Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Нарушение функции мононуклеарных фагоцитов, противомикробной резистентности организма и фармакологическая коррекция при экспериментальной спленэктомии

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РСФСР ЧЕШШИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ВДЩШСКИЙ ИНСТИТУТ

НАРУШЕНИЕ ФУНКЦИИ МОНОНУЮШАНШХ ФАГОЦИТОВ, ПРОТС1ВОМИКРОЕЮЙ РЕЗИСТШТНОСШ ОРГАНИЗДА И ФАШАШЮГИЧЕС&Я КОРРЕКШШ ПИ! ■ ЭКСПЕРШЯНТАЛШОЙ СПЛЕНЖШШ

14.00.36 - Аллергология и иммунология

Автореферат диссертации на'соискание ученой степени "кандидата медицинбких наук

На правах рукописи

•ЛИВШИЦ Григорий Ефимович

Челябинск, 1991

Работа внпалнена в Челябинском государственном медицинском институте.

Научный руководитель:

доктор медицинских наук,профессор С.Н.ТЕШЮВА Научный консультант:

доктор медицинских наук,профессор В.И.РАТНИКОВ Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук,профессор А.Н.МАШСЕИЙ

доктор медицинских наук,профессор И.И.ДОДГУПИН

Ведущее учреждение:

Институт клинической иммунологии Сибирского филиала АМН СССР (г. Новосибирск)

Защита состоится "_" 1991г. в_; часов

на заседании специализированного ученого совета

Челябинского медицинского института (454092, Челябинск, ул.Воровского, 64).

С диссертацией можно ознакомиться в- библиотеке Челябинского медицинского института.

Автореферат разослан " 6 ' 1991г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат медицинских наук Н.И.ЖГАЛОВА

■дэл ртаций —йтя

ОБЩАЯ ЗЙРАКТЕШСТШ РАБОШ Дальность :ссследоваяия. В настоящее время оперативное

налете селезенки проводится по поводу травматического поврея-;анкя, а такка ятрогенних травм органа в ходе абдоминальных операций, при лечении больвнх с заболеваниями крови и другими сос-'ойниями, сопровождашимися спленомегадшей (тромбоцитопеническая урпурз, вроздензнй шкросферодатоз, СПИД), в трансплантологии ля уменьшения интенсивности реакций отторгения трансплантата Sherman R. ,1984; Alexandre G.P.I.et al. ,1985;Aliwari O.E. Л a1. ,1987; Jfethaw A.et al. ,1989).

.Длительное время удаление селезенка считалось абсолютно безродным для организма. В 70-е годы XX века появились гаогочислен-ые публикации о высокой частоте развития инфекционных ослояне-ий различной этиологии и различного характера у больных после пленэктомии <СЭ) { Warren W.D.et al. ,1984; Mo GuskeyEJS., 985; Dawes L.c. et al. Д985). Среди этих осложнений наибольшую грозу для жизни пациентов представляет, по данным литературы, азгзитие сепсиса, вызванного пневмококками, стафилококками, стреп-ококками, а такхе бактериями кишечной группы (bockwood с.и., 983; Schroder Н.К. et al. ,1985; ШгаиЪ A. et al. ,1987).

Так, частота инфекционных осложнений после СЗ у людей колеба-ась от 14 до 29%, хотя при других оперативных вмешательствах не ревшала Ъ% (Bernt Ly et al. ,1981; Carl stoat A. et al. ,1985). иск смерти от тяжелых бактериальных инфекций в общей популяции юдей в "о^сте до 14 лет составляет 0,05$, в то время как пос-з посттрар,магической СЭ он увеличивается чегырнадцатикрдтно, зксимален риск у детей в возрасте до I года ( Pedersen F.K., Э83). После СЭ по поводу тромбоцятопанической пурпуры и сфероци-эза риск смертности увеличивается в 31-58 раз (Eickernan i.D., Э76).

Статистика инфекционных ослогнений и смертности после СЭ послужила основой дай формирования представления о закономерном развитии шшуно дефицитного соотояния (ИДО) У больных, перешсиих операции удаленая селезенки ( Cbaikof B.L.et al. ,1985; И. Са-taldo S. et al. ,1987,* Piapl V. et al. ,1989)..

Литературные данные о нехешзыо постепленэктсшческого ИЯС свидетельствуют, что у бальннх после СЭ имеется вырагенные дефекты гуморального шаунитета, что проявляется уменьшением содержания иммуноглобулинов разных классов, нарупзнием транспорта В-лкы-фоштов, их пролиферации в даффзревдарсака. СЭ приводит s изменениям числа и соотношения димфоиднах клеток периферической кро-еи, соотношения субпопуляцконной сгруктуры Т-кяеток, а такге к нарушения кдеточно-клаточной кооперации. Снижение выработки БО после удаления селезенки вызывает нарушение органозависиних связей СКуи Н.Х. и др. ,1988; Billiar Т.Е. et al. ,1988; Choelyn-Curtia 6. et al. ,1988; Woag W.C. et al.,1988; Freye Z.M.et al., 1989).

