Автореферат и диссертация по медицине (14.00.06) на тему:Полиморфизм генов цитокинов и предрасположенность к инфаркту миокарда и внезапной смерти
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.06
Автореферат диссертации по медицине на тему Полиморфизм генов цитокинов и предрасположенность к инфаркту миокарда и внезапной смерти
На нра¿ахрукописи
Туликова Гульнара Хамнтоппа
ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ И ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТЬ К ИНФАРКТУ МИОКАРДА И ВНЕЗАПНОЙ СМЕРТИ
14.00.06 - кардиология 03.00.15 - генетика
АВТОРЕФЕРАТ
Диссертация па соискание ученой степепи кандидата медицинских наук
□0307 1Б4В
УФА-2007
003071648
Работа выполнен? в Институте биохимии и генетики Уфимского научного центра Российский академии наук и ГОУ В ПО «Башкирский государственный медицинским университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
Научные руководители
доктор медицинских наук, профессор доктор биологических наук, профессор
Официальные оппоненты:
доктор медицинских наук, профессор доктор медицинских наук, профессор
Закирова Аляра Нурмухаметовна Мустафина Ольга Евгеньевна
Кузин Анатолий Иванович Викторова Татьяна Викторовна
Ведущая организация: ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
Защита состоится 29 мая 2007 г в _ часов на заседании
диссертационного совета К 208 006 02 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу 450000, г Уфа, ул Ленина, д 3
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке при ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
Автореферат разослан 28 апреля 2007 года
Ученый секретарь
диссертационного совета,
доктор медицинских наук, профессор
Бабушкина Г В
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) остаются по-прежнему одной из основных причин инвалидности и смертности наиболее трудоспособной части населения, унося ежегодно в мире 17 млн жизней В России от ИБС и цереброваскулярной патологии умирает около 1 млн 300 тыс человек [Оганов Р Г и др , 2007] Серьезную медико-социальную проблему представляют собой такие клинические формы ИБС, как инфаркт миокарда (ИМ) и внезапная смерть (ВС), являющаяся в 20% случаев первым проявлением ИБС [Мазур Н А , 2006]
В настоящее время в ряде развитых стран, благодаря осуществлению программ, направленных на выявление факторов риска (ФР) ССЗ и их устранение, удалось добиться некоторого снижения заболеваемости и смертности от ИБС Однако попытки снизить заболеваемость ИБС только за счет коррекции средовых факторов риска не всегда оказываются эффективными Значительную роль в развитии ИБС играют наследственные компоненты В связи с чем, для решения проблемы профилактики ССЗ на популяционном и индивидуальном уровнях, актуальным является исследование молекулярно-генетических основ ССЗ и поиск генетических маркеров риска ИБС и ее клинических форм. Большое внимание на современном этапе уделяется исследованию генетического полиморфизма по ряду конкретных генов кандидатов, определяющих состояние систем, вовлеченных в патогенез заболевания К генам-кандидатам ИБС правомерно отнести гены аполипопротеинов, белков ренин-ангиотензин-альдостероновой системы, синтаз оксида азота и многие другие
Данные последних исследований указывают на важную роль цитокиновой сети в инициации и прогрессировании атеросклеротического процесса и ИБС [Насонов ЕЛ и др , 1999, Покровская Е В , 2001, Титов В Н , 2000, Ross R, 1999] В то же время изучение значимости полиморфизма генов цитокинов в развитии ИМ и ВС ограничено немногочисленными работами [Antonicelli R et al, 2005, Humphries SE et al, 2001, Kelberman D et al, 2004, Rus H G et al, 1996, Tseng L H et al, 2001]
При молекулярно-генетическом изучении любых многофакторных заболеваний, в том числе и сердечно-сосудистых, для расчета индивидуального прогноза и создания основанных на нем рекомендаций необходимо учитывать
специфику конкретной популяции Поскольку генетическая структура этноса характеризуется особенностями распределения аллельных вариантов генов и ген-генных взаимодействий, для каждой популяции будет характерен «свой» набор генов, предрасполагающих к заболеванию Поэтому проверка гипотезы о значимости полиморфизма генов цитокинов в определении риска ИБС и ее клинических форм у этнических русских и татар, проживающих в Республики Башкортостан, является актуальной
Цель работы - исследовать молекулярно-генетические основы ИМ и ВС по полиморфизму генов про- и противовоспалительных цитокинов в этнически однородных группах (у русских и татар Республики Башкортостан) Задачи исследования:
1 Изучить распределение ФР ССЗ у больных острым инфарктом миокарда (ОИМ) и постинфарктным кардиосклерозом (ПИКС)
2 Исследовать состояние внутрисердечной гемодинамики и особенности ремоделирования миокарда левого желудочка у больных ОИМ и ПИКС
3 Провести анализ клинико-морфологических характеристик внезапно умерших лиц с констатированной ВС
4 Провести в группах больных с ИМ, ВС и в контрольной группе оценку частот генотипов и аллелей по полиморфизмам генов
- фактора некроза опухоли а (TNFA, -308G/Ä),
- интерлейкина 1В (IL1B, -511 Г/С, +3953С/Т),
- антагониста рецептора интерлейкина 1В (IL1RA, VNTR),
- интерлейкина 6 (IL6, -572G/C),
- интерлейкина 10 (ILIO, -627С/А),
- интерлейкина 12В (IL12B, -1159А/С)
5 Охарактеризовать частоты сочетаний генотипов по перечисленным полиморфизмам генов цитокиновой сети
6 Провести анализ ассоциаций полиморфизмов генов цитокиновой сети с ИМ и ВС в этнически однородных группах (у русских и татар)
Научная новизна исследования. Впервые в этнически однородных группах (русских и татар Республики Башкортостан) охарактеризованы молекулярно-генетические основы предрасположенности к развитию ИМ и ВС по 7 полиморфизмам генов цитокиновой сети Установлено, что с риском развития ИМ у этнических русских ассоциированы полиморфизмы -572G/C гена IL6, -1159С/4 гена IL12B и +3953С/Т гена IL1B, у этнических татар -
полиморфизмы -3G8G/A гена TNFA, -627С/А гена ILIO Полиморфизмы -627С/А гена ILIO и -511Т/С гена ILIB вносят вклад в риск развития ВС у этнических русских, а полиморфизм -572G/C гена IL6 маркирует повышенный риск развития ВС и у русских и у татар Выявлено сочетание генотипов IL6(-572)*G/*C - ILIRA*H/*II, ассоциированное с высоким риском развития ИМ и ВС у этнических русских
Практическая значимость работы. Результаты работы могут быть использованы при разработке основ профилактической медицины, для медико-генетического консультирования по ИМ и ВС с целью первичной и вторичной профилактики сердечно-сосудистой патологии Материалы исследования могут быть использованы в учебно-методическом процессе на медицинских и биологических факультетах, а также на курсах постдипломного образования кардиологов, терапевтов и врачей общей практики
Внедрение результатов исследования. Результаты исследований используются в лечебной работе Республиканского кардиологического диспансера (г Уфа) Основные положения диссертации внедрены в педагогический процесс кафедры кардиологии и функциональной диагностики ИПО ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава»
Положения, выносимые на защиту
1. Полиморфизмы генов TNF A, ILIB, IL6, ILIO, IL12B ассоциированы с инфарктом миокарда и внезапной смертью
2 У этнических русских риск развития инфаркта миокарда ассоциирован с полиморфизмами генов IL6(-572G/C), IL12B(-1159А/С), IL1B(+3953C/T)
3 У этнических татар риск развития инфаркта миокарда ассоциирован с полиморфизмом генов TNF A (-308G/A) и IL 10(-62 7С/А)
4 С развитием внезапной смерти у этнических русских ассоциированы полиморфизмы генов IL1B(-51 IT/C), IL10(-627C/A) Полиморфизм гена IL6(-572G/C) маркирует повышенный риск развития внезапной смерти и у этнических русских и у этнических татар
Апробация работы. Материалы диссертационной работы были представлены на Европейском конгрессе по генетике человека (European Human Genetics Conference, Prague, 2005), V съезде Российского общества медицинских генетиков (Уфа, 2005), 7 балканском симпозиуме по генетике человека (7th Balkan Meeting on Human Genetics, Skopje, 2006), XIV интернациональном симпозиуме по атеросклерозу (XIV international Symposium
on Atherosclerosis, Rome, 2006), научной конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии» (Курск, 2006), Российском национальном конгрессе кардиологов (Москва, 2006) Основные результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на научном межлабораторном семинаре ИБГ УНЦ РАН, проведенном совместно с кафедрой кардиологии ИПО БГМУ (Уфа, 2007)
Публикации. По теме диссертационного исследования опубликовано 12 печатных работ
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа включает в себя следующие разделы введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты исследования и обсуждение, заключение, выводы, библиографический список использованной литературы, приложение Работа изложена на /У ^страницах машинописного текста, содержит 26 таблиц и 15 рисунков Библиографический список включает 258 источников отечественной и зарубежной литературы
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Обследовано 306 мужчин (этнических русских - 192, татар - 114), перенесших крупноочаговый ИМ в возрасте до 56 лет, находившихся на лечении в отделении острого инфаркта миокарда Республиканского кардиологического диспансера и кардиологическом отделении Республиканской клинической больницы им Г Г. Куватова г Уфы Диагноз ИМ устанавливался на основании критериев Комитета экспертов ВОЗ при наличии двух из трех следующих признаков ангинозная боль более 30 минут и/или подъем сегмента ST>0 2 мВ в двух грудных отведениях, и/или подъем сегмента ST>0 1 мВ в стандартных отведениях, и/или развитие острой блокады левой ножки пучка Гиса, появление патотогических зубцов Q на ЭКГ и/или повышение уровня МВ КФК (в 2 раза от нормы), тропонинов Т и J Больные со сложными нарушениями ритма сердца, тяжелыми заболеваниями печени, почек, легких, крови, застойной сердечной недостаточностью, требующими коррекции, в исследование не включались Из исследования также исключались пациенты с активными воспалительными процессами, онкологическими и иммунопатологическими заболеваниями
Проанализировано 175 эпизодов ВС у мужчин в возрасте от 27 до 60 лет в результате острой коронарной недостаточности, по данным Бюро судебной экспертизы г Уфы и патологоанатомического отделения ГКБ №13 В группу исследования включались только умершие, у которых по данным вскрытия констатировалась острая коронарная недостаточность В исследование не включались умершие от «внесердечных» причин кровоизлияние в мозг, тромбоэмболия легочной артерии, диабетическая кома, эпилепсия и др , а также от другой кардиальной патологии
Группу сравнения составили 248 здоровых мужчин в возрасте от 20 до 60 лет, без признаков сердечно-сосудистых и других хронических заболеваний в медицинском анамнезе, отобранных из жителей республики Башкортостан, русских и татар по этнической принадлежности
Для анализа состояния внутрисердечной гемодинамики у больных ОИМ и ПИКС проводилось эхокардиографическое исследование с определением КДР, КСР, КДО, КСО, УО ФВ ЛЖ Массу миокарда ЛЖ определяли по корригированной формуле Американской ассоциации эхокардиографистов
ММЛЖ=0 8x1 04х[(КДР+МЖП+ТЗС)3-КДР3)]+0 6, с последующим вычислением индекса массы миокарда (ИММ) и индекса относительной толщины стенок в диастолу (ИОТ) На основании значении индекса ИММ и ИОТ выделяли нормальную геометрию (ИММ<117 г/см2 и ИОТ<0 45), концентрическое ремоделирование (ИММ<117 г/см2 и ИОТ >0 45), концентрическую гипертрофию (ИММ>117 г/см2 и ИОТ >0 45), эксцентрическую гипертрофию ЛЖ (ИММ >117 г/см2 и ИОТ <0 45) [Васюк Ю А,2003]
В исследуемой группе лиц, внезапно умерших от ИБС, были проанализированы данные судебно-медицинского и патологоанатомического исследования Для оценки выраженности гипертрофии миокарда определялась масса сердца Показатели массы сердца более 400 г расценивались, как увеличенная масса миокарда (ММ) [Мазур НА, 1985] Степень стеноза коронарных артерий (СКА) оценивали визуально-планиметрическим методом с выделением стеноза коронарных артерий <50% и >50% Для установления роли алкоголя, как провоцирующего фактора риска ВС, определялась концентрация этанола в крови и моче умерших
Материалом для молекулярно-генетического исследования послужили 729 образцов ДНК ДНК выделяли методом фенольно-хлороформной экстракции [Johns М et а!, 1989] из венозной крови Анализ генетического полиморфизма осуществляли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) или ПЦР с последующей рестрикцией ампликонов Разделение фрагментов ДНК проводили при помощи электрофореза в 7% полиакриламидном или 2% агарозном гелях с последующим окрашиванием гелей раствором бромистого этидия и визуализацией электрофореграмм в УФ-свете
Статистическая обработка полученных данных проводилась с использованием пакетов прикладных программ «Statistic for Windows 5 О» (StatSoft), программного обеспечения MS Exel 98 (Microsoft) и компьютерной программы RxS (Rows х Columns) [Roff PA et al, 1989] При попарном сравнении частот генотипов и аллелей в исследуемых группах и контроле использовался точный двусторонний критерий Фишера
Относительный риск заболевания по конкретному аллелю или генотипу вычисляли как соотношение шансов (OR - odds ratio) по формуле (a*d)/(b*c), где а и b - число лиц соответственно с наличием или отсутствием маркера среди больных, end- число лиц соответственно с наличием или отсутствием маркера в контрольной группе [Bland J , 2000]
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Структура факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний у больных с крупноочаговым инфарктом миокарда
Нами установлено, что группы пациентов с ОИМ и ПИКС не отличались по таким ФР ССЗ, как отягощенная наследственность по АГ (44 45% и 38 96% соответственно, Р=0 417) и ИБС (30 72% и 33 77%, Р=0 625), курение (86 28% и 90 26, Р=0 293), распространенность АГ до развития ИМ (41 83% и 50 0%, Р=0 170), а также по показателям индекса массы тела (ИМТ) (26 42±4 15 кг/м2 и 26 79±4 92 кг/м2, Р=0 495), уровню САД (147 83±36 29 и 160 54±42 32 мм рт ст , Р=0 082) и ДАД (92 08±20 23 и 98 92±21 95 мм рт ст, Р=0 081)
Значительный вклад в развитие и прогрессирование ИБС вносит АГ Среди обследованных нами пациентов 50 00% больных с ПИКС и 41 83% с
ОИМ знали о наличии у них АГ до развития ИМ, однако медикаментозное лечение либо не получали, либо получали эпизодически
Известно, что отягощенная наследственность и абдоминальное ожирение увеличивают риск развития АГ, что подтверждается и данными нашего исследования Так, по сравнению с пациентами без АГ, среди больных с АГ отягощенная наследственность выявлялась в большем числе случаев как среди пациентов с ОИМ (37 93% и 54 68% соответственно, Р=0 048), так и среди больных с ПИКС (28 57% и 48 68%, Р=0 012)
Средние показатели ИМТ были достоверно выше в группе пациентов с ОИМ и сопутствующей АГ по сравнению с группой больных без АГ (27 66±4 17 кг/м2 и 25 44±3 87 кг/м2, Р=0 002) Значимые различия отмечаются и у больных с ПИКС Так, средние показатели ИМТ в группах больных с ПИКС с сопутствующей АГ и без АГ составили 28 11±4 65 и 25 47±4 85 кг/м2 соответственно (Р=0 001) В целом, обнаружена достоверно более высокая частота встречаемости ожирения (ИМТ>30 кг/м2) у больных с сопутствующей АГ по сравнению с пациентами без АГ как среди пациентов с ОИМ (32 81% и 8 04%, Р<0 001), так и среди больных с ПИКС (32 46% и 14 28%, Р=0 013)
Особенностн ремоделирования миокарда у больных ОИМ н ПИКС
При оценке геометрии ЛЖ у больных в зависимости от нозологии показано, что в обеих группах больных (с ОИМ и ПИКС) выявляется эксцентрическая гипертрофия ЛЖ в 42 11% и 53 90% случаев, а нормальная геометрия ЛЖ в 48.68% и 30 50% случаев соответственно (рис 1) В группе пациентов с ПИКС по сравнению с больными с ОИМ сравнительно чаще обнаруживается эксцентрическая гипертрофия ЛЖ (Р=0 047), и достоверно реже нормальная геометрия ЛЖ (Р=0 002)
Анализ распределения типов ремоделирования ЛЖ проводился и с учетом фактора АГ, поскольку АГ, наряду с ИМ, является одной из причин, приводящих к структурно-геометрическим изменениям сердца [Шляхто Е В , 2002]
Распределение типов ремоделирования ЛЖ в группах ОИМ и ПИКС с АГ представлены на рис 2 Преобладающими стуктурно-геометрическими изменениями ЛЖ у больных с ОИМ как в группе с АГ, так и в группе без АГ являются эксцентрическая гипертрофия (47 62% и 38 21% соответственно) и
нормальная геометрия ЛЖ (36.51% против 57.30% соответственно). У пациентов с О ИМ без сопутствующей АГ по сравнению с группой больных с ОИМ и АГ достоверна повышена частота нормальной геометрии ЛЖ (Р=0.014), Следует подчеркнуть, что отсутствие АГ на фоне ОИМ способствует сохранению нормальной геометрии ЛЖ и, следовательно, сохранению его функциональной способности.
