Автореферат и диссертация по медицине (14.00.27) на тему:Коррекция иммунных и гемопоэтических нарушений при остром обтурационном холестазе
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.27
Автореферат диссертации по медицине на тему Коррекция иммунных и гемопоэтических нарушений при остром обтурационном холестазе
На правах рукописи МОКШИНА ЕЛЕНА ИВАНОВНА
КОРРЕКЦИЯ ИММУННЫХ И ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ ПРИ ОСТРОМ ОБТУРАЦИОННОМ ХОЛЕСТАЗЕ
(экспериментальное исследование)
14.00.27 - хирургия
14.00.16 - патологическая физиология
1 5 ОПТ 2009
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
Саранск 2009
003479774
Работа выполнена на кафедре общей хирургии и анестезиологии им. Н. И. Атясова Медицинского института ГОУВПО «Мордовский государственный университет им. Н. П. Огарёва»
Научные руководители: заслуженный деятель науки РМ
доктор медицинских наук профессор Беляев Александр Назарович кандидат медицинских наук профессор Усанова Анна Александровна
Официальные оппоненты: доктор медицинских наук профессор
Перетягин Сергей Петрович; доктор медицинских наук профессор Никольский Валерий Исаакович
Ведущая организация: ГОУВПО «Нижегородская государственная
медицинская академия»
Защита состоится « 2009 года в « » часов на
заседании диссертационного совета Д 212.117.08 при ГОУВПО «Мордовский государственный университет имени Н. П. Огарёва» (430005, г. Саранск, ул. Большевистская, 68).
С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГОУВПО «Мордовский государственный университет имени Н. П. Огарёва» (430005, г. Саранск, ул. Большевистская, 68), а с авторефератом на официальном сайте -www.mrsu.ru.
«Л» cHt^i/tSju
Автореферат разослан Ll ^ W^/Isi 2009 года
Учёный секретарь диссертационного совета
кандидат медицинских наук доцент А. Г. Голубев
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. Болезни органов пищеварения сопровождаются изменениями функциональных свойств иммунокомпетентных клеток, зависящими от характера повреждения органа, активности патологического процесса и проводимой терапии (Зубеев П. С. и др., 2001). Оперативное вмешательство, как правило, усугубляет нарушения иммунной системы, приводя нередко к развитию синдрома вторичной иммунной недостаточности и, как следствие, к послеоперационным инфекционным осложнениям, которые ухудшают прогноз хирургического лечения, увеличивают длительность госпитализации и летальность (Крюков А. И., Елисеев О. В., 2004; Андреев Г. Н., 2008).
Большое значение в иммунных нарушениях имеют патологические изменения в костном мозге, где из стволовых клеток образуются клетки-предшественники для лимфоцитов и фагоцитов, а также нейтрофилы, эозино-филы и базофилы - три типа клеток, активно участвующих в иммунных реакциях (Воробьёв А. И., 2003; Аскаров М. Б. и др., 2008).
Имеется очевидная сопряженность процесса повреждения печени с нарушениями в иммунной системе, касающимися не только количественного состава основных субпопуляций иммунокомпетентных клеток, но и их функциональной активности (Серова Т. И. и др., 2002; Ильченко Л. И. и др., 2004). Так, среди больных с обтурационным холестазом частота развития инфекционных осложнений в послеоперационном периоде, по данным различных авторов, составляет в среднем от 3,9 до 14,6 % (Гельфанд Б. Р. и др., 1997; Кузин Н М. и др., 2000).
Из экзогенных иммуномодуляторов большую известность в клинической практике получил Деринат. В литературе встречаются публикации о его-применении в онкологии, пульмонологии, педиатрии, при лечении больных с нарушением иммунного статуса (Каплина Э. Н., Вайнберг Ю. П., 2005; Балыко-ва Л. А. и др., 2007).
В последние годы в клиническую практику широко внедряется метод озо-нотерапии. Наличие целого ряда лечебных эффектов медицинского озона (антимикробный, антигипоксантный, гипокоагуляционный, спазмолитический) позволяет одновременно воздействовать на различные звенья инфекционного процесса (Бояринов Г. А., 1999; Конторщикова К. Н., 2003; Перетягин С. П., 2003; Беляев А. Н., 2007), в частности на иммунную систему и гемопоэз.
Повышение эффективности проводимой терапии нам видится в том числе и в использовании внутрипортального пути введения выбранных лекарственных средств, который позволяет подвести препараты непосредственно к очагу повреждения в большей концентрации. (Гульман М. И., Винник Ю. С., 2000; Беляев А. Н. и др., 2001, 2003; Тумайкин В. П., 2005).
Цель исследования. Изучить эффективность дерината и озонированного изотонического раствора натрия хлорида в коррекции иммунных и гемопо-этических нарушений при остром обтурационном холестазе.
Основные задачи исследования.
1. Проанализировать показатели гемопоэза и иммунитета в динамике развития обтурационного холестаза и после декомпрессии холедоха.
2. Оценить иммуномодулирующую и гемопоэзстимулирующую активность дерината при остром обтурационном холестазе.
3. Изучить влияние озонированного физиологического раствора на показатели гемопоэза и иммунитета при остром внепеченочном холестазе.
4. По степени коррекции показателей иммунитета и гемопоэза дать сравнительную оценку эффективности внутрипортального введения озона и дерината при остром обтурационном холестазе.
Научная новизна. В динамике течения обтурационного холестаза изучены качественные и количественные изменения костномозгового кроветворения, проявляющиеся в виде угнетения миело- и эритропоэза, а также выявлены существенные иммунные нарушения, проявляющиеся угнетени клеточного звена иммунитета.
Показано, что деринат при остром внепеченочном холестазе обладает выраженным иммуномодулирующим эффектом, в большей степени проявляющимся повышением активности клеточного звена иммунитета и реализующим свое действие через активацию миелопролиферации.
Установлено гемопоэзмодулирующее действие озонированного 0,9% раствора №С1, который при лечении обтурационного холестаза проявляется стимуляцией миело- и эритроидного ростков кроветворения. Иммуномодулирую-щий эффект озона основан преимущественно на стимуляции клеточного звена и фагоцитарной активности.
Оценена эффективность внутрипортальных инфузий озонированного 0,9% раствора №С1 при остром обтурационном холестазе.
Практическая ценность. В результате проведенных исследований изучены степень депрессии костномозгового кроветворения и иммунные нарушения при остром обтурационном холестазе, требующие медикаментозной коррекции.
Исследование иммуно- и гемопоэзстимулирующих возможностей дерината, озонированного 0,9% раствора №С1 указывает на целесообразность их применения в комплексном лечении острого обтурационного холестаза.
Гемопоэз- и иммуномодулирующее действие озона в большей степени проявляется при внутрипортальном его введении.
Положения, выносимые на защиту:
1. При остром внепеченочном холестазе возникают выраженные нарушения гемопоэза и иммунитета, не корригируемые декомпрессией желчевыводя-щих путей и требующие патогенетической терапии.
2. Озон и деринат, применяемые при лечении внепеченочного холестаза, оказывают однонаправленное, но в разной степени выраженное стимулирующее влияние на системы гемопоэза и иммунитета.
"3. Озонированный физиологический раствор, в отличие от дерината, более выраженное иммуномодулирующее и гемопоэзстимулирующее действие оказывает при внутрипортальном его ведении.
2
Апробация работы. Основные результаты исследования доложены и обсуждены на ежегодных Огаревских чтениях Мордовского университета (г. Саранск, 2003-2006); ежегодных научных конференциях молодых ученых Мордовского государственного университета им. Н. П. Огарева (г. Саранск, 2005-2007); научно-практической конференции «Трудные и нестандартные ситуации в хирургии. Новые технологии в медицине» (г. Ижевск, 2006); межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежь и наука: итоги и перспективы» (г. Саратов, 2006); 9-м Международном Славяно-Балтийском научном форуме «Санкт-Петербург-Гастро-2007» (г. Санкт-Петербург, 2007).
Публикации и внедрение в практику. По теме опубликовано 18 научных работ, зарегистрировано 3 рационализаторских предложения.
Результаты диссертационной работы внедрены в практическую деятельность ГУЗ «Мордовская республиканская клиническая больница», ЦНИЛ Медицинского института ГОУВПО «Мордовский государственный университет им. Н. П. Огарёва». Фрагменты диссертации включены в программу обучения студентов, клинических интернов, клинических ординаторов на кафедре общей хирургии и анестезиологии им. Н. И. Атясова ГОУВПО «Мордовский государственный университет им. Н. П. Огарёва».
Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, пяти глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и библиографического списка: Изложена на 153 страницах машинописного текста, содержит 16 таблиц, 37 рисунков. Библиографический список включает 174 отечественных и 68 иностранных источников.
Работа выполнена в соответствии с тематическим планом научных исследований ГОУВПО «Мордовский государственный университет имени Н.П. Огарёва» «Обоснование применения внутрипортальных инфузий в хирургии и интенсивной терапии» (номер государственной регистрации 01200105274).
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования
Для решения поставленных задач выполнены эксперименты под внутривенным тиопентал-натриевым (0,045-0,050 г/кг массы) наркозом на 56 беспородных собаках половозрелого возраста обоего пола массой от 10 до 32 кг, В зависимости от характера проведённого лечения и состава инфузионных сред все экспериментальные животные были распределены на 7 групп.
В 1-й серии экспериментов (п=8) проводили моделирование обтурацион-ного холестаза путём наложения лигатурной перетяжки на общий желчный проток; лигатура не удалялась.
Во 2-й серии (п=8) на 3-й сутки осуществляли декомпрессию желчевыво-дящих путей посредством удаления лигатурной перетяжки.
В последующих экспериментах моделирование обтурационной желтухи и декомпрессии желчевыводящих путей (ЖВП) дополняли проведением инфузи-онной терапии. Объём вводимых сред во всех сериях составлял 20 мл/кг, скорость инфузии - 40-60 кап/мин.
В 3-й серии (п=8) сразу после выполнения декомпрессии ЖВП внутривенно капельно (40-60 кап/мин) вводили 0,9% раствора натрия хлорида (физиологического раствора - ФР).
В 4-й серии (п=8) после декомпрессии холедоха проводили внутривенную инфузию раствора дерината, взятого в средней терапевтической дозировке (1,5% раствор из расчета 0,1 мл/кг) и растворенного в ФР объемом 10 мл/кг, затем внутривенно капельно вводился 0,9% раствор хлорида натрия (10 мл/кг).
В 5-й серии (п=8) инфузионная терапия включала внутрипортальное введение дерината в тех же дозе и объеме со скоростью 40-60 кап/мин. После завершения внутрипортальной инфузии внутривенно капельное вводили 0,9% раствор хлорида натрия в объёме 10 мл/кг.
В 6-й серии (п=8) проводили внутривенную инфузию ОФР в объеме 10 мл/кг, после чего внутривенно вводился ФР (10 мл/кг).
В 7-й серии (п=8) после удаления лигатуры с холедоха, осуществляли внутрипортальное введение ОФР (10 мл/кг) и внутривенное - ФР (10 мл/кг).
Для исследования костного мозга пунктировали проксимальный мета-эпифиз левой бедренной кости лечебно-диагностической костно-мозговой иглой. Аспирацию костного мозга в объеме 0,3-0,5 мл производили шприцем в исходном состоянии, на 3, 5, 7 и 10-е сутки эксперимента.
Пробы крови для биохимических исследований и оценки иммунного статуса забирали из яремной вены в исходном состоянии, на 3, 5, 7 и 10-е сутки эксперимента.
Методы исследования.
