Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Нарушения функции гемостаза под действием урографина, ультрависта и омнипака и пути их коррекции

На правах рукописи

Климанова Евгения Викторовна

Нарушения функции гемостаза под действием урографина, ультрависта и омнипака и пути их коррекции.

14.00.25.-фармакология, клиническая фармакология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

МОСКВА 2007

003068175

Работа выполнена в Государственном учреждении Гематологическом научном центре Российской академии медицинских наук

Научный руководитель:

доктор медицинских наук Петрухина Галина Николаевна Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор Мирзояи Рубен Симонович Доктор медицинских наук, профессор Сейфулла Рошен Джафарович

Ведущая организация: Центр теоретических проблем физико-химической фармакологии РАН

заседании диссертационного совета Д 001.024.01. при ГУ НИИ фармакологии имени В.В.Закусова РАМН по адресу: 125315 Москва, ул. Балтийская, д.8.

С диссертацией молено ознакомиться в ученой части при ГУ НИИ фармакологии имени В.В.Закусова РАМН по адресу: 125315 Москва, ул. Балтийская, д.8.

Защита диссертации состоится

часов на

Автореферат разослан «

^ 2007г.

Ученый секретарь диссертационного совета, д.м.н.

Е.А.Вальдман

Общая характеристика работы

Актуальность. В настоящее время рентгенологическое исследование является одним из основных методов, позволяющих получить объективную информацию о состоянии различных органов и систем организма, необходимую для установления правильного диагноза и точной локализации выявленных патологических изменений, а также контроля за эффективностью проводимого лечения. Использование различных видов рентгенологического исследования позволяет получить объективное рентгеновское изображение практически любой части человеческого тела. Естественная контрастность тканей является достаточной для исследования костно-суставного аппарата, сердца, легких, диафрагмы и некоторых других органов без проведения какой-либо предварительной подготовки. При обследовании желудочно-кишечного тракта, печени, бронхов, сосудов, естественная контрастность которых недостаточна, используют рентгеноконтрастные средства (РКС). По физическим свойствам РКС делят на рентгенонегативные и рентгенопозитивные. К первым относят газы, мало поглощающие рентгеновское излучение (азот, кислород, ксенон и другие). Их введение приводит к возникновению прозрачного фона, способствующего выявлению патологических образований. В группу рентгенопозитивных РКС входят жидкие и твердые вещества, поглощающие рентгеновское излучение существенно лучше, чем ткани тела. В настоящее время из этих соединений наиболее широко используют препараты, содержащие барий и йод. Йодсодержащие рентгеноконтрастные средства подразделяются на ионные и неионные, различающиеся между собой химическим строением, вязкостью и осмолярностью [Сергеев П.В., Свиридов Н.К. и соавт., 1993].

На фармакологическом рынке представлен большой выбор как ионных, так и неионных рентгеноконтрастных препаратов, однако, все они в какой-либо мере оказывают негативное воздействие на различные системы организма, в том числе и на свертывающую систему крови [Сергеев П.В., Свиридов Н.К. и соавт., 1993; Сергеев П.В., Шимановский Н.Л. и соавт., 1993]. Во многих клинических и экспериментальных исследованиях показано, что применение РКС может сопровождаться развитием, как кровотечений, так и тромбозов. Это ограничивает использование данных препаратов в клинической практике. В настоящее время нет четного представления о механизме воздействия рентгеноконтрастных средств на течение гемостатических реакций, что делает весьма затруднительным, с одной стороны, прогнозирование возникновения и направленности нарушений со стороны свертывающей системы крови при введении рентгеноконтрастных средств, а с другой стороны - разработку методов предупреждения подобных осложнений. Следует отметить, что в настоящее время

практически не существует безопасных и эффективных медикаментозных композиций, способных при профилактическом введении снизить частоту побочных явлений со стороны системы гемостаза при клиническом использовании РКС. Таким образом, выяснение возможных механизмов воздействия рентгеноконтрастных средств на систему свертывания крови является важной задачей, решение которой служит необходимым условием для снижения риска развития осложнений при применении РКС. Также представляется целесообразной разработка подходов к фармакологической профилактике возникновения нарушений функции свертывающей системы крови, обусловленных введением рентгеноконтрастных препаратов в организм.

Цель исследования. Целью данного исследования явилось изучение влияния рентгеноконтрастных средств (ионного урографина и неионных ультрависта и омнипака) на свертывающую систему крови и разработка фармакологической профилактики развития нарушений течения гемостатических реакций, вызванных введением данных диагностических препаратов.

Задачи исследования. Для достижения цели были поставлены следующие

задачи:

1. Оценить возможное влияние исследуемых препаратов на агрегацию тромбоцитов человека в опытах in vitro.

2. Провести изучение воздействия болюсного внутривенного введения ионных и неионных рентгеноконтрастных средств на свертывающую систему крови кроликов.

3. Исследовать влияние ионного урографина и неионных ультрависта и омнипака на тромборезистентные свойства сосудистой стенки.

4. Изучить возможное защитное действие n-З полиненасыщенных жирных кислот по отношению к тромборезистентным свойствам интимы сосудов при локальном воздействии на сосудистую стенку рентгеноконтрастных препаратов.

Научная новизна исследования. В работе впервые показано, что как ионный урографин, так и неионные ультравист и омнипак обладают заметным влиянием на функциональную активность тромбоцитов и реакции плазменного гемостаза, причем выраженность и направленность этого действия не зависит от принадлежности данных веществ к ионным или неионным РКС, а, вероятно, связаны со структурными и физико-химическими особенностями каждого отдельного препарата. Впервые выявлено, что все исследуемые рентгеноконтрастные средства дозазависимо снижают тромборезистентные свойства сосудистой стенки, что может быть важной общей причиной развития тромботических осложнений при введении РКС. Также впервые

показано, что предварительное введение экспериментальным животным п-3 полиненасыщенных жирных кислот препятствует снижению противотромботического потенциала интимы сосудов при воздействии на нее рентгеноконтрастных средств.

Практическая значимость. Разработана простая в исполнении и не требующая дорогостоящих реактивов и оборудования методика оценки степени повреждение тромборезистентных свойств сосудистой стенки под влиянием рентгеноконтрастных средств. Данная методика позволяет проводить дозазависимое изучение интегрального снижения синтеза антиагрегационных соединений клетками сосудов при воздействии на последние каких-либо агонистов. Кроме того, предложена принципиальная схема фармакологической защиты интимы сосудов от повреждающего действия рентгеноконтрастных соединений. Показано, что превентивное 5-ти дневное внутримышечное введение препаратов n-З полиненасыщенных жирных кислот предупреждает потерю сосудистой стенкой тромборезистентных свойств после введения в сосудистое русло рентгеноконтрастных средств.

После определенной модификации, данный метод защиты может применяться в клинических условиях для предупреждения развития патологических реакций со стороны свертывающей системы крови при проведении рентгенологических исследований.

