Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Оценка диагностической значимости неопределенных результатов в иммуноблоттинге при диагностике ВИЧ-инфекции

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РФ ИНСТИТУТ ИММУНОЛОГИИ

Р Г 6 00

- 1 ПАЯ 1993 на "Р61®31* рукописи

ГЛУШЕНКО Мария Викторовна

ОЦЕНКА ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ ЗНАЧИМОСТИ НЕОПРРдаЕННУХ РЕЗУЛЬТАТОВ В ИММУШБЛОТТИНГК ПРИ ДИАГНОСТИКЕ ВИЧ-ГОЮЕКЦИИ

14.00.36 - Аллергология и иммунолс.

Автореферат

диссертация на соискание учоной степени кандидата медицинских наук

Москва - 1993

Работа выполнена в Институте иммунологии Минздрава №

Научный руководитель: Член-корреспондент РАМН, доктор медицинских наук, профессор Р.М.Хаитов

Официальные оппоненты: академик АЕН РФ, д.м.н., профессор Б.Б.Першин доктор медицинских наук И.Г.Сидорович

Ведущая организация: ЩИ эпидемиологии и микробиологии ем. Н.Ф.Гамалеи РАМН

Задать диссертации состоится п/шхр?^1993 г. в^^час. на заседании специализированного совета Д 074.09.0Г при Институте иммунологии Минздрава РФ по адресу: 115478, Москва, Каширское шоссэ, 24, корп. 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института иммунологии Минздрава РЕ.

Автореферат разослан

Учений секретарь специализированного совета доктор медицинских наук

Л.С.Сеславина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

Актуальность теш. Комплекс проблем, связанных с диагностикой, лечением и предотвращением распространения заболевания СПВД (aids, синдром приобретенного иммунодефицита), занимает одно из центральных мест в современной медицине. О глобальном характере проблем; СПИД свидетельствуют статистические данные, согласно которым к середине 1991 г. выявлено 372 тыс. больных СПИД в 163 странах мира. Эпидемиологические исследования дают основание считать, что число инфицированных БИЧ в настоящее время превышает 10 млн. человек. По оценкам специалистов, у 30-40? этих лиц произойдет прогрессиро-ваняе симптомов поражения иммунной системы вплоть до развития картины СПИД (Хаитов P.M., 1991 г.). Одной из важнейших мер, позволяющих предотвратить дальнейшее распространение вируса ВИЧ, является массовый серологический скрининг широких контингентов, направленный на выявление вярусоносигелей и исгслгчешге коктаминированлой вирусом крови пз донорских запасов.

Интерпретация результатов наиболее широко применяемого подтверждающего теста - нмзлуноблоттинга (ИБ) - представляет определенную диагностическув проблему. Тактика в отношении лиц с неопределенными результатами ИБ (нИБ), то есть, с антителами только к дад-протеинам (реже ро£ и env-белкам) ВИЧ, такяе требует своего' научного обоснования (S.Kleinman,19B8,1990; R.У.Dodd,1990 ; J.Genes-са,1989; Хаитов P.M. и др., 1990 г.). Причини "неопределенной" реактивности до настоящего времени не ясны и являются предметом специальных исследований (C.L.Van dr>r Pool, 1989; K.Midthun,1990).

С другой стороны, в последнее время в литературе появились описания клинических случаев СПИД-подобных иммунодефицитных состояний в отсутствие лабораторных доказательств ВИЧ-инфекции (j.Lo-urence, 1992 и др.). Появляются данные о распространении в популяции человека других ретровирусов, помимо уже известных, и о возможности их перекрестной антигенной реактивности (r.p.Garry,1990; S.Gupta, 1992). Учитывая вышеизложенное, обследование лщ с нИБ к антигенам ВИЧ с применением различных подходов (углубленный серологический, эпидемиологический, клинико-иммунологический анализ), предпринятое в настоящей работе, представляется актуальным как с практической, так и с теоретической стороны.

В лаборатории приобретенных иммунодефицитов Института иммунологии Минздрава РФ диагностические исследования на наличие антител к ВИЧ в массовом порядке проводятся с 1987 г. За период прове-

дения исследований был выявлен ряд ВИЧ-инфицированных пациентов, а такяе груша лиц с неопределенным результатом в ИБ с антигенами ВИЧ-1. Целью настоящей работы явилась оценка диагностической и протаостической значимости неопределенных результатов, получаемых в ходе двухэтапного исследования сывороток различных контингентов лиц на наличие антител к БИЧ, включающего первичное скрининговое тестирование и подтверждающее исследование в ИБ. Для достижения названной цели в ходе работы решались следующие задачи:

1. Анализ результатов скрннинговых и подтверздакцих исследований сывороток различных контингентов на наличие антител к ВИЧ.

2. Формирование банка сывороток л соответствующих групп пациентов, имеющих:

а) позитивный результат при скрининге и при исследовании в ИБ (что, в соответствии с общепринятым подходом, является доказательством инфицировапиосги ВИЧ),

б) более или менее стабильную позитивную реакция в скрининговых тестах и неопределенный результат в ИБ,

в) отрицательный результат серологического исследования на наличие антител к ВИЧ.

3. Эпидемиологическая л клиняко-яммунологическая характеристика различных груш пациентов, включающая анализ обследованного контингента по отношению к наличию факторов риска инфицирования ВИЧ, диспансерное и клиническое наблюдение в динамике, применение общеклинических и лабораторных методов обследования и иммунологических гестов 1-го и 2-го уровней, исследование серологического статуса

в отношении различных персистирующих вирусов, широко распространенных в популяции человека и не относящихся к семейству ретрови-русов.

4. Углубленная серологическая характеристика группы лиц с неопре-дшгенныма результатами ИБ к ВИЧ-1 в отношении возможной ретрови-русной инфекции (ВИЧ?), включающая определение антигенов ВИЧ, антител к другим регровирусаы человека и животных (ВИЧ-2, НТ1У-1, ретровирусы млекопитахщкх С-гипа).

5. Применение дополнительных диагностических методик доя уточнения генеза неопределенных результатов ИБ (электронная микроскопия).

Научная новизна результатов исследования. В настоящей работе впервые проведено комплексное обследование лнц с нйБ к антигенам ВИЧ, выявленных при серологическом скрининге на ВИЧ-инфекцию в нашей стране.

Ваервые проведено длительное (до нескольких лет) клинико-имму-нологическоо наблюдение пациентов с нИБ, показавшее отсутствие признаков ВИЧ-инфекции в этой группе лиц в течение всего времени наблюдения.

Полученные в работе результаты дополняет существующие представления о серологическом статусе различных групп лиц в отношении ряда внрусньа инфекций. Впервые проведено серологическое исследование достаточно большой группы ВИЧ-инфицированных пациентов из нашей страны (37 человек) на наличие антител к НТ1У-1, позволившее прийти к заключению об отсутствии сочетанной инфекции БЭТ и НГ1У-1 в этой группе. Впервые получены данные о серологическом статусе пациентов с нИБ в отношении спектра вирусных инфекций (НТ1У-1, рет-ровирусы млекопитающих, ЦМВ, вирус гепатита В, ВЭБ, вирусы герпеса типов Г, 2). Впервые продемонстрирован высокий уровень антител к дад-яротеинам вируса НЬУ в популяции человека.

