Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Коррекция пептидными препаратами тимуса и костного мозга вторичных иммунодефицитных состояний (экспериментальное исследование)

5 г. 55' 9 я

ВОЕННО-МЕДИЦИНСКАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА КРАСНОЗНАМЕННАЯ АКАДЕМИЯ имени С. М. КИРОВА

На правах рукописи

МАЛ ИНИН Владимир Викторович

КОРРЕКЦИЯ ПЕПТИДНЫМИ ПРЕПАРАТАМИ ТИМУСА И КОСТНОГО МОЗГА ВТОРИЧНЫХ ИММУНОДЕФИЦИТНЫХ СОСТОЯНИЙ

(экспериментальное исследование)

14.00.16 — патологическая физиология 14.00.36 — аллергология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук ~

Санкт-Петербург —1992

- А

Работа выполнена в Военно-медицинской ордена Ленина Краснознаменной академии имени С. М. Кирова.

Научные руководители; доктор медицинских наук, профессор В. X. ХАВИНСОН, доктор медицинских наук, профессор О. С. НАСОНКИН.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор В. Б. ЛЕМУС, доктор медицинских наук, профессор Б. Н. СОФРОНОВ.

Ведущая организация — Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови.

Защита диссертации состоится /¿/¿■/¿.С- 1992 г.

в часов на заседании специализированного совета

Д 106.03.06 в Военно-медицинской ор'дена Ленина Краснознаменной академии имени С. М. Кирова (194175, Санкт-Петербург, ул. Лебедева, 6).

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке ВМедА имени С. А1. Кирова.

Автореферат разослан 1992 г.

Ученый секретарь специализированного совета доктор медицинских наук

В. Н. АЛЕКСАНДРОВ

Подписано к печати 23 апреля 1992 г. Объем 1,0 п. л. Бесплатно. Зак. 266.

Типография ВАС

ХАРАКТЕРИСТИКА Pí.íÜTU

_________ paçotu. проблема це?л fu дпрсюлежмой

инпунскоррекции 9.эпяетс<а одной из актуальных в современной медицине? . Нарушения s системе иииунитигта, оозник^оцми при различных заболеваниях и патологических состояниях, способствуют, как пр^аило, затч-инаиу течению основного з 2болгя а»-я со гк/юннастью к ррцидиолм, снижению сопротивляемости организма к ,1н;екцичм, г^ийитио осло»«енпй, Matero иесоштсттилч с -нэнию (Ковальчук A.B. , 19?9; Чер^дееи А.Н., 1979; Патрс« Р.П., Певедуз К.А., 1934, 1935; Luver A.M.L., Webster A .D .D . , 1ÎH' . > . 1зввстно, что такие поража/ацие ^актеры как овлучениз, грл^мл-^нтоксикаиия, инфекция и ряд других при воздействии на органики человека и животных вызывают глубокие? нарушения s различ>мх

звсньчх - ими у иной защиты , что, п ldoio ичоредь , смзыоос-г <еовходимость п роез едежия иилеиаправ чениого им» »унокорриг иг> уюдгга течения (Лисицин к..м. и др., 19с£; Гсибицкий е.б., 19í3->; !озоаой 13.П. и др. , 19q5; Ллвинсон В.х.,, Захаров Í5.H. и др.,

i99<;; Сорый c.b., 1990). Однако, существующие методы и -îOKripcTDOHHbic? средств* < Ма:иь пзский М.Д., 1с.ЗЗ), приппгнчепые п слинпчеекой практике», и-.» дают возможности в полной мрре о^рспрчит'» 5ф?сктипну>0 ксррокцию иммунодем-ицитних состояний. В епчзи с этим, »алиеГ-иим на прав лением научных исследований чалчетсч разработка и 1эучг»ние лекарственных средств и спосгвсв воздействия на различные? :уз популяции иммунокомгштрнтт < кл«ток с из вира 7 рльным под лгзя.?» том 1/1 и 5кт1 юацией их функций с ирлью посстдноплсиия на р у ¡л «мной 1ммунолосической ррдктивности организма (Михайлова A.A.,

1с?гроэ P.D., 1977 ; Лопухин 10. M. , 1 Э^З : Петров Г.В. и др . , 1935 ; 1оловьс?в Г.М. и др., 1937? Шапьнке £5. И. и др. , 19¡?3| Савиноз В. А., 989? Чучалин А.Г. и др., 1Э8Э; Low T.L.K. , Goldstein A.L., 19Í34; hingoG M.A., Talr-adqp J.E., 1985, Waymcick J.P., Alexander J.U., 93b! Veys Е.П. e?t al . 19SBJ.

Достижения conpf?npi иной иммунологии, сп пс об с то укщи= раскрытию атогенетичвеких механизмов многих эз^опепаний, стимулировали оиск препаратов, оеладдкхцих способностью яоэд^йстгич на различии^ DPHbl ИИИУМИОГО OTCRT1 И РО^МО*'НОС"»"КЮ ого коррекции. ûcncog мимание уделяется вылплрнгю и изучению регулягорны:« пептидкыж актоосв из центральных органов сисгеил иммунитета-тимус л и остного мозга. Из тимуса пмдвлрп ряд веществ полиппптидиой

природы« per улирукхцих различи.^ этапы пролис-ерации i дифференцировки Т- лимфоцитов s тимусный г уморальный сактор — ТТ*£ (Tramm N., Small А., 1970), тимозии (Goldstein A.L. et al., 1975) , тимспозтин (Goldstein G. , 1974) , тимусный сывороточный Ф-актор - ТСФ (Bach J .F. et al . , 1975) , тимостинулин - TP-1 (Bergesi G.t Falchetti R., 1977) , тималин (Moposdd В.Г., Хаоинсо*-В.У., 197Ö) , Т-актиаин (Ai ;'üh В.Ям 1931), тимостииулик (Гринезич Ю.А., Никольский И.С., 19ПЭ) , вилозен (Безвершенко И.А. и др., 1989), тимоптии (Скоеельцына Е.С. и др., 1989) и др.

В настоящее время известно нс.^'олька препиратси тимуса (тииозин 5 Фракция, типопоэтин, сывсро точный ттiycj-^й оактор, тималин) , из которых выделен»! иммумоактиз^лс фракции, послужившие основой длч создание синтетических иммунамедуляторов, принензеных d клинической практике.