Апробация работы. Диссертационная работа доложена на заседании проблемной комиссии «Патология гемостаза» ГНЦ РАМН. Отдельные фрагменты работы были представлены на X, XI, XIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (2003, 2004, 2006), 2-ом Съезде Российского Научного Общества фармакологов (2003), Научно-практической конференции «Медико-биологические науки для теоретической и практической медицины» (2003) и Пироговской студенческой научной конференции (2003)

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа объемом 128 страниц состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, главы экспериментальной части, заключения, выводов. Работа содержит 19 таблиц и 17 рисунков. Список литературы включает 33 отечественных и 189 иностранных работ.

Материалы и методы исследования.

Для оценки влияния рентгеноконтрастных средств на свертывающую систему крови в работе было использовано три препарата: неионный ультравист-300 - водный раствор 1Ч,М-ди[2,3-трийод-5-метоксмацетиламино-М-метиллизофталамида]

(«Schering», Германия), неионный омнипак-300 - водный раствор N,N-6hc(2,3-

дигидроксипропил)-5- р^-(2,3-дигидроксипропил) ацетамид 2,4,6-трииодизоталамида («Nicomed», Норвегия) и ионный урографин-76% - содержащий смесь натриевой и метилглкжаминовой солей («Schering», Германия.)

Изучение влияния рентгеноконтрастных средств на функциональную активность тромбоцитов было выполнено на венозной крови здоровых доноров, которую стабилизировали раствором цитрата натрия 3,8%. Для получения богатой тромбоцитами плазмы, кровь центрифугировали в течение 10 мин при 1000 об/мин, после чего верхний надосадочный слой плазмы переносили в другую пробирку, а остаток повторно центрифугировали при 3000 об/мин в течение 20 мин для выделения бедной тромбоцитами плазмы.

Эксперименты по изучению воздействия ренгеноконтрастных средств на тромборезистентные свойства сосудистой стенки проводили на белых беспородных крысах обоего пола массой 250,0-350,0 г, у которых под общим наркозом извлекали аорту [Балуда В.П., Лакин K.M. и соавт. 1980]. В качестве наркозного средства применяли этиловый эфир.

В исследованиях по изучению влияния рентгеноконтрастных средств на свертывающую систему крови in vitro использовали кроликов обоего пола массой 3,04,0 кг. У животных образцы крови забирали из краевой вены уха методом свободного падения капель и стабилизировали ее 3,8% раствором цитрата натрия.

В работе применялись методы оценки функциональной активности тромбоцитов и состояния плазменного гемостаза.

Измерение агрегации тромбоцитов. Агрегацию тромбоцитов изучали методом светорассеяния, предложенным G. G. V. Born [Born J.V.R. 1962] на агрегометре фирмы "CHRONO-LOG CORPORATION" (США). О степени агрегации судили по максимальной величине падения оптической плотности после окончания реакции (Атю) по сравнению с исходной величиной. В работе в качестве проагрегантов применяли АДФ (Boehringer Mannheim, Австрия), коллаген (НПО "РЕНАМ", Россия) и адреналин (Reanal, Венгрия) в конечных концентрациях 1х10"5 М, 0,2 мг/мл и 2,5x10"6 М, соответственно.

Определение активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ). Тест проводили турбоденситометрическим методом на коагулометре "Fibrintimer" (Behring, Германия) с использованием стандартного набора реагентов для определения АЧТВ (НПО «Ренам», Россия) [Баркаган З.С., Момот А.П. 1999]. В основе методики лежит оценка активации внутреннего пути гемостаза путем добавления к

плазме фосфолипидов; при этом время образования сгустка фибрина зависит от активности I, II, VIII, IX, X, XI и XII факторов.

Определение протромбинового времени. Оценку протромбинового времени проводили по методу A.J.J. Quick [Quick A.J.J. 1935] с применением стандартного набора реактивов Calcium-Tromboplastin («Behring», Германия), на коагулометре "Fibrintimer" (Behring, Германия).

Принцип метода состоит в следующем: инкубация плазмы с тканевым тромбопластином ведет к активации факторов внешнего пути свертывания. После добавления реагента к образцу плазмы начинается образование фибринового сгустка. Время формирования сгустка определяет активность внешнего пути свертывания, в частности активность V, VII факторов.

Определение концентрации фибриногена. Количество фибриногена определяли методом, предложенным Clauss [Баркаган З.С., Момот А.П. 1999]. В работе использовали набор реагентов Тех-Фибриноген-тест фирмы «Технология-стандарт» (Россия). Исследования проводили на коагулометре "Fibrintimer" (Behring, Германия «Fibrintimer»). Принцип метода заключается в определении свертывания цитратной плазмы избытком тромбина. Время свертывания при этом обратно коррелирует с концентрацией фибриногена.

Определение концентрации продуктов деградации фибрина и фибриногена. Исследования проводили на бедной тромбоцитами плазме с применением стандартного набора реактивов «Fibro-Tec» (Behring, Германия). Принцип метода основан на реакции преципитации. Суспензию Staphilococcus aureus смешивали с бедной тромбоцитами плазмой, что приводило к взаимодействию продуктов деградации фибриногена с добавленной субстанцией [Hawiger J. at al. 1970].

Для полуколичественной оценки плазму разводили трис-буфером в соотношении 1:1 (титр 1), 1:2 (титр 2), 1:4 (титр 4), 1:8 (титр 8), 1:16 (титр 16) и добавляли Staphilococcus aureus. После проведения исследования отмечали титр, в котором выпадали преципетаты и умножали номер данного титра на 0,6 мкг/мл. Полученное значение являлось концентрацией ПДФ в изучаемой пробе.

Определение влияние рентгеноконтрастных средств на сосудистую стенку. Для исследования действия РКС на интиму сосудов необходимо было выделить сосудистую стенку крысы. С этой целью у здоровых животных, находящихся под эфирным наркозом, забирали грудной и брюшной отдел аорты, прополаскивали в трис-НС1-буферном растворе (0,05 М рН=7,5) при 4°С и разрезали вдоль. Кусочки стенки аорты массой 9 мг инкубировали с рентгеноконтрастными препаратами при 37"С

в течение 5 мин. После инкубации сосудистую стенку отмывали в трис-НС1-буфере и определяли антиагрегационную активность интимы, инкубированной с РКС. Об антиагрегационной активности судили по степени торможения процесса АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов плазмы здоровых доноров, которую инкубировали с аортой 5 мин [Бапуда В.П., Лакин K.M. 1980]. Плазму получали методом, описанным выше. В качестве контроля использовали стенку сосуда, не подвергающуюся токсическому воздействию РКС.

Статистический анализ полученных результатов. Статистическую обработку результатов измерений проводили в соответствии с общепринятыми методами вариационной статистики с использованием критерия Стыодента [Лакин

Г.Ф. 1973].

