Автореферат и диссертация по медицине (14.00.05) на тему:Неспецифическая иммунокоррекция в комплексной терапии хронических гепатитов

'■'Я .( ; ,1-

; -.О «J

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ

КИЕВСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ им. зчза .A.A. БОГОМОЛЬЦА

На лрг.зах рукописи .

ГЮЛЛИНГ МИХАИЛ ЭДУАРДОВИЧ

^СПЕЦИФИЧЕСКАЯ. ИММУНОКОРРЕКЦИЯ В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ ХРОНИЧЕСКИХ ГЕПАТИТОВ.

14 00 05 - внутренние болезни

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соисканиз ученой степени; кандидата медицинских наук

Киев-1992

Работа эыполкена в Киевеко.. ордена Трудового Ноского Знамени медицинском институте имени академика А.А.Богомол

НАУЧНЫЙ ру^вдить: доктор мбдицинских наук, м рофессор ПЕРЕДЕРИ»! В.Г.

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОШЮНШЫ:

доктор медкцикспшх н&уя, профессор даГТЯРЕЁА И.И. доктор иедкциксгих нау* БОРДОНОС'В.Г.

ас дуда в организация : Днепропетровский наукко-иссяадоватея институт гастроэнтеролог*

Зашита состоится ",,■,",, 1992г.

ка заседании епепйвлкзированного Совета Д 068.I3.C2 при Киевском ордена Трудового Красного Знамени медщимсйом институте имени акадей^ка А.А.ГсичшолЬца / £££004, Киев, бульвар Ше»«$еиш> ',.¥?/.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Киевскоп медицинского кистетута / 252057, Киев» ул.Зоологическая,I ,

Автореферат разослан " 1992г.

Учеинй секретарь спе<'ивли»ироааннр"0 совета ц.м.м., профессор

. П.Н.БОДНАР

j; - "Wi.i'

:SJ 1

¡ОЕШЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Особая актуальность проблем хронических заболеваний печени обусловлена тяжелым прЪгргсеирукцкн течением активных гепатитов со значительном сниг.снием трудоспособности н инвалидиэацкей больных, слояностьп и недостаточной е^октгп ностьа терапии / А.Ф.Блюгер и соавт., 1975, KQ7, А.С.Догиноз и соавт., ISS3. ISSC /.

Многочисленными клинико-иммунологическими иселедованитаи убедительно показано, что развитие хронических гепатитов, особенно инфекционной природа, в большинстве случаев обусловлено снижение« устойчивости организка к гепатотрогашм вирусам к формированием реакций гиперчувствительности замедленного или немедленного типов по отношению п антигенам вируса и клеток печени / А.Ф.Блсгер, Х.И, Веекяер, I960 /.

Поэтому при лечении болышх хроническими гепатитами больсоо внимание уделяется современники средствам и способа« шлун терапии. С цеяьп носьэеиил устойчивости к вирусам применяет тпср|сро!ы и индукторы образования ендогеиного интерферона / А.ЙЛролсп к соавг. ¡987, Fettovich'F. et 01.1902,1909» Dabrowski И.P. et S1.I9B0 / разнообраагмо естсбтйагныэ н синтетические гашунстгодулягори. Лля подавления куиушп/х реакций иоврзпдения геттецитов ппропо попользуйся глккокор'тйкостеро-.ида к иепото^з'цнтсстаиш! / X.X.f.'ancypoa I) соавт. IPQ7, С.Л.Прда;оса, I97fi, Т204, Seullord о.н.е* el.. 1981/, Однако оффеитганос^ь многих из прнуеияегядх гаякуномодуллторсв ограничена. стадией ифзкциенного процесса у пациентов с вйруааэлп по-рзясмиягш печени, плохой персносшостьп ряда препзратеэ, развитием

Еаанообраоных осложнений, лооникбщих при дпитольнш курс.*;:; лечения / А.й.БлЮГер, 19&7, В^Дт П.е* а;,1983- Мег1вгп Т.С. 1982

Особенно слояной диллотся иммунотерапия больных у т>щах разьитис хронического гепатита патогенетически сьизано с ш^цунной недостаточностью, сочетающейся с аутоиммунным повревдонизм гена-тоцитов. Б таких случг тх при назначении иммуностимуляторов монет активироваться и икмушиЯ цитолиз печеночных клеток, И напротив, наоначенио туносупрессоров для подавления реакция аутсагрессш; &ожот приводить к раэиитшп иммунодефицита с последущоП икчиш-ЦК8Й ьирусноя инфекции/ ЗЬвсЬоив'.:1 J 81, 1990 /, п связи с от1м, р последнио года активно разрабатывается ди^сренци-рованная иммунотерапия больных хроническими гепатитами.

■ Целью нашего исслед озашш было дальнейшее совершонстиашшш дкйфереицировашюЯ иммунотерапии больных зсроничоскиаи гепатоыи Ой осчосв в::спершентального и клшншо-^шгунологнчеакого иссло-доей.чпя сйситег'н.ости пршеиешш пиакомояекудярлого тиаишоского прспирш вчиоасна и микроволновой ю^уьоыодуляцнц.

Задай ксследошшш.

1. Изу-ань ыпапт) ымлсасла и влока'рошгшшиха еол»^ дсщшит-. |ю»ого Д!.'йпвдсни /'ЛУН / ш ^шщиогшшюо \coziomno ¡1счв1ш При оксисрммштлыюи гепатита;

2. Ксмсдоьать влияние ьилозшш и &лсктракагштшх микроволн дсцшотросого диапаеош на обрааошшиэ и ^ интерферона леПкоц!пами крови при хронической гепатите.

