Автореферат и диссертация по медицине (14.00.15) на тему:Морфология первичного хронического бронхита: гистохимическое, электронно-микроскопическое и морфометрическое исследование слизистой оболочки

ц'З : i

АКЛДЕМИЛ МЕДИЦИНСКИХ НАУК СССР ШЧНО-ЖСЛЕДСВАТЕЛЪСКИЙ ИНСТИТУТ МОРФОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА

На правах рукописи УДК 616.233-002:616-076. if

МР'ША Гвлчнп Валентиновна.'

МОРФОЛОГИЯ ПЕРВИЧНОГО ХРОНИЧЕСКОГО БРОНХИТА: ГИСТОХИМИЧЕСКОЕ,. ЭЛЕКТРОННО-МЙКРОСКОПИЧНСКОЕ И !ЮР$0 МЕТРИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СШ ИЗГОЙ ОБОЛОЧКИ

1^.00.15 - патологическая апатоыия

Автореферат диссертация на соискание ученой отепеяи кандидата медицинских наук

Москва - 1991

Работа выполнена в НШ1 морфологии человека АШ ССОР.

Научный руководитель: доктор ыедицинокшс наук, профессор Т.Н.Копьева

Ведущая организация Московская Мсдишнская Академия

часов на заседании специализированного совета (Д.001,04.ОХ) при ШШ морфологии человака АШ СССР по адресу: 117418, г.Мооква, ул. Цюр$ош, 3.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НИИ морфологии человека АШ СССР,

Официальные оппонанти: доктор медицинских наук В.В.Ерохин доктор медицинских наук Л.В.Кактурский

йи. И.М. Сеченова

Защита состоится

Автореферат разослав

Ученый секретарь специализированного совета кандидат биологических паук

И.Н.Етльяненко

ЖШЕКА с« Р я, '-ХС/1*54

' т >л диспут аций

Е8ВДЕШТБ

Уктуадьность прелат'. Первичный хронический брогхвт

I

СПХБГ является езжноИ проблемой современной пульмонологии. В настоязцее время этим заболеванием страдает от 2-5 до 10% населения прошаленно развития стран (Чучплян А.Г.,1Б86;

КгопгпЪоге ,1988). У дольний вое ПХБ достигает 60-65$ среди всех форм хронических заболеваний бропхолегочной системы. Актуальность изучения ПХБ в боль'ло2 степени определяется ростом заболевания в последние десятилетия: количество боль-пых ежегодно увеличивается в сродпс-ы на 5% (Путов И.В. и соавт. ,1987; 1ЬгпГгваа еД; а1.,1Э89).

Важшлл звеном патогенеза ПХБ является нарушение мукоцп-лнзрноЗ транспортной системы, представляющей собой первый барьер на пути внешних воздействий и основной фактор носпеци-ф!чэскоЛ защити, легких. Физиологическими, биохимическими и иммунологическими исследованиями показана избыточная продукция слизи и качественное изменение ее состава, подавление функции ресничек, дефицит секреторного 1еА в бронхиальном секрето (Солонов Б.II., Луничкина И.В.,1987; Луценко Ы.Т. п соавт.,1989; Ечте« et а1. ,1987). .Сведения о морфологических изменениях слизистой оболочки бронхиального дерева, являющейся основной мпшонью при ПХБ, противоречивы. А.Г.Бобков (1989), И.В.Го;,галяко (1989,1991) , Могвепго«1 , ТТоттЬоиве (1983) важным гистологическим признаком считают структурно-метаболическую перестройку бронхиального эпителия. Напротив, Л.П.Замотаов и соавт.(1905) подчеркивают, что изменения эпителия определяются только при ПХБ с проксимальной обструкцией бронхов. о-ь а1 (1989), Л.П.Замотаэв и соавт. (1985)

сообщают об умеренно Eupair.ntiiioM склерозе собственной участники, тогда как по данным А.Г.Еобкова и соавт. (1981) эти изменения не характерны для ПХБ. Остаются номзучешшш стерео-ультраструктурние особенности бронхов при ПХБ. 11о проводился количественный анализ выраженности распространенности дас-лластичоских изменений эпитолия и склороза собственной пластинки слизистой оболочки различных уровней бронхиального дерева.

Спорным является вопрос о гистологических вариантах ПХБ. !!о re en го tii » ГопЬоизэ (1903), И. А. Рябуха (1987) выделяют 2 варианта заболевания (катаралышЯ и катарально-склеротичо-ский бронхит), Г.Ц.Неиоииядих п Л.М.Ивпомияцпх - 3 варианта (катаральный, катаралыю-склеротический п фиброзный).

Широкое распространение эндоскопических методов в пульмонологии диктует необходимость разработки ношх критериев диагностики хронических воспалительных заболеваний легких. Диагностическая ценность гистологических критериев хронического бронхита ио данным пункционных бяоптатов обседается только в отечественной днторатуро (Заыотаев И.О. и соавт,', 1985; Харлашгавнч С.И. и соавт.,1905; Гомоляко И.В.,1909, 1991; Непомнящих Г.И., Непомнящих Л.1Л. ,1990). Б единичная работах проводится сопоставление витологической и гистологической активности по данным бронхоальвеолярных смывов (БАС) и биопсий (Непомнящих Г.И. к соавт.,1989,1990; Hobson, et al, 1906; Thompson st al.,1909).

Нельго работы явилось комплексное изучение морфологии слизистой оболочки бронхов при первичном хроническом бронхите.

- р -

Поставленная ешэ цоль прадцолагаот ронанио слодумцих задач:

1. Изучить гистохимические н стерооультраструктурнио особенности слизистой о'олочк.1 бр.) нхов у лиц бОЗ ли точной патологии.

2. Изучить гистолоп1чоски9, гистохимические н стерео-ультраструктурние особенности слизистой оболочки бронхов при 1ШЗ.

