Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему:Клинико-прогностическая значимость маркеров пролиферативной активности, апоптоза и межклеточной адгезии при плоскоклеточном раке легкого
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.14
Автореферат диссертации по медицине на тему Клинико-прогностическая значимость маркеров пролиферативной активности, апоптоза и межклеточной адгезии при плоскоклеточном раке легкого
На правах рукописи
Соболева Юлия Вадимовна
КЛИНИКО-ПРОГНОСТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ МАРКЕРОВ ПРОЛИФЕРАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ, АПОПТОЗА И МЕЖКЛЕТОЧНОЙ АДГЕЗИИ ПРИ ПЛОСКОКЛЕТОЧНОМ РАКЕ ЛЕГКОГО
14.00.14 - онкология
14.00.15 - патологическая анатомия
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
п 8 */.... .'.иЗ
Хабаровск-2009
003471029
Работа выполнена в Институте повышения квалификации специалистов здравоохранения МЗ Хабаровского края, г. Хабаровск.
Научные руководители:
д.м.н., доцент Коваленко Виталий Леонидович, д.м.н., профессор Коган Евгения Александровна.
Официальные оппоненты:
доктор медицинских наук, профессор Д.Е. Мацко, доктор медицинских наук О.В. Пикин.
Ведущее учреждение: ГОУВПО «Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова», Санкт-Петербург.
Защита состоится « .в V часов
на заседании Диссертационного совета (Д.208.052.01) ФГУ «НИИ онкологии им. H.H. Петрова Росмедтехнологий» 197758, Санкт-Петербург, Песочный-2, ул. Ленинградская, д. 68.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова Росмедтехнологий». Электронный вариант автореферата находится на сайте www.niioncologii.ru
Автореферат разослан « ^» _20(1^ г.
Ученый секретарь Диссертационного совета
доктор медицинских наук Е.В. Бахидзе
Цель работы
Определить клинико-прогностическое значение иммуногистохимических маркеров пролиферации, апоптоза и межклеточной адгезии при плоскоклеточном раке легкого.
Задачи исследования:
1. Изучить экспрессию иммуногистохимических маркеров пролиферации, апоптоза и межклеточной адгезии в плоскоклеточном раке легкого.
2. Оценить особенности плоскоклеточного рака легкого, используя иммуногистохимические маркеры пролиферации, апоптоза и межклеточной адгезии на различных этапах опухолевой прогрессии.
3. Изучить связи уровней экспрессии иммуногистохимических маркеров с клинико-морфологическими характеристиками плоскоклеточного рака легкого (возрастом, полом, размером опухоли, наличием некроза, состоянием внутригрудных лимфатических узлов, клинико-анатомической формой).
4. Провести анализ выживаемости больных ПРЛ в зависимости от клинико-анатомических морфологических и морфогенетических особенностей опухоли и оценить прогностическое значение изучаемых параметров.
5. Выявить возможные биологические различия между ППРЛ и ЦПРЛ.
6. Изучить возможность использования ИГХ исследований для выделения групп больных с неблагоприятным прогнозом, подлежащих дополнительной послеоперационной лекарственной терапии.
Научная новизна
1. Впервые установлены различия между клинико-анатомическими формами ПРЛ, которые выражаются в следующем:
• при центральном и периферическом раке легкого уровень экспрессии маркера р53 различен,
• уровни экспрессии маркеров пролиферативной активности, р53 и межклеточной адгезии взаимно коррелированы только в ЦПРЛ,
• реализация метастатического потенциала при ППРЛ в большей степени связана с повышением пролиферативной активности, а при ЦПРЛ - с мутацией гена супрессора р53.
2. Клинико-анатомическая форма опухоли является значимым прогностическим фактором при наличии метастазов в регионарные лимфатические узлы.
Научно-практическая значимость
Маркеры пролиферативной активности, мутации гена супрессора р53 и межклеточной адгезии (Е-кадхерин) являются вспомогательными характеристиками агрессивности опухолевого процесса и могут быть использованы в качестве дополнительных факторов прогноза с учетом клинико-анатомической формы. Их применение в клинической практике позволяет стратифицировать больных с учетом потенциальной агрессивности опухоли и может использоваться для назначения адъювантной терапии.
Положения, выносимые на защиту:
1. Маркеры пролиферативной активности, мутации гена супрессора р53 и межклеточной адгезии (Е-кадхерин) являются вспомогательными характеристиками агрессивности опухолевого процесса.
2. Имеются биологические различия между центральным (ЦПРЛ) и периферическим (ППРЛ) плоскоклеточным раком легкого (ПРЛ), которые заключаются в том, что характер взаимосвязи уровней экспрессии изучаемых ИГХ маркеров между собой и их прогностическая значимость в опухолях ЦПРЛ и ППРЛ различны. ЦПРЛ и ППРЛ различаются также по уровню экспрессии маркера мутации гена супрессора р53.
3. Анализ корреляций между уровнями экспрессии ИГХ маркеров является более чувствительным методом выявления биологических различий опухолевых процессов, чем сравнение уровней этих маркеров.
Апробация результатов. Основные результаты работы доложены на конкурсе молодых ученых и аспирантов ДВГМУ (Хабаровск, 2006 г.), V Межрегиональной Дальневосточной научно-практической конференции «Современные принципы диагностики и лечения злокачественных новообразований» (Биробиджан, 2004 г.), на 3-м конгрессе Европейского региона (Российское респираторное общество. 14-й Национальный конгресс. 22-26 июня 2004 г.), III региональной конференции молодых ученых «Актуальные вопросы экспериментальной и клинической онкологии» (г. Томск, 2008 г.), в материалах юбилейной научно-практической конференции «Современные принципы профилактики, диагностики и лечения, злокачественных новообразований.
Публикации: По теме диссертации опубликовано 14 работ.
Объем н структура диссертации
Работа изложена на//^страницах и состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы (180 источников, из них 20 отечественных и 160 иностранных. Работа иллюстрирована рисунками и »/^таблицами.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы. В исследовании использованы образцы первичных опухолей 212 больных ПРЛ, из них 200 мужчин и 12 женщин. Во всех случаях диагноз гистологически верифицирован в соответствии с классификацией опухолей легких (1997 г.). Ни у кого из больных на момент операции не было отдаленных метастазов. Распределение больных по стадиям представлено в таблице 1. Средний размер опухоли при ППРЛ составил 47,2 мм, при ЦПРЛ 41,9 мм. Срок наблюдения от 1 до 88 месяцев при обеих формах ПРЛ. Обе группы сравнимы по всем представленным показателям.
Таблица 1
Характеристика групп больных с различными клинико-анатомическими формами ПРЛ
Показатели ППРЛ ЦПРЛ
количество % количество %
Всего больных 121 57 91 43
Возраст 42-77 45-73
Пол (мужчины/женщины) 111/10 91,7 / 8,3 89/2 97,8 / 2,2
Регионарные метастазы No 79 65,3 42 46,1
N+ 42 34,7 49 53.9
Степень дифференцировки G, 43 35,5 42 46.2
59 48,8 44 48.3
G3 19 15,7 5 5,5
Некроз отсутствие 49 40,5 39 42,9
наличие 72 59,5 52 57,1
Всем больным ПРЛ проведено радикальное хирургическое лечение.
Для исследования использовались серийные криостатные срезы первичных опухолей с презентабельной гистологической картиной, толщиной 7 мкм. С использованием первичных моноклональных антител и вторичной системы детекции фирмы «Novocastra» изучены иммуногистохимические (ИГХ) маркеры пролиферативной активности (KÍ67 и топоизомераза На), апоптоза (р53) и межклеточной адгезии (Е-кадхерин). В качестве первичных использовались моноклональные антитела - KJ67 (clone NCL-MM1), топоизомераза На (clone 3F6), р53 (clone ВР53-12) и Е-кадхерин (clone 36В5). В качестве вторичных антител использованы мышиные биотилированные иммуноглобулины. Проявление осуществлялось с использованием авидин-стрептовидиновой метки и ДАБ (ABC kit vector, CA, DAB kit, «DAKO»), В качестве фонового красителя использован гематоксилин. Ставились контрольные реакции: позитивный контроль - случаи ПРЛ с известной
положительной экспрессией моноклональных антител, негативный контроль -без первичных маркеров.
Оценку пролиферативной активности (Ki67 и топоизомераза IIa) и маркеров апоптоза (р53) проводили методом определения соотношения окрашенных DABom ядер к неокрашенным из расчета на 1000 ядер опухолевых клеток в 10 полях зрения и выражали в процентах. Подсчет окрашенных клеток осуществлялся в «горячих точках», т.е. зонах их максимальной концентрации.
Экспрессию протеина р53 оценивали как количественно в процентах, так и качественно; позитивным считался любой уровень меченых клеток, негативным, соответственно, полное отсутствие продуктов реакции в опухоли.
Экспрессия Е-кадхерина оценивалась полуколичественно в баллах: окраска менее 5% опухолевых мембран расценивалась в 1 балл, более 5% -2 балла, менее 50% - 4 балла и более 50% - 6 баллов.
Статистический анализ и графический дизайн результатов выполнен в пакете программ «Statistica Microsoft Windows» версия 6.0. При анализе данных использовались непараметрические критерии: для оценки корреляций - тесты Спирмена и гамма; для выявления значимости различий между частными выборками — тесты Манна-Уитни и Вальда-Вольфовитца; в необходимых случаях применялся стандартный математический аппарат параметрических статистик. Для однофакторного анализа выживаемости использовались методы Каплана-Майера, критерии Гехана и логранковый; для многофакторного -пропорционально-регрессионная модель Кокса. Уровень статистической значимости принят р < 0,05.
Результаты исследования н их обсуждение Экспрессия пммуногистохнмичсскнх маркеров (KÏ67, топоизомераза Па, р53 н Е-кадхерин) при плоскоклсточном раке легкого.
Нами были изучены уровни экспрессии ИГХ маркеров - KJ67, топоизомеразы IIa, р53, и Е-кадхерина. Распределение уровней экспрессии маркеров ПА в описываемой когорте не является нормальным, а подчиняется закону гамма-распределения для Ki67 и Вейбулла для топоизомеразы IIa. В то же время распределение уровней экспрессии р53 в общей выборке (с включением нулевых значений) полимодальное. В связи с дискретностью оценки экспрессии Е-кадхерина и малым количеством интервалов деления исследование закона распределения не выполнено. При дальнейшем анализе использованы методы непараметрической стастистики.