3. Изучить эффективность применения ьилозена б комплексной терапии ярошшсскях гепатитов.

Научная Новизна. Впервые установлено, «то иммуномоцулятор вилоэен ускоряет восстановление функциональной активности печени при экспериментальном гепатите, индотированном четыреххлористым углеродом. Показано, что препарат повышает устойчивость животных к Х-гитотоксину золотистого стафилококка и«С^ - эндотоксин^ Salmonella typhi , стимулирует образование интерферона. Включение вило: )на в комплексную терапию больные хроническим гепатитом Способствует нормализации иммунной системы и повышает эффективность лечения.

. Впервые установлена способность а .эктромагнитных микроволн дециметрового диапазона эффективно подавлять процессы перекисного окисления липидов при экспериментальном то.ксичёском гепатите. Показано, что ДИВ стимулируют образование сА, - и ^ - интерферона лейкоцитами крови больных хроническими гепатитами, особенно при значительном снижении активности интерферонообраэования.

Практическая ценность.' Проведенные исследования позволяют расширить арсенал иммуномодуляторов, применяемых при лечении хрони-. честог -гепатитов за.счет использования низкомолекулярного тймичес-■кого препарата ..вплозена и микроволновой иммуномод<'лят'ии.

Экспериментально обосновано примейе'ние электромагнитные поли дециметрового диапазона с гелью Стимуляиии образования интерферона и определены критерии ¡эффективности использования ДОВ при лечении больных хроническим, гепатитом.

Обоснована целесообразность клинической апробации эффективности применения электромагнитных микроволн для подавления процессов перекисного окисления липидов при гепатитах.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЗНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

- экспериментальное и клинико-лабораторное обоснование включения иммуномодулятора вилозена в комплексную терапии больных хроническим гепатитом с цельг восстановления функциональной актив ности печени, стимуляции интерферонообраэования и подавления ал-легических реакций.

- стимуляция электромагнитными волнами дециметрового диапазона функциональной активности гепатоцитов и образования -ин терферо>.а лейкоцитами крови больных хроническими гепатитами.

- влияние электромагнитных волн дециметрового диапазона на перекисное окисление липидов при экспериментальном гепатите.

Апробация работы» • Результаты исследования и основные положения работы доложей на ежегодной конференции молодых ученых Киевского мединститута в 1989г. ХУШ научной сессии Центрального НИИ гастроэнтерологии с участием зарубежных ученых / Москва 1991г./, конференции, посвященной 160-летию Киевского медицинского института/ Киев,1991г./

Публикации

По теме диссертации опубликовано б научных работ и получено положительное решение о выдаче авторского свидетельства на изобретение $ 4711576 от 27.05.91г., а также установлен приоритет по заявкам * 4843663,от 29.0б.90г. и » 4843662 от 29.06.90г.

Обгеи и структура диссертации Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания ма-

териалов и методов исследования, 3-х глав с описанием собственных исследований, заключения, пыводов и указателя литературы, включающего 94 отечественных и 166 иностранных источника. Работа изложена на 128 страницах машинописного текста, содержит 24 табл и 13 рисунков.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования. ,

Для решения поставленных задач обследовано 68 больных хроническими гепатитами в стадии обострения, из них 61,8? составили больные хроническим лерсистир'-щим гепатитом / 2&,Ъ% - НВ 8 А^ положительным, 35,3^ - НВ - отрицательным./, 38,211 - хроническим активным гепатитом/ 17,6^ - НВ -' положительным, 20,6% -НВ аЛд - отрицательным /.

Мужчины составляли 64,женшины - 35,Детальная клиническая характеристика больных с анализом картины течения заболевания и методами их обследований представлена в соответствующем разделе настоящей работы. ' . ,

. Диагноз устанавливали на-, оснований клинико-биохимического, радиологического и сонографического исследований с использованием ■ международной классификации болезней печени /Женева, 1978/.

У. всех больных исследовали состояние иммунной системы по ; ,'твотам I и П уровней / Меморандум,ВОЗ, 1981г./.' Циркулирующие иммунные комплексы' / ЦИК / определяли методом осаждения полизти-ленгликолем / йевкоуа , 1973 /; сенсибилизацию к специфическом" липопротегог' печени / СЛП / выявляли в реакции ингибиции прилипания макрофагов с применением имм;"Н0ДияГ'Н0СТиг"ма • / Рижский

медицинский инстит"? /.

- б -

Эффективность образования лейкоцитами периферической крови «Í-

KirohT Н. et el, 1982 .

При проведении экспериментальных исследований использовали модель хронического токсического гепатита, воспроизводимого пяти: кратным введением бельм беспородным крысам весом 1В0-230г 50? раствора четыреххлористого углерода из расчета I мл на ЮОг веса животного / А.Г.Одннеи и соавт.,1988 /. Морфологические изменения определяли при окраске препаратов печени гематоксилином и эозином. Состояние гепатопитов оиенивяли по данным гистохимического исследования с'Ш'инатцегицрогеназы /СДГ / по метода Берстона / 1965 / и.аценозинтрифосфотазы / АТФ / по Ванштейн" и Кейзелю / 1975 /. . Электронномикроскопи«естае исследования проводили Е соответствии' с рекомендациями Б.Уикли / 1975 /, В.Я.Кар-"Ш' / 1984 /.

