Автореферат и диссертация по медицине (14.00.15) на тему:Комплексная оценка репаративного процесса при использовании культуры фибробластов для закрытия раневых дефектов кожи после микрокристаллической дермабразии (экспериментальное исследование)
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.15
Автореферат диссертации по медицине на тему Комплексная оценка репаративного процесса при использовании культуры фибробластов для закрытия раневых дефектов кожи после микрокристаллической дермабразии (экспериментальное исследование)
На правах рукописи
00316Э356
Дорожкина Елена Борисовна
КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА РЕПАРАТИВНОГО ПРОЦЕССА ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ КУЛЬТУРЫ ФИБРОБЛАСТОВ ДЛЯ ЗАКРЫТИЯ РАНЕВЫХ
ДЕФЕКТОВ КОЖИ ПОСЛЕ МИКРОКРИСТАЛЛИЧЕСКОЙ ДЕРМАБРАЗИИ
(экспериментальное исследование)
14.00.15 — патологическая анатомия 14.00.11 - кожные и венерические болезни
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
15 мал 2г:з
Саратов-2008
003169356
Работа выполнена в ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
Научные руководители:
доктор медицинских наук, профессор Колсанов Александр Владимирович, доктор медицинских наук, профессор Орлов Евгений Владимирович.
Официальные оппоненты:
доктор медицинских наук, профессор Степанов Сергей Алексеевич, доктор медицинских наук, профессор Курдина Мария Игоревна
Ведущая организация: ФГУ «Институт хирургии им. А В Вишневского Росмедтехнологий»
Защита состоится 2008 г. в часов на заседании
диссертационного совета Д 208 094 01 при ГОУ ВПО «Саратовский ГШ7 Росздрава» по адресу 410012, Саратов, ул Б Казачья, 112
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ Росздрава»
Автореферат разослан
Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор
Маслякова Г.Н.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы
Изучение вопросов воспаленш и репаративной регенерации является одной из фундаментальных задач современной патологии. Несмотря на большое количество исследований, до настоящего времена не существует четкого представления о ряде процессов, протекающих в ходе воспалительно-репаративной реакции (Рабин Б., 2001; Иванов АЛ. с соавт, 2002) Решративные процессы в ране неразрывно связаны с воспалением и формируют с ним единую реакцию на повреждение (Серов В В, Пауков В С, 1995; Пальцев МА., Аничков НМ., 2001). Репаративная регенерация является стереотипным процессом, который имеет свои особенности в различных органах и тканях, но в целом основные механизмы сходны с процессом заживления кожных ран (Trent J.F., Kirsner R.S , 1998; Nwomeh B.C. et al, 1998), детальное знакомство с которым крайне необходимо для оптимизации ведения ран, включающего оценку признаков воспаления, определение стадии раневого процесса, своевременное применение необходимых методов лечения (Назаренко ИГ. с соавт., 2002).
Особую актуальность изучение вопросов регенерации ран кожного покрова приобретает в связи с постоянным ростом количества дефектов кожи и рубцов вследствие ожогов, операций, порезов, трещин, травм, язв, посгакне (Ахгямов СЛ., Бутов Ю.С, 2003, Sahi WJ et al, 1994) Современный клинический опыт мировой дерматологии и хирургии позволяет использовать высокоэффективные, научно-обоснованные подходы к лечению рубцовых деформаций различного генеза. Наряду с традиционными методами пластической, эстетической и реконструктавно-восстановигельной хирургии, в последние годы активно внедряются консервативные методики, основанные на использовании новых медицинских технологий (Адаскевич BIL, 2000; Morelli J.G., 1998; AclandKLM etaUOOO).
Среди множества предлагаемых способов лечения рубцов дермабразия занимает ведущее место из-за значительно меньшего количества рецидивов
данной патологии. При дермабразии вместе с эпидермисом удаляется верхняя часть сосочкового слоя дермы, что влечет за собой большие структурные изменения не только в эпидермисе, но и в дерме
Проблема оптимизации заживления раневых дефектов кожи после дермабразни является актуальной и в настоящее время Применение современных раневых покрытий, обладающих высокими гемостатическими, антимикробными, анестезирующими, сорбционными и неполитическими свойствами, позволяет свести до минимума риск возникновения послеоперационных осложнений (Фришберг И А., 1984, Жигульцова Т.И с соавт, 2000; Fulton J.E, 1996, Harmon D., 2002).
Разработка и внедрение новых высокотехнологичных способов восстановления целостности кожного покрова с использованием клеточных кулыур фибробластов и кератиноцитов позволяют оптимизировать течение репаративных процессов в ране и снизить риск формирования грубых рубцов, что важно для больных как в хирургической практике, так и в дерматологии (Саркисов Д.С с соавт, 1995; Туманов В П., 1999, Алексеев А А. с соавт., 2002) Фибробласты ускоряют механизм регенерации кожи за счет вырабатываемых ими различных факторов роста (Васильев А В с соавт, 2001).
Таким образом, исследования по комплексному изучению вопросов ре1енерации при использовании клеточных культур фибробластов для лечения раневых дефектов кожи после дермабразии являются актуальными и современными.
Цель исследования
Провести комплексную оценку воспалительно-репаративного ¡процесса на модели плоскостных ран кожного покрова при использовании культуры аллофибробластов и 3%-ного раствора перманганата калия после дермабразии в эксперименте. -
Задачи исследования
1 Создать модель поверхностного плоскостного раневого дефекта кожного покрова за счет применения микрокристаллической дермабразш в эксперименте
2 Провести сравнительную морфологическую оценку процессов заживления раневых дефектов кожного покрова при использовании культуры аллофибробластов и 3%-ного раствора перманганата калия после микрокристаллической дермабразии в эксперименте
3 Изучить в сравнении количественные изменения клеток периферической крови, гистамина и оксипролина при использовании культуры аллофибробластов и 3%-ного раствора перманганата калия после микрокристаллической дермабразии в эксперименте
4 Создать математическую модель и алгоритм расчета для разработки компьютерной программы оценки и прогнозирования течения раневого процесса
5 Теоретически обосновать и разработать способ лечения раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии путем применения культуры аллофибробластов.
Научная новизна
Разработана экспериментальная модель поверхностной плоскостной раны кожного покрова после микрокристаллической дермабразии (рац предо. № 556 от 20 04 2007 г ).
Дополнены морфологические особенности заживления раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии при использовании культуры аллофибробластов на носителе в сравнении с 3%-ным раствором перманганата калия.
Впервые изучены количественные изменения клеток периферической крови, гистамина и оксипролина при использовании культуры аллофибробластов в сравнении с применением 3%-ного раствора
перманганата калия после микрокристаллической дермабразии в эксперименте
Разработана компьютерная программа оценки и прогнозирования течения раневого процесса.
Впервые разработан способ лечения раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии за счет использования культуры аллофибробластов на носителе (рад предл № 555 от 20 04 2007 г )
Практическая значимость Способ моделирования раневого дефекта кожного покрова путем применения микрокристаллической дермабразии позволяет в 100% случаев получить поверхностную плоскостную рану кожи в эксперименте
Программа оценки и прогнозирования течения раневого процесса позволяет объективно судить о процессах заживления ран различной этиологии, прогнозировать течение раневого процесса и определять тактику лечения ран в эксперименте и клинической практике
Внедрение способа лечения раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии за счет использования культуры аллофибробластов на носителе позволит оптимизировать течение репаративных процессов в ране и снизить риск формирования рубцов Апробация результатов исследования Материалы диссертации доложены и обсуждены на Ш Всероссийском симпозиуме с международным участием «Актуальные вопросы тканевой и клеточной трансплантологии» (Москва, 2007), на съезде травматологов и ортопедов России (Самара, 2006), на межвузовских научных конференциях молодых ученых «Аспирантские чтения - 2005» (Самара, 2005), «Аспирантские чтения - 2006» (Самара, 2006), на международных конференциях молодых ученых «Актуальные проблемы современной науки» (Самара, 2005; 2006), на заседании кафедр дерматовенерологии, общей хирургии с курсом оперативной хирургии, патологической анатомии,
кафедры гистологии и эмбриологии, Центральной научно-исследовательской лаборатории СамГМУ (Самара, 2005,2006,2007)
Внедрение результатов исследования
Способ моделирования раневого дефекта кожного покрова путем применения микрокристаллической дермабразии используется при выполнении экспериментов на базе Центральной научно-исследовательской лаборатории Самарского государственного медицинского университета Основные положения и выводы работы используются в обучении студентов, клинических ординаторов и интернов, слушателей на кафедрах дерматовенерологии, оперативной хирургии и клинической анатомии с курсом инновационных технологий Самарского государственного медицинского университета. Разработанная программа оценки и прогнозирования течения раневого процесса используется при проведении экспериментов на животных в ЦНИЛ и в клинической практике на базе клиники кожных и венерических болезней Самарского государственного медицинского университета, в центре эстетической медицины «Данне» Публикации по теме диссертации По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ, в т ч 2 статьи в реферируемом журнале ВАК, получены 2 рационализаторских предложения Структура и объем диссертации Диссертация изложена на 150 страницах машинописного текста, включает 1 таблицу, 33 рисунка и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 541 источник, из них 290 отечественных и 251 зарубежных авторов
Основные положения, выносимые на защиту: 1 Раневой процесс при лечении раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии имеет более благоприятное течение
при использовании культуры аллофибробластов в сравнении с традиционным лечением 3%-ным раствором перманганата калия. 2. Для оценки и прогнозирования течения раневого процесса в клинической практике и эксперименте целесообразно применять разработанную компьютерную программу, основанную на кластерном и системном многофакторном анализах данных, полученных с помощью раневой планиметрии, цитологических, бактериологических, морфологических, биохимических, гистохимических и дополнительных методов исследования больного или лабораторного животного
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования Экспериментальный раздел работы выполнен на базе Центральной научно-исследовательской лаборатории СамГМУ (директор - профессор Л Т Волова) в рамках научной тематики ЦНИЛ «Регуляция регенераторных процессов в опорных и покровных тканях организма за счет дифференцированного применения аллогенных тканей, культуры клеток, тканевых компонентов, лекарственных и немедикаментозных факторов воздействия»
В эксперименте на 52 белых лабораторных крысах изучали эффективность культуры аллофибробластов в сравнении с традиционным лечением 3%-ным раствором перманганата калия при лечении поверхностных плоскостных дефектов кожи в межлопаточной области после микрокристаллической дермабразии Для получения модели плоскостной поверхностной раны площадью 400 мм2 применяли прибор для микродермабразии «Crystal» (Италия) Действие прибора основано на выбрасывании на кожу потока инертных микрокристаллов с высокоабразивными свойствами, контролируемого посредством градуируемого вакуума На конце наконечника прибора имеется эллиптическое отверстие, при контакте которого с кожей возникает вакуум, направляющий поток микрокристаллов на кожу.
В эксперименте на лабораторных животных после полного выстригания шерсти, обезжиривания 70%-ным раствором этилового спирта проводили глубокое воздействие со шлифовкой на уровне сосочкового слоя кожи
После получения модели плоскостной поверхностной раны лабораторные животные были разделены на 3 серии В первой (основной) серии (20 крыс) лечение поверхностных ран проводили культурой аллофибробластов на культуральной подложке Фолидерм, во второй (серия сравнения) серии (20 крыс) раневые дефекты лечили 3%-ным раствором перманганата калия (традиционное лечение), в третьей (контрольной) серии (12 крыс) поверхностные раны заживали самостоятельно «под струпом»
В первой серии на раневой дефект помещали культуру клеток (аллофибробластов) на подложке клеточным слоем вниз, после чего к рапе фиксировали рамку и закрывали стерильным перевязочным материалом Культуру аллофибробластов на подложке для лечения раневых дефектов применяли однократно Во второй серии раневой дефект обрабатывали 3%-ным раствором перманганата калия, после чего подшивали рамку и закрывали стерильным перевязочным материалом.
Животных во всех сериях выводили из эксперимента передозировкой эфира на 3,7,14,21-е сутки
Культуру аллофибробластов получали по стандартной технологии в лаборатории культур клеток ЦНИИ СамГМУ Источником клеток в экспериментальном разделе служила кожа лабораторных новорожденных крысят После фрагментации и ферментативной обработки дермы 0,25%-ным трипсином в течение 15 минут получали первичную культуру фибробластов Первичную культуру под микробиологическим и морфологическим контролем пассировали В качестве культуральной среды использовали среду Игла в модификации Дульбенко или среду Игла с двойным набором аминокислот с добавлением антибиотиков, 2%-ного глутамина и 5%-ной
эмбриональной сыворотки Культивирование проводили в условиях абсолютной влажности, при температуре 37°С, 5-6% С02
Для трансплантации использовали культуры 4-17 пассажей Перед трансплантацией на рану клетки пассировали на подложку «Фолидерм» Культура росла и сохранялась на пленке до трансплантации на рану от 1 до 14 суток.
Для оценки результатов экспериментов использовали комплекс методов исследования Динамику изменений площади раневого дефекта определяли методами раневой планиметрии Проводили гистологическое исследование кусочков кожи в области дефекта вместе с участками прилегающих интактной кожи и мышц Серийные парафиновые срезы биоптатов кожи окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по ван Гизон Эластические волокна выявляли окраской орсеином Гистологические срезы изучали светооптически и телеметрически с помощью видеокамеры CCD КОСОМ KCC-310PD и светового микроскопа Nicon ALPHAPHOT-2 YS2-H (Japan) По всем сериям и срокам эксперимента было изготовлено и изучено 478 гистологических препаратов. Комплексное морфологическое исследование образцов грануляционной ткани экспериментальных животных включало в себя морфометрическое исследование и светомикроскопическую радиоавтографию Для проведения количественного анализа подсчитывали на всех сроках лечения число пролиферирующих фибробластов в полях зрения
Метаболизм коллагена изучали по изменению количественного содержания свободного и белковосвязанного оксипролина в плазме крови по методике ТВ Замараевой (1977)
Для количественной оценки процессов воспаления в организме лабораторных животных на различные пластические материалы вычисляли содержание гистамина в крови по методике С А. Мещеряковой (1971).
Цитологическую картину раневого процесса изучали по данным микроскопии мазков-отпечатков по методу М П Покровской и М С Макарова (1942) Мазки крови, фиксированные в смеси Никифорова,
окрашивали азур-эозином по Романовскому-Гимзе, определяли лейкоцитарную формулу с подсчетом относительного содержания лейкоцитов
Статистическая обработка результатов выполнена при помощи пакета статистической обработки STATISHCA 6 ©StatSoft, Inc. (2001)
Первой методикой, примененной к массиву данных, была программа описательной статистики Были изучены средние величины в группах наблюдения, величины среднего квадратического отклонения Нормальность распределения наблюдений оценивали по методикам Шапиро-Вилка, Колмогорова-Смирнова.
