Автореферат и диссертация по медицине (14.00.08) на тему:Применение Адгелона при травматических поражениях роговой оболочки



На правах рукописи

Р Г Б ОД 1 9 ФЕВ 2004

РОМАНОВА ИРИНА ЮРЬЕВНА

ПРИМЕНЕНИЕ АДГЕЛОНА ПРИ ТРАВМАТИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЯХ РОГОВОЙ ОБОЛОЧКИ

(экспериментально-клиническое исследование) 14.00.08 - глазные болезни

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва —2004

Работа выполнена в Московском научно-исследовательском институте глазных болезней им. Гельмгольца МЗ РФ (директор - доктор медицинских наук, профессор А. М. Южаков)

Научный руководитель Официальные оппоненты

Ведущая организация

доктор медицинских наук ЕЛ. Ченцова

заслуженный деятель науки РФ, академик РАЕН, РАМНТ, доктор медицинских наук, профессор Е.СЛнбман заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Ю.Ф. Майчук

ГУ МНТК "Микрохирургия глаза" МЗ РФ

2004 г. в /1

фо часов

Защита состоится «_ на заседании диссертационного совета Д 208.042.01 при Московском научно-исследовательском инеппуге глазных болезней им. Гельмгольца по адресу 103064, г. Москва, ул. Садовая -Черногрязская, дом 14/19.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке МНИИ глазных болезней^ им. Гельмгольца Автореферат разослан « ¿А/}> ЛЛ^Щл*} 2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук,

профессор М.Б. Кодзов

\

Актуальность проблемы.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

В современной офтальмологии в связи с реально недостаточным арсеналом ¿едицинских средств остается острой проблема поиска и изучения новых методов соррекции рестапуционных процессов в тканях глаза, основанных на достижениях "еоретической медицины и практической офтальмологии.

В этом направлении перспективным является применение лекарственных ipenaparoB, оказывающих положительное действие на репаративные процессы в юговице глаза человека после ее травматических поражений различного характера. По щнным Е.С. Либман (2003), проникающие ранения глазного яблока встречаются в 68 % шучаев травм органа зрения (из них 15,8 % с инородным телом). Повреждения роговой >болочки глаза отмечаются примерно в 22,5-63 % от общего числа его проникающих >анений (БЛ. Поляк, 1972, ГШ. Лебехов, 1974, Р.А. Гундорова с соавт., 1988, Р.А. рицюс, 1991, JI.K. Мошетова, 1998).

Среди всех травматических поражений глаз ожога составляют от 6,1 % до 37,0 % Т.В. Бирич, 1979, И.М. Волков с соавт., 1980, И.П. Макаров с соавт., 1987, НА Тучковская, 1987, 1988, Е. Poser, 1983, КМ. Saari et al., 1984), а на долю химических >жогов, по данным разных авторов, приходится от 7,9% до 85% всех травм глаза (В.Ф. ^аниличев, 2000, ВВ. Малинина с соавт., 2000, SJ. Margan, 1987, RJL Pfister, 1988).

В качестве причины стойкой потери зрения ожога выявляются в 2,5% случаев от >бщего числа лиц с полной потерей предметного зрения (Е.С. Либман, 1988, Р.И. Ъшанова, 1990, С А Якименко, 2000, IP.Parmanetal., 1986).

Учитывая вышесказанное, заслуживающим внимания является изучение (ействия нового регуляторного нюкомолекулярного белка с адгезивными свойствами, юлученного из сыворотки крови быка и человека в 1982 г. Ямсковой BJI и Резниковой Л.М и получившего название Адгелон (BII Ямскова с соавт. 1984, 1985). Адгелон шляется эффективным средством лечения ряда заболеваний желудочно-кишечного ракта путем воздействия на регенерацию его слизистой (НА. Ямсков с соавт., 2000). Сообщается о положительных результатах клинического применения Адгелона в общей ревматологии при лечении разнообразных травм и переломов конечностей и терапии равматически поврежденных суставов (А.С. Неверкович, 1998). Препарат «Адгелон-

гель» положительно влияет на восстановление повреждений кожных покровов, в тс числе при ожоговой болезни и пролежнях (ИА. Ямсков с соавт., 2000). Кроме того, эк препарат оказывает стимулирующее действие на репаративные процессы в коже после < лучевого поражения. По мнению этих авторов, применение Адгелона может бьп полезным в реабилитационном периоде после инфаркта миокарда.

В офтальмологической практике Ддгелон для лечения заболеваний глаз I применялся, но употреблялся в качестве компонента среды для консервации донсрскс роговицы (А.А, Каспаров с соавт., 2000).

Основываясь на данных о благоприятном влиянии Адгелона на процесс регенерации тканей и учитывая необходимость совершенствования способов лечеш последствий травм роговиц ы, в настоящей работе была поставлена следующая цель:

Цель исследования:

Экспериментально и клинически изучить действие препарата Адгелон I восстановительные процессы в роговой оболочке глаза после различных ввдов < травматического поражения.

Задачи исследования:

1. Оценить биологическую безвредность и специфическую активность Адгелот с целью последующего применения препарата для лечения травм роговицы эксперименте и клинике.

2. Изучить фармакологическую эффективность Адгелона в экспериментально исследовании на моделях торлидной эрозии, проникающего ранения и химически ожога.

3. Оценить в эксперименте воздействие Адгелона на восстановительнь процессы в роговице после проникающего ранения и химического ожога на оснст данных морфологического исследования.

4. Изучить фармако-тералевтическую эффективность Адгелона П£ посггравматичееких состояниях роговой оболочки глаза человека

Научная новизна:

1. Впервые экспериментально обоснована возможность применения ново! отечественного препарата Адгелон в качестве лечебного средства в тераш травматических поражений роговицы.

2. Впервые в эксперименте установлена терапевтическая эффективность гестного лечения путем инсталляций препарата Адгелон при вялотекущей субтотальной розии роговицы, проникающем ранении и тяжелом химическом ожоге. Получены овые данные о значительной стимуляции Адгелоном восстановительных процессов в оговой оболочке глаза при указанных травматических поражениях.

3. Впервые для применения в офтальмологической практике разработан и боснован метод консервативной коррекции посттравматических состояний роговицы в анние сроки при механической и химической вялотекущей эрозиях, прободном ранении

химическом ожоге, эффективность которого подтверждена проведенными линическими исследованиями.

Теоретическая в практическая значимость работы:

1. Экспериментально установлено, что Адгелон обладает безвредностью, а также пецифической активностью в отношении восстановительных процессов в роговице осле разных видов ее травматического поражения.

2. Показано, что местное применение Адгелона в виде глазных капель при оспроизведении на роговице экспериментальных животных эрозий, проникающего анения и химического ожога оказывает выраженный терапевтический эффект с ормализацией ее строения в зоне повреждения.

3. Разработанный метод консервативного лечения Адгелоном способствует окращеншо длительности, облегчению тяжести течения посттравматических состояний оговицы, предотвращает развитие осложнений и оптимизирует исходы повреждений паза.

4. Предложенные на основании экспериментальных данных рекомендации по рименению препарата Адгелон в комплексной терапии эрозий, проникающих ранений химических ожогов роговицы подтверждены результатами клинических исследований.

5. Проведенное экспериментально-клиническое исследование биологического ействия нового регуляторного адгезивного белка Адгелона указывает, с одной стороны, а его важную роль в организме, а с другой стороны, расширяет круг его практического ечебного применения в медицине, в частности, в офтальмологии.

Основные положения, выносимые ва защиту:

1. Новый регуляторный адгезивный белок Адгелон безвреден и специфически

активен по отношению к восстановительным процессам в роговице экспериментальнь животных после различных травматических поражений (эрозии, проникающее ранени химический ожог).