Впервые методом электронной микроскопии выявлены вирусоподобные частицы с морфологией ретровирусов в клеточном материале от лиц с нИБ.

Практическая значимость работа. Данные, полученные в работе, имеют существенное значение для совершенствования диагностики ВИЧ-инфекции, выявления пациентов, потенциально подверженных развитию иммунодефицигных состояний и/или клинических проявлений вирусных инфекций, то есть, в конечном счете, способствует более успешной профилактике СПИД. Систематизированы данные, полученные в процессе длительного обследования различных групп лиц в нашей стране с использованием подтверждения в ИБ, и результаты динамического обследования лиц с нИБ. Анализ этих результатов позволил прийти к заключению об их соответствии критериям серопозитивности к ВИЧ, выработанным совещанием экспертов ВОЗ 1990 г. Обоснован подход к группе пациентов с нИБ как "клинической группе риска" по развитию ВИЧ-инфекции и СПВД, что предполагает целенаправленное выявление и обследование таких пациентов. Показана необходимость включения в план обследования лиц из групп риска и пациентов о нИБ тестирования на другие персистирувдяа вирусные инфекции (ЦМВ, вирус гепатита В я др.). Дополнительно обосновано требование о безусловном отстранении от донорства лиц, сыворотки которых проявили "неопределенную" реактивность при серологическом обследовании на ВИЧ-инфекцию. >

Публикация результатов исследования и апобагая материалов диссертации. ПО теме диссертации опубликовано 5 статей (в том числе, в иностранных журналах) и ряд тезисов в материалах внутрисоюзные и

международных конференций. Основные положения диссертации доложены и обсувдеш на конференциях колодах ученых Института иммунологии Минздрава РФ в 1989, 1990 г.г., на I Всесоюзном съезде иммунологов (Сочи, 1989 г.), в рамках Международной ш;:оды иммунологов (Ташкент, 1992 г.). Апробация состоялась на ыежлабораторной конференции Института иммунологии в июне 1992 г.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на/¿Остр, машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов. Содержит >0таблиц и /¿С рисунков. Список литературы включает ЙОО работ отечественных и зарубежных авторов.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ.

Материалы и метода.

В работе использованы образцы сывороток крови, отобранные в процесса скрининга на наличие антител к БИЧ с подтверждением в им-мунойлоттинге в лаборатории приобретенных ишунодефицитов Института иммунологии в течение 1987-1991 г.г., а также сыворотки, присланные в лабораторию для проведения подтвервдаавдк референс-ис-следований. В процессе проведения работы сформированы следущие основные грушш:

1) сыворотки ВИЧ-инфицированных пациентов (80 образцов),

2) сыворотки с более или менее стабильной позитивной реакцией в скрининговнх тестах я неопределенными результатами в ИБ с антиге-. нами ВИЧ-1 (285 образцов),

3) сыворотки серонегативных в отношения ВИЧ доноров.

Сыворотки получались путем центрифугирования крови из локтевой вены и хранились в замороженном виде при -20 и -70° С.

Выявленные в процессе скрининга лица с позитивной реакцией в ИМ к нИБ (а такие с позитивной реакцией в ШК при отрицательном ИБ) вызывались в Институт иммунологии дня проведения диспансерного наблюдения. ВИЧ-инфицированные пациенты находились на обследовании и лечении в клинике Института иммунологии.

В соответствии с поставленной целью и задачами работы, исследование проводилось по следующему плану: серологические исследования па наличие антител к ВИЧ, а также антигенов ВИЧ-1 в сыворотках; определение антител к другям ретрозирусам {НГ]У-1 и ретроаирусы улекошггаидах С-тлпа); определение антител к различным пёрсистиру-вдим вирусам; эпидемиологическая характеристика пациентов; шшнл-ко-юаггкологичеокоя характеристика; применение дополнительных ме-

тодов исследования (электронная микроскопия периферических клеток крови).

- В качестве скршшнговых тест-систем на наличие антител к ВИЧ использовались следующие отечественные и зарубежные тест-системы: "Антиген", "Рекомбинант-ВИЧ", "Пептоскрин", "Пептоскрин-2" (СССР), "Abbott-Recombinant - HTLV-IXI-EIA", Abbott (II поколение, США), "Vironoatlka anti-HTLV-III", Organon-Teknika (Голландия), "Fînzy-gnoat-anti-fav-oilcro", "Enzygn08t-anti-F{IV1 + 2", Behring . (ФРГ)» в некоторых случаях использованы таете тест-система фирмы "Abbott" I поколения и "Serodia-HIV" (Япония). Постановка реакции и интерпретация результатов осуществлялась в соответствия с инструкциями, прилагаемыми к каадой тест-системе. Подробная характеристика тест-систем представлена в тексте диссертации.

В качестве подгвервдавщего теста использованы системы Weetern blot фирм "Du Pont/Blotech-HIV-1" (США), "Organon-Teknika" (Голландия), "Bio Rad" (США), "Антиген" (СССР), в которых в качестве антигенов на нитроцаллшозпу» мембрану нанесены фракционированные вирусные протеины. Большая часть подтверждающих исследований проведена с использованием тест-системы фирмы Du Pont . Использовались тахле системы ИБ для выявления антител к белкам ВИЧ-2 { Du Pont ), а также системы ИБ, в которых в качество антигена присутствует ллзат неинфицированных клеток культуры Н-9. Постановка осуществлялась в строгом соответствии с прилагаемыми инструкциями. Интенсивность реакции исследуемого образца с определенным белком ВИЧ оценивалась полуколичественно "в крестах" (от + до 4+) путем'сравнения со степенью окраски полосы соответствующей локализации, образованной высокореактивной и слабореактивной позитивными контрольными сыворотками, входящими в состав наборов.

Определение антигенов ВИЧ-I в исследуемых сыворотках проводили совместно с лабораторией диагностики СГЩ НИИ вирусных препаратов МАН СССР с использованием иммуноферментной тест-системы, разработанной коллективом авторов этого института (Г.Р.Мацевич и др., 1991 г.). Антигены ВИЧ-I выявляли в цельной нативной сыворотке, в разведении 1/3, а также после предварительного разрушения ИММУННЫХ Комплексов ПО ОПИСаННОЙ методике ( T.Mathieaen, 1988 ).

Определение антител к НТ1У-1. Скрининговое исследование проводили параллельно в двух тест-системах: "Abbott-HTLV-i - eia" » (США) и агглютинационной тест-системе "Serodia-HTLA" (Япония). В качестве подтверждающего теста использован ИБ, разработанный в лаборатории вирусного канцерогенеза ВОНЦ АМН СССР.

Определение антител к ретровирусам млекопитающих С-тша (HIV -яирус лейкоза мышей Раушера, FelV - вирус кошачьего лейкоза, SSV -нирус саркома обезьян) проводили методом ишуноблоттинга в сотрудничестве с лабораторией клеточного иммунитета НШ канцерогенеза ЬОНЦ АМН СССР, в качестве антигенов использованы лизатн вирусов, нолученние ИЗ NIH (Betheada, MD, USA).

