Автореферат и диссертация по медицине (14.00.06) на тему:Оптимизация диагностики острого коронарного синдрома с помощью маркеров функциональной морфологии сыворотки крови (клинико-экспериментальное исследование)



UUJ44707B

: МЛГГ.ПлГТСГ-ОП-

3 0 CEH2ÚÚ8

003447078

Рааста - »ьнюяжна в Государственном оРразрвдеяьпом учреждении зыспд-т гтрофеЕ.еиоиалъього.'Образонаикя О-ратсБСХкЯ государственный медицгшский университет) Федерального. агек.етза по .зцСхюачрьнгни.о и социальному развитию v гьно«|

!007.!истачн.юм -учреждении С'аратаьскпй. яаучно-мсследсзатсльскдм институт кардиологии! Федерального шчытетза чо ьысокетехьологичтюп медицинской homoiçi:. '

Kajncsje руководители.

■ "кмгднда" медицинских Мапиноиа Гипия йгорчта; -. ¿акя-*р ■ылкцпясхих наук, профессор Сгпсгупов Андрей Алексеевич'.

Офза":»яы;ьк..- onuoi-ciiru:

■■ лолто.; уед«Н"-Н';.!;:х nays. ирофсееор Ушьков 3-налип Юрье'вчч: . .дгхl io чаук. профессор Брл.и". Грпщрнй Еф:-;мЗЕич.

Пс-и-"■ '.-р-'лл .^ация - - ü'5p¡>'JO»a'i¿;:№Ot . учре*.де.Ы'.с cycoieío

life ^есспол-д jLH'iiir ..обрак-вяния« "ачйосъиЛ юсударстг.екчыи 'МодчцинскиЯ yiiHfcpcirer Ч'^дераг.пгюгэ si-CiîT/льа чдрамоохранечч'о и соииалъьому рмвчы'о.

;;:га •.осгошся , 14 Ш-е^л Ч-У-!Я .-■ г И_iia -i;íCvsi.V¡;-:ii дисеср^чи-нчп.о/о)

слзстд./д li'H y-ï4--ù.i ¡t-if ГОУ BJÎ'J СщтсвстЗ ! МУ .aou.-jp»r.a па ,адрес,s. 4¡Ú'J¡í,:.r Саратов vji. S. Казачья. ! i2.

-. 1 - - „ I •-••■■ " ' ■ i f ¡'."ссарташ'.ей ¡.¡ожассанекимкт.ср, в 5-иблиотеке ГОУ ВИО Саратоастай Г-МУ-Роелярава

Ä.sropCfisepuT разослан - И> оря I

У-к нь' ч секретарь диссч;ртг.ц>;.):-п;огс a.sci?,

Х0Х70 > vr'.U'-í'Ji'HCKuh ьау-v. 4 • \ И. Козо':и'гоза

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования

Сердечно-сосудистые заболевания и борьба с ними представляют наиболее важную линическую и социальную проблему современной медицины, так как даже в кономически развитых странах по оценке European Task Force распространенность племической болезни сердца (ИБС) на протяжении последних десятилетий остается ысокой и составляет 10-20% среди людей в возрасте 65-74 лет (Kesteloot Н et al, 2006) оссийская Федерация, но данным Европейского общества кардиологов, относится к ислу стран с высокой распространенностью ИБС Число лиц, страдающих стенокардией России, составляет 30-40 тыс человек па 1 млн насетеиия (Оганов Р Г , 2002, Аронов М и соавт, 2006)

Наиболее значимым для определения прогноза ИБС является развитие острого <оронарного синдрома (ОКС), включающего нестабильную стенокардию и инфаркт шокарда любого объема и локализации поражения (Грацианский Н А , 1996, Мазур Н А , 1999, Braunwald Е et al ,2000)

Внедрение в широкую практику коронаровентрикулографии в начале 90-х годов тривело к изменению традиционных представлений о патогенезе ОКС как следствие бструквдщ атеросклеротической бляшкой коронарной артерии (Alderman Ц L et al, 1993), появилось мнение, что ботыпинство нестабильных форм ИБС возникает при менее ем 50-70% стенозов, оцениваемых обычно как «гемодинамически незначимые» (Serruys W et al, 1987, Hasket D et al, 1988) Более того, оказалось, что на основании оронарографической картины нельзя с большой степенью вероятности предсказать озможность разрыва бтяшки и прогнозировать дальнейшее течение ИБС (Мазур Н А, 1999, Reiner JS et al, 1994, Topol EJ et al, 1995) В связи с этим появились новые юнятия «стабильная» и «нестабильная» бляшки (Грацианский Н А , 1996, Крыжановский

А , 2001, Окороков Ф Н , 2002, Davies М J et al, 1986, Falk E , 1992, Wilson J M et al, -1995) С помощью коронарографии и внутрисосудистой УЗ-апгиоскопии можно 1 д— пределить локализацию поражешы и степень сужения сосуда, наличие тромба и •дассекции нестабильных бляшек (De Feyter Р J et al, 1995) Однако не все нестабильные 'ляшки разрываются, и не все разрывы ведут к коронарному тромбозу (Wilson J М , Capek 5 et al, 1995) Для развития острого коронарного синдрома одного разрыва бляшки ■сдостаточно (Davies М J et al, 1986) По данным патологоанатомических исследований, юлышшство разрывов протекает практически бессимптомно, и при аутопсии погибших т некардиальных причин обычно находят несколько бляшек с трещинами и разрывами "ез признаков их окклюзионного тромбообразования (Hasket D et al, 1988, Falk E, 1992)

Таким образом, с ростом технических возможностей клиницист оказывается перед гавипой отдельных фактов, суммация которых чревата попаданием в так называемые «информационные ловушки» Где та грань в сердечно-сосудистом континууме, за которой 1ежит начало развития ОКС Проблема своевременного, возможно, скринингового метода шагностики ранних этапов дестабилизации течения ИБС остается неразрешегаюй и по сен день

В настоящее время установлено, что - передача информации твердофазной структуре биологической жидкости из жидкой среды происходит за счет упрочнения псковалентных (слабых) связей, формирующих информационное содержание молекут Ьс'ш любое изменение физико-химического состояния плазмы крови находит отражение в специфическом формообразовании ее структуры, то появляется возможность выявлять изменения биоструктур на мо 1еку 1ярном уровне, и открываются принципиально новые позиции для диагностики на доклиническом этапе развития патологического процесса (Шабалин В Н , Шатохина С Н , 2001) В связи с вышесказанным нами была поставлена следующая цель

Цель исследования

Оптимизация диагностики острого коронарного синдрома с помощью маркеров

функциональной морфологии сыворотки крови

Задачи исследования

1 Сопоставить наличие важнейших клинических критериев и биохимических маркеров острого коронарного синдрома с параметрами пространственно-временной самоорганизации сыворотки крови у пациентов с острым коронарным синдромом

2 Сопоставить наличие важнейших клинических критериев и кардиальных факторов риска с параметрами пространственно-времетюй организации сыворотки крови у больных стабильной стенокардией III функционального класса

3 Изучить пространственно-временную самоорганизацию сыворотки крови у лиц без сердечно-сосудистой патологии

4 Оценить возможность прогноза дестабилизации коронарного кровотока у больных с исходно стабильным течением стенокардии по пространственно-временным характеристикам образования фации сыворотки крови

5 Изучить возможность разграничения стабильного и нестабильного течении ишемической болезни сердца по морфологическим и временным параметрам процессов самоорганизации сыворотки крови

6 Разработать синергетический алгоритм диагностики острого коронарного синдрома и ранних стадий дестабилизации хронического течения ишемической болезни сердца

Научная новизна исследования заключается в том, что впервые

• Разработана система предикторных функционально-морфологических маркеров острого коронарного синдрома - тип пространственно-временной организации сыворотки крови

• Доказана диагностическая значимость пространственно-временной организации сыворотки крови у пациентов с острым коронарным синдромом Наибольшее диагностическое значение имеют следующие морфологические особенности фации сыворотки крови циркулярная симметрия трещин, феноменологическая скудность фаций, сокращение длительности клиновидной дегидратации - 17,23 ± 1,9 мин, уменьшение ширины центральной зоны фаций (82,8 ± 3,68 мкм)

• Выявлены и статистически доказаны принципиальные различия пространственно-временной самоорганизации плазмы и сыворотки крови у больных стабильной стенокардией, пациентов с острым коронарным синдромом и практически здоровых лиц Фация сыворотки крови с циркулярной симметрией трещин и феноменологической скудностью характерна для пациентов с острым коронарным синдромом, а у пациентов при стабитьных формах стенокардии в 98% случаев фация имеет вид иррадиального растрескивания с незавершенными конкрециями и подсистемными включениями структуры «листа», «черные» трещины, трещины «серебра», «трещины-конусы» У лиц без сердечно-сосудистой патологии в 99% случаев встречались радиальное растрескивание фации сыворотки крови, сформированные отдельности и конкреции, отсутствие аномальных структур

• На доступных клиническом и лабораторно-инструменталыюм материалах впервые выявлена прогностическая значимость обнаружения полицикличных полиформных структур в фациях сыворотки крови пациентов со стенокардией стабильного течения в 100% случаев предсказана дестабилизация коронарного кровотока (формирование острого коронарного синдрома) в 3-5-дневный срок

Практическая значимость исследования На основании анализа полученных результатов разработан синергетический горитм диагностики острого коронарного синдрома, позволяющий оптимизировать шагпостику и прогнозирование наступления острого коронарного синдрома у пациентов • ишемической болезнью сердца

Основные положения, выносимые на защиту На процесс дегидратационной самоорганизации сыворотки крови пациентов с стрыми и хроническими формами ишемической болезни сердца значимо влияет соотношение грубо- и мелкодисперных фракций белка, что позволяет использовать годелирование концентрации альбумина в качестве диагностического зонда для ыявления стабильного состояния пациентов с ишемической болезнью сердца

