Автореферат и диссертация по медицине (14.00.29) на тему:Новый стимулятор эритропоэза - эритроцитарный антикейлон и его взаимоотношение с эритроцитарным кейлоном
- Ученая степень
- кандидата биологических наук
- ВАК РФ
- 14.00.29
Оглавление диссертации Калашникова, Антонина Петровна :: 1984 :: Воронеж
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1.Факторы, стимулирующие эритропоэз
1.2.Факторы, ингибирующие эритропоэз
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1.Метод выделения эритроцитарных антикейлона и кейлона из плазмы, экстракта эритроцитов и эритролизата
2.2.Метод определения активности эритроцитарных антикейлона и кейлона с помощью авторадиографии
2.3.Метод получения лизата и стромы из эритроцитов
2.4.Методы изучения некоторых биологических и физико-химических, свойств эритроцитарных антикейлона и кейлона
2.5. Метод получения гипоксической гипоксии, и постгипоксической полицитемии
ГЛАВА 3. ВЫЯВЛЕНИЕ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ ЭРИТРОЦИТАРНЫХ АНТИКЕЙЛОНА И КЕЙЛОНА.
ЗЛ.Тестирование фракций на биологическую активное ть.
3.2.Зависимость действия антикейлона и кейлона от их концентрации в культуре.
З.З.Зависимость действия антикейлсша от вводимой дозы в условиях целостного организма
ГЛАВА 4. БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЭРИТРОЩТАРНЫХ АНТЖЕЙ
ЛОНА И НЕЙЛОНА.
4.1.Определение активности лизата и стромы эритроцитов
4.2.Изучение динамики выхода антикейлона и кейлона из эритроцитов
4.3.0пределение специфичности действия антикейлона и кейлона
4.4.Влияние предварительной совместной инкубации на активность, антик ейлона и кейлола
4.5.Исследование антикейлона на токсичность и пирогенность
4.6.Влияние антикейлона на созревание клеток эритроидного ряда.
ГЛАВА 5. СОПОСТАВЛЕНИЕ ЭРИ1Р01ЩАРН0Г0 АНТИКЕЙЛОНА С ЭРИТРОПОЭТИНОМ ПО НЕКОТОРЫМ ПРИЗНАКАМ. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЭРИТРОЦИТАРНЫХ АНТИКЕЙЛОНА И КЕЙЛОНА
5.1.Определение активности антикейлона на постгипоксических полицитемических мышах.
5.2.0пределение активности антикейлона и кейлона в крови у крыс с двусторонней нефрэктомией.
5.3.Чувствительность антикейлона и; кейлона к тепловой обработке и стабильность их в процессе хранения
5.4.Молекулярная масса антикейлона и кейлона и их белковые спектры
ГЛАВА 6. ЭРИТРОЦИНАРНЫЕ АНТИКЕЙЛОН И КЕЙЛОН ПРИ ГИПОК-СИЧЕСКОЙ ГИПОКСЖ Ж ШСГГИПОКСйЧЕСКОЙ ПОЛИЦИ-ТЕМИИ. 8% бЛ»Активность антикейлона и кейлона, выделенных из плазмы.
6.2»Активность антикейлона и кейлона, выделенных из экстракта эритроцитов .„
6.3,Активность антикейлона и кейлона, выделенных из эритролизата
Введение диссертации по теме "Гематология и переливание крови", Калашникова, Антонина Петровна, автореферат
ЛИТЕРАТУРА .ПО
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы. Одной из важнейших проблем современной гематологии является изучение механизмов регуляции пролиферации и дифференциации кроветворных клеток, закономерностей нормального; и патологического роста. Кроветворная ткань принадлежит к числу самообновляющихся систем организма, управляемым универсальными и специфическими законами регуляции и саморегуляции.
Нормальный эритропоэз как и весь гемопоэз в целом является строго сбалансированным процессом, в котором гибель элементов крови адекватно восполняется вновь образующимися клетками (Е.Н.Мэсягина, 1976а,б). Постоянство количественного и качественного состава красной крови поддерживается взаимодействием большого числа факторов, которые могут быть объеденены по своему конечному эффекту в две основные группы - стимуляторы и ингибиторы (В.Н.Черниговский и др., 1967; С.Ю.Шехтер, 1976; О.И.Моисеева, 1979). Многие стороны регуляции эритропоэза к настоящему времени уже достаточно* полно изучены. Так, накоплен значительный материал об основном стимуляторе - эритропоэтине (Н.А.Федоров, М.Г.Кахетелидзе, 1973; Kuratowaka , 1968; Eralev et al. , 1971, и др.). Показана важная роль продуктов распада эритроцитов в стимуляции эритропоэза (Б.А.Серебряная, 1970; Я.Е.Ужанский и соавт., 1977; Н.М.Новиков и соавт., 1980).
Что касается ингибиторов эритропоэза, то, несмотря на то, что их исследования начались относительно недавно, сведения о них весьма обширны и зачастую трудно сопоставимы. Так, имеются данные об ингибиторах, действие которых сводится к нейтрализации стимулирующей активности эритропоэтина (0. И. Моисеева, 1976; Kuratowaka , 1968; Mori jama ,Shimotori,
- б
1970). Исследования последних лет (Г.В.Heyстроев, 1983; Ьогй et al. , 1977; Bateman , Pollock , 1977) свидетельствуют о том^ что основную и наиболее специфическую роль в ингибиции эритропоэза играет эндогенный регулятор - эритроцитарный кейлон (ЭК).
В то же время совершенно отсутствуют сведения о биологическом антагонисте эритроцитарного кейлона - эритроцитарном анти-кейлоне (ЭАК), предположение о существовании которого вытекает из факта обнаружения антикейлонов в гранулоцитах (Ю.М.Бала и соавт», 1978, 1979; В.Н.Немых, Ю.М.Бала, 1983; Rytömaa , Kiviniemi , 1968а,б,в), фибробластах ( Salas , Green ,
1971), печени (А.Н.Пашков, Т.Д.Авдеева, 1981; П.А.Карманов и соавт., 1983) и некоторых других клетках и тканях.
В связи с вышеизложенным, для понимания механизмов эндогенной регуляции эритропоэза, представляется актуальным выделение и изучение нового стимулятора эритропоэза - эритроцитарного антикейлона, а также определение его взаимосвязи с эритроцитар-ным нейлоном в норме и при экспериментальной патологии системы эритрона.
Целью исследования явилось выделение и изучение свойств ЭАК и ЭК и определение их активности у человека и животных в норме, а также под влиянием возмущающих эритропоэз факторов.
Задачи работы: 1.Разработать методику выделения ЭАК и ЭК. Получить препараты и определить их эффективные дозы.
2.Изучить биологические и физико-химические свойства ЭАК и ЭК.
3.Провести сравнительную характеристику ЭАК и эритропоэтина (ЭП).
4.Исследовать влияние гипоксической гипоксии и постгипокси-ческой полицитемии на активность ЭАК и ЭК в крови мышей.
5*0ценить значение кейлонно-антикейлонной системы в общем механизме регуляции эритропоэза.
Методические подходы. Для выделения ЭАК и ЭК использованы методы спиртового фракционирования и гель^-фильтрации на сефа-дексе. Для оценки активности препаратов применяли метод авторадиографии (с использованием меченого по тритию тимидина) в культурах эмбриональной печени мышей и костного мозга крыс и мышей, а также в условиях in vivo на мышах. В работе использовались модели гипоксической гипоксии и постгипоксической поли-цитемии у мышей. Все исследования с животными проводились под эфирным наркозом.
Научная новизна. Впервые выделен и описан тканеспецифиче-ский, видонеспецифический стимулятор эритропоэза - ЭАК. Показано его отличие от ЭП по уровню действия, месту образования и некоторым физико-химическим свойствам. Расширены сведения об ЭК-эндогенном ингибиторе эритропоэза. Определена активность ЭАК и ЭК у животных в норме и при экспериментальной патологии системы эритрона (гипоксия, полицитемия), а также у здо>ровых доноров. Впервые выдвинуто экспериментально обоснованное положение о существовании наряду с ЭП кейлонно-антикейлонной системы регуляции, осуществляющей, вероятно, более тонкий контроль на уровне активно пролиферирующих, морфологически идентифицируемых. клеток эритроидного ряда.