3. Провести количественный анах:э выраженности и распространенности диспластичосклх изменений зпптолчя я склероза собственной пластинки в слизистой оболочке различных уровней бронхиального дерева по сравнении с возрастаю контролем.

4. Сопоставить гистологичоскуш и цитологическую активность воспалитольного процесса в слизистой оболочке бронхов по данпшл бионтатов и бронхоальвеоллрних смывов при 1КБ.

Научная новизна.

ПроЕодонноа впервые комплексное гистологическое, гистохимическое, сторооультраструктурноа и иорйшетрнческоа иссло-доваине слизистой оболочки бронхов при ГИБ выявило наличие одного гистологического варианта заболевания, а имонно, ката-рально-склеротпческого бронхита. Показано, что изменения стереоультраструктуры поверхности слизистой оболочки бронхов связаны с гиперсекрециоЯ бокаловидных клеток в очагах катаральных изшнэниЗ и повреждением цидиариого аппарата реснитчатых клеток, наиболее вирау.онним в участках дисилазин. Дана характеристика ультрастрултурних особенностей бронхиального эпита;шя при Обоснована мозаичность пораг.ентш слизистой оболочки бронхов у этих больных. Впервые установлено,

■(то .распространенность дисплазнц эпителия нарастает в кау-дальном направления и наиболее вирааона в участках ветвеле-ния бронхов.

Практическая ИОПЧОСТЬ Р8б0ТЦ.

Морфологическое исследование пункционных биоптатоз сли-аистой оболочки бронхиального дараеа рокоман дуется проводить в комплексе с цитологическим анализом бронхоальвеолярних сшвов доя определения степени активности воспалительного процесса при 1КБ.

Полокония. вносящиеся на ?шаиту.

1. При 1Ш> имеется один гистологическиЯ вариант заболевания, а иыоиво, катарально-склеротическиА бронхит с чередованием очагов катаралхяшс и катарально-склеротнческих измене гш1.

2. Стерооультраструктура поверхности слизистой оболочки бронхов при 1ШЗ нарушена в очагах катаральных изменений и диошшзии.

3. Ультра структурни о иэиевення в бронхиальном эпителии характеризуются накоплением секреторных гранул в бокаловидных клетках и повреждением цилиарного аппарата в реснитчатых.

4. Распространенность даспластических изменений эхште-" лиального пласта слизистой оболочки бронхов при 1ШЗ нарастает в кандальном направлении и наиболое шрш:.ена в участках ветвления бронхов.

5. Имеется достоверная умеренно шраменноя корреляционная связь между гистологической и цитологическоЗ активностью воспалительного процесса в бронхах.

Аппобапия ррботн. Основные результата опубликован« в 13

печатных работах. Полокзния работы доложены и обсуздены па ежегодных научных сессиях НШ морфологии человека (Москва, 1986,IS87,1988,IS89), на заседании Московского научного общества патологоанатомов (Москва,1937), на ХП научной конференции молодых ученых фтпзиопульмонологов г.Москвы (Москва,1987), но 17 Всесоюзной конференции по патологии клетки (Москва, 1987), на 1У конференции по ультраструктурнкм основам патологии (Тбилиси,1989), на УП Всесовзном съезде патологоанатомов' (Тбилиси,1989), на I Всесоюзном конгрессе по болезням органов диханпя (КиевД990), на Всесоизном симпозиуме "Патогенез хро-

II

нлческого воспаления^с международным участием (Новосибирск, 1991).

Структура и объщ диссертации. Диссертация изложена на /$машинописного текста, иллюстрирована 3f рисунками, содержит _ $ таблиц, J? гистограмм. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы о материале и методах исследования, I глэш собственных данных, обсуждения полученных результатов, выводов и указателя литературы, включающего S? отечественных и ^^иностранных авторов.

МАТЕРИАЛ И штода ИССЛЕДОВАНИЯ

Диссертация является частью комплексной работы "Иммуно-глорфогенез хронического воспаления" (iS гос.регистрации теш 01.86-00-58.987), проводимой лабораторией пбщей патологической анатомии ICQI морфологии человека АМН СССР.

Обшзя характеристика материала

Материалом исследования послужили биоптаты слизистой

оболочки бронхов, а таккэ секипонпие паблю,иония лиц, страдавших ПХБ. Проводтли комплексное изучопив 43 биоптатов, взятих на уровне ветвления сегментарных бронхов во время диагностической бронхоскопии у 38 болышх, страдавших нообструктпвним ШБ в течонпе 3-20 лет. Всо больные (мужчин - 23, :.юнашн -15), возраст (от 17 до 59 лет), находились на обследовании и лечении в отделении хронических патологических процессов ИШ иммунологии ЫЗ СССР (руководитель - профессор А.М.Борисова) .

Сокциошшо наблюдения касаются S болышх (мужчин - 6, женщин - 3), лечившихся в больницах г.Москвы (й 7, 51, им. С.П.Боткпна), а токко в клиниках Московской медицинской академии. Возраст больных колебался от 48 до 8G лот, длительность заболовонил - от 6 до 30 лот.

Контрольную группу составили 8 секционных наблюдении ранних (до 6 часов от момента смерти) и поздних (от 6 до 12 часов) вскрнтиЯ лиц боз легочной патологии. Поражение легких исключалось после их макро- и микроскопического изучения.