Выраженность свободнорацитальнмт процессов определяли методов хемилгаинеспентного анализа с опениой кинетических параметров свечения / Серкиэ Л.И. и соавт.,1989 /.

Влияние имьтюмодулятороп на образование интерферона исследовали in vivo и in vitro ' . Способность вилозена инцугировать интерферонообразоаание определяли при однократном введении прет' парата вш'трибрюшинно самкам мышей линии НК 6-7 недельного возраста в дозах 0,05,05, 5,0 мг/кг. Затем через 3,6,24,72 и 128 часов в пуле сывороток мышей / по 5 животных в группе / определяли наличие интерферона. Для сравнения мышам других групп вводили по 0,05,05,5,0 мг/кг левамизола и в аналогичные сроки в сыворотке крови животных определяли содержание интерферона»

интерферонов определяли в соответствии с рекомендациями

Влияние ДМВ па образование интерферона мссле^ вали при юнратном воздействии электромагнитными волнами / 460 Ш*. мВт/см , в течение б минут / на цельнуг кровь и культуру ¡коцитов небных миндалин человека. В качестве индукторов интер-юнообраоования при етом использовали вирус болезни Ньюкасла !ЕН / и фитогеыагглютинин / ФГА /.

Протек'тиьноч действие иммуномодуляторов по отношению к 'отоксииам определяли при применении препаратов в дозах 0,05, | и 5,0 мг/кг. Через 24 часа после введения иммуномодуляторов рм инъекцировали летальные дозы эндотоксина . aureus Salmonella typhi . Состояние животных оценивали в течение'

¡уток. Контрольным животнь-м вместо иммуномодуляторов сводили ,'5М раствор f'aGl .

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЩОВАНИЯ Клинико-иммунологическая характеристика больных хроническим йерсистирухщим гепатитом / ХПГ / Среди больных ХПГ преобладали лица мужского пола п возрасте 30 до 50 лёт. Наиболее характерными были жалобы болымх на ib или чувство тяжести в правом подреберье / 79 % /, диспепсия 135? проявление астено-вегетативного синдрома / 54% /. При П1ИЧ0СВОМ обследовании наиболее тастьгми симптомами Сули гатто-телия / 79% /, болезненность в правом подреберье / /.

При биохимическом исследовании огаоротег. кропи у.большие 1 отмечено умерешгое увеличение активности ЛлАТ, АсЛТ, незнп-гельное повьшение содержания билирубина прсгалущестсашо за ¡т связанной фракции пигмента / табл. $6 /

При исследовании клеточного иммунитета у больных НВдА^ -поа^нтельным ХПГ и явлено умеренное снижение количества Е-РОК ¿32 +38.1С5/л / 38 + £*?./ и активных клеток Еа-РОК / 16,0+2$ /ь уменьшение иммунорегуляторного индекса / 1/1^0,10 / / табл.№ I /, а также снижение способности лейкоцитов периферической крови продуцировать и | -интерфероны / рис Л* 3 /. При

исследовании гуморального иммунитета у больных 1Ш % -положительным хроническим гепатитом отмечено небольшое'увеличение уровней 18 й и циркулирующих иммунных комплексов / табл. № 2 /.

У Сольных НВвАб - отрицательно ХПГ при иммунологическом исследовании выявлено лишь незначительное уменьшение количества Е-РОК т Л130 + 43 / 45+ 3? /. Остальные показатели достоверно не отличались от наблюдаемых у контрольной группы.

Клиниио-иммунологическая характеристика больных хроническим активным гепатитом / ХАТ /

Среди больнь'х ХАГ преобладали лица мужского пола в возрасте до 60 лет. Клинические проявления заболевания у них значительно вариировали. При умеренно активном течении ХАГ больные ^предъявляли жалобы в основном на чувство тяжести и боли в правом подреберье, диспептические явления, астенизацию. При. тяжелых формах заболевания отмечались гепатолиенальный и геморрагический синдромы, лихорадка, желтуха, зуд кожи.

У больных ХАГ, как правило, наблюдалась гипер-АлАТ, АсАТ -емия, гипербилнрубйнемия эа счет содержания связанной фракции пигмента, увеличение'относительного уровня ^ - глобулинов в сыворотке крови, в 2 и более раз. Почти у половины больных от-

Показатели клеточного•иммунитета у больных хроническими гепатитами

Таблипа I

Группа обследован-п/п I ных больных

к-во

больных

Т - лимфопиты

абс.

%

| акт. / % /

иммунорегу- ; ляторннй |

индекс "

РБТЛ с ФГА

сенсибилизация

лимйюнитов к СЯП

I. ХПГ НВ3А3 + 18 932 ± 38 г 38±2* 18 ± 2* 1,4 ± 0,18х 60 + 7 -

2. ХПГ НВ5/Ц- 24 . .ИЗО ± 43 -- 45^3 25. ± 3 1,72 ± 0,21 63 + 4 -

3. ХАГ ' НВ|А^ + 7 . 724 ± 39, г 34±2*'" • 17 ± 3 к 3,15 ± 0,41 х 52 * I X 7/7

• ХАТ с переходом в ЦП 5 615 ± 28 т. 31-3* 14 ± 3 4 2,06 ± 0,25 X 50 + 4 х 3/5

4. ХАТ Н38А5- б. 820 - 42 х 30+2 Х 15 + 2 х 4,07 + 0,35 60 + 4 5/6

ХАГ НВ3 с пере- 634 - 31 т

- ходом в ЦП 8- 33+2Х • 13 * I г 3,06 ± 0,12К 48 + 3 т 4/8

5. Контрольная группа .30 . 1169 ± 4.1 45+3 27 ±'4 1,86 ± 0,31 62 + 5 -

* - Различия достоверны по сравнению с .контролем / Р < 0,05 /

- в числителе - количество положитеяьньгг сл^яев в знаменателе - количество обследовании*' больных

