Автореферат и диссертация по медицине (14.00.01) на тему:Особенности структурно-функциональных изменений эритроцитарных мембран при гемолитической болезни плодов и новорожденных

Министерство Здравоохранения РФ Российский государственный медицинский университет

На правах рукописи

КАЛЛА ЕВА Аида Хайрутдиновна особенности

структурно-функциональных

изменений эритроцитарньг мембран при гемолитической г езни плодов и новорож

14.00.01 —Акушерство и гинекология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

• / . Москва—1994

Работа выполнена в Российском государственном медицинском университете

Научный руководитель:

Академик РАМН, профессор Г. М. Савельева

Научные консультанты:

Доктор медицинских наук, профессор О. А. Азизова,

Доктор медицинских наук, профессор В. П. Чехонин

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор В. М. Сидельникова,

Доктор медицинских наук, профессор Г. В. Яцык

Ведущее учреждение:

Московский областной научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии.

Защита диссертации состоится «_»_1994 г.

на заседании специализированного ученого совета (К 084.014.03) Российского государственного медицинского университета (117437, Москва, ул. Островитянова, д. 1).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Российского государственного медицинского университета.

Автореферат разослан «_»_1994 г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат медицинских наук, доцент

Л. В. САПЕЛКИНА

Актуальность пооблемы. ^а последние десятайепя' »отсосы патогенеза, клчнччи, диагностики, • лечения и пг>о¿'/л ikt 1-ки гемолитическое болезни новорожденных, обусловлеюш'-; резус-конфликтом мечду матепью -и шюдом, изучено ноотатоi-но по пробно. Более того, существенные достижения в ofvnw терапии гемолитической болезни привели к уветнч^.чию ',ч.та--живания. детей с это.ч п.атологяе.й /¿ерсианинов -Я.и, ,Оидечыш-ков^а В.Ii.,1975, Гуревич И.О., 1978, Дйвазорова А.О. и соавт., 1980, Алимова Х.Р.,1930,1леу А.Г..Рахимбевдиева r.„l.,19o.J,

Mwiü К;, (1 979. /УЯ/з,ХХ ¡Wci MVj79< foU /\

1982/.

■1'ем не менее, гемолитическая болезнь, плодов л поворот-#

ценных и сегодня продолжает оставаться одам из существенных факторов перинатальной смертности, появления на свет тяжело больных детей, часть, из которых на ппотятени) :jco°i кизни страдает от множества функциональных нарутени;./ ^-адалин JI.Q. и соавт.,1973, Каличснюк Э.С. и соавт. ,1975, ¿а с-Заеэа Л.Г. ,1977,Свягрис. A.iu.,Ьа1итавиче,не' Д.А.,1 ¿81 ..Лтюн-так И.Н, и соавх. ,1982, Гсфлан A.A., Кеяжебаева Л.К.,1984, bttdowik^-Z. ,1972,UirKJ. i.a.. ,197б.КлоЦ'Дг.0,

1984/. ' ■ .

притонами этого, по-видимому, являются .недостаточно 1зученн,ые патогенетические аспекты данного заболевания 1арялу со- сложностями рациональноЧ терапии выявленных из-«енений. ' .

Особое значение в развитии патологических ¡тпоцесоои фи ГБН, '.одним из основных механизмов которой является 'емолиз эригроцитов, поднадпежит,' по ¡лнениэт гада ассаедоза-■елей, nopjf о-1ункаиональног.1у состоят,:.« кчеточчшс "ечбран , 1питп0.цчт0в /Аврат!1нскил o.ü., 1 ¿d7,. ivhf. o.a., u'o9, :ова J.3.,1 992 /.

— 2 -

>ст ¡почте но, что деструктивные процессы в эритроцитах • 1 |)'я:пт:дг>н"ю. степени обусловлены интенсификацией перекис" ■ 1 'о ок/к^лгл мгртдов/ ПОЛ / при целом ряде заболеваний как ." "'о^'шу.т^к и уяэтейДозлов Ю.П., 1975,Кондакова Я.Д.,1980, м! 'пкспа К.Д.. 1982,ЕородинА.Б.,Верещагина а.М.,1984ЛсМщ4

ПВ. ,1977,Кущ И.Б.,1988,Гень С*А.,1989,Павлова Т.Д., '! 'Л•'■',/, что чоппотмо исследователям рассматривать ПОЛ как уни-

«те>:л^'зм развития патологических процессов в ор-; -тепопек^ на молекулярном уровне.

СчП'..3пелен ;ое кодичество работ/Азратинский О.И. ,1987,Банкса , 1990,Гень С,А.,1989/по.священо изучению интенсивнос-тн г-мснчтлческой бояезнч новорожденных;, при этом све-=!••)[ об читкоксидянтноП актщностч организма представляют-:.;'Когеот»яов.1Н:1ши.

Сложность ппоблемы заключается в том,что билирубин,по дан-. п,.'1 гада чсочодозателей,в условиях гипоксии'проявляет себя ¡•.. породни!"' ан^юксидонт.а ПОЛ рассматривается кач один из ловнос ядзптационныа механизмов организма,обеспечивающих нор -

I *

■'•:г,нор ■■ унч г*ояпюванле систем жизнедеятельности/ Банкова З.З., ¡¡.'.'О, Бя^гев.М.И; и соавт., 1985-/,

О этчх поачцяй неясными остается вопросы о .взаимосвязи !'/-поубннч и процессов ЛОЛ - АОА в механизмах гемолиза брит--"'окточ, .чо кс»н патогенез пооат.ения ЦНС щк отностечьно ь' к.>ч70?тт)П!иях билирубина . Следует отчатять, что боль-"•г'нсгю "ссдее.ователей связывазд поражение мозтовь^с структур ¡:пл рог/о'Г'ттичпоко? болезни плодов и новорожденных с навугаениеи гионтлчочооти гематб-энцефатаческого барьера. О учетов. этого, • стеле кнш? уоовня бидйрубяна,' изучать ггооницаемость г- ^то-экцй\а5чческого барьера по содетганив в периферической т: чдчдоп ч ноаокп денных- нейроспецяЗических белков мозга ■ акг'?льну^ ндучно-практяческуэ задачу. ;

Очевидце, что выявление в пери]ерическол квопи но .ооолзпн.

