Автореферат и диссертация по медицине (14.00.23) на тему:Морфофункциональная характеристика яичника ..емивариоэктомированных крыс при беременности и в разные фазы полового цикла

инистерств'О здравоохранения российской федерации владивостокский государственный медицинский

р[Б О А институт

На правах рукописи КАРАТУН Валерия Михайловна

УДК 618.211.618.11.-089.87:812.621.31-092.9

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЯИЧНИКА' 1МИ0ВАРИ0ЭКТ0МИР0ВАННЫХ КРЫС ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ И В РАЗНЫЕ ФАЗЫ ПОЛОВОГО ЦИКЛА

14,00.23 - гистология, цитология и, эмбриология

Автореферат

диссертации аа соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Владивосток, 1994

Работа выполнена в 2аС>аровском - государственном медицинском институте

Научный руководитель: доктор медицинских неук, профессор В.Я.Рыадвский

Официальные оппоненты:доктор ыедацивскюс наук.

профессор В.Ы.Черток

кандидат ивдадакских наук В.И.Цыганков

Бегущее учр&вдение: Дальневосточный государственны!; университет

Защита состоется " " Ж- 199 ^г. Еа заседания

специализированного совета Д 0851.24.01 при Владивостокском государственном медицинском институте /6Э0600, г.Владивосток, проспект Острякова, 2„тел. 25-17-06/.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Владивосток-:;*:;,.^ государственного медицинского института /г.Владивосток, проспект Острякова, 2/.

Автореферат разослан

/Л. ¿7199 ^г.

Ученый секретарь специализированного совета

доцент Г.М.Холоденко .

ОКЦАЯ XAPAKÏEPJ1 CT »ÏKA PABOTlJ

Актуальность проблема. Односторонняя овариэгктошзя (CCD) приводит к злачителышм и необратимым изменениям и остам емся яичшке. Удаленна одного япчника уменьшает запас пракордладь-них фолликулов и массу стероидпродутиругаи.т структур OlJl.He-нодпкхов, 1988, r.L.i'aUrasi s.a., 1992). У коловогзратах животных удаление одного литника приводит на ранних этапам после операции к компенсаторной гшертро.}яи оставшегося органа, которая характеризуется усилением процессов фолликуло- сто-ропдогенеза, и на поздних - к кистоЕному перероаденив и атрофии Ш.И.Егорова, 1966, Л.А.Леонтш, ÏS79V 002 вызывает изменения уровня гонадотрошак гормонов и половит, стероидов (Н. »V.Fleming е.a., 3981?, H.H.A.llei js-Hcelofs o.a.,190м, D.А.г , 1985, Д.И.Бенедиктов, 1988). Кроме этого, удаление одного яичника приводит к изменении функцаошгрования раа/гавдшс органов и систем у потомства, прячем репродуктивная система самок характеризуется на ранних этапах онтогенеза ускоренным развитием, а в зрелом возрасте - болзе ранней инволюцией (Б.Я.Рыяавскпй и соавт., 1391,И.Р.Ере:лонко, 19SI). Механизмы, определяющие эти отдпчпя потомства »рас, действуют в эмбриогенезе, а запускающим моиентсл является изменение эндокринного статуса, организма после ОВарИОЭКТОМИИ I «.ft-.Fleming е.a., 1984, 3.ï,.Butcher

е.а.,-. 1985). Вместо с тек, отсутствуют данные о состоянии оставшегося яичника во вреда беременности, т.е. именно в гот период, когда проявляется воздействие яичника матери на развитие потомства. При оценке функционального состояния яичника после 00Э не было удалено достаточного внимания структурам органа, продуцирующим половые стероиды. Кролю этого, влияние 003 исследовалось либо без учета фаэи полового цикла, либо только в одной фазе - зструсе. В связи с этим не представляется возможным объяснить механизмы, определявшие отлития потомства животных после ООЭ. Учитывая то, что отклонения в функционировании различных органов и систем у потомства закладываются во внутриутробном периоде и могут быть следствием изменения как уровня овариальных стероидов, так и уровня гонадотропинов, представляет интерес исследование состояния осташегося яичника ьо врош беременности, а так как влияние яичника на плод неодинаково в разные сроки беременности, необходимо изучение и

сравнение состояния яичника в разные временные точки беременности.