Необходимое количество наблюдений определяли по методике ГП Котельникова, MB Угловой, Б А Углова (1985). С учетом данных о нормальности распределения выполняли матричный тест корреляции Пирсона для выявления взаимной корреляции между переменными Для группировки переменных применяли кластерный анализ методом древовидной кластеризации, а также факторный анализ (Котельников Г П, Шпигель А С , 2001)
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Заживление раневых дефектов в сравниваемых сериях экспериментов имело сходный качественный характер, но отличалось сроками эпителизации
При осмотре на 3-й сутки в серии с применением культуры аллофибробластов (основная серия) на дефекте выявляли подложку без признаков воспаления в ране и окружающих тканях Серозный экссудат определялся в небольшом количестве по краю раны При цитологическом исследовании в раневых мазках-отпечатках выявляли большое количество фибробластов Подложка закрывала всю раневую поверхность, поэтому об истинных размерах раны судить было сложно В серии с использованием 3%-ного раствора перманганата калия и в контрольной серии («без лечения») на дефекте определяли струп, соизмеримый с исходными размерами раны
При гистологическом исследовании в этот срок выявляли сходную картину, которая заключалась в активном образовании грануляционной ткани в дне раны, регенерации эпителия с краев раны и из базального слоя эпидермиса наружного эпителиального влагалища волосяного фолликула, что подтверждалось при радиоавтографическом исследовании
Более выраженные репаративные процессы в ране определяли в опытах с аллофибробластами В грануляционной ткани в основной серии животных выявляли значительное количество капилляров, тяжи веретенообразных фибробластов
На 3-й сутки в серии с использованием 3%-ного раствора перманганата калия раневая поверхность представлена струпом - безъядерным скоплением разрушенных клеточных пластов, интенсивно окрашенным оксифильно эозином в темно-малиновый цвет Струп сверху покрыт фибриновьгм сгустком, окрашенным эозином в бледно-розовый цвет Под базальным слоем выражена клеточная инфильтрация, представленная как воспалительными явлениями, так и регенераторными Среди клеток инфильтрата - интенсивно базофильно окрашенные молодые фибробластьг, лейкоциты, макрофаги Сосочки дермы сглажены, уплощены
Характерной особенностью данного срока является резко выраженный отек всех слоев дермы и глубжележащего слоя подкожно-жировой клетчатки, что проявляется в дерме набуханием и деструктуризацией коллагеновых волокон На микропрепаратах это выглядит как наличие большого количества бесклеточных и бестканевых пустот между волокнами Волокна расположены неупорядоченно, хаотично В глубоких слоях дермы выражено разрушение кожных дериватов - волосяных фолликулов и сальных желез -их структура нарушена, вокруг развит межуточный отек В глубжележащих мышечных слоях также отмечается межуточный отек - бесклеточные пространства между волокнами, заполненные жидкостью, набухание волокон и нарушение их структуры и хода Во всех слоях дермы отмечается тромбоз сосудов - их просвет расширен, содержимое представлено рыхлыми
безъядерными фибриновыми тромбами, окрашивающимися эозином в розовый цвет В прилежащих к зоне дефекта участках интактной кожи отмечается резкий контраст между здоровыми участками и поврежденными Эпидермис здоровых участков имеет нормальную толщину и 5-слойное строение, все его слои четко выражены Клеточной инфильтрации нет Сосочки дермы хорошо выражены и вдаются в базальную мембрану эпидермиса Коллагеновые волокна имеют нормальную структуру и расположение, их ход упорядочен, отека не отмечается Сосуды не расширены
В опытах с применением культуры аллофибробластов эпителизация раневой поверхности шла более интенсивно по сравнению с серией животных, где местно использовали 3%-ный раствор перманганата калия, и контрольной серией («без лечения») Количество пролиферирукяцих фибробластов в основной серии составило 5,1 ±0,2 (р<0,05), тогда как в серии с использованием 3%-ного раствора перманганата калия - 3,2±0,2 (р<0,05), в контрольной серии - 2,4+0,1
К 5-м суткам у всех лабораторных животных в опытах с применением культуры аллофибробластов подложку с раны удаляли На месте раневого дефекта визуально определяли полную эпителизацию без признаков рубцевания
Гистологически в данной серии животных на 5-е сутки выявляли полное восстановление всех слоев эпидермиса, базальную мембрану, формирующийся сетчатый слой Толщина эпителия в зоне раневого дефекта приближается к пограничной нормальной толщине эпидермиса В области регенерата базальная мембрана уплощена, сосочки дермы незначительно сглажены по сравнению с интактными участками кожи Межуточного отека и клеточной инфильтрации в дерме не выявляется Молодые коллагеновые волокна интенсивно формируются и созревают. Они имеют нормальную толщину и форму Среди клеточных элементов в зоне регенерата преобладают молодые фибробласты. Идет активное формирование дериватов
кожи - молодых волосяных фолликулов и кожных желез Они находятся на разных стадиях развития, но волосы и протоки желез еще не достигают поверхности кожи Выявляются расширенные капилляры во всех слоях дермы - сосуды полнокровны Подкожно-жировая клетчатка и подлежащие мышечные волокна имеют нормальную структуру и расположение
При осмотре на 5-е сутки в серии с использованием 3%-ного раствора перманганата калия и контрольной серии при осмотре определяли струп, покрывающий 7з - '/4 площади раны по сравнению с исходными размерами На участках раны, не покрытой струпом, выявляли эпителизацию раневого дефекта без признаков рубцевания
При гистологическом исследовании струп состоял из высохшего экссудата, местами со скоплением нейтрофильных лейкоцитов Под струпом в дне раны выявляли хорошо развитую грануляционную ткань Под струп на раневую поверхность наползал регенерирующий эпидермис
В серии с использованием 3%-ного раствора перманганата калия струп отпадал лишь к 7-8-м суткам после операции, в контрольной серии струп отпадал на 9-10-е сутки На 7-е сутки в серии с применением 3%-ного раствора перманганата калия при гистологическом исследовании в зоне дефекта отмечается интенсивная регенерация поврежденного эпителия Его толщина возрастает по сравнению с предыдущим сроком, но всё же значительно меньше нормы Наиболее выраженными являются два слоя клеток - базальный и роговой Отмечается наличие раневого струпа, отслаивающегося от поверхности регенерирующего эпидермиса Струп представлен как безъядерными детритными массами, интенсивно окрашенными оксифильно эозином в темно-малиновый цвет, так и хлопьями и нитями фибрина, окрашенными эозином в бледно-розовый цвет. В области регенерата базальная мембрана уплощена, сосочки дермы значительно сглажены В дерме под базальной мембраной и в глубжележащих слоях определяется интенсивная клеточная инфильтрация, представленная скоплением пролиферирующих фибробластов, лейкоцитов и макрофагов
Встречаются единичные тучные клетки В дерме по-прежнему отмечаются явления отека - коллагеновые волокна местами истончены, местами -набухшие и деструктурированные, между ними есть пустоты Направление их хода и структура нарушены Также отмечается сохраняющийся незначительный отек подлежащей области дефекта подкожно-жировой клетчатки. В глубоких слоях дермы вдет формирование новых кожных дериватов - отмечаются молодые новообразованные волосяные луковицы и зачатки сальных и потовых желез Однако все они находятся на ранних стадиях развития - выводные протоки желез не достигают поверхности кожи, волосяные луковицы лишь в зачаточном состоянии, без формирующихся волос Мышечные волокна в подлежащей зоне регенерата области истончены, хаотично расположены, между ними также присутствуют небольших размеров пустоты, что свидетельствует о легко выраженном отеке эндомизия волокон Как в зоне регенерата, так и в прилежащих к ней интактных участках кожи, встречается множество крупных и мелких тонкостенных сосудов Их просвет резко расширен, содержит большое количество эритроцитов - отмечаются выраженное полнокровие и стаз По-прежнему наблюдается довольно резкий контраст между структурой регенерирующей кожи в зоне раневого дефекта и прилежащими участками здоровой, интактной кожи
На 14-е сутки в серии с использованием культуры аллофибробластов при гистологическом изучении кожи в области восстановленного дефекта наблюдали все слои эпидермиса, базальную мембрану, сформированные сосочковый и сетчатый слои дермы
На 14-е сутки в серии с использованием 3%-ного раствора перманганата калия при гистологическом исследовании в зоне дефекта регенераторные процессы практически завершены Толщина эпителия в зоне нанесения раны возрастает по сравнению с предыдущим сроком, но по-прежнему меньше нормальной. Струпа и наложений фибрина нет В области регенерата базальная мембрана уплощена, сосочки дермы незначительно сглажены по
сравнению с интактными участками кожи В дерме клеточной инфильтрации нет, межуточного отека не выявляется Идет интенсивное формирование и созревание молодых коллагеновых волокон. Они имеют нормальную толщину и форму, но их расположение местами упорядочено, местами хаотично. Отмечаются общая повышенная клеточность в зоне регенерата — среди клеточных элементов преобладают молодые фибробласты, процесс активного формирования дериватов кожи - молодых волосяных фолликулов и кожных желез Они находятся на разных стадиях развития, но волосы и протоки желез еще не достигают поверхности кожи По-прежнему отмечается наличие расширенных капилляров во всех слоях дермы - сосуды полнокровны Подкожно-жировая клетчатка и подлежащие мышечные волокна имеют нормальную структуру и расположение
На 14-е сутки в основной серии количество пролиферирующих фибробластов значительно сократилось по сравнению с предыдущим сроком и составляло 0,5±0,1 (р<0,05), тогда как в серии сравнения - 1,2+0,1
На 21-е сутки в серии с использованием культуры аллофибробластов выявили нормальную гистологическую картину кожного покрова без каких-либо морфологических изменений Дериваты кожи сформированы Подкожно-жировая клетчатка и подлежащие мышечные волокна имеют нормальную структуру и расположение В эти же сроки в серии животных с применением 3%-ного раствора перманганата калия регенерация кожного покрова завершена Коллагеновые волокна имеют нормальную толщину и форму; их расположение в основном упорядочено. Молодые волосяные фолликулы и кожные железы находятся на разных стадиях развития Подлежащие слои имеют нормальную структуру и расположение
Направленность морфологической динамики заживления раневых дефектов после операции дермабразии в третьей серии (без лечения) была схожей с двумя сериями, однако процесс эпителизации раневых дефектов при макро-и микроскопическом исследовании отставал на 2-3 дня от серии
лабораторных крыс, у которых местно использовали 3%-ный раствор перманганата калия В одном наблюдении в контрольной серии выявили инфицирование раны и удлинение срока заживления (через контракцию и рубцевание раны) на 5 дней
Таким образом, при лечении поверхностных ран после операции дермабразии выявлено достоверно более раннее заживление раневых дефектов под воздействием культуры аллофибробластов по сравнению с серией животных, где применяли 3%-ный раствор перманганата калия К 5-м суткам в основной серии макроскопически отмечали полное заживление и отсутствие струпа, при гистологическом исследовании - формирование многослойного плоского эпителия на всей поверхности раны с верификацией всех его слоев и базальной мембраны. Подобную картину в серии сравнения (3%-ный раствор перманганата калия) наблюдали лишь на 7-8-е сутки В последующие сроки при морфологическом исследовании процесс регенерации в серии с использованием культуры аллофибробластов проходил интенсивнее, чем в других сериях, и опережал серию с применением 3%-ного раствора перманганата калия - на 5-7 дней, контрольную серию - на 9-10 дней Эпителизация ран у лабораторных животных происходила за счет стимуляции пролиферации эпидермиса в придатках кожи и с краев раны
При радиоавтографическом исследовании на 3, 7-е сутки определяли более высокий уровень (в 2 раза выше) синтеза ДНК в базальных клетках регенерирующего эпителия и высокую пролиферативную активность фибробластов дермы в серии с культурой аллофибробластов по сравнению с серией сравнения
Динамика изменений содержания свободного и связанного оксипролина во всех опытах носила сходный характер, но имела разную количественную характеристику Начиная с 3-х суток, во всех сериях отмечали максимальное увеличение свободного оксипролина, что было связано с его выходом в периферическую кровь Связанный оксипролин на 3-й сутки от начала лечения
в опытах снижался Далее во всех сериях лабораторных животных выявляли уменьшение свободного оксипролина и увеличение связанного оксипролина в связи с усилением регенераторных процессов В опытах с использованием культуры аллофибробластов свободный оксипролин возвращался к нормальным значениям к 14-м суткам, тогда как в серии с применением 3%-ного раствора перманганата калия и контрольной серией - лишь к 21-м суткам Увеличение связанного оксипролина к 14-м суткам объяснялось активизацией процессов коллагеногенеза (идет биосинтез молекул коллагена) в ране Процессы синтеза коллагена были более выражены в опытах с применением аллофибробластов, что подтверждалось более интенсивным ростом связанной фракции оксипролина
Динамика изменений содержания гистамина в периферической крови во всех сериях носила сходный характер и заключалась в максимальном его увеличении на 3-й сутки Далее в сериях наблюдали последующее снижение и возвращение к нормальным значениям к 21-м суткам Однако, если в опытах с применением культуры аллофибробластов изучаемый показатель находился в пределах нормы уже к 14-м суткам, то в серии с использованием 3%-ного раствора перманганата калия - лишь приближался к норме
Вычисление абсолютного количества лейкоцитов, палочкоядерных лейкоцитов и сегментоядерных лейкоцитов в периферической крови показало, что максимальных значений изучаемые показатели достигали на 3-й сутки Однако, в опытах с применением культуры аллофибробластов (1-я серия) для лечения раневых дефектов и в серии с использованием 3%-ного раствора перманганата калия (2-я серия) изучаемые показатели начинали снижаться к 7-м суткам, возвращаясь к норме в 1-й серии на 14-е сутки, во 2-й серии - на 21-е сутки В контрольной серии (3-я серия) значения абсолютного количества лейкоцитов, палочкоядерных лейкоцитов и сегментоядерных лейкоцитов оставались высокими на 14-е сутки и приближались к норме на 21-е сутки
Динамика изменений процентного содержания лимфоцитов и моноцитов в периферической крови экспериментальных животных во всех сериях носила
однонаправленный характер, который заключался в снижении данных показателей Минимальные значения изучаемых показателей выявляли на 3-й сутки, далее выявляли нормализацию данных показателей в опытах с аллофибробластами — к 14-м суткам, в серии с использованием 3%-ного раствора перманганата калия и в контрольной серии - к 21-м суткам
Во всех сериях во все сроки отмечали снижение процентного содержания эозинофилов и базофилов (или не выявляли вообще в периферической крови)
Таким образом, количественные изменения клеток периферической крови при местном лечении поверхностных раневых дефектов после операции дермабразии носили сходный характер Изучаемые показатели достигали максимальных значений на 3-й сутки, после чего происходила их нормализация Однако степень выраженности и сроки полной нормализации показателей крови были различны В серии с применением аллофибробластов нормализация изучаемых показателей происходила к 14-м суткам, тогда как в серии с применением 3% раствора перманганата калия сравнения и в контрольной серии — лишь к 21-м суткам
Для изучения нормальности переменных и обоснования выбора методик статистического анализа все изучаемые параметры во все сроки наблюдения были проанализированы с учетом тестов нормальности Проверка на нормальность проведена для всех рядов данных Во всех случаях характер распределения соответствовал нормальному Ошибочных точек, выпадающих из общей закономерности, ни в одной из переменных выявлено не было. Количество значений в выборке определено как достаточное Таким образом, проведена валидация результатов исследования
С целью редуцировать количество переменных* и определить возможность их группировки проведен факторный анализ. Выявлена группировка переменных в два достаточных фактора Первый включает показатели лейкоцитоза, уровень гистамина, площади раны до 14-х суток эксперимента, второй - уровень оксипролина, площадь раны позднее 14-х
суток эксперимента, количество пролиферирующих фибробластов при авторадиографии
С учетом выделенных при кластерном и факторном анализах группировок определяется четкая смена связей и зависимостей в процессе заживления раны с течением времени и логическое разделение показателей по направлению к двум факторам - условно «воспалительному» и «регенерационному»
Для построения математической* модели использована методика системного многофакторного анализа Б А Углова, Г П Котелышкова, М В Угловой (1985) в сочетании с техникой моделирования структурными уравнениями (БЕРАТН) и метода множественной многомерной регрессии наименьшими квадратами
При проведении моделирования сформированы два интегральных критерия соответственно описанным выше группировкам при кластерном и факторном анализах Критерий 1 - «воспалительный» - больше соответствовал показателям цитологии раневого отделяемого Его значение в большей степени влияло на длительность очищения раны и длительность преэкспоненциальной фазы планиметрической кривой Критерий 2 -«регенераторный» - больше соответствовал динамике числа фибробластов, уровню оксипролина Его значение определяло площадь под планиметрической кривой и в большей степени влияло на скорость заживления раны Влияние обоих критериев учтено в значении главного интегрального критерия Каждый критерий пересчитывали в 100-балльную шкалу для упрощения вычислений
Кроме того, определен коэффициент влияния способа лечения на процесс заживления Значение коэффициента влияния для контрольной серии установлено в 1,0 При этом коэффициент влияния на фоне применения калия перманганата составил 1,1 Наибольшее значение имеет коэффициент влияния у культуры фибробластов - 3,3, что свидетельствует об ускорении процесса заживления раны при их использовании.