ческих белк'оэ итэет важную роль в понимании патошчоиа пю->

ражения ШС при Г£ плодов и новорожденных, свидетельств/и, с однрй стороны, о повышении проницаемости ГУБ, а с доуго; отмяв, об аутоиммунном поражении мозга, Исследования попоеноIV рода при различнол патологии плодов и нозоротаеичих ■ гоочоч.ч'мя

лишь с самого недавнего воемени и дали уне весьма !«»и>чх?с»1.й ■ 1 ' ^

результаты/¿1авлоза| Т.А., 1992, Сичинава Д-.Г., 1 1Ш/. Лш т;,-дов и новорожденных определение нейтоспеци! ическт овгкин и периферической крови не проводились,

' Данная работа и бита стиму тирована необходимость (1 »и ь тент новых патогенетических аспектов развития гемолитическом болезни плодов и я.оворокденных, а также оптимизации про водимой терапии.

Цель .исследования : совершенствование методов тетппп гемолитической болезни новорожденных.

В соответствии с целью при проведении.работы были поставлены следующие задачи:

1.Изучить показатели структурно-функциональных сеочств клеточных мембран эритроцитов у плодов и новорожденных с ГБ различной степени тяжести.

2.Остановит взаимосвязь между концентрацией билирубина и структурно-функциональными авойствамя эритродитарнь'Х меморан при гемолитической болезни у плодов и новорожденных в раннем неонатадьном периоде,'.

3.Оценить Показатели содержания нейроспедафтческих белков мозга в периферической крови плодов с различной степенью :тяй жести ГБ и их взаимосвязь с показателями,' 'характеризующими структурно-функциональные свойства эритрэцитарных мембран. ' 4,Исследовать а Динамке уровень концентрации нечооспец чч-ческих белков мозга у новорозденнцх с гемолитическое ботчшьп

- 4 _

•'.43 ггпо" ОТОЛ'?;!!-' тяжести.

-1; .ч'З;:тг, читте коиадексяо.- терапии ГБ с включением в нее

:-ч .ччреччвчни'" кпоэи на интенсивность процессов ДОЛ-АОА

)

нч /.о»;ц|,чтг.пц"ию не*вэспеци). песках бечков мозга.з пери^ери-ч< т'о 1 ксоч. ••».'■чг^ясгт втшяие антиоксидэнтных препапатов на интенсив-'по 1'ь ИДО-ЛОЛ "[ котглттгачич билирубина з крови у новорожден-

г.-»юччтячсско'1 бочеани. , I-и-';я на »тэяа : псовые устаноз!вяо, что интенсивность пере-кчоиог'о о:: !с ю'-'т ляпчдов и ачтиоксчдантная активность у гого-- »ч и ь'очгро'т^вииыч. ппи гемолитической .бочез.чи зазискт от сте-пчгг! пуест-, .заболевания, гчааным обгазом,- от степени гипер-Здаатено, что ГБ бичируоин угнетает ПОЛ за счет токс:)чпского пе'Лствдя на метаболизм. ^а основании определения ч леги'Готчтско?, крози плодов и новорокдекккх неГроспеод^и-' -ч^снсх бр1ког) мозга дач'е при легком течение заболевания пока--з.ч.чя возможность аутоиммунного потжения мозга при относительно »е-и-соких степенях гипербилиоубинемии. Показано вчияние эамен-пи\ крови на угючень интенсивности перекирного

оглоюнчя чипидов,'анткокяслэтелькол активности крови и не^гро-ппен:'! Септов мозга.

Лг.оя';течная оценка эффективности препаратов с аятиоксидант-■ тI—т д« -г.т-' <5М шипи то необходимость даг^епенц'.'рованного подг у.пчп к ччзнччрнию этих препаратов при гб различной степени

ТЯ.ГСТИ.

¿р-нсгтческая значимость работы: рекомендовано использование плпч^еггоэ солертаняя продуктов ПОЛ - АОА и Н(Ж в качестве л-гктчтлтьккх критешев тяжести состояния пол ГБ у детей я глч'.'й'л ноонатя.тьмоч пешоде. -Разработана тэационачьная схема оостчрчпя процессов 110Л-А0А в динамике Гъ. ¿'екомендо-;г.5!1, ^.пп^прупаи аитчоко'тсач'тнан терапи«? с учетом'особен-

- b -

ностей влияния антиокяслите льн ьх препаратов но почала?« i:i UiM-

АОА гтри различных степенях тяжести'ГБ у детей и паннем неон i-■ . ' 1 ' тальном периоде-.

лПиобация работы: результаты .исследований долокены 1 .На. .совместное научно-щштчческо.й конференции к.и едри акужм от ва и гинекологии педиатрического факультета fiw им.Н,Л.пипо-гова и врачей родильного дома №23 г.>»Ьскзи. 2.На.научно-практической конференции кафе-цры акушерства и гинекологии Дагестанского Государственного медицинского института -и врачйй родвбъедин.ения' №-г.^хачкалк. . внедрение результатов .: результаты исследования исгккьнултся в практике отделения новорожденных родильного дома РЗ' г.^оскш:, в педагогическом процессе кафедры акушерства'и гинекологии' педиатрического факультета РГлУ, в поактйке родитьного дома г, ¿Махачкалы..

публикации: по теме диссеотации опубликовано 2 научные работы в центральных медицинских журналах и одна - в региональном сборнике научных.статей по проблемам перинаталогии, ибъем и Структура диссертация: диссертация изложена на страницах мани.кописиого текста и состоит иэ введения, обзора литературы, трех глав собственных,исследований я обсуждения, выводов, практических рекомендаций. Работа.иллюстрирована таблицам».и . чисунками. Список лД'ературы вклотаеи

источникрв отечественных и зарубечсных авторов. Объем материала й характеристика методов исследования: работа выполнядась, на; кафедре акушерства и гинекологии педиатрического факультета, РЬ!У т.Я, И. Лирогова/зав, « академик РАД1, профессор Г.М.Саяёльеза / на базе родильного дома #23 г.-'.1ос:пш /глав.врач - Û.i3. дрснова/ а лаборатории, осноп патологии клетки /зав., -¡пшф'ессор 0. А.Азпзопа/ НЖ ЙСМ / директор - академик РАМЦ, профессор k-.-'l.JIony.f-ik/, в лаборатории иммунохимия /за>з.~