Определение антител к различным персистируидиы вирусам (ЦМВ, ВЭБ, вирусы герпеса типов 1,2) и серологических маркеров инфекции вирусом гепатита В проводили в соответствующих иммуноферментных тест-системах отечественного и импортного производства: "аъъо«-CHV-Total-AB-EIA", "Du Pont EBV VOA-IgG-ELISA", "AUSAB-EIA" (США), "Snzycnost HBs-Ag-micro", "Snzygnost onti-HBc", Behring (ФРГ), иммуноферментная тест-система для определения антител к вирусу герпеса типов 1,2 (НИИ вируеннх препаратов АШ СССР),. Постановка осуществлялась в соответствии с инструкциями. Подробная характеристика тост-систем представлена в тексте диссертации.

Эпидемиологическая характеристика пацкеигов проводилась в соответствии с кодовым обозначением, принятым в нашей стране при массовых исследован...« на ВИЧ-инфекцию, а также путем выяснения анамнеза по специально разработанной схеме.

Клиническое обследование вшшчало: .общий осмотр (особое внимание обращалось на состояние кожных покровов, лимфатической систем!, SKI, суставов); лабораторные исследования (общий клинический анализ крови а биохимическое исследование крови, посевы материалов со слизистых носа, зева, десны); повторное серологическое исследование на ВИЧ (в ряде случаев осуществлялся забор крови от сексуального партнера или ближайших родственников); инструментальные метода исследования и консультации специалистов (по показаниям).

Иммунологическое обследование. Тесты первого уровня: оценивалось абсолютное л относительное количество лимфоцитов периферической крови, относительное и абсолютное количество клеток, несущих рецепторы к эритроцитам барана (E-РОК, Т-лимфоциты) и быка (EAG-POK, В-димфоциты) традиционным методом. Определялось содержание иммуноглобулинов различных классоа (IcjG, Ig?J!, IgA) методом Манчиш. Тесты второго уровня: содержание популяций и субпопуляций лимфоцитов определялось с помощью моноклональных антител: JTTI(CD3) - зрелые лгоифоцигы периферической крови, ЛТ4 (CD4) - хелперно/ин-дукторная популяция, JIT8 (C.D8) - супрессорно/цитотоксичесная популяция лимфоцитов. Количество клеток, несущих соответствующие маркеры, определялось на проточном цитометре или с помощью флюорес-

центной ыикроскопли.

Электронно-микроскопическое изучение клеток периферической крови проводилось в лаборатории электронной микроскопии Института иммунологии. Клетки крови, выделенные в градиенте плотности фиколл-пак, фиксировали 2% глутаровым альдегидом, обезвоживали и заливали в эпон-аралдит. Ультратоккие срезы окрашивали уранилацетатом и цитратом свинца и исследовали в электронном микроскопе jem 1200 EX, Jeol (Япония).

Статистическая обоработка результатов проводилась на персональном компьютере типа IBM PC, включая обвдестатистичеокий анализ (вычисление средни, среднеквадратичных отклонений и ошибки репрезентативности), сравнение групп по отдельным параметрам (учитывая парный Т-критерий Стъюдента), вычисление коэффициента корреляции между качественными признаками (тетрахорического показателя связи) и критерия сопряженности признаков j(2.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

Серологическая и эпидекотологическая характеристика ВИЧ-инфицированных пациентов. В соответствии с общепринятым подходом, лица, имеющие позитивные результаты скргашнговых и подтверждающих исследований в ИБ, были признаны инфицированными ВИЧ. Из них 31 -являлись иностранцами и 49 - гражданами СССР. Ниже проанализированы результаты, полученные при исследовании именно этих 49 пациентов. Сыворотки исследовались как минимум в двух иммунофермент-ных тест-системах, во всех случаях получен позитивный результат. В ИБ- (Du Pont) IOQi этих сывороток отвечали критериям серопозитивности для данной тест-системы; то есть, в этой группе сывороток отмечалось совпадение результатов всех скрининговых и подтверждающих исследований. У всех 49 пациентов этой группы, независимо от стадии ВИЧ-инфекции, выявлялись антитела к оболочечным гликопроте-инам ВИЧ gpI20, gpI60 и $р41 в высоких титрах (1/10 тыс.- 1/20 тыс), что полностью согласуется с принятыми ВОЗ критериями серопозитивности (рис. I). С наименьшей частотой выявлялись антитела к gag-протеинам ВИЧ pI5/pI7 (75? случаев), 37 пациентов (75?) имели антитела ко всем белкам ВИЧ, представленным в ИБ. По данным ИБ, в этой группе не выявлено случаев сочетанной инфекции двумя типами вирусов ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Существенно, что из 49 ВИЧ-инфицировант > пациентов 100% имели положительный эпидемиологический анамнез, то есть, для всех из них оказалось возможным установление пути и момента инфицирования. Инфицирование произошло половым или медицинским путем (41 и 8 пациентов соответственно), сроки инфекции на момент наблюдения составили от 10 месяцев до II лет.

Рис. I. Картина ИБ с антигенами ВИЧ-1 при исследовании сывороток от ВИЧ-инфицированных пациентов и лиц с нИБ.

Слова направо: стрипн № 6,22,20 - негативная, слабопозитивная и высокопозитивная контрольные сыворотки соответственно; стрипы № 4,13,9 - сыворотки ВИЧ-инфицированных пациентов; стрипы № 9 - 25 - сыворотки с нИБ, $ 9,18,18 - реакция в области р17 ВИЧ-1 в сочетании или без других ВИЧ-специфических полос, й 17,16,17 - реакция в области р24 ВИЧ-1 в сочетании или без других ВИЧ-сиацкфических полос, № 1,3,6,25 - реакция в области других белков-продуктов ВИЧ-1.

- э -

Серологическая и эпидемиологическая характеристика группы лип с неопределенными результатами в ИБ о антигенаш ВИЧ-1. Эта группа била представлена сыворотками 286 лиц, которые характеризовались более или менее устойчивой позитивной реакцией в скринян-говых тестах и нИБ о' антигенами ВИЧ-1 (рясЛ). В это число вошли как сыворотки, выявленные в процессе скрининга в лаборатории (89 образцов), так и при проведении референс-исследований присланных образцов (197 сывороток).

Таблица I.

Распределение полос связывания в сыворотках - с неопределенным результатом ИБ к ВИЧ-1.

Полоса выявляется в области: Количество сывороток Всего

только р24 только pI5/pI7 только р55 нескольких белков-продуктов гена qaq 64 45 9 32 150 (52,450

только gp4I только gpI20 продуктов генов gag + env 28 2 48 79 (27,3$)

только р31 только р51 только р64 , продуктов генов + pot 3 I 10 10 24 (8,42)

продуктов генов env + pot продуктов генов gag -t env + pot1 4 26 4 (1,42) 26 (9,12)

всех белков ВИЧ-1 0

неспецифическая локализация полос 4 4 (1,42)

Суммарно 286 (1002)

х - интенсивность реакции не соответствовала требованиям, предъявляемым к позитивным сывороткам.