2. Адгеяон, применяемый в виде глазных капель на различны экспериментальных моделях травм роговой оболочки, является эффективны универсальным лечебным средством, оказывающим в короткие сроки положительно влияние на течение восстановительных процессов в роговице.

3. Препарат Адгеяон способствует ^пированию воспалительной реакцш ускоряет эпителизацию раневой поверхности, предупреждает образование глубоки стромальных дефектов, что приводит к более быстрому и качественному, чем контроле, заживлению эпителия роговицы после ее повреждения.

4. Применение Ддгелона у пациентов для лечения посттравматических состояли роговицы по разработанной в экспериментальных исследованиях методике показало ег высокую эффективность.

Внедрение результатов работы.

Получен патент РФ № 2220687 «Офтальмологическое лекарственное средство способ лечения заболеваний и повреждений роговицы глаза» от 17.12.2001. Результат! работы внедрены в клиническую практику Московского НИИ глазных болезней ю Гельмгольца. Глазные капли «Адгеяон» производятся ЗАО ПП «Эндо-Фарм-А» продаются в аптечной сети г. Москвы.

Апробация работы.

Основные положения диссертационной работы доложены на конференци «Клиника и лечение повреждений глаз при экстремальных и криминальных ситуациях (Суздаль, 1993), на I и П Международных симпозиумах по экспериментальной клинической глазной фармакологии и фармацевтике (Женева, 1995, Мюнхен, 1997), и конференции в честь 90-летия Н.А. Пучковской (Одесса, 1998), на конференци «Эндогенные соединения в морфогенезе и восстановительных процессах интегрирующие и регуляторные системы» (Москва, 2000), на X Российско национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2002), на межотделенческо конференции в МНИИ ГБ им. Гельмгольца (2003).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 23 статьи (в том числе 2 в иностранной печати).

Объем и структура работы:

Работа изложена на 269 страницах машинописи; иллюстрирована 14 таблицами и 48 рисунками, которые содержат 36 фотографий, 11 графиков, 6 гистограмм. Список использованной литературы включает 389 источников (297 отечественных и 92 иностранных). Диссертация состоит го введения, четырех глав включающих обзор литературы, глав содержащих данные собственных исследований и их обсуждение, выводов, практических рекомендаций и списка использованной литературы.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Общая характеристика материалов и методов исследования

В соответствии с поставленной целью и задачами работы проведены экспериментальные исследования на 152-х кроликах (304 глаза) породы «Шиншилла» (средняя масса животных 2,5 кг), включающие 6 экспериментальных серий: 1-Ш серии по исследованию местной и общей толерантности к Адгелону и его специфической активности; 1У-У1 серии по изучению действия Адгелона на заживление травматических поражений роговицы различного генеза Клинические наблюдения проведе!ш на 59-и больных [66 глаз] с различными посттравматическими состояниями роговицы, составившими Ш группы исследования: 1-31 больной [38 глаз] со свежими ожогами I-Ш степени тяжести (сроки поступления в стационар или амбулаторию - от 3 час до 3 нед. после получения ожоговой травмы); П - 16 больных [16 глаз] после сквозной, субтотальной кератопластики по поводу ожогового бельма ПНУ категории с задержкой эпителизации трансплантата более 72 часов; Ш - 12 больных [12 глаз] с посттравматической рецидивирующей эрозией.

Препарат Адгелон, полученный из сывороточного белка крови быка, является внеклеточным низкомолекулярным (25-27 кДа) гликопротеином с высокой степенью гликозилирования (50 %) и обладает большой устойчивостью к ферментной и термической денатурации. 1 мл препарата Адгелона содержит 10 ~13 г сывороточного гликопротеина, растворенного в физиологическом растворе.

В рамках доклинического изучения нового вещества были проведен исследования и экспериментально-фармакологические испытания Адгелона I животных, регламентированные ФК РФ (В.П. Ямсхова с соавт., 1984-1992 г.г.). Оцени безвредности вещества, основанная на данных об его общей, острой и хроническс токсичности, аллергенности и иммунотоксичности (эксперименталын фармакологическая экспертиза) была дана в МНТК "Микрохирургия глаза" МГП-Ю1 (рук. работ - д.б.н. Чаброва Л.С., 1992, 1994 г. г.), в результате которой было сделан заключение об отсутствии у Адгелона отрицательных свойств.

Толерантность и специфическая активность Адгелона были изучены нами отделе травматологии, реконструктивной хирургии и глазного протезирования (ру проф. Р.А. Гундорова) МНИИ ГБ им. Гельмгольца (директор проф. А.М. Южаков) и институте Биологии развития им. ПК. Кольцова РАН (директор академик РАЬ профессор КГ. Хрущев).

Методы исследования толерантности и специфической активности Адгелона (1-Ш экспериментальные серии)

Толерантность испытываемого фармакояогаческого средства (ФС подразделяется на местную (в данном случае глаза) и общую, относящуюся к организм животного в целом. В местной толерантности органа зрения выделяют: глазну) переносимость, влияние ФС на тканевые структуры глаза, влияние на некоторые ет функции (ширину зрачка и внутриглазное давление [ВГД]).

Эксперимент по изучению толерантности состоял из двух серий со срокам проведения их в течение 2-х недель и 3-х месяцев.

ВI серии исследования осуществляли на 8 кроликах (16 глаз). Животные был разделены на две равные группы: контрольную и опьпную, в первой из них производил инсталляции плацебо, во второй - Адгелона в оба глаза по 50 мкл (2 капли) 6 раз в день течение 14 суток. Такая процедура инсталляций Адгелона и плацебо проводила* одинаково во всех сериях экспериментов (кроме II серии).

Во П серии исследовали глаза 8 кроликов (16 глаз), которые составили да равные группы. Животным контрольной и опытной групп инсталлировали плацебо Адгеяон 3 раза в день в течение 3-х месяцев.

При определении толерантности Адгелона у животных изучали его прижизненную (местную) переносимость тканями глаза при боковом фокальном освещении глаза и биомикроскопии с помощью щелевой лампы и флюоресцеинового теста (ФТ) [2% раствор флюоресцеин-натрия]. По окончании опыта исследовали морфологию тканей переднего и заднего отделов глаза гистологическими методами.

Общий осмотр глаза при боковом фокальном освещении и его биомикроскопию производили ежедневно в одно и тоже время суток в течение 2-х недель от начала каждой из обеих серий экспериментов, а при хроническом опыте до 3-х месяцев 2 раза в неделю, начиная с 14-х суток эксперимента. У всех кроликов I серии в первый и последний день исследования производили пупшшометрию с помощью калиброметра и путем сопоставления со шкалой стандартных диаметров. ВГД измеряли 10-и граммовым тонометром Маклакова сразу же после утренних и вечерних инсталляций плацебо и Адгелона в первый и в течение последних 3-х дней эксперимента у всех животных обеих групп I серии опытов. Помимо указанных офтальмологических методов изучения переносимости Адгелона, осуществляли постоянное наблюдение за состоянием, поведением и массой тела животных, участвующее в опытах.

В Ш-й серии экспериментов изучали течение восстановительных процессов в роговице глаза кроликов при воспроизведении в ней эрозии и влияние на нее глазных капель Адгелон. Тотальную механическую эрозию роговицы на обоих глазах кроликов (8 животных, 16 глаз) моделировали по методике Ю.Ф. Майчука (1997). Животным контрольной и опытной групп инсталлировали плацебо и Адгелон соответственно, в течение 10 суток. Для профилактики бактериального заражения раны в этой серии, как и во всех остальных, использовали 0Д5% раствор левомицетина по 2 капли 3 раза в день на протяжении всего эксперимента. Наблюдения глаз животных производили, начиная с 1-х суток опыта (через 6 час после возникновения эрозии), далее ежедневно в одно и то же время суток до 10-го дня эксперимента. При этом использовали боковое фокальное освещение и биомикроскопию с проведением ФТ. У животных определяли динамику эпителизации эрозий и регистрировали момент ее завершения.

