-

! !ная форма !стршениал 'ванная форма

! ? "фортка !

* ! п я75 ! п а 84 1 п » 77

Фаговитор-

рый индекс, 64,94+2,03 72,53+2,76* 75,4+1,98^ 66,Sa¿2,33 НСГ-тест

Су. е.) 0,56+0,024 0,61+0,02 м, 5+0,016х 0,38*0,015'"*

спонтанный ~ "*

Стнмулиро- ^ • „„„

ванный 0,97+0,03 0,87+0,026® 0,75+0,026^ 0,43*0,015^-

Индекс -

стимуляции 1,7+0,08 -1,446+0,04** 1,549+0,05 1,14+0,02^

Примечание: Достоверность различий с контролем: * - Р <0,05 пк - Р"<0,01 Р^0,001

При иестнораслространенной форме рака прямой кишки ( T-jNjSr0 , ) сни-

жено абсолютное и относительное содержание лимфоцитов, сохраняется увеличенной субпопуляпия малояяфферениированных форм Т-лкмфо-питов (9,3+0,692, 0,139+0,014) разнила с контрольной группой ста-

тистически достоверна (Р 0,001). Показатель функции тимуса ниже, чем в предыдущей группе больных(0,963*0,03). но существенно не отличается от такового у здоровых людей.Увеличен за счет хелпер-мой субпопуляпии шмунорегулоторный индекс (таблица I). По сравнение с группой больных локализованной формой рака прямой кишки, у пациентов с ыестнораспространеикой оаухольз количество ВДК увеличилось и составило £5,34+3,17 у. е.

Значения фагоцитарного индекса еае больше возросли, показатели НСГ-геста оставались снивеяндаи (таблица 2).

Состояние иммунологической напряженности у больных локализованной и ыестиора спрострзненной формами рака прямой кишки* характеризующееся активапией как клеточного,так и гуморального звеньев иммунного ответа,8 такае факторов несаглафической резистентности, ыоает привести к возникновения феномена иммунологического усиления роста опухоли. Поэтому для данного контингента патентов необ-

; А ' ;

ходимо использование иммунотерапии .направленной не на стиыуяяшп,

с ка медулетла шшунологшшеккх прапассов.

При генерализованной форте рока прямой к и п к и (Т^ по-2 мх ) ЕШГвленЕ значительная кимунодепрессая: сникшие абсолетного я относительного количества лейкоцитов, Т-лимфопетов, Т-хелверов / индукторов, иеньие контрольные пифр показатель функции тимуса (0,71+0,02, Р<-0,001), одновременно с этгел повышено количество Т-супрессоров/киялеров (таблица £). Параду с нарастанием ЦШС в сыворотке крови у пациентов этой группы отмечено снижение количества иммуноглобулина ■ с (8,03+0,39 г/л, Р<0,001) и увеличение иммуноглобулина М(2,6% +0,15 г/л, Р-£.0,003) по срашенио с контрольными цифрами. Значительно шияенв фушаташаяшо-метаболическав активность фвгопигоз" (таблица 2).

Выявленные иммунологические наруизнил у Сольиьас раком прямой.

кишки свидетельству!» о постоянной и нараставшей (в зависимости от распространенности рака прямой кишки) антигенной стимуляции, постепенной потерей иммунной системой своих компенсаторных возможностей, что ведет к развитию иммунодепрессии на фона роста и дис-семинании опухоли» Учитывая нарушение пронессов распознавания и презентагии антигенов вследствие значительной иымуносупрессии, больным генерализованной формой рака прямой кишки также необходимо назначение иммунокорригируощей терапии, направленной на ку-шроввнив признаков иммунодефицита.

Соответствие клинического течения заболевания и иммунологических изменений подтвердило изучение состояния иммунитета у больных раком прямой кишки в пропессе специального лечения.