Из костного нозга также г»ыли получены пептидно препараты, Обладающие широким спектром виологичссксго действия, ОБеспечира/адиг реализацию многочисленных оункции отого орг-смл кроветворение и иммунитета: миелопид (П'лтроз Р.В. и др,, 1904) и геналин (Иорозои В.Г., Хоаинсон В.Х. , 1901). На основе содержащейся в геналине Биологически ¿ктианой фракции осуществлен химический сингла пентгшиптида костного нозга, озладлхшего сходным с гемалином cap микологическим дгйстгги;^ i.

Несмотря на широкое изуч:.ни:? тимуса и костного

мол г rt, or»ecne4nacJL^HX сс^^-сугниу, гзаимздействие и

оункционирселние иммун^ко/пл ¡? г ,.'н г r-tjx • л:м с к, окончател ьно н_' устаяовльно их вли^ии^? на мигг о~-тпт процессы Формирования

иммунного отвага. Предстапл«ег интерес дальне*^».;ее my^rw "П пептидных препаратов тимуса и ксстного мозга и их ссчг-чанмй(? применение для коррекции вторичм^х иммунадатицитмлх состояний.

Цг?л и __ и_рснс;эк:1з а дачи исс л ел о о ¿чш . 0 стиран 2 я цел-:» р ¿из о v-1 заключалась в из учении ьличии^ комплекс.ни> и пин тттич^ск.; * пг птид» "ix ripe- паратой тимуса ( тималпчг. и ти.!,::тч J и к ост моги мо^гд (г --мали" и пентлпептида. кос тис., г о ис::г .. ! и , • р .гз л.*?>"'.»нзм и сочетанием применении на систему »<r w !: г " г.'-.--- « и

Л HÜO Т ЧЫУ с ЕГОР11Ч(«.1МИ НММ /!-<■?/• ' - " i • ~ С, С Т и 7 4; i -1 I<;« ,

cu>r лщ-'лгн^'пи поз дзис Г'н'ем иемчзге^ю..-.. • •1 ■» •. > ч ' ; и "i,-:r 1ТС!ч:г

прсиеденнн сравнительной оцс-нки Биологическом акл.инсстн на г ионы к и синтетических пептидов тимуса и костного мозга in vitra.

Для достижения указанная цели сыли пост задачи:

1. ИЗУЧИТЬ НДРуиеНИЯ ИММУННОЙ cmct»-?il-i Организма ПРИ ПОЗ ДОЙСТОИИ исчизирукиц-ГО из луч ГНИЛ и Т1 !МЗКТОМИМ.

2. Сраснить имнунослюлогическ^о активность н-ли.') j< и синтетических лептидоз тимуса и костного мозга in vitro.

3. Изучить влияние комплексных и синтетических полти»ч -их преп^ратез тимуса и костного мозга при раздельном прим:?и-л1им i-1 иммунную систолу у здсрооых ЛЭ^ЗОТ^ГХ И при отсрич! fij.v иммунодефицитных состояниях, сз ус лез лонных раДИАЦИОННЫМ воздействием и тимзктонией.

4. Изучить влияние комплексных и синтетических пептидных препаратов тимуса и костного мозга при сочитайном применений! на иг ту иную систему у эдорезых ллзоткых м при вторична ¡х иммунаде^ицитных состояниях, сеуслаоленьих радиационном гез дейстенам и тимзк темией.

Мчуч>^зч__jp-iизна______р«чкпты . В р ав a т е впервые пр еледема

сравнительная оценка Биологической актизности комплексних и синтетических пептидных препгратоя тимуса и костного но*» г а при их раздельном и сочетанием применении.

При сравнительном изучении in vitro биологической активности пептид мм ч препаратос тимуса и кост ного мозг а установлено, ч m натипние, и синтетические пептидм тимуса os ладлют наисолес? сыра^еннгли актигпфу1адим дейстоием на с у s популяции Т—лимтоцитоз ; активность натичных пептидпз ксстииси мозга нлпраолена на В-лимфоциты, а синтетический препарат »остного мозга оказывает слияние на Т- и Б-лимфоциты.

Устанпз лено, что комплексные < тималин, гемалин) и синтетические (тимоген, пенталептид костного мозга) пептиды тимуса и костного мозга сказывают специфическое регуляторное влияние на имиунекомпетентные клетки. Еаедение тималина споссв стаует сосстаноолениго количества тимоиитоо и лимтоидных клеточных форм костного мозга, применении» г емдлина стимулирует гранулоцитопоэз и активность В-лимфоиитоо после радиационного создействия. Тимоген и

¿\

пентапе'пид костного мозга у оо л ученных животных сжазывгиот стичулиругацее слияние на созревание Т- и Ь-лим;оцитов D лим^сидных органах, активируют пролиферацию клеточных элементов лима-оидного ростка крове,творения.

У тимэктомиравань-ых живот hsíx пептидные препараты тимуса ок азывtJOT воздействие преим/ чественно на ранние этапы дио-с-еренцировки Т- и В-лим^ \ци-. зв . Действие костномоэговых п^гпи/аав при иммунодефиците, аг, у с лоз ленном тимэктомией, направлена на ли| 1<;>оидный и гранулоцигарный ростки крогетворения.

Сочеганное применение комплексных 1.~птидных препаратов тимуса и костного мозга при вторичных ими у--адр.рицитах, вызвашых ойлучс-.'и! inri и тимэктсмипй, приводи'- к волке быстрому и стойкому восстановлемко измененных. иммунологических показателей.

Синтетические пептидные препараты тимуса и костного мозга при сочет «зннам применении оказывают менее выр^сниое? стимулирующее действие на регенградионную способность лейкоичтоа и лимфоцитов периферической крови облученных животных, но способствуют восстакаоленикз количества Т- и П-лимФоцитив в лимсоипнм» п^глчлх. Пои вторичном иммунодефиците, индуцированном тимзктомией, coveran» те грименвниг? тимог ена и г.ентап.зптндл костнсг о но?г а чбляртся полег ач'1рктием^н, чем раздельное применение препаратов.

Пептидные препараты тимуса и костного мозга и с кспер^г 1ентв.льных иодглчх иммумолегицм; г- i ' состачмий оказывали норма лизуне el» влияние на показ «-.гт от» не^пг'ци ; ■ "i-'ой резистснт ноет и организм;-..

Пскгпано, ч го спец и хичног т ^ - л - щ с? тлпка к ix nprn,ip¿'ac\: тимуса и i<огтного излгй сг> уелоj л ена н.1'мчи;п п. их coctücj иммунодк тивы,,14 п^птиднмх с г-акт и.

