Автореферат и диссертация по медицине (14.00.11) на тему:Организация и эффективность службы серологической диагностики сифилиса в лечебно-профилактических учреждениях Республики Казахстан

ПШЕНИЧНАЯ ЛЮБОВЬ АНДРЕЕВНА

ррд 0Д На правах рукописи

2 з (нон т?

ОРГАНИЗАЦИЯ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ СЛУЖБЫ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА В ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ УЧРЕЖДЕНИЯХ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

14.00.11 — Кожные и венерические болезни

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

МОСКВА — 1997 г.

Работа выполнена в. Научно исследовательском кожно-венерологиче-ском институте Министерства здравоохранения Республики Казахстан.

,Научные консультанты: доктор медицинских наук, профессор 3. Б. КЕШИЛЕВА,

доктор медицинских наук, профессор К. С. АКЫШБАЕВА.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Л. Д. ТИЩЕНКО,

доктор медицинских наук, профессор Г. Я. ШАРАПОВА,

доктор медицинских наук, профессор А. В. РЕЗАЙКИНА.

Ведущее научное учреждение: Российский государственный медицинский университет последипломного образования,

г. Москва.

Защита диссертации состоится И июня 1997 года в 12 часов на заседании Диссертационного совета Д-074.10.01 Центрального научно-исследовательского кожно-венерологического института МЗ МП РФ по адресу: 107076, г. Москва, ул. Короленко 3.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ЦКВИ МЗ МП РФ. Автореферат разослан « »______________________ 1997 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета кандидат медицинских наук

Н. к. ИВАНОВА

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. В последние голы в странах СНГ уровень заболеваемости БППП имеет тенденцию к резкому распространению. Эпидемиологическая ситуация продолжает ухудшаться к в последующие годы заболеваемость этими болезнями по данным многих анторов будет нарастать (Скрипкин Ю. К. и др. 1996; Аковбян D. А., Борисенко К. К., 1996; Sanchez М. R. , 1994; Schmid G. , Zaidi А, 1995).

При изучении заболеваемости в Республике Казахстан отчетливо выявлена картина резкого ускорения темпов увеличения количества случаев сифилиса. Так, в 1995 г. заболеваемость сифилисом составила 123,1 на 100 тыс. жителей; за перЕое полугодие 1996 г. - в 2,3 раза больше по сравнению с соответствующим периодом 1995 г. Ожидается, что в ¡997 г. впервые заболеет сифилисом примерно 0,3% населения страны (3. Б. Кешилева и др., 1996). Одной из важных проблем венерологии является рациональная организация сети серологических лабораторий, совершенствование диагностики сифилиса на -основе внедрения современных тестов, проведение контроля качества нммуно-серологкческих исследований (Беднова В. Н., 1984; Рассказов Н. И. и др., 1988; Беднова В. Н; и др., 1995; Farshy С. С. et al., 1987; Larsen S.A. el al., 1995). •

Особую ценность в диагностике сифилиса приобрели трепонемные тесты: реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ) - для диагностики скрытых форм и ретроспективного установления диагноза (Беднова В. Н.,. Милонова Т. И., 1985; Борисенко К. К. и др., 1985; Стурза В.Е., 1988; Ruczkowska J, 1985); реакция иммунофлюоресцекции (РИФ) - для диагностики всех форм, наибольшая диагностическая чувствительность ее проявляется при ранних периодах сифилиса (Беднова В.Н., Орлияа Э. А., 1985; Колуканов И. Е„ 1988; Hunter Е. F. et al, 1986; Dobson S.R. et al, 1988; Petersen С. S. et al, 1990, 1991; Larsen S. A. et al, H95); в подтверждении диагноза сифилиса оказывает помощь реакция иммунього прилипания - РИП (Скрипкин Ю. К., 1980; Абидов М, М. и др. 1980; Алиева С. Г. и др.. 1982); в последнее

, г

десятилетие - иммуноферментный анализ - ИФА (KorpOECWtfi А. В., 1987; . Рассказов Н. И. и др., 1991; Беднова В. Н. и др., 1995; MarschalJro М. ¿1 al, 1983; Cold A. A. el al, 1988; CostelU) P. 0-, Qreti F. A., 1988; jjoizou S". el ¿1, 1990) и реакция пассивной гемагглютииашМ - PiltA (Ёедлова В. Н., Тимченко Г. Ф., 1987; Тимченко £ 1991; van der Shils i.J., 1992; iareen S, A. a al, 1995).

Однако, данные о сравнительной диагностической эффективности этих тестов неоднозначны и практическому .врачу трудно выбрать оптимальную программу серодиагностики и мониторинга сифилиса в разные периоды заболевания. ..

Ряд авторов (Овчинников Н. М. и др., 1983; Никогосян Г. А, , 1987; Титов В. Н., 1995; Никулин H. IC и др., 1996; Farshy С. Е. ct al, 1987; Larscn S. A. et al, 1995) предлагает комбинации диагностических реакций. Необходимость этого обусловлена тем, что любая аз предложенных в настоящее время реакций не является абсолютно чувствительной и специфичной (Дьяченко Л. А. и др., 1984; Наумова В., Няголова В., 1987; Тацкая Л. С. и др., 1988; Левина А. Б., Бескровная Л. В., 1991; Babini О., Savelli G., 1983; Rath P. М. et al, 1994). Постановка диагноза сифилиса затруднена у соматических больных, когда необходимо отдифференцировать ложную позитивность серореаюшй от специфических. (Мшии М. В. и др., 1988; Зудин Б. И. и др., 1989; Шинский Г. Э. и др., 1991; Новиков С. И., Фриго Н. В., 1993; ЭдманЮ.С. и др., 1995; FogedE, 1985).,

Актуальным является разработка методов . получения контрольных сывороток с высоким титром антител, потребность которых в Республике Казггхстан достаточно высока. Стандартные сыворотки, закупа ющиеся> из-за рубежа, дорого стоят., ■

Здрацоохранение Казахстана не имеет трепонемного антигена в достаточном количестве и в Республик? он не производится.

Антиген, получаемый в результате культивирования бледных тренонем штамма Никольса путем пассажа а теста кул ы кролика не всегда обеспечивает

высокое, качество н количество возбудителя для проведения точной #

серодиагностики сифилиса.

Известно, что распространение инфекций в ор[анише млекопитающих определяется состояинем системы гиалуронндаза-гиалуроновая кислота. Однако попытки охарактеризовать активность гиалуронидазы при сифилисе и «использовать этот фермент с целью создания благоприятных условий для размножения бледных трепинем ранее не предпринимались, также как и увеличение выхода бледных трепонем в экстрагирующую жидкость для изоляции антигена путем дополнительного введения гиалуронидазы.

Все вышеизложенное предопределило цель и задачи настоящей работы.

Цель работы - организация, оценка эффективности и совершенствование службы серологической диагностики сифилиса.

Задачи.

Изучить: - эффективность системы серологической диагностики сифилиса, разработать оптимальную структуру организации серологического обеспечения в Казахспне и определить пределы, ее мобильности.

- чувствительность и специфичность основных серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса и разработать диагностическую программу с учетом периодов заболевания.

