Автореферат и диссертация по медицине (14.00.23) на тему:Нитрооксидсинтаза легких и значение NO-ергического механизма в регуляции проходимости бронхов

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РФ ВЛАДИВОСТОКСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ '

На правду рукописи

ЗУГА Маргарита Викторовна

НИТРО0КСИДСИНТАЭА ЛЕГКИХ И ЗНАЧЕНИЕ мо-ергичылшго МЕХАНИЗМА В РЕГУЛЯЦИИ ПРОХОДИМОСТИ БРОНХОВ

14.00.33 - гистология, цитслошч и змСрпологня

14.00.45 - пульмсиолопп .

А л т о р ч ф с р а т

- диессртзкии и - с5ис:-эш:в упгпоа'сг.лмнн кандидата медши:НСлих наук

Р Г 5 ОД

В.^дтссто.

Работа выполнена во Владивостокском, осудопственном медицинском

университете

V • ■

Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор ■ П. А. Могавкин

доктор медицинских наук, профессор Б.И.Гельцер

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук

А.В. Ломакин ‘

доктор медицин .сих наук, профессор .

Ю.В. Кулаков

, Ведущая организация: Российский Кардиологический центр .

, ■ і

Защита состоится "________" ___________________________1996 года на заседай

специализированного совета Д 084.24. 01 лри1 Владивостокском государственна медицинском университете (69(д»00, г. Владивосток, проспект Острякова, 2, ті 25 17-06). . .

С диссерт?чией мо' но ознакомиться , в библиотеке Влздивоотокскс государственного медицинского унивгрситета (690^00, г. Владивосток, просій Острякова, 2)

Автореферат разослан "____"________________1996 г.

Ученый секретарь -

специализированного ученого совета к 6 II

Г.М. Холоденко

Актуальность работы. Нормальная функция легких, как органа ;гсит в перзую очередь от проходимости бронхов. Они не только прсчач г пух, но и регулируют его количество, адекватное вместимости респираторного ела. В этом значении особую роль играют мелкие бронхи и брсгпХ'Ю.ц.’, тощие более развитую мышечную оболочку (Есипова, ' 'ексеевскпГ:, : 994 ■.

Между тем, пнешь,,е и внутренние факторы способны ы.-пьгать я дукторном отделе легких дистрофические и. воспалительные прщессч личной тяжести. Одной из серьезных и наиболее широко распространенных ологий считается бронхиальная астма (Федосеев,. 1996, Moreno et al.. сим проявлением этой болезни является гиперреактнвность гладкой мышечной ни, обусловленная изменениями в иммунном статусе организма и нарушениях ро-эндокринной регуляции (Barnes. 1986, 1991, 1992).

В последние пять лет в происхождении и развитии этой болезни стали давать особое значение изменениям в ;.^х лннергической и лрснергической нервной регуляции бронхов (Федосеев, 19.96, Barnes,1991 je, 1991). Среди этих новых механизмов, судя но обилию публикаций, ляется особое внимание нитрооксндергической регуляции (Barnes, 1995, Li,

О- ' ■ -

Открытие окиси азота (SO), как универсального внутриклеп. юго сенджера, явилось "революционным" этапом в развитии физиологии, рывающим новые возможности для понимания патогенеза и фармакотерапии гзни легких.

Широко обсуждается вопрос об участии N0 в легочной гемоциркуляции not et al, 1995), его значение в релаксации и констрикцип Vponenoci удов большого и малого круга кровообращешш (Francisclietti et al, !995), в троле за состоянием свертывающей системы крови (Jensen, Holr ;cn, 1995), гственному составу эритроцитов и полнморфноядер ых лейкоцитов liconstantinos, 1995, Seth et al, 1994), репаратпвных процессов в легких через мулнрование функции макрофагов и синтетической активности фнброблаетов lasanti, 1995). '

Однако, среди всех этих несомненно важных научных проблем, особое дпочтение отдается КО. как регулятору тонуса мышечной оболочки бронхов aritonov et al, 1995, Zhao, Guenard, 1995). Имеющиеся факты, как считают )ры, не позволяют сделать окончательных выводов о роли N0 в контроле за ходимостью бронхов. Не хватает данных о гистологических структурах, азующих газ в легких, активности ферментов, его синтезирующих, времени )евання и состоянии их у человека и животных, а так же о соотношении рооксидергнческого механизма с другими системами, регулирующими кцню органон дыхания.

Цель работы состояла в том, чтобы установить значе! плтрооксидергического механизма в регуляции подвижности, в основном, меЛ1 бронхов, отвечающих за наполняемость ацинусов вдыхаемым воздухом.

Залами исследования: ■ '

1. Определить локализацию к активность нитрооксидсинтазы в легких.

2. Установить взаимодействие ее активности с двигательной функцией бронхо1

3. Определить соотношение в регуляции бронхов нитринергического и

тучноклсточного механизмов. - -

Оцепить интегрирующее значение вагусной иннервации бронхов.

Научная новизна. В работе установлены новае факты о локализации энзим они гелии, выстилающем бронхи, в сосудистом эндотелии нигрооксидергических нервах, его созревании в онтогенезе у человека соетоянь в зрелом возрасте. Показано, что под влиянием ацетилхолина больных и здоровых животных происходит активация фермента, 1: •• ■ приводи неоднозначной реакции бронхов - констрикции у больных и релаксации здоровых. Установлено, что повышение тонуса гладкой мышечной ткани боль ы\ •/кивотхых связано с ' активацией тучных клеток. Показ; интегрирующее значение вагусной иннервации относительно координаг питрооксидсргнчсского и тучноклеточного механизмов регуляции подвижно! бронхов. '

Теоретическая и практическая ценность работы. Полученные в раб( результаты .дополняют ранее известные механизмы о регуляции подвижно! бронхов, устанавливают значение нитрооксидергического механизма и > соотношение с другими-регуляторными системами легких,‘ открывают нов направления в фармакотерапии неспецифических заболеваний орггнов дыхани В связи с наличием внешнего, заключенного в эпителиальной высти бронхов, механиз?ла их релаксации, становится возможным разрабо недорогих, но эффективных методов лечения обструктивных заболевай основанных на введении лекарственных препаратов в дыхательные п; ингаляционным способом. Это может быть сам газ в слабых концентрациях, I вещества, изготовленные на его основе, "

Апробация диссертации. Основные результаты исследования доложены научных конференциях Владивостокского медицинского университета (1996), конгрессе морфологической ассоциации СЧГ (1996), на съезде пульмонологе Нов сибирске (19961.

' Публикации. П (атерналам работы опубликовано 15 печатных работ, из I 7 в ц 'игральной печати. ' ■

Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обз( литературы, материалов и методов исследовавши, четырех глав результа' собственных данных, обсуждения и выв. дои.

