Оптимизация методов лечения рецидивов и метастазов рака шейки матки

Гуськова, Екатерина Александровна

Диссертации по медицине → Онкология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему:Оптимизация методов лечения рецидивов и метастазов рака шейки матки

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Гуськова, Екатерина Александровна Ростов-на-Дону 2009 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.14

Автореферат диссертации по медицине на тему Оптимизация методов лечения рецидивов и метастазов рака шейки матки

На правах рукописи

ГУСЬКОВА Екатерина Александровна

ОПТИМИЗАЦИЯ МЕТОДОВ ЛЕЧЕНИЯ РЕЦИДИВОВ И МЕТАСТАЗОВ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ

14.00.14 - онкология

АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

□□3461613

Ростов-на-Дону 2009

003461613

РАБОТА ВЫПОЛНЕНА В ФЕДЕРАЛЬНОМ ГОСУДАРСТВЕННОМ УЧРЕЖДЕНИИ «РОСТОВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ ФЕДЕРАЛЬНОГО АГЕНТСТВА ПО ВЫСОКОТЕХНОЛОГИЧНОЙ МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИ»

(директор института - академик РАН и РАМН, Ю.С. Сидоренко)

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

- доктор медицинских наук В.Н. Касьяненко

- доктор медицинских наук проф. Т.И. Моисеенко

- кандидат медицинских наук старший научный сотрудник. Э.А. Шурыгина

Ведущая организация: Волгоградский государственный

медицинский университет

К> И 2009 г. в // *

Защита диссертации состоится «=*-- ' » 11- 2009 г. в 17 часов на заседании совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д.208.083.01 при Федеральном государственном учреждении «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт Росмедтехнологий» (344037, г. Ростов-на-Дону, 14-я линия, 63).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт Росмедтехнологий»

Автореферат разослан «Л__5> _ 2009 г.

Ученый секретарь совета по защите докторских и кандидатских диссертаций, член-корреспондент РАМН, профессор Г.А. Неродо

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Рак шейки матки (РШМ) является актуальной проблемой в связи с высокой заболеваемостью, тенденцией ее роста у женщин репродуктивного возраста и поздней обращаемостью. В результате недостаточно эффективного хирургического и/или лучевого воздействий на первичную опухоль у 10-40% пролеченных больных возникают местные рецидивы, а у 35% -отдаленные метастазы (Бохман Я.В.,2002; В.В. Кузнецов и соавт.,2006). По частоте отдаленного метастазирования у больных РШМ первое место занимают метастазы в парааортальные лимфатические узлы (31,2%), второе - легкие (16,1%), третье - кости (12,9%) (Ю.И. Бородин и соавт.,2004). Лечение рецидивного и генерализованного рака шейки матки является сложной и до конца нерешенной проблемой современной онкологии ввиду крайне ограниченного спектра возможных лечебных мер воздействия. Ведущая роль в консервативной терапии рецидивов и метастазов рака шейки матки отводится высокотоксичным, но не обладающим специфичным действием цитостатикам, что усугубляет состояние больных и иммунологическую несостоятельность организма (Гарин A.M., 2000; Тархов A.B., 2005).

На сегодняшний день наиболее оптимальными вариантами лекарственного лечения злокачественных опухолей являются способы введения цитостати-ков на естественных средах организма, предложенные академиком РАН и РАМН Ю.С. Сидоренко. Доказано, что эти оригинальные способы химиотерапии способны обеспечить высокую противоопухолевую эффективность цито-статиков даже при резистентных формах злокачественных опухолей при существенно более низком токсическом их влиянии на организм (Позднякова В.В., 2006; Джабаров Ф.Р., 2008 и др.).

В последние годы отмечен положительный опыт лечения рецидивных новообразований ряда локализаций с использованием рекомбинантных цитоки-нов: ронколейкина, реаферона (Жаринов Г.Н. и соавт., 2001; Молчанов O.E., 2003; Лихванцева В.Г. и соавт., 2005; Златник Е.Ю., Голотина Л.Ю., 2005; Под-руль В.М., 2006). Потенциальные возможности метода аутогемоиммунотерапии

в сочетании с аутогемохимиотерапией и одновременным лучевым воздействием при рецидивах и метастазах рака шейки матки на сегодняшний день практически не изучены, что определило цель и задачи настоящего исследования.

Цель исследования. Улучшение результатов лечения больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки путем сочетания аутогемохимио- и ауто-гемоиммунотерапии с лучевым воздействием.

Поставленная цель достигалась решением следующих задач:

1. исследовать влияние цитокинов: ронколейкина и реаферона на клетки экспериментального рака шейки матки и структурно-функциональные характеристики клеток периферической крови in vitro;

2. разработать метод комбинированного лечения рецидивов и метастазов рака шейки матки, включающий сочетание аутогемохимиотерапии с аутогемо-иммунотерапией и лучевым воздействием;

3. оценить эффективность разработанного метода по непосредственным и ближайшим (2-летним) результатам лечения больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки;

4. изучить влияние аутогемохимиоиммунотерапии на иммунный статус, структурно-функциональные характеристики мембран клеток крови, степень выраженности эндогенной интоксикации, состояние лейкоцитарного, эритро-идного и тромбоцитарного звеньев периферической крови на этапах лечения;

5. разработать прогностические гематологические критерии эффективности аутогемохимиоиммунотерапии и дальнейшего течения заболевания у больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки.

Научная новизна исследования. В диссертационной работе впервые:

- использовано введение иммунотерапевтических препаратов, инкубированных на аутокрови онкологических больных;

- разработан новый способ комбинированного лечения рецидивов и метастазов рака шейки матки, включающий совместное использование аутогемохи-

мио- и аутогемоиммунотерапии в дополнении с лучевой терапией (Заявка на изобретение №2008113581/14 (014747), приоритет от 07.04.2008 г.);

- изучена взаимосвязь показателей клеточного иммунитета, интенсивности свободнорадикальных процессов и структурно-функционального состояния мембран клеток крови при различной эффективности лечения;

- установлена прогностическая значимость фоновых значений уровней пе-роксинитрита и нитрозилгемоглобина в мониторинге эффекта аутогемохимиоим-мунотерапии у больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки (Решение о выдаче патента РФ от 8.10.2008 г. по заявке № 2007137724 (15) (041260);

- установлена прогностическая значимость изменений коэффициента МУКе/МБИе в оценке эффективности аутогемохимиотерапии и дальнейшего течения заболевания у больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки (Решение о выдаче патента РФ от 20.10.2008 г. по заявке № 2007137722/15 (041258).

Практическая значимость работы

Предложен спектр иммунотерапевтических препаратов для аутогемоиммунотерапии и разработана оптимальная схема чередования курсов лекарственного и лучевого воздействия при лечении рецидивов и метастазов рака шейки матки.

Доказаны преимущества и клиническая эффективность нового комбинированного метода паллиативного лечения, позволяющего существенно улучшить непосредственные и ближайшие результаты лечения больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки.

Сочетание аутогемохимиотерапии с аутогемоиммунотерапией и лучевой терапией обладает минимальной токсичностью и дает возможность проведения лучевой терапии в запланированном объеме.

Разработанная методика лечения - аутогемохимиоиммунотерапия рецидивного и метастатического рака шейки матки технически проста, не требует специального оборудования и может быть использована в любом онкологическом учреждении.

Внедрение результатов исследования в практику здравоохранения

Новый способ лечения рецидивов и метастазов рака шейки матки и прогностические критерии оценки эффективности предлагаемого метода внедрены в работу гинекологического отделения Ростовского научно-исследовательского онкологического института, онкодиспансеров городов Ростова-на-Дону, Таганрога, Шахты.

Основное положение, выносимое на защиту

В паллиативном лечении рецидивов и метастазов рака шейки матки целесообразно сочетание аутогемохимио- и аутогемоиммунотерапии с индивидуально планируемым лучевым лечением.

Апробация работы. Апробация диссертации состоялась на заседании Ученого Совета ФГУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» 04.12.08 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 научных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 217 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, характеристики материала и методов исследования, 6 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций. Указатель литературы включает 316 литературных источников (201- отечественных и 115 - зарубежных), работа содержит 43 таблицы и 22 рисунка.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Характеристика материала и методов исследования

В работу вошли клинические данные о 65 больных с манифестированными рецидивами и метастазами РШМ, развившимися после комбинированного или стандартного сочетанного лучевого лечения.

По вариантам проводимого лечения больные были распределены на 2 анализируемые группы. В основную вошли 35 больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки, при лечении которых использовалась аутогемохи-

миотерапия (АГХТ) в сочетании с аутогемоиммунотерапией (АГХИТ) и последующей лучевой терапией по показаниям. Контрольную группу составили 30 больных с рецидивами и метастазами РШМ, которым проводилась АГХТ и лучевое лечение по показаниям.

Больные обеих групп были сопоставимы по основным клиническим характеристикам: возрасту, распространенности злокачественного процесса, гис-тотипу первичной опухоли, ее стадиям, виду и объему инициального лечения и сопутствующей патологии (рис. 1-3).

Отмечалось превалирование женщин в возрасте 30^19 лет как в основной группе - 23 из 35 (65,7%), так и в контрольной- 19 из 30 (63,3%).

37,1% 33,3%

28,6% 30,0%

14,3%

¿1

,04

13,3% Л ООО/

11,4% 13'3/°

20-29 30-39 40-49 50-59 > 60

ЕЗОсновная (^Контрольная

возраст

Рис. 1. Распределение по возрасту больных с рецидивами и метастазами РШМ в основной и

контрольной группах

У большинства пациенток исходно имелась третья стадия заболевания

(рис. 2).

п=35

п=30

34,0% 20,0% 20,0% ,1В НИ' щ

1 щЩ шр

1МШ

ШШШ8ЯШШ

17,0%

Основная группа

Контрольная группа

□ ТЗМхМО ИТ2^М0

шртгтмо ортгыомо

□ рТ1М0М0

Рис. 2. Распределение больных основной и контрольной групп по стадии исходного процесса рака шейки матки

В основной группе стадия рТгТчЬМо и Т3НхМ0 установлена у 19 из 35 (54,3%) больных, в контрольной - у 14 из 30 (46,7%). Обращало на себя внимание, что рецидивы и метастазы развились практически у каждой четвертой пациентки даже с ранними стадиями процесса: 9 женщин из 35 (25,7%) в основной группе и 8 из 30 (26,7%) в контрольной исходно имели Т^Ио, что подчеркивает определенную непредсказуемость течения РШМ.

По морфологической структуре плоскоклеточный рак без ороговения различной степени дифференцировки имел место в основной группе у 15 из 35 (42,9%) больных, в контрольной - у 14 из 30 (46,7%). В два раза реже морфологически диагностирована аденокарцинома, что составляло в среднем по 20,7% в каждой из групп.

Операция Вертгейма и адъювантная сочетанная лучевая терапия имели место у 16 из 35 (45,7%) больных основной и 13 из 30 (43,3%) контрольной групп. Соответственно 19 из 35 (54,2%) и 17 из 30 (56,6%) пациенток были подвергнуты самостоятельной сочетанной лучевой терапии.

Диагноз рецидива или развития метастазов у 62,8% больных основной группы и у 60% — контрольной был установлен в течение первых полутора лет после лечения (рис. 3).

Основная (п=35) Контрольная (п=30)

Н Менее 6 мес Ш 7-12 мес 0 13-18 мес

0 19-24 мес Ш Более 24 мес

Рис. 3. Сроки возникновения рецидивов и метастазов РШМ в группах наблюдения

Локальный рецидив на шейке матки или в рубце культи влагалища выявлен в основной группе в 6 из 35 (17,1%) случаев, в контрольной — в 5 из 30 (16,7%). Рецидив процесса в параметральных пространствах, чаще односто-

ронний, диагностирован у 24 из 35 (68,6%) больных основной группы и у 21 из 30 (70,0%) в контроле. Состояние больных обеих групп отягощалось наличием отдаленных органных или лимфогематогенных метастазов, выявленных у 17 из 35 (48,6%) больных основной группы и у несколько меньшего числа - у 14 из 30 (46,7%) - в контрольной.

Методика лечения Всем больным основной и контрольной групп проводились курсы АГХТ с использованием схемы «САР»: разовая доза цисплатина составляла 150 мг/м2, доксорубицина - 30 мг/м2, циклофосфана - 600 мг/м2. Цисплатин вводился внутривенно после предварительной инкубации со 150 мл аутокрови при 37°С в течение 30 минут с использованием стандартного режима гипергидратации и антиэметиков. Остальные химиопрепараты перед введением разводились физиологическим раствором.

В основной группе дополнительно использовалось иммунотерапевтиче-ское воздействие с внутривенным введением ронколейкина в дозе 4 млн. ME после предварительной его инкубации при 37°С в течение 30 мин. со 150 мл аутокрови. Реаферон вводился подкожно в разовой дозе 3 млн. ME.

Первый курс химиотерапии больным обеих групп проводился самостоятельно как инициальный. Через 3 недели курсы АГХИТ или АГХТ проводились повторно (II курс) и через 1 неделю подключалась лучевая терапия. Аналогично планировался III курс химиолучевого лечения. Последующие (IV-VI) курсы запланированного для групп больных лекарственного цикла проводились с интервалом 3-4 недели, поскольку для большинства из них возможности лучевого лечения были уже исчерпаны.

Общие суммарные дозы лекарственных препаратов в основной группе за 6 курсов АГХИТ составляли: цисплатина - 900 мг/м2, доксорубицина -180 мг/м2, циклофосфана - 3600 мг/м2, ронлейкина - 48 млн. ME, реаферона -54 млн. ME. Суммарные дозы цитостатиков в контрольной группе были аналогичными.

Уровень суммарных и толерантных доз облучения при лечении больных с рецидивами устанавливался индивидуально. Так, 16 больным из 35 (45,7%) в основной группе и 13 из 30 (43,3%) в контроле вторая серия облучения на область рецидива РШМ не представлялась возможной. Также индивидуально планировалось дополнительное облучение различных по локализации отдаленных метастазов.

Эффективность проводимой терапии больных обеих групп контролировалась с помощью стандартных приемов клинико-лабораторного обследования, включающих гинекологический осмотр, оценку степени подвижности тазового дна, данные УЗИ органов малого таза с методиками цветового допплеровского (ЦДК) и энергетического картирования (ЭДК), почек, печени, СРКТ в динамике по показаниям.