Практическая значимость. Помимо теоретического аспекта работа имеет несомненную практическую ценность. Определение уровня ЭАК и ЭК в крови больных с различной патологией красного кроветворного ростка, а также чувствительности костномозговых элементов к этим факторам могут служить в качестве дополнительных и весьма чувствительных тестов для понимания патогенеза, оценки степени тяжести и эффективности лечения этих заболеваний, целей дифференциальной диагностики, а также позволят обсуждать новые подходы к лечению некоторых из них.
Проводимые в настоящее время исследования (В.А.Белошевский, 1981, 1982) подтверждают это заключение.
Результаты работы внедрены в клиническую практику гематологического центра Воронежской областной клинической больницы и городского гематологического кабинета г.Воронежа с 1980г., кафедры детских болезней Томского медицинского института с 1982г., детской больницы № 2 г.Томска с 1983 г.
Публикации. По материалам исследования опубликовано 12 научных работ, оформлено одно рационализаторское предложение. Основные положения диссертации доложены:
1.На I Всесоюзном съезде гематологов и трансфузиологов. Баку, 1979 г.
2.На I Всероссийском съезде гематологов и трансфузиологов. Ленинград, 1981 г.
3„На Ч Международном симпозиуме по кейлонам. Москва, 1982 г. 4*На научной конференции Воронежского государственного медицинского института, посвященной 20-летию ЦНИЛ. Воронеж, 1982 г.
Заключение диссертационного исследования на тему "Новый стимулятор эритропоэза - эритроцитарный антикейлон и его взаимоотношение с эритроцитарным кейлоном"
Результаты работы внедрены в клиническую практику, детской больницы № 2 г.Томска (Акт внедрения предложения от 24 октября 1983 г.), а также кафедры детских болезней Томского медицинского института (Акт об использовании предложения от I июля 1983 г.) и применяются для определения содержания эритроцитарных антикейлона и кейлона в крови людей в норме и при различных патологических состояниях.
Полученные в диссертационной работе результаты в обобщенном виде представлены в главе монографии; "Антикейлоны и кейлоны" (принято к печати издательством Воронежского государственного университета).
- но
ЗАКЛЮЧЕЕИЕ
Нормальный эритропоэз - сложнейший механизм, в регуляции которого принимает участие большое число факторов, действующих на самых различных уровнях» В изучении ряда из них к настоящему времени достигнуты определенные успехи» Так, накоплен значительный экспериментальный материал об основном стимуляторе - эритропоэтине. Появились, немногочисленные пока, сведения о бурстопромоторной активности, способствующей образованию колоний из более ранних и менее чувствительных к ЭП предшественников эритропоэза. Не вызывают сомнения данные в пользу стимулирующей роли продуктов распада эритроцитов, хотя механизм их действия обсуждается до настоящего^ времени.
Что касается регуляторов, подавляющих эритропоэз, то показано;, в частности, существование ингибиторов, которые образуются в почках и нейтрализуют стимулирующую активность ЭП. Сравнительно недавно,' открыты факторы, действующие непосредственно на эритроидные клетки-предшественники по принципу отрицательной обратной связи - эритроцитарные кейлоны. Причем, исследования последних лет убеждают нас в том, что из всех ингибиторов наиболее важную и специфическую роль в регуляции эритропоэза играет именно ЭК. В связи с этим имеются попытки противопоставить ЭК основному стимулятору эритропоэза - эритропоэтину. Однако., анализ литературных данных свидетельствует о том, что действие этих регуляторов осуществляется на разных уровнях; отличаются они и по месту своего образования в организме. Кроме того, ЭК является, по-видимому, филогенетически более древним фактором, нежели ЭП. Все вышесказанное, а также, с другой стороны, факт обнаружения биологических анатагонистов кейлонов - антикейлонов в ряде клеток и тканей (гранулоциты, фибробласты, печень и др.) предполагает наличие, наряду с ЗП, иного) стимулятора эритролоэ-за - эритроцитарного антикейлона. Такой стимулятор должен быть сравним с ЭК по основным биологическим свойствам (видо-неспецифичность, тканеспецифичность, обратимость действия и т.д.) и входить с ним в единую функциональную систему регуляции.
Использование в наших опытах методов спиртового фракционирования и гель-фильтрации на сефадексе позволило выделить из экстракта эритроцитов и плазмы человека и различных животных вещества, обладающие как стимулирующим, так и ингибирующим эритропоэз действием. Причем, как показали специальные исследования, основные свойства этих факторов позволяют отнести их к эритроцитарным антикейлону и кейлону.
В частности, показана их видонеспецифичность. ЭАК из плазмы и экстракта эритроцитов человека, мелких лабораторных животных (крыс, мышей), крупного рогатого скота оказывает сравнимое по величине стимулирующее влияние на пролиферативную активность эритробластов в культурах костного мозга крыс и эмбриональной печени мышей (рис.8). Аналогично, ЭК из плазмы и экстракта эритроцитов человека, крыс и мышей подавляет включение %-тими-дина в эритробласты эмбриональной печени мышей (рис.8).
Эритроцитарному антикейлону и кейлону присуща клеточно-линейная специфичность действия: в условиях in vi-tro они оказывают влияние только на эритроидные клетки-предшественники. Интенсивность пролиферативных процессов миелобластов при этом не меняется.
Подобно ЭК (Г. В. Hey строев, К.Я.Петров, 1978; Lord et al. t 1977) ЭАК оказывает действие как в культуре клеток, так и в условиях целостного организма. При этом действие его обратимо и нетоксично. Препараты ЭАК апирогенны.
ЭАК, наряду со стимуляцией пролиферативных процессов, ускоряет созревание эритроидных клеток и выброс ретикулоцитов в периферическое русло, о> чем свидетельствуют результаты опыта с дробным, в течение 3-х дней подряд, введением ЗАК интакт-ным мышам (рис»9). При этом ЗАК действует преимущественна на активно пролиферирующие клетки эритроидного' ряда, поскольку максимально выраженный ретикуладатоз наблюдается через 48 ч, а не на следующие от. начала введения сутки. В то же время, ЭАК, по-видимому, не оказывает влияния на коммитированные в сторону эритропоэза стволовые клетки. В противном случае трудно объяснить наблюдаемое через 48 ч уменьшение общего; числа эритроидных. клеток в костном мозге (рис.9). Это предположение нашло экспериментальное подтверждение: введение ЭАК постгипоксиче-ским полицитемическим мышам не вызывает, в отличие от ЭП, рети-кулоцитарную реакцию через 72 ч. Следовательно, ЭАК не действует на уровне ЭЧК.
Изучены некоторые физико-химические свойства ЭАК и ЭК. В лиафилизированном виде это порошки белого цвета, легко, растворимые в водных средах. Молекулярная масса ЭАК находится в пределах 40 ООО - 100 ООО. ЭК - низкомолекулярное вещество с массой 1000-2000. Выделенные препараты весьма термолабильны: они легко инактивируются при тепловой обработке и хранении в лио-филизированном состоянии. Показана неоднородность белкового спектра ЭАК, содержащего до 13 фракций: ЭК - электрофоретичес-ки гомогенное вещество, поскольку на одну из 3-х его фракций приходится около 90$ суммарного белка.
Установлено отличие ЭАК от ЭП. Если, главным местом образования ЭП, по данным литературы, являются почки, то, как показали наши исследования, источник ЭАК - зрелые эритроциты периферической крови. Почки не имеют отношения к продукции ЭАК, о +30
20 10 0 I Ш
ЗАК
1 2 человек <1 5
1 2 КРЫСЫ 1 2
1 г мыши 1 2
1 3 коровы
-10 -20 -30 о/
I« эк
Рис.8. Влияние ЭАК и ЭК, выделенных из плазмы (I) и экстракта эритроцитов (2) человека и различных животных, на пра-лиферативную активность эритробластов в культурах клеток костного мозга крыс - и эмбриональной пе- . чени мышей - ГТ
По оси абсцисс - источник ЭАК и ЭК; по оси ординат -отклонение ИМ от контроля, % . чэ ю
Рис .9. Эритрограммы мышей в разные сроки от начала введения ЭАК. I - праэритробласты и эритро-бласты оазофильные, 2 - полихроматофильные эритрабласты, 3 - полихроматофильные нормо,-бласты, 4 - оксифильные нормооласты. Графики изображают: А - общее число ретикулоцитов в крови, Б - общее число эритракариоцитов в I бедренной кости.