- в -

ц.ч.п. Чг^ончн/ НИИ обще it и судебной психиатрии им.В.Л,. "•M-frroro /л-:пастор - академик РА.»И, ткх|ессор С,Г.»Ьрозов/. л-л. '{юстявденных задач было обследовано 123 плодов

»"> »• wjcHKiix с желтуио-анемаческо:! ч отечной формами геио-

' ■ ■ г < "око:, болезни. Соответственно степени тяжести заболевания

(

"Vii:. !« "о'-з'пю'кдчнные быта разделены на 4'группн:

I vrynna - 37 п "годов и новорожденных с легким течением ■ <■> -гту'»'o~-atiMn^ec::oi' .."орадц ГБ,

II г-:; una -• 41 плоцоз и новоро жденных со сведиетяяелым "■'•••¡г'П' -»Йттушо-аплмйческоЛ Зотк ГБ. > • *

¡11 гпуппа _ Зй пяояоэ ичнового-кленных с тяжелы--: течением • itjч .>r*h46cw0.i 'iopvH Г£.

V 1\\7тра - ,7 mono я и новорожденных с отечно '.! г.;ошой ГБ. . t;;>. о'-пл-пслг'И степени тяжести о д'но временно с основными сиип-тг.-'ч-ч чеачи&и /анемия., гипербичацубинемия, яелтушнк'2 .:r. i-ii-.c.V y:inv ватиоь : оптическая плотность билиузубг/нг! в около-, '•^ппг; rtoc-чх, канны? ультразвукового обследоаания в динамике сор ''.'-'.'¡¡"ости, признаки недоношенности. Юкчико-лабораторные г,.г.1Гг-пЛГП-.-ча,ш: пъйчадеяие общего анализа крови, мочи, и-., .,r.;i'.'c у резня г'ипиоубкна в пупоччнноЯ крова до первого 'V..-K4 /к:млк? рассматривались как' плодовые/ И'в дчнамчке ранит) .¡^о ртлидаого периода до 5-х суток г.-изни,' '^иксярЬчадбсь ;!f>- .'тсзпиости кояшкх покровов, темпы .ее нарастания, v •"; '-'..-иьной латенсязноств, подсчитывало» почасовой -с," oyer-:!«. i ■ ''

-? t7-урдо-.. ункциональные с во.' ства аритроциташнх мембран обпог: тнсъ на оснозччии изучения уровня пеоянггеиого окисле-|гт r.j.f-Ktiij и .эдтчоа4олкте?ы}о8 аттйности крова у плодов и в ..-¡•с-' »»онзтгийюн пешоде. Об у со вне первичных и вторичных lit.il суд;:л:-г. по «оицвятрйцтг ТБК-акггвных продуктов, о ■)•.■>•;•.;.:««: сп?.л'!.о'готскетричесг::{ /спектра{отснетр М-? $ир.щ

и ffcc&plütu- »t США/»' этом выделялись следу«;«з ¿как . >и:

гидроперекиси /ГЦ/ и малоновнй дяальдегид Д1ДА/. Из нок-г:< i-• - \ ' .

теле8 антиокислительной сисгемк крови изучались coiiep^ «не ца~ рулоплазмяна /Цп/ и трансферрина /Тр/ в сыворотке кгювч методом электронного парамагнитного резонанса, определили соогно- . шение Цц/Гф. .

Для оценки значимости нарушения структуоно-^ушщиона гьного состояния.эритроциташых мембтак в развитии гемолчтнческо.- болезни и ее ослочснений на основании определения в пер:цешческо:: крови нейроспецифичоских белков мозга изучалось изгюление проницаемости гемато-энцефалического барьера и возможность аутоиммунного поражения мозга. Лри этом методом иммуно; ерментного анализа э периферической крови , плодов и новорожденных определялись такие мозговые антигены, ..как:с/^-гликопротеид и глио-фибриллярный кислы:! протеин я&ар /. Изучаемые показа-

тели в раннем неонатальном периоде определялись на 1.3,о сутки жи'зни новоронщенных, *£онтро'лем для сравнения служит! данные, полученные 'Г.А. валовой /1992/ у здоровых плодов и новорожденных. .;'.',

результаты ясаадовшя:

Цри изучении структурно-функционального состояния эрятро-цитарных мембран у плодов с желтувдо-анемической .'íotmo.í ГЬ установлено, что при. легком течении заболевания содержание продуктов ПСИ в сыворотке крови превышало их значение у здо- -роэых плодов д 1,5-1,9 раза /табл.1/. .Довышение содержания . продуктов свидетельствующее об интенсификации этого процесса у плодов о легким течением болезни, обнаруживалось • также и при анализе изучаемых показателей эритроцитов. Содержание как первичных, так и вторичных продуктов ПОI в эритроцитах превосходило таковое у здоровых плодов.а 1,2-1,3 раза.

i-- i rot.e обуспол тайности tftmmeij активации ПОЛ в сыворотке

,!'í i'i cm^'r'a"' с эритроцитами, необходимо иметь s вину ¡i-."у-гь'гл п. !тсс.1лчотадчя б.В.Тдботлной /1990/, свидететьствукь ' v.t о том, что я условиях гипе'пбплипубйнемии имеет место, вьгоа-

'•ч«и'. :i юбаланз -¡осфолкпндов, как основного субстрата ПОД, в

i- ' [11тлх и плазме.

-орд увеличения степени тяжести заболевания нанялась ;:;п"!1с;-.ност)г перекисного окисления липидоа.

чюдоп'со срэялетяжолш течением *елтунто-анелгической •-огг'ь: Г- показатели содержания первичных продуктов ПОЛ в сыво-крова достоверно не отличались от таковых при легком те-'pü'hi + 3,1 отн.ед. против 19,8 ¿ 0,7 отн.ед./, в то

гг'.мл, как содержание втооичннх продуктов ЯШ было нижё; чем .в П1)?дь"1,у-11е" группе в 1,2 раза. При, этом в эритроцитах происхо-, т. то дооговягмгое снижение /р^0,01/, как первичных, так и втог .

чроцуктоз ЛОЛ по Сравнению с аналогичными параметрами, V h то по ч с лапсш течением заболевания /TÎÏ-TTg.ô + отн.ед. ru;o7'iB 247, ô + 7,4 отн.ед., ; МДА«$9,3 + 7,4 отн.ед. против ïo/j -3,5 отн.ед./., . . ..