Список литературы включает 48 отечественных и 249 инострани источников. Диссертация изложена на 177 страницах и включает 12 таблиц, рпеунтв (схемы, световые и электронные микрофотографии).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Нитрооксидсинтаза легких была изучена гистохимическим метолом НАДФН-диафоразу у человека и лабораторных животных (26 кроликон с !.:'0 крыс), .

Для исследования фермента у человека были выбраны:

- период внутриутробного развития (плоды I и П°половины оеремеьнос’н). ^ ■; ч:: органы дыхания в оснопном сформированы, но еще не функшюнирогчг'1. ч, следовательно, не подвергались воздействию внешней среды; и

• период зрелого возраста, легкие людей 40-49 лет, умерших не от лггспг.п патологии. ■

В эксперимент помимо практически здоровых животных были взяты крыс,' •: пневмоцистной пневмонией и кролики с моделью хронического брочм^л. Хронический бронхолегочный процесс был воспроизведен путем ьымекиг, инородного тела в трахею и бронхи по методу Н.Н. Аничкова и М.А. Захарьевской (1954).

Экспериментальные исследования слогались из трех посдедоиаюлг..! г; этапов: '

1. Изучение активности NO-синтазы . ттелия бронхов а их ниОиюк'/икчнн при ингаляции ацетилхолина.

Здоровым и больным животным ингалировали г.цети.тхолнн • ГАХ > ,i нарастающих концентрациях 0,2, 0,4 и 0,6 г/л, которым соответствовали дозы 5, 10, 15 мкг/кг. Отдельным группам в ингалпруемын раствор ацетилхолнн;: добавляли ионофор кальция А23217 в расчете Ю‘б Моль/мл. Животные помещались и полиэтиленовую камеру, соединенную с ультразвуко::.ы.\' ингалятором. АХ растворялся перед каждой шп шяцией в 5 мл физиологического раствора и подавался в течении 3-х минут со средней скоростью 1,6 мл/мин. Между ингаляциями выдерживался пятиминутный перерыв. Отдельные групп' i составили здоровые и больные животу ,ie, которым за 10 минут до начала первой ингаляции вводился атропин (100 мг/кг). Контрольным жн-отным ингалировали физиологический раствор. После ингаляции животные умерщвлялись: кролики введением в полость сердца 1 мл 10 % формалина, крысы декапитнроаались.

2, Исследование функциональной активности тучных клеток под воздействием холннсрсический препаратов

' Эксперимент был выполнен на крысах (in vivo) и на органной культуре меднастинальпой плевры (in vitro).

В исследованиях in vivo животным знутриплеврально вводили АХ в терапевтической дозе (0,5 мг/кг), отдельным группам перед введением АХ вводили атропин (0,1 мг/кг) или ингалировали атровент (2 мкг/кг). Две группы -интактные п с внутриплевральиым введением физиологического раствора, были взяты п качестве контроля.

Легкие и плевра извлекались не позднее 10 мин. после декапитации. Плевра растягивалась на предметном . стекле, подсушивалась и окрашивалась толундиновым синим. Легкие замораживались' в криостате, затем . срезы обрабатывались по такой же методике.

В исследованиях in vitro медиастинальную плевру, взятую от здоровых крыс инкубировали с ацстилхолином, из расчета 0,5 мкг на 1 г ткани, атропином і атрозентом, из расчета 0,1 мкг на 1 г, в течении 15 мин. Затем промывали 5°/ раствором глюкозы, подсдоивали и окрашивали толуидин(?вым синим.

. 3. Односторонняя перерезка блуждающего нерва: состояние бронхов г

тучных клеток. .

Крысам под легким эфирным наркозом перерезался правый блуждагощиі нерв ниже узловатого (нижнего) ганглия. Первая группа жпвотны: дечапитировалась через 5 дней, а вторая через месяц. Исследовалось состояши правого и для сравнения с ним, левое легкое, с сохраненной вагусноі иннервацией. Контрольную группу составили кооперированные животные.

Результаты перерезки, полнота дегенерации устанавливались импрегнацией п( Кахалю д.истального отдела церва. Плевра импрешировалась по Кампосу. I легких изучали НАДФН-диафоразу бронхиального эпителия, ксследовалі состояние бронхов и тучных клеток.

Гистохимическая реакція локализации активности НАДФН-зависимой N0 сшпазы (НАДФН диафоразы) (КФ: 1.6.99.1.) проводилась нами по методу' В.Т Норе и S.R. Vincent (1989) и основана на образовании диформазана в присутствиі эндогенного НАДФН н солей тетразолия. НАДФН-диафораза осуществляе перенос протонов от НАДФН к нитросинему тетразолию (НСТ). Востановленный НСТ превращается в нерастворимый продукт - диформазан, его расположени указывает на локализацию активности NO-синтазы.

Участки легких человека или животных, размерами 1x0,5 см, выделяли помощью лезвия и опускали в охлажденный, приготовленный на 0,1М фосфатно: буфере (pH 7,4), 4 % параформальдегид, который из всего кг/асса дпафора сохраняет активность только НАДФН-диафоразы. Материал фиксировали течении 2 часов при 4° С, затем сутки промывали при той же температуре в 15 °/ растворе сахарозы с 7-8 кратной сменой раствора. Из образцов, замороженных криостате, изготавливали срезы толщиной 10 мкм, монтировали на предметны стекла и помещали в инкубационную среду, состав и конечная концентраци которой были следующими: 50 мМ Трис-буфер (pH 8,0), 1 мМ НАДФ-Н (Sigma

0,5 мМ нитросинего тетразолия (Sigma) и 0,2 % Тритон Х-100 (Serva). Инкубацш проводили в течении 60 минут при 37°С, после чего срезы ополаскивали дистилляте, обезвоживали и заключали в біЛьзам по общепринятой методике.

Для'исследования холинергичсских структур в легких использовали широк известный тиохолиновый метод Келе на ацетилхолинестеразу (АХЭ)(1949).

Применялись классические нейрогистологические методы импрегнаци азотнокислым серебром: метод Кампоса (для пленочных препаратов плевры) метод Кахаля (для кусочков легких). ■

Ультраструктурные исследования шполнены на электронном микроскоп "JEM-100B".

Структура бронхов п легочной ткани изучалась так же с применение] общег. отологический методик: окрашивание срезов 1% спнртовьіі

толуидиновым синим, по Романовскому и гематоксилин-эозином.

Количественные исследования активности НАДФН-диафоразм, АХЭ и плотности специфических гранул тучных клеток выполнены ид .микроденситометре "Viclcers-M85". .

Морфометрия бронхов проводилась из строго поперечных срезах с помощью МОВ-1 л микроскопа фирмы "Carel Zeis’’. У человека исследовались, преимущественно, Gpoiixn 11-16 порядка деления (Weibel, 1964). У животных-бронхи диаметром 0,5-0,1мм. В эксперимента степень констрикции или релаксации после ингаляции препаратов определяли как отношение диаметра просвета к диаметру бронха п процентах.