Метода исследования

Основшм объектом исследования послужили полутонкне срезы 43 биоптатов слизистой оболочки бронхов больных 1КБ, а также кусочки слизистой оболочки сошентарннх. бронхов, взятие со срочных вскрнтиЯ лиц без легочной патологии. Для получения полутонких срезов и последующего изучения слизистой оболочки бронхов с помощью электронной микроскопии кусочки размером Ixlxl мм3 фиксировали в 2,5;» растворе глютаральдеги-да на О,ИЛ фосфатном буфере (pii = 7,4) с последующей дофикса-цией в 1% растворе четирехокиси осмия, обезволивали в сгшр-

тах нарастающая концентрации. Кусочки, предназначенные для исследования с помощью сканирующей электронной микроскопии (15 наблюдений), гысуллва.'ш методом обхода критической точки СО2 с последующим напилонием их поверхности слоем золота и исследовали в сканирующем микроскопе ^прмн "ни^сы з 500". Полутонкие и улътратонкмо с]озы получили с кусочков, золитих в эпон-аралднт. Дня правильной ориентации на эпителиальна!! пласт делали полу тонкие срезы толщиной в 0,5 мкм, которые скрашивал]! толуидиновш.1 синим н исслодоеаги в световом микроскопе. Ультратонкне срезы (21 наблюдение) контрастировали цитратом свинца и уранилацетатом и исследовали в электронном микроскопа ^х -чЮО В (Япония). Дм количественного анализа с 43 биоптатов и 7 вусочков слизистой оболочки сегментарных бронхов контрольных наблюдений делали полутонкиа срезы толщиной 2 МК1.1, которые носло предварительного обоссмоливания окрашивав по ван Гизону. Ширину эпителиального пласта, базаль-ной пластинки и реснитчатой каймы измеряли в мкм. Ыорфометри-чоское исследование проводили на стареомэтрическом комплексе "Структура" в полуавтоматическом режима с использованием многоцелевой тестовой системы. В каждом препарате полутонкого среза толщиной 2 мкм, окрашонного по ван Гизону; подсчитывали количество точек тестовой систеш, приходящихся на исследуемую структуру. Для исследования шбирались срезы с плоскостью строго порпондикулярной слоям бронхиальной стоики. Линии тестовой системы в какдо;л поле зрения располагались параллельно исследуемым слоям. Определял!: объемную плотность (в объемных %) 3 структурных компонентов эщ;тел1шльного пласта {реснитчатых, бокаловидных, базальних клеток) и 3 - собственной плао-

тиняи (сосудов, клеток, волокнистых пучков).

Статистическую обработку полученных данных проводили методом вариационной статистики. Определяли средние ор'.критические величины, ошибки средних арифметических, среднее квадратическое отклонение. Достовернрсть различий ме;.щу средними величинами находили по критерию Стьюдента.

Вырезку легких в секционных наблюдения:': проводили по разработанной в лаборатории схеме. Вырезали кусочки легких с бронхом на протяжении сеплентарнпх, субсегмонти];.шх генераций, а такяе легочную паренхиму с пловрой (для исследования маыбранозных бронхов и торшиальниъ бронхиол). Полученный материал фиксировали в формалине, забуференном по Ллллы, и после обезвоживания в спиртах возрастающей концентрации заливали в парафин с использованием вакуума (давление 20 мм рт.ст.), создаваемого водоструйным насосом. Парафиновые срезы окрашивали соответственно прописям, иыошцшея в руководствах Г.А.Иэркулова (1961), Пирса (1962). Использовали гистологические окраски гематоксилином и эозином, пикро-фуксином по Еан Гизону, по Карту. Проводит! гистохимические реакции на гликопротеиды ( раз -Реакция с обработкой контрольных срезов амилазой), рибонуклеопротеи.ды (реакция по

V

Браню с обработкой контрольных срезов рибонуклеазой), глпкоз-аминогликави (окраска толуидиновым синим с обработкой контрольных срезов тостикулярной и бактериальной гиалуронида-аой), оульфо- и сиаломуцшш (окраска альциановим синим).

Распространенность диспластических изменений эпителия и склероза собственной пластинки определяли с помощью полу-количеотиенного анализа парафиновых срезов, окрашенных ге-

матоксилином и эозином, а также по ван Гпзону. Исследовали различные уровни бронхиального дерева. Подсчитывали общее количество полей зрения, приходяпдехся на эпителиальный пласт и собственную пластинку, а также число полей зревзя, содержащих дисгошстичоские и склеротические изменения. Затом вычисляли показатель в процентах.

Па 33 наблюдениях проводили сопоставление данных цитологической п гистологической активности воспаления при 1КБ. Распределение больных по группам делали в соответствии с критериями цитологической активности, разработанными в нашей лаборатории (Гробова O.iá. и соавт. ,1989). Для решения вопроса о достоверности и силе связи гистологической и цтологиче-ской активности проводили корреляционный анализ, используя метод вычисления коэффициента корреляции по таблицам сопряженности абсолпт.ных частотных показателей (КактурскиЗ Л.В.,1980).

Результаты исследования р их обсуждение

Гистологическое, гистохимическое и электронно-микроскопическое исследование биоптатов слизистой оболочки бронхов выявило картину хронического катарального пли катарально-снлоротического воспаления в собственной пластинке слизистой оболочки, о гипертрофией и гиперсекрецией слизистых клеток бронхиальных желез, очаговой гипертрофией бокаловидных кле- . ток эпителиального пласта в очагах катаральных изменений и дисплазией бронхиального эпителия в катарально-склеротиче-ских участках. Отмечалась мозаичность морфологических изменений. Только в одном очаго катаральных изменений обнаружили дисплазию бронхиального эпителия.

Дня катарального бронхита были характерны: гипертрофия и гиперсекрация слизистых клоток, л о йк о по дез эпителиального пласта, хроническая воспалительная реакция в собственное пластинка в виде скудной очаговой лгмфо-гпстиоцнтарной инфильтрации, малкио очаги склероза. В секреторных гранулах слизистых клоток эпителия и бронхиальных колоз отмечаюсь накопление гликопротоидов и снижонио содержания кислых муцинов.

Поверхность эпителия слизистой оболочки бронхов в очагах катаральных изменений характеризовалась сохранным реснитчатым покровом и увеличение:.: количества грибовидных выбуханий апикальных отделов бокаловидных клеток.

