Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Локомоторная и фагоцитарная функция нейтрофилов при острых и хронических бронхолегочных заболеваниях

1 д ,1.011 1щшйская академия медицинских наук

] И ••••

научно-исследовательский институт экспериментальной медщину

На правах рукописи

колодкина любовь анатольевна

локомоторная и фагоцитарная функции нейгрошюв при остри и хронических ы>шхолегочшх заболеваниях

14.00.36 - аллергология и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Санкт-Иэтврбург 1993

Работа выполнена в Государственном научно-исследовательском пульмонологическом центре МЗ РФ.

Научный руководитель - доктор биологических наук,

профессор И.В.Походзей

Официальные оппоненты - доктор медицинских наук,

профессор 0.И.Король кандидат медицинских наук Е.П.Киселева

Ведущая организация - Институт фтизиопульмонологии МЗ РФ.

Защита дисоергации состоится "^-1" илсУ^л- 1993 г. в (2 часов на заседании специализированного совета Д.001.23.02 при Научно-исследовательском институте экспериментальной медицины РАМН (197376, Санкт-Петербург, ул.Академика Павлова, 12).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке института.

Автореферат разослан " 21 " -ча^*- 1993 г.

Ученый секретарь специализированного совета доктор медицинских наук

Л.А.Бурова

ОЩЛЯ 1АРАКТЕРИСШСА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Исследование функциональной активности найтрофилон при различного рода патологических состояниях представляет собой чрезвычайно Еажную задачу в связи с тем, что нейтрофи-лам принадлежит ведущая роль в механизмах, обеспечивающих неспецифическую резистентность организма (Маянский А.Н., Маянский Д.Н., 1989). При острых воспалительных заболеваниях нейтрофилыше лейкоциты являются первым барьером на пути к распространению инфекции, и их функциональная недостаточность может приводить к возникновению осложнений, к дальнейшему распространению инфекционного процесса ( Pick П.В., iieynolda H.G., 1903; Katz P., 1985; Howard Т.Н., 19B0). При хронических заболеваниях функциональная активность нейт-рофплов может изменяться в результате длительного воспалительного процесса в организме (Маянский А.Н., Маянский Д.Н., 1989) и, таким образом, neilTpофнлы могут участвовать в дальнейшем развития патологических изменений. Причем, и при острых, и при хронических заболеваниях нейтрофилыше лейкоциты задействованы не только в защитных реакциях организма, но и в деструктивных процессах, в связи с высвобождением ими в окружающую среду протеолитических ферментов а токсичных продуктов метаболизма кислорода ( stockey h.a., 1983; Christner P.et al., 1986; Worthen O.S., 1987; Me Gowan S.E., Hutminghake G.w., 1989). Следовательно, возникает необходимость комплексного исследования нейтрофилъных лейкоцитов, отражающего различные аспекты их функциональной активности.

Б то же время в литературе, как правило, имеются данные по изучению какой-либо одной или двух функциональных характеристик нейт-рофилов как при острых, так и при хронических бронхолегочных заболеваниях, причем эти данные зачастую противоречивы. В сеязи с этим представляется актуальным разностороннее и углубленное исследование нейтрофилышх лейкоцитов при различных формах и в зависимости от особенностей клинических проявлений бронхолегочных заболеваний для выработки в дальнейшем целенаправленного подхода к терапевтической коррекции нарушений их функциональной активности.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования явилось изучение нейтрофильных лейкоцитов при некоторых острых и хронических бронхолегочных процессах для выявюнля наиболее характерных изменений их Функциональной активности в зависимости от особенностей клинического течения заболеваний.

Основные задачи исследования:

1) Изучить локомоторную функцию нейтрофилов: спонтанную миграцию, хемотаксическую активность у больных острыми (острая пневмония, острие абсцессы) и хроническими (хронический обструктивный бронхит, идиопатический фиброзирующий альвеолит) бронхолегочными заболеваниями.

2) Определить поглотительную способность и кислородный метаболизм нейтрофилов (по тостам спонтанной и стимулированной хчмилюминесценции) у больных острыми и хроническими бронхолегочными заболеваниями.

3) Выявить зависимость изменения иммунологических показателей от особенностей клинического течения бронхолегочных заболеваний.

Новизна исследования. Впервые получены данные по комплексной оценке функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов с исследованием как локомоторной, так и фагоцитарной функции, включающей определение кислородного метаболизма с использованием разных активаторов, при различных формах бронхолегочной патологии.

Впервые показано изменение хемотаксической активности нейтрофилов и их кислородного метаболизма по тестам спонтанной и стимулированной хемилззминесценции в зависимости от распространенности инфильтративних изменений в легочной ткани при острых пневмониях тяжелого течения.