В результате анализа парных корреляций исследуемых ИГХ маркеров в общей выборке выявлены достоверные (р<0,01) связи экспрессии Ki67 с топоизомеразой IIa (R=0,71), с р53 (R=0,23) и Е-кадхерином (R=0,20). Топоизомераза IIa, кроме Ki67, достоверно связана с экспрессией р53 (R=0,28,
р<0,01). Оба маркера пролиферации сходно коррелируют с другими исследуемыми параметрами, что согласуется с данными литературы.
Экспрессия нммуногпстохнмнческнх маркеров в зависимости от характеристик первпчной опухоли и метастазирования в регионарные лимфатические узлы.
Связь экспрессии изучаемых маркеров с размерами первпчной опухоли.
Статистический анализ показал отсутствие существенных различий в уровнях экспрессии ИГХ маркеров в опухолях разного размера. Размер опухоли в общей выборке достоверно коррелирует только с наличием некроза в опухоли (R = 0,43, р < 0,01).
Анализ корреляций между экспрессией исследуемых маркеров и размерами опухоли (при пороге разделения 30 мм) выявил наличие тесной связи экспрессии Ki67 с топоизомеразой IIa в обеих подгруппах (R=0,59 и R =0,73, р<0,01). Маркеры пролиферации Ki67 и топоизомераза IIa в группе опухолей до 30 мм включительно достоверно коррелируют с экспрессией Е-кадхерина (р=0,04), а в группе опухолей более 30 мм - с р53 (р< 0,01). Это, возможно, свидетельствует о различной роли Е-кадхерина на разных стадиях развития опухоли и об усилении влияния апоптоза при увеличении размеров опухоли. Отсутствие достоверных количественных изменений позволяет предположить наличие качественных изменений в активности р53 по мере опухолевой прогрессии.
Связь изучаемых маркеров со степенью дифференцпровкп опухоли.
Размер опухоли не был связан со степенью дифференцировки. Различия в уровнях экспрессии Ki67 между высоко- и умереннодифференцированным ПРЛ несущественны, однако при снижении дифференцировки опухоли от умеренно- к низкодифференцированной экспрессия Ki67 возрастает (р=0,03). Результаты множественного сравнения по критерию Краскела-Уоллиса аналогичны.
Доля р53-негативных случаев в умеренно- и низкодифференцированных опухолях одинакова, а в высокодифференцированных опухолях она на 32% выше (р=0.02-0.03), т.е. в опухолях высокой степени злокачественности экспрессия мутантного р53 встречается достоверно реже.
Оценка экспрессии Е-кадхерина проведена с условным разделением на подгруппы с «высокой» (4 и 6 баллов) и «низкой» (1 и 2 балла) экспрессией. При сравнении отношения количества опухолей с высоким и низким уровнем экспрессии Е-кадхерина при различных степенях дифференцировки обнаружено, что высокий уровень экспрессии Е-кадхерина наблюдается только в группе с промежуточной степенью дифференцировки G2.
Только в высокодифференцированных опухолях (Gi) все изучаемые ИГХ параметры взаимосвязаны с высоким уровнем достоверности (р<0,04). При снижении дифференцировки (группы G2 и G3) эти зависимости становятся
недостоверными, т.е. в низкодифференцированных опухолях имеется существенный дисбаланс между основными определяющими жизнедеятельность опухоли процессами - пролиферации, апоптоза и межклеточной адгезии. Исключением является корреляция между уровнями экспрессии маркеров пролиферативной активности - Ki67 и топоизомеразы IIa, которая остается достоверно высокой независимо от степени дифференцировки опухоли.
Связь изучаемых маркеров с наличием некроза в опухоли.
При сравнении уровней экспрессии исследуемых маркеров в зависимости от наличия или отсутствия некроза в опухоли в подгруппах с наличием метастазов в регионарные лимфатические узлы и без их поражения установлено, что экспрессия Ki67 коррелирует с наличием некроза только в метастазирующих опухолях (р=0,02), т.е. уровень ПА (по экспрессии Ki67) обусловливает развитие некробиотических процессов только в метастазирующих опухолях.
Связь изучаемых маркеров с метастазированнем в регионарные лимфатические узлы.
Различий в средних величинах исследуемых параметров между группами N| и N2 по критерию Манна-Уитни не выявлено, поэтому в дальнейшем больные с метастазами в регионарные лимфатические узлы объединены в группу N+.
Сравнение подгрупп No и N+ показало их достоверное различие по размерам опухоли и экспрессии Е-кадхерина. Средний размер первичных опухолей, метастазирующих в лимфатические узлы, на 20% больше; экспрессия Е-кадхерина, наоборот, существенно снижена, т. е. опухоли, имеющие низкую экспрессию Е-кадхерина, обладают более высокой степенью злокачественности; при повышенной экспрессии Е-кадхерина метастазы наблюдаются реже. Выявлена тенденция (р=0,07) к повышению экспрессии Ki67 при метастазировании в регионарные лимфатические узлы.
Представляют интерес не только средние величины экспрессии изучаемых маркеров, но и изменение их взаимодействия между собой в зависимости от наличия метастазов в лимфатические узлы. С этой целью проведен анализ парных корреляций в подгруппах, сформированных по заданному признаку (табл. 2).
В обеих группах уровни экспрессии изучаемых параметров не коррелируют с размером опухоли. Уровни экспрессии Ki67, топоизомеразы IIa и р53 достоверно связаны между собой, характер и сила связей в обеих группах одинаковы - различия в коэффициентах корреляции отсутствуют (р=0,41-0,45). Корреляции уровней экспрессии Ki67, топоизомеразы IIa и р53 с экспрессией Е-кадхерина незначимы в группе N0 (р=0.13-0.58) и достоверны в группе N+ (р<0,05, лишь для связи р53 с Е-кадхерином р=0.07), что свидетельствует о возрастающей роли экспрессии Е-кадхерина при метастазировании.
Таблица 2
Сравнение коэффициентов корреляции экспрессии ИГХ маркеров в группах ПРЛ зависимости от наличия метастазов в регионарные лимфоузлы
Коррелируемые параметры Nu N+
Ri Р R2 Р
Ki67 - топоизомераза IIa 0,69 <0,01 0,71 <0,01
Ki67-p53 0,25 0,03 0,21 0,10
Ki67 - Е-кадхерин 0,17 0,13 0,32 0,01
Топоизомераза IIa - р53 0,26 0,02 0,28 0,02
Топоизомераза IIa -Е-кадхерии 0,08 0,49 0,30 0,03
р53 - Е-кадхерин 0,06 0,58 0,22 0,10
Особенности экспрессии нммуногистохнмнческнх маркеров при центральной и периферической клннико-анатомической формах плоскоклеточного рака легкого.
Сравнение средних значений размеров первичной опухоли, уровней экспрессии Кл67, топоизомеразы Па, р53 и Е-кадхерина в ЦПРЛ и ППРЛ по критерию Манна-Уитни выявило достоверное различие опухолей ППРЛ и ЦПРЛ только по экспрессии р53 - в ППРЛ она выше на 32% (р<0,01). Анализ сопряженности значений р530 и р53+ в ППРЛ и ЦПРЛ показал, что различие уровней экспрессии р53 в некоторой степени обусловлено разным процентным соотношением р53-негативных значений - при ППРЛ их 20%, а при ЦПРЛ -50%. В подгруппе больных с опухолями более 30 мм с поражением лимфатических узлов при ППРЛ доля р53-негативных случаев в 3,53 раза меньше, чем при ЦПРЛ (17% и 60% соответственно), а 5-летняя выживаемость при ППРЛ в указанной группе в 1,75 раза ниже, чем при ЦПРЛ (32% и 56% соответственно).
В обеих клинических формах ПРЛ некроз в опухоли встречается примерно с одинаковой частотой.
Нами были изучены корреляции экспрессии ИГХ маркеров при различных клинико-анатомических формах ПРЛ (табл. 3).
Таблица 3
Сравнение коэффициентов корреляции экспрессии исследуемых ИГХ маркеров при различных формах ПРИ
Параметры ЦПРЛ ППРЛ Вероятность отсутствия различий между R1-R2 Р
Ri Р Rz Р
Ki67 - Е-кадхерин 0,49 <0,01 0,02 0,85 <0,01
р53 - Е-кадхерин 0,35 0,01 0,02 0,85 0,03
Ki67 - р53 0,22 0,12 0,30 <0,01 0,31
Корреляции Ki67 и р53 с Е-кадхерином при различных клинико-анатомических формах достоверно различаются по силе и направленности. При ЦПРЛ взаимосвязаны все эти параметры, в то время как при 111 IP Л коррелированы только Ki67 и топоизомераза Па с экспрессией р53; т.е. в ЦПРЛ, по мере увеличения количества пролиферирующих опухолевых клеток и гиперэкспрессии р53, усиливается межклеточная адгезия, в ППРЛ же данная зависимость отсутствует. Это свидетельствует о наличии биологических различий ЦПРЛ и ППРЛ (табл. 3).
Аналогичный анализ выполнен для подгрупп, сформированных по наличию или отсутствию метастазов в регионарные лимфатические узлы, размеру, наличию некроза и степени дифференцировки первичной опухоли. Результаты, представленные в таблице 4, показывают, что при ППРЛ экспрессия Ki67 достоверно связана с наличием метастазов в регионарные лимфатические узлы (р=0,03), а при ЦПРЛ такая связь отсутствует (р=0,62), т.е. в ППРЛ более высокая ПА свойственна метастазирующим опухолям, а в ЦПРЛ уровень ПА с регионарным метастазированием не связан. Гиперэкспрессия р53, наоборот, не связана с поражением внутригрудных лимфатических узлов в ППРЛ (р=0,41) и связана в ЦПРЛ (р=0,04). Видимо, в ЦПРЛ определяющая роль в отношении развития метастазов принадлежит мутации гена супрессора р53, тогда как в ППРЛ - повышению пролиферативной активности.