Более скромными является данные литературы о поражении функции профессиональных фагоцитов после СЭ. Так, продемонстрировано снижение реактивности купферовских клеток к ЛПС е.coli (Billiar т.et si,i9B8 ), снижение-бактерицидном® альвеолярных с сохранением фагоцитарных функций (Tien leu H.et al. ,1983), транзитор-ное нарушение фагоцитарной функции альвеолярных Щ, изменение числа мононуклеаров а профессиональных фагоцитов в периферическом кровотоке ( Bbennib H.et al. ,1983; Cioi.fi W.G. et al. ,1985).

Этим, по существу, имеющиеся данные о состоянии макрофагадь-ного звена иммунитета посла СЭ исчерпываются.

Достаточно высокая частота СЭ и связанных с ней инфекционных осложнений делает актуальной проблему изучения механизма пост-спленэктошческого ИДЗ, поскольку адекватные метода терапевтичес-

есоЗ коррекции могут бнть достигнута леев о учетом достаточно тодробных свэдзннй о патогензгэ данного состоявши В настоящее зрегля прогресс з сфзро тактики задопяя большие, пуздаплзася в хп-эургичэском удаления сэлаseras:, саяззн о использованием садящих способов операции, примэнешом техника сштонознрспания при тоталь-îo'3 удаления органа, проведением интенсивной а длительной антл-Зиотакотераши, профилактической т^мувпзации оперированных больна: с помошьо поливалентнкх шгезакясоикханх вакцин, пешздоглика-юа и ЛПС бактерий кишечной группы (Гринев U.B. и др. ,1986; ЗЬег К.G» et al. ,ISB5; Hotert <3.0. ,1287;СапМ.о G. et al., CS88). Формирование представления о постсплэнэктоиичоском НДС и ¡го патогенеза привело к попнткам использования заместительной ?врахши с помощью коммерческого иммуноглобулина я сплеплна. Од-1ако эти попытка являются немногочисленншгя, а результаты п:: нз-щпозначншли (Терехов Н.Т. и др.,1386; Lang J.M. at al., !9S6 ;0f f eabartl К.et al,1987).

Таким образом, целенаправленное изучение различных звеньев '.атогонеза ностспленэктомического ИДО, а такке апробация з экспе->имэнтз различных фармакологических препаратов с. тестированием вменения йротзпзомикробной резистентности'организма под влиянием тах препаратов представляет несомненный теоретический и практк-еский интерес.

Цель п задачи исследования. Целью работы явилось изучение арушешй функции паритонаальных Щ> и оценка прогавошкробной езистентности организма после экспериментальной СЭ, a такге равттельяая опенка эффективности некоторых фармакологических репаратов щш этом состоянии.

Ди реализации пели были поставлены следующие задачи:

I. Анализ изменения функциональной активности перитснзальянх

макрофагов в различные срока после экспераменталхной сплзнэкто-

ШИ.

2. Анализ нарушения адшшвацш антигенов и резистентности организма к инфекции после салензктогшн.

3. Сравнительный вналзз влияния ишуноиодулятороз на устойчи вость животных посла сдленэктомяи к экспериментальной инфекции.

Научная новизна. Впервые в эксперименте проведено целбнаправ ленное исследование функциональной активности перитонеатьинх мак рофагов в разные сроки после удаления селезенки и получены новые данные о конкретшх механизмах формирования вторичного ишуноде-фпцитного состояния после СЭ, связанных с дисфункцией клеток С!.!Ф и определяющих нарушение афферентной и эфферентной фазы имыунног ответа, сшкение цротивошкробной резистентности организма.

Подучены оригинальные данные относительно различной эффектна ности фармакологических препаратов. Установлен положительный эффект тафтцина и лиешна на уровень антиинфенционной резистентное ти после снлензктоши и отсутствие эффекта со стороны Т-активина и продигиозана.

Практическое значение и внедрение полученных результатов. В работе представлено экспериментальное обоснование направления фармакологической коррекции после сшхенэктодаи с помощью препаратов сплешхческого происховдешя, что ысиет быть использовано дяя последущей клинической разработки проблеш.

Материалы исследования внедрены в учебный процесс кафедры иммунологии и аллергологии по разделу "Цриобретенные ивдунодефи-цзтше состояния", а гакга кафедры фармакологии в разделе "Имму-нотропные препараты". По результатам работы принято Челябинским медицинским институтоы и внедрено в иммунологическом отделе ЦНИИ

в иммунологическом отдала ОТТВ и на кафедре «агробиологии рационализаторское прадяозение "Способ определения клиренса неопсони-зированной в.-бурЬ1пгагхша из бршаой полости в эксперименте" (й 24 от 29.12.90).