□ Нормальная геометрия
О Конце ктрич ее кое
рем оде-лирогание
■ Концентрическая гипертрофия
□ Эксивнтрняесвм гипертрофия
Рис. 1. Распределение больных с ОИМ и ПИКС в зависимости от типа р ем оде л и р о в ания ЛЖ.
Здесь и далее: * - различия статистически значимы (Р<0.05)
Более половины больных в группах с «ПИКС без АГ» и «ПИКС с АГ» имело эксцентрическую гипертрофию ЛЖ (56.92% и 5132% соответственно), что согласуется с данными литературы, свидетельствующими о преобладании данного типа ремоделирования среди пациентов с ИБС [Васюк Ю.А. и др., 2003]. Важным отличием между двумя группами пациентов с ПИКС является преобладание концентрической гипертрофии ЛЖ у больных ПИКС в сочетании с АГ (17.11% против 1.54% среди пациентов ПИКС без АГ, Р=0.002).
Таким образом, у больных с ПИКС преобладает дезадаптивное ремоделирование (эксцентрическая гипертрофия ЛЖ). Структурно-геометрические изменения ЛЖ у больных с сочетанием ПИКС и АГ аналогичны таковым у больных с изолированным ПИКС, но с большей долей концентрической гипертрофии ЛЖ, что согласуется с литературными данными [Васюк Ю.А. и др., 2003].
и
20 -I— 10
И
£
ОИМ с АГ
ОИМ без АГ
ПИКС с АГ
ПИКС без АГ
П Нормальная геометрия
В Концентрическое реноделирование
□ Концентрическая гипертрофия
О Эксцентрическая гипертрофия
Рис 2 Распределение больных в группах ОИМ и ПИКС с АГ в зависимости от типа ремоделирования ЛЖ
Клинико-морфологическая характеристика умерших с констатированной
внезапной смертью
В выборке умерших с констатированной ВС проведен сравнительный анализ ряда клинико-морфологических показателей в трех возрастных группах до 45 лет, 45-60 лет и старше 60 лет Группы были однородны по показателям, характеризующим процессы, протекающие в стенке коронарных артерий, и степени алкогольного опьянения
Было отмечено, что с увеличением возраста умерших масса миокарда нарастает Так, в группе умерших в возрасте до 45 лет ММ была достоверно ниже (409 74±79 82 г) по сравнению с умершими в возрасте 45-60 лет (444 48+89 89 г, Р=0 033) и старше 60 лет (468 46±110 90 г, Р=0 004) Различия по ММ между возрастными группами 45-60 лет и старше 60 лет статистически недостоверны (Р=0 190)
Степень стеноза коронарных артерий (СКА) также претерпевала изменения в зависимости от возраста развития ВС Так, СКА 50% и более сравнительно чаще отмечается в группе умерших в возрасте старше 60 лет (91 83%), чем в группе умерших до 45 лет (74 35%, Р=0 039) В то время как среди умерших в возрасте до 45 лет с большей частотой выявляется СКА менее 50% (25 64% против 8 16% в возрастной группе старше 60 лет, Р=0 039)
Известно, что алкогольное опьянение повышает электрическую нестабильность миокарда, индуцирует желудочковые аритмии и приводит к ВС
[Мазур Н А , 2006] В проведенном нами исследовании установлены различия между группами ВС с сопутствующим алкогольным опьянением и без него Группа лиц с ВС без сопутствующего опьянения по сравнению с группой лиц с ВС и сопутствующим алкогольным опьянением характеризовалась достоверно большими показателями ММ (457 86±103 53 г и 419 19±75 60 г соответственно, Р=0 005) и СКА (58 67%±14 47% и 50 08%±15 38% соответственно, Р<0 001) В группах лиц с констатированной ВС выраженный атеросклероз коронарных артерий (СКА 50% и более) отмечается в 90 26% случаев, увеличенная ММ (более 450 г) в 48 67% случаев В группе лиц, у которых ВС констатирована на фоне алкогольного опьянения, стеноз коронарных артерий более 50% встречается в меньшем числе случаев (67 74%), а масса миокарца превышает 450 г лишь в 20 96% случаев Таким образом, было показано, что фактор алкоголя играет значительную роль в генезе ВС ВС в сочетании с алкогольным опьянением развивается в группе лиц, характеризирующейся меньшей выраженностью атеросклеротического процесса и меньшей ММ
Анализ ассоциаций полиморфизмов генов цптокиновой сети с круппоочаговым инфарктом миокарда
Результаты анализа распределений частот аллелей и генотипов по полиморфизмам [енов цитокиновой сети у пациентов с ИМ, а также в контрольной группе (К) представлены в табл 3 и 4 Значимые различия были выявлены по полиморфизмам генов TNFA, IL12, IL6 и ILIO
В группе больных ИМ, татар по этнической принадлежности, достоверно чаще, по сравнению с группой контроля, обнаруживается генотип TNFA(-308)*G/*G и аллель TNFA(-308)*G и реже генотип TNFA(-308)*G/*A и аллель TNFA(-308)*Ä Таким образом, повышенный риск развития ИМ маркируют генотип TNF А (-308) *G/*G (СЖ=2 25, CI 1 14-441), а пониженный - генотип TNFA(-308)*G/*A (OR=0 49, CI 0 25-0 96) У этнических русских данный полиморфизм не ассоциирован с риском развития ИМ
Полиморфизм -U59A/C гена IL12 ассоциирован с уровнем экспрессии цитокина IL-12 [Davoodi-Semiromi A et al, 2002, Moraban G et al 2001] В пашем исследовании показано, что у больных ИМ, этнических русских, повышена частота генотипа IL12(-1159)*А/*А, ассоциированного, согласно
Таблица 3 - Результаты анализа ассоциаций полиморфизмов генов цитокиновой сети с ИМ и ВС у этнических русских
Аллель Частота, % Р Р Генотип Частота, % <Р Р
К ИМ ВС K-IIM к-вс К ИМ ВС к-им к-вс
-308G/A TNFA
*G *А 83 19 16 81 86 39 13 61 82 41 17 59 0 297 0 901 *G/*G *G/*A *А/*А 68 91 28 57 2 52 74 35 24 08 1 57 64 81 35 19 0 03 0 424 0 679 0 573 0319 0 248
-511 Т/С IL!В
*Т *С 45 26 54 74 46 6 53 4 39 25 60 75 0 802 0213 *Т/* jT *т/*с *С/*С 21 55 47 41 31 03 20 42 52 36 27 23 11 21 56 07 32 71 °?85 0 412 0516 0.047 0 228 0 886
+3953С/ТIL1B
*С *Т 78 45 21 55 71 47 28 53 69 91 30 09 0 058 0.040 *С/*С *а*т *т/*т 61 21 34 48 431 53 93 35 08 10 99 49 07 41 67 9 26 0 236 1 0 0 056 0 081 0 274 0 183
VNTR IURA
*1 61 76 60 73 56 02 0 865 0216 *1/*1 38 66 40 84 32 41 0 722 0 336
*II 35 71 36 91 41 67 0 797 0 210 *1/*П 42 02 26 65 44 44 0 401 0 789
*Ш 2 52 1 83 1 85 0 575 0 754 *1/*1П 42 2 62 2 78 0515 0 724
*IV 0 0 26 0 46 1 0 1 0 *II/*II 14 29 17 8 18 52 0 436 0 472
*V 0 0 26 0 1 0 - *п/*ш ост 0 84 0 105 1 04 0 93 0 93 1 0 1 0 1 0 1 0
-627С/А ILIO
*С *А 78 1 21 9 78 27 21 73 86 47 13 53 1 0 0.044 *С/*С *С/*А *А/*А 60 0 26 19 3 81 62 3 31 94 5 76 75 29 22 35 2 35 0710 0 520 0 586 0 030 0 040 0 693
-1159А/СIL12B
*А 72 33 78 53 70 83 0 104 0 747 *А/*А 53 40 65 45 53 70 0.046 1 0
*С 27 67 21 47 29 17 *А/*С *С/*С 37 86 8 74 26 18 8 38 34 26 12 04 0.046 1 0 0 667 0 503
-572G/CIL6
*G *С 82 71 17 29 76 7 23 3 66 67 33 33 0 095 <0.001 *G/*G *G/*C *С/*С 68 22 28 97 28 63 35 26 7 9 95 43 52 46 3 10 19 0 448 0 687 0.035 <0.001 0.011 0.05
Таблица 4
- Результаты анализа ассоциаций полиморфизмов генов цитокиновой сети с ИМ и ВС у этнических татар
Аллель Частота, % Р Р Генотип Частота, % Р Р
К к-им к-вс К ИМ ВС к-им к-вс
-308G/A TNFA
*G *А 86 61 13 39 93 48 6 52 84 15 15 85 0.015 0 585 *G/*G *G/*A *А/*А 74 8 23 62 1 57 86 96 13 04 0 68 29 31 71 0 0.022 0.046 0 499 0 423 031 1 0
-51 ¡Т/С 111В
*Т *С 48 05 51 95 44 74 55 26 39 02 60 98 0 523 0 163 *т/*т *т/*с *с/*с 25 0 46 09 28 91 15 79 57 89 26 32 17 07 43 9 39 02 0 083 0 072 0 669 0 395 0 858 0 249
+3953С/ТIL1B
*С *Т 77 42 22 58 72 17 27 83 74 39 25 61 0 206 0 652 *с/*с *с/*т *т/*т 56 59 35 66 7 75 55 65 33 04 И 3 56 1 26 59 7 32 0 898 0 688 0 385 1 0 1 0 10
VNTRIL1RA
*1 71 03 73 04 64 63 0 685 0 274 51 59 52 17 46 34 1 0 0 593
*П 26 98 26 09 35 37 0 837 0 162 *1/*П 35 71 40 87 36 59 0 428 1 0
*Ш 1 98 0 43 0 0 219 0 339 *I/*III 3 17 0 0 0 123 0 573
*V 0 0 43 0 1 0 v*v *II/*II *П/*Ш 0 8 73 0 79 0 87 5 22 0 87 0 17 07 0 1 0 0 324 1 0 0 151 1 0
-627С'А ILIO
*С *А 85 35 14 65 80 0 20 0 79 17 20 83 0 162 0 263 *с/*с *С/*А *А/*А 71 72 27 27 1 01 64 35 31 30 4 35 63 89 30 56 5 56 0 305 0 550 0 220 0 403 0 829 0 564
-1159A/CILI2B
*А *С 77 14 22 86 72 17 27 83 76 83 23 17 0 273 I 0 *А/*А *А'*С *С/*С 60 95 32 38 6 67 53 04 38 26 8 7 58 54 36 59 4 88 0 276 0 399 0 622 0 852 0 698 1 0
-572G/CIL6
*G *С 79 81 20 19 79 57 20 43 64 63 35 37 1 0 0.01 *G/*G *G/*C *С/*С. 62 5 34 62 2 88 64 35 30 43 5 22 39 02 51 22 9 76 0 781 0 564 0 504 0.015 0 089 0 292
данным литературы, с избыточным уровнем IL-12 [Morahan G et al, 2001] Следовательно, его можно считать маркером повышенного риска заболевания (OR=l 65, CI 1 01-2 69) Также у больных ИМ прослеживается снижение частоты генотипа IL12(-1159)*А/*С, поэтому данный маркер можно отнести к протективным (OR=0 58, CI 0 35-0 97) У этнических татар данный полиморфизм не ассоциирован с риском развития ИМ
Одним из ключевых медиаторов воспалительной реакции, обладающих провоспалительными свойствами является IL-6 [Biasucci LM et al, 1999, Funayama H, 2004, Heinisch RH et al, 2001, Tzoulaki I et al, 2005] Анализ распределении частот генотипов и аллелей полиморфизма -572 G/C гена IL6 показал, что у больных ИМ, русских по этнической принадлежности, по сравнению с контрольной группой увеличена доля генотипа IL6(-572)*C/*C, ассоциированного, согласно данным литературы, с повышенной экспрессией IL-6 в крови [Brüll DJ et al, 2001, Ferrary S L et al, 2003] Относительный риск ИМ по данному генотипу составляет 3 93 (CI 1 06-14 51) Генетическими маркерами риска развития ИМ в возрастной группе русских до 45 лет является генотип IL6(-572)*C/*C (OR=6 75, CI 1 45-31 53) В этнической группе татар различия по частотам генотипов и аллелей между группами больных ИМ и контролем не прослеживаются
IL-10, противовоспалительный цитокин, вовлеченный в патогенез ИБС [Mallat Z et al, 1999, Pinderski-Oslund L J et al, 1999] Полиморфизм -627 С/А гена ILIO ассоциирован с уровнем IL-10 в плазме крови у носителей аллеля *А он понижен [Borvsh L et al, 1996] В проведенном нами исследовании обнаружено, что у этнических татар генотип IL10(-627)*А/*А (9 09% против 0% в контроле, Р=0 001) маркирует повышенный риск (OR=16 23 и 3 02), а генотип IL10(-62 7) *С/*С (52 73% против 77 03% в контроле, Р=0 005) пониженный риск развития ИМ в возрасте моложе 45 лет (OR=0 33 и 0 33) Можно полагать, что в основе такой ассоциации лежит низкий уровень противовоспалительного ILIO у носителей аллеля IL10(-627)*A
Анализ ассоциаций полиморфизма гепов цитокиыовой сети с ипфарктом миокарда в сочетании с факторами риска ССЗ
IL-1 является одним из основных цитокинов вовлеченных в процесс атерогенеза и ИБС [Shimokawa Н et al, 1996, Simon AD et al, 2000] Аллель
%
70 60 SO 40 30 20 10 О
Рис, типа
*
.