Методики гематологического исследования. Изучение количественного и качественного состава периферической крови осуществляли на гематологическом анализаторе LH-500 (Beckman Coulter, США) с использованием VCS-тех-нологии. Изучена структура популяций лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов по объему - V (Volume) клеток, электрической проводимости - С (Conductivity) и величине лазер-индуцированного светорассеяния - S (Scatter).

Иммунологические методы. Для оценки состояния Т- и В-звена иммунной системы проводили выделение лимфоцитов из периферической крови по A. Boyum (1968). Общее содержание Т-лимфоцитов в крови определяли в реакции спонтанного розеткообразования (РСРО) с эритроцитами барана, В-лим-фоцитов - в РСРО с эритроцитами мыши. Субпопуляционный состав оценивали иммунофлуоресцентным методом с использованием моноклональных антител против рецепторов CD4+ и CD8+ (Хаитов P.M. и соавт., 1995).

Кулътуралъная методика. В монослой культуры HeLa добавляли стерильно разведенные иммунопрепараты в количестве 50 мкл. Ронколейкин использовали в концентрациях: 0,5х10б (25 ООО ME препарата) и 250 ME. Концентрации реаферона - ЗхЮ6 и 1х106 МЕ/мл (150 000 и 50 000 МБ на 50 мкл); в контрольные пробы добавляли равный объем среды. Аналогичные опыты ста-

вили с циклофосфаном (0,5 мг в пробе) и доксорубицином (0,005 мг в пробе). Дальнейшее культивирование проводили в течение 18-24 часов при 37°С в атмосфере, содержащей 5% С02. Затем в камере Горяева подсчитывали процент погибших клеток, способных окрашиваться трипановым синим.

Методики биохимических исследований. В плазме крови изучали: концентрацию молекул средней массы, эффективную концентрацию альбумина, содержание глюкозы, общего белка, билирубина, креатинина, мочевины, триглицеридов, калия и натрия, активность трансаминаз (АЛТ И ACT). В лимфоцитах и нейтрофилах периферической крови определяли: активность каталазы и супероксиддисмутазы - СОД, суммарную пероксидазную активность - СПА, концентрацию витаминов А и Е, малонового диальдегида (МДА), диеновых коньюгатов, активность катепсина Д, кислой и щелочной фосфатаз - КФ и ЩФ с использованием набора реактивов фирмы «Olvex», общую антитриптическую активность — ATA и активность кислотостабильных ингибиторов протеиназ - КСИ. В качестве контроля использовали кровь здоровых доноров (20 человек).

Статистическую обработку полученных результатов проводили на персональном компьютере с использованием пакета статистических программ «Sta-tistica 6.0», «Excel».

В работе использованы методы дисперсионного анализа (Плохин-ский H.A., 1980; Лакин Г.Ф., 1990), отражающие характер причинно-следственных отношений между различными показателями крови и состоянием больных, позволяющие судить об эффективности проводимого лечения.

Результаты исследования

В предварительных экспериментальных исследованиях нами найдено, что иммунопрепараты цитокинового ряда, а именно реаферон (IFN-альфа) и ронко-лейкин (IL-2) при самостоятельной инкубации их с культурой клеток HeLa способны вызывать гибель 51-71% опухолевых клеток. Так, после инкубации с ронколейкином количество неизмененных клеток HeLa составило 17,5±2,4%,

после инкубации с реафероном - 24,7±2,5% против 63,0±1,55% в контроле. После контакта с иммуномодуляторами клетки НеЬа теряли способность формировать монослой, угнеталась их митотическая активность. Сравнительный анализ показал более выраженное повреждающее действие ронколейкина на ядерный аппарат клеток НеЬа, в то время как реаферон в большей степени вызывал дегенеративные изменения цитоплазмы: лизис, выраженную вакуолизацию вплоть до некроза. Гибель клеток культуры после инкубации ронколейкина и реаферона со смесью химиопрепаратов доксорубицина и циклофосфана по нашим данным составила 84,0±2,7%. Проведенное исследование подтвердило правомочность выбора указанных препаратов для включения их в схему лечения больных основной группы с генерализованным РШМ.

Оценка клинической эффективности проведенных вариантов лечения в обеих группах контролировалась после первого этапа лечения, т.е. после первых 3-х курсов лекарственного и лучевого воздействий.

Субъективные боли в области малого таза и пояснице перестали беспокоить практически половину больных контрольной и основной групп уже после первого этапа лечения. Сукровично-слизистые выделения из половых путей сохранились после первого этапа лечения у 37,5% больных основной группы, тогда как в контрольной группе этот признак оставался у 83,3% женщин (р<0,05). Дизурические явления, отеки нижних конечностей исчезли соответственно у 66,6 и 57,1% женщин основной группы и только у 42,8 и 40,0% - в контрольной (р<0,05). Тенденция к нормализации подвижности тазового дна по сравнению с исходом зарегистрирована у 23,7% больных основной группы и только у 8,7% в контроле (р<0,05). Клиническая симптоматика субъективного характера, связанная с органным метастазированием, на этом этапе лечения в обеих группах не имела значимых различий.

При оценке степени регрессии рецидивных очагов установлено, что объективный эффект в основной группе при проведении только курсов аутогемо-иммунотерапии без лучевого лечения составил 50,0%, в контрольной группе -лишь 23,1% (р<0,05) (рис. 4).

Полная регрессия Частичная Стабилизация Стабилизация Прогрессирование

регрессия £50% 25-50% <25%

Общий эффект

Полная регрессия Частичная Стабилизация Стабилизация Прогрессирование

" регрессия 250% 25-50% <25%

Рис. 4. Регрессионная эффективность лечения рецидивов в группах больных: А - без лучевого лечения; Б - с лучевым лечением; * - достоверно (р<0,05) между данными групп

При дополнении АГХИТ или АГХТ курсами лучевого лечения общий регрессионный эффект зафиксирован в основной группе уже в 84,2% наблюдений, в контроле - в 58,8% (р<0,05). В среднем, независимо от курса лучевого лечения контролируемая регрессия рецидивов отмечена у 68,5% больных основной группы, а в контроле - в 1,6 раз реже - у 43,3% больных (р<0,05).

Исходный сонографически регистрируемый объем рецидива в параметрах у больных основной группы уменьшился в 2,2 раза, в среднем на 23,9 см3 в сравнении с исходными данными; в контроле — лишь на 11,2 см3 (р<0,05). Показатели скорости кровотока в нисходящих ветвях маточных артерий снижались по сравнению с исходом до 8-15,9 см/с и ниже, индекс периферического

сосудистого сопротивления повышался до 0,7-1,0, что свидетельствовало о степени резорбции патологического очага.

Оценка влияния химиолучевого воздействия на отдаленные метастазы показала, что в основной группе при метастазах в арегионарных лимфоузлах, легких, костях был получен регрессионный эффект соответственно в 85,7, 83,3 и 100,0% случаев. В контрольной группе, соответственно в 66,7, 40,0 и 50,0% случаев (р<0,05).

Использование аутокрови в обеих схемах лечения обусловливала низкую гематологическую токсичность цитостатиков. Тем не менее, в основной группе относительные и абсолютные показатели крови были в среднем на 20% выше, чем в контроле. Это дало возможность осуществления лучевого лечения в основной группе в полном объеме, что способствовало повышению степени регрессии очагов поражения.

После проведения 6 курсов от начала лечения общий регрессионный эффект в основной группе составил 82,9%, а в контрольной - 56,7%, разница результатов составляет 26,2% (р<0,05).

Число случаев с полной регрессией отдаленных метастазов, независимо от их локализации, составило в основной группе 71,4%, в контроле - лишь 44,2% (р<0,05). При метастазах в арегионарных лимфоузлах в основной группе имелось 5 из 7 (71,4%) наблюдений полной их регрессии, в контроле - только в 1 из 6 (16,6%, р<0,05) (рис. 5).

□ Основная группа в Контрольная группа

35 30 25 % 20 15 10 5 О

...............

31,4

^""''"М 26,£ Вя» 28,6 /Ч и

Общий эффект основная группа - 82,9%-контрольная группа - 56,7%

Полная регрессия Частичная регрессия Стабилизация 250%

Прогрессирование

Рис. 5. Максимальный положительный эффект лечения рецидивов РШМ; * - достоверно при р<0,05 между данными групп

Регрессия (>50%) очагов метастазирования в основной группе отмечена в 35,3% случаев, в контроле - в 21,4%. Новых очагов метастазирования на втором этапе лечения (IV-VI) не выявлено ни в одной из групп.

С целью изучения механизмов регрессионного эффекта мы исследовали в сыворотке крови больных до и после лечения уровень пероксинитрита и нитро-зилгемоглобина. Установлено, что при существенном терапевтическом эффекте исходный уровень пероксинитрита превышал норму в среднем на 94% в пределах 80,4-248,8 нмоль/мг, а концентрация нитрозилгемоглобина в среднем снижена на 24% (11,8-22,69 нмоль/мг). Напротив, отсутствие эффекта или стабилизация процесса имели место в ситуациях, когда фоновые значения пероксинитрита оказывались ниже нормы на 72%, а содержание нитрозилгемоглобина превышало норму в 3 раза. При благоприятном прогнозе заболевания оба показателя имели тенденцию к нормализации (Решение о выдаче патента РФ от 8.10.2008 г., приоритет от 11.10.2007 г.).

Для выяснения аспектов механизма терапевтического действия используемых препаратов нами in vitro и на этапах лечения больных было изучено влияние ронколейкина и реаферона и их комбинации с химиопрепаратами на VCS-показатели лейкоцитов. Особое внимание было уделено лимфоцитам и нейтрофилам - как клеткам-эффекторам противоопухолевой защиты организма.

Установлено, что лейкоцитарное звено крови больных реагирует на опухолевый процесс изменением в общем пуле соотношения долей клеток разного объема, ростом гетерогенности популяции и расширением интервала варьирования значений объема клеток. Выявлено достоверное увеличение объема (V) лимфоцитов и нейтрофилов. Показатели лазер-индуцированного светорассеяния (S) и электрической проводимости (С) в нейтрофилах - снижены, в лимфоцитах - повышены, что свидетельствует об изменениях клеточных структур.

После инкубации крови больных с химиопрепаратами наблюдалась отрицательная динамика изменений VCS-показателей: резкое уменьшение V клеток, изменение интенсивности S и С: в нейтрофилах - повышение, в лимфоцитах -снижение. Наибольшую устойчивость к воздействию цитостатиков продемон-

стрировали лимфоциты, численность которых снизилась незначительно; наименьшую - нейтрофилы.

Добавление в среду ронколейкина приводило к снижению интенсивности изменений УСБ-параметров, потери численности клеток, что указывало на активацию процесса внутриклеточной репаративной регенерации и о подавлении чувствительности клеток крови к воздействию химиопрепаратов за счет защитного действия ронколейкина. Следствием этого феномена явилось снижение гематологической токсичности АГХИТ, проявляющейся в стабилизации клеточных структур.

У больных с различной степенью регрессионного ответа на лечение мы расчетным путем определяли соотношение объема нейтрофилов к величине их светорассеяния, то есть индекс МУЫе/М8№. Установлено, что у всех больных до начала лечения значения данного показателя были всегда больше 1. В случаях клинического эффекта индекс М\ТМе/М5Ые снижался до нормативных значений (доноры) и принимал значения ниже 1. При стабилизации роста опухоли значения соотношения объема нейтрофилов к их светорассеянию оставались на исходном уровне и были всегда больше 1,0, что подтверждается проведенным дисперсионным анализом.

До начала лечения у больных рецидивным РШМ были угнетены основные звенья иммунной системы. После лечения у больных контрольной группы не выявлено статистически значимых отличий от исходных значений по большинству иммунологических показателей. Отмечено снижение процентного содержания и абсолютного количества лимфоцитов и уровня ^А (рис. 6).

У больных основной группы после АГХИТ регистрировалась иная позитивная динамика, а именно, статистически достоверное повышение процентного содержания Т-лимфоцитов, преимущественно, за счет хелперно-индуктор-ной субпопуляции (СБ4+); возрастание уровня БГЛ и процента функционально активных В-клеток, отвечающих в РБТЛ на ЛПС. Еще более выраженные изменения отмечены при исчислении показателей в абсолютных значениях: статистически достоверно повышаются уровни Т- и В-лимфоцитов, включая функ-

ционально активные, а также уровень ТЖ-клеток. Полученные результаты мы объясняем действием использованных ронколейкина и реаферона, направленных в условиях вторичного иммунодефицита в организме опухоленосителя на стимуляцию процессов дифференцировки, пролиферации, активации, миграции, а также эффекторных функций лимфоцитов различных популяций и субпопуляций. Как ШЫ-альфа, так и 1Ь-2 явились стимуляторами прежде всего Ти 1ЧК-звеньев иммунной системы, что не противоречит литературным данным (Ершов Ф.И., 1996; Ярилин А.А., 1999).

ЛЛ 100% фоновые

показатели ^ИИИИв^И

иищ. £

□ основная группа Яконтрольная группа

Рис. 6. Иммунологические показатели больных раком шейки матки после лечения; * - статистически достоверные отличия от фоновых показателей, р<0,05

Нами были изучены структура клеточных элементов крови, характер распределения клеток по их структурно-функциональным свойствам, а также ан-тиоксидантный статус лимфоцитов и нейтрофилов крови больных в зависимости от распространенности процесса, эффективности лечения и продолжительности жизни. Было найдено, что в лимфоцитах и нейтрофилах крови больных рецидивным раком шейки матки с метастазами показатель СОД/СПА превышал значения нормы соответственно в 4,1 ив 1,6 раза. В нейтрофилах крови больных без метастазов этот показатель не отличался от значений в норме, а в лимфоцитах превышал их на 51,6%. Значения коэффициента СОД/каталаза в лимфоцитах и нейтрофилах крови больных с метастазами увеличивались в 4,1 и

<ИТ

2.3 раза соответственно. Без метастазов этот показатель не имел достоверных отличий от соответствующих нормативных значений.

До лечения в лимфоцитах и нейтрофилах крови больных с метастазами найдено снижение витамина А в 5 и 37,5 раз соответственно; витамина Е - в

1.4 раза и 4,8 раз по сравнению с показателями доноров. При этом коэффициент соотношения E/A в лимфоцитах и нейтрофилах превышал контрольные значения соответственно в 4,3 и 7,8 раза. У больных без метастазов содержание витамина А было снижено соответственно в 5 и 23 раза, витамина Е - в 2,3 и 8 раз в сравнении с нормой. Значения коэффициента E/A в лимфоцитах и нейтрофилах были повышены в меньшей степени - в 2,8 и 3,4 раза соответственно. Эти изменения свидетельствуют о более глубоких нарушениях антиоксидантной системы лимфоцитов и нейтрофилов больных с большей прогрессией рака шейки матки.