Апробация работа. Результаты были доложены на республиканской конференции по актуальным проблемам охраны здоровья матери и ребенка (Тбилиси, 1986), на IX мвяинститутсной научной конференции "Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях"(ЧелябинскД988).

По тема диссертации оггублшсовано 8 работ.

Объем в структура диссертации. Диссертация представлена на страницах машинописи и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, собственных исследований (3 главы), заключения, выводов и списка литературы, включающего 260 источников, из которых 54 - отечественных и 206 - зарубежных. Текст иллюстрирован 35 таблицами и 5 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И ИОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Эксперименты были выполнены на мышах линии СВА и гибридах (СВАхС57В1б) массой 20-25 граш. Еивотнне были получены из питомников АН СССР "Столбовая" а "Рапйолово" и содержались в условиях вивария на стандартном пищевом рационе.

Все нивотные были поделаны на 3 группы. I группа - интактнне, 2 - ложнооперированнш, 3,- сшгекгктомврованные. В качестве контроля использовали две группы животных: пнтактныо и логноопериро-ванные. Исследования проводились на 3,10 и 30-е сутки и в некоторых случаях на 180-е сутки после удаления сед..:.енки. Всего использовано 1610 животных.

Спленэктомия проводилась под обпим эфирным наркозом с соблю-

дением правил асептики и антисептики. Оперативный доступ осуществляли через разрез в левой костовертебральной области. После перевязки ножки органа селезенка отдалялась шаштт. Лоанай операция проводилась аналогичным опоеобои, за исазотедаем перевязки и удаления органа.

Клетки перитонзальяого экссудата (ШЗ) у даней получат на 4-е сутки после стхщуяяцпп педтоктпм бульоном ист баз стимуляции.

Обогацэвие ыагфофагадьаой фракции КПЗ проводили методой адгезии на пластика. Таким образом удавалось получить попуяящго Иф с чистотой до 90%. Жязнаспособность шхэток оценивали в тесте с трипановнм санш. Сусшнзшз клеток cseosshket получали по общепринятой методике Р.В.Пагроза, Ю.М.Зарецко1 (1965). Подученная таким образом суспензия кагатОк состояла ва 85-S0? яз жизнеспособных клеток. Для воспроизведения ¡экспериментальной инфекции использовали лабораторный шташ s.typbiiaurtum Ja 39. Его вару-* лентность дата зшвоггаых исследуемой популяции установлена ©кспери-ментаяьно. Число микробвдх клеток, необходимое для гибели 60$ животных, рассчитывали по иетоду Рида и йзнча, описанному Ф.С. Носковым (1985).

Функциональную активность пернтонеальшсс Mg оцешзала'.сле-дущими методами: адгезивнуэ способность перзтокеальнш: Щ> - по A.S.Emrepy с coast, (1930); способность к распластыванию пери-тоне альных Щ - hp методу Н.Rolleg, я. Degrs (1982); Рс-розет-кообразушую способность неритонеальных Щ - по методу z.Ear-Shavit et el (I979)i ^-опосредованный фагоцитоз опсонизиро-ванннх ЭБ - по методу Z.BsavSbavit et al. (1979); фагоцитоз частиц латекса - по методу И.С.Зфейдшш о соазт.(1976); фагоцитов St.aureus - по методу А.В.Carpenter et al« (IS8S); внутриклеточный гошплтр St.aureus - по методу A.B.Carpeater et al. (1936); спонтанный и индуцированный ЕСГ-тесг - по него-

ду Н.Гагоег et al. а готдефавацзя А.Н.Ыаяшхкого с соавт.(1977); определение ллзосокальной активности - но штоДу Й.С.ФрсЙдяин с соавт. (1976); гптягешразвнтувдув йуякцш Щ - по методу В.Г. Галактпонова п Т«В.АЕфэдовой (1974)? тост очпшзшя бршзоЯ полости от B.tsrpbicmriua (с опсоназатдаоЗ) - по методу D.Briles ■ et al, (IS8I); тест очипания бршной полости от s.typhimiritia (без онсонязагцш) - в наша кодификации; определение уровня сывороточных ЩК - по методу В.Гагосовой с соавт. 11978); изучение летальности лонюоперирозаплих и сшгзнгхягсизроаашш: еивогных, инфицированных Q.typbijsuriua , з условиях шаунокоррокции.

