Автореферат и диссертация по медицине (14.00.13) на тему:Обмен свободных аминокислот у больных боковым амиотрофическим склерозом и рассеянным склерозом (клинико-биохимические сопоставления)

ВОЕННО-МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ

РГБ ОД

На правах рукописи

1 3 ФЕБ

ДЕНИЩУК Иван Степанович

ОБМЕН СВОБОДНЫХ АМИНОКИСЛОТ У БОЛЬНЫХ БОКОВЫМ АМИОТРОФИЧЕСКИМ СКЛЕРОЗОМ И РАССЕЯННЫМ СКЛЕРОЗОМ

(клинико-биохимические сопоставления)

14.00.13 — нервные болезни

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

\

САНКТ-ПЕТЕРБУРГ 1996

Работа выполнена в Военно-медицинской академии.

Научный руководитель:

— доктор медицинских наук профессор А. А. Михайленко.

Официальные оппоненты:

— доктор медицинских наук профессор П. Г. Лекарь;

— доктор медицинских наук профессор А. П. Зинченко.

Ведущее учреждение:

— Санкт-Петербургский Государственный медицинский Университет имени И. П. Павлова.

Защита состоится 1996 г. в часов

на заседании диссертационного совета Д 106.03.10 при Военно-медицинской академии по адресу (194175, Санкт-Петербург, ул. Лебедева, д. 6).

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке Военно-медицинской академии.

Автореферат разослан

1996 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук профессор

В. В. НЕЧИПОРЕНКО

- 1 -

ОВДАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕШ. Широкое распространение бокового амиотро фического склероза (БАС) и рассеянного склероза (РС), ранняя и глубокая инвалидизация больных, недостаточная изученность этиологии и патогенеза заболеваний, отсутствие надеотж методов ле чения обуславливают не только медицинскую но и социальную значи мость искомой проблеш, актуальность дальнейшего изменил этих заболеваний (Гордеев Я.Я., 1988;Головкин В.И., 1992 Завашкш И.Л. и соавт. 1990,1991; . Хондкариан 0.А.и соазт.1978,1987; Ваг1Ге1(1 е1. а1.1982; СаБЬтап е<.. а1.1985).

Известно, что развитию ыорфологичес;шх изменений в нервной ткани предшествует ряд метаболических нарушений (Чазва Л.С. 1' соавт.1978).Такие установлено, что зачастую расстройства иетабо-лизма аминокислот (АК) не только осложняют течение болезни, но I становятся ведущим фактором в развитии патологического процес са (Нетахата Я.Н..Ляпун С.Н.1973). В мозге содержатся все необходимые АК не только для построения белков,но и для синтеза некоторых липидов.ряда гормонов,медиаторов и других биологически активных веществ,существенно влиякдих на течение БАС и РС. Поэтому представляется перспективным исследование изменений обмена свободных АК у таких больных.

Литературные данные по исследование свободных АК в плазне крови и ликворе больных БАС и РС носят противоречие^ характер. Изучение нарушений обиена АК при различных варизлтах заболеваний, сопоставление их с данными кл!ШИчесга1х,1я.йр;нологчиес-ких,эндокринологических исследований позволит распшркть возможности объективной оценки особенностей течения заболеваний,разработки критериев ранней диагностики и поиска ¡лвмх подходов к проведению адекватной терапии. Все это предопределяет нсобходи-

мость дальнейшего изучения аминогаюлотного метаболизма у больных БАС и РС.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ. Определить основные закономерности изменений метаболизма свободных аминокислот у больных боковым амиотрофическим склерозом и рассеянным склерозом.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1.Определить содержание свободных аминокислот в плазме крови и цереброспинальной жидкости у больных боковым амиотрофическим склерозом и рассеянным склерозом.

2.Исследовать и сопоставить характер нарушений обмена аминокислот при разлзгашх клинических вариантах этих заболеваний.

3.Провести корреляционный анализ изменений метаболизма свободных аминокислот, серотонина, гормонов и иммунологических параметров у больных боковым амиотрофическим склерозом и рассеянным склерозом.

4.Оценить влияние эпиталачина на метаболизм свободных аминокислот.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ. В настоящем исследовании впервые на большом клиническом материале представлена сравнительная комплексная характеристика изменений метаболизма свободных аминокис-.. лот в плазме крови и ликворе больных Соковым амиотрофическим склерозом и рассеянным склерозом, выявлена их взаимосвязь с различными клиническими вариантами этих заболеваний,обменом серотонина и гормонов. Впервые показано влияние эпифизарного полипептида эпиталамина на аминокислотный обмен. Расшифрованы отдельные звенья патогенеза бокового амиотрофического склероза и рассеянного склероза, обусловленные нарушениями обмена свободных аминокислот.