Различия между сравниваемыми величинами считались достоверными при уровнях значимости не менее 95%.

Данные в таблицах представлены в виде (x)-fcm,.

Результаты собственных исследований.

Влияние рентгеноконтрастных средств на агрегацию тромбоцитов человека in vitro.

В начале работы необходимо было выяснить, обладают ли сами РКС свойствами прямых тромбоцитарных агонистов. Результаты показали, что используемые препараты в диапазоне концентраций 500-40 мкл/мл per se не вызывали агрегацию тромбоцитов, что свидетельствует об отсутствии прямых проагрегационных свойств у ультрависта, омнипака и урографина in vitro.

Следующий этап исследований был посвящен изучению влияния ионного урографина и неионных ультрависта и омнипака, взятых в очень низких концентрациях (10"2-10"s мкл/мл в конечном разведении), на агрегацию тромбоцитов человека, индуцированную АДФ. Данные концентрации имеют место в сосудистом русле спустя 1-2 часа после введения препарата. Показано, что в этой постановке опыта исследуемые РКС не влияют на выраженность межтромбоцитарного взаимодействия.

Задачей следующего фрагмента работы было изучение действия рентгеноконтрастных средств в концентрациях, локально создающихся в первые 1-2 минуты после введения препарата, на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов человека. В этой ситуации количество добавляемого в кювету агрегометра РКС составило 500, 340, 200 и 100 мкл/мл. Было показано, что в данных концентрациях урографин, ультравист и омнипак обладают дозазависимым антиагрегационным эффектом. Так, добавление к богатой тромбоцитами плазме растворов РКС в конечной

концентрации 500 мкл/мл во всех случаях приводило к полной блокаде межтромбоцитарного взаимодействия, тогда как использование урографика, ультрависта и омиипака в концентрации 100 мкл/мл лишь частично подавляло агрегацию тромбоцитов. Следует отметить, что исследуемые ре нт геи око траст ные препараты в диапазоне концентраций 100-340 мкл/мл не вполне одинаково снижали выраженное» межтромбоцитарного взаимодействия. При добавлении к реакционной смеси растворов РКС в количестве 340 мкл/мл наиболее заметным ai ith arpe гаи ионным эффектом обладал омнинак (1,9±1,1% и 45,9±2,0% о опыте и контроле, соответственно), тогда как урографин и ультравист менее выражено снижали величину An,ж (до 10,9+2,9% урографин и 7,0±2,4% ультравист). В то же время, использование РКС в конечной концентрации 100 мкл/мл выявило наиболее выраженные анти агрегйуийн ные свойства у у ро граф и на (45,9±2,0% в контроле и 24,3±2,4% при добавлении урографина), а ультравист и омнИпак в данной постановке опыта достоверно менее выражено подавляли межтромбоцитарное взаимодействие (до 34,3+1,6% при добавлении ультрависта и 35,8±2,2% - омнипака). Не исключено, что Снижение максимальной амплитуды агрегации при внесении в кювету агрегометра больших количеств РКС обусловлено, прежде всего, физическими свойствами данных соединений. Возможно, имея высокую, вязкость рентген о контрастные средства обволакивают клетки и таким образом служат механическим препятствием, ограничивающим возможность развития межтромбоцитарных контактов. Именно такой механизм антиагрегационного действия имеет место при добавлении жиров к тромбоцитам [El mad fa 1. et al. 1993]. l-le исключено, что омнипак обладает подобными свойствами в большей степени, чем ультравист и урографин (рис. 1).

Четвертая серия экспериментов была посвящена изучению влияния на агрегацию тромбоцитов in vLtrO рентгенокон грустных средств в конечной концентрации

П контроль

□ 100 мкл/мл

□ 200 мкл'мя

□ 340 мкл/мл ■ 50Q мклУмл

Рис. I. Влияние РКС в конечных концентрациях 100500 мкл/мл на агрегацию тромбоцитов человека in vilro (Amax; %; АДФ). ♦-достоверно rio отношению к контролю (р<0,05).

40 мкл/мл. Такое количество РКС присутствует в сосудистом русле спустя 3-5 минут после введения препаратов в максимальной диагностической дозе (3,0 мл/кг веса). В этой ситуации в качестве проагрегантов мы сочли целесообразным использовать не только АДФ, но и коллаген. Известно, что воздействие на сосудистую стенку рснтгеноконтрастных средств может приводить к повреждению тромба резистентных свойств интимы сосудов [Emeis J.J. el ai. 1997; Faiiser С. al al, 2001]. Мы предположили, что через 3-5 минут после введения исследуемых веществ коллаген (а этот белок является одним из наиболее сильных тромбоцитарных агонистов) может стать доступным для клеточных элементов крови и повлиять на функциональную активность тромбоцитов. Результаты эксперимента показали, что все РКС достоверно снижали агрегационные свойства тромбоцитов, причем степень этого эффекта зависела от выбранного проагреганта, При использовании АДФ уменьшение величины Amjs было умеренным. В то же время при использовании в качестве проагреганта коллагена отмечено, что конный урографин и неионный омнипак полностью блокировали развитие межтромбоцитарного взаимодействия, а неионный ультравнет снижал выраженность данного процесса примерно в 3 раза (рис. 2).

Рис. 2. Влияние РКС (40 мкл/мл) на агрегацию тромбоцитов человека in

vitro

(Amax; %; АДФ; коллаген) •-достоверно по отношению к контролю!'piO.O5),

АЛФ

Коллаген

Учитывая, что введение рентгеноконтрастных средств (как, впрочем, и другие врачебные манипуляции) может служить причиной развития стресса и сопровождаться повышением уровня катехоламинов в крови, мы сочли важным оценить влияние РКС на агрегацию тромбоцитов индуцированную адреналином. С этой целью урографин4 улътравист и омнипак были взяты в достаточно широком диапазоне концентраций (100. 40, 10 и 5 мкл/мл), соответствующих тем, которые определяются в кровотоке как через 2-5 минут, так и через 30-60 минут после введения препарата. Полученные результаты свидетельствуют, что in vitro в конечных концентрациях 10-100 мкл/мл все

исследованные РКС достоверно и дозазависимо снижали величину максимальной амплитуды агрегации. Добавление к богатой тромбоцитами плазме 5 мкл/мл данных соединений не приводило к достоверным изменениям агрегации тромбоцитов, вызванной адреналином.

Таким образом, при оценке полученных результатов в экспериментах in vitro можно заключить, что все эти соединения per se не обладают проагрегационными свойствами, однако в высоких концентрациях данные препараты дозазависимо подавляют агрегацию тромбоцитов при инициации процесса такими агонистами, как АДФ, коллаген и адреналин. Выраженность этого эффекта не зависит от того, к какой группе препаратов - ионных или неионных - принадлежат исследуемые вещества. Вероятно, изменение агрегационных свойств тромбоцитов связано со структурными и физико-химическими особенностями каждого отдельного соединения.