Полученные данша обработав отатаотагаесяа. ДосЕоверноеть различий оценивали при покош как пзрз:.:огричсс~ого критерия (критерия Стьидента), так и шгодоэ ЕепзрзкейрзческоЗ статистики (точный метод Фишера, критерий Коль*огорова-Сй.яряова). За уровень

<е

статистически значимой величины принимали р ^0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ В результате проведенных исследование установлено, что в ранние сроки посла СЭ проявилась как траненторяш нарушения, так и устойчивые, сохранявшиеся и в поздние сроет наблюдения. Все

данные верифицировали по отношению к показателям,- подученным в

» *

контрольной группе ложнеоперироватшз енвотнш:.

К транзиторнам следует отнести: изменение много-, средне- и мылорецепторнше Fc-P0K э обшей популяции росоткообразуших клеток перятопеального экссудата, изменение показателей адгезивной способности Уф, ЕЕтенсиБиостп спонтанного HCI-теста и лизосомальной активности, а такае нарушение внутриклеточного шшшнга et.aureus перитонеальаыми Щ>.

К устойчивым изменениям относятся угнетение поглотительной стадии фагоцитоза st. aureus , ентигенпрззентушей функции Щ),

а также нарушение аяиминациЕ АГ.

Анализ ранних транзиторных нарушений перитонеадышх Щ у животных после СЭ позволил отметить, что на 3-й сутки после операции увеличивалось содержание многорецепторных Рс-РОК (р< 0,001) и снижалось относительное количество средне- (р* 0,01) и ыалоре-цапторных (р< 0,001) клеток. Наблвдалось повышение лизосомальной активности (р<0,02) и ее интенсивности (р<0,001), а таете интенсивности спонтанного НСТ-теста (р<0,05). Кроме того, регистрировалось снижение внутриклеточного кшиинга st. aureus Ср <• 0,01) в сравнении с аналогичными показателями контрольной группы ложнооперированных животных.

На 10-е сутки после оперативного вмешательства сохранялось нарушение субшшушщий иало- (р<0,01) и ыногорецепторннх клеток (р <0,001), наблюдалось снижение адгезивной способности <р^0,С5) перитонеадьных Щ. Индекс суммарной люминесценции лизосом, повышенный на 3 сутки, достоверно снизился на 10-е сутки (р<0,05) в сравнении с контролем.

К 30-м суткам наблюдения все вышеперечисленные показатели функциональной активности перитонаальных Щ возвратились к уровню контрольных цифр, .

По нащеыумнешв, одним из возмогшее механизмов транзиторных нарушений функции перятонеальных Щ в ранние сроки после СЭ могло быть нарушение субпопудяционной структуры Щ, т.к. известно, что селезенка является местом сосредоточения большого количества Щ и областью их дафференцаровки (Иаянский А.Н., Цаянскнй ХН., 1989; Токиаков A.A. н др.,1989; ObozsJoL К. et al. ,1983; «agar в. Д985). Нарушение дифференцирован йф могло повлечь за собой появление незрелых форм в брпшой полости и обусловить появление самых разнообразных нарушений функции Щ.

Полученные в наших експервыентах данные о нарушении иакрофа-

гадъного звена глогшо таказ объяснять сншгеззем уровня биологически активных веществ, учасгвугаях 2 рзгулдаи паритонеальных Щ л. активно секротирузмш: салазонкоЗ (Шааова !1.Е. и др.,1985; ноп т. вЪ а1. Д931; АкзагйЪ Й.Й» et ей. Д982).

В целом, пояучдшшо дзшшо свядзтзльсгвуюг, что СЭ в ранние срохог (3 д Ю-сутки) приводят к измааешз целого ряда показателей функциональной актнвноста серитонзальша Мф. Очевидно, кратковременное нарунзпяз этих кештзш» нгрзот определенную роль в патогенеза ситная гсротявсЕнфзглионяоз розлсгавтностн организма, что согласуемся о даннаия литературы о максшхзяъпом риске развития постсплензктокзческиг о&яоЕйений у бйльшк в ранние- сроки посла удаяашя селезенки.

Устойчивые дефекты йф, ■ возяикатав в связи со СЭ, проявляются уже на; рапша стадиях посла операция л сохраняются на 30 и 180-е сутки наблюдения. При этом, нарушается как афферентное, так и эфферентное звенья иммунного''ответа.

Выявленное ваш достоверное ешмшо ДГ-дрзЕОНтущзЙ функции Щ на всех сроках наблюдении посла СЭ, в том чпелэ п в отдаленные сроки, имеет прянщгоиальяоз ззачапао в связи с важной ролью АГ-прэзентации в инициации полноценного Иммунного ответа организма на АГ и осуществлении ишушгого надзора. .