Морфометрию тучных клеток осуществляли с помощью МОП-1 на световом микроскопе. Содержание клеток в плевре и легочных срезах расчитывали на площадь в 1 ка. мм (в 10 полях зрения). Коэффициент дегрануляшш определяли как отношение дегрпнулиругощнх элементов к общему количеству клеток. Величину профильного поля расчитьп>али как произведение двух диаметров клетки. Статистическую обработку числовых значений производили с ' использованием критериев Стыодента.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ Для нормальной проходимости бронхов необходимы совершенные регуляторные механизмы, способные обеспечить респираторный отдел достаточным количеством воздуха. Он должен быть согрет, увлажнен, очищен от посторонних бпотпчных и абиотнчиых примесей. Для этого кондукторный отдел дыхательной системы - носоглотка, гортань, трахея и бронхиальное дерево располагают геем необходимым:

- развитым кровоснабжением, обильной капиллярной сетью в слизистом слое ссех органов и особенно носовой полости;

- увлажняющим слизеобразугащим аппаратом - бокаловидными клетками и мелкими железами лодслизистого слоя;

- наличием ресничек на апикальной поверхности призматнчсског ч эпителия, образующих мерцательный аппарат, который совместно со слизистым секретом, составляет муксиилиарпый клиренс, определяющий направление тока жидкости,. с которой удаляются инородные тела н продукты жизнедеятельности клеток. ■Чистоту воздуха и состояние среды а легких, их гомеостаз контролируют ’легочные макрофаги (коппофаги), постоянно присутствующие з органе, а также ;’е|-;его;!Ь!': клетки лимфатических сосудсп, сопровождающих бронхи.

Механизмы, регулирующие г.ригок воздуха и его кондешшонированне. •'•пгются единой системой, управляющей йиешним дыханием. Трахея и бронхи это глазные ноздухоправодяшпе пути, а мелкие бронхи и бронхиолы, помимо транспортной функции, определяют 'норму'' наполнения воздухом респираторного отдела.

Весь воздухоносный путь покрыт опителиех функция которого состоит а том, чтобы контролировать проходимость бронхов и нормальную воздухснзполняемость легких. Неслучайно, одну из болезней легких, бронхиальную астму, при которой нарушается эпителиальный покров, иногда

б

образно называют "болезнью зшггелил”. '

Контактируя первым с движущимся воздушным потоком, эпителий посылае' сигналы на мышечный а 1арат, который .\;еп;.я тонус, определяет состояшк проходимости бронхов. Мгновенные реакции миоцитоп (шщрпмор, на ядовитые пары), приводящие к бронхоспазму, поступают с эпителия. Зтп факты нзассиш I науке давно, но механизм передачи раздражения с эпителия па' гдадкук мускулатур; объясняли неоднозначно.

С связи со скоростью реакции большинство авторов считают, что оно реализуется с помощью нервного механизма. Под эпителием были описями нервные рецепторы н эффекторы, которые и рассматривают как штернг-льную основу заг '-гкого рефлекса (Лашков, 1963, Вагпез, 1986).

Паш»! наследования пока*;’,«ают, что под эпителиальной ьыстилкой имеется

• ерапое сплетение из волокон малого н среднего диаметра. Некоторые т них образуют рецепторные терминала довольно причудливой формы, Аксоны, постепенно утолщать к концу, формируют терминтль, напоминающую грушу, Мы пологаем, что такие грубые концевые утолщечмя возникают при наллчнн длительного раздражителя (Мотапкин, 1959), чго относительно поверхности дыхательных путей всегда имеет место.

При элсктронномшфоскопапеских исследопапнях под базальной мс.\:йрзкоц найденные многочисленные, с разнообразной ультр^струкзуркой организацией, нервные терминали. Топкие (0,5-1 мкм) аксоны нылст светлые электроинопрозратныс пузьюнки диамегром <10-50 нм. Высокги ко.'.центрацнч пузырьков характерна для холнаергипссцзго щ.сл'.удник; (Могагалш, 1980). Наличие в последних ацетиллолкшете'разь! укренллег уи'-'снпосгь ь парасимпатической природе ал-соноа. Перерезка нерва подтверждает принадлежность их к системе блуждающего перса.

Аксоны лодэпителиалыюго нервного сплетения контролируют .\;сс?1.у:э гемодинамику, секреторные процессы е бокаловидных, ^-'дэкрллин:; клетках и * железах подслшнстого слон, определяют шпяскосгс мерцательного екдерелл ресничных клеток (АНгпЬу с1 а!, 1992, Впе’кЬу, 299-!). Хол'::;.ргцч;;:чпе акссш взаимодействуют со свотш мишенемн чгрез мускары.'оыч; рецепторы, главным образом М> и Мз(Ми'.пеЦе, Вг.гпез, 1990).

В с» ином безмякотпом волокне с х&ишергпчсскимц ипходкгел адренергические аксоны. Они содержи пузырьки (<10-60пм) с зг.екфонаоплотпай граиудоЛ или глобулой, которые р!-::гпру!ОТ иа ингмимторм мопоанкнокендаеы Н прокуреорн иорадренллнна (Мотавкии, Чертик, 1979). Близкие колта^зы с секреторными клетками доказывают их регулирующее юшши стаоситгльно продукции слизи н олнгонептидов, вырабатываемых мегтг.ьшя эчцокрлноцпгамн {Внек!су, 1594, 1чпн; л з1, 1992). Они а;с сшгл.ают ьшшгчимП тонус артеслюл слизистой оболочки, расширяют пх просвет, увеличивают крошена полпенни каашшкрос (Ун-Чап, 1991). В адренергических терминал;.;; более нлп меиез постоянно имеются типичные пептидные'везикулы величиною в 150-200 н;л. Они заключают нейропептид "У", являшн1иГ*'5я типичным ‘е;йско»с'фн.;тором (Оаеоу с! ;;1, 198Б). Вычленение шейных симпатических узлов приводит к дегенерации аксонов с

ісііропептндом ''Y" и катсхолпмшкімі:, что доказывает их совместную точгп;«?.шпо (A'r.-ci ct at, togfi). Оллахо, і:с>1ропзткд "Y" еиптсанпугат но псе іпмкгтнчссккз іг-ч'-ронм. Предполагаете::, что он является модулятором, icu'itiuatomtiai дєіієіриє биогенных амилоз. Он мс.кот быть н медиатором, если :сдсроснтгл a аоооно л слсутепох! «.'атохолг'шиоз (Bevan, Brayden, 1987).