Таблица 4
Сравнение экспрессии исследуемых ИГХ маркеров при ППРЛ и ЦПРЛ
в зависимости от характеристик первичной опухоли _ и поражения лимфатических узлов _
Параметры Размер <30мм />30 мм Некроз в опухоли (есть / ист)
ППРЛ ЦПРЛ ППРЛ ЦПРЛ ППРЛ ЦПРЛ
Кл67 0,03 0,62 0,37 0,03 0,27 0,90
Топоизомераза Па 0,11 0,44 0,41 0,07 0,40 0,86
р53 0,41 0,04 0,42 0,72 0,69 0,49
Е-кадхерин 0,24 0,26 0,80 0,32 0,03 0,69
При разделении первичных опухолей по размеру (<30 мм и >30мм без учета значения символа «Т») различие в экспрессии Кл67 отсутствует в ППРЛ (р=0,37), в то же время в «малых» опухолях ЦПРЛ ПА выше (р=0,03).
При обеих клинико-анатомических формах независимо от поражения лимфоузлов наблюдается прямая сильная связь между уровнями экспрессии маркеров ПА - Кл67 и топоизомеразы Па.
Нами выполнено сравнение коэффициентов корреляции в группах в зависимости от клинико-анатомической формы ПРЛ (табл. 5).
Таблица 5
Сравнение коэффициентов корреляции уровней экспрессии в группах в зависимости от клинико-анатомической формы ПРЛ
Корреляции ИГХ маркеров ППРЛ ЦПРЛ
N0 N0
Р1 Кг 1 Рг Р1 1*2 Р2
Кл67-р53 0,29 0,02 Корреляции отсутствуют 0,24 0,32 0,18 0,31
Топоизомераза Но -р53 0,29 0,03 0,17 0,49 0,31 0,08
И67 - Е-кадхерин -0,00 0,90 0,59 <0,01 0,41 0,02
Топоизомераза На -Е-кадхерин 0,03 0,80 0,25 0,28 0,53 <0,01
р53 - Е-кадхерин 0,05 0,68 0,01 0,95 0,53 <0,01
Выявленная слабая связь обоих маркеров ПА с экспрессией р53 была достоверна только при неметастатическом ППРЛ, т.е. гиперэкспрессия р53 в определенной степени связана с усилением пролиферации (11=0,29); при поражении лимфатических узлов и при ЦПРЛ указанное взаимодействие отсутствует.
Корреляция маркеров ПА с экспрессией Е-кадхерина отсутствует в ППРЛ, в ЦПРЛ же она достоверная, положительная, средней силы (11=0.41-0,59, р=0,01-0,02), т.е. по мере роста ПА опухоли степень межклеточной адгезии повышается. Корреляция между высоким уровнем экспрессии Е-кадхерина и гиперэкспрессией р53 (Я =0,53, р<0,01) существует только в метастатическом ЦПРЛ.
Результаты расчетов позволяют высказать обоснованное предположение о том, что на реализацию метастатического потенциала в ППРЛ в большей степени влияет уровень ПА, а в ЦПРЛ - гиперэкспрессия р53 (рис.1 и 2), что свидетельствует о различии биологических свойств ППРЛ и ЦПРЛ.
Нами были исследованы биологические свойства опухоли при неметастатическом ЦПРЛ и ППРЛ при различных размерах опухоли. При этом отмечены достоверные взаимосвязи экспрессий следующих маркеров:
> Ш67- р53 в опухолях ЦПРЛ более 30 мм (II =0,65, р=0,05) и в ППРЛ менее 30 мм (11=0,62, р=0,02); топоизомераза Иа коррелирует с гиперэкспрессией р53 аналогично;
> К167 - Е-кадхерин только в ЦПРЛ менее 30 мм (11=0,64, р=0,04);
> р53 - Е-кадхерин только в ЦПРЛ более 30 мм (11=0,70, р=0,03).
Наблюдаемая в опухолях ЦПРЛ менее 30 мм связь Кл67 с экспрессией Е-кадхерина исчезает в опухолях более 30 мм, при этом появляются сильная связь экспрессии р53 и Е-кадхерина и средней силы связь экспрессии р53 и Ю67. Таким образом, в ходе опухолевой прогрессии ЦПРЛ влияние процессов пролиферации на межклеточную адгезию ослабевает, а влияние мутаций гена-супрессора р53 усиливается. Взаимодействия маркеров пролиферации и апоптоза имеют разнонаправленный характер изменения: в ППРЛ по мере роста опухоли корреляция ослабевает, тогда как в ЦПРЛ она усиливается.
Полученные результаты дают основания рассматривать ЦПРЛ и ППРЛ как опухолевые процессы, различающиеся на молекулярно-биологическом уровне.
Клннико-прогностическое значение морфологических и экспрессии нммуногнстохимических маркеров при ПРЛ.
Математически обоснована величина порога разделения уровня экспрессии Ю67 на «высокий» и «низкий». Средние значения уровня экспрессии К67 и стандарта отклонения в метастазирующих (94 случая) и не метастазирующих (121 случай) опухолях составили 37,4±12,4% и 34,0±13,9% соответственно. Ориентировочное значение точки разделения составляет 36%. Проверка
правильности разделения и уточнение ее значения cut off point проведены методами анализа выживаемости (Log-Rank Test). Оптимальная величина порога разделения - 37%. Для уровня экспрессии топоизомеразы Па порог разделения составил 30%.
Однофакторный анализ выживаемости показал, что значимыми факторами прогноза являются размер опухоли (Gehan's Wilcoxon Test р<0.01) и метастатическое поражение регионарных лимфоузлов (р0,03=); причем последний фактор значим только в группе больных ППРЛ (рис. 3).
Cumulative Proportion Survivirte (Kaplan-Meier) О Complete - Censored
Рис.3. Выживаемость больных ПРЛ в зависимости от метастатического поражения регионарных лимфатических узлов (слева ППРЛ, справа ЦПРЛ). Группа 0 - N0, группа 1 -
Степень дифференцировки опухоли ни в парном, ни во множественном сравнении на выживаемость больных ПРЛ не влияет (р=0,72). В однофакторном анализе выживаемости и в регрессионной модели Кокса значимого влияния уровня экспрессии изучаемых иммуногистохимических маркеров на выживаемость больных ПРЛ в общей выборке не выявлено, кроме экспрессии Е-кадхерина в группе больных с умереннодифференцированным ПРЛ (р=0,02).
Проведенное сравнение выживаемости больных в подгруппах с некрозом в опухоли и без него показало, что наличие некроза в опухоли достоверно ухудшает прогноз, независимо от стадии заболевания и гистологической степени злокачественности (р<0,01). В опухолях размером до 30 мм включительно в модели Кокса значимым фактором выживаемости, помимо наличия некроза (р=0,03), оказалась экспрессия Й67 при пороге разделения 37% (р=0,05).
Анализ выживаемости при различных клинико-анатомических формах ПРЛ в подгруппе больных с No не выявил достоверных различий в выживаемости больных ППРЛ и ЦПРЛ; однако анализ в подгруппе N+ показал, что выживаемость определяется клинико-анатомической формой опухоли: в ППРЛ период жизни меньше, по сравнению с ЦПРЛ (р=0,07 по Gehan's Wilcoxon Test). В многофакторной модели Кокса (р=0,04) среди анализируемых параметров значимыми оказались размер опухоли (р=0,02) и клинико-анатомическая форма ПРЛ (р=0,05); уровни экспрессии Ki67, топоизомеразы Па, р53 и Е-кадхерина не имели прогностической значимости.
Факторы прогноза при ЦПРЛ.
В регрессионной модели Кокса (р=0,04) значимым для прогноза является наличие некроза в опухоли (р<0,01); тогда как влияние таких общепринятых факторов прогноза, как метастазирование в регионарные лимфатические узлы (р=0,26), степень дифференцировки (р=0,61) и экспрессия Ki67 (р=0,41) незначимо. Влияние Е-кадхерина приближается к достоверности (р=0,06). Эти выводы полностью согласуются с результатами однофакторного анализа.
Для ЦПРЛ без метастазов в лимфатические узлы, как в модели Кокса, так и в однофакторном анализе (р<0,01), высокозначимым оказалось наличие некроза в опухоли (р<0,01) и экспрессия Е-кадхерина (р=0,03).
В то же время при метастатических опухолях ЦПРЛ оба метода анализа показали, что ни один из клинико-морфологических или ИГХ маркеров не представляет прогностической ценности.
Факторы прогноза при ППРЛ.
В многофакторном анализе выживаемости наибольшее значение имеют метастатическое поражение регионарных лимфатических узлов (р=0,01) и размер первичной опухоли (р=0,02). В однофакторном анализе подтверждается влияние на выживаемость больных наличия метастазов ( р=0,01) и размера опухоли (р<0,01).
В подгруппе больных без метастазов в лимфатические узлы в однофакторном анализе (Gehan's Wilcoxon Test) прогностически значимым было наличие некроза в опухоли (р=0,04) и ее размер (р=0,05).
В подгруппе больных с метастазами в лимфатические узлы многофакторный анализ показал статистическую значимость экспрессии р53 (р<0,01) для прогноза; однофакторный анализ (Gehan's Wilcoxon Test) подтверждает данный вывод (р=0,01).
Наиболее значимыми факторами, влияющими на выживаемость при ППРЛ, являются наличие метастазов в лимфатические узлы, размер первичной опухоли и некроз в опухоли, тогда как при ЦПРЛ - некроз в опухоли и экспрессия Е-кадхерина. При отсутствии метастазов в лимфатические узлы некроз в опухоли значимо ухудшает прогноз при обеих формах ПРЛ.
Выводы:
1. Снижение экспрессии Е-кадхерина (р=0,04) и тенденция к повышению Ш61 в первичной опухоли (р=0,07) ассоциируется с метастазированием в регионарные лимфатические узлы.
2. Рост первичной опухоли при отсутствии метастазов в регионарные лимфатические узлы не сопровождается повышением экспрессии маркеров пролиферативной активности, апоптоза и межклеточной адгезии (р=0,35-0,83).
3. Дополнительным маркером агрессивности при умеренной степени дифференцировки ПРЛ является уровень экспрессии Е-кадхерина (Р=0,02).