При исследовании сывороток этой группы в ИБ с антигенами ВИЧ-1 выявлялись полосы связывания в области одного или нескольких белков ВИЧ, однако результаты не могли быть расценены как по-

активные. Ни в одной из этих сывороток не выявлены антитела одновременно к двум из трех оболочечных гликопротеинов (qp4I, gpI20 и/или qpI60), что, в соответствии с последними рекомендациями ВОЗ, является необходимым критерием Серопозитивиостн. Из 286 сывороток, дававвдх неопределенный результат в ИБ, в 162 случаях (56,6%) выявляли полосы связывания только в области одного белка-антигена ВИЧ-1, в 124 случаях (43,4#) - в области двух н более белков. Наиболее часто нИБ был связан с наличием антител только к продукту гена gag ВИЧ - белку р24, таких сывороток было выявлено 64 (22,4#). Подробные данные о выявлении полос связывания в ИБ представлены в таблице I.

Таблица 2.

Эпидемиологическая характеристика лиц о яИБ (в соответствии с кодовым обозначением).

Контингент (код)

Общее число

tfo них:

мужчин хепвдя

Доноры }фови (108)

Лица, обследованные по клиническим показаниям (113)

- в том числе дети до 14 лет (117)

Беременные женщины (109)

Лица, относящиеся к группам риска, в том числе:

- контакт с ВИЧ-инфицированным сексуальным партнером (101)

- наркоманы (102)

- гомосексуалисты (103)

- стрздащие венерическими заболеваниями (104)

- с беспорядочными половыми связями (105)

- реципиенты крови (ПО)

- находящиеся в местах лишения свобода (112)

- обследованные анонимно (114)

- имевздз бытовые или медицинские контакты с ВИЧ~вдфнцаровшн£ым|^

Всего

78 (27,355) 44

122 (61,5» 10

64

34 59

54 II

32 (П,2*) 20

1

2 I

16

3

4

3 I

286 (над 128(44,8/5)158(55,23

улс!гр?дс?ленио лиц с нИБ по отношению к наличию факторов рис-

ка инфицирования БИЧ (в соответствии с кодовым обозначением, принятым при массовом обследовании в нашей стране), представлено в таблице 2. Как видно из таблицы, большинство лиц с нИБ не имели отношения к очевидным группам риска по инфицированию ВИЧ (89,2$). Не отмечено значительной разнили в количестве мужчин и женщин с нИБ (44,8$ я 55,2% соответственно). При анализе возрастной структуры этой группы лиц выявлено, что абсолютное большинство составляли лица 17-60 лет (95/Е), 3,5/2 (10 чел.) являлись детьми до 14 лет, 2% (6 чел.) - лица старше 60 лет, то есть возрастная структура этой группы отражала данную характеристику контингента, подвергавшегося массовому скринингу на наличие антител к ВИЧ.

В дальнейшем был проведен анализ количественного и качественного соотношения выявляемых антител к ВИЧ в сыворотках с нИБ в зависимости от отношения к факторам риска по инфицированию ВИЧ. Частота выявления антител к белкам-продуктам различных генов ВИЧ-1 (спектр антител) не различалась у лиц, относящихся к группам риска и другим обследованным группам.

При анализе данных ИБ в динамике выявлено, что из 86 человек, наблюдавшихся в течение времени от 6 месяцев до 4-х лет, не произошло прогрессирования картины ИБ у 79 (.92%), при этом:

- у 47 картина осталась без изменений,

- у 14 результат ИБ.стал отрицательным,

- у 18 - количество полос и интенсивность их окрашивания уменьшились, В 6 случаях отмечено некоторое прогрессирование картины ИБ, выражавшееся в увеличении количества полос связывания и их интенсивности, однако результат продолжал оставаться неопределенным, не отвечая критериям серопозитивяости. Все эти 6 пациентов не относились к группам риска по инфицированию ВИЧ (доноры, беременные, обследованные по клиническим показаниям).

В группу сывороток, исследованных в ИБ в динамике, вошла также сыворотка пациентки, чьим сексуальным партнером на протяжении более 2-х лег являлся ВИЧ-инфицированный мужчина. В серии исследований в ИБ сыворотка данной пациентки продолжала давать неопределенный результат, однако, однократно были зафиксированы антитела к др120 (2+) и др160(3+), что, в соответствии с рекомендациями ВОЗ, может быть расценено как позитивный результат. Подробная характеристика случаев прогрессирования картины ИБ в сыворотках с > исходно неопределенным результатом представлена в таблице 3. Кроме названных, в таблицу включены также результаты исследований сыворотки пациента африканского пронохоздения, у которого в тече-

Таблица 3.

СЛУЧАИ ПРОГРЕССИРОВАВ НЕОПРЕДЕЛЕННОЙ КАРТИНЫ ИВ К ВИЧ-1 В ДИНАМИКЕ

•пидениологкческая Исходная Результат ИБ в динамике

а}»актористИ1а картина ИВ

•пциилта

срок наблюдения)

). Переменная женщина р17(2+) р17(4+)р24(+)

(1 год 4 >*.>с)

Донор крови (1 год 9 мее)

р17(2+)

р17( 4+) gp41 ( +) р55( +)Epi20( +)

Л Клинические показания р24(4+) (6 иес)

p24(4+)pS5(2+)

4 Донор крови (10 t*>c)

иеслец. р17( +) р24( +),

полосы неспецифические полосы«

'.'». Донор крови (1 год 3 мес)

gp41(+) р15( 2+) р24( 2+) gp41(+)'

Г>. Клинические показания р24(4+) (С мес) gp41(2+)

р24( 4+) и>41 ( 2+) р5ЦЙ*^

7. Из эндемичного региона, отр. Африка (7 мес)

а. Коковой коотакт р24(+)

с БИЧ- инфицированным партнером (2 года)

р18р24р31щ>41р51р55р®§> ВР120/160 (все 4+)

1) p31(+)gpiai(2+)epl6É(i^>

2) ЕР41(2+)

ние 7 месяцев произошла полная сероконверсия с появлением всего спектра анти-ВИЧ-антител при первоначально негативном результате ИБ.

Определение антигенов ВИЧ-1 проводилось в сыворотках лиц о нИБ (54 образца) и ВИЧ-инфицированных пациентов (23 человека, из которых 4 имели диагноз ВИЧ-инфекции в бессимптомной фазе, 15 -ВИЧ-инфекции а стадии лимфоаденопатии и 4 - ВИЧ-инфекции в развернутой фазе). Антигенеыия ВИЧ выявлена в сыворотках 9 ВИЧ-инфицированных пациентов, при этом, у всех 9 имелись клинические проявления ВИЧ-инфекции. То есть, выявляемость антигенов ВИЧ у лиц с клиническими проявлениями составила в данном исследовании 47,7£ (9/19), что приближается к аналогичному показателю для диагности-куыов зарубежных фирм. Ни в одном образце с нИБ (включая сыворотку пациентки, имевшей контакт с ВИЧ), антигенов ВИЧ не обнаружено.