По оси абсцисс - время от начала введения, па оса ординат - отклонение исследуемых показателей от контроля, г ^ поскольку двустороняя нефрэктомия не изменяет активность ЭАК и ЭК в плазме и экстракте эритроцитов опытных животных-. Действие ЭАК и ЭП проявляется на разных уровнях. Так, основной мишенью: для ЭП является отдел ЭЧК. ЭАК, по всей вероятности, действует на более низком уровне - на активно пролиферирующие, морфологически идентифицируемые клетки эритроидного ряда (про-и эритробласты). Кроме того, ЭАК отличается от ЭП по некоторым физико-химическим свойствам (неустойчивость к тепловой обработке и малые сроки хранения в лиофилизированном виде).
Свойства выделенного и описанного нами стимулятора не соответствуют и свойствам веществ, обладающих БПА. Как: известно', к последним относят гликопротеид с молекулярной массой от 15 00020 000 до 40 000. Причем, в отличие от ЭАК, БПА оказывает влияние на уровне стволовых клеток и при этом не обладает специфическим действием, поскольку стимулирует образование не только эритроидных, но и гранулоцитарных, а также мегакариоцитарных колоний ( 1асоте , &и11ЪегЪ , 1978). Показано присутствие БПА в сыворотке больных апластической анемией, а также в кондиционированных средах лейкоцитов или мышиных: лимфоцитов.
Выделение вещества, противоположного по действию эритроци-тарному кейлону и сходного с ним по основным биологическим свойствам и месту образования предполагает существование самостоятельной кейлонно-антикейлонной системы регуляции эритролоэза, действующей по принципу обратной связи на внутритканевом уровне.
Показано;, что в плазме здорового человека и интактных: животных эти регуляторы (ЭАК и ЭК) содержатся в эквивалентных количествах. В связи с вышесказанным, весьма интересным казалось исследование активности ЭАК и ЭК при некоторых возмущающих. эритропоэз воздействиях, а именно-, гипоксической гипоксии; и пастгипоксической полицитемии. Эти состояния моделируют такие заболевания системы эритрона, как анемии, симптоматические эритроцитозы и эритремии.
Оказалось, что. гипоксия, независимо от сроков ее воздействия (и от общей массы эритроцитов) значительно увеличивает уровень ЭАК в крови (плазме, экстракте эритроцитов и эритроли-зате), О; чем свидетельствует сдвиг максимума доз - реакционных кривых влево (рис.10). Исключение составляет активность ЭАК, выделенного из плазмы в ранние сроки гипоксии, которая не отличается от нормы, что), вероятно.', обусловлено* усиленной утилизацией стимулятора в данный период. В то же время наблюдается снижение содержания ЭК в плазме, экстракте эритроцитов и эрит-ролизате (рис.II).
При постгипоксической полицитемии наблюдаются обратные изменения в кейлонно-антикейлонной системе. Активность ЭАК, выделенного из плазмы, экстракта эритроцитов и лизата, значительно. снижается или совсем исчезает, поскольку ни одна из исследуемых доз не оказывает достоверного стимулирующего действия (рис.10). В то же время активность ЭК возрастает в 4-5 раз (рис.II).
Установлено, что отсутствие или значительное снижение активности ЭК (при гипоксии) и ЭАК (при полицитемии) не связано с блокировкой их выхода из клеток: в данные периоды эти регуляторы не выявлялись и в лизате (рис.10, II). Можно предположить, что при определенных, экстремальных для организма, условиях, не происходит активации, того- или иного регулятора в самой клетке, либо этот процесс значительно замедляется. Реципрокный характер изменений активности ЭАК и ЭК при гипоксии, и политтемии свидетельствует в пользу взаимосвязанноета действия этих регуляторов и подтверждает предположение о существовании кейлон
-5 Ь 0,25 0,5
Рис.10. Кривые доза-ответ для ЭАК, полученного из,плазмы (а), экстракта эритроцитов (б) и эритролизата (в) интактных ( О—О), гипоксических: в ранний С Л—Д) и поздний С о—О ) периоды, и постгипоксических полицитемических мышей ( 0—$),
По оси абсцисс - дозы в условных единицах, по оси ординат - отклонение ИМ от контроля, %. но>-антикейлонно.й системы регуляции эритропоэза. Данная система физиологична, поскольку наблюдаемые сдвиги носят компенсаторно~адаптационный характер и дополняют известные изменения продукции ЭП в этих же условиях.
Значительные колебания концентрации ЭАК и ЭК при гипоксии и полицитемии: поставили вопрос о механизме наблюдаемых изменений. Исследования, проведенные в нашей лаборатории (В*А.Бело~ шевский, неопублик. данные), позволяют ответить: на этолг вопрос» Оказалось, что- гипоксия и гипероксия взвеси эритроцитов в раот-воре Хэнкса (в атмосфере чистого азота и кислорода) приводит к аналогичным, по сравнению; с нашими опытами in vivo , изменениям активности ЭАК и ЭК в инкубационной среде, направленным на адаптацию к возникшей ситуации. Возможность и быстрота (через I ч) воспроизведения этих изменений in vitro указывает на автономность от ЭП кейлонно-антикейлонной системы и на прямой (через напряжение кислорода в^крови) характер влияния гипоксии и гипероксии на выход ЭАК и ЭК из эритроцита®. Повышение эритропоэтической активности солевых растворов, в которых при низком атмосферном давлении инкубировались эритроциты* отмечалось и другими исследователями ( Hirsjarvi , 1958).
Следовательно, по крайней мере 2 фактора способны вывести кейлонно-антикейлонную систему регуляции эритропоэза из состояния динамического равновесия, имеющего место в нормальных условиях: I) изменение напряжения кислорода в крови и 2) изменение общей массы эритроцитов. Причем, наблюдаемые при этом изменения активности ЭАК и ЭК носят адаптационно-компенсаторный характер.
Каков же механизм действия ЭАК и ЭК? Многое в этом вопросе еще предстоит выяснить. Вряд ли можно считать, что ЭАК и ЭК продуцируются зрелыми эритроцитами. Скорее, всего^ эти; факторы синтезируются в клетках-предшественниках в неактивной форме и активируются уже в зрелых эритроцитах» высвобождаясь по мере необходимости в окружающую среду. Именно? так представляют себе образование ЭК некоторые исследователи (Г.B.Heyстроев, 1981b; Rytömaa , 1976). Причем, интенсивность активации этих регуляторов в клетках, па-видимому, зависит он ряда фактаров.
ЭАК, по нашим данным, имеет преимущественна внутриклеточную локализацию. ЭК предположительно связан с наружной мембраной эритроцитов (Г.В.Неустроев; 1979)» И стимулятор, и ингибитор легко поступают в окружающую среду в условиях in vitro на протяжении нескольких часов инкубации.
В условиях организма ЭАК и ЭК переносятся к клеткам-мишеням костного мозга через кровь. Показано^ постоянное присутствие ЭАК и ЗК в нормальной плазме.
ЭАК и ЭК имеют, по-видимому, общие пути реализации биологического эффекта на клетки-предшественники: через рецепторы, расположенные на их поверхности. Рецепторный механизм действия ЭК обсуждается в настоящее время (Г.В.Heyстроев; 1978 г.).