Впервые показано снижение спонтанной миграции нейтрофилов при вялотекущем обострении хронического обструктивного бронхита, зависящее от воздействия мононуклеаров крови.

Впервые выявлено повышение хемотаксиса и кислородного метаболизма нейтрофилов (по тестам спонтанной и стимулированной формил-метиониловым пептидом хемилюминесцешши) у больных идиопатическим фиброзирующим альвеолитом, и показана зависимость изменения кислородного метаболизма от активности процесса.

Теоретическое и практическое значение работы. Комплексный подход к исследованию, включающий определение как локомоторной, так и фагоцитарной функции нейтрофилов, позволил дать наиболее полную оценку их функциональных характеристик во взаимосвязи друг с другом и с различными регулаторными факторами в организме.

Выявленные изменения функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов в зависимости от формы и клинических проявлений бронхолегочных заболеваний вносят дополнительный Еклад в развитие представлений о роли нейтрофилов в течении острых и хронических забо-

леваний бронхолегочной систеш.

Полученные данные могут быть использованы в клинической практике в комплексе с общепринятыми исследованиями для оценки активности воспалительного процесса и эффективности проводимой терапии.

Положения, выносимые на защиту

1. У больных острой пневмонией и осгрш.и абсцессами легких наблюдается угнетение либо только поглотительной способности нейтро-филов, либо в сочетании с хемотаксисом,и повышение их кислородного метаболизма, что зависит от степени активности воспалительного процесса, а также,при острой пневмонии, и от распространенности инфильтративных изменений в легких.

2. При хроническом обструктивном бронхите в период вялотекущего обострения угнетена спонтанная миграция нейтрофилов в результате влияния мононуклеаров крови; при клиническом улучшении снижена поглотительная способность нейтрофилов на фоне остающегося повышенным уровня спонтанной хемилюминесценции.

3. У больных идиопатическим фиброзирувдим альвеолитом повышение стимулированной фор.чилметиониловым пептидом хемилюминесценции и снижение поглотительной способности нейтрофилов зависит от активности процесса и вдраженности клинических проявлений заболевания; уровни хемотаксиса и спонтанной хемилюминесценции повышены независимо от активности процесса.

Апробация- работы. По теме диссертации опубликовано IГ научных работ. Основные материалы диссертации доложены на городских конференциях молодых ученых по проблемам пульмонологии (Ленинград, 1986, 1988 гг.); на заседании Ленинградского общества эпи-

демиологии, микробиологии и иммунологии (1985 и 1987 гг.); на I Всероссийской конференции по проблемам комплементологии (Киров, 1987); на 3 конгрессе по болезням органов дыхания (Петербург,1992).

Реализация работы. Метод спонтанной и стимулированной хемилюминесценции лейкоцитов внедрен в практику работы пульмонологического отделения детской областной больницы, лаборатории биохимических и иммунологических методов исследования медико-инженерного центра (ЖЦ) "Аэрозоль".

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 128 страницах машинописного текста и состоит из оглавления, введения, обзора литературы, раздела собственных исследований, обсуждения результатов, еыводов и списка использованной литературы. Библиографический указатель содержит 199 источников (69 сте-

чественных и 130 зарубежных). Работа иллюстрирована 4 рисунками, 23 таблицами).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы. Было обследовано 289 больных острыми и фоническими бронхолегочными заболеваниями в возрасте от 18 до 72 лет, находившихся на лечении в период с 1984 по 1990 год е клинике ВНИИ пульмонологии МЗ СССР. Контрольную группу составили 90 здоровых лиц.

В группу больных острыми бронхолегочными заболеваниями вопли 168 больных, из них 118 больных крупозной острой пнешоняей тяжелого течения (Ш) - средний возраст 36,5 лет, и 50 больных острыми абсцессами легких (ОА) - средний возраст 43 года. Исследования проводились в динамике заболевания. У больных острой пневмонией была выделена основная группа - 102 больных с тяжелы?,: течением заболевания,и 16 больных с деструктивной пневмонией. Для уточнения сеязи тяжести течения заболевания с распространенностью инфильтрации в легочной ткани 102 больных Ш были разделены на две группы. Одну группу составили 60 больных с распространенностью патологических изменений менее доли и доля, другую - 42 человека с распространенностью патологических изменений более одной доли. У больных ОП исследования проводились трехкратно: на стадии максимальной активности воспаления (I период), на стадии обратного развития, когда уменьшались активность воспаления и объем инфильтрации в легких (П период), и при клиническом выздоровлении (Ш период). Для оценки степени активности воспаления был использован метод количественной оценки состояния больных, предложенный Г.И.Мар-чуком и соавторами (1979), для этого рассчитывали один из предложенных автором индексов тяжести - лабораторный - Пд.