Методы экспериментально-клинического исследования травматических поражений роговицы и действия на них Адгелона (IV-VI экспериментальные серии)

В IV экспериментальной серии (20 кроликов, 40 глаз) для воспроизведет торпидной эрозии роговицы использовали 99% раствор геотанола (C7Hi60) [1-Heptane фирма Sigma Chemical CO., StLouis, USA] по методике GA. Paterson (1994).

Оценку динамики заживления эрозии роговицы производили 3 раза в день помощью биомикроскопии и ФТ, спустя 3,6,12,24 (1-е сутки), 30,36,48 (2-е сутки), 5' 60,72 (3-е сутки), 78, 84,96 (4-е сутки), 120 (5-е сутки), 144 (6-е сутки), 168 (7-е сутки 192 (8-е сутки), 216 (9-е сутки) и 240 часов (10-е сутки) после воспроизведения эрози Калиброметром, встроенным в окуляр микроскопа, измеряли наименьший и наиболыпи диаметры эрозии. Размеры средней площади (S) эрозии роговицы (СПЭ) определяли и формуле: S=77r2, где г- средний радиус.

Воспроизведение проникающего ранения роговицы (V экспериментальна серия) осуществляли по способу Р.Т. Исаевой (1981).

Эта серия подразделялась на две подсерии (I и П), в одной из когорь производилось клиническое наблюдение за поврежденными глазами, а в другой - к морфологическое исследование. Каждая подсерия состояла из двух групп животны: контрольной (а) и опытной (б), в которой животным закапывали Адгеяон сразу же поа нанесения ранения. Подсерия I поставлена на 30 кроликах (60 глаз). Животным трупп 1а инсталлировали плацебо в течение 14 суток после нанесения ранения, исюпоче ночной период, а животным группы 16 - Ддгелон.

Осмотр животных осуществляли ежедневно 3 раза в день, начиная с перви суток эксперимента [то есть через 6,12,24 (1-е сутки); 30,36,48 (2-е супси); 54,60,72 (1 сутки);78, 84, 96(4-сугки); 108, 114, 120 часов (5-сугки) и т.д.] по десятые сутки [24 часов] после нанесения на роговицу проникающего ранения. Начиная с 11-го и по 30-день эксперимента осмотр делали 1 раз в сутки.

Экспериментально-клиническое исследование глаза проводили с помощь; следующих диагностических методов: осмотр с боковым фокальным освещение! биомикроскопия под щелевой лампой и операционным микроскопом фирмы «Optor (Германия) с использованием ФТ. Фоторегисграцшо проводили с помощы

фотоаппарата «Leika» (Германия).

Основными показателями раневого процесса в роговице служили: воспалительная реакция, наличие диастаза краев раны, эпителизация раневой зоверхносш, восстановление полноценной передней камеры глаза, посттравматическая перифокальная) инфильтрация роговицы вокруг зоны ранения, ретрокорнеалышй зыпот фибрина и гипопион.

В подсерию П включены 24 кролика - 48 глаз (составивших контрольную pía] и эпытную [Пб] группы), которым через 1,3,7,14 и 30 суток после проникающего ранения i лечения Адгелоном (Пб) было проведено морфологическое исследование глаз.

Для морфологического исследования тканей глаза животных умерщвляли и тосле стандартной гистологической обработки с помощью светового микроскопа троводили качественный морфологический анализ структур переднего отрезка глаза, >бращая при этом внимание на область повреждения роговицы. Гистологические срезы жаней глаза также подвергали морфометрии с помощью полуавтоматического шализатора изображения ASM-68 (фирма «Leitz», Австрия) и по методике Р.Т. Исаевой 1981) определяли размеры следующих компонентов раневого канала: диастаза, (питеяиального пласта, фибринозных масс, клеточного пролиферата. Изучение доводили в отделе патологической анатомии и гистологии глаза МНИИ глазных юлезней им. Гельмгольца - руководитель проф. И.П. Хорошилова-Маслова консультанты проф. И.П. Хорошилова-Маслова и к.б.н. JIB. Илаговская).

После воспроизведения химического ожога роговицы (VI серия исследований) оучали эффективность использования Адгелона для лечения данного патологического »стояния. Эта серия экспериментальных исследований подразделялась на две подсерии I и П), в одной из которых производилось клиническое наблюдение за обожженными •лазами, а в другой - их морфологическое исследование. Каждая подсерия состояла из рвух групп животных: контрольной (а) и опытной (б), в которой животным шстиллировали Адгелон сразу же после нанесения на роговицу химического ожога.

Подсерия I поставлена на 30 кроликах (60 глаз). На центр роговицы помещали [ггамп из фильтровальной бумаги (Д = 8 мм), смоченный в 10% растворе NaOH с кспозицией 20 секунд. Животным 1а группы инсталлировали плацебо, 16 - Адгелон, в ечение 14 суток после нанесения на роговицу ожога.

Экспфиментально-клиническое изучение глаз подопытных животны осуществляли ежедневно в течение 30 дней. Кроме того, учитывая волнообразный фазовый характер течения ожоговой болезни, нами были выделены отдельны контрольные сроки исследования: через 4 часа после химического воздействия н роговицу и на 1,3,7,14,30 сутки опыта.

Для оценки лечебного действия Адгелона применяли эксперимеигальнс клинические и морфологические методы, изложенные выше. Показателям терапевтической эффективности Адгелона служили: динамика и выраженност воспалительной реакции в переднем отрезке глаза, динамика заживления эрозий п данным определения их среднего диаметра (СДЭ), степень изъязвления роговиць динамика и выраженность васкуляризации, степень помутнения роговицы в баллах п шкале Войно-Ясенецкого.

В годсерию П были включены 24 кролика - 48 глаз (составивших котрольнут [Па] и опытную [Пб] группы), которым через 1, 3, 7, 14 и 30 суток после накесени химического ожога проводили морфологическое исследование. Гистологаческо исследование дифференцированно проводили в 3-х зонах поражения роговицы: 1) зон эпицентра (центральной зоне ожога), находящейся в границах неюсредственног контакта поверхности роговицы с щелочью; 2) переходной (парацешральной) зоне, которой обожженная часть роговицы переходит в окружающую ее непораженную часл 3) периферической (паралимбальной) зоне - зоне, окружающей ожог.

Методы исследования терапевтической эффективности действия глазных капель Адгелон в клинике

В данном разделе диссертации представлен материал об апробации препарат Адгелон, проведенной впервые в офтальмологической практике на ограниченно! контингенте больных. Пациенты, страдающие рядом травматических повреждений глаз или имеющие их осложнения, обследовались и получали лечение на базе стационарног и амбулаторного подразделений отдела травматологии, реконструктивной хирургии глазного протезирования (рук. отд. проф. РА. Гундорова) МНИИ глазных болезней и\ Гельмгольца.

Пациенты 1-й и П-й групп помимо традиционного лечения получали Адгелон

иде инсталляций по 2 капли (50 мкл) 6 раз в день в течение 14 суток. В основной одгруппе больных с посттравматической рецидивирующей эрозией (Ш группа) лечение ро водил ось только Адгелоном (в те же сроки, в том же режиме), в контрольной -ольные продолжали лечиться обычными средствами. В 1-й и Ш-й группах исследуемых, кдгелон начинали закапывать с первого дня (в первые часы) обращения больного к нам а помощью, больным П-й серии - не ранее чем через 72 часа после проведения ератопластики при наличии у них признаков замедленной репарации эпителия оговицы.