Сохранит.! считали однослойный цилиндрический эпителий с чередованием реснитчатых и бокаловидных плеток и рядностью ядер но более 4. Сканирующая электронная микроскопия зон сохранного эпителия выявила тяжистые наложения секрета на поверхности ресничек, которые имели одинаковую Еелачпну и направленность. В кзадом наблюдении в участках выброса сокрета определялись поля с нарушенной ориентацией росничек. Трансмиссионная электронная микроскопия реснитчатых клеток зон сохранного эпителия биоптатов при ПХБ не выявила изменений в длине, ультраструктуре ресничек и базальных телец, а такие регулярности их расположения по сравнению с возрастным контролем. Трубчатые комплексы на поперечных срезах ресничек сохраняли-свое нормальное строение. Как и в возрастном контроле, цитоплазмы реснитчатых клеток имела умеренную электронную плотность, митохондрии располагались упорядоченно, т.е. были ориентированы по длинной оси клетки.

Бокаловидные клетки находились е стадии накопления и одновременного внброса сокрота. Выделялось значительное слияние мелких капель сокрота сформированием крупных гранул.

В очагах катаралыю-склоротичиских изменений били болов выражены склероз собственной пластинки и длспластичоские изменения эпителиального пласта. Количество грибовидных выбуханий аникальпих отделов бокаловидных клетск было утоньшено по сравнению с катг.ральншлп очпгам.ч.

Зоны сохранного эпителия бшш представлены незначительными нсмоненпями реснитчатых клеток е виде цитоллазыатических шростов, слияния аксиом отдельных ресинчек, которые встречались чзцо, чип в еозр:стиои контроле. Сканирующая электронная микроскопия показала нарушение однонаправленной ориентации и появление ресничек различной длини. Наши результаты подтверждают данниа М.С..Ьорозовского, И.Н.РоаиновоЙ (1986), ЬипвсГ'зПа ^ а1. (1985), У*.о1а6 и г а1. (1985), ТгзУиз1п1 вt а1. (Е990) о тон, что нарушения цукоцшгоарного транспорта при КБ связаны с хронический воспалением респираторного тракта. Данных, свидетельствующих о первичной цшшарной дис-кинезип при 1Щ> на наиом материале не получено.

Стереоультраструктура поверхности слизистой оболочки бронхов была существенно изменена лишь в участках дисплазнй. Ми Биделяли 2 типа их: переходные зони и плоскоклеточную метаплазию.

В переходной зоне эпителий сохранял цилиндрическое строение, однако рядность ядер превышала 4, количество бокаловидных клеток было снижено. Базалышо клетки в этой зоне шлели ядра, вытянутые перпендикулярно базально! пластинка.

При исследовании поверхности переходной зоны с помощью сканирующей электронной микроскопии отмечали чередование участков с сохранными ресничками и полностью лишенных ресничек. Грибовидные ЕЫбуханмя апикальных отделов бокаловидных клеток были единичные. При трансмиссионной электронной микроскопии в реснитчатых клетках выявляли цитоплазматические выросты, в основании которых отсутствовали базальныо тельца, а также 1 резко укороченные реснички. Цитоплазма отдельны:: клеток содержала волокнистоподобныа структуры, некоторые клетки давали боковые единичные отростки с формированием ые:гклеточных контактов. Секреторные гранулы бокаловидных клоток располагались в апикальных отделах, были мелких размеров, но сливались между собой. В базалышх клетках отмечалось увеличение гранулярного эндоплазматического ретикулума и свободных рибосом. Цитоплазма дав.ад а множественные отростки, Едающиеся в базальную пластинку.

К плоскоклзточной метаплазии были отнесены изменения, где цилиндрическое строение эпителия было полностью утрачено и отчетливо выражена стратификация. Клетких верхних пластов, вытянутые параллельно ходу базалыюй пластинки, плохо воспринимали окраски; клетки нижних пластов располагались перпен-^ дикулярно йазалыюй пластинке, были гиперхромны, четко отделяясь от шшэлежащих в виде бордюра. При сканирующей электронной микроскопии поверхности эпителиального пласта в этой зоне была полностью лишена ресничек. По данным трансмиссионной электронной микроскопии, такие клетки были бедны митохондриями и содержали большое количество беспорядочно расположенных волокнистых структур. Цитоплазматические выросты апикалъ-

них отделов не имэлн в основании бззальпых телец. Клетки, содержащие секреторные гранулы, отсутствовали. Базалыше клетки в участках плоскоклоточноЗ метаплазии ззмолп форму теннисной ракетки, цитоплазматпческие отростки сформировали МН0Г9СТЕЭНПЫЭ *-штсрдлгнталышв выпячивания.

При распределении пункцпониых биоптатов слизистой оболочки бронхов при ПЕВ на группы в качестве обобщающего гистологического признака использовали склероз, о шра&енности которого мы судили по объемной плотности сосудов, меток и волокон в собственной пластинке. На основании достоверных различий показателей выраженности склеротических изменений в собственной пластинке выделены 2 гистологические группы: I) катарального бронхита (25 биоптатов); 2) катаралыю-счло-ротпческого бронхита (18 биоптатов). Каждая из указанных групп была разбита на .2 подгруппы на основании достоверных различий показателей объемной плотности сосудов я клеток: I) боз обострения воспаления; 2) с обострением воспаления. При морфометрическом исследовании учи швали также эпптоли-алыю-стромалыше отношения, айализпруя отдельно участки сохранного эпителия, переходную зону и пяоекоклеточнув метаплазию. Морфометрическиа показатели структурных элементов слизистой оболочки сегментарного бронха в норме и при ПХГ> представлены в таблице.

В биоптатах с катаральным бронхитом (1-я гистологическая группа) объемная плотность бокаловидных клеток и инфильтрата была достоверно выше, чем в Еозрастном контроле (Р< 0,01). Отмечалось нарастание склероза (Р<0,05).