Таблица £

Содэрханиз иммуноглобулинов осмоенкх классов и циркулирующих квсцунйда комплексов в скаоратае крови больных хроническими гепатитами

п/п *« | Групт обследованных больных . - ч ( Количество ( болькых » т ) 1(5 А 1 » ^ 1в И 1 ! ! ! 1е I * ! 1Щ

I. ЯГНВД "+" 18 1,52+ 0,25 1.24+ о.да 16,28+ 1,32 х 0,094+ 0,21

2. ХПГ КВ А 24 1,43+0,12 цаь± о.п 12,24+ 0,31 0,071+0,017

ШЕЕ А "+" 7 1,65+ 0,33 1.£± 0,27 х 18,2+ 0,65 х 0,35о+ 0,СГ72х

ХАГ с переходом в ЦП 5 3,15* 0.52 х 2,®+ 0,32 X 24.4+0,81 х 0,372+ 0,ОБЭх

4. ХАГ Нй А ' б . 1,74+ О.З1/ 1,8+ 0^31 х 20,(К 0,15 х 0,362+ 0,051х

ХАГ НВ А с переходом в ЦП 8 3,75+ 0,48 х 2.Г7+ 0,41 х . &± 0,65 х о,еао+ 0,070«

Контрольная группа . 30 1.48+ 0,26 1.21+ 0,15 13,65+ 0,24 0,062+ 0,015

х - различия достоверны по сравнению с контролем / р<0,05 /.

мечена перестройка ткани печени по типу цирроза, лги этой у них чаще выявлялись сп леномегелия, варикозное расширение вен пищевода, малые печеночные знаки, зуд кожи.

При исследовании иммунного статуса у больных ХАГ, особенно НВйАв - положительных, установлено уменьшение количества и функциональной активности Т-лимфоцитов, активных Та, высокая частота сенсибилизации лимфоцитов к СКП / табл. Р I /, увеличение концентрации в сыворотке крови иммуноглобулинов всех трех классов и ЦИК, особенно выраженное у больных ХАГ с переходом в цирроз печени / табл.А 2 /. Иммунорегуляторный индекс у большинства больных ХАГ значительно превышал показатели у лиц контрольной группы. Особенно высоким индекс был у больных НВвАв - отрицательным ХАГ / 4,07+ 0,35 /.

У всех больных НЗаАв - Положительным ХАГ и у 50% больных НВаАк -отрицательным ХАГ с переходом в цирроз печени достоверно снижалась способность лейкоцитов периферической крови к синтезу сЛ- и ^ - интерферойов / рис . $3 /.

Таким образом, результаты проведенных клинико-ишунологичес-ких исследований согласуются с данными литературы о том, что у больных ХАГ сенсибилизация к антигенам гепатоцитов / СЭШ.и др./ закономерно сочетается с Т-иммунодефиЦитом, одним из основных проявлений которого является .значительное снижение способности лейкоцитов крови больных продуцировать и Ц - интерфероны. В связи с этим, для гипоеейсибилизации при ХАГ наиболее обосновано применение таких иммуномодуляторов, которые супрессируя реакции гиперчувствительности, стимулируют образование интерфе-ронов. Так как влияние отобранных нами для гипосенсибиЙизаций

>

иммуномолулятсров на образ, пание интерферонов не было изучено,-" мы исследовали действие вилоэена и электромагнитных волн дециметрового диапазона на образование Д. и | - интерферонов 1п уПзо.

Результаты экспериментального изучения способности вилозена индуцировать интерфериюгенез у мышей представлены в таблице !»3 . Иэ приведенных данных видно, что при определенных условиях препарат стимулирует образование интерферона даже более эффективно, чем иууномодулятор левамизол.

Исследование влияния ДМ В на продукцию интерферонов/рис № 3/ показало, что микроволны эффективно стимулируют образование А - интерферона лекцитами периферической крови людей контрольной грутЙ1ы/геометрическиЯ титр Интерферона без воздействия ДМВ - 57,0} после воздействия - 161,02; р <0,001 / и небных миндалин / 29,16 и 161,23; р< 0,001 /, но незначительно влияют на продукцию ¿'-интерферона геометрические титры / 16,0- 26,*/6; р<0,05 и 16,76 - 24,25; р>0,05, соответственно/.

Влияние ЩВ на продукцию интерферонов лейкоцитами крови больных хроническими гепатитами существенно зависело а* клинических особенностей течения заболевания. Микроволны эффективно стимулировали образование интерферона лейкоцитами периферической крови больных НВдА^ - отрицательными гепатитами / средний геометрический титр без воздействия ДМВ - 43,65, после - 152,22; р -с. 0,01 /■ и незначительно влияли па % - интерфероногенёз / 10,66 и 16,0, соответственно; р>0,05 /. Достоверных различий в действии ДМВ на Продукцию интерфейсов лейкоцитами периферической крови больных НВрА? - негативными ХИТ и ХАТ выявлено не было,

Таблица №

СОДЕРЖАНИЕ ИНТЕРФЕРОНА В ОРГАНИЗМЕ {ШЕЕЙ, ПОЛУЧАВШИХ ИЗУЧАЕШЕ ПИМРАТЫ

Препарат Доза в Время £ в час. ) после введения препарата

мг/кг ---------------------. —---*----------

3 б 24 72, 168

Титры интерферона

0,05 10 20. . 20 10 10

Левамизол 0,5 10 . 80 40 20 10

5,0 10 Ш 80 20 10

У»

0,05 10 . 40 40 . • 20 10

Вялоэеи 0>5 Ю. 320 . 80 40 10

5,0 10 320 160 40 10

за исключением 2 наблюдений отсутствия стимуляции интерфероно-сбразования и даже его подавления при воздействии минроволнами на лейкоциты крови больных с декоыпенсированным циррозом печени.