Полученная математическая модель представляет собой группу формул и алгоритмов, позволяющую оценивать и прогнозировать изменение показателей При подстановке в нее показателей, полученных в ходе эксперимента, она позволяет предсказать течение раневого процесса Трактовка указанных показателей указывала на направленность патологического процесса и саногенеза, позволяла формулировать экспертное заключение
Обобщенный интегральный критерий свидетельствовал о течении процесса заживления раны в целом Переход к первой стадии раневого процесса соответствовал значению обобщенного интегрального критерия 34,6±3,8 Переход ко второй стадии - регенерации - отмечался при значении 58,3±6,8 Эпителизация раневого дефекта наблюдалась при значении обобщенного критерия в диапазоне 78,9-84,3±6,76. Большое внимание придавали и скорости увеличения раневого инте1рального показателя Прирост показателя на 3,8 единицы в сутки и более свидетельствовал о нормальном течении раневого процесса и позволял прогнозировать, когда
т _ioo_
будет достигнуто полное заживление раны по формуле F~ Fп_ i , где Тэп
- количество дней, максимально необходимое для закрытия раны, F„ -значение интегрального показателя в день наблюдения, Fn_i - значение показателя в день накануне
На основе полученной математической модели для оценки и прогнозирования течения раневого процесса нами разработана компьютерная
V
программа для изучения регенерации ран кожи и мягких тканей, прогнозирования течения и оценки эффективности их лечения (соавторы А В Колсанов, Б.И Яремин, А А Миронов, А В Хачатрян) Исходный алгоритм создан на языке программирования php 5 0 - Zend для любых платформ, поддерживающих php и базы данных MySQL (Linux, Microsoft Windows) и предназначен для ввода полученных цифровых показателей, характеризующих течение заживления раневого дефекта В основе работы
программы лежит использование математической модели, анализирующей взаимоотношения между полученными величинами и рассчитывающей интегральные показатели для конкретной ситуации
Выводы
1 Разработанная модель плоскостной поверхностной раны позволяет изучать течение раневого процесса у экспериментальных животных и оценивать эффективность различных способов местного лечения после дермабразии
2 В сравниваемых сериях эксперимента наблюдали общую тенденцию заживления ран, однако в серии с использованием культуры аллофибробластов отмечали уменьшение длительности фазы экссудации, более интенсивный процесс эпителизации ран, высокую пролиферативную активность фибробластов, начиная уже с 3-х суток, что сопровождалось значительным увеличением белковосвязанного оксипролина в периферической крови
Реэпителизация поверхностных ран кожного покрова при использовании культуры аллофибробластов происходила с образованием полноценного слоя эпидермиса за счет пролиферации базальных эпидермоцитов с краев раны и придатков кожи
3 Количественные изменения клеток периферической крови и медиатора воспаления - гистамина свидетельствуют о более благоприятном течении раневого процесса в серии экспериментов при местном применении культуры аллофибробластов по сравнению с 3%-ным раствором перманганата калия и контрольной серией
4 Разработана и внедрена компьютерная программа для ЭВМ, которая путем высчитывания значений интегральных показателей на основе введенных числовых параметров позволяет оценить направленность патологического процесса и прогнозировать течение раневого процесса
5 Разработанный способ местного лечения раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии с использованием
культуры аллофибробластов позволяет сократить сроки эпителизации ран в
1,5 раза, предотвратить вторичную контаминацию и оптимизировать
течение репаративных процессов в ране
Практические рекомендации
1 Разработанный способ местного лечения раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии за счет использования культуры аллофибробластов может быть использован в дерматокосметологической и хирургической практике
2 После микрокристаллической дермабразии трансплантацию культуры аллофибробластов на подложке необходимо проводить на подготовленную рану в условиях операционной без обезболивания Подложка с культурой аллофибробластов помещается клеточным слоем на раневую поверхность, без образования воздушных пузырей и гематом Подложка удаляется с раневой поверхности после ее полной эпителизации В качестве подложки для культуры аллофибробластов может быть применено раневое покрытие Фолидерм.
3 Для оценки и прогнозирования течения раневого процесса в клинической практике и эксперименте целесообразно применять разработанную компьютерную программу, основанную на кластерном и системном многофакторном анализах данных, полученных с помощью раневой планиметрии, цитологических, бактериологических, бакгериоскопических, морфологических, биохимических, гистохимических и дополнительных методов исследования больного или лабораторного животного
4 О течении процесса заживления раны в целом может свидетельствовать обобщенный интегральный критерий Переход к первой стадии раневого процесса соответствует значению обобщенного интегрального критерия 34,6±3,8 Переход ко второй стадии отмечается при значении 58,3±6,8 Эпителизация раневого дефекта наблюдается при значении обобщенного критерия в диапазоне 78,9-84,3 ±6,76
Список работ, опубликованныхчш теме диссертации
1. Дорожкина, ЕБ Культура фибробластов в лечении раневых дефектов кожи после операции дермабразии / ЕБ Дорожкина // Аспирантские чтения-2006 - Самара, 2006 - С 75-78
2 Дорожкина, Е Б Изучение заживления ран кожного покрова при использовании культуры фибробластов / А В Колсанов, Е Б Дорожкина, Н Н Золотовицкая // Актуальные проблемы современной науки- Сб науч трудов 1-го Международного форума- Самара, 2005.- С. 205-207
3 Дорожкина, Е Б Клеточные культуры фибробластов в лечении раневых дефектов кожи / Е Б Дорожкина, С С Чаплыгин // Актуальные вопросы современной медицинской науки в здравоохранении- Материалы 61-й межвузовской научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием - Екатеринбург, 2006.-С. 339-340
4. Дорожкина, Е Б. Современные подходы в лечении раневых дефектов кожи после операции дермабразии экспериментальное обоснование / А В Колсанов, Е Б. Дорожкина // Актуальные проблемы современной науки Сб науч трудов 2-го Международного форума-Самара, 2006 - С 107-110
5 Дорожкина, Е Б Оценка эффективности применения культуры фибробластов в лечении раневых дефектов кожи после операции дермабразии в эксперименте / Е Б Дорожкина, С.С. Чаплыгин // Наука о человеке Материалы VII конгресса молодых ученых и специалистов -Томск, 2006. - С. 68-69
6 Экспериментально-клиническая оценка эффективности применения культуры фибробластов / А В Колсанов, В Д Иванова, Л Т Волова, Е Б Дорожкина // Клиническая" анатомия и экспериментальная хирургия Ежегодник Российской ассоциации клинических анатомов в составе ВНОАГЭ Приложение к журналу «Морфологические ведомости» - Вып 6-й, 2006 -С 69-73
7 Дорожкина, Е Б Экспериментальное обоснование применения культуры фибробластов в лечении раневых дефектов кожи / А В Колсанов, ЕБ
Дорожкина, А В Толстов // Актуальные вопросы современной медицины Сб статей XXXIX итоговой научно-практической конференции научно-педагогического состава Самарского военно-медицинского института -Самара, 2006,-С 57-59
8 Дорожкина, ЕБ Клеточные технологии в лечении раневых дефектов кожи после операции дермабразии / А В Колсанов, Л.Т. Волова, ЕБ Дорожкина // Актуальные вопросы тканевой и клеточной трансплантологии Материалы Ш Всероссийского симпозиума с международным участием - М, 2007 - С 26-27.
9 Клеточные культуры фибробластов в лечении раневых дефектов и Рубцовых деформаций кожи в эксперименте / А В Колсанов, Л Т Волова, В Д Иванова, Е Б Дорожкина // Клиническая анатомия и экспериментальная хирургия. Ежегодник Российской ассоциации клинических анатомов в составе ВНОАГЭ. Приложение к журналу «Морфологические ведомости» - Вып 7-й, 2007-С 17-23
10 Дорожкина, ЕБ Оценка эффективности использования культуры фибробластов в лечении раневых дефектов кожи после дермабразии / А В Колсанов, ЕВ Орлов, ЕБ Дорожкина // Внедрение инновационных технологий в хирургическую практику Материалы дистанционной научно-практической конференции - Пермь, 2007 - С 92-94
\
Подписано в печать 24 04.2005. формат 60x84/16. Бумага офсетная Печать оперативная Объем 1,0 уся. печ. л Тирая 80 экз.
Отпеяатгно с гстозого ордаин&п-ыакета в типографии ООО «24 Принт» 443066, г Самара, ул Советской Армии, 105-68 г. (84 6)333-42-60
Оглавление диссертации Дорожкина, Елена Борисовна :: 2008 :: Саратов
Введение
Глава 1. Обзор литературы.
1.1. Морфология раневого процесса.
1.2. Использование дермабразии в лечении рубцовых деформаций кожи в дерматологической практике.
1.3. Современные подходы к лечению раневых дефектов кожи.
Глава 2. Материалы и методы исследования.
2.1. Характеристика экспериментальных исследований.
2.1.1. Характеристика серий экспериментов.
2.1.2 Методы исследования в эксперименте
2.2. Методы статистической обработки полученных результатов и математического моделирования.
Глава 3. Сравнительная характеристика морфологических изменений при местном лечении раневых дефектов кожи после микрокристаллической дермабразии при использовании культуры аллофибробластов и 3% перманганата калия у лабораторных животных.
ГЛАВА 4. Сравнение биохимических и гематологических изменений при местном лечении раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии при использовании культуры аллофибробластов и 3% раствора перманганата калия у лабораторных животных.
4.1. Количественная оценка метаболизма коллагена в периферической крови лабораторных животных при различных способах лечения раневых дефектов кожи после микрокристаллической дермабразии в эксперименте.
4.2. Количественная оценка изменений гистамина в периферической крови лабораторных животных при различных способах лечения раневых дефектов кожи после микрокристаллической дермабразии в эксперименте.
4.3. Количественная оценка изменений клеток периферической крови лабораторных животных при различных способах лечения раневых дефектов кожи после микрокристаллической дермабразии в эксперименте.
ГЛАВА 5. Описательная статистика и управление качеством исследования. Математическое моделирование раневого процесса.
5.1. Организация статистического анализа.
5.2. Поиск внутренних взаимосвязей в выборке.
5.3. Анализ зависимости показателей от времени.
5.4. Математическое моделирование.
5.5. Прогнозирование течения раневого процесса.
5.6. Программа для оценки и прогнозирования течения раневого процесса.
Введение диссертации по теме "Патологическая анатомия", Дорожкина, Елена Борисовна, автореферат
Изучение вопросов воспаления и репаративной регенерации является одной из фундаментальных задач современной патологии. Несмотря на большое количество исследований, до настоящего времени не существует четкого представления о ряде процессов, протекающих в ходе воспалительно-репаративной реакции (Рабин Е., 2001; Иванов А.А. с соавт., 2002). Репаративные процессы в ране неразрывно связаны с воспалением и формируют с ним единую реакцию на повреждение (Серов В.В., Пауков B.C., 1995, Пальцев М.А., Аничков Н.М., 2001). Репаративная регенерация является стереотипным процессом, который имеет свои особенности в различных органах и тканях, но в целом основные механизмы сходны с процессом заживления кожных ран (Trent J.F., Kirsner R.S., 1998, Nwomeh B.C. et al., 1998), детальное знакомство с которым крайне необходимо для оптимизации ведения ран, включающего оценку признаков воспаления, определение стадии раневого процесса, своевременное применение необходимых методов лечения (Назаренко И.Г. с соавт., 2002).
Особую актуальность изучение вопросов регенерации ран кожного покрова приобретает в связи с постоянным ростом количества дефектов кожи и рубцов вследствие ожогов, операций, порезов, трещин, травм, язв, постакне (Ахтямов С.Н., Бутов Ю.С., 2003; Sahi W.J. et all., 1994). Современный клинический опыт мировой дерматологии и хирургии позволяет использовать высокоэффективные, научно-обоснованные подходы к лечению рубцовых деформаций различного генеза. Наряду с традиционными методами пластической, эстетической и реконструктивно-восстановительной хирургии, в последние годы активно внедряются консервативные методики, основанные на использовании новых медицинских технологий (Адаскевич В.П., 2000; Morelli J.G., 1998; Acland К.М. et all.,2000). Среди множества предлагаемых способов лечения рубцов дермабразия занимает ведущее место из-за значительно меньшего количества рецидивов данной патологии. При дермабразии вместе с эпидермисом удаляется верхняя часть сосочкового слоя дермы, что влечет за собой большие структурные изменения не только в эпидермисе, но и в дерме.
Проблема оптимизации заживления раневых дефектов кожи после дермабразии является актуальной и в настоящее время. Применение современных раневых покрытий, обладающих высокими гемостатическими, антимикробными, анестезирующими, сорбционными и некролитическими свойствами позволяет свести до минимума риск возникновения послеоперационных осложнений (Фришберг И.А., 1984; Жигульцова Т.И. с соавт., 2000; Fulton J.E., 1996; Harmon D., 2002).