При •катаральяо-склеротичосксм бронхита (2-я гистолога-

Таблида

Иорфометрпческгв показатели структурных элементов слизистой оболочки стенка сегментарного бронха в норме и при первичном хроническом бронхите

Группы Состояние эпителиального пласта & группы срав- Кол-во полей зрензя Объемная плотность (Н+и ,об .% )

наблнденнй клетки эпителия } собственная югас-тттнкэ

- нения реснит- бокало-чатые видные базалЬ' ные - !сосу-! да клетки волокна

I 2 3 4 5 б 7 ! 8 о 10

0 3 Р А С Т НОЙ КОНТРОЛЬ' Г -7) - -

сохранные • I 35 38,3+ 12,0+ г 1,6- 20,7+ 3,4" 9,5+ 0|9" 5,4+ 27,5+ 3,2"

переходная зова 2 0 - - •

метаплазия 3 0 _ _ -

Продолаание табл.

4

Ю

ПЕРВИЧНЫЙ

Без

обострения

(V =12)

ХРОНИЧЕСКИЙ

сохранпий 4

БРОНХИ Т(и,43)

переходная 5 зона

метаплазия 6

КАТАРАЛЬНЫЙ

С обо- сохранный 7 стрением

пеиаходная "зона Б

метаплазия 9

Г =13)

47 14,1+ г.от 7,3+ 0|б" 8,7+ 0|3"

2 чт- 22.4+ 0,9" 3,5+ о,з- 8,5+ 0,27 Ч'М

2 - - . - 4,3+ 0,7" 8,1+ 0.7" 36,0+ о',г

27 32 д+: ОД" 14,6+ - 0,1- > 1,й ю,с+ 0,9" II ,7+ о,г 28,9+ 0,2*

10 36,4+ 3,4" 12,6+ 0)1- 21,2+ 0,2" 6,4+ о.б- 4,7+ 0,7" 55,0+ 4,7-

15 44,3+ 2.9" 5,8+ 0.7" 2С ,2+ о|1- 8,3+ 0,8- 4,9+ 0,8" 42.2+ 5,9"

22 - - - 5,6+ 0,5" 8,8+ 0,9" 54,34. 2,4"

6 37,4+ 6,4" 16,7+ 2,1~ 23,7+ 2.3" 6,7+ III- 11,0+ 1,7" 45,5+ л г**-

3 27,5+ 2,1- 9,3+ 1|9- 23,6+ 2,8" 7,2+ 1|5- 6,0+ 2,2" 54,0+

15 — 7,2+ 0.7" 10,3+ ОД- 51Д+ 3,9"

¿ез

обострения

(В =12)

КАТАРАЛЪН0=

сохранный 10

переходная II зона

изтаплазпя 12

СКЛЕРОТИЧЕСКИЙ с обо-стрэни-

; ем

(и =5)

сохранный 13

переходиая 14 зона.

штаплазия 15

СЛ ÏO M Hon*» Ol СОЮ di.

им ннннннн

СО OOÜlNHf^OHi

{-1 ÍHÍ-IIUÍ-ímmm

WtO,|i.i-lí-iO Olrfi-CONMO

Ч Ч 4 hihJhihJhj»T3 hihiT) h3h3

^ /■« V Av VV w А V лул Ад I I Ol Ol Ol OOOOOOI OOI OOOI oo

о

M

ß ci

OOOOOO OO ООО CnOlOlOlOlOl MOI СЛСЛСЛ

ßS

►d hi ha hihahahahihi ►tiha ha hi ha ►dhJ

A A V А ЛЛлА А va A V V VA

O 1 Ol Ol ООО оо OO 1 ООО1 OO

. - . о- - 1

О О о ОООМОО OO ООО OO

M Ol , , Ol нисл мм Ol M MOI СП oiM

hi ha ha ha ha hi hi ha hl hihi »U'dhi hi ha

V V V V V AA л А V V V vv AV

о 1 Ol Ol OOOOOOI OO 1 ООО 1 OO

О О о OOOOOO о о ООО . OO

Ol Ol Ol ülülHHOlH Ol Ol OlülOl МСЛ

hi ha hi ha hi hi hi hi hi ha hi hi ha ha ha ha ha hi hi ПЗ hi hi hi hi

vvv л л V unvnNa/vvwav avnn л

OOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOO

ooooooooooooooooooooooooо

OlOlOIHülOlOlOlHülCnOlOlMHoiOlOlHcnMOlMMUl

hd h3 hi hi hi hi hi ha hi hi hi hi hi ha hi hi ha hi hi ha ha ha h3 hi ha

vavavanaívNVAM/SAVMVNNKV/V

OOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOO

0000000000000000000000000

01 НСЛНСЛОКЛИННСЛННКННСЛЬСЛОИЛИК.СЛН

►ti »ti fd hi ha hi hi hi hi hi hj ha ha ha *tJ hi hi 4) hi hd ha hihl hi 4)

VVVVvavvayvamvA^^^VAW

0000000000000000000000000

ooooooboooooooooooo оооо'оо

01 U1 СП Ol Ol Ol Ol Ol СП СЛ ОТ H M СЛ Ol (-1M M MH1-1 Ol Cl СЛ Ol

в

со

•а

§ s

m ш и a

ШН Д m i

ш ex С: о

m W

aS

й о cd ta

wë и I

CK !Ч CD » CJ

CD Ш

an

и a e

ш

о

0

1 о

о a о

о о. t*

CD

S

m й

tu

- 9t- -

ческая группа обнаружит дальнейшее нарастшшо выраженности склероза (Р-^r0,01), а такие частоты дослластнчосних изшнопиЭ эпителиального пласта. Объемная плотность бокаловидных клеток была достоверно уменьшена по сравнению с катаральным бронхитом (P^O.OI).

Таким образом, существенное увеличение объемной хшотнос-тя бокаловидных клеток выявляется липь в сохранных пластах эпителия очагов катарального типа, которыо занимают относительно небольиую протяженность поверхности. Следовательно, вклад гипертрофии бокаловидных клеток в гипорсакрзцав невелик. Полученныо нами результаты согласуются с данными Toa (1984), который с помощью патофизиологических методик показал, что на долю бокаловидных клеток приходится всего 2% бронхиального секрета.