•/клэпинке изменения свидетельствуй о снижении активности гг'о'ссоот ПОЛ у плодов с гемолитическо-Л болезнью' при сгедне-т; ''гю" течении заболевания. Ç'6 атом можно-судить не только :ïd сч.гтнто концентрация продуктов ЯйИ в эритроцитах, но й по -пзч"-и' '3 стопечи их содержания в сывбвотке /сндаеаие в больна i стоп?«'.« вготичных продуктов, чей пеозичп'ых /, что сви-' Л;.! го тГ)0 г чует о нарушении метаболизма гидроперекиси и о с ниже-чин и п«зультате этого синтеза -АНА /т.е. скорости ПОЛ/,-

lirw тяжелом течении 'далтушно-ачемическоп ^ормк гемолити- .

'fsko': бо тэянч .содержание продуктов ок'тбденяя у обследуемых

i . . •чопо* 'сяк п ся?орогке, так и, в эритроцитах били знаете явно

- У -

¡гаже показателей, характерных да>> пчоцо.в с леиг'ш и сх'смм гяталым течением /р < 0,01, табл.1/.

I

Состояние процессов ЛОЛ у плодов о отечно* осмол л;!7 1-теской болезни также харэктернзоваяось низко / иитенсгзчоогь'о. Считывая поль процессов перекисного окисления ллготдов в модифт даи.липидного бгслоя плазматических, мембран /лчзчнм ii.fi., 19с13, ^¡¿Ь £. ,1934,1987 и др./ мо-кно думать, что угног.уше .Ш относительно■его стационзшо.4 скорости, ячляется одно - из цр'ч -и зтарения мембран и гибели клеток.

Что же касается первошзичины угнетения 'ЮЛ у больных с Гь, го данные об этом относятся, в основном, к раз сяду предтло'.'м-гельных. Лрн этом, наиболее заслуживавши внимания ппэдстач -1яются показанные в ряде .исследований антиоксидантные с •ад Яства 5илирубина /Блюгео'^.И, и соавт., 1985,' , >

1978/, Ирч проведении корреляционного анализа ме;*цу покчзате-хями, характеризующие интенсивность.ПОЛ и концентпац-ш онлпру-

5ина.бшха выявлена высокая обратная корреляция /Г = - -

С точки зрения возможной причины повышения уровня ¡ЮЛ у плотов при легком течении заболевания, заслуживав внимания работы Ниапоуу /1984/, свидетельствующие об образовании актн?-шх форм кислорода, являющихся инициаторами ИОЛ, в результате трушения взаимоотношений между иммунной Системой и микросо-тльным окислением при иммуноконфликтных ситуациях, •Учитывал, ио в основе гемолитической болезни леяит изоиммунизацчя плода штителамч. матери, эти данные представляют■определенный т-ререс, 3 то «се время, снижение интенсивности ПОЛ по мере ионы-пения концентрации билирубина и нарастания тяжести клинических 1роявленик ГБ, свидетельствуют о глубоких нарушениях гомео-г ¡таза, извращающих естественные адаптивно-компенсаторные р-">а!с— (ии у плодов, начиная со. спедпвтя^едо^ степени яелтучмо-пнои;!-

Табл. ]

. Ггтпиа Снворотка хровх Эритроциты

ГП ш ГП М'ДА

Здоровые 15.0 ±1.2 22.1 ±2.0 191-6 ±"4.5 56.6 + 4.0

I 19.8 ±0.7 42.6 ±1.8 247-5 ±7.4 75.9 ±3.5

II 22.0 ±3.1 17.2 ±3.0 175.б±7.в 49.3 ±7.4

Ш 13.7 ±1.2 15^4 ±2.7 136-3 ±1.0 41.6 ±5.5

IV 12.1 ±0.0 14л±0.9 бол ±3.7 21.5 ±4.8

Уровдо ПОЯ ( В отв. ЕД.1 в ион оводов с гшдаишо* бошнм

отв. ад

НШВ»/|

I группа II типа Шгртши IV группа □ бкшуби а ГП о ш

Содшше продуктов ШШ-ГПI ИДА я показал» концЕвтрации бшртбгаа св сцворотхс кров* вводов.

ческой '{-осмы.

Изучен ie антиокидлтеальнс-1 актизностя кговя.у - itj/'jjh <:.• i влияние и взаимосвязь с ¡гсоцессами, ЛОЛ в живом орган i3M-\in.v~ вставляло особый интерес вдачио/. с 'тгуация. Пр-, легком т>п-и ; пооисходило поижнхе антиокислительной активности кров.» зн счет системы церулоояазчин-т^анс«*ороян:об этом овнцетрлмггл;'-ет как повышение уровня Дп/с 14,9+7,1отн.ед. до -jo,0Н1 ,-ю.п. ' ед./.так и коз'; 1 нциента Цц/Тр.которк"! в 5,8 раза прпвос-ол;. i

А л

показатели у здововых плодов.Следует отметить,чго пов^'чс.чис-уровня Дп в ответ на интенсификацию 11СЛ является наибол* > универсальном реак-диел организиа/Козлов А.С.,1985/.

При среднетяяелом и тяжелом течении заболевания ог.'ечено достоверное снижение Дп по сравнению с таковым у плоцсж лги легком течении 'елтушно-анемлческой <|ормы/17,5+4,1 и 19,4+ 5,6 отн.ед. соответственно/. 3 основном, за счет уменьшена/! концентрации Цп при указанных степенях тяжести ГЕ пшисхоцило падение ан "мокс"дан гной активности, о чем свидетельствовало снижение показателей, коэффициента Дп/Тр в 2-2,5раза.

Наиболее низкие показатели антиоксидантно': активности, судяг почвеличинам Цп/Тр,били отмечены у плодов с отечной дор, мои ГБ/О,106+0,06/. ■ •Уменьшение содержания Цп, начиная со сре«нетяжелого течения заболевшая связано, яо-аддимому, с угнетением белокенн*-тетическол пункцией печени при гемолитическом болезни /Лрам-пян и др,, Однако, возможен и доугоЧ г/.г-ха-низм сникения антиокмелитеяьнол активности. Известно, что при гемолизе эритроцитов в избытке -образуются ионы железа, на окисление которого расходуется церулоплазмин, язлятаи.-ся по своей сути фепоксидазоП. »¡осле окисления железа, апоттанс] еприн, аграрии роль железотраиспоотного белка, захватывает его, теряя при этом анч'вокелдзнтлаэ с во ;стза и ипепптнаегся в транс Гечччн.