Кроме холкімрпгіесхих и адроноргдчоехчх прозодішкоз нами установлены .ксо’!’!, cr^pT.m’V.'c ".•лтпрлг-’,? г-с:н:;удп Г-00-'00 нм. Трудно назвать конкретное • СШССТГ.0 ЛПІТ1Г» ПО '.ТО у.іьтрпсчруїггурноіі ОрГЙШ!32ДНИ. Это молсст был ь :.іпрс:;ігт!:л А «ли ’:сн.'->ч^п:ь.'1. Обмчло эти о-Р'роггеггшдм локалктянм л фферохто' uy^ciruv.:тдермипа-лх (Bucldsy, Nijkxunp, 1994). lie [сглтонеко, хто !:■;>:гид’л: грдогулм пречгллежаг счбстэтши Р. Методом

отреградного транспорт; п о.одрлпхкурліо;м:; исслейэзапирми ог;о было :,~е:і7і:фі:ці:р'.'’-".по з про і о:-vtrouлч спи^чомозгоїш?: yjscr, гг.ііглнєз

гойплопого н Swcpwom-.to нерпа и п ті?: подохім;: (Gam?:-: et a!, 1980, Liu-Chem

Ul.PGO-

Co" л«,.->:іоч о г^гсстгс'і Р о!д> ’:г- глр’-нрует. Hanpnvcp, г. сосудах

o ra -і-: о.хло:: у :::о':оі:п:;', ч.*м у члрог.ека (Utldmon, Et’-ins--on, 1933). іолг.гг.ьт:, хто г/о еусоїохіо'о оад’отел оодуллгором Go;::'. Воодсгоо •.«•цвотным лпссогопа :и-'оолог л .о-отгоз:;-. :дс!.л:х М'?слл:г-ац:оі гещослза І' а і; ,, і УЗО).

І!г;чо:л‘о :-”рс діл о: дллл/’Тгрс:': 'ролхоп сп;та:от олзопотсспшааышп Л!ТЛО (VI;-;, дохооо аі о >'■• м анлотсооо ;jo:\\o і (Нодк’о, сі аі.

Г'Н). На юооуои:::рслао;и.о: г;см 'ЛР О’!*:; *?l С’-’орорюх опдпх прі:

г;:мул?ц::ч б.-.; і-їкооігєго нсрг.г бмло '■ о --с-булсдеї’::.; >г хлц-рахеи :г; ’і •' oJvxar;: о,угч'о: о;.одО‘'Ог :, Л.;/’п гі)по:;г о ?:— оду, ч:о ’•

і 1 лдого : і ...лі: - о Д'оо ;о ' '1 L'-or.rii’-: ’'Д:оо ослооо :. Олхаоо.

"ах: ■ :до -; -on, чі о VIP гг’-с:пі о ? лто одхоо 'охлх аосоо'о; і.-олмсстко с огр'опгд ■1 о.о:' ого ороо-- оооо лр-'оаор"оо х:оог'о'г. '’хлопот ::і:пел::алчп :о ОІ!.-ІО;о-;'■ Т!,-'ІГОПОО ; " ;0С1 о, ■ 01Г -Г !:а 'іу.'СЦПЛООаОМІ; Тр:’;ГСПОІ5Т {palmer

’ ' ' ‘ ' 'о:"о::у;і!;г : ' іодг-;, доио: іодг'од;’ о:;: Д'рдаают гах ноа^чо •

•до'оіу'о or si о '"і :о 'о; оо 'гкоі: гоо,''ргаїнк: г-дуляторпуіо спатиму.

,, . , . . гч.гомпого J:OCO:U1CI!UO,

'ооо :>о ojri арі«т:о'-і ;r • о оооі об порука:::! Gr ooa (Ijanies,

'9!, :’:!io:.- cl ri, l');o), D ooooo: :: i -ooooooo: n н:и';л'одо:ш; ні люлпх

''■‘00','0, oro уугд;. ;'Гі: ■ ■ л її.--,;-; v;. а'оП\:0^0,ОЛ О v О О і О О СОСТСМО

■ ооомо'- : .• до г:: цмц" о1 ■- д, -о‘ о: о- оу: "от то:ус :оюц-г;оа п сронхач

огор о J !0: О’ 01-;,0 0' оро :..оОО:;га);,

Г.:Ц;;ПОрНЧ” Оі'ОчОІ Р .■!' Г - то;, ;;ут;0 *;огуТ СЫТЬ ОррОГаТНОПЫС

оопто]::і, oOptno’’-штю тоого:о; o:oicoh.i'ot груг.пи С. Б пормпдг.?:мх условиях :і к ■нгро;шр;.!ОТ проход;г ^рлцхоп и оіссобствуюг брсиходалогацїчі. При піллсліїн гх раздроо'ола: пгі':л;о!СТ'^роихо-оїтстриощдо п па^олмлятацшо, а ; ;іа: 'прмознтдйіршуллц'-.:-:! тучних к:;:юіг. (Ношо et nl, 199!),

Последователи склоняются к -мысли о том, что дидятатарными эффекторами могут быть КО-эргическис аксоны, обнаруженные в составе блуждающего нерва. Эга система волокон, показана нами в Мелик бронхах человека. Один и тот ?.t нерв одновременно1 может иннервировать брою: и бронхиальные кровеносные сосуды. Дихотомическое Деление небольших нервных стволиков соответственно артерии и бронху памп было зарегистрировано неоднократно. Их аксоны формируют КО-эргичеекие ciueiciii!)' Эгот факт свидетельствует в пользу того, что функции сосуда ц бронха могут изменяться хрбногропно ввиду того, что они иннервируются из

О ШО! о и того же источника. .

Помимо центральных рефлекторных механизмов, стимулирующих или угнетающих функцию эпителиального пласта, его клетки могут работать в относительно автономном режиме, снижая констрикторпые эффекты холниергическнх влолкси блуждающего.нерва.

Вглусной - констрнкции эпителиоциты противопоставляют мощные днлятаторные механизмы, еекретируя вещества, снижающие тонуе гладких МЫИ1СЧНЫХ клето;». Долгое время факторы, расширяющие бронхи, связывали исключительно с производными арахидоновой кислоты. Метаболизм ее по циклооксигсназному пути приводит, как известно, к образованию нроетоглапдннов, а окисление лнноокенгеназой дает лейкотриены, Обе группы веществ рассматриваются как потенциальные регуляторы, мишеныо для которых служат гладкие мышечные клетки бронхов (Baines, 1992). Среди лейкотрисиов особое значение в патогенезе «еспецнфичсеких заболеваний легких, таких например как бронхиальная астма, имеют лейкотриены В4 (ЛТВ4), C.i (ЛТД D4 (ЛТ04) и К.( (ЛТЕ4) (Абросимов, Порядим, 1994). .

В обзорах В.Е. Skooyk (Skooyk, Ulltnan, 1991) и J.L. Balaeh (Balaeh, 1991) подробно рассмотрены механизмы действия простоглапдинов ПТЕ?, ГИТ;, ПГОг. Па основе литературы и собственного опыта авторы.рассматривают релаксацию бронхов под влиянием простоглапдинов в качестве механизма, ограничивающего вагусную конструкцию. При этом Простогландины, ■ действуя через адепилатциклазную сиете,\:у или инозитол-3-фоефат и специфические ци гоплаз.матические протеннкиназы, снижают тонус гладких миоцитов.