Таким образом, группу с нИБ составили сыворотки, которые на основании данных различных тестов на антитела к ВИЧ не могли считаться негативными, однако, и не отвечали необходимым критериям серопозитивности. Корректно установить истинную частоту встречаемости неопределенных результатов в данном случае затруднительно, поскольку в данную группу включены также сыворотки, отобранные и другими скрининговыми лабораториями. С учетом этой поправки,, количество неопределенных результатов при двухступенчатом серологи-Чвскои исследовании составило 0,05-0,125$, что соответствует аналогичным показателям других лабораторий.

Эпидемиологический анализ показал, что значительное большинство лиц о нИБ не имели отношения к группам риска по инфицированию ВИЧ, Четкие указания на возможность инфекции (контакт с ВИЧ-инфи-цярованным партнером) имелись только у одной пациентки из этой группы. При попытке определения другого серологического маркера инфекции - антигенемии ВИЧ - не было получено положительных результатов.

Демонстративным является сравнение по этим характеристикам группы лиц о нИБ с группой ВИЧ-инфицированных пациентов из этого же региона (территория СССР). 7 100$ ВИЧ-инфицированных выявлялись антитела ко всем трем оболочечным гликопротеинам, имелся четкий положительный эпидемиологический анамнез, у 47,1% больных с диагнозом ВИЧ-инфекции в стадия клинических проявлений выявлена анти-генемия ВИЧ.

Несмотря на наличие в литературе указаний на возможность получения неопределенной картины ИБ при инфекции другим серотипом

г!ИЧ, в нашем исследовании не было выявлено .позитивной картины ИБ о антигенами БИЧ-2 ни у одного из 86 исследованных пациентов с нИБ к ВИЧ-1. Сочетанной инфекции двумя вирусами не выявлено также у пациентов, инфицированных ВИЧ-1. Данные потаостью согласуются с результатами эпидемиологических исследований, свидетельствуйте: об относительно невысоком уровне инфекции ВИЧ-2 в европейских странах, а также об отсутствии инфекции ВИЧ-2 у лиц низкого риска инфицирования с нИБ к ВИЧ-1, которое было продемонстрировано ранее в аналогичных работах (.Г.Кпиувг-НорГ,1939; К.М1(Ш1ип,1990).

Наиболее информативным для оценки диагностической значимости неопределенных результатов ИБ явкяатся исследование образцов сыворотки от пациента в динамике. При анализе данных ИБ в динамике ин у одного из 86 лиц низкого риска с исходным нИБ не произошло формирования позитивной картины ИБ. Сохранение у пациента нИБ в течение как минимум 6-ти месяцев наблюдения при отсутствии у него Факторов риска инфицирования и клинических проявлений заболевания, рассматривается ВОЗ как свидетельство отсутствия у него инфекции ВИЧ ("'т7йек1у ср1(1.Кесогс1"1990). Установление данного срока наблюдения связано с особенностями динамики иммунного ответа на ВИЧ, для которой характерна полная серококвероия о появлением всего спектра антител в течение 6-ти месяцев после инфекции. Демоистраг-тивным в этом отношении является наблюдение пациента африканского происховдения. Вопрос о наличии инфекции у пациентки, имевшей контакт с ВИЧ, в настоящее время остается открытым и требует применения дополнительных вирусологических исследований и увеличения времени наблюдения.

Учитшзая вышеизложенное, есть основания считать, что неопределенные результаты у лиц низкого риска инфицирования не связаны с инфекцией одним из двух серотипов ВИЧ и носят характер неспеци- -фической реактивности. В определенной мере это предположение подтверждается высоким уровнем реакций (572) с антигенами неинфициро-ванной культуры Н-9 в ИБ в этой группе сывороток, выявленным в настоящем исследовании.

Природа неопределенных результатов, в ИБ с, антетенами ВИЧ у лиц низкого риска инфицирования до настоящего времени^ не ясна и -является продает ом специальных исследований.. По-видимому, такая реактивность сывороток может являться, следствием различных при- ' чин у разных групп пациентов. В ряде случаев она, возможно, связана с содержащимися в.сыворотках аутоантит&пами, иммунными комплексами или факторами другой природа, появляющимися при той' или икой форке натологди," - ' - * • *

$ртичеокое обследование лиц р нИБ (выборка из 52-х пациентов, составивших группу клинического наблюдения, являлась репрезентативной до отношению ко всей группе с нИБ по возрастным, эпидемиологическим и серологическим характеристикам) показало, что практически у всех этих пациентов имеет место тот или иной патологический процесс, способный явлться причиной ложнопозитивных серологических реакций. Наиболее часто (в 85,4^ случаев) встречались заболевания инфекционной этиологии, а также онкологическая, аутоиммунная и аллергическая патология. Почти у половины обследованных лиц выявлялись соответствующие изменения в результатах общего клинического (некоторое повышение СОЭ) и биохимического исследований крови (снижение альбутгано-глобулшшвого индекса, изменение содержания глобулиновых фракций, умеренная гипер-гамма-глобулинемия, у части лиц - наличие С-реактивпого белка и возрастание белковых осадочных проб).

В группе лиц с нИБ выявлены такле изменения в идауяком статусе, свидетельствующие об умеренном угнетении клеточного эвена иммунного ответа: умеренное снижение относительного (по по абсолютного) числа Е-РОК и ЕАС-РОК (Т- а Б-лимфоцятоз), которое, однако, не сопровождается сшшепием синтеза иммуноглобулинов, напротив, отмечается умеренная гипердамуноглобулинемия, связанная с увеля-четтам содержанием всех классов. Вкялано также некоторое снижение относительного, по пе абсолютного числа СОЗ-линфодитов и умеренное снижение относительного а абсолютного числа С04-лж.5фо-цитов по сравнения со здоровкш серонегатнвшгмя допорота (соотношение Т4/Т8 оставалось на уровне 1,3). Отмеченные изменения могут быть связаны с высокой частотой хронических апфокцношшх заболеваний бактериального н вирусного геяеза, онкологических заболеваний, выявленной в этой группе. Описанные изменения имели место как у лиц, обследованных по клиническим показаниям, так и у доноров Ефови и беременных яеннш. Подробно данные кяинико-шмунологичес-кого обследования изложены в тексте диссертации.

Дополнительную клиническую и эпидемиологическую информацию, характеризующую группу лиц с нИБ, представляет проведенное наш исследование сывороток этой группы па содержание антител к различным персистнрующим вирусам, широко распространенным в популяция. -

Хроническая инфекция различными вирусами являете , с одньл стороны,- одним из факторов, способствующих переходу инфекции ВИЧ из латентной фазы.в продуктивную стадию, а с другой стороны - может -„самостоятельно приводить к формированию состояния иммуноде-

Таблица 4.

Результаты определения анти-ЦМВ-1д& в различных группах сывороток методом ИФА.