Практическая __ i ^ pó'.OTci. Сим т е г» 'ч»_ т.>ч ти/;.-ые

препгра ты тим ус «i. <. тииог1 ей) и ь с с тного гозг л (iviitcii гптнд и с-: г г,) о"» т vui 1>'нйЮРпаЛ1и>К1;.!:с1 г.грстмт и - р •- г п ■ i 'у г:„ !.:"•■•>

с истек;! ими у ни т г? га и нар:- д у с н чт и-! i • .>•'•;';.. • • • ■. t r-, ■ ■ -i¡-n í

nnyea (т имг.?/н'н> и кост ног о > 4 - ¡' мзг ут с=; ть

дл~> И' ту • с г ; г i чи *и . i' ¡ п , ■. гр* ;м-> н,

пьчг'т.!!'. П т 11-1 С CíC'H 'Г,Г С1 МО" Г -л МЛ'" f" ■ • i' ■ 1 • l-^.i М i ~ / . М " •

кос ti ujmo? г" о !пго kpu'jr t k? с'г'гнчч -

Ü3

(/Оч;л jnM-r? пригон:-ми'.» П2ПТИД1МН npíin.ípj roa тимуса и ьостиого run г a лозролт'.-г осу; ¿ e-ero л я tu полноценную cpplíi и то;- ичк<их

t 'ммун^.оо'ицитмлх cccTfjrsH'i/i с nopavñHHüii Т- и Г--~::Г;><ьс-ч п'.лунной

сис tfîmli .

Hporедено определение? ч у гз с то и те/i ь мости к г person at г.м суг; популяций Г- и Б-лим^оаитеп , выделеин» jx из л ори : см-.-, с. с » ;г,й i.-pfúii с пторич»*лми пммугод«тплитьыни состояниями, nui.. J/IP-.-.J.V-fc?

осуществлять подбор иииуномодуляторо'з для nporit деми-л

целенаправленней коррекции иммунологнисскич наругд-ииСи

Материалы исследований испал^зу^тея г.ри дипгнастн заг; о лазаний, сопрс^ож/!^ г.иуся кимую/;*?'„пиитами, а пинт рал* нг.'й лавсратории, научно-исследсчательскпй лаиоратсрии иммунологии и пирусологии, научно-иесле?£озат£?льсьпй лаборатории Биорегуляторов , лечении больных с патологией ими у и» ¡oii системы а к линии, с? гематологии и клинической иммунологии ПМедА i,м. С.M.Кирouа-

Материалы диссертационной равоты ыключены в научно-ггсуничсск^о документации на пентапоп гид коеппго нптл, лредстзвл 9 ем у га в Тармакэлогичосн им ксчитот Миьист г;рс т м а здравоохранения для получения разрешения на клинические? испытания препарата.

По материалам работы получено 1 ргшечи*? о сыдаче авторского свидетельства, разработано и внедрено 1? рационализаторских предложений.

Основные поло*г?ния j вынос с? на.з «тмит у.

1, Вторичные иммунадятицитные состояния, вызванные

воздгйс гпием ионизирующего излучения и тимлктомией,

характеризуются а раз личной степени выраженности нар у:и«ни«пи клеточного, г уморального иммунитета и неспрч,и*ичоской резистентности орг анизма.

5. Применение комплексного пептидного препарата тимуса (тималина) при вторичных иммумодетицитны* состояниях способствует нормализации преимущественно показателей клеточного иммунитета. Комплексный пептидный препарат костного мозга (гемалин) окагшгзает стимулирующее влияние преимущественно на гуморальное звена иммунной системы и гранулоцитапоэз.

ь

3. Применение синтетических пептидных препаратов тимуса (тимогена) и костного мозга <пентапелтида костного мозга) стимулирует процессы пролиферации и дифференцировки как Т—, так и В-лимфоцитов, при этом, пентапептид костного мозга оказывает Более сильное активирующее воздействие на лиифопоэз в костном мозге.

Сочетанное применение комплексных и синтетических пептидных препаратов тимуса и костного мозга при нарушениях иммуно— и гнмопоээа спосовствует волее быстрому восстановлению показателей клеточного и гуморального иммунитета в центральных и периферических органах иммунной систь.«, активации лимфо- и гранулоцитопоэза.

Апроеация. _е.а§оты. Основные результаты диссертационной равоты вь'ли доложены на городских научных конференциях: "Иммунорегуляцит" (/I. , 1923) , "Вопросы прикладной иммунологии" (Л., 1984, 1985, 199и), "Еозрастные особенности детского организма в норме и патологии" (Л., 1985); 7IH и XI научных конференциях молодых уче« гых академии (Л. , 19Q4 , 1990) J научных конференциях! "Роль пептидных Биорегуляторов (цитомедммоа) р регуляции гомеостаза" (/1., 1987), "Применение современных лекарственных препаратов и медицинский техники на крупных промышленных предприятиях" (Тольятти, 1991); Всесоюзной научной конференции "Иммунный статус челссека и радиация" (Гомель, 1991) ; научном симпозиуме "Физиологическое? и клиническое зи-яченио регуляторных пептидов" (Пущино, 1990 i? I —см иммунолог ичрском съезде Селор уссии " Экологические проб леьы ими у но л аг ии и «л irpr ологии" (Минск, 1990) .

Публикации. Основные результаты диссертации изложены в 14 нлуч»-плх пусликаци-зх.

РтРУктУР.а__. U__овьем__диссеогации. Диссертация состоит из

Введения, овзора лнтератугы, описания материала и методов не с л едопания. четырех глан собственных исследований, заключения , пыпедов, практическую рекомендаций, списка литературы и прилоч.е* ия»

Г'а^ота и^ло*ена на 11В страница*; м.а^нотююго теиста, иллюстриоована 27 та&лицаин и ££ рис -i. *. исм^ск литературы содер-"ит (IBB оге'честзеуи*ыл и Г.": г острг.мных) .

МАТЕРИАЛ И МЕТОДА ИССЛЕДОВАНИЯ

С целью определения возможности коррекции вторичнмх имиунодефицитних состояний пептидными препаратами тимуса и костного мозга проводили оценку иммуновиологичвской активности этих препаратов хп ч'11го по их влиянию на лимфоциты и а экспериментальных моделях иммунодесицитпэ.

Были изучены следуквдие пептидные препараты! тимуса - гсмалнн и тимоген, костного мозга - геиалим и пантапептид костного мп;га. Проведено также изучение Эффективности сочетанного применят • • комплексных и синтетических препаратов тимуса и костного мозга.