1
г-
■ ■
Г 1 •
т
ОИМ с А Г
ОИМ без АГ
ПИКС с АГ
ПИ КС без АГ
□ Нормальная геометрия
■ Концентрическое рц модсл и рова икс
□ Коицентрическая гипертрофия
□ Эксцентрическая
2. Распределение больных в группах ОИМ и ПИКС с АГ в зависимости от ремоделирозания ЛЖ.
Клнннко-морфалогическяяг характеристика умерших с констатированной
внезапное смертью
В выборке умерших с констатированной ВС проведен сравнительный анализ ряда кли нико-морфологических показателей в трех возрастных группах: до 45 лет, 45-60 лет и старше 60 лет. Группы были однородны по показателям, характеризующим процессы, протекающие в стенке коронарных артерий, и степени алкогольного опьянения.
Было отмечено, что с увеличением возраста умерших масса миокарда нарастает. Так, в группе умерших в возрасте до 45 лет ММ была достоверно ниже (409.74±79,82 г) по сравнению с умершими в возрасте 45-60 лет (444.48±89.89 г, Р=0.033) и старше 60 лет (468.46±110.90 г, Р=0.004). Различия по ММ между возрастными группами 45-60 лет и старше 60 лет статистически недостоверны (Р=0.190).
Степень стеноза коронарных артерий (СКА) также претерпевала изменения в зависимости от возраста развития ВС. Так, СКА 50% и более сравнительно чаще отмечается в группе умерших в возрасте старше 60 лет (91.83%), чем в группе умерших до 45 лет (74.35%, РЮ.039), В то время как среди умерших в возрасте до 45 лет с большей частотой выявляется СКА менее 50% (25.64% против 8.16% в возрастной группе старше 60 лет, Р^0.039).
Известно, что алкогольное опьянение повышает электрическую нестабильность миокарда, индуцирует желудочковые аритмии и приводит к ВС
*Т полиморфизма -3959СЛГ гена ILIB ассоциирован с повышенной продукцией данного цитокина [Gausch J.F, et а)„ 1996; Pociot F. et al., 1992], а также с более высоким уровнем С-РБ в группах больных ИБС [Latkovskis G. et. al., 2004). Как показано на рис. 3, достоверные различия прослеживаются по частотам генотипа IL1 В(+3953)*Т/*Т между группами больных, перенесших ИМ и имеющих отягощенную наследственность по ССЗ (17.24%), и группой контроля (4.3!%, Р-0,008), русских по этнической принадлежности. Генотип ILIВ(+3953) *Т/*Т маркирует повышенный риск развития ИМ у лиц с отягощенной наследственностью (OR=4.63. С! 1.50-14.26),
□ Контроль
ПИМ, отягощенная наел ед ствен н ость
I /V, неотягои^нная наследственность
"СГС *СГТ
-тгт
Рис. 3. Распределения частот генотипов и аллелей по полиморфизму +3953С/Т гена ПАВ в группах пациентов, перенесших ИМ в сочетании с фактором ОН (у этнических русских)
В группе этнических русских с сопутствующим ожирением повышена частота генотипа 1L! В(+3953)*Т/*Т (17.07% против 4.31% в контроле, Р=0.014, OR'4.57, CI 1.36-15.33) и аллеля IIIВ(+ЩЗ)*Т (34.15% и 21.55% соответственно, P-0.Q26, OR.= l.89, CI 1,09-3.29) и понижена частота аллеля 111В(+3953)*С (65.85% и 78.45% Р-0.026, QR=0.53t CI 0.30-0,92). Риск развития ИМ при ожирении маркирует генотип /11 В(+3953)*Т/* Т (рис. 4).
Таким образом, ассоциация полиморфизма +3953 С/Т гека ¡LIB с ИМ у этнических русских наблюдается в связи с такими ФР как отягощенная наследственность по ССЗ и ожирение.
□ Контроль
□ ИМ. ожирение (ИМТаЗО кг Ли1)
■ ИМ, избыточная масса тепа (25£ИМТ<30 кг/н') □ ИМ, нормальная масса тела {ИМТ<25 кг/м1)
Рис. 4. Распределения частот генотипов и аллелей по полиморфизму +3953С/Т гена [LIB в группах пациентов, перенесших ИМ в сочетании с ИМТ (у этнических русских)
Анализ ассоциаций полиморфизма генов цнтокнновой сети с внезапной
смертью
Риск ВС, обусловленный острой коронарной недостаточностью, имеет прямую корреляцию с уровнем [L6 и TNF-a [Biasucci L.M. et al., 1999; Funayama H., 2004; Bleinisch R.H. et ai., 2001]. Вовлеченность цитокинов в генез ВС может быть объяснена их участием в апоптозе кардиомнсщитов к, в первую очередь, пейсмекерных клеток, что может приводить к развитию нарушений проводимости и пароксизмальных аритмий [JamesT.N., 1994].
Нами проанализированы полиморфизмы генов проеоспалительных (7NFA, IL1B, ILI2B, JL6) и противовоспалительных {¡LIRA, ILiO) цитокинов у внезапно умерших (табл.2). Установлено, что полиморфизмы +3953СЛГ и -51IT/C гена IL1B, полиморфизм -627С/А гена ILIQ и полиморфизм -572G/C гена IL6 ассоциированы с развитием ВС. У этнических русских маркером повышенного риска являются генотипы !L6(-572)*G/*C (OR=2.ll, CI 1.20-3.71), ¡L6(-572)*C/*C (OR=3.93, CI 1.06*14.51), IU0(-627)*C/*C (C)R=2.03, CI 1.083,8 L;, пониженного - генотипы IL6(-572)*G/*G (OR=0.36, CI 0.21-0.63), IL1B(-5ll)*T/*T (C)R=0.46, CI 0.22-0.97), IL10(-62T)*C/*A (QR=0.51, CI 0.27-0.97). У
этнических татар пониженный риск развития ВС маркирует генотип 1L6{-572)*G/*G (ORKUS, CI 0.1 8-0.81).
Проведен поиск ассоциации полиморфизмов генов цитокинов с описанными по результатам патологоанатом и чес ко го вскрытия морфологическими изменениями ММ и выраженностью зтеросклсротического поражения коронарных артерий.
Оказалось, что среди этнических русских, внезапно умерших и имеющих изъязвления в фиброзных атеросклеротических бляшках (рис. 5) выше частота генотипа ILIВ(+3953)*С/*Т (57.14% против 34.48% а контроле, Р=0.019) и аллеля ILIB(+3953)*T (37.14% и 26.67% соответственно, Р=0.012)- Менее распространенными в данной группе являются генотип IL1 В(+3953)*С/*С (34.29% против 61.21% в контроле, Р=0.007) И аллель 1Ш(+ШЩ*С (62.86% против 73.33%, Р=0.012). Маркером повышенного риска развития ВС в сочетании с изъязвлениями в атеросклеротических бляшках является генотип lLlB(+3953) *С/*Т (OR=2.5 3, CI 1.17-5.48), пониженного - генотип IL1B(+3953)*C/*C (OR=0.33, CI 0,15-0.73). Правомерно полагать, что полиморфизм + 3953С/Т гена ill В ассоциирован с риском ВС при выраженных атеросклеротических изменениях в коронарных артериях (на стадии изъязвления фиброзной бляшки).