- зависимость гиалуронидазной активности сыворотки крови от характера сифилитической инфекции, разработать способ обогащения патогенною трепоиемного антигена на основе введения экзогенной гиалуронидазы кроликам, использующимся для культивирования бледной трепонемы.

- разработать схемы иммунизации крупных животных взвесью бледных трепонем или ультраозаученным трецонемиым антигеном для приготовления контрольных сывороток, изучить гуморальный ответ, сопоставить иммунные

свойства стандартных сывороток крови и сывороток, полученных от крупных животных, влияние сроков хранения на чувствительность сывороток при постановке основных серологических реакций.

I

НАУЧНАЯ НОВИЗНА И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ.

Обоснована структура и доказана эффективность диагностических лабораторий для лечебно-профилактических учреждений разного профиля и определен объем серологических исследований на сифилис в зависимости от эпидемической ситуации в Республике Казахстан.

Определен комплекс диагностических тестов для применения у больных различными формами сифилиса и обследования населения, в том числе групп повышенного риска.

Установлена высокая диагностическая иенность при постановке серологических реакций тренонемного антигена, приготовленного путем воздействия гиалурокидазой.

Получены высококачественные иммуннные сыворотки на крупных животных путем иммунизации ультраозвученным тренонемным антигеном.

Организованная серологическая служба обеспечила экономически эффективную лабораторную диагностику сифилиса за счет поэтапного контроля качества серологических исследований, рационального подбора серологических тестов, внедрения ноиых реакций.

Основные сведена« о внедрении.

Результаты работы внедрены в практику централизованных серологических лабораторий научно-исследовательского кожно-венерологического института Министерства здравоохранения Республики Казахстан, городских кожно-венерологических диспансеров Алматы и Талгара, в 12 областях Казахстана (Алматннская, Акмолинская, Атырауская, Восточно-Казахстанская, Таразская, Кокшетауская, Жезказганская, Карагандинская, Мангыстауская, Костанайская, Павлодарская, Уральская).

Апробация работы. Основные положения работы доложены и обсуждены на научно-практичесхих конференциях дерыато-пенерологов г. Алматы (1976, 1979. 1983, 1985, 1987), г. Ашхабад (1982); выездных республиканских семинарах по вопросам дермато-вецерологин (Уральск, 1980; Архалык, Жезказган, 1985; Шымкент, Павлодар, 1992); пленумах Научного совета по дерматологии и венерологии АМН РФ (Суздаль, 1983, Челябинск, 1984); Всесоюзных семинарах по серологической диагностике сифилиса (г. Москва, ЦКВИ МЗ РФ, 1978, 1984, 1987); Республиканских семинарах врачей-серологов (г. Алматы, 1976, 1977, 1978, 1984, 1987); Vil, IX Всесоюзных и VI Всероссийских съездах дермато-вгнерологов (Львов, 1979, Алматы, 1991, Челябинск, 1989); на I конгрессе дерматовенерологов Казахстана (1996).

Публикация по материален диссертации. Опубликовано 52 научные работы, из них 5 методических писем, одно изобретение и фармакопейная статья.

' Личный вклад автора. Все разделы представленной диссертации выполнены самим автором. Разработка получения контрольных иммунных сывороток проводилась совместно с Д. А. Азизоаым.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на Шо страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, результатов собственных исследований (5 глав), заключения, выводов, -практических рекомендаций, указателя литературы, включающего 377 источников, из них на руссхом языке 217, иностранном - 160. Диссертация иллюстрировала таблицами и двумя рисунками.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планами НИР Научно-исследовательского к'лжно-венерологического института МЗ Республики Казахстан (№№ гос. ретстрашто: 7 S077734; 81002376; 01840 005533; 01860086079,- 0194-РК 00506). • .

Считаю своим приятным долгом выразить глубокую благодарность • > 6

профессору 3. Б. Кешилевой, профессору К. С. Акышбасвой и доценту А. Коеухнну за научно-консультативную помощь и содействие при выполнен», работы.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Разработка методических подходов рациональной организации серологической службы Республики Казахстан проводилась ка.осносе данных о заболеваемости сифилисом-, отчего а колаю-иенерологкческих учреждений (1977-95 гг.), анкетирования всех 19 областных кожно-венеролосических учреждений и городского кожно-венерологического диспансера Алматы, методических рекомендаций „Применение расчетных норм времени на иммунологические лабораторные исследования для серо- п лнкиоро-диагиоешки сифилиса к серодиагностики гонореи", разработанных ЦКВИ МЗ РФ, 1950 г.

При определении чувствительности и специфичности серологических реакций на сифилис проводилось клиннко-лабораторное обследование больных сифилисом (о 6 068), больных соматических клиник (п 21 572) и лиц группы сравнения (п » I 588).

Исследования по совершенствованию серологической диагностики .сифилиса включали улучшение качества трепонемного антигена для постановки специфических реакций и получение иммунных сывороток крови на крупных животных (козлов, ослоу)

Для получения трепонемного антигена под действием локализованного сифилитического орхита кролика разработаны две методики введения гиалуронидазы. Опыты проводились па двух группах кроликов. Модель локализованного сифилитического орхита получали общепринятым методом,

7

применяя пгамурошшазу стрептококковую (серия Л1? 463, производство Иаучно-исследозлтельского инспггута эпидемиологии я микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи).

I методика - взвесь БТ виутритестикулярно ---> через 15 мин. -гаалуронндазу внутримышечно в область бедра. По этой методике заражали 4 кроликов (группа сравнения 4 кролика): количество взвеси бледных трепонем вводимых в оба яичка варьировало от 0,5 до 1,2 мл, при контроле - по 0,75 мл о оба яичка (бледных трепонем до 60 в темном поле зрения микроскопа). Количество гиалуронидазы стрептококковой составило 0,2 мл (две опытные дозы). Вскрытие кроликов проводили на 7-й и 14 день от момента заражения.

II методика - взвесь бледных тепонем виутритестикулярно----> через 15

мин. гиалуронидазу виутритестикулярно, группа сравнения - кроликов заражали общепринятым методом виутритестикулярно' взвесью бледных трепонем без введения гиалуронидазы. По этой методике заражали по 5 кроликов в опыте и контроле. Количество взвеси бледных трепонем - по 0,75 мл в каждое яичко, как в опыте, так и контроле, гиалуронидазы - по 0,1 мл (одна опытная доза).

Для получения иммунных сывороток крови были использованы две группы крупных животных: 1 группа (п » 2) копы, возраст 1,5-2 года, вес 27 -30 кг; 11 группа (п = 2) ослы, возраст 1,5-2 года, вес 50 кг. Животные предварительно находились в течение 2-х месяцев на карантинном режиме. Для иммунизации крупных животных предложено 7 методик, апробировано 4. Наиболее приемлемы две, при которых общий объем антигена для проведения иммунизации составил 24,0 - 36,0 мл; срок иммунизации 18 - 24 дня.

При постановке основного опыта РСК иммунные сыворотки крови, полученные от крупных животны 1 предварительно разводили в 4 раза, из этого

разведения готовили рабочее - 1:5 /инактивация при 56°С 30 мин). За рабочий

титр принимали титр комплемента, установленный при титровании

нормальной челомческой сыворотки крови, плюс 50% надбавки.