У больных - положительна, персистирупцим гепатитом ДМВ '

также достоверно стимулировали продукциг - интерферона / средний геометрический титр без воздействия - после воздействия ; - 41,5; р<0,01 / , существенно не влияя на продукцию ^ - интер-'. ферона. Титр интерферона после микроволновой стимуляции лейкоцитов больчкх, однако, не достигал уровней этого цитокина, продуцируемого без - воздействия лейкоцитами периферической крови здоровых лкдей.

Вкгьхешсе ¡^фсятиЕНСр елггык прогивоаяхе- гического икмуно-модулятора вилсзена-< на интерферсногенез подтвердило предположение о целесообразности его применения при гепатитах. Однако, в связи с отсутствием даннкх о действии вилозена на функциональное состояние печени в условиях патологии, перед использование).: препарата в клинике, мы ка экспериментальной модели хронического-токсического гепатита исследовали рлияние пилозена не выраженность цитолитического синдрома и поглоти:ельно-вкделительнуг функцкг печени. Результаты исследований, Представленное в таблице* 4,рис.№ I показали,-что введение вилозенэ опь-ттъ: животным'способствует нормализации поглотительно-выделительной,функции печени, оцениваемой с помощью бромсульфяяаиовоЯ пробы, значительно уменьшает / в 1,5 раз по данным определения АлАТ ив 1,5 раза по АсАТ / выраженность цитолитического синдрома. То есть подобно другим ниэкомолекулярным Препаратам, получаемым из Т-лимфоцитов / Е'.В.

„ Олейник, 1590 / вилозен Положительно влияет на функциональное состояние ¡¡ечени..

Таблица № 4

Влияние вилозена на поглотительнуо функции

печени крыс щ>и хроническом токсическом СС£4 -индуцированном гепатите

•а* ! Схема

пп | эксперимента

•Количество (Задержка бромсуль- I ¡животных » "Р°ви ,

1.

2. 3.

С0?4

СО^ + вилоэен Контроль

/интактные крысы/

11

12

12

19,(Н1,40 13,86*0,68

12,46+0,82

Р <0,01 Р1 >0,06

Р - достоверность различий данных,полученных при обследовании крыс I и 3 групп

достоверность различий данных,полученных при ебследовании

крыс 2 и 3 групп.

fâ

ы

о ci rq g, ra tí"

й-' I0t "i1

aíí

a. o P „

Ьз O

p le

p

з2 fe ^ g

со

i ° SÍ O

ю г*

II

■S O

no

o

Q»

to-

o o

«■r

o a

OJ

* o

> o

- -4«

а

&Д

o o

o o

Так как снижение эффективности печеночного барьера при,хронических заболеваниях печени приводит к проникновению эндотоксинов кишечной микрофлоры в общую циркуляцию и возникновение системных расстройств / Nolan 3., Ali Ii ., 1974 / мы также исследовали влияние вилозена на выживаемость' животных после введения летальной дозы эндотоксина Salmonelle typhi и питотоксина Staph . eun-ue

Опыты показали, что антитоксическое действие вилозена превосходит таковое иммуномодулятора левамизола / рис. 2 /.

Таким образом было установлено выраженное стимулирующее влияние вилозена на образование интерферона, выявлено его гепато-лротекторное и антитоксическое действие. Г^ттоенные данные явились экспериментальным обоснованием клинической апробации эффек-тирности применения вилозена в комплексной терапии больных хроническим -^рпатитом.

Положительные результаты, полученные пви исследовании влияния пе"иметвовьи- электромагнитных волн на образование интерферона лейкоцитами крови больные гепатитами, позволили также предположить розможность использования ДДВ при лечении этих больные. Однако, в связи с тгм, что микроволны стимулируют клеточный метаболизм, нетал вопрос о том, на природат ли использование ДМВ к дополни- : тельной активации спободнорацикальных процессов, ухудга*ш$х течения гепатита. Экспериментальное исследование'вопроса показало,

что воздействие микроволн на организм крыс с хроническим токсичес-

*

ким гепатитом сопровождается значительным снижением активности срободноратикальных процессов и повышением эффективности функционирования антискситчнтной системы сыноротки ярори / таблипа '£5 /. 3 период завершения приведенных экспериментов,. И.ЛЛ'&яритской и соавторами, 1990 /, были опубликованы результаты клинического K3v-

Влияние ителчетх првптшоа на втивлепоать тшеи на 7аечь

НГ/кг 1 1 < Г.) РРН въедемии яетльмх доъ

Х-воксш ЯорЬуЬсост аигш иг/кг) экдототш ЬаЬпопеИа Ьц>}п

О*

оог

30 «Г 91

—•—контроль

30 ^ ^о М 80 50 £

----левлмнзол

ВЛИЯНИЕ ДМВ НА ОБРАЗОВАНИЕ в^иУ- ИНТЕРФЕРОНОВ ЛЕЙКОЦИТАМИ ПЕРИЗЕРИЧЕСКОЗ КРОВИ

КОНТРОЛЬНАЯ об- ИФН ■

РСО.О!