Разработка и внедрение новых высокотехнологичных способов восстановления целостности кожного покрова с использованием клеточных культур фибробластов и кератиноцитов позволяет оптимизировать течение репаративных процессов в ране и снизить риск формирования грубых рубцов, что важно для больных как в хирургической практике, так и в дерматологии (Саркисов Д.С. с соавт., 1995; Туманов В.П., 1999; Алексеев А.А. с соавт., 2002). Фибробласты ускоряют механизм регенерации кожи за счет вырабатываемых ими различных факторов роста (Васильев А.В. с соавт., 2001).
Таким образом, исследования по комплексному изучению вопросов регенерации при использовании клеточных культур фибробластов для лечения раневых дефектов кожи после дермабразии являются актуальными и современными.
Цель исследования
Провести комплексную оценку воспалительно-репаративного процесса на модели поверхностных плоскостных ран кожного покрова при использовании культуры аллофибробластов и 3% раствора перманганата калия в эксперименте.
Задачи исследования
1. Создать модель поверхностного плоскостного раневого дефекта кожного покрова за счет применения микрокристаллической дермабразии в эксперименте.
2. Провести сравнительную оценку процессов заживления раневых дефектов кожного покрова при использовании культуры аллофибробластов и 3% раствора перманганата калия после микрокристаллической дермабразии в эксперименте.
3. Изучить в сравнении количественные изменения клеток периферической крови, гистамина и оксипролина при использовании культуры аллофибробластов и 3% раствора перманганата калия после микрокристаллической дермабразии в эксперименте.
4. Создать математическую модель и алгоритм расчета для разработки компьютерной программы оценки и прогнозирования течения раневого процесса.
5. Теоретически обосновать и разработать способ лечения раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии путем применения культуры аллофибробластов.
Научная новизна
Разработана экспериментальная модель поверхностной плоскостной раны кожного покрова после микрокристаллической дермабразии (рац. предл. № 556 от 20.04.2007 г.).
Дополнены морфологические особенности заживления раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии при использовании культуры аллофибробластов на носителе в сравнении с 3% раствором перманганата калия.
Впервые изучены количественные изменения клеток периферической крови, гистамина и оксипролина при использовании культуры аллофибробластов в сравнении с применением 3% раствора перманганата калия после микрокристаллической дермабразии в эксперименте.
Разработана компьютерная программа оценки и прогнозирования течения раневого процесса.
Впервые разработан способ лечения раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии за счет использования культуры аллофибробластов на носителе (рац. предл. № 555 от 20.04.2007 г.).
Практическая значимость Способ моделирования раневого дефекта кожного покрова путем применения микрокристаллической дермабразии позволяет получить поверхностную плоскостную рану кожи в эксперименте.
Внедрение способа лечения раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии за счет использования культуры аллофибробластов на носителе позволит оптимизировать течение репаративных процессов в ране и снизить риск формирования рубцов.
Программа оценки и прогнозирования течения раневого процесса позволяет объективно судить о процессах заживления ран различной этиологии, прогнозировать течение раневого процесса и определять тактику лечения ран в эксперименте и клинической практике.
Апробация результатов исследования Материалы диссертации доложены и обсуждены на III Всероссийском симпозиуме с международным участием «Актуальные вопросы тканевой и клеточной трансплантологии» (Москва, 2007), на съезде травматологов и ортопедов России (Самара, 2006), на межвузовских научных конференциях молодых ученых «Аспирантские чтения — 2005» (Самара, 2005), «Аспирантские чтения - 2006» (Самара, 2006); на Международных конференциях молодых ученых «Актуальные проблемы современной науки» (Самара, 2005; 2006); на заседании кафедры дерматовенерологии СамГМУ, кафедры общей хирургии с курсом оперативной хирургии СамГМУ, кафедры патологической анатомии СамГМУ, кафедры гистологии и эмбриологии СамГМУ и Центральной научно-исследовательской лаборатории СамГМУ (Самара, 2005, 2006, 2007).
Внедрение результатов исследования
Способ моделирования раневого дефекта кожного покрова путем применения микрокристаллической дермабразии используется при выполнении экспериментов на базе Центральной научно-исследовательской лаборатории Самарского государственного медицинского университета. Основные положения и выводы работы используются в обучении студентов, клинических ординаторов и интернов, слушателей на кафедрах дерматовенерологии, оперативной хирургии и клинической анатомии с курсом инновационных технологий Самарского государственного медицинского университета. Разработанная программа оценки и прогнозирования течения раневого процесса используется при проведении экспериментов на животных в ЦНИЛ и в клинической практике на базе клиники кожных и венерических болезней Самарского государственного медицинского университета, в центре эстетической медицины «Данне».
Публикации по теме диссертации
По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ, в т.ч. 2 статьи в реферируемом журнале ВАК, получены 2 рационализаторских предложения.
Структура и объем диссертации
Диссертация изложена на 126 страницах машинописного текста, включает 1 таблицу, 33 рисунка и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 348 источников, из них 194 отечественных и 154 зарубежных авторов.
Заключение диссертационного исследования на тему "Комплексная оценка репаративного процесса при использовании культуры фибробластов для закрытия раневых дефектов кожи после микрокристаллической дермабразии (экспериментальное исследование)"
Выводы
1. Разработанная модель плоскостной поверхностной раны позволяет изучать течение раневого процесса у экспериментальных животных и оценивать эффективность различных способов местного лечения после дермабразии.
2. В сравниваемых сериях эксперимента наблюдали общую тенденцию заживления ран, однако в серии с использованием культуры аллофибробластов отмечали уменьшение длительности фазы экссудации, более интенсивный процесс эпителизации ран, высокую пролиферативную активность фибробластов, начиная уже с 3-х суток, что сопровождалось значительным увеличением белковосвязанного оксипролина в периферической крови.
Реэпителизация поверхностных ран кожного покрова при использовании культуры аллофибробластов происходила с образованием полноценного слоя эпидермиса за счет пролиферации базальных эпидермоцитов с краев раны и придатков кожи.
3. Количественные изменения клеток периферической крови и медиатора воспаления — гистамина свидетельствуют о более благоприятном течении раневого процесса в серии экспериментов при местном применении культуры аллофибробластов по сравнению с 3%-ным раствором перманганата калия и контрольной серией.
4. Разработана и внедрена компьютерная программа для ЭВМ, которая путем высчитывания значений интегральных показателей на основе введенных числовых параметров позволяет оценить направленность патологического процесса и прогнозировать течение раневого процесса.
5. Разработанный способ местного лечения раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии с использованием культуры аллофибробластов позволяет сократить сроки эпителизации ран в 1,5 раза, предотвратить вторичную контаминацию и оптимизировать течение репаративных процессов в ране.
Практические рекомендации
1. Разработанный способ местного лечения раневых дефектов кожного покрова после микрокристаллической дермабразии за счет использования культуры аллофибробластов может быть использован в дерматокосметологической и хирургической практике.
2. После микрокристаллической дермабразии трансплантацию культуры аллофибробластов на подложке необходимо проводить на подготовленную рану в условиях операционной без обезболивания. Подложка с культурой аллофибробластов помещается клеточным слоем на раневую поверхность, без образования воздушных пузырей и гематом. Подложка удаляется с раневой поверхности после ее полной эпителизации. В качестве подложки для культуры аллофибробластов может быть применено раневое покрытие Фолидерм.
3. Для оценки и прогнозирования течения раневого процесса в клинической практике и эксперименте целесообразно применять разработанную компьютерную программу, основанную на кластерном и системном многофакторном анализах данных, полученных с помощью раневой планиметрии, цитологических, бактериологических, бактериоскопических, морфологических, биохимических, гистохимических и дополнительных методов исследования больного или лабораторного животного.
4. О течении процесса заживления раны в целом может свидетельствовать обобщенный интегральный критерий. Переход к первой стадии раневого процесса соответствует значению обобщенного интегрального критерия 34,6±3,8. Переход ко второй стадии отмечается при значении 58,3±6,8. Эпителизация раневого дефекта наблюдается при значении обобщенного критерия в диапазоне 78,9-84,3 ±6,76.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2008 года, Дорожкина, Елена Борисовна
1. Абрикосов А.И. Частная патологическая анатомия / А.И. Абрикосов // Вып. 1-3. М. Медгиз, 1947.
2. Автандилов Г.Г. Морфометрия в патологии / Г.Г.Автандилов // М.: Медицина, 1973.- 248с.
3. Автандилов Г.Г. Основы количественной патологической анатомии: Учебное пособие / Г.Г. Автандилов // М.: Медицина, 2002. 240с.
4. Адамян А.А. Пролонгированная многокомпонентная энзимотерапия, развивающееся направление в гнойной хирургии / А.А. Адамян, С.П. Глянцев // Хирургия.- 1992.- № 7 -8 .- С. 105- 108.
5. Адаскевич В.П. Актуальная дерматология / В.П. Адаскевич // Н.Новгород: Мед. книга - НГМА, 2000.-306 с.
6. Александров А.В. Неклассические субпопуляции лимфоцитов, дендритные клетки и стромальное окружение (сообщение о 9 международном конгрессе иммунологов) / А.В. Александров, Г. Скибинский // Гематол. и трансфузиол. 1996. - №3. - С. 45-47.
7. Алексеев А.А. Ожоговый сепсис: диагностика, профилактика, лечение / А.А Алексеев // Дисс. доктора мед. наук. М., 1993.- 233 с.
8. Алексеев А.А. Комбинированняа аутодермопластика с трансплонтацией культивированных фибробластов при обширных глубоких ожогах; клинические результаты и перспективы / А.А. Алексеев, А.Ю. Яшин // Мат. межд. симпозиума. Тула, 1996. - С. 1-3.
9. Андреев С.Д. Антисептические пленки для своевременного закрытия и лечения ожогов / С.Д. Андреев, JI.A. Стончева // Современные средства первойпомощи и методы лечения ожоговой болезни: Тез. докл. III Всесоюз. конф. -М., 1986.-С. 100-101.
10. П.Анисимов А.И. Использование гелий-неонового лазера в амбулаторной практике при лечении гипертрофических кожных рубцов и вялогранулирующих ран / А.И. Анисимов, К.И. Белый // Вест, хирургии им.И.И. Грекова, 1988.-Т. 141, №101.-С. 97-98.
11. Анисимов В.И. Местное применение ксимедона для лечения трофических язв при варикозной болезни / В.И. Анисимов, С.Г. Измайлов, А.А. Шульц // III конференция ассоциации флебологов России: Тез. докл. Ростов н/Д, 2001.-С. 17.
12. Аничков Н.Н. Морфология заживления ран / Н.Н. Аничков, К.Г. Волкова // М.: медицина, 1951. С. 123.
13. Аргуновский И.А. Раневое покрытие «Гешиспон» / И.А. Аргуновский, Г.В. Поликахин // Современные подходы к разработке эффективных перевязочных средств: Сб. науч. трудов междунар. конф. М., 1995. - С. 113114.
14. Арьев Т.Я. Раны и их лечение / Т.Я. Арьев // руководство по хирургии. -М., 1962. С. 647- 684.
15. Атясов Н.И. Десятилетний опыт применения прополисной мази при лечении гранулирующих ран в горьковском Всероссийском ожоговом центре / Н.И. Атясов, М.П. Гусев, В.А. Куприянов // Бухарест: Апимондия, 1981. С. 118-119.
16. Атясов Н.И. Восстановление кожных покровов тяжелообожженных сетчатыми трансплантатами / Н.И. Атясов, Е.Н. Матчин //Саранск, 1989 201 с.
17. Ахабадзе А.Ф. Косметология на современном этапе развития / А.Ф. Ахабадзе // Новые косметические препараты и лечение заболеваний и косметических недостатков: Сб. науч. трудов.- М., 1988.- С.4-7.
18. Ахтямов С.Н. Практическая дерматокосметология / С.Н. Ахтямов, С.Н. Бутов // Учебное пособие.-М.: Медицина, 2003.-400 с.
19. Бабаджанов Б.Р. Комплексная терапия длительно не заживающих трофических язв / Б.Р. Бабаджанов, И.А. Султанов // Хирургия. 1998.- №10. -С. 42-45.
20. Барашков Г.Н. Возможности микрокристаллической дермабразии в косметологии и эстетической медицине / Г.Н. Барашков // Новости в мире косметики, 1999.-№ 5-6.-С.20.
21. Барышников А.Ю. Программированная клеточная смерть (апоптоз) / А.Ю. Барышников, Ю.В. Шишкин // Российский онкол. журн. 1996. - №1 — С. 5861.
22. Бевзенко A.M. Двадцатилетний опыт лечения больных с ожогами в Краснодарском крае / A.M. Бевзенко // Тез. докл. межрег. конф. Краснодар, 1993. - С. 3-5.
23. Беленький В.Я. Квантовая косметология высокоэкологическая технология / В.Я. Беленький // Экологические аспекты косметологии: Мат. научно-практ.конф.- Новосибирск: НКО, 2000.-С.28-34.
24. Белоцкий С.М. Иммунотерапия раневой инфекции / С.М. Белоцкий, В.А. Карлов // Научный обзор. М.: ВНИМИ, 1982. - 76 с.
25. Белоцкий С.М. Иммунология хирургической инфекции / С.М. Белоцкий //
26. М.: Медицина, 1980. С. 55-69.
27. Берлиан Х.П. Прикладная лазерная медицина / Х.П. Берлиан, Г.И. Мюллер // Учебное и справочное пособие. М.: ИАО "Интерэксперт", 1997.356 с.
28. Болховитинова JI.A. Келоидные рубцы / Л.А.Болховитинова, М.Н. Павлова//М.: Медицина, 1977.-136 с.
29. Булай П.И. К особенностям современной ожоговой травмы / П.И. Булай // Интенсивное лечение тяжелообоженных: Тез. докл. междунар конф. М., 1992. - С. 7- 9.
30. Булай П.И. Биологические комплексы для заживления ожогов / П.И. Булай // Современные подходы к разработке эффективных перевязочных средств: Мат. международн. конф. М., 1995. - С. 116-117.
31. Бутов Ю.С. Системный саркоидоз с поражением кожи / Ю.С. Бутов, А.А. Фролов, Т.А. Ильина // Росс. журн. кожн. и венер. болезней, 2000.-№ 1.-С.9-12.
32. Васютков В.Я. Трофические язвы стопы и голени / В.Я. Васютков, Н.В. Проценко // М., 1993. 160с.
33. Вихриев Б.С. Ожоги: Руководство для врачей / Б.С. Вихриев, В.М. Бурмистров // 2-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 1986. - 272с.
34. Воинов А.И. Местное применение иодопирона в комплексном лечении ожогов / А.И. Воинов, Я.Я. Кошельков // Интенсивное лечение тяжелообоженных: Тез докл. междунар. конф. М., 1992. - С. 62-63.
35. Войнов В.А. Патофизиология воспаления / В.А. Войнов // Патофизиология. Курс лекций-М., 1995. С. 121- 125.
36. Волков В.Г. Применение искусственного покрытия «Гиаплюс» в лечении трофических язв нижних конечностей / В.Г. Волков, В.В. Строитель, И.А. Федорщук//Вестн. новых мед. технол., 2000.-№ 1.-С. 101.
37. Втюрин Б.В. Ультраструктурные основы инфекционного процесса в развитии ожогов кожи и раннего сепсиса / Б.В. Втюрин, Р.И. Каем // Вестн. дерматол. и венерол. 1985. - №8. - С. 20-27.