Исследованная группа иг^м^ин* Оптическая плотность с£воро?Г <0П> ^ 492 ™

ВИЧ-инфицированные 31 0,442+0,04(0,159-1,096)

ВйЧ-негативпые доноры 39 0,492+0,05(0,066-1,584)

Лица с нИБ к ВИЧ-1 " 82 0,660+0,04(0,185-1,593)

Лица с клиническими проявлениями ЦМВ-инфекция (женщины с отягощенным акушерским анамнезом) 23 0,677+0,05(0,283-1,378)

. Таблица 5,, Выявление серологических маркеров инфекции аирусом гепатита В в различных группах.

Исследованная группа ЩЬ'-антиген Анти-НВ*- Анти-НВс-антитела антитела

ВИЧ-инфицированные 1/37 (2,750 7/27 (26,9%) 12/37 (32,4*)

Лица с нИБ в ВИЧ 5/45(11,1$) 18/58 №%) 47/127 ( 37%)

ВИЧ-негативные доноры 0/53 6/42 (14,3%) 18/103(17,5?)

прессии. Результаты ряда исследований, проведенных в группах риска по инфицированию ВИЧ, свидетельствуют, что неблагоприятный статус в отношении других персистируюцих вирусных инфекций является характерным именно для этой группы лиц: у них чащь выявляются вирусные инфекции в активной фазе, отмечен повышенный уровень антител к некоторым вирусам. Выявление серологических маркеров инфекции вирусом гепатита В рассматривается как один из важнейших эпидемиологических показателей.мвихеп,1989; р.рагс1,т989).

В настоящем исследовании было выявлено, что: а) У лиц о нИБ уровень антител к цитомегаловирусу достоверно

превышает уровень аиги-ЦМВ~антигел в группе серонегативных к ВИЧ

доноров и сравним о этим показателем у больных с клиническими проявлениями ЦМВ-инфекции (таблица 4).

6) Частота обнаружения серологических маркеров инфекции вирусом гепатита В в группе с кИБ соответствует таковой у ВИЧ-инфицированных пациентов и превышает этот показатель в группе серонегативных доноров в 2 раза (таблица 5).

Как следует из подученных нами данных, группа лиц с нИБ к ВИЧ, при всей своей очевидной клинической неоднородности, отличается от общей серонегативной в отношении ВИЧ популяции по уровню инфици-рованности некоторыми персистирующими вирусами и степени активности инфекционного процесса. С учетом вышеизложенного подхода, есть основания рассматривать пациентов о нИБ как своеобразную "клиническую" грушу риска по инфицированию БИЧ н развитии клинической картины иммунодефицита. Такие пациенты нуждаются в углубленном обследовании с- целью выявления и лечения у них хронических вирусных инфекций. Другой практический вывод из этой части работы - потенциальные доноры крови и других биологических материалов с подобными результатами серологического обследования должны безусловно отстраняться от донорства.

Согласно нашим наблюдениям, сыворотки с нИБ к ВИЧ могут быть разделены на 2 принципиально различающиеся группы:

1) большая группа, характеризующаяся реакцией с дад-протеинами ВИЧ-1 (преимущественно, р!7 и р24) в сочетании или без других ВИЧ-специфических полоо (в нашем исследовании таких сывороток было около 80%)}

2) меньшая группа, характеризующаяся в основном изолированной реакцией с оболочечнымн (преимущественно, gp4I) гликопротеинами ВИЧ-1 (в нашем исследовании - около 12$). .

(В незначительном проценте сывороток обнаруживались полосы связывания только в области ро?-белков дли неспецнфической локализации) (таблица I).

Следует отметить, что во всех случаях, когда сыворотка с нИБ реагировала с env-протеинами, характер и интенсивность такой реакции не соответствовали проявляемым сыворотками ВИЧ-инфицированных пациентов (рис. I), тогда как реакция о дад-протеинами в сыворотках с нИБ была сравнима с таковой у ВИЧ-инфицированных пациентов. О различном характере реакций с gag я erw -протеинами в сыворотках с нИБ свидетельствуют также результаты исследования их в лзнамико. При последующих исследованиях в ЙБ реактивность с ^ад-протеинами являлась значительно более стабильной, тогда как реактивность с

orw-протеинами, особ&вно, если она определялась изолированно, в большинстве случаев носила транзиторкнй характер.

Возможное объяснение феномена транзиторной реактивности с env-щютеннами у лиц низкого риска инфицирования может быть дано в свете недавно опубликованных данных CD.Davie et al. ,1990), свидетельствующих о наличии сходных аминокислотных последовательностей в области трансмембрашюго gp4I ВИЧ-I и белков многих других, неродственных ВИЧ вирусов (различные герпесвирусы, адено-, энтеро-, рино-, гепадна-, миксовирусы, вирусы папилломы, гриппа А, а также КОКЛЮШНОГО И столбнячного ТОКСИНОВ И Mycobact. tufrerculoaie ). Антитела к детерминантам в пределах этих последовательностей могут появляться у людей при естественной иммунизация иди вакцинации и впоследствии перекрестно реагировать с антигенами ВИЧ при серологических исследованиях.

В качестве одного из возможных объяснений персистируяцей реакции с да^-протеинами ВИЧ в отсутствие инфекции этим вирусом ряд исследователей выдвигает предположение о возможной инфекции другими ретровярусами, как уже известными, так и еще не идентифицирован ныда. В противоположность ретровирусным env-генам, проявляющим высокий уровень мутационной изменчивости, ^afj-гены являются наиболее стабильными я консервативными в процессе эволюции. По-видимому, в ряде случаев могут иметь место перекрестные реакции с групповыми антигенами (^ад-белками) различных регровирусов, например вируса HTD/-I, вызавающего у человека Т-клсточный лейкоз. С другой стороны, представляют интерес данные о высокой частоте сочетанной инфекции ВИЧ в HTIV-I, выявляемой в некоторых регионах.

В настоящей работе исследовано 3 группы сывороток на наличие антител к HTIV-I: 42 от ВИЧ-инфицированных пациентов (в том числе, 37 от больных из нашей страны), 119 сывороток с нИБ к ВИЧ и II? сывороток с первично позитивным результатом в скрининговых тестах и отрицательным результатом ИБ. При исследовании сывороток от ВИЧ-инфицированных пациентов, а также от лиц с нИБ, ни в одном случае не выявлено антител к HTD/-I. Принимая во внимание тот факт, что в СССР ВИЧ был SaBesed1 извне, не исключено, что из эндемичного я по HTLV-I региона, можно было ожидать инфицирования НТ1У-1 среди обследованных ВИЧ-инфицированных лиц. Однако, в настоящей работе не получено данных, свидетельствующих об одновременном инфициро- . вании вирусами ВИЧ и HTIV-I пациентов.из нашей страны. Не выявлен» также перекрестного реагирования сывороток, -содержащих антитела к ВИЧ, с антигенными детерминантами HTLV-I. Антитела г. ijajj-проте-

шам вируса НТ1У-1 р19 и р28 выявлены только в одной сыворотке от донора крови, обнаружившей неустойчивую серопозитивность в ИФА при первичном скрининге на наличие антител к БИЧ.