Новые подходы к пониманию механизма, регулирующего релаксацию обозначились в самом начале 80-х годов. Впервые R.F.Furchgott и J.Zawadski (i-iiichgott, Zavadski, 1980) в фармакологическом отделе Нью-Йоркского госпиталя показа.. , что ацетилхолнн релакеирует кровеносные сосуды через эндыелнальную. выстилку. .Повреждение ее вызывает обратную,, то есть констрикторную реакцию. Этот механизм регуляции кровеносных сосудов получил название эндотелиозависимого. На сегодняшний день об окиси азота, как эндогенном факторе, нзм> няющем подвижность кровеносных сосудов, имеется обширная литератора (см. обзоры - Мотавкин, 1992, Dinhuan, 1994). Згмегим, что регуляция кровеносных сосудов со стороны тока крови, то есть через нх внутреннюю оболочку, у нас в стране была названа интнмальньш

1еханизмом (Мотавкш{,Черток, 1980), разработанным и предложенным в одно и о же время с американскими исследователями. .

Существует мнение, что окнсь азота в легких при физиологических юстояниях вырабатывается, в основном, сосудистым эндотелием, а его значение ! модуляции бронхиального тонуса пока еще остается проблематичным. Однако, 1езависимо от фактора, днлятирующего бронх, уже сейчас ясно, что основным ■гостом взаимодействия между влыхаемым воздухом и стенкой бронха является шнтелин (Adnot et al, 1995). Воздух служит естественным раздражителем шителиоцитов, которые через окись азота снижают при вдохе тонус гладких мышечных ,леток. Об активности фермента в бронхах людей данных «достаточно (Belvisi et al, 1995, Gaston et al, 1994).

Наши исследования вносят новые факты в распределение и активность : (АДФН-днафоразы и ее онтогенетическое становление у человека.

Наличие энзима отмечено у плодов первой половины беременности в эпителиальной выстилке бронхов 1, 0,8 и 0.5 мм. Их размеры соответствуют 11,

13, 16 порядкам деления бронхиального дерева (Weibel, 196 ). Остальные гистологические образования оболочек бронха на НАДФН-диафоразу не

I .’агировали. Днформазан, образующийся при реакции, маркировал цитоплазму f .-спичных, вставочных и бокаловидных клеток, ядро не содержало осадка и досматривалось как оптически пустой пузырек. Инструментальная оценка фермента показала, что градиент его активности снижен в направлении от ■■рупных к более мелким бронхам. У плодов второй половины беременности а) тивность НАДФН-диафоразы в бронхах тех же калибров менялись на обратные (рис. 1). То есть наиболее высокая активность фермента оказалась в наименьших по диаметру бронхах, ответственных, как известно, за регуляцию объема притекающего воздуха, наполнение им респираторного отдела. Сопоставление активности НАДФН-диафоразы в бронхах плодов первой половины и второй половины беременности позволяет заключить, что ее созревание совершенствуется в направлении от крупных к мелким 'ронхам, то есть повторяет и соответствует направлению органогенеза трахео-бронхиального дерева легких (Волкова, Пекарский, 1976). Мы полагаем, что активность N0- . синтазы, как и некоторые другие вещества физиологических механизмов (например сурфактантный легочный комплекс), обеспечивают первый вдох неворожденного.

Исследование легких, шя;ых ог людей в:срого зрелого возраста, показало достоверное снижение активности НАДФП-диаф^ра^ы в бронхиальном эпителии. Образование дпфермазана характеризовалось структурными и цветовыми различиями. Местами эпителиальны”; пласт пргобргил вместо синего малиновый цвет, характерны;! г, л я формазана, что свидетельствовало о низкой активности диафоразы. Снижение содержат:;! фермента, вероятно, зависило от сильной запыленности легких. Пыловмс частицы в ле- их исследованных нами людей образовывали сплошные темные поля вдоль лимфатических сосудов бронхов и плевры, альвеолы содержали огромное число макрофагов, насыщенных пылевыми частицами. В opovxax отмечалась очаговая десквамация эпителия и

111-43

— тэ.сз

5,25

I половина беременности

17,31 ;

И половина беременности

□ бронхиола диаметром

1 :.ш (11 порядок деления)

□ бронхиола диаметром 0,8 мм (13 порядок деления)

£3 бронхиола диаметром 0,6 мм (16 порядок деления)

.1 Активность НАДФН-диафоразы эпителия бронхов плодог человека

■о перестройка из многорядного мерцательного в многослойный плоски», есомненно, что на запыленность органа, как и на активность ;.ЛДФН-тафоразы, оказывали влияние вредные привычки (курение) и загрязнение фужающей среды. При наличии у человека наследственного редрасположения, возникает возможность развития хронического бронхита и эонхиальной астмы. Некоторые ирритативные газы, такие как двуокись серы >0г) усиливают симптомы аст лы, однако, достаточных эпидемиологических эказательств о связи болезни с экологическим неблагополучием пока не элучено (Barnes, 1994). Возможно," что более низкое состояние активности АДФН-диафоразы у взрослых, чем у плодов является адаптацией к новым зловиям среды и поэтому может считаться явлением онтогенетическим.

В физиологии и патологии легких особое значение придают окиси азота, эразующейся в эндотелиальной выстилке кровеносных сосудоз легких, 'оказано, что от функции нитрооксндергических механизмов зависит адекватна! ггочная гемодинамика (Dinh-Xuan, 1994). Кроме того, новая оценка патогенеза :тмы, как воспаления слизистой оболочки, прямо затрагивает кровеносные эсуды и их регуляторный аппарат (Абросимов, Порядим, 1994).

Наши исследования подтвердили наличие НЛДФН-диафоразы в здогелии кровеносных сосудов бронхjильного дерева легких от артерий до апилляров. Наибольшей активностью, по сравнению с венами, обладал эдотелий артерий. Инструментальная оценка НАДФН-диафсразы в капиллярах е проводилась. Однако, можно считать активность фермента в микрососудах остаточно высокой, хотя бы уже потому, что их сеть в мелких бронхах ыявлялась с большей полнотой.

Следовательно, в органах дыхания N0, по нашим данным, продуцируется пителием, сосудистым эндотелием и некоторой долей аксонов блуждающего ерва.

Функции окиси азота в легких, как показывают литературные данные, ногообразны: .