38. Гавриленко А.В. Новое решение в лечении тяжелых форм хронической венозной недостаточности / А.В. Гавриленко // Мед. газета. 2002. -№2.-С. 10.
39. Газиев Р.Х. Влияние метилтиофена, диметилсульфоксида и дибунола на процессы регенерации кожи / Р.Х. Газиев, Н.Т. Бикбулатов, Х.М. Насыров // Фармакологическая регуляция регенераторных процессов. Йошкар-Ола, 1979.-С. 303-304.
40. Гамалея Н.Ф. Биостимуляционный эффект лазерного облучения крови / Н.Ф. Гамалея, В.Я. Садник, З.М. Рудых // Низкоинтенсивные лазеры в эксперименте и клинике.-Владивосток: ДВИ, 1991.-С.48-64.
41. Гарипов P.M. Микробиологический пейзаж инфицированных ожоговых ран / P.M. Гарипов, В.М. Тимербулатов // Казанский мед. журн. т. 72. - 1991. -№ 5. - С. 384- 385.
42. Гегия Э.Ш. Комплексное лечение длительно незаживающих ран и венозных трофических язв / Э.Ш. Гегия // Автореф. дисс. канд. мед. наук. -Тбилиси, 1990.-210 с.
43. Герасимов Л.И. Эффективность применения активированных растворов хлорида калия в лечении ожоговых ран / Л.И. Герасимов, С.В. Смирнов // Электрохимические методы в медицине: Тез. докл. конф.- Дагомыс, 1991.- С. 61.
44. Гланц С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц // Пер. с англ. М.: Практика, 1998. - 460 с.
45. Глущенко Е.В. Выбор оптимальных сроков трансплантации культивированных фибробластов на ожоговую рану / Е.В. Глущенко, Т.Л. Заец, Г.Г. Серов // Пластическая хирургия при ожогах и ранах: Мат. междунар. конф. М., 1994. - С. 21-22.
46. Глянцев С.П. Лечение гнойных ран повязками с иммобилизированными ферментами протеолиза: проблемы и перспективы / С.П. Глянцев // Междунар. конф. М., 1995. - С. 100-102.
47. Голиков А.Н. Заживление гранулирующей раны, закрытым швом / А.Н. Голиков // М.: Из-во АМН СССР. 1951. - 160 с.
48. Гостищев В.К. Оперативная гнойная хирургия / В.К. Гостищев // М.: Медицина, 1996. 416 с.
49. Григорьев В.В. Морфология заживления огнестрельной раны после первичной хирургической обработки в эксперименте / В.В. Григорьев, К.К. Зайцева // Арх. пат. 1983. - №8. - С. 64-72.
50. Григорян А.В. Трофические язвы (патогенез, клиника, лечение) / А.В. Григорян, В.К. Гостищев, П.И. Толстых // М.: Медицина, 1972. — 207 с.
51. Грудянов А.И. Остеопластические материалы, используемые при хирургическом лечении заболеваний пародонта / А.И. Грудянов, А.И. Ерохин // Пародонтология. 1998. - №1. - С. 13-23.
52. Давыдов Ю.А. Регуляция раневого процесса у больных пожилого и старческого возраста методом вакуум-терапии / Ю.А. Давыдов, А.Ю. Абрамов // Хирургия. 1994. - № 9. - С. 7.
53. Давыдов Ю.А. Вакуум-терапия ран и раневой процесс / Ю.А. Давыдов, А.Б. Ларичев // М.: Медицина, 1999. 160 с.
54. Даценко Б.М. Многокомпонентные мази на гидрофильной основе для лечения гнойных ран / Б.М. Даценко, И.М. Перцев // Клин. хир. 1984. - № 1. -С. 10-14.
55. Даценко Б.М. Теория и практика лечения гнойных ран / Киев: здоровье, 1995. 384 с.
56. Добыш С.В. Современные перевязочные средства для лечения ран во второй фазе раневого процесса / С.В. Добыш, А.В. Васильев, О.В. Шурупова // Материалы международной конференции под ред. В.Д. Федорова, А.А. Адамяна. М., 2001. - С. 115.
57. Дорохов Р.Н. К морфологии и кровоснабжению подмышечных и паховых лимфатических узлов у человека / Р.Н. Дорохов // Материалы 17-й итоговой науч. конф. Смоленского института физической культуры. Смоленск, 1967. -С. 56-58.
58. Егоров М.В. Прогностическое значение структурно-фунуциональной характеристики меланомы кожи / М.В. Егоров, Е.А. Конкина, Р.С. Полищук // Арх. пат. 2005. - №1. - С. 36-39.
59. Жигульцова Т.И. Дермабразия в коррекции косметических недостатков / Т.И. Жигульцова, JI.B. Пархаева // Рос. журн. кожн. и вен. бол., 2000.-№1.-С.63-69.
60. Ивашкин А.Н. Использование криоконсервированных жизнеспособных аллодермотрансплантатов в лечении длительно незаживающих ран и трофических язв / А.Н. Ивашкин // Дис. . канд. мед. наук. М., 2001. - 157 с.
61. Использование клеточных культур при местном лечении ожоговых ран / Е.В. Глущенко, А.А. Алексеев, С.С. Морозов и др. // Хирургия. 1993. - №11. -С. 26-29.
62. Использование культур аллофибробластов для лечения ожоговых ран у детей / Д.Я. Алейник, В.А. Куприянов, В.М. Левин и др. // Мат межд. симпозиума. Тула, 1996. - С. 1.
63. К методике определения точности морфологической диагностики операционного и биопсийного материала / Ю.П. Трибунов, Ю.А. Перов, Г.А. Франк и др. // Арх. пат. 2004. - №6. - С. 51-54.
64. Кааев М.Ф. Лечение ран антиоксидантами / М.Ф. Кааев // Хирургия. -1985.-№4.-С. 52-55.
65. Кабанов Н.Я. Применение гидрофильного сорбента гелевина в сочетании с физическими методами воздействия в комплексном лечении обширных гнойных ран / Н.Я. Кабанов, Е.Ю. Осинцев // Материалы междунар. конф. -М., 1995.-С. 172-174.
66. Каем Р.И. Ожоги. Воспаление / Р.И. Каем // Руководство для врачей под ред. В.В. Серова -М.: Медицина, 1995. С. 457-468.
67. Калинина Т.Н. Перевязочные средства на основе хитозана / Т.Н. Калинина, Н.А. Хохлова // Материалы междунар. конф. М., 1995. - С. 123124.
68. Калиниченко В.М. Применение левомицетинсодержащих мазей на гидрофильной основе для лечения гнойных ран / В.М. Калиниченко // Автореф. дисс. канд. мед. наук. Харьков, 1983. - 160 с.
69. Каныкин Ю.А. Использование света гелий-неонового лазера в амбулаторной практике для лечения кожных рубцов вялогранулирующих ран / Ю.А. Каныкин, С.В. Кинович // Грузинская респ. науч. конф. травматологов и ортопедов.-Тбилиси, 1987.-С. 102-105.
70. Караванская Н.А. Динамика клеточных иммунных реакций у крыс в условиях разного теплового режима / Н.А. Караванская // Иммунология и аллергия. Киев, 1975. - т. 18. - № 2. - С. 20-21.
71. Карлов В.А. Раны и раневая инфекция. Вопросы морфологии и метаболизма раневого процесса / В.А. Карлов, В.А. Думчев // Научный обзор. М.: Медицина, 1975. - 560 с.
72. Кацадзе М.А. Применение гидрогелевой повязки «Бакцеласепт» в лечении гнойно-некротического панкреатита и послеоперационных гнойных ран / М.А. Кацадзе, А.Г. Мирошниченко // Материалы междунар. конф. М., 1995. - С. 140-141.
73. Киселев И.В. Медико-биологическая оценка жизнеспособности криоконсервированной кожи / И.В. Киселев // Дис. . канд. мед. наук. М., 2000. - 145 с.
74. Кованов В.В. Коллагенопластика в медицине / В.В. Кованов, И.А. Сычеников // М.: Медицина, 1978. 256 с.
75. Коллаген и его применение в медицине / A.M. Хилькин, А.Б. Шехтер, Л.П. Истранов и др. // М.: Медицина, 1976. 256 с.
76. Коллагенопластика в медицине / И.А. Сычеников, Р.К. Абоянц, А.Ф. Дронов и др. // М: Медицина, 1978. 256 с.
77. Колсанов А.В. Комплексное лечение раневых дефектов кожи и мягких тканей различной этиологии с применением клеточных культур и биопокрытий / А.В. Колсанов // Дис. доктора мед. наук. Самара, 2003. - 460 с.
78. Кольгуненко И.И. Основы геронтокосметологии / И.И. Кольгуненко // М., 1974.-237 с.
79. Коновалов О.В. Морфологическая характеристика изменений лимфоидной ткани при аллотрансплантации / О.В. Коновалов // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1974. - т. 77. - № 5. - С. 114-116.
80. Коновалова Н. Н. Опыт лечения морщин и рубцов после угревой болезни методом дермабразии / Н.Н. Коновалова // Актуальные вопросы дерматовенерологии: Сб. науч. тр., посвящ. 70-лет. юбилею акад. РАМН Ю.К. Скрипкина. Курск, 1999.-Вып. 2.-С. 42-43.
81. Короткий Н.Г. Применение клинико-морфологического алгоритма в лечении келоидных рубцов методом СВЧ-криодеструкции / Н.Г. Короткий, В.В. Шафранов, А.В. Таганов, Е.Н. Борхунова, А.Г. Стенько // Вестн. дерматологии и венерологии, 2001.-№ .-С. 52-59.
82. Короткий Н.Г. Микродермабразия в лечении постэруптивных рубцов / Н.Г. Короткий, А.А. Тихомиров, А.В. Таганов // Мат. VIII Всероссийского съезда дерматовенерологов, М., 2001.-С. 114.
83. Костюченок Б.М. Современное лечение гнойной раны (обзор) / Б.М. Костюченок, В.А. Бумчев // Сов. мед. 1977. - № 3. - С. 123-127.
84. Костюченок Б.М. Цитологическое изменение обширных гнойных ран в процессе лечения в управляемой абактериальной среде / Б.М. Костюченок, Б.Л. Шимкевич // Сов. мед. 1983. - №4. - С. 33-40.
85. Котельников Г.П. Доказательная медицина / Г.П. Котельников, А.С. Шпигель // Самара, 2001. 312 с.
86. Кузин М.И. Раны и раневая инфекция / М.И. Кузин, Б.М. Костюченок // Руководство для врачей. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 1990. -592 с.
87. Кузин М.И. Общие принципы лечения гнойных ран / М.И. Кузин, Б.М. Костюченок // Мет. реком.: М., 1955. 28 с.
88. Кузин М.И. Хирургическое лечение гнойных очагов у больных раневым сепсисом / М.И. Кузин, Б.М. Костюченок // Мет. реком. М., 1985.- 56 с.
89. Лаврищева Г.И. Морфологические и клинические аспекты репаративной регенерации опорных органов и тканей / Г.И. Лаврищева, Г.А. Оноприенко // М., 1996.-С. 15-18.
90. Лапутин Е.Б. Современное представление о дермабразии / Е.Б. Лапутин // Nouv. Esthet. 1999. - N 1. -P. 18-20.
91. Ларичев А.Б. Подготовка раневой поверхности к пластическому закрытию методом вакуум терапии / А.Б. Ларичев, Ю.А. Давыдов // Кожная пластика в гнойной хирургии: Всес. симп. М., 1990. - С. 43 -44.
92. Лечение ожогов с использованием культивированных клеток кожи человека / Д.С. Саркисов, А.А. Алексеев, В.П. Туманов и др. // Хирургия. -1993.-№3.-С. 22-27.
93. Лечение ожоговых ран с применением раневых покрытий «Биодеспол» / А.А. Алексеев, М.Г. Крутиков, А.Э. Бобровников и др. // Материалы международной конференции под ред. В.Д. Федорова, А.А. Адамяна. М., 2001.-С. 133-135.
94. Лещенко И.Г. Прогнозирование течения гнойной инфекции при хирургических заболеваниях и тяжелых травмах / И.Г. Лещенко // Дисс. д-ра. мед. наук. Кбш., 1991.-161 с.
95. Лимарев A.M. Изучение действий содержащей мумиё мази на заживление экспериментальных лучевых язв / A.M. Лимарёв, В.Д. Петрик // Реабилитацияонкологических больных с местными лучевыми поражениями. Обнинск, 1983.-С. 10-14.
96. Линдер Д.П. Гистология и цитология лимфатических узлов, селезенки, тимуса при аллогенной трансплантации кожи у мышей / Д.П. Линдер, И.А. Поберий, Н.В. Махлин // Арх. патол., 1973, т. 35, № 6, С. 19-25.
97. Литвицкий П.Ф. Патофизиология воспаления / П.Ф. Литвицкий // Патофизиология. Курс лекций М., 1995. - С. 121-125.
98. Лубегина З.П. Лечение незаживающих язв нижних конечностей кожной пластикой / З.П. Лубегина // Вестн. хир., 1962, №3, С. 100-106.
99. Ляпунов Н.А. Новые препараты для местного лечения ожогов / Н.А. Ляпунов, Г.С. Башура // Ьужд. конф. М., 1992. - С. 112-114.
100. Ляпунов Н.А. Новые пенные препараты для местного лечения ран и ожогов / Н.А. Ляпунов, Л.А. Блатун // Местное лечение ран: мат. Всес. конф. -X., 1991.-С. 93-94.
101. Матриксные металлопротеиназы и их тканевые ингибиторы при базально-клеточном и метатипическом раке кожи / Е.С. Снарская, М.А. Молочков, Г.А. Франк и др. // Арх. пат. 2005. - №3. - С. 14-17.
102. Маянский А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский // Новосибирск, 1983. 116 с.
103. Меерсон Ф.З. Адаптационная медицина. Механизмы и защитные эффекты адаптации / Ф.З. Меерсон // М., 1993. 216 с.
104. Михайлов И.Н. Структура и функция эпидермиса / И.Н. Михайлов // М.: Медицина, 1979. С. 48-106.
105. Мороз Г.Д. Лечение длительно незаживающих донорских участков: трансплантация культивированных аллофибробластов человека / Г.Д. Мороз, В.М. Гришкевич, А.А. Алексеев // Хирургия, 1993. №7. - С. 71-75.
106. Морфологическая и иммуногистохимическая характеристика репаративных процессов в длительно не заживающих ранах / Д.Н. Федоров, А.Н. Ивашкин, В.В. Шинин и др. // Арх. пат. 2002. - №1. - С. 8-11.
107. Музыкант Л.И. Сравнительное морфологическое изучение динамики заживления ожоговых ран при различных методах лечения / Л.И. Музыкант, Р.И. Каем // Арх. пат. 1984. - № 3. - С. 52-59.
108. Мулюкина М.В. Создание самоклеющихся лечебных повязок / М.В. Мулюкина, А.А. Моисеева // Междунар. конф. М., 1995. - С. 37-38.