Так, обнаружено, что операционная травма усугубляла нарушения клеточного иммунитета у всех больных, но степень изменения количественного соотношения иммунопитов била различной и выражала адаптационные возможности иымунноЯ системы у данного контингента пациентов. Отмечено, что при клинически более благоприятном течении заболевания в большей степени сохранялась способность к иммунному ответу и к диф^ерениировке клеток,чего не наблюдалось э группе больных генерализованным раком Прямой кишки.,

Известно свойство антител образовывать с антигеном иммунные комплексы,количество которых может характеризовать содержание иммуноглобулинов и антигенов, поступающие из патологического очага. Нами показано, что при локализованной форме опухоли после выполнения экстирпаций или различных видов резекций прямой кишки количество ЦИК в сыворотке крови достоверно снизилось в среднем на 41,6$ (с 43,79+3,32 у.е. до 25,3+4,35 у.е., Р<0,001).

В группе больных с местнораспространенным процессом, когда пополнялись расширенные операпии, уровень ЦИК,тем не менее,падал всего на 14,35 (с 55,34+3,17 до 47,3+2,7, Р<0,05). В то время

как при генерализованной форме рака прямой кишки после лапарото-мии и наложения колостомы количество ДИК даже возрастало на II,4% (с 63,04+2,65 до 71,83+4,64 у.е., Р<0,05). Таким образом, полное удаление новообразования приводит к существенному снижению уровня ЦИК.

йзученив состояния иммунитета в пропессе проведения локальной полихимиотерапии, а также при завершении комплексного лечения показало, что у всех больных раком пряной кишки развивается иммуно-депрессия.

Учитывая наличие иммунологических нарушений у всех больных раком прямой кигаки,независимо от степени распространенности опухолевого процесса, а также с иельо уменьшения иммуносупрессивно-го эффекта спешальной терапии, бил использован индуктор интерферона дс-КЖ-ларифаа.. "

Для выяснения наибольшей эффективности препарата как иммуно-ыодулятора были использованы три пути введения лврифана: внутримышечный, пресакральныЯ и интратумораг^ный, оптимальная разовая доза - 5 ыг/м^, а общая доза - 20 мг/м^, т.к. превышение этого количества нерационально из-за развития гняореактивности при выработке интерферона. Гкпореактишос^ь длится в-течение месяца (Фелд-манеГ.Я., 1989).

Несмотря на то, что при лобом пути введения препарата количество лейкоцитов в крови больных раком прямой кишки достоверно не изменялось, обращает на себя внимание факт усиления процессов дифференпировки и созревания клеток у всех яапиентов, а показатель функгши тимуса приближался к нормальным шфрам.

Несмотря на то, что опухоль, оставаясь в организме, продолжала оказывать антигенную стимуляцию, введение ларифана уменьшало содержание малодифференшровьнннх форм лшфопитов, что гово-

- 12 -

риг о снижении функциональной напряженности в системе иммунитета V выработке полнопенного иммунного ответа.

Получены доказательства того, что индуктор интерферона оказывал положительное влияние не только на процессы дифференпиров-ки и созревания клеток,но и на Т-лимфопиты,обеспечивающие им-мунорегуляпию (Т-хелперн/индукторы и Т-супрессоры/киллеры).Независимо от пути введения ларифана у всех больных раком прямой кишки нормализовался шиунорегуляторньЯ индекс.Это достигалось тем, что в ответ на применение индуктора интерферона уменьшалось повышенное или возрастало сниженное количество иымунорегуляторных клеток.

Модуляторше способности ларифака коснулись и гуморального звена иммунного ответа. Нами показано, что лвбоя путь введения ларифана достоверно увеличивал конпентрапио иммуноглобулина 6 .

Для того,чтобы иметь полное представление о воздействии индуктора интерферона ларифана на систему иммунитета у больных рэком прямой кишки, нами изучена система фагопитов - фагоцитарный индекс и функционально-метаболические способности нейтрофилов.