4. Морфологические признаки некроза в опухоли являются независимым прогностическим фактором при ПРЛ (5-летняя выживаемость при отсутствии некроза составляет 60%, а при его наличии - 40%).
5. Характер взаимосвязи уровней экспрессии изучаемых ИГХ маркеров между собой и их прогностическая значимость в опухолях ЦПРЛ и ППРЛ различны. При ЦПРЛ ухудшение прогноза сопровождается уменьшением экспрессии Е-кадхерина (р=0,03), а при ППРЛ - с гиперэкспрессией р53 (р=0,03).
6. Иммуногистохимические маркеры пролиферации (Кл67 и топоизомераза Па), апоптоза (р53) и межклеточной адгезии (Е-кадхерин) являются дополнительными параметрами степени злокачественности ПРЛ. Их использование с учетом клинико-анатомической формы целесообразно для выделения подгруппы больных с повышенным риском прогрессирования заболевания.
Практические рекомендации
Проведение ИГХ исследований с определением маркеров ПА, межклеточной адгезии и мутации р53 целесообразно для комплексной оценки агрессивности опухоли. Их использование, с учетом клинико-анатомической формы ПРЛ, позволяет:
> выделять группы больных с повышенным риском прогрессирования для послеоперационного мониторинга;
> индивидуализировать назначение адъювантной терапии.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. Соболева Ю.В. Пролиферативная активность и апоптоз при плоскоклеточном раке легкого /Швец С.И, Коваленко В.Л., Миневцев Л.П., Яковцев В.П., Соболева Ю.В. //Современные принципы диагностики и лечения злокачественных новообразований. V Межрегиональная Дальневосточная научно-практическая конференция,- Биробиджан, 2004.- С. 68-70.
2. Соболева Ю.В. Особенности временного «тренда» пролиферативной активности опухолевых клеток и экспрессии в них белка - «стража генома» в плоскоклеточном раке легкого /Соболева Ю.В., Швец С.И., Коваленко В.Л., Камалов Н.И. // Сборник научных работ 301 окружного военного клинического госпиталя и Дальневосточного государственного медицинского университета-Хабаровск, 2004,- С. 217.
3. Соболева Ю.В. Соотношение процессов пролиферации и апоптоза в плоскоклеточном раке легкого (иммуногистохимическое исследование) / Швец С.И., Коваленко В.Л., Соболева Ю.В., Камалов Н.И. // Сборник научных работ 301 окружного военного клинического госпиталя и Дальневосточного государственного медицинского университета - Хабаровск, 2004- С. 218.
4. Соболева Ю.В. Соотношение процессов пролиферации, апоптоза, ангиогенеза и метастазирования в различных гистогенетических типах рака легкого (иммуногистохимическое исследование) / Коган Е.А., Швец С.И., Коваленко В.Л., Соболева Ю.В. //Арх. пат., 2004-№ 6-т. 66,-С. 33-38.
5. Соболева Ю.В. Иммуногистохимические маркеры пролиферации, апоптоза и межклеточной адгезии плоскоклеточного рака легкого в различных возрастных группах / Коган Е.А., Коваленко В.Л., Швец С.И., Тазалов В.А., Соболева Ю.В.// 3-й конгресс Европейского региона. Российское респираторное общество. 14-й Национальный конгресс. — М., 2004 - С. 355.
6. Соболева Ю.В. Морфогенетические особенности различных клинико-анатомических форм плоскоклеточного рака легкого // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической онкологии. Сб. мат. III регион, конференции молодых ученых им. академика Н.В. Васильева. - Томск, 2008 - С. 180-181.
7. Соболева Ю.В. Immunohistocemical characteristic of squamous cell lung cancer in various age groups/ Shvets S. I., Kovalenko V.L., Tazalov V.A., Soboleva Y.V. // The 7th Asia-Oceania Regional Congress of Gerontology.- Tokyo, Japan.-November 24-28,2003,-p. 141.
8. Соболева Ю.В. Сравнительный анализ взаимодействия процессов пролиферации, апоптоза и межклеточной адгезии при центральном и периферическом плоскоклеточном раке легкого // Тихоокеанский медицинский журнал, 2009,- №.1,- С. 33-34.
9. Соболева Ю.В. Некоторые биологические различия центральной и периферической форм плоскоклеточного рака легкого /Соболева Ю.В., Кожемяко О.В. // Дальневосточный медицинский журнал, 2008- № 3. -С.63-66.
10. Соболева Ю.В. О биологических различиях центрального и периферического плоскоклеточного рака легкого / Соболева Ю.В., Кожемяко О.В. // «Врач», 2008,- №11.- С. 58-60.
11. Соболева Ю.В. Соотношение процессов пролиферации, мутации гена супрессора р53 и межклеточной адгезии и степень днфференцировки опухоли при плоскоклеточном раке легкого / Соболева Ю.В., Кожемяко О.В. // Юбилейный сборник статей «Современные принципы профилактики, диагностики и лечения злокачественных новообразований». - Хабаровск, 2008.-С.133-135.
12. Соболева Ю.В. Взаимосвязи уровней экспрессии Е-кадхерина и маркеров пролиферативной активности и мутации гена-супрессора р53 с развитием некроза при плоскоклеточном раке легкого / Соболева Ю.В., Кожемяко О.В. // Юбилейный сборник статей «Современные принципы профилактики, диагностики и лечения злокачественных новообразований». - Хабаровск, 2008.-С. 137-138.
13. Соболева Ю.В. Сравнительный анализ взаимодействия экспрессии Е-кадхерина с маркерами пролиферативной активности и мутации гена-супрессора р53 на различных этапах опухолевой прогрессии при плоскоклеточном раке легкого / Соболева Ю.В., Кожемяко О.В. // Юбилейный сборник статей «Современные принципы профилактики, диагностики и лечения злокачественных новообразований».-Хабаровск, 2008-С. 131-133.
14. Соболева Ю.В. Дополнительные прогностические факторы при центральном плоскоклеточном раке легкого / Соболева Ю.В., Кожемяко О.В., Киндялов В.М. // Юбилейный сборник статей «Современные принципы профилактики, диагностики и лечения злокачественных новообразований».-Хабаровск, 2008. - С. 135-136.
Формат 60x84/16. Бумага офсетная. Гарнитура «Тайме». Печать оперативная. Усл. печ. л. 1,1. Уч. изд. л. 1,4. Тираж 100. Заказ 1-292
Отпечатано в издательском центре института повышения квалификации специалистов здравоохранения. 680009, г. Хабаровск, ул. Краснодарская, 9.
Оглавление диссертации Соболева, Юлия Вадимовна :: 2009 :: Санкт-Петербург
Введение
Глава 1. Роль иммуногистохимических исследований в прогнозировании отдаленных результатов лечения больных со злокачественными новообразованиями (обзор литературы).
Глава 2. Материалы и методы
Глава 3. Экспрессия иммуногистохимических маркеров (Ki67, топоизомераза Иа, р53 и Е-кадхерин) при плоскоклеточном раке легкого.
Глава 4. Экспрессия иммуногистохимических маркеров в зависимости от характеристик первичной опухоли и метастазирования в регионарные лимфатические узлы.
Глава 5. Особенности экспрессии иммуногистохимических маркеров при центральной и периферической клинико- анатомических формах плоскоклеточного рака легкого.
Глава 6. Клинико-прогностическое значение морфологических и экспрессии морфогенетических маркеров при ПРЛ.
Введение диссертации по теме "Онкология", Соболева, Юлия Вадимовна, автореферат
Рак легкого занимает первое место в структуре онкологической заболеваемости в России, являясь основной причиной смертности мужского населения от злокачественных новообразований. Он объединяет группу опухолей, различающихся по клиническому течению, морфологическому строению, биологической природе, способности к метастазированию, темпам роста и прогнозу.
Основной проблемой в стадировании злокачественного новообразования является недостаточная разрешающая способность существующих методов диагностики, что не позволяет выявлять субклинические метастазы и обоснованно судить об истинной распространенности процесса. Между тем, именно скрытая диссеминация на момент диагностики обусловливает неэффективность хирургического вмешательства и требует системного лечения.
На долю плоскоклеточного PJI приходится до 60% всех форм опухолей легкого.
Учитывая генетическую полиморфность HMPJI и его низкую чувствительность к химиотерапии, высокую токсичность и стоимость применяемых препаратов, целесообразно более точно определять группу пациентов, подлежащих дополнительным видам послеоперационной терапии. Отсутствие данных о параметрах опухоли, характеризующих ее биологическую активность -скорость роста, интенсивность неоваскуляризации, метастатический потенциал, а также вероятность субклинического метастазирования - затрудняет адекватное прогнозирование течения заболевания, и, следовательно, выбор оптимальной тактики лечения. Разработка методов идентификации больных ПРЛ с плохим прогнозом должна включать изучение биологических свойств первичной опухоли.
Роль химиотерапии в лечении HMPJI остается дискуссионной. HMPJI относится к опухолям с низкой химиочувствительностью, однако химиотерапия HMPJI — одно из наиболее динамично развивающихся направлений химиотерапии (XT) в онкологии. Разработка новых схем терапии на основе традиционно применяемых препаратов платины, внедрение в клиническую практику новых противоопухолевых химиопрепаратов изменили возможности XT как местнораспространённых, так и диссеминированных форм HMPJL
В связи с этим, изучение морфогенетических маркеров, позволяющих стратифицировать больных ПРЛ по степени биологической активности опухоли, представляет особый интерес в плане оптимизации назначения лекарственной терапии.
Наиболее важными из предиктивных факторов при HMPJ1 являются маркеры пролиферативной активности, апоптоза и межклеточного взаимодействия. Их прогностическая значимость и возможность клинического применения остаются предметом дискуссий, а их экспрессия и особенности взаимодействия при различных клинико-анатомических формах опухоли изучены недостаточно.
Цель работы:
Определить клинико-прогностическое значение иммуногистохимиче-ских маркеров пролиферации, апоптоза и межклеточной адгезии при плоскоклеточном раке легкого.
