Автореферат и диссертация по медицине (14.03.02) на тему:Патоморфология молочной железы под влиянием тиреоидина в норме, при введении синэстрола и при фиброкистозной болезни

На правах рукописи

АНИСИМОВА Светлана Анатольевна

ПАТОМОРФОЛОГИЯ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ПОД ВЛИЯНИЕМ ТИРЕОИДИНА В НОРМЕ, ПРИ ВВЕДЕНИИ СИНЗСТРОЛА И ПРИ ФИБРОКИСТОЗНОЙ БОЛЕЗНИ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)

14.03.02 - патологическая анатомия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург 2010

004604899

004604899

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П.Павлова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Научный руководитель: доктор медицинских наук профессор

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук профессор доктор медицинских наук профессор

Чумаченко Пётр Андреевич

Ариэль Борис Моисеевич Нейштадт Эдуард Львович

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И.Мечникова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Защита диссертации состоится Р у>и1-ОН Я 2010 г. в?_Зд^йасов на заседании диссертационного совета Д 208.089.04 в ГОУ ДПО «Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (191015, Санкт-Петербург, ул. Кирочная, д. 41).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ДПО «Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования Росздрава» (195196, Санкт-Петербург, Заневский пр., д. 1/82).

Автореферат разослан «/-_т>> С^^Ь? 4. Л Я_2010 года.

Учёный секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук

М.А. Шевяков

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. По определению Всемирной Организации Здравоохранения фиброкистозная болезнь - это заболевание, характеризующееся широким спектром пролиферативных и регрессивных изменений тканей молочной железы с ненормальным соотношением эпителиального и соединительнотканного компонентов. По данным разных авторов частота фиброкистозной болезни или мастопатии в популяции имеет место в 29-70% случаев, а частота диффузной мастопатии колеблется от 29,4 до 42,6% (В.П. Летягин, 2000; И.Д. Бубликов [и др.], 2000; О.Г. Горюшина, 2000; АЛ. Тихомиров, [и др.], 2000; Е.М. Аксель [и др.], 2002; В.П. Летягин, 2002; Э.Л. Нейштадт, [и др.], 2003; И.В. Высоцкая [и др.], 2003; И.А. Курзыкова [и др.], 2004; О.Н. Рыбин, 2004; И.В. Глухов, 2007; М.И. Давыдов [и др.], 2007; Т.В. Овсянникова, 2009; Я.Б. Асриян [и др.], 2009).

Известно, что фиброкистозная болезнь часто сочетается с патологией щитовидной железы (И.Д. Бубликов [и др.], 2000; С.М. Демидов, 2001; В.М. Провоторов [и др.], 2002; О.Б. Щвецова, 2003; Н.П. Макаренко [и др.], 2004; И .А. Курзыкова [и др.], 2004; М.И. Круглова, 2005; Н.П. Макаренко, 2005; О.А. Пересада [и др.], 2006; Л.К. Горяйнова, 2009; Т.В. Овсянникова, 2009; P.P. Smyth, 2003), а именно у больных с дисфункцией щитовидной железы в 3 раза чаще отмечаются дисгормональные заболевания молочных желёз (В.Н. Прилепская [и др.], 2000; В.Н. Прилепская [и др.], 2001; Е.Б. Кравец [и др.], 2004). При оценке функционального состояния щитовидной железы у больных мастопатией имеются разногласия. Одни авторы отдают предпочтение гипотиреозу (И.Д. Бубликов [и др.], 2000; В.М. Провоторов [и др.], 2002; О.Б. Швецова, 2003; О.Ф. Серова [и др.], 2005), другие гипертиреозу, как факторам, способствующим развитию фиброкистозной болезни (М. Dargent [et al.] 1962; М.Г. Футорный, Г.В.Светлова 1969), третьи не обнаруживают изменений функциональной активности щитовидной железы при мастопатии (К. Sicher, Т.А. Water-house, 1961; М.Б. Козлова [и др.], 2009).

Большинство авторов считают, что гипотиреоз встречается чаще другой патологии щитовидной железы у больных мастопатией (С. Фолли, 1962; Н.Г. Стуруа, 1983; И.Д. Бубликов [и др.], 2000; В.М. Провоторов [и

др.], 2002; О.Б. Щвецова, 2003; О.Ф. Серова [и др.], 2005; Ш.А. Ахмедова, 2006; Л.Н. Сидоренко, 2007; Л.К. Горяйнова, 2009). Естественно, что в этих условиях часто применяются тиреоидные гормоны (О.Г. Горюшина, 2002, 2003, 2004; В.Е. Радзинский [и др.], 2004; Т.В. Овсянникова, 2009). Но в литературе отсутствуют работы, посвященные изучению патоморфо-логии молочной железы под влиянием тиреоидных гормонов в норме, при введении высоких доз синэстрола на тканевом и клеточном уровнях с использованием морфометрического метода исследования. Нет тщательной морфофункциональной проработки изменений структур молочной железы при фиброкистозной болезни под влиянием тиреоидных гормонов.

Цель исследования. Изучить морфологию молочной железы под влиянием тиреоидина в норме, при одновременном воздействии синэстрола и при фиброкистозной болезни.

Задачи исследования:

1. Изучить патоморфологию молочной железы белых беспородных девственных самок крыс под влиянием терапевтической, высокой и очень высокой доз тиреоидина в течение двух, четырёх и восьми недель.