- ингибируя адгезию и агрегацию тромбоцитов, оказывает ктитромбогенный эффект (Чирков ндр., 19S8, Samamaetal, 1995);

- при активации макрофагов и нейтрофилов N0 участвует в модуляции ммуиного ответа (Hibbs et al, 1988, Marietta et al, 1988);

- оказывает влияние на эрнтроцитопоэз и продолжительность жизни ритроцитсв; при анемии у онкологических больных достоверно снижает время ребываний эритроцитов г. периферической крови (Deliconstantinos et al, 1995);

- широко обсуждается вопрос об участим N0 в легочной гемоципкуляции. >бразовзнне окиси азота из L-apmmnia в эидотелноцнтах регулируется цетилхолинсм, брадпкппипем, субстанцией Р, термином и фактором ктлзации тромбсинтоз. В нормальном легочном русле N0 не только погсбствует вазодмлятапии, но так ;кс противостоит констрнхторному действию нпокспи и зндотелина (Adnot et al, 1991, Maclean ct al, 1994). Недавно было оказано, что гипоксия в человеческих эндотелиальных и эпителиальных клетках 1Г!сдляет экспрессию МО-сг,птазы через транскрипционные механизмы

(У.^ЛЛИсл et al, 1994). Аналогичное происходит при гллоксической лсгочнс

• іттснзїііі (Giaid,Saleh, 1995). Состояние легочных сосудов во вре.\ хро.чнчсекол гипоксии может нарушаться в результате циркулирующих в крої нс.'потрапс:::птеров. Высвобождающиеся ' in холинергических и сенсорнь Нц'/ьмх окончаний ацетилхоліні, субстанция Р или кальцитонин ген-рилизш і!С:і-тід сііил:иют способность сосудов к дилятации при хронической гипоксии по».шлют при порм^ксли (Matran, 1991); .

- модулирует вазоконстрикцшо артерий легких через стимуляцию тонкі г.;;с;'':г.> блуждающего нерва типа С (Delaunois et al, 1995);

- к дыхательных путях N0, продуцируемая бронхиальным эпителием г....іє:іг,.ци:ігіі,ньім:і нервами, индуцирует релаксацию гладких мышечных клето он не то.и-ко модулирует дилятацию, но и активно препятствует констрикторлс рс. гиг.’л сронхл (Adnot et al, 1995);

-влияет на формирование межклеточного вещества, стимулир' с. ч готическую активность фиброоластов, образование коллагена

счльо ■'.тированных гдихозоамнногликанов. Эгот процесс уравновешиваете с краткой связью, й> качестве которой выступает фактор роста фибробластс Гг'Ог), подавляющий экспрессию индуциоельной МО-синтазы (Colasanti et t 1955). -

Одна из задач нашего исследования состояла в том, чтобы установи: соотношение между активностью НАДФН-диафоразы и двигательной реакцис бронхов. Изучение фермента в эпителии бронхов здоровых и больных животнь показало неоднозначные результаты. У крыс с пневмоцистной пневмонис уровни активности фермента превышали таковые показатели у здоровь животных. Эта особенность в состоянии фермента, образующего N0, бы; отмечена рядом исследователей у больных и здоровых людей. Сраьнеш синтазной активности в образцах от пациентов с воспалительных: заболеваниями (бронхиальная астма, кистозный фиброз, облитерируюии: бронхиолит после трансплантации легкого) с тазовой легких здоровых люде показало ее высокую активность (Belvisi et а!, 1995). Эта закономерное! подтверждена в исследованиях других авторов при разнообразной патолоп: органов дыхания у человека (Bames, Lievv, 1995, Kharitonov et al, 1995, Robbins al, 1994). ..

Гі,лі ингаляции аиетилхолина активность НАДФН-диафоразы повышала! оолсе значительно у боЛЬНых животных. Однако, ионофор кальция не увеличив^ ее так, KL.; это происходило-у здоролых крыс. Реакции на ацетилхелин зависим or ,<озы. У здоровых крыс она достигала максимума при 0,6 г/л, а у больных пр

0,4 г/л, а при следующей дозе падала до нормы (рис. 2).

Более высокая актнипость 1ТАДФ1 i-диафоразы у больных жизотны вероятно, связана с деструктивными изменениями в бронхах ввиду того, чт энзим активируется высвобождающимися при распаде клеток гамм; интерфероном, интерлейкинами и олнгопептидами (Gutierrez et al, 1995, Xie et с Ю94).

~о— эдорозыэ АХ —о— здоровые АХ+Са

• о--больные АХ

• о - -больно з АХ+Са -А— здорсгь:э атр+АХ

• Л - - больные атр+АХ

0.2 0,4

АХ (г/л) '

0.6

физ.рлстзор 0,2 г/л АХ 0,4 г/л АХ 0,о г/л АХ ,

эдоропые АХ 15,16+0,19 17,42+0,23* 20,24+0,35* 20,92+0,34*

здоровые АХ+Са 15,16+0,19 18,32+0,29* 24,41+0,35* 25,21+0,25*

больные АХ 13,04+0,26 24,45+0,36* 24,5+0,31* 20,05+0,18*

больные АХ+Са 18,64+0,26 25,31+0,15* 25,03+0,23* 22,13+0,25*

здорсзыэ атр+АХ 15,38+0,2 15,02+0,13 15,18+041 15,23+0,36

больныэ атр+АХ 18,67+0,19 18,69+1,25 19,45+0,37 19,03+0,29

■ * Р'0,05

Рис. 2 Изменение активности НАДФН-диафорчзы . эпителия бронхов здоровых и больных крыс при ингаляции ацетилхолина.

Имеются указания на то, что ответы гладких мышечных клеток бронхов находятся в прямом соответствии с активностью NO-синтазы (Gaston et al, 1994, Zhao 1995). Действительно, результаты наших исследований соответствуют этому правилу, но с одной оговоркой: реакция бронхов на высокую активность фермента не однозначна по своей направленности. Повышение активности энзима у здоровых животных приводит к релаксации, которая усиливается при использовании Са^-ионофора (А23217). У больных крыс развивается глубокая констрикция, которая не зависит от присутствия А23217. Действие ацетилхолина на эпителий бронхов полностью подавляется атропином, что доказывает активацию NO-синтазы через мускариновые рецепторы (рис.З).'

Заметим, что реакция гладкой мышечной ткани бронхов на ацетилхолин носит сходный характер с ответом при действии холнномиметика на кровеносные сосуды. Как сосуды при целосглоу эндотелии, так н бронхи при неповрежденном эпителии реагируют на ацетилхолин релаксацией, а при ■ нарушении эндотелиальной и эпителиальной выстилки отвечают, соответственно, констрикцией (Furchgott, Vanhoutte, 1989).

При исследовании двигательной реакции бронхов было замечено, что у больных животных возрастает активность тучных клеток. Эю проявляется в увеличении их числа и активной дегрануляционной реакции, с которой выводится значительное количество бронхоконстриктора гистамина (Абросимов, Васил1ева, 19SS). Очевидно за счет него происходит повышение мышечного тонуса бронхов у больных животных. Неслучайно тканевые базофилы рассматриваются как основной источник в организме не только гепарина (Scully ct al, 1986), но и гистамина (Persinger, 1977), для которого возможен как захват извне, так и синтез на месте (Хрущев, 1969). Кроме гистамина копстрикторным эффектом на гладкие мышечные клетки обладает вазопрессин и нейропептид “Y”, выявленные в тучных клетках (Ломакин и др., 1992, Ciitz et al, 1978). Вследствии химического многообразия вырабатываемых веществ, тучные клетки воздействуют на стенку бронха целым комплексом цитокинов (Абросимов, Порядин, 1994, Moreno et al, 1986,Nijkatrlp, 1992).