Грушу больных хроническими бронхолегочными заболевания составили 121 человек, из них 68 больных хроническим обструктивяым бронхитом и 53 больных идиопатическим фиброзирующим альвеолитом. В группе больных хроническим обструктивным бронхитом - ХОБ (средний возраст 52 года) исследования проводились в период вялотекущего обострения (0-1 степень активности воспалительного процесса) при поступлении в клинику, и при клиническом улучшении. Больных идиопатическим фиброзирующим альвеолитом (ИФА) - средний возраст 38 лот — обследовали в период активного патологического процесса

(26 чел.), и в период отсутствия признаков активности заболевания, при относительной стабилизации процесса (27 больных).

Помимо общепринятых лабораторных методоЕ исследования изучали функциональную активность нейтрофилов периферической крови. Определяли локомоторную функцию нейтрофилов (спонтанная миграция, хе-мотаксическая активность) по методу миграции лейкоцитов под ага-розой ( Helson P.D. et al., 1975) в модификации С.В.Безносенко с соавторами (1984), в составе нефракционированной лейковзвеси (дополнительно для сравнительной оценки - в обогащенной нейтрофиламп фракции). Поглотительную способность оценивали в тесте с латексом, кислородный метаболизм нейтрофилов по методу Cohen м.в. et al. (1983), в нашей модификации, на люминометре 1251 ("ЛКБ~ приборы"), с помощью программы I25I-I24. В качестве стимуляторов использовали продигиозан и н-формилметионилоЕый пептид (2x1При стимуляции пептидом определялся первый пик светового потока, отражающий быстрый выброс кислородных метаболитов в окружающую среду, а при стимуляции продигиозаном - общий уровень продукции кислородных метаболитов, как вне-, так и внутриклеточных. Циркулирующие иммунные комплексы (ДИК) определяли с помощью метода Haskova V. et alII977), иммуноглобулины классов А, о , М - по методу Mancini G.et al. (1965). Содержание СЗ-комлонента комплемента изучали'по методу Uanolnl G.et al. (1965), и на приборе фирмы "Beckman" с использованием коммерческих реактивов.

Статистическую обработку полученных данных проводили методом вариационной статистики с вычислением критерия достоверности Стьюдента (Плохинский H.A., 1975).

Результаты и обсуждение. Исследования функциональной активности нейтрофилов, проведенные у больных острой пневмонией, выявили зависимость .ее изменения от периода заболевания. В первый период заболевания, при максимальной активности воспалительного процесса (Пл - 5,42 + 0,18 ед.пра норме 0,60 + 0,06 ед., р < 0,001) наблюдалась недостаточность поглотительной способности нейтрофилор. Так, она была сшшеяа как по фагоцитарному числу, так и по фагоцитарному индексу. Фагоцитарное число (ФЧ) составило 62,6+2,5 % при норме 71,5 + 2,1 % (р< 0,05), фагоцитарный индекс (ФИ) -5,1 + 0,2 при норме S.8 £ 0,6 (р < 0,05). Хемотаксический индекс (ХИ) был равен 1,93 + 0,11 прп норме 2,08 + 0,03.

Одновременно в I период заболевания у больных ОП выявлено повышение как спонтанной, так я обоих видов стимулированной хеии.тп-

минесценции (и формилметионилоЕЫм пептидом, и продигиоааном). Уровень спонтанной хемилюминесценции (СПХ) составил 8,2 + 1,2 мВ при норме 4,1 + 0,1 мВ (р < 0,01), стимулированной формилметиони-ловым пептидом (СТХ^) - 58,0 + 7,0 мЗ при норме 13,7 + 1,1 мВ (р < 0,001), стимулированной продигиоааном (СТХ2) - 51,4 + 11,6 мВ при норме 21,3 + 2,0 ыВ (р < 0,05). Показатель спонтанной хеш люминесценции, так же как и стиглулированной формплметяониловым пептидом связан в основном с продукцией внеклеточных кислородных метаболитов, следовательно, повышение этих показателей, наряду с защитной функцией, может являться и неблагоприятны;.! фактором в связи с возможностью повреждения окружающих тканей и самих фагоцитирующих клеток.