Тималин и гемалин получали из тимуса и костного мозга телят по способу В.Г.Морозооа и В.Х.Хапмнсона (1574, 197Э, 1981». Тимоген и пентапептид костного мозга выделены мятолом высокоэффективной жидкостной хроматографии из тималина и гемалина соответственно с осушествл»?нием в последующем их химического синтеза.

Пентапептид костного мозга синтезирован сотрудниками Института еиоорганической химии им.М.М.Шемякина РАН под

руководством академика ГАК В.Т.Иванова и любезно предоставлен нам для проведения экспериментов.

Тималин и тииоген в настоящее время применяются а медицинской практике в качестве иммуномодуляторов и биостимуляторов при различных заволеваничх и патологических состояниях, сопровождающихся снйжениен показателей клеточного иммунитета.

Экспериментальные исследования иммунобиологической активности препаратов были выполнен»! на животных, постаэляеч-ых из питомника лавораторных животных "РАпполови" РАИН . В работе было использовано 567 морских свинок-самцов. Перечень проведенных экспериментов, количество и характеристика животных представлены в таблице 1.

Все животьые содержались в условиях вивария при одинаковом уходе и получали стандартное питание.

Морских свинок подвергали овщему однократному рентгеновскому эвлучению в дозе 1 Гр на установке РУМ-17.

Та'-.лица. i

Исфактеристиу-'А о: .с n?: о и» ¡г. нт ил v.bsJ y исс ледоэйнин .

14.

экспериментальные? нсследооат fc- оличестяо мер скнх СЕ) инок Пассa 1 морских 1 сгзинок 1

Иееледования in vitro Сравнительная оценка действия пептидных препаратов тимуса и костного мозга на экспрессии Е.-речеп торов тимоцитсв ин rdkthwx >1-130тных . Z0 150- 1 гоо г : Í I

Исследования in vivo Иэучение влияния пептидных препаратов тимуса и kocthqíо мозг а на систему иммунитета здоровых жизотнмч. f J 0 7€. I 300- ! чоо г : £50- Í 300 г ¡

Из учение» влияния пептидных препаратов тимуса и костнгта fioiííM на динамику изменения количества, лейкоцитоз и лимфоцит оз пг-ри.^ррическсй крон и облученных жидо гних. те H5Q- Í JuO г 1 ! г

Изучение влияния пети дни* препаратосз тимуса м кос т ног а мозга на сис тему имиуни reта оьлучон^ыч ^ЙвО 1 им* . 250300 г 1 i

Из учение влияния пептидных прел 2.рат оэ тимуса и костмог о мозга на уровень инсулина, коршзола, цАМФ и цГМР и крози облученных -u'ddtпых. 300 г ! Í

Изучени-з cj/ипьич пептидмых препаратов тимуса и костнего мозга на систему иммунитета тимзкт омиро^ан»-г>< ч * т ггп гнк' к . "00- 1 'luo г 1

Тимэктомию .«лвотныи проводили о 2-3-месячной возрасте и ч»?рез 3 месяца после операции и введения препаратов тнмусл. и кос гь ого мозга определяли иммунологические показатели.

Облученным животным через сутки после радиационного воздействия вводили ежедневно однократно «нутрииишечно тииллии, гемалин и тимогемин о дозе 1 мг/кг, тимоген и пентапсптид костного мозга при раздельном и сочетанном применении - га доза I мггг/кг о течение 5 - 10 суток. У ти. 1эктонированных жиэотмлх лрш:-граты вводили через 3 мес. после удаления тимуса по аналогичной схрч*?.

Подсчет лейкоцитарной формулы периферической крс< и экспериментальных животных провалили о мазках краям« окрашенных пс Романовскому-Гимзе.

Состояние систем иммунитета морских свинок оценивали путей определения в тимусп, селезенке, лимфатических узлах и костном могго оэщего количества лимфоцитов, Т-лимфоцитов (Е-РСК) <51ас1ескег М.Л. е1 а1., 1973) и 13-лимфоцитоэ <Е АС-РОЮ (В1агсо С. е! а!., 1970). Процентное содержание "активных" Т—лимфоцитов РОК) в суспензии тиноцитоо посла овраеотки их трипсином и инкуваций с препаратами тимуса и костного мозга определяли мятодом розеткоовразования с эритроцитами кролика К, «И ., 1905),

Функциональную активность Т~лимфоцитов кррви определяли в реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ/ с комиалавалином А (Чон Л) (Бендиксен Дж. и др., 19Е0) в модификации В.ГЛ1орозо*"1, В.Х.Хааинсона (1930). Для оценки »^специфической резистентности в нейтрофилах периферической крови определяли содержание катионных Белков по методу В.Е. Пигаревгкогз, Ю.А. Маэинг а (1981).

Содержание кортизона и инсулина в сысоротке крови овлучениых жиеотных определяли радйоиммунологическим методом, используя наворы реактивов Института висорганической химии ЛН ГССР: для определения кортизола - с использованием кортизола, меченого йодом-125, "стерон-К-1", для определения инсулина - с использованием инсулина, меченого йодом-125, "рио-Иг.С-ПГ-1 I " . Подсчет радиоактивности пров производился на счетчике "Тгасог Апа1у11С 1285" (США-Голландия) . Содержание цАМФ и иГМ1> з плазме крови определяли радио»- онкурент ным мет од ом (цАМФ) с помощью наьора

1 о

реактивов "-'bf-Cyc I îc ANP - kit" и p адиоимиунологическим методом (цГМЮ с использованием навара реактивов ":,H-Cyclic GMP - kit" ( "Amersha.n" , Англия) . Подсчет радиоактивное! и проб производился о »идкосгно-сцинтилляционнсм счетчике 'Unilux-111" ( "Nuelear Chicago", США).

Ткани тимуса и костногс пазга, предназначенные для гистологического исследования, Фиксировали в 10 'А растворе нейтрального Формалина с последующей заливкой в парафин. Парафиновые срезы окрашивали гематоксилином-оозином. Затем грсводили микроскопическое исследование » и. териала.

С цолью определения суспопуляцнонной и празленности действия препаратов тимуса и костного мозга in vitro оценивали их влияние на Т- и B-лимфоциты, выделенные из периферической крови £4 вольных травматалогического (хронический посттравматический остеомиелит) и дерматологического (хронические пиодермии) профиля с различной степенью выраженности иммунодефицита. Сцен'-.-.. проводилась о сравнении г показателями у 1£ здоровых лиц (доноры своего пола с возрасте 1*5 - ос{ лет) . количество Г-лимяоиитг;о и их сузпопуляций ац^мичали методом непрямой нммунса-луонисценгнай реакции с мышиными монокланалил-ыми антителами ОКТ 3, OkT Q, ÜKT 8 ("Ortho", США), г ом учеными к аи^'Тор^нцизс зонным антигена! \ поверхности лимфоцитса ;Ksinher z Е .L. fit al . , 197e*) в иод; -ьи>'«• » Г».Х.Хааинсона и др .