Влияние рентгеноконтрастных средств на систему гемостаза кроликов.

Животным болюсно внутривенно вводили исследуемые препараты в двух диагностических дозах, равных 1,5 и 3,0 мл/кг веса, что соответствует средней и максимальной дозам, рекомендуемым для применения в клинических условиях. В контрольной серии экспериментов животным вводили физиологический раствор в дозе 3,0 мл/кг веса, что было необходимо для определения возможных изменений в гемостазе после введение в сосудистое русло большого объема жидкости. Данная ситуация наблюдается при использовании контрастных средств в максимальной диагностической дозе, то есть 3,0 мл/кг веса. Во всех случаях образцы крови забирали до начала эксперимента, через 20 минут, 1, 2 и 24 часа после введения РКС. В качестве тестов, позволяющих оценить воздействие рентгеноконтрастных средств на основные звенья системы свертывания крови, были использованы АДФ-индуцированная агрегация тромбоцитов, протромбиновое время, АЧТВ, концентрация фибриногена и уровень продуктов деградации фибрина и фибриногена в плазме.

При проведении контрольного опыта было выявлено, что болюсное внутривенное введение физиологического раствора в дозе 3,0 мл/кг веса животного не оказывало существенного влияния на основные показатели, характеризующие функциональное состояние системы гемостаза. Отмечено лишь небольшое увеличение содержания фибриногена в плазме через 24 часа после начала эксперимента, что могло быть проявлением компенсаторных реакций в ответ на острое кратковременное увеличение объема циркулирующей крови.

Задачей следующего этапа работы явилось изучение воздействия одноразового внутривенного введения кроликам урографина, ультрависта и омнипака в средней (1,5

мл/кг веса) и максимальной (3,0 мл/кг веса) диагностических дозах на систему свертывания крови. Было показано, что все эти соединения, хотя и в разной степени, изменяли коагулологический потенциал крови.

При оценке влияния болюсной инфузии урографина в средней диагностической дозе на течение гемостатических реакций отмечено, что в данной постановке опыта введение исследуемого препарата приводило лишь к умеренному удлинению активированного частичного тромбопластинового времени к 24-ому часу наблюдения (12,9+0,7 и 15,9+1,3 сек в контроле и опыте, соответственно), а также незначительному увеличению протромбинового времени спустя 1 час после начала эксперимента (10,5+0,6 и 13,4+1,3 сек в контроле и опыте, соответственно). Эти изменения свидетельствуют о некотором, хотя и весьма слабом, противосвертывающем действии урографина. Повышение содержания фибриногена в плазме, имеющее место через 24 часа после начала эксперимента, не отличалось от такового при введении физиологического раствора и могло быть компенсаторной реакцией организма на острую дилюцию. Увеличение дозы урографина до 3,0 мл/кг веса сопровождалось выраженным снижением агрегации тромбоцитов уже через 20 минут после начала эксперимента. Этот эффект сохранялся до конца периода наблюдения. В то же время было отмечено достоверное укорочение АЧТВ через 2 и 24 часа после введения препарата и протромбинового времени во временном диапазоне 1-24 часа. Эти данные свидетельствуют об активации процесса свертывания крови, как по внешнему, так и по внутреннему пути. Таким образом, можно заключить, что введение урографина, в максимальной диагностической дозе увеличивает риск развития тромботических осложнений. Правда, достаточно заметные антиагрегационные свойства этого препарата могут частично препятствовать выявлению данного неблагоприятного эффекта.

Внутривенное болюсное введение кроликам неионного ультрависта в дозе 1,5 мл/кг веса животного сопровождалось некоторым укорочением АЧТВ (14,7+0,2 сек и 13,0±0,3 сек в контроле и опыте, соответственно) и протромбинового времени (9,6+0,3 сек и 7,3+0,2 сек в контроле и опыте, соответственно). Эти изменения имели место только через 24 часа после начала эксперимента. Приведенные данные свидетельствуют, что назначение ультрависта даже в средней диагностической дозе в определенных ситуациях может способствовать формированию тромбов. Повышение уровня фибриногена в плазме спустя сутки после введения этого препарата было примерно таким же, как и при введении физиологического раствора и, скорее всего, являлось ответом организма на острую дилюцию. Введение ультрависта в

максимальной диагностической дозе также вызывало укорочение протромбинового времени и повышение содержания фибриногена в плазме через 24 часа после начала опыта, однако не влияло на АЧТВ. Кроме того, в данной ситуации имело место слабое снижение агрегации тромбоцитов через 1, 2 и 24 часа после начала эксперимента. Полученные результаты позволили предположить, что увеличение количества вводимого ультрависта не сопровождалось существенным повышением риска развития тромбогенеза по сравнению с использованием препарата в дозе 1,5 мл/кг веса животного.

Оценка результатов, полученных при изучении влияния разового внутривенного введения неионного омнипака в дозе 1,5 мл/кг веса животного на систему свертывания кроликов показала, что данный препарат обладал достаточно выраженным воздействием на течение гемостатических реакций. В средней диагностической дозе омнипак, хотя и не изменял функциональную активность тромбоцитов и не влиял на АЧТВ, однако укорачивал протромбиновое время в период 1-24 часа после начала эксперимента (10,9+0,4 сек до начала опыта, 9,3±0,2 сек через 1 час, 9,5±0,2 сек через 2 часа и 8,4±0,2 сек через 24 часа после введения препарата). В отличие от урографина и ультрависта, введение которых сопровождалось увеличением уровня фибриногена в плазме через 24 часа после инфузии препарата, введение омнипака приводило к снижению данного белка в период 1-24 часа после начала эксперимента (5,8±0,2 г/л до введения препарата, 4,7+0,4 г/л, 4,6±0,5 г/л и 4,3±0,5 г/л через 1, 2 и 24 часа, соответственно). Одновременное повышение уровня ПДФ позволило предположить, что омнипак способствует увеличению потребления фибриногена в результате активации процесса свертывания крови. Введение омнипака в дозе 3,0 мл/кг веса сопровождалось заметным ростом межтромбоцитарного взаимодействия в период 20 минут-24 часа после инфузии препарата. Таким образом, если урографин и ультравист в максимальной диагностической дозе обладали некоторым антиагрегационным эффектом, то омнипак потенциировал развитие реакций клеточного гемостаза. Также показано, что введение омнипака в дозе 3,0 мл/кг веса вызывало укорочение протромбинового времени через 24 часа после начала эксперимента. Приведенные данные позволяют заключить, что использование омнипака в клинической практике в некоторых ситуациях может быть причиной тромботических осложнений.