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ. Результаты прове-

денного исследования имеют ватаоэ значение для понимания некоторых механизмов патогенеза бокового амиотрофшеского склероза и рассеянного склероза. Полученные данные расширяют представление о роли свободных аминокислот в процессе развития двигательных нарушений,гибели мотонейрона,в развитии дсмксл:тш-знруеп;его процесса и могут сдузялъ основанием для разработки новых направлений терапии бокового Ениотрофичесюто склероза и рассеянного склероза. Обнаружение типичных,установленных нами, нарушений обмена свободных аминокислот при боковое амиотрофическом склерозе и рассеянном склерозе может бить использовано, как дополнительный метод лабораторной диагностики заболеваний, а так^е для объективизации активности патологического процесса. Определены показания для назначения зпнталгмица при лечении больных с этим: заболеваниями.

ПОЖКЕНИЯ ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1. У больных боковым амиотрофическич склерозом п рассеянна.! склерозом в плазме крови и ликиоре закономерно обнаруживается наруаешга метаболизма свободных аминокислот.

2.Изменения, обмена свободных аминокислот з плазме крови и ликворе связаны как с метаболизмом биогенных аминов и гормонов та', и с характером клинических проявлении заболеваний.

3. Зпиталамин обладает серотонннэргическим эффектом и показан, в комплексном лечении бокового ачиотрофического склероза и рассеянного склероза.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Основные положения диссертации долокены на конференции молодых ученых ВМедА им.С.М.Кирова"Лктуальные вопросы клинической диагностики"/!. бЭЗг./, на научных конференциях "Нейроиммунология на пороге XXI века"/С.Петербург,1993,1994 гг./, на заседании общества неврологов Санкт-Петербурга

''1995г./. По теме диссертации опубликовано 4 работы.'

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ Pî&OTU. Результаты исследования внедрены в практическую работу клиники нервных болезней Военно-медицинской акадо1!й! и нзвросогических отделений 2 ЦВКГ им.П.В.Мавд-рыка. Основные научно-практические положения диссертации используются в педагогическом процессе на кафедре нервных болезней для курсантов и слушателей ВМедА.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ.' Диссертация представлена в одном томе, состоит из введения, четырех глав, выводов, списка литературы (149 работ отечественных и 155 иностранных авторов) и приложения. Работа изложена на 210 страницах машинописного текста, содержит .31 таблицу.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

МАТЕРИМ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.В работе представлен анализ результатов обследования трех групп больных, которые лечились в глшшке нервных болезней ЕМедА: 1 - PC (83); 11 - БАС (57); 111 (контрольная)- невоспалительные заболевания периферической нерв-1 ной системы (31).

Возраст большинства больных 1 группы составлял 20 - 40 лет (80.7%), преобладали женшины(5б.б%). Длительность заболевания:. л-> 1 года - 9.6Х, '1-5 лет - (25.3%), 6-15 лет - (54.3%)., свыше !'> лег ■• (10.8?). Как правило заболевание начиналось в молодом рргте, дебют PC в 20-40 лет составил 72.4%.

Стрпень тяжести заболевания: легкая (0-2 балла)-32.5%; i-лняя (3-4 балла)-51.9%; тякелая (5 и более баллов)-15.6%.

Нп характеру течения PC выделяли два варианта - прогредиен-гно-р-нпптирущий и хронически,-прогрессирующий. Дебютом считали '"-Тх-чаи, когга длительность заболевания не превышала 6 месяцев и rvtï ?tcî-{ наблюдалась только одна атака. Чаще (73.5%) определялся ,

- б -

прогредиентно-ремиттируший тип течения PC.

По клиническим критериям выделял! церебральнуа.цереброспи-■ иальную и спинапьнуз формы заболевания. Доминировала цереброспинальная форма (71.1%).

Во 11 группе преобладали больные з возрасте 45-65 дет (04.97.). У муячин БАС встречался в 1.7 раза час,в чем у женщин. Больных женщиц в Еозрасте до 40 лет в нслш наблюдениях не было.

При анализе клинических особенностей ЕАС ш использовали классификации . предложенную Хондкарианом O.A./1970/: высокая, бульбарная, вейно-грудная и поясшшго-крестцовая формы. В наших наблюдениях чаще диагнссциросалась шекно-грудная ¿ор»да Заболевания (40.4%), а высокая форма отсутствовала.

В соответствии с рекомендациями Хондкариана O.A./1973/ выделяли три варианта течения заболевания. Первый вариант - одина-1совая степень поратсешш передних рогов и пирамидных путей. Второй вариант - преобладание переднорогошх нарушений. Трети'Г. -преобладание пирамидных расстройств.В наш« найввдениях чаш.е регистрировался перЕЫй Бариант 'течения (С9.6Х). Длительность заболевания у большинства больных (Б9.77.) не превышала 1 года.

Контрольную группу составили больные з возрасте 20-53 лет, которым проводилась пиелография по поводу грили дисков поясничных .позвонков.

19 больным ВАС и 27 больным PC в комплексную терапию был В1шочен отечественный препарат шишковидной железы - Епиталачкн.