Критериями клинической эффективности Адгелона у больных являлись ледукмцие показатели: жалобы (боль в глазу, роговичный синдром, чувство инородного ела) и их длительность в сутках; длительность периода воспаления глаза в сутках, ризнаками воспаления служили: отделяемое в конъюнкгавальной полости, отек век и оньюнкгивы, инъекция конъюнктивы, отек стромы роговицы в пораженной и не ораженной областях, десцемитит, ирит (у больных с ожогами); количество случаев септического (токсического) выпота фибрина в переднюю камеру глаза в виде ипопиона, экссудагивной взвеси или пленок фибрина на поверхности радужки или в бласти зрачка при ожогах; завершение эютгелизации роговицы; количество различных ефектов стромы: поверхностных, глубоких изъязвлений, десцеметоцеле, перфораций оговицы (у больных с ожогами); острота зрения спустя 3 мес после начала заболевания { больных с ожогами и кератопластикой). Дополнительно у больных с ератоппастикой: завершение эпителизации трансплантата, сроки формирования омпактного рубца между донорским трансплантатом и роговицей реципиента, число лучаев прозрачного, полупрозрачного и мутного приживления роговичного рансплантата. Дополнительно у больных с посттравматической рецидивирующей оозией: количество больных с посттравматической рецидивирующей эрозией роговицы, которых произошла реституция эпителиального слоя роговицы.

Методы офтальмологического обследования. Офтальмологическое обследование ключапо: 1) определение остроты зрения по общепринятой методике с коррекцией по аблице Головина-Сивцева, при отсутствии форменного (предметного) зрения сследовалась свегопроекция; 2) осмотр при боковом (фокальном) освещении; 3) иомикроскошпо с помощью щелевой лампы (фирма «Орйэп», Германия) в проходящем

свете и в темном поле с применением ФТ и фоторегистрации; 4) офтальмоскопию прямом или обратном виде с помощью зеркального и электроофтальмоскопа (БМО ' 42, Россия), которая проводилась больным, оптические среды которых был прозрачными или полупрозрачными с целью исключения патологических изменений г глазном дне; 5) исследование офтальмогонуса пальпаторно. Полученные в работ данные обработаны методами вариационной и альтернативной статистики определением достоверности различий по критерию Стьюдента на ШМ PC совместимо компьютере с использованием программ Stat-Sak (v. 2.14), Harvard Graphics (v. 3.1) Microsoft Power Point (v. 7.0).

Результаты собственных исследований

Экспериментальные исследования

Изучение толерантности (переносимости) и специфической активности Адгелона (I - III экспериментальные серии)

Глазная переносимость Адгелона Наблюдение за состоянием конъюнктивы гла: при инсталляциях кроликам Адгелона на протяжении как 2-х недель, так и 3-х месяце не выявило раздражающего действия препарата на нее: не было отмечено ни одам случая расширения сосудов, отека слизистой глаза (хемоза), а также случае отделяемого (слизистого, слизисто-шойного) из конъюнкшвальной полости все подопытных кроликов. При биомикроскопии не было также обнаружено каких-либ признаков токсико-аллергаческого воздействия Адгелона и на роговицу глаза.

Состояние тканей глаза при воздействии Адгелоном. Данные морфолошческот изучения тканей глаза кроликов свидетельствуют об отсутствии в них структурны изменений после инсталляций на роговицу Адгелона как в течение 2-х недель, так и 3-месяцев его применения.

Ширина зрачка при воздействии Адгелоном. На 14-й день ширина зрачка контрольной и опытной ipynnax соответственно составила 9,4±0,6 мм и 9,6±0,8 м (р>0,05). Отсутствие достоверных огличий в этом показателе при воздействи Адгелоном от контроля говорит о сохранении нормальной функции зрачка в условия опыта

Внутриглазное давление при воздействии Адгелоном. Величина внутриглазнох давления на 12-й, 13-й, 14-й день воздействия Адгелоном в среднем равнялась 15,9±0,

мм. рт. ст., а у контрольных животных в эти сроки ольгга ее значение составляло 16,1+1,2 мм. рт. ст. (р>0,05). Таким образом, Дцгелон существенно не изменял этот параметр состояния глаза. Местной и общей толерантности к Адгелону у кроликов получавших препарат не обнаружено.

На модели тотальной механической эрозии роговицы было выявлено, что под действием Адгелона происходит сокращение сроков эпигелизации (на 25% или в 13 раза быстрее, чем в контроле), что свидетельствует об его выраженном действии на рост эпителия роговицы (рис. 1).

Рис. 1. Динамика эпигелизации роговицы в экспериментальных группах после нанесения тотальной механической эрозии (Ш серия)

Изучение действия Адгелоиа па заживление травматических поражений роговицы.

Репаративная регенерация в роговице после нанесения химической субтогальной эрозии и применения Адгелона (IV экспериментальная серия)

Под влиянием Адгелона ускоряются процессы регенерации эпителия роговицы

кроликов после нанесения субтотальной торпидной эрозии. Различия между

контрольной и опытной фуппами обнаруживаются уже через 24 часа эксперимента. В

этих условиях, сроки заживления эрозии сокращаются на 74% (в 2,8 раза быстрее)

(рис. 2, 3) и по времени раньше (на 25% по сравнению с контролем) происходит

купирование признаков воспалительной реакции (в 1,3 раза быстрее). В случае

торпидной эрозии эпителизация роговицы происходит быстрее, более чем в 2 раза, пс сравнению с ее эпителизацией после тотальной механической эрозии (рис. 1,2).

1X0.06

Рис. 2. Динамика заживления эпителиальных дефектов роговицы в экспериментальных группах (IV серия)

кол ичество глаз

20

18161412 -10 -8642

0

□опыт В контроль

—-3-е

сутки

-сутк I

4-е 5-е 6-е 7-е 8-е 9-е сутки сутки сутки сутки сутки сутки

48 54 60 72 78 84 96 120 144 168 часы

192 216

Рис. 3. Количество глаз с завершенной эпителизацией роговицы в зависимости от сроков исследования в экспериментальных группах (IV серия)

Изучение действия Адгелона на заживление проникающего ранения роговицы (V экспериментальная серия)

Данные о состоянии глаза при этой травме представлены в табл. 1. Различия в степени выраженности общей воспалительной реакции и регенерации ткани роговицы впервые обнаружены на 3-й сутки эксперимента, но эта разница в дальнейшем прогрессивно нарастала, достигая максимума к 7-м суткам опыта.

Таблица 1. Показатели состояния таза после проникающего ранения роговицы в контрольной и опытной группах (V серия)

ПОКАЗАТЕЛИ КОНТРОЛЬ опт р

М + т

Купирование воспаления (в часах) 177,3±1,4 98,1±0,5 <0,05

Наличие диастаза (в часах) 70,9Ь0,2 35,4*0,1 <0,05

Восстановление передней камеры (в часах) 86,б±0,3 44,8±0,4 <0,05

Эпителизация раны (в часах) 97,1±0,2 52Д±0,8 <0,05

Инфильтрация роговицы (в часах) 229,5±0,6 125,2±0,4 <0,05

Ретрокорнеальный выпот фибрина (число глаз) 6 2 -

Гипопион (число глаз) 2 0 -

Формирование компактного рубца (число глаз) 5 21 -

Васкуляризация роговицы (число глаз) 7 2 -

На рис. 4 схематично показана морфологическая структура раневого канала в различные сроки эксперимента, позволяющая выделить некоторые особенности воздействия Адгелона на восстановительные процессы в роговице после ее прободного ранения. У опытных животных восстановление эпителиального слоя по сравнению с контролем происходит в 1,9 раза быстрее. Под влиянием Адгелона происходило не только усиление эпигелизации, но и стимуляция восстановления эндотелиального :лоя в роговице, что было выявлено на 7-е сутки в опытной группе. К этому сроку эндотелий целиком покрывает заднюю поверхность рубца, в то время как в контроле на эольшей части раневого дефекта эндотелий отсутствовал и здесь наблюдались только небольшие группы его клеток.