ГРУППА

У- и®

Р< 0,05

100 150 10 20 30

НВ$А<| - НЕГАТИЗНЬЙ ХРОНИЖСи ГЕПАТИТ

Г- ЛЙ! 0,05

П3$\д - ЛОЗ'ТГИВНи.! хг '

(¿- 'КГ

"У- ¡Ш1 Р > 0,05"

я

50 100 150

БЕЗ ЗСП/^ЛПТВНЛ

да

10 2 С СРЕДШ , ГЕОЖШГШШ Т!ТГР 1Ш1

о

Таблица № 5

Влияние ЛИВ на хемилшинисценцию сыворотки крови крыс с хроническим токсическим гепатитом

Группы животных

см^

к

мм

и

мм

г

сек.

Хронический ¿Ж~гепатит 9,3+ 2,4

Р <0,01

Хронический ¡^А-гепатит

+ ДМВ ■ 4,0+ 1,6

Р >0,05

Рх 0,01

Интактные животине 4,1+ 0,4

23,3+ 2,7 <0,01 ,

16,(1+ 0,6 <0,01 0,01

Й0,6+ 2,4 15,1+ I/

Т9,5+ 2,1 29, е± <0,01 >0,05 0,01 0,01

8,1 + П,Г) 12,34 2,4 28,2+4,1

$ - площадь под кривой / интенсивность процессов свободкорадикального окислений /

Л-- интенсивность быстрой вспышки / количество гидроперекиси / Н - интенсивность медленной / максимально возможная интенсивность

перекисного окисления /, Т- время до начала развития медленной вспыйки / соотношение анти -и проксидантов / '

чения эффективности немедикаментозной иьалунакоррекции, реализуемой у больных хроническим вирусным гепатитом воздействием микроволнами дециметрового диапазона на облать грудины в месте прямой проекции вилочковоЯ железы, клинический эффект, отмеченный поиле курса ДМВ-терапии у больных, коррелировал при этом с положительными иммунологическими сдвигами.

Исследование эффективности вилозена I комплексной терапии хронических гепатитов

Применение вилозена при ХПГ.

В зависимости от проводимой терапии больные бь'ли разделены на две группы. Больных первой группы лечили традедионнкми средствами-: диетой, липотропными препаратами, гепатопротекторами / ка-рсил, эссенциалс / и витаминами группы 0 по общепринятой схеме.

Еольнке второй группы получали допо. нительно к базисной терапии кммунсмсдулятор вилозен / 20кг/сутки , курсом 20 дней ежедневно /.

эффективность'.-терапии оценивали по клшшко-биохт.шчеекга,. и иммунологическим критериям через 3 недели после на"ала терапии.

В результате традиционной терапии у больных хроническим персистирущим гепатитом наблюдалось уменьшение диспептического, астено-вегетативного и болевого синдромов у 66^ больных. Полная нормализация биохимических показателей имела место у 65?. больных / тогР числе у 2ЬУ больных НВ8ЛК- положительным ХПГ, табл." (у /. Достовернее изменений иммунологических показателей у больных ХПГ под влиянием традиционной терапии выявлено не было. Приври-

Таблица $ 6

Динамика биохимических показателей сыворотки крови при лечении больных хронкчзсяии перскстируюцим гепатитом

Группы больных

ХПГ ШдАз+ /базис-терапия /

т НВ3^ +

/базис-терапия * . вялозен /

ХПГ НВ^-/ базис-терапия /

хпг шэд -

/ базис-терапия + видозен /

10

Т2

| Сроки ' ( обследования."

АлАТ

кмоль/ч/л

Ас/.Т ммоль/ч/л

Тимоловая проба / ед /

!

! Общий билирубин : кколь/л

до лечения через 3 нед.

Р

до лечгния через 3 нед.

до лечения через 3 нед,

Р'

до лечения через 3 нед.

1.412+ 0,21 ' 0,625+ 0,06 0,888+ 0,627+ 0,075

<0.05 <0.05

1,48+ 0,214 0,672+ О,Т58

0,676+0,1 0,51% 0.065

1.292+ 0,172 0,729+ 0,08

0.744+ 0,083 0,575+ 0,05

■ <0,С5 <0,05

1,312+ 0,144 0,676+ 0,086

0.586+ 0,062 0,472+ ",043

6,03+ 0,23

5,63+ 0,38

0,05

6,26+ 0.4Ь 5,84+ 0,17

о

6,31+ 0,46 5,84+ 0,28 >0,05 6.24+ 0.4 5.67+ 0.24

24,4% 2,02

21.06+ 1,36

>

25,64+ 1,15 Т9.84+ 1,79

24,53+ 1,57 20,12+ 1,72 >0,05-24,07+ 2,72 13,45+ 2.36

Р - в сравнении с группой, получагпей вилозен

8

менении вилозена. в комплексной терапии ХПГ выраженность болевого-; диспептического и астено-вегетативного синдромов уменьшилась у 94% больных. Наряду с этим при лечении вилозеном наблюдалась достоверно более выраженная нормализация ферментов-индикаторов цитолитического синдрома - АлАТ, АсАТ / р<0,05 / , по сравнению с больными, получавшими традиционную терапию, при отсутствии достоверных различий по содержанию общего билирубина, показателям тимоловой пробы.