1. Активность аспартатаминотранферазы (АсАТ) и аланинаминотранс-феразы (АлАТ), содержание общего билирубина и его фракций, общего белка плазмы крови определяли стандартными унифицированными методами, принятыми в клинической и лабораторной практике (Меньшиков В. В., 1987; Карпи-щенко А.И., 1999).
2. Число миелокариоцитов определяли по принципу разведения пунктата и подсчета клеток в счетной камере в определенном количестве квадратов с последующим пересчетом на 1 мкл пунктата по формуле: X = (п'200'250) / 100 = (п'500), где X - число миелокариоцитов в 1 мкл пунктата; п - количество миелокариоцитов в 100 больших квадратах; 200 - разведение; 250 - множитель для приведения к 1 мкл.
3. Морфологическое исследование пунктата костного мозга с дифферен-цировкой форменных элементов и подсчетом миелограммы, т.е. процентного содержания различных миелокариоцитов, производили в световом микроскопе в окрашенных мазках костного мозга по методу Аринкина (Меньшиков В. В., 1987). Мазки костного мозга готовили унифицированным методом (фиксация смесью Никифорова, окраска по Романовскому-Гимзе).
4. Костномозговой индекс созревания эритроцитов (ИСЭ) вычисляли следующим образом: (полихроматофильные + оксифильные нормоциты) / (все клетки красного ростка). Костномозговой индекс созревания нейтрофилов (ИСН) рассчитывали по формуле: (промиелоциты + миелоциты + метамиелоци-ты) / (палочкоядерные + сегментоядерные нейтрофилы). Лейкоэритробластиче-ское соотношения (Л/Э) вычисляли как соотношение процентного содержания клеток белого и красного ростков (Владимирская Е. Б., 1991).
5. Абсолютное количество кроветворных клеток в состоянии митотиче-ского деления в 1мкл пунктата определяли, подсчитывая число митозов среди 1 ООО ядросодержащих клеточных элементов, затем производили пересчет, принимая за 100 % общее количество миелокариоцитов.
6. Количества лейкоцитов, лимфоцитов и нейтрофилов в периферической крови подсчитывали по унифицированной методике в счетной камере Горяева в окрашенных мазках крови (по Романовскому-Гимза).
7. Абсолютное количество Т-лимфоцитов (Е-РОЛ) определяли в периферической крови в реакциях Е-розеткообразования. Абсолютное количество В-лимфоцитов (М-РОЛ) в периферической крови определяли в реакции М-розеткообразования. (Петров Р. В., 1983; Лесков В. П., 2005). Число нулевых лимфоцитов вычисляли по формуле: 100 %-(Е-РОЛ + М-РОЛ). Индекс нагрузки (ИН) - соотношение показателей числа лимфоцитов и нейтрофилов в тестах Е-розеткообразования по формуле: ИН=Е-РОЛ / Е-РОН.
8. Количество теофиллинрезистентных (ТФР-лимфоцитов) и теофил-линчувствительных (ТФЧ-лимфоцитов) Т-лимфоцитов оценивали в нагрузочных тестах с теофиллином.
9. Тест восстановления нитросинего тетразолия (НТС-тест) определяли по проценту нейтрофилов с восстановленным формазаном (метод основан на способности нейтрофилов поглощать тетрозолий и восстанавливать его в гранулы нерастворимого диформазана синего цвета). Средний цитохимический коэффициент (СЦК) рассчитывали по формуле СЦК=(0'а) + (16) + (2'в) + (З'г) / 100, где 0, 1, 2, 3 - степень активности восстановления диформазана; а, б, в, г — количество клеток каждой степени активности соответственно (Петров Р. В. и др., 1981).
10. Фагоцитарный показатель (ФП) определяли микроскопическим методом, основанным на установлении с помощью светового микроскопа поглотительной способности нейтрофилов крови. ФП - процент клеток, вступивших в фагоцитоз (процент активных нейтрофилов).
11. Содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) крупных, средних и мелких размеров определяли по методике, основанной на осаждении ЦИК в растворе полиэтиленгликоля с относительной молекулярной массой 6 000.
Полученные при исследовании данные обрабатывали методом вариационной статистики с использованием критерия Фишера - Стьюдента. Для изучавшихся параметров вычисляли среднее арифметическое выборочной совокупности (М), ошибку средней арифметической (т). Достоверность различий определяли в каждой серии по отношению к исходному значению (р) и по от-
5
ношению к значению на 3-й сутки эксперимента (pi). При этом различия средних величин признавались статистически достоверными при уровне значимости 95 % (р<0,05). Вычисления проведены на персональном компьютере с использованием программы "Microsoft Excel 2000".
Результаты исследования и их обсуждение
Острое нарушение оттока желчи вследствие полной обтурации желчных путей уже с первых суток эксперимента сопровождалось выраженными нарушениями функции печени, что подтверждалось значительными изменениями биохимических показателей-маркёров холестаза и цитолиза: уровень общего билирубина возрастал с 7,08±0,47 до 330,12±9,45 мкмоль/л (в 46,7 раза выше исходного значения; р<0,001), АсАТ - с 0,2±0,02 до 2,18±0,13 мкмоль/мл-ч, Ал AT - с 0,18±0,02 до 4,19±0,2 мкмоль/мл-ч
При исследовании костного мозга выявлялись признаки повреждающего действия ингредиентов желчи и токсинов на кроветворную ткань. Это проявлялось деструкцией кроветворных клеток, падением общего количества миелока-риоцитов и клеток в состоянии митотического деления, сужением пролифера-тивного миелоидного и эритроидного пула, уменьшением числа элементов мо-ноцитарной и лимфоцитарной генераций (рис. 1).
Исходые 3-й 5-и 7-и 10-и Сутки
данные
■ промиелоциты □миелоциты
El мегамиелоциты □ палочкоядерные нейтрофилы
Шсегментоядерные нейтрофилы
Р и с. 1. Изменение гранулоцитарного ростка костного мозга при остром обтурационном холестазе
В пунктате преобладали зрелые гранулоциты, что отражалось в увеличении лейкоэритробластического соотношения и падении ИСН в 7,9 раза. Возрастало также содержание оксифильных нормоцитов и ИСЭ. В ответ на угнетение функционального состояния печени происходило повышенное вымывание ней-трофилов из костного мозга, что приводило к истощению костномозгового ре-
6
зерва, о чем свидетельствовал рост количества палочкоядерных нейтрофилов в 2,2 раза, сегментоядерных нейтрофилов - в 1,4 раза.
Проведенные исследования позволили определить существенные изменения в иммунном гомеостазе (рис. 2). Выявлены напряженность функционирования иммунной системы, депрессия поглотительной способности нейтрофилов
и дисбаланс в системе Т-клеточного иммунитета.
%
Исходные 3-й 5-и 7-и 10-и Сутки
данные
■ лимфоциты ИТ-лимфоциты
| нулевые лимфоциты □ ТФЧ-лимфоциты 0 ТФР-лимфоциты
%
Исходные 3-й 5-и 7-и 10-и Сутки
данные
■ В-лимфоциты ИЦИК крупные
в ЦИК средние □ ЦИК мелкие
Р и с. 2. Изменение показателей иммунитета при остром обтурационном холестазе
Увеличение субпопуляции Т-супрессоров на 85,7% сопровождалось понижением всей популяции лимфоцитов, пула хелперных клеток и значительным возрастанием нулевых лимфоцитов (на 300 %) - клеток с пониженной фи-
7
зиологической активностью: либо юных, несозревших, либо стареющих, дефектных лимфоцитов, либо клеток, временно лишенных рецепторов или имеющих блокированные рецепторы Т- и В-лимфоцитов
Гиперактивный В-клеточный иммунный ответ характеризовался повышением уровня В-лимфоцитов на 42,9 %, иммунных комплексов всех размеров на фоне нарушения иммунорегуляции и фагоцитарных процессов, что способствовало формированию патологического иммунокомплексного синдрома, утяжеляющего течение основного заболевания.
После декомпрессии холедоха на 3-й сутки холестаза наиболее значительно снижался уровень общего билирубина (в 3,4 раза) и уменьшалась в 1,25 и 1,26 раза активность АсАТ и АлАТ.
Исследование показателей гемопоэза выявило сохраняющуюся гемоде-прессию, хотя наблюдались признаки восстановления кроветворной ткани в виде увеличения содержания бластных форм на 3,9 %, что способствовало повышению числа пролиферующих элементов костного мозга.
В иммунной системе заметной нормализации измененных показателей не происходило. Дисфагоцитоз, дисбаланс в субпопуляционном составе лимфоцитов сохранялись: уровень супрессорной группы клеток уменьшился на 5,3 %, В-лимфоцитов - на 4 %, ЦИК средних размеров - на 30 % относительно данных на высоте холестаза.
Результаты, полученные во 2-й серии экспериментов, позволяют сделать вывод о положительном влиянии декомпрессии желчных протоков на функциональное состояние печени. Вместе с тем необходимо отметить, что удаление лигатуры с холедоха лишь препятствовало дальнейшему развитию иммунных и гемопоэтических нарушений, не устраняя их полностью.
Выполнение 3-й серии экспериментов было обусловлено необходимостью изучения влияния инфузии 0,9% раствора хлорида натрия (основного носителя дерината и озона, используемого для парентерального введения) на кроветворную ткань и иммунологический статус при обтурационном холестазе с целью последующей сравнительной оценки гемопоэз- и иммуномодулирующей активности дерината и озонированного физиологического раствора.
Выявлено, что на фоне проводимой внутривенной терапии 0,9% раствором хлорида натрия в объеме 20 мл/кг отмечалась общая тенденция к нормализации большинства изучаемых показателей по сравнению с результатами 2-й серии экспериментов. Хотя выявлялись признаки восстановления функциональной активности кроветворной ткани в виде увеличения митотической активности гемопоэтических клеток на 3,3 %, содержания бластных форм с небольшим повышением числа пролиферирующих и уменьшением зрелых элементов костного мозга, гемодепрессия сохранялась.
Наблюдался дисбаланс и в иммунной системе касающийся как количественного состава основных субпопуляций иммунокомпетентных клеток, так и их функциональной активности: фагоцитарный показатель повысился на 4,8 % (р<0,001, Р1>0,05), показатель НСТ-теста - на 18,5 (р<0,001, р,<0,001), средний цитохимический коэффициент - на 5,6 % (р<0,01, р|>0,05). Степень напряжённости работы иммунной системы сохранялась. Инфузионная терапия не обес-
8
печивала полного восстановления баланса субпопуляций лимфоцитов. Содержание нулевых лимфоцитов уменьшалось с 410 до 380 % (р<0,001, р,>0,05).
Включение в комплекс лечебных мероприятий инфузий дерината при экспериментальном обтурационном холестазе сопровождалось существенной положительной динамикой большинства исследуемых иммунных и гемопоэти-ческих показателей. Отмечена выраженная эффективность дерината в качестве протектора и стабилизатора гемопоэза. Деринат восстанавливал количественный состав клеток кроветворной системы. Митотическая активность клеток к 7-м суткам практически достигала первоначального уровня, что сопровождалось увеличением относительно исходных данных содержания бластных клеток в пунктате до 98,5% и количества пролиферирующих клеток (нормоциты базо-фильные и полихроматофильные возрастали с 0,13±0,014 и 2,39+0,298 % (р<0,001) до 2,53±0,241 и 8,55±0,674 % (р>0,05, р,<0,001). При этом понижалось содержание зрелых элементов гранулоцитарного и эритроидного рядов. К этому времени мегакариоциты и лимфоциты достигали исходного значения, моноциты составляли 95,7 % от начальной величены. Лейкоэритробластическое соотношение снижалось до 104,9 %, а ИСН повышался до 89 % (рис. 3).