При снижении активности воспалительного процесса, во Ц периоде заболевания-обратного развития (Пл - 3,76 + 0,17 ед., р^ 0,001 в сравнении с I периодом заболевания)- начиналось возрастание поглотительной и хештаксической способностей нейтрофилов, одновременно со снижением кислородного метаболизма:по.тестам спонтанной а стимулированной формилметионилоЕыи пептидом хемилюшнесценции. Так, фагоцитарный индекс повышался до 7,2 + 0,6 (р < 0,05 в сравнении с I периодом заболевания), хемотаксический индекс составил 2,43 + 0,24, уровень СПХ - 4,4 + 0,4 мВ, СТХд- - 19Г7^.5,5 мВ. Однако общий уровень продукции метаболитов~кислорода,:по тесту стимулированной про-дигиозаном хемилюминесценции. - СТХ2 был повышен и в периоде обратного развития (57,6 + 12,4 мВ, р <.0,01). К Ш периоду заболевания -.клинического выздоровления (Пл—11,40 + 0,23) - практически все показатели (хемотаксиса, фагоцитоза и хемилюминесценции) были в пределах нормы (хемотаксический индекс— 2,11 + 0,15; фагоцитарное число 78,7 + 2,3 % - р< 0,05 по сравнению с 66,1 + 2,2 % во П периоде заболевания; фагоцитарный индекс - 7,6 + 0,6; уровень СПХ - 3,8 + 0,2 мВ, уровень СТХ2- 40,2 + 9,4 мВ)7

На протяжении всех периодов наблюдения у больных острой пневмонией не отличался от нормы такой показатель локомоторной функции нейтрофилов, как спонтанная миграция (СМ): в первый период заболе-' вания он составил 5,63 + 0,50, во второй - 4,91 + 0,83, в третий - 5,14 + 0,35 (показатель СМ для здоровых доноров составил 5,36 + 0,15). Вероятно, отсутствие выраженных различий в данном случае можно объяснить действием разнонаправленных факторов, влияющих на способность клеток к движению, например, различных белков острой фазы воспаления, увеличивающих спонтанную миграцию и токси-

ческих ггродуггов бактериального происхождения, действующих противоположным образом.

Степень изменения функциональной активности нейтроТллов зависела не только от периода заболевания, т.е.от активности воспалительного процесса, но и от распространенности инфилътративных изменений в легочной ткани. Б первом периоде заболевания, при максимальной активности воспалительного процесса хемотаксический индекс нейтробплов был достоверно снижен по сравнению со здоровыми донорам! (1,83 + 0,08, р< 0,05) только в группе больных с ботылей распространенностью инфнльтрэтивннх изменений в легких, где инфильтрация охватывала более одной доли, в то время как е группе больных с меньшей распространенностью инфильтрации, охватывающей одну долю легкого и меньше, этот показатель не отличался от нормы (2,01 ± 0,19). Повышение показателя СТХ^ - симулированной проди-гиозаном хемилгалшесценции, отражандей обцчй уровень продукции кислородных метаболитов, как вне-, так, в основном, и внутриклеточных, наблюдалось только у больных с меньшим объемом инфилътративных изменений (63,6 ± 18,5 мВ; р < 0,05), а у больных с большей распространенностью инфильтрации значение этого показателя не было повышено (24,2 + 5,2 мЗ), что, видимо, связано с недостаточностью общего уровня продукция кислородных метаболитов, не соответствующей высокой активности воспаления, именно у больных с большим объемом распространенности инфильтрации в легких, где степень активности воспаления была наиболее высокой.

Наиболее медленное восстановление фагоцитарной функции нейтро-Филое наблюдалось у больных с большим объемом инфильтративных изменений. Так, у этих больных значение фагоцитарного индекса оставалось сниженным не только в первом, но и во втором периоде заболевания (4,9 + 0,6, рс 0,05), а при меньшей распространенности фагоцитарный индекс превышал норму (9,0 + 0,6, р < 0,01). Вероятно, именно за счет более быстрого восстановления к Ы периоду заболевания - клинического выздоровления - показатели фагоцитоза и хемотоксиса превышали норму только у больных с и<зш>шей распространенностью инфильтрации в легких (хемотаксический индекс -2,34 ± 0,11, р< 0,05; фагоцитарное число - 79,7 + 2,2 %, р <0,01; фагоцитарный индекс -8,4 + 0,6, р< 0,05), в то гремя как прл меньшей распространенности эти показателя достигал:! точт,-ко нормачышх значений Ш - 2,01 + 0,17; - 77,8 + 3,1?; Ш - 6,5 ± 0,5).

Динамика показателей кислородного катаболизма нейтрсфилов также зависела от распространенности инфильтративных изменений в легочной ткани. Так, у больных с меньшей распространенностью инфильтрации в периоде обратного развития показатель хемилюминесцен-ции, стимулированной продигиозаном - СТ^ - оставался повышенным по сравнению с донорами, а к периоду клинического выздоровления происходила его нормализация. У больных с большим объемом инфильт-ративных изменений в период обратного развития, как и в начале заболевания, повышения этого показателя не наблюдалось, и только к концу заболевания его значение возрастало.