В пользу данного механизма в наших исследованиях свидетельствует характер доз-реакционных кривых ЭАК и ЭК (с оптимумом), а также некоторые другие косвенные данные. В частности, для гранулоцитарной системы регуляции показано- (Ю.М.Бала и соавт., X98I), что после предварительной совместной 0,5 -часовой инкубации адекватных доз гранулоцитарных антикейлона и кейлона исчезает их стимулирующий и ингибирующий эффекты на клетки-предшественники (аналогично нашим опытам с ЭАК и ЭК). Если же эту, уже неэффективную смесь, вновь подвергнуть гель-хроматографии на сефадексе, то стимулирующее влияние антикейлона и ингибирую-щее - кейлона на миелобласты костного мозга восстанавливается. Следовательно, не происходит образования химического комплекса кейлон-антикейлон, а имеет место конкуренция их за общие рецеп-торные места на мембранах клеток-предшественников» Это. положение скорее всего верно- и для эритроцитарных антикейлона и кей-лона. В норме они содержатся в плазме в эквивалентных количествах, конкуренция за рецепторные места носит в этом случае равноправный характер. При возмущающих эритропоэз действиях ситуация изменяется в сторону преобладания одного из факторов и уменьшения концентрации другого» В такой ситуации конкурентноспособность. первого значительно^ возрастает, что приводит к соответствующим изменениям пролиферативной активности эритробла-стов.
Действие ЭАК и ЭК осуществляется в Gj-период клеточного цикла, поскольку под их влиянием происходит изменение числа меченых %-тимидином клеток эритроидного ряда» ЭАК ускоряет, а ЭК замедляет вход клеток в фазу синтеза ДНК.
Что» касается действия ЭАК и ЭК на молекулярном уровне, то; установлено), что под влиянием ЭАК in vitro происходит усиление люминесценции окрашенных акридин-оранжевым эритробластов костного мозга крыс (А.П.Калашникова, 1978). Известно, что люминесценция акридиновых производных в ультрафиолетовом свете зависит от наличия свободных фосфатных групп, связывающих акридин» В свою очередь количество таких групп обусловлено функциональным состоянием ДНК - степенью ее комплектования с гисто-нами. По-видимому, добавление ЭАК способствует расщеплению комплекса ДНК-гистоны, предшествующее синтезу ДНК. Аналогичные результаты получены и для гранулоцитарного. антикейлона (Ю.М.Ба-ла и соавт., 1977).
Известно, что ЭК приводит к увеличению активности аденил-атциклазы клеточной мембраны, повышению уровня цАШ? в клетке (Г.В.Неустроев, 1981а). Это в свою очередь, способствует подавлению целого ряда процессов, протекающих в клетке и угнетению ее пролиферативной активности.
Таким образом, данная работа позволила выявить, новый стимулятор и показать существование самостоятельного звена в общем механизме регуляции эритропоэза - кейлонно-антикейлонной системы.
Полученные данные имеют существенное не только теоретическое, но и практическое значение. Большая чувствительность компонентов системы к возмущающим эритрапоэз факторам и физио-логичность ее в данных условиях, предполагают значительные изменения активности ЭАК и ЭК при ряде заболеваний красной кроветворной системы в клинической практике.
В связи с этим можно полагать, что определение активности ЭАК и ЭК в крови больных с поражением красного кроветворного ростка, а также определение чувствительности костномозговых элементов к ЭАК и ЭК, будут представлять несомненный научно-практический интерес. Исследования такого рода могут быть использованы для дифференциальной диагностики, оценки степени тяжести и эффективности лечения ряда заболеваний, а также, воз' можно, позволят обсуадать новые подходы к лечению: некоторых из них.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 1984 года, Калашникова, Антонина Петровна
1.Апарович Г.Г. Влияние эритропоэз возмущающих воздействий на стволовые кроветворные клетки.- Автореф.Дис. канд. мед.наук. Новосибирск, 1977, 24с.
2. Бала Ю.М., Немых: В.Н., Сысоева Л.И. О некоторых биологических. свойствах гранулоцит арного* антикейлона и кейлона.-В кн.: Некоторые вопросы кардиологии!. Кейлоны и антикейлоны. Воронеж, 1981, с.89-95.
3. Балаж А., Епажек И. Эндогенные ингибиторы клеточной пролиферации. М., "Мир", 1982, 302с.
4. Безруков Н.В. Влияние продуктов распада клеток красной крови на синтез РНК и белков в кроветворных, органах:. -Автореф.Дис.канд.мед»наук. Рязань, 1974, 14с.
5. Белошевский В.А. Исследование эритроцитарного антикейлона и кейлона при эритремии. В кн.: Некоторые вопросы кардиологии. Кейлоны и антикейлоны. Воронеж, 1981, с.99-101.
6. Ю.Белошевский В.А. К вопросу о дифференциальной диагностике эритремии и симптоматических эритроцитозов. В кн.: Активаторы и ингибиторы биологических, процессов. Воронеж, 1982, с.88-90.
7. Беляев В.В., Гудим В.И., Москалева Г.П., Соболева Ю»Г., Иванова B.C., Н.Н.Скачилова, акад. АМН СССР Н.А.Федоров. Эритропоэтин m ингибитор эритропоэза у больных: с посттрансфузионными осложнениями. Пробл. гематол», 1978, № 4, с.20-23.
8. Бреслав И.С., Клестова О.В., Моисеева О.И., Шмелева A.M. Влияние дыхания чистым кислородом на эритропоэз. -Бюл.экспер.биол.мед., 1968, № 3, с.39-42.
9. Величко А.Г., Шехтер С.Ю. Об образовании фактора, тормозящего эритропоэз у альпинистов после спуска с высоты. -Бол.экспер.биол.мед., 1968, № 5, с.24-26.
10. Волжская A.M. К вопросу об ингибиторе эритропоэза при экспериментальной посттрансфузшшной полицитемии. -В кн.: Материалы симпозиума гуморальной регуляции кроветворения. Ереван, 1972, с.23.
11. Вайткевич! В.И., Волжская A.M., Мясников А.П. Об ингибиторе эритропоэза при: гипероксии. Там же, с.22-23.- 112
12. Гудим В»И., Кахетелидзе М.Г., Белянчикова Ю.В. Препарат эритропоэтина из плацентарной крови. Пробл.гематол., 1968, № II, с.50-53.
13. Гудим В.И., Москалева Г.П., Корецкая Т.И., Иванова B.C., Розенберг Г.Я» Получение стандарта эритропоэтина Си изучение его активности. -Пробл.гематол», 1971, № 10, с.48-49.
14. Гудим В.И., Иванова B.C. К методике биотестирования эритропоэтина на полицитемических мышах. Лаб.дело, 1977,7, с.429-430.
15. Идельсон Л.И. Эритропоэтическая активность мочи; при эритре-мии и анемии. Пробл.гематол.,1961, № 12, с.11-16.
16. Захаров Ю.М., Тарабчук А.Д., Ершов В.Н. 0 роли ядер костного) мозга в образовании гуморального ингибитора^ эритропоэза. Патол.физиол., 1973, № 3, с.61-62.28.3удин B.C., Баркова Э.Н., Печников Л.Н., Макаров А.И.,
17. В.Ф.Фролова. 0 механизмах, образования и действия эрит-ропоэтина. Тез.докл. 2-го Всес. съезда патофизиологов. Ташкент, 1976, т.1, с.367-368.
18. Калашникова А.П. Метод выделения и. очистки эритроцитарного антикейлона. В кн.: Электроника и химия в кардиологии. Воронеж, 1978, вып.Ю, с.154-155.
19. Карманов П.А., Милютина H.A., Нехлюдова М.Я., Красюк Г.К., Влияние многократного введения кейлона на динамику пролиферации гепатоцитов регенерирующей печени. В кн.: 1У международный симпозиум по кейлонам. Матер.докл., М., 1983, с.84.
20. Катаева Л.Н., Сперанский H.H. Стимуляция выработки эритро-поэтина при сужении почечной артерии в эксперименте.-В кн.: Механизм регуляции в системе крови. Красноярск, 1978, ч.Х, C.XI7-II8.
21. Кахетелидзе М.Г., Гудим В.й., Поляков Л.П. Концентрация ге-мопоэтинов из плацентарной крови и их действие на кроветворение животных. Пробл.гематол., 1966, $ II,с.42-46.- 114
22. Кетлинский С.А. Кейлоны как факторы тканевого гомеостаза.-Арх.анат.гистол.и эмбриол., 1980, & I, с.29-49.
23. Ковалевская Н.П. Гранулоцитарный кейлон в норме, при, остром миелобластном лейкозе и. хроническом миелолейкозе. -Автореф.Дис. канд.мед.наук. Москваi 1981, 23с.