Оценка влияния болюсного внутривенного введения урографина, ультрависта и омнипака показала, что все исследуемые соединения обладают влиянием на формирование реакций клеточного и плазменного гемостаза, причем, выраженность и

направленность данного эффекта у каждого отдельного препарат различны. Скорее всего, действие этих РКС на свертывающую систему крови зависит не от принадлежности к группе ионных или неионных соединений, а от их индивидуальных особенностей.

Влияние реитгеноконтрастных средств на тромборезистентные свойства сосудистой стенки.

Для выполнения данного исследования была использована методика определения агрегации тромбоцитов в присутствии фрагмента сосудистой стенки. Так как стенки сосудов при воздействии на них агонистов синтезируют и высвобождают антиагрегационные соединения, помещение в богатую тромбоцитами плазму участка аорты приводит к снижению степени межтромбоцитарного взаимодействия. Выраженность этого эффекта зависит, прежде всего, от суммарного количества образующихся в эндотелиальных клетках простациклина и оксида азота, то есть, в конечном итоге, от степени сохранности тромборезистентных свойств люминальной поверхности сосудов. В эксперименте были использованы одинаковые по величине участки аорты интактных крыс и богатая тромбоцитами плазма человека. Процесс агрегации тромбоцитов индуцировали АДФ в конечной концентрации 10"5М.

Результаты проведенного эксперимента показали, что предварительная 5-ти минутная инкубация богатой тромбоцитами плазмы с фрагментом интактной аорты приводила к полному подавлению АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов. При добавлении к инкубационной смеси урографина, ультрависта и омнипака в концентрациях 200, 100, 50, 20 и 10 мкл/мл было отмечено частичное дозазависимое восстановление процесса межтромбоцитарного взаимодействия. Так, участок сосудистой стенки, предварительно в течение 5-ти минут проинкубированный с урографином, при внесении его в богатую тромбоцитами плазму проявлял лишь частичный антиагрегационный эффект, причем степень восстановления процесса образования тромбоцитарных агрегатов зависела от концентрации данного РКС в реакционной смеси (23,8±2,2%, 18,2±2,0%, 14,7±1,6%, 8,3±1,8% и 7,0±1,8% при концентрации урографина 200, 100, 50, 20 и 10 мкл/мл, соответственно). Замена урографина на ультравист приводила к менее выраженному повреждению тромборезистентных свойств сосудистой стенки. Показано, что при 5-ти минутной предварительной инкубации фрагмента аорты с ультравистом, взятом в концентрации 200 мкл/мл, агрегация тромбоцитов восстанавливалась до 16,1 ±2,1%, в концентрации 100 мкл/мл - до 13,0±0,9%, в концентрации 50 мкл/мл - до 12,0±1,2%, в концентрации 20 мкл/мл - до 7,8±1,8% и в концентрации 10 мкл/мл - до 6,5±2,0%. Омнипак вызывал

наиболее выраженные повреждения тромборезистентных свойств интимы сосудов, которые были особенно заметны при инкубации фрагмента аорты с этим препаратом, взятом в низких концентрациях. Так, при предварительном воздействии на участок сосуда 10 мкл/мл омнипака агрегация тромбоцитов восстанавливать до 15,4±2,4%, 20 мкл/мл - до 15.9+2.4%, 50 мкл/мл - до 23,4±4,4%, 100 мкл/мл - до 25,0+4.2% и 200 мкл/мл - до 26,3+5,6%. Результаты эксперимента позволили заключить, что степень повреждения тромборезистентных свойств сосудистой стенки зависит не от принадлежности препарата к группе ионных или неионных рентген о контрастных средств, а связаны с индивидуальными свойствами каждого Конкретного соединения (рис. 3).

—_J □ контроль! ■ контроль 2

: Ш00 МКЛ/МЛ

В 100 мкл/мл □ 50 мкл/мл В 20 мкл/мл 010 мкл/мп

У ро графин

У л ь фа в ист

Омни пак

Рис. 3. Влияние РКС на агрегацию тромбоцитов человека írt vi tro (АДФ,%) в

присутствии сосудистой стенки.

'-достоверно по отношению к кОитролим I и 2 Í [У"0.')> i

Контроль 1, Величина агрегации тромбоцитов человека в отсутствии фрагмента сосудистой стенки крыс.

Контроль 2. Величина агрегации тромбоцитов человека в присутствии фрагментов сосудистой стенки контрольных и опытных животных без предварительной инкубации о РКС.

Разработка способа защиты сосудистой стенки от повреждающею дейсгвин рентгеноконтраспiых средств.

Учитывая, что все исследуемые РКС при контакте с интимой сосудов снижали тромбо резистентные свойства последней и тем самым повышали риск развития тромбозов, мы предио пожили, что превентивное введение веществ, повышающих устойчивость сосудистой стенки к действию повреждающих факторов, может снизить

вероятность развития тромбогенеза, индуцированного локальным воздействием рентгеноконтрастных соединений. Известно, что n-З полиненасыщенные жирные кислоты рыбьего жира, прежде всего ЭПК и ДГК, способны повышать противотромботический потенциал интимы сосудов. Кроме того, эти вещества даже в высоких дозах (15-20 г/кг веса) не обладают токсическими свойствами, а их применение не имеет серьезных противопоказаний [Schmidt Е.В., Dyerberg J. 1994; Dyerberg J. 1995; Calder P.C 1996]. Поэтому мы сочли целесообразным изучить возможный защитный эффект рыбьего жира ("БИОГАЛ", Венгрия) по отношению к тромборезистентным свойствам сосудистой стенки в условиях локального воздействия на нее урографина, ультрависта и омнипака. С этой целью беспородным крысам в течение 5-ти дней ежедневно внутримышечно вводили рыбий жир в дозе 2,5 мл/кг веса, что составляло 75,0 мкл/кг n-З ПНЖК в день. Затем у животных извлекали аорту, фрагменты которой .использовали при оценке влияния РКС на интиму сосудов.

Результаты эксперимента показали, что сосудистая стенка крыс, получавших рыбий жир, при воздействии на нее РКС достоверно лучше сохраняла свои тромборезистентные свойства по сравнению с сосудистой стенкой интактных животных. Так, при проведении эксперимента с использованием фрагмента аорты крыс, которым вводили рыбий жир, добавление к инкубационной смеси урографина в концентрациях 50, 20 и 10 мкл/мл вообще не приводило к восстановлению агрегации тромбоцитов, а при добавлении 200 и 100 мкл/мл урографина Ат!И повышалась лишь до 7,1±3,3% и 2,9+2,3%, соответственно (табл. 1).

При воздействии на участки сосудов опытных крыс ультрависта в концентрациях 200, 100 и 50 мкл/мл агрегация тромбоцитов восстанавливалась до 6,9±2,3%, 5,3+1,8% и 2,8+1,5%, соответственно, а в концентрациях 20 и 10 мкл/мл это соединение вообще не повреждало антиагрегационные свойства интимы (табл. 1).