Шдимо, на фагопиты ларифан воздействовал также через систему эндогенного интерферона»усиливая поглотительную и окислительно-восстановительную активность нейтрофилов,хотя индекс стимуляции ни в одной из групп больных раком прямой кишки достоверно не изменялся-

Учитывая, что ларифан оказывал влияние на все компоненты трехклеточной кооперации в система иммунитета«можно судить о том, что этот препарат является эффективным иш ун оыодулят о ром.

Предположение о том,что ларифан выступает в качестве имыуно-модулятора через систему интерферонов, подтверждено нами при изучении активности общего сывороточного интерферона у больных раком

прямой кишки (таблица 3).

Таблица 3

. Уровень интерферона в сыворотке крови у бальных раком прямой кишки на фоне введения ларифена

'^Количество инте£<£ерона в сыводотке крови Хе£/йл2 _ _

ПуТЬ !Контроль! бОЛЬНЫв £ЭКОМ П£ЯМОЙ кишкг вв*>пркпя ' ¡локализованная*" Тыёстнораспрос?I генерализован-

вцццп ? | форма 1раненная форма!ная форма

До введения • 4,0+0,5 2,95+0,4

Ьнутрмш-иечный

Пресак-ральный

йнтрату-ыоральный

15,143+2,07 Рг 0,001

13,91+1,95 Р| 0,001

Р2 0,05

13,46+2,29 Рх 0,001

Р_

0,05 0,05

2,29+03* 1,87+0,3?**

12,59+1,39 7,363+1,07 Рг 0,001 Р| 0,001

12,01+2,03 Р1 0,001

Р2 0,05

11,33+2,66

р£ о7ш

Р2 0,05 Р. 0,05-

7,4 +2,17

Р1 0,001 Р2 0,05

7,88+1,47 Рг 0,001 Р2 0,05 Р, 0,05

Примечание: Р^ - достоверность разкииы меяду исходным показателем я значением «полученным после внутримышечного,

пресакрального или интратуморельногс введений.

о

?2 *■ достоверность разницы ыевду поквзвТеяем после внутримышечного введения и значениями после пре-свхрального я кнтратуыорального введений ларифала.

Р8 » достоверность резнипы мевду показателями" после првсакрального и янтратуморельного сведений.

Достоверность различий с контролем:

* • Р<0,05; *** ► Р<0,001.

Отмечено,что исходный уровень интерферона у больных с локали-

зованным опухолевым нрапесссм достоверно не отличался от контрольных иифр, б с меетмораепространеннш и генерализованным раком

прямой кишки был в 1,5-2 раза ниже,чей у здоровых людей. У всех пациентов при любом пути введения ларифана увеличивалось количество общего интерферона в сыворотке крови в 6-7 раз,кроме того, активность его коррелировала с величиной опухоли и ее распространенностью. Так, у пациентов с генерализованным раком прямой кизки уровень индуцированного эндогенного интерферона был в 2 раза ниже,чем у больных с локализованным пропессом.несмотря на сохранение способности к выработке интерферона в ответ на введение дс-ШК.

Наряду с изучением положительных эффектов ларифана нами контролировалось обиее состояние больных раком прямой кишки нв фоне введения препарата. Не было отмечено никаких тяжелых и острых осложнений. Наиболее часто встречавшейся реакцией в ответ на применение индуктора интерферона было повыление температуры тела. Интересен тот факт, что количество больных генерализованной формой рака прямой кишки, у которых возникала температурная реакция, было на 20? меньше, чем в группа пациентов с локализованным опухолевым пропессом, у которых при внутримышечной нньекпии ларифана гипертермия встретилась в 80,93Ъ случаев. Видимо, гипереактивность больных генерализованным раком прямой кишки обусловила низкие титры интерферона и более редкое развитие температурной реакции.Повышение температуры теле, вызванное введением ларифана, начиналось через 4-5 часов после инъекции и длилось 10-12 часов.У бсль-винства пациентов температура тела достигала 37,2-38°С и только у отдельных больных повивалась до 39,5-40,0°С,что сопровождалось сильным ознойом,икогда головной больп. Лишь у одного человека (4,761) в группе больных локализованной формой рака прямой кишки внутримышечное введение ларифана осложнилось артериальной гипотонией. В отличие от температурной реакции, озноб, головная боль встречались во всех" группах пациентов приблизительно с одинаковой

частотой, независимо от пути введения препарата.