Задачи исследования:
1. Изучить экспрессию иммуногистохимических маркеров пролиферации, апоптоза и межклеточной адгезии в плоскоклеточном раке легкого
2. Оценить особенности плоскоклеточного рака легкого, используя иммуно-гистохимические маркеры пролиферации, апоптоза и межклеточной адгезии на различных этапах опухолевой прогрессии
3. Изучить связи уровней экспрессии иммуногистохимических маркеров с клинико-морфологическими характеристиками плоскоклеточного рака легкого (возрастом, полом, размером опухоли, наличием некроза, состоянием внутригрудных лимфатических узлов, клинико-анатомической формой).
4. Провести анализ выживаемости больных ПРЛ в зависимости от клини-ко-анатомических, морфологических и морфогенетических особенностей опухоли и оценить прогностическое значение изучаемых параметров.
5. Выявить возможные биологические различия между ППРЛ и ЦПРЛ.
6. Изучить возможность использования ИГХ исследований для выделения групп больных с неблагоприятным прогнозом, подлежащих дополнительной послеоперационной лекарственной терапии.
Научная новизна
1. Впервые установлены различия между клинико-анатомическими формами ПРЛ, которые выражаются в следующем:
• при центральном и периферическом раке легкого уровень экспрессии маркера р53 различен,
• уровни экспрессии маркеров пролиферативной активности, р53 и межклеточной адгезии взаимно коррелированы только в ЦПРЛ,
• реализация метастатического потенциала при ППРЛ в большей степени связана с повышением пролиферативной активности, а при ЦПРЛ -с мутацией гена супрессора р53.
2. Клинико-анатомическая форма опухоли является значимым прогностическим фактором при наличии метастазов в регионарные лимфатические узлы.
Научно-практическая значимость
Маркеры пролиферативной активности, мутации гена супрессора р53 и межклеточной адгезии (Е-кадхерин) являются вспомогательными характеристиками агрессивности опухолевого процесса и могут быть использованы в качестве дополнительных факторов прогноза с учетом клинико-анатомической формы. Их применение в клинической практике позволяет стратифицировать больных с учетом потенциальной агрессивности опухоли и может использоваться для назначения адъювантной терапии.
Положения выносимые на защиту:
1. Маркеры пролиферативной активности, мутации гена супрессора р53 и межклеточной адгезии (Е-кадхерин) являются ценными вспомогательными характеристиками агрессивности опухолевого процесса.
2. Имеются биологические различия между центральным (ЦПРЛ) и периферическим (ППРЛ) плоскоклеточным раком легкого (ПРЛ) которые заключаются в том, что характер взаимосвязи уровней экспрессии изучаемых ИГХ маркеров между собой и их прогностическая значимость в опухолях ЦПРЛ и ППРЛ различны. ЦПРЛ и ППРЛ различаются также по уровню экспрессии маркера мутации гена - супрессора р53. 3. Анализ корреляций между уровнями экспрессии ИГХ маркеров является более чувствительным методом выявления биологических различий опухолевых процессов, чем сравнение уровней этих маркеров.
Заключение диссертационного исследования на тему "Клинико-прогностическая значимость маркеров пролиферативной активности, апоптоза и межклеточной адгезии при плоскоклеточном раке легкого"
Выводы:
1. Появление метастазов в регионарных лимфоузлах при ПРЛ сопровождается снижением экспрессии Е-кадхерина и повышением Ki67 в первичной опухоли. Снижение экспрессии Е-кадхерина (р-0.04) и тенденция к повышению Ki67 в первичной опухоли (р=0.07) ассоциируется с мета-стазированием в регионарные лимфатические узлы.
2. Увеличение размеров первичной опухоли, при отсутствии метастазов в регионарные лимфатические узлы, не сопровождается повышением экспрессии маркеров пролиферативной активности, апоптоза и межклеточной адгезии (р=0.35-0.83).
3. Дополнительным маркером агрессивности при умеренной степени дифференцировки ПРЛ является уровень экспрессии Е-кадхерина (р=0.02).
4. Морфологические признаки некроза в опухоли являются независимым прогностическим фактором при ПРЛ (5-летняя выживаемость при отсутствии некроза составляет 60%, а при его наличии 40%).
5. Характер взаимосвязи уровней экспрессии изучаемых ИГХ маркеров между собой и их прогностическая значимость в опухолях ЦПРЛ и ППРЛ различны. При ЦПРЛ ухудшение прогноза связано с уменьшением экспрессии Е-кадхерина (р=0,03), а при ППРЛ - с гиперэкспрессией р53 (р=0.03).
6. Иммуногистохимические маркеры пролиферации (Ki67 и топоизомераза Па), апоптоза (р53) и межклеточной адгезии (Е-кадхерин) являются дополнительными параметрами степени злокачественности ПРЛ. Их использование с учетом клинико-анатомической формы целесообразно для выделения подгруппы больных с повышенным риском прогрес-сирования заболевания.
Практические рекомендации
Проведение ИГХ исследований с определением маркеров ПА, межклеточной адгезии и мутации р53 целесообразно для комплексной оценки агрессивности опухоли. Их использование, с учетом клинико-анатомической формы ПРЛ, позволяет: выделять группы больных с повышенным риском прогрессирования, для послеоперационного мониторинга; > индивидуализировать назначение адъювантной терапии.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Соболева, Юлия Вадимовна
1. Арсеньев, А. И. Адъювантная химиотерапия и лучевая терапия не-мелкоклеточного рака легкого / А. И. Арсеньев // Практическая онкология. -2006.-№3.-С. 154-160.
2. Давыдов, М. И. Совершенствование хирургического лечения больных немелкоклеточным раком легкого / М. И. Давыдов, С. М. Вол-ков, Б. Е. Полоцкий //Российский онкологический журнал. — 2001. № 5. - С. 14-17.
3. Давыдов, М. И. Современные принципы выбора лечебной тактики и возможность хирургического лечения немелкоклеточного рака легкого // Новое в терапии рака легкого / М. И. Давыдов, Б. Е. Полоцкий. М., 2003. - С. 41 -53.
4. Иммуногистохимия биомолекулярных маркеров рака легкого / Е. А. Коган, Г. Жак, У. Кайзер и др. // Архив патологии. 1997.6. С. 23-30.
5. Коган, Е. А. Соотношение процессов пролиферации и клеточной гибели в немелкоклеточном раке легкого с железистой дифференцировкой на разных стадиях опухолевой прогрессии / Е. А. Коган, Д. А. Угрюмов // Архив патологии. 2002. - № 1. - С. 33-37.
6. Комбинированные операции при немелкоклеточном раке легкого III стадии / А. X. Трахтенберг, Г. А. Франк, К. И. Колбанов и др. // Вестник РОНЦ. -2003. № 1. - С; 50-54.
7. Лактионов, К. К. Плоскоклеточный рак легкого (значение клинико-морфологических и молекулярно-генетических характеристик опухоли в прогнозировании результатов хирургического лечения) : дис. . д-ра мед. наук / К. К. Лактионов М., 2004. - 259 с.
8. Моисеенко, В. М. Лекарственное лечение распространенного немелкоклеточного рака легкого / В. М. Моисеенко // Практическая онкология. -2006. №3. - С. 154-160, 171-178.
9. Моисеенко, В. М. Лекции по фундаментальной и клинической онкологии / В. М. Моисеенко, А. Ф. Урманчеева, К. П. Хансон. СПб., 2004. - С. 17-27, 181-196.
10. Ю.Нефробластома — тест-объект детской опухоли Электронный ресурс. / Л. А. Дурнов, Т. А. Шароев, В. И. Лебедев [и др.]. М., 2002. - режим доступа: www.oncology.tomsk.ru/nii/gournal/2002/l/information/soj-2002-1-12-18.pdf.
11. Новик, А. А. Введение в молекулярную биологию канцерогенеза / А. А. Новик, Т. А. Камилова, В. А. Цыган. М.: Изд. ГЭОТАР-МЕДИА, 2004. -261 с.
12. Пальцев, М. А. Межклеточные взаимодействия. / М. А. Пальцев, А. А. Иванов, С. Е. Северин. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: «Медицина», 2003. -182 с.
13. Патолого-анатомическая диагностика опухолей человека / под ред. Н. А. Краевский, А. В.Смолянников, Д. С. Саркисов. М., Медици-на, 1993. С. 464-475.
14. Полоцкий, Б. Е., Лактионов К. К. Рак легкого Электронный ресурс. Материалы цикла повышения квалификации врачей. Режим доступа: http://www.pror.ru/art-01.shtml. - 2008.
15. Прогностические и предсказывающие факторы у больных немелко-клеточным раком легкого / К. К. Лактионов, М. И. Давыдов, Б. Е. Полоцкий и др. // Практическая онкология. 2006. - № 3. - С. 145-153.
16. Степанова, Е. В. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров при немелкоклеточном раке легкого : дис. . канд. мед. наук / Е. В. Степанова. М., 2002. - 130 с.
17. Харченко, В. П. Рак легкого / В. П. Харченко, И. В. Кузьмин. М., Медицина, 1994. - 386 с.
18. Чиссов, В.И., Давыдов, М.И. Национальное руководство. Онкология. М., «ГЭОТАР-Медиа», 2008. - С. 631-638.
19. Шацева, Т. А. Антиген Ki-67 в оценке опухолевой пролиферации, его структура и функции / Т. А. Шацева, М. С. Мухина // Вопросы онкологии. 2004. - № 2. - С. 157-164.
20. Элиниди, В. Н. Практическая иммуноцитохимия (практические рекомендации) / В. Н. Элиниди, Н. В. Аникеева, Н. А. Максимова. СПб.: Изд-во Всероссийского центра экстремальной и радиационной медицины МЧС России, 2002. - 25 с.
21. A prognostic model of recurrences and death in stage I non-small cell lung cancer utilizing presentation, histopathology, and oncoprotein expression / D. H. Harpole, J. E. Herndon, W. G. Wolfe et al. // Cancer Res. 1995. - № 55. - P. 51-56.
22. A study of E-cadherin and beta-catenin expression and their correlation with prognosis of non-small cell lung carcinoma / R. T. Pirinen, P. Hirvikoslci, Q. Li et al. // Zhonghua Bing Liu Xue Za Zhi, 2002. 31 (4). - P. 318-321.
23. Altered expression of E-cadherin in breast cancer: patterns, mechanismst t t л л лand clinical significance / K. S. AAsgeirsson , J. G. JoAnasson , L. TryggvadoAttir et al. //Eur. J. of Cancer. 2000. - № 36. - P. 1098-1106.