Предварительное введение крысам рыбьего жира предотвращало и снижение противотромботического потенциала сосудов и при действии на них омнипака. Показано, что восстановление агрегации тромбоцитов при использовании этого препарата в концентрациях 200 и 100 мкл/мл составило 1,6±0,6% и 1,1 ±0,3%, соответственно. При снижении содержания омнипака в инкубационной среде не было отмечено каких-либо нарушений тромборезистентных свойств фрагментов сосудов крыс, получавших рыбий жир (табл. 1).

РКС Контроль 1 Контроль 2 200 мкл/мл 100 мкл/мл 50 мкл/мл 20 мкл/мл 10 мкл/мл

Урографин Сосудистая стенка интактных крыс 46,7± 1,6 0 23,8± 2,2*° 18,2± 2,0*° 14,7± 1,6*° 83± 1,8*° 7,0± 1,8*°

Сосудистая стенка крыс после 5-ти дневного введения п-3 ПНЖК 47,1± 43 0 7,1± зз*° 2,9± 23*° 0*° 0*° 0*°

н а Сосудистая стенка интактных крыс 483± 1,7 0 16,1± 2,1*° 13,0± 0,9*° 12,0± 1,2*° 73± 1,8*° 6,5± 2,0*°

« с. Ь £ Сосудистая стенка крыс после 5-ти дневного введения п-3 ПНЖК 493± 2,4 0 6,9± 23*" 53± 1,8*° 2,8± 1,5*° 0*° 0*°

а а Сосудистая стенка интактных крыс 49,5± 2,1 0 263± 5,6*° 25,0± 4,2*° 23,4± 4,4*° 15,9± 2,4*° 15,4± 2,4*°

О Сосудистая стенка крыс после 5-ти дневного введения п-3 ПНЖК 46,9± 2,1 0 1,6± 0,6*° 1,1± 03*° 0*о 0*° 0*°

Табл. 1. Влияние рентгеноконтрастных средств на агрегацию тромбоцитов человека (АДФ;%) в присутствии фрагментов сосудистой стенки интактных крыс и крыс, получавших п-3 ПНЖК.

Контроль 1. Величина агрегации тромбоцитов человека в отсутствии фрагмента сосудистой стенки крыс.

Контроль 2. Величина агрегации тромбоцитов человека в присутствии фрагментов сосудистой стенки контрольных и опытных животных без предварительной инкубации с РКС.

'-достоверно по отношению к контролю 1 (р<0,05, метод для сопряженных величин); достоверно по отношению к контролю 2 (р<0,05, метод для сопряженных величин).

Таким образом, можно заключить, что предварительное 5-ти дневное внутримышечное введение крысам рыбьего жира в дозе 2,5 мл/кг (75,0 мкл/кг ПНЖК) выражено защищало интиму сосудов от токсического воздействия как ионных, так и

неионных рентгеноконтрастных средств. Наиболее явно этот эффект проявлялся при контакте интимы с неионным омнипаком. Воздействие на эндотелий крыс, получавших рыбий жир, ионного урографина и неионного ультрависта оказывало в этих условиях примерно одинаковое очень слабое повреждающее действие на тромборезистентные свойства сосудистой стенки.

Оценка результатов выполненной работы позволяет сделать вывод, что ионный урографин и неионные ультравист и омнипак модулируют течение гемостатических реакций. Выраженность и направленность их действия на систему свертывания крови зависит от индивидуальных свойств каждого отдельного препарата. Общим эффектом урографина, ультрависта и омнипака является снижение тромборезистентных свойств сосудистой стенки. Превентивное введение экспериментальным животным рыбьего жира частично предупреждает потерю интимой сосудов, антиагрегационных свойств при контакте с урографином, ультравистом и омнипаком.

Выводы

1. Урографин, ультравист и омнипак в диапазоне концентраций 40-500 мкл/мл per se не проявляют прямого проагрегационного эффекта in vitro, однако в концентрациях 10-500 мкл/мл in vitro дозазависимо подавляют агрегацию тромбоцитов человека, индуцированную АДФ, адреналином и коллагеном.

2. Болюсное внутривенное введение кроликам ионного урографина в средней диагностической дозе (1,5 мл/кг веса) сопровождается слабым ингибированием свертывания крови по внешнему и внутреннему пути. Введение урографина в максимальной диагностической дозе (3,0 мл/кг веса) приводит к укорочению активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ) через 2 и 24 часа после инфузии, но снижает агрегацию тромбоцитов в период 20 минут-24 часа после начала эксперимента.

3. Внутривенное введение животным неионного ультрависта в дозе 1,5 мл/кг веса вызывает укорочение АЧТВ и протромбинового времени через сутки после начала эксперимента. При увеличении дозы до 3,0 мл/кг веса развивается слабое снижение агрегации тромбоцитов через 1-24 часа после введения и уменьшение протромбинового времени через 24 часа после начала эксперимента, но не влияет на АЧТВ.

4. Неионный омнипак, введенный животным в дозе 1,5 мл/кг веса, укорачивает протромбиновое время и снижает уровень фибриногена в плазме через 1-24 часа после начала опыта, а также повышает уровень продуктов деградации фибрина

и фибриногена через 20 минут-24 часа после введения препарата, но не влияет на АЧТВ. Инфузия омнипака в дозе 3,0 мл/кг веса вызывает активацию межтромбоцитарного взаимодействия в течение всего периода наблюдения.

5. Влияние урографина, ультрависта и омнипака на гемостатические реакции при внутривенном болюсном введении кроликам не связано с принадлежностью данных соединений к группе ионных или неионных рентгеноконтрастных средств, а зависит от индивидуальных свойств каждого конкретного препарата.

6. Неионные ультравист и омнипак и ионный урографин in vitro в концентрациях 200, 100, 50, 20 и 10 мкл/мл дозазависимо снижают тромборезистентные свойства сосудистой стенки.

7. 5-ти дневное внутримышечное введение крысам рыбьего жира в дозе 2,5 мл/кг день (75,0 мкл/кг день n-З ПНЖК) in vitro частично предупреждает потерю сосудистой стенкой антиагрегационных свойств по действием урографина, ультрависта и омнипака, взятых в концентрациях 10,0-200,0 мкл/мл.

Слисок опубликованных работ по теме диссертации.

1.Болотова E.H., Сергеев П.В., Шимановский H.JL, Петрухина Г.Н., Васильева Т.М., Мифтахова Н.Т., Климаиова Е.В., Макаров В.А. «Влияние ультрависта-300 и Омнипака-ЗОО на функцию гемостаза»// X Российский национальный конгресс «Человек и лекарство» Москва, 2003, 122.

2. Болотова E.H., Сергеев П.В., Шимановский H.J1., Петрухина Г.Н., Васильева Т.М., Мифтахова Н.Т., Климанова Е.В., Макаров В.А. «Влияние неионых рентгеноконтрастных средств на функцию гемостаза».// 2-ой Съезд Российского Научного Общества фармакологов «Фундаментальные проблемы фармакологии», Москва, 2003, 71.