Для диагностики, оценки тяжести и типа течения заоолеваний, наряду с изучением клинико-неврологического статуса , использовались аппаратные и инструментальные методы исследования.

Компьютерная томография проводилась на аппарата "Soiria^.on-2"

- б -

фирмы "51шепз"(ФРГ) по стандартной методике. «

Магнитно-резонансная томография проводилась на аппарате "Мадпа'Лет" фирмы "1пз1гш1еп1аг1Щ1"(Ф!П!ляндия),имеющая силу магнитного поля 0.04 Тесла.Пространственная разрешающая способность томографа составляла 2 Ш.

Электронейрошография проводилась с помощью 4 канального' электромиографа О1&а-1БОО (Дания) .регистрировался М-ответ и Н-рефлекс.

Электромиография.проводилась на аппарате 01за (Дания).Отведение биопотенциалов производили игольчатыми электродами.Оценивалась .'амплитуда колебаний .частота и общая стуктура осциллограмм.

Реоэнцефалография выполнялась на 4 канальной аппарате "РГ4-02"по стандартной методике в двух отведениях.Оценивались показатели характеризующие ашуэтрпцность кровенаполнения . состояние тонуса и резистентности церебральных сосудов.

У всех больных проводились клинические анализы крови и мо-1 чи.исследовались показатели крови на аппарате '"¡ех никон ".остро-Фазовыэ реащш, протеинограмма; у части Сольных - К£К и коагу-лограмма. У больиш:ства больных БАС.РС и контрольной группы проводилось сбщеклиническое исследование цереброспинальной жидкости (ЦСЖ).

Методом высокоэффективной мщкостной хроматографии у всех больных в плазме крови и у больных,подвергавшихся люмбальной пункции,в цереброспинальной жидкости определялся уровень 23 свободных аминокислот,а у части больных и продукт метаболигма трип-тофана-серотонин.У больных,получавших в комплексной терапии эпи-таламин,свободные АК и серотонин в плазме и ликворе исследовались до и после лечения.

Состояние иммунитета оценивалось путем изучения содержания в 1фовн общего количества лейкоцитов и лимфоцитов, идентификации Т- и В- лимфоцитов и их субпопуляций , определения индекса напряжения и иммуноглобулинов Q.M.A. В ликворе исследовалось содержание иммуноглобулинов G.M.A. Идентификация Т-лимфоцитов и их субпопуляций проводилась по методу Re Inhere и соавт./1979/. В лимфоциты определялась по методу Bianco и соазт./107О/,а иммуноглобулины- по методу Mancini и соавт./1965/.

Назальный уровень гормонов в плазме и сыворотке крови определялся с помощью наборов фирмы Cls International и радиосчетчика Тгасог Analitic-1285 (СНА).Определяли Тз,14,кортизол,тестостерон.

Результаты исследований были подвергнуты статистической обработке на ЭВМ "Электроника БЗ-54" по специальным программа;.), разработанным на кафедре автоматизации и военно-медицинской статистики ВМедА. Проводился расчет средних величин и пгасазателей колебания варьирующих признаков, проверялись статистические гило-теаы с расчетом критерия Стьюдента.Вариационный,корреляционный и факторный анализ, проводились с использованием пакета программ Stat(jraphics(BepcHfl 2,6 -1979 года).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. В ЦСН больных всех трех групп выявлялись 23 свободных АК.В плазме крови обнаруживались те же АК,исключая ГАМК.Данные уровня АК в плазме крови и ПСЖ больных БАС,PC и группы сравнения представлены в табл.1

Проведенное исследование показало, что как при РАС , так и при PC имеются достоверные изменения в метаболизме свободных АК. Выявлены как общие, так и частные закономерности' в изменении спектра АК в крови и ликворе этих больных..

Относительное содержание АК в ликворе было иным,чем в плаз-

не крови.Основную массу (около 50 £)от общего содержания АК в ликворе всех групп составил глутамин.

Таблица 1

Уровень свободных АК в плазме крови и ЦС8 больных БАС,• РС и контрольной группы в шшоль/л (X + Мх)

Аминокислоты

Заболевания

БАС

РС

, Контроль

Гистидин 34.76+3,81 33.90+3.80 37.02+3.81

1.8Ю.32 1.7210.32 1.86Ю.35

Таурин 141.55+9.84 139.82+10.56 ,-144.60+12.89

4.9310.31 4.75Ю.31 -4.94i0.30

Аспарапш 68.62+4.77 65.37+6.13 66.32+5.75

2.9010.45 2.5810.36 2.8310.30

Глутамин 604.48+52.91 585.63+66.19 613.11+53.41 139.8418.23 145.25113.2 147.24116.7