Количество Е-лимфоиигов, н^суии-: н--. ссоей поверхности х 1» 1муиог лоб> линопые рсцептс-ч.!, сиоик'кдли о прямей

i «mî : у нот л уоресцентной реакци» i iz мо-час л пиитическими антител али, мечеными ФИШ (Винчестер . Çy С.M. , 1930) s модификации

В.*.Хаоинсона и др. (I9G9).

Результаты исследований озрасатывали с использованием параметрического < t-критерий Стьюдента) и но параметрических ( KP и 1 pi'ии Вил ко1 et: она- Манна-У и гни и Еаль ла-Ссльсопица) методас статистического анализа (/Icjchh Г.t., 1 '>г<0>.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДС'ЕАЧЧЙ

1 . Сравнительная оценка действия пептидных препаратез тимуса и костного мозга in vitro.

Учитывая перспе» гтивность медицинского примйгченич

синтетических имм у номо дул я тор о*э, lli/i о проведено ерл ai «и >• но г? изучениз in vitro иммуновиологической активности натионь;- и синтетических пептидных препаратов тимуса и костного мозга.

Влияниэ лептидоо тимуса ( тииал ина и тииог «на) и каст» □ мозга . (гемалина и пентапептида костного мозга) на экспрессии эецептсроэ Т-лимфоцитов, осрасотанных протеолитическим Ферментом трипсином, изучали в суспензии клеток, выделенных из тимуса *нтактиых морских свинок. С ц«лыо сравнительной оценки активности -»ативных и синтетических пептидов тимуса использовали t?u;e один зипептид, выделенный и*ч тималина.

После озравотки тимоцитос трипсином происходит разрушении большей части Е-рецептоРсз на поверхности у ле^ток к эритроцитам 'Ролика, о результате mito снижаете** процентное содержание Î-тим^оцитоз, выявляемых о реакции розеткоопразооания.

Ранее ьыло устанозлено, что тимозин фракция 5 и тимозин et » (начительно усиливают скорость регенерации Е-рецептороз па Т-»имфоцитах человека, опраьотанных трипсином (Wilson 6.В. et I., 1934). Ловаэление пегтидез тимуса к евраеоганным трипсином Т-■имфоцитам свиньи стимулировало синтез Е-реиептороэ ( Yang И. -it I . , 1987) .

В результате проведенных исследований установлено, что аиаолыией способностью восстанаолисать Е-рецепторы Г-лимфоцитов, враротанных трипсином, опладаюг тималин, с*нтетические пептиды имуса и синтетический ксстноматгозой пептид. Причем, полуиенн1 к? энные свидетельствуют о то-«, что активность тималина не граничивается наличием пептидной фракции, послужившей пеновой длп □здания тимогена, и определяется также другими иммуноактиеными загментами иной аминокислотной псследоэате гьности.

I'd

Гшшин не овладаег способностью восстанаоливать Е-рецепторы Т-'Лиифоцитов, а синтет»1ческмй препарат костного мозга проявляет свою ai'.тнвность в большом диапазоне концентраций.

Оценка сувпопуляционной направленности действия пептидов тимуса и костного мозга проводилась in vitro с использованием лимфоцитов, выделенных из периферической крови больных с в торичными имиунодефицитными '/.ост оуниями, так как провести подобного рсаа исследование на экспериментальных животных не представлялось возможным из-за отсутствия моноклональных антител к и>: лимфоцитам.

Исходя из направленности действия пеп -идных препаратов тимуса преимущественно на Т-лимфоциты, оценивали влияние тималина, тимогена и дипептида тимуса на сувпопуляции Т-лимфоцитов. Учитывая волее выраженное действие костномозговых пептидов на гуморальное звено иммунной системы (Петров Р.В. и др., 1Э83), определяли влияние ret(алина И пенгапептида костного мозга на сувпопуляции Б-лимфоцитоз.

Было установлено, что у овследопанных вольных имеются Различные нарушения клеточного и гуморального иммунитета. Применение in vitro пептидных препаратов тимуса способствовало восстановлению количества Т-хелперов (DKT 4М, в результате чего происходила нормализация коэффициента дифференцировки лимфоцитов ОК.Т 4*"/0КТ . При этом наиволь^сй активностью Обладали синтетические пепгидные препараты тимуса.

Из учение и» 1муноак тичных пептидов ксстног о мозг*а показало, что нлиБОлее выраженной стимулирующей активностью на сувпопуляции В-лимфоцигов осладал пентапептил костного мозга.

Таким оаразом, пептидные препараты тимуса и костного мозга ос лалают в'»»раненной имму нов» ологической активностью vi отсутствием видовой специфичности. Установлено, что пептиды тимуса оказыпя.ют стимулирующее воздействие на Т-лимфоциты ч их суппопуляции. Среди костномозговых пептидоп наибольшей активностью «сарактеризуется синтетический препарат - пентагшптид кипнпгп ir.nra, оказыванием сильное стимулирytv^e влияние как иг. т, :rj ¡.un, так и на В-лимфоциты, несущие на своеи п'".'Г-.ч ^ног.т и ра^личк-'р

иммуног лоеулиноэые р«?цр птсри .

2. Влияние пептидных препаратов тимуса и костного мозга на систему иммунитета здоровых животных.

Исследование иммунобиологической активности пептидов тимуса и костного мозга у здоровых животных свидетельствует о влиянии препаратов на процессы созревания и межклеточнойо взаимодействия иммунокомпгэтентнмх клеток.

Активные фрагменты комплексных пептидных препаратов тимуса и костного мозга в ряде случаев оказыгают сходное воздействие на иммунологические показатели, что, зероятно, связано с аминокислотным составом коротких пептидов. При этом, навл'олается однонаправленность изменений, вызываемых тималином и ти,4огеном, гемалином и пентапептидом костного мозга.

Исследуемые пептиды тимуса и костного мозга при сочетанном пр11менении оказывал и во л ее еыраженное стимулир м^лдее влияние на процессы пролиферации и дифференцирооки лимфоцитоз в центральных и периферических органах иммунной систе»<ы.