Вероятно, выраженное снижение функциональных характеристик нейгрофилов при максимальной активности воспалительного процесса можно объяснить угнетающим воздействием различных токсических продуктов бактериального происхождения.

Отдельную группу больных острыми бронхолегочными заболеваниями составили острые абсцессы легких, у которых исследование проводилось в динамике заболевания: через 1-3 недели после возникновения деструктивных изменений в легких, то есть в период активного воспалительного процесса и в период клинического выздоровления.

В период высокой активности воспаления (Пл - 4,42 + 0,47, р < 0,001 в сравнении с нормой) у больных острыми абсцессами легких наблюдалась та же закономерность, что и у больных острой пневмонией, а именно недостаточность функциональной способности нейт-рофилов, заключающаяся в выраженном снижении их поглотительной способности (фагоцитарное число 55,7 + 11,8 %, р с 0,05 в сравнении с нормой, фагоцитарный индекс - 4,8 + 1,0 при норме 6,8 + 0,6), а также в нормальных показателях хемотаксиса, не соответствующих высокой степени активности воспаления (хемотаксический индекс -2,04 + 0,22). Нормализация фагоцитоза (ФЧ - 72,7 ± 1,7 %, ФИ -6,4 + 0,2) и повышение хемотаксиса (И! - 2,35 + 0,4 при норме

2.08 + 0,04, р < 0,05) происходили только к периоду клинического выздоровления, при стихании активности воспалительного процесса Нл - 2,77 + 0,43, р < 0,05). Уровни спонтанной и стимулированной формилмегиониловым пептидом хемилюминесценции были повышены, как и при острой пневмонии, только при высокой активности воспаления (СПХ - 7,2 + 1,0 мВ при норме 4,1 + 0,1 мВ, р< 0,05, СТХ1 -28,7 + 6,9 мВ при норме 13,.7 + 1,1 мВ, р< 0,05), а к концу заболевания происходило их снижение (СЕК - 4,3 + 0,9 мВ; СТХ, ■

9.9 + 1,8 мВ). Однако, в отличие от больных острой пневмонией, с

период высокой активности воспаления не набллцалосъ повышения стимулированной продигиозаном хемилюминесценции (22,0 + 3,4 мь), которая не повышалась и к периоду клинического выздоровления (25,0 ± 2,2 мВ).

Так же, как и у больных острой пневмонией, у болышх острыми абсцессами легких отсутствовали различия в показателях спонтанной миграции по сравнению со здоровыми донорами: в период активного воспаления в легочной ткани показатель спонтанной миграции составил 5,66 + 0,62, при клиническом выздоровлении - 5,50 + 1,12.

Группу больных хроническими бронхолегочными заболеваниями составили больные хроническим обструктивным бронхитом (ХОБ) и идио-патическим фиброзирупщим альЕеолитом (ИФА). Больные хроническим обструктивным бронхитом были обследованы как пример хронического воспаления в бронхолегочной системе, при котором участвуют инфекционные факторы.

В период вялотекущего обострения у больных ХОБ не наблюдалось существенных различий в показателях хемотаксической и поглотительной способности нейтрофилов по сравнению со здоровыми донорами (хемотакспческий индекс - 2,30 + 0,12, фагоцитарное чясло -70,8 + 4,2 %, фагоцитарный индекс - 7,1 + 0,7). К периоду клинического улучшения хемотаксический индекс практически не изменялся (2,22 + 0,14), а поглотительная способность нейтрофилов снижалась по фагоцитарному индексу ($4 - 67,2 + 3,1 %, фагоцитарный индекс - 5,3 + 0,4, р <. 0,05 в сравнении с нормой и с периодом обострения). Показатели кислородного метаболизма нейтрофилов по тестам стимулированной хемплюминесценции не отличались от нормы ни при обострении (стш.гулироЕанная пептидом СТК^ - 16,8 + 1,8 мЗ, стимулированная продигиозаном СТХз - 26,6 + 3,0 мВ), ни при клиничеп ком улучшении (СТХ1 - 16,8 + 1,8 мВ, СТХ2 - 22,8 + 4,4 1дВ). Одну ко спонтанная хеми люминесценция была повышена на протяжении вс»1-периода наблюдения (7,6 + 0,6 мВ, р< 0,001 и 8,2 + 1,0 мВ при клиническом улучшении, рс 0,001).

Тот факт, что даже в период обострения заболевания не повышается уровень стимулированной хемилюминесценции (как формилметион • ловым пептидом, так и продигиозаном), вероятно, свидетельствует " недостаточности функциональной способности нейтрофилов. Повшп?!!!." спонтанной хемилюминесценции происходит, видимо, в результат*» д?" ствия различных раздражающих агентов в самом организме, что огн«-тельствует о непрекращающемся воспалительном процессе.