Завершение восстановления эндотелия роговицы при проникающем ранении «утя и наступает позже, чем в ее эпителии (разница составляет 5 суток), но оно также тодвержсно стимулирующему влиянию Адгелона. Быстрое формирование

эндотелиального слоя предупреждает усиленное разрастание рубцовой ткани I способствует более совершенному процессу ее реконструкции, завершающейся щи лечении Адгелоном в среднем к 30 дню после ранения роговицы.

Ш фибрин Шпролиферат □ эпителий □диаста:

тоо%

80%

30%

60%

40% ■■

20%

0%

¡®Й

яа м

14 30

60% -I

40%--

20%

II

I

■

ч

Б 1

14

30

СУТКИ

Рис. 4. Схематическая структура раневого канала в виде соотношения (в %) составляющих его компонентов в различные сроки исследования. А - контроль, Б - опыт (V серия)

Изучение действия Адгелона на заживление роговицы после ее химического ожога (VI экспериментальная серия)

Данные о течении ожогового процесса в роговице кроликов в опыте и контрол< представлены в таблицах 2,3. В течение 1-х суток после альтерации щелочью наблюдал! классическую картину тяжелого химического ожога, но видимых различий 1 контрольной и опытной группах не наблюдалось. Изучение морфологии роговиць показало, что в это время опыта в обеих группах животных помимо тотального некроз; эпителия на месте ожога наблюдалось разрушение коллагеновых пластин ] поверхностных слоях соромы, исчезновение кератоцитов в ее центральных отделах I деструкция эндотелия. И только в периферической - отмечались редкш кератоциш. Через 3 дня после ожоговой травмы интенсивность воспалительной реакции

Таблица 2. Клинические проявления воспали- ТаблицаЗ. Распределение исходов тельной реакции в исследуемых группах (VI серия)_ ожогового процесса по глубине

средние сроки купи- изъязвления роговицы в иссле-

Симптомы воспаления рования симптомов р<0,05 дованных группах наЗО-е сутки

воспаления, сутки эксперимента (VI серия)

контроль опыт Дефект Количество глаз

гнойное отделяемое 6,5 ±0,9 4,4 ±1, + роговицы контроль опьгг

слизистое отделяемое 17,1 ±1,6 12,1 ±1,6 + Отсутствует 4 18

хемоз 5,4 ±0,6 4,9 ±0,4 - Эрозия 16 9

гиперемия конъюнктивы 19,5 ± ОД 15,1 ±0,3 + Поверхностный 4 2

перифокальный отек Глубокий 3 1

роговицы 28,0 ±1,9 17,0 ±0,3 + Десцеметоцеле 2 0

экссудация в передней Перфорация 1 0

камере, случаи 5 4 -

Степень васкуляризации

Сутки эксперимента

Рис. 5. Дииамика васкуляризации роговицы в кошрольной и опытной группах (VI серия)

в глазу у животных обеих групп была менее выраженной, но общая морфология роговицы у них в целом мало отличалась от предыдущего срока. Через 7-14 дней воспалительная реакция уменьшалась в глазах животных обеих групп, но полной регенерации эпителия не наблюдалось, особенно в контроле, где происходило прогрессирование деструктивных процессов и усиление васкуляризации (рис. 5). Это

подтвердило и морфологическое исследование роговицы на 30 день, когда под влияние Адгелона происходит активация фибробластических процессов с укрепление структурного каркаса роговичной ткани, препятствующая ее разрушению, что особеш убедительно показали данные морфометрического исследования роговицы.

В целом Адгелон ускорял ход восстановительных процессов в обожженнс роговице в 1,9 раза, в связи с чем у опытных животных число и характер осложнен* были менее выраженными. Применение Адгелона стимулировало развит! фибробластических процессов в роговичной ткани, укрепление ее структурного карка и, как следствие, препятствовало разрушению, изъязвлению, перфорации роговицы, также уменьшало патологическую васкуляризацию (табл. 3, рис. 5,6).

Не только в контрольной, но и в опытной группе к концу эксперимента I отмечено полного завершения регенерации эпителия, хотя скорость эпителизации опытных животных была втрое выше, чем у контрольных (рис. 6). В обожженнс роговице к концу эксперимента не происходило полного восстановления моносл< эндотелиальных клеток.

ШОпыт И Контроль

6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 Сутки эксперимента

Рис. 6. Динамика эпителизации роговицы в контрольной и опытной группах (VI серия)

По данным морфометрии обожженной роговицы установлено существование пространственного градиента ее толщины в центральной, переходной и периферической зонах. Пространственный градиент впервые выявляется на 3-й сутки в обеих группах животных. В дальнейшем, фадиентные изменения толщины роговицы остаются и даже усиливаются. По мере удлинения опьгга пространственный градиент у животных, получавших Ддгелон, становится все менее выраженным, что говорит о торможении деструктивных процессов в эпителии и строме роговицы. У контрольных животных этот градиент, наоборот, в течение опыта приобретает все большую степень выраженности. Кроме того, наблюдается различный характер изменений в течение опыта в толщине обожженной роговицы в ее разных зонах. Это указывает на то, что данный параметр характеризуется связанными между собой пространственными и временными изменениями.

Клинические исследования

В 1-й группе больных с ожогом роговицы лечение Адгелоном приводило к улучшению практически всех, изученных нами, клинических признаков ожоговой эолезни глаза Наиболее быстро проходили болевые ощущения, чувство инородного тела в глазу и роговичный синдром. При сравнении больных основной и контрольной подгрупп стимулирующее действие Адгелона было особенно выражено в качестве шшвления ожогового дефекта роговицы (интенсивность эпителизации, изъязвления и перфорации), а также в отсутствии рецидивов эрозий в отдаленном периоде.

Во П-й группе применение Адгелона у больных после сквозной кератопластики вызывало статистически достоверную разницу в скорости эпителизации трансплантата и Армирования послеоперационного рубца У больных получавших Адгелон скорость эпителизации трансплантата была выше в 1,8 раза, эпителий был прозрачным и Злестящим, а фиброзное кольцо через 3 месяца было более нежным и тонким по сравнению с контрольной группой.

В Ш-й группе больных с посттравматической рецидивирующей эрозией под злиянием Адгелона восстановление эпителия роговицы начиналось уже через 2 дня тосте начала лечения, осуществлялось значительно быстрее, чем у контрольных Зольных. Наиболее демонстративны результаты терапии Адгелоном на 13-15 день. В это зремя эпителиальные дефекты в контроле выявлялись в 2,5-5 раз чаще, чем в основной

подгруппе. Новообразованный эпителий у больных, леченных Адгелоном, б! прозрачным и без тенденции к десквамации. Обследование через 3 месяца пос лечения Адгелоном, обнаружило отсутствие рецидивов эрозии в основной подгрут тогда как в контрольной они встречались в 50% случаев.

У всех обследованных нами больных, которым проводились инстиллящ Адгелона, не обнаруживалось каких-либо побочных явлений или непереносимости это препарата.

Заключение

Полученные в настоящей работе данные экспериментальных и клиничесю наблюдений действия препарата Адгелон свидетельствуют о нем, как о достаточ! эффективном лекарственном средстве, которое вызывает выраженную стимуляци репаративных процессов при различных травматических поражениях роговиц Достоинством этого препарата является его положительное влияние на совокупное многих патологических симптомокомплексов, возникающих при механической ш ожоговой травме роговицы. К ним можно отнести: снижение выраженное воспалительной реакции, сокращение сроков эпителизации и, следовательно, чис. изъязвлений и перфораций, развитие помутнений роговицы меньшей плотност торможение процессов грубой васкуляризации, образование компактного и, в то а время, нежного рубца.

В результате проведенных нами доклинических и 01раниченных клиничесю испытаний Адлеяона был представлен отчет в ФК МЗ РФ, на основе которого бьц разрешены обязательные клинические испытания, результаты которых послужи; основанием для присвоения Адгелону наименования лекарственного средства соответствующим регистрационным номером (№ Р №000070/01-2000, от 23.10.2000).