Влияние концентраций ионов натрия и хлора на процесс дегидратационной ■амоорганизации плазмы и сыворотки крови больных с острыми и хроническими орчами ишемической болезни сердца позволяет использовать моделировшше онцентраций ионов натрия и хлора в качестве диагностического зонда для выявле1шя острого коронарного синдрома

Внедрение результатов исследования Результаты исследования испотьзуются в учебном процессе на кафедре ероптологии и гериатрии ГОУ ВПО Саратовский ГМУ Росздрава и в лечебном процессе ГУ Саратовский НИИ кардиологии Росмедтехнологий

Апробация диссертационного исследования

Результаты диссертационного исследования доложены на международных и оссийских копферешшях Всероссийской научно-практической конференции 'Неотложные состояния при сердечно-сосудистых заболеваниях" (Москва, 2006), VIII Всероссийском научном форуме «Кардиология» (Москва, 2006), Российском гационалыюм конгрессе кардиологов (Москва, 2006), 9-й Международной научной школе ю оптике, лазерной физике и биофизике (Саратов, 2006), X International School for Junior Scientists and Students on Optics, Laser Physics & Biophysics Saratov, 2006) По результатам исследования опубликовано 13 печатных работ, из них 1 в реферируемом журнале, рекомендованном ВАК РФ для публикации результатов шсссртационных исследований Подана заявка на изобретите «Способ прогнозирования ра¡вития острого коронарного синдрома у больных стабитьной стенокардией» приоритетная справка на изобретение № 2008130236 РФ от 21 июля 2008 г)

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, 3 глав собственных исследований и заключения Изложите занимает 180 страниц машинописного текста Список использованной литературы включает 254 источника, из них отечественных - 92 и иностранных - 162

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования Клиническая характеристика субъекта исследования Всего обследованы 173 мужчины, из которых - 112 - пациенты с ИБС в возрастном диапазоне от 42 до 80 лет, находившиеся на лечении в ФГУ Саратовский НИИ кардиологии Росмедтехнологий В группу 1 вошли пациенты, госпитализированные в блок интенсивной терапии с направительным диагнозом «острый коронарный синдром» (п = 43) Из них у 24 пациентов был диагностирован инфаркт миокарда, у 19 - нестабильная стенокардия I, II и

III В классов по Е Браунвальду (1998) Группу II (п=69) составили мужчины со стенокардией напряжения III функционального класса (по Канадской классификации) (Braunwald Е, Antman EM et al, 2000) (табл 1) Диагноз верифицировался типичной клинической картиной, данными стресс-теста на тредмиле, результатами селективной ангиокоронарографии (Hamm С , Braunwald Е , 2000)

Критериями невключения являлись женский пол, возраст моложе 40 лет, ожирение II и выше степени, острые нарушения ритма сердца при поступлении

Из исследования исключались пациенты с тяжелой артериальной гипертензиси, хронической сердечной недостаточностью III и выше функционального класса (по NYHA), сахарным диабетом любого типа, злокачественными новообразованиями, патологией печени и почек с выраженными нарушениями метаболизма, гематологической патологией, аутоиммунными заболеваниями, диффузными болезнями соединителыюп ткани и системными васкулитами, а также любой сопутствующей патологией в стадии обострения При выявлении у пациента критериев исключения на любом этат. проведения исследования его дагаше не использовались для проведения дальнейшего анализа

Контрольную группу I составили практически здоровые мужчины в возрасте от 23 до 38 лет (п = 31) Контрольная группа II включала мужчин сопоставимого с основной и группой сравнения возраста без признаков сердечно-сосудистой патологии (п = 30) (табл 1)

Таблица I

Распредечение обследуемых по группам

Группы исследования Группа I Группа II Контрочьная группа I Контрольная группа II Всего

Абсолютные значения 43 69 31 30 173

Преобладающими в данном исследовании были пациенты зрелого (53,6%) и пожилого (38,4%) возраста Количество больных старческого возраста не превышало 9,3% и было сопоставимо в обеих группах Чаще всего у обследованных по данным коронарографии выявлялось «трехсосудистое» поражение коронарного русла (33,3%)

Методы исследования дегидротационной самоорганизации плазмы и сыворотки крови

Метод получения субстрата Забор крови производился натощак из кубиталыюи вены В группе сравнения забор крови осуществятялся в первые 30 минут пребывания пациента в блоке интенсивной терапии до начала антиангиналыюй, антитромбоцитарной и антикоагулянтной терапии У курящих безникотиновый промежуток составлял не менее 4 часов Из полученной цельной крови получали бедную тромбоцитами плазму (цитратную, для стабилизации крови использовался 3,8%-ный раствор цитрата натрия) и сыворотку крови путем центрифугирования по стандартному протоколу

Метод приготовления препаратов фаций для феноменологического анализа Для приготовления препаратов фаций сыворотки крови обследованных всех групп 5 мкл сыворотки крови помещались на строго горизонтально расположенное чистое предварительно обезжиренное предметное стекло размером 26 х 75 мм и толщиной 1 мм, после чего, при сохранении горизонтального расположения подложки, проводилась дегидратация препарата в стандартных условиях (температура 37 ± 1°С, при относительной неподвижности окружающего воздуха и изоляции от всех внешних воздействий, включая ультрафиолетовое и электромагнитное облучения) Для сравнительного феноменологического анализа препаратов в условиях различной концентрации белков и солей субстрата использовались сыворотка и птазма пациента и препараты 30-60-минутного эквиобъемного инкубирования сыворотки и плазмы с

астворами альбумина (10%) и хлорида натрия (0,85%) в пластиковом луночном шаишете

Фиксировалось время полного высыхания препарата Диаметр капли на подложке оставлял 3-5 мм Допочнителыго образцы сыворотки, плазмы и инкубата высушивались ри температуре 20-25°С и относительной влажности воздуха 60-65%, при минимальной юдвижности окружающего воздуха и при отсутствии влияния ультрафиолетового плучеиия Продолжительность периода высыхания образцов составляла 18-24 часа

Метод приготовления фации для временного анализа При приготовлении ¡¡аций для временного анализа полуавтоматической пипеткой на одно предметное стекло тносили по 12 образцов плазмы и сыворотки крови каждого пациента объемом 5 мкл егидратация проводилась по вышеописанной методике с принудительным ысушиваиием каждого препарата с интервалом в 2 минуты Фиксировали время полного ысыхания каждого препарата

Метод изучения готовых фаций Морфологическая картина в получе1шых репаратах (фациях) исследовалась при помощи световой и темноголыгой микроскопии микроскоп «Ломо Биолам П2-1», совмепдашый с цифровой видеокамерой и терсональным компьютером) с двадцати- и сорокакратнъгм увеличением

В полученных фациях проводилось изучение системной организации, типа, гокализации и частоты встречаемости морфологических элементов Использовалась гоменклатура функциональной морфологии биотогических жидкостей, предложенная в заботах В Н Шабалина (2000, 2002) (приложение 2) Для проведения количественного и татистического анализов частота встречаемости каждого морфологического элемента в фиготовленном препарате была ранжирована 0 - нет, 1 - единичные в поте зрения, 2 -меренное количество (2-3 в поле зрепия), 3 - значитетьное количество (4-6 в поле ¡рения), 4 - сплошь в поле зрения Для проведения количественного анализа выполнялось [змерение размеров основных зон препарата (центральной, промежуточной и краевой), а акже размеров основных структурных элементов приготовленной фации

Феноменологическое описание изучаемых морфологических элементов (приложение 2)

Фация - дегидратированная структурировшшая пленка капли биологической идкости (сыворотки, плазмы), полученная с помощью метода клиновидной югидратации (приложение 2, рис 1а)

Сектор - часть фации, отграниченная со всех сторон радиальными трещинами, в оставе которого имеются совокупность отдельностей, конкреций и ряд мелких юрфологических элементов (приложение 2, рис 16)

Отдельность - участок фации, образованный радиальными трещинами и более (едкими трещинами, перпендикулярными радиальным, является составной частью ектора (приложение 2, рис 1в-1)

Конкреция - в норме окрупый фокус в отдельностях с ровными и четкими раницами (скопление однородного вещества - по данным литературы), образующаяся ¡следствие его стяжения локальным центром самоорганизации (приложение 2, рис 1в-2)

Аморфная фация - деструктурированная фация, характеризующаяся отсутствием истемной оргаговации - отсутствует разделение на зоны, нет радиальных трещин и конкреций, может быть наличие единичных незавершенных отдельностей (приложение 2, ис 1г)

Двойная фация - визуально наличие как бы двух самостоятельных фаций (меньшей и большей по размеру), наложенных друг на друга (приложение 2, рис 1д)

Циркулярно распотоженные трещины - отсутствие радиальных трещин и наличие циркулярных, повторяющих окружность фации (приложение 2, рис 1е)

Незавершенные конкреции - конкреции в отдельностях не сформированы, растянуты - отсутствует округлая симметрия, границы контуров размыты (приложение 2, рис le)

«Черная» трещина - неполная трещина фации с горизонтальным расслоением плазмы или сыворотки крови на ее дне и образованием воздушной прослойки (приложение 2, рис 1ж-1)

Трещины «серебра» - ряд мелких параллельных линейных темных трещин, расположенных у периферии конкреции (приложение 2, рис 1ж-2)

«Трещина-конус» - конусообразное растрескивание поверхности фации (приложение 2, рис 1з)

Гребешковая структура - линейная трещина с отходящими от нее по одну сторону мелкими трещинами, напоминающая форму гребешка (приложение 2, рис 1и)

Бляшка - округлое образование, возвышающееся над поверхностью фации (приложение 2, рис 1к)

Жгутовые трещины - радиальные трещины с приподнятыми краями фации формирующие их стенки (приложение 2, рис 1л)

Дендритовые структуры в центральной зоне - кристаллические структуры, имеющие форму дендритов с делениями на ветви 1-го, 2-го и иногда 3-го порядков (приложение 2, рис 1м)

Складчатость - локальное смещение рельефа фации с образованием параллельных складок на ее поверхности (приложение 2, рис 1н)