Регрессионные процессы в основной группе сопровождались нормализацией большинства структурно-функциональных показателей мембран клеток крови, снижением до контрольного уровня содержания пероксинитрита и повышением антиоксидантной активности церулоплазмина.

Наблюдаемое при этом резкое увеличение интенсивности хемилюминес-ценции и повышение содержания среднемолекулярных продуктов, по-видимому, отражало интенсивный распад опухолевых масс. У больных со стабилизацией процесса показатели структурно-функционального состояния мембран клеток крови оставались на уровне фоновых величин или изменялись в еще большей степени, чем до начала лечения. Уровень пероксинитрита оставался повышенным, не наблюдалось увеличения активности церулоплазмина, а коэффициент эндогенной интоксикации был почти вдвое выше, чем у больных с большей эффективностью химиотерапии.

Регрессионные процессы в опухоли, происходящие под действием АГХТ, были связаны с сохранностью структурно-функционального состояния клеточных мембран лимфоцитов и нейтрофилов и перестройкой естественного каскада антиоксидантных ферментов форменных элементов крови на нормализацию.

При отсутствии регрессии сохранялась дискоординация в не ферментативном звене антиоксидантной системы и, очевидно, что это было обусловлено более тяжелыми исходными структурно-функциональными нарушениями мембран лимфоцитов и нейтрофилов крови больных. Очевидно, что использование рон-колейкина и реаферона совместно с АГХТ, усиливало положительное ее влияние и способствовало восстановлению нарушенных кооперативных взаимоотношений между лимфоцитами и нейтрофилами.

Двухлетняя выживаемость больных в основной группе составила 61,6+5,3, в контрольной - 28,1±9,1%. Разница в результатах лечения, составившая 33,4%, статистически значима (р<0,05) (рис. 7).

Медиана выживаемости больных в основной группе составила 20±4,1 месяца, в контрольной - 9+3,4 месяца (р<0,05). В обеих группах выживаемость больных, имевших только локорегионарные рецидивы, незначительно, (на 12,7%), превышала показатель у пациенток с метастазами (рис. 8).

100 80 60

40 20 0

87,9

6 12 18 24 месяцы

Рис. 7. Двухлетняя выживаемость больных с локальными рецидивами РШМ 100 -

80 ■ 60

40 20

73,5

. 46,5

64,6

29,5

55,3

24,5

55,3

Основная группа

21,8

■

Контрольная группа

6 12 18 24 месяцы

Рис. 8. Двухлетняя выживаемость больных с рецидивами и метастазами РШМ

Преимущества использования АГХИТ сохраняются как при лечении рецидивных процессов, так и в отношении очагов отдаленного метастазирования.

Идентичность состава и доз цитостатиков, используемых при проведении АГХТ в обеих группах, аналогичный методический подход к лучевому лечению позволяют считать, что именно использование ронколейкина и реаферона, инкубированных на аутокрови, повышает эффективность паллиативного хи-миолучевого лечения на 30%, то есть каждая третья больная с рецидивами и метастазами рака шейки матки получает шанс на продление жизни.

Таким образом, по всем проанализированным показателям клинической эффективности на однородных по составу двух группах больных, а также лабораторными исследованиями доказаны преимущества и необходимость использования АГХИТ с включением ронколейкина и парентерального введения реаферона на этапах паллиативной терапии больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки.

ВЫВОДЫ

1. Введение ронколейкина и реаферона в комплекс противоопухолевого лечения метастазов и рецидивов рака шейки матки основывается на их прямом цитолитическом эффекте in vitro: процент гибели клеток экспериментального рака шейки матки под воздействием иммуномодуляторов составил от 51% до 71%, при сочетании с цитостатиками - 84%. (р<0,05).

2. Разработанный метод многокурсовой аутогемохимиоиммунотерапии при рецидивном и метастатическом раке шейки матки обеспечивает регресс локального рецидива в 82,9% случаев, отдаленных метастазов - в 88,2%. Эффективность лечения без иммунологических препаратов (контрольная группа) ниже, где степень регрессии составляет 56,7% и 57,1% соответственно (р<0,05).

3. Положительный клинический эффект аутогемохимиоиммунотерапии представлен уменьшением доли выраженности болевого синдрома, лимфостаза и патологических выделений на 50%, 57,1% и 62,5% случаев соответственно. В контрольной группе клинические симптомы регрессировали в достоверно

меньшей степени: на 33,3%, 40%, 16,7% соответственно (р<0,05).

4. Включение ронколейкина и реаферона в схему многокурсовой аутоге-мохимиоиммунотерапии рецидивного и метастатического рака шейки матки нивелирует токсическое влияние цитостатиков: способствует двукратному снижению степени эндогенной интоксикации, снижению гематологической токсичности, восстановлению показателей клеточного иммунитета в сравнении с группой больных, подвергшихся только химиотерапии.

5. Ретроспективно установлено, что ряд лабораторных критериев определяет чувствительность рецидивного и метастатического рака шейки матки к много курсовой аутогемохимиоиммунотерапии. Коэффициент соотношения объема нейтрофилов к величине их светорассеяния менее 1,0 прогнозирует высокую чувствительность. Отсутствие эффекта лечения отмечено при фоновом трехкратном снижении содержания пероксинитрита и высоком (в 3 раза выше нормы) уровне нитрозилгемоглобина (р<0,001).

6. Многокурсовая аутогемохимиоиммунотерапия достоверно повышает продолжительность жизни: двухлетняя общая выживаемость составила 61,6% против 28,1% в контроле; медиана выживаемости - 20 месяцев, в контроле - 9, что позволяет рекомендовать данный метод в паллиативном лечении рецидивного и метастатического рака шейки матки. (р<0,05).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. При рецидивах и метастазах рака шейки матки целесообразно использовать при лучевом лечении сочетание аутогемохимиотерапии схемой «САР» с иммунотерапией ронколейкином и реафероном, инкубированными на аутокро-ви больных.

2. Для оценки эффективности проводимого лечения на его этапах целесообразно проводить мониторинг структурно-функциональных показателей клеток крови, а именно УСБ-параметров, что позволяет на раннем этапе проведения лечения определить его возможно малую эффективность и изменить тактику терапии.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Гуськова Е.А. Аутогемохимиоиммунотерапия (АГХТ) больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки / Е.А. Бараненкова (Е.А. Гуськова), Е.В. Вереникина, Н.И. Супрунова // Аннотации докладов и материалов на 61 Итоговой научной конференции молодых ученых. РГМУ, 20 апреля 2007 г. - Ростов Н/Д.-С. 140.

2. Гуськова Е.А. Исследование влияния химиопрепаратов на структурные показатели состояния мембран клеток крови больных с рецидивами рака шейки матки в опытах in vitro / И.А. Горошинская, Г.А. Неродо, Е.А. Гуськова, Е.В. Шалашная, Е.И. Сурикова, Л.А. Немашкалова, И.В. Нескубина, П.С. Качесова // Труды VI межвузовской конференции с международным участием «Обмен веществ при адаптации и повреждении», 18-19 мая 2007 г. - Ростов н/Д. - С. 4547.

3. Гуськова Е.А. Исследование влияния химиопрепаратов на интенсивность свободнорадикального окисления и структурные показатели состояния мембран клеток крови больных с рецидивами рака шейки матки в опытах in vitro / И.А. Горошинская, Г.А. Неродо, Е.А. Гуськова, Е.В. Шалашная, Е.И. Сурикова, Л.А. Немашкалова, И.В. Нескубина, П.С. Качесова // Материалы 5-й национальной научно-практической конференции с международным участием «Активные формы кислорода, оксида азота, антиоксиданты и здоровье человека». - Смоленск, 2007.- С. 277-279.

4. Гуськова Е.А. Структурные изменения клеток крови под влиянием ци-тостатиков у больных с метастазами и рецидивами рака шейки матки (in vitro) / Г.А. Неродо, Н.Е. Левченко, Е.А. Гуськова, Н.К. Гуськова // Сибирский онкологический журнал. - 2007. № 4 (24). - С. 80-83.

5. Гуськова Е.А. Иммунный статус больных рецидивным раком шейки матки в динамике лечения методом аутогемохимиотерапии с иммунотерапией / Е.Ю. Златник, Г.И. Закора, Е.А. Гуськова // Академический журнал Западной Сибири. - 2007. №5. - С. 83-86.

6. Гуськова Е.А. Аутогемохимиоиммунотерапия в лечении больных с генерализованной формой рака шейки матки / Ю.С. Сидоренко, Г.А. Неродо, Е.А. Гуськова // Тезисы в материалах V съезда онкологов и радиологов СНГ. - Ташкент, 2008.-С. 481.

7. Гуськова Е.А. Исследование влияния химиопрепаратов на уровень эндогенной интоксикации, интенсивность свободнорадикального окисления и мембранный аппарат клеток крови больных с рецидивами рака шейки матки в опытах in vitro / Е.В. Шалашная, И.А. Горошинская, Г.А. Неродо, Е.А. Гуськова, Е.А Сурикова, Л.А. Немашкалова, И.В. Нескубина, П.С. Качесова // Сибирский онкологический журнал. - 2008. № 2(26). - С. 50-54.

8. Гуськова Е.А. Обоснование применения ронколейкина и реаферона в качестве терапии сопровождения при рецидивном и генерализованном раке шейки матки / Е.Ю. Златник, Г.И. Закора, Е.А. Гуськова // Сборник в материалах XII Международной научной конференции и III Международной научной онкологической конференции, 29 апреля-07 мая 2008 г. - Эйлат, Израиль. - Ч. I,-С. 298-299.

9. Гуськова Е.А. Способ прогнозирования эффективности лечения рецидивов и метастазов рака шейки матки / Ю.С. Сидоренко, Е.А. Гуськова, Н.К. Гуськова, Н.Е. Левченко // Решение о выдаче патента от 20.10.2008 г. по заявке на изобретение № 2007137722/15(041258), приоритет от 11.10.2008 г.

10. Гуськова Е.А. Способ прогнозирования эффективности аутогемохи-миоиммунотерапии у больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки / Ю.С. Сидоренко, И.А. Горошинская, Г.А. Неродо, Е.А. Гуськова // Решение о выдаче патента от 8.10.2008 г. по заявке на изобретение №2007137724/15(041260), приоритет от 11.10.2007 г.

11. Гуськова Е.А. Способ лечения локорегионарных рецидивов и отдаленных метастазов рака шейки матки / Ю.С. Сидоренко, Л.Я. Розенко, Е.М. Франциянц, Е.А. Гуськова // Заявка на изобретение № 20081135581/14(014747), приоритет от 7.04.2008 г.

Печать цифровая. Бумага офсетная. Гарнитура «Тайме». Формат 60x84/16. Объем 1,0 уч.-изд.-л. Заказ № 1116. Тираж 100 экз. Отпечатано в КМЦ «КОПИЦЕНТР» 344006, г. Ростов-на-Дону, ул. Суворова, 19, тел. 247-34-88

Оглавление диссертации Гуськова, Екатерина Александровна :: 2009 :: Ростов-на-Дону

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОСОБЕННОСТИ РЕЦИДИВИРОВАНИЯ И МЕТАСТАЗИРО

ВАНИЯ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ И ПОДХОДЫ К ИХ ЛЕЧЕНИЮ обзор литературы).

Глава 2. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МАТЕРИАЛА, МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ И ЛЕЧЕНИЯ.

2.1. Клиническая характеристика групп больных и методов лечения.

2.2. Методы лабораторных исследований.

Глава 3. ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ РОНКОЛЕЙКИНА И РЕАФЕ

POIIA В КАЧЕСТВЕ ТЕРАПИИ СОПРОВОЖДЕНИЯ ПРИ РЕЦИДИВИРУЮЩЕМ И МЕТАСТАЗИРУЮЩЕМ РАКЕ ШЕЙКИ МАТКИ

В ИССЛЕДОВАНИЯХ IN VITRO.

3.1. Влияние иммунопрепаратов ронколейкина и реафероиа на состояние культуры клеток рака шейки матки in vitro.

3.2. Исследование влияния химиопрепаратов и ронколейкина па VCS-показатели клеток периферической крови больных РШМ (in vitro).

3.3. Влияние химиопрепаратов и их комбинации с ронколейки-ном на структурные показатели клеток крови больных РШМ (in vitro)

Глава 4. КЛИНИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ С

РЕЦИДИВАМИ И МЕТАСТАЗАМИ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ.

4.1. Обоснование выбранной тактики лечения больных.

4.2. Оценка клинической эффективности вариантов химиолуче-вого лечения больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки.

4.3. Непосредственные и отдаленные результаты лечения рецидивов и метастазов рака шейки матки.

4.4. Результаты исследования иммунного статуса больных в динамике лечения.

Глава 5. СОСТОЯНИЕ ЛЕЙКОЦИТАРНОГО, ЭРИТРОИДНОГО И ТРОМ

БОЦИГАРНОГО ЗВЕНЬЕВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ НА ЭТАПАХ АГХТ И АГХИТ РАСПРОСТРАНЕННЫХ ФОРМ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ.

5.1 Результаты исследования показателей периферической крови.

5.2 Изменение показателей антиокислительпой системы организма в процессе консервативной терапии больных с рецидивами рака шейки матки в зависимости от распространенности процесса и эффекта лечения.

5.3 Структурно-функциональное состояние мембран клеток крови и показатели эндогенной интоксикации у больных с рецидивным раком шейки матки при АГХИТ.

Глава 6. ПРОГНОСТИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ АГХИТ У БОЛЬНЫХ С РЕЦИДИВАМИ И МЕТАСТАЗАМИ

РАКА ШЕЙКИ МАТКИ.

6.1. Дисперсионный анализ в оценке прогностической значимости ряда структурно-функциональных показателей клеток крови в мониторинге АГХИТ больных с рецидивами и метастазами РШМ.

6.2. Разработка биохимического прогностического критерия оценки эффективности метода АГХИТ.

6.3. Разработка гематологического критерия оценки эффективности лечения больных и прогнозирования течения заболевания.