При оценке степени интенсивности реакции в ИБ с антигенами ВИЧ в "неопределенных" сыворотках выявлено, что 2А% (70/286) из них характеризовались интенсивной реакцией с дад-протеинамк р17 или р24 ВИЧ (визуально реакция оценивалась на 3+/4+). При исследовании сывороток в разведении такая интенсивность реакции соответствовала титру 1/1000-1/10 тыс., то есть, титр антител в этих сыворотках был сравним с таковым в сыворотках ВИЧ-шфицированных пациентов. Ряд сывороток характеризовался присутствием антител к р17 или р24 в титре 1/1000-1/10 тыс. и антител к другим белкам ВИЧ в титре 1/100-1/500. Как правило, такая реакция сывороток являлась стабильной и сохранялась у пациента в течение длительного срока наблюдения. Из 55 сывороток (19,2$ от 286), реагировавших в ИБ таким образом, в 24 преобладающей била реакция о р24, в 31 ~ о р17 ВИЧ. В 26 случаях отмечалась реакция в области белков продуктов всех структутриых генов ВИЧ - дад, ро£, егм. Пациенты, принадлежащие к этому числу, представляли особый интерес и в дальнейшем были обследованы с применением специальных мэтодпк (ИБ с антигенами ретровлрусов штотинх, электронная микроскопия).

Данные о наяшши антител к баллам ретровлрусов млекопитающих • С-типа в группах о нИБ и сероаегативпых в отношении ВИЧ доноров представлены в таблица 6. .

Таблица 6.'

Антитела, взаимодействующие с дад-цротеинаш (р15 п рЗО) ретровлрусов млекопитаодих С-типа . в различных группах сывороток по данным ИБ.

Исследованная груша Содержат антитела к дад-протеинам

ШГ ТвЪУ

Лица с яНБ к ВИЧ-Г 20/36 (55,6?) . 3/36 ■ Л/36

ВИЧ-негативные доноры 13/31 (41,9*) 1/21 . . 1/21

В целом 63$ (23 из 36) сывороток о нИБ реагировали с ср^-сло-теинашг того или иного из названных вирусов.' Интенсивность окрашивания полос в ИБ, соответствующих белкам определенного мо окулярного веса, ямела различную степень выраженности (от + до 4+). На рас, 2 представлены наблюдавшиеся типы реакций.

рЗО

а)

123 1 2 3, Г 2 3 123 123 I II • III 1У У б)

Ряс.2.

Исследование сывороток от ляп с нИБ к ВИЧ-1 в нммуноблотткяге с антигенами ретровирусов млекотгтатаях С-типа.

а) ИБ с антигенами RLV : в образцах Л 8,10,14 - реакция в области рЗО RLV.

б) ИБ'с антигенами FelV сыворотки пациента О-ва: 1-У - образцы сывороток, взятые в динамике в течение 4,5 лат наблюдения; 1,2,3 - разведения сыворотки 1/50, 1/250. 1/1000 соответственно.

i

К?

При попытке сопоставления данных КБ к ВИЧ-1 и ИБ с антигенами вирусов С-типа не удалось выявить корреляции между спектром анти-ВИЧ-интител и наличием антител к дад-протеинам названных вирусов. В некоторых случаях титр выявленных антител к БеВ/ и 1?И' оказался достаточно высоким(>1/1000 и Г/500 у двух пациентов соответственно).

При исследовании сывороток от 31 серонегативных в отношения ВИЧ допоров в ИБ с антигенами вирусов С-типа обнаружено, что 13 из них (42$) реагировали с дад-протеянами К1У. 21 сыворотка из 31 была также исследована в ИБ с антигенами згу и РеВ/, Суммарная роак-тивность с антигенами всех трех вирусов составила 66,6$ (14/21). Таким образом, названные антитела обнаруживались в исследованных грушах приблизительно с одинаковой частотой. Наиболее часто отмечалась реакция с дад-прогеином.; ШУрЗО. Высокий уровень антител, взаимодействующих с антигенами этого вируса, в популяция людей был выявлен в настоящей исследовании впервые. '

' Обсудцаешй феномен реактивности с дад-белками различных рет-ровирусов моясет быть предположительно связан с нескольккш причинами: I) экзогенная инфекция данными вирусами; 2) экспрессия эндогенных вирусных последовательностей с появлением соответствующих антигенов на клеточной поверхности; 3) инфекция другим, еще не идентифицированным типом рэтровирусов, который обладает общими антигенными детерминантами в области да^-протеинов о уже описанными типам. Последние два предположения представляются наиболее вероятными. С другой стороны, возможной причиной высокой частоты реакций в ИБ с антигенами названных вирусов в общей, популяции можят явиться так называемая молекулярная мимикрия, свойственная различным вирусным щюгешшм. В раде работ было показано повышенное содержание антл-С-ретровярусных антител при аутоиммуканх заболева- ■ шшх у человека, а также обсуддается вопрос об участки экзогенных или эндогенных ретровкрусов в патогенезе этих заболеваний. Пере-гфестная реактивность антител с анткгвнаш вирусов и некоторыми нормальными структурами, по-видимому, является одним из патогенетических звеньев аутоиммунных заболеваний и синдромов.

Таким образом, в результате проведенного наш наблюдения лиц о. нЙБ к ВИЧ в динамика и обследования их о применением различных подходов ш не получили доказательств ВйЧ-инфенцлж в ч?ой гру"1е лиц. Анализ данных ИБ в этой группе и у БШ-инфицировааных пациентов позволяет нам согласиться с уточненными критериями лнтер-претации результатов Ж с антигенами ВИЧ 0»ееИ.у ер1Л,йвпогд,19?о) как наиболее специфическими и адекватный* цата выявления ВИЧ-кн-

Клиническая и серологическая характеристика доноров с неопределенными результатами в иммунойдоттинге*.

Таблица

Донор,

возраст, срок наблюдения

Клиническая характеристика

Иммунологические показатели

Данные ИБ к ВИЧ-1 в динамике

Данные ИБ с антигенами ретровирусов С-типа_

Р-в, 30 лет, 4,5 года

Хронический тонзиллит, дисбактери-оз кишечника, аллергический дерматит.

В пределах нормы

1) р24 gp4I р55

2) р15 р24 р55

3) р24 р55 (титр анти-р24

1/1000)

рЗО HLV (титр 1/500)

П

О-в, 60 лет, 3,5 года

Хроническая лучевая CD4, сов -болезнь (легкая тябилыю

$юрма), дисбактериоз кишечника, какдида- вшивым, носительство с сенси- Т4/Т8 - в билззацией, лиифоаде- пределах нопатия. нормы

1) pI7 gp4I р55

2) pi? р24 p3I gp4I р55

3) р17 р24 р31 р55 (титр анти-р17

1/5000)

рЗО PeLV (тигр>1/1ООО)

х - у данных доноров в электронной микроскопии периферических клеток крови в межклеточном пространстве выявлены вирусоподобные частицы с морфологией ретровирусов.