24. Altered expression of E-cadherin in hepatocellular carcinoma: correlations with genetic alterations, beta-catenin expression, and clinical features / Y. Wei, J. T. Van Nhieu, S. Prigent et al. // Hepatology. 2002. - № 36 (3). - P. 692701.
25. Analysis of p53 serum antibodies in patients with head and neck squamous cell carcinoma / J. Bourhis, R. Lubin, B. Roche et al. // J. Natl. Cancer Inst. 1996. - № 88 (17). - P. 1228-1233.
26. Apoptosis, p53, and tumor cell sensitivity to aticancer agents / J. M. Brown, B. G. Wouters // Cancer Research. 1999. - № 59. - P. 1391-1399.
27. Assessment of cell proliferation antigen Ki-67, protein p53 related to apoptosis and angiogenesis in laryngeal cancer / M. Gryczynski, J. Kobos, H. Niewiadomska et al. // Otolaryng. Pol. 2000. - 54, suppl. 31. - P. 191-195.
28. Association of E-cadherin and beta-catenin immunoexpression with clinico-pathologic features in primary ovarian carcinomas / C. Faleiro-Rodrigues, T. Macedo-Pinto, D. Pereira et al. // Hum. Pathol. 2004. - № 35 (6). - P. 663-669.
29. Association of E-cadherin and beta-catenin with metastasis in nasopharyngeal carcinoma / Z. Li, Y. Ren, S. X. Lin et al // Chin. Med. J. 2004. - № 117(8). - P. 1232-1239.
30. Bcl-2 protein: a prognostic factor inverselly correlated to p53 in non-small-cell lung cancer / G. Fontanini, S. Vignati, D. Bigini et al. // Br. J. Cancer. -1995. № 71 (5). - P. 1003-1007.
31. Beavon, I. R. The E-cadherin-catenin complex in tumor metastasis: structure, function and regulation / I. R. Beavon // Eur. J. of Cancer. 2000. - Vol. 36. - P. 1607-1620.
32. Biological markers in non-small cell lung cancer. Retrospective study of 10-year follow-up after surgery / P. Carbognani, G. Tincani, P. Crafa et al. // J. Cardiovasc. Surg. (Torino). 2002. - № 43 (4). - P. 45-48.
33. Biological prognostic factors for early stage completely resected non-small cell lung cancer / L. Cagini, M. Monacelli, G, Giustozzi et al. // J. Surg. Oncol. 2000. - № 74 (1). - P. 53-60.
34. Biological relevance of E-cadherin-catenin complex proteins in primary epithelial ovarian tumors / C. Faleiro-Rodrigues, I. M. Macedo-Pinto, S. S. Maia et al. // Gynecol. Obstet. Invest. 2005. - № 60 (2). - P. 75-83.
35. Biomolecular markers of breast cancer / A. Nicolini, A. Carpi, G. Tarro //Front Biosci. 2006. - № 11. - P. 1818-1843.
36. C-erbB2 and topoisomerase II alpha protein expression independently predict poor survival in primary human breast cancer: a retrospective study / P. Fritz, С. M. Cabrera, J. Dippon et al. // Breast Cancer Res. 2005. - № 7 (3). - P. 374-384.
37. C-erbB-2 expression and codon 12 K-ras mutations both predict shortened survival for patients with pulmonary adeno-carcinomas / J. A. Kern, R. J. Sle-bos, B. Top et al. // J. Clin. Invest. 1994. - № 93. - P. 516-520.
38. Clinical significance of E-cadherin-catenin complex expression in metastatic foci of colorectal carcinoma / M. Ikeguchi, M. Malcino, N. Kaibara // J. Surg. Oncol. 2001. - № 77 (3). - P. 201-207.
39. Clinicopathologic and molecular correlations of necrosis in the primary tumor of patients with renal cell carcinoma / O. S. Lam, O. Shvarts, J. W. Said et al. //Cancer. -2005.- № 103 (12).-P. 2517-2525.
40. Combined examination of p27(Kipl), p21(Wafl/Cipl) and p53 expression allows precise estimation of prognosis in patients with gastric carcinoma / X. P. Liu, S. Kawauchi, A. Oga et al. // Histopathol. 2001. - № 39 (6). - P. 603610.
41. Comparison of DNA topoisomerase II alpha expression in small cell and non-small cell carcinoma of the lung. In search of a mechanism of chemother. response / D. G. Guinee, J. A. Holden, J. R. Benfield et al. // Cancer. 1996. - № 78 (4).-P. 729-735.
42. Contribution of c-erbB-2 and topoisomerase Ilalpha to chemoresistance in ovarian cancer / J. G. Hengstler, J. Lange, A. Kett et al. // Cancer Res. 1999. -№59 (13). - P. 3206-3214.
43. Correlation between the status of the p53 gene and survival in patients with stage I non-small cell lung carcinoma / Y. Tomizawa, T. Kohno, T. Fujita et al. // Oncogene. 1999. - № 18 (4). - P. 1007-1014.
44. Correlation between topoisomerase II alpha gene amplification and protein expression in HER-2 amplified breast cancer / V. Durbecq, C. Desmed, M. Paesmans et al. // Int. J. Oncol. 2004. - № 25 (5). - P. 1473-1479.
45. Correlation of Ki-67 and gelsolin expression to clinical outcome in renal clear cell carcinoma / H. Visapaa, M. Bui, Y. Huang et al. // Urology. 2003. - № 61 (4).-P. 845-850.
46. Cyclin, Dl, p53, and p21Wafl/Cipl expression as predictive of poor clinical outcome in serous epithelial ovarian cancer / A. Bali, P. M. O'Brien, L. S. Edwards et al. //Clin. Cancer Res. 2004. - № 10 (15). - P. 5168-5177.
47. Destructive cycles: the role of genomic instability and adaptation in carcinogenesis /L. S. Brandt, M. Kulesz-Martin // Carcinogenesis. 2004. -. Vol. 25. -№ 11.
48. Detection of gene promoter methylation and mRNA, protein expression levels of E-cadherin in nasopharyngeal carcinoma / Z. Li, S. X. Lin, Y. J. Liang // Zhonghua Bing Liu Xue Za Zhi, 2003. -№ 32 (1). P. 25-30.
49. Determinants of response to the DNA topoisomerase II inhibitors doxorubicin and etoposide in human lung cancer cell lines / K. Kasahara. Y. Fujiwara, Y. Sugimoto et al. // J. Natl. Cancer Inst. 1992. - № 84 (2). - P. 113118.
50. Differential expression of DNA topoisomerases in non-small cell lung cancer and normal lung / G. Giaccone, J. van Ark-Otte, G. Scagliotti et al. // Biochim. Biophys. Acta. 1995. - № 1264 (3). - P. 337-346.
51. Disordered beta-catenin expression and E-cadherin/CDHl promoter me-thylation in gastric carcinoma / L. Wang, F. Zhang, P. P. Wu et al. // World J. Gastroenterol. 2006. - № 12 (26). - P. 4228-4231.
52. DNA topoisomerase Ilalpha expression and the response to primary chemotherapy in breast cancer / G. MacGrogan, P. Rudolph, I. I. Mascarel et al. // Br. J. Cancer. 2003. - № 89 (4). - P. 666-671.
53. DNA topoisomerase II-alpha immunoreactivity as a marker of tumor aggressiveness in invasive breast cancer / L. Nakopoulou, A. Lazaris, N. Kavantzas et al. //Pathobiology. 2000. - № 68 (3). - P. 137-143.
54. Downregulation of E-cadherin and its undercoat proteins in pituitary growth hormone cell adenomas with prominent fibrous bodies / B. Xu, T. Sano, K., Yoshimoto et al. // Endocr. Pathol. 2002. - № 13 (4). - P. 341-351.
55. E-cadherin expression in surgically-resected non-small cell lung cancers a clinicopathological study / Y. C. Lee, С. T. Wu, C. S. Chen et al. // Thor. Card. Surg. - 2000. - № 48 (5). - P. 294-299.
56. E-cadherin gene is silenced by CpG methylation in human oral squamous cell carcinomas / S. Nakayama, A. Sasaki, H. Mese et al. // Int. J. Cancer. 2001. -№ 93 (5). - P. 667-673.
57. E-cadherin-beta-catenin adhesion complex in neuroendocrine tumors of the lung: a suggested role upon local invasion and metastasis / C. Salon, D. Moro, S. Lantuejoul et al. // Hum. Pathol. 2004. - № 35 (9). - P. 1148-1155.
58. E-cadherin-mediated cell-cell adhesion prevents invasiveness of human carcinoma cells / U. H. Frixen, J. Behrens, M. Sachs et al. // J. Cell. Biol. 1991. -№ 113.-P. 173-185.
59. Evaluations of p53 immunoreactivity, nucleolar organizer regions, and proliferating cell nuclear antigen in non-small cell lung carcinoma / E. Oyama, T. Osaki, N. Nose et al. // Anticancer Res. 2000. - № 20(1B). - P. 505-510.
60. Expression and implication of Pgp, MRP, LRP, GST-pi, Topo II alpha in tongue squamous cell carcinoma / W. D. Leng, D. Z. Wang, G. Feng et al. // Hua Xi Kou Qiang Yi Xue Za Zhi, 2004. № 22 (1). - P. 23-25.
61. Expression and significance of MRP, GST-pi, Topo Ilalpha, and LRP in gastric carcinoma. / D. Q. Yu, Y. F. Yi // Ai Zheng. 2003. - № 22 (5). - P. 496499.
62. Expression and significance of P-glycoprotein, glutathione S-transferase-pi and topoisomerase II in gastric carcinomas / F. Qin, X. Qin, X. Zhang et al. // Ai Zheng. 2002. - № 21 (2). - P. 167-170.
63. Expression correlation of Ki67 to p53, VEGF, and C-erbB-2 genes in breast cancer and their clinical significances / B.J. Li, Z. H. Zhu, J. Y. Wang et al. // Ai Zheng. 2004. - № 23 (10). - P. 1176-1179.