□ Контроль
■ ВС. изъязвление фиброзных бляшек
О ВС, фиброз
*С/*С *С/*Т *ТГТ 'С *Т
Рис. 5. Распределения частот генотипов и аллелей по полиморфизму +3953С/Т гена ILIB в группах умерших с констатированной ВС и контрольной группе (у этнических русских)
сочетания генотипов IL6(-572)*G/*C - ILIRA*II/*II (7 33% против 0 94% в контроле, Р=0 026, OR=10 82, CI 1 36-86 6) Выделенное нами сочетание генотипов IL6(-572)*G/*C — IL1RA*II/*II также с достоверно большей частотой встречается у больных с ИМ, этнических русских, по сравнению с группой контроля (7 33% против 0 94% в контроле, Р=0 026, OR=8 38, 95%С1 10964 67) Таким образом, его можно рассматривать в качестве маркера высокого риска развития ИМ и ВС у этнических русских
ВЫВОДЫ
1 Среди больных с крупноочаговым инфарктом миокарда и сопутствующей артериальной гипертензией с большей частотой, чем среди пациентов без артериальной гипертензии, выявляется отягощенная наследственность по сердечно-сосудистым заболеваниям и ожирение
2 Среди больных с постинфарктным кардиосклерозом повышена частота эксцентрической гипертрофии левого желудочка Вероятность формирования концентрической гипертрофии левого желудочка возрастает у больных с постинфарктным кардиосклерозом в сочетании с артериальной гипертензией
3 В группах лиц с констатированной внезапной смертью выраженная степень стеноза коронарных артерий (более 50%) отмечается в 90 26% случаев, увеличенная масса миокарда (более 450 г) в 48 67% случаев У значительной доли лиц на фоне алкогольного опьянения внезапная смерть развивается при степени стеноза коронарных артерий не превышающей 50% и при нормальной массе миокарда Алкогольное опьянение можно рассматривать как фактор риска развития внезапной смерти
4 У этнических татар структура наследственной предрасположенности к инфаркту миокарда включает аллельные варианты генов TNFA(-308G/A), ILI0(-627С/А) Риск развития инфаркта миокарда повышен у носитепей генотипа TNFA(-308)*G/*G, понижен > носителей генотипа TNFA(-308)*G/*A Риск развития инфаркта миокарда в возрасте до 45 лет увеличен у носителей генотипа IL10(-62Т)*А/*А, и уменьшен у носителей генотипа ILJ0(-62T)*C/*C
5 У этнических русских структура наследственной предрасположенности к инфаркту миокарда включает аллельные варианты генов IL6(-572G/C), IL 12В(-1159А/С) и IL Iß(+3953С/Т) Риск развития инфаркта миокарда повышен у носителей генотипов IL6(-572)*C/*C и IL12B(-l 159)*А/*А, и понижен у
носителей генотипа Ш2В(-1159)*А/*С Генотип 1ИВ(+3953)*Т/*Т ассоциирован с повышенным риском развития инфаркта миокарда у лиц с отягощенной по сердечно-сосудистой патологии наследственностью и сопутствующим ожирением Риск развития инфаркта миокарда существенно возрастает при сочетании генотипов 1Ь6(-572)*С/*С- 1ЫКА*П/*Л(СЖ=8 38)
6 Риск развития внезапной смерти у этнических татар понижен у носителей генотипа 1Ь6(-572)*0/*С У этнических русских риск внезапной смерти понижен у носителей генотипов И6(-572)*С/*С, II. 10(-627)*С/*А, ШВ(-511)*Т/*Т, повышен у лиц с генотипами 116(-572)*С/*С, 1Ь6(-572)*С/*С, 1Ь10(-6П)*С/*С, и существенно возрастает при сочетании генотипов И6(-572)*й/*С — 1ЫЯА *Н/*Н (011=10 82) Генотип И1 В(+3953)*С/*С у этнических русских ассоциирован с риском внезапной смерти при выраженных атеросклеротических изменениях в коронарных артериях (на стадии изъязвления фиброзной бляшки)
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1 Целесообразно проводить генотипирование у этнических русских и татар с целью оценки риска развития инфаркта миокарда по полиморфным вариантам генов ТЫРА (-3080/А), 1Ы0(-627С/А), И6(-572в/С), 1Ы2В(-1159А/С), 1ЫВ(+3953С/Т), для установления риска развития внезапной смерти по полиморфным вариантам генов И6(-572С/С), Ш0(-627С^А), 1ЫВ(-5ПТ/С)
2 При выявлении генетических маркеров повышенного риска развития инфаркта миокарда и внезапной смерти необходимо проводить раннюю первичную профилактику у практически здоровых лиц и эффективную вторичную профилактику у лиц с диагностированной ишемической болезнью сердца
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1 Молекулярно-генетическое исследование эссенциальной гипертензии и ишемической болезни сердца анализ ассоциаций с полиморфными маркерами генов-кандидатов / ОЕ Мустафина, ТР Насибуллин, И А Туктарова, Г X Тулякова [и др ] // Медицинская генетика - 2004 - № 6 - С 269-274
2 The G-308A polymorphism of tumor necrosis factor-a gene and type 1 diabetes melhtus in Bashkirs, Russians and Tatars from Bashkortostan / D Sh Avzaletdinova, GH Tuliakova, T V Morugova [et al ] // Balkan J Med Genet - 2004 - Vol 7 -P 55-60
3 Полиморфизм гена антагониста рецептора интерлейкина 1 и риск развития инфаркта миокарда в популяциях русских и татар / Г X Туликова, Т Р Насибуллин, А Н Закирова [и др ] // Медицинская генетика - 2005 - № 6 - С 277
4 The +3953 (С—>Т) polymorphism of interleukin-lp gene in myocardial infarction in Tatars and Russians from Bashkortostan / G Tulyakova, T Nasibullin, A Zakirova [et al ]//Balkan J Med Genet -2005 - Vol 8, № 1-2 -P 65-70
5 Association of the -308 (G/A) polymorphism of tumor necrosis factor a with myocardial infarction and sudden cardiac death / G Tulyakova, T Nasibullin, A Salmanov [et al ]//Balkan J Med Genet -2005 - Vol 8, № 3-4 -P 31-35
6 Cytokine gene polymorphisms and risk coronary artery disease in Tatars / I R Timasheva, О E Mustafina, TR Nasibullin, GH Tulyakova [et al ] // Eur J Hum Genet -2005 - Vol 13 - P 334
7 Gene polymorphisms in the interleukin-1 locus and the risk of myocardial infarction / G Tulyakova, T Nasibullin, A Salmanov [et al ] // 7th Balkan Meeting on Human Genetics - Skopje, 2006 - P 98
8 Association of the -308 G/A polymorphism of tumor necrosis factor alpha gene with myocardial infarction and sudden cardiac death / G Tulyakova. T R Nasibullin, A N Zakirova [et al ] // Atheroscler Suppl - 2006 - Vol 7 - P 396
9 Анализ ассоциаций полиморфного маркера +3953 С/Т гена интерлейкина-ф с риском развития инфаркта миокарда / ГХ Тулякова, О Е Мустафина, А Н Закирова [и др ] // Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии матер Рос науч конф. с междунар участием - Курск, 2006 — Т 2 -С 109
10 Исследование молекулярно-генетических основ предрасположенности к ишемической болезни сердца и внезапной кардиальной смерти по полиморфизму генов цитокиновой сети / О Е Мустафина, Г X Тулякова, Т Р. Насибуллин [и др ] // Материалы Российского национального конгресса кардиологов - М , 2006 - С 248
11 Аналт ассоциации полиморфного маркера -572G/C гена интерлейкина-6 с риском развития ннфаркга миокарда и внезапной смерти / Г \ Гухяки.д, TP Насибуллин, И А. Туктарова [и др ] // Материалы Российского национального конгресса кардиологов - M , 2006 - С 378
12 Полиморфизм гена интерлейкина 10 и риск развития инфаркта миокарда в популяциях русских и татар / Г X Тулякова, Т Р Насибуллин, И А Туктарова [и др ] // Материалы Российского национального конгресса кардиологов - M , 2006 - С 379
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АГ - артериальная гипертензия
АД - артериальное давление
ВС - внезапная смерть
ГЛЖ - гипертрофия левого желудочка
ИБС - ишемнческая болезнь сердца
ИМ - инфаркт миокарда
ИМТ - индекс массы тела
КДР, КДО - конечный диастолический размер, конечный диастолический объем
КСР, КСО - конечный систолический размер, конечный систолический объем
ЛЖ - левый желудочек
ММ - масса миокарда
ОИМ - острый инфаркт миокарда
ПИКС — постинфарктный кардиосклероз
СКА — стеноз коронарных артерий
ССЗ - сердечно-сосудистые заболевания
ФВ - фракция выброса
ФР - факторы риска
УО - ударный объем
IL (interleukine) - интерлейкин
OR (odds ratio) - показатель соотношения шансов
TNF (tumor necrosis factor) - фактор некроза опухоли
VNTR (variable number of tandem repeats)-BapbnpyioLuee число тандемных повторов
Подписано в печать 27 04 2007 Формат 60x84 1/16 Бумага ксероксная Печать ризографчческая Тираж 100 экз Заказ 109 Гарнитура «Times New Roman» Отпечатано с готовых оригннал-магетов б типографии «ПЕЧАТНЫЙ ДОМЪч ИП ВЕРКО Объем 1,0 пл Уфа, Карча Маркса 12/4, т/ф 2727-600, 2729-123
Оглавление диссертации Тулякова, Гульнара Хамитовна :: 0 ::
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ.
ВВЕДЕНИЕ.
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Факторы риска атеросклероза и ишемической болезни сердца.
1.2. Роль цитокинов в патогенезе атеросклероза и ишемической болезни сердца.
1.3. Полиморфизм генов цитокиновой сети и риск развития сердечнососудистой патологии.
1.3.1. Полиморфизм -308G/A гена фактора некроза опухоли-а.
1.3.2. Полиморфизмы -511 Т/С и +3953С/Т гена интерлейкина-1 и полиморфизм VNTR гена антагониста рецептора интерлейкина-1.
1.3.3. Полиморфизм -572G/C гена интерлейкина-6.
1.3.4. Полиморфизм -627С/А гена интерлейкина-10.
1.3.5. Полиморфизм -1159А/Сгена интерлейкина-12.
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Объект исследования и методы анализа клинических данных.
2.2. Инструментальные методы диагностики.
2.3. Молекулярно-генетические методы.
2.3.1. Выделение ДНК из венозной крови человека.
2.3.2. Полимеразная цепная реакция синтеза ДНК и рестрикционный анализ амплифицированных фрагментов ДНК. 2.3.3. Методы электрофоретического разделения амплифицированных фрагментов ДНК.
2.4. Методы статистического анализа результатов исследования.
Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Структура факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний у больных с крупноочаговым инфарктом миокарда.
3.2. Состояние внутрисердечной гемодинамики и особенности ремоделирования миокарда левого желудочка у больных острым инфарктом миокарда и постинфарктным кардиосклерозом.
3.3. Клинико-морфологическая характеристика умерших с констатированной внезапной смертью.
3.4. Анализ ассоциаций полиморфизмов генов цитокиновой сети с инфарктом миокарда и внезапной смертью.
3.4.1. Анализ ассоциаций полиморфизма -308G/A гена фактора некроза опухоли-а с инфарктом миокарда и внезапной смертью.
3.4.2. Анализ ассоциаций полиморфизма -511Т/С гена интерлейкина-1Р с инфарктом миокарда и внезапной смертью.
3.4.3. Анализ ассоциаций полиморфизма +3953С/Тгена интерлейкина-ip с инфарктом миокарда и внезапной смертью.
3.4.4. Анализ ассоциаций полиморфизма VNTR гена антагониста рецептора интерлейкина-1 с инфарктом миокарда и внезапной смертью.
3.4.5. Анализ ассоциаций полиморфизма -627С/'А гена интерлейкина-10 с инфарктом миокарда и внезапной смертью.
3.4.6. Анализ ассоциаций полиморфизма -1159А/С гена интерлейкинас инфарктом миокарда и внезапной смертью.
3.4.7. Анализ ассоциаций полиморфизма -572G/C гена интерлейкина-6 с инфарктом миокарда и внезапной смертью.
3.5. Анализ ассоциаций с инфарктом миокарда и внезапной смертью изученных полиморфизмов по сочетаниям генотипов.
Введение диссертации по теме "Кардиология", Тулякова, Гульнара Хамитовна, автореферат
Актуальность проблемы
Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) остаются по-прежнему одной .из основных причин инвалидности и смертности наиболее трудоспособной части населения, унося ежегодно в мире 17 миллионов жизней. В России от ИБС и цереброваскулярной патологии умирает около 1 миллиона 300 тысяч человек [29]. Серьезную медико-социальную проблему представляют собой такие клинические формы ИБС, как инфаркт миокарда (ИМ) и внезапная смерть (ВС), являющаяся в 20% случаев первым проявлением ИБС [24].
В настоящее время в ряде развитых стран, благодаря осуществлению программ, направленных на выявление факторов риска (ФР) ССЗ и их устранение, удалось добиться некоторого снижения заболеваемости и смертности от ИБС. Однако попытки снизить заболеваемость ИБС только за счет коррекции средовых ФР не всегда оказываются эффективными. Значительную роль в развитии ИБС играют наследственные компоненты. В связи с чем, для решения проблемы профилактики ССЗ на популяционном и индивидуальном уровнях актуальным является исследование молекулярно-генетических основ сердечно-сосудистой патологии и поиск генетических маркеров риска ИБС и ее клинических форм. Большое внимание на современном этапе уделяется исследованию генетического полиморфизма по ряду конкретных генов-кандидатов, определяющих состояние систем, вовлеченных в патогенез заболевания. К генам-кандидатам ИБС правомерно отнесят гены аполипопротеинов, белков ренин-ангиотензин-альдостероновой системы, синтаз оксида азота и многие другие.
Данные последних исследований указывают на важную роль цитокиновой сети в инициации и прогрессировании атеросклеротического процесса и ИБС [38,77, 135, 140, 142, 162, 207, 215, 216, 241]. В то же время изучение значимости полиморфизма генов цитокинов в развитии ИМ и ВС ограничено немногочисленными работами.
При молекулярно-генетическом изучении любых многофакторных заболеваний, в том числе и сердечно-сосудистых, для расчета индивидуального прогноза и создания основанных на нем рекомендаций необходимо учитывать специфику конкретной популяции. Поскольку генетическая структура этноса характеризуется особенностями распределения аллельных вариантов генов и ген-генных взаимодействий, для каждой популяции будет характерен «свой» набор генов, предрасполагающих к заболеванию [70]. Поэтому проверка гипотезы о значимости полиморфизма генов цитокинов в определении риска ИБС и ее клинических форм у этнических русских и татар, проживающих в Республики Башкортостан, является актуальной.
Цель работы - исследовать молекулярно-генетические основы ИМ и ВС по полиморфизму генов про- и противовоспалительных цитокинов в этнически однородных группах (у русских и татар Республики Башкортостан).
Задачи исследования:
1. Изучить распределение ФР ССЗ у больных острым инфарктом миокарда (ОИМ) и постинфарктным кардиосклерозом (ПИКС).
2. Исследовать состояние внутрисердечной гемодинамики и особенности ремоделирования миокарда левого желудочка у больных ОИМ и ПИКС.
3. Провести анализ клинико-морфологических характеристик внезапно умерших лиц с констатированной ВС.
4. Провести в группах больных с ИМ, ВС и в контрольной группе оценку частот генотипов и аллелей по полиморфизмам генов:
- фактора некроза опухоли-а (TNFA, -308G/A),
- интерлейкина-1 р (IL1B, -511 Т/С, +3953С/Т),
- антагониста рецептора интерлейкина-lp (IL1RA, VNTR),
- интерлейкина-6 (IL6, -572G/C),
- интерлейкина-10 {IL10, -627С/А),
- интерлейкина-12В (IL12B, -1159А/С).
5. Охарактеризовать частоты сочетаний генотипов по перечисленным полиморфизмам генов цитокиновой сети.
6. Провести анализ ассоциаций полиморфизмов генов цитокиновой сети с ИМ и ВС в этнически однородных группах (у русских и татар).