Серин

245.17+45.76 19.3612.29

177.95+11.10 15.4410.65

179.01+13.81 15.79Ю.83

Аспарагино-

вая кислота 76.78+10.79 8a.40-Hl.46 107.82+12.65

13.44«.81 11.54Ю.96 11.09±0.66

Глутамино-

вая кислота 70.2245.61 72.23t7.87 87.51t7.85

7.5341.30 6.4440.85 5.8610.24

Сгссипролин 33.2844.87 85.0143.42 33,6344.35

0.7440.13 0.7140.12 0.7510.09

Треонин 229.4249.78 27.4741.05

229.284Ц.28 224.41410.12 27.5240.77 27.90+0.84

Глицин 317.44416.50 317.45434.06 317.08416.85

6.2440.41 9.7741.07 6.2940.32

Алании 557.85427.11 565.64428.44 573.55128.11

32.7043.31 33.0642.56 33.5712.471

ГУШК

0.47Ю.12

О

0.4510.10

О

0.91 Ш. 17

а- Ш<

1.65 »0.1В

ЗЬ3844ЛИ. 1.56»О. 22

33.41 ил34 1.6ГЯ0.19

Метиоиин

2S.61t3.22 1.45*0.16

18.55t4.04 1.4210.13

26.3U3.75 1.38Ю.17

Пролин

324.37119.40 1.3810.20

334.93118.40 1.5310.22

335.47122.41 1.6310.23

Трйптофан

28.2313.49 6.2511.17

39.7013.22 9.4111.21

33.0314.07 8.00Ю. 70

Валин

338.51122.01 24.5912.6

342.45122.06 24.8312.38

338.47124.42 25.1312.16

Фенилаланин 135.6216.33 11.7110.69

159.19115.04 139."817.71 11.7010.93 i 11.8710.71

Лейцин+ изолейцин

277.73117.63 16.14Ю.55

272.38115.19 278.51115.48

15.61И.07

16.0710.72

Орнитин

167.00113.13 7.Б1Ю.58

172.77111.71 6.10Ю.96

168.24113. 94 7.4510.68

Лизин

241.64122.98 11.33Ю.53

240.3917.21 11.45Ю.73

244.87121.14 11.5010.59

- и -

1 2 3 4

Тирозин 131.04±21.14 106.43110.44 108.4519.84

9.3211.25 7.40Ю.76 7.37Ю.43

Аргинин 76.40t6.32 93.9516.05 92.45110.11

3.48Ю.50 4.48Ю.41 4.72Ю.45

Примечание: 1) Х-среднее значение;ых-ошибка среднего.

2) в числителе - плазма крови, в знаменателе - ЦСЯ.

Различия в суммарном содержании свободных ЛК, а также уровне отдельных групп ЛК (ааыенгашх, незаменимых, полярных, неполярных, основных, глюкогенных, кетогенных и др.) как в плазме крови, так и в ЦС1 больных всех 1сатегорий, были не достоверными (Р>0.05).

Исключение составила группа нейромедиаторных АК.где отмечались различия как в суммарном содержании возбуздающих АК (ВАК) и тормозных АК (ТАК), так и !1х отдельных представителей.

При БАС и РС в плааме крови отмечалось достоверное (Р<0.01) снижение уровня ВАК в сравнении с контрольной группой,как каждой из АК в отдельности,так и их суммарного количества.

Уровень ВАК в ЦСЖ больных БАС был достоверно (Р<0.01) повн-вен, как глутаминой и аспарагиновой кислот'в отдел1 .стн, так и их тотальный уровень по сравнения с больнши РС и контрольной группы. При РС в ЦСЖ гагате отметалась тенденцг,-; к повыкэнш ВАК , однако значительно менее выраженная чем, чел при БАС: в сравне-

нии с контролем повышение уровня глуташвдовоЭ иайй Сьшо достоверным (Р<0.05), а аспарагиновой - не достигало степени достоверности. Повышение суммарного содержания ВАК в ДСЗ при РС также не было статистически достоверным.

При изучении метаболизма ТАК выявлено отсутсвкэ ГАЫХ в плазме крови всех групп пациентов и ео достоверное (Р<0.01) снижение в ЦСХ больных БАС и РС. При исследовании таурина у пациентов всех трех групп в плазме и ЦСН достоверных различий не получено. Глицин достоверно (Р<0.01) повышался б ДСЗ и плазме крови больных РС. При сравнительном изучении суммарного количества ТАК в плазме крови во всех трех группах статистически значимых различий не.получено.В ликворе не у больнкх РС общее количество ТАК было достоверно повышенным (Р<0.01).

Таким образом,сравнительный анализ позволил выявить неоднозначные тенденции в изменении содержания ТАК у больных БАС и РС:содеряаиие ГДМК в ЦСЖ снижалось в обе юс группах, а уровень глицина в плазме крови и ЦСЗ повышался у больных РС. ,

При проведении корреляционного анализа по^содерканкю ней-ротрансмиттерных АК в плазме и ЦСй больных БАС и' РС достоверных корреляционных связей не получено (г<0.33).