64. Expression of c-erbB-2 and topoisomerase Ilalpha in relation to chemo-resistance in ovarian cancer. / B. Tanner, H. Pilch, U. Schaffer et al. // Zentralbl. Gynekol. 2002 Mar. - № 124(3). - P. 176-183.
65. Expression of cyclin Dl, Ki-67 and PCNA in non-small cell lung cancer: prognostic significance and comparison with p53 and bcl-2 / V. N. Nguyen, P. Mirejovsky, L. Melinova et al. // Acta Histochem. 2000. - № 102 (3). - P. 323338.
66. Expression of cyclins D3, Bl, oncoprotein Rb and Ki67 proliferation index in non-small cell lung cancer. / S. Xynogalos, C. Lariou, Ch. Vamvouka et al. // ASCO Ann. Meet., 2002. P. 192-194.
67. Expression of drug resistance-related genes in head and neck squamous cell carcinomas and normal mucosa / S. Hirata, O. Katoh, T. Oguri et al. // Jpn. J .Cancer Res. 2000. - № 91 (1). - P. 84-90.
68. Expression of E-cadherin and beta-catenin in gastric carcinoma and its correlation with the clinicopathological features and patient survival / Y. N. Zhou, C. P. Xu, B. Han et al. // World J. Gastroenterol. 2002. - № 8 (6). - P. 987-993.
69. Expression of E-cadherin and beta-catenin in human non-small cell lung cancer and the clinical significance / S. Kase, K. Sugio, K. Yamazaki et al. // Clin. Cancer Res. 2000. - № 6 (12). - P. 4789-4796.
70. Expression of E-cadherin and catenins in early gastric cancer / Y. E. Joo, J. S. Rew, S. K. Choi et al. // J. Clin. Gastroent. 2002. - № 35 (1). - P. 3542.
71. Expression of E-cadherin (E-CD) as related to other prognostic factors and survival in breast cancer / P. Lipponen, E. H. Saarelainen, S. Aaltomaa et al. // J. Pathol. 1994. - № 174. - P. 101-109.
72. Expression of MDA-7/IL-24 and its clinical significance in resected non-small cell lung cancer / S. Ishikawa, T. Nakagawa, R. Miyahara et al. // Clin. Cancer Res. 2005. - № 11 (3). - P. 1198-1202.
73. Expression of multidrug resistance-associated protein (MRP), MDR1 and DNA topoisomerase II in human multidrug-resistant bladder cancer cell lines / S. Hasegawa, T. Abe, S. Naito et al. // Br. J. Cancer. 1995. - № 71 (5). - P. 907913.
74. Expression of surviving and proliferating cell nuclear antigen in human non-small cell lung cancer / J. M. Zhou, J. H. Zhou, Z. H. Deng et al. // Zhong Nan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 2005. - № 30 (5). - P. 544-548.
75. Expression of the E-cadherin-catenin complex in lung neuroendocrine tumors / С. E. Clavel, F. Nollet, G. Berx et al. // J. Pathol. 2001. - № 194 (1). -P. 20-26.
76. Expression of topoisomerase Ilalpha is associated with rapid cell proliferation, aneuploidy, and c-erbB2 overexpression in breast cancer / T. A. Jarvinen, J. Kononen, M. Pelto-Huikko et al. // Am. J. Pathol. 1996. - № 148 (6). - P. 20732082.
77. Expression of Y box-binding protein-1 correlates with DNA topoisomerase Ilalpha and proliferating cell nuclear antigen expression in lung cancer / C. Gu, T. Oyama, T. Osaki et al. // Anticancer Res. -2001.- 21 (4A). P. 23572362.
78. High-throughput tissue microarray analysis used to evaluate biology and prognostic significance of the E-cadherin pathway in non-small cell lung cancer / R. M. Bremnes, R. Veve, E. Gabrielson et al. // Cancer. 2002. - № 94 (2). - P. 386392.
79. Immunohistochemical and twoparameter flow cytometric studies of DNA topoisomerase Ilalpha in human epithelial ovarian carcinoma and germ cell tumor / K. Tanoguchi, H. Sasano, N. Yabuki et al. // Mod. Pathol. 1998. - № 11 (2).-P. 186-193.
80. Immunohistochemical examinations (Ki67, p53, nm23) and DNA cyto-photometry in bladder cancer / F. S. Krause, G. Feil, К. H. Bichler // Anticancer Res. 2000. - 20 (6D). - P. 5023-5028.
81. Immunohistochemical patterns for alpha- and beta-catenin, E- and N-cadherin expression in ovarian epithelial tumors / F. R. Marques, G. A. Fonsechi
82. Immunohistochemical examinations (Ki67, p53, nm23) and DNA cyto-photometry in bladder cancer Text. / F. S. Krause, G. Feil, К. H. Bichler // Anticancer Res. 2000. - 20 (6D). - P. 5023-5028.
83. Immunohistochemical patterns for alpha- and beta-catenin, E- and N-cadherin expression in ovarian epithelial tumors Text. / F. R. Marques, G. A. Fonsechi-Carvasan, L. A. De Angelo Andrade [et al.] // Gynecol. Oncol. 2004. -№94(1).-P. 16-24.
84. Immunohistochemical typing of non-small cell lung cancer on cryostat sections: correlation with clinical parameters and prognosis Text. / W.FIilbe, S. Dirnhofer, F. Oberwasserlechner [et al.] // J. Clin. Pathol. -2003. № 56 (10). - P. 736-741.
85. Increased expression of mutant forms of p53 oncogene in primary lungicancer Text. / R. Iggo, K. Gatter, J. Bartek [et al.] // Lancet. 1990. - 335 (8691). -P. 675-679.
86. Increased phosphorylation of DNA topoisomerase II in etoposide resistant mutants of human glioma cell line Text. / Y. Matsumoto, K. Kunishio, S. Nagao // J. Neurooncol. 1999. - № 45 (1). - P. 37-46.
87. Influence of E-cadherin promoter methylation and mutation of beta-catenin on invasion and metastasis of nasopharyngeal carcinoma cells Text. / Z. Li, S. X. Lin, Y.J. Liang / Zhonghua Zhong Liu Xue Za Zhi, 2003.-№25 (3). -P. 238-242.
88. Invasion and metastasis of oral cancer cells require methylation of E-cadherin and/or degradation of membranous beta catenin Text. / Y. Kudo, S. Kitajima, I. Ogawa [et al.] // Clin. Cancer Res. № 10 (16). - P. 5455-5463.
89. Ki-67 index exchange the prognostic accuracy of the urothelial superficial bladder carcinoma risk g^oup classification Text. / L. Santos, T. Amaro, C. Costa [et al.] // Int. J. Cancer. 2003. - № 105 (2). - P. 267-272.
90. Ki-67 MIB1 labelling index and the prognosis of primary TaTl urothelial cell carcinoma of the bladder Text. / A. Quintero, J. Alvarez-Kindelan, R. J. Luquc [et al.] // J. Clin. Pathol. 2006. - № 59 (1). - P. 83-88.
91. Lack of prognostic significance of p53 and K-ras mutations in primary resected non-small-cell lung cancer on E4592 Text. / J. H. Schiller, S. Adak, R. H. Feins [et al.] // J. Clin. Oncol. 2001. - № 19 (2). - P. 448-449.
92. Markers of radioresistance in squamous cell carcinomas of the head and neck: a clinicopathological and immunohistochemical study Text. / H. Raybaud-Diogene, A. Fortin, R. Morency [et al.]'// J. Clin. Oncol. 1997. - № 15 (3). - P. 1030-1038.
93. Moul, J. W. Angiogenesis, p53, bcI-2 and Ki-67 in the progression of prostate cancer after radical prostatectomy Text. / J. W. Moul // Eur. Urol. 1999. - № 35 (5-6). - P. 399-407.
94. Mutations in exon 7 and 8 of p53 as pbor prognostic factors in patients* with non-small cell lung cancer Text. / C. Huang, T. Talci, M. Adachi [et al.] // Oncogene. 1998. - № 16 (19). - P. 2469-2477.
95. Mutations of the p53 gene as a predictor of poor prognosis in patients with non-small-cell lung cancer Text. / T. Mitsudomi, T. Oyama, T. Kusano [et al.] //J. Natl. Cancer Inst. 1993.-№ 85. - P. 2018-2023.
96. Neutral-cadherin expression associated with angiogenesis in non-small-cell lung cancer patients Text. / T. Nakashima, C. Huang, D. Liu [et al.] // Br. J. Cancer. 2003. - № 88 (11). - P. 1727-1733.
97. Oncogenes and male breast carpinoma: c-erb B-2 and p53 coexpression predicts a poor survival Text. / A. Pich, E. Margaria, L. Chiusa // J. Clin.Oncol. -2000.-№ 18 (16). P. 2948-2956.
98. Hashimoto, Y. Tokuchi, M. Hayashi et al. // Cancer Res. 1999. - № 59 (21). - P. 572-577.
99. Predicting prognosis in lung cancer: use of proliferation marker, Ki67 monoclonal antibody Text. / I. N. Soomro, J. Holmes, W. F. Whimster // Рак. Med. Assoc. 1998. - № 48 (3). - P. 66-69.I
100. Predictive survival markers in patients with surgically resected non-small cell lung carcinoma Text. / J. Moldvay, P. Scheid, P. Wild [et al.] // Clin. Cancer Res. 2000. - № 6 (3). - P. 1125-1134.
101. Predictive value of cell cycle markers p53, MDM2, p21, and Ki-67 in superficial bladder tumor recurrence Text. / C. Pfister, L. Moore , P. Allard [et, al.] // Clin. Cancer Res. 1999. - № 5 (12). - P. 4079-4084.
102. Prognostic biomarker study in pathologically staged N1 non-small cell lung cancer Text. / R. Komaki, L. Milas, J. Y. Ro [et al.] // Int. J. Radiat. Oncol. Biol .Phys. 1998. - № 40 (4). - P. 787-796.
103. Prognostic evaluation of the expression of p53 and bcl-2 oncoproteins in patients with surgically resected non-small cell lung cancer Text. / R. S. Lai, J. S. Wang, H. K. Hsu [et al.] // Jpn. J. Clin. Oncol. 2002. - № 32 (10). - P. 393-397.