Научная новизна исследования
• Впервые в этнически однородных группах (русских и татар Республики Башкортостан) охарактеризованы молекулярно-генетические основы предрасположенности к развитию ИМ и ВС по 7 полиморфизмам генов цитокиновой сети. Установлено, что с риском развития ИМ у этнических русских ассоциированы полиморфизмы -572G/C гена IL6, -1159С/А гена IL12B и +3953С/Т гена IL1B, у этнических татар полиморфизмы -308G/A гена TNFA, -627С/А гена IL10. Полиморфизмы -627С/А гена IL10 и -511 Т/С гена IL1B вносят вклад в риск развития ВС у этнических русских, а полиморфизм -572G/C гена IL6 маркирует повышенный риск развития ВС и у русских и у татар. Выявлено сочетание генотипов IL6(-572)*G/*C - IL1RA*II/*II, ассоциированное с высоким риском развития ИМ и ВС у этнических русских. Практическая значимость работы
Результаты работы могут быть использованы при разработке основ профилактической медицины, для медико-генетического консультирования по ИМ и ВС с целью первичной и вторичной профилактики сердечно-сосудистой патологии. Материалы исследования могут быть использованы в учебно-методическом процессе на медицинских и биологических факультетах, а также на курсах постдипломного образования кардиологов, терапевтов и врачей общей практики.
Внедрение результатов исследования Результаты исследований используются в лечебной работе Республиканского кардиологического диспансера (г.Уфа). Основные положения диссертации используются в лекционном материале и при проведении практических занятий на кафедре кардиологии и функциональной диагностики ИПО ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава».
Положения, выносимые на защиту
1. Полиморфизмы генов TNFA, ILJB, IL6, IL10, IL12B ассоциированы с инфарктом миокарда и внезапной смертью.
2. У этнических русских риск развития инфаркта миокарда ассоциирован с полиморфизмами генов IL6 (-572G/C), IL12B {-1159А/С), IL1B (+3953С/Т).
3. У этнических татар риск развития инфаркта миокарда ассоциирован с полиморфизмами генов TNFA (-308G/A) и IL10 (-627С/А).
4. С развитием внезапной смерти у этнических русских ассоциированы полиморфизмы генов IL1B (-511Т/С), ILJ0 (-627С/А). Полиморфизм гена IL6 (-572G/C) маркирует повышенный риск развития внезапной смерти и у этнических русских и у этнических татар.
Заключение диссертационного исследования на тему "Полиморфизм генов цитокинов и предрасположенность к инфаркту миокарда и внезапной смерти"
ВЫВОДЫ
1. Среди больных с крупноочаговым инфарктом миокарда и сопутствующей артериальной гипертензией с большей частотой, чем среди пациентов без артериальной гипертензии, выявляется отягощенная наследственность по сердечно-сосудистым заболеваниям и ожирение.
2. Среди больных с постинфарктным кардиосклерозом повышена частота эксцентрической гипертрофии левого желудочка. Вероятность формирования концентрической гипертрофии левого желудочка возрастает у больных с постинфарктным кардиосклерозом в сочетании с артериальной гипертензией.
3. В группах лиц с констатированной внезапной смертью выраженная степень стеноза коронарных артерий (более 50%) отмечается в 90.26% случаев, увеличенная масса миокарда (более ,450 г) в 48.67% случаев. У значительной доли лиц на фоне алкогольного опьянения внезапная смерть развивается при степени стеноза коронарных артерий не превышающей 50% и при нормальной массе миокарда. Алкогольное опьянение можно рассматривать как фактор риска развития внезапной смерти.
4. У этнических татар структура наследственной предрасположенности к инфаркту миокарда включает аллельные варианты генов TNFA(-308G/A), IL10(-627С/А). Риск развития инфаркта миокарда повышен у носителей генотипа TNFA(-308)*G/*G, понижен у носителей генотипа TNFA(-308) *G/*A. Риск развития инфаркта миокарда в возрасте до 45 лет увеличен у носителей генотипа IL10f-627)*А/*А, и уменьшен у носителей генотипа IL10(-627)* С/*С.
5. . У этнических русских структура наследственной предрасположенности к инфаркту миокарда включает аллельные варианты генов IL6(-572G/C), IL12B(-1159A/C) и IL1B(+3953C/T). Риск развития инфаркта' миокарда повышен у носителей генотипов IL6(-572)*C/*C и IL12В(-1159)*А/*А, и понижен у носителей генотипа IL12B(-1159)*А/*С.
Генотип IL1B(+3953)*T/*T ассоциирован с повышенным риском развития инфаркта миокарда у лиц с отягощенной по сердечно-сосудистой патологии наследственностью и сопутствующим ожирением. Риск развития инфаркта миокарда существенно возрастает при сочетании генотипов IL6(-572)*G/*C — IL1RA т/Ш (OR=8.38).
6. Риск развития внезапной смерти у этнических татар понижен у носителей генотипа IL6(-572)*G/*G. У этнических русских риск внезапной смерти понижен у носителей генотипов IL6(-572)*G/*G, IL10(-627)*C/*A, IL1B(-511)*Т/*Т, повышен у лиц с генотипами IL6(-572)*G/*C, IL6(-572)*С/*С, IL10(-621) *С/*С, и существенно возрастает при сочетании генотипов IL6(-572)*G/*C - ILlRA*II/m (C)R=10.82). Генотип IL1B(+3953)*C/*T у этнических русских ассоциирован с риском внезапной смерти при выраженных атеросклеротических изменениях в коронарных артериях (на стадии изъязвления фиброзной бляшки).
Список использованной литературы по медицине, диссертация 0 года, Тулякова, Гульнара Хамитовна
1. Артериальная гипертензия и ее связь с наследственной отягощенностью в мужской популяции Новосибирска (программа ВОЗ Monica) / Ю.П. Никитин, М.И. Воевода, В.Н. Максимов и др.. // Кардиология. - 2005. — Т. 45, № 8 . - С . 44-45.
2. Беленков, Ю.Н. Сердечно-сосудистый континуум / Ю.Н. Беленков, В.Ю. Мареев // Сердечная недостаточность. - 2002. - № 3 (1). - 7-11.
3. Болезни сердца и сосудов: рук-во для врачей: в 4 т. / Р.С. Акчурин, А.П. Борисенко, В.И. Бураковский; под ред. Е.И. Чазова. - М.: Медицина, 1992.-Т. 2.-512 с.
4. Бышевский, А.Ш. Биохимия для врача / А.Ш. Бышевский, О.А. Терсенов - Екатеринбург: Уральский рабочий, 1994. - 383 с.
5. Васюк, Ю.А. Возможности и ограничения эхокардиографического исследования в оценке ремоделирования левого желудочка при ХСН / Ю.А. Васюк // Сердечная недостаточность. - 2003. - Т. 4, № 2. - 79-80.
6. Власов, А.Ю. Основные характеристики массы сердца / А.Ю. Власов // Судебно-медицинская экспертиза. - 1983.- Т. 26, № 4. - 25-27.
7. Власов, В.В. Введение в доказательную медицину / В.В. Власов. - М.: Медиа Сфера, 2001. - 392 с.
8. Внезапная смерть при ишемической болезни сердца / Домбровская Е.А., Кульдагова Х., Бугуев Д.Т., Бицуев В.Г. // Сов. медицина. - 1989. - № 6.-С. 51-54.
9. Волков, В.И. Провоспалительные цитокины и растворимая молекула межклеточной адгезии-1 при ишемической болезни сердца / В.И. Волков, А. Серик // Кардиология. - 2002. - № 9. - 12-16.
10. Гареева, Е.А. Клинико-морфологическая характеристика внезапной смерти от ишемической болезни сердца: дис. ... канд. мед. наук. - Уфа, 2000.-155 с.
11. Гитель, Е.П. Роль интерлейкинов в патогенезе атеросклероза / Е.П. Гитель, Д.Е. Гусев, Е.Г. Пономарь // Клиническая медицина. - 2006. - № 6 . -С . 10-16.
12. Животовский, Л.А. Популяционая биометрия / Л.А. Животовский. - М.: Наука, 1991.-272 с.
13. Жуковский, Г.С. Курение и риск развития ИБС / Г.С. Жуковский, И.С. Глазунов, А.Д. Деев // Кардиология. - 1987. - № 11. - 11-14.
14. Зотова, И.В. Синтез оксида азота и развитие атеросклероза / И.В. Зотова, Д.А. Затейщиков, Б.А. Сидоренко // Кардиология. - 2002. - № 4. - 58-67.
15. Иванов, А.П. Ремоделирование левого желудочка у больных артериальной гипертонией / А.П. Иванов, И.А. Выжимов // Клиническая медицина. - 2006.-№ 5. - 38-41.
16. Изменения поверхностного фенотипа эндотелиальных клеток под влиянием провоспалительных и противовоспалительных цитокинов / Э.А. Старикова, Е.И. Амчиславский, Д.И. Соколов и др.. // Медицинская иммунология. - 2003. - Т. 5, № 1-2. - 39-48.
17. Иммунопатология застойной сердечной недостаточности, роль цитокинов / Е.Л. Насонов, М.Ю. Самсонов, Ю.Н. Беленков и др.. // Кардиология. - 1999. - № 3. - 66-73.
18. Коненков, В.И. Структурные основы и функциональная значимость аллельного полиморфизма генов цитокинов человека и их рецепторов / В.И. Коненков, М.В. Смольникова // Мед. иммунология. - 2003. - № 5. -С. 11-28.
19. Липовецкий, Б.М. Внезапная сердечная смерть (обзор литературы, дискуссионные вопросы, собственные наблюдения) / Б.М. Липовецкий // Терапевт, арх. -1992. -№ 12 . -С . 108-111.
20. Липовецкий, Б.М. Инфаркт, инсульт, внезапная смерть. Факторы риска, предвестники, профилактика / Б.М. Липовецкий. - СПб.: Специальная литература, 1997. - 191 с.
21. Мазур, В.В. Особенности постинфарктного ремоделирования левого желудочка сердца у больных артериальной гипертонией / В . В . Мазур, Е.С. Мазур, Ч.Б. Пун // Кардиология. - 2004. - №7. - 53-56.
22. Мазур, Н.А. Внезапная смерть больных ишемической болезнью / Н.А. Мазур. - М.: Медицина, 1985. - 189 с.
23. Мазур. Н.А. Внезапная смерть (стратификация риска и профилактика) / Н.А. Мазур // Сердце. - 2006. - JNo 1. - 24-32.
24. Маниатис, Т. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование / Т. Маниатис, Э. Фрич, Дж. Сэмбрук. - М.: Мир, 1984. -399 с.
25. Моисеев, В. Роль воспаления в процессах атерогенеза и в развитии сердечно-сосудистых осложнений / В. Моисеев, Е. Павликова, И. Мерай // Врач. - 2003. - № 3. - 3-6.
26. Моисеев, B.C. Концепция факторов риска / B.C. Моисеев // Клинич. фармакология и терапия. - 2002. - Т. 11, № 3. - 4-6.
27. Оганов, Р.Г. Вклад сердечно-сосудистых и других неинфекционных заболеваний в здоровье населения России / Р.Г. Оганов, Г.Я. Масленнокова // Сердце. - 2003. - № 2. - 58-61.
28. Оганов, Р.Г. Профилактика сердечно-сосудистых заболеваний - реальный путь улучшения демографической ситуации в России / Р.Г. Оганов, Г.Я. Масленникова // Кардиология. - 2007. - Т. 47, № 1. - 4-7.
29. Особенности систолической функции и ремоделирования левого желудочка у больных артериальной гипертензией и ишемической болезнью сердца / Ю.А. Васюк, А.А. Козина, Е.Н. Юш;ук и др.. // Сердечная недостаточность. - 2003. - Т. 4, № 2, - 79-80.
30. Павликова, Е.П. Клиническое значение интерлейкина-6 и фактора некроза опухоли а при ишемической болезни сердца / Е.П. Павликова, И.А. Мерай // Кардиология. - 2003. - № 8. - 68-71.
31. Покровская, Е.В. Атеросклероз и иммунная система (по материалам семинара Европейского общества атеросклероза) / Е.В. Покровская // Кардиология. - 2001. - № 10. - 69-73.
32. Преображенский, Д.В. Курение как фактор риска ИБС /Д.В. Преображенский, И.В. Шатунов // Кардиология. - 1988. - № 10. - 113-120.
33. Распространенность факторов риска среди больных артериальной гипертонией в Европейской части Российской Федерации / В.Ю. Мареев, И.В. Фомин, Ф.Т. Агеев и др.. // Сердечная недостаточность. - 2004. -Т. 5, № 6. - 282-284.
34. Роль воспаления в клинике внутренних болезней. Проблемы и перспективы / Ю.Б. Белоусов, А.Г. Чучалин, Е.Л. Насонов и др.. // Русский медицинский журнал. - 2001. - Т. 9, № 12. - 487-502.
35. Седьмой отчет совместной национальной комиссии по предупреждению, выявлению, оценке и лечению высокого артериального давления / A.V. Chobanian, G.L. Barkis, H.R. Black et al.. // Сердце. - 2004. - Т. 3, № 5. -С. 224-261.
36. Симбирцев, А.С. Биология семейства интерлейкина-1 человека / А.С. Симбирцев // Иммунология. - 1998. - № 3. - 9-17.
37. Титов, В.Н. Общность атеросклероза и воспаления: специфичность атеросклероза как воспалительного процесса (гипотеза) / В.Н. Титов // Клинич. лаб. диагностика. - 2000. - № 4. - 3-10.
38. Титов, В.Н. Роль макрофагов в становлении воспаления, действие интерлейкина-1, интерлейкина-6 и активность гипоталямо-гипофизарной системы (Обзор литературы) / В.Н. Титов // Клинич. лаб. диагностика. -2003 . -№12 . -С . 3-11.
39. Фрейдлин, И.С. Кооперативные эффекты цитокинов / И.С. Фрейдлин, Д.И, Соколов // Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии.-2001. - № 1.-С. 311-324.
40. Чурина, К. Особенности развития и течения инфаркта миокарда у мужчин в возрасте до 50 лет / К. Чурина, И.Е. Ганелина, С В . Черниговская // Терапевт, архив. - 1979. - № 4. - 74-78.