При постановке МР с кардиолипиновым антигеном иммунные сыворотки крови (титр кардиопшшноиого и трепонемного антигена в FC ¡С -1:30 - 1:40) крупных животных-продуцентов соединяли ГЛ с иммунной сифилитической сывороткой крови (титр 1:20) кролика.

При изучении зависимости положительных результатов иммунных ¿ывороток от условий (различные температурные режимы: +4° С, -18° С, -20° С и лиофилкзация) и срока хранения (1,5 мес., 3, 6, 9 и 12 месвйги) было И""лсдовано в РСК и МР 1 381 сыворотка крови (серии №№ 18, 19, 20, 21, 22, 23).

Сравнительные данные серореакций (РСК, МР, РИФ-200, РИТ и РИП) при исследовании положительных и отрицательных контрольных сывороток изучены в нативном ввдг (1 порция • 1 день) н через 8 и 14 месяцев ( 11 и И1 порции при хранении в замороженном состоянии в при температуре - ¡ь°С).

В работе были использованы следующие серологические реакции:

1. Комплекс серологических реакций (КСР): реакция связывания комплемента (РСК) с кардиолшшновыы и трспонешшм ультраозвучениым антигенами + микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном (МР) (приказ 1161 МЗ РФ,1985).

2. Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ) мсланжерный • метод (Н. М. Овчинников, 1S62).

3. Реакция иммунофлюоресцеццин (РИФ-200, РИФ-абс) (Белнова В.И., Э.А. Орлина, 1975).

4. Реакция 1Солмера (в 1/5 объема) (Пшеничная Л. А., Стоянова О. А.,

1980).

5. Реакция иммунного прилипания - РИП - (Г. П. Авдеева, 1978).

6. Иммунофсрмеюный анализ * ИФА ( Бсдношь В. Н., Котроьский А. В., 1985).

7. Ре?лш;л »гссигпсй гемагглютиноции - РПГА (Тимченко Г. Ф., 1591).

3. Микрорсакния с !сзрл!!олиппновы:л антигенам: с актацией в иигктивнровзнпой сыкороткой (типа БДРЛ), плазмой (фовл и шгтратной щют-ъю (Оггпшгшкоз II. М. и солит., 1980).

10. Оореаелеике пгалуронидазиоК активности проводили по методике Л. Бгррет, 1580 (в модифгпшшн - Косухииа А. Б. и созвт., рапконализагсрское предложение, 1590).

Статистическую обработку ргзультатоэ ясслеяоранкЯ пропоя;:;;!; с использованием методов сарицпонной статосткхн (Сепеглнез Д, 1955; Мерксв А. М., Потаксз Л. Е., 1974, Лскин Г. Ф„ 1990).

РЕЗУЛЬТАТА ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Из ссногзк!!!! указанных ранее организационных решений нами разработана система лабораторного контроля с различным клинскэ-лаберзтсрггьш уровнем.

Центральный уровень представлен научной серологической лабораторией Научно-исследовательского козсно-венерологичсского института Министерства здравоохранения Республики Казахстан, в ко-порой осуществляется следующий комплекс лабораторных нсследогакнй: КСР, МР (в 4-х модификациях), РОТ, РИФ (РИФ-10, РИФ-2С0, РИФ-абс, РИФ с цитратной кровью), ИФА, РПГА, РКП, реакция Колмерэ, количественные методы (рис. 1.).

Следующий уровень лабораторной службы представлен 46 централизованными лабораториями при Восточно-Казахстанском, Павлодарском, Шымкентском, Карагандинском, Костанайском, Северо-Казахстзнском областных кс;:ско-пенсролсптческкх диспансерах, и городском кожно-венеролопг^есксм диспансое Алматы (рис. 2.).

Далее следует сеть ла( ораторий, созданных при кожно-сеперологнческгя районных и городских диспансерах, а также при

10

Рис.2.0рпишз.пия серологической службы области

м .

■ 'f

учрсвдгнуях другого профиля (например, при клинико-диггиосгаческиг. лабораториях). Количество m 110 республике 158. ,

Токкм образом, вся серологическая служба- РсснуЕлики Казахстан по вавиш расчета« включала 240 лабораторий, пз них о 103 основной функцией * является серош(агно5Т>1!2) сифилиса.

Нике подтверждена эффективность, в .том числе экономическая, разработанной im 5-урсвие»ой системы серологической службы «раны (табл. 1.).

Пр:: разработке широкой программы скрининга актуальпой яплкгтея создание системы лабораторного контроля. Оснокшаи фордаин контроля качества лабораторных- исследований яиляетсп поэтапный йнутрилабораторамй и мегслабораторнмй контроль. Не основе «зу*«ек1Ш географических особенностей, матернально*текнического уровня, усошизгктозанпзсгк квалифицированными 'кадрами территория Республики Казахстан бил г. разделена ¡м 6 зон: 1 зона включает Лаучно-исслсяоватсяьский кохшо-ьснсралотческмП институт МЗ PIC, код контроле!.! которого и гладятся ДСП Алматкнс::ого ОКВД, ГК.ВД г. Алматы и 13 Рс-слубликанозк мешицнехш учргхжний. В ссаю очередь ЦСЛ ГКВД проводи контроль над ысашшнскими учреждениями г. Алдеты (42), осущ5ствл»иащ;:х иостеиовку -«спресс-иетода;. ЦСЛ ОКВД - городские и районные лаборатории области. И - YI зонь? шупочалт головные зональные • ОКВД, который контролируют работу близлежащих региональных ОКВД. Контроль качества сепологнчесикя исследований осушестщшгш! с помощью контрольных сывороток (положительных, слабополокительны» ii отрицательных), Данные по контролю качества серологических исследований из зональных ЦСЛ поступают а НИКОИ МЗ PIC, где проводится анализ результатов качества проводим lu исследований по КСР, РИТ, РИП, РИФ. Епедренда зонального контроля обеспечила эффективность выявления бальных сифилисом, »1 tu учения стабильных результатов серорсакпий на

. 13

Таблица 1

ЛАБОРАТОРНО-ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ТЕСТЫ ДЛЯ ЛАБОРАТОРИЙ РАЗНОГО УРОВНЯ

Уровень (категории)

Комплекс серологических иссяедепаинй

I. - республиканский (НИКВИ МЗ РК)

КСР (РСК с кгрдполнпйновшг и трепонегшым антигенами, МР прецкшггащш с кардиолюкшоЕЫЫ антигеном), РИФ (РИФ-200, РИФ-а§с, РИФ-ц с СМЖ), РИТ, РИП, реакция Кххлыера с кардколипиновьш к трепонсьшы:.! антигенам«, И ФА, РПГА, исследование ликвора, количественные методы РСК, МР, РИФ, РПГА, РИТ, ИФА; МР (4 кодификации)

11. - -Оластной (ЦСЛ 01СВД)

111- городской (ЦСЛ ГКВД)

IV- районный (ЦСЛ РКВД или „серологические" ка базе КДЛ)

КСР (РСК, МР), РИФ (модификации), РИТ, РИФ (модификации), РИП и реакция Колмера, илн сочетание спецкфпесхга реакций с ИФА, РПГА, исследование ликвора количественные методы РСК, РИФ, МР; МР (4 модификации)

КСР (РСК, МР), РИФ и РПГА, или сочетаете ИФА и реакции * Коямера, исследование лихБорг, колнчгсшшные методы РСК, МР; МР (4 модификация)

КСР (РСК, МР),- МР (любую из модифякацей)

У - ЛГГУ

Экспресс-метод (МР с плазмой, героин) ¡эш любую, пз - МОДЦфЦКЕДКЙ МР

сифилис.