109. Мурадян Р.Г. Современные методы местного лечения ран, стимулирующие репаративные процессы / Р.Г. Мурадян // Автореф. дисс. докт. мед. наук.-М.,1996.-32с.
110. Мурадян Р.Г. Применение иммобилизированного террилина с антисептиками при лечении гнойных ран / Р.Г. Мурадян // Интенсивное лечение тяжелообоженных: Тез докл междунар. конф. М., 1992. - С. 120-122.
111. Озерская О.С. Патогенетическое обоснование новых методов терапии рубцов / О.С. Озерская // Дис. докт. мед. наук. СПб, 2002.- 299 с.
112. Озерская О. С. Способы коррекции гипотрофических рубцов / О.С. Озерская // Вестн. дерматологии и венерологии, 2002.-№ З.-С. 65-67.
113. Опыт лечения гнойных ран ируксолом / И.И. Матяшин, А.К. Мендель, А.Я. Яремчук и др. // Сов. мед. 1981. - № 3. - С. 65-68.
114. Опыт лечения препаратами эмбриональной ткани трофических язв / Б.Т. Глухенький, Г.И. Ластовецкая, Л.Д. Калюжная и др. // Врачебн. дело, 1984. -№6. - С. 93-94.
115. Осепян И. А. Аутотрансплантация костномозговых фибробластов в травматологии и ортопедии / И.А. Осепян, Э.С. Гарибян // Вестн. хир. 1988. -№5.-С. 70-71.
116. Осипов А.А. Применение красного когерентного света в комплексном лечении келоидных рубцов у детей / А.А. Осипов // Автореф. дисс. канд. мед. наук. -М., 1991.- 22 с.
117. Пальцев М.А. Межклеточные взаимодействия / М.А. Пальцев, А.А. Иванов // М., 1995. С. 23-29.
118. Пальцев М.А. Патологическая анатомия / М.А. Пальцев, Н.М. Аничков // Учебник в 2 т. М.: Медицина, 2000.
119. Панова О.С. Теоретические и прикладные аспекты современной дерматокосметологии / О.С. Панова // Автореф. дис.докт. мед. наук. М., 2001.-47 с.
120. Парамонов Б.А. Ожоги / Б.А. Парамонов, Я.О. Порембский, В.Г. Яблонский // СПб., 2000. 480 с.
121. Патоморфология болезней кожи / Г.М. Цветкова, В.В. Мордовцева, A.M. Вавилов и др. // Руководство для врачей. М.: Медицина, 2003. — 496 с.
122. Пекарский Д.Е. Лечение ожоговых ран: обзор / Д.Е. Пекарский // Ортопедия, травматология, протезирование. 1981. - №7. - С. 70-74.
123. Петров Р.В. Иммунология / Р.В. Петров // М., 1983. С. 26-31.
124. Пирс Э. Гистохимия / Э. Пирс // Пер. с англ. М., 1962. — 625 с.
125. Победина В.Г. Фагоцитарная функция нейтрофилов при острой гнойной хирургической инфекции / В.Г. Победина, A.M. Светухин // Сов. мед. — 1981. -№4. С. 64-67.
126. Покровская М.П., Макаров М.С. Цитология раневого экссудата как показатель процесса заживления ран / М.П. Покровская, М.С. Макаров // М., 1942.-42 с.
127. Полевов В.Н. Формирование повязок на раневой поверхности — новое направление в местном лечении ран / В.Н. Полевов, С.В. Добыш // Междунар. конф. — М., 1995.-С. 64.
128. Пономарев И.В. Лазерная хирургия сосудистых и пигментных дефектов кожи / И.В. Пономарев // М.: Медицина, 2001.- 154 с.
129. Рабин Е. Основы патологии / Е. Рабин // 3-е издание, Филадельфия: Липпинкот Уильяс и Уилкинс, 2001. - 786 с.
130. Ракчеев А.П. Основные аспекты и перспективы применения лазеров в дерматологии и косметологии / А.П. Ракчеев, В.Г. Акимов, С.М. Федоров // Вестн. дерматологии и венерологии. 1993. - N 5. - С. 35-38.
131. Реброва О.Н. Статистический анализ медицинских данных с помощью пакета программ "Статистика" / О.Н. Реброва // М.: Медиасфера, 2001. 180 с.
132. Роль EGF-стимулированного эпидермиса в регуляции заживления ран / А.А. Иванов, Д.Н. Федоров, А.В. Васильев и др. // Арх. пат. — 2002. №1. - С. 11-14.
133. Росс Р. Заживление ран / Р. Росс // Молекулы и клетки. М., 1970. - Вып. 5.-С. 134-153.
134. Самцов А.В., Озерская О.С. Классификация, сравнительная клиническая характеристика и тактика лечения келоидных и гипертрофических рубцов кожи / А.В. Самцов, О.С. Озерская // Вестн.дерм.венер.,2002.-№2.-С.70-72.
135. Сапин М.Р. Лимфатический узел / М.Р. Сапин, Н.А. Юрина, Л.Е. Этинген // М.: Медицина, 1978. 272 с.
136. Сапин М.Р. Иммунная система человека / М.Р. Сапин, Л.Е. Этинген // М.: Медицина, 1996. 304 с.
137. Саркисов Д.С. Общая патология человека / Д.С. Саркисов, М.А. Пальцев, Н.К. Хитров // М.: Медицина, 1995.-271 с.
138. Саркисов Д.С. Клинический аспект современных представлений о структурных основах адаптации и компенсации нарушенных функций / Д.С. Саркисов // Руководство, М.: Медицина, 1987. - С. 57-84.
139. Саркисов Д.С. Морфология гнойной раны в процессе лечения регулируемой среде / Д.С. Саркисов, Б.М. Астюченок // Арх. пат. 1981. - № 8. - С. 83-89.
140. Саркисов Д.С. Морфологическое и микробиологическое исследование бактериальной обсеменённости ожоговой раны и механизм проникновения микробов в кровяное русло / Д.С. Саркисов, И.И. Колкер // Тез. докл. III Всесоюзн. конф. М., 1986 - С. 48-50.
141. Саркисов Д.С. Электронно-радиографическое изучение гнойной раны человека / Д.С. Саркисов, А.А. Пальцев // Арх. пат. 1984. - №9. - С. 16-24.
142. Саркисов Д.С. Использование культивированных фибробластов для восстановления кожных покровов у тяжелообожженных / Д.С: Саркисов, В.Д. Федоров, Е.В. Глущенко // Бюл. эксп. биол. мед. 1995. - т. 19, №6. - С. 566570, С. 22-26.
143. Сафронов А.А. Вакуум-терапия трофических язв с одномоментной аутопластикой кожи / А.А. Сафронов // Новый хир. архив. 1962. - №3. - С. 42-44.
144. Светухин A.M. Комплексное лечение огнестрельных ран, осложнённых хирургической инфекцией / A.M. Светухин, Ю.А. Амиросланов // Хирургия. -1996.-№2.-С. 154.
145. Седларик К.М. Альгинаты для лечения ран: обзор / К.М. Седларик // Хирургия. 1993. - № 1. - С. 71-106.
146. Серов В.В. Соединительная ткань / В.В. Серов, А.Б. Шехтер // М.: Медицина, 1982.- 128 с.
147. Серов В.В. Воспаление / В.В. Серов, B.C. Пауков // Руководство для врачей. М., 1995.-365 с.
148. Смольянникова В.А. Ультраструктурные и иммуноморфологические особенности процесса кератинизации в норме и при наследственных ладонно-подошвенных кератодермиях / В.А. Смольянникова // Арх. пат. — 2004. №1. — С. 19-22.
149. Стручков Ю.В. Лечение гнойных ран / Ю.В. Стручков // Хирургия. 1982. - № 8. - С. 12-15.
150. Стручков А.И. Патологическая анатомия / А.И. Стручков, В.В. Серов // М.: Медицина, 1993. С. 164-168.
151. Стручков В.И. Гнойная рана / В.И. Стручков, А.В. Григорян // М.: Медицина, 1975. 310 с.
152. Сычеников И.А. Лечение ран коллагеновыми препаратами / И.А. Сычеников, А.В. Николаев // Хирургия. 1979. - №3. - С. 31-38.
153. Таран Д.Д. Ранозаживляющие свойства эфирных масел тысячелистника, полыни якутской и хамазулена при напалмовом ожоге / Д.Д. Таран, А.С. Саратиков // Воен.-мед. журнал. 1989. - № 8.- С. 50-52.
154. Теория и практика местного лечения гнойных ран / Н.А. Ляпунов, Б.М. Даценко, Н.А. Мохерт и др. // Проблемы лекарственной терапии. Киев, 1995. -190 с.
155. Толстов А.В. Рациональная химиопрофилактика местных инфекционных осложнений при ожоговой болезни / А.В. Толстов, А.А. Филимонов, П.И. Бучин // Актуальные вопросы лечения термической травмы и её последствий. -М.: Медицина, 1995. С. 44-48.
156. Толстов А.В. Усовершенствованный метод проведения операции дермабразия с применением БУТОЛа / А.В. Толстов, И.Б. Глубокова // Матер, науч. тр. XXVII науч. конф. Самарского военно- мед. института. Самара, 1999.-С.61-62.
157. Толстых П.И. Биологически активные перевязочные и шовные материалы / П.И. Толстых, В.К. Гостищев // Хирургия. 1988. - № 4. - С. 3-8.
158. Толстых П.И. Сравнительная оценка эффективности, биологически активного и обычных дренажей в профилактике нарушений заживления ран / П.И. Толстых, В.К. Гостищев // Вестн. хир. 1988. - № 2. - С. 47-51.
159. Туманов В. П. Процесс заживления ожоговой раны при трансплантации культивированных аллофибробластов / В.П. Туманов // Современные подходык разработке эффективных перевязочных средств: Мат. III Международ, конф.—М., 1998.- С. 128—129.
160. Туманов В.П. 15-летний опыт использования культивированных фибробластов для восстановления кожных покровов у тяжелобольных / В.П. Туманов, Д.С. Саркисов // Комбустиология на рубеже веков: Международ, конгр. М.,2000.- С. 168.
161. Тупицын Н.Н. Иммуноморфологическая диагностика гемобластозов / Н.Н. Тупицын // В кн.: Иммуногистохимическая диагностика опухолей человека под. ред. С.В. Петрова, А.П. Киясова. Казань, 1998. - С. 138-153.
162. Федорина Т. А. Комплексный подход к оценке погрешностей, возникающих при использовании методов количественного анализа в гистологических исследованиях / Т.А. Федорина, Г.В. Недугов // Самара, 2004. -48 с.
163. Фенчин К.М. Заживление ран / К.М. Фенчин // Киев: Здоровье, 1979. 168 с.
164. Фисенко Г.Н. Комплексное лечение рубцовых деформаций кожи / Г.Н. Фисенко // Актуальные вопросы пластической эстетической хирургии и дерматокосметологии: Сб. науч. трудов.-М., 1998.- С. 142-146.
165. Фомин Н.Н. Раневое отделяемое показатель хода заживления раны / Н.Н. Фомин // Воен.-мед. журн. - 1974. - №8. - С. 71-74.
166. Фонталин JI.H. Иммунологическая реактивность лимфоидных органов и клеток / JI.H. Фонталин // Л.: Медицина, 1967. 125 с.
167. Форштер Ф.К. К вопросу о механизме образования антител лимфоидными клетками / Ф.К. Форштер // Журнал микробиол. 1955, №1, С. 100-106.
168. Фришберг И.А. Косметические операции на лице / И.А. Фришберг // М.: Медицина, 1984.-208 с.
169. Фукс Б.Б. Биохимия и гистология ран кожи / Б.Б. Фукс // Очерки по проблеме регенерации. -М., 1966. 163 с.
170. Хитров Н.К. Реакция сосудов в очаге воспаления / Н.К. Хитров // Воспаление. М.: Медицина, 1995. - С. 39-52.
171. Хрупкин В.И. Местное применение низкоэнергетической воздушной и аргоновой плазмы в лечении гнойных ран и трофических язв / В.И. Хрупкин, А.В. Зудилин, Л.В. Писаренко // Вестн. хирургии им. Грекова. 2001. - №2. -С. 39-45.
172. Цезарь О.В. Комплексная терапия рубцов различной этиологии / О.В. Цезарь, Л.Е. Антонова // Тез. докл. II междунар. конг. эстет, мед. М.,2002.-С.22.
173. Цыплаков Д.Э. Иммунопатология / Д.Э. Цыплаков, Н.Ш. Шамсутдинов, Е.Ю. Кальчева // Учебно-методическое пособие для врачей.-Казань, 1998.-20 с.
174. Цыплаков Д.Э. Рак и регионарные лимфатические узлы (иммуногистохимическое и ультраструктурное исследование) / Д.Э. Цыплаков, С.В. Петров // Арх. пат. 1997. - №1. - С. 12-19.
175. Чекмарева И.А. Процессы репаративной регенерации в ранах при лечении биологическиактивными перевязочными средствами экспериментальноморфологическое исследование / И.А. Чекмарева// Автореф. дисс. д-ра биол. наук. -М., 2002.-С. 183.
176. Чернух A.M. Воспаление / A.M. Чернух // М., Медицина, 1979. 448 с.
177. Шага Н.Г. Эффективность лечения ожоговых ран денатурированной амниотической пленкой / Н.Г. Шага, Л.П. Логинов // Тез. докл. III 1986. М. -С. 97-99.
178. Шапошников Ю.Г. Оценка течения репаративных процессов в ранах / Ю.Г. Шапошников, Б.Я. Рудаков // Хирургия. 1984. - № 2. - С. 20-29.
179. Шевнюк Л.А. Экспериментальное изучение влияния некоторых образцов облепихового масла на процессы репаративной регенерации / Л.А. Шевнюк, В.М. Авакумов // Фармакологическая регуляция регенераторных процессов / Йошкар-Ола, 1979. С. 270-271.
180. Шехтер А.Б., Серов В.В. Грануляционная ткань: воспаление и регенерация / А.Б. Шехтер, В.В. Серов // Арх. пат. 1991. - №7. — С. 7-14.
181. Шимкевич Л.Л. Изучение гемокоагуляции у больных с локальной гнойной инфекцией методами микрокалометрии и спектрофотометрии / Л.Л. Шимкевич, М.А. Амирасланов // Клин. мед. 1978. - №11. - С. 107- 111.
182. Электронно-авторадиографическое исследование дифференцированного влияния биологически активных раневых покрытий на процессы регенерации / И.А. Чекмарева, Б.В. Втюрин, А.А. Адамян и др. // Арх. пат. 2004. - №3. - С. 19-23.
183. Юденич В.В. Пластика местными тканями язв подошвенной поверхности стопы / В.В. Юденич, В.М. Гришкевич // Вестн. хирург. 1984. - №6. - С. 99102.
184. Яремин Б.И. Применение тканевых компонентов с комплексами антисептиков в местном лечении язв и ран при заболеваниях сосудов / Б.И. Яремин // Автореф. дисс. канд. мед. наук. Самара, 2003. - С. 12- 17.