Данные о нарушении АГ-првзеягувдзЧ функции Мф получены методом адоптивного переноса сингешш пршшр'ов'ашвк. ЕВ Щ> ог доноров (интактных, ложнооперировашхше й сяязйэктомированннх мышей) иитактным мшам-решпиентам,., Через 5 суток определяли абсолютное и относительное количество АОК в селезенке шшЗ-рвцшшантов. Как видно из полученных дашйк (рисЛ), удаление сатззенки приводило к более чем двухкратному сникании как абсолютного, так и относительного содержания АОК-в селезенке ишей-решгпиентоз.

В сникании лГ-презевгушей функции могут участвовать, по на-

Рис; I

ДОК на 10° кариоцитов

300

250 200 150

100

60

з да

ю дней зо дай 180 дай.

о

-Т-

400

350

300

250 200

150 100

60

аок вооад08эее9 X 10^

4

гЬ

4

ь

■ь*

.р, *

з да ю дан зо даш ш даа

ОЦЕНКА. ШИГШНРЕЗШТЛЩа ФУНКЦИИ ШСРОФАГОЭ ПО КОЛИЧЕСТВУ АОК В ОЕЖЕЗЁНКЗ ШШШ-РЕЦЩШГГОВ В РАЗНЫЕ СРОКИ ПОСЛЕ ОПЕРАЦИИ.

* - ДОСТОВЕРНЫЕ РАЗЛИЧИЯ мщу ОПЫТНОЙ И КОНТРОЛЬНЫМИ ГРУППАМИ.

а

шзыу мнакшэ, следушка механизмы: нарушение прелого контакта мзнду и Т~лнм$овдташ, связанное с удалением селезенки, снижение доли селезеночных Т-амплифайеров, контролирущпх генерацию перитонеальннх АГ-прадставляпцйх Щ> (Anabaugh D.F.et al., ,1978), нарушение уровня БАВ, в частности тафтцина, который потешдарует имыуногенное действие MJ (Phillips J.H.ct al. ,1981; Najjar 7.л., 1981).

Нарушение АГ-прозентужмй функции, как аффекторного звена иммунного ответа, монет повлечь за собой выпадание ванного звена в специфической защите организма - очищение организма от патогенов и повлиять на антишфекционвую устойчивость организма-. Поэто- ' му на следующем этапе навей работы ьга оценивали зффекторкуа стадию иммунного ответа с поиощыэ теста очищения брюшной полости от s .typhimurium , определения уровня сывороточных ЦИК, изучения активности и интенсивности фагоцитоза St.aureus перитонезль-ныш Щ.

Для того чтобы определить фагоцитарнув активность перитонеаль-ных Мф к живым микробным объектам,!® использовали в качестве мишени St.aureus . Как показали наш эксперименты, на всех сроках наблюдения после СЭ происходило достоверное снижение (р < 0,001) числа фагоцитируших Мф в группе сплэнэктомированных животных по сравнению с группами лозщбоперкровашшх и интактных. Также был достоверно снияен показатель интенсивности фагоцитоза (р< 0,001) в группе спленэктомированнах животных в сравнении с контролем.

Необходимо отметить, что в наших экспериментах показатели фагоцитоза частиц латекса и Рс-опосрздозаншй фагоцитоз SB перито-неальннми Мф у спленэктомярованных етвотных не снижался по сравнении с аналогичным показателями контрольных групп. Ыокно предположить, что нарушение поглотительной фазы фагоцитоза при СЭ но-

сит селективный характер, поскольку проявляется только по отношении к микробному агенту и моеэт быть связано с нарушением экспрессии рецепторов типа шмегрянов.

Одним из вероятных механизмов уменьшения поглотительной активности Щ моает быть снимание способности Щ спленэктошрова'н-ных ШВОТ1ШХ к кондиционированию среды в условиях v3.tr», нарушение субпопуляцвонной структуры Щ> и появление среди них неустойчивых к действию биологически активных токсических веществ, выделяемых патогенными микроорганизмами.

Оценивая элиминации мцкробншс антигенов , щ прово-

дили тест очищения брюшной полости с культурой б^урмггигзлз. Выбор культуры для оценка клиренса шпсробнюс агентов к противо-микробной резистентности организма обоонован данными ряда авторов, констатировавших, что у мыией главное значение в заапто от введенных внутрибршинно 8.4трЫивд;1вд1 принадлежат перитонеаль-ним 1.'4>, т.к. механизм бактериолиза у .этих еквотных отшэн из-за отсутствия С9-фрагыента комплемента ( а!» ,1987;

Маке1& Р.Н.е« 01. ,1988). ' 1 '

Тест очищения брюшной полости проводили в двух постановках: с неопсонизированныш и опсонизированнши бактериями. Клиренс неопсонизированных микроорганизмов из брюшной полости на всех' сроках наблюдешя (3,10,30 и 180 суток) был достоверно снижен (р<0,001) у силенэктомированных зевотных по сравнению с иятакт-шми и логнооперированнши. Иллюстрацией этому служит рисунок 2, где показано, что количество жизнеспособных шкроорганизмов, высеваемых из бршной полости через 4 часа после введения, достоверно превышает аналогичный показатель контрольных групп на в~эх сроках наблюдения.