Введение диссертации по теме "Онкология", Гуськова, Екатерина Александровна, автореферат

Актуальность проблемы. Рак шейки матки (РШМ) является одним из самых распространенных злокачественных новообразований у женщин, занимая в структуре опухолей репродуктивных органов второе место после рака тела матки (Бебнева Т.Н., Прилепская В.Н., 2001; Урманчеева А.Ф., Мерабишвили В.М., Сельков С.А. и соавт., 2001; Новик В.И., 2002; Воробьева Л.И., Жилка Н.Я., 2003; Бородин Ю.И. и соавт., 2004). Стандартизованный показатель заболеваемости РШМ в России колеблется в пределах 11-14 на 100 тыс. женского населения (Бохман Я.В., 1989, 2002; Новик В.И., 2002), в то время как в Ростовской области он составляет 19,6. В последние годы отмечена тенденция к росту заболеваемости среди молодых женщин в возрастной группе до 40 лег с максимальными показателями заболеваемости среди лиц в возрасте до 29 лет (Прилепская В.Н., Конд-риков Н.И., Бебнева Т.Н., 2000; Чиссов В.И., Старипский В.В., Петрова Г.В. и соавт., 2004; Трушина О.И., Новикова Е.Г., 2005). Следовательно, заболеванию подвержена репродуктивно значимая часть женского населения, а также — наиболее активная и в социальном отношении.

Рак шейки матки первично у 30% больных выявляется в III—IV стадиях; проводимая сочетано лучевая терапия зачастую малоэффективна и, как правило, больные погибают от рецидивов и метастазов. Таким образом, рецидивы и метастазы являются основными причинами неудач лечения РШМ.

Большая часть рецидивов РШМ диагностируется в течение первых 2-х лет после окончания лечения (ранние рецидивы). Достаточно высоким остается и процент рецидивов в ближайшие 5 лет после лечения - поздние рецидивы, составляющие 30-40% (Баранов С.Б., Гусейнов К.Д., 2003). С наибольшей частотой рецидивы возникают в параметралыюй, парарек-тальной, паравезикальной клетчатке таза и в культе влагалища (Бохман Я.В., 2002). Для РШМ характерно длительное местное или местно-регионарное распространение. Местно-регионарпое распространение приводит к гематогенному метастазированию, чаще всего в печень, легкие, кости. Как правило, гематогенные метастазы РШМ встречаются в сочетании с лимфогенными.

В большинстве случаев диссеминация злокачественных клеток происходит по лимфатическим сосудам (Pepper M.S., 2000; Wang Н. et al., 2001; Seci S., Fudjimura A., 2003). Переход опухоли от местно-инфильт-ративного роста к лимфогенному распространению считается прогностически неблагоприятным, являясь одним из первичных механизмов, приводящих к смерти больных. У значительной части больных РШМ уже при первичном обращении выявляются лимфогенные метастазы. Лимфогенные метастазы РШМ в первую очередь поражают подвздошные лимфоузлы (Бохман Я.В., 2002).

Лечение рецидивов и метастазов РШМ является сложной клинической задачей, что обусловлено относительной резистентностью плоскоклеточного гинекологического рака к большинству имеющихся цитостатиков, развитием массивных постлучевых изменений окружающих тканей, затрудняющих подвод адекватных доз препарата к опухолевому очагу, а также — вследствие поражения мочевыводящих путей.

При возникновении рецидивов заболевания и появлении отдаленных метастазов условным стандартом лечения на современном этапе принято проведение курсов химиотерапии с препаратами платины. Однако, результаты комбинированной химиотерапии (как непосредственные, так и отдаленные) являются недостаточно удовлетворительными (Тархов А.В., 2005). Лимитирующим моментом использования цитостатических препаратов является также выраженная общетоксическая реакция. Доказано, что реальным способом повышения эффективности противоопухолевой терапии является уменьшение побочных явлений цитостатиков (Сидоренко Ю.С., 2002). К факторам, повышающим эффективность химиотерапии, могут быть отнесены методы введения цитостатических препаратов с использованием естественных биологических сред.

Развитие РШМ сопровождается существенными изменениями иммунитета, тем более, что в этиопатогенезе этого заболевания имеют определенное значение вирусные агенты (Киселев Ф.Л., 2000; Коломиец JT.A., Уразова Л.Н., 2002; Козлова В.И., Пухнер А.Ф., 2003; Трушина О.И., Новикова Е.И., 2005; Syrjanen К., 1990; 2000; Мс Murray H.R. et al., 2001; Bosch F.X., Lorincz A., Munoz N. et al., 2002).

Многообразие и глубина нарушений иммунного статуса, характерные для онкологических больных, в том числе и РШМ, диктуют необходимость иммунокоррекции у больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки.

В настоящее время в лечении злокачественных новообразований применяются рекомбинантные цитокины: ронколейкип, реаферон (Жари-нов Г.Н. и соавт., 2002; Молчанов О.Е. и соавт., 2001, 2002, 2002, 2003; Лихванцева В.Г. и соавт., 2003, 2005; Злагник Е.Ю., Голотина Л.Ю., 2005; Падруль В.М., 2006).

Перспективным направлением развития лечебных режимов с использованием указанных препаратов является поиск эффективных комбинаций последних с химиопрепарагами, в числе которых блеомицин, циегшатин, циклофосфан (Молчанов О.Е., Карелин М.И., Школьник М.И., 2002).

Академиком РАН и РАМН профессором Ю.С. Сидоренко предложен и внедрен в практику новый метод системной химиотерапии - аутогемо-химиотерапии (АГХТ), высокая эффективность которого обусловлена значительным повреждающим действием на опухолевые клетки и низкой токсичностью. В основе противоопухолевого действия АГХТ — связывание химиопрепаратов с форменными элементами крови и плазмой (Бордюш-ков Ю.Н., 2000; Сидоренко Ю.С., 2002), что значительно продлевает время циркуляции препарата в крови в высокой концентрации (Солдаткина Н.В., 2000; Солдаткина Н.В. и соавт., 2006). Метод нашел широкое применение в лечении злокачественных новообразований различных локализаций (Ма-лейко М.Л., 1998; Касьяненко В.Н., 2001; Зинькович С.А., 2005) и может быть использован, на наш взгляд, в паллиативном лечении рецидивов и метастазов РШМ.

В этой связи, при лечении рецидивов и метастазов РШМ представляется актуальным применение новых комбинаций химиопрепаратов на биологических средах организма в сочетании с методами иммунологического сопровождения, в частности, цитокинотерапии ронколейкином и/или реа-фероном, а также — совершенствование способов их введения, позволяющих минимизировать общетоксическое воздействие химиотерапии на организм, не снижая эффективности лечения.

Высокая частота рецидивов и метастазов РШМ, в том числе, возникающих в ранние сроки после лечения, ограниченные возможности их лечения, необходимость поиска критериев, позволяющих оценить эффективность методов терапии больных, и определили актуальность данного исследования.

Цель исследования. Улучшение результатов лечения больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки путем сочетания аутогемохи-мио- и аутогемоиммунотерапии с лучевым воздействием.

Поставленная цель достигалась решением следующих задач:

1. исследовать влияние цигокинов: ронколейкина и реаферона па клетки экспериментального рака шейки матки и структурно-функциональные характеристики клеток периферической крови in vitro;

2. разработать метод комбинированного лечения рецидивов и метастазов рака шейки матки, включающий сочетание аутогемохимиотерагши с аутогемоиммунотерапией и лучевым воздействием;

4. изучить влияние аутогемохимиоиммунотерапии на иммунный статус, структурно-функциональные характеристики мембран клеток крови, степень выраженности эндогенной интоксикации, состояние лейкоцитарного, эритроидного и тромбоцитарного звеньев периферической крови на этапах лечения;

Научная новизна исследования.

В диссертационной работе впервые:

- разработан новый способ комбинированного лечения рецидивов и метастазов рака шейки матки, включающий совместное использование ау-тогемохимио- и аутогемоиммунотерапии в дополнении с лучевой терапией (Заявка па изобретение № 2008113581/14 (014747), приоритет от 07.04.2008 г.);

- изучена взаимосвязь показателей клеточного иммунитета, интенсивности свободнорадикальных процессов и структурно-фупкционалыюго состояния мембран клеток крови при различной эффективности лечения;

- установлена прогностическая значимость фоновых значений уровней пероксинитрита и нитрозилгемоглобина в мониторинге эффекта аутогемохимиоиммунотерапии у больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки (Решение о выдаче патента РФ от 8.10.2008 г. по заявке № 2007137724 (15) (041260);

- установлена прогностическая значимость изменений коэффициента MVNe/MSNe в оценке эффективности аутогемохимиотерапии и дальнейшего течения заболевания у больных с рецидивами и метастазами рака шейки матки (Решение о выдаче патента РФ от 20.10.2008 г. по заявке № 2007137722/15 (041258).

Практическая значимость исследования

Предложен спектр иммунотерапевтических препаратов для аутоге-моиммунотерапии и разработана оптимальная схема чередования курсов лекарственного и лучевого воздействия при лечении рецидивов и метастазов рака шейки матки.

Сочетание аутогемохимиотерапии с аутогемоиммуногерапией и лучевой терапией обладает минимальной токсичностью и дает возможность проведения лучевой терапии в запланированном объеме.

Разработанная методика лечения — аутогемохимиоиммунотерапия рецидивного и метастатического рака шейки матки технически проста, не требует специального оборудования и может быть использована в любом онкологическом учреждении.

Внедрение результатов исследования в практике здравоохранения

Основное положение, выносимое на защиту

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 научных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 223 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, характеристики материала и методов исследования, 6 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций. Указатель литературы включает 347 литературных источников (249— отечественных и 98 — зарубежных), работа содержит 43 таблицы и 22 рисунка.

Заключение диссертационного исследования на тему "Оптимизация методов лечения рецидивов и метастазов рака шейки матки"

ВЫВОДЫ

2. Разработанный метод многокурсовой аутогемохимиоиммунотера-пии при рецидивном и метастатическом раке шейки матки обеспечивает регресс локального рецидива в 82,9% случаев, отдаленных метастазов - в 88,2%о. Эффективность лечения без иммунологических препаратов (контрольная группа) ниже, где степень регрессии составляет 56,7% и 57,1%) соответственно (р<0,05).

3. Положительный клинический эффект аутогемохимиоиммунотера-пии представлен уменьшением доли выраженности болевого синдрома, лимфостаза и патологических выделений на 50%), 57,]% и 62,5% случаев соответственно. В контрольной группе клинические симптомы регрессировали в достоверно меньшей степени: на 33,3%, 40%, 16,7% соответственно (р<0,05).

4. Включение ронколейкина и реаферона в схему многокурсовой аутогемохимиоиммунотерапии рецидивного и метастатического рака шейки матки нивелирует токсическое влияние цитостатиков: способствует двукратному снижению степени эндогенной интоксикации, снижению гематологической токсичности, восстановлению показателей клеточного иммунитета в сравнении с группой больных, подвергшихся только химиотерапии.

5. Ретроспективно установлено, что ряд лабораторных критериев определяет чувствительность рецидивного и метастатического рака шейки матки к многокурсовой аутогемохимиоиммунотерапии. Коэффициент-соотношения объема нейтрофилов к величине их светорассеяния менее 1,0 прогнозирует высокую чувствительность. Отсутствие эффекта лечения отмечено при фоновом трехкратном снижении содержания пероксинитрита и высоком (в 3 раза выше нормы) уровне нитрозилгемоглобина (р<0,001).

6. Многокурсовая аутогемохимиоиммунотерапия достоверно повышает продолжительность жизни: двухлетняя общая выживаемость составила 61,6% против 28,1% в контроле; медиана выживаемости — 20 месяцев, в контроле - 9, что позволяет рекомендовать данный метод в паллиативном лечении рецидивного и метастатического рака шейки матки. (р<0,05).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

2. Для оценки эффективности проводимого лечения на его этапах целесообразно проводить мониторинг структурно-функциональных показателей клеток крови, а именно VCS-параметров, что позволяет на раннем этапе проведения лечения определить его возможно малую эффективность и изменить тактику терапии.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Гуськова, Екатерина Александровна

1. Абдулкадыров К.М., Рукавицыи О.А., Бессмелъцев С.С. Малые дозы препаратов альфа-интерферона в лечении больных хроническим мие-лолейкозом // Терапевт, архив. 2000. - Т.72. — №7. — С. 22-27.

2. Абраров А.А., Сабирова Р.А., Кадырова М.А., Юнусова Д.Ф. Влияние токоферола и ретинола на некоторые метаболические показатели в легочной ткани // 5 конф. биохимиков респ. Средней Азии и Казахстана. Тезисы докл. Ташкент, 1991, 12-15 ноября. - С. 265.

3. Айрапетов КГ. Традиционная и модифицированная аутогемо-химиотерапия в комплексном лечении больных неходждкинскими лимфо-мами: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Ростов н/Д, 2002. - 29 с.

4. Александров В.Я. Реактивность клеток и белки. — Л.:Наука, 1985.

5. Аитонишкис Ю.А. Сегментация ядер нейтрофилов: новый взгляд на природу явления // Клиническая лабораторная диагностика. -2006. №8. - 2006. - С. 22-25.

6. Афифи А., Эйзен С. Статистический анализ: Подход с использованием ЭВМ / Пер. с англ. М.: Мир, 1982. - 488 с.

7. Афонина Г.Б., Брюзгина Т.С., Русин Е.В. и др. Свободнорадикаль-ные механизмы формирования иммунных дисфункций // Свободнорадикаль-ные процессы: Эпидемиологические, фармакологические и клинические аспекты. Цитология. 1999. - Т.41. - №49. - С. 766.

8. Балътер С.А. Основы клинической топомегрии в онкологии. — М.: Медицина, 1986. 256 с.

9. Барабой В.А., Зинченко В.А. Вторичная радиорезистентность опухолевых клеток и пути ее преодоления // Ж. Акад. Мед. наук Украши. 1999. -5,№ 3. - С. 453-469.

10. Баранов С.Б., Гусейнов К.Д. Оценка эффективности предоперационной химиолучевой терапии больных раком шейки матки T1B-2ABN0-1М0 // Вопросы онкологии. 2003. - Т.49. - №5. - С. 612-614.

11. Бебнева Т.Н., Прилепская В.Н. Папилломавирусная инфекция и рак шейки матки // Практическая гинекология. — 2001. Т. 3 (3). - С. 77-82.

12. Белокриницкая Т.Е., Витковский Ю.А. Состояние защитных систем и их коррекция при эндометритах после родов и кесарева сечения. -Чита: «Поиск», 1999. 121 с.

13. Белокриницкая Т.Е., Витковский Ю.А., Пономарева Ю.Н. Роль цитокинов в возникновении нарушений иммунитета и гомеостаза больных раком шейки матки // Материалы 11 Рос. форума «Мать и дитя». М., 2000. -С. 186-187.