Структура «листа» - растрескивание в толще фации вдоль радиальной трещины с образованием воздушной прослойки, что во фронтальной плоскости в совокупности напоминает структуру «листа» (приложение 2, рис lo)

Изучение анизотропных свойств структурных элементов фации Изучение анизотропных свойств структурных элементов фаций сыворотки и плазмы крови проводилось при помощи оптического поляризациошюго микроскопа «ПОЛАМ Р - 211», совмещенного с цифровой видеокамерой и персональным компьютером

Измерение размеров морфологических элементов Юстирование результатов исследования Калибровка измерительного инструментария проводилась по стандартному тест-объекту-микрометру (ОМ-ДТ 7,21 6 009 ПС) с ценой детения 0,005 мм ± 0,00003

Лабораторно-инстументальная характеристика обследуемых пациентов Веем больным основной группы и группы сравнения проводилось полное общеклиническое исследование, определялись уровни основных биохимических параметров общего холестерина (ХС), триглицеридов (ТГ), глюкозы крови и креатшпша фотоколориметрическим методом на приборе Clima-15 «Испания» с использованием тест-наборов глкжоза-ФС «ДДС», триглшериды-ФС-(бОО) «ДДС», холестерин-ФС-(бОО) «ДДС», креатшшн ФС (120) «ДДС» (производитель ЗАО «Диакон-ДС»)

Методы математического и статистического анализов Статистический анализ проводился с помощью пакета программ STATISTICA, версия 6 0 (Copyright StatSoft, Inc, 1984-2001) Рассчитывались параметры описательной статистики (среднее арифметическое, медиана, мода, частота моды, вариабельность, симметричность и островершинность) и построение нормальных вероятностных кривых Асимметрия и эксцесс менее 0,5 и более -0,5 считались малыми, соответствующими нормальному закону распределили признака Проверка статистических гипотез проводилась при помощи построения таблиц сопряженности с расчетами критерия максимального правдоподобия Пирсона, Хи-квадрата, критериев Вальда-Вольфовитца, U критерия Манна-Уитни (Медик В А , Токмачев M С , Фишман Б Б, 2000, Реброва О Ю, 2006)

Результаты исследования и их обсуждение Все обследованные группы пациентов были относительно однородны и сопоставимы по основным биохимическим параметрам уровням общего холестерина, мглицеридов, глюкозы крови и креатинина Как видно из табл 2, пациенты группы 1 и группы II не разчичались по уровням глюкозы крови, общего холестерина, триглицеридов и креатинина

Табчща 2

Иссчедуемые биохимические параметры пациентов группы lull

данные представлены в виде M±SD)

Группы Глюкоза крови (ммоль/л) Общий холестерин (мг/дл) Триглицериды (мг/дл) Креатишш (мг/дл)

I 5,6 ± 1,89 190 ±35,5 102 ±28,5 0,78 ± 0,03

II 5,5 ± 1,0 179 ±29,5 95 ± 18 0,76 ±0,01

Р 0,86 0,60 0,60 0,39

Также не различались по уровням глюкозы крови, общего холестерина, триглицеридов и креатинина пациенты групп I и II зрелого, пожилого и старческого возраста, включенные в исследование (табл 3)

Табчща 3

Исследуемые биохимические параметры пациентов зречого пожилого и старческого возраста пациентов группы I и II

Биохимические Возраст Группа I Группа II p-level

параметры

Глюкоза крови (ммоль/л) Зрелый возраст 5,4+1,72 5,1+0,73 0,79

Пожилой возраст 5 8+2,21 5,9+0,91 0,68

Старческий возраст 6,5+2,89 5,9+1,95 0,51

Общий Зрелый возраст 180+37,9 177+27,8 0,06

холестерин Пожилой возраст 194+18,3 189+34,4 0,68

(мг/дл) Старческий возраст 222+55,8 164+19,6 0,51

Триглицериды (мг/дл) Зрелый возраст 102,4+36,8 94+19,0 0,25

Пожилой возраст 95+7 3 101+19,3 0,42

Старческий возраст 118+20,5 83+8,2 0,13

Креатинин (мг/дл) Зрелый возраст 0,78+0,02 0,76+0,02 0,25

Пожилой возраст 0,77+0,02 0,76+0,01 0,84

Старческий возраст 0,85+0,06 0,77+0,03 0,13

Пространственная и временная самоорганнзация плазмы и сыворотки крови пациентов группы I

Принципиальная структура полученных фаций была аналогична описанной в работах В Н Шабалина и С Н Шатохиной (2003) и представляла собой концентрическую системную организацию с выделением краевой, промежуточной и центральных зон, с формированием системы трещин и образованием структурных элементов

Длительность клиновидной дегидратации фаций сыворотки крови у пациентов группы I составила 17,23 ± 1,9 мин

Размеры основных зон фаций сыворотки крови пациентов с ОКС составили краевая

зона - 21,8 ± 1,27 мкм, промежуточная зона - 2,1 ± 0,13 мкм, центральная зона - 82,8 ± 3,68 мкм При инкубации сыворотки с 10%-ным раствором альбумина ширина краевой зоны уветичивалась до 25,4 ± 2,81 мкм, размер промежуточной зоны составлял 1,4 + 0,09

мкм, а размер центральной зоны несколько уменьшался - до 77,6 ± 3,98 мкм. I [ри инкубации сыворотки крови с 0,85%-ным раствором хлорида натрия происходило изменение размеров зон фации: краевая зона уменьшалась — до 11.1 ± 1,15 мкм промежуточная увеличивалась - до 3,4 ± 0,73 мкм, центральная увеличивалась - до 88.1 ± 3,08 мкм (рис. 2).

120 100 80 60 40 20 0

ЯР, 1 СП о

II, ь

95 Л О Л о

11,1о А ¿1 1 ,и

1,4 пМ

альбумин + физ. раствор + сыворотка сыворотка сыворотка

□ краевая зона ■ промежуточная □ центральная зона

Рис. 2. Размеры основных зон фаций сыворотки крови пациентов группы I

При сравнительном анализе размеров соответствующих зон трех фаций: нативной сыворотки крови, эквиобъёмной инкубации сыворотки крови с 10%-ным раствором альбумина и 0,85%-ным раствором хлорида натрия. - были получены статистически значимые отличия (р <0,05).

При феноменологическом анализе сыворотки крови пациентов группы I были выявлены нарушения системной организации фаций сыворотки крови, проявляющиеся циркулярным расположением радиальных трещин в 47% случаев (Mod 2) или аморфной структурой - 42% (Mod 2), наличием незавершённых конкреций - 74% (Mod 4), жгутовых трещин в центральной зоне - 38% (Mod 3) и пятен - 63% (Mod 2) (рис. 3). При инкубации сыворотки крови с 10%-ным раствором альбумина циркулярная система трещин была преобразована в частичную радиальную симметрию в 47% случаев (Mod 2), частота и выраженность незавершённых конкреций несколько уменьшались - 32% (Mod 3), но появлялись единичные подсистемные аномалии: трешины «серебра» - 16% (Mod I). «трещины-конусы» - 12% (Mod 1), «чёрные» трещины - 32% (Mod 1) (рис. 4).

6Ш

Рис. 4. Фация сыворотки Рис. 5. Фация сыворотки

крови, инкубированная с крови, инкубированная с

10%-ным раствором 0.85%-ным раствором

альбумина, пациента К.. 45 хлорида натрия, пациента

лет, группа I М., 52 лет, группа I

Рис. 3. Фация сыворотки крови пациента Ц., 57 лег, группа I

¡При инкубации сыворотки крови с 0.85%-пым раствором хлорида натрия симметрия трещин возвращалась к циркулярной - 18% (Mod 2), полностью отсутствовали конкреции - 100% (Mod 4), появлялись дендритовые трещины 1-го и 2-го порядков - 53% (Mod 3) и пятна - 53% (Mod 2) (рис. 5). Во всех трёх сериях фаций выявлялись штриховые трещины в промежуточной зоне: в нативной сыворотке - 74% (Mod 2). в эквиобъёмной инкубации сыворотки крови с 10%-ным раствором альбумина - 42% (Mod 2) и с 0,85%-ным раствором хлорида натрия - 42% (Mod 2).

Для анализа основных временных закономерностей процесса самоорганизации сыворотки и плазмы крови нами были получены поэтапные срезы процесса дегидратации iBO времени с интервалом в 2 минуты. Полученные фации показывали последовательность ¡формирования системных и подсистемных структур на границе перехода жидкой и ,твёрдой фаз.

При временном анализе сыворотки и плазмы крови пациентов группы 1 радиальная ¡симметрия трещин практически полностью отсутствовала во всех 12 образцах - 84-100% ¡(Mod 0). Аморфная структура фации во всех образцах была в 42% случаев (Mod 2), а ¡циркулярная симметрия трещин от 1-й- 69% (Mod 1) к 17-й минуте составляла 20% (Mod ;2). Частота и выраженность незавершённых конкреций были высокими на 2-й минуте -¡46% (Mod 4) с последующим убыванием - до 54% (Mod 2). Частота и выраженность штриховых трещин в промежуточной зоне были практически на всех этапах ¡самоорганизации - 42% - 58% (Mod 2), а выраженность жгутовьгх трещин нарастала к 17-й ■ минуте - от 31% (Mod 1) до 38%) (Mod 3). Динамики в формировании пятен не было - 63% |(Mod 2). К 17-й минуте наблюдалось появление следующих единичных элементов: трещины «серебра» - 16% (Mod 1). «трещины-конусы» - 12% (Mod 1), «чёрные» трещины |- 32% (Mod 1). Структуры «листа» на всех этапах самоорганизации отсутствовали - 96% (Mod 0).

I Пространственная н временная самоорганизация плазмы и сыворотки крови

пациентов группы II

I Длительность клиновидной дегидратации фаций плазмы и сыворотки крови ■пациентов группы II составила 23.1 ±2,1 мин.