Во второй серии экспериментов тест очищения бршной полости

был проведан с той se культурой бактерий, но предварительно оп-сошзироваяной специфической антисальыояеллбзноЁ сыворогкоИ.

Анализ полученных в этой серта данных показал, что на 3,10 а 30-е сутки посла СЭ -число жизнеспособных ышфоорганизмов, высеянных из бршноЁ полости через I час и 4 "часа после внутрзбрнь шинного введения, достоверно не отличалось во всех сравниваемых группах shbotehx. "

Применение опсонизированных микроорганизмов в этом тесте нивелировало подученный феномен, и скорость клиренса в группа сплен-эктошрованннх животных на отличалась от контрольных цифр.

Наши эксперименты согласуются с едяничнша рабо.ами о том, что удаление селезенки приводит к снижению клиренса патогенных микроорганизмов, а предварительная опсопизация микробного антигена сникала этот эффект и восстанавливала клиренс (Brovm E.J. et al.,IS8Í). Полученные данные, вероятно, являются доказательством дефекта перитонеальных Щ и показывают, что после удаления селезенки Щ> in vivo полноценно элиминирует только готовке, опсонизированнне частицы и неспособны к элиминации натйвных микроорганизмов, что подтверздено нами и в экспериментах in vitro. После СЭ выявляется снижение количества опсонируших факторов, которое WGser быть связано как с удалением самой селезенки, так и с дефектом секреторной функции макрофагального звена, что не противоречит литературный данным ( Kein 2.et al. ,1989; Morri-esey P.I. «t al. ,1989).

Заключительная стадия иммунного ответа характеризуется не только нарушением элиминации микробных агентов, но и накоплением ЩК в кровотоке, в клиренсе которых активно участвует профессиональные фзгоцити.

В наших экспериментах повышение уровня сывороточных ЩК фор-

глзровалось в поздние срош после оперативного вмешательства. В ранние сроки элиминация ШК была коглпенсированной. Спустя 30 суток после операции уровень сывороточных ЩПС в группе сплензкто-мированннх животных становится достоверно выше (р<0,002), чем в обеих сравниваемых контрольных группах.

Механизм нарушения элиминации ЩПС из организма достаточно слонен и носит многокомпонентный характер. Одним из вероятных компонентов мозет быть дефект фагоцитарной функции манрофагаль-ного звена после удаления селезенки, зарегистрированного и в наших экспериментах.

Установив нарушение афферентного и эфферентного звеньев иммунного ответа в постсплензктомическсм периоде, мы провели исследования, позволяйте оценить общий уровень антпинфекциснноа резистентности организма посла удаления селезенки.

С этой целш мы сравнивали показатели летальности спленэкто-мированных и лолнооперированных швотных в условиях инфицирования з.йурЫтиг1ип как в поздние, так и в отдаленные сроки (30-180 суток) после операции.

' Через 30 суток после операции летальность в группе спленэкто-мированннх ответных была достоверно вниз и составила $0%, в то время как в группе лавносперирозанЕЫх животных - 40%.

В отдаленные срока после операции (30 и 180 дней) летальность в группе спленэктомирозанных гвдотных была достоверно выше и составила ЮС$, в то время как в группе лозшооперированных ги-вотных - 56%.

Выявленные различия в показателях летальности двух сравниваемых групп являются убедительным доказательством сникения резистентности организма к бактериальной инфекции в результате СЭ.

Полученные наш экспериментальные, а также литературные дан-

- is

ша о дефектах свогша CIS- воеводявд постулировать пологенпо о

фОрГЯШОЗЗаНИЛ ЩО 0QWXS GO.

На основада отого ш псщнтаявсь представить общ?» схему патогенеза псстсшшнэкто^ческрго ИДО (табл.1> и участия в нем пе-рптонеалькЕХ Иф. Как шдно йз схемы» ведущий звеньями патогенеза ИДО посла СЭ язяяшй яарушаша йуикшш швднвого надзора, икцрщого клиренса, . .вдутой рейршцаа.

Нарушение адушото надзора ыоает &m> связано со снЕкениеы ^чзрезептрйзй-йушсшщ Щ>, кагору® кы регистрировали в ваших sitenepiaiQitfax, а гшсгэ о нарушаем транспорта лшлфо4дааов п со- . ойзэусгвешш дасбалазсш каеадщЕ популяций и сшгашем накопления гнжатенной Ейорладаз»

Нарушения надуши» г>лйренса происходят как за счет снижения АГ-прздетаиштгЛ- (|уыщш lg> г ведущего патогенетического звена, -так и га счет дэфзнтса: фагоцитоза и опронззацяп. Эго подтвервда-&г и данные ваших явваехныешав. • .