Полученные данные,касающиеся имыунокорригируицего действия ларифана, подтверждаются проведенной серией исследований по изучению реакции гиперчувствительности замедленного типа (РГЗГ). Известно, что развитие РГЗГ можно рассматривать как эквивалент реакций клеточного иммунитета.

Всем больным раком прямой кишки, разделенным по методу Д.П. Березкина (1972) на группы с благоприятным и неблагоприятным прогнозом, были проведены внутрикожные пробы со стафилококковым анатоксином. Реакиия ГЗГ коррелировала с иммунологическими исследованиями in vitro и с прогнозом течения заболевания (таблица 4).

• ° Таблииа 4

Кожная реакция ГЗГ на стафилококковый анатоксин у больных раком прямой кишки на фоне применения ларифана

У Про гноз -

®тап { благоприятный ! неблагоприятный

исследования,- - - - - —----------- ------• —

|папуле (мм) !гиперемия |папула(ым) | гиперемия

До введения

ларифана 1,129+0,15 9,6+0,46 - О 4,31+0,34

После введе- „„ „„

кия ларифана 6,48+0,4*** 24,7+0,92*** 3,47+0,3^14,0+0,62***' Примечание: х*к - Р<0,001.

Как и в случае использования теста розеткообразования, у больных с генерализованным опухолевьи процессом и неблагоприятным течением рака прямой кишки отмечена гипоергическвя реакция,свидетельствующая о наличии иммуносупрессии. Развившаяся внутрикожная реакция ГЗГ у патентов с благоприятным течение»' заболевания характеризовалась наличием папулы величиной 1,129+0,15 мм и гиперемией

-169,6+0,46 мм. У больных с явлениями интоксикации или отдаленными метастазами папула отсутствовала, а диаметр эритемы составил 4,34+0,34 мм.

Полученные данные играют большую роль для предварительной опенки распространенности и течения опухолевого процесса уже в момент поступления больного в стационар,не прибегая к инструментальным методам исследования (рапионализаторское предложение 543 от 9 апреля 1990 г.). Кроме того, результаты реакции ГЗГ позволяют судить о состоянии системы иммунитета и необходимости назначения иммунокорригирутоей терапии. Учитывая, что иммунная статус онкологических больных во многом определяет успех терапии, возможность сиенить его поможет планировать адекватный объём оперативного вмешательства и схемы проведения химио-лучевой терапии с использованием иммуномодуяяторов.

Нами доказано, что внутримышечное введение ларифана приводит к увеличению папулы й гиперемии у всех Зольных ракш прямой киски, независимо от прогноза течения и распространенности опухолевого пропесса, то есть индуктор интерферона оказывает икмуномодулирую-вее действие. ' %

Опенка терапевтического эффекта ларифана была проведена не только до начала, но и в пропессе комплексного лечения больных раком прямой кишки.

Доказано, что превентивное применение индуктора интерфероне готовит организм к стрессовым факторам - операпии, химислучевой терапии. Отмечено, что в послеоперационном периоде у патентов, пролеченных ларнфаном, напряжение иммунной системы гораздо меньше, чем у больных,которым ларифан не вводили. В частности, применение иммуномодулятора способствовало сохранению значений показателя функпии тимуса после операгаи, о также уменьшения содержания