С згшдемнслопяксхой точки зрения необходимо усщспш ывроцрнятиЗ ко организации скриниигоиш обследований широких месс наесдешгя, с первую очередь груди риска.

Расчет относьтслькой сгролтнссте выявлен!« скфатиса е результата серологического обследования показал, «го а Рееиубдшх 1Слза.чст»ш о излом и его промышленных в сельскохозяйстгзакш регионах, а тадаг С г. Алвдта показатели взрияруют от 0,17 (минимальное значение в дскгрцтельцоа шяерааяс ОР с вероятносто 95%) у школьников, учащихся ПТУ н счудгщоз Д1» 52,03 (иаксииальког значение в додератейыкш интервале ОР с вероятность» 95%) у неработающих жигслей селъхозоблестеЛ (табл. 2). Наибольший 'относительный риск заболеть сифилисом оказало« у цор^ботаищих молодого возраста (12,77...12,91) независимо от места проницания; а икгустркальных регионах - у разнорабочих и работников промышленных . првмцяшиЦ (1,02... 1,53); в сгльско-хрзгЛстЕС.чиых районам ыгаболее высок риск заболеть сифилисом у работников аатохозяйсти (1,71—2,51) и строительный сргор«згцнЛ ü,5ó...2,3l).

В процессе работы" каин проведено изучение диашостачесесй чувствительности 'и спгццф^чкостк современных серологически;; тестов, определение ковдлецеа сероредошй б зг.в!;си*к»сти от пгриода ц течения заСолсвас-чоста.

При сращцгтрлыгоы изучекик 831 сксоротеи крога белышх различными форшмя сифилиса с РИТ н реакции ¡Колмгря рыашкиа' едвдуюшег: при сифилиса первичной к вторичном, сегхздз '¡угстилелышсть psasmsM Колдорб саше, чем PJíT, при поздних формах сифилиса,' и том числе вторичном рецкшшкым преимущество остается за РИТ (табл. 3).

Сыворотки кроен 534 больных различными формами сифилиса исследованы в РИф-абс и РСК с трепопеш.ьш гщтигеном. Высокая чувствительность РИФ-абс провалялась при есех сщщдх сифилиса.

7':.сл.:Г.2 2

Отпоапгекьнкй риск гоЗадгть ск&хшхсоа гжсотсрыя ког-тшггэтсз ргбспцаааи и пгрг£отсхищ:а з рхвачпьас эхзногдг.чгаша jónacsm РсспеЗлязз! Казахстан

íCcirrr.-rcr.T

: ¿кЛОКЯЭТйН

t. Pc&othz:ui прам;

3.PaîffRi«:<wj ere,-; шла орп&йззц'лй

4. РаЕташшз "1 азтеяшйсгз

5. Учащиеся икоя, П ГУ

й студснты 0.2Ц0,20—0,22 j

Ô.Ke^SoTsrcîîKie (по дашьйГ^оЛссайоз со

; 1^4011,30.. Л ,51J

ГС г -л о й ы сол&сти :U51!,02...1,55J 0,2510, IÎL.0,37] lO^iO,41...0.56J *0,9|0,83...0,99j

Соластй" с 'прсоЗяаг. Аяматы

дождал сельсксго ' нгеслшяя* l,!ll0,S9.„I,2ój

;0,ô7LÎ)t57...0,S2J l,íi7(l,Só.„2,3¡J .2,СсП,71-2,51] ;ö,3llü,23...0,34i i 0,2010,17...Ö/23J

0,7У[0,09...0Д!] !5,23[4,30„.6,45j 1,0311,02—1,04] ! 1,5611,3s...!,75 j ;0,43 [0,42...0,41 J

Q'Sñizi't чйсла'ни'сстй'I2,'.i4j 12.77—12,91 j l1,2019,74-15,03! : 30,37(21,C0.;.52,03í ; Í9,3[i4,4...23,9j

Прикечание:* - Алштшская, Атыраусгся, Таразскзя, Кзьш-Ординсгсад л íCccnuíaüKoa сбла^га. HpoittaucKKSHs сбсасти: (Вссто^о-Кгаахствксхгя, Карапаццшскак).

Таблица 3

Погсазгтежк дпагнолической »гувсяттедшсста РИТ и реакции Колмера (в круглых скобзсах определенные по Ван-дер-Вгрдену) и »гх доверитьпглше интервалы ( в квадратных скобке::) с вероятность!© 95% у больных сифилисом, % (х+га)

ГЮшническйе формы ; Поло Ги тельные рез у л ь т а т ы

I сифилиса.......................;......РИТ................."........... ............ Реакыия Кодмсра с антигенами

! (п=831) .....................^к^йоШиинок®

I- первичный ...............................1 '

I. ссронегативный {п-25) - ~ 40,010,02.: 15,3] !8,0[0,75.„21,91

| серопозитивный '.(п«Л8> 14^3139,1:37,5]* : Щ99,1)197,•4.ЛЭД]! 1Щ99,1)|97,4..Л

вторичный ' '

свежий <п=213) | 99ДР7ДСЛ(Ю] I ЩВДрвДГЛО^15. ЛШ]

рецидивный (п=281) "" .......................................

сетитый неуточненный сдадечйо-сосудистой

системы (п-15) 'Ш (94ЛШД..Ш] Ш6Ж9Д.100]

Ксрной- систеьш'<п~Щ Ю0(ВД185,5..ЛМ] '1^,9[74.1...КЮ] 94,4М3.6..Л00]

-гс^дзногомозга (п~2). 100(75,0) ...... ............*' ...... ....... '

поздггий (п=24) 100(96,1)

'99,11973^100] ¡ДОЭДИЗДСВД 1 10Щ99,5)р!,5. ЛМ]

100(99,6)198,8..Л001 :100(99.6) ¡98 100] ■ 1Ш{99,6)19йД.Л00] ( пда1оо(9^2)[?7,7..лоо]::. : :::

ШД.Л00] Ш6Ж9Д.100]

б5Д:.лш] Г88дал::гоо| г^дасло^

0,9—1001 иОО(75.6Ж9..ЛШ] 100(75,&)[0,9.Л00] 88,7~ЛОО][79,2|;б1,7...95,7]*

Прммечпкиг: * - достоверные (р<0,05) различия РОТ и реакции Ктмгра

Специфичность РИФ-абс, РИТ и РСК была подтверждена при обследовании 6 Мб лиц свободных от сифилитической инфекции. Высокая специфичность отмечена я РИТ, среди дерматологических больны* (п= 922) только в одном случае (диагноз: красная волчанка) отмечены •неспецифические положительные результаты (0,1 [0,0...0,44]%), по РИФ-абс зарегистрировано по одному неснецнфическому выпадению среди терапевтически* (п * 843) и гинекологических (п = 543) больных (0,12 [0,0...0,47)%) н (0,18 ¡0,0...0,73)%) соответственно; среди онкологических больных (п = 745) - два несцецифичсских результата (0,27 (0,0...0,7Я|й).