7-и Сутки
- ДЕРИНАТ в/в * ОФР в/в —А— ОФР в/п
Р и с. 3. Сравнительная динамика активности Л/Э при инфузионной терапии обтурационного холестаза
Деринат, используемый при лечении обтурационного холестаза, проявляет иммунокорригирующие свойства. По нашим данным, он активирует клеточный и гуморальный иммунитет, а также усиливает функциональную активность фагоцитирующих клеток. К 7-м суткам лечения это проявляется увеличением количества абсолютных лимфоцитов на 29,5 %, понижением числа В-лимфоцитов в 1,2 раза и возрастанием индекса нагрузки до 78% (р>0,05; Р1<0,001) от исходных данных.
При сравнительном анализе эффективности внутривенного и внутрипор-талыюго путей введения дерината при обтурационном холестазе не выявлено
каких-либо достоверных различий в показателях гемопоэза. Общая их направленность отражала положительное влияние инфузий дерината как при внутривенном, так и при внутрипортальном пути введения. (В 5-й серии митозы достигали 93,3 %, лейкоэритробластическое соотношение снижалось до 104,6 %, ИСЭ - до 101,2 %, а ИСН повышался до 87,4 %).
Вместе с тем отмечено, что по сравнению с внутривенной терапией, использование внутри портальных инфузий характеризовалось более выраженной коррекцией изучаемых показателей иммунной системы. Улучшение иммунологических показателей выражалось увеличением абсолютного содержания в периферической крови лимфоцитов, возрастанием уровня ЦИК, положительными изменением баланса субпопуляций лимфоцитов. Активность нейтрофильного звена защиты (ИН) на фоне проводимой внутрипортальной инфузии дерината характеризовалась повышением к концу эксперимента на 34,1 % (р>0,05; р,<0,01).
Полученные результаты позволяют судить о способности дерината корригировать иммунологические и гемопоэтические нарушения, развивающиеся при обтурационном холестазе. Можно предположить, что внутрипортальное применение дерината имело эффект восстановления функциональной активности гепатоцитов, в результате чего уменьшалась выраженность эндотоксемии, снижалось воздействие желчных кислот и токсинов на кроветворную ткань и иммунный гомеостаз, тем самым обусловливая нормализацию иммунных и ге-мопоэтических показателей.
Включение при экспериментальном обтурационном холестазе в комплекс лечебных мероприятий инфузий озонированного 0,9% раствора хлорида натрия сопровождалось положительной динамикой большинства исследуемых показателей гемопоэза и иммунитета. В данной серии экспериментов отмечена выраженная способность озона восстанавливать повреждение кроветворной ткани, сопровождающаяся нормализацией к 7-м суткам митотической активности и увеличением содержания миелокариоцитов с 6,35±0,37 до 24,05±1,024 %. Гра-нулоцитарный пролиферативный пул возрастал на фоне постоянного уменьшения числа зрелых гранулоцитов. Наблюдалось восстановление пролиферации и дифференцировки элементов эозинофильной, лимфоцитарной, моноцитарной и мегакариоцитарной генераций. Внутривенное введение озонированного 0,9% раствора хлорида натрия оказывало корригирующее влияние на процессы эри-тропоэза, что проявлялось поэтапным увеличением пролиферативного пула эритрокариоцитов и уменьшением числа оксифильных нормоцитов.
Был установлен иммуномодулирующий эффект озона при обтурационном холестазе, который обусловлен его способностью восстанавливать и повышать функциональную активность клеток иммунной системы. Следствием активации клеток моноцитарно-макрофагальной системы являлось возрастание функциональной устойчивости организма к инфекции. Поэтому после введения озонированного 0,9% раствора хлорида натрия происходило усиление резистентности организма к повреждающим факторам, способствующее более быстрому восстановлению нарушенных функций иммунитета и гемопоэза.
ю
Одновременно с этим происходила активация клеточного иммунитета, характеризующаяся увеличением с 63,5 до 91,3 % (р>0,05; р1<0,001) абсолютного содержания в периферической крови лимфоцитов, нормализацией баланса их субпопуляций.
На фоне проводимой озонотерапии отмечались положительные изменения гуморального иммунитета. Наблюдалась активация антигенсвязывающей функции иммунной системы (оцениваемой по снижению уровня ЦИК). Содержание среднедисперсных ЦИК уменьшалось в 1,3 раза (р<0,001; р]<0,05).
Смена пути введения озона с внутривенного на внутрипортальный характеризовалась большей степенью нормализации большинства изучаемых показателей. Положительное влияние озона выражалось в восстановлении клеточного состава пунктата и митотической активности. Так, при внутривенной озонотерапии уровень митозов повышался на 37,5 %, при внутрипортальной -на 51,6 % (р<0,05), оставаясь соответственно на 9,6 % ниже и 6,1 % выше исходных данных.
На фоне проводимой внутрипортальной озонотерапии происходило значительное восстановление содержания лимфоцитов. Так, их уровень при внутривенном введении повышался на 54,2 %, а при внутри портальном - на 58,7 % (р<0,05), превосходя исходные величины на 3,1 %.
О нормализации клеточного состава пунктата свидетельствовало уменьшение лейкоэритробластического соотношения до 104,9 % относительно исходного уровня (до 114,9 % - при внутривенном введении).
На фоне внутрипортального введения озонированного 0,9% раствора хлорида натрия положительная динамика ряда иммунулогических показателей оказалась также более значительной. Динамика нулевых лимфоцитов имела волнообразный характер, значительно снижаясь к 5-м суткам, в последующем, к 7-м суткам происходило их компенсаторное возрастание (рис. 4).
%
ОЕТУРАЦИЯ ЛЕЧЕНИЕ
- » ДЕРИНАТ в/в —♦—ОФР в/в —А— ОФР в/п
Р и с. 4. Сравнительная динамика нулевых лимфоцитов при инфузионной тернии обтурационного холестаза
Существенно повышался индекс нагрузки (до 95,6% относительно исходного уровня), что является благоприятным симптомом, свидетельствующим о восстановлении функциональной активности иммунной системы (рис. 5).
ОЕТУРЛЦИЯ ЛЕЧЕНИЕ
- ДЕРИНАТ в/в ♦ ОФР в/в —А— ОФР в/п
Р и с. 5. Сравнительная динамика индекс напряжения при инфузнонной терапии обтурационного холестаза
Повышение количества нулевых клеток после внутрипортальной озоно-терапии свидетельствовало об активации иммунной системы, что являлось подтверждением иммуномодулирующих свойств озона.
Важным моментом в успешном лечении обтурационного холестаза явилось восстановление гуморального иммунитета. Внутрипортальное введение озонированного 0,9% раствора хлорида натрия сопровождалось снижением количества ЦИК всех калибров (в частности, ЦИКсредних размеров - в 1,7 раза), тем самым уменьшая их повреждающее действие на гепатоциты, что нашло подтверждение в снижении цитолитического синдрома (уровень АлАТ снижался в 12,1 раза, АсАТ - в 7,5 раза).
Полученные результаты позволяют утверждать о высокой способности озона корригировать иммунные и гемопоэтические нарушения, развивающиеся при обтурационном холестазе. Использование внутрипортального пути введения озонированного 0,9% раствора хлорида натрия, по сравнению с внутривенным путем, сопровождалось более существенной нормализацией изучаемых показателей гемопоэза и иммунного статуса.
выводы
1. Развитие обтурационного холестаза сопровождается депрессией кроветворения в виде угнетения миело- и эритропролиферации с одновременным нарушением иммунной защиты организма, которое проявляется дисбалансом в системе Т-клеточного иммунитета.
2. Декомпрессия холедоха и последующие внутривенные инфузии изотонического раствора хлорида натрия, препятствуя дальнейшему углублению холестатического синдрома, не приводят к существенной нормализации наблюдаемых иммунных и гемопоэтических нарушений.
3. Применение дерината при экспериментальном обтурационном холестазе способствует заметной нормализации показателей кроветворения. Им-муномодулирующий эффект препарата более выражен и проявляется восстановлением активности нейтрофильного звена защиты с повышением индекса нагрузки на 35,3 %, абсолютных лимфоцитов - на 29,5 %.
4. Озонированный 0,9% раствор хлорида натрия при обтурационном холестазе обладает выраженным гемопоэзмодулирующим действием, стимулируя миелоидный и эритроидный ростки костного мозга. Иммуномодулирую-щий эффект препарата проявляется нормализацией иммунного статуса с повышением фагоцитарного показателя и индекса завершенности фагоцитоза.
5. Внутрипортальные инфузии озонированного физиологического раствора при экспериментальном обтурационном холестазе сопровождаются более значительной коррекцией показателей гемопоэза и иммунитета по сравнению с внутрипортальным введением дерината.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. С целью коррекции нарушений гемопоэза при остром обтурационном холестазе целесообразно применение озонированного 0,9% раствора ЫаС1 с содержанием озона в озонокислородной смеси 2,5 мг/л в течение 10 дней.
2. Для нормализации иммунных нарушений показано использованиие 1,5% раствора дерината (0,1 мл/кг) в течение 5 дней.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Динамика трансаминазной активности венозной крови собак при внутрипортальном введении изотонического раствора натрия хлорида / О. Н. Инякин, А. Е. Лапшин, О. П. Мялькин, Е. И. Мокшина и [др.] // Современные аспекты теоретической и клинической медицины : проблемы диагностики, лечения и реабилитации.-Межвуз. сборник науч. тр. - Саранск, 2000. - С. 89-91.
2. Кшняйкина О. И. Коррекция ЭКГ-нарушений при механической желтухе / О. И. Кшняйкина, Е. И. Мокшина, С. В. Костин // Современные методы диагностики и лечения заболеваний в клинике и в эксперименте : Материалы науч. конф. молодых ученных, посвящ. 60-летию Ин-та хирургии им. А. Н. Вишневского РАМН, Москва, 13-14 окт. 2005. - С. 443^145.
3. Мокшина Е. И. Эффективность применения озонированного физиологического раствора при внепеченочном холестазе по данным функционального состояния печени / Е. И. Мокшина // Тезисы работ участников открытого российского конкурса на лучшую научную работу студентов 2004 года по разделу «Медицинские науки». - М. 2005. - С.47.
4. Влияние дерината на показатели костномозгового кроветворения при внепеченочном холестазе / Е. И. Мокшина, А. Н. Беляев, X. А. Рафик, Р. Р. Казаков // Трудные и нестандартные ситуации в хирургии : сб. науч.-практ. стат. / под ред. проф. В. А. Ситникова, С. Н. Стяжкиной. - Ижевск, 2006. Вып. 3,-С. 163-166.
5. Эффективность внутрипортальной озонотерапии при экспериментальном внепеченочном холестазе / А. Н. Беляев, В. П. Тумайкин, Е .И. Мокшина и [др.] // Гастроэнтерология Санкт-Петербурга, 2006. - № 1-2. - С. 15.
6. Эффективность различных инфузионных сред при лечении механической желтухи / Д. Ю. Сапарин, Е. И. Мокшина, X. А. Рафик и [др.] // Материалы межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежь и наука : итоги и перспективы». - Саратов, 2006. - С. 284-285.
7. Внутрипортальный путь введения лекарственных растворов в коррекции нарушений гомеостаза при остром внепеченочном холестазе / А. Н. Беляев, В. П. Тумайкин, С. А. Беляев, Е. И. Мокшина и [др.] // Вестн. Морд. Унта. Научно-публицистический журнал, 2006- № 2. - С. 125-131.