Вышеизложенное определило цель работы: изучить влияние 003 на состояние основных гормонпродуцарукщих компонентов яичника в разные фазы полового цикла и при беременности. Исходя из атоЯ дели были поставлены задачи:

1. Дать морфофункциональдую характеристику стероидародуцирую-щих структур яичников в 8струее и диэструсв через 1,5 месяца после 003.

2. Дать морфофункциональную характеристику стероидцродуцирув-щих структур яичников в ранние сроки беременности (8 даей).

3. Дать морфофункциональную характеристику стероидпродударующих структур яичников в поздние сроки беременности 120 дней).

4. Оценить репродукчишу» функцию яичников крыс, подвергшихся 009.

Научная новизна. В работе впервые дана комплексная оценка, базирующаяся на результатах количественного морфологического анализа состояния яичника, оставшегося после 00Э, в разные фазы полового цикла и при беременности. Показано, что степень гипертрофии, активности Зв-од-стероиддегидрогеназы, щелочной фосфатазы, сукцинатдегидрогеназы в разные изученные временные точки в различной степени отличается от контрольных показателей. Выявлено, что 003 приводит к изменениям временной организации гистофизиологии оставшегося яичника. Впервые показано влияние 003 на массу плаценты.

Практическая значимость рабоуц состоит в том, что изложенные данные расширяют представления о механизмах компенсаторной гипертрофии и гистофизиологии оставшегося яичника после 003, а также о его влиянии на развитие потомства. Материалы работы могут быть использованы при чтении лекций по гистологии, гинекологии, эндокринологии.

Основные полоиения. вынооицше на защиту.

1. Состояние яичника крыс после ООЭ в неодинаковой степени отлично от яичника интактных крыс в разные фазы полового никла

и при беременности.

2. 003, наряду с компенсаторной гипертрофией, ведет к изменения.« соотношений объемов стероидородуцарувдих структур, и компонентов строш.

.). Для яд'-шика аиватвшс, подвергнутых ООЭ, характерны отклонении временной организация морфологических и метаболических изменений а течение полового цикла и при боременности, проявляющиеся изменениями динамики морфологических показателей, активности обдемегаболических {сукцинатдегадрогеназа, щелочная фоо-фатаза) и связанных с продукцией гормонов (Зв-ол-стероиддегид-рсгенааа) ферментов.

4. Репродуктивная нагрузка оставшегося яичника после 00Э черэз 1,5-2 месяца после операции примерно в 1,5 раза превышает репродуктивную нагрузку одного яичника антактных животных, что ыо-яат рассматриваться как показатель усиленного расходования овариальных фолликулов после 003.

Дцррбадщ дирсеруашщ. Материалы диссертации представлены на международной конференции "Актуальные проблемы охраны материнства и Детства с экологических позиций" (г.Хабаровск, 1994), на меакафедральнои заседании кафедр гистологии, пат.анатомии, пат.физиологии, нормальной анатомии и Института охраны материнства и детства СО РАМН (г.Хабаровск, 1994).

Нубликшщ, По тема дассертавдр. опубликовано 3 печатных работа.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 3 глав собственных данных, заключения, выводов, списка литературы. Работа содержит 129 страниц машинописного текста, 8 таблиц, 74 рисунка, включающих 64 фотографии а 10 графиков. Указатель литературы представлен 116 работами отечественных и 96 работами иностранных авторов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССВДОВАНИЯ

Эксперименты щюводились на половозрелых беспородных крысах-самках, которым в возрасте 2,5-3 месяца производили ООЭ по Я.М.Кабак (1968). Через 1,5-2 месяца после операции часть крыс сиариьачась с интактными самцами, остальные забивались в разные фазы полового цикла (острус, диэструс). Объектом исследования служили яичники 55 крыс с ООЭ (подопытная группа) и яичники 52 интактных (контрольная группа), содержавшихся, в условиях одного виваршь Наследовались яичники в даэсгруев, зструсе, на 8-й и 20-Й дня ситрс'мщмоета. «¿аза цикла определялась по вагинальным мпзкаи, ерж сн ромешюсти устанавлипачсн по времени нахождения и ЙЧЯ'К С|:<;|. г. {!.:•«»!ц«ь. Крчкн згйшшись одновременно из опцт-

ной и контрольной групп, декапигацней, в утренние часы (10 час.). 1ешй яичник половины крыс с 003 использовался для проведения гистохимических реакций, воловины - фиксировался в жидкости Карнуа с поел едущей заливкой в парафин. При забое определялись масса тела животного, масса яичника, надпочечника, матки, при беременности - количество и масса плодов, их расположение в матке, масса плаценты, объем околоплодной жидкости.