«'г со сгч°п »-ачче транс¡пприча пгч это"; возрастает, что • " с-- гчптенч-т> аитиоксчцаитчо-Ч активности,

.) •■сюч'нх ¡'-т-.т^енип стсуктугно-Чункччонатьчых"свойств эрит-.• г» т м-г 1йпач, часто исто аьяуемьу к ах "о.тчль плазматической »«г !>••!'•: ' ^"¡а ^^'мв Ь-.А., Арч^ков А. А, ,1972,1979,. Козлов &.Я., 1,/-";.], -.¡¡у> У.,1979 ;1 др./, иогадо пгелчоловить, что и -в ДРУ-

■ :> 1."*ч ггпо'^йчопят подобные ;;э"енечнл, ведущие к повы-" "1 * 'г \ч:ппа,''оста. подтвержден .чем эт.ого язля'-ттся исследования

'•><;; з пзоч!йРическо!; ктпэи плодов не'',ооспеии4ичес-

ки г-мго « ю:>г-|, обнаруживаемых только поя изменении прони-ч»- ••о.:те гечато-яиче.} тлического барьера.

^е.-зулы чты пгютузценяых исследование по .определению ¡¡СБ ' чг. I гку о т'ПческоЧ болезни свидетельствуют об их присутствии .) с»-»''потке кров! плодов. Нами выявлено, что исследуемые белел 0"0'!*-л»1ись в-черч^ераческол крови у половши плодов уже >гп ^'•гг«'.« течении гемолитической болезни, Дри спеднётячселом го^тя соболечаяяя починенная коччентра'рш^-гликопротеида л г-по' ¿бгттяяного кислого протеина обнаруживалось у всех •! .«'л:» гыно группы.. йачболее высокие значения оггоеделяе-№.■ гоочежи веских белков получено у плодов пря тяжелом ■ ? с-'-болеэ^чия и отечной ¡Коше ГБ;' Обоа'цает на ребя вни-

.;"г-п>'', "гл у птозов выяаченные нпоуиеняя проницаемости Ш> с«'д-т.;т'й?«!ут»р не только о иаоу'ленчи струятурно-'1уикционачь-

«-»о "-гй 'пазч-ат^чеекчх мембтеш, но и, уччтызая специфичное тг-. •'pvn-.cr.Tyx белков длр 4НС предполагает возможность ауто— чю га пэтуенля мозга. Слеяоватедьно,дайныз факторы могут с1?тгть этио^сгяччскчш моментами чооалсений ЦНС на ']оне низких ;: о и: [ г- и г п ч цуг •'; б и л и ру б л на.

й*?г.щу с этт тогззден анализ аналогичных параметров, с,,-л.,•-, -г.)пт,!г1'чйх об изменена угоняя пол-аоа и у иозооокдея- . я,- ч ''''чип неонатазьном периоде. С этой целью изучение

структ,урно-4ункциональны:* особенностей эоитроцитагных мемб- -ран осуществлено в зависимости от варианта проводимой терапии, т.е. оценивалась эф]ективность паяличных методов, составляющих комплекс лечебных мероприятий при ГБ, в том числе и антиокси-дантов. Интенсивная те'оалия, проводимая с момента рождения, вкл'о . чала в себя ингузиончу-о тетпив, фототерапию, у ноаопо»денных со среднетятелым и тяталым течением, а так'ке и отечной '(ормол ГБ - пшведение в зависимости от тяеёстя состояния от одного.до нескольких ззменных перелизачи'! крози. 'кэмимо этого, вводились препараты, шгаяшие на Ферментные системы печени: зиксотан, ¡е-, нобарбитал. 63 новорожденным с ГБ различной степени тяжести в комплекс лечения вводили антиоксидантные препараты: витамин Ё, липоеву''1 кислоту. ,

У но1юро"!шенных с легким течением телтуцно-анемическо:! :)ор-мы ГБ на :;оне проводимой тетпии без ачтиоксидантов в первые 3 суток чизни отмечалась высокая активность ПОЛ. наиболее высокие значения исследуемых параметров соответствовали первым суткам *изнч/ГД-ЗП,5+8,1 , ЧДА-Т02,4+4^4 /и, постепенно снижаясь; достигали нормальных значении на о сутки неоната.ль-ного периода. ^а всех этапах исследования в раннем неонаталь-ном пепиодё жъ.пу показателями, характеризующими интенсивность ПОЛ и концентрацией билирубина выявлена определенная обратная . зависимость./Л = -0,48 /. Максимальные значения концентрации билирубина у новорожденных при легком течении заболезания, которым не вводились антчоксмдантк, соответствовали 3 суткам тзнч ч составляли 180 мАмоль/л.

Антиоксядантная активность у новорожденных с легким течением H9. всех этапах исследования характеризовалась высокими показателями,'о чем свидетельствует повышение коэффициента Uft^fp

та

как по ср^чечитп с. плодами, со зяоровкмч ноаопотденнкии

/1,37 + 0,08 против 1,065'+ 0,051 отн.ед./. проведенный индивидуальный анализ показа'!, что 'наиболее низкие значения Дп/'Гр, прослеживались, несмотря на мадьй разброс величин, у детей с явлениями моого-чункциональноп незрелрсги. Ие исключено, что это явилось следствием .недостаточно.': функциональной активности печени у незрелых и недоношенных детей.

Повышение антиоксидаш ной акти шости у новорожденных-с ■ легким течением желтушно-анемяческо!5 <{ормы параллечьно интен^ си^нкацик ПОЛ согласуется с принятым в настоящее время з общей патологии положением,что воздействия,изменяющие пардалет-, ры какого-либо звена системы ДОЛ-АОА, должны приводить в действие всю сложную регулятотаую систем,в результате чего.и"- ■ тенсивность ПОЛ возвращается на стационарный уроаень/Вурдако-ва В.Б., 1985/.Очевидно,что подобная сбалансированность между процессами ПОЛ и АОА может рассматриваться как следствие высоких, компенсаторных возможностей организма при легком течении заболевания,подтверждением которых стукало значительное улучшение в клиническом состоянии новорожденных на 5 сутки раннего неонатаяьного периода: снижении желтушной окраски кочи,-прекрапении потери первичной массы тела, улучшении неврологической симптоматики.