2. Изучить патоморфологию молочной железы белых беспородных девственных самок крыс при одновременном воздействии тиреоидина в различных дозах и синэстрола в высоких дозах в течение двух, четырех и восьми недель.

3. Изучить особенности патоморфоза фиброкистозной болезни молочной железы белых беспородных девственных самок крыс под влиянием тиреоидина в различных дозах в течение двух, четырёх и восьми недель.

Научная новизна исследования. Впервые проанализирована пато-морфология молочной железы под влиянием тиреоидина в обычных условиях, при введении синэстрола и при фиброкистозной болезни в эксперименте с помощью морфологического и морфометрического методов исследования.

Практическая значимость. Результаты данной работы представляют большой интерес не только для фундаментальной науки, но и для практического здравоохранения, так как полученная информация позволит более

дифференцированно подходить к назначению тиреоидных гормонов как для лечения фиброкистозной болезни молочной железы, так и при их использовании в комплексной терапии других заболеваний, например с целью профилактики и лечения гипогалактии, гипотиреоза, при отставании в физическом развитии молочных желёз. Также возможно улучшение прогноза у больных фиброкистозной болезнью, предупреждение малигниза-ции, снижение количества койко-дней в стационаре.

Проведенное исследование показывает целесообразность применения тиреоидных гормонов в комплексной терапии фиброкистозной болезни молочной железы, но с учётом риска возникновения очаговых изменений в молочной железе.

Внедрение в практику. Результаты исследования внедрены в учебный процесс кафедры патологической анатомии с курсом судебной медицины, кафедры онкологии с курсом лучевой диагностики, кафедры гистологии и биологии, кафедры нормальной и топографической анатомии Рязанского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова и используются при проведении практических занятий и чтении лекций студентам 1-4 курсов лечебного, стоматологического и медико-профилактического факультетов, врачам-интернам, клиническим ординаторам.

Положения, выносимые на защиту:

1. Тиреоидин способствует развитию и появлению секреции в ин-тактной молочной железе половозрелых самок крыс.

2. Тиреоидин при одновременном воздействии с синэстролом усиливает фиброкистозные изменения молочной железы у исследованных животных.

3. Тиреоидин вызывает регресс фиброкистозной болезни молочной железы у исследованных животных.

Апробация работы. Основные положения и полученные результаты представлялись и обсуждались на: IV общероссийской научной конференции «Перспективы развития вузовской науки» (г.Сочи, Дагомыс, 2008), межкафедральном заседании РязГМУ им. акад.И.П. Павлова 28 января 2010г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ. Из них 1 работа в журнале, рецензируемом ВАК.

Личный вклад автора. Участие автора осуществлено на всех этапах работы: планирование, набор фактического материала, обобщение и мате-матико-статистический анализ результатов. Самостоятельно проведено экспериментальное исследование на 195 белых беспородных самках крыс в виварии университета, извлечены щитовидные и паховые молочные железы. Щитовидная железа взвешена на торсионных весах. Органы фиксированы в 10% растворе нейтрального формалина, залиты в парафин. Сделаны срезы молочной и щитовидной желёз. Все срезы окрашены гематоксилином и эозином, часть срезов - гематоксилином и пикрофуксином, Суданом III на липиды, на эластику по Вейгерту, импрегнированы серебром ретикулярные волокна по Футу. Автором изучены более 570 гистологических препаратов молочной и щитовидной желёз. Проведена серия микрофотоснимков в цифровом формате и составлена коллекция слайдов, частично вошедшая в диссертационную работу. Автором сделано микроскопическое описание молочных и щитовидных желёз, аналитическая математическая и статистическая обработка данных морфометрического исследования паренхимы и стромы молочных желёз. Была разработана морфометрическая программа, включающая 30 параметров. Для её выполнения потребовалось более 6000 измерительных операций на гистологическом и цитологическом уровнях. На основании полученных данных автором сделаны соответствующие выводы и даны практические рекомендации. Доля участия в сборе информации - 80-90%, в обработке данных - 100%, в анализе материала- 100%.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 189 страницах и состоит из введения, 3-х глав, заключения, выводов и практических рекомендаций. Указатель литературы включает 274 источника, в том числе 207 отечественных и 67 иностранных. В диссертации имеется 9 таблиц и 113 цветных рисунков.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал и методы исследования.

Молочные железы были изучены у 195 белых беспородных девственных самок крыс в возрасте от трёх до пяти месяцев, собственной разводки, весом в среднем 200г. Всех крыс разделили на 3 группы, которые состояли из подгрупп. В каждой подгруппе было по 5 крыс. В первой и второй группах опыты длились в течение 2-х, 4-х и 8-ми недель.

Первая группа - крысы, которым давали тиреоидин в разных дозировках (рис.1). Пересчёт дозы производился с учётом того, что обмен веществ у крысы протекает в 5 раз быстрее (И.П. Западнюк [и др.], 1962; И.В. Давыдовский, 1969). Средний вес человека 60кг, средний вес крысы 200г. Вы

ПЕРВАЯ ГРУППА

2 НЕДЕЛИ

20мг

1 60мг 1 180мг [ интактныеН

4 НЕДЕЛИ

20мг h 60мг Ь 180мг

I интактные

н

8НВДЕЛЬ

20мг

(...... 60мг' Ь

i 180мг >

I интактныег

Рис. 1. Схема экспериментальной работы с первой группой животных, где интактные - самки крыс, получавшие корм без тиреоидина, в данном и во всех последующих рисунках: 20мг, 60мг, 180мг - дозы тиреоидина