Обострение воспаления в обеих гистологических грушах было прадставлопо лойкоподазом эпителиального пласта, увеличением объемной плотности сосудов (Р<0,05) и инфильтрата из найтрофилов, лимфоцитов, гистиоцитов (P¿lO,OI). При обострении воспаления учащались деструктивные изменения эпителия, которые сочетались с изменением гистохимических свойств слизи. А именно, выявлялось сникеиие содержания гликозаминогли-" капов и нанопление глнкопротеидов, с укрупнением и слиянием секреторных гранул.' Отмечали переполнение протокоЕ и просветов слизистых ацинусов плотнш тягхнетым секретом и наличием ого на поверхности ресничек. Эти изменения свидетельствовали о выраженном нарушении мукоцилиарного транспорта.

использование бронхоскопии в пульмонологии диктует необходимость разработки новых критериев диагностики хрониче-

ских воспалительных заболеваний. Вопрос о значении результатов гистологического исследования пункционных биоптатов слизистой оболочки бронхов в диагностике хронического бронхита дискутируется только в отечественной литературе (Г.И.Непомнящих, Л.11.Непомнящих,1990; И.В.Гомоляко,1989). В качостве обдигатного признака предлагаются морфомотрическне параметры площади бронхиального эпителия и краевой каймы при исследовании пункционных биоптатов слизистой оболочки бронхов (Гомо-ляко И.В.,1989).

В ряде работ сообщается о илроком распространении плос-коклеточасй метаплазии эпителия при вторичном хроническом бронхите (Непомнящих Г.И. ,1979; Непомнящих Г.II., Непомнящих Л.LI. ,1990). Однако авторы не проводили количественных исследований. В литературе мы нашли единственную работу ( А1кача ot cl. ,1989), посвященную изучению распространенности дис-шхастических изменений эпителия в бронхиальном дереве с помощью полуколичественного анализа. Авторы но выяеили достоверных различий выраженности плоскоклеточной метаплазии в центральных и периферических бронхах при 1КБ.

Задачей настоящего исследования был анализ еозмокпости использования качественных и количественных гистологических

>

критериев в диагностике ПХБ. Кроме изучения биопсийного материала был проведен сравнительный анализ распространенности диспластическпх изменений эпителия и склероза собственной пластинки на всем протяжении бронхиального дерева в 9 секционных наблюдениях лиц, страдавших ШШ. На аутопсийном материале такие обнаругшш ыозаичность поражения слизистой оболочки бронхов в виде чередования катаральных и катарально-склеро-

тических очагов.

Распространенность дисшгастических изменений эпителия слизистой оболочки при ПХБ нарастала в каудальном направлении бронхиального дерева (7+4,ОЙ полой зрения в сегментарных бронхах, 28+6,5$ - в мембранозных). В участках ветвлений сегментарных бронхов распространенность диспластических изменений эпителиального пласта была более выражена и составляла 58$. В литературе наги удалось найти единственную работу, в которой представлены данные о различиях структуры эпителиального пласта по перш/отру канала и в области ветвления бронхов (Поликар и Гали, 1972). По мнению авторов, высокая распространенность плоскоклеточной метаплазии в области бифуркации обусловлена сменой ламинарного потока воздуха на турбулентный. Следовательно, данные биоптатов, взятых из области ветвления бронхов,нельзя экстраполировать на состояние слизистой оболочки всего бронхиального дерева.

Склеротические изменения собственной пластинки слизистой оболочки на различных уровнях бронхиального дерева были слабо или умеренно выражены. Что касается распространенности склероза собственной пластинки, то на уровне сегментарных бронхов слабо выраженные изменения составляли 33+6,0% полей зрения и умеренно выраженные - 21+5,0$. Анализ склеротических изменений в собственной пластинке биоптатов, взятых на уровне разветвления сегментарных бронхов показал, что распространенность слабых и умеренных склеротических изменений в этих участках была выше (соответственно 48+6,0$ и 32+5,0$). Следователвно, в области бифуркации сегментарных бронхов, откуда берется биопсия, склеротические изменения собственной пластинки встречаются чаще, чем непосредственно

в каналах того же уровня. В возрастном контроле отмечали лишь слабые склеротические изменения (15+7,С$ нолей зрения).

На уровне субсегментарных, мембранозных бронхов, а также терминальнкх бронхиол распространенность слабых и умеренно выраженных склеротических изменений собственной пластинки слизистой оболочки существенно не отличалась от. возрастного контроля.

Мы проанализировали взаимоотношения распространенности диспластических изменений эпителиального пласта с выраженностью склероза собственной пластинки. Сочетание диспластиче-оких изменений эпителиального пласта со склерозом собственной пластинки было зарегистрировано в 17 из 43 биоптатов. В 11 наблюдениях они были представлены плоскоклоточной метаплазией, в 3 - сочетанием плоскоклеточной метаплазии и переходной зоны,, в 3 - переходной зоной. При этом только в 6 наблюдениях преобладал умеренно выраженный склероз, в остальных 11-слабый, либо - чередование слабо и умеренно выраженных склеротических изменений. Что касается секционного материала, то на всех уровнях бронхиального дерева сочетание диспластических изменений эпителия со склерозом собственной пластинки зарегистрировано в 2 из 9 наблюдений, причем лишь у 1 больного ПХБ сопровождался развитием легочного сердца. Морфометрические показатели выраженности склероза в слизистой оболочке биоптатов, соответствующей Боне сохранного эпителия достоверно не отличались от аналогичных показателей в собственной пластинке под участками плоскоклеточной метаплазии (Р>0,05).

Таким образом, на нашем материале не подтвердилось положение Г.И.Непомнящих (1979), Г.И.Непомнящих, Л.М.Непомнящзх (1990 ) о связи диспластических изменений бронхиального эпите-

лия с развитием склероза собственной пластинки слизистой оболочки бронхов при 1КБ.

