Автореферат и диссертация по медицине (14.01.22) на тему:Клинико-патогенетическое значение исследования активности ферментов гуаниловой ветви пуринового метаболизма в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных реактивным артритом

На правах рукописи

ЕВДОКИМОВА Елена Вячеславовна

КЛИНИКО-ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ ГУАНИЛОВОЙ ВЕТВИ ПУРИНОВОГО МЕТАБОЛИЗМА В ЛИЗАТАХ ЛИМФОЦИТОВ, ЭРИТРОЦИТОВ И ПЛАЗМЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ РЕАКТИВНЫМ АРТРИТОМ

14.01.22 Ревматология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

4 ДЕК 2014

Волгоград - 2014

005556139

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении «Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной ревматологии» Российской академии медицинских наук и Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Мартемьянов Владислав Федорович

Официальные оппоненты: Мясоедова Светлана Евгеньевна

доктор медицинских наук, профессор, ГБОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия» Минздрава России, кафедра терапии и эндокринологии института последипломного образования, заведующая кафедрой

Чижов Петр Александрович

доктор медицинских наук, профессор, ГБОУ ВПО «Ярославская государственная медицинская академия» Минздрава России, кафедра факультетской терапии с военно-полевой терапией, заведующий кафедрой

Ведущая организация: Государственное бюджетное образовательное

учреждение высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Защита состоится "_2014 г. в _ часов на заседании диссертационного

совета Д 208.008.08 при ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России по адресу: 400131, г. Волгоград, пл. Павших борцов, 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке и на сайте организации (www.volgmed.ru) ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России.

Автореферат разослан "_ " _2014 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Магницкая Ольга Валерьевна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Аетуальность темы исследования и степень ее разработанности

Реактивные артриты (РеА) относятся к классу ревматических болезней костно-мышечной системы, заболеваемость которыми в последние годы растет (В.А. Насонова и др., 2000; C.B. Шубин и др., 2006; О.М. Фоломеева и др. 2007). Клинические проявления РеА сходны со многими ревматическими заболеваниями суставов, что затрудняет их дифференциацию. Запоздалая диагностика РеА негативно отражается на течении болезни и ее исходах. РеА входит в группу серонегативных спондилоартропатий (ССА) или спондило-артритов, для которых характерно наличие сакроилеита и болевого синдрома в области нижней части спины. Этот синдром наблюдается у 20-32% населения, и только 5% случаев составляют больные с ССА, что еще больше затрудняет диагностику и дифференциальную диагностику РеА (Ш.Ф. Эрдес, 2006; О.М. Фоломеева и др., 2007; О.В. Курушина и др., 2009; Н.В. Пизова, 2010). Учитывая, что этиология РеА известна, и для его диагностики иногда достаточно только определить триггерные инфекции, инициирующие это заболевание, в клинической практике диагностика РеА связана с определенными трудностями, так как проведение бактериологического исследования у всех больных с суставным синдромом экономически затратно и для пациентов, и для общества. Значимость проблемы РеА определяется и социальными аспектами, так как заболевают, в основном, люди молодого трудоспособного возраста. Исходя из этого, борьба с РеА является актуальной и социально значимой проблемой.

Патогенез РеА изучен недостаточно. Роль инфекционных факторов в индукции аутоиммунных и воспалительных процессов при РеА не вызывает сомнений, но почему одна и та же инфекция вызывает различные варианты течения и исходы болезни, а в некоторых случаях не оставляет последствий, остается неясным. Среди основных причин такой ситуации можно выделить иммуногенетическую предрасположенность человека (Т.В. Казакова и др., 2010; I. Colmegna et. al, 2004; Y. Ikeda-Dantsuji et al., 2007). В то же время хорошо известно, что иммуновоспалительные процессы часто ассоциируются с метаболическими нарушениями, которые могут поддерживать развитие патологических иммунных реакций, а возможно и инициировать их. До настоящего времени не совсем ясно, что является первичным, а что вторичным при воспалительных процессах в суставах: иммунный дисбаланс или метаболические нарушения, но их взаимосвязь не вызывает сомнений. Исходя из этого, нами у больных РеА и другими ССА были исследованы активности некото-

рых ферментов одного из важнейших метаболических циклов - пуринового метаболизма (ПМ).

Энзимы чутко реагируют изменением своей активности даже на минимальные нарушения обмена и могут являться предвестником или показателем патологических состояний организма. Интерес к изучению метаболизма пуриновых соединений связан с важной биологической ролью, которую выполняют его отдельные составные части: ферменты и промежуточные субстраты. Хорошо известно, что с активностью пуриннуклео-зидфосфорилазы (ПНФ) связаны процесс созревания Т-клеток и развитие Т-клеточного иммунитета в организме, повышение активности гуаниндезаминазы (ГДА) является специфическим индикатором печеночной патологии, а гуанозинфосфорилаза (ГФ) и гуано-зиндезаминаза (ГЗДА) принимают участие в процессе деградации пуринового нуклеозида -гуанозина, обладающего выраженными регуляторным и физиологическим свойствами. Все эти ферменты представляют собой тесно связанные друг с другом функциональные единицы одного метаболического цикла - пуринового обмена (Р.Т. Тогузов и др., 1986).

Предыдущие исследования (Е.Э. Мозговая, 2008; В.Ф. Мартемьянов, 2009) показали, что энзимы ПМ используются в дифференциации ревматоидного артрита, остеоартро-за, подагры. Исходя из этого, нам представляется, что изучение активности ГДА, ГЗДА, ПНФ и ГФ в крови больных РеА является перспективным направлением в решении актуальных проблем ранней диагностики и дифференциации РеА и других ССА.