сшая суточная доза тиреоидина для человека - 1г, для крысы - 0,02г или 20мг. Тиреоидин в дозе 20мг в дальнейшем мы рассматриваем в качестве высшей суточной дозы или дозы №1. Тиреоидин давали через день с целью уменьшения угнетающего действия гормона на щитовидную железу (Г1.М. Боряк, В.Я. Черкас, 1978). Тиреоидин перемалывали в кофемолке. Аналогичным образом обрабатывали сухой корм для животных "Wiskas". Смешивали в определённых пропорциях и давали животным перорально, насыпая в чашки. Также были выделены 3 подгруппы крыс, которые не получали тиреоидин. Это подгруппы интактных самок. Тиреоидин давали

в высшей суточной дозе (доза №1 - 20мг), высокой дозе - в 3 раза больше суточной (доза №2 - 60мг) и очень высокой дозе - в 9 раз больше суточной (доза №3- 180мг).

Вторая группа - крысы, которым одновременно вводили синэстрол внутримышечно по 10мг один раз в неделю и давали тиреоидин в разных дозировках через день (рис.2). Контрольные животные - это крысы, которым только вводили синэстрол.

( ВТОРАЯ ГРУППА 1

2 НЕДЕЛИ

Змг+син I

бОмг+син — |180мг+сйн1-

синэстрол J—'

4 НЕДЕЛИ |

20мг+син— 50мг *с:ин |— 180мг+син— [ синэстрол]—1

. 8 НЕДЕЛЬ [ 20мг+син|-ГбОмг+син]—

Г180МГ4СИН-

Рсинэстрол]—1

Рис. 2. Схема экспериментальной работы со второй группой животных, где синэстрол - группа крыс, которым только вводили синэстрол в дозе 10мг

В третьей группе эксперимент начинался с создания модели фиброки-стозной болезни (Л.Ф. Гачечиладзе, 1967; П.А. Чумаченко, 1978; П.А. Чу-маченко, O.K. Хмельницкий, И.П. Шлыков. 1987). Для этого внутримышечно вводили синэстрол по 10мг 1 раз в неделю 6 раз. Сроки введения и дозы были определены опытным путём ранее. Тиреоидин начинали давать на 45-й день опыта и животные получали его в течение 2-х, 4-х и 8-ми недель. Также в этой группе были выделены подгруппы крыс, которым вызывали фиброкистозную болезнь, а в последующем они не подвергались никакому воздействию. Это было сделано с целью изучения естественного патоморфоза фиброкистозной болезни (рис.3).

По окончании указанных сроков длительности эксперимента (2, 4, 8 недель) крыс выводили из опыта в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (приказ Минвуза

от 13.11.1984г. № 724). Для этого крыс усыпляли эфиром в эксикаторе, молочные железы извлекали, фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, заливали в парафин, все срезы окрашивали гематоксилином и эозином, для оценки состояния коллагеновых волокон - пикрофуксином, Суданом III налипиды, на эластику по Вейгерту, импрегнировали серебром ретикулярные волокна по Футу.

ТРЕТЬЯ ГРУППА

(фКБ+20мг)— [фКБ»60мг)—

(фКБ+180мг)—

[ПАтам0РФ0з1 I_ФКб_Г

( ФКБ )-

2 НЕДЕЛИ

4 НЕДЕЛИ

|ГФКБ+60мг)--

(фКБ+180шЬ

[ПАТОМОРФОЗ L_

I_<ИШ_J

Г" ФКБ )-

¡8 НЕДЕЛЬ j

ФКБ+бОмг' •

ПАТОМ ОРФОЗ ФКБ

ь

ФКБ Н

Рис.3. Схема экспериментальной работы с третьей группой крыс, где ФКБ - фиброкистозная болезнь

Далее гистологические препараты молочных желёз изучали с помощью описательного метода и морфометрического анализа. Описательный метод даёт качественную оценку, а морфометрия позволяет количественно оценить состояние молочных желёз на тканевом и клеточном уровнях (Я.Е. Хесин, 1967; Б.М. Ариэль, 1974; П.А. Чумаченко, 1975; 1991; Г.Г. Автан-дилов, 1990; 2002).

Морфометрический анализ состояния паренхимы и стромы молочной железы крыс производили по 30 количественным показателям.

Полученные показатели подвергли статистической обработке по Стьюденту с использованием показателей математической статистики: М -среднее арифметическое, ш - ошибка средней, С - критерий Стьюдента для анализа различий средних и определения степени достоверности этих различий.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Молочные железы молодых крыс-самок вне периода беременности и лактации состоят из протоков, которые расположены в основном по одному. Эпителий железистых структур кубический. Просвет протоков спавшийся или незначительно расширенный, пустой. Основную массу стромы составляет жировая ткань, которая слабо дифференцируется на отдельные дольки. Перигландулярно имеются тонкие прослойки рыхлой соединительной ткани, клеточный состав которой представлен преимущественно фибробластами.

Патоморфология молочной железы под влиянием тиреоидина.

Через 2 недели приёма 20мг тиреоидина по сравнению с контролем (интактными молочными железами) - достоверно (р<0,05) снизилось количество одиночных протоков в 2,7 раза; достоверно (р<0,01) увеличились площадь эпителия одного протока в 6,2 раза и размер ядер в 1,1 раза.

Через 2 недели приёма 60мг тиреоидина по сравнению с контролем (интактными молочными железами) - достоверно (р<0,05) увеличились площадь эпителия одного протока в 7,6 раза и размер ядер (р<0,01) в 1,1 раза.