Необходимо отметить, что нт.иволыуие изменения в клеточном составе лим-гоидных органов были отмечеьы через 20 суток после начала в в еде! <ия пгэе паратое. Подобный отсроченный эч?тект дейстгия пептидных препаратов, пеооятно, овьясняется тем, чт» вслед за прямым действием какого-либо одного регул^торного пептида следует каскад еывроса других от дельных регулятормых езкторогэ, которые в соою очередь ос yvj.ee тс л яют модул г»щгэ ряда пункций оргт-шлил (Ли-марин И.П., Свухова М.Ф., 198Ь> .

Несмотря на мнпг гэоеразие вызываемых изменений в иммунной системе, получение результаты эксперимента на здоровых »изотшх не позволяют в полной мер;? оценить эффективность действия пгщтидь'ы-*- прпплиатоп тимуса и костного мозг а на иммунологические по»- азатпли.

Б связи с гэтим, мредст«?плчется наиболее информативным из учение пиалогической йкт1шнасги пептиден тимуса и кпетнетч) мозга ПРИ ПТСГИЧНЫ X МММуНОД«2<1»ИЦИТ»4>1Х состояниях.

3. Плизина пептидных препаратов ткнусь и костного пс^ги на. систему иммунитета облученных хо^^тн^х.

£] результате прозеденных оксперимента-лььых исследований установлено, что тииалин, гемалин и, особенна, тимсгемин оказывает етимулирукз^зэ влияние на димрс- и гранулоцитопозз, ¿¿ктиоиру>\ процессы регенерации клеток костного мозга после радиационного воздействия. Причем, наиболее выраженный и стойкий а^сс-кт иа5 людглск после применения комбинированного препарата тимуса и костного мозга, что свидетельствует о восстановлении наруиенн^;; комлснсатррнст-приспосоьителькых мгх5яизно& инмуно— и руиапо^Лс. (рис. 1). Аналогичном дейсть/Игм оглад^от и синтетические пептидное препараты тинуса и костного мозга, однако их соиместноз прим^н^н-;!.1 не окг^зыиаэт столь эанетнзго стимулирьлс^Е-го слияния на процессы регенерации клеток периферической крози о ранние сроки после ОБлучени«, но с последу.алин сто&кин восстановлением их количества (рис. с!) »

Исследование динамики изменений количества гранулоцитои и лимфоцйтсз периферической крсси меезходило для планирования и презедени'я адекватного лечения« При этом суиественним яоляетс>-способность спонтанного аоссталозления гемопоэтич&ских стволосых1 клеток. Применение средств, стимулирую^х иммунз— и гемопсо», оправдано при возможности компснсаторнэ-приспосогительных реакций, направленных на максимально Быстрое? оссстахозлпние клеточной массы опустошенного радиацией костного мозга, а также ускорение миграции зрелых клеток крови о периферическое сосудистоо русло <Груздео Г.П., 1ЭиЗ,| <$>лиднэр Т.М. 1990).

При оценке влияния тинллина, гемалина и тииогемина на иммунологические показатели отмечено нормализующее дайстаиа препаратов на количественный состав и функциональную ¿ктианость лимфоцитоэ, бактерицидную активность нейтрочилоо, наиболее выраженное . при их сочетанном применении. Причем, применение тималина оказывало стимулирукщее влияние преимущественна на показатели клеточного иммунитета, а гемалина - на гуморальное в вено иммунной система. Введение тимагемина способствовало

SUHCTwy изменениО код)«есг!?о /еСхоцетсЗ г.?ри*еруческеО к?а5а У обличенных

' гзргких iSbnnx;-—-Ktrcpow, -----тмкмич; — • —гемг'нч;----ш-егрмин;

[—Меритг/ъны? г^гньиы юрмы. *

C-jirti" :кц iwîHei.'jo хслпссгЗ! ft-.xoiK^tS периферической Kpcîu у c5/>)4î>wx

••сгски ct'.-c;-'.си-;э"г;------ra'.ri; — • — ксокюго

■"■»зги; — •■ —'--мя:-', i-n ? га;

lb

(¡ссстановлении количества как Г-, так и лимфоцитов в центральных И периферических иммунных органах. Необходимо othl. <ить, что при via учении иммунобиологической активности синтетических пептидных препаратов тимуса и костного мозга, выли получены несколько иные результаты. Однозначно сказать, что тимоген оказывает влияние на Т—звено системы иммунитета, а пентапептид костного мозг а - на 13-ввено - нельзя. Osa препарата при раздельном и сочетанном применении способствуют восстаноолению показателей как клеточного, так и гуморального иммунитета (рис. 3). Исследуемые синтетические препараты сказывали однонаправленное действие на показатели нсспецифической резистентности, нормализуя активность катионных белков гранулоцитоо периферической крови.

Эффективность применения пептидов тимуса и костного ио^г& при радиационных иммунодефицитах связана, вероятно, не только с их стимулирующим влиянием на пролифераш^о и дифференцировку лимфоцитов- Исходя из гипотезы запрограммированной генетической гивели овлученных клеток (Хансоч К.П., Комар В.Е., 19S5), можно предположить, что препараты тимуса и костного мозга оказывают также ингивирукхцер воздействие на инициированный ионизируки'ям излучением процесс актизации определенных участков генома как предпосылки постлучевой деградации клеток.

Проблему иммунологических нарушений и возможности поименония иммунокорригирукэщей терапии при воздействии ионизирующего излучения невозможно рассматривать изолированно от сложной системы регуляторных механизмов, овеспечиоаюдих не только восстановление нормальной функции иммунной и кроветворной систем, но и жизнедеятельности всего организма.

Результаты исследований содержания кортизола, инсулина, цАМФ и цГМФ в крови после облучения животных в дозе 1 Гр в период разгара лучевого синдрома, характеризующегося максимальным опустошением лимфоидной и кроветворной тканей, свидетельствуют о наличии в этот период резервных возможностей организма, предотвраш.акздих развитие глубоких патологических изменений. Применение пептидных препаратов тимуса и костного мозга способствует активации компенсаторно-при^. мосавительных механизмов.

ló' MI'

ООО 050" 450 -100 350" "00-

250~

sonICO-

SO—

; :ллус

1 Ó/'jr

- ft"

Hi

300--25C 20C--150 ICO 5 Or

0:тспеп::т

•ï

ft

il

ÍI

1 234'5 1 23 4 5

Г-лимфогглтгд. Л- лимфоцит?.!