8. Новые технологии виутрипортальных инфузий в хирургии и интенсивной терапии / А. Н. Беляев, В. П. Тумайкин, С. А. Беляев, О. И. Кшняйкина, Е. И. Мокшина II Общая Реаниматология. - 2006. - Т.2, № 4/1.-С. 55-57.
9. Коррекция функционаьного состояния печени и системы гемостаза при механической желтухе / А. Н. Беляев, Д. Ю. Сапарин, С. А. Беляев, Е. И. Мокшина // Современные хирургические технологии :. Сб. науч. тр. -Красноярск, 2006. - С. 248-253.
10. Мокшина Е. И. Изменения эритроидного ростка под действием раствора дерината при внепеченочном холестазе / Е. И. Мокшина, Д. Ю. Сапарин //
Материалы межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежь и наука: итоги и перспективы». - Саратов, 2006. - С. 277.
11. Технология катетеризации портальной вены при хирургическом лечении внепеченочного холестаза / А. Н. Беляев, С. А. Беляев, В. П. Тумайкин, Е.И. Мокшина, и [др.] // Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. - 2007. - JV» 1-2.
12. Мокшина Е. И. Внутрипортальные инфузии дерината в коррекции системы иммунитета при внепеченочном холестазе / Е. И. Мокшина // Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. - 2007. - № 1-2. - С. М76-М77.
13. Внутрипортальные инфузии озонированного физиологического раствора в комплексном лечении внепеченочного холестаза / А. Н. Беляев, X. А. Рафик, В. П. Тумайкин, Е. И. Мокшина и [др.] // Альманах клинической медицины. Актуальные вопросы клинической хирургии. - М. 2007. - Т. 16. - С.
14. Эффективность внутрипортальной озонотерапии при механической желтухи / А. Н. Беляев, X. А. Рафик, В. П. Тумайкин, С. А. Беляев, Е. И. Мокшина // Казан. Мед. журн. Прил. к № 4. - Н. Новгород, 2007. -Т. 88. - С. 30-32.
15. Киршев В. С. Влияниие внутрипорталыюго введения дерината и озона на липопероксндацию при остром внепеченочном холестазе / В. С. Киршев, А. Н. Беляев, Д. Ю. Сапарин, Е.И. Мокшина, и [др.] // Казан. Мед. журн. Прил. к № 4. - Н. Новгород, 2007. - Т. 88. - С. 34.
16. Мокшина Е.И. Коррекция эритроидного ростка при внепеченочном холестазе внутрипортальными инфузнями озонированного физиологического раствора / Е. И. Мокшина, А. Н. Беляев, Д. Ю. Сапарин // Казан. Мед. журн. Прил. к № 4. - Н. Новгород, 2007. - Т. 88 - С. 38-39.
17. Мадякин Д. А. Топографо-анатомический аспект применения внут-рипортальных инфузий в хирургии / Д. А. Мадякин, Е. И. Мокшина // Медицинский альманах / Спецвыпуск. Рецензируемый медицинский научно- практический журнал. - Нижний Новгород, 2008. - С. 180-181.
18. Мокшина Е.И. Иммунокоррекция деринатом внепеченочного холестаза / Е. И. Мокшина, С. И. Хвостунов, А. А. Юдин // Вести. Рос. гос. мед. ун-та. - 2009. - №3. - С. 120.
-С.М14.
38^1.
РАЦИОНАЛИЗАТОРСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. Беляев А. Н., Беляев С. А., Мокшина Е. И., Рафик X. А., Сапарин Д. Ю., Тумайкин В. П., Таратынов И. Б. Способ коррекции гемокоагуляционных нарушений при печеночной недостаточности. Удостоверение на рационализаторское предложение № 1041, выдано 07.11.2006 Мордовским государственным университетом имени Н. П. Огарёва.
2. Беляев А. Н., Мокшина Е. И., Рафик X. А., Сапарин Д. Ю., Мельникова Д. В., Костин С. В. Способ коррекции эндогенной интоксикации при механической желтухе. Удостоверение на рационализаторское предложение № 1045, выдано 10.04.2007 Мордовским государственным университетом имени Н. П. Огарёва.
3. Беляев А. Н., Мокшина Е. И., Рафик X. А., Сапарин Д. Ю., Мельникова Д. В., Киршев В. С. Способ коррекции иммунной системы при внепеченочном холестазе. Удостоверение на рационализаторское предложение № 1051, выдано 20.06.2007 Мордовским государственным университетом имени Н. П. Огарёва.
Подписано в печать 21.09.2009. Объем 1,0 п. л. Тираж 100 экз. Заказ № 1259.
Типография Издательства Мордовского университета 430005, г. Саранск, ул. Советская, 24
Оглавление диссертации Мокшина, Елена Ивановна :: 2009 :: Саранск
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Применение метода внутрипортального введения лекарственных средств в медицине.
1.2. Нарушение гемопоэза в клинической практике.
1.3. Нарушения иммунитета при заболеваниях печени.
1.4. Применение дерината и медицинского озона в клинической практике.
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Подготовка животных к эксперименту.
2.2. Методика проведения эксперимента.
2.3. Характеристика экспериментального материала.
2.4. Биохимические методы исследования.
2.5. Гематологические и иммунологические методы исследования.
ГЛАВА III. НЕКОТОРЫХ ПОКАЗАТЕЛИ ГЕМОПОЭЗА И ИММУНИТЕТА ПРИ ОСТРОМ ОБТУРАЦИОННОМ ХОЛЕСТАЗЕ И ПОСЛЕДУЮЩЕЙ ДЕКОМПРЕССИИ ЖЕЛЧЕВЫВОДЯЩИХ ПУТЕЙ.
3.1. Динамика показателей функционального состояния печени при остром обтурационном холестазе.
3.2. Динамика показателей гемопоэза при остром обтурационном холестазе.
3.3. Динамика показателей иммунитета при остром обтурационном холестазе.
3.4. Динамика показателей гемопоэза при остром обтурационном холестазе и после декомпрессии желчевыводящих путей.
3.5. Динамика показателей иммунитета при остром обтурационном холестазе и после декомпрессии желчевыводящих путей.
ГЛАВА IV. КОРРЕКЦИЯ НЕКОТОРЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ГЕМОПОЭЗА И ИММУНИТЕТА ПРИ ОБТУРАЦИОННОМ ХОЛЕСТАЗЕ ВНУТРИВЕННЫМИ И ВНУТРИПОРТАЛЬНЫМИ ИНФУЗИЯМИ ДЕРИНАТА.
4.1. Динамика показателей гемопоэза при обтурационном холестазе и последующих внутривенных инфузий 0,9% раствора NaCI.
4.2. Динамика показателей иммунной системы при обтурационном холестазе и последующих внутривенных инфузий 0,9% раствора NaCI.
4.3. Динамика показателей гемопоэза при обтурационном холестазе и после внутривенных инфузий дерината.
4.4. Динамика показателей иммунной системы при обтурационном холестазе и после внутривенных инфузий дерината.
4.5. Динамика показателей гемопоэза при обтурационном-холестазе и после внутрипортальных введений дерината.
4.6. Динамика показателей иммунитета при обтурационном холестазе и после внутрипортальных введений дерината.
ГЛАВА V. КОРРЕКЦИЯ НЕКОТОРЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ГЕМОПОЭЗА И ИММУНИТЕТА ПРИ ОБТУРАЦИОННОМ ХОЛЕСТАЗЕ ВНУТРИВЕННЫМИ И ВНУТРИПОРТАЛЬНЫМИ ИНФУЗИЯМИ ОЗОНИРОВАННОГО 0,9% РАСТВОРА NACI.
5.1. Коррекция показателей гемопоэза внутривенным введением озонированного 0,9% раствора NaCI при обтурационном холе-стазе
5.2. Коррекция показателей иммунитета внутривенным введением озонированного 0,9% раствора NaCI при обтурационном холе-стазе
5.3. Коррекция показателей гемопоэза внутпортальным введением озонированного 0,9% раствора NaCI при обтурационном холе-стазе
5.5. Коррекция показателей иммунитета внутпортальным введением озонированного 0,9% раствора NaCI при обтурационном холе-стазе
Введение диссертации по теме "Хирургия", Мокшина, Елена Ивановна, автореферат
Актуальность темы.
Болезни органов пищеварения сопровождаются изменениями функциональных свойств иммунокомпетентных клеток, зависящими от характера повреждения органа, активности патологического процесса и проводимой терапии (Зубеев П. С. и др., 2001). Оперативное вмешательство, как правило, усугубляет нарушения иммунной системы, приводя нередко к развитию синдрома вторичной иммунной недостаточности и, как следствие, к послеоперационным инфекционным осложнениям, которые ухудшают прогноз хирургического лечения, увеличивают длительность госпитализации и летальность (Крюков А. И., Елисеев О. В., 2004; Андреев Г. Н., 2008).
Большое значение в иммунных нарушениях имеют патологические изменения в костном мозге, где из стволовых клеток образуются клетки-предшественники для лимфоцитов и фагоцитов, а также нейтрофилы, эозинофилы и базофилы - три типа клеток, активно участвующих в иммунных реакциях (Воробьёв А. И., 2003; Аскаров М. Б. и др., 2008).
Имеется очевидная сопряженность процесса повреждения печени с нарушениями в иммунной системе, касающимися не только количественного состава основных субпопуляций иммунокомпетентных клеток, но и их функциональной активности (Серова Т. И. и др., 2002; Ильченко JI. Н. и др., 2004). Так, среди больных с обтурационным холестазом частота развития инфекционных осложнений в послеоперационном периоде, по данным различных авторов, составляет в среднем от 3,9 до 14,6 % (Гельфанд Б. Р. и др., 1997; Кузин Н М. и др., 2000).
Из экзогенных иммуномодуляторов большую известность в клинической практике получил деринат. В литературе встречаются публикации о его применении в онкологии, пульмонологии, педиатрии, при лечении больных с нарушением иммунного статуса (Каплина Э. Н., Вайнберг Ю. П., 2005; Балыкова Л. А. и др., 2007).
В последние годы в клиническую практику широко внедряется метод озонотерапии. Наличие целого ряда лечебных эффектов медицинского озона (антимикробный, антигипоксантный, гипокоагуляционный, спазмолитический) позволяет одновременно воздействовать на различные звенья инфекционного процесса (Бояринов Г. А., 1999; Конторщикова К. Н., 2003; Перетягин С. П., 2003; Беляев А. Н., 2007), в частности на иммунную систему и гемопоэз.
Повышение эффективности проводимой терапии нам видится в том числе и в использовании внутрипортального пути введения выбранных лекарственных средств, который позволяет подвести препараты непосредственно к очагу повреждения в большей концентрации. (Гульман М. И., Винник Ю. С., 2000; Беляев А. Н. и др., 2001, 2003; Тумайкин В. П., 2005).
Цель работы. Изучить эффективность дерината и озонированного изотонического раствора натрия хлорида в коррекции иммунных и гемопоэтических нарушений при остром обтурационном холестазе.
Основные задачи исследования:
1. Проанализировать показатели гемопоэза и иммунитета в динамике развития обтурационного холестаза и после декомпрессии холедоха.
2. Оценить иммуномодулирующую и гемопоэзстимулирующую активность дерината при остром обтурационном холестазе.
3. Изучить влияние озонированного физиологического раствора на показатели гемопоэза и иммунитета при остром внепеченочном холестазе.
4. По степени коррекции показателей иммунитета и гемопоэза дать сравнительную оценку эффективности внутрипортального введения озона и дерината при остром обтурационном холестазе.