24. Ковалевская Н.П., Бала Ю.М., Козинец Г.И. Гранулоцитарный кейлон в норме и при миелоидных лейкозах у человека. -В кн.: 1У международный симпозиум по кейлонам. Матер, докл., М., 1983, с.104.
25. Козинец Г.И. Изучение пролиферативной способности кроветворных клеток: с помощью: радиоактивных: индикаторов. -Автореф.Дис. канд.мед.наук. Москва, 1963, 19с.
26. Куратовская 3. Гемопоэтические препараты, выделяемые из плацентарной крови при ее фракционировании. Пробл. гематол., 1966, № 7, с.46-53.
27. Кшимовский Т.А. Физиологический механизм регуляции гемопоэза. В кн.: Материалы симпозиума гуморальной регуляции кроветворения. Ереван, 1972, с.49.
28. Мамонтов С.Г# Свойства кейлонов и взаимодействие их с ре-гуляторными системами организменного уровня. В кн.: 1У Международный симпозиум, по кейлонам. Матер.докл. М., 1983, с.45-48.
29. Маурер Г. Диск-электрофорез. М., 1971, 247с.
30. Михайлов В.В., Неустраев Г.В., Герина Л«.С* Роль симпатической нервной системы в регуляции продукции, эритроци-тарного. кейлона. Физиол.журн. СССР, 1980, № 9,с.1344-1349.
31. Моисеева 0.И. Почки и эритропоэз. Л."Наука", 1970, 123с.
32. Моисеева О.И. Эритропоэтические свойства гомогената почек и его субклеточных фракций. Физиол.журн.СССР; 1974, № I, с.39-104.
33. Моисеева О.И. Эритропоэз и функция почек. В сб.: Проблемы интероцепциш, регуляции физиологических, функций и поведения. Л."Наука", 1976, с.164-174.
34. Моисеева О.И. Эритропоэтинообразующая функция почек. В кн.: Физиология системы крови. Физиология эритропоэза. Л."Наука", 1979, с.118-158.
35. Моргунов И.Н., Гарковая E.F., Бордонос В.Г. Влияние лимфо-идного) кейлона на вторичный иммунный ответ при иммунизации бактериальными антигенами. Журн.микробиол., 1980, № 5, с.605-608.
36. Морщакова Е.Ф., Павлов А.Д. Влияние экзогенного эритропоэти-на на синтез РНК в почках и печени,. В кн.: Экспериментальные исследования механизмов гемопоэза. Свердловск, 1971, с.50-56.
37. Морщакова Е.Ф., Павлов А.Д. Изучение места и механизма образования эритропоэтина. В кн.: Молекулярные аспекты регуляции эритропоэза. Рязань., 1974, с.57-86.
38. Москалева Г.П., Гудим В.И., Иванова B.C. Изменение эритропоэза при экспериментальной посттрансфузионной полици-темии. Патол.физиол., 1976, № 5, с.69-72.
39. Мосягина E.H., Федоров H.A., Гудим В.И., Горбунова H.A., Раушенбах М.О. Эритропоэтин. В кн.: Нормально« кроветворение и его регуляция. Москва, 1976а , с.363-457.
40. Мосягина E.H.»Владимирская Е.Б., Торубарова H.A., Мызина Н.В.Регуляция эритропоэза. В кн.: Кинетика форменных элементов крови. М., "Медицина", 19766, с.119-122.
41. Немых: В.Н., Бала Ю.М. К вопросу о методах выделения и очистки тканеспецифических ингибиторов и стимуляторов гемо-поэза (кейлонов и антикейлонов) из лейкоцитов. В кн.: Некоторые вопросы кардиологии!. Микроэлементы. Воронеж, 1977, с.57-59.
42. Немых В.Н., Бала Ю.М. Гранулоцитарный антикейлон стимулятор лейкопоэза в норме и при облучении. - В кн.:1У международный симпозиум по кейлонам. М., 1983, с ЛОЗ.
43. Неустроев Г.В. К механизму образования эритроцитарного кей-лона при. полицитемии in vitro . В кн-: Механизмы регуляции в системе крови. Красноярск, 1978а, ч.1, с.130-131.
44. Неустроев Г.В. Роль эритроцитарных: белков в регуляции клеточного деления эритрона. Физиол.журн.СССР, 19786, № I, с.44-48.
45. Неустроев Г.В. Влияние эритроцитарного (¡^-кейдона на эритро-кинетику у мышей. Бюл.экспер.биол.мед., 1978в, № I, с.73-75.
46. Неустроев Г.В. Влияние эритроцитарного кейлона на электро-форетическую, подвижность клеток костного; мозга мышей.-Бюл.экспер.биол.мед., 1978г, № I, с.8-10.
47. Неустроев Г.В. Об источниках и природе эритроцитарного инги- 117 битора при полицитемии " in vitro Патол.физиол., 1979, № 4, с.54-57.
48. Неустроев Г»В. К вопросу о механизме анемии, вызванной длительным введением эритроцитарного кейлона. Пробл. гематол., 1980а, № 2, с.32-35.
49. Неустроев Г.В. Влияние ояищенного эритроцитарного кейлона на пролиферируищие клетки эритрана мышей. Физиол. журн., 19806, № 6, с.846-851.
50. Неустроев Г.В. Действие эритроцитарного кейлона на кроветворение в селезенке и печени., индуцированное циклофосфа-ном и карбоксиметилцеллллозой. -Патол.физиол., 1980в,1. Ш 4, с.69-73.
51. Неустроев Г-В. 0 роли эритроцитарного кейлона в регуляции эритропоэза. Успехи физиол.наук, 1981а, №2, с.131-148.
52. Неустроев Г.В. Попытка экспериментального обоснования лечения эритремии с помощью кейлонов. Пробл. гематол., I98I6, № 2, с.28-32.
53. Неустроев Г.В. О механизмах действия эритроцитарного кейлона. В кн.: Кейлоны. Значение и роль в нормальных и патологических процессах. Тр.2-ого ШЛМИ им.Н.И.Пирогова.1. М., 1981в, с.52-60.
54. Неустроев Г.В. 0 содержании эритроцитарных белков в сыворотке крови и их функциональное значение. Патол.физиол.,1982а, № I, с.56-58.
55. Неустроев Г.В. Эритроцитарные белки в сыворотке крови при острой кровопотере и полицитемии у крыс. Пробл.гематол., 19826, $ 7, с.64.
56. Неустроев Г.В. Действие кейлонов на эритропоэз (количественная оценка). Успехи соврем.биол., 1983, вып.I,с.84-99.- 118
57. Неустро)ев Г.В., Герина Л.С. Изучение динамики образования эритроцитарного кейлона при регенерации костного мозга крыс. В сб»: Фармакологическая регуляция регенераторных процессов. Йошкар-Ола, 1979, с.62.
58. Неустроев Г.В., Королев Н.П. Поверхностное происхождение эритроцитарного кейлона при полицитемии in vitro Бол.экспер.биол., 1979, Л 9, с.345-348.
59. Неустроев Г.В., Михайлов В.В. О рецепции эритроцитарного кейлона клетками эритроидного ряда костного мозга. -Бюл.экспер.биол.уед., 1981, № 4, с»481-483.
60. Неустроев Г.В., Петров К.Я. Действие эритроцитарного ингибиQтора на включение Н тимидина в ДНК клеток костного мозга in vitro . - Цитология, 1978, № 2, с.179-183.
61. Новиков Н.М. О влиянии продуктов распада эритроцитов на активность ПЭ§ эритрогенина. - Патол.физиол., 1976, № 5, с.82-83.
62. Новиков Н.М., Блюм Л.И., Ромендик Л.М. и др» 0 роли эритро-диереза и продуктов распада эритроцитов в механизмах регуляции: эритропоэза. Тез^докл» 2-го Всес.съезда патофизиологов. Ташкент, 1976а, т.Г» с.383-384.
63. Новиков Н.М., Блюм Л.И., Стагис A.B. и др. О роли почек в механизме эритродиереза при гемолитической (фенилгидрази-новой) и острой постгеморрагической анемии. Бюл. экспер. биол.мед., 19766, № II, с. I3II-I3I4.