Гистохимическое исследований проводили на ssüppcsünnisc криостатных срезах яичников, Активность Зв-ол-стероиддегидро-генаэы исследовалась по методу 'М.Н.Суриной (1967). Интенсивность реакции оценивалась цитофотометричеоки (Г.Г.Автандалов, i960). В каадом случае проводили штофдтоыетршв в 5 желтых телах в 50 клетках отдельно в центре г на периферии, в 25 клетках во внутренне^ хеке 5 полосуных фолликулов, не имевших признаков атрезии, 25 клетках 5 атретическях тел И 25 - в интер-стициальной ткани. Иаыерещщ проводили на микроскопе "Лшам М-2" при длине волны 550 вм и'говда 0,1. Во оптической плотности определяли удельную активаоеть ферьинтаЧТ.ВДуравлева, Р.А.Прочуханов, 1978). После определения активности фермента на этих же срезах« прошедших через центральную часть органа, при увеличении х 25 при домоща фотоувеличителя УПА-714 зарисовывались контуры яичника а всех стероиддродуцирупцих структур - желтых тел, фолликулов, агретических tan, расчитывался их удельный объем. Затем на основании данных о массе яичника вычислялись следующие показатели:

1) масса желтых тел, средняя масса одного желтого тела,

2) масса вторичных фолликулов, маоса наиболее крупного фолликула, средняя масоа одного вторичного фолликула.

Кроме этого, в каждом случае подстегивалось число полостных фолликулов, желтых тел, имевшихся в центральном срезе яичника.

Активность сукданатдегидрогеназы выявлялась по Шелтон и Шнейдер (Кисели Д., 1962). Интенсивность реакции оценивалась цитофотометричеоки по той же методике, как л активность Зв-ол-стероиддегидрогеназы. Активность щелочной фосфатазы определяли по Гомори (Д.Кисели, 1962). Оценку активности производили цитофотометричеоки на микроскопе "Лшам И-2" при длине волны 550 нм и зонде 0,1. Подсчет производился в 50 точках в канал-

лярах желтых тел и 25 точках в капиллярах теки вторичных фолликулов. Но оптической плотности судили об активности фермента. После цитофотометрического определения активности фермента на срединных срезах вычислялись следующие показатели;

1) средняя площадь вторичного фолликула и теки определялась весовым методом (Е.Х.Васильев, 1971),

2) процент площади сосудов внутренней теки, имеющих полота-тельну©, реакцию на щелочную фосфат азу определялся при помогая морфометрической сетки (Г.Г.Автандалов, 1980) на основании измерения 100 точек в навдом случае при увеличении 12,5x8,

3) площадь сосудов теки, реагируют: при реакции на щелочную фосфатазу, вычисляли по формуле -

s ЩФ = 3 теки з % сосков теки, реагирующих на !№

4) трофический показатель {HI) вычисляли по формуле

ТО = 3 ¿№ х активность ЩИ площадь фолликула Выявление И введено с учетом его информативности, показанной в работах А.Г.Черток, (1987), Д.Н.Модат (1992).

Активность аденилатцаклазы определялась гистохимическим методом по Райку (Г.Гайер, 1974) в модификации Б.Я.Рккавакого (1979), С.А.Ростомяна, К.С.Абрамяна (1979). В желтых телах определялся удельный объем структур, положительно реагирующих на аденилатциклазу. Концентрация лнпндов выявлялась при окраске Суданом черным В. Статистическая обработка проводилась при помощи точного метода Фшера.

Уровень прогестерона п плазме крови всех подопытных к контрольных животных определялся под руководством с.н.с. Н.Б. Мурэиной в ЦНИЛ Хабаровского медицинского института paraoin.yji-НЫ1Я методом С использованием наборов DELFA progesteron Hit

Все цифровые данные обрабатывались статистически с использованием критерия Сгьадента (Е.В.Гудлер, 1978). Различил считались достоверными при Р<^0,05.

^ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ

Через 1,5-2 месяца поело операции масса оставшегося начни ка увеличивается по сравнению с массой одного яичника ян-тактннх зкво-пшх, но не достигает массы двух яичников. Сте-

пень гипертрофии неодинакова в разные фазы цикла и сроки беременности. Минимальное увеличение наблюдается в даэструсе -65$ массы двух яичвшсов (36,3+ 3,9 мг в контроле и 47,5 + 3,1 мг в опыте), максимальное увеличение - на 8-й день беременности и 2С-й день беременности - 92% и 85,6;?, Масса надпочечннка у интактных животных возрастает при беременности на 25S. У 003 животных масса надпочечника достоверно снижена в даэструсе (30,5 + 1,9 иг в контроле и 24,9 + 1,2 «г в опыте) и имеется тенденция к ее сшгжеятгп цпи <<еременностз. Масса ™атк2 у su -тактных животных и животных с ООЭ в Днестру се минимальная (299,2 i 24,0 мг в контроле м 230,5 - 24,0 мг в опыте), прячем масса матки у ООЭ животных достоверно ^снижена. В эструсе и у контрольных, и у подопытных животных масса маткл увеличивается, но если у интактных животных это увеличение составляет около 150 мг (358,4 i 24,9 мг), то в опыте - более чем двукратное (514,6 i 42,0 шО» На 8-й день беременности этот показатель был практически одинаков у подопытных (543 - 43 мг) н контрольных (551,8 - ВЭ,9 мг), а на 20-й день беременности имелась тенденция к снижению массы матки (1975 - 228,4 мг) у 003 крае по сравнена» с матаяткнми (2492,9 t 514,3 мг). При этом у ООЭ животных плода располагались в одном роге матки (в среднем около 9) на стороне сохраненного яичника, а у интактных - в двух рогах, в среднем около 12, т.е. "нагрузка"на один рог матки у интактных крыс составляла 6 эмбрионов, у 003 - 9, превышая в 1,5 раза контрольный показатель. При этом масса птог.оп оказалась неотличимой от контрольной, хотя имеются данные о том, что при большем числе плодов в помете их масса снижается (М.В.Мина, Г.А.Клевезаль, 1976). Можно предположить, что отсутствие этого эфекта у гешювариоэктошрованкых крыс предотвращалось благодаря увеличенной массе плаценты (522,0 ¿31,5 мг в опыте и 611,2 - 28,9 мг в контроле), в которой синтезируется ряд веществ, родственных гормону роста.

• В контроле масса желтых тел в даэструсе составляет 10,1

- 2,7 мг, в эструсе - 15,2 - 1,9 мг, на 8-й день-беременности

- 12,4 - О ,6 мг, на 20-й день беременности -31,3 - 3,9 мг. В опыте масса желтых тел в даэструсе и при беременности превши • ет контрольные показатели почти в 2 раза (19,7 - 2,6 мг, 23,3

- 3,8 мг, 58,7 - 3,1 мг), а в эструсе - практически не от..",.-:. • ется от контрольного - 16,5 - 3,7 мг. Масса {•олликуясв л д/ч-

н«г,-д шиактшпс крае сминается от диэструоа к вструсу (3,6 -'.- .В иг а 2,4 0,4 iir), яатш несколько повивается на 8-й день беременности (4,1 - 0,9 от) и снова снижается на 20-й лень беременности (2,6 - 0,2 мг), У ООЭ крыс масса фолликулов со вси временные точки повыа&на (4,8 — 1,3 мг, 0,7 - 1,6 мг, 9,0 i 3,9 л 3,9 - мг соответственно). При это» масел келтнх тел в яичниках ннтактных жшютних повидается от даэструса г. эструсу, в яичниках 003 животных, наоборот, снижается, теса фолликулов в контроле снижается от'диэструса к эструсу, в опыте - повшается (pnc. I). Средний размер вторичного фолликула в контроле в диэструсе, эструсе и на 8-й день беременности одинаков (69 ^ 8,6, 68 - 11,3, 65 - 11,3 усл.ед. соответственно). На 20-й день беременности средний размер вторичного фолликула несколько снижается (53 - 5,7 усл.ед.). Б опыте средний размер вторичного фолликула мшссимачыю и достоверно снижен по сравнению с контролем в диэструсе (-56,1 - 8,6 усл.од,), а в эструсе, наоборот, повышен (84 ~ 15,1 усл.ед.). При бере-иешюсти этот показатель также превютает контрольный (85,0 -i 11,3 усл.ед. на 8-й день л 91 - 8,2 усл.ед. на 20-й день беременности). (рис.2).