Нами разработан метод постановки РИФ-абс с высушенной цнтрагной кровью с достаточной чувствительностью и специфичностью, что расширяет возможности применения данного диагностического теста на сифилис в отдаленных районах Республики Казахстан.

Прн сравнительной оценке результатов, полученных в РИГА и И ФА в диагностике сифилиса показана высокая чувствительность РПГА, при первичном серопозитианом, вторичном рецидивном, скрытом раннем, скрьпчхм поздне:м и серорезисгентнош до 100% положительных результатов; при скрытом неуточненном - 95,5%; первичном серонегатквном - 50,0%. По ИФА положительные результаты при скрытом раннем и серорезистентном регистрировали до 100%, при скрытом неуточненном и вторичном рецидивном до 93,2% и 91,6% (соответственно), несколько меньше положительных ответов получено при первичном серопозитинном (71,4%) и скрытом позднем (80,0%). При контроле лечения и снятии с учета получены

достоверные (р<0,05) различия ИФА, РИТ по сравнению с РПГА (табл. 4).

»

Для изучения диагностической чувствительности и специфичности М!' преципитации и РСК с карднолнпиновым антигеном исследовано 16 762 образца крови больных различными формами сифилиса и друиши соматическими заболеваниями. Контрольную группу составзти 1 343 образца крови доноров. Диагностическая чувствительность мтсрореакций и РСК

13

Теблицз 4

Диагнесггичгская чувствительность РПГА, ИФА, РИТ у больных скфллксом, % (Х+т)

Клиничесхлз форгш Потоокпельные результатj_.................

сифяшст (п-240) J ...РЖА ........................................ИФА , ..........\ РИТ

- первичный ...............................................................................................................................................!..........

сссокегатйвн7яй. (п~4) _ ;50,0[36,0...64,0] .........[-................ ............. j -..........

' (п«=14)": [ 1€0(93,7)182Д.Л001 |71,4[47,3~.95,5Г.............^,3[33,7...89,9Г

- ВТСрПЧКЫЙ . : ....................................j............... ';,................................' " . .

-|5£ШШ!Ш11ЫЙ.(П=12)....... ; $00(92,8)179,5...I00] |?1,6[75,6..Л00].......... ] 100(92,8)[79,5..ЛО0]

- скрытый ' ...... .... .....................i............... ......

¿аяЕГйй (я-20) '' j 500(95,4)185,7„.100j : 1C0(95,4)[S6,7„.10ÜI J 103(95,4)[86,7..ЛС0] поздний.<n=ip) [100(91,6)|76,2...!00j ¿£0,0154,7... 100] j Í0a(91,6){76l2...iCD] неупгекекаый (r«»44). ^. j95*Д..100] . 93,2{85,6...100]..........! 100(97,8)193,5-100]

. «роргзкгтенгккй:(n=4) J Ш0(83,3)[55,1..ЛС03 J00i83ß){55,lr.!CD] ,!00(23,3){55,1...100}

После лечсяш:: ...........I. . ..................

^ЙТЬГЙ пжгаый (я«Щ40,0[!2,6...72,61 40ДО,6.-72,6]

-скрытый вторичный (п= 18; 66,6144,4.-88,8] 66,6[44,4...88,8]

-CEptór ый (г.-б) ..... . 65,6126,9.-95,8] . 33,314,2.-73,0]

- 'otante с'учета ' 3'1,7j25,L..44J] 5СЩ39Д-60ЛГ

22,216,2.-44,8]*

33,314,2.-73,0] 5ЛИД.ЛС,ЗР

ы «о

П{й2Д2чгигз: 0 - деетпевзрнне (р<0,05) ф&хтая с РПГА

■ я

Ei

»P

c¿

í-

a

a

Ü й*

a

I'

П • i-™ «

л íí c.i o O o

S 8

a tí

(Л >;l

аз

« 8

ru

{2 1

3 я p p

í' f) il Й

y

«

y

u

íí ir

ii

Ci &

CS

S=I

U ц

с. <

* tí

» A

« У

Б i •

•4

4

-V

3

5.

«С p1 h Л ~

л

«3*

N

Ai

rt Ф

cf £ 4

<•4 « t r*» r- tj к Гт •n

й С'«

u» Ь

g • s* ta 57

fs.' : ^ a».

! a[ on" fis

«i t» Ц. wV ll'V o" V*

s ¿T

u

&

«v

I— €-1

«Л

' FT

a

1 u

PU g

u о

ä

u К

показана на 281 образце крови больных различными формами сифилиса (твбл. 5) и частота нсспецифичесшх положительных результатов мнкрорсакний и РСК - на 733 образцах крови группы обследованных (табл.6). •

Наиболее чувствительной при всех формах сифилиса были МР с плазмой, цитра гной кровью и инактивированной сывороткой крови, специфичной - МР с инактивированной сывороткой кропи. Высокая чувствительность, простота выполнения МР с плазмой, даже при меньшей специфичности позволяет рекомендовать ее как реакцию отбора при массовых скрининговых обследованиях в ЛПУ. МР с инактивированной сывороткой крови, являющаяся наиболее специфичной н достаточно чувствительной по сравнению с другими модификациями МР, может бьпь использована в КСР для диагностики сифилиса.

Суммируя результаты изучения диагностической значимости

(

серологических реакций установили, что чувствительность и специфичность серологических реакций зависит от формы и течения заболевания. При ранних стадиях сифилиса (первичный серонегагшзный и серопозитивный, вторичный свежий) наиболее чувствительными являются РИФ-абс, реакция Колмера й РПГА. При сифилисе вторичном рецидивном, скрытом (раннем, позднем и неуточненном), серорезистентном РИФ-абс, РИТ, реакция Колмера, РПГА, РСК с трепонемныл. антигеном положительны до 100%. При сифилисе висцеральном РИФ-абс и РИТ более чувствительны (р>0,05) чём реакции Колмера и РСК с двумя антигенами. При сифилисе позднем врожденном^ контроле лечения, снятии с учета и сифилисе в анамнезе РИФ-абс, РЙТ, ИФА, РПГА достоверно превышают РСК с кардиодипиновым и трепонемным антигенами по вышеуказанным параметрам. Результаты изучения чувствительности и специфичности широкого комплекса серологических реакций показали наибольшую эффективность МР и ИФА (доступность тест-систем) в выявлении и диагностике различных форм сифилиса.