Размеры основных зон фации плазмы крови пациентов группы II составили: краевая зона - 24,1 ± 2,51 мкм, промежуточная зона - 1,5 ± 0,09 мкм, центральная зона -94,1 ± 3,46 мкм. При инкубации плазмы с 10%-ным раствором альбумина ширина краевой зоны увеличивалась - до 25,9 ± 2,86 мкм; размер промежуточной зоны составлял 0.8 ± 0,05 мкм, а размер центральной зоны несколько уменьшался - до 77,9 ± 2,01мкм. ¡Обратная ситуация наблюдалась при инкубации плазмы с 0,85%-ным раствором хлорида .натрия: краевая зона уменьшалась - 12,1 ± 1.22 мкм, промежуточная увеличивалась - 4,9 ± 0,99 мкм, центральная увеличивалась - до 101,3 ± 4,76 мкм (рис. 6).

120 1

100--Г—I-

80--¡=,- - —

' | 60---, -

| 40--25^- - -2П-

^"По* —^ —№ -

0 —---—,—I--—,—-L__J-—,

альбумин + плазма </ / ор * плазма

\ плазма

J а краевая зона ■ промежуточная зона D центральная зона

| Рис. 6. Размеры основных зон фаций плазмы крови у пациентов группы Л

\ и

101,3

94.1

77,9

"25^"

0,8

12,1

"Ж

1,5

альбумин + плазма </ / ор плазма

При сравнительном анализе группы II, размеры краевых зон фаций плазмы крови и плазмы, инкубированной с 10%-ным раствором альбумина или с 0,85%-ным раствором хлорида натрия, показали статистически высокозначимые различия (р <0,001). При анализе размеров промежуточных и центральных зон трёх серий фаций группы II достигалась аналогичная величина уровня значимости (р <0,001).

120

100

60 40

' 20

~7ЮГ

-38-

"ТШ7Г

12&,

93,9

-24т8-

Гв

альбумин + сыворотка

физ. раствор -сыворотка

сыворотка

^ краевая зона® промежуточная зонаО центральная зона

Рис. 7. Размеры основных зон фаций сыворотки крови у паг^ентов группы II

Размеры основных зон фации сыворотки крови пациентов группы II составили: краевая зона - 24,8 ± 2,61 мкм, промежуточная зона - 1,6 ± 0,12 мкм, центральная зона -93,9 ± 3,41 мкм. При инкубации сыворотки крови с 10%-ным раствором альбумина ширина краевой зоны увеличивалась до 26 ± 2,91 мкм; размер промежуточной зоны составлял 0,9 ± 0,07 мкм, а размер центральной зоны несколько уменьшался - до 78,4 ± 2,04 мкм. При инкубации сыворотки крови с 0,85%-ным раствором хлорида натрия происходило изменение размеров зон, сходное с изменениями размеров в плазме: краевая зона — 12,6 ± 1,24 мкм, промежуточная - 4,7 ± 0,98 мкм, центральная - 100,1± 4,02 мкм (рис. 7).

Сравнительный анализ размеров соответствующих зон фаций сыворотки крови, полученных при инкубации с 10%-ным раствором альбумина или с 0,85%-ным раствором хлорида натрия и нативной сыворотки, показал статистически значимые отличия (р <0,001) (рис. 7).

При сравнительном анализе размеров основных зон грех фаций плазмы и сыворотки крови не были достигнуты статистически значимые отличия (р>0,05). ;

При сравнительном анализе размеров основных зон фаций сыворотки крови у пациентов группы II с размерами соответствующих зон фаций сыворотки крови у пациентов группы I значимые отличия были получены в краевой -24,8 ± 2,61 мкм У5 21,8 ± 1.27 мкм и центральной зонах - 93,9 ± 3,41 мкм уб 82.8 ± 3,68 мкм, р=0,01. При ; инкубации сыворотки с 10%-ным раствором альбумина отличия составили в промежуточной зоне - 0,9 ± 0,07 мкм уз 1,4 ± 0,09 мкм, р=0,01. При инкубации сыворотки \ с 0,85%-ным раствором хлорида натрия отличия были выявлены в центральных зонах -100,1 ± 4,02 мкм уэ 88,1 ± 3,08 мкм, р=0,001 (табл. 4).

Таблица 4

Размеры основных зон фаций сыворотки крови группы 1 и группы II __(данные представлены в виде М±8Р)

Зоны фаций Размеры зон, мкм Р-1еуе1

Группа I Группа II

Краевая зона сыворотки крови 21,8 ± 1,27 24,8 ±2,61 0,01

Центральная зона сыворотки крови 82,8 ±3,68 93,9 ±3,41 0,01

Промежуточная зона сыворотки крови, инкубированная 10%-ным раствором альбумина 1,4 ±0,09 0,9 ± 0,07 0,01

Центральная зона сыворотки крови, инкубированная 0,85%-ным раствором хлорида натрия 88.1 ±3,08 100,1 ±4.02 0,01

Обращало на себя внимание нарушение системной организации фаций плазмы и сыворотки крови у пациентов группы II, проявляющееся потерей симметрии ¡расположения радиальных трещин - 100% (Mod 0), наличием иррадиальной симметрии трещин - 38%) (Mod 4) vs 47% (Mod 4), высокой частотой и выраженностью несформированных отдельностей и конкреций - 92% (Mod 4) vs 87% (Mod 4), и структур | «листа» - 53% (Mod 2) vs 51% (Mod 2). Отсутствие жгутовых трещин в центральной зоне ! в плазме - 87% (Mod 0) и сыворотке - 80% (Mod 0); пятен в плазме - 40% (Mod 0) и ¡сыворотке - 47%) (Mod 0) (рис. 8). При инкубации плазмы или сыворотки крови с 10%-¡ным раствором альбумина система трещин оставалась иррадиальной - 38% (Mod 4) vs ¡45% (Mod 4); сохранялась незавершённость отдельностей и конкреций - 86% (Mod 4) vs 87% (Mod 4); появлялись подсистемные аномалии в виде трещин «серебра» - 41% (Mod 2) !vs 45% (Mod 2), «трещин-конусов» - 34% (Mod 2) vs 38% (Mod 2), «чёрных» трещин - 48% (Mod 2) vs 53% (Mod 2) и структур «листа» - 62% (Mod 2) vs 53%) (Mod l) (рис. 9). При инкубации плазмы или сыворотки крови с 0,85%-ным раствором хлорида натрия система трещин оставалась иррадиальной - 30% (Mod 4) vs 45% (Mod 4); полностью отсутствовали конкреции - 100% (Mod 4) vs 100% (Mod 4); появлялись дендритовые трещины 1-го и 2-го порядка - 70% (Mod 2) vs 62% (Mod 2) (рис. 10). Штриховые трещины были выявлены во всех сериях фаций: в плазме - 46% (Mod 2) и сыворотке -53% (Mod 2). при инкубации с 10%-ным раствором альбумина - 38% (Mod 2) vs 47% (Mod 2), или с 0,85%-ным раствором натрия хлорида - 38% (Mod 2) vs 40% (Mod 2).

Ыс. 8. Фация сыворотки Рис. 9. Фация сыворотки Рис. 10. Фация сыворотки

крови пациента Л., 54 лет. крови, инкубированная с крови, инкубированная с

руппа II 10%-ным раствором 0,85%-ным раствором

альбумина, пациента В., 61 хлорида натрия, пациента А.,

год. группа II 59 лет. группа II

При сравнительном феноменологическом анализе организации фаций плазмы и выворотки крови пациентов группы II статистически значимые различия выявлены при Инкубации с 10%-ным раствором альбумина в структурах «листа» - 62% (Mod 2) vs 53% Mod 1), р = 0,03.

Значимые различия в фациях сыворотки крови пациентов группы I и II были выявлены в системе трещин - циркулярная симметрия трещин 20% (Mod 2) встречалась

только в группе I и не встречалась во II группе - 100% (Mod 0) Аморфная структура фаций также присутствовала только в группе I - 42% (Mod 2) и не была выявлена в группе II - 100% (Mod 0) Жгутовые трещины - 38% (Mod 3) и пятна в центральной зоне - 63% (Mod 2) присутствовали только в группе I и отсутствовали в группе II - 47-80% (Mod 0) При инкубации сыворотки крови с 10%-ным раствором альбумина отличия были выявлены в системе трещин - циркулярная симметрия трещин в 47% случаев (Mod 2) в группе I и иррадиальная в группе II - 45% (Mod 4), р <0,05 Частота и выраженность подсистемных аномалий была больше в группе II «трещины-конусы» - 38% (Mod 2) vs 12% (Mod 1), «черные» трещины - 53% (Mod 2) vs 32% (Mod 1), p<0,05 Структуры «листа» lie встречались в группе I - 96% (Mod 0) и были выражены в группе II - 53% (Mod 1) Циркулярные трещины в фациях сыворотки крови, инкубированных с 0,85%-пым раствором хлоридом натрия, были только в группе I - 18% (Mod 2) и не встречались в группе II - 100% (Mod 0) Частота и выраженность дендритовых трещин в центральной зоне фаций сыворотки крови в шпсубате с 0,85%-ным раствором хлоридом натрия преобладали в группе II - 62% (Mod 2) vs 32% (Mod 1), р<0,05

У всех пациентов группы II, у которых в фациях были обнаружены полиформные полицикличные элементы, в 3-5-дневный срок в 100% случаев развивался ОКС

При временном анализе нативной плазмы крови пациентов группы II радиальная симметрия трещин полиостью отсутствовала на протяжении 24 минут - 91-100% (Mod 0) Динамики в формировании иррадиальных трещин до 24-й минуты не было - 38-47% (Mod 4) Частота встречаемости широких трещин на 2-й минуте исследования составляла 44% (Mod 1) с последующим увеличением к 24-й минуте - 63% (Mod 1) Частота встречаемости множественных незавершенных конкреций во всех образцах колебалась в пределах 87-92% (Mod 4) Частота и выраженность штриховых трещин в промежуточной зоне были практически одинаковыми на всех этапах самоорганизации - 46-53% (Mod 2) Жгутовые трещины отсутствовали на протяжении всего процесса самоорганизации - 8087% (Mod 0) Наблюдались рост встречаемости единичных трещин «серебра» к 24-й минуте - от 25% (Mod 1) до 45% (Mod 1) и «трещин-конусов» - от 25% (Mod 1) до 38% (Mod 1) и увеличение частоты встречаемости и выраженности «черных» трещин - от 50% (Mod 1) до 53% (Mod 2) Структуры «листа» на начальных этапах этапах самоорганизации составляли 25% (Mod 1) с последующим нарастанием к 24-й минуте - до 62% (Mod 2)