Под влиянием вилозена у больных хроническим персистирущим гепатитом увеличилось содержание в периферической крови общих и активных Т-лимфоцитов, уменьшилось количество ЦИК / р <0,05 /.

Применение вилозена при ХАГ. \

В зависимости от проводимой терапии больные были разделены на две группы: больные первой' группы получали традиционную терапию, которая вклгчала диету, гепа топро тектср!т, витаминыггруппы В, антиоксйданты по общепринятой схеме, а при НВяАв - отрицательном ХАГ - преднизолои в дозе 20-40 мг/сутки. Больные второй группы получали дополнительно вилозен / 20кг/сутки, 20 дней',)фп-ли в кос /. ,

В результате традиционной терапии положительная клиническая динамика наблюдалась у 42? больных НВвАв - положительни« и у 82* больных НВ8А8 - отрицательным ХАГ. Полной нормализации биохимических показателей достигнуто не было," однако у больных с НВдА8 - отрицательным гепатитом, получавших преднизолФн, вьгражен-но снижался уровень билирубина, уменьшалась активность ферментов процесса переаминирования, снижались показатели пробы / табл.?;' 7/

У больных НВйА8 - положительным ХАГ традиционная терапия

ТаЙяшч 7.

ДИНАМИКА БИОХИМИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ СЫВОРОТОК КРОВИ БОЛШЫХ ХРОШЯЕШШЙ АКТИВНЫМИ ГЕПАТИТАМИ

Группы больных

!к-во сроки бодышх! обследования

! АлАТ

.моль/ч/л

АсАТ , !ммодь/ч/л

I

[имоловяя Общий билирубин /яр/ ! ммоль/л

ХАТ НЗ А + /базис-терапия/ 6

ХАТ НВ А + /ба зис-тева ггия+ б +вшгозен/

ХАТ НВ А + /базис-терапия/ 7

ХАТ НВ А + /базис-тера гия+

вид038н/ •

да лечения

через 3 вед.

до лечения

через 3 нед.

до лечения ,

через 3 кед,

до лечения через Знец.

2,87+0,43

1,56+0,34*

2,76+0,39

,1,42+0,25*

3,11+0,57

1,36+0,24*

3,27+0,34 1,46+0,28*

1,72+0,26

1,16+0,19*

1,63+0,18

1,07+0,12*

1,58+0,24

1,02+0,17*

1,82+0,19 1,1^0,12*

14,2+3,1

12,1+2,6

15,6+4,2

13,2+3,7

17,6+5,2

15,3+3,7

16,2+4,9 13,7+4,2

38,4+11,5

26,2+3,4*

27,2+9,6

24,3+4,1

41,0+13,6

27,0+5,9

43,0+12,4 25,0+7,1

х - Р 0,05 при сравнения показателей до и после лечения

хх - Р 0,05 при сравнении показателей после базис-терапии с использованием вилозена

способствовала лишь незначительному увеличении общих и активных Е-РОК / р<0,05, табл. №8 /. Достоверных изменений других исследуемых показателей иммунитета выявлено не было. В то же время у больных HßgAg - отрицательным ХАГ, аолучавших преднизолон, наблвдалось снижение уровня lg G , уменьшение частоты и степени сенсибилизации лимфоцитов к GJ.II, снижение иммунорегуляторного индекса, сочетающееся, однаки с уменьшением обтего количества Т-лимфоцитов.

При применении вилозена у НВз% - положительных больных ХАГ биох.;мк-1еские показатели достоверно не изменялись / р >0,05 /, однако отмечалась положительная динамика показателей клеточного иммунитета: достоверное увеличение количества общих и активных Т-лимфоцитов / р 0,05 /, уменьшение иммунорегуляторного индекса, индекса" стимуляции лимфоцитов СШ / до течения f, 18+0,18 , после лечения 0,76+ 0,06,р<0,05 /, выявилаеъ тенденциям снижению уровней .Тд У и -jj ^ / табл.." Q ,/•

У больных Hi^Ag - отрицательные ХАГ применение вилозена на фоне приема преднизолона достоверно увеличивало только количество общих Т-лимфоцитов / р<0,05 / и активных Т-лимфоцитов / табл.'4 в /

Таким образом, при ХАГ вилозен, повышая количество общих Т-лимфоцитов и Т-супрессоров, способствует нормализации иммунорегуляторного индекса и подавлению аутоиммунных реакций.

Проведенные клинико-иммунологические исследованиГ. подтверждают данные эксперимента о перспективности применения низкомоле-кулярнгго тимического препарата вилозена в комплексной терапии Сольных хронически*, персистирумцим и активным гепатитами.

Таблица $ 8

Динамика показателей клеточного хроническими активными

югмунитета при лечении больнчх гепатитами . '

Группы больных

~т——Т~--Г

[ к-во ! срок Г

!больных:обследова-|

.!_ ;..- I

абс.

,Ти -тлимфоцита^

! !

! * ! !

акт. /%/

,т-----т---

~ иммуноре-|Сенсиби» |гуляторныЯ5 лизацшг ; индекс !к СШ

I. ХАГ /базис-терапия/ 5 до лечения

706+ 68 чзрез 3 нед. 730+ 72

2. ХАГ / базис-терапия+ 4 . до лечения

вилозен / через 3 нед.

3. ХАГ / базис-терапия/ 6. до лечения

чзрез 3 нед.