Для повышения качества серологической диагностики сифилиса нами

21

Ч&стага псспсапфичсаал пахожхтглы'.их рггушкгоз мжсрс?гак!'кй • прсшшитгшш с кард5!ол«пино5?ь:м- гнтаггиом п ?СК яра йсслсдоьгнаи

оЗразноэ :фосл разных хяяякх, % (Х*т)

Группы Нсспецифпчссхяг пазаэ&пеямше результата .. |

сбслсястуших М н :: р о р с а к ц и а ;

| (л=733) с инактааирэ-с агггизисй с плазмой с цитрзтной PCX с ;сгрд. ;

I згяксй сыво- сизортопой ,«роььк> .А!" {

; ротхой ! '.Больные стационаров:

терапевтических (n-250) 2,0(0,63-4,2] 3,2(1,4...5.3] 3,6(5,6-6,3j 3,2(1,4-5,2] 3,2(1,4-5,8]

дсрматолописскнх (п=15б) !,3(1,0-3,2] 1,3(1,0-3,2] 1,9(0,5-4,1] 0,6(0,02-2] 1,3(1,0—3,2]

I- онкологических (n-16) .6,2(0,0-23,1] 6,2(0,0-23,1] 6Д0,0...23,Ц - .6,2(0,0-23,1)

гинскологичссхих <n=103) 2,9(0,5-7,1] 4,8(1,5-9,9] 3,9(1,0-8,6] 1,9(0,17-5,5] 3,9(1,0-8,6]

• Группа сравнения <п=133) .5,3(2,1.„9,9] 3,0[0,75...6,&] 7,5(3,6.-12,7] 9,0(4,7...14,6] 5,3(4,7...9,9] ;

¡Доноры (а=75) . 0,0(0,0...0,2] 0,0(0,0-0,2] 0,0[0,0...0,2j 0,010,0- 0,2] .0,0(0,0.-0,2] ;

1. . Всего ;_______2,4(1,4...0,7 2,711,6-4,0} 3,6(2,4-5,И 3,1(2Д..4,5) 3,0(1,9-4^41 j

«

Примечание: в квадратных схобгсзх даны девсрэтсльяые шггерсглы с вероятностью 95%, пычксяенные цстадсм Фишера

бьыа изучена возможность получения трепоиемного антигена х помощью стрепококковой гиалуронидазы- Предпосылкой явилось выявленная повышенная гиалуронидазная активность сыворотки крови больных первичным серопозитивным, вторичным свежим, вторичным рецидивным, скрытым ранним и скрытым поздним сифилисом по сравнению с контролем (13,67+1,90; 18,04+1,83; 22,09-И,75; 18,43+1,68; 17,15+0,70 против 8,5+1,18). Испытания показали, что применение вышеуказанных методик заражения кроликов позволяет получить в одинаковой степени более качественный трепонемный антиген, чем при заражении без гиалуронидазы. Изучение диагностической чувствительности серологических реакций (РИФ-абс, РИП) с применением трепоиемного антигена (ГЭГ+) показало более высокую чувствительность РИП при скрытом раннем (86,5...100%), в том числе леченном (50,6... 100%) и при ссроконтроле (83,6...100%). При остальных

I .

формах сифилиса были совпадающие результаты. Показана возможность использования в РИФ-абс трепонемного антигена (ГЭГ+), фиксированного на стекле (30 дней и более) (табл.7.).

Изучение возможности использования иммунных с вороток, полученных от крупных животных - ослов, в качестве контрольных сывороток показало совпадающие результаты с рекомендуемыми контролями (стандартная промышленного про -зводства и сыворотки крови больных сифилисом). Данная контрольная иммунная сыворотка не теряет своей активности в сроки наблюдения до 420 дней.

Таким образом, полученные клииико-лабораторные и экспериментальные данные свидетельствуют о многообразии факторов, определяющих уровень и цикличность заболеваемости, чувсТвительНЬсть и специфичность серологических реакций на сифилис в зависимости от формы и течения заболевания. Определена оптимальная структура серологической службы республики. Выполненная работа предопределяет перспективность дальнейших исследований по улучшению качества

23

Чуастантельность РИФ с тргпонешшм антигеном (ГЗГ-г), фиксированным на стекле у больных сифилисом, % (Х+ш)

¡Клиничссккс формы п

| сифириса

| -первичный серопозитивный ¡г. вторичный ; свежий | рецидивный •!- скрытый I ранний | поздний | иеуточненный |пос!с лечения: ¡- скрытый

ссроконтроль 'подозрешге на сифилис___

17й| Положительные результаты РИФ-абс исследованы:

а первы," день чарээ 10 дней че.оез 30 дней

20.100(95,4)186,7... 103] ' 100(95,4)186,7...100] '95,0{35,3..л00]

12 100(92,8)179,5... 100] 100(92,8)179,5..ЛС0] 91,6175,б..ЛОО] 47 100(97,9)193,9.. .100] 97,8193,6..Л00] 95,7|89,8..ЛС0]

23 100(96,0)188,4... 100] " 100(96,0)188,4...100] 91,3179,6...100] 5 100(85,7)144,9...¡00] 100(85,7)144,9-Л00] '100(85,7)144,9... 100]

27 100(92,8)183,4...100] . 100(92,8)183,4...100] 100(92,8)183,4...100]

13 100(93,3)180,8..Л00] 100(93,3)180,8...1С0] 100(93,3)180,8...100] 17 100(94,7)189,7... 1001 94,1{82,7...100] 88,2172,6.-100]

14 100(93,7) [82,0..Л001 92,8179,0.-1001___78,5156,6-100}

Примечание: 1) чувствительность РИФ определена по Ван-дер-Вардену (в круглых скобках); 2) довсрител1,мые интервалы ( в квадратных скобках) с вероятностью 95%.

трепонемиого антигена и пол учет«! контрольных позитивных сывороток.

ВЫВОДЫ

1. Анализ эффективности применяемого нами на основании многочисленных исследований комплекса серологических реакций для лабораторий разного уровня позволили выявить группы повышенного риска в различии* климато-географическнх и экономических зонах республики: наибольший относительный риск заболеть сифилисом оказался у неработающих молодого возраста (12,77..Л 2,91), независимо от места проживания; в сельских районах наиболее высок риск у работников автохозяйств (1,71...2,51) и строительных организаций (1,56...2,31); в индустриальных - у разнорабочих промышленных предприятий (1,02...1,55),

2. При сравнительном изучении чувствительности и специфичности широкого комплекса серологических реакций (РСК, МР, РИФ, РИТ, И ФА, РПГА) установлена наибольшая эффективность в выявлении и диагностике различных форм сифилиса.

3. Предложенная нами методика приготовления патогенного трепонемного антигена с использованием стрептококковой гиалуронидазы, позволила повысить '.увствительность РИП у бальных скрыты»! сифилисом (86,5—100%), в том числе леченных (50,6...100%) и при серокоитролз (83,6...100%). '

4. Установлена пригодность иммунных сывороток крови с высоким титром антител (1:160 - 1:1280), полученных от крупных животных по предложенной нами методике иммунизации, в качестве контрольных при постановке серологических реакций на сифилис.

5. Теоретически обоснованная, апробированная и внедренная система серологических лабораторий для диагностики сифилиса в Республике Казахстан обеспечила эффективность выявления больных сифилисом,

25

получение стабильных результатов в разные периоды эпидемической ситуации на протяжении всего инфекционного процесса и иа стадии серологического контроля.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ:

1. Для качественного выявления сифилиса использовать следующую профамму серодиагностики и серомониторинга сифилиса:

- первичный ссронегатгшный - МР, РИФ-абс;

- первичный серопозитивиый - МР, РСК или ИФА, РИФ-абс;

- вторичный свежий, вторичный.рецидивный, скрытый ранний - МР, РСК или ИФА, РИФ-абс или РИЛ;

- скрытый поздний, скрытый неуточиенный, поздний врожденный, серорезистентный - МР, РСК иди ИФА, РИФ-абс или РИТ;

- контроль лечения, снятие с учета, сифилис в анамнезе - МР, РСК или ИФА, РИФ-абс;

- висцеральный сифилис - МР, РСК или ИФА, РИФ;

- беременные женщины - РСК или ИФА, РИФ-абс;

- скрининговое обследование - экспресс-метод;

- доноры, больные терапевтических и других стационаров - экспресс-метод, РСК или ИФА.