При проведении дополнительных исследований спонтанной миграции хемотаксиса в обогащенной фракции нофтрофилов у болышх хрони-■|.'1:киы обструкгивным бронхитом е период вялотекущего обострения он;к5 обнаружеш; различия по сравнению со зпорогами донорами в степени влияния клеток мононуклеарной Фракции на локомоторную функцию нейтрофилов. 'Гак, соотношение показателей СМ/СМ-^ в составе нефрак-ционированной лойковзвеси и в обогащенной фракция нейтрофилов соответственно составило 0,61 + 0,05 и резко различалось по сравнению со здоровыми донорами, где индекс СМ/С.М^ был равен 0,86 + 0,14 (р < 0,001), т.е.в присутствии мононуклеаров спонтанная миграция нейтрофилов снижалась в среднем на Зд%, в отличие от здоровых лиц, у которых снижение происходило на 14',?. Количественное содержание мононуклеаров в крови у больных ХОБ в этот период также отличалось от нормы: процент лимфоцитов превышал уровень здоровых доноров (35,2 + 2,2 % при норме 29,0 + 1,4 %, р ^ 0,05 и был достоверно яьшга (р < 0,05), чем при клиническом улучшении (29,5 + 2,5 %). Процент моноцитов также превышал норму только при обострении заболевания (7,8 + 0,5 % при норме 5,5 + 0,6 %, р < 0,01), во время клинического улучшения он составил 7,8 +1,1 %. В отличие от периода обострения при клиническом улучшении влияния мононуклеаров на спонтанную миграцию нейтрофилов ужо не выявлялось, показатель СМ/СМ^-был равен 0,84 + 0,09, т.е.не отличался от нормы. То есть у больных ХОБ в период вялотекущего обострения резко выраженное влияние мононуклеарной фракции на нейтрофилы сочеталось с изменения™ б количественном содержании мононуклеаров. Учитывая преобладание лимфоцитов в мононуклеарной фракции, можно думать о преимущественном их влиянии на двигательную активность нейтрофилов в составе нефракшю-нированной лейковзвеси. Как известно, лимфоциты способны вырабатывать фактор, ингибирующий миграцию лейкоцитов (ЛИ£) в результате стимуляции различными агентами, находящимися в крови (Григорьева М.П., 1989; РауЦотСаегШо Ь., 1988), под влиянием которого происходит накопление нейтрофилов в месте повреждения или воспаления. Возрастание количественного содержания лимфоцитов в крови может, видимо, вносить какой-то вклад в повышение уровня регуляции локомоторной функции нейтрофилов. Однако выявленные изменения не носят постоянного характера и зависят от клинического состояния больных ХОБ, вероятно, за счет того, что в результате адекватной терапии у беды-кх происходит улучшение клиренса.

Тй'-пм обрезем, спонтанная миграция кейтро^илзв в н?-*ракилош,ро~

ванной лейковзвеси была снижена по сравнению с донорами в период вялотекущего обострения (средний показатель составил 3,83 + 0,21 при норме 5,36 + 0,15, р 0,001). При клиническом улучшении снижения спонтанной миграции нейтрофилов уже не выявлялось, в этот период средний показатель СМ составил 4,59 + 0,23 и был достоверно Еыше (р < 0,05) по сравнению с периодом обострения. Спонтанная миграция в обогащенной фракции нейтрофилов, показатель которой зависит не от регуллторного воздействия лимфоцитов, а непосредственно от двигательной способности самих нейтрофилов, напротив, снижалась по сравнению с периодом обострения при клиническом удушении (5,31 + 0,60 в сравнении с 7,00 + 0,40, р < 0,05,при норме 6,43 + 0,32). 3 сочетания со снижением в период клинического улучшения поглотительной способности нейтрофилов этот факт, видимо, означает, что при обострении заболевания показатели спонтанной миграции и фагоцитарного индекса нейтрофилов не могут подняться выше нормальных значений, а затем их способность к спонтанному движению и фагоцитозу возвращается к исходно сниженному состоянию.

Исследование нейтрофильных лейкоцитов у больных идиопатическим фиброзирующим альвеолитом представляет особый интерес, так как данный альвеолит называется "нейтрофильным", т.е.показано участие нейтрофилов в его патогенеза. Обработка результатов исследования у больных ИФА проводилась как по группе в целом, с целью получения' характеристики нейтрофилов при данной нозологической форме, так и в зависимости от активности процесса и выраженности клинических проявлений заболевания.