Помимо особенностей обмена ВАК и ТАК отмечались различия п в содержании отдельных АК из других групп. Так, в плазме крови у больных БАС отмечалось достоверное повышение уровня серина и тирозина (Р<0.01) и снижение уровня триптофана и аргинина (Р<0.01), а у больных РС - повышение содержания триптофана, фенил адалина (Р<0.01) и снижение уровня метионина (Р<0.01). '

В ЦСЖ больных БАС определялось статистически значимое (Р<0.01) повышение уровня серина и тирозина и снижение уровня аргинина,триптофана(Р<0.01) и пролина (Р<0.05), а в ликворе

больных РС был повышен уровень трнпго'2>2ла(Р<0.01) и снижен орни-т1п1(Р<0.05),

» 1

Как егщяо из вышеприведенных данных, некоторые АК (серии,

аргинин, триптофан, тирозин при БАС и триптофан при РС) имеют одинаковые тенденции к повышения или сн^егпш' концентраций гсак в плазме крови, так и.в ЦСЖ. Однако, при проведении корреляционного 'анализа, достоверных- связей иейду содержанием этих Л1< в героям и ликворе у одних и тех ие больных не получено (г<0.33). Отмечались таете противоположные тенденции в метаболизме триптофана при БАС и РС (снижение уровня при БАС и повышение при РС).

Лля уточнения патогенетической значимости указанных нзруяе У!пЛ Сил проведен анализ и сопоставление содержания свободных АК в крови и ЦСЯ с полом, возрастом, длительностью, формой и зарк-. внтами течения БАС. Достоверней зависимости содержания свободных АК з плазме крови и ЦСЗС больных БАС от пола, возраста и различии форы заболевания не обнаружено.

Наряду с этил установлена отчетливая тенденция к увеличению уровня ВАК'в ликворе больных БАС с возрастанием сроков заболева-ния.Так, уровень аспарагиновой кислоты в ИСТ больных с длительностью заболевания до 0.5 года был равен 12.6СН1.31 мкмоль/л, а с длительностью свыше одного года 13.82*1.33 мкмоль/л (Р<0.05). Содержание глутаминовой кислоты при тех же сроках заболевания составляло соответсвенно 7.01*1.03 мкмоль/л и 8.97*1.11 мкмоль/л

г»

(Р<0.05). Кроме того, с увеличением длительности заболевания отмечалось достоверное снижение концентрации ГАМК в ЦСИ: при длительности БАС до 0.5,года концентрация ГАМК была равна 0.63*0.1 мкмоль/л, а сЕЫие одного года - 0.40*0.11 мкмоль/л. В плазме крови больных БАС подобной динамики не выявлено.

В наших наблюдениях обнаружена зависимость метаболизма се•

рнна от различных вариантов течения БАС. Содержание серина в ЦСЖ у Сольных с преобладанием в клинической картине проводниковых нарушений было большим, чей в других группах (Р<0.05) и составляло 22.31И. 18 мкыоль/л, а при сочетаннои поражении и преобладании поражения передних рогов 7 соответственно 18.2Ш. 08 ыкмоль/л и 19.24И.79 шаюль/л. В плазме крови подобных изменений не обнаружено.

Кроме того, почти у половины больных с преобладанием в клинической картине периферических парезов зарегистрировано достоверное <Р<0.01) повышение в плазме крови уровня глицина, сопро-вовдавшееся повышенным содержанием уровня креатинфосфокинааы.

У больных РС изучалась зависимость содержания АК в плазме крови и ЦСЖ от пола,возраста вольных,форш и степени тяжести заболевания, характера течения процесса и стадии заболевания.

Достоверной зависимости содержания свободных АК в плазме кроьи и ЦСЖ от пола и разных форы заболевания не обнаружено. Наряду с зтим, отмечена значимая зависимость содержания триптофана от ьоараста больных: с увеличением возраста больных уровень триптофана а ЦСЖ достоверно уменьшался. Так,содержание триптофана в ЦСЖ возрастай групп до 30 лет было достоверно (Р<0.01) большим,чем в группах старые 30 лет,и составляло соответственно 12.0П1.32, 11.98И.50, 8.75И.20 и 8.5511.25 мкмоль/д. В плазме крови подобная тенденция не достигала степени достоверных величин .

Установлена также четкая зависимость обмена глутаминовой кисдоти от характера течения РС. Уровень'глутаминовой кислоты в ЦСа больных РС с хронически-прогрессирующим течением был равен ?.ЗОШ.бЬ ыкмоль/л .и достоверно (Р<0.05) превышал его содержание у лиц с- прогредиентно-ремиттирущим течением (6.16Ю.85

- 15 - '

мкмоль/л). В плазме крови подобная тенденция также не прослеживалась.

Выявлена достоверная зависимость метаболизма глицина от стадии РС. Уровень глицина-в ПСЯ больных РС при обострении Сил равен 10.92*0.69 мкмоль/л и достоверно (Р<0.05) превышал его со-дерлание у лиц п стации ремиссии (9.04Ю.42мкмоль/л). В плазме !фбви подобной закономерности не Зыло.