При подсчете объемной плотности стероидпродуциругацнх структур тгтпкав (мелтых ты, фолликулов, атретических тал и интерегкцаапьной ткани) было найдено, что в диэструсе в яичниках интактных MiEOTHUx лелтые тана составляли 27%, фолликулы -9,9$, атретичесняе тела и пнтерстициальная ткань -7,$. Объем ткани, не реагирующей на Зв-ол- стероиддегидрогеназу бал равен 54,9%. В яичниках 003 животных объем стероидпродуцируэдих структур возрастает (58,5%) по сравнению с контролем (45,И) за счет повышения объема желтых тел (4L,5t"), Объем фолл («гулов

10»I/S) и агретических тол (6,9?) но отличается от контрол i. В эструсе в яичниках интактных животных объем стероидпродуци-руетцих структур равен 52,8^, из них объем желтых тел равен 41,3$, фолликулов - 6,1%, атретических тел и интерстициалъноЗ ткани -- П, . В яичниках 003 крыс объем стероидпродуцирущих структур снижается по сравнению с контролем (46,11 в опыте) главным образом за счет снижения объема яелтнх тел (21%) , при этом объем фолликулов повышен в опыте (14,3£) по сравнению с контролем. На 6-й день беременности в яичниках интактных крыс объем отероидгтро;утарукщих структур повышается по орзвненито о

-ю

за

го

го

о1-

риса

во то 60 60

нв

Суммарная иасса желтих тел интактных (1^) и 003 (10) крис, фолликулов интактных (Лк) и 003 (П0) крыс в диоструио (Д) острусе (Э>, на 6-4 день ((Здн) и 20-и день (20дн) беременно сги.

$15

85.0

910

Мо

Л

<3<?н

Рис. ¿ . Средний размер вторичного фолликула дачников литгистий.* (.К) и 00Э (0) крыс в разике фазы цикла и при беременности.

а

д»1ьструсоы и вструсом и составляет 64,5£. Объем желтых тел равен 44,3$, фолликулов - 14,5?, атретяческих тел и интерсчги-циаяьной ткани - 5,5$. В яичниках животных с 003 объем сте-рсидиродуцирущих структур несколько повышен по сравнению с контролем (С7,3^) в основном за счет повышения объема фолликулов (Г?,3;£), при атом объем желтых тел (44,1%), агрэтических тел и интерстициальной ткани (6,2$) не отличается от контроля. На 20-й день беременности в контроле объем стероидпродуцирую-щих структур составляет 69,объем желтых тел - 60,9$, фолликулов - 6,3%, атрвтических тел и интерстициальной ткани -2,6%. В яичниках 003 крыс объем стеровдпродуцируыцих структур повышен (74,3%) по сравнении с контролем, в основном, за счет повышения объема желтых тел (67,7$), при этом объем фолликулов и атретических тел и интерстициальной ткани не отличаются от контроля (4,5$ и 2,1$),

Таким образом, после 003 изменяется соотношение объема стеропдародуцирущих структур н ткани, не реагирующей на Зв-ол-стероиддогидрогеяаэу. В диэструсе и при беременности повышен объем стероидпродуцирущих структур по сравнению с контролем, в острусе, наоборот, снижен. Изменяется и соотношение различных видов стероидпродуцирупцих структур. В опыте увеличен удельный объем фолликулов в эструсе и на 8-й день беременности, желтых тел - в диэструсе и при беременности. Эти данные свидетельствуют о том, что состояние яичника не может быть объективно оценено без учета соотношения объемов разных стероидпродуцирупцих структур (а следовательно, синтеза различных стероидов), в разные временные отрезки вне и во время беременности.

Оценивая активность ферментов в структурах яичников в разные временные точки, мы нашли, что активность Зв-ол-сте-роиддегидрогеназы в течение полового цикла и при беременности в разных структурах яичников интактных крыс подвержена значительный изменениям. В желтых телах в диэструсе эта активность минимальная (203 - 15,1 усл.ед.), в эструсе - возрастает в 1,5 раза (303 £ 33,2 усл.ед.), на 8-й день беременности несколько снижается (267 - -12,6 усл.ед.), а на 20-й день - в максимальной степени повышается (482,5 - 27,6 усл.ед.). У подопытных крыс имеется значительная сглаженность изменений ак-

диэслгрус

^ \ контроль

опыт

8 с/ней беременности

опыт

контроль 20 dnей дервмешосою

олй/т л'о//троу!б

Рис. 3 : Активность Зв-СД1 в стероидородуцирусщих структурах яичников - жолтих тепах (ж.т.), фолликулах (ф) и атретичееких голах (ft.т.) в разные фазы цикла и при беременности ..у интчк-'г л их (контроль) и O'J с) (опит) крис.