включение в комплекс лечения 18 новорожденных с легким течением желтушнот-анемической с^ормы препаратов с антиоси-дантным действием оказывало, судя по анализу полученных данных, своеобразный эМект. как на клинические показатели, так и На интенсивность ПОЛ-АОА, Уровень ПОЛ снижался к 3 и э суткам раннего няонатального периода по -сравнения с таковым в первый день 'кизни, при втом у одном трети детей показатели ЛОЛ были Значительно нте их 4изиологических параметров / п сыворотке ■ ' кропи:-ГП _ 7,1'. + отн.ед., .ЛДА - 44,3 + У,1 отн.ед., в эрит ропитах : ГЛ - 734,3 ^ 3,1 отн.ед., :<ЦА - 84,1 + 8,8 отн.ед./, Лсшцгптрчцчл билирубина лгменялюь- в тютазополо-кном на прав- •

ленте я на 3 и ¿ сутки была вине, чем у новопатаанных, котогкм в комплекс тешпии не включали витамин В, составляя 19-1,6 ¿ У,;// и 177,63 +.0,32 мкмоль/л соответственно. ^озмотео з даичоа ситуации имеет место установлении1 факт конкурентной бопьбы за связывание с глпкуроново'; кислотой мечду молекулами билтубина и яруги?™ биологически активными веществами, включая и витамин К, / Шабалов H-FJ ,1982 /. Повышение концентрации билирубина связано, таким образом, с регургигацией непрямого билирубина у птих новорожденных.

Исследования показателей уровня НОЛ и АОА у новорожденных со среднетячелым ие тяжелым течением желтушно-ане.мчческой ■}ор— мы ГБ, которым в комплекс лечения не вводился .витамин поз-'водили выявить значительные изменения исследуемых параметров по сравнении со здоровыми новорожденными и При легком течении заболевания в раннем неонатяльном периоде. При этом было ус-таноаленб, что динамика показателей ЛОЛ-АЛА в значительно.'! степени определялась влиянием ттооэодимкх ЗЖ, а так*« их количеством. Учитывая, что пес вое у подавляющел части новорожденных этих, групп проводилось, в первые часы яиани, исследование утйзня ЛОЛ-АОА так,те проводилось начиная с этого этапа.

Нчт исследования показали, что содержание первичных /Til/ и вторичных /»ША/ продуктов ЛОЛ в сквооотке крови до первого ■ SiU достоверно не отличались от плодовых показателей в.этих пе группах, а эритроцитах изменения уровня ПОЛ чо сравнении с плодами касалось' нить содерханч* первичных продуктов окисления яипидов, превышая значения ГЛ у плодов в 1,¿ раза /п и.Оо/, 3 то те время, концентрация билирубин-в увеличивалась по совв-ненич о такого.! в цутктнчо'! кгови /у плодов/ в 1,4-1,5 раза. '¡овь""ение оодер-ччия первчччых проектов ЛОЛ в эритроцитах при otcvto-'vm дт'намика в со "съ-.ъ-гт -вторичных лзчдето7ьствует

- 1о -

о синении синтеза параллельно по выше ни ч концентрации би-л1'ТО7блна.

Обоаткчя завист.юоть скошсти процессов пеоеокисления от • концентоаци 5 билирубина подтверждается резким подъемом значений Ш и 1'ША / в 1,з-1,4-раза соответственно / после выведения

• в результате операции 311К значительноI) части билирубина *дз сосу дастого русла, что отражается з снижении его концентрации.

Антиоксидантная активность у новорожденных" "до первого ЗЛЯ

менялась, "о сравнению с таково;: у плодов зтих групп, в больше,! *

степени, ¿'ри этом содержание Цп повысилось в раза, а % - снизилось в 1,4 раза. Соответственно этому, вырос коэффициент 4п/Гр, характеризующий антиоксидантну о активность, до 0^,476+* й',012. . Одновременно с повышением активности ПОЛ после £ПК антиокислительные свойства сыворотки крови снижались и соответствовали, судя по значениям 4п/Тр §-.56340 04

последующем, изменения ПОЛ-АОА у новорожденных при средне' тяжелом и тяжелом течении желтушно-анемическо.1 <}ормы ГБ, носили разнонаправленным характер. ,

^ 23 новорожденных со среднетя-келым течением, у 'которых пог-. часовом прирост билирубина после проведения 51К'не превышал его критических значений, уровень ПОЛ в пеовые сутки лизни /не ранее,'чем через 12'часов после вождения/ бал выше по сравнению с таковым у здоровых новорожденных в 1',7—<¿,0 раза. 'Ька-затели ачтяоксидантноп активности после кратковременного снижения, которой имело место сразу «после проведения ЗИК, имели тенченцип к повышению, изменяясь от 0,383 + 0,01 до 1,27 + 0,032 В течение первых суток жизни, гшезосходя значения у здоровых но но по-- денных в 1,2 раза /р < 0,05/. 1! клиническом состоянии

• от.« ноиэро«денных отмечалась положительная динамика и в дальне1":«!* не возникало необходимости в проведении повторных ЫкС.

•'эм»>н<>ния интенсивности 1ВД на 3-а сутки р-ннего неонаталь-

ного периода у детей, которым проводилось лиать одно ЗПК.'сви-де'тельсп позади о высоком уровне переокис пения и антиоксидант-нол,'активности. , " ' • . ■

Хотелось бы отметить, что В.З.Ьанкоза /1 990/ констатируя .аналогичны?! тип изменений П0Л-А0А в норме в здоровом растущем организме в стрессовых ситуациях, отттчвт его признаком напряжения адаптационных механизмов, наполненных на стабильность состава клеточных мечбтан, '

У 23 новорожденных со' среднетялелкм'течением и у всех новорожденных с тяжелым" течением "телтушно-анемическоЛ <)от:>лц ГБ про-.. ведение одного ЗПК не приводило к стабилизации изменений ПОЛ, выявленные непосредственно после операции и уровень пёреокио-ления свидетельствовал об угнетении.процесса к концу первых-началу вторых сутсйс жизни.Снижение интенсивности ПОЛ происходило параллельно значительному почасовому приросту билирубина.При ■ятом у 4 недоношенных детей с тяжелым течением ГБ определялись самые низкие знвчения показателяй, характеризующих уровень ПОЛ и прямая зависимость между показателями ПОЛ и гестационным сроком /А =0,59/,Отсутствие положительно;'} клинической динамики и ывсо-кие значения концентрации' билирубина определял1:" необходимость • проведения повторных 31Ж, 1