При сравнительном анализе временных закономерностей формирования фаций плазмы крови пациентов групп I и II статистически значимые отличия были выявлены относительно широких трещин, динамика роста которых со 2-й минуты до 24-й минуты была различной - в группе I наблюдалось уменьшение - с 62% (Mod 2 до 38% (Mod 2) к 24-й минуте, а в группе II, наоборот, - увеличение частоты встречаемости - с 44% (Mod 1) до 63% (Mod 1) Частота и выраженность незавершенных конкреций были больше в группе II - 87-92% (Mod 4), а в группе I наблюдалось постепенное убывание выраженности - с (Mod 4) - 46% на 2-й минуте исследования до (Mod 2) - 54% к 17-й минуте Жгутовые трещины в центральной зоне встречались преимущественно в группе I - 38% (Mod 3) vs группа II - 87% (Mod 0) Частота встречаемости структур «листа» к 24-й минуте в группе II нарастала - до 62% (Mod 2)

Пространственная и временная самоорганизация плазмы н сыворотки крови

лиц контрольных групп I и II

Размеры основных зон фации плазмы крови в контрольных группах I и II составили краевая зона - 18,2 ± 1,06 мкм, промежуточная зона - 0,9 ± 0,07 мкм, центральная зона - 89,9 ± 3,97 мкм При инкубации плазмы крови с 10%-ным раствором альбумина ширина краевой зоны увеличивалась до 27,9 ± 2,97 мкм, промежуточная зона практически отсутствовала - 0,01 ± 0,002 мкм, а размер центральной несколько уменьшался - до 78,1 ± 2,01 мкм При инкубации плазмы крови с 0,85%-ным раствором

хлорида натрия размер краевой зоны уменьшался - до 11,4 ± 1,17 мкм, промежуточная и центральная зоны увеличивались - 4.1 ±0,89 мкм vs 95,4 ± 3.92 мкм (рис. 11).

150

5100 г;

£ 50

01 п а 0

□

-Ы7

JZ&

95,4

М4.1

89.9

0,9

альбумин + физ. раствор + плазма плазма плазма

краевая зона Э промежуточная зона О центральная зона

Рис. 11. Размеры основных зон фации тазмы крови у контрольных групп I и II

11ри сравнительном анализе размеров краевых, промежуточных и центральных зон фаций плазмы крови и плазмы крови, инкубированной с 10%-ным раствором альбумина или с 0,85%-ным раствором хлорида натрия, получены статистически значимые отличия (р <0,001).

При сравнении размеров краевых, промежуточных и центральных зон фаций плазмы крови у пациентов группы II с соответствующими размерами зон фаций плазмы крови у контрольных групп I и II статистически значимые отличия были выявлены в краевой - 24,1 ± 2,51 мкм У5 18,2 ± 1.06 мкм (р=0,001) и центральной - 94,1 ± 3.46 мкм уз 89,9 ± 3.97 мкм (р=0,03) зонах. В фациях плазмы крови, инкубированной с 10%-ным раствором альбумина, значимые отличия выявлены только в промежуточной зоне - 0,8 ± 0,05 мкм уэ 0.01 ± 0,002 мкм. р=0,002, а в фациях плазмы крови при инкубации с 0,85%-цым раствором хлорида натрия отличия зафиксированы в центральной зоне - 101,3 ± 4,76 •1км 95,4 ± 3,92 мкм. р=0,01 (табл. 5).

Таблица 5

Размеры основных зон фаций плазмы крови группы II и контрольных групп I и II

Зоны фаций Размеры, мкм Р- level

Группа II Контрольные группы I и II

Краевая зона плазмы крови 24.1 ±2.51 18,2 ± 1,06 0,001

Центральная зона плазмы крови 94.1 ±3.46 89.9 ±3.97 0,03

Промежуточная зона плазмы крови с 10%-ным раствором альбумина 0,8 ± 0,05 0.01 ±0.002 0.002

Центральная зона плазмы <рови с 0,85%-ным раствором хлорида натрия 101,3 ±4,76 95.4 ± 3,92 0,01

Размеры основных зон фации сыворотки крови у контрольных групп I и II составили: краевая зона — 19,9 ± 1.05 мкм, промежуточная зона - 0,7 ± 0,05 мкм, центральная зона - 90,2 ± 3,36 мкм. При инкубации сыворотки крови с 10%-ным раствором альбумина размер краевой зоны увеличивалась до 27,3 ± 2,86 мкм: промежуточная зона практически отсутствовала - 0,01 ± 0,002 мкм; размер центральной зоны несколько уменьшался - до 77,9 ± 2,01 мкм. При инкубации сыворотки крови с 0,85%-ным раствором хлорида натрия размер краевой зоны уменьшался - до 11,1 ± 1,12 мкм, размер промежуточной зоны составил 3,9 ± 0,87 мкм, а размер центральной зоны увеличивался -96,1 ± 3,98 мкм (рис. 12).

120

100 80 | 60

§- 40

а

^ 20

77,9

27,3

0,01

-птг-

3,9

17,9

0,7

альбумин + сыворотка

физ раствор + сыворотка

сыворотка

и краевая зона и промежуточная зона □ центральная зона Рис. 12. Размеры основных зон фаций сыворотки крови контрольных групп I и II

При сравнительном анализе размеров основных зон фаций сыворотки крови у контрольных групп I и II в трёх сериях исследования (сыворотка, сыворотка + альбумин, сыворотка + хлорид натрия) были получены статистически высокозначимые отличия (р<0,001).

В контрольных группах 1 и II при сравнении размеров основных зон трёх образцов фаций сыворотки крови с соответствующими размерами фаций плазмы крови значимых отличий не выявлено.

Отмечены положительная корреляционная взаимосвязь между концентрацией мелкодисперсных белков и размером краевой зоны (белковой) и отрицательная с размером центральной зоны (солевой). Обратная картина наблюдается в отношении концентрации ионов №' и СГ. Следует отметить, что промежуточная зона более выражена в образцах, инкубированных с 0,85%-ным раствором хлорида натрия.

Полученные результаты согласуются с общепринятым представлением о преимущественном белковом составе краевой зоны, преобладании солей в центральной зоне и белково-солевом составе промежуточной зоны (Шабалин В.Н., 2002; Тарасович Ю.Ю., Аюпова А.К., 2003).

При сравнении размеров основных зон фаций сыворотки крови в трёх сериях исследования (сыворотка, сыворотка + альбумин, сыворотка + хлорид натрия) у пациентов группы I и добровольцев контрольных групп I и II статистически значимые отличия отмечены: в краевой - 21,8 ± 1,27 мкм уэ 17,9 ± 1,05 мкм и центральной - 82,8 ± 3,68 мкм уэ 90,2 ± 3,36 мкм, р=0,04 зонах. В фациях, инкубированных с 10%-ным раствором альбумина, значимые отличия были выявлены только в промежуточной зоне -

1,4 ± 0,09 мкм УЭ 0,01 ± 0,002 (р=0,001), а в фациях, инкубированных с 0,85%-ным раствором хлорида натрия, отличия отмечены в центральной зоне фаций - 88,1 ± 3,08 мкм уэ 96,1 ± 3,98 (р=0,01)

При сравнении размеров краевых, промежуточных и центральных зон трех образцов фаций сыворотки крови у пациентов группы II и добровольцев контрольных групп I и II статистически значимые отличия зафиксированы в краевой - 24,8 ± 2,61 мкм уэ 17,9 ± 1,05 мкм (р= 0,001) и центральной - 93,9 ± 3,41 мкм уэ 90,2 ± 3,36 мкм (р=0,03) зонах В фациях, инкубированных с 10%-ным раствором альбумина, значимые отличия отмечены только в промежуточной зоне - 0,9 ± 0,07 мкм уб 0,01 ± 0,002 мкм, р=0,002, а в фациях, инкубированных с 0,85%-ным раствором хлорида натрия, отличия отмечены в центральной зоне - 100,1± 4,02 мкм уэ 96,1 ± 3,98 мкм, р=0,01 (табл 6)

Табчица 6

Размеры основных зон фаций сыворотки крови группы II и контрольных групп I и II _(данные представлены в виде М^Р)

Зоны фаций Размеры, мкм Р-

Группа II Контрольные группы I и II level

Краевая зона сыворотки крови 24,8 ±2,61 17,9 ± 1,05 0,001

Центральная зона плазмы крови 93 9 ±3,41 90,2 ± 3,36 0,03

Промежуточная зона плазмы крови с 10%-ным раствором альбумина 0 9 ± 0,07 0,01 ±0,002 0,002

Центральная зона плазмы крови с 0,85%-ным раствором хлорида натрия 100,1± 4,02 96,1 ±3,98 0,01

Сравнительный феноменологический анализ процесса самоорганизации плазмы -рови в контрольных группах I и II не показал значимых отличий, что позволило в (альнейшем их не разграничивать Сравнительный феноменологический анализ, в онтрольных группах I и II, фаций плазмы и сыворотки крови и их инкубатов с 10%-ным аствором альбумина или 0,85%-ным раствором хлорида натрия значимых отличий не оказал, р>0,05

При феноменологическом анализе фаций плазмы крови в контрольных группах I и I установлено, что преобладал следукшпш тип фаций наличие частично радиальной имметрии трещин - 48% (Mod 3), завершетшых конкреций 48% (Mod 3) и отсутствие ррадиалыюй симметрии трещин - 92% (Mod 0) В фациях плазмы и сыворотки крови онтрольных групп I и II структурные аномалии не обнаружены (рис 13)

При инкубации плазмы и сыворотки крови у контрольных групп I и II с 10%-ным аствором альбумина частично радиальная симметрия трещин была преобразована в адиалыгое растрескивание Трещины достигали центра фации в 36% случаев (Mod 3) тсутствовали структурные аномалии Исключение составили «черные» трещины, езначителыюе количество которых (1 -2 в фации) встречалось в 17% случаев

При инкубации птазмы и сыворотки крови контрольных групп I и II с 0,85%-ным аствором хчорида натрия происходило частичное радиальное растрескива1ше оверхности фации - 56% (Mod 2), в 72% случаев исчезала иррадиальная симметрия ещин, в 100% - циркулярные трещины и аморфная фация Центральная зона была ыполнена кристаллическими структурами с длинными ветвями 2-го и 3-го порядков в ~>% стучаев (Mod 4) В 96% случаев полностью отсутствовали такие подсистечные ючалии, как штриховые трещины в промежуточной зоне и жгутовые трещины в

центральной зоне. Не были выявлены трещины «серебра» в 88%случаев, «трещины-конусы» в 92% случаев, «чёрные» трещины в 79% случаев, пятна в 40% случаев, структуры «листа» в 81% случаев (рис. 14). Явление анизотропии в этой серии исследования установлено не было.