64. Павлов АД. Зритропоэтический стресс и рибонуклеиновые кислоты костного мозга* В кн.: Шлекулярные аспекты регуляции эритропоэза» Научные тр. Рязанского; мед»ин-та. 1974а, т.49, с.25-40.
65. Павлов А.Д., Эритрон и механизм действия эритропоэтина. В кн»: Молекулярные аспекты регуляции эритролоэза» Научные труды Рязанского: мед.ин-та, 19746, т.49, с»5-24.
66. Павлов А.Д.Эритроидная дифференциравка и механизм действия эритропоэтина. В кн.: Молекулярные механизмы адаптации эритрона. Тр.Рязанского мед.ин-та, 1979, т.68, с.11-38.
67. Пашков А.Н. Аппарат для регистрации и поглощения ультрафиолетовых лучей (Рацпредложение. Удостоверение № 237 от 13 сентября 1973 г.). В кн.: Изобретения и рационализаторские предложения в медицине. Воронеж, 1974, вып.2, с.76-77.
68. Пашков А.Н., Авдеева Т.Д. Влияние печеночного кейлона и анти-кейлона на синтез ДНК и активность некоторых ферментов» В кн.: Некоторые вопросы кардиологии. Кейлоны и анти-кейлоны. Воронеж, 1981, сЛ03-Ю5.
69. Пашков А.Н., Ремезава Т.И.Днтикейлоны печени и млекопитающих. В кн.: Электроника и химия в кардиологии. Воронеж, 1978, с.158-160.
70. Ракитянская A.A., Харамоненко С.С. Влияние фосфатидов крови на гемопоэз. Пробл.гематол., i960, № II, с.21-26.
71. Ремезова Т.И. Тканеспецифический стимулятор пролифератив-ной активности клеток интимы аорты. В кн.:. Некоторые вопросы кардиологии» Кейлоны и антикейлоны. Воронеж, 1981, с. 108-109.
72. Романов Ю.А., Семенова М.В. Действие кейлона из асцитной опухоли Эрлиха мышей на митотическую активность в этой опухоли после однократного и двухкратного его введения. Бол .экс пер. био л. мед., 1980, № 2, с.189-191.
73. Серебряная Б.А. Влияние продуктов распада эритроцитов на эритропоэз и образование эритропоэтина. Автореф.Дис. канд.биол.наук, Москва, 1970, 15с.
74. Серебряная Б.А., Москалева Г.П., Корецкая Т.Н., Гудим В.И. Влияние продуктов гемолиза на образование эритропоэтина. Патол.физиол., 1969а, }Ь 6, с.49-51.
75. Серебряная Б.А., Москалева Г.П., Горбунова H.A. Влияние продуктов гемолиза на образование эритропоэтина и гемопоэз у собак после острой кровопотери. Пробл.гематол., 19696, № II, с.24-27.
76. Сидельникова В.И., Немых В.Н., Ковалевская Н.П. Фракционирование кейлонов и антикейлонов методом электрофореза в полиакриламидном геле. В кн.: Некоторые вопросы кардиологии. Кейлоны и антикейлоны. Воронеж, 1981, с.105-107.
77. Стародуб Н.Ф., Артюх В.П., Грицак А.Н., Рекун Г.М. Влияние эритропоэтических факторов на синтез различных цепей гемоглобина в культуре эритроидных клеток. Еиохимия, т.45, вып.1, 1980, с.56-62.
78. Туманишвили Г.Д., Козлова Н.В., Саламатина Н.В. 0 теориивнутритканевой регуляции скорооти размножения клеток»-Журн.общей биологии, 1968, № б, с.711-718.
79. Ужанский Я.Г* Учение о гемопоэтинах (эритролоэтинах;). В кн.: Физиологические механизмы регенерации: кроши, М., "Медицина", 1968а, с*28-70-.
80. Ужанский Я.Е. К учению об. эритропоэтинах:. В кн.: Вопросы патофизиологии: регенерации, крови. Хр.каф.патофизиологии. Свердловск, 19686, вып.З, с.5-12.
81. Ужанский Я.Г. К вопросу о природе и происхождении, эритро-поэтических веществ крови при гипоксиях. Сб.научных тр.Кирг.мед.ин-та, 1971, т.68, с.88-97.
82. ЮО.Ужанский Я.Г., Новиков Н.М., Юшков В.Е. и др. Влияние продуктов распада эритроцитов на стволовые клетки и образование эритропоэтина. -Бюл»экспер.биол.мед., 1977,№ 8, с. 14 3-й 5.
83. Федоров H.A., Кахетелидзе М.Г. Гемопоэтины. В кн.: Многотомное руководство, по патологической физиологии*. 1.3, Москва, 1966, с.137-152.
84. Федоров Е.А., Кахетелидзе М.Г. Эритропоэтин. М., "Медицина", 1973, 190с.
85. ТОЗ.Федоров H.A., Москалева Г.П., Гудим В.И,, Иванова B.C. К вопросу о механизме действия продуктов распада гемолиза на гемопоэз. Пробл.гематол., 1975, № II, с.36-39.
86. Федоров H.A., Розенберг; Г.Я., Кахетелидзе М.Г. и др. Получение эритропоэтина из плацентарной крови и изучение era биологических свойств. Пробл.гематол., 1970, № 9, с.40-46.
87. Филимонов В.И. Механизмы торможения эритропоэза ингибитором. Патол.физиол., 1972, № 5, с.33-37.
88. Юб.Фраш В.Н. Биохимические компоненты эритроцитов и ретикулоцитов и их. влияние на эрктропоэа и регенерацию крови.-В кн.: Вопросы патофизиологии; регенерации крояи. Тр. каф.патофизиологии. Свердловск, 1968а, вып.З, с.18-32.
89. Ю7.$раш. В.Н. О влиянии гемоглобина, его дериватов и стромыэритроцитов на эритропоэз и регенерации крови. Патол. физиол., 1968, $ I, с.51-55.
90. Ю8.Черниговский В.Н., Шехтер С.Ю., Ярошевский А.Я. Регуляция эритропоэза. Л., "Наука", 1967, 100с.
91. Чертков И.Л., Фриденштейн А.Я. Клеточные основы кроветворения. М., "Медицина", 1977, 210.
92. ПО.Чумаченко Ю.В., Лотоцкая Л.С. Простой способ лиофилизации большого количества проб малого, объема. Укр.биох. журн., 1978, 1Ь 6, с.783-787.
93. I.Шехтер С.Ю. Регуляция образования эритроцитов при нормальном и нарушенном кроветворении. В кн.: Проблемы интеро-цепции., регуляции физиологических, функций и поведения. Л., "Наука", 1976, с.247-257.
94. П2.Эйвазо,в И.М., Халитова Г.Г., Валиева С.С. 0 роли селезенки в регуляции эритропоэза. Тез.дохл. 2-г© Всес. съезда патофизиологов. Ташкент, 1976,-Т.1, с.403.
95. ПЗ.Ярошевский А.Я. Анемия при заболеваниях, почек и ее патогенез. В кн.: Достижения нефрологии. М., "Медицина", 1970, с»135-143
96. Anagnoston А., Baranowski R., Pillay V. et al. Effect of renin on extrarenal erythropoietin production.-J. ЬаЪ. clin.Med., 1976, v.88, p.707-715.
97. Bala.za A. Insertion of the clalone theory into the frames of cell "biology. In: IV International Symposium on Chalone.Abstract. Moscow, 1982, p.16-19.
98. Bateman A, Cell specificity of chalone-type inhibitors of MA-synthesis released by blood leycocytes and erythrocytes. Cell Tissue KLnet., 1974, v.7, N5, p.451-461.
99. Bateman A., Pollock K. Effect of erythrocyte lysate and erythrocyte-conditioned medium on erythroicL cells in vitro. Virhows Archiv.Abt.B. Cell Path., 1977 , v.2 5, H2, p. 171-177.
100. Bertoncello I., Bradley T.R. The physicochemical properties of erythrocyte derived activity which enhances murine bone marrow colony growth in acar culture. — Austral. J.exp.Biol.Med.Sci., 1977, v.55, N3, P.28I-292.