филированных пациентов. Однако, определенная группа пациентов с нИБ, по нашему мнению, представляет особый интерес и требует дальнейшего клинического и вирусологического изучения. Эта группа характеризуется интенсивной реакцией в ИБ а области gag-белков ВИЧ р24 или р17 в сочетании с реакцией d области других белков ВИЧ. Четверо пациентов из этой группы наблюдались нами в течение времени от 2 до 5 лет. На протяжении всего времени наблюдения картшт ИБ оставалась неопределенной. Трое из этих пациентов обследовались на наличие ВИЧ-инфекции как потенциальные доноры крови, I - во вро-мя беременности. Нами были исследованы периферические клетки крови этих пациентов в электронно;! шкроскопки и в межклеточном пространстве' у двух из них обнаружены частицы с морфологией ротровирусов. №'ерозГОгическая я клиническая характеристика этих пациентов приведет & иа&ище 7). Подученный нами результат, хотя и является в деста-ро'Ш'б^ степени неожиданным, однако, согласуется с наблюдениям? ЯруЯЕК аиторов (C.J.o'lIaxa, J.Groopman, 1988), которым в злвк-трошю® ьйПфоскогает клеток лимфоузлов удалось обнаружить сходные частицы1 у божййых с генерализованной лимфоадепопатией другой, но связанной: с ВИЧ> этиологии. Калг следует лз представленных данных, предположений с более широком спектре ретровирусных инфекций у человека, чей это известно в настоящее время, является вполне обос-йовшплд! и требует развития исследований в этом направлении. Лица <2 неопределенными результатами ИБ к ВИЧ являются одной из групп, йфежувавлявдей особый интерес, и может, слузгать ксточнлкогл новой йЕфоркации.

ВЫВОДЫ.

1. В процессе массового двухэгапного серологического С1фиши1га на наличие ВИЧ-инфекции систематически выявляются лида-, имеющие неопределенные результаты в подгверадащем тесто шмуноблоттинга. Указанные результаты выявляются как у лиц, имеющих отношение к группа« риска по ВИЧ-пифекцшт, так я у лиц низкого риска инфицирования.

2. Прп клиническом обследовании лиц с нИБ у 98$ пациентов этой группа выявлена заболевания, преимущественно инфекционной этиологии, способные явиться причиной лолкопозлгивнш: реакций при серологическом доследования.

3. В процессе пролонгированного наблюдения и обследовяния лиц з нИБ к ВИЧ-1 низкого риска инфицирования не получено данных, свиде-тельствущих о наличии ВИЧ-инфекции в этой группе. Подтверждена максимальная адекватность критериев, требуицих обязательного при-

сутотвия в ИБ антител к высокомолекулярным оболочечным гликопроте-инаы ВИЧ .для корректной постановки диагноза ВИЧ-инфекция.

4. Лица с нИВ отличаются от общей серонегативной в отношении ВИЧ популяции по уровню гафацированности и активности персистярующюс вирусных инфекций (ЩВ, ВГВ), что, с учетом ролл указанных вирусов в патогенезе иммуиодефицитов, заставляет рассматривать эту группу лиц в качестве своеобразной "клинической" группы риска, гребувдей дополнительного обследования.

5. Лица с неопределенными результатами серологического исследования на наличие ВИЧ-инфекции должны безусловно исключаться из числа потенциальных доноров крови и других биологических материалов.

6. Группа лиц с нИБ, характеризующаяся стабильным выявлением в ИБ антител к ^а<д-протеянам ВИЧ в высоком тигре, в сочетании о антителами к другим антигенам ВИЧ, представляет особый научный интерес в плане выяснения природы этих реакций и расширения спектра охарактеризованных ретровирусных инфекций у человека.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАНИЙ ПО ТШ ДИССЕРТАЦИИ.

1. Серопозктивность к ВИЧ при исследования доноров крови. Р.М.Хаитов, А.Л.Лиознер, Л.П.Трубчешшова, Б.В.Шшегин, Н.А.Хабахпашева, А.Н. Бузина, A.B. Симонова, Н.Ф.Трафильева, М.Е.Ищвико, М.В.Глущенко. Иммунология, 1990, № 3, стр. 8-10.

2. Исследование сююроток, положительных и сомнительных в отношении вируса иммунодефицита человека, на наличие HTlV-I-спеплфических антител. Р.М.Хаитов, Л.ПДрубченянова, Л.С.Яковлева, М.В.Глущенко, Н.А.Хабахпашева, О.А.Павлиш, Н.Б.Сегаота, В.Э.Гурцевич. Вопросы вирусологии, 1991, № 5, стр. 364-366.

3. Обнаружение HIV-подобных структур у лиц с неопределенными результатами в икмуноблоте. Р.М.Хаитов, Г.Н.Чувяров, Л.П.Трубченинова, Б.В.Шшегин, Н.А.Хабахпашева, М.Е.Ищеико, М.В.Глущенко, Л.С.Яковлева, Е.В.Ефремова, С.А.Макарова. Иммунология, 1990, № 4, стр.21-23.

4. Повышенный уровень антител к цитомегаловирусу в сыворотках с неопределенными результатами в иммуноблоттянге при определении антител к ввдгсу иммунодефицита человека. Р.М.Хаитов, Л.П.Трубченинова, М.В.Глущенко, Н.А.Хабахпашева, Н.В.Ульянова, М.Е.Ищенко, В.Д.Прокопенко. Иммунология, 1992, Л 4, стр. В-Ю.

5. Персистируадие вирусы в серодиагностике ВИЧ-инфекции. Р.М.Хаитов, М.В.Глущенко, Л.П.Трубчегагаова. Вестник РАМН, 1992, » 9-Ю, с.59-63.

6. Соотношение уровня антител к прогностическим белкам ВИЧ-1 при титровании в юдауноблоте сывороток ВИЧ-инфицированных лиц. P.M.

Хаитов, .Л.П.Трубчешшова, Е.В.Врре?.юва, М.В.Глущенко, М.Е.Кщенко, В.Д.Прокопенко. Иммунология, 1992, № 5, отр.11-14.

7. HlV-liks otructure detection Jji people with Indeterminate immu-noblotting results. R.Khaitov, G.Cbuvirov, L.Trubcheninova, B.Pine-gin, N.Khabakhpasheva, M.Ishchenko, M.Gluohchenko, L.Yakovleva, E.Efremova, S.Makarova. Journal oí AID3, 1991, v.4, p.4.44-446.

8. Identification of antibodies to norae mammalian oncogenic viruaee p30 protein in the oara of. individúalo with, indeterminate result."!

on HIV-1 Western blot. I.Trubchoninova, A.Buntflevich, M.Glushchenko, E.Efremova, R.Khaitov. 8 Intern. Congreaa of Immunology, Budapest, August 23-23, 1992, Aba tracts IV-63, N 46, p.397.

9. Persistent viruses in serological diagAooio human immunodeficiency vixun infection. M.Glushchenko, L.Trubcheninova, V.Prokopenko, R.Khaitov. The sarao, N 12, p.391.

10. Ultraatructural and functional characteristics of blood cells in patients with HlV-infection. G.Chuvirov, L.Trubcheninova, A.Bo-riaova, M.Gluahclienico, R.Khaitov. VIII Intern. Conference on AIDS/ III STD Werld Congxena, Amsterdam, July 12-24j 1992, Abo tracts PuB 7454, v.3, p.124.