Оставался неясным вопрос о том, вызывается ли дсгрануляция тучных клеток через N0, или же он оказывает на мастопит прямое действие.

Эксперименты, выполненные с медиастинальной плеврой в условиях in vitro, показали, что тканевые базофилы отвечают на холиполитикн автономно Vpuc. 4). Реакция in vivo на то же вещество в целом организме показала сходные результаты.

Однако, в оршнпзме она реализуется прежде всего через центральные нерзные механизмы. На примере медиастинальной плевры было показано, чтр тучные клетки имеют ацетилхолинестеразу п снабжены окончаниями холинергичсскнх аксонов, а. за счет тканевых .рецепторов получают чувствительную иннервацию. " , . ,

Учитывал, что и в других регионах тучные клетки имеют сходны: шшервацноншле -аппараты - (Мотавпин, 1992, Motavkin ct al, 1990), можно говорить о целостной тучнокл сточной системе с эндокринными функциями,

.10 1 %'' ' \ \ исиофор

‘4 *’ *• О * ‘больные ех

I

Ч * • -Л • -больные ах+Са*

* ‘ ‘. ионофор

*?3 1 _□—агорояув атропин*ах

( ' *, ' • * О * *£ояьмы$ агрслин+ах

-30 дх (г/я) ' 'я ‘

сЫ'.з.раствор 0,2 г/л АХ 0,4 г/л АХ 0,6 г/Л АХ

здоровью АХ 0,03+0,02 0,73+0,02е 0,81+0,01* 0,3+0,01*

злоровыз АХ+Сп 0,63+0,03 0,69+0,01* 0,93+0,01* 0,92+0,02'

больные АХ 0,52+0,02 Г 0,03+0,02* 0,44+0,02* 0,33+0,04*

больные АХ+Оп 0,52+0,03 0,01+6,"02* 0,62+0,02* 0,424 0,02*

здоропыэ ГЗТР+ АХ 0,63-^0.02 0,7+0.02 6,7’НО.ОЗ 0,734 0.02

больныз птр+ АХ 0,С-=Э *0.01 0,60+0.02 0,50+0.03 0,604 0.02

* Р<0,03

Риа.З Влияние сцотилмолина на двигательную активность бронховздоропых и больных крыс.

—о— ПЛ 5Д0Р

- -х - ах в/п

- <з - атропин+ах в/п

- -Д- • ах инг

атровент+-ах

~ ~ гч

площадь профильного поля, мкм.кв.

50 Т 60 -

70 і Є0 т 50 ; 40 30 г 20 10 I 0 4~

□ ннтахтные

□ дегранулированны

ҐІ .

КД=0,15

контооль

КД=0,5 КД=0,13 КД=0,49

ах о/л ато+ах е/п ах инг

20

I'5

I»

N

о

ч 5

0

14,96

-ь

,59

т*

10,8

£

12,9

-Ї-

14

Чг.

□ контроль

□ АХ в/п •

О

□ АХ инг.

О атрошш+АХ с/п С атровснт+АХ

* Р < 0,05

Рис. 4 Изменение величины профильного поля (а), коэффициента дегрануляцин (б) и плотности гепариновых гранул (и) тучных меток при введении ацетилхолипа в сочетании с атропином и абонентом. ,

абота которой координируется нервной системой. Относительно мастонитои егких и плевры таким координатором и интегратором становится блуждающий ерв, Дегенерация нервных окончаний после перерезки взгуса у крыс доказывает го регулирующее значение относительно тучных клеток органов дыхания.

Мышечную оболочку бронхов можно рассматривать как двухконтурный кран, Со стороны вдыхаемого воздуха оті ограничен эпителием, в котором аклгочепы механизмы релаксации, обеспечивающие легкость движения и декпяткость наполнения легких роз духом. Одним из таких механизмов, как .мы юказали, является с.‘*чсь а ?ота. С другой, противоположной, стороны ізсполагается 7учно”>.ч*очіш эндокринная система, имеющая богатый набор чгалогичсски активных веществ коксгрихтсрного действия. Функциональное :остоякие этих дяух разнонаправленных механизме"!, контролирующих тонус •ладких мыиг.’чпых клеток, регулируется блуждающим нервом. Он образует гармикалк не только на эгштслиоцитах и мастоцитах, г.о и на гладких мышечных летках. Рецепторы экстггсишюго типа, имеющие вид нервных клубочков, локализируют в центральные ядра блуждающего нерва а каждый данный момент з функциональном состоят;;; мышечной оболочки и при необходимости зырытшившо? тонус миоцитов через поетганглпопарные холннергнчеекие аксоны ;ріїс. 5). • .

Занимал центральной положение з регуляции органов дыхания, блуждающий нерп координирует редакенругощюга функцию эпителия и констриктсрную фу:п:цн. л ту ных кле.ок, обеспечивая проходимость бронхов. Эта закономерность с особой яркостью раскрывается при вагусной дсафферентацпи (Геб. 1). В условиях заключения иерза кх:;дый из механизмов изменяется иезз місимо от другого, а в бронхах развиваются глубокие морфологическиз изменения, • характерные для деафферентационного феномена(Грнгср1,евд, 1969). ’

. ВЫВОДЫ ■

1, 3 легких человека и животных НАДФН-диафораза установлена п эпителии бронхов, сосудистом эндотелии и аксонах блуисцающего нерва. Её активность выше:

- у плодов, чем у зрелых людей и половозрелых животных;

• у плодов первой половины, чем второй половины беременности;

* у крыс, лолышх паразитарной пневмонией, чем у крыс, практически здоровых;

- у крыс, чем у кполшеоз; ,

- в бронхиальном эпителии, чем сосудистом эндотелни;

- в эндотелни артерий, чем пен.

2. При ингаляции и инъекции ацетилхолина, совместно с Са^-конофором А23187 и без него, активность НАДФН-диацюразы статистически достоверно повышается:

- более заметно у крыс, чем у кроликов;

- больше у больных, чем у здорозых животных;

I'uaS Ингггіглиі-л 6яутг.?.иумни in-рзом нггтрии.-рппсг.гого і; 'іучиооілутого urAPHizuoz рсгуа-Ащт {іг;і-:і.;::ік>сп!