Проведенный нами морфометрический анализ структурных ко;.шонентов слизистой оболочки бронхов нрл 1КБ но выявил также зависимости между изменениями эпителиального лласта и за-пустеванием сосудистого русла. Объемная плотность соединительной ткани и сосудов как а зонах сохранного бронхиального эпителия, так и в участках его дисллазии достоверно не различалась /Р>0,0с).

Сравнительный частотны1.! анализ гистологических признаков ПХБ на материале биоататов слизистой оболочки бронхов и различных уровней бронхиального дерева в секционных наблюдениях показывает гетерогенность пора-,мнил слизистое оболочки и наличие одного гистологического варианта 11ХБ, а именно — катарачь-но-склеротнческого. Поэтому рекомендации Г. 11.Непомнящих и Л.И. Непомнящих-(1989,1990), согласно которым на основании исследования ограниченного участка слизистой оболочки в бг.оптате можно ставить диагноз НХБ и делать заключение о стадии заболевания, неправомочны. Не подтверждаются также положения Л.Б.Гомолога о (1989,1991) о диагностической ценности исследования эпителиального пласта при хронических воспалительных заболеваниях легких. На основании морфологических изменений, выявленных в бнонтате можно говорить лишь о катаральном и катарально-склеро-тлческом воспалении, наличии или отсутствии дисплазии эпителия.

В доступной литературе мы обнаружили единичные работы по сопоставлению результатов цитологии БАС и гистологического ис-следсьания "(' тьогарзоп вt п1.,1989; Г.И.Непомнящих, Л.М.Непомнящих, 1990). Авторы без проведения корреляционного анализа сделали заключение о взаимосвязи особенностей бронхита о количе-

отвешшми цитологическими показателями БАС. Напротив, НоЪаоп вt а1 .(1986.) на выявили зависимости данных цитограммы БАС от степени воспаления в легочной ткани.

Нами проведено сопоставление данных цитологической и гистологической активности воспаления у 33 больных 1Ш5. Материал группировался с учетом критерия цитологической активности БАС, разработанного в нашей лаборатории (О.М.Гробова и соавт.,1989^. *1м послужил показатель процентного содержания нейтрофилов.

Группа с низкой воспалительной активностью содержала от 5 до 19$ нейтрофилов {9 наблюдении), группа с умеренной активностью - от 20 до 59^ нейтрофилов (и наблюдений), группа о высокой активностью - от 60 до 98% нейтрофилов 13 наблюдений . Распределение материала биоптатов слизистой оболочки бронхов по этим группам показало, что при высокой цитологической активности в абсолютном большинстве биоптатов 11 из 13 в собственной пластинке слизистой оболочки преобладала картина обострения воспалительного процесса. Напротив, при низкой цитологической активности признаки обострения воспаления отсутствовали (в 6 из 9 биоптатов). Таким образом, частотные показатели свидетельствовали о нарастании воспалительной реакции в биоптатах слизистой оболочки бронхов в группах с высокой цитологической активностью. Однако в части биоптатов (9 из 24) х>т больных с умеренной и высокой активностью воспаления не удалось выявить признаков обострения. Поэтому для определения силы и достоверности связи между этими показателями был проведен корреляционный анализ по таблицам сопряженности. Установлено, что между цитологической активностью по данным БАС и гистологической активностью воспалительного процесса в слизис-

той оболочке бронхов у больных 11КБ существует достоверная и умеренно выраженная корреляционная связь (г= 0,536 при Р< 0,05). Частотные показатели свидетельствовали о нарастании воспалительной реакции в собственной пластинке слизистой оболочки бронхов у больных в группе с высокой цитологической активностью. Проведенное нами сопоставление результатов гистологического заключения о преобладании катаральных или катарально-склеротических очагов в биоптатах слизистой оболочки бронхов с данными цитологического исследования БАС у этих жэ больных не выявило особенностей цитологической картины в обеих гистологических группах. Поэтому мы не можем согласиться с. положением Г.¡1.Непомнящих и Л.¡Л.Непомнящих (1990), о том, что на основании цит о граммы БАС можно судить о. стадии заболевания.

Таким образом, выявленные гистологические изменения и установленная в работе мозаичность поранения слизистой оболочки бронхов при 11ХБ не позволяют сделать заключение о диагностической ценности гистологических критериев ПХБ по данным пункцион-ных биоптатов слизистой оболочки бронхов. На основании гистологического исследования можно говорить только о наличии или отсутствии обострения воспалительного процесса. Для определения степени активности воспалительного процесса при 1КБ более информативным является комплексное гистологическое и цитологическое исследование пункциониых биоптатов и БАС.

ВЫВОДЫ

1.Гистологически первичный хронический бронхит является катарально-склеротическим и характеризуется хроническим воспалением в собственной пластинке слизистой оболочки, гипертрофпе.; и гиперсекрецией слизистых клеток бронхиальных келез, очаговой

гипертрофией слизистых клеток эпителиального пласта в участках катаральных изменении и очаговой дпеплазией бронхиального эпителия в катарально-склоротпческнх участках.

2. ¡.'юрфометричнекий анализ ви'ра-кишости изменений эпителиального пласта и собственно]; пластинки при первичном хроническом бронхита выявил мозаичность поражения слизистой оболочки в виде чередования катаральных и катаралыю-склеротических очагов. В очагах катарального типа определяется существенное увеличение объемной плотности бокаловидных клеток и минимальный склероз собственной пластинки. По сравнению с катаральными очагами в катаралыю-склеротических участках объемная 'плотность склероза достоверно возрастает, содертание бокаловидных клеток -существенно уменьшается, достигая контрольных показателей, развиваются диспластические изменения эпителия.

3. Стереоультраструктура поверхности слизистой оболочки

в очагах катаральных изменений при первичном хроническом бронхите характеризуется увеличением количества грибовидных выбуханий апикальных отделов слизистых клеток. В последних при трансмиссионной электронной микроскопии отмечается увеличение размеров и слияние секреторных гранул. Гистохимически секрет гранул слизистых клеток бронхиальных желез и эпителиального пласта содержи? нейтральные гликопротеиды.