14. Белокриницкая Т.Е., Витковский Ю.А., Пономарева Ю.Н. Роль цитокинов в патогенезе нарушений иммунитета и гемостаза у больных с тяжелыми дисплазиями и раком шейки матки // Вопросы онкологии. 2003. — Т.49 (1).-С. 51-54.

15. Вельская Н.В., Вельский Ю.П., Патрушев В.К. и др. Иммуносу-прессорная активность костно-мозговых клеток мышей при гиперчувстви-телыюсти немедленного типа /НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН (Томск) // Иммунология. 2004. - Т. 25. - № 4. - С. 213-215.

16. Вельский Ю.П., Данилец М.Г., Вельская Н.В. и др. Роль оксида азота в иммуносупрессорной и противоопухолевой активностях клеток эмбриональной печени // Бюлл. Сибирского отделения РАМН: ежеквартальный научно-теоретический журнал. 2005. - № 2. - С. 75-78.

17. Бережная Н.М., Чехун В.Ф. Иммунология злокачественного роста. Киев: Наукова думка, 2005. — 790 с.

18. Бессмельцев С.С., Абдулкадыров A.M. Альфа-2А-Интерферон (реаферон) в лечении больных множественной миеломой // Журнал? — 1999.-Т. 45.-№4.-С. 393-397.

19. Бирюкова А.А. Аутомиелохимиотерапия в лечении рецидивов рака яичников: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — Ростов н/Д, 2006. — 26 с.

20. Бойко К.П. Особенности комплексного ультразвукового исследования с применением современных технологий визуализации при раке шейки матки: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — Ростов н/Д, 2008. — с. 22.

21. Бордюшков Ю.Н. Исследование экспериментальных данных для улучшения результатов аутогемо- и аутомиелохимиотерапии // Высокие технологии в онкологии: Материалы V Всерос. Съезда онкологов. — Казань, 2000. Т.З. - С. 307-308.

22. Бордюшков Ю.Н., Галенко-Ярошевский П.А., Шапошников А.В. и др. Изучение возможности улучшения результатов химиотерапии с помощью фармакологических препаратов // Аутолимфохимиотерапия и другие вопросы онкологии. — М., 1997. — С. 278-282.

23. Боровиков В. STATIST1CA: искусство анализа данных на компьютере, 2 издание. Питер. 2003. Аннотация. — 18 с.

24. Бохман Я.В. Руководство по онкогинекологии. Л., 1989. - 464 с.

25. Бохман Я.В. Руководство по онкогинекологии. СПб.: «Фолиант», 2002. - 544 с.

26. Бохман Я.В., Вишневский А.С., Максимов С.Я., Урманчеева А.Ф. Петербургская школа онкогинекологии: некоторые итоги и перспективы // Вопросы онкологии. 1997. - Т. 43. - №1. - С. 39-46.

27. Бохман Я.В., Лютра У.К. Рак шейки матки. Кишинев-Штиинца: Cervical cancer, 1991. -238 с.

28. Браун А.Д., Моженок Е.П. Неспецифический адаптационный синдром клеточной системы. // Наука, Л.-1987.

29. Важенин А.В., Кондакова Е.Ю., Титова В.А. Особенности многокомплексного лечения запущенных форм рака шейки матки с применением индукционной полихимиотерапии // Лучевая терапия рака шейки матки. Очерки. — Челябинск, 2002. С. 144-202.

30. Ванин А.Ф. Д инитрозильные комплексы железа эндогенные сигнальные агенты в клетках и тканях животных и человека (Гипотеза) // Биофизика. - 2004. - Т. 49. - Вып. 4. - С. 581-586.

31. Васильев Б.В., Бохман Я.В., Чепнк О.Ф. и др. Опыт клинического применения человеческого лейкоцитарного интерферона при раке шейки матки // Вопросы онкологии. 1986. — Т. 39. — № 3. — С. 68-71.

32. Вишневская Е.Е., Океанова Н.И., Матылевич О.П. Непосредственные и отдаленные результаты комбинированного лечения рака шейки матки II стадии //Вопросы онкологии. 1999. - Т.45. -№.4. - С. 416-419.

33. Вишнякова Е.Е., Косенко И. А. Отдаленные результаты комплексной терапии больных рака шейки матки с неблагоприятным прогнозом // Вопросы онкологии. 1999. - Т. 45. - №4. - С. 420-423.

34. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Соросовский образовательный журнал. 2000. - Т.6. - №12. - С. 13-19.

35. Владимиров Ю.А., Азизова О.А., Деев А.И. и др. Свободные радикалы в живых системах. Биофизика. Итоги науки и техники ВНИИТИ АН СССР. М., 1991. - Т.29. - 252 с.

36. Владимиров Ю.А., Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран. -М.: Наука, 1980. 320 с.

37. Владилшрова Л.Ю. Неоадъювантная химиотерапия на естественных средах организма с применением пептида эпифиза эпиталамина в комплексном лечении местнораспространенного рака молочной железы: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — Ростов н/Д, 2000. — 32 с.

38. Владимирова Л.Ю. Результаты аутоплазмохимиотерапии диссе-минированного рака молочной железы // Актуальные вопросы теоретической, экспериментальной и клинической онкологии. М., 2006. - С. 119-130.

39. Внуков В.В. Железосодержащие белки и протеолитическая активность в сыворотке крови при гипероксии и защитном действии мочевины // Автореф. дис. . канд. биол. наук. Харьков, 1979. -23 с.

40. Воробьева Л.И., Жилка Н.Я. Анализ деятельности онкологической службы Украины в 2002 году. — Киев, 2003. — 14 с.

41. Вотякова О.М., Демина Е.А. Поддерживающая терапия альфа-интерфероном при множественной меланоме // Современная онкология. -1999.-Т. 1.-№1.-С. 49-53.

42. Габриэллн Н.И., Левицкий Э.Р., Дмитриев А. А. и др. Скрининго-вый метод определения средних молекул в биологических жидкостях. Методические рекомендации. — М., 1985. — 25 с.

43. Габриэлян Н.И., Липатова В.И. Экспресс-метод оценки степени тяжести состояния больных (Патент РФ № 2168165) // Лаб. дело. 1984. -№3. С. 138-140.

44. Галкина С.Н. Влияние различных форм витамина А и его сочетания с витамином Е на перекисное окисление липидов // Вопросы мед. химии.- 1984. Т.30. - №4. - С. 91-94.

45. Гарин A.M. Скромные успехи лекарственного лечения трех дис-семенированных или местнораспространенных форм опухолей, считавшихся в начале 90-х годов химиорезистентными // Современная онкология. -2000. -Т.2.-№4.-С. Ю4-107.

46. Гершанович М.Л. Осложнения при химио- и гормонотерапии злокачественных опухолей. — М., 1982. — 224 с.

47. Гершанович М.Л. Применение ИЛ-2 (пролейкина, алдеслейкина) в онкологической практике // Вопросы онкологии. 2003. - Т. 49. - №6.- С. 776-782.

48. Гилязутдинова З.Ш., Михайлов М.К. Рак шейки матки. М.: МЕДпресс, 2000. - 384 с.

49. Гогадзе Д.Г., Чарквиани Л.И., Цинцадзе И.Г., Данелия Э.В. Пути улучшения эффективности экзентерации при онкологических заболеваниях // Материалы 1 съезда онкологов стран СНГ. М., 1996. - Т.2. - С. 451-452.

50. Голдобенко Г.В., Канаев С.В. Факторы прогноза и возможностьиндивидуализации лучевого лечения онкологических больных // Вопросы онкологии. 2000. - Т. 46. - С. 361-365.

51. Голъдберг Е.Д., Дыгай A.M., Шахов В.П. Методы культуры тканей в гематологии. — Томск, 1992. 272 с.

52. Гублер Е.В., Генкин А.А. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях. Л.: Медицина, 1973.- 141 с.

53. Давыдов М.И., Аксель Е.М. Заболеваемость и смертность от злокачественных новообразований населения России и стран СНГ в 2004 г. // Материалы IV Съезда онкологов и радиологов СНГ. Баку, 2006. - Т. 1-2. -С. 48-51.

54. Давыдов М.И., Нормантович В.А., Киселевский М.В. и др. Адаптивная иммунотерапия при опухолевых плевритах // Рос. онкологич. журнал. 2000. - № 6. - С. 5-9.

55. Девятченко Т.Ф., Филатова Н.С., Коротина Л.А. и др. Особенности локализации и диагностики рецидивов рака шейки матки // Сб. Частные вопросы практической онкологии. — Волгоград, 1995. Т.51. -Вып. З.-С. 50-53.

56. Демидова JI.B., Бойко А.И., Борисов В.И., Телеус Т.А. Химиолу-чевое лечение местнораспространенных форм рака шейки матки // Материалы межрегиональной конф. «Актуальные вопросы мед. радиологии». -Челябинск, 1997. С. 91-92.

57. Дэюабаров Ф.Р. Комплексное лечение больных неоперабельными формами злокачественных новообразований: Автореф. дис. .докт. мед. наук. Ростов н/Д, 2008. - 48 с.

58. Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании клеток, мембран и липопротеинов. М.: Наука, 1989. - 276 с.

59. Дунаева Е.А. // Сб. Актуальные вопросы клинической и экспериментальной онкологии. Материалы межрегиональной научно-практич. конф. молодых ученых. М., 1999. - С. 108—111.

60. Дятловицкая Э.В. Сфинголипиды и злокачественный рост. // Биохимия. 1995. Т.60. вып. 6. С. 843-850.

61. Дятловицкая Э.В., Кандыба А.Г. Роль биологически активных сфинголипидов в опухолевом росте // Биохимия. — 2006. — Т. 71. №1. -С. 17-25.

62. Ермакова Н.А. Роль химиотерапии на различных этапах лечения рака шейки матки // Практическая онкология. — 2002. — Вып. 3. №3. -С. 211-219.

63. Ершов Ф.И. Система интерферона в норме и при патологии. -М., 1996.-240 с.

64. Ефимов А.Г. Медицинская реабилитация пожилых больных раком шейки матки после сочетанной лучевой терапии: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Волгоград, 2001. - 23 с.

65. Жаринов Г.М., Молчанов О.Е., Агафонова М.В., Румянцев С.Ю. Первый опыт локальной иммунотерапии онкологических больных // Цито-кины и воспаление. — 2002. Т. 1. - № 2. - С. 75.

66. Забунов А.В., Дударева JI.A. Непосредственные результаты комбинированной химиотерапии распространенных форм и рецидивов рака шейки матки винкристином, платидиамом и адриамицином // Вопросы онкологии. 1991. - Т. 37.-№ 11-12.-С. 1090-1094.

67. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс: Биохимический и патофизиологический аспекты. — М.: МАИК «Наука/Интерпериодика», 2001. 343 с.

68. Зенков Н.К., Меньшикова Е.Б. Активированные кислородные метаболиты в биологических системах // Успехи современной биологии. -1993.-Т. 113,-Вып.З. С. 286-296.

69. Зинчук В.В. Участие оксида азота в формировании кислородсвя-зывающих свойств гемоглобина // Успехи физиологических наук. 2003. - Т.34. - № 2. - С. 33^45.

70. Зинъкович С.А. Интраоперационная аутогемохимиотерапия в лечении рака легкого: Автореф. дис. . докт. мед. наук. Ростов н/Д, 2005.-55 с.

71. Златник Е.Ю. Роль иммунной системы в реализации эффектов химиотерапии на аутологичных жидких тканях у онкологических больных: Автореф. дис. . докт. мед. наук. — Ростов н/Д, 2003. — 51 с.

72. Златник Е.Ю., Голотина Л.Ю. Изучение возможности применения ронколейкина для LAK-терапии рака яичника // Цитокины и воспаление. 2005. - 4(2). - С. 54-58.

73. Златник Е.Ю., Нестерова Ю.А., Закора Г.И., Никипелова Е.А. Применение ронколейкина в комплексном лечении злокачественных новообразований у детей // Детские инфекции. — 2005. — Т.4. — №2. — С. 56-59.

74. Златник Е.Ю., Чилингарянц С.Г., Закора Г.И. Действие адъю-вантной АГХТ на иммунный статус больных раком легкого // Актуальные вопросы теоретической, экспериментальной и клинической онкологии. -М., 2006.-С. 221-228.

75. Зыкин Б.И., Медведев М.В. Допплерография в гинекологии // Акушерство и гинекология, М., 2000. — С. 152.

76. Извекова В.А. Липиды мембран и функции иммунокомпетентных клеток // Успехи современной биологии. 1991. - Т.З. - Вып. 4. - С. 577—590.

77. Ильиных JI.B. Влиянии ронколейкина на состояние иммунитета и гомеостаза больных раком гортани: Автореф. дис. . канд. мед. наук. -Чита, 2001.-22 с.

78. Кадагидзе З.Г. Иммунодиагностика и иммунотерапия опухолей // Вестник РАМН. 1999. - №5. - С. 19-22.

79. Кадагидзе З.Г., Заботина Т.Н., Короткова О.В. Особенности иммунологического статуса у онкологических больных //. Мед. иммунология. 2002. - Т. 4. - №2. - С. 296.

80. Канаев С.В., Туркевич В.Г., Абакумова В.В. Результаты сочетан-ной лучевой терапии рака шейки матки // Материалы научной конф.: Актуальные вопросы медицинской радиологии. — СПб., 1998. — С. 271.

81. Карякин О.Б., Гришин Г.Н., Володина Т.В. Диагностика и лечение метастазов рака мочевого пузыря // Урология и Нефрология. 1997. - №2. — С. 22-25.

82. Касьяненко В.И. Неоадъювантная аутогемохимиотерапия мест-но-распространенного рака ободочной кишки: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Ростов н/Д, 2001. - 25 с.

83. Киндзелъский Л.П., Бутенко А. К. Естественные клетки-киллеры и их роль в противоопухолевой защите организма // Экспериментальная онкология. 1983. - Т.5. - №3. - С. 3-6.

84. Киселев Ф.Л. Вирус-ассоциированные опухоли человека: рак шейки матки и вирусы папиллом // Биохимия. 2000. - Т. 65. - Вып. 1. - С. 79-91.

85. Киселева Е.С. Лучевая терапия злокачественных опухолей. Руководство для врачей. М., 1996. - 464 с.

86. Киселевский М.В., Казакова Г.В., Варфоломеева С. Р. и др. Опыт применения интерлейкина-2 и лимфокинактивированных клеток-киллеров в терапии онкогематологических заболеваний у детей // Иммунология. -2002.-Т. 23.-№ 1,-С. 56-59.