101. Bjerkness R., Iversen 0. "Antichalone" a theoretical treat -ment of the possible role of antichalone in the growth control system. Acta Pathol.Microbiol.Scand. /A/ , Suppl., 1974, v.248, p.33-42.
102. Bolding W.H., Laurence E.B. Extraction,purification a preliminary characterisation of epidermal chalone : a tissue specific mitotic inhibitor obianed from vertebrate seine. Europ.J.Biochem., 1968, v.5, N3, p.189-198.
103. Borsook H., Rather K., Tattrie B., Teigler D. Effect of erythropoietin in vitro which stimulates that of a maaaive dose in vivo. Nature /London/, 1968, v.217, P.IG24.
104. Brown J.R., Altschuler N., Cooper J.A.D. Erythropoietic effect of Red blood cell components and heme-releted compounds. Proc.Soc.Exp.Biol.Med., 1963, v.112, N4, p. 840-843.
105. Bullough ¥.3. The control of mitotic activity in adult mammalian tissuea. Biol.Rev., 1962, v.37, p.307-342.
106. Bullough W.S. Mitotic and functional homeostasis : a speculative review. Cancer Res., 1965, v.10, p.1683-1727.
107. Bulloughi W.S. Chalone control mechanisms. Life Sci., 1975, v.16, p.323-330.
108. Dorado M., Espa.da J., Langston A.E., B randan K.O. Molecularweight estimation of Human erythropoietin "by SDk-poly — acrilamide gel electrophoresis. Biochem.Med., 1974 , v.IO, p. 1-7.
109. Dunn C.D.R., Jarvis J.H., Napier J.A.F. Changes in erythro-poiesis and renal ultraatructure during, exposure of mice to hypoxia. . Exp.Hematol., 1976, v.4, p.365-381.
110. Dunn C., Lange R., Jones I. Evidens that the fetal mouse liver cell assay detects erythroid regulatory factors /E.R.3?./ not measured with a standart in vivo assay. -Exp.Hemat., 1979, v.7, p.519-523.
111. Erslev A.J., Kaeal L.A. Inactivation of erythropoietin by tissue homogenatea. Proc.Soc.Exp.Biol.Med., 1968,v.129» P.845-849.
112. Erslev A.J,, Kazal L.A., Miller O.P. Binding and release of erythropoietin. Ins The regulation of erythropoieaia and haemoglobin synthesis. - Praha, 1971» p. 15-22.
113. Erslev A.J., Kazal L.A., Miller O.P., Abaidoo K.J.R. The renal erythropoietin inhibitor. In: Regulation of Ery - ' thropoisis. Milano, 1972, p.217-272.
114. Ernatrom IJ., Norlind K. Inhibition of lymphocyte proliferation in vitro by a splenic factors. Acta Path.microbiol. scand., 1974, V.82A, p.445-449.
115. Eapada J., LangtonA.A., Dorado M. Human erythropoietin stu-diea on purity and partial charachterization. Biochem . Biophya.Acta , 1972, v.285, P.427-435.
116. Fischer J.W., Hatch F.E., Roh B.L. et al. Erythropoitin inhibitor in Kidney extracts and plasma from anemic uremic human subjects. Blood, 1968, v.3I, p.440-452.
117. Fischer J.M., langston J. The influence of hypoxemia and co-halt on erythropoietin production in the isolated perfused gog kidney. Blood, 1964, v.29, P.II4-I24.
118. Fischer J.W., Roh B.L., Samuels A.J. et al. Factors influencing renal and extrarenal erythropoietin! production.-In : The regulation of erythropoiesis and haemoglobin synthesis. Praha, 1971, P.23-40.
119. Fletcher J.M., Gallocher N.J., Warnecke M.A., flonati R.M.
120. Erythropoiesis and hyperoxia. Proc.Soc.Exp.Biol.Med., 1973, v.I44, N2, p. 569-574.
121. Foa P., Maiolo A.T., Lambardi 1». et al. The granulocytic chalone : "biological testing and tentative chemical composition. In -j IV International Symposium on Chalone, Abstract, Moscow , 1983, p.12-16.
122. Fried W., Knospe V/.H., Trobaugh F.E. Effect of sex differences on extrarenal erythropoietin production. Proc. Soc,Exp.Biol.Med., 1971, v. 137, p.255-257.
123. Garcia J.F., Sherwood J., Goldwasser E. Radioimmunoassay of Erythropoietin. Blood Cells, 1979, v.5, N3 ,p.405-419.
124. Croll IC.H. Erythropoietin. Folia Haemat., 1974, v.IOI,1. N5, 771-775.
125. Göll R.D. Das Erythropoietin. Wien med Wschr., 1976 , Bd.126, 1120-22. s.299-202.
126. Gordon A.8. Hematopoietic Physiol.Rev., 1959, 29,P. 1-40.1.8«Gordon A.S., Mirand E.A.,Wenig J. et al. Androgen actions in erythropoiesis. Änn.N.X.Acad.Sci., 1968, V.49, p.318-225.
127. Gordon A.S., Zanjani E.D. Studies on the renal erythropoietic factor /REP/ . In : Kidney hormones. /Ed. Fisher J.W./ New York, 1971, p.295-329 .
128. Goldwasser E. Erythropoietin. Blut, 1976, Bd.33, s.125-140.
129. Goldwasser E., Kung C.K.H. Progress in the Purification of Erythropoietin. Ann.N.Y.Acad.Sei., 1968, v.149,P.49-52.
130. Goldwasser E., Kung E.G. Properties of puri^fied erythropoietin. Fed.Proc., 1971, v.20, p.II28.
131. Goldwasser E., White W.F., Taylor K.B. Further purifecation of sheep plasma erythropoietin. Biochim.Biophys.Acta, 1962, v. 64, N3, P.487-496.
132. Gorge W.J., Breiggs D.W., Rodgers G.M., Fisher J.W. Hetabo-lism of erythropoietin. In : Kidney - Hormones!. London-New York, 1977, v.II, p. 73-109.
133. Heidemann E., lung A., Magurczab J. Furthes purification of a tissue specific inhibitor in lymphopoiesis /lymphocyte chalone ?/. Blut, 1979, v.29, N2, p.99-106.
134. Hirsjarvi E. Erythropoietic activity of saline washings ofblood cells subjected to low atmospheric pressure in vitro. -Acta physiol.scand., 1958, v.42, p.288-298.
135. Hodgson G.S., Eskuche J. Time course of effects of erythro -poiais stimulating factor /s/ ESF on Fe59 distribution. In : Erythropoiesis. /Ed. "by L.O. Jacobson, M.D.Doyle/ New York-London, 1962, p.222.
136. Iscove N., Guilbert L. Erythropoietin-Independence of Early Erythropoieaia and Two-Regulator Model of Proloferative Control in the Hemopoietic system. In : In vitro Aspects of Erythropoiesis. 1T.Y.-Heidelberg-Berlin,l978 , P. 5-7.
137. Iversen O.H. In s Chalone /Ed."by Houck/. New York, 1976,p.37-69.
138. Johnson G., Met calf D. Analysis of the cells forming pureand mixed erythroid colonies in agar after stimulation "by pokewed mitage-stimulation splee-conditioned medium.- Exp.H&at.today., N.Y.-Heidelberg^Berlin,I978,p.6l-64.
139. Keighley G., Lowy P.M. Chemistry and purification of erythropoietin. In : Kidney Hormones. /Ed.Fisher J.W. /. Hew York, 1971, p.269-293.
140. Kivilaakso E., Rytomaa T. The effect of polycythaemic serumon the proliferation of rat "bone marrow cells in vitro.- Cell Tissue Kinet., 1970, v.3, N4, p.385-392.
141. Kivilaakso E., Rytomaa T. Erythrocytic chalone a tissue-specific inhibitor of cell proliferation in the erythron.
142. Cell.Tissue Kinet., 1971, v.4, p.1-9.
143. Krizsa P., Keleman E., Cserhati J. et al. Karositott torz-sazonos thrombocytak trombocytopoesist gallo failagos hatasa eger kiserletben. Kiser.orvostud., 1977, k.29, p.512-517.
144. Krzymov?ski T. Participation of the erythropoiesis-inhibitig factor and erythropoietin in regulation of erythrocytes production. Acta physiol.pol,, 1971, v.22, p.881 .