¿rOO

jm гоо

*оо

13

жолтиа тела

текоцити Í30

<9(2/

WM

V

У

/ОСУ

атретические тела /й? /âo

»г

âàv

2ûàfr-

m

•So

11нтерстициальшя ткань

Ü ,ö3

m

-t-

.4 Э öd« ЛЧ/

Ние,Л . Akihühoctl Jb—í^ill' в хелтих телах, йтротическил голах,

ииа-цютицишаиок ткани к теки фолдикулоь в даэструсе (Л), (3), na t-и (lizutl и 20-и (¿Оли) дни гЦхтепноети .

тибности Зв-ол-стероидцегидрогеназы. Более того, в аструсе она оказалась меньшей (240,5 £ 22,1 усл. ед.), чем в диэстру-се (289,3 + 33,3 усл. ед,), тогда как в контроле в вструсе была значительно вше, чем в дазструсе. Заметным отличием явилась и более чем полуторократная разница активности фермвн -та на 20-й дань беременности в сравниваемых группах животных (4S2,5 + 27,6 усл. ед. в контроле, 306,0 ±43,0 усл. ед. у 003 крыс). Направленность изменений активности Зв-ол-стеровд-дегидрогеназы в теке фолликулов у нитактннг sssqzvjjx была аналогична таковой в желтых телах. В теке фолликулов активность фермента составляла в дазструсе 64,2 + 27,6 усл. ед. и эстру-се - 130,1 £ 18,2 усл. ед., т.е. в эструсе двукратно возрастала. У подопытных крыс в аструсе и дазструсе наблюдается "сглаженность изменений" (62,8 + 16,6 усл. ед. и 76,3 ± 19,3 усл. ед. соответственно), причем в вструсе активность Зв-ол-стеро-иддегидрогеназы снижена в 2 раза по сравнению с контролем. Во время беременности наблвдается повышение активности этого фермента к 20-цу дню как у интактных, так и у подопытных животных. В атретических телах в аструсе у интактных животных происходит повышение активности энзима по сравнению с диэструсом, у крыс с 00Э - снижение (рис. 1,2). Причем в эструсе активность фермента у 00Э крыс достоверно снижена. В течение беременности, между ее 8-м и 20-м днем у интактных животных наблюдалась тенденция к повышению активности фермента в атретических телах (со 128,2 + 27,9 усл. ед. до 180,1 + 32,4 усл. ед.), у подопытных эти показатели не отличались (134,0 + 18,0 усл. ед. и 132,5 + 17,6 усл. ед. соответственно).

. Таким образом, у интактных животных активность Зв-ол-сте-роиддегвдрогеназы в различных структурах яичников неодинакова в разные временные точки и подвержена циклическим изменениям. В желтых телах небеременных животных амплитуда изменений активности фермента составляет 100 усл. ед., а при беременности - 200 усл. ед., в текоцитах фолликулов - 65 и 70 усл. ед. соответственно. В яичниках 003 животных наблюдается уменьшение амплитуды в изменениях активности Зв-ол-стероиддегидрогеназы (при беременности), а в некоторых случаях - "инвертированность" (изменения активности в желтых телах и атретических телах не-бергменних .тквогных). Следовательно, здесь наблюдалось, как к

ДЛЗСТР/С

ЭСТРУС

8-иЛдНЬ Б^д&ШШСТИ

20-йДйНЬ БЬРМ-ЫШОиТИ

-Д

0

1

О

¿С

7, 4'/АТ "

СТ

масса даух яичников 7¿,o мг

масса даух яичников

78 Л мг

41,%

исса яичника?47,5мг масса яичника-б!мг

6,2$

масса даух яичников УГ,<> мг

АТ-

масса даух яичников 101.2 мг

АП2

масса яичникажеб,7 мг

масса яичника-152,8мг

РиС. э Соотношение стероидпродуцирующих структур - желтых -»-ел (ДТ), фолликулов (.«), атретических тел и интерстициальнои ткани (АТ) и соедкнитвлыюи ткани, не реагируюшея на За-ол-староиддегидрогеназу (СТ) а дачниках интактных (контроль) . и гемиовариозктомировсшных крыс (опыт) в диэструсе, эсгрусе, на 8-и л ¿0-й дни беременности.