ВЫВОДЫ:

1. В эксперименте доказано, что лекарственный препарат Адгелон, примененнь в виде глазных капель, характеризуется переносимостью (общей и места толерантностью к нему) и специфической активностью, проявляющейся в стимулящ эпителизации механической тотальной эрозии роговицы.

2. Восстановительный процесс, в роговице глаза кроликов после торпидне

субтотальной эрозии под воздействием Адгелона ускоряется в 2 раза быстрее по сравнению с контролем.

3. Установлено, что применение Адгелона при проникающем ранении роговицы у экспериментальных животных ускоряет ее восстановление по отношению к контролю в 2,4 раза Это связано с уменьшением сроков завершения воспалительной реакции (в 1,8 раза), с более ранней ликвидацией диастаза краев раны (в 2 раза) и восстановлением передней камеры, ускорением эпителизации раны (в 1,9 раза) и более ранним формированием рубцовой ткани (в 4,2 раза). Морфологическое исследование выявило, что восстановление эндотелия роговицы при проникающем ранении под действием Адгелона начинается позже, чем в ее эпителии, но завершается быстрее в 2 раза по сравнению с контролем.

4. Определено, что после тяжелого химического ожога под влиянием Адгелона восстановительный процесс в роговице глаза кроликов ускоряется по сравнению с контролем в 1,9 раза.

- Более раннее начало и интенсивность эпителизации ожогового дефекта (в 3 эаза), по отношению к контролю, приводит к ослаблению воспалительного процесса, жижению степени васкуляризации и деструктивных процессов в обожженной роговице.

- Морфологическими исследованиями подтверждено, что под влиянием Адгелона в роговице активизируются фибробластические процессы, укрепляется ггруктурный каркас роговичной ткани, снижается степень васкуляризац ии роговицы, что трешпствует ее разрушению, изъязвлению и перфорации.

- Морфометрическое изучение толщины роговицы в контроле и опыте выявило ваимосвязанную временную (на протяжении опыта) и пространственную (по зонам юговицы) динамику изменений этого показателя, свидетельствующую о юложигельном влиянии Адгелона

5. Анализ клинических исследований показал, что применение Адгелона в сомплексной терапии в ранние сроки ожоговой болезни глаз и после сквозной сератопластики с замедленной эпигелизацией приводит к ускорению репаративных гроцессов в эпителии роговицы, сокращает сроки реконвалесценции и число юложнений. Инсталляции препарата ускоряют формирование послеоперационного |убца Адгелон значительно стимулирует заживление посттравматических эрозий

роговицы и предотвращает их рецидивы.

Глазные капли Адгелона хорошо переносятся больными, не обнаружен« токсического или аллергического действия препарата.

6. Полученные результаты экспериментально-клинического исследованш свидетельствуют о высокой эффективности препарата Адгелон в стимуляцм репаративных процессов в роговице и о перспективности его применения в широко! офтальмологической практике.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Результаты проведенных экспериментальных исследований указывают ш новые пути и возможности восстановительной терапии механических и химически; эрозий роговицы, проникающих ранений и химических ожогов глаз.

2. Для уменьшения периода реконвалесценции пациентов с вялотекущим! эрозиями роговицы, вследствие её различных повреждений (механических, термических химических, смешанных) либо операционных вмешательств (сквозная кератопластика) ускорения процессов эпителизации и предупреждения стромальных дефектов рекомендуется локальное использование глазной лекарственной формы Адгелона, в нид< инсталляций, в течение всего периода, перснстенции эпителиального дефекта.

3. С целью сокращения сроков лечения, патогенетически ориентированно! терапии и улучшения исходов проникающих ранений глаз, в комплекс лечебны; мероприятий рекомендуется включить местное применение Адгелона в виде глазньп капель в первые две недели после повреждения роговицы.

4. При лечении свежих химических ожогов роговой оболочки I, П и Ш степей тяжести рекомендуется местная терапия пораженных тканей путем инсталляции глазны: капель Адгелона в течение первых 14 суток для коррекции эрозивных и деструктивны: процессов в эпителии и строме роговицы, профилактики ее перфораций, уменьшена воспалительной реакции и улучшения исходов заболевания.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Клиника и лечение больных с поражениями органа зрения отравляющим! веществами из газовых баллончиков и газовых пистолетов // Повреждения орган зрения: Материалы научно-пракгич. конф. - Суздаль, 1992. - С. 29—30. (соавл РАГундорова, ГГЛегриапшили).

2. К вопросу о лечении химических ожогов глаз // Клиника и лечение ювреждений глаз при экстремальных и криминальных ситуациях: Материалы научно-трактич.конф. - Суздаль, 1993.-С. 26—27 (соавт.ПетриашвилиГ.Г.).

3. Применение нового стимулятора репаративной регенерации «Адгелона» при жспериментальных ожогах роговицы // Травмы глаз: Сб. науч. трудов МНИИ ГБ им. "ельмгольца.—М., 1994.-С.26-28 (соавт. ЧенцоваЕБ.).

4. Новое средство профилактики осложнений травм глаза при катастрофах // Ъврежд. глаз при экстрем, ситуац.: Материалы научно-практич. конф. - М., 1995. -С. 142—143 (соавт. Гундорова РА, Ямскова В Л, Платовская Л.В.).

5. Применение Адгелона в лечении проникающих ранений роговицы в жсгтерименте // Веста, офгальмол. — 1997. - № 2. - С. 11-13. (соавт. Гундорова Р.А., Сорошилова-МасловаПП, ЯмсковаВЛ, Ченцова Е.В., Платовская ЛВ).

6. Клиническая апробация нового низкомолекулярного сывороточного [олипепщца при ожоговых и постгравматических повреждениях роговицы // Ожоги глаз I их последствия: Материалы научно-пракгач. конф. - М., 1997. - С. 19-21 (соавт. 1енцова Е.В.).

7. Влияние нового адгезивного препарата на восстановительные процессы в юговице при моделированных эрозиях // Там же, с. 32-34 (соавт. Гундорова РА, Генцова Е.В.).

8. Новые средства и возможности для оказания первой медицинской и врачебной юмощи при катастрофах на этапах эвакуации больным с поражением органа зрения // [линико-инструментальные и физические методы лечения: Материалы научно-пракгач. онф. -М., 1998. - С. 156-157 (соавт. Гундорова РА, Ченцова ЕВ., Капитонов ЮА, Гетриашвили Г.Г.).

9. Применение Адгелона в терапии рецидивирующей постгравматаческой эрозии оговицы // Там же, с. 157-158 (соавт. Ченцова ЕВ, Капитонов Ю А),

10. Экспериментальное исследование влияния Адгелона на процесс эпителизации оговицы // Тез. конф. в честь 90-летия НА Пучковской. - Одесса, 1998. - С. 386-388 х>авт. Гундорова Р.А., Ченцова ЕВ., Петриашвили ГГ.).

11. Особенности лечения ожоговой болезни глаз // Пособие для врачей. - М., 999. -10 с. (соавт. Ченцова Е.В., Капитонов Ю.А.).

12. Способ лечения химических ожогов глаз // Современные лазерные гхнологии в диагностике и лечении повреждений органа зрения и их последствий: 1атериалы научно-пракгач. конф. -М., 1999. - С. 134-135 (соавт. Капитонов ЮА, енцова ЕВ.).

13. Адгелон, глазные капли, перспективы применения в восстановительной фапии роговицы // Там же, с. 135-136 (соавт. Капитонов ЮА, Ченцова ЕВ.).

14. Новый фармакологический препарат Адгелон в офтальмологии // Эндогенные эединения в морфогенезе и восстановительных процессах - интегрирующие и ггуляторные системы (теория и практика): Тез. конф. посвящ. 275-летию Российской ¡садемии наук. -М., 1999. - С. 4-5 (соавт. Гундорова РА).