Научная новизна исследования. В динамике течения обтурационного холестаза изучены качественные и количественные изменения костномозгового кроветворения, проявляющиеся в виде угнетения миело- и эритропоэза, а также выявлены существенные иммунные нарушения, проявляющиеся в угнетении клеточного звена иммунитета.
Показано, что деринат при остром внепеченочном холестазе обладает выраженным иммуномодулирующим эффектом, в большей степени проявляющимся повышением активности клеточного звена иммунитета и реализующим свое действие через активацию миелопролиферации.
Установлено гемопоэзмодулирующее действие озонированного 0,9% раствора NaCI, который при лечении обтурационного холестаза проявляется стимуляцией миело- и эритроидного ростков кроветворения. Иммуномодулирующий эффект озона основан преимущественно на стимуляции клеточного звена и фагоцитарной активности.
Оценена эффективность внутрипортальных инфузий озонированного 0,9% раствора NaCI при остром обтурационном холестазе.
Практическая ценность. В результате проведенных исследований изучены степень депрессии костномозгового кроветворения и иммунные нарушения при остром обтурационном холестазе, требующие-медикаментозной коррекции.
Исследование иммуно- и гемопоэзстимулирующих возможностей дерината, озонированного 0,9% раствора NaCI указывает на целесообразность их применения? в комплексном лечении острого обтурационного холестаза.
Гемопоэз- и иммуномодулирующее действие озона в большей степени проявляется при внутрипортальном его введении.
Внедрение в практику. Результаты диссертационной работы внедрены в практическую деятельность ГУЗ РМ «Мордовская республиканская клиническая больница», ЦНИЛ медицинского института ГОУВПО «Мордовский государственный университет им. Н. П. Огарёва». Фрагменты диссертации включены в программу обучения студентов, клинических интернов, клинических ординаторов на кафедре общей хирургии и анестезиологии им. Н. И. Атясова ГОУВПО «Мордовский государственный университет им. Н. П. Огарёва».
Положения, выносимые на защиту:
1. При остром внепеченочном холестазе возникают выраженные нарушения гемопоэза и иммунитета, не корригируемые декомпрессией желчевыводящих путей и требующие патогенетической терапии.
2. Озон и деринат, применяемые при лечении внепеченочного холестаза, оказывают однонаправленное, но в разной степени выраженное стимулирующее влияние на системы гемопоэза и иммунитета.
3. Озонированный физиологический раствор, в отличие от дерината, более выраженное иммуномодулирующее и гемопоэзстимулирующее действие оказывает при внутрипортальном его ведении.
Апробация работы. Основные результаты исследования доложены и обсуждены на ежегодных Огаревских чтениях Мордовского университета (г. Саранск, 2003-2006); ежегодных научных конференциях молодых ученых Мордовского государственного университета им. Н. П. Огарева (г. Саранск, 2005-2007); научно-практической конференции «Трудные и нестандартные ситуации в хирургии. Новые технологии в медицине» (г. Ижевск, 2006); межрегиональной научно-практической конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежь и наука: итоги и перспективы» (г. Саратов, 2006); 9-м Международном Славяно-Балтийском научном форуме «Санкт-Петербург-Гастро-2007» (г. Санкт-Петербург, 2007).
Публикации по теме исследования. По теме диссертации опубликовано 18 печатных научных работ (из них 5 - в журналах, рекомендованных ВАК РФ), зарегистрировано 3 рационализаторских предложения.
Структура и объём работы. Диссертация состоит из введения, 5 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и библиографического списка; изложена на 153 страницах машинописного текста, содержит 16 таблиц, 37 рисунка. Библиографический
Заключение диссертационного исследования на тему "Коррекция иммунных и гемопоэтических нарушений при остром обтурационном холестазе"
ВЫВОДЫ
1. Развитие обтурационного холестаза сопровождается депрессией кроветворения в виде угнетения миело- и эритропролиферации с одновременным нарушением иммунной защиты организма, которое проявляется дисбалансом в системе Т-клеточного иммунитета.
2. Декомпрессия холедоха и последующие внутривенные инфузии изотонического раствора хлорида натрия, препятствуя дальнейшему углублению холестатического синдрома, не приводят к существенной нормализации наблюдаемых иммунных и гемопоэтических нарушений.
3. Применение дерината при экспериментальном обтурационном холестазе способствует заметной нормализации показателей кроветворения. Иммуномодулирующий эффект препарата более выражен и проявляется восстановлением активности нейтрофильного звена защиты с повышением индекса нагрузки на 35,3 %, абсолютных лимфоцитов - на 29,5 %.
4. Озонированный 0,9% раствор хлорида натрия при обтурационном холестазе обладает выраженным гемопоэзмодулирующим; действием, стимулируя миелоидный и эритроидный ростки-костного мозга. Иммуномодулирующий эффект препарата проявляется нормализацией иммунного статуса с повышением фагоцитарного показателя и индекса завершенности фагоцитоза.
5. Внутрипортальные инфузии озонированного физиологического раствора при экспериментальном обтурационном холестазе сопровождаются более значительной коррекцией показателей гемопоэза и иммунитета по сравнению с внутрипортальным введением дерината.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. С целью коррекции нарушений гемопоэза при остром обтурационном холестазе целесообразно применение озонированного 0,9% раствора NaCl с содержанием озона в озонокислородной смеси 2,5 мг/л в течение 10 дней.
2. Для нормализации иммунных нарушений показано использование 1,5% раствора дерината (0,1 мл/кг) в течение 5 дней.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Мокшина, Елена Ивановна
1. Алферина Е.Н. Иммунологические факторы патогенеза рецидивирующей эритематозной рожи и их коррекция: автореф. дисс. . канд. мед. наук: 14.00.16 / Алферина Екатерина Николаевна. — Саранск, 2000. -16 с.
2. Анализ осложнений, связанных с инфузией солевых растворов и лекарственных сред в пупочную вену новорожденных / Т.В. Успенская и др. // Здравоохранение Казахстана. 1989: - № 3. — С. 64.
3. Андреев Г.Н. Предоперационная подготовка и хирургическое лечение больных с механической желтухой неопухолевой этиологии / Г.Н. Андреев, М.Д. Катаева // Анналы хирургической гепатологии. 2008. - Т. 13, № 3. - С. 105.
4. Андриевский А.Е. Опыт применения препарата дерината. в комплексном лечении эубиотических изменений в толстой кишке // Использование препарата деринат в различных областях медицины: Материалы II Всероссийской конференции. М., - 2002. - С. 60 - 61.
5. Антимикробные свойства озонированных растворов / А.В. Филатов и др. // Нижегородский медицинский журнал. Приложение: Озонотерапия. 2003. - С. 20 - 21.
6. Антонов Ю.В. Исследование иммунного статуса у больных хроническим гепатитом и циррозом печени / Ю.В. Антонов, В.В. Негода, А. А. Павина // Сб. тр.: Современные проблемы аллергологии и иммунофармакология. М., 2001. - Т. 2. - С. 405.
7. Атясов Н.И. Новые технологии использования венозного русла костей в экстремальной медицине / Н.И. Атясов, И.Н. Атясов. Саранск: Изд-во Мордов. ун-та. - 2001. - 212 с.
8. Ахаладзе Г.Г. Гнойный холангит: вопросы патофизиологии лечения // Инфекции в хирургии. 2003. - Т. 5, № 4. - С. 12 - 22.
9. И. Баранова Н.Н. Методы оценки иммунного статуса: Метод, рекомендации / Н.Н. Баранова, Т.А. Дружинина. — Пенза, 2004. — С. 36.
10. Беляев С.А. Применение озона для коррекции функциональной активности печени и системы гемостаза при внепеченочном холестазе: автореф. дисс. . канд. мед. наук: 14.00.27 / Беляев Сергей Александрович. — Саранск, 2004. 16 с.
11. Беляева Е.В. Патофизиологические основы коррекции эндогенной интоксикации на фоне полихимиотерапии при раке яичников: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.01 / Беляева Евгения Васильевна. -Саранск, 2005. 16 с.
12. Бенсман В.М. Облегченные способы статистического анализа в клинической медицине / В.М. Бенсман. Краснодар: Изд-во КГМА, 2002. — 35 с.
13. Бергман Р.Е. Руководство по педиатрии (болезни плода и новорожденного, врожденные нарушения обмена веществ) / Р.Е. Бергман, В.К. Боган. -М., 1987. 162 с.
14. Беталейкин (RHIL-1) как протектор гемопоэза при интенсивной полихимиотерапии / Н.Б. Михайлова и др. Цитокины и воспаление. 2003. - № 2 (Электронный ресурс).
15. Бильченко С.В. Применение озонотерапии при лечении больных с механической желтухой: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.16 / Бильченко С.В. Воронеж, 2003. - 17 с.
16. Биологические основы и перспективы терапии стволовыми клетками / Владимирская Е.Б. и др. // М.: Медпрактика-М, 2005. 395 с.
17. Бозо И .Я. Применение гемопоэтических клеток пуповинной крови для лечения сахарного диабета I типа / И.Я. Бозо // Клеточная трансплантология. — 2008. Т. Ill, № 1 (Электронный ресурс).
18. Борисова Н.А. Чрезкожная чрезпеченочная катетеризация воротной вены и ее возможности в диагностике и лечении цирроза печени: автореф. дис. канд. мед. наук: 14.00.27 / Борисова НА. JL, 1985. - 19 с.
19. Бояринов Г.А. Озонированное искусственное кровообращение (экспериментальное обоснование и результаты клинического применения) / Г.А. Бояринов, В.В. Соколов. Нижний Новгород, 1999. - 318 с.
20. Бражникова Н.А. Внутрипортальные инфузии при лечении гнойно-септических осложнений в хирургии желчных путей / Н.А. Бражникова, В.Ф. Цхай // Материалы 3-ей конференции хирургов-гепатологов, 14-16 июня 1995. С. 362 - 363.
21. Ваккасов М.Х. и др. Лечение абсцесса печени пункционным дренированием и эндопортальной инфузией медикаментов / М.Х. Ваккасов, А.А.Каххаров, Х.Д. Исламова // Анналы хирургической гепатологии. 2003. -Т. 8, №2.-С. 271-272.
22. Васина Н.В. Клинико-экспериментальные аспекты использования ксеногенных гепатоцитов в лечении больных с острой печеночной недостаточностью: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.16 / Васина Н.В. -Москва, 1996.-22 с.
23. Вахрунин А.А. Экспериментально-клиническое обоснование профилактики и лечения печеночной недостаточности при остром панкреатите: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00 16 / Вахрунин А.А. — Красноярск, 1998. 25 с.
24. Винд Г.Д. Прикладная лапароскопическая анатомия: брюшная полость и малый таз / Г.Д. Винд. — М.: Медицинская литература, 1999. 384 с.
25. Винник Ю.С. и др. Острый панкреатит: вопросы патогенеза, клиники, лечения / Ю.С. Винник, М.И. Гульман, В.О. Попов. — Красноярск-Зеленогорск, 1997.— 13 с.
26. Владимирская Е.Б. Костномозговое кроветворение. Оценка миелограммы / Е.Б. Владимирская // Физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 1991. - № 12. - С. 29 - 31.
27. Владимирская Е.Б. Роль ростовых факторов в регуляции кроветворения / Е.Б. Владимирская, А.Г. Румянцев // Гематология и трансфузиология. 2000. - № 6. - С. 4 - 8.
28. Влияние дерината на эндотоксикоз при остром перитоните / А.П. Власов и др. // Использование препарата деринат в различных областях медицины: Матер. II Всерос. науч.-практ. конф. М., 3-6 апреля 2002 г. - С. 26-28.