Полученные результаты могут быть резюмировали следующим образом. В регуляции произвольный двигательных актов участвует большое количество нейратрансмиттерннх систем.При этом ютчевая Еозбулдающая нейротрансмиссия осуществляется ,в основном,аспара-Гиновой и глутаминовой ДК,а тормозная -основным ингибиторным трансмиттером в ПНС ГАМК / Б&руатопа В.П.. Завалшин И.А.,1993/. Обнаруженные нами девиации об^на нейротрансмиттерных свободных АК у больных БАС и РС могут приводить к изменения сложного взаимодействия между различными трансмиттерами как на церебральном, так и. на спинальном уровне и лежат в основе развития моторных нарушений при этих заболеваниях.Это,прежде всего,касается синтеза нейротрансмиттеров,их накопления в терминалях аксонов,высвобождения в синаптическую т»ль .а также функциональной активности рецепторов.В зависимости от преобладания нарушений в каком-либо из.вышеуказанных звеньев Формируются и особенности двигательных нарушений при БАС и РС. Однонаправленные .тенденции в обмене ВАК и ГАМК при этих заболеваниях .вероятно, связаны с формированием уч них пирамидных нарушений.

Для ВАК выявлен "эксцитстоксический" эффект, сопряженный с необратимой дегенерацией нейронов мозга /Раевский К.С.,1986/. Нельзя исключить нейротоксического действия повышенного количества ВАК на нервную ткань при БАС и РС.

Некоторые исследователи допускают участие' норадренергичес-ких систем в эксцитотоксических механизмах гибели двигатель кш нейронов у болышх БАС /Езрхатова В.П., .Завалишин И.А., 1993/. Следовательно, повнаение уровня тирозина и, как следствие, кате-холаыинов у больных БАС иояет быть одной из причин нейрохимической дегенерации цоторншс нойрональных систем.

Нарушение в чэбыеие триптофана приводит к изменению ¿одерка-ния кинуренина и хсышиовой кислоты, которые могут участвовать в патогенезе БАС и PC подобно ВАК /Лапин И.П., Рыков И.В.,1989/.

Обнаруженное повышение уровня фенилапан" ;а у больных PC указывает на возможность торможения синтеза прешенное в головном мозге, в частности, синтеза структурных элементов миелина. Снижение уровня аргинина у больных БАС может способствовать деген-ративныа процессам в мотонейронах. Матионин служит основным источником ыеуидьных групп при синтезе белков и фосфолипидов, явившихся структурным« элементами миелина. Выявленный дефицит метионина у больных PC может быть сопряжен с нарушением синтеза миелина и провесом демиелиннзации. Серии является структурным эцементом фосфопротеидов и фосфолипидов, служащих источником энергетического и пластического материала для различных структур ЦНС Избыток серила у больных БАС, вероятно, является следствием р-йрушеиия иейрональных структур.

Обмен аК отражает состояний обмена веществ в организме в U-iotj, поскольку он является составной частью метаболического (1*;лда .исшльзуемого дла синтеза белков, жиров,углеводов,фермен • ив, гормонов и других физиологически активных веществ.Поэтому ¡¡p;-Jv-танлилось целесообразным проследить взаимосвязь амшюкио-Л( ¡ищи обмена с метаболизмом биогенных ашшио (tx-potuuiuiaj i ■¡.■ишшои горниииаьиого и иммушкчо ciaiyea.

- 17 - ...

Отмечено достоверное'снижение уровня серотонина в плазме крови больных БАС и повышение у больных РС^ (33.04И.68 и 72.13110.0 нг/мл соответственно^'контрольной группе -41.8315.74 иг/мл).Аналогичная динамика прослеживалась и в ЦСл: в 1 группе -0.1510.02, во 11 - 0.1010.02, 3 111- 0.12Ю.02 НГ/1.Ш.

Выявить какую-либо определенную взаимосвязь уровня серотонина с полом, возрастом- больных БАС,длительностью,формой и вариантом течения заболевания не удалось.При РС отмечена зависимость содержания серотонина в плазме крови и в ликворе только от возраста больных.У больных в возрасте до 30 лет его уровень был достоверно (Р<0.01) выше,чем у больных старше 30 лет: соответственно в плазме крови- 83.5Ш2.45 и 38.93113.21 нг/мл и ЦСЗ -0.1610.03 и 0.12Ю.03 нг/мл . ^

При проведении корреляцийшого анализа между содержание)« серотонина в плазме крови и ПСЗ одних и тех до пациентов достоверных корреляционных связей не получеио(г<0.33).Содержание серотонина как в- плазме крови (г»0.40),так и в ликворе (г=0.45) находилось' в прямой корреляционной зависимости от уровня триптофана.