12 3 4 5

1 2 3 4 5

lit-'IIГ 350

300 250 2001 COICO" " 50

Лимфоузел

Т-лимфоциты Я-лимфоциты Костики near

1(?/иг

£50 -•" ПС О 150 100 -50 "-

! 2 3 1:

1 2 3 4 5

1 2 3 4 5

1 2 3 4 5

Т-лп1."! оцитм D-лпмфоцптп Т-лпн-; оцпгм В—лимфоцит

3"!i;«i.jo а'ч^отг'.'Еких псгчА-чх "L'wi и kk^'Odo мазга па

д^аягяЗ 6 г "Г2'::r\ ОУСФМК ¡ornan ctwc

VC vi '

»-i--"гкч !';rrif";.i'D HVO.fíj гч .........г г"

•'¡" f-"'.""j'j —г--3

'i i rVjwvi ,t':V>4ii~a

*

-

t

1В

что проявляется в их модулирующем воздействии на исследуемые показатели гуморальной регуляции.

Таким оеразом, установлено, что комплексные и синтетические пептид* »иг препараты гимуса и костного мозга при радиационных иммунодефицитах о&ладанэт не только иммунооктивным действием, но и оказывают влияние на адаптационные возможности организма.

Влияние пептидных препарата« тимуса и костного мозга

на систему иммунитета тимзктомированных животных.

При изучении влияния тималина и тимогена на иммунную систему тимэктомироаанных животных получек данные, свидетельствующие о действии препаратов преимуи^ствено на ранние этапы дифференцировки Т- и Б-лимфоцитов• Это, вероятно, связано со стимулирую^м воздействием пептидов тимуса на клетки костного мозга., в частности, на лимфоидный росток кроветворения. Подо&ная стимуляция, в свою счередь, по конкурентному типу оказывает ингийиругаш,ее воздействие на гранулоцит опоэз. Описанная реакция является физиологически оправданной и направлена на накопление в костном нозге пула иммунакомпетентных клеток с последующим их поступлением о периферическую кровь. Применение геналина и. пентапептида костного мозга в условиях иммунодефицита, вызванного тимэктомией, оказывает ингиоирукхцее действие на процессы антигеннезааисимого развития V- и В—лимфоцитов в периферических органах иммунной системы. Но вмосте с тем, пептидные препараты костного иозга стимулируют созревание клеток костного иозга преимущественно по лимфоидному и, в меньшей степени, гранулоиитарному пути дифференцироэки. Сочетанное применение пептидов тимуса и костного мозга у тимзктомированных животных позволяет активно впиять на различные? звенья иммунитета с целью восстановления нарушенной иммунологической реактивности организма. Как тимогемин, так и тимоген и пентапептид костного мозга при сочетанном применении эффективно воздействуют на процессы межклеточной кооперации и стимулируют Функциональную активность лимфоцитов•

Результаты проведенных экспериментальных исследований показали, что иммуновиологическая активность комплексных пептидных препаратов тимуса и костного мозга обусловлена наличием в их составе пептидах фракций, окаэы высших стимулирующее влияние на: процессы пролиферации и дифференцировки иммунокомпетентиых клеток. Некоторые установленные различия в действии комплексных к' синтетических пептидных препаратов тимуса и костного мозга-объясняются, вероятно, образованием при расщеплении нативных пептидов фрагментов, обладающих не только стимулирукшей, но и иной, возможно, противоположно направленной активностью.

Полученные данные свидетельствуют о перслектнпности применения пептидных препаратов тимуса и костного мозга для коррекции вторичных иммунодефицитных состояний различного генеза; При заволеваИйях и патологических состояниях, сопровождлкуцмхс* выраженьями нарушениями клеточного и гуморального иммунитета, Более целесообразно сочетанное ' применение пептидах препаратов тимуса и костного мо^га.

13НВ0ДУ

1 . ВоздейстййС ионизирующего излучения сызывант комплекс взаимосвязанных нарушений иммунитета и кроветворения, nposiB л^мхшхся в уменьшении количества Т- и E3-лимфоцитов, снижении Функциональной актизности Т-лимсоцитов и нгрйтрофилоз , угнетении лимфо- и гранулоцитопоэза. Нммунодефицитно:* состояние, об услоплечноэ тимоктомией, характеризуется уменьшением о*Ш',г?г о количества лимфоцитов, нар ушением функциональной активности Т-лимтоцитсв и нейтрофилов.

Р.. "Гималич и тимоген in vitro ока^ыгэают стимупир уточее плияии»? на зке пресс i*o специфических рецепторов преимущественно Т— лимфоцитов, а гемалин — В- лимфоцитов. Пентапептид костного мозга стимулирует их экспресото как на Т-, так и на D-клатках.

3. Применение тимзлина и тимогена, гемалинл. и пентапептида костного мозга у здорогнх -тиротных характеризуется однонаправленное! l'o изменений иммунологических показателей,

2 О

пробил',,i,1с'.ч11хсй с c/lu£»c£i>lpcl4^hhc3m с т имулир yi£ij..;m d л hs-. нии !< р ^ пар v"i i u-

¿t. Прим^^нм^ т:п1йлинй у иалуми'ншх ¿иииткьи спосо^стьу^т РОЛии' БЫСТРОМУ ЕСССТиН^ЛЛиНгЫ КОЛИЧЬСТЬй т-ЛИМ-i СЦИГС^ ; овпдс-м :н;з

тимог Erf а с; ¿¿..3ajr.ia.3T Ни^малюя^мУс паз дейс твие на Т— и ¡3-лиг <<?оциты г: ли) ^оид^х органах • Пептидные- препараты ТИМУСа d услиспзх депрессии крове mcjpevw« ч стимулируют Лк«к.ог.осаз.

5. Гtмалин при радиационных иммуниде.ч пцитах акт ивир v <зт процессы пролиферации и снциро л ки пр£?ииу1д;«-%стбе.-и» ю Ь-лип^оцити^, способствует per сн£>рац!Ч1 гранулоцитарного ростка кр^мстьс.-ггрмия. ГЪнтапоптид костного моага оказьш'аот вир^.^н, юо стимулиру;_!ц^г? н лилии и на пролифир^щню клеток костного мозга прсимуи-стиенно ли« iiоид)-«ого ряда и на процессы созр<!^Лания как Т-, TL.,< и fj-лигс'оцитсз .

6. Пептидные препараты тимуса и костного4 мс/зга у оьлученных жяаотиык оказыв£>зт регул«торное влиянии на содержание инсулина, кортизола, uAN4> и цгМ?> в периферической кради, способствующее йити^йции компенсатор но- приспособит сильных механизмов организма.