Через 2 недели приёма 180мг тиреоидина по сравнению с контролем (интактными молочными железами) - достоверно (р<0,05) увеличились следующие показатели: площадь гистотопографического среза в 2,5 раза; количество групп протоков в 2,5 раза; площадь железистого поля в 2,7 раза; общая площадь эпителия (р<0,01) в 3 раза; площадь просвета желёз в 2,7 раза; размер ядер (р<0,01) в 1,1 раза.

Таким образом, приём тиреоидина в течение 2-х недель: способствует росту интактной молочной железы преимущественно за счёт нарастания эпителиальной массы; вызывает секрецию в интактной молочной железе; тиреоидин в дозе 180мг приводит к наибольшему росту молочной железы. В ряде случаев в крупных протоках молочной железы появляются истинные эпителиальные сосочки (при 20мг и 60мг тиреоидина).

Через 4 недели приёма 20мг тиреоидина по сравнению с контролем (интактными молочными железами) - достоверно (р<0,05) уменьшился процент одиночных протоков в 2,3 раза; увеличился процент протоков в

группах в 1,7 раза; увеличился процент площади железистого поля в 7,4 раза; увеличился размер протока в 5,8 раза; выросла общая площадь эпителия в 9,5 раз.

Через 4 недели приёма 60мг тиреоидина по сравнению с контролем (интактными молочными железами) - достоверно (р<0,05) увеличились следующие показатели: площадь железистого поля в 5,6 раза; площадь эпителия одного протока (р<0,01) в 9 раз; общая площадь эпителия в 17 раз; размер ядер в 1,1 раза.

Через 4 недели приёма 180мг тиреоидина по сравнению с контролем (интактными молочными железами) - достоверно (р<0,05) увеличились следующие показатели: площадь гистотопографического среза в 2,8 раза; величина групп протоков в 1,5 раза; процент протоков в группах в 1,8 раза; площадь эпителия одного протока (р<0,01) в 7,2 раза; достоверно (р<0,05) уменьшились процент одиночных протоков в 2,8 раза и степень васкуляри-зации в 2,9 раза.

Таким образом, как за две, так и за четыре недели мы наблюдаем картину роста, развития и секреции молочных желёз под действием тиреоидина. Действие гормона в дозе 60мг приводит к наибольшему росту молочной железы. Тиреоидин в дозе 20мг и 60мг иногда вызывает появление очагов пролиферации эпителия в крупных протоках молочной железы.

Через 8 недель приёма 20мг тиреоидина по сравнению с контролем (интактными молочными железами) - достоверно (р<0,05) увеличился процент площади железистого поля в 4,4 раза; уменьшился процент площади стромы в 1,1 раза; выросла площадь железистого поля (р<0,01) в 2,9 раза; увеличился размер протока (р<0,001) в 9,2 раза; увеличилась площадь просвета одного протока (р<0,05) в 8,8 раз; выросла площадь просвета желёз (р<0,001) в 2,0 раза; уменьшилась высота эпителия (р<0,05) в 1,2 раза; увеличилась клеточность околопротоковой стромы (р<0,05) в 1,7 раза.

Через 8 недель приёма 60мг тиреоидина по сравнению с контролем (интактными молочными железами) - достоверно (р<0,01) увеличилась площадь железистого поля в 2,8 раза; увеличилась площадь просвета одно-

го протока (р<0,05) в 5,9 раз; увеличилась площадь просвета желёз (р<0,001) в 2,2 раза.

Через 8 недель приёма 180мг тиреоидина по сравнению с контролем (интактными молочными железами) - достоверно (р<0,01) увеличилась площадь железистого поля в 2,7 раза; увеличилась площадь просвета одного протока (р<0,05) в 2,2 раза; увеличилась площадь просвета желёз (р<0,001) в 2,1 раза.

Таким образом, приём тиреоидина в течение 8-ми недель: способствует росту интактной молочной железы преимущественно за счёт увеличения просвета желёз; вызывает секрецию в интактной молочной железе при применении 60мг и 180мг гормона; действие тиреоидина в высшей суточной дозе (20мг) приводит к наибольшему росту молочной железы; действие тиреоидина в ряде случаев приводит к появлению истинных эпителиальных сосочков (20мг тиреоидина) и очагов пролиферации эпителия в расширенных и терминальных протоках молочной железы (180мг тиреоидина). Также иногда обнаруживается активно секретирующий (апокринового типа) эпителий (при 60мг тиреоидина).

Итак, приём тиреоидина в течение двух и четырёх недель способствует росту интактной молочной железы преимущественно за счёт нарастания эпителиальной массы; приём тиреоидина в течение 8-ми недель способствует росту интактной молочной железы преимущественно за счёт увеличения просвета желёз; приём тиреоидина вызывает секрецию в интактной молочной железе; чем длительнее приём гормона, тем меньшая доза становится более эффективной; действие тиреоидина в ряде случаев приводит к появлению очаговой пролиферации эпителия в крупных выводных протоках с формированием истинных и ложных эпителиальных сосочков; происходит апокринизация эпителия и фиброзирование перигландулярной стромы.

Патоморфология молочной железы при одновременном воздействии тиреоидина и синэстрола.