145. Krzymowski T., Krzymowska H. Studies on the erythropoiesis inhibitory factor in the plasma of animals with transfusion polycythemia. Blood, 1962, v.I9, P.38-44.
146. Kuba.nek B., Taylor W.S., Ferrari 1. et al. Regulation on ery-thropoisis. XXI. The effect of erythropoietin on thestem cel. Proc.Soc.Exp.Biol.Med., 1968 , v.127, p. 770-782.
147. Kuratowska Z. On the cubcellular localisation of erythropoietic renal factor. Bull.Acad.Polon.Sci., 1965, v.63, N7 , p.389-390.
148. Kuratowska Z. The renal mechanism of the formation and ina-ctivation of erythropoietin. Ann.ET.I.Acad.Sci., 1968, v.149, p.128-134.
149. Kuratowska Z., Lewartowski B., Lipinsli B. Chemical and "biologic properties of an erythropoitin-generating substance obtained from perfusates of isolated anoxic kidneys. J.lab,clin.Med., 1964, v.64, N2, p.226-237.
150. Kurtides E.S., Rambach W.A., Alt H.L. Erythropoiesis in rata with acute uremia and the effect of erythropoietin. -Blood, 1965, v.2 5, p.292-298.
151. La.nge R.D. Immunological Studes on erythropoietin. Ins Kidney hormones /Ed. Fisher J.W./ , London, 1971»1. P. 373-396.
152. Lewis J.P., Heal W.A., Moores R.R. et al. A protein inhitor of erythropoiesis. J.Lab.clin.Med., 1969, v.74, K4, p.608-613.
153. Lewis J.P., Emily T., V/elch E.2. et al. The selective membrane Filtration of an ESF-generating Factor /EGF/ in the Presense of erythropoietin /ESF/. Proc.3oc.Exp. Biol.¡¡fied., 1971, v.138, HI , p.322-324.
154. Lewis J.P., Neal W.A., Y/elch E.T. et al. The isolation of erytropoiesis regulatory factors by an electrofractiona tion technique combined with selective membrane permeability. Proc.Soc.Exp,Biol.Med., 1973, v.142,p.293-298.
155. Lewis J.P., Welch E.T., Neal W.A. at al. A comparision offour preparations of erythropoiesis regulatory factors. Biochem.Med., 1975, v.I4, 1U, p.399-410.
156. Lindeman R. Erythropoiesia inhibiting factor /EJF/. I.Fractionation and demonstration of urinary EJF. Brit.J. Haemat., I971, v.21, p.623-631.
157. X78.Iindeman R. Erythropoiesis-irihibiting factor /s/ in intact and haemolyzed red "blood cells. Scand. J.Haematol. , 1975, v.I4, p.216-225.
158. I<indeman R. Erythropoiesia inhibiting factor /s/ /EJF/ -methodologic studies. Blood, 1976, v.47, p.155-163.
159. Lord B.J., Cercek L., Cercek B. et al. Inhibitors of haemo-poietic cell proliferation? Specificity of action within the haemopoietic system. Brit.J.Cancer, 1974 , ▼.29, P.168-176.
160. Loz;zio B.B, Regalators of cell division. A review. I.Endogenous mitotic inhibitors of hematopoietic cells. -Exp.Hematol., 1973, v.I, p.309-239.
161. Lukowsky W., Painter R. Studies on the role of sialic.Acid in the physical and biological properties of erythropoietin. Canad J.Biochem., 1972, v. 50, p.909-917.
162. Marks F.S. A tissue-specific factor inhibiting DBA in mouse epideemis. Hath.Cancer Inst.Monogr., 1972, ▼.38, P. 79-90.
163. Ma.toth Y., Kaufmann L. Mitotic activity in vitro of erythro-blasts previously exposed to erythropoietin. Blood, 1962, v.20, p.I65-I7I.
164. Miyake T., Kung Ch., Coldwasser E. Purifications of Human Erythropoietin. J.Biol.Chem., 1977, v.252, N15,1. P.5558-5564.
165. Morijama J., Shimotori T. Studies on erythropoiesis inhibiting factor.The site of formation of EJF. -Acta Haematol., 1970, v. 44, p.321-326.
166. Nakao K., Miura Y., Takaku F. In vitro effect of erythropoietin on the spleen of the polycythemic mouse. Blood, 1966, v.27, p.646-653.
167. Napier J., Dunn C., Ford T., Price V. Pathophysiological changes in serum erythropoiesis activity. Brit.J.Hae-matol., 1977, v.35, P.403-409.
168. Neal W.A., Welch E.T., Lewis J.P. et al. The apparent he-terogenity of erythropoietin. Biochem.Med., 1978, v.20, p.229-237.
169. Nissen C., Iacove N., Speek B. He&gh-burst-promoting activity /BPA/ in serum of patients with acquired aplastic anemia., Exp.Hematology to-day, H.Y.-Heidelberg-Berlin, 1979, P. 79-87.
170. Peschle C., Marone G-., Genovese A. et al. Erythropoietin production in the rat : adNative role of kidney and liver.- Brit.J.Physiol., 1976, v.230, p.845-848.
171. Piha R.S., Hyrake J. The role of the kidney in erythropoiesis. The effect of normal and anemic kidney extracts. -Ann.Acad.Sci.Tenn.»Series A.V.Medica. Helsinke, 1961, v.76, p.I-17.
172. Przala. J. The role of the spleen and its subcellular fractions in the production of the erythropoiesis inhibitor.
173. Bui.Acad.Pol.Sci./Ser.Sci.Biol./, 1977, v.25, P.342-349.
174. Reynafarie C. Humoral regulation of the erythropoietic depression of high altitude polycythemic subjects after return of sed level. Ann.ll.T.Acad.Sci., 1968, v.149, p.472-474.
175. Rytomaa T. The chalone concept. Int.Rev.Exp.Pathol., 1976a, v. 16, p.155-206.
176. Rytomaa T. Biology of granulocyte chalone. Inj Chalonea /Ed.J.C.Houck/, Amsterdam, 1976"b, p.289-310.
177. Rytomaa T., Foa P., Paile W. et al. Mode of action of granulocytic chalone on chlorleukomia cell in vitro. Inj IV Intern.Symposium on Chalone .Abstract. Moscow, 1983, p.19-20.
178. Rytoma.a T., Kiviniemi K. Control of Granulocyte production.
179. Chalone and antichalone,two specific humoral regulators. Cell Tissue Kinet., 1968a, v.I, p.329-346.
180. Rytomaa T., Kiviniemi K. Control of granulocyte production.1..Mode of action of chalone and antichalone, — Cell Tissue Kinet., 1968b, v.I, p. 341-350.
181. Rytomaa T., Kiviniemi K. Control of DMA duplication in ratr nchlol eukaemia "by mea!se of the granulocytic chalone.— Eur op.
182. Y/eiss P., Kavanau J.L. A model of growth and growth control in mathematical terms. J.Gen.Physiol.,1957,v.41 ,1. P. 1-47.
183. Vfaitcomb W.H. Erythropoietic inhibition.in polycythemic plasma following transfusion or hypoxia. In--.: Kidney hormones /Ed. Fisher J.W./ london-N.Y., 1971, p.461-484.
184. Whitcomb W.H., Moore M.Z. She inhibitory effect of plasma from hypertransfused animals on erythrocyte iron incor— poretion in mice. J.Lab.clin.Med., 1965, v.66 ., N4, p.641-655.
185. Zanjani E.D., Poster J., Burlington H. et al. liver as the primary site of erythropoietin formation in the fetus.- J.Lab.clin.Med., 1977, v.89, p.640-644.
186. Zivny J., Necas E. Regulation of erythropoiesis an attempt to demonstrate the existence of an inhibitor of erythropoiesis. Physiol.bohemoslov., 1972, v.21, p.j>;>.
187. Zucali J.R., McCarry M.P., Mirand E.A. Stimulation of erythropoiesis in a grafted animal by mouse fetal liver culture media. Exp.Hematol., 1977 , v.5, p.102-108.
188. Zucali J.R., Mirand E.A. Biosynthesis of erythropoietin by mouse fetal liver in culture. Blood Cells, 1975, v.I, P. 417