•ЙЧ.

>1

*

ШШ

kf " \К

МШи

Рис. 13. Фация сыворотки крови пациента С., 38 лет, контрольная группа I II

Рис. 14. Фация сыворотки крови, инкубированная с 0,85%-ным раствором хлорида натрия, пациента Е., 41 год, контрольная группа II

Пациенты I группы исследования и практически здоровые добровольцы различались по типу растрескивания препаратов сыворотки крови: в I группе преобладающим было умеренное (Mod 2) циркулярное растрескивание, в то время как в контрольных группах - выраженная (Mod 3) радиальная симметрия трещин. Количество завершешгых конкреций было больше в контрольных группах I и II, в отличие от группы I (р <0,05). Жгутовые трещины - 38% (Mod 3) и пятна в центральной зоне - 63% (Mod 2) были выявлены только в группе I и отсутствовали в контрольных группах I и II — 98% (Mod 0).

Сопоставление клинических критериев и биохимических маркеров острого коронарного синдрома с параметрами пространственно-временной организацией сыворотки крови доказало достоверную диагностическую значимость последней. Была выявлена положительная корреляционная связь между частотой и выраженностью следующих структурных элементов фаций сыворотки крови больных с инфарктом миокарда — циркулярные трещины или аморфные фации, незавершённые конкреции, - и уровнем биохимических маркеров некроза миокарда (КФК. КФК MB) - г +0,36 при р=0,002.

Также было выявлено, что уровни общего холестерина и триглицеридов у пациентов стабильной стенокардией III функционального класса обладают сильной прямой функциональной связью с морфологическим типом фаций (иррадиальная симметрия трещин, незавершённость конкреций, структуры «листа»), г=0,34, р=0,009.

Учитывая выявленные многочисленные корреляционные связи между исследуемыми параметрами (табл. 7), было принято решение об оценке вклада изученных признаков для отнесения исследуемых пациентов к той или иной группе

Таблица 7

Корреляционные зависимости между биохимическими показателями и морфологическими параметрами фаций сыворотки крови пациентов группы / и группы ¡1

Параметр 1 Параметр 2 г Р

КФК (ед/л) Ширина центральной зоны фаций сыворотки крови пациентов группы I, мкм -0,52 0.0027

КФК (ед/л) Время клиновидной дегидратации фаций сыворотки крови пациентов группы I - 0,51 0,0029 '

КФК MB ед/л) Ширина центральной зоны фаций сыворотки крови пациентов группы I, мкм -0,52 0,0027

КФК MB ед/л) Время клиновиднои дегидратации фаций сыворотки крови пациентов группы I -0,51 0,0029

ТГ (мг/дл) Частота иррадиалыюй симметрии трещин фаций сыворотки крови пациентов группы II + 0,47 0,0029

ТГ (мг/дл) Частота структур «листа» фаций сыворотки крови пациентов группы II + 0,58 0,0016

Для чего использовался пошаговый дискриминантный анализ, результатом которого стала оценка коэффициентов математической модели - линейной искриминантной функции

У = а/хI + С12Х2 + а&з + + да + С,

где х, - наиболее информативные из анализируемых признаков, а, - коэффициенты, - константа

Выбор признаков для включения в конечную дискриминантную функцию существлялся, исходя из силы корреляционной связи (табл 8)

Табчица8

_Признаки, включенные в конечную дискриминантную функцию

Wilks Lambda

p-level

Пирина промежуточной зоны фации сыворотки крови, шкубированной с 10%-ным раствором альбумина

0,371

0,007

Пирина центральной зоны фации сыворотки крови, шкубированной с 0,85%-ным раствором хлорида натрия

0,305

0,0003

Пирина краевой зоны фации сыворотки крови

0,267

0,049

ирина центральной зоны фации сыворотки крови

0,498

0,0003

Учитывая количество анализируемых групп, был проведен канонический анализ ыделены две значимые канонические функции (ЯООТ1 и 1ЮОТ2)

В пространстве дискриминантпых функций (1100Т1 и ЯООТ2) центроиды выборок сследуемых групп образовали три группы При этом, первая каноническая функция реимуществешю дифференцировала контрольные группы I и II от групп I и II, в то ремя как вторая каноническая функция вносила вклад в дифференцировку I и II групп 1аиболыную силу связи с первой канонической функцией обнаружили следующие еременные ширина краевой зоны фации сыворотки крови и ширина промежуточной оны фации сыворотки крови, инкубировашгой с 10%-ным раствором альбумина, со торой - ширина центральных зон фаций нативной сыворотки крови и в эквиобъемной нкубации с 0,85%-ным раствором хлорида натрия

Выводы

1 Разработана система функционально-морфологических маркеров острого оронарного синдрома, в основу которой положено определение типа пространственно-ременной самоорганизации сыворотки крови

2 Сопоставление клинических критериев и биохимических маркеров острого оронарного синдрома с параметрами пространственно-времегаюй самоорганизации

1воротки крови доказало достоверную диагностическую значимость последних При стром коронарном синдроме для процесса самоорганизации сыворотки и плазмы крови арактерны (вероятность от 85 до 92%) циркулярная симметрия трещин, еноменологическая скудность фаций, длительность клиновидной дегидратации с

тенденцией к уменьшению - 17,23 ± 1,9 мин, уменьшение ширины центральной зоны фаций-81,7 ± 4,78 мкм

3 Уровни общего холестерина и триглицеридов у пациентов стабильном стенокардией III функционального класса коррелируют с морфологическим типом фацин сыворотки крови, характеризующимся иррадиальной симметрией трещин (г=0,47, р=0,0029), незавершенностью конкреций (г=0,43, р=0,003) и наличием структур «листа» (г=0,58, р=0,0016)

4 Установлены принципиальные различия между пациентами с ишемическон болезнью сердца и лицами без сердечно-сосудистой патологии по характеру пространственно-временной организации сыворотки крови У лиц без сердечнососудистой патологии в 99% случаев встречались радиальное растрескивание фацин сыворотки крови, сформированные отдельности и конкреции, отсутствовали аномальные структуры

5 Выявлена прогностическая значимость обнаружения полицикличиых полиформных структур в фациях сыворотки крови пациентов со стенокардией стабильного течещш в 100% случаев предсказана дестабилизация коронарного кровотока (формирование острого коронарного синдрома) в 3-5-дневный срок в рамках доступного к анализу материала

6 Установлена возможность разграничения стабильных и нестабильных форм стенокардии по морфологическим структурам фации сыворотки крови Фация сыворотки крови с циркулярной симметрией трещин и феноменологической скудностью характерна для пациентов с острым коронарным синдромом, а для пациентов со стабильной стенокардией в 98% случаев фация сыворотки крови имеет вид иррадиалыюго растрескивания с незавершенными конкрециями и подсистемнычн включениями структуры «листа», «черные» трещины, трещины «серебра», «трещины-конусы»

7 Разработан синергетический алгоритм диагностики острого коронарного синдрома, основанный на изучении особенностей пространственно-временной организации сыворотки и плазмы крови пациентов с ишемической болезнью сердца в условиях моделирования соотношений грубо- и мелкодисперсных белков и ионов натрия и хлора

Практические рекомендации

1 В комплексное обследование больных со стенокардией напряжения III функционального класса целесообразно включать исследование дегидратациоиной самоорганизации сыворотки крови согласно разработашюму синергетическому алгоритму для выявления степени риска развития острого коронарного синдрома

2 Пациентов с подозрением на острое коронарное событие и выявлением в фациях сыворотки крови циркулярных трещин, феноменологической скудности, жгутовых трещин и пятен в центральной зоне целесообразно рассматривать как больных с дестабилизацией коронарного кровотока

3 Пациентов, у которых фации сыворотки крови представлены в виде иррадиального растрескивания с незавершенными коикрециями и структурами «листа» следует рассматривать как больных со стабильным течением коронарной болезни

Приложения

Приложение 1

Синергетпческии алгоритм диагностики острого коронарного синдрома

1 Забор образцов цельной крови для приготовления сыворотки и плазмы крови у пациентов с ишемической болезнью сердца

2 Приготовление препаратов фаций сыворотки и плазмы крови экспресс-методом с фиксированием длительности самоорганизации сыворотки и плазмы крови

3 Оценка размеров зон, наличия и частоты встречаемости в препарате структурных элементов, длительности самоорганизации сыворотки и плазмы крови

4 Если обнаружены потиформиые полицикличные структуры - высокий риск развития острого коронарного синдрома в течение 3-5 суток с момента диагностики - клтшческий мониторинг состояния пациента

5 Если характер системы трещин в фации сыворотки крови представлен в виде иррадиалыюго растрескивания с незавершешплчи конкрециями, и присутствуют стедующие форменные элементы структуры «листа», «черные» трещины, трещины «серебра», «трещины-конусы», время высыхания больше 21 мин -наиболее вероятно стабильное течение ишемической болезни сердца - продолжить наблюдение и лечение