малодафференпированных форм лимфоцитов, нормализации иммунорегу-ляторного индекса, увеличению количества иммуноглобулинов 6 и А, что говорит об усилении функциональных способностей системы иммунитета у больных раком прямой кишки. Изучение системы иммунитета у пациентов, пролеченных ларифаном, на фоне пресакральной полихимиотерапии и в процессе комплексного лечения продемонстрировало, что индуктор интерферона благоприятно подействовал на соотношение зрелых и малодифференцированных форы лимфопитов, иммунорегулятор--ных клеток, содержание иммуноглобулинов & и А. Применение ларифана позволило у большинства больных всеми формами рака прямой кишки сохранять фагонитарный индекс и усилить окислитеяьно-восстано-вительные пропесск. в нейгрофилах в процессе комплексного лечения.-

Предварительное применение имыуномодулятора дс-ГОК - ларифана до начала специальной терапии отразилось не только на состоянии системы иммунитета, но и клинически (таблица 5).

Чаща всего в ходе лечения возникали следующие осложнения: гнойные, нарушение регенерации тканей в послеоперационном периоде, развитие цитопаний при проведении лучевой и химиотерапии. Отмечено, что степень иммунологических нарушений коррелирует с частотой осложнений, возникающих на фоне проводимой специальной терапии. Имеется прямая зависимость - чем сильнее выражена иммунодепрессия, тем чаще развиваются нарушения регенерации тканей и цитопении. Так, у больных генерализованной формой рака прямой кишки в процессе комплексного лечения лейкопения (количество лейкоштов меньше

а

3,0 х 10 /л), развилась в 92,3» случаев, а анемия (уровень гемоглобина меньше 100 г/л) в 76,а у пациентов с локализованным опухолевым процессом - в 64,29.', и 42,Эб% соответственно.

Показано,что з случзе использования иммуномодуляторз гнойнее осложнения, лейкопении и анемии отмечались а два раза, а нарушение регенерации ткана* - о 3 раза реже,чел у пациентов, кото-

Таблипа 5

Частота осложнений у больных раком прямой кишки во время . комплексного лечения с использованием внутримышечного введения

ларифака

I Частота осложнений Т %) 2 и д | локализованная форда Т мостнораспространенная ! генерализованная форма ОСЛОЗИ01КЯ !________•_____! _________!____________

|беэ ларифана !с использоваТбээ ларифэна Тс использоЕа'беэ ларифана |с использо-

I ¡нием ларифа-1 ¡нием ларифа-: )занией лари-

| ¡на | на { ¡фана

| П а. 14 | П « II ) п - 12 | п а 17 ] П * 13 { П =» 10 |

Иослеопораписн- <3

нкэ гнойные ос- • ,

лошеиия 21,4^ 9.09Й 8,ЭХ 5,9$ 7,7£ ОЙ

Нарушение рогене-

ршнш тканей 35,7% 9,091 0% 0% 7,71 0%

Лейкопения 64,29й 36,36% 83,3% 29,43 92,Ж 10%

Аи-змия 42,86% 18,18% 58,3£ 23,53% 76,9% ЗСЙ

рым не вводили ларифан.

Скорее всего это связано с тем,что макрофаги и различные субпопуляпии лейкопитов участвует а процессах заявления,с лари-фен, активируя все звенья иммунитета, стимулирует рагенерашв «саней.

Уменьшение количества питопений у больных раком прямой кишки, пролеченных ларифаном, вероятно, может быть объяснено стимуляцией костного mos:а различными потокинаыи , которые выдедяится в пропе се индукиии интерферона ( Holtmann П., 1988).

Таким образом, анализ литературных материалов и полученных данных дает возможность оценить необходимость изучения состояния системы иммунитета и его коррекции у больных раком прямой кишки.

Резюмируя вышесказанное, могло утверждать, что большую практическую ценность имеет изучение состояния системы иммунитета у

г.

больных раком прямой, кишки как с помощью теста, розеткообразования, так и при использовании реакция РЗГ. Оценка степени изменений в соотношении клеток иммунной системы при сопоставлении с развие-кейся внутрикожной реакпией позволяют прогнозировать течение^пред-варительно опеиить распространенность опухолевого процесса и частоту осложнений, вызванных, комплексным лечением. Эти знания необходимы при выборе объёма оперативного вмешательства,а также при назначении схем химио-лучевой терапии.