Молочные железы крыс при введении синэстрола в течение 2-х, 4-х и 8-ми недель фактически претерпевают изменения, характерные для становления фиброкистозной болезни. Протоки расположены в основном

средними или большими группами. Эпителий кубический, иногда немного уплощён. Просвет желёз расширен, они представляют собой кисты разного размера: от маленьких до больших. Перигландулярная строма в виде тонких соединительнотканных прослоек. В клеточном составе их в основном фибробласты, также обнаруживаются лимфоциты, эозинофилы, тучные клетки и нейтрофилы. Гистологические особенности этой группы: папил-ломатозные выросты эпителия, участки дисплазии и пролиферации эпителия, очаги обызвествления белкового секрета в расширенных протоках, участки лимфангиэктазии и околопротокового фиброза. Чем длительнее эксперимент, тем больше появляется очагов пролиферации и дисплазии эпителия, тем более выражен околопротоковый фиброз.

Молочные железы крыс при одновременном влиянии синэстрола и тиреоидина претерпевают следующие изменения. При применении средней терапевтической дозы (доза №1'): чем дольше длится эксперимент, тем крупнее становятся группы протоков, тем вариабельней вид эпителия (от уплощённого призматического до высокого кубического через 8 недель), тем больше просвет протоков (от спавшегося через 2 недели до значительно расширенного через 8 недель). Гистологические особенности этой группы: околопротоковый фиброз, гигантские конгломераты протоков, пролифераты эпителия в виде сосочков без подлежащей стромы, огромные группы протоков по 40-50 штук с незначительно расширенными просветами с содержимым или без него, очаги лимфангиэктазии.

При применении высокой дозы (доза №2) тиреоидина по сравнению с контрольными группами (только введение синэстрола) изменения в паренхиме и строме молочных желез незначительны. Гистологические особенности этой группы в отличие от предыдущей: папилломатозные выросты эпителия, единичные очень большие кисты.

При применении очень высокой дозы (доза №3) тиреоидина по сравнению с контрольными группами (только введение синэстрола) изменения в паренхиме и строме молочных желез невелики. Группы протоков различного размера: от маленьких до гигантских (до 200 протоков в одной группе). Просвет протоков тем больше, чем длительнее срок эксперимента (вплоть до огромных кист). Гистологические особенности этой группы в

отличие от предыдущих: через 8 недель в большинстве случаев в прослойках рыхлой соединительной ткани и околопротоковой строме отмечается круглоклеточная инфильтрация, в одном наблюдении имеются пролифера-ты миоэпителия.

Через 2 недели одновременного воздействия 20мг тиреоидина и синэ-строла по сравнению с контролем - достоверно (р<0,01) увеличилась площадь эпителия одного протока в 4,5 раз; увеличились (р<0,05) общая площадь эпителия в 4,3 раза и размер ядер в 1,1 раза.

Через 2 недели одновременного воздействия 60мг тиреоидина и синэ-строла по сравнению с контролем - достоверно (р<0,01) увеличилась площадь эпителия одного протока в 3,2 раза; уменьшилась площадь просвета одного протока (р<0,05) в 4,7 раза; увеличились (р<0,05) общая площадь эпителия в 4,4 раза и размер ядер в 1,1 раза.

Через 2 недели одновременного воздействия 180мг тиреоидина и си-нэстрола по сравнению с контролем - достоверно (р<0,05) увеличились общая площадь эпителия в 6,1 раза и размер ядер в 1,1 раза.

В общем, изменения в молочных железах невелики. Площадь эпителия железистого дерева достоверно больше в опытных группах, минимальный просвет протоков обнаружен при приёме 60мг тиреоидина, а вот ядра в этих условиях самые крупные. При сравнении силы действия доз между собой надо отметить наибольшую активность 20мг и 60мг гормона. Секреция в молочной железе сохранена.

Через 4 недели одновременного воздействия 20мг тиреоидина и синэ-строла по сравнению с контролем - достоверно (р<0,05) уменьшились площадь просвета одного протока в 3,5 раза и клеточность околопротоковой стромы в 1,6 раза.

Через 4 недели одновременного воздействия 60мг тиреоидина и синэ-строла по сравнению с контролем - достоверно (р<0,05) увеличилась площадь эпителия одного протока в 3,9 раза.

Через 4 недели одновременного воздействия 180мг тиреоидина и си-нэстрола по сравнению с контролем - достоверно (р<0,05) уменьшился размер ядер в 1,1 раза.

Таким образом, одновременное воздействие тиреоидина и синэстрола в течение 4-х недель приводит к уменьшению просветов протоков при действии 20мг тиреоидина; увеличению эпителиальной массы при действии 60мг гормона. Действие тиреоидина в высшей суточной дозе (20мг) и очень высокой дозе (180мг) приводит к наибольшим изменениям молочной железы.

Через 8 недель одновременного воздействия 20мг тиреоидина и синэстрола по сравнению с контролем - достоверно (р<0,05) увеличились площадь эпителия одного протока в 4,7 раза и общая площадь эпителия в 4,8 раза.

Через 8 недель одновременного воздействия 60мг тиреоидина и синэстрола по сравнению с контролем - достоверно (р<0,05) уменьшилась степень васкуляризации в 1,6 раза; увеличился размер ядер в 1,1 раза.

Через 8 недель одновременного воздействия 180мг тиреоидина и синэстрола по сравнению с контролем - достоверно (р<0,05) уменьшились степень васкуляризации в 2,2 раза и размер ядер (р<0,01) в 1,1 раза.