41. Шальнев, В.И. Роль воспалительных факторов в патогенезе атеросклеротического поражения сосудов / В.И. Шальнев // Рос. семейный врач. - 2005. - № 3. - 4-10.
42. Шевченко, Н.М. Кардиология / Н.М. Шевченко. - М.: Медицинское информационное агентство, 2004. - 539 с.
43. Эпидемиология неинфекционных заболеваний / под ред. A.M. Вихерта, А.В. Чаклина. - М.: Медицина, 1990. - 269 с.
44. Allele associations reveal four prominent haplotypes at the human interleukin- 6 (IL-6) locus / N. Jordanies, J. Eskdale, R. Stuart, G. Gallagher // Gen. Immunol. - 2000. - Vol. 1. - P. 451-455.
45. Allele frequencies of polymoфhisms of TNFA, IL-6, IL-10 and IFNG in an Italian Caucasian population / F. Poll, A. Nocco, S. Berra et al.. // Eur. J. Immunogen. - 2002. - Vol. 29. - P. 237-240.
46. Allelic variants in the interleukin-6 gene and essential hypertension in Japanese women / T. Nakajama, N. Ota, H. Yoshida et al.. // Genes. Immunity.-1999.-Vol. l . - P . 115-119.
47. Allelic variation at the interleukin ip gene is associated with decreased bone mass in patients with inflammatory bowel diseases / A. Nemetz, M. Toth, М.А. Garcia-Gonzalez et al.. // Gut. - 2001. - Vol. 49. - P. 644-649.
48. Alteration of monocyte function in patients with grovH;h hormone (GH) deficiency: effect of substitutive GH therapy / O. Serri, P. St-Jacques, M, Artippour, G. Renier // J. Clin. Endicrinol. Metab. - 1999. - Vol. 84. - P. 58-63.
49. An investigation of polymorphism in the interleukin-10 gene promoter / D. M. Turner, D. M. Williams, D. Sankaran et al.. // Eur. J. Immunogenet. - 1997. -Vol.24.-P. 1-8.
50. Angiotensin induces inflammatory activation of human vascular smooth muscle cells / R. Kranzhofer, J. Schmidt, C.A. Pfeiffer et al.. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1999. - Vol. 19. - P. 1623-1629.
51. Apoptosis of vascular endothelial cells by fibroblast growth factor deprivation / S. Araki, Y. Shimada, K. Kaji et al.. // Biochem. Biophys. Res. Commun. -1990.-Vol. 168.-P. l 194-1200.
52. Arterial inflammation in mice lacking the interleukin 1 receptor antagonist gene / M. J. Nicklin, D. E. Hughes, J. L. Barton et al.. // J. Exp. Med. - 2000. -Vol . 191.-P. 303-312.
53. Association between bone loss and promoter polymorphism in the IL-6 gene in elderly Japanese women with hip fracture / D. Feng, H. Ishibashi, S. Yamamoto et al.. // J. Bone Miner. Metab. - 2003. - Vol. 21. - P. 225-228.
54. Association between the interleukin-1 beta C(-511)T ро1утофЫ8т and blood pressure in a Chinese hypertensive population / G. Huang, T. Niu, S. Peng et al.. // Immunol. Lett. - 2004. - Vol. 91, № 2-3. - P. 159-62.
55. Association of an A allele for imterleukin-10 -627 gene polymorphism with higher susceptibility to endometriosis / Y.Y. Hsieh, C.C. Chang, F.J. Tsai et al.. // J. Reprod. Med. - 2003. - Vol. 48. - P. 735-738.
56. Association of elevated interleukin-6 and C-reactive protein levels with mortality in the elderly / T.B. Harris, L. Ferruci, R.P. Tracy et al.. // Am. J. Med. - 1999. - Vol. 106. - P. 506-512.
57. Association of endotoxemia with carotid atherosclerosis and cardiovascular disease: prospective results from the Bruneck study / C.J. Wiederman, S. Kiechl, S. Dunzendorfer et al.. // J. Am. Coll. Cardiol. - 1999. - Vol. 34. - P. 1975-1981.
58. Association of the interleukin-ip genetic polymorphism and gastric cancer risk in Japanese / S. Kato, M. Onda, S. Yamada et al. // J. Gastroenterol. -2OOI.-V0I. 3 6 . - P . 696-699.
59. Association of the tumor necrosis factor a -308 but not the interleukin 10 -627 promoter polymorphosm with genetic susceptibility to primary sclerosing cholangitis / S.A. Mitchell, J. Grove, A. Spurkland et al.. // Gut. - 2001. -Vol. 49. - P. 288-294.
60. Association of TNF2, a TNF-a Promoter Polymorphism, With Septic Shock Susceptibility and Mortality / J.P. Mira, A, Cariou, F. Grail et al.. // J. Am. Med. Assoc. - 1999. - Vol. 282. - P. 561-568.
61. Bacterial endotoxin is an active component of cigarette smoke / J.D. Hasday, R. Bascom, J.J. Costa et al.. // Chest. - 1999. - Vol. 115. - P. 829-835.
62. Bazzoni, F. Tumor necrosis factor ligand and receptor families / F. Bazzoni, B.Beutler/ /N.Eng.J.Med.-1996.-Vol. 334.-P. 1717-1725.
63. Beta-adrenoceptor antagonists suppress elevation in body temperature and increase in plasma IL-6 in rats exposed to open field / D. Soszynski, W. Kozak, C.A. Conn et al.. //Neuroendocrinology. - 1996. - Vol. 63. - P. 459-467. "
64. Beutler, B. Tumor necrosis, cachexia, shock, and inflammation: a common mediator / B. Beutler, A. Cerami // Arm. Rev. Biochem. - 1988. - Vol. 57. - P. 505-518.
65. Beutler, B.A. Recombinant interleukin 1 suppresses lipoprotein lipase activity in 3T3-Llcells / B.A. Beutler, A. Cerami // J. Immunol. - 1985. - Vol. 135. -P. 3969-3971.
66. Biologically modified LDL increased the adhesive proprties of endothelial cells / J. Frostergard, A. Haegerstrand, M. Gidlund, J. Nilsson // Atherosclerosis. - 1991. - Vol. 90. - P. 119-126.
67. Bishop, T. Analysis of multifactirial disease / T. Bishop, P. Sham. - S. 1..: BIOS Ltd., 2000.-345 p.
68. Burstein, S.A. Cytokines, platelet production and haemostasis / S.A. Burstein // Platelets. -1997. - Vol. 8. - P.93-104.
69. Cachectine/tumor necrosis factor induces cachexia, anemia, and inlammation / K.J. Tracey, H.E. Wei, K.R. Manogue et al.. // J. Exp. Med. - 1988. - Vol. 167.-P. 1211-1227.
70. Changes in serum interleukin-8 and interleukin-12 levels in patients with ischemic heart disease in a Chinese population / R.H. Zhou, Q. Shi, H.Q. Gao, B.J. Shen // J. Atheroscler. Thromb. - 2001. - Vol. 8. - P. 30-32.
71. Cigarette smoking influences cytokine production and anti-oxidant defenses / P.S. Tappia, K.L. Troughton, S.C. Langley-Evans et al.. // Clin. Sci. - 1995. -Vol . 88.-P. 485-489.
72. Circadian interrelationships among levels of plasma fibrinogen, blood platelets and serum interleukin-6 / E.L. Kanabroski, R.B. Sothem, H.L. Messmore et al.. // Clin. Appl. Thromb. Haemostasis. - 1999. - Vol. 5, J^ o 1. -P. 37-42.
73. Circulating levels of IL-ip, a prothrombotic c3^okine, are elevated in unstable angina versus stable angina / A.D. Simon, S. Yazdani, W. Wang et al.. // J. Thrombos. Thrombolis. - 2000. - Vol. 9. - P. 217-222.
74. Clinical use of C-reactive protein for the prognostic stratification of patients with ischemic heart disease / L.M. Biasucci, G. Liuzzo, C. Colizzi, V. Rizzello // Ital. Heart. J. - 2001. - Vol. 2. - P. 164-171.
75. Cloning and expression of murine lymphotoxin cDNA / C.B. Li, P.W. Gray, P.F. Lin et al.. // J. Immunol. - 1987. - Vol. 138. - P. 4496-450L
76. Cloning and expression of the human interleukin-6 (BSF-2/IFN beta 2) receptor / K. Yamasaki, T. Taga, Y. Hirata et al.. // Science. - 1998. - Vol. 241.-P. 825-828.
77. Cloning, sequence and expression of two distinct human interleukin-1 complementai-y DNAs / K.J. March, B. Mosley, A. Larsen et al.. // Nature. -1985.-Vol. 315.-P. 641-647.
78. Complement and atherogenesis. Binding of CRP to degraded, nonoxidized
79. DL .enhances complement activation / S. Bhakdi, M. Torzewski, M. Klouche, M. Hemmes // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1999. - Vol. 19. - P . 2348-2354.
80. Concentrations of interleukins, interferon, and C-reactive protein in stable and unstable angina pectoris / H. Yamashita, K. Shimada, E. Seki et al.. // Am. J. Cardiol. - 2003. - Vol. 91. - P. 133-136.
81. C-reactive protein binding to FcgRIIa on human monocytes and neutrophils is allele-specific / M.P. Stein, J.C. Edberg, R.P. Kimberly et al.. // J. Clin. Invest. - 2000. - Vol. 105. - P. 369-376.
82. C-reactive protein induces human peripheral blood monocj^es to synthesize tissue factor / J. Cermak, N.S. Key, R.R. Bach et al.. // Blood. - 1993. - Vol. 82.-P. 513-520.
83. Cross-regulatory roles of interleukin (IL)-12 and IL-10 in atherosclerosis / K. Uyemura, L.L. Demer, S.C. Castle et al.. // J. Clin. Invest. - 1996. - Vol. 97. -P . 2130-2138.
84. Cytokine expression in advanced human atherosclerotic plaque: dominance of pro-inflammatory (Thl) and macrophage-stimulating cj^okines / J. Frostegard, A.K. Ulfgren, P. Nyberg et al.. // Atherosclerosis. - 1999. - Vol. 145.-P. 33-43.
85. Cytokines and growth factors positively and negatively regulate interstitial collagen gene expression in human vascular smoth muscle cells / E.P. Amento, N. Ehsani, H. Palmer, P. Libby // Arterioscler. Thromb. - 1991. -Vol. 11.-P.1223-1230.
86. Danis, V.A. Increased frequency of the uncommon allele of the tumor necrosis factor alpha gene polymorphism in rheumatoid arthritis and systemic lupus-erythematosus / V.A. Danis, M. MillinGton // Dis. Markers. - 1994. -Vol. 12 . -P. 127-133.
87. Das, U.N. Free radicals, cytokines and nitric oxide in cardiac failure and myocardial infarction / U.N. Das // Mol. Cell. Biochem. - 2000. - Vol. 215. -P.145-152.
88. Das, U.N. Transforming growth factor-beta: is it an endogenous cardioprotector? / U.N. Das // Med. Sci. Res. - 1993. - Vol. 21. - P. 373-375.
89. Davenport, P. The role of interleukin-4 and interleukin-12 in the progression of atherosclerosis in apoE-deficient mice / P. Davenport, P.O. Tipping // Am. J. Pathol.-2003.-Vol. 163. - P.1117-1125.
90. Davoodi-Semiromi, A. IL-12p40 is associated with type 1 diabetes in Caucasian-American families / A. Davoodi-Semiromi, J.J. Yang, J.X. She // Diabetes. - 2002. - Vol. 51. - P. 2334-2336.
91. Dubios, D. A formula to estimate the approximate surface area if height and weight are known / D. Dubios, F. Dubios // Arch. Intern. Med. - 1976. - Vol. 17.-P. 863-871.
92. Effect of a polymorphism in the human tumor necrosis factor a promoter on transcriptional activation / A.G. Wilson, J.A. Symsons, T.L. McDowell et al.. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1997. - Vol. 94. - P. 3195-3199.
93. Effect of interferon on cachectin expression by mononuclear phagocytes / B. Beutler, V. Tkacenko, I. Milsark et al.. // J. Exp. Med. - 1986. - Vol. 164. - P. 1791 -1796.
94. Effect of interleukin-6 promoter polymorphisms in survivors of myocardial infarction / D. Kelberman, E. Hawe, L.A. Luong et al.. // Thromb. Haemost. - 2004. - Vol. 92. - P. 1122-1128.
95. Effect of tumor necrosis factor (TNF a) promoter base transition on transcriptional activity / A.G. Wilson, J.A. Symons, T.L. McDowell et al.. // Br. J. RJieumatol. - 1994. - Vol. 33. - P. 89.
96. Effect of tumor necrosis factor gene polymorphism on patients with congestive heart failure / T. Kubota, D.M. MCNamara, J.J. Wang et al.. // Circulation. - 1998. - Vol. 97. - P. 2499-2501.
97. Elevated interleukin-10 levels correlated with disease activity in systemic lupus erytematosus / Y.B. Park, S.K. Lee, D.S. Kim et al.. // Clin. Exp. Rheumatol. - 1998. - Vol. 16. - P. 283-288.
98. Endotoxin and tumor necrosis e the cardiovascular profile septic shock / C. Natanson, P.W. Eichenholz, R.L. Danner et al.. // J. Exp. Med. - 1991. - Vol. 169.-P. 823-832.
99. Evidence for the involvement of interleukin-10 in the differential deactivation of murine peritoneal macrophages by prostaglandin E / G. Strassmann, V. Patil-Koota, F. Finkelman et al. // J. Exp. Med. - 1994. - Vol. 180. - P. 2365-2370.
100. Evidence of cardiocyte apoptosis in myocardium of dogs with chronic heart failure / V.G. Sharov, H.N. Sabbah, H. Shimoiama et al.. // Am. J. Pathol. -1996.-Vol. 148.-P. 41-49.