Поглотительная способность нейтрофилов у больных И5А в целом --■по группе была снижена по сравнению с нормой как по фагоцитарному числу, так и по фагоцитарному индексу (ФЧ - 49,9 + 6,7 %, р < 0,01; ФИ - 3,9 + 0,9, р < 0,01). Хемотаксическая активность нейтрофилов была повышена (ХИ - 2,70 + 0,12, р < 0,001 в сравнении с нормой), а показатель спонтанной миграция не отличался от здоровых доноров (4,99 + 0,33 при норме 5,36 + 0,15).

Исследование кислородного метаболизма нейтрофилов выявило повышение спонтанной хемилюминесценции (7,8 + 0,6 мВ при норме 4,1 ± 0,1 ыВ, р < 0,01). Показатели хемилюминесценции, стимулированной как формилметиваловым пептидом, так и продигиозаном, не отличались от здоровнх лиц (стх1 - 16,6 + 1,6 мВ, СИ2 - 20,2+2,2 мВ).

При анализе результатов исследования по группам больных в зависимости от активности процесса и выраженности клинических прояя-

лений заболевания оказалось, что для больных с активным ИМ было характерно возрастание! хемотаксической активности нейтрофилов у большинства больных. Так, средний показатель хемотаксического индекса составил для бальных с обострением заболевания 2,81 + 0,17 (р < 0,001), частота повышения значений Ж выше Еерхней границы нормы равнялась 0,75, При относительной стабилизации процесса средний показатель Хй снижался, оставаясь достоверно повышенным по сравнена» а дрнорами (2,59 + 0,13, р< 0,05), а значення XII превышали верхнюю, границу нормы в половине случаев. Таким образом значительный, приток цойтрофилоЕ в легкие может быть обусловлен их высокой хемотаксической активностью, и при обострении заболевания может увеличиваться вероятность воздействия нейтрофилов на легочную ткань. Тот факт, что и при относительной стабилизации процесса хемотаксис остается повышенным, может указывать на роль нейтрофилов в поддержании хронического течения заболевания. Кроме того, обнаружено, что при относительной стабилизации процесса одновременно происходило снижение спонтанной миграции цейтрофалов (средний показатель составил 4,43 + 0,31) при норме 5,36 + 0,15, р < 0,05). При активном процессе такого снижения не наблюдалось (5,41 + 0,52).

Поглотительная функция нейтрофилов была достоверно снижена по сравнению с нормой тев®е только у больных о относительной стабилизацией процесса. Средний показатель фагоцитарного числа составил для этой группы больных 45,3 + 7,6|(р < 0,001), фагоцитарного индекса - 2,9 + 0,6 (р< 0,001). При активном Ш>А поглотительная способность нейтрофилов тоже была снижена, однако различия с нормой в данном случае не были достоверными (средний показатель фагоцитарного числа'- 53,9 + 11,6 %, фагоцитарного индекса - 4,7+0,9).

Исследование кислородного метаболизма нейтрофилов показало, что повышение спонтанной хемилюминесценции по сравнению с нормой наблюдалось у больных ИФА независимо от периода заболевания (7,6 + 0,6 мВ, рС 0,05 - при обострении заболевания, 7,6 + 1,0 мВ - при относительной стабилизации процесса. Таким образом, независимо от периода заболевания у больных ИФА происходит постоянно продуцирование токсических кислородных метаболитов в окружающую среду. Однако при обострении заболевания хемилюминесценция, стимулированная формилметяонаяоЕШ пептидом, была достоверно выше нормы (21,2 + 2,8 мВ, р< 0,05) и достоверно выше, чем при относительной -стабилизации процесса (р < 0,05), где этот показатель составил

только 12,8 + 1,2 мВ„ Следовательно, при обострении заболевания увеличивается возможность участия нейтрофилов в повреждении собственных тканей организма. В отличие от этого, показатели, хеш люминесценции, стимулированной продигиозаном, которая выявляет общий уровень продукции кислородных форм как вне-, так в основном и внутриклеточных, не отличались от нормы в оба периода заболевания. При обострении заболевания этот показатель составил 20,8 + 3,4 мВ, при относительной стабилизации - 19,8 + 3,2 мВ.

Таким образом, у больных идиопатическим фиброзиругощим альвеоли-том некоторые показатели функциональной активности нейтрофилов (поглотительная способность, окислительный метаболизм) зависели от активности процесса и выраженности клинических проявлений заболевания. Повышение хемотаксической активности наряду с возрастанием уровня продукции токсических кислородных метаболитов может быть патогенетическим фактором, способствующим участию нейтрофилов в возникновении и развитии нарушений в легочной ткани.

ВЫВОДЫ

1. У больных острой пневмонией тяжелого течения наблюдается снижение хемотаксической и поглотительной способностей нейтрофилов и повышение всех показателей кислородного метаболизма (спонтанной и стимулированной как формилметяонлловым пептидом, так и продигиозаном хемялхминесценции), что зависит от степени активности воспалительного процесса и распространенности икфпльтративных изменений в легочной ткани.