I - проколі on^rnfi мсзг, З-'.мд^са ядро блувдшощсго і.гр»-,?.-,

З - чувзшпшлш клетка узловатого гмігаш; Л - хяіСТйшшиіі узсл орзи:;г-; 5 - оішіслиіі; б - гладкий їшощіт; 7 - кл«п.-а; С * їіпкііШсіі р.’цстоп;

9 - зкгісшившлґі рсциігор; 10 - прритишш/: рсц-лкор;

II - ирсга;іглиоиараос . пояшісргичискоа сскрсториоо ьолзіаю;

12 - ноотганпшопарпос полегаю, шшерипрующс.' миоцит. •

- заметнее у здоровых животных в присутствии А23187; , ■

- повышение активности НАДФН-дцг.форазы блокируется атропином,

3. Повышение активности НАДФН-диафоразы сочетается с двигательнс

реакцией бронхов: , '

- у здоровых животных снижается тонус гладких мышечных клеток, настугш

релаксация; '

- у больных животных повышается тонус гладких мышечных клеток, происход! констрикция;

- двигательная реакция бронхов блокируется атропином.

4. В органах дыхания - в бронхах, респираторном отделе, висцеральной медиастинальной плевре установлены тучные кяатки:

- их больше в медиастинальной, чем в висцеральной плевре, меньше в бронхах

легочной ткани; '

- их больше у больных крыс, чем у здоровых;

- их больше в деафферентированном легком, чем в интактном;

- они чаще дегранулируют у больных, чем у здоровых животных,

5. При ингаляции и инъекции ацетилхолпна и пилокарпина наступает msccob;

дегрануляция тучных клеток, как в опытах in vivo, так и in vitro, котор, блокируется атропином. .

6. Тучные клетки иннервируются блуждающим нервом:

- они имеют чувствительные нервные рецепторы, общие с тканевыми;

- получают холинергическую эффскторную иннервацию;

- в цитоплазме содержат ацетилхолиэстеразу; .

- их нервные проводники и окончания дегенерируют при перерезка блуждающе

нерва. .

7. Мелкие бронхи и бронхиолы (1-0,5 мм) человека и животных iir.isi

сенсорную и эффскторную иннервацию: ,

- в подслнзистом слое нервное сплетение содержит ирритативные рецептор холинсргическис, пептидэргические и адренергические аксоны;

- пдееницня и мышечная оболочка иннервированы экстешивными рецептора; клубочковой формы, холннергическими н ннтринергическими аксонами.

8. Перерезка блуждающего нерва вызывает в легких характерные д деафферентированного органа дистрофические изменения:

- очаговую десквамацшо и метаплазию многорядного мерцательного . шогослонный плоский эпителий;

- гиперплазию и гиперсекрецию бокаловидных ioictok; .

- пролиферацию тучных клеток;

- снижение активности НАДФН-диафоразы;

- атонию и релаксацию бронхов. .

9. Функция мышечной оболочки регулируется: ' .. ■ ■

- окисью азота эпителиальных клеток, релакенрующей бронхи в физиологичсск

условиях; • ' '

- гистамином тучных клеток, повышающим тонус' гладких миоцитов

вызывающим бронхоконстрккцшо; .

. 21 эта местные механизмы интегрируются блуждающим нервом в единую систему ггуляцин проходимости бронхов, '

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Зуга М.В., Калиниченко С.Г., Невзорова В.А., Архипенко И.В. НАДО диафораза эпителия бронхор плодов человека // Пульмонология.- 1996.- N1,-68-71.

2. Зуга М.В., Невзорова В.А., Баранов В.Ф., Гельцер Б.И. Активно НАДФП-диафоразы эпителия бронхов и их подвижность при ингаля! ацегилхоллна// Пульмонология.- 1996.* N2.

3. Зуга М.В., Невзорова В.А., Гарцман Т.Ю., Гельцер Б.И. Активно

НЛДФП-дшк , ы и состояние тучных клеток бронхов при вагус1 деафферешации легкого крысы // Пульмонология.- 1996,- N3, .

4. Зуга М.В., Невзорова В.А., Гельцер Б.И. НАДФН-дипфораза в элите; бронхов //Морфология.- 1996.- Т-.109.- N2.* С. 54.

5. Зуга М.В., Архипенко И.В., Гарцман Т.Ю., Невзорова В,А. Регуля! функции тучных клеток органов дыхания препаратами холинергическ< действия // В сб. статей? Клиническая морфология в Приморье,- Владнвостс

1995,-С. 69-72. . '

6. Зуга М.В., Гарцман Т.Ю., Гельцер Б.И. Влияние холинергнчеси препаратов на функцию тучных клеток дыхательных путей // 6 Националы! конгресс по болезням органон дыхания,- Новосибирск,- 1996.- С. 361.

7. Зуга М.В., Калиниченко С.Г. Экспериментальные исследования НАДФ диафоразы дыхательных путей // Тезисы докладов 37-й научной конференщ Проблемы экспериментальной, клинической и профилактической медицины Дальнем Востоке.- 1996.- С. 70.

8. Невзорова В.А., Зуга М.В., Гельцер Б.И. Роль окиси ,азога в регуляц легочных функций // Пульмонология.- 1996.-№4.

9. Могавкпн II.А., Зуга М.В., Баранов В.Ф., Елисеева Е.В., Невзорова В. Моноамипсргическал иннервация медиастинальной плевры плодов человека Морфология,- 1997.- N1.

10. Архипенко И.В., Елисеева ЕВ., Зуга М.В., Невзоровй В.А. Регуляц функции тканевых’ базофилов фармакологическими препаратами // Морфологи.

1996.-Т.109.-N2.-0. 31.

11'. Архипенко И.В., Зуга М.В., Гарцман Т.Ю., Невзорова В.А. Обратимые необратимые реакции тучных меток .1 их коррекция липосомальнь фенотеролом // В сб. статей: Клиническая морфология в Примеры Владивосток.- 1995.- С. 73-77.

12. Невзорова В.А., Зуга М.В,, Гельцер Б,И. Холипореактивность тучш клеток дыхательных путей при бронхиальной астме // 6 Национальный конгре по болезням органов дыхания.- Новосибирск.- 1996.- С. 39.

13. Невзорова В.А., Гельцер Б.И., Зуга М.В., Егупов В.А., Кулакова H.U. Активность биогенных моноаминов в бронхиальном лаваже у больны\ неспецифическими заболеваниями легких // 6 Национальный конгресс и<> болезням органов дыхания.* Новосибирск,- 1996,-С. 107.

14. Гарцмаа Т.Ю., Зуга М.В., Архипенко И.В., Елисеева Е.Ь.

Холинореактивность тканевых базофилов серозных оболочек знугренних органов // Тезисы докладов 37*й научной конференции: Проблемы

экспериментальной, клинической и профилактической медицины на Дальнем Востоке.* 1996.» С.

15. Arckhlpenko I.» Geltser В., Motavcln P., Lukyanov P., Zuga М., Gartstmn 1'., Nevzorova V. The effects of liposomal form of fenoterol in rats with bronchoconsirictlon (absttact) II XV-th World congress of asthmology "From gene to quality of life" April 24-27, 1996. Montpellier, France.