15. Применение нового фармакологического препарата Адгелон офтальмологии. // Онтогенез. - 2000. - т. 31, № 4. - С. 272-273 (соавт. Гундорова РJ Ченцова Е.В., Ямскова В.П., Капитонов Ю.А.).

16. Новый путь стимуляции восстановительных процессов в роговице Современные лазерные технологии в хирургическом лечении осколочных ранений гла и орбиты: Материалы научно-практич. конф. - М., 2001. - С. 154-155 (соавт. Гундоро РА, Ченцова EJB., Капитонов Ю.А).

17. Способ лечения адаптированных проникающих ранений роговицы // Там ж с. 155-157 (соавг. Хорошилова-Маслова ИЛ., Ченцова ЕВ., Капитонов Илатовская JI.B.).

18. Консервативная терапия в реабилитации больных с повреждениями oprai зрения // Веста, офтальмол. - 2002. - № 3. - С. 34-37 (соавт. Вериго EIL, Кузнецо: ИА, Орлова Е.Н., Капитонов Ю А).

19. Основные принципы медикаментозного лечения при особо тяжель повреждениях органа зрения // Восстановительное лечение при последствиях ocof тяжелых повреждениях органа зрения, полученных в чрезвычайных ситуация Материалы научно-практич. конф. - М., 2002. - С. 124-126 (соавт. Капитонов Ю.^ Вериго ЕЛ., Сусайкова М.С.).

20. Эффективность Адгелона при лечении посттравматической рецидивирующ« эрозии роговицы//Тезисы докладов IX Российского национального конгресса «Челов и лекарство» - М., 2002. - С. 379 (соавт. Ченцова ЕВ.).

21. Современный подход к правовой трансформации лекарственных веществ офгальмотравштолопга // Неотложная помощь, реабилитация и лечение осложнен! при травмах органа зрения и в чрезвычайных ситуациях: Материалы научно-практи конф. -М., 2003. - С. 183 -186 (соавт. В.П Ямскова, ЮА Капитонов, ЕЛ Гурмизов).

22. Effect of glycopeptide serum (GS) preparation on cornea healing using the model penetrating wound // International Symposium on experimental and clinical оси] pharmacology and pharmaceutics. - Geneva, 1995. - P.16. (GundorovaRA, ChentsovaK.V.]

23. Adhelon: anew adhesive medicine to stimulate reparative processes in cornea // 2i International Symposium on experimental and clinical ocular pharmacology and pharmaceutic - Munich, 1997. -P.40. (Gundorova RA, Chentsova K.V., Choroshilova-Maslova IJ IlatovskayaL.V.).

Изобретения

Патент РФ № 2220687 «Офтальмологическое лекарственное средство и спос< лечения заболеваний и повреждений роговицы глаза» от 17.122001. Соавторы: Рыю АВ., Барченков ДА, Поликарпов ДА, Ямсков ИА, Ямскова ВЛ, Гундорова РJ Ченцова ЕВ., Капитонов Ю А

В современной офтальмологии находят применение различные лекарственные препараты, хирургические и технические методики стимуляции процессов репаративной регенерации, однако реально имеющийся арсенал медицинских средств явно недостаточен. В связи с этим не утратила своей остроты проблема поиска и изучения новых методов коррекции реституционных процессов в тканях глаза, основанных на достижениях теоретической медицины и практической офтальмологии.

В этом направлении перспективным является терапевтическое применение лекарственных препаратов, оказывающих положительное действие на репаративные процессы в роговице глаза человека после ее травматических поражений различного характера.

По данным Е.С. Либман (2003), проникающее ранение глазного яблока встречается в 68% случаев травм органа зрения (из них 15,8% с инородным телом). Повреждения роговой оболочки глаза наблюдаются примерно в 22,5-63% от общего числа его проникающих ранений (Б.Л. Поляк, 1972, П. И. Лебехов, 1974, Р.А. Гундорова с соавт., 1989, Р.А. Грицюс, 1991, Л.К. Мошетова, 1998).

Среди всех травматических поражений глаз ожоги составляют от 6,1% до 37,0% (Т.В. Бирич, 1979, И.М. Волков с соавт., 1980, И.П. Макаров с соавт., 1987, Н.А. Пучковская, 1987, 1988, Е. Poser, 1983, К.М. Saari et al., 1984), а на долю химических ожогов, по данным разных авторов, приходится от 7,9% до 85% всех травм глаза (В.Ф. Даниличев, 2000, В.В. Малинина с соавт., 2000, S.J. Margan, 1987, R.R. Pfister, 1988).

В качестве причины стойкой потери зрения ожоги выявляются в 2,5% случаев от общего числа лиц с полной потерей предметного зрения (Е.С. Либман, 1988, Р.И. Чаланова, 1990, С. А. Якименко, 2000, I.P. Parman et al., 1986) .

Учитывая выше сказанное, заслуживающим внимания является изучение нового регуляторного низкомолекулярного белка с адгезивными свойствами, полученного из сыворотки крови быка и человека в 1982 г. Ямсковой В.П. и Резниковой М.М и получившего название Адгелон (В.П. Ямскова с соавт. 1984, 1985). Адгелон является эффективным средством лечения ряда заболеваний желудочно-кишечного тракта путем воздействия на регенерацию его слизистой (И.А. Ямсков с соавт., 2000). Сообщается о положительных результатах клинического применения Адгелона в общей травматологии при лечении разнообразных травм и переломов конечностей: была установлена высокая активность препарата в формировании костной мозоли и восстановлении функционально полноценной костной ткани (А.С. Неверкович, 1998). Использование Адгелона не вызывало побочных эффектов, аллергических реакций, агрессивности по отношению к новообразованным сосудам, грануляционной ткани раны и неповрежденным тканям. Автором показана эффективность применения «Адгелона-геля» для лечения травматически поврежденных суставов. Препарат «Адгелон-гель» положительно влияет на восстановление повреждений кожных покровов, в том числе при лечении ожоговой болезни и пролежней (И.А. Ямсков с соавт., 2000). Кроме того, этот препарат оказывает стимулирующее действие на репаративные процессы в коже после ее лучевого поражения. По мнению этих авторов, применение Адгелона может быть полезным в реабилитационном периоде после инфаркта миокарда.

В офтальмологической практике Адгелон для лечения заболеваний глаз не применялся, но употреблялся в качестве компонента среды для консервации, в последующем трансплантируемой, донорской роговицы (А.А. Каспаров с соавт., 2000).

Основываясь на данных о благоприятном влиянии Адгелона на процессы регенерации тканей и учитывая необходимость совершенствования способов лечения последствий травмы роговицы глаза, в настоящей работе была поставлена следующая цель:

Цель исследования: Экспериментально и клинически изучить действие препарата Адгелон на восстановительные процессы в роговой оболочке глаза после различных видов ее травматического поражения.

Задачи исследования:

1. Оценить биологическую безвредность и специфическую активность Адгелона с целью последующего применения препарата для лечения травм роговицы в эксперименте и клинике.

2. Изучить фармакологическую эффективность Адгелона в экспериментальном исследовании на моделях торпидной эрозии, проникающего ранения и химического ожога.

3. Оценить в эксперименте воздействие Адгелона на восстановительные процессы в роговице после проникающего ранения и химического ожога на основе данных морфологического исследования.

4. Изучить фармако-терапевтическую эффективность Адгелона при посттравматических состояниях роговой оболочки глаза человека.

Научная новизна;

1.Впервые экспериментально обоснована возможность применения нового отечественного препарата Адгелон в качестве лечебного средства в терапии травматических поражений роговицы.