6 Если в изучаемой фации сыворотки крови отмечаются циркулярная симметрия трещин, феноменологическая скудность, длительность клиновидной дегидратации равна 21 мин и меньше, ширина центральной зоны фаций - 82,8 и меньше -высокий риск ранних стадий острого коронарного синдрома - целесообразно проведение исследования традиционных маркеров дестабилизации коронарного кровотока и по результатам - принятие решения о рациональности госпитализации в блок интенсивной терапии и проведения соответствующих лечебных мероприятий

7 Если время самоорганизации меньше 21 мин, но характер структурных элементов и система трещин не позволяют достоверно вынести заключение, произвести инкубацию сыворотки крови пациента с физиологическим раствором и приготовить препарат фации сыворотки крови, при обнаружении циркулярной симметрии трещин - высокий риск острого коронарного синдрома -целесообразно проведение исследования традиционных маркеров дестабилизации коронарного кровотока и по результатам - принятие решения о рациональности госпитализации в блок интенсивной терапии и проведения соответствующих лечебных мероприятий

8 В отрицательном случае провести инкубацию с альбумином и при обнаружении -структур «листа», «черных» трещин, трещин «серебра», «трещин-конусов» -наиболее вероятно стабильное течение ишемической болезни сердца - продолжить наблюдение и лечение

Приложение 2

Феноменологическое описание изучаемых морфологических элементов фаций

Список принятых сокращений

ИБС - ишемическая болезнь сердца

ОКС - острый коронарный синдром

КФК - креатинфосфокиназа

КФК MB - МВ-изоформа креатинфосфокиназы

Mod - мода

ТГ - трнглицериды

УЗ-ангиоскопия - ультразвуковая ангиоскопия

ХС - общий холестерин

г - коэффициент корреляции

Списокpaoohi, onvd.wkoeauMX ко п^емг диссертации G:pi ce:u, ЮВ Простпанстьенно-врсменная организация плазмы крови при пшимическоП болеши сердца/Ю В Сергеева, 1 И Малчнова// Моюде^ь'и паук* „тоги и перспективы Материалы Ы осенней науч -практ конф студешон и молодыхус"ых -Сарггив, 2005 -С 118-119

Диагностическое з.-ач;чие морфо.книи плазмы у пациентов с ишейичгсксч бстезнь'о сердца /ПИ Млиши/а, Г В Си,юнцы о, ЮЗ Cepacia и др // Проблемы опп.чеа ок физики Man.спали v-ii vie клу народной Школы по оптике, лалпчоЛ физи.се и 6».odjn2 же -Саратов, 2006 -С 33-36

Сергееьа Ю В Иасмч^еская болезнь сердца у чоздновозрастной группы пациентов диагностические вошожности исследов?ния функциональной уорфологьи плазмы крови / ЮР Сергеева, Л И Малинова // Кардиология 2006 Материалы VllI Всерос ьау шого форума -М,2006 -С 123-125 Функщ опальная мопфолегия плазмы коози - роль в диагностике острого ьорочю.юго события / ЛИ Малчновл, ЮВ Сергеева, ТП Денисова, П'Я До1.1 апэвгкнй // Песгло/кные сссо^чия при сердеч. о-сссудисть.х заболеваниях Материалы Бсгрос на^ч-практ конф -М.2006 — С°-10

Диагностическое зчачеьиг исследования процессов фазового перехода плазмы крови больных ишемичсскои болезнью сердца /ЛИ Малинова, Ю В Сергеева, ТП Денисова и лр /'Материалы Рос национального конгресса кардиологов -М, 2006 -С 116-117

Равняя диагностика острого керонаршло cpiiaouva позможности исследования функциональной морфологии плазмы крлчи / Л И Малинова, Ю В Сергеева, ТП Денисова, Г В Симсненко II Мир люд:й с ограниченными возможностями, 2006 Материала ноччою форума -М ,2006 -С 137-139

Ctp-ser' Ю В Клинп-<есксе зниениг ¡.селсдзвачия процессов фазового перехода м^ьзмы крссч сонных ишеигчгскон беадз'чле сердца // ЮВ CepieeBa. ЛИ Ма"чнсвн // Молодом, ч наука "тогч и перспективы Материалы \,eA|«:nio,ia.i vio"; пауч -практ koi ф студентов и молодых ученых с' мс/л^народным участием-Саратов, 20C.J-С 206-207

Diag".Oi*.c va'iie ot plasma morphology in patients with coronary heart disease / 1 I Malinova, Y V Sergeeva С V Sinjnenfco et al // Proc SPIli - Washington, 2006 -!'P 61631! -1 — 61631L—:

(jross protein .nflucnce opon blood plasna ard serum self organization processes in f atien.s with ccona.-y hea^ cisease /' L I vlaimova, Y V Sergeeva, T P Denisova et al /'Octiu! Iccmo'ogics in Biophysics £ Mediciric International Workshop - Saratov, 200b - Pi' 102-105

Plarma lipids proi le'ard erythrocytes system in oatients with coron'ary heart disease / I I Malmcva, Y V Seieeeva,nv Sn.onenko ct a! /,'Proc SI'IE - Washington 2006 -Vo' 6163 -1>P 61635-1-6163Ю-3

Влияние гр^бодисперснон фракции белкоч плазмы крови на процессы ее дегтоатационной самоорганизации у больных ишемической болезнью сердца / ЛИ Малинова, [О В Сергеева. Г В Симоненко и лр // Материалы 10-й Международной научной Школы по оптике, "азерней физи&е н биофизике -Сара-ов 200- -С 13-16

Диагностическое зна le.nie дегидратацнонной самоорганизации пла!мы крови бо ibrLix чысмпчссьол болезнью сердца / ЛИ Малш.ова, ЮВ CepieeBa, Г В Снмоненко п др //Клл; :ricc,.as ^туора^орная диагностика -2007 -Лг°10 -С 1416

Ф.-чкциотальная чорц)олоп!я сыворотки крови больных ишемической болезнью серльг Атлас / Сое ЛИ Малинова, АЛ Свистучоз, ТП Денисова, ЮВ Cepretca -Саратов Повой ве-ср, 2008 -гбе

АКТУАЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Сердечно-сосудистые заболевания и борьба с ними представляют наиболее важную клиническую и социальную проблему современной медицины, так как даже в экономически развитых странах по оценке European Task Force распространённость ишемической болезни сердца (ИБС) остаётся довольно высокой и составляет 10-20% среди людей в возрасте 6574 лет (Task force of the European Society of Cardiology on Cardiovascular Mortality and Morbidity Statistics in Europe, 1997). Российская Федерация, по данным Европейского общества кардиологов, относится к числу стран с высокой распространённостью ИБС. Число лиц, страдающих стенокардией в России, составляет 30-40 тыс. человек на 1 млн. населения. Частота развития ИБС увеличивается с возрастом: пик заболеваемости у мужчин отмечен в 6070 лет, после чего частота ИБС несколько снижается (Чазов Е.И. и соавт., 1999). В 2000 году в России от болезней сердца и сосудов умерло 545 162 мужчин и 686 211 женщин, что составило 46% и 65% соответственно от общей смертности (Оганов Р.Г., 2002; Аронов Д.М. и соавт., 2006).

ИБС среди сердечно-сосудистых заболеваний занимает первое место по частоте осложнений и числу смертей и является основной проблемой современной кардиологии, поскольку тесно взаимосвязана с артериальной гипертензией, сердечной недостаточностью, ремоделированием миокарда, нарушениями ритма и проводимости. Особую серьёзность течение и прогноз ИБС приобретают при развитии острого коронарного синдрома (ОКС), включающего нестабильную стенокардию и инфаркт миокарда различной распространённости (Грацианский H.A., 1996; Мазур H.A., 1999; Braunwald Е. et al., 2000).

Понятие «острый коронарный синдром» получило распространение во второй половине 80-х гг. и правомочность этого термина подтверждена уточнёнными данными о единстве морфологии и патогенеза нестабильной стенокардии и инфаркта миокарда (Грацианский H.A., 1996; Gorlin R.et al., 1986; Fuster V. et al., 1992; Libby P., 1995; Davies M.J., 2000). Внедрение в широкую практику коронаровентрикулографии в начале 90-х годов привело к изменению традиционных представлений о патогенезе - ОКС как следствие обструкции атеросклеротической бляшкой коронарной артерии (Alderman E.L. et al., 1993; Ambrose J.A., Weinrauch M., 1996), и появилось мнение, что большинство нестабильных форм ИБС возникает при менее чем 50-70% стенозах, оцениваемых обычно как «гемодинамически незначимые» (Serruys P.W. et al., 1987; Hasket D. et al., 1988; Falk E. Et al., 1995).

Более того, оказалось, что на основании коронарографической картины нельзя с большой степенью вероятности предсказать возможность разрыва бляшки и прогнозировать дальнейшее течение ИБС (Мазур H.A., 1999; Reiner J.S. et al., 1994; Topol E.J. et al., 1995). В связи с этим появилось новое понятие «стабильная» и «нестабильная» бляшка (Грацианский H.A., 1996; Крыжановский В.А., 2001; Окороков Ф.Н., 2002; Falk Е., 1992). Показано, что нестабильность бляшки не связана ни с её величиной, ни со степенью стеноза коронарной артерии (Davies M.J. et al, 1986; Wilson J.M. et al, 1995). Определение с помощью коронарографии и внутрисосудистой УЗ-ангиоскопии нестабильных бляшек и места образования будущего тромбоза оказались недостаточно чувствительными (De Feyter P.J. et al., 1995). В настоящее время большое внимание привлекает метод ядерно-магнитного резонанса (ЯМР) для получения среза бляшки и определения её нестабильности по толщине покрышки и объему липидного ядра (Крыжановский В.А, 2001; Farb A., Burke А.Р. et al., 1996). На практике превентивные инвазивные вмешательства с помощью метода ЯМР пока невозможны, так как не все нестабильные бляшки разрываются и не все разрывы ведут к коронарному тромбозу (Wilson J.M., Capek Р. et al., 1995). Для развития острого коронарного синдрома одного разрыва бляшки недостаточно (Лутай М.И., 2002; Davies M.J. et al., 1986). По данным патологоанатомических исследований, большинство разрывов протекает практически бессимптомно, и при аутопсии погибших от некардиальных причин обычно находят несколько бляшек с трещинами и разрывами без признаков их окклюзионного тромбообразования (Hangartner J.R.W, et al., 1986; Hasket D. et al., 1988; Falk E., 1992).