3. Болотова E.H., Шимановский H.J1., Петрухина Г.Н., Сергеев П.В., Васильева Т.М., Климанова Е.В., Мифтахова Н.Т., Макаров В.А. «Влияние некоторых рентгеноконтрастных средств на свертывающую систему крови».// Научно-практическая конференция «Медико-биологические науки для теоретической и практической медицины», Москва, 2003, 13.

4.Климанова Е.В., Васильева Т.М. «Влияние ионных и неионных рентгеноконтрастных средств на агрегацию тромбоцитов и их количество»// Пироговская студенческая научная конференция — 2003 «Вестник российского Государственного Медицинского Университета», Москва, 2003, 172.

б.Сергеев П.В., Климанова Е.В., Болотова E.H., Шимановский H.J1., Петрухина Г.Н., Макаров В.А., Полудницына Ю.В., Гольтяпин Ю.В., Кулаков В.Н. «Влияние

контрастных средств на агрегацию тромбоцитов человека in vitro»// XI Российский национальный конгресс «Человек и лекарство» М., апрель 2004, 335-336.

6. Климанова Е.В., Петрухина Г.Н., Макаров В.А., Сергеев П.В., Шимановский Н.Л., Болотова E.H. «Влияние ионных и неионных рентгеноконтрастных средств на агрегацию тромбоцитов in vitro»// Омский научный вестник, № 1 (30), март 2005, 148150.

7.Имамбаев М.С., Кузденбаева P.C., Макаров В.А., Петрухина Г.Н., Белозерская Г.Г., Мапыхина Л.С., Васильева Т.М., Климанова Е.В., Жидков Е.А. «Влияние масла крапивы на функцию гемостаза»// Тромбоз, гемостаз и реология, №2,2005, с.51-54.

8.Климанова Е.В., Петрухина Г.Н., Макаров В.А., Сергеев П.В., Болотова E.H., Шимановский Н.Л. «Влияние урографина-76% на свертывающую систему крови кроликов» //XII Российский национальный конгресс "Человек и лекарство", М., апрель 2005, с. 762.

9.Клнманова Е.В., Петрухина Г.Н., Макаров В.А., Сергеев П.В., Болотова E.H., Шимановский Н.Л./ « Влияние ионных и неионных рентгеноконтрастных средств на свертывающую систему крови кроликов ex vivo» // Экпер. и клин, фармак.; 1; 2006; 6064.

Ю.Болотова E.H., Климанова Е.В., Петрухина Г.Н., Макаров В.А., Сергеев П.В., Шимановский Н.Л. / «Изучение действия рентгеноконтрастных средств на тромборезистентные свойства сосудистой стенки.» // XIII Российский национальный конгресс "Человек и лекарство", М., апрель 2006, с. 72.

Подписано в печать 1 f. О JG 7 г. Формат 60x84/1 б. Тираж 100 экз. Заказ №161 Отпечатано в службе множительной техники ГУ РОНЦ РАМН им. H.H. Блохина РАМН 115478, Москва, Каширское ш., 24

Лкттимюсп. тсмм. О шспжиис врем* рсятгсяошгичгст) эрчашно о «ктойнни различим* оргммв и систем ирпми lui

КОбМШШуЮ iL« >С1*1ММ«1И« п ьымэепимк нтмогмчссюес гаакшй. a пкже центром л» тффвепганапъю приводимою ярки н я Неполновлинс ряинчиых видов рагтгеиаэагпчеекого иссделиишШ 11ШНЖ1 получить обиктшшое рсиискчвсию » куражен не

ПрШТМЧКЖН «ЮбОП ■ПК'III ЧС.КИЧМГСЙ*« ШШ. l'A' 1ССГВСШI ИЛ ИМПрвСПЮСГЬ папсЯ «влияй достаточно It для иссдслокшпя KQCTii о vi ft яио го winnpaia.

I. rip троила. llC'iCun. 6[wnw». нсужм, нггсепвИНН «mtpacrmtcik когармч идаеппмпа, мпндыдот рсы псжжом ipgctMK срйдспа {РКС> По свойетмы РКС .ми 1и рапкмнсгвппине и К периыы огиоежг пак. : {Пл. кислород, ксенон и лрлтис> Их ■ п прлрмио» 4x111«. амабодчйЦНО вшиший В грущу рсотгоюимипшиых РКС ищи Mu.-p.iui вещества, яогдоч иной пне ренттюисич юлучемне luBifcrH* широки паииьлкп препараты. одэержандо Оарий к Пол.

ЙОЛСОЛФШИИС pCHTTOlOïdinpiCTlIlIt (рСЯСГМ 1№фП№Н»К11 на IKJHMHC II

1 прс^ПВшДМ билыной выбор la pcniífHOKOHjpaemLK препаратов однако. вес она в кикой-тибо истинт wrueftítHiwiirt рилнчине актсш тритии*», я и™ fm 215]. Bp «mm« клинических и ПСС может

I Ol крокпгмгниП. tu И rpowúoMífi Ora u«, препаратов я кпшншиЯ прелине в прекпмемп о исминичс иилсПсцт жмм »груяттяьтт, с едтЛ страт лропнанфомиле тпнкмн и ивнрапдсшиэета нарушений си стороны сверплшкянеН системы вроет при ппсленпи рснППнллнтрэСШЫх средств. й с друтИ стороны - рпрабогку ыетолде прсдуирежамш пшбиых кк.||"*11сннй Слелуп отчслгтъ, что • мспншсс »рем* лршт»ч«вд не с}ВК1цп вемтини и тффелтшых исликкчечтотих рлщтикЬ спдаЛны* при профилактическом ше.хянн синит. чпетигу побочных ввленпЛ со стороны сксгсчы гемосгла пр|г

ЧеЯМИТЧиН ВОисвкТНШ рситтсжконтрвстнш срсдст и* сискчу свершыин* крови «илвстсв тиой цдачеП. решение которое стумп иесйцпличым ус.юшкм ли снижения риска рлшипп ослласпсниЦ при применении 1'КС. Таяли 11рслСиа.истс1 цедесообриниП ра1ра)лпка подходов к фарчяко.кн и'1секи* профи,такпскс мчникнйваим идрушсннП функции с*ергикиошсй счечечы крем. обуенамимш »елгииеч рсинеиолспнржтим», препаратов в орездтч иялк-шжвдаваиий. ЦсЛЫО дшиичо мскямашм явилось 1пучсш1с ЯЛМаггля мом№ж Г?рс«|Мф||ы.?|УЧ 'ЗДюпПк'. !е[Н(тагг*| м 1гсйсн1кМЛ (ультравиет-ЗСО "КсЬспп^", Горшни) и омиммк-ЗОО "Ыкечне^, Норьеги!» рсипсикягграсгны* средств и« евертшокиц>г> ешетечу кропи н рач*Гютжа флрилгогнч ичо.кпй профилактики рагвнтив нарушений течения (смостличйших решшй. »ы1шииых мс.тснвсч ЛВИНЫХ ДНа11ичггичсскмч ирешрти!,