Учитывая полученные результаты,следует отметить, что все больные раком прямой кишки нуждаются в превентивной имиуиомодуля-пии по разным причинам. Для одних пациентов - это уменьшение нежелательной активапии системы иммунитета, для других - снятие синдрома иммунодепрессии-. Состояние системы иммунитета во многом определяет непосредственные результаты комплексного лечения,воз-нлкновэние нарушения репарации тканей, питопекией,гнойных осложне-ьи.1. Для всех ^ольиьас раком прямой киши применение иммуномоду-

ллторэ - это необходимое условие улучшения результатов специального лечения, как было показано выше.

Изучение влияния различных путей введения индуктора интерферона на все звенья иммунного ответа позволило разработать схему иммунокоррекции для.больных раком прямой киши. Оптимальная разовая доза ларифэнв,«вызывавшей выработку интерферона и иммунологическую перестройку - 5 мг/к^. При достижении сбией дозы ларифана 20 мг/ы^ начинается состояние гипореактнэности по отношении к индукции интерферона, длящееся в течение I месяца (Г.Я.Фелдмане, 198Э). Как было показано, для получения икмунокорригирувдего эффекта путь введения препарата роли не играет. В связи с этим нами разработана схема кммуномодулкции с помощьо дс-РНК - ларифана.Весь больным раком прямой кишки до начала специальной терапии вводят внутримышечно. ларифвн по 5 мг/м^ каждые 3 дня. При достивении обсей дозы 20 мг/м^ шмуиотерэтга прекращает.

Дополнительным косвенным критерием, отражааягм кммунокомпз-тенгность организма больных раком прямой к.ишхл,ксхб? бьггь температурная реакция» развивающаяся в ответ на введение ларифана,кор-редирувзая с уровнен интерферона з сыворотке крови пациентов. Уровень гипертермии коает .характеризовать способность к вырсботке интерферона, вагного фактора, участвувщого в противоопухолевой аештв. Учитывая скяоргазм различных типов интерферона и многих цнтостатиксв, по степени температурной реакция мокно правильно подобрать дозы хишюпрепаратов. Изучение взаимодействия антиблас-томнюс лекарственных вегеств и ¡шдуктора интерферона ларифана мр--.-ет быть перспективным направлением в разработке схем химио-имчу-нотервпии у онкологических больных.

ВЫВОДЫ: 1. Степень кт/мунологичеехдаг нарушений у бальнщ рако?4 пряней к;:ики зокдек? с? ст*<д;г-1 о::у;;ологсго процесса: по мере арогресси»

ропания заболевания нарастают признаки иммунодепрессии, сменяя состояние иммунологической напряженности.

2. У всех больных раком пршой кишки снижена активность интерферона, которая уменьшается в зависимости от распространенности опухолевого процесса.

3. Реакция ГЗТ коррелирует с прогнозом течения рака прямой кишки. У больных с неблагоприятным развитием заболевания папула при ' внутрикожиой реакции отсутствует,а диэметр эритемы в среднем в 2 раза меньше,чем у пациентов с благоприятным течением рака'прямой кишки.

4. Каждый компонент специального лечения рака прямой киски усугубляет исходные нарушения клеточного иммунитета.

5. Ларифан,вне зависимости от пути его введения в организм больного,нормализует показатель функции тимуса,соотношение зрелых и малодифференпироваиных лимфоцитов,усиливает функциональную активность нейтрофилов.

6. Применение лврифана в кодалексном лечении рака прямой кишки позволяет снизить количество больных,у которых развивались питопении и местные осложнения.

7. Гипертермйческак реакция, возникающая на фоне введения лари фа. на,является дополнительным критерием опенки иммунокомпетентности

организма больных и способности к выработке интерферона.

8. Превентивное внутримышечное введение ларифана по 5 мг/м^ каждые 3 дня (общая доза 20 мг/м^) позволяет уменьшить проявления напряженности или супрессии в системе иммунитета у больных раком прямой кишки.