29. Влияние длительного воздействия гранулоцитарного колониестимулирующего фактора на кроветворение / И. Н. Нифонтова и др. // Гематология и трансфузиология. 2008. - № 5. - С. 63 - 67.
30. Влияние миелопептидов на пролиферацию лимфоцитови продукцию IL-lbeta и TNF alpha мононуклеарами, моноцитами и нейтрофилами / С.В. Гейн и др. // Цитокины и воспаление. 2008. — № 1. (Электронный ресурс).
31. Влияние озонотерапии на состояние системьг иммунитета спортсменов высокой квалификации / Е.И. Кухоренко и др. // Иммунология, аллергология, инфектология. 2002. - №3. - С. 38-45.
32. Влияние озонированного физиологического раствора на ультраструктуру неокортекса и печени / Е.И. Яковлева и др. // Нижегородский медицинский журнал. Приложение: Озонотерапия. 2003.е. 16.
33. Влияние хирургического стресса на уровень циркулирующих CD34+—гемопоэтических стволовых клеток: анализ возможных факторов мобилизации / М.А. Алиев и др. // Цитокины и воспаление. — 2008. — № 2. (Электронный ресурс).
34. Воробьев А.И. Руководство по гематологии. 2003. Т. I, II. (Электронный ресурс).
35. Газин И.К. Кислотно-основное состояние и кислородный бюджет крови при лечении комбинированной'травмы с использованием волекама и озонотерапии: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.27; 14.00.16 // Газин Игорь Камильевич. Саранск, 1998. - 20 с.
36. Гармаш А.С. Применение препарата дерината в поликлинической практике // Использование препарата дерината в различных областях медицины: Матер. I Всерос. научн.-практ. конф. М., 2000. - С. 31 - 32.
37. Голубев А.Г. Пункционная декомпрессия желчного пузыря при остром обтурационном холецистите / А.Г. Голубев, А.В. Вилков, В.И.
38. Давыдкин // Анналы хирургической гепатологии. — 2003. — Т. 8; № 2. — С. 281 -282.
39. Гольдберг Е.Д. и др. Итоги изучения механизмов регуляции кроветворения в норме и при патологии / Е.Д. Гольдберг, A.M. Дыгай, И.А. Хлусов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1997. — №3. -С. 56-59.
40. Гречканев Г.О. Научное обоснование использования; медицинского озона" в комплексном лечении некоторых1 акушерских: осложнений и гинекологических заболеваний: автореф. дис. . док. мед. наук: 14:00-/ Гречканев Г.О; М;, 2003^ - 25:с.
41. Гречко В.Н. Применение: комплексной: озоно- и фототерапии; в хирургии / В.Н. Гречко // Нижегородский медицинский журнал. Приложение: Озонотерапия. 2003. - С. 228 - 229.
42. Григорян. А.С. Хемокины, экспрессируемые мультипотентными мезенхимальными стромальными клетками; в терапии острой печеночной-недостаточности / А.С. Григорян. // Клеточная трансплантология.- 2007. Т. II; № 4: - С. 13-14.
43. Григорян А.С. Изменения в юхассической модели; гемопоэза -обнаружен миелоидный потенциал; ранних предшественниц Т-клеток / А.С. Григорян // Клеточная»трансплантология. 2008; - Т. III, № 3. (Электронный ресурс):
44. Гульман М.И. Острый панкреатит: современные подходы к диагностике и лечению / М.И. Гульман, Ю.С. Винник, Д:В. Черданцев, А.А.
45. Вахрунин, B.JI. Фаттахов, С.В. Миллер, С.В. Якимов, О.В. Первова // Первая краевая. 2000. - №7. - С. 15-17.
46. Детоксикационная терапия и метаболическая коррекция у больных с механической желтухой / Э.Г. Топузов и др. // Анналы хирургической гепатологии. 2003. - Т. 8, № 2. — С. 355 - 356.
47. Динамическая теория регуляции кроветворения / Е.Д. Гольдберг и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999. - Т. 129, №5.-С. 484-494.
48. Дранник Г.Н. Клиническая иммунология и аллергология / Г.Н. Дранник. ООО «Медицинское информационное агентство», 2003. - 604 с.
49. Дранник Г.Н. Клиническая иммунология и аллергология / Г.Н. Дранник. 3-е изд., доп. - К.: ООО «Полиграф плюс», 2006. — 482 с.
50. Емаку B.C. Цитокины и их биологические эффекты при некоторых болезнях печени / B.C. Емаку // Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. 2004. — №5. — С. 11 — 16.
51. Ефименко Н.А. и др. Инфекции в хирургии. Фармакотерапия и профилактика: монография / Н.А. Ефименко, И.А. Гучев, С.В. Сидоренко. — Смоленск. 2004. - 296 с.
52. Занькина Н.А. Патофизиологическое обоснование применения озона и мексидола при диабетической ретинопатии: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.16 / Занькина НА. Саранск, 2003. -17 с.
53. Оценка иммунного статуса и иммунопрофилактика послеоперационных осложнений у больных с калькулезным холециститом / П.С. Зубеев и др. // Актуальные проблемы деятельности диагностических центров в современных условиях. — Тула. 2001. С. 93 - 96.
54. Зулин Я.В. Печеночный кровоток при хирургической коррекции синдрома желчной гипертензии: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.27/ Зулин Я В. Новосибирск, 2000. - 19 с.
55. Иванов О.П. Эффективность гипербарической оксигенацииг в комплексном лечении коньюгационных желтух новорожденных: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.16 / Иванов О.П. -Москва, 1999.-23 с.
56. Иммунный статус при хронических заболеваниях печени / JI.H. Ильченко и др. // Аллергология и иммунология. — 2004. Т. 5, № 1 - С. 113.
57. Иммунодефицитные состояния / под ред. B.C. Смирнова, И.С. Фрейдлин. СПб.: Изд-во «Фолиант», 2000. — 568 с.
58. Инякин О.Н. Обоснование оптимальной скорости внутрипортальных инфузий по данным функционально-морфологического состояния печени: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00. 27 / Инякин Олег Николаевич. — Саранск, 2001. 18 с.
59. Использование дерината и иммунофана для коррекции врожденного иммунитета в условиях острого экспериментального.-панкреатита / Д.В Пехов и др. // Успехи современного естествознания. — 2003.-№ 12.-С. 62.
60. Казаченко И.В. Проблема диагностики иммунной недостаточности // И.В. Казаченко, С.Ю. Старикова // Медицинская иммунология. 2003. - Т.5, № 3 - 4. - С. 278.
61. Каплина Э.Н., Вайнберг Ю.П. Деринат — природный иммуномодулятор для детей и взрослых / Э.Н. Каплина, Ю.П. Вайнберг. — изд. 21е, испр. и доп. М.: Научная книга, 2005. - 216 с.
62. Кардиопротекторный эффект дерината при, аритмиях у детей / JI.A. Балыкова и др. // Использование препарата деринат в различных областях медицины: Матер. II Всерос. научн.-практ. конф. 3-6 апреля 2002 г. М., 2000.-С. 17-19.
63. Карпищенко А.И. Медицинская лабораторная диагностика. Программы и алгоритмы / Справочник под ред. Карпищенко' А.И. СПб.: Интермедика, 2001. — 120 с.
64. Клинико-экспериментальное обоснование регионарного и системного введения препаратов группы тиопоэтинов при циррозе печени / А.Е. Борисов и др. // Вестник хирургии им. Н.И. Грекова. 2001. - Т. 160, №4.-С. 32-38.
65. Клинико-эпидемиологическая характеристика инфицированности' вирусами гепатитов В и С больных с заболеваниями системы крови при поступлении в стационар / Т.Ц. Гармаева и др. // Гематология^ и трансфузиология. 2009. - № 1. - С. 3 - 10.
66. Козлов В.К. Дисфункция иммунной системы в патогенезе травматической болезни / В.К. Козлов // Украинский журнал экстремальной медицины. 2005. - Т. 6, № 3. - С. 5 - 16.
67. Козлов В.К. и др. Иммунная недостаточность в патогенезе политравмы / В.К. Козлов, В.Н. Цыган, А.Ф. Ким // Вестник Росс, воен.-мед. акад. 2005. - №2(14). - С. 20 - 29.
68. Козлов В.К. Дисфункция иммунной системы в патогенезе сепсиса / В.К. Козлов, Л:И. Винницкий // Общая реаниматология. 2005. - Т. 1, № 4. -С. 65-76.
69. Колб В.Г. Справочник по клинической химии. — 2-е изд., перераб. и доп. / В.Г. Колб, B.C. Камышников. Мш: Беларусь, 1982. - 366 с.
70. Колесникова А.И. Мезенхимальные (стромальные) стволовые клетки костного мозга человека в медицинской практике: обоснование, результаты и перспективы / А.И. Колесникова // Гематология и трансфузиология. 2008. - № 5. - С. 36 - 40.
71. Колесникова Н.В. и др. Функционирование системы нейтрофильных гранулоцитов в динамике после экспериментальной острой кровопотери / Н.В. Колесникова; И.В. Нестерова, Г.А. Чудилова // Гематология^ трансфузиология. 1999. — № 2. - С. 20 - 23. ►
72. Корригирующее действие озона на метаболизм и структуру печени и почек* при искусственном, кровообращении / Д.М. Зеленов и^ др. // Озон в биологии и медицине:' Тез. докл. I Всерос. научн.-практ. конф. -Нижний Новгород, 1992.-С. 15-16.
73. Костина О.В. Состояние' про' и антиоксидантной систем организма при ожогах в условиях воздействия озоном и биосканом С: автореф. дис. . канд. биол. наук: 14.00.16 / Костина О В. - Н.Новгород, 2001. - с.
74. Костюченко А.Л. Иммунный ответ организма на хирургическую► инфекцию // Хирургические инфекции: руководство / под ред. И.А. Ерюхина, Б.Р. Гельфанда; С.А. Шляпникова. СПб.: Питер, 2003. - С. 114 - 130.
75. Крюков А.И. Пред- и- интраоперационная подготовка больных с гнойно-воспалительными заболеваниями уха, глотки и околоносовых пазухполости / А.И. Крюков, О.В. Елисеев // Вестник оториноларингологии. — 2004. — № 1. (Электронный ресурс).
76. Куликов А.Г. и др. Озон и биогенные гепатопротекторы в лечении пациентов с неалкогольным стеатогепатитом / А.Г. Куликов, В.А. Максимов, И.Н. Воробьёва // Нижегородский медицинский журнал. Приложение: Озонотерапия. 2003. - С. 85.
77. Лапароскопическая и традиционная холецистэктомия: сравнение непосредственных результатов / Н.М. Кузин и др. // Хирургия. 2000. -№2. - С. 25-27.
78. Лапшин А.Е. Коррекция морфофункциональных нарушений • печени при внепеченочном холестазе озонированным физиологическим раствором: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.27; 14.00:15 / Лапшин Александр Евгеньевич. Саранск, 2004. - 16 с.
79. Латышева Т.В. Принципы заместительной терапии внутривенными иммуноглобулинами / Т.В. Латышева / Цитокины и воспаление. 2005. - Т. 4, № 2 - 3. - С. 58 - 62.
80. Лебедев В.Ф. Иммунопатогенез тяжелых ранении и травм; возможности иммунокоррекции / В.Ф. Лебедев, В.К. Козлов, С.В. Гаврилин // Вестник хирургии. 2002. - Т. 161, №2 - 4. - С. 85 - 90.