2.Впервые в эксперименте установлена терапевтическая эффективность местного лечения путем инстилляций препарата Адгелон вялотекущей субтотальной эрозии роговицы, проникающем ранении и тяжелом химическом ожоге. Получены новые данные о значительной стимуляции Адгелоном восстановительных процессов в роговой оболочке глаза при указанных травматических поражениях.

3. Впервые для применения в офтальмологической практике разработан и обоснован метод консервативной коррекции посттравматических состояний роговицы в ранние сроки при механической и химической вялотекущей эрозиях, прободном ранении и химическом ожоге, эффективность которого подтверждена проведенными клиническими исследованиями.

Теоретическая и практическая значимость работал:

1.Экспериментально установлено, что Адгелон обладает безвредностью и специфической активностью в отношении восстановительных процессов в роговице после разных видов ее травматического поражения.

2.Показано, что местное применение Адгелона в виде глазных капель при воспроизведении на роговице экспериментальных животных эрозий, проникающего ранения и химического ожога оказывает выраженный терапевтический эффект с нормализацией ее строения в зоне повреждения.

3.Разработанный метод консервативного лечения Адгелоном способствует сокращению длительности, облегчению тяжести течения посттравматических состояний роговицы, предотвращает развитие осложнений и оптимизирует исходы повреждений глаза.

4.Предложенные на основании экспериментальных данных рекомендации по применению препарата Адгелон в комплексной терапии эрозий, проникающих ранений и химических ожогов роговицы подтверждены результатами клинических исследований.

5.Проведенное экспериментально-клиническое исследование биологического действия нового регуляторного адгезивного белка Адгелона указывает, с одной стороны, на его важную роль в организме, а с другой стороны, расширяет круг его практического лечебного применения в медицине, в частности, в офтальмологии.

Внедрение результатов работа! в практику.

Получен патент РФ № 2220687 «Офтальмологическое лекарственное средство и способ лечения заболеваний и повреждений роговицы глаза» от 17.12.2001.

Результаты работы внедрены в клиническую практику Московского НИИ глазных болезней им. Гельмгольца.

Глазные капли «Адгелон» производятся ЗАО ПП «Эндо-Фарм-А» и продаются в аптечной сети г. Москвы.

Основные положения, выносимые на защиту.

1.Новый регуляторный адгезивный белок Адгелон в своем биологическом действии безвреден и специфически активен по отношению к восстановительным процессам в роговице экспериментальных животных после различных травматических поражений (эрозии, проникающее ранение, химический ожог).

2.Адгелон, применяемый в виде глазных капель на различных экспериментальных моделях травм роговой оболочки, является эффективным универсальным лечебным средством, оказывающим в короткие сроки положительное влияние на течение восстановительных процессов в роговице.

3.Препарат Адгелон способствует купированию воспалительной реакции, ускоряет эпителизацию раневой поверхности, предупреждает образование глубоких стромальных дефектов, что приводит к более быстрому и качественному, чем в контроле, заживлению эпителия роговицы после ее повреждения.

4.Применение Адгелона у пациентов для лечения посттравматических состояний роговицы по разработанной в экспериментальных исследованиях методике показало его высокую эффективность.

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 23 статьи (в том числе 2 в иностранной печати).

Апробация работа.

Основные положения диссертационной работы доложены на конференции «Клиника и лечение повреждений глаз при экстремальных и криминальных ситуациях» (Суздаль, 1993), на I и II Международных симпозиумах по экспериментальной и клинической глазной фармакологии и фармацевтике (Женева, 1995, Мюнхен, 1997), на конференции в честь 90-летия Н.А. Пучковской (Одесса, 1998), на конференции «Эндогенные соединения в морфогенезе и восстановительных процессах -интегрирующие и регуляторные системы» (Москва, 2000), на X Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2002), на межотделенческой конференции в МНИИ ГБ им. Гельмгольца (2003).

Объем и структура работы:

- 218 -ВЫВОДЫ

1. В эксперименте доказано, что лекарственный препарат Адгелон, примененный в виде глазных капель, характеризуется переносимостью (общей и местной толерантностью к нему) и специфической активностью, проявляющейся в стимуляции эпителизации механической тотальной эрозии роговицы.

2. Восстановительный процесс в роговице глаза кроликов после торпидной субтотальной эрозии под воздействием Адгелона ускоряется в 2 раза быстрее по сравнению с контролем.

3. Установлено, что применение Адгелона при проникающем ранении роговицы у экспериментальных животных ускоряет ее восстановление по отношению к контролю в 2,4 раза. Это связано с уменьшением сроков завершения воспалительной реакции (в 1,8 раза), с более ранней ликвидацией диастаза краев раны (в 2 раза) и восстановлением передней камеры, ускорением эпителизации раны (в 1,9 раза) и более ранним формированием рубцовой ткани (в 4,2 раза). Морфологическое исследование выявило, что восстановление эндотелия роговицы при проникающем ранении под действием Адгелона начинается позже, чем в ее эпителии, но завершаются быстрее в 2 раза по сравнению с контролем.

4. Определено, что после тяжелого химического ожога под влиянием Адгелона восстановительный процесс в роговице глаза кроликов ускоряется по сравнению с контролем в 1,9 раза.

- Более раннее начало и интенсивность эпителизации ожогового дефекта (в 3 раза), по отношению к контролю, приводит к ослаблению воспалительного процесса, снижению степени васкуляризации и деструктивных процессов в обожженной роговице;

Морфологическими исследованиями подтверждено, что под влиянием Адгелона в роговице активизируются фибробластические процессы, укрепляется структурный каркас роговичной ткани, снижается степень васкуляризации роговицы, что препятствует ее разрушению, изъязвлению и перфорации;

Морфометрическое изучение толщины роговицы в контроле и опыте выявило взаимосвязанную временную (на протяжении опыта) и пространственную (по зонам роговицы) динамику изменений этого показателя, свидетельствующую о положительном влиянии Адгелона.

5. Анализ клинических исследований показал, что применение Адгелона в комплексной терапии в ранние сроки ожоговой болезни глаз и после сквозной кератопластики с замедленной эпителизацией приводит к ускорению репаративных процессов в эпителии роговицы, сокращает сроки реконвалесценции и число осложнений. Инстилляции препарата ускоряют формирование послеоперационного рубца. Адгелон значительно стимулирует заживление посттравматических эрозий роговицы и предотвращает их рецидивы.

Глазные капли Адгелона хорошо переносятся больными, не обнаружено токсического или аллергического действия препарата.

6. Полученные результаты экспериментально-клинического исследования свидетельствуют о высокой эффективности препарата Адгелон в стимуляции репаративных процессов в роговице и о перспективности его применения в широкой офтальмологической практике.

- 220

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Результаты проведенных экспериментальных исследований указывают на новые пути и возможности восстановительной терапии механических и химических эрозий роговицы, проникающих ранений и химических ожогов глаз.

2. Для уменьшения периода реконвалесценции пациентов с вялотекущими эрозиями роговицы, вследствие её различных повреждений (механических, термических, химических, смешанных) либо операционных вмешательств (сквозная кератопластика) , ускорения процессов эпителизации и предупреждения стромальных дефектов, рекомендуется локальное использование глазной лекарственной формы Адгелона, в виде инстилляций, в течение всего периода персистенции эпителиального дефекта.

3. С целью сокращения сроков лечения, патогенетически ориентированной терапии и улучшения исходов проникающих ранений глаз, в комплекс лечебных мероприятий рекомендуется включить местное применение Адгелона в виде глазных капель в первые две недели после повреждения роговицы.

4. При лечении свежих химических ожогов роговой оболочки I, II и III степени тяжести рекомендуется местная терапия пораженных тканей путем инстилляции глазных капель Адгелона в течение первых 14 суток для коррекции эрозивных и деструктивных процессов в эпителии и строме роговицы, профилактики ее перфораций, уменьшения воспалительной реакции и улучшения исходов заболевания.