101. Excessive fat accumulation is associated with the TNFa -308G/A promoter polymorphism in women but not in men / J. Hoffstedt, P. Eriksson, L. Hellstrom et al.. // Diabetologia. - 2000. - Vol. 43. - P. 117-120.
102. Exogenous interferon-y enhances atherosclerosis in apolipoprotein E-/- mice / S.C. Whitman, P. Ravisancar, H. Elam, A. Daugherty // Am. J. Pathol. - 2000. -Vol. 157.-P. 1819-1824.
103. Expression of 1С AM-1 and VCAM-1 and monocyte adherence in arteries exposed to altered shear stress / P.L. Walpola, A.I. Gotlieb, M.I. Cybulsky, B.L. Langille // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1995. - Vol. 15. - P. 2-10.
104. Expression of interleukin-1 alpha and beta genes by human blood polymoiphonuclear leukocytes / P. Lord, L. Wilmoth, S.B. Mizel et al.. // J. Clin. Invest. - 1991. - Vol. 87. - P. 1312-1321.
105. Expression of interleukin-6 in atherosclerotic lesions of male ApoE-knockout mice: inhibition by 17 beta-estradiol / D. Sukovich, K. Kauser, F. Shirley et al.. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1998. - Vol. 18. - P. 1498-1505.
106. Fibrinogen: a link between chronic infection and coronary heart disease / P. Patel, D. Carington, D.P.E. Strachan et al.. // Lancet. - 1994. - Vol. 343. - P. 1634-1635.
107. Fried, S.K. Omental and subcutaneous adipose tissue of obese subjects release interleukin-6: depot difference and regulation by glycocorticoid / S.K. Fried, D.A. Bunkin, A.S. Greenberg // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 1998. - Vol. 83. - P. 847-850.
108. Gausch, J.F. Five novel intragenic dimoфhisms in the human interleukin-1 genes combine to high informativity / J.F. Gausch, R.M. Bertina, P.H. Reitsma // Cytokine. - 1996. - Vol. 8. - P. 598-602.
109. Gene polymorphism in the TNF locus and the risk of Myocardial infarction / J.С Padovani, A. Pazin-Filho, M.V. Simoes et al.. // Thrombosis Research. -2000. - Vol. 100. - P. 263-269.
110. Gene therapy ingibiting neointimal vascular lesion: in vivo transfer of endothehal cell nitric oxide synthase gene / H.E. Von Der Leyen, G.H. Gibbons, R. Morishia et al.. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1995. - Vol. 92. -P . 1137-1141.
111. Genetic and functional evaluation of an interleukin-12 polymoфhism (IDDM18) in families with type 1 diabetes / R. Bergholdt, P. Ghandil, J. Johannesen et al.. // J. Med. Genet. - 2004. - № 41. - P. е39.
113. Genetic polymorphism of IL-12 p40 gene in immune-mediated disease / M.A. Hall, E. McGlinn, G. Coakley et al.. // Genes. Immun. - 2000. - Vol. 1. - P. 219-224.
114. Genetic polymorphisms of interleukin-ip in association with the development of alcoholic liver disease in Japanese patients / M. Takamatsu, M. Yamauchi, Y. Maezawa et al.. // Am. J. Gastroenterol. - 2000. - Vol. 95. - P. 1305-1311.
115. Genetic variation in the interleukin-10 gene promoter and systemic lupus erythematosus / M. Lazarus, A.H. Hajeer, D. Turner et al.. // J. Rheumatol. -1997.-Vol.24.-P. 2314-2317.
116. Gesser, B. Identification of functional domains on human interlekin 10 / B. Gesser, H. Leffers, T. Jinquan // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1997. - Vol. 94. - P. 14620-14625.
117. Hanson, D. Demonstration of interleukin 1 activity in apparently homogeneous specimens of the pi 5 form of rabbit endogenous pyrogen / D. Hanson, P. Murphy // Infect. Immun. - 1984. - Vol. 45. - P. 483-490.
118. Hansson, G.K. Immune Mechanisms in Atherosclerosis / G.K. Hansson // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2001. - Vol. 21. - P. 1876-1890.
119. Huang, D. Complete primary structure, chromosomal localisation, and definition of polymorphisms of the gene encoding the human interleukin-12 p40 subunit / D. Huang, M. Cancilla, G. Marahan // Genes. Immun. - 2000. -Vol. 1.-P. 515-520.
120. Human and murine interleukin 1 possess sequence and structural similarities / P.E.-Auron, L. Rosenwasser, K. Matsushima et al.. // J. Mol. Cell. Immunol. - 1985.-Vol. 2 . -P . 169-177.
121. Human subcutaneous adipose tissue secretes interleukin-6 but not TNF-a in vivo / V. Mohamed-Ali, S. Goodrick, A. Rawesh et al.. // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 1997. - Vol. 82. - P. 4196-4200.
122. IL-10 inhibits cytokine prodution by activated macrophages / D.F. Fiorentino, A. ZIotnik, T.R. Mosmann et al.. // J. Immunol. - 1991. - Vol. 147. - P. 3815-3822.
123. IL-10 inhibits prostaglandin E2 production by lipopolysaccharide-stimulated monocytes / H. Niiro, T. Otsuka, S. Kuga et al.. // Int. Immunol. - 1994. -Vol. 6.-P. 661-664.
124. IL-10 is produced by subsets of human CD4+T-ceII clones and peripheral blood T-cell / H. Yssel, R. de Waal Malefyt, M.G. Roncarolo et al.. // J. Immunol. - 1992. - Vol. 149. - P. 2378-2384.
125. IL12B polymorphism and type 1 diabetes in the Italian population / L. Nistico, G. Giorgi, M. Giordano et al.. // Diabetes. - 2002. - Vol. 51. - P. 1649-1650.
126. IL-lb,gene polymorphisms influence the course and severity of inflammatory bowel disease / A. Nemetz, M.P. Nosti-Escanilla, T. Molnar et al.. // Immunogenetics. - 1999. - Vol. 49. - P. 527-531.
128. IL-6 and IL-1 receptor antagonist in stable angina pectoris and relation of IL-6 to clinical findings in acute myocardial infarction / A.S. Gabriel, S. Ahnve, B. Wretlind, A. Martinsson // J. Intern. Med. - 2000. - Vol. 248. - P. 61-66.
129. Increased adipose tissue expression of tumor necrosis factor-a in human obesity and insulin resistance / G.S. Hotamisligil, P. Amer, J.F. Caro et al.. // J. Clin. Invest. - 1995. - Vol. 95. - P. 2409-2415.
130. Increased Thl activity in patients with coronary artery disease / J.L. Femandes, R.L. Mamoni, J.L. Orford et al.. // Cytokine. - 2004. - Vol. 26. -P. 131-137.
131. Increases in interleukin-6 and matrix metalloproteinase-9 in the infarct-related coronary artery of acute myocardial infarction / H. Funayama, S.E. Ishikava, N. Kubo et al.. // Circ. J. - 2004. - Vol. 68, № 5. - P. 451-4.
132. Inflammation, obesity, stress and coronary heart disease: is interleukin-6 the link? / J.S. Yudkin, M. Kumari, S.E. Humphries, V. Mohamed-Ali // Atherosclerosis. - 2000. - Vol. 148. - P. 209-214.
133. Inflammatory cytokines predicts one-year outcome of patients with acute coronary syndromes but not in stable angina / R.H. Heinisch, C.R. Zanetti, F. Comin et al.. //Eur. Heart. J. -2001 . -Vol. 22. - P. 518.
134. Inflammatory gene load is associated with enhanced inflammation and early carotid atherosclerosis in smokers / P. Jerrard-Dunne, M. Sitzer, P. Risley et al.. // Stroke. - 2004. - Vol. 35. - P. 2438-2444.
135. Interleukin 10 gene -627 polymorphisms in Chinese patients with early-onset coronary heart disease / Y.Y. Wang, X.J. Yu, P.L. Wang, Z.M. Bao // Zhorighua Yi Xue Yi Chuan Xue Za Zhi. - 2005. - Vol. 22, № 6. - P. 679-81.
136. Interleukin 10 promoter region polymorphisms and susceptibility to advanced alcoholic liver disease / J. Grove, A.K. Daly, M.F. Bassendine et al.. // Gut. -2000. - Vol. 46. - P. 540-545.
137. Interleukin-1 cluster and tumor necrosis factor-alpha gene polymorphisms inpolymyalgia rheumatica / L. Boiardi, C. Salvarani, J.M. Timms et al.. // Clin."Exp. Rheumatol. - 2000. - Vol. 18. - P.675-681.
138. Interleukin-1 polymorphisms associated with increased risk of gastric cancer / E.M. El-Omar, M. Carrington, W.H. Chow et al.. // Nature. - 2000. - Vol. 404. - P. 398-402.
139. Interleukin-1 receptor antagonist allele (IL1RN*2) associated with nephropathy in diabetes mellitus / A.I.F. Blakemore, A. Cox, A.M. Gonzalez et al..//Hum. Genet. - 1996. - Vol. 97. - P.369-374.
140. Interleukin-1 receptor antagonist gene polymoфhism and coronary artery disease / S.E. Francies, N.J. Camp, R.M. Dewberry et al.. // Circulation. -1999:-Vol.99.-P. 861-866.
141. Interleukin-1 receptor antagonist gene polymorphism as a disease severity factor in systemic lupus erythematosus / A.I.F. Blakemore, J.K. Tarlow, M.J. Cork et al.. // Arthritis. Rheum. - 1994. - Vol. 37. - P. 1380-1385.
142. Interleukin-1 receptor antagonist gene ро1утофЫ8т in carotid atherosclerosis / B.B. Worrall, S. Azhar, P.A. Nyquist et al.. // Stroke. -2003 . - Vol. 34, № 3. - P. 790-3.
143. Interleukin-10 / K.W. Moore, A. O'Garra, R. de Waal Malefyt et al.. // Ann. Rev. Immunol.-1993.-Vol. 11.-P. 165-190.
144. Interleukin-10 and transforming growth factor-beta promoter polymorphisms in allergies and asthma / K. Hobbs, J. Negri, M. Klinnert et al.. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. - 1998. - Vol. 158. - P. 1958-1962.
145. Interleukin-10 and tumor necrosis factor gene polymorphisms and risk of coronary artery disease and myocardial infarction / W. Koch, A. Kastrati, C. BotiGer et al.. // Atherosclerosis. - 2001. - Vol. 159. - P. 137-144.
146. Interleukin-10 blocks atherosclerosis events in vitro and in vivo / L.J. Pinderski-Oslund, C.C. Hedrick, T. Olvera et al.. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1999. - Vol. 19. - P. 2847-2853.
147. Interleukin-10 inhibits B7 and intercellular adhesion molecule-1 expression on human monocytes / F. Willems, A. Marchant, J-P. Delville et al.. // Eur. J. Immunol. - 1994. - Vol. 24. - P. 1007-1009.
148. Interleukin-10 inhibits the induction of monocyte procoagulant activity by bacterial lipopolysacchride / O. Pradier, С Gerard, A. Delvaux et al.. // Eur. J. Immunol. - 1993. - Vol. 23. - P. 2700-2703.
149. Interleukin-6 (IL-6) and the prognosis of abdominal aortic aneurysms / K.G. Jones, D.J. Brull, L.C. Brown et al.. // Circulation. - 2001. - Vol. 103. - P. 2260-2265.
150. Interleukin-6 -174G>C polymorphism and risk of coronary heart disease in West of Scotland Coronary Prevention Study (WOSCOPS) / F. Basso, G.D-O. 1.owe, A. Rumlex et al.. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2002. - Vol. 22.-P.599-604.
151. Interleukin-6 exacerbates early, atherosclerosis in mice / S.A. Huber, P. Sakkinen, D. Conze et al.. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1999. - Vol. 19.-P. 2364-2367.
152. Interleukin-6 family of cytokines and gplBO / T. Kishimoto, S. Akira, M. Narazaki, T. Taga // Blood. - 1995. - Vol. 86. - P. 1243-1254.
153. Interleukin-6 gene transcripts are expressed in human atherosclerotic lesion / Y. Seino, U. Ikeda, M. Ikeda et al.. // Cytokines. - 1994. - Vol. 6. - P. 87-91.
154. Interleukin-6 ро1утофЫ8т and susceptibility to myocardial infarction; the ECTIM study / J.L. Georges, V. Loukaci, O. Poirier et al.. // J. Mol. Med. -2OOI.-V0I. 79 . -P . 300-305.
155. Isolation of the human interleukin 10 promoter. Characterization of the pronioter activity in Burkitt's lymphoma cell lines / D. Kube, C. Platzer, von A. Knethen et al.. // Cytokine. - 1995. - Vol. 7. - P. 1-7.
156. James, T.N. Normal and abnormal consequences of apoptosis in the human heart: from postnatal morphogenesis to paroxismal arrythmias / T.N. James // Circulation. - 1994. - Vol. 90. - P. 556-573.
157. Johns, M.B. Purification of human Genomic DNA from whole blood using proteinase К treatment followed by phenol-chlorophorm extraction / M.B. Johns, J.E. Paulus-Thomas // Anall. Biochem. - 1989. - Vol. 180. - P. 276-278.
158. Kanriel, W. Sudden coronary death; the Framingham study / W. Kannel, H. Thomas // Ann. N. Y. Acad. Sci. - 1982. - Vol. 382. - P. 3-21.
159. Kelly, R.A. Nitric oxide and cardiac function / R.A. Kelly, J.L. Baffigand, T.W. Smith//Circulat. Res. - 1996. - Vol. 79. - P. 363-380.