Независимо от степени тяжести заболевания,анализ влияния лов-. >торных ЗПК показал,что динамика процессов пероксидации.носила волнообразный характер и находилась в обратной зависимости от концентрации билирубина.Имело знаяение и количество?, проводимых Э11гС; с увеличением кратности проводимых ЗПК происходило йни-тенэте амплитуды колебаний параметров ПОЛ, которое в большей степени определялось у новорожденных, при введении в комплекс

„I I

лечения витамина л,

^ледует^. однако, отменить, что отсутствие достоверной

»

р°зн'гик мезду параметрами ПОЛ у детей на г} он в введения витамина; -3 и без его ■ использования, яп позволяет свйдст°льстзозять

с достаточной опое :еЛенностью. о влиянии витамина Ц. По-видимому, в присутствии высоких концентрации билирубина система ИОЛ-АОА .не способна тонко реагировать на введение антиоксидантных тое-т, паоатов. И ходе исследования, также было выявлено, что наиболее ., высаженное угнетение ПОД происходило при сочетании максимальных . в наших наблюдениях концентраций билирубина и введений витамина К Удобный феномен является, скорее всего , результатом син,ер~" гичного взаимодействия последних, что согласуется с данными литературы

/З/сеЯ'т В'юрбу* оск, №6,) эаэ/.' -

. Таким образом, проведение повторных ЗПК благоприятно влияло на все исследуемые параметры, в том числе и на антиоксидантную . активность, что отражалось в повышении ее показателей по срав-- нении с таковыми после первого ЗПК, полагаем, что повышение антиоксидантной активности после проведения нескольких ВПК -является следствием улучшения функциональнои активности печени, в частности белоксинтетической ее аункции наряду со снижением : гемолиза.

Согласно полученным результатам исследования, нормализация показателей ЙОЛ-АОА у новорожденных, ко'горйм проводилось несколько ЗШС наблюдалась на о сутки чизни только у детей со средне-тяжелым течением заболевания, / детей с тяжелым ..течением хел-тушно-анемической 4армн, несмотря на положительную клиничес-ку« динамику, .параметры ИОЛ-АОА не достигали физиологических значения, характерных для этого этапа наблюдений, .

¿озмотао, что замедленное зосстановченйе механизмов адаптации у новорожденных с тяжелым течением Г£, свидетельствует о значительное истощении компенсаторных, или резёрвнкх возмож-ноете;! во внутриутробном периоде. Данное положение согласуется о результатами наших исследований системы ЛОЛ-АОАу плодов при соответствующей тямести заболевании и покззнзает

определенную прогностическую значимость последней.

^то касается влияния остальных компонентов комплексно Л тератгта гечолдтическо'-; болезни было выявлено, что после ЗЛК наиболее выраженным эф)ектсм на структуоно-:Тункцчоналъные особенности эштооцитарных мембран оказывала фототерапия и ин-фуэйя свежезамороженно" плазмы. 3 плане влияния фототерапия на интенсивность ПОЛ можно отмётить повышение его уровня, в то время, как антиоксядантная активность не изменялась. % считаем, что интенсификация ПОЛ под влиянием фототерапии обусловлена образованием счнглетного кислорода, являющегося одним из основных активаторов ПОЛ, в процессе зотооксигеначии билирубина

/Полачв^. /Ш" ,

При сравнительном анализе показателей ПОЛ-АОА при шйузии сухой /разведенной/ и све?сезаморо,»еи"ой плазмы отмечалось повышение уровня антиоксидачтных" белков после вливания свежезамороженной плазмы.

Таким' образом,, суммируя проведенные исследования, лабораторные И клинические .данные, можно отметить,. что выявленные изменения мочк> квалифицировать как угнетение ПОЛ и АОА пси гемолитической болезни, отпадающее срьвь механизмов адаптации у но-вогожденнюс начиная со соеднетя^елого течения желтугано-ачемичес-' ко?, формы ГБ. , .

Прч анализе результатов исследования у■ новорожденных с отечно« 4 отмой ГБ у 4 из 7 дето?; была выявлена ареактилность ЯОЛ-АОА на ¡тиоводимуо инт^нсизнул тесанию, в том числе и'ЬПК. ¿оочень интенсивности ПОЛ и АОА у этих детей характеризовался чтзезвкча'йо низ ко 9 актчвность"п и монотонностью, не отличаясь достоверно от такового у плодов я то л группы. Глубокое пош-женив на клеточчсм уровне отразилось в тяжести клинического состояния г. смерти этих човоро-дйннкх к концу 2-иачялу 8 суток

'кивни. ^ остальных детей с. отеччоГ: ¡!оР'/ог, заболевания наблюдалась некоторая дака-мка исследуемых .показателей ПОЛ-АОА на протяжении йеовых пяти суток мизни по сравнению с плодовыми показателями. Лщ прозедении оЛК содерадн.ле продуктов ЛОЛ.и аяти-оксчдантная активность незначительно увеличивались после операции, однако стабилизации выявленных чзмененил не происходило.

Следовательно, особенности изменений ЛОД-АОА пои гемо.лити- •

\ 1 ■ '

ческо"! болезни плодов и новоро гДенньх является, возможность развития как активации /при легкое течении/, так и угяетёния, процесса /начиная со средаетячелого течения 'заболевания/.