Таким образом, с ростом технических возможностей клиницист оказывается перед лавиной отдельных фактов, суммация которых чревата попаданием в так называемые «информационные ловушки». Где та грань в сердечно-сосудистом континууме, за которой начало развития ОКС? Разработка системы предикторных маркеров ОКС является животрепещущей проблемой современной кардиологии.

Все более широкое применение в клинике внутренних болезнй приобретает методика исследования функциональной морфологии биологических жидкостей. В настоящее время установлено, что передача информации твердофазной структуре биологической жидкости из жидкой среды происходит за счёт упрочнения нековалентных (слабых) связей, формирующих информационное содержание молекул. Если любое изменение физико-химического состояния плазмы крови находит отражение в специфическом формообразовании её структуры, то появляется возможность выявить изменения биоструктур на молекулярном уровне и открыть принципиально новые позиции для диагностики на доклиническом этапе развития патологического процесса (Шабалин В.Н., Шатохина С.Н., 2001).

В связи с вышесказанным нами была поставлена следующая цель.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ Оптимизация диагностики острого коронарного синдрома с помощью маркеров функциональной морфологии сыворотки крови.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

1. Сопоставить наличие важнейших клинических критериев и биохимических маркеров острого коронарного синдрома с параметрами пространственно-временной самоорганизации сыворотки крови у пациентов с острым коронарным синдромом.

2. Сопоставить наличие важнейших клинических критериев и кардиальных факторов риска с параметрами пространственно-временной организации сыворотки крови у больных стабильной стенокардией III функционального класса.

3. Изучить пространственно-временную самоорганизацию сыворотки крови у лиц без сердечно-сосудистой патологии.

4. Оценить возможность прогноза дестабилизации коронарного кровотока у больных с исходно стабильным течением стенокардии по пространственно-временным характеристикам образования фации сыворотки крови.

5. Изучить возможность разграничения стабильного и нестабильного течений ишемической болезни сердца по морфологическим и временным параметрам процессов самоорганизации сыворотки крови.

6. Разработать синергетический алгоритм диагностики острого коронарного синдрома и ранних стадий дестабилизации хронического течения ишемической болезни сердца.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЯ ЗАКЛЮЧАЕТСЯ В ТОМ,

ЧТО ВПЕРВЫЕ

Разработана система предикторных функционально-морфологических маркеров острого коронарного синдрома — тип пространственно-временной организации сыворотки крови.

Доказана диагностическая значимость пространственно-временной организации сыворотки крови у пациентов с острым коронарным синдромом. Наибольшее диагностическое значение имеют следующие морфологические особенности фации сыворотки крови: циркулярная симметрия трещин, феноменологическая скудность фаций, сокращение длительности клиновидной дегидратации - 17,23 ±1,9 мин, уменьшение ширины центральной зоны фаций (82,8 ± 3,68 мкм).

Выявлены и статистически доказаны принципиальные различия пространственно-временной самоорганизации плазмы и сыворотки крови у больных стабильной стенокардией, пациентов с острым коронарным синдромом и практически здоровых лиц. Фация сыворотки крови с циркулярной симметрией трещин и феноменологической скудностью характерна для пациентов с острым коронарным синдромом, а у пациентов при стабильных формах стенокардии в 98% случаев фация имеет вид иррадиального растрескивания с незавершёнными конкрециями и подсистемными включениями: структуры «листа», «черные» трещины, трещины «серебра», «трещины-конусы». У лиц без сердечно-сосудистой патологии в 99% случаев встречались радиальное растрескивание фации сыворотки крови, сформированные отдельности и конкреции, отсутствие аномальных структур.

На доступных клиническом и лабораторно-инструментальном материалах впервые выявлена прогностическая значимость обнаружения полицикличных полиформных структур в фациях сыворотки крови пациентов со стенокардией стабильного течения: в 100% случаев предсказана дестабилизация коронарного кровотока (формирование острого коронарного синдрома) в 3-5-дневный срок.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ На основании анализа полученных результатов разработан синергетический алгоритм диагностики острого коронарного синдрома, позволяющий оптимизировать диагностику и прогнозирование наступления острого коронарного синдрома у пациентов с ишемической болезнью сердца.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ На процесс дегидратационной самоорганизации сыворотки крови пациентов с острыми и хроническими формами ишемической болезни сердца значимо влияет соотношение грубо- и мелкодисперных фракций белка, что позволяет использовать моделирование концентрации альбумина в качестве диагностического зонда для выявления стабильного состояния пациентов с ишемической болезнью сердца.

Влияние концентраций ионов натрия и хлора на процесс дегидратационной самоорганизации плазмы и сыворотки крови пациентов с острыми и хроническими формами ишемической болезни сердца позволяет использовать моделирование концентраций ионов натрия и хлора в качестве диагностического зонда для выявления острого коронарного синдрома.

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ В ПРАКТИКУ Результаты исследования используются в учебном процессе на кафедре геронтологии и гериатрии ГОУ ВПО Саратовский ГМУ Росздрава и в лечебном процессе ФГУ Саратовский НИИ кардиологии Росмедтехнологий.

АПРОБАЦИЯ ДИССЕРТАЦИИ Результаты диссертационного исследования доложены на международных и российских конференциях: Всероссийской научно-практической конференции "Неотложные состояния при сердечнососудистых заболеваниях" (Москва, 2006); VIII Всероссийском научном форуме «Кардиология» (Москва, 2006); Российском национальном конгрессе кардиологов (Москва, 2006); 9-й Международной научной школе по оптике, лазерной физике и биофизике (Саратов, 2006);

X International School for Junior Scientists and Students on Optics, Laser Physics & Biophysics (Saratov, 2006). По результатам исследования опубликовано 13 печатных работ, из них 1 в реферируемом журнале, рекомендованном ВАК РФ для публикации результатов диссертационных исследований. Подана заявка на изобретение «Способ прогнозирования развития острого коронарного синдрома у больных стабильной стенокардией» (приоритетная справка на изобретение № 2008130236 РФ от 21 июля 2008 г.).

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, 3 глав собственных исследований и заключения. Изложение занимает 180 страниц машинописного текста. Список использованной литературы включает 254 источника, из них отечественных - 92 и иностранных - 162.

Выводы

1. Разработана система функционально-морфологических маркеров острого коронарного синдрома, в основу которой положено определение типа пространственно-временной самоорганизации сыворотки крови.

2. Сопоставление клинических критериев и биохимических маркеров острого коронарного синдрома с параметрами пространственно-временной самоорганизации сыворотки крови доказало достоверную диагностическую значимость последних. При остром коронарном синдроме для процесса самоорганизации сыворотки и плазмы крови характерны (вероятность от 85 до 92%): циркулярная симметрия трещин, феноменологическая скудность фаций, длительность клиновидной дегидратации с тенденцией к уменьшению — 17,23 ± 1,9 мин, уменьшение ширины центральной зоны фаций - 81,7 ± 4,78 мкм.

3. Уровни общего холестерина и триглицеридов у пациентов стабильной стенокардией III функционального класса коррелируют с морфологическим типом фаций сыворотки крови, характеризующимся иррадиальной симметрией трещин (г=0,47, р=0,0029), незавершённостью конкреций (г=0,43, р=0,003) и наличием структур «листа» (г=0,58, р=0,0016).

4. Установлены принципиальные различия между пациентами с ишемической болезнью сердца и лицами без сердечно-сосудистой патологии по характеру пространственно-временной организации сыворотки крови. У лиц без сердечно-сосудистой патологии в 99% случаев встречались радиальное растрескивание фации сыворотки крови, сформированные отдельности и конкреции, отсутствовали аномальные структуры.

5. Выявлена прогностическая значимость обнаружения полицикличных полиформных структур в фациях сыворотки крови пациентов со стенокардией стабильного течения: в 100% случаев предсказана дестабилизация коронарного кровотока (формирование острого коронарного синдрома) в 3-5-дневный срок в рамках доступного к анализу материала.

6. Установлена возможность разграничения стабильных и нестабильных форм стенокардии по морфологическим структурам фации сыворотки крови. Фация сыворотки крови с циркулярной симметрией трещин и феноменологической скудностью характерна для пациентов с острым коронарным синдромом, а для пациентов со стабильной стенокардией в 98% случаев фация сыворотки крови имеет вид иррадиального растрескивания с незавершёнными конкрециями и подсистемными включениями: структуры «листа», «черные» трещины, трещины «серебра», «трещины-конусы».

7. Разработан синергетический алгоритм диагностики острого коронарного синдрома, основанный на изучении особенностей пространственно-временной организации сыворотки и плазмы крови пациентов с ишемической болезнью сердца в условиях моделирования соотношений грубо- и мелкодисперсных белков и ионов натрия и хлора.

Практические рекомендации

1. В комплексное обследование больных со стенокардией напряжения III функционального класса целесообразно включать исследование дегидратационной самоорганизации сыворотки крови согласно разработанному синергетическому алгоритму для выявления степени риска развития острого коронарного синдрома.

2. Пациентов с подозрением на острое коронарное событие и выявлением в фациях сыворотки крови циркулярных трещин, феноменологической скудности, жгутовых трещин и пятен в центральной зоне целесообразно рассматривать как больных с дестабилизацией коронарного кровотока.

3. Пациентов, у которых фации сыворотки крови представлены в виде иррадиального растрескивания с незавершёнными конкрециями и структурами «листа» следует рассматривать как больных со стабильным течением коронарной болезни.