185. Abd-El-Aleem S.A. Expression of nitric oxide synthase isoforms and arginase in normal human skin and chronic venous leg ulcers / S.A. Abd-El-Aleem, M.W. Ferguson, I. Appleton // J. Pathol., 2000 Aug; 191(4): 434-442.
186. Abston S. Treatment of burns. Inhalatory injury / S. Abston, T.C. Rutan, R. Barrow // Curr. Probl. Surg. 1987. - Vol. 24, № 6. - P. 370-384.
187. Acland K.M. Lasers for dermatologist / K.M. Acland, R.J. Barlow // Br. J. Dermatol., 2000.- Vol.143, № 2. P.244 - 255.
188. Agren M.S. Studies on zinc in wound healing / M.S. Agren // Acta Derm. Venereol Suppl. (Stockh). 1990; 154: 1-36.
189. Aharinejad S. Morphological and clinical aspects of scapular fasciocutaneous free flap transfer for treatment of venous insufficiency in the lower extremity / S. Aharinejad, R.M. Dunn, F. Nourani // Clin. Anat., 1998; 11(1): 38-46.
190. Allor K.M. Stability and convergent validity of three physical activity assessments / K.M. Allor, J.M. Pivarnik // Med. Sci Sports Exerc., 2001 Apr; 33(4): 671-679.
191. Alt T. Dermabrasion. Cosmetic surgery of the skin / T. Alt // Philadelphia:1. Decker, 1991.- 320 p.
192. Andriessen M.P. Epidermal proliferation is not impaired in chronic venous ulcers / M.P. Andriessen, B.H. Bergen, K.I. Spruijt // Acta-Derm-Venereol., 1995, Nov.; 75(6): 459-462.
193. Andoniades O. Sclerotherapy with chromic glycerol in chronic venous ulcer treatment / O. Andoniades, R. Mirabella, A. Avramovic // Union Internationale de Phlebologie: XII World Congress. London Phlebology., 1995. - Vol. 1. - P. 556558.
194. Aronsson A. New methods of acne vulgaris treatment / A. Aronsson, T. Eriksson, S. Jacobsson, L. Salemark // Arch.Derm., 1997.- Vol.4.- P.235-237.
195. Apfelberg D.B. The use of epidermis over a keloid as an autograft after resection of the keloid / D.B. Apfelberg, M.R. Masser, H. Lash // J. Dermatol. Surg. Oncol., 1976,- Vol.2, N 4. P.409 - 411.
196. Arturson G. Neutrophil granulocyte functions in severely burned patients / G. Arturson//Burns. 1995. - Vol. 11, №5. - P. 309-319.
197. Arturson G. Transcapillary transport after thermal injury / G. Arturson, C.E. Jonsson // Scand. J. Plast. Reconstr. Surg. 1991. - Vol. 13, P. 29-34.
198. Bartelli A. The role of proteases in burns / A. Bartelli // Symposium on Pharmocological Treatment Burns, Amsterdam. Exe Med., 1985. P. 25-32.
199. Barr D.M. The Unna's boot as a treatment for venous ulcers / D.M. Barr // Nurse-Pract., 1996 Jul.; 21(7): 55-56, 61-64, 71-72.
200. Basse C.F., Solberg C.O. Phagocytosis of Staphylococcus aureus by human Leukocytes measured dy flow cytometry / C.F. Basse, C.O. Solberg // Procc. Soc. Exp. Boil. Med. 1983. - Vol. 174. - P. 182-254.
201. Bello Y.M., Phillips T.J. Chronic leg ulcers: types and treatment / Y.M. Bello, T.J. Phillips//Hosp-Pract-Off-Ed., 2000, Feb. 15; 35(2): 101-107; quiz 108.
202. Benedetto A.V. Dermabrasion therapy and prophylaxis of the photo aged face / A.V. Benedetto, T.D. Griffin, E.A. Benedetto //JAAD., 1992.-V.27.-P.439-447.
203. Bergan J.J. New developments in the surgical treatment of venous disease / J.J. Bergan // Cardiovasc.Surg. 1993. - №1. - P. 624-631.
204. Berman B. The treatment of hypertrophic scars and keloids / B. Berman, F. Flores // Eur. J. Dermatol., 1998.-V.8, №8.- P.591-595.
205. Bernard J. Microdermabrasion in clinical practice / J. Bernard, S.J. Beran, L. Rusin //Clin.Plast.Surg., 2000.-Vol.27, N 4.-P.571-577.
206. Beghe F. Lyophilized non-denatured type-I collagen (Condress) extracted from bovine Achilles' tendon and suitable for clinical use / F. Beghe, C. Menicagli // Int. J. Tissue React., 1992; 14 Suppl: 11-19.
207. Bishop J.B. A prospective randomised evaluator-blinded trial of two potential wound healing agents fortreament of venous stasis ulcers / J.B. Bishop, L.G. Phillips, T.A. Mustoe // J. Vase. Surg. 1992. - Aug., Vol. 16, №2. - P.251-257.
208. Bolivar Flores Y.J. Frozen allogeneic human epidermal cultured sheets for the cure of complicated leg ulcers / Y.J. Bolivar Flores, W. Kuri Harcuch // Dermatol-Surg., 1999, Aug; 25(8): 610-617.
209. Bowling A. Short Form 36 (SF36) Health Survey Questionnaire: which normative data should be used? Comparisons between the norms / A. Bowling, M. Bond, C. Jenkinson // Journal of Public Health Medicine 1999. - Vol. 21, №3 - P. 255-270.
210. Burnet F. M. Клеточная иммунология (пер. с англ.) / F. М. Burnet // М., «Мир», 1971.
211. Camirand A. Needle dermabrasion / A. Camirand, J. Doucet // Aesth.Plast.Surg, 1997.- V.21, №1-p.48-51.
212. Comparison of three methods of estimating energy expenditure: caltrac, heart rate, and video analysis / D.L. Bailor, L.M. Burke, D.V. Knudson et al. // Res Q Exerc. Sport, 1989 Dec.; 60(4): 362-368.
213. Carrol R.G. Prevention of "irreversible" hemorrhagic shock by the preservation of cellular intergrity / R.G. Carrol, S.G. lams, W.H. Pyor // Med. Hypotheses. -1987. Vol. 24, N1. - P. 69-75.
214. Chang D.W. Can a tissue-engineered skin graft improve healing of lower extremity foot wounds after revascularization? / D.W. Chang, L.A. Sanchez, F.J. Veith // Ann-Vasc-Surg., 2000 Jan; 14(1): 44-49.
215. Charles H. Developing a leg ulcer management programme / H. Charles // Prof-Nurse, 1996, Apr; 11(7): 475, 477.
216. Chew D. Gas-liguid chromatography in mierobiology / D. Chew, A. Trevor // J. Med. Lab. Technol. 1982. - vol. 36. - P. 8-11.
217. Cimminiello C. Plasma levels of tumor necrosis factor and endothelial response in patients with chronic arterial obstructive disease or Raynaud's phenomenon / C. Cimminiello, G. Arpaia, V. Toschi // Angiology, 1994, Dec; 45(12): 1015-1022.
218. Clare A. Potential roles of fibronectin in cutaneus wound repair / A. Clare // Arch. Dermatol. 1990. - Vol. 124, № 2. - 201-206.
219. Cordts P.R. A prospective randomised trial of Unna's boot versus Duoderm CGF hydroactive dressing plus compression in the management of venous leg ulcers / P.R. Cordts, L.M. Hanrahan, A.A. Rodrigues // J. Vase. Surg. 1992. - Vol. 15, №3. - P. 480-486.
220. Craig D. Early postoperative irradiation in the treatment of Keloid scars / D. Craig , D. Pearson // Brit. J. Plast. Surg., 1998.-V.18.-P. 369-373.
221. Crimbel N.S. Epithelisation in experimental burn blisters / N.S. Crimbel, L. Threlked, W. Farris // In.: Research in burns Ed. Curtis P. Artz. Philedelphia: F.A. davis, 1962.-P. 311-314.
222. Daniel F. Collagen: physiological approach to skin healing. Its application to the practical treatment of leg ulcers (author's transl) / F. Daniel, C. Foix, F. Zaegel // SemHop., 1978, Sep. 18-25; 54(25-28): 833-837.
223. De Bandt J. Cytokine response to burn inury. Relationship with protein metabolism / J. De Bandt, S. Cholett-Martin, A. Hernvann // J. Trauma. 1994. - V. 36, №6-P. 624-628.
224. Djokovic R. Modern treatment of keloids / R. Djokovic, Dj. Karadaglic //Srp.Arh.Celok. Lek., 1997.-Vol. 125, N 5-6.-P.176-180.
225. Drinker C.K. Lymphatics, lymph and lymphoid tissue. Their physiological and clinical significance / C.K. Drinker, J.M. Yoffey // Harv. Univ. Press., 1941.
226. Ellitsgaard V. Hypertrophic scars and keloids: a recurrent problem revisited / V. Ellitsgaard, N. Ellitsgaard //Acta Chir.Plast., 1997.-Vol. 39, N 3.-P.69-77.
227. Enchancement of epidermal regeneration dy biosynthetic epidermal growth factor / G. Brown, L. Cyrtsinger, J. Brightwel et al. // J. Exp. Med.- 1996. vol. 163, № 12.-P. 1319-1329.
228. Eaglestein D. Experience with biosenthetic dressings / D. Eaglestein // Amer. Acad. Dermatol., 1985. №2, - Pt. 2. - P. 434-440.
229. Florey H. Observationes on the contractility of lacteals / H. Florey // Part. I. -«J. Physiol.», 1927, №63, p. 1-18.
230. Fibronection enchancens healing of excised wounds in rats / C.Cheng, D. Martin, C. Legget et al. // Dermatol. 1988. - Vol. 124, № 2. - P. 221-225.
231. Freeman MS. Microdermabrasion / MS. Freeman // Facial Plast. Surg. Clin. North Am., 2001.- Vol.9,N2.-P.257-266.
232. Fulton J.E. Dermabrasion, chemabrasion, and laserabrasion. Historical perspectives, modern dermabrasion techniques, and future trends / J.E. Fulton // Dermatol.Surg., 1996.- vol.22, № 7.-P.619-628.
233. Ganz T. Extracellular release of antimicrobal defenses by human polymorphonuclear leukocytes / T. Ganz // Infect. Immun. 1987. - Vol. 55, № 3, -P. 568-571.
234. Gallin J.I. Human neutrohil heterogeneity exists, but is it meaningful? / J.I. Gallin // Blood. 1984. - vol. 63. - p. 977-983.
235. Georgiev M. Advantages of Surgeons Personal Duplex Mapping before Phlebectomy / M. Georgiev, S. Ricci // Dermatol. Surg. 1995. -Vol. 21, №1. - P. 97.
236. Goodwin C.W. Epidemiology of burn wounds / C.W. Goodwin, R.W. Yurt // Raven Press. New York, 1986. - Vol., 6. - P. 5-18.
237. Grinnel F. Activation of human keratinocyte fibronectine receptor function during cutaneous wound healing / F. Grinnel, T. Ken-Ichi, T. Akiz // J. Cel. Sci. -1987. Suppl. 8 - P. 199-209.
238. Goldsmith L.A. Physiology, Biochemistry and Molecular Biology of the Skin / L.A. Goldsmith //New York: Oxford University Press, 1991. P. 481-508.
239. Gorin D.R. The influence of wound geometry on the measurement of wound healing rates in clinical trials / D.R. Gorin, P.R. Cordts, W.W. La Morte // J. Vase. Surg., 1996, Mar; 23(3): 524-528.
240. Guo M. Activation of human keratinocyte migration on type 1 collagen and fibronection / M. Guo, K.-i. Toda, C. Lamre-Seimour // J. Cell. Sci. 1990. - Vol. 96, № 2. P. 197-225.
241. Guttman C. Microdermabrasion serves sear management: Avoids downsides of lasers dermabrasion, dark skin, chest, back all treated capably / C. Guttman // Dermatol.Times, 2000.-N 8.-P.11-12.
242. Hadjiiski O. Amniotic membranes for temporary burn coverage / O. Hadjiiski, N. Anatasov // Annals of burns and fire disasters. 1996. - V.9, №2. - P. 88-93.
243. Hardaway С.A. Non-ablative cutaneous remodeling with a 1.45 microm mid-infrared diode laser: phase I. / C.A. Hardaway, E.V. Ross, DJ. Barnette, D.Y. Paithankar // J. Cosmet. Laser Theor., 2002.-V.4, № 1.-P.3-8.
244. Harmon D. Dermabrasion: Long time favored procedure makes a comeback / D. Harmon //Am. Acad. Dermatol., 2002.-Vol.46.-P.842.
245. Harris I.R. Cytokine and protease levels in healing and non-healing chronic venous leg ulcers / I.R. Harris, K.C. Yee, C.E. Walters // Exp-Dermatol., 1995.
246. Harris L. Disc space infection / L. Harris, F.P. Haws // Ala Med., 1994. -63(7), 12-14.
247. Harris S. Studies on transfer of lymph node cells, transfer of cells incubated in vitro with suspensions of Shigella paradysenterial / S. Harris, T. N. Harris // J. Immunol, 1955, №74, P. 318-328.
248. Hefron J. Grafting of burn patients with allografts of cultured epidermal cells / J. Hefron, J. Firlenstein, M. Madden // Lancet. 1983. - Vol. 2, № 8347. - P. 428430.
249. Hermans R.P. Primary excision of full- thieknes burns up to 40% of body syrface, followed by micro or mechgrafts / R.P. Hermans // Research in burns, Bern. Stuttgard, Vienna: Hans Huber, 1996. P. 301-303.
250. Hunt Т.Н. Standarts for wound healing research / Т.Н. Hunt // Surgery. 1973. -Vol. 73.-P. 153-154.
251. Jenkins M. Failure of topical steroids and vitamin E to reduce postoperative scar formation following reconstructive surdgery / M. Jenkins, W. Alexander, B.C. MacMillan //J. Burn. Care Reabil., 1986.-Vol.7, N3.-P.309.
252. Jocobson S. Studies healing of dedrisan-Treated wounds / S. Jocobson // Scand. J. plast reconstr. Surg. 1977. - Vol. 10, № 2. - P. 135- 139.
253. Johnson M. Measuring healing in leg ulcers: practice considerations / M. Johnson, R. Miller//Appl-Nurs-Res., 1996, Nov.; 9 (4): 204-208.
254. Johnson M. Using cluster analysis to develop a healing typology in vascular ulcers / M. Johnson // J-Vasc-Nurs., 1997, Jun.; 15(2): 45-49.
255. Jones В.М. Indentification of B-cell and T-helper-cel defects, and of suppressor cell hyperactivity, in humoral immunodeficiency / B.M. Jones // Clin. Immunol. -1984. Vol. 32. - P. 41-54.
256. Jovanovic S. C02 laser therapy for rhinophyma / S. Jovanovic, B. Sedlmaier // Facial. PlastSurg., 1998.-№4.-P.279-286.
257. Karmarci M. The effect of topical application of bee honey on burn wound healing / M. Karmarci, M. Carmacri // The 8 international Congress on Burn .Injuries. new Delhi. - 1990. - P. 275.