2. при определении объема и характера серологических реакций использовать данные долгосрочного прогноза заболеваний и динамику групп риска в контексте региона.

3. Целесообразно очищение усовершенствованного трепонемного

антигена, полученного по схеме с использованием введения стрептококковой

«

гиалуронидазы для постановки РИП.

4. Использование контрольных иммунных сывороток, полученных путем иммунизации крупных животных ультраозвученным трепонемным антигеном, в качестве контрОлей для постановки серлреакиий (РСК, МР, РИП).

Список основных иаучнмя работ по материалам диссертации

1. Итоги комплексного изучения безальбуминовой среды К» 2 для реакции иммобилизации бледных трепонем (соавт. Л. В. Сазонова, Т. П. Брусницина, Л. А. Дьяченко, Е. П. Никольская и др.) //Вести, дерматол. венерол. 1970. С. 52-Я.

2. Реакция иммобилизации бледных трепонем в диагностике сифилиса //Сб. научн. трудов - Алматы, 1973, - С. 235-239.

3. Материалы к изучению специфичности реакции иммобилизации бледных трепонем при некоторых заболеваниях несифилитической этиологии (соавт. Г. А. Змечоровская) //Сб. научн. Трудов. - Алматы, 1973, - С. 228-230.

4: Чувствительность реакции иммобилизации бледных трепонем при поздних формах сифилиса (соавт. Г. А. Имирова) //Сб. научн. трудов НИКВИ, - Алматы, 1975, С. 272-273.

5. Сравнительная оценка результатов кардиолипинового и неспецифического антигена в реакции Вассермана (соавт. С. М. Воробейчик) //Сб. -Венер, и кожн. забоя. - Алматы, 1975, - С. 274-277.

6. Реакция иммобилизации бледных трепонем при сердечно-сосудистых заболеваниях (соавт. П. И. Волова, М. П. Цыгловская) //Сб. Венерич. и кожи, заболев. - Алматы, 1975, - С. 280-282.

7. Выпадение неспецифической РИТ у больной красной волчанкой (соавт. П. К. Сулуянова) /Дам же, - С. 283 - 284.

8. Сравнительное изучение ускоренных реакций на сифилис (соавт. Н. М. Овчинников, Л. С. Резникова, Т. Й- Милонова, О. А. Стоянова.и др.) //Вестн.дерматол.вснерол., 1977, 1, - С. 32-38.

9. Реакция иммобилизации бледных трепонем с высушенными сыворотками для диагностики сифилиса //Методические рекомендации, Алматы, 19776 11 С.

10. Сравнительное изучение трех отборочных реакций на сифилис

■ 27

(соаот. H. M. Овчинников, Л. С. Резникова, О. Л. Стояноиа, ч гр )//йеспi.дермэта).с:нерол., 1977, 3, - С. 27-31.

11. Ускоренный метод для серодиагностики сифилиса (соаит. С. М. Всрсбейчнк, Г. А. Имироиа, В. !С. Басенхо, В. Г. Бил плова) //Сб. Венерич. и ко .'кн. забол. Алматы, 1977, -С. 24-27.

12 Реакция иммунофлюоресценцни с сухим тренонеммым антигеном для с t р ai i : агн ос п ; км енфшшел (соааг. С. М. ВоробсАчик) //Там же, - С. 27-29.

13. Сезонные холгбания содержания антигена дляРИ'Г от кроликов различней пероаы (соавт. H. Е. Canoatea) //Там же, - С. 29-32.

14. Использование сорбентов в реакции иммунофлюоресценции с абсорбцией при сифилисе (соаит. С. М. ВоробеПчик) /Дам же, - С. 33-35.

15. Результаты серологических реакций при экспериментальном " сифилисе //Там ;хг, - С. 35-38.

16. Усоисршенстиование серодиагностики сифилиса. Руковод. Л. А. Пшеничная (соисполнители В. Г. Ьилялова, С. М. Воробейчик, А. И. Кайзер) //Отчет НИР. эакл., № roc регистр. 7603474S, пни. № 700678 23.10.76., Алматы, 1977 //Сб. НИР и ОКР, 1979. 8, - С. 4.

17. Опыт внедрения ноиых лабораторных методой ц дермато-аенеродогической службе (соаит. М. О. Омарон, Б! А. Броэр) //Вестнлерматол.венерол., 1978, 2, - С. 34-38.

18. Сравнительная оценка результатов РИФ-200, РИФ С абсорбцией и КСР при исследовании высушенных сывороток (соаит. С. М. Воробейчик, В. Г. Билялопа) //Сб. Венерич. и кожн. ;абол., Алнаты, 1978, - С. 28-36.

19. Результаты комплексного изучения. „Ускоренного метода для серодиагностики сифилиса" (coaur. 11. M. Овчинннкои. Л. С. Резникова, Т. И. Милонова и др.)/УВестн.дерматол.венерол., 1978, 5, - С. 28-35.

20. К вопросу о применении сухого тренонемного антигена и реакции иммунофлюоресценции при сифилисе (соаот. H. М. Овчинникон, В. Н. Бедноиа, Э. А. Орлйна и ДР.)//Весгн.дерматол.венера!., 1978. 11, - С. 35-37.

21. Реакция иммунного прилипания'бледных трепонем (РИП) в • диагностике сифилиса но материалам Узбекского и Казахского НИКВИ

(соавт. Г. П. Авдеева, С. Г. Алиева)//Тез. докл. VII Всесоюзн. съезда дерматовенерол., Львов, 1979 - С. 104-105.

22. Изыскание организационных Форм внедрения экспресс-метода серодиагностики сифилиса (соавт. Н. М. Овчинников, Л. С. Резникова, Т. И. Мнлонова и др.)//Вестн.дерматоя.венерол., 19S0, 4, - С. 25-29.

23. Реакция Колмера в диагностике сифилиса (соавт. О. А. Стоянова) //Методические рекомендации, Алматы, 1980, 16 с.

24. Физиологические основы НОТ в серологической службе (соавт. Р. М. Немкаева, Г. С. Сокол енко)//Вопросы НОТ и экономики во фтизиатрии, Алмапл,' 1980, - С. 69-71.

' 25. Изучение состояния серологической помощи в дерматовенерологических учреждениях Казахстана и мероприятия по ее улучшению. Руковод. проф. Н. М. Овчинников, ответ, иснолн. Л. А. Пшеничная (соисполн.

B. Г. Билялова, М. Г. Гусак, Т. А. Евтеева и др.)//Отчет НИР6 закл., № гос. регистр. 78077734, икв. № Б 925937, И.03.81., Алматы, 1980, 91 с.

V ' 4

26. Сравнительные результаты чувствительности и специфичности РИФ-200 и мнкрореакции (соавт. И. А. Жодзишский, С. М. Воробейчик, М. Г. Демьяновская, М. П. Цыгловская)//Сб.Венерич.кожн.забол., Алматы, 1981, -

C. 190-193.

27. Способы забора и доставки материала для лабораторных исследований в дерматовенерологических учреждениях (соавт. Б. А. Броэр, Л. Н. Тимофеева, С. В. Арустамова, В. Г. Билялова)// Методические рекомендации, Алматы, 1982, 56 С.