727+ 54 941+бб*,ХХ

795+ 39 . 662+ 47

712+ 54

4. ХАГ -/ базис-терапия+ : 7' до лечения

вилозен / через 3 нед; 996+ 40

х.хх

3 2,1+ 2 15,0+ 2

35,1± 3 Г?+ 2

31+2 16+ 2

38± ? 21+ !?•**.

32+ 3 16+ 3

37+ 2 20+ 4

31+2 * 17+ 2

х.хх ~ ^ х,хх

29+3 23+ 3

2,75+0,32 2,5+ 0,4

5/5 4/5

2,83+0,51 ■ 4/4

2,42+0,26 2/4

3,07+ 0,61 4/5

2,45+ 0,36 4/6

3,16+ 0,57 5/7

2,32+ 0,32 3/7 '

- в числителе количество положительных .случаев, в знаменателе - количество обследованных больных х - Р< 0,05 при сравнений показателей до и после лечения *хх - Р<0,05 при сравнении показателей после базис-терапии и лечения с использованием

••-.■..вняозена.

• оагоишв ююда'

1. У бояыдах ярокнчеейим персистпругрим и, особенно» аитигти гепатитом г,|/являгте« Г'-1;шпсигд.г.'.п;«> кямеиентг моточного иммунитета, шщо адего прояплялдкпел умешя-гжт.м количества ткмуезяяногммх лтТоцитсп и способности лейкоцитов периферической кропи продуцировать «тор^ероим. У болышх хрсиичгсиш гепатитом сугостлсичо изменяется «пкуинорегулпторлиЗ ггцяекс.

2. Пнзксшлекулярпкй препарат тимуса шмезеп ускоряет восстало» лсш'о функциональной активности печени при гепатите, вызванном у крьо четкроххлористым углеродом.

3. Скспсргкснталыю показано, что при онред летних условиях видозсп индуциругт образованно интерферона Сол с о активно, едм имлунсмодулятор лесиигаол. Препарат также достоверно ловадгазт устойчивость пилотных к х - токсину ЗОЛОТИСТОГО стафклокошш и рнлотокеьну

4. Кяитгоо-иилупояогическицй исслсдсьаншт обосновано ири-ксиейке тиоасна для лечодм хронических гепатитов у больных с енряеннш» роиадшт ггаср«упст»чтйльмос7и и при сшшпнсЯ спо-соСНостн лейкоцитов ррояи к продукции интерферона.

5. ГйстоЯганчеснми иссяодонашиий покаеедо, что злентрсмаг-шпмые вояны дециммройого дивпоома ногу* бйчъ 8-Й«К1иыю «ейойь-зопапы с целыз погшеяия функциональной активности гепдтоцитоп,

а танке стинулппп» сбразов&иия оС - глтерферона лейкоцита»«! крови больных хроническим^ геппттали, особенно в слу-гаях значительного снижения способности клеток продуцировать шиерферон,

6. Экспериментально обоснована целесообразность апробации

о^Фшаюттста применения огоктромагнитикх микроволн дйцикатрового" дтпаэока для н'ориллььщин порекиеного окисления лкпкдов при влбо-лекамипх печени ,

- Ш '

СПИСОК РАБОТ, ОНУБИИКОВ.МПШХ ¡К) 1ШЙ ДО'ММ'АЦИИ

1. Умишке механизм»* патогенеза хронического активного гепатита и перспектив».! его несгтгтфииеской имм<иптг>р.■пии // Акттвчьные нроблвадч мяципинм и биологии. Сб.на^н.ст.-Ки«н,-То« П. с.'27(3-290/ Соявт. В.Г.Иэредеркй, А.В.Петко.

2. ЗД«ктявность я мечшшэмм коррекции имм'гитета ¿из вескими факторами // Л1 сьезц отмариигояогов УССР: Тезисы - Киев, 1903-с.309-310 / Соант. А.Ф.Карась, В.Е.Кяэмириук, В.Л.Баргии, Л.П.Бабенке /.

3. Иммунная.система и прогессч рйпара>'ии орггаков и тканей

// Актуя<ш?ые преЗяема медицины и биология. Сб.на'-ч.ст.-Киев, 1990-Том.П,с.3-12./ Соалт'. А.В.Пешо, А.Я.Ярвмчук, В.Г.Ноляценко

4. Диффс-реннировамная иммунокоррекпия в терапии хронически* активных гепчтнтсв // Четвертый Всссоюэннй сьезд гастроэнтерологов «¡атериая* сьездя, - Москва - Ленинград, Г990, Том.П, с. 76-76

5. Обоснование применения ниэкомолекуяярногэ тимического препарата еняояена при лечении хроничэских гепатитов // И межрегиональная научно-практическая конференция "Актуальные! проблема иммунологии, морфологии и ИммуноряАбилитании в условиях индустриального региона Донбасса" - Тез,докл.-Моск»а-Л".гакск, 19Э1-1-.. 19.'

6. Чиэкомсяй^лярмне тимичвекие »йш^омо^ялторн р комплексной терап Ш больных хроническими гепатитами // I Республиканский сьезд иммунологов и аллергологов Узбекской ССР: Тез. докл.-Самарканд, 1991 - е.153-154.

7. Заивкв 'на изобретение "Способ актимити (Шфм'итов" Поло1йтельиов радение 0 4711576 от 27.00,91г. / в соявт. /.

ЩОХЗЦ, «и»'•¿¿Ьмь