1, У THH^KTCMvii^Gisынних животных пептид>-ые препараты тимуса стимулируцгг пролитератизиук» активность лимфоцитез, действуют преимуместиемно на. paj-шиэ CJTtxriJ ди-^фереицироцки Т- и В- лимфоцитов; пептидные препараты костного мозга оказывают ингипир yiau.ee ыоздейстииэ на процессы дифференциривки Т- и R-лимфоцитов с периферических органах иммунной ■ систоиы и вызывают актив ацн^о лейкопоэза.

Q, Применение тимогемииа при иммунодетицитных состояниях, овуслоалзн*слх радиационным воздействием и тимзктомией, сказыпает волее сильное стимулируюц&о влияние на процессы пролиферации, миграции и дифференцировки лимфоцитов по сравнению с раздельным использованием тималина и гемалина. Эффективность сочетанного применения тимогена и пентапептида костного мозга менее выражена.

9« Пептидные препараты тимуса и костного мозга как при раздельном, так и при сочетанном применении оказывают нормализукхцее влияние на неспецифическую резистентность организма.

практические ГЕКШ-ЕНЛАЦИИ

1 • Тималин целесообразно принян^ть при атсрич^х

ИММУНОДЕфИЦИТНЫХ СОСТОЯНИЯХ, СОПрОВОЖДакЩИХСЯ Н^РУШОНИ^'И

клеточного иммунитет«!.

2. Применг?ниг? гемдлина наиполез эффективно при нарушениях гуморального зоенл иммунитета и гранулоцитопсоэд.

3. Применение тимогсна и пентапсптида костного мозга целее г?сб разно при угнетении /?имфог ""зза, нг'руиении процессов пролиферации и ди^еренцирезки Т~ и П— лии<гоцитсз .

При тотгт/tVHCM угнетении иммуно— и ггмопозза неопхедимо со^отонное лримгнгниэ пгптидт-глх гропйрдгоз тимус л и костного мозг а.

СПИССК*РГ^ПТ, СГГУБЛИКСПРР^Х ПЭ ТEÎ7Z ДИССЕРТАЦИИ

I . '*>ункш?оигпльно-мортологичг»скач хлрактеристока ерггнсэ ИММУНСГСНезЛ ЗЛСРСПУХ морских при во л действии ТИМЛЛИН.1,

г р: мал» "Hi и л езгмизолл/ / X XV гипуск Тру /lei тигр адсксго науч. о-пл патологолматсноя. — Л., -С.7-1П (с^-гЗт. Хмель яицки;"» О.'С.,

Мгроэпл Г?.П. ,' «мсеи П.Х. и яр-,) .

<?. . п г* п тиль- i4 • »"?лид гсрсзт , г1 1лтл г» 1ix из тим у с.-a. m

kcctv'-.го 2 hl ИЯНУЬ-мт'?Т мсгскмх c-»'>.c'r< J/ Из». ГЯ К-лз.ССР.

C"'P,nw. - - N !5. - C.%f„'3-C7 (со?.ат. Г'оргзсг* П,Г.,

- ^ ' ! : ' - .1 с i ? В.-'... Сугнпз Т.Ч., Л.Ii.).

3 . Пли л г-и*.? ri-rí <сг см-на m систлиу » '•"м^ншутл// Теп . лек л. Н'5уч.ксч'п. "Роль птпткл' "лх (цнто^'^^г'нгг») п

-;Т уу1-гци1. V . - - C.Ô1 (соггзт. С'Т^м С.П.).

'Ч . Сп лсоа 11ММ у иске s pi*»' цич к и^ и;- су га '"-"-'M rrf?n 'Р i т с?м г i -ч ус п и

'.3. С пс С-' ; т ."_?:i г» гп— гзгзс пл. л и тглгк »-*

e'tc~¡!1'; -: r< ¡" чумелгт'чпп// т-м - С. 7 7-7*3 'лс—т.

С С.'З. , IÎ7.4-I4 :t. Л.) .

1 иммунологического съезда Белоруссии "Зкологичаски^ пройлс-мы иммунологии и аллергологии" . - Кинск, 1930. - С.84-В5 (соавт. Сь^ыЛ C.B.) .

7. Ксм^иниргианнос прим^н^ниа пептидов тимуса и костного мозга с цельи по^ь^сниа их Еи^сктизности// Тез.докл. XI науч .ко: ^.молог^х ученых и споциалистои академии/ Ооен.-пед.акад. -Л.,1950. - С.23 (соаат. Серий C.L1.).

С. Способ коррекции радиационных наруиокий ннмуио- и гемэпоззь// Сл.иэоср. и рец.првдло*:./ Ео^н.-игд.аксд. -/>.,1991. -E-jn.22. - С.SC.

9. Дипзптмд, езладахд^ий пнпуностимулиру,а-^"! актизиостыз// Таи - С.Cl (соа^т. Серый C.B.).

10. 3î©2kthohoctu пептидных сиорсгулаторсо при КОМЗКНИрОЦгп'НОИ применении// Тьзз. докл. науч. кон;>. " Прин'-ниниз ccapeMCHi-йлх л^карств^нних препаратов и м^'д; .цинской техники на крупных nparw4:«/i£?Hb5jx предприятиях" . - Ленинград-Тольятти, 1991 . -С. 32-33.

11. Влиснид тиногона. и дипоптида тимуса на

хЕ-рлкТ£г>исткк:: лпичОид^х срганаь//

Cî; .науч.рааот "Рогуп'^терчие пс-птиди г, норну и патологии (цитом^дКг*.!) ". - Чита., 1991. - С.У4 (соает. Симснснкоза О. А., Сирый С.Е.).

1Г2. Иммунокоррскци« пептидными препаратами тииусг. и костнзгС ипзгг при радиационных и:1мунаде»ицптах// Тез. докл. Ыссексз. науч. ксиа. "Ннмунн^'й статус челооекй. и радиация". - N,,1991. - С. lot. (соазт. Морозоа В.Г., Хаиинесн Ц_.Х. , СерыЛ С.П.).

13. Кс?рскцмг, л,-птндали тинуса и костного мозга радиационных нару^ний имлуно- и гемапоэза// Радиобиологи«. — 1991. —Т.31, вып.4. - С.501-505 (соаст. Хаоинсон В.Х., Серий C.B.).

14. Дипамтид тииуса, ОБлада^^жии иммуностимулирующей активностью// Решение о выдача аоторсксго сайд»гильстал (50.06.91 г.) по заявке N 4353191 /04/046192 от КЗ.04.90 г., (соаит. Хаиинсон В.Х., Лейгии В.И., Серый C.B., Короткс.ч А.К.).