28. Значение специфических серологических реакций в диагностике ранних и скрытопротекающих форм сифилиса (соавт. М. Г. Демьяновская, М. П. Цыгловскаи, Т. В. Константинова и др.)//Сб.научн.трудов НИКВИ, Алматы, 1983, - С. 31-35. ■

29. Способы иммунизации подопытных животных при экспериментальном сифилисе. Научн. руковод. арсф. H. М. Овчинников, огвет.исполн. J1. А. Пшеничная ( соисн. Д. А. Азизов, Л. П. Волкош, Л. Н. Тимофеева и др.)// Отчет НИР6 закл. № гос.регистр. 810Û2376, инв. № 028400 Ь>617, Алматы, 1983, 134 С. //Сб. реф. НИР и ОКР, 1985, № 2, - С-27.

30. Чувствительность и специфичность реакции иммунного прилипания бледных трепонем при использовании различных сгрий трепонемного антигена (соавт. Е. Р. Федотов, Д. А. Азизов)//Специальные методы исследования в клинике., Алматы, 1984, - С. 78-80.

31. Пути развития серологической помощи в Казахстане //Сб.Венерич. и кожн.забал., Алматы, 19846 - С. 8-11.

32. Организация работы но проведению контроля качества серологических, исследований на сифилис в Казахстане. Под редакцией проф. В. Н. Бедноиой (соавт. С. М. Воробейчик)//Методические рекомендации, Алматы, 1985, 14 С.

33. Совершенствование серологических метсаов в диагностике сифилиса. Научн.руковод. к.м.н, снс. Л. А. Пшеничная (соавт. Д. А. Азизов, Л. П. Ba-iKouj, Л. Н. Тимофеева)// Отчет НИР, закл., Ni гос.регистр. 018/40/005533, инв. № 02860/009102, Атматы, 1985, 71 С.

34. Лабораторные исследования в дерматовенерологических учреждениях. Под редакцией М, С. Валитовой (соавт. Б. А. Броэр). Депон. рукой., Д-Ю, 417, Москва, 1985 //МРЖ. 1986, 5, - С. 27.

35. Обследование больных на сифилис в соматических стационарах (соавт. В. В. Калугин) //Методические рекомендации, Алматы, 1986. 11 С.

36. Сравнительные результаты серологических реакций ири исследовании контрольных сывороток (соавт. Д. А. Азизов)//Актуальные вопросы дерматовенерол., Ачматы. 1986, - С. 148-151.

37. Муколитическая система крови в патогенезе кожных и венерических болезней //Диспансеризации и реабилитация кожных больных, Алматы, 1987, -

30

С. 37-45.

38. Сравнительные показатели иммуноферм{нтного анализа н других серологических реакций на сифилис ( соавт.

Т. И. Голованова)//Сб. эпидем., диагн., терапия и профил. венерич. забол., - Аиматы, 1988, - С. 51-56.

39. Показатели гуморального иммунитета у крупных животных (соавт. Д. Д. Азиэов)//Там же, - С. U1-116.

40. Получение иммунных сывороток крови на крупных животных (соавт. В. Н. Беднова, Д. А. Азизов)//Тез. докл. VI 'Всерос.сьезда дерматовенерол., Челябинск, 1989, Москва -С. 188.

41. Получение контрольных сывороток на сифилис к ФС 42-10 ВС-85,

. ФС 42-ИВС-Й5 и ФС 42-12ВС-85 (соавт. З.Б.Кешилева, Д. А. Азизов, Ю. К. Скрипкин и др.)//МЗ РФ, Комитет медиц.иммунобиол.препаратов. Утв. замминистра, 05.04.90. № 14 - 317, Предс.Комитета - Н.Б.Медунидин, 10.04.90.

42. Изучение патогенетических механизмов, разработка новых методов диагностики, комплексного лечения больных сифилисом.' Руковод. И. М. Омаров, отв. нсполн. Л. А. Пшеничная, Л. Н. Тимофеева (соисполн. Д. А. Азизов, В. Л. Рыбкина, Н А. Шлыкова и др.)//Отчст НИР, эакл., bh гос. psmcrp. 0086079, ОШ, инв. Nil 02910051877, Алмагы, 1990, 128 С.

43. Приготовление и хранение контрольных сывороток (соавт. Д. А. Азизов)//Сб. Соврем, методы диагн. и терапии в дерматовенерол., 1990, С. 144- «147. ,

44. Результаты изучения контрольных сывороток в практических лабораториях дермато-венерологическнх учреждений Казахстана (соавт. Д. А. Азизов)//"Здравоохранение Казахстана", 1991, - С. 19-21.

45. Реакция пассивной гемагтлютинации (РПГА) в серодиагностике сифилиса (соавт. Д. А. Азизов, И. Р. Коржова, Т. И. Голованова и др.)//Тез. докл. IX Всесоюзн. съезда дермато-венсрол., Алматы-М., 1991, - С. 78.

46. Реакция пассивной гемап лютикации в диагностике сифилиса (соавт.

31

Д. А Азгооэ)//Медико-социальн. аспекты дермао-венерол., Ал маты, 1994, - С. 32-35.

47. СовершЬнствование методов ранней диагностики и лечения венерических заболеваний. Руковод. к. м.н., доцент, зав.отд. сифилиса и урогетггальных инфекций, С. А. Темиргалиев, ответ.исполн. Л. Н. Тимофеева,

Л. А. Пшеничная, К. С. Акышбаева, С. М. Нурушепа //Отчет НИР, закл., N°

<

гос, регистр. 0194 РК 00506, инв. № 0296 Р1С 00242, 30.12.95.

43. Способ получение антигена для диагностики сифилиса (соавт. 3. Б. Кешилсва, И. В. Дмнтрйева, Д. А Азизов, А. Б. Косухин(//Пациональное Патентное ведомство РК, 950472.1, 07.06.95., передана в отдел экспертизы 03.09.95 (заявка на изобретение). Получено решение о выдаче предварительного патента на изобретение заявки 950472.1-4/3658 от 26.09.96 г., патент № 4570.

■49. Эффективность внедрения экспресс-метода диагностики сифилиса в Республике Казахстан (соавт. 3. Б. Кешилева, Р. С. Мурзанова)// Тез. докл. Первого конгресса дерматосгнерол. Казахстана 12-13 сент. 1996 г., Алматы, -С. 63:

50. Диагностическая специфичность РИФ-абс, РИТ и РСК //Там же, -С. 120-121.

51. Улучшение качества трепонемного антигена для постановки специфических серологических реакций на сифилис /Дам же - С. 121-122.

52. Диагностическая чувствительность. РИФ и РИП при применении патогенного трепонемного антигена, полученного с использованием стрептококковой гааяуронидазы /Дам же, - С. 122-123.

' 53. Новые факторы и группы риска в Казахстане в период подъема заболела» емости сифилисом (соавт. 3. Б. К«шслс1!а) //Лссоииадня САНАМ, ЗППП, 1937, .V» 2,- С. 21—23.

и.