Еарусеше аадшой ресу-ШШ,' во-зддовду» определяется уменьшением щюдушш ВДВ (ШФ», интерферон,. семейство щтерлей-кгшов, швдуашшобззшвоа), шщшещеы кааточно-шгетечннх взаимоотношений, ;-йГ-за2асимоЗ. стазст дяффаренщювкп Т- и В-лиыфоцзтов • н идаоЕШгвЕггодгогщшвоЕо2 ^ейузздш. Дэшше по нарушении иммунной регузшшх нзшютгмяенда и заслуживают посладузошей самостоятельной разработ;.

Весьма перспективной в вадаой в практическом отношении пред-ставляегся гак^ разработка способов коррекции постсшгенэктош-чесюэго 1ЩЗ с. кшоЕйв.разлйчнзх щаршкаяогичеакйх средств. Мы' провели экспврадёагашше. исследования влияния препаратов (проди-таозан, Т-актквпи, тафгщш, ляешн) на интегральный показатель уровня противоиБфещкшой устойчивости организма, т.е. показа-

Тейшща I

№Ш. ПАТОГЕНЕЗА m посдв сшшшошш^

нарушение ищунного надзора

нарушение

транспорта

лимфоцитов

даобадано ЕДОТОЧШХ

популяций лайфодатоа

нарушение накопления антигенной информации

снижение

антигенпвв-

аентуадеи

функций

макрофагов

нарушение

иммунного кдареноа

нарушение

нарушение

гуморальной

регуляции

регуляции

I

нарушение »

клеточно-

клетоша M

взаимо -

действий 1

нарушаниа выработка опецифа -чеоках антител

I

снижение уровня тафтщша, фаоронектина, компонентов комшюмонта

X

оввя

уменьшение *

бактериальных антигенов

поотопленэктомичеокоз*'

аде

* - данные получены в настоящей работе.

гель легальности 'в условиях нн$тщроваБ2я.

При выборе фарщшгюгичзсетх препаратов исходили ив следующих данных. Во-первых, бал взят продагиозав как препарат дщополиса-харидной црароды. Из литературы известно, что основные ишунора-гуяируицае эффекта указанный препарат реализует через активацию болнпшства факторов естествзваой резистентности организма (Да-

■Зг-

ззрэва Д.Н., Алехин Е.К.Д385), а *зкга пу?ем стартам выработ-ха ак'итэл (Збэрт Я.Я.,1968). Во-вгорнк, в работе был использован Т-актЕВян, являвдайся прапуршетвешо Т-клеточшзм активатором (Арион В.Я.,1231). В-третьих, учнтшая сзЕзстные факторы о физиологической рола селевзЕкз в шьзуяорегудящш, о^дастЕлязиой, в частности, тетранзптндсм тафтцанш ( ЕаЗЗгг Т.Д.,ИеЫоЬа Е., 1570), для повшкдаш аЕТШщфекщюнной резистентности органпгма был использован экзогенный прзаарат аналогичного строения - тафт-цш1. Крмла того, с етой ез целью использована суммарная вытяака иэ-селезенки, полученная методой уксуснокислой экстракция, известная под название:.-! ливиин.

При сравнительном шшяиае с^фокгивности пршавяешх препаратов (рис.3) мы ыоезн проследить показатели летальности 1сак в группах лошооперировашшх, так е в группах спленэктомированвых животных.

Как видно из рисунка 3, нрз еразшешп всех групп логноопери--ровашшх кавотшк, получавпах препараты, показатели летальности достоверно на отличалась когду собой и недостоверно были снкне-нн по сравнению с контрольной одушю!.

Сравнащю групп свлбЕаяаоазрававЕы: животных (рис.3) показало, что применение продикгоЕана м Т-активяна не оказывало протекторного дзйствея по отноаоаию к е«1-урЬ1шш?1иа и не сникало летальность в укаваншх группах. В етои отноиании оказались эффек-тевнши препараты, создааше на основе биологически активных

со

О

m p-t

швзвт* o/sr

вдата* од

í

ЯЕШ1 + О/Ж

шш + ш

шашап she о/$

о о H

о ш

ООО t- tfl. ю

о о

О Ol

' о

M

ншшг * ео

ШШ9£ + еЭ

шш + ео

ШЙЖШШ + 6D

шзяшш sas ео

га

а «

M

О О

со о

о о

a

ю

о

со

о

веществ, выделяемых с еле заикой - тафтщн в лзешн. Зги препараты, в отличие от продегиозана г Т-активина, достоверно снижали детальность в группах силена Етошровашых давотшх в сравнении с группой ложнооверированных.