2. У больных острыми абсцессам легких при высокой активности воспалительного процесса выявлено снижение поглотительной способ- ' ности нейтрофилов, повышение спонтанной и стимулированной формил-метионилоЕШ пептидом хеш люминесценции, и нормальный уровень стимулированной продигиозаном хэмзлюминесценции.

3. Снижение спонтанной миграции нейтрофилов по сравнению со здороЕыми лицами у больных хроническим обструктиЕным бронхитом в период вялотекущего обострения связано с регуляторным влиянием мо-нонуклеаров кроЕИ, при клиническом улучшении это влияние менее выражено.

4. При клиническом улучшении у больных хроническим обструктив-ным бронхитом снижаются показатели поглотительной способности и спонтанной миграции нейтрофилов, не зависящей от влияния мононук-

одров, в сравнении с нормальными показателями в периоде обостре-.::я заболевания, на фоне остающегося повышенным уровня спонтанной ■.омилхшнесценцпи. Стимулированная хемилюминесценция не изменяется в динамике заболевания и не отличается от уровня здоровых лиц.

5. У больных идиопатическим фяброзиругацим альве.олитом при обострении заболевания наблюдается повышение хемотаксиса, спонтанной и стимулированной формилметиониловым пептидом хемилюминесценции нейтрофилов. При относительной стабилизации процесса хемотаксис и спонтанная хемилюминесценция остаются повышенными, в сочетании с наиболое выраженным угнетением поглотительной способности и сниженным уровнем спонтанной миграции.

список работ, опубликованных по тиле диссертации

1. Путов Н.В., Походзей И.В., Колодкина JI.А. О роли некоторых механизмов в патогенезе эмфиземы и ряда других заболеваний легких // Терапевтический архив. - 1985. - № 3, - C.I44-I48.

2. Колодкина Л.А., Мовчан Н.С., Иванова Н.М., Нефедова И.А. Опсонизирувдие факторы (IgGi СЗ) при острых и хронических бронхо-легочных заболеваниях // Сб."Система комплемента". - М., 1988. -С.142-144.

3. Колодкина I.A. Хемотаксическая активность нейтрофильных лейкоцитов при идиопатическом фиброзирувдем альвеолите // Сб. "Клеточный иммунитет в патогенезе заболеваний легких". - Л., 1988. - C.I08-III.

4. Колодкина Л.А., Маховенко Л.В. Локомоторная функция нейтрофилов периферической крови у больных хроническим обструктивным бронхитом // Сб."Актуальные вопросы диагностики и лечения хронического бронхита". - Л., 1989. - С.42-45.

5. Колодкина Л.А., Орлова Г.П. Хемотаксическая активность нейтрофилов периферической крови при дассеминированных процессах в легких // Сб."Актуальные вопросы диагностики и лечения диссемини-рованных процессов в легких". - Л., 1989. - С.52-56.

6. Сесь Т.П., Колодкина Л.А., Журавлев A.B. Фагоцитирующие клетки в патогенезе ИФА // Сб."Актуальные вопросы диагностики и лечения диссеминированных процессов в легких". - Л., 1989. -С.48-52.

7. Колодкина Л.А. Хемотаксис и хемилюминесценция нейтрофилов у больных кесдецифлчаскиш заболеваниями легких // Сб.тезисов I Все-

союзного научного общества иммунологов. - M., 1989. - T.I. - С.60

8. Колодаина л.А., Орлова Г.П. Функциональная активность нейт-рофплов у больных идиопатическим фиброзаруэдим альвеолитом // Сб. резюме 2 Всесоюзного конгресса по болезням органов дыхания. -Челябинск, 1991. - С.177.

9. Колодкина Л.А., Довнар Т.Е., Шкляревич Г.А., Орлов C.B. Хемотаксис п хемилюминесценция нейтрофилов периферической крови больных острыми инфекционными заболеваниями легких // Сб."Актуальные проблемы пульмонологии". - Л., 1991. - С.124-128.

10. Колодкина Л.А., Шкляревич H.A., Довнар Т.Е. Хемотаксис, фагоцитоз и метаболическая активация лейкоцитов у больных острой пневмонией // Терапевтический архив. - 1991. - Л 3. - С.27-30.

11. Kolodkina L.A., Shklyarevich N. А., Dovnar Т.Е. Chemotaxis, phagocytosis end metabolic activation of leukocytes in acute pneumonia patienta // Soviet Archives of Internal Medicine.-1991.- Vol.65, N 1.- P.69-71.

С-П ЫИП З.Ю5 T.100 1 3.05.93 г. Бесплатно.