87. Классификация TNM злокачественных опухолей / Перевод с анг. 6 изд. СПб.: Эскулап. - 2003. - 243 с.

88. Князева М.В., Павлова Т.Д. и др. Перекисное окисление липидов, антиоксидантная система: связь с метаболической активностью опухоли и прогнозом течения рака яичников // Тезисы докл. II съезда онкологов стран СНГ. Киев, 2000. - № 1020.

89. Козаченко В.П. Рак шейки матки // Современная онкология. -2000. Т. 2. - № 2. - С. 40^14.

90. Козаченко В.П., Рамараджапалли М.Л. Клиника, диагностика и лечение аденокарциномы рака шейки матки // Проблемы современной онкологии: тезисы докладов IV Всеросс. съезда онкологов. Ростов н/Д, 1995.-С. 544-546.

91. Козель Ю.Ю. Лимфохимиотерапия в комплексном лечении мс-стно-распространенного рака органов полости рта и ротоглотки: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Ростов н/Д, 2001.-33 с.

92. Козлов В.К, Молчанов О.Е., Жаринов Г.М. Иммунотерапия ре-комбинантными цитокинами в лечении онкологических больных // Ронколейкин в онкологической практике. Сб. статей. — СПб., 2003. С. 6-18.

93. Козлова В.И., Пухнер А.Ф. Вирусные, хламидийные и микоплаз-менные заболевания гениталий. Руководство для врачей. Изд. 6-е, обновленное и дополненное. М., 2003. - 440 с.

94. Колб В.Г., Камышников B.C. Справочник по клинической химии. -Минск, 1982.-326 с.

95. Коломиец Л.А., Уразова Л.Н. Генитальная папилломавирусная инфекция и рак шейки матки. Томск, 2002. - 100 с.

96. Коломиец Л.А., Уразова Л.Н., Севастьянова Н.В., Чуруксаева О.Н. Клинико-морфологические аспекты цервикальной папилломавирусной инфекции // Вопросы онкологии. 2002. - Т.48. — №1. — С. 43-46.

97. Корман Д.Б., Потапов С.Л., Шамаев В.И. и др. Ненасыщенность липидов крови у больных раком молочной железы // Известия АН. Серия Биологическая. 1995. - №1. - С. 19-24.

98. Кормаш Н.Г., Лактионов К.П., Чеснокова А.А. Уровень пере-кисного окисления липидов в крови как фактор прогноза у больных с распространенным раком яичников // Тезисы докл. II съезда онкологов стран СНГ. Киев, 2000. - № 1022.

99. Королюк М.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г., Токарев В.Е. Метод определения активности каталазы // Лаб. дело. 1988. - № 1. - С. 16-18.

100. Короткина Р.Н., Мацкевич Г.Н., Панова Н.В. и др. Исследование ферментов обмена глутатиона в злокачественных новообразованиях легких и вилочковой железы //Рос. онкологич. журнал. — 1999. — № 2. С. 21—24.

101. Косенко И.А., Таргонская Г. С., Шалковский И.II. Рецидивы и метастазы после сочетанной лучевой терапии рака шейки матки // Материалы I съезда онкологов стан СНГ. М., 1996. — Т.2. — С. 461.

102. Косников А.Г., Баранов С.Б., Зельдович Д.Р. и др. Выбор адекватного лечения больных раком шейки матки TiNoMo // Актуальные вопросы онкологии. Материалы Междунар. симп. СПб., 1996. — С. 193—195.

103. Кравец Б.Б., Костенко С.М., Потапов Ю.Н. и др. Лечение больных генерализованными формами рака почек // Сб. научн. Трудов: Прикладные информационные аспекты медицины. ВГМА, 1999. — Т. 2. - №4.- С. 27-30.

104. Крейнина Ю.М., Титова В.А., Горбунова В.В. Химиолучевое лечение местно-распространенного рака шейки матки: оптимизированная лучевая терапия и химиотерапия // Рос. онкологич. журнал. — 2003. — № 5. -С. 4-11.

105. Крейнина Ю.М., Титова В.А., Шишлова А.Н. и др. Оптимизация послеоперационной лучевой терапии в комплексном лечении рака шейки матки 2—3 стадии // Вопросы онкологии. 2006. - Т. 52. - № 1. - С. 83-88.

106. Крикунова Л.И. Лучевая терапия рака шейки матки // Практическая онкология. 2002. - Т. 3 (3). - С. 194-199.

107. Кузнецов В.В., Лебедев А.И., Морхов К.Ю., Нечушкина В.М. Диагностика и лечение рака шейки матки в России // Вестник Рос. онкологич. научн. центра им. Н.Н. Блохина. 2006. - Т. 17. - №2. - С. 27-28.

108. Кузьмина Е.Г., Дорошенко Е.Л., Пантелеева Е.С. и др. Иммунный статус больных раком шейки матки 1—3 стадий при сочетанном лучевом лечении // Мед. иммунология. -1999. Т. 1. - № 3—4. - С. 99-100.

109. Кузьмина Е.Г., Пантелеева Е.С., Неприна Г.С. и др. Иммунный статус пациентов с поздними лучевыми повреждениями, развившимися в отдаленные сроки после комбинированного лечения // Мед. иммунология.- 1999.-Т. 1. -№3-4. С. 102.

110. Кулаков В.И., Тохиян А. А. Проблемы злокачественных новообразований репродуктивной системы в практической гинекологии // Журнал акушерства и женских болезней. 2001. - Вып. 1. — Т. XLX. - С. 9-13.

111. Лаврова B.C., Чердынцева Н.В., Васильев Н.В. и др. Нейтрофилы и злокачественный рост. Томск, 1992. — 130 с.

112. Лакин Г.Ф. Биометрия. Издание 3-е. — М.: Высшая школа, 1980.- 293 с.

113. Лакин Г.Ф. Биометрия: учебное пособие для биологических специальностей вузов. М.: Высшая школа, 1990. — 352 с.

114. Лебедев А.И. Клиническая оценка эффективности комбинированного метода лечения больных плоскоклеточным раком шейки матки IB1 и IB2 стадии // Вестник Рос. онкол. научи, центра им. Блохина РАМН.- 2000. №3. — С. 34^12.

115. Лебедев М.Ф. Ронколейкин десять лет в лечебной практике // Материалы междунар. научн. конф. «Актуальные проблемы аллергологии и иммунологии». - Астана, 2005. - С. 70-71.

116. Лекции по фундаментальной и клинической онкологии / Под ред. В.М. Моисеенко, А.Ф. Урманчеевой, К.П. Хансона. СПб., 2004. - 704 с.

117. Лесков В.П., Чередеев А.Н., Горлина Н.К. и др. Клиническая иммунология для врачей. — М., 1997. — 124 с.

118. Лихванцева В.Г., Зиангирова Г.Г., Слепова О.С. и др. Местные эффекты ронколейкина при системном введении у пациентов у пациентов с увеальной меланомой // Мед. иммунология. 2003. - Т.5. - № 3-4. - С. 456.

119. Лихванцева В.Г., Слепова О.С., Алиханова В.П. Изучение механизма действия рекомбинантного IL-2 (pIL-2) на развитие метастатического процесса у пациентов с генерализованной формой увеальной меланомы. Сб. статей. СПб.: Скиф, 2005. - 119 с.

120. Лобышева И.И., Сереженков В.А., Ванин А.Ф. Взаимодействие динитрозильных тиолсодержащих комплексов железа с пероксинитритом и перекисью водорода in vitro // Биохимия. 1999. - Т. 64. - Вып. 2. -С. 194-200.

121. Луговская С.А., Морозова В.Т., Почтарь М.Е., Долгова В.В. Лабораторная гематология. — М.: ЮНИМЕД-пресс, 2002. — 114 с.

122. Лю Б.Н. Старение, возрастные патологии и канцерогенез (кисло-родно-перекисная концепция): Монография. Алматы: КазНТУ, 2003. — 808 с.

123. Максимов С.Я., Баранов С.Б., Чепик О.Ф. и др. Химиолучевая терапия в комбинированном лечении первичного рака шейки матки // Высокие технологии в онкологии. Материалы V Всерос. съезда онкологов.- Казань, 2000. С. 350-351.

124. Максимов С.Я., Гусейнов К.Д. Комбинированное лечение рака шейки матки. Практическая онкология: избранные лекции / Под ред. С.А. Тюляндина и В.М. Моисеенко. СПб., 2004. Гл. 8. - С. 676-686.

125. Максимова Н.А. Современные методики ультразвукового исследования в онкогиненкологии: Дис. . докт. мед. наук. Ростов н/Д, 2003.-480 с.

126. Малейко М.Л. Аутогемохимиотерапия распространенных форм рака желудка: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — Ростов н/Д, 1998. 24 с.

127. Мардынский Ю.С., Крикунова Л.И., Киселева М.В., Сидорки-на Л. С. Результаты сочетанной лучевой терапии рака шейки матки на аппарате «SELECTRON» с использованием источника Csl37 средней активности // Рос. онкологич. журнал. — 1999. №5. — С. 4-7.

128. Мардынский Ю.С., Крикунова Л.И., Мкртчян Л.С., Kapnui}-кая B.C. Отдаленные результаты лучевой терапии рака шейки матки с использованием метронидазола // Рос. онкологич. журнал. 2000. - №4.- С. 24-26.

129. Матвеев С.Б., Спиридонова Т.Г., Клычникова Е.В. и др. Критерий оценки эндогенной интоксикации при ожоговой травме // Клиническая лаб. диагностика. 2003. - № 10. - С. 52-53.

130. Матюшичев В.Б., Шамратова В.Г. Возрастная специфика картины крови при диффузном токсическом зобе у женщин // Клиническая лабораторная диагностика: научно-практический журнал. 2006. — № 10.- С. 39-42.

131. Матюшичев В.Б., Шамратова В.Г., Гуцаева Д.Р. Динамика взаимосвязей показателей объема эритроцитов и тромбоцитов крови детей // Педиатрия: Журнал им. Г. Н. Сперанского / Союз педиатров России. -2005. № 2 . - С. 115-116.

132. Матюшичев В.Б., Шамратова В.Г., Хидиятов И.И. Взаимосвязи показателей объема и количества эритроцитов и тромбоцитов крови человека // Физиология человека. 2004. - Т. 30. - № 3 . - С. 136-139.

133. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. Новосибирск, 1983. - 254 с.

134. Мейскенс-младший Ф. Курение и рак шейки матки // Вестник Рос. онкологич. научн. центра им. Н.Н. Блохина. — 2006. — Т. 17. — №2. -С. 36-37.

135. Мельник И.А., Барановский П.В., Нестеренко Л.И. Новый способ оценки транспортной функции сывороточного альбумина // Лаб. дело.- 1985. № 4. - С. 202-204.

136. Меньщикова Е.Б., Зенков Н.К., Ланкин В.З., Бондарь И.А., Труфа-кин В.А. Окислительный стресс. Патологические состояния и заболевания.- Новосибирск, 2008. 284 с.

137. Меньщикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., Бондарь И.А., Круговых Н. Ф., Труфакин В.А. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. М.: «Слово», 2006. - 284 с.

138. Моисеенко В.М., Орлова Р.В. и др. Современные возможности лекарственного лечения больных диссеминированпым РШМ // Вопросы онкологии. 2004. - 50 (3). - С. 304-310.

139. Моисеенко Т.И. Нестандартный подход к планированию и проведению лечения у больных раком тела матки III стадии: Дис. . докт. мед. наук. Ростов н/Д, 2003. - 515 с.

140. Молчанов О.Е., Карелин М.И., Жаринов Г.М. Современные тенденции применения препаратов рекомбинантного интерлейкина-2 в онкологии // Цитокииы и воспаление. 2002. — 1(3). - С. 38^-7.

141. Молчанов О.Е., Попова И.А., Козлов В.К. Современные тенденции иммунотерапии злокачественных опухолей. СПб.: изд. СПб. университета, 2001. — 85 с.

142. Морозкина Т.С., Суколинский В.Н., Стрельников А.В. Избирательное влияние комплекса витаминов Е, А, С на антиоксидаптную защиту опухолевых и нормальных тканей // Вопросы мед. химии. 1991. - Т. 37. - №6. - С. 59-61.

143. Морхов К.Ю. Комплексное лечение РШМ T2bN0-lMo: Автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 2002. — 27 с.

144. Морхов К.Ю., Кузнецов В.В., Лебедев А.И. и др. Современные подходы к лечению рака шейки матки // Эффективная формакотерапия в онкологии, гематологии и радиологии. — 2005. — №1. — С. 16-20.

145. ХвЪ.Неродо Г.А. Химиотерапия в комплексном лечении злокачественных опухолей наружных половых органов у женщин: Автореф. дис. . докт. мед. наук. Ростов н/Д, 1995. - 51 с.

146. Николаева Н.В. Неоадъювантная аутомиелохимиотерапия в комплексном лечении больных местно-распространенным раком молочной железы: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — Ростов н/Д, 2003. — 29 с.

147. Новик В.И. Эпидемиология рака шейки матки, факторы риска, скрининг // Практическая онкология. 2002. - Т. 3 (3). — С. 156-165.

148. Новиков В.И., Карандашов В.И., Сидорович И.Г. Иммунотерапия при при злокачественных новообразованиях. -М., 1999. 136 с.

149. Новиков Д.К., Новикова В.И. Клеточные методы иммунодиагностики. Минск, 1979.-221 с.

150. Новикова Е.Г. Диагностика предраковых заболеваний и начальных форм рака шейки матки // Заболевания шейки матки, влагалища и вульвы. -М.: МЕДпресс, 2000. С. 153-159.

151. Новикова Е.Г., Смирнова С.В., Русаков И.Г., Теплое А.А. Стриктуры мочеточника у больных раком шейки матки: состояние проблемы, профилактика и лечение // Рос. онкологич. журнал. 2006. — №5. — С. 51-55.

152. П\.Новицкий В.В., Рязанцева Н.В., Степовая Е.А. и др. Молекулярные нарушения мембран эритроцитов при патологии разного генеза являются типовой реакцией организма: контуры проблемы // Бюллетень сибирской медицины. 2006. - № 2. - С.62-69.

153. Орлов С.Н., Новиков КН. Регуляция объема клеток: механизмы, сопряженные клеточные реакции и патофизиологическое значение // Фи-зиологич. журнал им. И.М. Сеченова. 1996. - 82 (8-9). - С. 1-15.