Таким образом, через 8 недель одновременного воздействия тиреоидина и синэстрола также как и через 2 и 4 недели отмечается увеличение эпителиальной массы железистого дерева, но только при приёме 20мг гормона. Наиболее активно действует тиреоидин в дозе 180мг. Секреторные процессы в молочной железе сохранены. С увеличением дозы тиреоидина всё более уменьшается степень васкуляризации стромы.

Итак, одновременное применение тиреоидина и синэстрола: способствует увеличению эпителиальной массы железистого дерева молочной железы с уменьшением его просветов в течение 2-х и 4-х недель; способствует увеличению эпителиальной массы железистого дерева молочной железы без уменьшения просвета желёз в течение 8-ми недель; сохраняет секрецию в молочной железе; действие тиреоидина в средней терапевтической дозе (20мг) и в очень высокой дозе (180мг) приводит к наибольшим изменениям молочной железы. При длительном одновременном применении тиреоидина и синэстрола (в течение восьми недель в дозе 60мг и 180мг) не обнаруживаются участки выраженной дисплазии эпителия и околопротокового фиброза.

Патоморфология молочной железы под влиянием тиреоидина при фиброкистозной болезни.

Модель фиброкистозной болезни молочной железы у белых беспородных девственных самок крыс разрабатывалась в течение многих лет (Л.Ф. Гачечиладзе, 1967; П.А. Чумаченко, 1978; П.А. Чумаченко, O.K. Хмельницкий, И.П. Шлыков, 1987). Данную патологию вызывали путём внутримышечного введения 10мг синэстрола каждые 7 дней в течение 35 дней. Дни введения синэстрола: 1, 7, 14, 21, 28, 35. Опытным путём было установлено, что максимальной степени развития патологический процесс в молочной железе достигает через 10 дней после последней иньекции, то есть на 45 день. Этот день принимался за нулевую точку отсчёта обратного развития фиброкистозной болезни. При этом в молочных железах крыс отмечались изменения, подобные тем, которые наблюдаются в молочных железах женщин при аналогичной патологии.

Молочные железы крыс в группе с фиброкистозной болезнью (ФКБ) выглядят следующим образом. Протоки расположены небольшими группами, просвет их различен от маленького до больших кист с жиро-белковым содержимым и единичными клетками спущенного эпителия. Эпителий кубический, часто уплощён. Перигландулярная строма различного размера: от тонких до широких прослоек. Жировая ткань, как правило, преобладает над соединительной, но иногда может наблюдаться обратная картина за счёт широких околопротоковых фиброзных прослоек. В клеточном составе кроме фибробластов достаточно много тучных клеток, моноцитов и эозинофилов. Гистологические особенности этой группы: па-пилломатозные выросты в крупных протоках; выраженная пролиферация эпителия с почти полным закрытием просвета в расширенных протоках; сосочковые выросты эпителия; в больших кистах содержимое более гомогенно. Обнаружен участок лимфангиэктазии.

Молочные железы крыс в группах с естественным патоморфозом фиброкистозной болезни (КШ отличаются друг от друга в зависимости от длительности эксперимента. Чем больше срок опыта, тем больше одиночных протоков со спавшимся просветом; кубический эпителий перестает быть уплощённым. Исчезают широкие прослойки околопротоковой соеди-

нительной ткани, они становятся очень тонкими. Гистологические особенности этой группы в отличие от предыдущей: очаги лимфангиэктазии, в мелких протоках жиро-белковое содержимое с участками обызвествления.

Микроскопическая картина молочных желёз с фиброкистозной болезнью в группах опыта, где крысы получали тиреоидин в общем достаточно разнообразна. Протоки лежат как по одному, так и группами различных размеров, вплоть до огромных групп, включающих до 60 протоков и более. Просвет железистых структур отличается необычайно большой вариабельностью: просвет от спавшегося, маленького до кист любых размеров, в том числе и гигантских. В просвете, как правило, жиро-белковое содержимое и единичные клетки слущенного эпителия. Гистологические особенности молочных желёз этих групп: гигантская киста с огромными сосочкоподоб-ными выростами апокринового эпителия, конгломерат протоков с диспла-зией эпителия, околопротоковый фиброз, очаговая лимфоцитарная инфильтрация, пролиферация эпителия с образованием истинных и ложных эпителиальных сосочков, участки лимфангиэктазии.

Через 2 недели приёма 20мг тиреоидина при фиброкистозной болезни по сравнению с исходным контролем ФКБ - достоверно (р<0,05) увеличилась площадь гистотопографического среза в 2,4 раза; уменьшилась величина групп протоков в 1,7 раза; уменьшилась общая площадь эпителия в 7,8 раза.

Через 2 недели приёма 60мг тиреоидина при фиброкистозной болезни по сравнению с исходным контролем ФКБ - достоверно (р<0,05) увеличилась площадь гистотопографического среза в 2,4 раза; увеличилось количество одиночных протоков в 2,2 раза; уменьшилась величина групп протоков в 1,7 раза; увеличилась степень васкуляризации в 2,5 раза; уменьшилась общая площадь эпителия в 6,6 раза.

Через 2 недели приёма 180мг тиреоидина при фиброкистозной болезни по сравнению с исходным контролем ФКБ - достоверно (р<0,05) увеличилась площадь гистотопографического среза в 2,5 раза; уменьшилась величина групп протоков в 1,5 раза; уменьшилась общая площадь эпителия в 6,1 раза; уменьшился размер ядер (р<0,01) в 1,1 раза.