4. Диспластические изменения бронхиального эпителия при первичном хроническом бронхите представлены разрежением реснитчатой каймы существенным уменьшением количества слизистых клеток, увеличением рядности ядер эпителиального пласта, стратификацией и очаговой плоскоклеточной метаплазией.

5. Изменения стереоультраструктуры реснитчатых клеток при первичном хроническом бронхите проявляются нарушением однонап-

равленной ориентации и длины ресничек, а также развитием цито-плазматических шростов в участках дисилазии. При трансииссион-ной электронной микроскопии реснитчатых клеток обнаруживается слияние аксоном отдельных ресничек, нерегулярное расположение базалышх телец и полное отсутствий их в основании цитошшэма-тических выростов.

6. Обострение воспалительной реакции при порвичном хроническом бронхите представлено лейкопедезом эпителиального пласта, увеличением объемной плотности сосудов, скудным воспили-телышм инфильтратом из нейтрофилов, лимфоцитов, гистиоцитов и илазмоцитов в собственной пластинке слизистой оболочки. При регрессии воспаления отмечается снижение объемной плотности сосудов и нарастание склероза собственной пластинки, который но достигает резкой степени выраженности.

?. Распространенность днсиластических изменений эпителиального пласта слизистой оболочки на различных уровнях бронхиального дореьа при первичном хроническом бронхите нарастает в каудалыюм направлении ( 7+4,0% в сегментарных бронхах, 28+6,5$ в ыембранозных). Распространенность днсплезия эпителия более высокая в участках ветвления бронхов (53+5,0). Распростраден-ность склероза собственной пластинки вариабельна на различных уровнях бронхиального дерева.

8. Лрн первичном хроническом бронхите »шоется достоверная слизь частотных показателей активности воспаления по данным цитологии бронхоальвеолярных смывов и морфологии пупкционних биоптагов слизистой оболочки. При определении степени активности воспалительного процесса при этом заболевании следует использовать комплексное гистологическое и цитологическое исследование пункциошшх биоптатов и бронхоальвеолярных срывов.

ПЛ.

Список работ, опубликованных по теые диссертации

1. Бармина Г.В., Свищев A.B., Коиьева Т.Н. - Морфология слизистой оболочки бронхов при хроническом необструктивном бронхите. //В кн. "Актуалыше вопросы-гистопатологии". М., 1989,-С.19-20.

2. Бармина Г.В., Свищев A.b., Копьева Т.Н. и др. - Хронический необструктиышй бронхит: сопоставление морфологии слизистой оболочки бронхов и клеточного состава бронхоальвеоляр-ного смыва. // Тез. докл. УН Всесоюзного съезда патологоанатомов. - Тбилиси, 1989. - С.24-25.

3. Бармина Г.В. - Использование морфометрического анализа при первичном хроническом бронхите. // Тез. докл. научно-практической конференции "Новые приложения морфометрии и математическое моделирование в медико-биологических исследованиях. -Харьков,1990. - С.20.

4. Бармина Г.В., Свищев A.B., Копьева Т.Н. - Стереоульт-раструктурные особенности бронхиального эпителия при хрониче- -ском воспалении. // В кн.: "Ультраструктурные основы патологии органов и тканей". - Тбилиси,1989. - С.24.

5. Бармина Г.В», Дыханов li.il., Свищев A.B. - Первичный хронический бронхит, гистологическая, электронно-микроскопическая и морфометрическая характеристика слизистой оболочки бронхов. // В кн.: "1 Всесоюзный конгресс по болезням органов дыхания". - Киев,1990. - 962.

6. Копьева Т.Н., Бармина Г.В., Свищев A.B., Макарова О.В.-Морфология и патогенез хронического бронхита. // Арх. пат., 1989, № 7. - С.83-87.

7. Копьева Т.Н., Гробова Ü.M., Воронина Л.М.,■ Бармина Г.В., Гудовскнй Л-ГЛ. - Местная неиммунная защита при хроническом воспалении легких. // Тез.докл. Всеооюзного симпозиума с международным участием "Патогенез :<ро1Шческого воспаления" 11-13/1Х. - Новосибирск,1991. - С.37-30.

8. Копьева Т.Н., Бармина Г.В., Гробова О.М., Воронина Л.М., Лунькова Л.К. - Патогенетические аспекты хронического бронхита. // Тез.докл. 2-го Всесоюзного конгресса по болезням органов дыхания. - Челябинск,1991, & 314.

9. Воронина Л.Копьева Т.Н., Бармина Г.В., Жаворонков H.A. - Морфологические изменения в легких у больной с синдромом Зиверта-Картагенера. // Арх. пат., 1991. - № 11. - С.66-68.

10. Бармина Г.В., Свищев A.B. - морфология бронхиального эпителия при хроническом катаральном бронхите /по материалам слизистой оболочки бронхов/. - b сб.: "Материалы по актуальным вопросам современной гистопатологии", 1987. - С.42.

11. Бар.мпна Г.В., Свищев A.B. - Ультраструктурныс особенности реснитчатых клеток бронхиального эпителия при хроническом катаральном воспалении. - В сб. "1В 1У Всесоюзная конференция по патологии клетки" . - М. ,1987. - С.109.

12. Бармина Г.В., Свшцвв А.Б. - Ультраструктурные особенности раснитчатого аппарата эпителия хрящевых бронхов человека при исследовании аутолсийного материала. // В кн.: "Материалы ежегодной научной сессии 1Ш морфологии человека АМН СССР. -С.42-43.

13. Бармина Г.В., Свищев A.B., Макарова О.В., Гробова О.М., Днханов И.И. - Хронический бронхит: состояние местного иммунитета /по материалам бронхоальвеоляршх смывов/. - В кн.: "Эпидемиология и диагностика неспецифических заболеваний легких". - Саратов, 1988. - С.90.

МТ5ТИ За к.1'" 12/17 тир. 120 экз.