Разноплановость изменений уровня ЛОЛ-АОА монет обусловливаться рядом причин, ^о-первых, цллг.ед'Уюстьа заболевания во ' -внутриутробном периоде. Лродоткчтетьяое течение предполагает активацио системы ЛОД-АОА на начальных этапах болезни, "как одно из основных адаптационных систем. Лри длительной бтимуляций ЛОД-АОА возможно угнетение процессов за. счет истощения субстрата переокислекия, Ло-втооых, прлчино.; неоднозначных изменений ПОЛ-АОА является показанная в нашх исследованиях влияние высоких концентрация билирубина на интенсивность ЛОД,представляющего собол дополнительный фактор ингибиции процессов переокис- ■ ления. ' . •

Онтогенетическая значимость.изменения активности процессов. ПОЛ в развитии гемолитическо.1 болезни плодов и новорожденных представ льется нам следующим образом - возникает взаимосвязь следующих этиологических факторов: иммунокон^ликт-активацкя ЛОЛ—, гемолиз- гшербилирубянемия-угнетение иОЛ-снитенне модификации липидного бисдоя иембран-нарущение функции- нарушение структуры мембран-гемо,газ. : '., ■

Анализируя исследования по определению нейроснеци^ических ' Селков мозга з периферячосиоЧ крови у новорожденных с ГЬ было

\

отмечено, «то изменение струк рупчоЧу'.гкциона тьчь: « ¿?о 'стч эрятооцятапянх мембран такче как п у птозов о ГЬ, атг.^пось на проницаемости мембранных структур геиято-гчме) аличсокого барьера, Установлено, что неиооспеци.! чческие бетеи "езга определяются в пртщферическоГ' крови новорожденных при всех степенях тячестя заболевания, поя атом их концентрация ггоячо пгочогцио-нальна степени тяжести заболевания. Следует отметить, что пои всех степенях тячесги самые высокие концентрацииоС.,-1М ц гтио.'-'б-

' и

риллярного кислого протеина в натах наблюдениях были выявлен« в первые сутки т-1зни< на Фоне проводимой комптексно 1 тегапнч у новорожденных с легким течение« Г£ происходило снижение чэичеит-■ рации на J сутки жизни, в 4,2 « Jvb саза соответ-

ственно. 'Аз о сутки тизни исследуемые белки не определялись у 2/3 части новорожденных с легкие течением, что свидетелъетчова- -до о восстановлении проницаемости 1ЭБ, у остальных цете'* определялись минимальные значения концентрация белков /о1л-РП-

У' новорожденных со спедчетя^едым и тяжелым течением ГБ, несмотря на.проводимое лечение, на всех этапах исследования в периферической крови выявлены иссдетуемке белки мозга в концент--рациях, значительно превосходящих их уровень у детех с легким течением ГБ. Согласно полученным результатам исследования, наиболее выпаренное влияние на изменения концентрации^-^ и^^ оказывало проведение SiiK-уровень белков после ЗПК снижался по сравнение с таковым до операции в а,4 раза. все'; видимости данное, снижение было обусловлено механическим г-ыведеччем не?роспецифччэских бетаов из кровотока новорожденных.

Следовательно, результаты проведечтх иссле дочачч", с^нде-тельству-лт об актуальности исгюл:>зояаччя показателе,'! сод°г':ч- . ния не^рпсчец-'?"чесччх белков :т°Р'* ¡ерическсл к"очи в. кгггспе дополя ттетьного критерия опечки тя»ес гч сосгор'г-'у: трн-

чих мои Гь, что 'г'ррт суцест :оо зяа^е'чле • дчя' про -о .••-н'*я

- 21 -)

своевременной и адекватной интенсивной терапии данного заболевания. .

ВЫВОДЫ4

1..В патогенезе гемолитической болезни плодов и новорожденных наряду с гемолизом эритроцитов,гемической и тканевой гипоксией, важную роль играет нарушение структурно-функциональных свойстр клеточных мембран.

2.У плодов и новорожденных с ГБ изменение интенсивности ПОЛ-АОА зависят от степени тяжести забодевяния:а/при легком течении жол-тушно-анемической формы происходит интенсификация ПОЛ-АОА; б/ддятсреднетяжелого и тяжелого течения,а также для отечной формы ГБ характерно снижение уровня как Перекисного окисления лили-дов.так и антиоксидантной активности. *

3. Показатели уровня ПОЛ-АОА у новорожденных с ГБ корреллируют

со значениями концентрации бидируби^гпри концентрации билирубин* до 160 мкмоль/л отмечена активация НОЛ-АСА,при значениях .превышав ющих указанное - угнетение 1П$рекискых и антиокислитдльннх про* цессов.

4.Наряду с нарушением структурно-^нкциональньк свойств эритро-цитарных мембран при ГБ повышается проницаемость гемато-энцефа-лического барьера,о чем, свидетельствует выявление в периферической крови плодов и новорожденных нейроспецифических белхов ыозга. б.Заменное переливание крови,вызывая снижение концентрации билирубина,приводит к активации патологически сниженного уровня П0Л--А0А и нормализации ст^турно-фунхциональньа свойств клеточных мембран,снижению гемолиза, эритроцитов.

б,Включение витамина Е в комплесную терапию новорожденных с ге-

\

- 22 - •

молтической болезнью вызывает дополнительное угнетение патологически сниженного уровня ПОЛ-АОА и,в отличие от детей с гипоксией гипоксического гвнеза,не может быть рекомендовано в качестве патогенен тически обоснованного компонента лечения при данной патологии.

Практические рекомендаций *

Для дополнительной оценки степени тяжести состояния и решения • ' вопроса о необходимости проведения ЗПК в комплексной терапии новорожденным с гемолитической брлезкыо рекомендуется исследо-, ние интенсивности' ПОЛ-АОА в сыворотке крови и в эритроцитах. В качестве контроля за эффективностью -проводимой терапии целе-образно определение концентрации нейроспецифических белков мозга в периферической крови.Снижение концентрации НСБ является прогностически благоприятным признаком и свидетельствует об Адекватности проводимой терапии.

Принимая' во внимание ингибирующее действие витамина. Е на систему ПОЛ-АОА в условиях патологического снижения ее уровня,применение данного антиоксиданта в комплексе лечения новорожденных , о гемолитической болезнью в раннем ивонатальном периоде не пока-вано. -

, Список опубликованных работ по теме диссертации

I.Состояние первкисного окисления липидов у плодов с геиолити- • ческой болезнью при -кбнфликте.//В сборнике статей'Пути снижен!.г ния перинатальной патологии"под рбд.Г.М.Савельевой,Москва,1990. -с.176-183

Й.Состояние эритроцитарных" мембран у плодов с гемолитической бо-лезныо//Впросы охраны материнства * детства.-199Г.-* 4.-с.4§-

- 23 -

-53/в соавт.с И.Б.Кущ,О.А.Аэизовой,Д.Б.Егоровыц/ 3.Коррекция мембранных нарушений в комплексной терапии перинатальной патологии//В сборнике"Медико-социальные аспекта перината-логии и современные технологии родорйэрешения",Челябинск,1992 -с.ТбО/в соавт.с Р.И.Шалиной.М.О.Дорофеевбй/

\