154. Павлов А.С., Костромина КН. Рак шейки матки. — М.: Медицина, 1983.- 158 с.

155. Падрулъ В.М. Опыт локальной иммунотерапии патологии шейки матки // Тезисы докладов XIII Рос. национ. конгр. «Человек и лекарство». -М., 2006.-С. 243.

156. Паркер Чарльз В. Медиаторы: высвобождение и функции. В кн.: Иммунология. / Под ред. У.М. Пола. М.: Мир, 1989. - Т.З. Гл. 27. -С. 170-247.

157. Переводчикова Н.И. Руководство по химиотерапии опухолевых заболеваний. 2-е изд., доп. М.: Практическая медицина, - 2005. - 697 с.

158. Переводчикова Н.И. Химиотерапия опухолевых заболеваний. Краткое руководство. М., 2000. - 392 с.

159. Переслегин И.А., Саркисян Ю.Х. Клиническая радиология. М.: Медицина, 1973. -456 с.

160. Платонов Е.А. Статистический анализ в медицине и биологии. Изд. РАМН, 2000. - С. 52.

161. Плецитый К.Д., Лидак М.Ю. Витамин А и синтетические рети-ноиды в иммунологии и онкологии. — Рига: «Знание», 1984. 127 с.

162. Плохинский Н.А. Алгоритмы биометрии. — М.: Изд. московского университета, 1980. 150 с.

163. Позднякова В.В. Неоадьювантная химиотерапия в комплекном лечении больных меланомой кожи I-III й: Автореф. дис. . длкт. Мед. наук. Ростов н/Д., 2006. - 48 с.

164. Позднякова С.В., Грек О.Р., Волхонская Т.А. Коррекция гемато-токсичеекого действия комплекса цитостатических средств водным экстрактом пятилистника кустарникового // Бюллетень СО РАМЫ. 2004. -№1 (111).-С. 112-115.

165. Покровский А.А. Биохимические методы исследования в клинике. -М., 1969.-С. 349-351.

166. Пономарева И.В., Сухих Г.Т., Кирющенков П.А. и др. Immunological aspects of reproductive health. M., 1995. - C. 109-127.

167. Попович A.M., Егорова В.Н. Интерлейкин-2: опыт клинического применения. Издание 2-е. — СПб: Издательский дом «Новости правопорядка», 2006. 39 с.

168. Прилепская В.Н., Кондриков Н.Н., Бебнева Т.Н. Значение вируса папилломы человека в развитии диспластических процессов шейки матки // Гинекология для практических врачей. 2000. - Т. 2. — № 3. - С. 240-246.

169. Проскуряков С.Я., Бикетов С.И., Иваиииков А.И., Скворцов В.Г. Оксид азота в механизмах патогенеза внутриклеточных инфекций // Иммунология. 2000. - № 4. - С. 9-19.

170. Пфистер Г. Молекулярные механизмы канцерогенеза и биологические основы терапии онкологических заболеваний. Роль вирусов в патогенезе рака // Современные достижения генетических исследований: клинические аспекты. Ростов н/Д, 2001. — С. 147—149.

171. Родионова О.Г. Лечение рецидивов рака шейки матки после со-четанной лучевой терапии с использованием параметрального введения смесей цитостатиков: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — Ростов н/Д, 2005.-24 с.

172. Розенко Л.Я., Сидоренко Ю.С., Франциянц Е.М. Особенностиизменения параметров антиокислительного статуса крови больных раком шейки матки в динамике противоопухолевого лечения // Вопросы онкологии. 1999. - Т. 45. - №6. - С. 630-635.

173. Рубцов Б.И., Рахманкулова З.П., Славина Е.Г. Использование реаферона в лечении диссеминированных форм меланомы и рака почки // Современные аспекты применения интерферонов и других иммуномодуля-торов. — 1990. — С. 101.

174. Рукавицин О. А. Роль иммунотерапии в лечении больных заболеваниями крови // Вопросы онкологии. 2002. - 48 (2). — С. 186-192.

175. Саргсян С.А., Кузнецов В.В., Шабанов М.А. и др. Аденокарцино-ма рака шейки матки // Вестник Рос. онкологич. научн. центра им. Н.Н. Блохина. 2006. - Т. 17. - №3. - С. 43-48.

176. Сергеева Н.С., Дубовецкая О.Б., Маршутина Р.В. и др. Опухоле-ассоциированные маркеры TPS и SCCA в сыворотке крови больных раком шейки матки // Рос. онкологич. журнал. 2004. - №2. - С. 37-39.

177. Сидоренко Ю.С. Аутогемохимиотерапия. Ростов н/Д, 2002.299 с.

178. Сидоренко Ю.С., Розенко Л.Я. Новые подходы к эндолимфати-ческой терапии на модели местно-распространенного процесса рака шейки матки. Ростов н/Д: ЛаПО, 2004. - 232 с.

179. Сидоренко Ю.С., Франциянц Е.М., Бордюшков Ю.Н. и др. Особенности распределения циклофосфана при аутогемохимиотерапии // Итоговые научные изыскания последнего года XX века. М., 2000. - С. 384—387.

180. Сидоренко Ю.С., Чирвина Е.Д., Лазутин Ю.Н. и др. Неоадъю-вантная аутолимфохимиотерапия в комплексном лечении местнораспрост-раненного рака молочной железы // Аутолимфохимиотерапия и другие вопросы онкологии. М. - 1997. - С. 3-12.

181. Солдаткина Н.В. Возможность аутогемохимиотерапии в экспериментальной онкологии и изучение некоторых механизмов ее действия: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Ростов н/Д, 2000. - 26 с.

182. Соляник Г.И., Кулик Г.И. Противоопухолевая терапия. Вспомогательная информация // Медикаментозное лечение онкологических больных. Киев, 1999. - С. 273-339.

183. Степуро И.И., Чайковская Н.А., Солодунов А.А., Арцукевич А.Н. Образование NO в процессе окисления серроформ гемоглобина нитритом //Биохимия. 1997.-Т. 62.-Вып. 9.-С. 1122-1129.

184. Стороэ/сакова А.Э. Аутоплазмохимиоиммунотерапия и ауто-плазмохимиотерапия в лечении больных лимфомой Ходжкина: Автореф.дис. . канд. мед. наук. — Ростов н/Д, 2006. — 25 с.

185. Тархов А.В. Возможности химиотерапии рака шейки матки в современных условиях // Новые технологии в онкологической практике. Материалы Рос. научно-практич. конф. с междунар. участием. Барнаул, 7-8 июня, 2005.-С. 107.

186. Трушина О.И, Новикова Е.Г. Роль папилломавирусной инфекции в генезе рака шейки матки // Рос. онкологич. журнал. 2005. - №1. - С. 45-51.

187. Умарова С.Г. Изучение процессов генерализации рака шейки матки после проведенного лечения с использованием математических методов исследования на ЭВМ: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Ташкент, 1992.-27 с.

188. Урманчеева А.Ф., Бурнина М.М. Заместительная гормональная терапия и злокачественные опухоли // Журнал акушерства и женских болезней. 2000. - Вып. 1. - Т. XLIX. - С. 58-62.

189. Урманчеева А. Ф., Мерабишвили В.М., Селъков С.Ф. и др. Эпидемиология и диагностика РШМ // Журнал акушерства и женских болезней.- 2001. Вып. 1. - Т. XLX. - С. 80-86.

190. Фадеева М.А. Дозиметрическое обоснование лучевой терапии гинекологического рака // Мед. радиология. 1996. — Т. 41. - № 2. - С. 53-58.

191. Фатъкина Н.Б. Паратуморальная аутоплазмохимиотерапия в сочетании с лучевым лечением местно-распространенного рака шейки матки: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — Ростов н/Д, 2007. 26 с.

192. Федорова М.З., Левин В.Н. Метод комплексного исследования геометрии, площади поверхности, резервных возможностей мембраны и осморегуляции лейкоцитов крови // Клиническая лаб. диагностика. 1997. -(11). -С. 44-46.

193. Филатова Н.С., Винокуров В.Л., Ефимов Д.А. Результаты лечения рецидивов рака шейки матки // Казанский мед. журнал. 1997. - Т. 78.- № 3. С. 211-212.

194. Филов В.А., Гершанович М.Л., Акимов М.А., Акимов А.А. Проблемы онкологической фармакологии // Вопросы онкологии. — 1998. -Т.44. -№ 6. — С. 651-661.

195. Фишер Р.А. Статистические методы для исследователей / Пер. с англ. 1958.-268 с.

196. Фишер Р.А. Статистические методы для исследователей. — М.: Госстатиздат, 1958. — 268 с.

197. ФримелъХ. Иммунологические методы. -М., 1987. -456 с.

198. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Оценка основных этапов фагоцитарного процесса: современные подходы и перспективы развития исследований // Патологич. физиология и экспериментальная терапия. 1995. - №3. -С. 3-10.

199. Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Истамов Х.И. Экологическая иммунология. М., 1995. - 219 с.

200. Харитонова Т.В. Возможности лекарственной терапии рака шейки матки // Современная онкология. 2005. - Т. 7. - №3. - С. 135-141.

201. Хричкова Т.Ю., Голъдберг В. У., Жданов В.В. и др. Механизмы гематологической токсичности цисплатина и кселоды в условиях комбинированной терапии больных диссеминированным раком желудка // Бюллетень СО РАМН. 2005. —№ 4 (118). - С. 64-68.

202. Цыплаков Д.Э. Рак и регионарные лимфатические узлы: Автореф. дис. . докт. мед. наук. СПб., 1997. - 46 с.

203. Цыплаков Д.Э. Содержание антителообразующих клеток в регионарных лимфоузлах, как прогностический критерий при раке // Материалы республиканской научно-практич. конф. «Новые методы диагностики и лечения». Набережные челны-Казань, 1995. — С. 333—334.

204. Чакалова Г.Б., Карагозов А.И. Метастазы в костях у больных раком шейки матки // Онкология. 1993. - 30. -№11. - С. 1372-1375.

205. Чекнее С.Б. Фенотипическая и функциональная гетерогенность циркулирующего пула естественных киллеров // Иммунология. 1999. - №4. - С. 24-32.

206. Черникова Н.В. Аутогемохимиотерапия в комплексном лечении больных саркомой тела матки: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — Ростов н/Д, 2004. 27 с.

207. Черняускене Р.Ч., Варшкявичене 3.3., Грибаускас П.С. Одновременное флуорометрическое определение концентрации витаминов Е и А в сыворотке крови // Лаб. Дело. — 1984. № 6. - С. 362—365.

208. Чертова Н.А. Аутомиелоиммунотерапия с химиотерапией в комплексном лечении больных местно-распространенным раком слизистой оболочки органов полости рта и ротоглотки: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Ростов н/Д, 2003. - 26 с.

209. Чиссов В.И., Старинский В.В., Петрова Г.В. Злокачественные новообразования в России в 2002 г. (заболеваемость и смертность). М., 2004. - С. 7, 92-94.

210. Шестаков В.А., Бойчевская И.О., Шерстнев М.П. Хемилюми-нисценция плазмы крови в присутствии перекиси водорода // Вопросы медицинской химии. 1979. - Т. 25. — Вып. 2. - С. 132-137.

211. Шишова М.И. Аутогемохимиотерапия в комплексном лечениирака шейки матки III стадии: Автореф. дис. . канд. мед. наук. — Ростов н/Д, 2002. 25 с.

212. Шмаров Д.А. Закономерности клеточного цикла при действии ионизирующей радиации // Гематология и трансфузиология. 1995. -№ 6.-С. 25.

213. Шмаров Д.А., Крехнов Б,В., Попова О.Н. и др. Пролиферативпая активность и клеточный состав костного мозга // Гематология и трансфузиология. 1992. - № 7-8. - С. 6.

214. Шмаров Д.А., Луговская С.А., Князева Е.С., Козинец Г.И. Проточная цитометрия в гематологии. Методы и техника проточно-цитомет-рического анализа // Клиническая лаб. диагностика. — 1998. №8. - С. 3-9.

215. Якубовская Р.И. Современные представления о молекулярных механизмах канцерогенеза и опухолевой прогрессии как основа для разработки новых методов терапии злокачественных новообразований // Рос. онкологический журнал. 2000. - № 6. - С. 42—50.

216. Якубовская Р.И. Современные подходы к биотерапии рака // Рос. биотерапевтический журнал. 2002. — Т.1. - №3. - С. 5-13.

217. Ярылин А.А. Принципы и пути использования цитокинов в противоопухолевой терапии // Аллергия, астма и клиническая иммунология. 1999.-№10.-С. 3-16.

218. An Yun-ting, Li Han-ping, Xu Xiao-Ian, Wan Jian-ping Zh ongliu fangzhi zazhi // China J. Cancer Prev and Tret. 2004. - 11. №2. - P. 171-172.

219. Beauchamp C., Fridovich I. Superoxide dismutase: Improved assays and assayapplicable to acrylamide gels // Anal. Biochem. 1971. - Vol. 44. -P. 276-281.

220. Begg A.C. Implications of tumor cell kinetics for radiotherapy // On-cologia. 1993.-Vol. 16.-P. 77.

221. Bergmann L., Fenchel K., Weidmann E. et al. Daily alternating administration of high-dose interferon-alpha-2B and interleukin-2 bolus infusion in metastatic renal-cell cancer // Cancer. 1993. - Vol. 72. - P. 1733-1742.

222. Bosch F.X., Lorincz A., Munoz N. et al. The casual relation between human papillomavirus and cervical cancer // J. Clin. Pathol. 2002. - Vol. 55. -P. 244-265.

223. Bosch F.X., Qiao Y.L., Castellsagur X. The epidemiology of human papillomavirus infection and its association with cervical cancer // Int. J. Gyna ecol Obstet. 2006; 94 (1): 8-21.

224. Bowles K.M., Cooke L.J., Richards E.M., Baglin T.P. Platelet size has diagnostic predictive value in patients with thrombocytopenia // Clin Lab Haematol. -2005; 27(6): 370-373.

225. Boyum A. Separation of leukocytes from blood and bone marrow // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1968. - Vol. 21 (Suppl. 77). - P. 77.

226. Breidenbach M., Rein D.T., Schondorf Т., Schmidt T. et al. Hematological side affect profiles of individuslized chemotherapyregimen for recurrent ovarian cancer // Anticancer drugs. 2003. - Vol. 14 (5). - P. 341-346.