104. Prognostic factors in non-small cell lung cancer: a decade of progress Text. / M. D. Brundage, D. Davies, W. J. Mackillop // Chest. 2002.f - № 122. -P. 1037-1057.
105. Prognostic rclevance of cell proliferation in head and neck tumors Text. / A. Pich, L. Chiusa, R. Navone // Ann. Oncol. 2004. - № 15 (9). - P. 1319-1329.
106. Prognostic releavance of proliferating cell nuclear antigen and p53 expression in non-small cell lung cancer Text. / D. Dworakowska, S. Gozdz, E. Jassem [et al.] // Lung Cancer. 2002. - № 35 (1). - P. 35-41.
107. Prognostic significance of dyscadherin expression in patients with non-small cell lung cancer Text. / M. Tamura, Y. Ohta, Y. Tsunezuka [et al.] // J. Tho-rac. Cardiovasc. Surg. 2005. - № 130 (3). - P. 740-745.
108. Prognostic significance of Е-cadherin and beta-catenin in resected stage I non-small cell lung cancer Text. / Y. S. Choi, Y. M. Shim, S. H. Kim [et al.] // Eur. J. Cardiothor. Surg. 2003 - № 24 (3). - P. 441-449.
109. Prognostic significance of K-ras, p53, bcl-2, PCNA, CD34 in radically resected non-small cell lung cancers Text. / F. Grossi, M. Loprevite, M. Chiaramondia [et al.] // Eur. J. Cancer. 2003. - № 39 (9). - P. 1242-1250.
110. Prognostic significance of p53 and bcl-2 abnormalities in operable non-small ccll lung cancer Text. / J. Laudanski, W. Niklinska, T. Burzykowski [et al.] // Eur. Respir J. 2001. - № 17 (4). - P. 660-666.
111. Prognostic significance of p53 and ras,p21 expression in non-small celllung cancer Text. / M. Fujino, H. Dosaka-Akita, M. Harada [et al.] // Cancer. -1995. № 76 (12). - P. 2457-2463.
112. Prognostic significance of p53 mutations and 3p deletions in primary resected non-small cell lung cancer Text. / Y., Horio, T. Takahashi, T. Kuroishi [et al.] // Cancer Res. 1993. - № 53. - P. 1-4.
113. Prognostic significance of p53, bcl-2 and Ki-67 in high risk superficial bladder cancer Text. / N. E. Stavropoulos, I. Filiadis, E. Ioachim [et al.] // Anticancer Res. 2002. № 22 (6B). - P. 3759-3764.
114. Prognostic value of carbonic anhydrase IX and KI67 as predictors of survival for renal clear cell carcinoma Text. / M. H. Bui, H. Visapaa, D. Seligson [et al.] //J. Urol. 2004. -№ 171. - P. 2461-2466.
115. Prognostic value of immunohistochemical expressions of p53, HER-2/neu, and bcl-2 in stage I non-small-cell, lung cancer Text. / H. Han, R. J. Landreneau, T. S. Santucci [et al.] // Hum. Pathol. 2002. - № 33 (1). - P. 105-110.
116. Prognostic value of p53 gene mutations in a large series of node-negative breast cancer patients Text. / N. Falette, M. P. Paperin, L. Treilleux [et al.] //CancerRes. 1998. -№ 58. - P. 1451-1455.
117. Prognostic value of serum p53 antibodies in patients with resected non-j small cell lung cancer Text. / J. Laudanski, T. Burzykowski, W. Niklinska [et al.] // Lung. Canccr. 1998. - № 22 (3). - P. 191-200.
118. Proliferative status is a risk index for recurrence in primary superficial (pTa/Tl) low-grade urothelial bladder carcinoma Text. / J. S. Su, K. Arima, M. I-Iasegawa [et al.] // Hinyokika ICiyo. 2003 Nov. - № 49 (11). - P. 649-658.
119. Reduced E-cadherin expression is associated with increased lymph node1 , metastasis and unfavorable prognosis in non-small cell lung cancer. Text. / M. A.
120. Sulzer, M. P. Leers, J. A. van Noord et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1998
121. Apr.-№ 157 (4 Pt 1).-P. 1319-1323.
122. Rcduced E-cadherin immunohistochemical expression in node-negative breast carcinomas correlates with 10-year survival Text. / C. Charpin, S. Garcia, P. Bonnier [et al.] //Am. J. Clin. Pathol. 1998. - № 109. - P. 431-438.
123. Reduced expression of E-cadherin in oral squamous cell carcinoma: relationship with DNA methylation of 5' CpG island Text. / Y. Saito, II. Takazawa, K. Uzawa [et al.] // Int. J. Oncol. 1998. - № 12 (2). - P. 293-298.
124. Relationship between AgNORs, MIB-1 and oncogene expression in male breast carcinoma and papillary superficial bladder neoplasm Text. / A. Pich, E. Margaria, L. Chiusa [et al.] // Oncol. Rep. 2003. - № 10 (5). - P. 1329-1335.
125. Relationship between cancer cell proliferation, tumor angiogenesis and 201T1 uptake in non-small cell lung cancer Text. / S. Fujita, S. Nagamachi, R. Nishii [et al.] //Nucl. Med. Commun. 2006. - № 27 (12). - P. 989-997.
126. Risk of recurrence in patients with surgically resected stage I non-small cell lung carcinoma: histopathologic and immunohistochemical analysis. Text. / C. Poleri, J. L. Morero, B. Nieva [et al.] // Chest. -'2003 Jun. № 23 (6). - P. 18581867.
127. Separating favorable from unfavorable prognostic markers in breast canccr: the role of E-cadherin Text. / R. Heimann, L. Fusheng, R. McBride [et al.] // Cancer research, 2000. № 1560. - P. 298-304.
128. The clinical significance of p53, p21, and p27 expressions in rectal carcinoma Text. / B. Lebe, S. Sarioglu, S. Sokmen [et al.] // Appl. Imm. Mol. Morph. -2005. -№ 13 (1). P. 38-44.
129. The correlation between 99mTc-MIBI uptake and MIB-1 as a nuclear proliferation marker in glioma a comparative study with 201T1 Text. / S.i Nagamachi, S. Jinnouchi, K. Nabeshima [et al.] //Neuroradiology. - 2001. - № 43 (12). - P. 1023-1030.
130. The E-cadherin cell-cell adhesion complex and lung cancer invasion, metastasis, and prognosis Text. / R. M. Bremnes, R. Veve, F. R. Hirsch [et al.] // Lung Cancer. 2002. - P. 115-124.
131. The expression of beta-catenin in non-small-cell lung cancer: a clinico-pathological study Text. / J. M. Retera, M- P. Leers, M. A. Sulzer [et al.] // J. Clin. Pathol. 1998. - № 51 (12). - P. 891-894.i
132. The prognostic significance of p53, p27 kipl, p21 wafl, HER-2/neu, and1
133. Ki67 proteins expression in gastric cancer: a clinicopathological and immunohisto-' chemical study of 121 Arab patients Text. / M. S. Al-Moundhri, Y. Nirmala, I. Al-Hadabi [et al.] // J. Surg .Oncol. 2005. - № 91 (4). - P. 243-252.
134. The prognostic value of p53 and c-erb B-2 expression, proliferative activity and angiogenesis in node-negative breast carcinoma Text. / O. Erdem, A. Dursun, U. Coskun [et al.] // Tumor. 2005. - № 91 (1). - P. 46-52.
135. The role of E-cadherin expression in non-small cell lung cancer Text. / S. C. Lim, I. G. Jang, Y. C. Kim [et al.] // J. Korean Med. Sci. 2000. - № 15 (5). -P. 501-505.
136. Tonato, M. Final report of the Adjuvant Lung Project Italy (ALPI): an Italian/EORTC-LCG randomised trial of adjuvant chemotherapy in completely resected non-small cell lung cancer (NSCLC) Text. // ASCO Annual Meeting., 2002.
137. Topoisomerase II alpha and other drug resistance markers in advanced non-small cell lung cancer Text. / A. C. Dingemans, J. van Ark-Otte, S. Span [et al.] // Lung. Cancer. 2001. - № 32 (2). — P. 117-128.
138. Topoisomerase II alpha expression in breast cancer: correlation with outcome variables Text. / P. L. Depowski, S. I. Rosenthal, T. P. Brien [et al.] // Mod. Pathol. 2000. - № 13 (5). - P. 542-547.
139. Topoisomerase II alpha expression in ductal carcinoma in situ of the breast: a preliminary study Text. / B. Shpitz, Y. Bomstein, T. Zehavi [et al.] // I-Ium. Pathol. 2000. - № 31 (10). - P. 1249-1254.
140. Topoisomerase II alpha gene expression is regulated by the p53 tumor suppressor gene in non-small cell lung carcinoma patients Text. / D. Liu, C. L. Huang. K. Kameyama [et al.] // Cancer. 2002. - № 94 (8). - P. 2239-2247.
141. Using tumor markers to predict the survival of patients with metastatictrenal cell carcinoma Text. / H. L. Kim, D. Seligson, X. Liu [et al.] // J. Urol. -2005.-№ 173(5).-P. 1496-1501.
142. Value of immunohistochemical Ki-67 and p53 determinations as predictive factors of outcome in renal cell carcinoma Text. / N. Rioux-Leclercq, B. Turlin, J. Bansard [et al.] // Urology. 2000. - № 55 (4). - P. 501-505.
143. VRK1 signaling pathway in the context of the proliferation phenotype in head and neck squamous cell carcinoma Text. / C. R. Santos, M. Rodriguez-Pinilla, F. M. Vega [et al.] // Mol. Cancer Res.D 2006. - № 4(3). - P. 177-185.1. Рис.1
144. Умереннодифференцированный плоскоклеточный рак легкого (эозин гематоксилин хЮО)1. Рис.2
145. Плоскоклеточный рак легкого (иммуногистохимический маркер Ki67 xlOO)k • ЯШ* Vл "V Ф'-i^' Г- Г" »-mm1. Рис.3
146. Плоскоклеточный рак легкого (иммуногистохимический маркер р53 х400)1. Рис.4
147. Плоскоклеточный рак легкого (иммуногистохимический маркер Е-кадхерин х400)1. Рис.5
148. Плоскоклеточный рак легкого (иммуногистохимический маркер Ki67 х400)