Список работ,опубликованных по теме диссертации I. Игитов". З.И., Нечунаев В.П., Павлов Е.В., Сквориова И.И.

Результаты хирургического лечения рака прямой кишки //Тезисы

дскладов ч научной конференции молодых ученых и специалистов-ангиологов Алтайского края. - Барнаул, 1937. - С. 169-170.

2. Скворпова И.И., Колесников А.II., Игитов В.И. .Цыплаковэ J1.К. Изменение некоторых иммунологических показателей у больных рекой прямой кишки/Дезисы докладов на I Всесоюзный иммунологический съезд. - Сочи, I9ö9, - Т.2. - C.IÎ8.

3. Сквориова И.И., Игитов В.И., Цыпяахова Л.М. Возможности при метения индукторов интерферона (дс-РНК) з комплексном лечении больных рзксм прямой юшки //Тезисы докладов к научной конференции молодых ученых и специалистов "Теоретические науки практическому здравоохранению. - Уфа, I9S0. - С.49.

4. Сквориова И.И!, ¡¡гитов В.И., Опарина С.И..Мвтвейкин A.A., Скворцов C.B., Шихман С.М. Возможности применения дс-РНК в иммунореабилитапии больных раком прямой киши //Материалы

2 Международного симпозиума "Реабилитация иммунной системы". -Сочи, 1990.

5. Скворцова И.И., В.И.Игитов, Цыплакова Л.Ы., Опарина С.И. ,Брэ-тышева Н.С. Одновременное изучение показателей фагоцитоза,ЦИК, иммуноглобулинов и субпопулкций Т-лимфоцитов у больных раком прямой кишки //Тезисы докладов к итоговой научной конференции молодых ученых, посвященной 35-летию Алтайского медицинского института га.Ленинского комсомола. - Барнаул, I9ö9. - С.57-53.

6. Игитов В.И., Братыиева Н.С., Пйхман С.М.,Сквориова И.И. Новые подходы к лечению рана прямой кивши /В кн. : Актуальные вопроск гастрозотерологки. - Барнаул, 1991. - С.II3-II5.

7. Игитов З.И., Нечунаез В.П., Пвдалан С.Й., Сквориова И.И., Чури-лоея Л.А. :: др. Сочит вша я хито-гагдунотсрапия как коглпенепт . комплексного лечзиия бгльшас рзксм прямо?. стоки //В ich. : Модификация лекарственной' терзлкя опухолей. - BS?Î /АЯ СССР,Моек-

, ICSI. - G. 22-27..

- 23 -

8. Skvortsove. I., Shikk-an 5., Peldcane G., Cherfcashin G. The Employment of the Interferon Inducer ds-RKA. in the Rectal Cancer Therapy// la: The European J. of Cancer, Г991, Suppl. 2., p. 594, N 548, ECCO 6, Pirenze, 1991.

Принята в печать Sicrortsova I., Shlkhman S., Igitov V. Immunodepression in Rectal 2usiour Patiento // 8th International Congress of Immunology, Budapest; Huneary, 199?.

Рационализаторские предложения

1. И.И.Скворцова, Г.В.Черкашин, В.И,Игитов, С.В.Скворцов. Способ прогнозирования течения заболевания у больных раком прямой кипки. Рацпредложение № 513, 9 апреля 1990 г.

2. И.И.Скворцова,,Г.В.Черкашин, В.И.Игитов, С.В.Скворцов. Способ определения распространенности опухолевого процесса у больных раком прямой кишта. Рацпредложение $ 563, I июня 1990 г.

3. И.И.Скворцова, В.И.Игитов, А.А.Матвейкин, В.П.Нечунаев, Способ профилактики рецидивов рака прямой нитки. Рацпредложение № 578, II декабря 1990 г.

г. Барнаул, ¡1, «Полиграфист*. За к.*/// Т щ.^ОО