У больных БАС достоверно снижались уровни лейкоцитов.лимфоцитов, соотношения хелперной и супрессорной субпопуляций Т-лимфо-цитов и повышение иммуноглобулина М. У больных же РС выявлено достоверное снижение лимфоцитов,Т-личфоцитов,В-лимфоцитов и повышение хелперной субпопуляции Т-лимфоцитов и иммуноглобулина а. Достоверной корреляционной взаимосвязи иммунологических показателей крови с аминокислотным обменом не выявлено (г<0.33).

В ЦСй иммуноглобулин м не определялся го всех группах, а иммуноглобулин Э достоверно повышался в I группе. Достоверных корреляционных связей мигду обменом АН. и содеряанием иммуногло

- 18 -

булинов в ликворе не подучено (г<0.33).

Уровень исследованных гормонов у больных БАС и РС не выходил за пределы дсдашых величин. Однако ..сравнивая их содержание у больных БАС и РС , удалось выявить достоверные различия в содержании (Р<0.01), кортизола . (Р<0.01) и тестостерона (Р<0.01). Изучение обмена АК и гормонов выявило прямую корреляционную вависимость между уровнем Т4 и тирозина(г-0.42),_тестос-

*

терона и.аргинина (г-0.48).

В процессе лечения эпиталашном происходили одинаковые из-ыененип в содержании АК и серотошша как в ЦСЕ, так и в плазме крови : достоверно повышалось содержание триптофана и серотошша (Р<0.05).

Прием зпиталашша не оказывал отрицательного воздействия на течение БАС.У большинства Сольных улучшалось общее самочувствие. У 6 Сольных из 19 частично регрессировали проявления дис-фошш и дисфагкн, а у Б пациентов снизимся фон глубоких рефлексов.

У 8 боль-.лх РС отмечалось ухудшение общего самочувствия:появилась головная боль,наросли мозжечковые проявления.Это были пациенты.в возрасте до 30 дет. У них имело место повышение уровня триптофана и серотонина в плазме крови и ликворе.У 13 Сольных ЯС применение зпиталашша существенного влияния на клиническую картину заболевания не 01;азывало: больные были в возрасте 30-40 лет, содержание серотонина и триптофана у них существенно не отличалось от контрольной группы. У 6 больных ГС отмечалось улучшение общего самочувствия, снижение фона глубоких рефшексов,уменьшение атаксии. Эту группу составляли больные в возрасте старше 40 лет,с поздним дебютом ааболеиания и первично хроническим течением.В плазме крови и ликворе этих больнш

- 19 - '

отмечалось снижение уровня серотоннна и триптофана.

Из приведенных выше данных следует,что зпиталамин .попадая а организм человека .обладает серотонинзргическиы действием. Его назначение показано в комплексном лечении Сольных БАС и некоторой категории больных РС (з возрасте стари© 40 лет ,с поздними формами заболевания и с первично-хроническим течением).

Резюмируя изложенное выше,важно сделать заключение о том', что результаты комплексного и Целенаправленного исследования свободных АК в плазме крови и ЦСТ больных БАС и РС позволили отразить состояние аминокислотного метаболизма при этих заболеваниях и расширили представление о возможных патогенетически механизмах развития полиморфных клинических проявлений. Взаимосвязь ряда АК с особенностями клинического течения этих заболеваний позволяет следить за актИЗностыо патологического процесса и проводить адекватный ,патогенетически обоснованный подбор терапии. Обнаружение изменений в метаболизме АК уле в первые месяцы после гозшдаювения БАС и РС позволяет предполагать кя наличие еще до клинической манифестации заболеваний, что мелет ¡гметь диагностическое и прогност1г;еско9 значение.Связь содержания АК с метаболизмом серотоннна и отдельных гормонов дает основание утверждать, что АК не только непосредственно участвуют в патогенезе. БАС и РС,но и осуществляют это участие посредством влияния на обмен указанных веществ.

Отсутсвие достоверных связей между содержанием свободных АК в плазме крови и ЦСЖ, отсутсвие ГАМК в плазме крови, противоположная направленность в содержании ВАК в плазме крови и ЦСН, отсутствие зависимости содержания АК в крови от клинических вариантов заболеваний предопределяет необходимолсть исследования АК в ЦСЖ, как среде более полно отражающей патологические процессы

- 20 -

в ЦНС. • , ' ;

Роль нарушений мэтаболизма АК в определении путей . поиска новых подходов к терапии этих заболеваний в настоящее время еще не представляется возмогшим оценить в полной мере.Однако,имеющк-еся результаты даат основание прэдпрлагать, что это направленна является привлекательным и перспективны:-!.

ВЫВОДЫ _

1. Обмен свободных аминокислот у больных боковые шиотрофи-ческим склерозом и рассеянным склерозом качественно отличается от обмена у -здоровых лиц и взаимосвязан с процессами дегенерацш и дешелинизацш. ' . ¡) '

2. Выявлены обдао закономерности в обмене неюэторых »о-1ШСЛ0Т при боковом амкотрофпческом склерозе и рассеянной склерозе: снижается содержание возбуздаздих аминокислот в плазме крови и повышаете?! в цереброспинальной гладкости, сшспдется уровень гам^ааминомасляниой кислоты в цереброспинальной зддкостк.