Через 2 недели при сравнении естественного патоморфоза (КП) и исходного контроля фиброкистозной болезни (ФКБ) обнаруживаются морфологические признаки регресса болезни при естественном течении процесса: снижение общей площади эпителия (р<0,05) в 6,6 раза; высоты эпителия в 1,4 раза; размера ядер (р<0,01) в 1,1 раза.

Через 2 недели при сравнении естественного патоморфоза и действия тиреоидина отмечается - достоверное снижение площади гистотопографи-ческого среза (р<0,05) в 1,5 раза по сравнению с 180мг тиреоидина; достоверное увеличение клеточности околопротоковой стромы (р<0,05) по сравнению с 60мг тиреоидина в 1,4 раза; увеличение процента плазмоци-тов (р<0,001) в 2 раза по сравнению с 20мг тиреоидина.

Через 4 недели приёма 20мг и 180мг тиреоидина при фиброкистозной болезни по сравнению с исходным контролем ФКБ - достоверных изменений не выявлено.

Через 4 недели приёма 60мг тиреоидина при фиброкистозной болезни по сравнению с исходным контролем ФКБ - достоверно (р<0,01) увеличилась площадь гистотопографического среза в 2,2 раза; уменьшилась величина групп протоков (р<0,05) в 0,1 раза; увеличился процент тучных клеток в 3,6 раза.

Через 4 недели при сравнении естественного патоморфоза (КП) и исходного контроля фиброкистозной болезни (ФКБ) - достоверно (р<0,05) увеличилась площадь гистотопографического среза в 1,9 раза; уменьшилась величина групп протоков в 2,2 раза; увеличился процент одиночных протоков в 2,7 раза; уменьшился процент протоков в группах в 1,4 раза; уменьшился размер ядер в 1,1 раза.

Через 4 недели при сравнении естественного патоморфоза и действия тиреоидина отмечается - достоверное (р<0,05) уменьшение количества групп протоков в 2,4 раза по сравнению с 20мг тиреоидина и в 2,1 раза по сравнению с 180мг тиреоидина; уменьшение количества протоков в группах в 4,7 раза по сравнению с 20мг тиреоидина, в 2,4 раза по сравнению с 60мг тиреоидина и в 3,4 раза по сравнению с 180мг тиреоидина; уменьшение общего количества протоков (р<0,01) в 3,5 раза по сравнению с 20мг тиреоидина и в 2,7 раза по сравнению с 180мг тиреоидина; уменьшение

плотности железистого поля (р<0,05) в 1,8 раза по сравнению с 60мг тиреоидина и в 4,2 раза по сравнению с 180мг тиреоидина; уменьшение величины групп протоков в 2,1 раза по сравнению с 20мг тиреоидина, в 1,2 раза по сравнению с 60мг тиреоидина и в 1,8 раза по сравнению с 180мг тиреоидина; уменьшение плотности групп протоков в 1,7 раза по сравнению с 60мг тиреоидина и в 3,1 раза по сравнению с 180мг тиреоидина; увеличение процента одиночных протоков в 2,5 раза по сравнению с 20мг тиреоидина и в 2,4 раза по сравнению с 180мг тиреоидина; уменьшение процента протоков в группах в 1,4 раза по сравнению с 20мг и 180мг тиреоидина; уменьшение процента площади железистого поля в 3,4 раза по сравнению с 20мг тиреоидина и в 3,6 раза по сравнению с 60мг тиреоидина; увеличение процента площади стромы в 1,1 раза по сравнению с 20мг и 60мг тиреоидина; уменьшение площади железистого поля в 4,5 раза по сравнению с 60мг тиреоидина; уменьшение общей площади эпителия в 3,6 раза по сравнению с 20мг тиреоидина и в 4 раза по сравнению с 60мг тиреоидина; уменьшение площади просвета желёз в 4,5 раза по сравнению с 60мг тиреоидина; уменьшение размера ядер в 1,1 раза по сравнению с 180мг тиреоидина.

Таким образом, приём тиреоидина в течение 4-х недель при ФКБ вызывает слабо выраженный положительный эффект в динамике течения болезни только за счёт снижения величины групп протоков, в то время как при сравнении естественного патоморфоза (КП) и действия тиреоидина по ряду достоверно изменённых морфофункциональных показателей (12 показателей) изменения, полученные при естественном патоморфозе намного предпочтительнее.

Через 8 недель приёма 20мг тиреоидина при фиброкистозной болезни по сравнению с исходным контролем ФКБ - достоверно (р<0,05) увеличилась площадь гистотопографического среза в 2,0 раза.

Через 8 недель приёма 60мг тиреоидина при фиброкистозной болезни по сравнению с исходным контролем ФКБ - достоверных изменений нет.

Через 8 недель приёма 180мг тиреоидина при фиброкистозной болезни по сравнению с исходным контролем ФКБ - достоверно (р<0,05) увеличилась площадь гистотопографического среза в 1,6 раза; увеличилось ко-

личество одиночных протоков (р<0,01) в 2,2 раза; увеличилась степень васкуляризации (р<0,05) в 4,4 раза; уменьшилась площадь эпителия одного протока в 3,3 раза.

Через 8 недель при сравнении естественного патоморфоза (КГО и исходного контроля фиброкистозной болезни (ФКБ) - достоверно (р<0,05) увеличилась площадь гистотопографического среза в 1,7 раза; увеличилась степень васкуляризации в 3,3 раза; уменьшилась площадь эпителия одного протока в 4,3 раза.