258. Kirshbaum J.O. Dermabrasion on scars / J.O. Kirshbaum //Clin Plast Surg.,1977.-V.4, № 2.- P.283-287.
259. Kleinman H. Isolation and characterization of type IV procollagen, laminim and heparan sulfar proteoglycan from EHS sarcoma / H. Kleinman, M. VcGarvy // Biochemistry. 1982. - Vol. 21. - P. 6188-6193.
260. Koch RJ. Microdermabrasion / R.J. Koch, M.M. Hanasono //Facial.Plast.Surg.Clin. North. Am., 2001.-vol.9, № 3.-P.377-382.
261. Konig A. Dermabrasion for the treatment of xeroderma pigments / A. Konig, H.C. Friederich, R. Hoffmann, R. Happle //Arch. Dermatol., 1998.-v.134, № 2.-P.241-242.
262. Le Blanc N. Durometer measurements of skin induration in venous disease / N. Le Blanc, A. Falabella, H. Murata // Dermatol-Surg. 1997, Apr.; 23(4): 285.
263. Lindsey W.H. Facial keloids. A 15-year experience / W.H. Lindsey, P.T. Davis // Arch. Otolaryngol. Head Neck Surg., 1997.-Vol. 123, N 4.-P.397-400.
264. Lloyd J.R. The use of microdermabrasion for acne: a pilot study / J.R. Lloyd // Dermatol. Surg., 2001.-v.27, № 4.-P.329-331.
265. Mandy S.H. Tretinoin in the preoperative and postoperative management of dermabrasio / S.H. Mandy //J.Am.Acad.Dermatol., 1986.-Vol.15, N 7.-P.878-879.
266. Mandy S. H. Dermabrasion / S. H. Mandy //Semin.Cutan.Med.Surg.,1996.-V.15,№3.-P. 162-169.
267. Marcus J. Lasers in dermatology: a nursing perspective / J. Marcus, D.J. Goldberg//Dermatol. Nurs., 1996.-V.8, №3.-P.181-187, 191-195,204.
268. Marks R. The measurement of photodamage / R. Marks, C. Edwards //Br. J. Dermatol., 1992.-V 127, № 41.-P.7-13.
269. Mc Millan B.G. Early excision / B.G. Mc Millan // J. Trauma. 1997, - P. 7579.
270. Mc Master P.D. Indused alterations in permeability of lymphatic capillary / P.D. Mc Master, S. Hudask // J.exp.Med., 1932, № 56, P. 239-253.
271. Morelli J.G. Use of lasers in pediatric dermatology / J.G. Morelli // Dermatol.Clin., 1998. -№3.-P.489-495.
272. Moyer A.A. Treatment of large human burns with 0,5 silver nitrate solution / A.A. Moyer // Arch. Surg. 1990. - P. 812-867.
273. Munro K.J.G. Treatment of hypertrophic and keloid scars / K.J.G. Munro //J.Wound Care, 1995.-Vol. 4, N 2.-P.243-245.
274. Nagase H. In Zinc Metalloproteinases in Health and Disease / H. Nagase // Taylor and Francis, London, 1996. P. 153-204.
275. Nagase H. Activation mechanisms of matrix metalloproteinases / H. Nagase // Biol. Chem., 1997; 378(3-4): 151-160.
276. Nwomeh B.C. Physiology of the chronic wound / B.C. Nwomeh, D.R. Yager // Clin-Plast-Surg., 1998, Jul.; 25(3): 341-356.
277. Patil A. In vitro studies using zink Sulphadiazine and silcer sulphadiazine / A. Patil, A. Vartal, M. Keswani // The VIII International Congress on Burn Injuries. -New Delphi. 1990. - P. 510.
278. Phillips T. A study of the impact of leg ulcers on quality of life: financial, social, and psychologic implications / T. Phillips, B. Stanton, A. Provan // J. Am. Acad. Dermatol. 1994. - № 31. - P. 49-53.
279. Pinski J.B. Dressings for dermabrasion: new aspects / J.B. Pinski // J. Dermatol. Surg. Oncol., 1987.-Vol.l3.-P.673-683.
280. Ponec M. Use of human Keratinocyte and fibroblast cultures for toxicity studies of topically applied compounds / M. Ponec, M. Havercort // J. pharm. Sci. 1990. -Vol. 79, №4. - P. 321-326.
281. Quttke W.A. Evidence for the uptake neuronally derived choline by glial cells in leech central nervous system / W.A. Quttke, V.W. Pentreath // J. Physiol. 1990. № 42. - P. 387-408.
282. Raekallio J. Enzyme histochemistry of wound healing / J. Raekallio Stuttgart, 1970.
283. Rice P. The role of dermabrasion in lewisite-induced skin injury / Rice P., Bennet N.J., Lam D.G.K., Brown R.F.R. //Biomed.Science, 2002.-V.28.-P.8-16.
284. Rompel R. Dermabrasion of congenital nevocellular nevi: experience in 215 patients / R. Rompel, M. Moser, J. Petres // Dermatol., 1997.-Vol.194.-P.261-267.
285. Ross R. Connective tissue eels, eel proliferation snd syntesis of extracellular matrix-a review / Ross R. // Philos. Trans. Lond. 1975. - Vol. 271, № 912. - P. 247-259.
286. Sahi W.J. Cutaneous scars / W.J. Sahi, H. Clever // Int.J.Dermatol., 1994.-Vol.33.-P.681-691, 763-770.
287. Schadek M. Echo-sclerose de la grande saphene / M. Schadek // Phlebologie. -1993. Vol. 46, №4. - P. 673-682.
288. Schiller W. Use of split thickess skin grafts from a twin as a partial closure of a 65% full thickenss burn / W. Schiller, D. Caruso // 9-th Congress of the International society for Burn Injuries. - 1994. - Paris. - P. 270.
289. Sherman R.S. Varicose veins: Anatomy, reevaluation of Trendelenburg tests, and operating procedure / R.S. Sherman // Surg. Clin. North Am.- 1964. Vol. 44, №7. - P. 1369.
290. Shilling J.A. Wound Healing / J.A. Shilling // Surg. Clin. N. Amer. 1976. -Vol. 56, №4.-P. 859-875.
291. Schmid E.E. In the remodeling and turnover of collagen in soft connective tissue / E.E. Schmid // Anat. Res.- 1995.- Vol. 182, № 1.- P. 1- 14.
292. Scholz Т.A. Laser treatment of hypertrophic scars and keloids / T.A. Scholz, S.L. Vanderhooft//Dermatol. Surg., 1998.-Vol.24, N 2.-P.298-299.
293. Sigg K. Ulcus Cruris und Thrombose / K. Sigg // Berlin, 1986. 154 s.
294. Smith R. A new technique of dermabrasion / R. Smith, R.A. Dailey //Ann. Plast. Surg., 1997.-Vol.3, N 2.-P.149-150.
295. Smith D.J. Changing flora in burn and trauma units: historical perspective -experience / D.J. Smith, P.D. Thomson // J. Burns. Care. - Rehabil. - 1994, Mar-Apr.; 13.-P. 276-280.
296. Snyder U. W. Dermabrasion des Gesichtes / U. W. Snyder, M.M. Sheikh // Hautarzt., 1977. Vol.28.-P.241-245.
297. Steffe T.J., Caffee H.H. Long-term results following free tissue transfer for venous stasis ulcers / T.J Steffe, H.H. Caffee // Ann-Plast-Surg., 1998, Aug.; 41(2): 131-137; discussion 138-139.
298. Statiano-Coico L. Human keratinocyte growth factor effects in a porcine model of epidermal wound healing / L. Statiano-Coico, J. Krueger // J. Exp. Med. 1993. -Vol. 178, №8.-P. 865-878.
299. Stadelmann W.K. Physiology and healing dynamics of chronic cutaneous wounds / W.K. Stadelmann, A.G. Digenis, G.R. Tobin // Am-J-Surg., 1998, Aug; 176 (2A Suppl): 26-38.
300. Stahl R.L. Vasculitic leg ulcers in chronic myelogenous leukemia / R.L. Stahl, R. Silber//Am. J. Med., 1985, May.; 78(5): 869-872.
301. Stanley A.C. Reduced growth of dermal fibroblasts from chronic venous ulcers can be stimulated with growth factors / A.C. Stanley, H.Y. Park // J-Vasc-Surg., 1997, Dec.; 26(6): 994-999; discussion 999-1001.
302. Steed D.L. Foundations of good ulcer care / D.L. Steed // Am-J-Surg., 1998, Aug.; 176(2A Suppl): 20-25.
303. Tallman P. Initial rate of healing predicts complete healing of venous ulcers / P. Tallman // Arch.Dermatol., 1997, Oct.; 133(10): 1231-1234.
304. Tan M.H. The evaluation of aluminum oxide crystal microdermabrasion for photo damage /Tan M.H., Spencer J.M., Pires L., Ajmeri J., Skover G. //Dermatol. Surg., 2001. Vol.27, №11.- P.943-949.
305. Taylor C.R. Immunomicroscopy: A diagnostic tool for the surgical pathologist / C.R. Taylor, R.J. Cote // Philadelphia, 1994. 450 p.
306. Teepe R.G. The use of cultured autologous epidermis in the treatment of extencive burn wounds / Teepe R.G. // J. Travma. -1990. -N30. -P. 269-275.
307. Thomas S. Wound management and dressing / S. Thomas // London, 1990. P. 182.
308. The role of Apligraf in the treatment of venous leg ulcers / K. Dolynchuk, P. Hull, L. Guenther et al. //Ostomy Wound Manage, 1993 Jan-Feb; 39(1): 12-14, 16-17, 20-22 passim.
309. The tretment of deep dermal burns of the face with cultured allogeneic keratinicyte grafts in the acute phase / G. Henkel von Donnermark, E. Hofiier, S. Jagemann et al. // The Sixth Congressof the European Burn assotiation, Verona, 1995. P. 189.
310. Tournay R. La Sclerose des Varices / R. Tournay // Paris, 1985. P. 186.
311. Treatment of donor sites of skin grafts of partial thickness of purulen wounds / J. Valero, M. Cornelias, A. Alvarez et al. // International Wound Association; The IV International Congress. Tel-Aviv. - 1996. - P. 60.
312. Tsai R.Y. Aluminum oxide crystal microdermabrasion. A new technique for treating facial scarring / R.Y. Tsai, C.N. Wang // Dennatol. Surg., 1995.- V.6, №21.-P.539-542.
313. Vaicuvenas V. Prcelanas- an immobilized proteases for the treatment of purulen wounds / V. Vaicuvenas, D. Ceranaviciene // International Wound Association; The IV International Congress. Tel-Aviv. - 1996. - P. 60.
314. Valero J. Treatment of donor sites of skin grafts of partial thickness with hydrocolloid dressing / J. Valero // An. Mediter. Burn. Club. 1991. - Vol. 4, № 4. -P. 234-237.
315. Watanabe A. Serum amino acids in hepatic encephalopaty- effect of dranced chaim amino acid infusion on serum aminogram / A. Watanabe // Acta hepato-gastroenterol. 1979. - Vol. 26, №> 5. - P. 346-357.
316. Winkle van W. The fibroblast in wound healing / W. Winkle van // Surg. Gynec Obstet. 1987. - Vol. 124. - P. 369-386.
317. Whitby D. Growth Factors and wound healing / D. Whitby // The ixth Congress of the European Burn assotiation, Verona, 1995. P. 140.
318. Yamada Y. Plasma cytokine levels in patients with sevwew burn injury with reference to the relationship between infection and prognosis / Y. Yamada, S. Endo // Burns. 1996. - V. 22, № 5. - P. 587-593.
319. Yano M. A sucessfiil bypass operation for long-stading venous stasis ulcer of the leg / M. Yano, S. Tajima, M. Chikamori // Plast. Reconstr. Surg. -1992. Vol. 89, №2.-P. 330-334.
320. Trent J.F. Tissue engineered skin: Apligraf, a bi-layered living skin equivalent / J.F. Trent // Int-J-Clin-Pract., 1998, Sep.; 52(6): 408-413.
321. Whitby D. Growth factors and wound healing / D. Whitby // The ixth Congress of the European Burn Association, Verona, 1995. P. 140.
322. Vaalamo M. Distinct populations of stromal cells express collagenase-3 (MMP-13) and / M. Vaalamo, L. Mattila, N. Johansson // The ixth Congress of the European Burn Association, Verona, 1995. P. 89-96.
323. Verzar F. Ageing of collagen fiber / F. Verzar // Int. Rev. Connect. Tiss. Res., 1964; 2; 224-300.
324. Villeneuve P. A novel culturing and grafting system for the treatment of leg ulcers / P. Villeneuve, J. Hafner, J.E. Prenosil // Br-J-Dermatol, 1998, May; 138(5): 849-851.
325. Whitby D. Growth Factors and wound healing / D. Whitby // The ixth. Congress of the European Burn assotiation, Verona, 1995. p. 140.
326. Wadstrom T. Pathogenesis of wound infections / T. Wadstrom, A. Ljung // Wound healing and skin Physiology. Berlin. - Heidelberg: Springer- verlag, 1995. -P. 717.
327. Walshe С. Living with a venous leg ulcer: a descriptive study of patients' experiences / C. Walshe // J-Adv-Nurs., 1995, Dec.; 22(6): 1092-1100.
328. Williams C. Granugel: hydrocolloid gel / C. Williams, S. Inwood, C.F. Taylor//Br-J-Nurs., 1996, Feb. 8-21; 5(3): 188, 190.
329. Winkel M. Social medicine impotance and treatment strategy of chronic venous diseasses / M. Winkel // Besamte Inn. Med. 1990. - Vol. 45, №5. - P. 144-145.
330. Wound infection rates: the importance of definition and post dischange wound surveillance / D.J. Byrne, W. Lynch, A. Napier et al. // J. hosp. Inf. - 1994. -Vol. 55.-P. 1261-1267.
331. Wound covtrage with cultured autologous keratinocytes: use after burn wound excision, including biopsy follow-up / S.R. Herzog, A. Meyer, D. Woodley et all. // J. Travma. 1988. - № 28. - P. 195-198.
332. Yano M. A sucessful bypass operation for long-stading venous stasis ulcer of the leg / M. Yano, S. Tajima, M. Chikamori // Plast.Reconstr. Surg. -1992. Vol. 89, №2. - P. 330-334.
333. Yarbororough J. Dermabrasive surgery. State of the art / J. Yarbororough // Clin.Dermatol., 1987.-Vol.5.-P.75-80.
334. Zachariae H. Delayed wound healing and keloid formation following argon laser treatment or dermabrasion / H. Zachariae // Br.J.Dermatol., 1988.-V.118, N5.-P.703-706.
335. Zimmet S.E. Venous leg ulcers: modern evaluation and management / S.E. Zimmet // Dermatol-Surg., 1999, Mar; 25(3): 236-241.
336. Zisser M. Manual dermabrasion / M. Zisser, B. Kaplan, R.l. Moy // J. Amer. Acad. Dermatol., 1995.-Vol.33.-P.105-106.