Мичи ИКЛСЛЗМПМ, Нчучешк лейстоия рснтгеиокоитрастиы* среде» иа синему •еиосгаха. в также р*1роЁапса чеши чсдикаЧспкпноН приф|иам иш рашптна иврунюмП прикеш «ерчыааиив вроам при нве.кннм * (фгшилн ЦоМтО урографинд и ппокша оыиипйка ■ удцрюнст« нрелпнреле.ныв решение слсл) киник ладам

I- Оисмпъ вошвашое влияние исследуемил препарата Ш агрегашПо тромбмик* человека в опыт т ч41п»

Пингтичсснт hhhhmocti. РирЛлми проспи i трсб}*ишя дарогостсчинк рештаки и обсрулошиы ютпяшш opçii 1и1Врс«.кИис !(*>4(Hj(VriKcicirt»ih« CBOACIB акудисгоа crami mu ri емокан tpeeniitt epcjet» ÍUiihoi мгпмма пиита wuuigicinix отученкс шгтегрспмкко снижения normt штигрегшиоиинх сжлмтсимА *летелвд «сияв* при мтсЯстми m тосклив seow-wfio л Dilución Крине roio, предложит нрншшпиллыия eseua фариаколилгчсскай lliitaiaiui. ч№ премжпимк S-rn . мдаи* препаратов и-? шиннашвдшти жи^иыл т,кп вроартрншп потерю с осудил оЛ cramait ipotifioprutcfcimiux своПст» после ишпиа » сосудиста р}сла рвлпитнпркпш средств

1 [осле oiipcjc.itiittuft нолнфпяаШп- Лонный метол ишяты ноаоет Применяться « КЯШМЧОМНЖ yCMHUX .111Я 1фсл>прсж.1си1ш pgtiutllim (Ulli.|tl( WKCKIU pftWIUI* Crt CTOpöir« «Кр(Ы№Ю«исК «ИСТСЧЫ Крови при проведение реттаюжинчесиих нсслсдомииП

Airp/амия раГтш JliKrtpt шиюпнпя работа яшмянма нв «сдапии проблемной комиссии .J limeña г емче тли» |ЦЦ РАМН. Отлитые фрагменты pafknu Gm.™ предстпясш il» X. XF. ХШ ПмиШнюм имимиалыми конгрессе «ЧслтЕК и лекарствип (200), 2004. 20061. 2чш Гмцс Российскою I Научного (Mhiiccib флрмак1.\ю| ein 120031. llayaio-cipuK'iK'ircMifi конференции ■Mc.iimo-6lio.liM и'1ссю1Е irajni .vi« тервппиявй и практической медицины» (2003) н ПнролжюИ студенческой пцчюА конференции (300$)

Петиции По теме днсеертэдиоиняИ paßaru опублшпмашо 10 печатных робот.

СШКПН H röMM iWWtmBiHil. Дисеериамвдим prfore объемом 12» страниц состой i ni авеленнк. обюра jaiqui^u оплынмя материалов и чею.кш. Пят; ■нмртнныынл част. шешочши, ВЫВаЛоя Работа содержиi И таблиц и (7 рисунна Список литературы включает 33 «гтечсспешмк i« ДОнмсцишш работ цир^т-Ш и петитные улырагшст-ЭОО м оыилнм;щыи влиянием iu систему свергмшипя кропи IMCI1* II выраженность шч.юК гыш весдедусмых ГКС ПН* фоыбоито* и р í от "рнмллсиюстн * нгтралпых средств, « «н стр>кт>ри н фиш

Itniiiiull урогртф||11-7(Ль и iuwhiuuí ^.тьтрааист-МЮ и оиншых-wh) обпалшш «0)11ич 1ффвКГМ1 - опошл tptim&opcïflcicluhi* Wile I h* сосудист 0* ÇTdini иралрагов п-3 полпиамсышглимх жирных КНС*Н ПрНОМЛ BOHfM |рМСб(ф«МПСИ11ШХ свойств «кулмстов стсипЯ, поиквуп воисйстшсы роттюмцптжген* cpe.icr»

выводы

I. У (Vil рафии. y,ibrpaa»et и очнинак л лшоимс пмюпраци! 40-500 mewWi peí tc ие праимяит

2■ У pa граф нн. удыравНсг и оиинпвк в ннщешршшвч 10-500 мвлгмл in «im лнаивнсимо полдники тромбоцита* человека. иилуинроаанн)» A/W>, u уросрафипа ■ средней jlBâl ностчесжой дик ( IJ н.ь'кг веса | сопровождаете» слабым нишОнропанисч свср1ыааикв Ером □о нисышечу и внутреннему нуги. Введение > poi рафию и ыэссичильтй jiiaiimcni4eeifo(l .кис (3.0 «.те пси) прняодит к укорочен ню АЧТВ чере) 2 » 24 часа после кифушн. но снижает агрепшшо тромбоцитов в период 20 чииут-24 'laca после печам «слсричента

4 Внутривенное введение «импщч неионного ультра виси » док 1.3 или ne« шшнет >хо]№кпис ЛЧТВ it ПрОГрОЧбНиОаоГО вгрсчснн ЧсрС! Cyrill HIX,«с ПаЧаДа эксперимента tip« увеличении лик до 3.0 мл'кг веса раданвоетс* слабое снижение агрегации тромбоцитов чере» вречеми черт 24 часа носае начала твсНСрИмеига, Но ие шт на ЛЧТВ.

5. НснОниий оынинав. введенный жнкчным в док 1.5 мд'кг веса, укорачнаас! иротраыбиноаое apcut и снижает чроаень фнбрнпошеа в ОпашИ черо 1-24 чаев нос.« начала Орала, а также поминает уровень про;ц ктчи якрорввш фибркпа и фибриногена черет 20 иииут-2-i часа после нони в iuMho.kAci вив а 1ечеНИе всего периода наблюдения уротрофняв. улмравнетв и омннп введении яро.» ком ne emano с ПрНи*а.1ежЯ0СП.К> Л

5-ТИ ЛНСЯИое янутрпыышечное ВВСЛСНИб Крмеам pfctfteio лира в л»ж 2.5 мЛ'Вг День (75.0 чкл'кг лет. iv l Г1НЖК') in vino частично Предупреждал потерю сосудистой сгонной ыинирсгвиноинмх »оИсгв по дсЛстянем урогрв+ина. улириюп н очпшпляа, виты* в кОНнспгрлпкяС (0,0-200,0