3. Обмен ряда аминокислот при боевом амнотрофическом склерозе и рассеянном склерозе претерпевает неоднозначные девиации. У больных боковым амиотрофичесгаш склерозом в плазме крови повышается уровень серина и тирозина, снимается - триптофана и аргинина; в церебростшальиэй'явдсости повышается концентрация серина' и тирозина, пошкаотег: - триптофана и аргинина. У больны)', рассеянным склерозом в плазме крови повышается содержание триптофана и фенилаланина, снюхается - метиоиина; в цереброспинальной жидкости повышается уровень триптофана и глицина, понижается - орнитина.

4. Установлены изменения обмена аминокислот, характерные для определенных клинических вариантов и типов течения богаэвого амиотрофического склероза и рассеянного склероза. У больных с

- 21 - ' • длительным точением бокового амиотрофкческого склероза з цереброспинальной жичксстн повышается уровень возбулдаоцца амкнокпс-

i

лот п сшгпастся - гаммзаминомаслянной кислота; при преобладании в'клинике пролодникоЕнх нарушений - повышается уровень серкна. -У больных с прогрессирующим течением рассеянного склероза увеличивается содеряание глутаминовой кислоты в цереброспинальной жидкости; при обострении процесса возрастает содеряание глицина;" с увеличением вовраста • повышается уровень триптофана в лшево-ре.

5. Обмен свободных аминокислот тесно взаимосвязан с метаболизмом биогенных аминов (серотонина) и гормонов (тироксина,тестостерона) : прослеживается прямая корреляционная зависимость между содержанием триптофана и серотонина, тироксина и тирозина, тестостерона и аргинина. f

6. Изменения обмена свободных аминокислот, закономерно наблюдавшиеся при ботовом ашготрофическом склерозе, могут быть использованы как дополнительные критерии диагностик! заболеваний, характеристики стадий и особенностей течения, прогноза развития этих заболеваний и подбора 'патогенетически обоснованной терапии.

7. Серотонинэргическое действие зпиталамина, влияющего на метаболизм триптофана, дает, основание включать его в комплексное лечение больных боковым амиотрофическим склерозом, а также больных рассеянным склерозом с поздними формами заболев&ния, в возрасте .^тарше 40 лет, у которых закономерно выявлялось пониженное содержание триптофана'И серотонина в плазме крови и цереброспи-нальной жидкости.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ . . ,

1. Для ранней диагностики и дифференциации БАС и РС целесо

образно исследовать в ЦСК ВАК; ГАИК, 'триптофан, глицин, оршгаш (РС), ЕЛК, Г ALK, cepsai, тирозин, трштофан, аргинин (БАС); в плавно 'крови - ВАК,триптофан, фенниалашш, иетиошш (РС),ВАК, серпк, тирозин, трштофан, аргинин (БАС).

2. Для определения активности процесса при РС необходимо исследовать уровень глицина ь ЦСЯ.

3. Элиталашш целесообразно пспольвовать в комплексном лечении болыых БАС и больных FC с поздними формами заболевания, в возрасте старше 40 лет.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКО&АННЫХ ПО TBE ДИССЕРТАЦИИ

1. Влиянце зш!физзрного полипиптнда эпктр1- змина на уровень ашшоккслот ь ЦСЕ у пациентов с бокозьм аииотрсфическиу склеро-30U (БАС). Материалы научной ^конференции "Актульнио вопросы клинической диагностики". Санкт-Петербург.1993 г. ( Соавт.- Королева Е.М. ,Гсцовкин В.II.).

2. Определение свободны/, аминокислот в плазме крови и ликворе больных рассеянны« склерозом и боковым ааиотрофическш склерозом. Материалы симпозиума с международна участием " Ней-роиммунологи:. ча'пороге XXI века". Санкт-Петербург.1Q93 г. ( Соавт.-1.!ихайдешсо А. А. .Королева Е.М. .Головкин В.И. .Дыскин Д.Е.).

3. Нейромедиаторные ' аминокислоты в плазме крови и ликворе бальных рассеянным склерозом (РС) и боковым амиотрофическж склерозом (БАС).' Материалы 3-ей научной конференции " Нейрошлиу-нология на nopdre XXI века". Санкт-Петербург.1094 г. ( Соавт.-Михайленко А.А..Королева Е.М..Головкин В.И..Дыскин Д.Е.).

4. Кдшшко-биохишческне корреляции при боковом аыиотрофи-ческом склерозе (БАС) и рассеянном склерозе (РС). Материалы научной конференции '.'Актуальные вопросы клиники, диагностики и лечения". Санкт-Петербург.1095 г. ( Соавт.- Михайленко A.A.).