227. Celorio A. Angiogenesis ее cancer del cervix uterine // Clin invest ginecol у abstetric. 2000; 27 (9): 343-355.

228. Cersosimo R.J. Hepatotoxity associated with cisplatin chemotherapy // Ann. Pharmacother. 1993. - Vol. 27(4). - P. 437-441.

229. Chan Г., Hag Т., Ngan H. et al. I/ Gynaecol. Oncol. 2002. - Vol. 84(1).-P. 7-11.

230. ChiariA., Ciavattini A., Grechi G. et al. Efficacia del follow-up clinico-strumentale nelle pazienti affete da carcinoma della cervice uterine: Nostra esperienza/ Garzetti G/G/ //G.ital.ostet.e ginecol. 2000. - 22, №4. - P. 199-202.

231. Creasman W.T. Cancer and pregnancy // Annals of the New York Academy of Sciences. 2001. - Vol. 943. - P. 281-286.

232. Ebbehoj E., Langkjer S.T. Comparison between different parameters of cell viability. In vitro studies in a human cervix cancer cell line // J. Exp. Clin. Cancer Res. 1995.-Vol. 14.-P. 95-101.

233. Ehrke M.J., Mihich E., Berd D., Mastrangelo M.J. Effects of anticancer drugs on the immune system in humans // Semin Oncol. — 1989; 16 (3): 230-253.

234. Fourcade C., Casbas M.J., Belaouni H. et al. Automated detection of malaria by means of the haematology analyser Coulter GEN.S. // Clin Lab Haematol. 2004; 26(6): 367-372.

235. Frommel Т.О., ZarlingE.J. Chronic inflammation and cancer. Potential role of Bcl-2 gene family members as regulators of cellular antioxidant status // Med. Hypotheses. 1999. - Vol. 52. - № 1. - P. 27-30.

236. Fulwyler M.J. Electronic separation of biological cells by volume // Science. 1965.- 150. -P. 910-911.

237. Haan J.В., de Critiano F., Ianello R.C., Kola I. Cu/Zn superoxidedismutase and glutathione peroxidase during aging // Biochem. And Mol. Biol. Int. 1995. - Vol. 35. - №6. - P. 1281-1297.

238. Hadzisejdic I., Simat M., Bosak A. et al. Prevalence of human papillomavirus genotypes in cervical cancer and precursor lesions // Coll Antropol. -2006; 30 (4): 879-883.

239. Hiddemann W., Griesinger F., Unterhalt M. Interferon alfa for the treatment of follicular lymphomas. (Review) 47 refs. // Cancer Journal From Scientific American. 1998, Jul. - 4 Suppl 2: S. 13-8,

240. Hockel M., Baubmann E., Mitre M. et al. Are pelvic sidevall reccur-ences of cervical cancer biologically different from central relapses? // Cancer. -1994. Vol. 47. - №2. - P. 648-655.

241. Holly E.A. Cervical intraepithelial neoplasia, cervical cancer and HPV // Annu. Rev. Public. Health. 1996. - Vol. 17. - P. 69-84.

242. Jovin T.M., Morris S.J., Striker G. et al. Automatic sizing and separation of particles by ratios of light scattering intensities // J Histochem Cyto-chem. 1976; 24(1): 269-283.

243. Kaito K., Otsubo H., Usui N. et al. Platelet size deviation width,. platelet large cell ratio, and mean platelet volume have sufficient sensitivity and specificity in the diagnosis of immune thrombocytopenia // Br. J. Haematol. -2005; 128(5): 698-702.

244. Kerbel R.S., Kobayashi Hiroak, Graham Ch.M. Intrinse or acguired drag resistance and metastasis: are they linked phenotypes // J. Cell. Biochem. -1994.-Vol. 56. -№1. P. 37-47.

245. Kim C.J., Taubenberger J.K., Simonis T.B. et al. Combination therapy with interferon-gamma and interleukin-2 for the treatment of metastatic melanoma // Journal of Immunotherapy with Emphasis on Tumor Immunology.- 1996 Jan. 19 (1): 50-58.

246. Kim S.I., Namkoong S.E., Kim J.H. et al. Clinical response to «quick cis-platin and etoposide» as neoadjuvant chemotherapy and its outcome in the uterine cervical cancer patients of stage Ib2-IIIb // Int. J. Gynecol Cancer. 1997. - 7:39.

247. Kintzel P.E. Anticancer drug-induced kidney disorders // Drug Saf. -2001.-Vol. 24.-P. 19-38.

248. Kudelka A.P., Verschraegen C.F. et al. Preliminary report of the activity of docetaxel in advanced or recurrent squamous cell cancer of the cervix //Anticancer Drugs. 1996.-№ 7.-P. 398-401.

249. Law T.M., Motzer R.J., Mazumdar M. et al. Phase III randomized trial of interleukin-2 with or without lymphokine-activated killer cells in the treatment of patients with advanced renal cell carcinoma // Cancer. 1995. Sep 1. 76 (5): 824-832.

250. Lee K.B., Lee J.M., Park C.Y., Lee K.B., Cho H.Y. What is thedifference between squamous cell carcinoma and adenocarcinoma of the cervix? A matched case-control study // Int J Gynecol Cancer. 2006; 16 (4): 1569-1573.

251. Leibel S.A., Ling C.C., Kutcher G.J. et al. The biological basis for conformal threedimensional radiation therapy // Int. J. Radiat. Oncol. Phys. -1991.-Vol. 21.-№3.-P. 805-811.

252. Leif R.C., Schwartz S., Rodriguez C.M. et al. T wo-dimensional impedance studies of BSA buoyant density separated human erythrocytes // Cytometry. 1985; 6 (1): 13-21.

253. Li Yong-mei, Luo Tian-you, wu Jing-quan. Диагностика рецидивов рака шейки матки с помощью спиральной компьютерной томографии // Zhongguo yixue yingxiang jishu. Chin. J. Med. Imag. Technol. 2003. - 19, №1. - P.86-88. - Кит.; рез. англ. 03.10-04H2. 339.

254. Loken M.R., Sweet R.G., Herzenberg L.A. Cell discrimination by mul-tiangle light scattering. // J. Yistochem. Cytochem. 1976. - 24(1). - P. 284-891.

255. Madersbacer R. Die pharmakotherapie bei postoperativen blasente jrugsstorungen // Acta. Urol. Esp. — 1992. P. 36-39.

256. Markman M., Webster K., Zanotti K., Kulp В., Btlinson J. Phase 2 trial of prolonged administration of topotecan in platinum/taxsanerefractory ovarian, follopian tube, and primary peritoneal cancer // Gynecol. Oncol. -2004. Vol.95 (1). - P. 109-113.

257. Martinez-Monde R., Aristu J.J. et al. Radiotherapie peroperatoire (PRO) dans les cancer gynacologues evolues et recudivants // Lyon. Chir. 1994. - Vol. 90. - №4. - P. 252.

258. Matutes E., Polliack A. Morphological and immunophenotypic featares of chronic lymphocytic leukemia // Rev Clin Exp Hematol. 2000; 4(1): 22-47.

259. Mc Guire W.P., Arsenau J.C. et al. A ranlomized comparativ trial of carboplatin and iproplatin in advanced squamous carcinoma of the uterine cervix: a Gynecologic Oncology Group Study // J. Clin Oncol. 1996. - № 7. -P. 1462-1468.

260. Mendez L.E. Iatrogenic injuries in gynecologic cancer surgery // Surg. Clin. N. Am. -2001. Vol. 81 (4): 897-923.

261. Mikhaevitch O.D., Mikhaevitch I.S., Gorozhanskaya E.G. Antioxidant defence in tissues of patients with lung, stomach and renal cancers // J. Exp. Clin. Cancer Res. 1995. - Vol. 14. - P. 247-253.

262. Mitsumoto Tarayoshi, Horii Takanisa, Nagai Ken et al. Significance of paraaortic Lymph node mestasis in cervical cancer // J. Jap. Soc. cancer Ther. 1995.-Vol. 30,-N2.-P. 273.

263. Montuorо A., De Rosa L., De Blasio A. et al. Alpha-2a-inter-feron/melphalan/prednisone versus melphalan/prednisone in previously untreated patients with multiple myeloma // Br J Haematol. — 1990. 76 (3): 365-368.

264. Muggia F.M., Blessing J.A., McGehee R., Monk B.J. Cisplatin and ir-inotecan in squamous cell carcinoma of the cervix: a phase II study of the Gynecologic Oncology Group // Gynecol Oncol. 2004; 94(2): 483^187.

265. Okawa Tomohiko. Contraversy of treatment for recurent cancer after definitive radiotherapy // Nihon gan chirio gaklcaishi J. Jap. Soc. Cancer Ther. -1995.-Vol. 30. (2).

266. Onishi H., Yamaguchi M., Kuriyama K. et al. Effect of concurrent in-tra-arterial infusion of platinum drugs for patients with stage III or IV uterinecervical cancer treated with radical radiation therapy // Cancer J Sci Am. — 2000; 6(1): 40^15.

267. Papadimitriou C.A. Domopoulos M.A., Giannakoulis N. et al. A phase II trial of methotrexate, vinblastine, doxorubicin and cisplatin in the treatment of metastatic carcinoma of the uterine cervix // Cancer. — 1997; 79 (12): 2391-2395.

268. Parkin D.M., Bray F., Ferlay J., Pisani P. Global Cancer Statistics // CA Cancer J. Clin. 2005. - Vol. 55 (2). P. 74-108.

269. Pepper M.S// Lymphology. 2000. - Vol. 33: P. 144-147.

270. Philip P.A., Flaherty L. Treatment of malignant melanoma with in-terleukin-2. Review. [64 refs] // Seminars in Oncology. 24 (1 Suppl 4):S32-8, 1997 Feb.

271. Pinkoski M.J., Green D.R. Cloak and dagger in the avoidance of immune surveillance // Curr. Opin. Genetics& Development. 2000. - Vol. 10. -P. 114-119.

272. Ъ2\.Рор D.A., Jucu V. Membrane micro viscosity in cell/virus systems // Romanian J. of Virology. 1993. - Vol. 44. - №. 1-2. - P. 79-83.

273. Pornthanakasem W., Shotelersuk K., Termrimgruanglert W. et al. Human papillomavirus DNA in plasma of patients with cervical cancer // BMC Cancer.-2001; 1(2).

274. Ratanatharathorn Vaneerat, Powers William Т., Perez Carlos A. Bone metastasis: Review fnd critical analysis of random allocation trials of local field treatment//Int. J. Radiat., Oncol., Biol, Phyc. 1999.-44,-№1.-P. 1-18.

275. Reiner F. Enzymatic and non-enzymatic assay of superoxide dismu-tase // Biochimie. 1975. - Vol. 57. - P. 657-660.

276. Rose P.G., Bimdy B.N. et al. Concurrent cisplatin based radiotherapy and chemotherapy for locally advanced cervical cancer // N Engl. J. Med.- 1999: 340.

277. Salomon S. The immune system and cancer progression // Cancer J.- 1995.-Vol. 8.-P. 87.

278. Santucci R.A., Erlich J., Labriola J. et al. Measurement of tissue factor activity in whole blood. 11 Thrombos. and Haemostas. 2000. - Vol. 83 (3). - P. 445-454.

279. Savarese A., Cognetti F. New drugs in the treatment of recurrent or metastatic cervical cancer // Crit Rev Oncol Hematol. 2003; 48(3): 323-327.

280. Scamlia G., Benedetti Panici P., Ferrandina G. et al. Significance of cathepsin-D expression in uterine tumours I I Eur. J. Cancer. 1995. - Vol. 31 A. -P. 1449-1454.

281. Schaider Helmut et al. Differential response of primary and metastatic melanomas to neutrophils attracted by IL-8 // Int. J. Cancer. 2003. - Vol. 103. -№3.-C. 335-343.

282. Seci S., Fudjimura A. II Lymphology. 2003. - Vol. 36. - P. 128-139.

283. Shinitzky M. Membrane fluidity in malignancy adversative and recuperative//Biochim. Biophys. Acta. 1984. - Vol. 738.-P. 251-261.

284. Shiromizu K., Kasamatsu Т., Takahashi M. et al. A clinicopathologi-cal study of postoperative pulmonary metastasis of uterine cervical carcinomas // Selec. Pap. Saitama Cancer Cent. 1999. - №2. - P. 249-253.

285. Simon R., Oriol A., Lima M. et al. Automated differential diagnosis of lyphocitosis using Beckman-Coulter and Gen's Investigational Screen Parameters 11 J. of the American Society of hematology. 2002. — Vol. 100, №11, supl.2. — P. 3506.

286. Syrjanen K., Syrianen S. Epidemiology of human papilloma virus infections and genital neoplasia // Scand. J. Infect. Dis. 1990. — Vol. 69. - P. 7—17.

287. Syrjanen K., Syrianen S. Papillomavirus Infections in Human Pathology. New York, 2000.

288. Takeda M., Sakugari N., Okamoto K. et al. II Acta Obstet. Gynecol. -2002;-Vol. 81 (5): 451-457.

289. Tambaro R., Scambia G. et al. The role of chemotherapy in locally advanced, metastatic and recurrent cervical cancer. Critical Reviews in oncology // Hematology. 2004. - P. 52.

290. Villa L.L. Human papillomaviruses and cervical cancer // Adv. Cancer Res. 1997. - Vol. 71. - P. 321-341.

291. WangH., Tan Y, WangX., Xie J. II Lymphology. 2001. - Vol. 34. - P. 69-76.

292. You K., Liang X., Qin F., Guo Y., Geng L. High-risk human papillomavirus DNA testing and high-grade cervical intraepithelial lesions // Aust N Z J Obstet Gynaecol. 2007; 47(2): 141-144.

293. Yuan C., Wang P, Ng H. et al II Eur. J. Gynaecol. Oncol. 2002. -Vol. 23 (l).-P. 17-20.

294. Zhang Guo-nan, Xu Shi-qiang, Shi Ju et al. Brain metastases from carcinoma of uterine cervix // Chin. J. Cancer Res. 2002. - 14. - №3. - P. 230-234.

295. Zhao Y, Wang J.L., Wei L.H., Bao D.M. Clinical analysis of eight cases of bone metastasis of uterine carcinomas // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi. -2006; 41(12): 822-825.

296. Zhu L., Li B. Histopathology and immunohistochemical expression of precursor lesion of cervical adenocarcinoma // Zhonghua Bing Li Xue Za Zhi. -2001.-Vol. 30 (4).-P. 249-252.

297. Zur Hausen H. Papillomavirus infections a major cause of human cancers // Biochim. Biophys. Acta. - 1996. - Vol. 1288 (2). - P. 55-78.