Через 8 недель при сравнении естественного патоморфоза и действия тиреоидина отмечается - достоверное (р<0,05) уменьшение площади просвета желёз в 2,3 раза по сравнению с 60мг тиреоидина; увеличение процента лимфоцитов в 9 раз по сравнению с 60мг тиреоидина.

Итак, приём тиреоидина в течение двух и четырёх недель вызывает неполный регресс ФКБ преимущественно за счёт уменьшения величины групп протоков, общей площади эпителия и размера ядер. Приём тиреоидина в течение 8-ми недель вызывает неполный регресс кистозной мастопатии преимущественно за счёт уменьшения средней площади эпителия одного протока. Кратковременное действие тиреоидина в высокой дозе (60мг) и длительное действие тиреоидина в очень высокой дозе (180мг) приводит к наибольшему регрессу кистозной мастопатии. Однако, при использовании тиреоидных гормонов необходимо учитывать риск развития очагов тяжёлой дисплазии эпителия.

Выводы

1. Тиреоидин способствует повышению морфофункциональной активности интактных молочных желез половозрелых самок крыс, что проявляется увеличением площади железистого поля и повышением активности секреторного процесса.

2. Синэстрол в высоких дозах (10мг 1 раз в неделю) приводит к появлению фиброкистозных изменений молочных желез, что выражается в гиперплазии протоков, интраканаликулярной пролиферации эпителия с формированием истинных папиллярных структур, кистообразовании с жиро-белковым содержимым, фиброзированием околопротоковой стромы.

3. Тиреоидин при одновременном воздействии с синэстролом в 4,1 раза усиливает фиброкистозные изменения молочных желёз по сравнению с группами животных, которым вводили только синэстрол.

4. Тиреоидин вызывает регресс фиброкистозной болезни молочных желёз половозрелых самок крыс, что выражается в уменьшении площади эпителия, величины групп протоков, размеров ядер.

5. Выявлена дозовая и временная зависимость действия тиреоидина на регресс фиброкистозной болезни у исследованных самок крыс. Наибольший регресс вызывает 20мг тиреоидина при применении в течение двух недель.

6. Повышение дозы тиреоидина выше 20мг не оказывает регрессивного действия, а приводит к активизации пролиферации и появлению очагов дисплазии эпителия протоков.

Практические рекомендации

1. Целесообразно применение тиреоидных гормонов при отставании в физическом развитии молочных желёз.

2. Полученные данные о дозовой и временной зависимости воздействия тиреоидина на молочные железы половозрелых самок крыс могут быть использованы при составлении рациональных методик гормонотерапии фиброкистозной болезни.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Чумаченко П.А. Влияние тиреоидина на патоморфоз кистозной мастопатии в эксперименте / П.А. Чумаченко, С.А. Анисимова, Ж.А. Огольцова // Диагностика и реабилитация физического состояния человека: сб. науч. тр. под ред. акад. МАИ проф. М.Ф. Сауткина и д.м.н. В.Д. Прошлякова. - Рязань: РГМУ, 1997. - С.58-59.

2. Чумаченко П.А. Модифицированное пероральное применение тиреоидина в эксперименте / П.А. Чумаченко, С.А. Анисимова, Г.П. Казанцева, Ж.А. Огольцова // Общая патология: на пороге третьего тысячелетия: межрегион, сб. науч. тр., посвящ. 50-летию Ряз. гос. мед. ун-та и каф. пат. физиологии. - Рязань, 2001. - С.75-78.

3. Анисимова С.А. Влияние тиреоидина на интактные молочные железы в эксперименте / С.А. Анисимова, П.А. Чумаченко // Материалы

ежегодной науч. конф. РязГМУ им. акад. И.П. Павлова: сб. науч. тр. / под общ. ред. В.Г. Макаровой. - Рязань, 2006. - 4.1. - С.78-79.

4. Чумаченко ПЛ. Влияние различной степени гиперфункции щитовидной железы на морфологическое состояние молочных желёз эстроге-низированных крыс в препубертатном возрасте / П.А. Чумаченко, В.В. Давыдов, С.А. Анисимова, Ю.А. Ельчанинов, A.C. Клябина // Актуальные проблемы клинической и экспериментальной патологии: сб. науч. тр. / Ря-зан. гос. мед. ун-т им. И.П. Павлова. - Рязань, 2007. - С.149-151.

5. Анисимова С.А. Краткосрочное воздействие тиреоидина на ин-тактные молочные железы в эксперименте / С.А. Анисимова, П.А. Чумаченко // Актуальные проблемы клинической и экспериментальной патологии: межрегион, тематический, сб. науч. тр., посвящ. 110-летию со дня рождения патофизиолога Л.Н. Карлика / под ред. д.м.н., проф. Ю.Ю. Бялов-ского и к.м.н. C.B. Булатецкого. - Рязань: РязГМУ, 2008. - С.13-17.

6. Анисимова С.А. Патоморфоз кистозной мастопатии при длительном воздействии тиреоидина в эксперименте / С.А. Анисимова // Фундаментальные исследования. - 2008. - №8. - С. 102-103.

7. Анисимова С.А. Патоморфоз кистозной мастопатии при краткосрочном воздействии тиреоидина в эксперименте / С.А. Анисимова, П.А. Чумаченко // Рос. медико-биол. вестн. им. акад. И.П. Павлова. - 2008. - №3. - С.12-17.

Сдано в печать 26.04.2010. Формат 60x84/16. Объем 1,5 п.л. Заказ № 4948. Тираж 100 экз. ИПП «Гриф и К г. Тула, ул. Октябрьская, 81-а.