Исхода иг лаптах литературы, одшш из механизмов реализации иммуноыодулирувдето действия тафтцина и додана могет быть активация ыагфофагальвого звена, нарушение которого было выявлено в вашх исследованиях. Применение этих препаратов можно рассматривать как своего рода адекватную заместительную терапию вторичного ИДС после удаления селезенки, тем более, что щг чененне тафт-цина и лианива у доююоперированннх «вотннх не оказывало существенного влияния на проишоммсробвую резистентность экспериментальных животных.

Таким'образом, дефект антшнфекциошой резистентности организма, обусловленный СЭ, эффективно корригируется изучаемыми препаратами сплевического происходденпя.

'вывода

1. Снижение уровня антибактериальной резистентности организма после спленэктомии является характерным признаком формирова- , ния ишунодефицитного состояния и связано с нарушением афферентной и афферентной стадий иммунного ответа.

2. В патогенезе экспериментального постсяленэктошческого ИДС можно выделить две фазы, связанные с дасфункцией веритонеаль-нкх макрофагов: гравзиторную и устойчивую.

3. Ч^аязаторные нарушения функции макрофагов, установленные в ранние сроки после операции, вюшчают снЕгение внутриклеточного киллиЕга, изменение метаболической и лизосомальной активности, а танке субпопуляциовныа структуры перзтонеальных макрофагов

й не регистрируются к 30-у суткам пабллдск'йя.

4. К устойчивым изменениям показателей фуакциоязльноа активности макрофагов относятся; нарушения антлгохшразодтутазЗ функции перитонеаяьных макрофагов и эламйнащй аазшгонов.аз организма, которые формируются в ранние срока поело сшшезктомпз (3 и 10-е сутки) и сохраняется в поздние и отдалешшз срош наблюдения (30 и 180-е сутки).

5. Выявленный дефект антиинфекционной рзззсткшюстя организма, обусловленный спленэктоипей, корригируется при использовании тафтцина ж лпениш» но не устраняется при применении про-дигяозана и Т-активзна.

список работ, опганковшых ео теш дасертащш

1. Лавииц Г.Е. Влияние шзкоыолекуллрного пептида тафтцина на продукцию антител после ешгенэктоииа // Охрана труда на про-шпшенных предприятиях: Тез.донл.конф.- Челябинск, 1985.- С.32.

2. Лившиц Г.Е., Шаман С.Н., Марачез С.И. Проблема оценки функциональной активности макрофагов после сшгенэктсмии // Охрана труда на промышленных предприятиях! Тез.докл.конф. - Челябинск,1985. - С.40.

3. Лившиц Г.Е., Крюкова I.H., Шамин С.Н., Погар В.Н. Некоторые показатели .клеточного и гуморального имиуготета посла сплеп-зктоиин у дете2 и в зкеперицентэ // Мат.рзсп.конф, по актуальным пробл.охраш здоровья матери и ребенка.*- Тбилиси,IS86,-С.77-79.

4. Лившиц Г.Е., Hosap В.Н., Шашн С.Н. Влияние епленэктомии на показатели общего клиренса // Факторы югеточн. к гуморального иммунитета при разл.физиологических и патологических состояниях: Тез.докл. к 8 шяяЕстит.конф.- Челябинск, 1966. - С.92.

5. Тепаова С.Я., Бор дуновений B.S., Кракова Л.И., Ливтщ Г.В.,

Погар В.Н. ■ ИедунагогЕГСвсвая дисфункция у взросла жтй в отдаленные срока после сплевэкго^Ез // Кроветворные клетки-предшост-венникя в кзхашзшх позраздвшя и конденсации систаю крови при действии на оргаюгзц экстремалБШд факторов: Тез.докл. к ешп.-Челябинск,1986.» С.20-31.

6. Лившиц Г.Е., Тешова 0.Н., %\ив С.Н, Изменение функциональной активности макрофагов посла -сяшбэегсшя в эксперименте// Патод.флзислогия вкстреиалькнх состояний. Патологические аспекты гематологии и ишзунологаи: Тез.докл. к 12 науч.конф.патофизиологов Урала.- Пзриь,1986.- СЛСВ-ПО.

7. Теплова С.Н., Шашш С.Н., Лившиц Г.В. Кэдноломгаеские показатели до п посла сшшпэггоыкп у детей с гваатссогичеснши заболеваниями // Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических а патологических состояниях: Тез. докл. П ыахивстптутскоЁ науч.конф.- Челябинск,1988. - С.126.

'8. .Еибшц Г.Е. Оценка антпгенггредставлящей функции перито-неальных макрофагов после саленэктошк в эксперименте //. Факто-.ры клеточного и гуморального иммунитета щи-различных физиологических и патологических состояниях: Тез.докл.ХХ- цегинстит.науч-конф.- Челябинск,1388. - С.75.