160. Kerr, R. Interleukin 6 and haemostasis. Review / R. Kerr // Br. J. Haemat. - 2001.-Vol. 115.-P. 3-12.
161. Kishimoto, T. Cytokine signal transduction / T. Kishimoto, T. Taga, S. Akira // Cell. - 1994. - Vol. 76. - P. 253-262.
162. Komitzer, H. Smoking, coffee and atherosclerosis / H. Komitzer // Act. Cardiol. - 1988. - Vol. 29. - P. 97-106.
163. Kornman, K.S. Genetic variations in cytokine expression: a risk factor for severity of adult periodontitis / K.S. Komman, F.S. di Giovani // Ann. Periodontol. - 1998. - Vol. 3. - P. 327-338.
164. Lack of association between interleukin-1 receptor antagonist protein gene polymorphism and bone mineral density in Hungarian postmenopausal women / E. Bajnok, L Takacs, P. Vargha et al.. // Bone. - 2000. - Vol. 27. -P. 559-562.
165. Lack of association of interleukin-Ip gene polymorphisms in Chinese patients with systemic lupus erythematosus / CM. Huang, M.C. Wu, J.Y. Wu et al.. // Rheumatol. Int. - 2002. - Vol. 21. - P. 173-175.
166. Left ventricular systolic and diastilic dysfunction after infiision of tumor necrosis factor-a in conscious dogs / F.D. Pagani, L.S. Baker, С Hsic et al.. // J. Clin. Invest. - 1992. - Vol. 90. - P. 389-398.
167. Libby, P. Molecular bases of the acute coronary syndrome / P. Libby //. Circulation. - 1995. - Vol. 91. - P. 2844-2850.
168. Linkage disequilibrium of a type 1 diabetus susceptibility locus with a regulatory IL12B allele / G. Morahan, D. Huang, S.I. Ymer et al.. // Nat. Genet. -2001. - Vol. 27. - P. 218-221.
169. Meade, T. Effect of changes in smoking and other characteristics on clotting factorjs and the risk of IHD / T. Meade, J. Imeson, Y. Stirling // Lancet. -1987. - Vol. 2, № 8566. - P. 986-988.
170. Mechanism of suppression of nitric oxid synthase expression by interleukin-4 in primary mouse macrophages / C. Bogdan, Y. Vodovotz, J. Paik et al.. // J. 1.euk'oc. Biol. - 1994. - Vol. 55. - P. 227-233.
171. Megakaryocyte ploidy and platelet changes in human diabetes and atherosclerosis / A.S. Brown, Y. Hong, A. de Belder et al.. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1997. - Vol. 17. - P. 802-807.
172. Mesangial cell-derived interleukin-10 modulates mesangial response to lipopplysaccharide / B. Fouqueray, V. Boutard, C. Philippe et al.. // Am. J. Patol. - 1995. - Vol. 147. - P. 176-182.
173. Moore, R. Moderate alcohol consumption and coronary artery disease / R. Moore, T. Pearson // Medicine (Baltimor). - 1986. - Vol. 65. - P. 242-267.
174. Novel genetic association between ulcerative colitis and the anti-inflammatory cytokine interleukin-1 receptor antagonist / J.C. Mansfield, H. Holden, J.K. Tariow et al.. // Gastroenterology. - 1994. - Vol. 106. - P. 637-642.
175. Obesity as an independenyt risk factor for cardiovascular disease / H. Hubert, M. Feinleib, P. Mc Namara, V. Castelli // Circulation. - 1983. - Vol. 67. - P. 968-977.
176. Olomolaiye, 0 .0 . Identification of a novel polymorphism in the human IL-6 promoter region / 0 .0 . Olomolaiye, N.P. Wood, J.L. Bidwell // Immunology. - 1997.-Vol. 92.-P. 66.
177. Pasceri, V. C-reactive protein induces MCP-1 expression by endothelian cells / V. Pasceri, J.T. Willerson, E.T.H. Yeh // Eur. Heart. J. - 2001. - Vol. 3. - P. 372.
178. Pelton, G.H. Epinephrine stimulates increased IL-6 blood levels in major depression / G.H. Pelton, L.H. Price, G.R. Heninger // Proceedings of the Annual Meeting of the American College of Neuropsychopharmacology. - S. 1.., 1995.-P. 122.
179. Plasma concentration of interleukin-6 and the risk of future myocardial infarction among apparently healthy men / P.M. Ridker, N. Rifai, M.J. Stampfer, C.H. Hennekens // Circulation. - 2000. - Vol. 101. - P. 1767-1772.
181. Polymorphism of the 3'-untranslated region of interleukin-12 p40 is not associated with the presence or severity of coronary artery disease / Y. Momiyama, R. Ohmori, M. Nagano et al.. // Circ. J. - 2005. - Vol. 69. - P. 793-797.
182. Polymorphism of the tumor necrosis factor-a gene, coronary atery heart disease and obesity / S.M. Herrmann, S. Ricard, S. Nicaud et al.. // Eur. J. Clin. Invest. - 1998. - Vol. 28. - P. 59-66.
183. Ро1утофЫ8т within the tumor necosis factor locus and prevalence of coronary artery disease in middle-aged men / T. Keso, M. Perola, P. Laippala et al.. // Atherosclerosis. - 2001. - Vol. 154. - P. 691-697.
184. Primary structure and functional expression from complementary DNA of a human interleukin-1 receptor antagonist / S. Eisenberg, R. Evans, W. Arend et al.. //Nature. - 1990. - Vol. 343. - P. 341-347.
185. Problems in echocardiographic volume determination / L.E. Teichholtz, T. Kruelen, M.V. Herman, R. Gorlin // Am. J. Cardiol. - 1976. - Vol. 37. - P. 7-11. •
186. Prognostic value of C-reactive protein and serumamyloid A protein in severe unstable angina / G. Luzzio, L.M. Biassucci, J.R. Gallimore et al.. // N. Engl. J. Med. - 1994. - Vol. 331. - P. 417-424.
187. Protective role of interleukin-10 in atherosclerosis / Z. Mallat, S. Besnard, M. Duriez et al..//Circ. Res. - 1999. - Vol. 85. - P. el7-e24.
188. Purification of cachectin, a lipoprotein lipase-supressing hormone secreted by endotoxin-induced RAW 264.7 cells / B. Beutler, J. Mahoney, N. Le Trang et al..//J. Exp. Med.-1985. -Vol . 161. - P.984-995.
189. Regulation of interleukin-10 production by b-adrenergic agonists / S. Suberville, A. Bellocq, B. Fouqueray et al.. // Eur. J. Immunol. - 1996. - Vol. 26.-P. 2601-2605.
190. Reperfusion injiury induces apoptosis in rabbit cardiomyocytes / R.A. Gottlieb, K.O. Burleson, R.A. Kjoner et al.. // J. Clin. Invest. - 1994. - Vol. 94.-P. 1621-1628.
191. Roff, P.A. The statistical analysis of mtDNA polymorphism chi 2 and problem of small samples / P.A. Roff, P. Bentzen // Mol. Biol. Evol. - 1989. -Vol. 6.-P. 539-545.
192. Role of IL-6 and its soluble receptor in induction of chemokines and leukocite recruitment / M. Romano, M. Sironi, C. Toniatti et al.. // Immunity. - 1997. -Vol. 6.-P. 1-20.
193. Ross, R. Atherosclerosis - an inflammatory disease / R. Ross // N. Eng. J. Med. - 1999. - Vol. 340. - P. 115-126.
194. Roy, S. Tumor necrosis factor promoter polymorphism and susceptibility to lepromatous leprosy / S. Roy, W. McGuire // J. Infect. Dis. - 1997. - Vol. 176.-P. 530-532.
195. Ruetten, Н. Endotelin-1 stimulates the biosynthesis of tumor necrosis factor in macrophages: ET-receptors, signal transduction and inhibition by dexamethasone / H. Ruetten, С Thiemermann // J. Physiol. Pharmacol. -1997. - Vol. 48. - P. 675-688.
196. Rus, H.G. Interleukin-6 and interleukin-8 protein and gene expression in human arterial atherosclerotic wall / H.G. Rus, R. Vlaicu, F. Niculescu // Atherosclerosis. - 1996. - Vol. 127. - P. 263-271.
197. Rychlik, W. Optimization of the annealing temperature for DNA amplification in vitro / W. Rychlik, W.J. Spencer, R.E. Rhoads // Nucleic Acids Research. - 1990. - Vol. 18, № 21. - P . 6409-6412.
198. Saren, P. TNF-a and IL-1|3 selectively induce expression of 92-kDa gelatinase by human macrophages / P. Saren, H.G. Welgus, P.T. Kovanen // J. Immunol. - 1996. - Vol. 157. - P. 4159-4165.
199. Schlesselman, J. Case-control studies. Design, conduct, analysis / J. Schlesselman. - Oxford: Oxford Univ. Press, 1982. - 350 p.
200. Sehgal, P.B. Regulation of IL6 gene expression / P.B. Sehgal // Res. Immunol. - 1992. - Vol. 143. - P. 724—734.
201. Severity of alopecia areata is associated with a ро1утофЬ18т in the interleukin-1 receptor antagonist gene / J.K. Tarlow, F.E. Clay, M.J. Cork et al.. in. Invest. Derm. - 1994. -Vol . 103. - P . 387-390.
202. Shmeider, R.E. Hypertension and the heart / R.E. Shmeider, F.H. Messerley // J. Hum. Hypertens. - 2000. - № 14. _ p. 597-604.
203. Shock and tissue injury induced by recombinant human cachectine / K.J. Tracey, B. Beutler, S.F. Lowry et al.. // Scince. - 1986. - Vol. 234. - P. 470-474.
204. Single base polymorphism at -511 in the human interleukin-la / F.S. Di Giovine, E. Takhsh, A.I.F. Blakemore, G.W. Duff // Hum. Mol. Genet. -1992.-Vol. 1.-P. 450.
205. Stahl, N. The alphas, betas, and kinases of cj^okine receptor complexes / N. Stahl, G.D. Yancopoulos // Cell. - 1993. - Vol. 74. - P. 587-590.
206. Structure of the mouse IL-10 gene and chromosomal localization of the mouse and human gene / J.M. Kim, C.L Brannan, N.G. Copeland et al.. // J. Immun. - 1992. - Vol. 148. - P. 3618-3623.
207. Systemic inflammatory parameters in patients with atherosclerosis of the coronary and peripheral arteries / M. Erren, H. Reinecke, R. Junker et al.. // Arterroscler. Thromb. Vase. Biol. - 1999. - Vol. 19. - P. 2355-2363.
208. Taga, K. Human IL-10 can directly inhibit T-cell growth / K. Taga, H. Mostouwski, G. Tosato // Blood. - 1993. - Vol. 81. - P. 2964-2971.
209. Taq I polymorphism in the human interleukin-la gene correletedcorrelated with IL-la secretion in vitro / F. Pociot, J. Molvig, L. Wogensen et al.. // Eur. J. Clin. Invest. - 1992. - Vol. 22. - P. 396-402.
210. The interleukin-6 -174 G/C promoter polymorphism is associated with risk of coronary heart disease and systolic blood pressure in healthy men / S.E. Humphries, L.A. Luong, M.S. Ogg et al.. // Eur. Heart. J. - 2001. - Vol. 22. -P. 2243-2252.
211. The relation among stress, adrenalin, interleukin-6 and acute phase proteins in the rat / J. Gool, H. Vugt, M. Helle, L.A. Aarden // Clin. Immunol. Immunopathol. - 1990. - Vol. 57. - P. 200-210.
212. The role of interleukin 12 in development of atherosclerosis in ApoE- deficient mice / T.S. Lee, H.C. Yen, C.C. Pan, L.Y. Chau // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1999. - Vol. 19. - P. 734-742.
213. Tipping, P.G. Production of tumor necrosis factor and interleukin-1 by macrophages from human atheromatous plaques / P.G. Tipping, W.W. Hancock//Am. J. Pathol.-1991.-Vol. 138. - P. 951-960.
214. TNF-a gene polymoфhism in psoriasis / A.I. Arias, B. Giles, Т.Н. Eiermann et al.. // Exp. Clin. Immunogenetic. - 1997. - Vol. 14. - P. 118-122.
215. Transcriptional regulation of endothelial cell adhesion molecules: NF-kB and cj^ikin-inducible enchancers / T. Collins, M.A. Read, A.S. Neish et al.. // FASEB J. - 1995. - Vol. 9. - P. 899-909.
216. Tumor necrosis factor-a -308 promoter gene polymorphism and increased tumor necrosis factor serum bioactivity in fanner's lung patients / B.M. Schaaf, U. Seitzer, V. Pravica et al.. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. - 2001. -Vol . 163.-P. 379-382.
217. Turnbull, A.V. Regulation of the Hypothalamic-Pituitary-Adrenal Axis by Cytokines: Actions and Mechanisms of Action / A.V. Turnbull, C.L. Rivier // Physiol. Rev. - 1999. - № 79. - P. 1-71.
218. Upadhya, S. Role of interleukins in atherogenesis / S. Upadhya, S. Mooteri, R.G. Pai // Int. J. Angiol. - 2001. - Vol. 10. - P. 227-236.
219. Vascular interleukin-10 protects against LPS-induceced vasomoptor dysfunction / C.A. Gurmett, D.D. Lund, P.M. Faraci, D.D. Heistad // Am. J. Heart Circ. Physiol. - 2005. - Vol. 289, № 2. - P. H624-30.
220. Vascular superoxide production by NAD(P)H oxidase / T.J. Guzic, N.E.J. West, E. Black et al.. // Circulat. Res. - 2000. - Vol. 86. - P. E85-E90.
221. Vilsek, J. Tumor necrosis factor. New insightes into the molecular mechanisms of its multiple actions / J. Vilsek, Т.Н. Lee // J. Biol. Chem. — 1991. - Vol. 266. - P. 7313-7316.