81. Лебедев К.А. Иммунная недостаточность. Выявление и лечение / К.А. Лебедев, И.Д. Понякина. М.: Мед. книга, 2003. - 443 с.
82. Лебедев К.А., Понякина И.Д. Иммунофизиология эпителиальных клеток и образраспознающие рецепторы / К.А. Лебедев, И.Д. Понякина // Физиология человека. 2006. Т. 32, № 2. С. 97.
83. Лебедев К.А. Новый этап развития иммунологии / К.А. Лебедев, И.Д. Понякина // Природа. 2006. - № 4. - С. 3.
84. Лебедев К.А., Понякина И.Д. Роль белков теплового шока в формировании конфликта организма человека с его микрофлорой иммунологии / К.А. Лебедев, И.Д. Понякина // Физиология человека. — 2007. -Т. 33,№3. —С. 100.
85. Лебедева Е.В. Влияние кровопотери на мегакариоцитарно-тром-боцитарную ось гемопоэза / Е.В. Лебедева, Б.Г. Юшков // Актуальные вопросы гематологии и трансфузиологии: Матер, науч.-практ. конф. СПб. — 2000.-С. 200-201.
86. Лесков В.П. Клиническая иммунология для врачей / В.П. Лесков. М.: Медицина, 2005. - 144 с.
87. Малова И.Ю. Влияние гепастерила на течение реперфузионного синдрома (экспериментальное исследование): автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.16 / Малова ИЮ. Старая Купавна, 2005. - 16 с.
88. Предоперационное дренирование в лечении больных с опухолевой обтурацией желчных путей / В.И. Малярчук и др. // Анналы хирургической гепатологии. 2003. - Т. 8, № 2. - С. 170.
89. Мамонтова Е.П. Влияние эритропоэтина на иммунную систему // Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины: Матер. II Рос. конф. молодых ученых. М. - 2001. - С. 201.
90. Мамхегова Т.Р. Использование регулирующего воздействия клеток органов портальной системы для восстановления функции гепатоцитов поврежденной печени: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.16 / Мамхегова Т.Р. Москва, 1998. - 32 с.
91. Манакова Т.Е. Культивирование кроветворных клеток: использование в экспериментальных исследованиях и для диагностики гематологических заболеваний / Т.Е. Манакова // Гематология и трансфузиология. 2007. - № 2. - С. 46 - 50.
92. Мачулин Е.Г. Механическая желтуха неопухолевого генеза / Е.Г. Мачулин. Мн.: Харвест, 2000. - 160 с.
93. Мельников Д.И. Применение дерината в онкологической практике // Противоопухолевые свойства комплекса адриамицин-деринат :Тез. докл. Всерос. научн.-практ. конф. Ростов, 1995. - С. 234.
94. Меньшикова В.В. Лабораторные методы исследования в клинике / под ред. проф. В.В. Меньшикова. — М.: Медицина, 1987. 100 с. ;
95. Мягкова И.И. Показатели гемопоэза и иммунного статуса у больных острыми лейкозами и их взаимосвязь с эндогенной интоксикацией: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.16 / Мягкова Инна Ильинична. -Саранск, 2000. 17с.
96. Надинская М.Ю. Заболевания печени, протекающие с синдромом внутрипеченочного холестаза / М.Ю. Надинская // Болезни печени. 2002.1. Т.4,№6.-С. 34-43.
97. Неясова И.Г. Некоторые патофизиологические механизмы действия озона у больных герпетическим кератитом: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.16 / Неясова ИГ. Саранск, 2005. - 16 с.
98. Никольский В.О. Влияние озона на метаболизм и структуру печени, почек, селезенки и лимфатических при искусственном при искусственном кровообращении: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.16 / Никольский В.О. - Саранск, 2003. - 18 с.
99. Новиков Е.И. Обоснование применения озона и димесфосфона в комплексном лечении диабетической ангиопатии нижних конечностей: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.27 / Новиков Евгений Иванович. -Саранск, 2000.- 16 с.
100. Новомлинский В.В. Значение селективной озонотерапии при гипоксических повреждениях печени / В .В. Новомлинский // Озон в биологии и медицине: Тезисы докл. 1Г Всерос. научн.-практ. конф. с междунар. участием. — Нижний Новгород, 1995. — С. 13.
101. Новые технологии внутрипортальных инфузий в хирургии и интенсивной терапии / А.Н. Беляев и др. // Общая реаниматология. 2006. — Т. II, №4/1.-С. 55 - 57.
102. Нозокомиальная инфекция в интенсивной^ терапии' / Б.Р. Гельфанд и др. // Анестезиология и реаниматология. 1997. - №3. - С. 4 — 8.
103. Обоснование внутрипортальных инфузий при- лечении-деструктивных панкреатитов / А.Н.' Беляев и др. // Материалы.9-ого Всерос. съезда хирургов, 20-22 сентября 2000 г. Волгоград, 2000: - С. 17.
104. Об' эфферентной терапии ферментативной фазы- острого деструктивного панкреатита в комплексе с озонированными растворами / А.Н. Волков и др. // Анналы хирургической гепатологии. 2008. - Т. 13, № З.-С. 220.
105. Окрут И.Е. О механизмах гипокоагуляционного действия озонированного физиологического! раствора / №Е. Окрут, К.Н. Конторщикова // Нижегородский медицинский журнал. Приложение: Озонотерапия. 2003. - С. 69 - 70.
106. Перетяган- С.П. О многофакторном механизме лечебного^ действия' озона / С.П* Перетяган // Нижегородский медицинский журнал. Приложение: Озонотерапия. 2003. - С. 6-7.
107. Петренко Ю .Л. Иммунорегуляторные-свойства клеток фетальной печени человека / Ю.Л. Петренко // Клеточная трансплантология. 2007. - Т. И, № 3. - С. 57-61.
108. Петров, А.Б. Влияние дерината на гематологические, биохимические и иммунологические показатели крови при комплексной терапии рака молочной железы: автореф. дис. . канд мед. наук: 14.00. 16. Петров Александр Борисович. Саранск, 2004. - 18 с.
109. Петров Р.В. Иммунология / Р.В. Петров. М.: Медицина, 1983.368 с.
110. Петров Р.В. и др. Контроль и регуляция иммунного ответа / Р.В Петров, Р.М1. Хаитов, В.М. Манько. М.: Медицина, 1981. - 311 с.
111. Петухов В:А. и др. Желчекаменная болезнь: современный взгляд на проблему / В.А. Петухов, М.Р. Кузнецов, Б.В. Болдин // Анналы хирургии. 1998. -№ 1.-С. 12-13.
112. Пиксин И.Н. Аутотрансфузии крови при хирургических вмешательствах. Саранск, 1991. - 188 с.
113. Показатели гемограммы у взрослого работающего населения / С.А. Волкова и др. // Гематология и трансфузиология. 2007. — № 1. — С. 21 -28.
114. Поспелов A.JI. Слияние клеток костного мозга с эпителием кишечника / A.JI. Поспелов // Клеточная трансплантология. 2007. — Т. I, № З.-С. 13.
115. Провоспалительные гепатотропные эффекты хронического стресса и повышение чувствительности к цитокин-зависимой супрессии некоторых изоформ цитохрома Р450 / В.Э. Цейликман и др. // Цитокины и воспаление. 2008. — № 1. (Электронный ресурс).
116. Применение озонотерапии в, комплексном лечении неотложных хирургических заболеваний1 / М.Ф. Заривчацкий и др. // Эфферентная, иммунокорригирующая и интенсивная терапия в клинической практике. — Ижевск, 2004. С. 13 - 15.
117. Пушкарёв В.П: Иммунокоррекция* в комплексном» лечении больных циррозом печени и хроническим гепатитом / В.П.Пушкарёв, С.Н. Магомедов // Эфферентная, иммунокорригирующая и интенсивная терапия в клинической практике. — Ижевск, 2004. С. 33 - 34.
118. Разваляева О.В. Влияние озонотерапии на перекисное окисление липидов? у больных хроническими диффузными заболеваниями печени: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.16 / Разваляева О.В.-Волгоград, 1997. -24 с.
119. Разумовский С.Д. Динамическое моделирование физико-химических процессов в базовых манипуляциях озонотерапии / С.Д. Разумовский, В.Я. Зайцев // Нижегородский медицинский журнал. Приложение: Озонотерапия. 2003. - С. 8.
120. Роль гемопоэтических ростовых факторов- в регенерации кроветворения при миелодепрессии, вызванной введением этопозида / Е.В. Удут и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2001. -Т.,131,№ 5.-С. 512-516.
121. Ронколейкин в- иммунопрофилактике постхирургических инфекий: Пособие для врачей / А-.А. Останин; Е.Р. Черных. СПб., 2005. - 24 с.
122. Серова Т.И. Иммуноглобулин Е при хроническом активном гепатите / Т.И. Серова, В.Ф. Савельева // Хронический гепатит: Сб; научн. трудов: М.: Медицина, 1988. - С. 25 - 29.
123. Серова Т.И. Иммунодиагностика хронических заболеваний печени / Т.И. Серова и др. // Медицинская-иммунология. 2002. - Т.4, № 2 — С. 162.
124. Симбирцев. А.С. Толл-белки: специфические рецепторы, неспецифического иммунитета / А.С. Симбирцев // Иммунология. —2005. Т. 26, №6.-С. 368.
125. Синенченко Г.И. и др. Перспективы применения озонированных растворов в комплексном лечении больных с механической желтухой (обзор) / Г.И. Синенченко, М.Ю. Кабанов, С.В. Тихончук // Вестник хирургии. -2004.-№3.-С. 91 -94.
126. Скрининг-тест для оценки патогенных свойств циркулирующих иммунных комплексов / П.В. Стручков и др. // Лабораторное дело. 1985. -№7.-С. 410 -412.
127. Слесаренко С.С. Принципы хирургической тактики и лечения больных механической желтухой неопухолевого генеза / С.С. Слесаренко,
128. B.Э. Федоров // Анналы хирургической гепатологии. — 2003. — Т. 8, № 2. С. 115-116.
129. Степанова Э.Ф. Перспективы использования дерината в медицинской и фармацевтической практике / Э.Ф. Степанова, В.В Акопова // Современные наукоемкие технологии. — 2008. — № 8. — С. 108.
130. Суданов К.В. Иммунные механизмы системной деятельности организма : факты и гипотезы / К.В. Суданов // Иммунология. — 2003. №6. —1. C. 372 379.
131. Талакин Ю.Н. и др. Использование метода перфузии печени в токсикологическом исследовании / Ю.Н. Талакин, Л.А. Иванова, А.А. Калашников // Гигиена и санитария. 1990. - № 6. - С. 60 - 62.
132. Теория регуляции кроветворения и создание на ее основе новых препаратов для терапии патологии системы крови / Е.Д. Гольдберг и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2008. Приложение 2. (Электронный ресурс).
133. Уфимцева Е.А. Патофизиологическое обоснование применения озонотерапии при эндемическом зобе с пониженной функцией щитовидной железы на фоне ожирения: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.16 / Уфимцева Е.А. Саранск, 2005. - 18 с.
134. Хаитов P.M. Иммунология / P.M. Хаитов. М.: ГЕОТАР-Медицина, 2006. - 311 с.
135. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Современные представления о защите организма от инфекции / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. — 2000. -№1.-С. 61 -64.
136. Хирургические инфекции: руководство/ под ред. И.А. Ерюхина, Б.Р. Гельфанда, С.А. Шляпникова. СПб.: Питер, 2003. - С. 864.
137. Хирургия печени и желчевыводящих путей / А.А. Шалимов и др.. Кшв: «Здоров'я». - 1993. - 506 с.