щ>в научена^ ряда мор$смпрических показателей, изменение вре~ мпчной организация гистофпзиологшг важнейших компонентов яяч-нгчов подопытных крыс, и в частности, стероидогенеза. С другой стороны, подобные нарушения найдены нами и в содержании прогестерона в плазме крови 003 животных, как при беременности, так в вне ее. По нашему мнению, представляет интерес, что отклонения от контроля проявляются в разных временных точках как изменениями соотношения объемов различных ствроидародуци-рупгтт структур, так л Ектенсишости в них реакции на Зв-ол-стерокддегидрогеназу. Поскольку разная стероидцродуцирующие компоненты яичника различаются по спектру секретируемых гормонов (О.В.Вашсова, 1983), то можно полагать, что у крыс с 0ОЭ в разные фазы цикла и при беременности будут наблюдаться различные отклонения от нормы в секретвруешх гормонах.

Анализ активности общеметаболического, штохондрнального, фермента - сукцинатдегидрогеназы - показал, что она не имела достоверных отличий во всех структурах гонада, кроме желтых тел, во всех временных точках у подопытных и контрольных животных. Б желтых телах имелось снижение активности сукцинатдегидрогеназы на 20-й день беременности. По-видимому, это дает основание предполагать, что специфические функции стероид-продуцррущих клеток изменяются в известной мере автономно или, может быть, первично, не будучи следствием изменений в них окислительно-восстановительных реакций в митохондриях.

Направленность изменений активности щелочной фосфатазы в желтых телах в норме выглядит следующим образом - повышается от диэструса к эструсу, затем снижается к 8-му и, еще больше, к 20-щ дню беременности (361 + 47,9 усл. ед. в диэструсе, 443 + 45,3 усл. ед. в эструсе, 4Э1 + 30,2 усл. ед. на 8-й день беременности, 302 + 33,7 на 20-Й день беременности). Это подтверждается данными литературы о снижении активности щелочной фосфатазы в поздние сроки беременности (л.воог, а.а., 1988).

Направленность изменений в желтых телах у подопытных крнс полностью повторяет таковую у интактных, но уровень активности во всех временных точках несколько меньший (291 + 26,8 усл. ед., 438 + 51,7 усл. ед., 340 + 10,7 усл. ед., 272 ± 26,6 уел, ед. соответстпенно).

Тсшш обрщам, мзксииаииое етгвгяв активности щелочной фсе^атази наблюдается на 8-й день беременности. В теке фолликулов у подопытных крис не выявлено уагньзеняя интенсивности решении к 20-му дню беременности. Таким образом, щелочная фосфатаза, как и сукцинатдегядрогеяаза, в разных компонентах яичников ООЭ крнс изменялась однонаправленно с таковой у ин-тактных на протяжения полового цикла а при беременности, т.е. активность этих ферментов меньше отклонялась от контрольных показателей по сравнению с активностью ЗВ-ол-стероиддегидро-геназы. При оценке процента площади сосудов внутренней теки, занятой сосудами, а также трофического показателя вторичных фолликулов найдено, что первый достоверно снижен во всех временных точках у 003 крыс и разница между опытом и контролем составила от 10% в диэструсе до 14? на 20-й день беременности. Трофический показатель вторичного фолликула у ООЭ животных имел тенденцию к снижению во всех временных точках, а на 8-й день беременности различия между опытом и контролем были достоверными (76,6 + 7,8 усл. ед. в контроле и 49,9 + 4,5 усл. ад. в опыте).

При оценке активности аденилатциклазы в желтых телах ин-тактннх крыс найдено, что в диэструсе, эструсе и на 8-Й день беременности активность была максимальна в желтых телах П и Ш генерации, а в желтых телах I генерации ~ минимальна. На 20-Я день беременности активность аденилатциклазы Во всех желтых телах была одинакова. Плотность расположения структур, положи тельно реагирующих на аденилатциклазу, в желтых телах предпоследней генерации у интактных и ООЭ крыс не отличаются во всех исследованных группах.