138. Холестаз и пути его коррекции в педиатрической практике: применение урсофалька / Ю.Г. Мухина и др. // Фарматека. 2005. - № 10. — С. 22 - 39.
139. Царегородцева Т.М. Прогностическое значение цитокинов при хронических заболеваниях органов пищеварения / Т.М. Царегородцева и др. // Медицинская иммунология. 2004. - Т. 4, № 2. - С. 167.
140. Цухишвили Н.А. Использование пупочной вены в лечении некоторых заболеваний печени и желчных путей: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00. / Цухишвили Н.А. Москва, 1972. - с.
141. Иммунофизиология / В.А Черешнев. и др.. Екатеринбург: УрО РАН, 2002.-258 с.
142. Чертков И.JI. Принципы организации стволового отдела кроветворной системы / И.Л. Чертков, Н.И. Дризе // Гематология и трансфузиология. 2000. - № 4. - С. 38 - 42.
143. Шаймарданов Р.Ш. и др. Бактериология желчи при механической желтухе / Р.Ш: Шаймарданов, В.А. Филлипов, С.З. Шарафиев // Анналы хирургической гепатологии. 2008. - Т. 13, № 3. - G. 147.
144. Шерлок Ш. Заболевания, печени и желчных путей / Ш. Шерлок, Дж. Дули. М.: ГЭОТАР-Медицина, 1999. - 864 с.
145. Шерлок Ш., Дули Дж. Болезни, печени и желчных путей: Пер. с англ. М.: ГЭОТАР-Медицина, 2002. -1028 с.
146. Шкуратов А.Г. Современные принципы внутрипортального введения лекарственных растворов в хирургии диффузных и очаговых заболеваний^печени: автореф. дис. . канд. мед. наук: 14.00.27 / Шкуратов А.Г. Владивосток, 1997. - 22 с.
147. Экспериментальное подтверждение клинического эффекта озонотерапии / С.Н. Стяжкина и др. // Эфферентная, иммунокорригирующая и интенсивная терапия в клинической практике. — Ижевск, 2004. С. 40-41.
148. Эндоваскулярная эмболизация сосудов гепатолиенальной зоны в лечении синдрома портальной гипертензии / Ш.И. Каримов и др. // Ангиология и сосудистая хирургия. 2003. - Т. IX, № 3. - С.40.
149. Эффективность метода внутрипортального введения озонированного физиологического раствора при механической' желтухе в эксперименте / А.Н. Беляев и др. // Нижегородский медицинский журнал. Приложение «Озонотерапия». 2003. - С. 30.
150. Andersson R. Gut barrier dysfunction^ in experimental acute pancreatiti Электронный ресурс. / R. Andersson, X.D. Wang // Ann. Acad. Med. Singapore. 1999. - Vol. 28(1). - P. 141 - 146. - Режим, доступа: http//www.pubmed.gov.
151. Antigen composition of circulating immune complexes in the blood of patients with hemorrhagic strokes / Bakunts G. et al. // Westnik IAELPS. 2001. -Vol; 6, 42(1).-P. 97-99.
152. Antimicrobial potential of ozone; in an ultrasonic cleaning system against Staphylococcus aureus Электронный ресурс. / С. Estrela [et al.] // Braz Dent J. -• 2006. Vol. 17(2). - P. 134 - 138. - Режим доступа: http//www.pubmed.gov
153. Bates D.V. Ozone 42 years later Электронный ресурс. / D.V. Bates // Can Respir J. - 2006. - Vol. 13(5). - P. 261 - 265. - Режим доступа: http//www. pubmed.gov, свободный.
154. Beger H.G. Natural course of acute pancreatitis / H.G. Beger, B. Rau // Ann. Ital. Chir. 1995. - Vol. 66. - P. 209 - 215.
155. Biological, histological, and. clinical impact of preoperative IL-2 administration'in radically operable gastric cancer patients Surg / Romano F. et al. // Oncol. 2004. - Vol. 88. - P. 240- 247.
156. Brink M.A et al. Enterohepatic cycling of bilirubin: a- putative mechanism for pigment gallstone formationiin ileal Crohn's disease / M.A. Brink, J'.F. Slors, У С. Keulemans // Gastroenterology. 1999. - Vol. 116: - P. 1420 -1427.
157. Capoccia BJ-. et al. G-CSF and AMD3100 mobilize monocytes into the blood,that stimulate angiogenesis in vivo through a paracrine mechanism / BJ. Capoccia, RM. Shepherd; DC. Link // Blood. 2006: - Vol. 108(7). - P. 2438 -2445.
158. Cengic M. Importance of determination of circulating immune complexes in systemic lupus erythematosus./ M. Cengic, S. Rasic // Med Arch. — 2002. Vol'. 56 (5-6). - P: 267 - 270:
159. Chermesh I., Shamir R. Immunonutrition can we see t e Ig t Harefuah. - 2004. - Vol. 143, №3. - P. 203 - 204.
160. Docke W.D. et al. Immunoparalysis in sepsis from phenomenon to treatment strategies IITransplantationsmedizin. - 1997. - Vol. 9. - P 55-56.
161. Enter 1 ntritiona.r uppl, mentation prevents mesenteric lymph node T-celL suppression^ IIP burn IllJUry Crit / M:A. Choudhry et al. // Care Med. -2003. Vol. 31, №6: - P. 1764 - 1770.
162. Faria A.M.G. Oral tolerance / A.M.C. Faria, H!L. Weiner // Immunol-Reviews. -2005. Vol. 206. -№ 1. - P. 232.
163. Gudjonsson Т., Magnusson MK. Stem cell-biology and. the cellular pathways of carcinogenesis / T. Gudjonsson, MK. Magnusson // APMIS. 2005. -Vol. 113(11-12).-P.4 922-929:
164. Hericium erinaceum induces maturation of dendritic cells derived from human peripheral blood monocytes Электронный ресурс. / S.K. Kim [etal. // Phytother Res. — 2009. Vol. 13. - Режим доступа: http//www.pubmed.com, свободный.
165. Human intestinal epithelial cells are broadly unresponsive to Toll-like receptor 2-dependent bacterial ligands: implications for host-microbial interactions in the gut / G. Melmed et al. // J. Immunol. 2003. - Vol. - 170, № 3. - P. 1406.
166. Immuneprophylaxis of purulent and septic complications with Derinat at surgical treatment of calculous cholecystitis / P.S. Zubeev et al:. // Khirurgiia. -(Mosk). 2007. - Vol. 5. - P.' 56 -59.
167. Improved" liver function in* patients with liver cirrhosis after autologous bone marrow cell infusion therapy / S. Terai et al. // Stem Cells. — 2006. Vol. 24(10). - P. 2292 - 2298.
168. Induction of hepatocyte growth by intraportal infusion of HGF into beagle dogs Электронный ресурс. / Y. Kobayashi [et al.] // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1996. - Mar 7. Vol. 220(1). - P. 7 - 12. - Режим доступа: http//www.pubmed:gov, свободный.
169. Inhibition of metastatic tumor growth in nude mice by portal vein infusions of matrix-targeted retroviral vectors bearing a cytocidal cyclin G1 construct Электронный ресурс. / E.M. Gordon [et al.] // Cancer Res. 2000.
170. Jul 1. Vol. 60(13). - P. 3343 - 3347. - Режим доступа: http//www.pubmed. gov, свободный.
171. Intestinal obstruction promotes gut translocation of bacteria Электронный ресурс. / P.M. Sagar [et al.] // Dis. Colon. Rectum. 1995. - Vol. 6. - P. 640 — 644. - Режим доступа: http//www.pubmed.gov, свободный.
172. Intraportal hepatocyte transplantation in the pig: hemodynamic and histopathological study Электронный ресурс. / M. Muraca [et al.] // Transplantation. 2002. - Mar. Vol. 27;73(6); - P. 890 - 896. - Режим доступа: http//www.pubmed.com.
173. Intravenous immunoglobulin for treating sepsis and septic shock (Cochrane Review) / M.M. Alejandria et al. // In: The Cochrane Libra, ary, Issue 4, 2002. Oxford: Update Software. - Vol. 28, №2. - P. 108 - 121.
174. Interleukin-10 and nerve growth factor have reciprocal upregulatory effects on intestinal epithelial cells / D. Ma et al.// Am. J. Physiol. 2003. - Vol. 284.-P. 1323.
175. Isolation of amniotic stem cell lines with potential for therapy / De CoppiP. etal.//NatBiotechnol.-2007.-Vol. 25(1).-P. 100- 106.
176. Jeong Ju Ah et al. Rapid neural differentiation of human cord blood-derived mesenchymal stem cells // Neuroreport. 2004. - Vol. 15 (11)/ P. 1731 -1734
177. Managemet and outcome of bleeding pseudoaneurysm associated with chronic pancreatitis / Hsu J.T. et al. // BMC Gastroenterology. 2006. — Vol. 6. — P. 3.
178. Matzinger P. An immunologist's view on'specific immunotherapy / P. Matzinger // Drugs Today (Bare). 2008. - Vol. 44.
179. Nagasue N., Inokuchi K. Ensymatic and Hemodynamik Changes After Short Hepatic Outflow // Surg. Gynec. Obstet. 1977. - Vol. 144, № 2. - P. 179-181.
180. Newman MB, et al. Transplantation of human umbilical cord blood cells in the repair of CNS diseases // Expert Opin Biol Ther. 2004. - Vol. 4,- P. 121-130:
181. Nosocomial infections in combined lnedical-surgical Intensive Care Units in the United States / Richards M. et al. // Infect. Control Hosp. Epidemiol. 2000. - Vol. 21. - P. 510 - 515.
182. Orkin S. Chipping away at the embryonic stem cell network / S. Orkin // Cell. 2005. - Vol. 122. - P. 828 - 830.
183. Pesce M, et al. Myoendothelial differentiation of human umbilical cord blood-derived stem cells in ischemic limb tissues // Circ Res. 2003. - Vol. 93 (5). — P. 51—62.
184. Portal hemodynamic changes after hepatocyte transplantation in acute hepatic failure Электронный ресурс. / С.И. Yu [et al.] // J Biomed Sci. — 2004. — Vol. 11(6). P. 756 - 763. Режим доступа: http//www. pubmed.com, свободный.
185. Superantigens powerful modifiers of the Immune system / G. Fraser et al. // Mob Med: Today. - 2000: - Vol; 6, №2. - P. 125- 132. .
186. Tissue levels of chemotherapeutic agents for;hepatic metastasis during hepatic arterial and portal injection Электронный ресурс. / A. Kaneko [et al.] //
187. Vivo. 1999. - Vol. 13(2). - P. 195 - 198. - Режим доступа: http//www.pubmed.gov, свободный.
188. Transplanted hematopoietic stem cells demonstrate impaired sarcoglycan expression after engraftment into cardiac and skeletal muscle / KA. Lapidos et al. // J Clin Invest. 2004. - Vol. 114. - P. 1577 - 1585
189. Vendrame M, et al. Infusion of human umbilical cord blood cells in a rat model of stroke dose-dependently rescues behavioral deficits and reduces infarct volume // Stroke. 2004. - Vol. 35. - P. 2390.
190. Werner G.H. Immunostimulating agents: what next? A review of their present and potential medical applications / G.H. Werner, P. Jolles // Eur. J. Immunol. 1996.-Vol. 242.-P. 1-19.
191. Yeh F.L. et al. Changes in circulating levels of an anti-inflammatory cytokine interleukinlO in burned patients / F.L. Yeh, W.L. Lin, H.D. Shen // Burns. 2000. - Vol. 26, №5. - P. 454 - 459.