Таким образом, полученные данные говорят о том, что как во время полового цикла, так и во время беременности у интактных животных наблюдается четкая временная организация функционирования яичника. У ООЭ животных эта временная организация нарушена. Это проявляется прежде всего в сглаженности и инвер торованности изменений активности Зв-отероиддегидрогеназы в течение полового цикла и при беременности, тенденции к снижению концентрации прогестерона у крыс с ООЭ, а также изменении соотношения объемной плотности различных стероидиродуцирующих структур. Зти нарушения проявляются на достаточно ранних срока;-:

1Г(

после операции, когда в яичниках еще не развиваются дистрофические и инволютивные процессы. Все эти изменения не являются грубыми и не могут быть выявлены без применения количественна* методик, исследования гонады в разные временные точки. Можно полагать, что изложенные данные'могут оказаться полезными при выявлении генеза ряда патологических изменений после резекции или экстирпации яичника, в анализе причин, определякщих особенности потомства матерей с 003.

вывода

1. У интактных животных удельный объем различных компонентов яичника и активность Зв-ол-стероиддегидрогеназы закономерно изменяются в течение полового цикла и при беременности. Ствроидпродуцируюцие структуры имеют максимальный удельный объем на поздних сроках беременности, минимальный - в Днестру се. В яичниках животных с ООЭ нарушается временная ор ганизащя гисгофизиологии стероидпродуцяруюцих структур. Изменения активности Зв-од-сгероиддегидрогеназы в них в течение полового цикла и при беременности имеет сглаженный,

а иногда инвертированный характер. В дивструсе в яичниках крыс с ООЭ удельный объем желтых тел увеличен, а компонентов стромы - уменьшен по сравнению с контролем, в зструсе отклонения от контроля противоположны: удельный объем жел тнх тел уменьшен, стромы - увеличен.

2. Репродуктивная функция яичника, осташегося после ООЭ, через 1,5 месяца после операции сохранена, "репродуктивная нагрузка" на яичник при атом увеличена в 1,5 раза. Развитие плодов происходит в одном роге матки - на стороне оставив -гося яичника. Количество плодов на 20-й день беременности достоверно снижено, масса плодов у крыс с ООЭ но отличается от контрольной, масса плаценты - увеличена,

3. Компенсаторная гипертрофия яичника после 003 особенно вира -жена во щ>емя беременности. Нарастание массы яичника пос.ь ООЭ в наибольшей степени зависит от увеличения кассл желтых тел.

4. В диэструсе в яичниках, животных с ООЭ увеличиваются масса желтых тел и фолликулов, средний размер вторичного Фолликула уменьшен. В желтых телах яичников этих вщвотиьос достоверно повышается активность Зв-ол-старолддегидрог--Р

токе вторичных фолликулов снижен процент площади, занятой сосудами, реагирующими при реакции на щелочную фосфатазу. Масса матки при этом уменьшена.

5. В яичниках животных с 003 в эструсе увеличивается масса желтых тел, средний размер вторичного фолликула. В желтых телах, внутренней теке и атрзтачвских телах активность Зв-ол-стероиддегидрогеназы снижена. Во внутренней теке вторичных фолликулов уменьшается процент площади теки, занятой сосудами, реагирующими при реакции на щелочную фосфатазу. Масса матки в этой стадии цикла увеличена.

6. На 8-й день беременности масса желтых тел в яичниках крыс с 00Э почти в 2 раза превышает массу желтых тал в одном яичнике интактных животных, масса фолликулов достоверно увеличена. Активность щелочной фюсфатазы в желтых телах яичников 003 крыс снижена. Трофический показатель и площадь теки, занятая сосудами, реагирующими на ЩЬ,уменьшены. На 20-й день беременности у крыс с 003 масса желтых тел, фолликулов увеличена, активность Зв-ол-стероиддегидрогеназы и сукцинатдегидрогеназц в желтых телах снижена.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Рыжавский Б.Я., Каратун В.М., Мурзина Н.Б. Морфофункцио-нальные особенности яичника, оставшегося после односторонней овариоэктомии, в разные фазы полового цикла и при беременности // Билл. эксп. биод. и мед. - 1993. - СХУ, 4 3.-С.313-314.

2. Активность щелочной фосфатазы в яичниках крыс после односторонней овариоэктомии. Рукопись депонирована в ВИШГШ 16 марта 1994 года, № 583-В 94.

3. Каратун В.М. Морфометрическая характеристика яичника, оставшегося после гемиовариоэктомии, в разные фазы полового цикла и при беременности // Актуальные проблемы охраны материнства и детства. Тез. докл. мевдунар. науч.-пр. конф. ( сентябрь, 1994р). - Хабаровск. - 1994. - С.Я.