Цель исследования. Повышение качества диагностики РеА, объективизации оценки эффективности проводимой терапии больных РеА, выявление особенностей активности ГДА, ГЗДА, ПНФ и ГФ в плазме, лизатах лимфоцитов и эритроцитов больных РеА в зависимости от клинических особенностей, этиологических факторов и энзимологических особенностей крови больных реактивным артритом, анкилозирующим спондилитом (АС) и псориатическим спондилоартритом (ПСА), способствующих их дифференциации.

Задачи исследования

1. Отработать методики определения активности ГДА, ГЗДА, ГФ, ПНФ в плазме крови, а также лизатах лимфоцитов и эритроцитов, определить границы нормальных величин активности энзимов у здоровых людей и изучить зависимость активности ферментов в трех биосредах у здоровых в зависимости от пола и возраста.

2. Изучить активность ГДА, ГЗДА, ГФ, ПНФ в трех биосредах больных реактивным артритом в зависимости от клинических особенностей: активности процесса, характера течения, стадии поражения и ФК суставов, этиологических факторов.

3. Изучить возможность использования показателей активности энзимов в качестве дополнительных объективных критериев эффективности проводимой терапии больных реактивным артритом.

4. Изучить активность ГДА, ГЗДА, ПНФ и ГФ в крови больных АС и ПСА в зависимости от активности процесса.

5. Провести сравнительные исследования активности ГДА, ГЗДА, ПНФ, и ГФ в крови больных РеА, АС и ПСА целью выявления энзимологических особенностей крови, способствующих дифференциации РеА, АС и ПСА.

Научная новизна. Впервые у больных реактивными артритами в трех биологических средах: лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови будет проведено комплексное исследование активности 4-х энзимов пуринового метаболизма: ГДА, ГЗДА, ПНФ и ГФ в процессе стационарного лечения и показано, что изученные энзимные показатели в комплексе с клиническими данными способствуют уточнению степени активности патологического процесса, характера течения, объективизации оценки эффективности проводимой терапии. Проведены сравнительные исследования активности ГДА, ГЗДА, ПНФ и ГФ в крови больных РеА, АС и ПСА и выявлены энзимологические особенности, способствующие дифференциации этих заболеваний. Выявленные нарушения пуринового метаболизма в крови больных РеА могут составить отдельные звенья патогенетических механизмов РеА.

Теоретическая и практическая значимость. Исследования активности ГДА, ГЗДА, ПНФ, ГФ в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных РеА в комплексе с клиническими данными могут быть использованы в клинической практике для выявления и уточнения степени активности патологического процесса, характера течения заболевания, что способствует назначению индивидуализированной адекватной терапии, объективизации оценки ее эффективности, разграничению фаз клинической ремиссии и обострения заболевания, дифференциации РеА, АС и ПСА.

Методология и методы исследования. В основу данного исследования входят комплексный анализ и системный подход к изучению первоисточников и различной литературы российских и зарубежных авторов по рассматриваемой теме (в области изучения

ревматологии, энзимологии). При работе над диссертацией использовались системный и материалистический научный подход, эмпирические научные методы, такие как наблюдение, измерение, сравнение, эксперимент; и методы, используемые как на эмпирическом, так и теоретическом уровне исследования (абстрагирование, анализ и синтез, индукция и дедукция, выдвижения и проверки гипотез и другие).

Положения, выносимые на защиту.

1. Изменения активности ГДА, ГЗДА, ПНФ, ГФ в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови больных РеА могут быть использованы в качестве дополнительных параклинических показателей диагностики минимальных проявлений обострения заболевания.

2. Изменения активности ГДА, ГЗДА, ПНФ и ГФ в трех биосредах у больных РеА с различной выраженностью активности патологического процесса способствуют уточнению степени активности процесса и назначению адекватной терапии.

3. Характер течения РеА отражается как на клинических проявлениях заболевания, так и на энзимологических показателях крови, и изменения активности изученных ферментов может оказать существенную помощь в дифференциации вариантов течения РеА.

4. Исследования активности ГДА, ГЗДА, ПНФ и ГФ в трех биосредах в процессе лечения в комплексе с клиническими данными могут способствовать объективизации оценки эффективности проводимой терапии.

5. Энзимные различия в крови больных РеА, ПсА и АС в комплексе с клинико-инструментальными данными способствуют дифференциации этих заболеваний.

Степень достоверности и апробация результатов.

Достоверность результатов исследования подтверждается достаточным количеством обследованных пациентов, отобранных в строгом сооттветсвии с диагностическими критериями РеА, АС и ПсА, а также в соответствии с критериями включения и исключения из исследования. Материалы диссертации базируются на данных, полученных при использовании стандартных клинико-лабораторных и статистических методов, с соблюдением традиционных принципов их выполнения и интерпретации.

С результатами энзимных исследований, возможностями энзимной диагностики и дифференциальной диагностики спондилоартритов систематически знакомятся студенты Волгоградского государственного медицинского университета, аспиранты, ординаторы и практические врачи на лекциях, научно-практических и клинических конференциях.

Основные положения диссертации опубликованы в 25 печатных работах, из них в 3-х изданиях, рецензируемых Высшей аттестационной комиссией Министерства образования и науки РФ. Материалы диссертации докладывались в 2010-2013 гг. на научно-практических конференциях Волгоградского государственного медицинского университета, НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН, на II конгрессе ревматологов в Ярославле в 2011 году, VII Всероссийской конференции ревматологов России в г. Владимир в 2012 году, VI Съезде ревматологов России в Москве в 2013 году . Методы определения активности ГДА, ГЗДА, ПНФ и ГФ в лизатах лимфоцитов, эритроцитов и плазме крови с целью выявления активности процесса и ее степени, дифференциации РеА, АС и ПСА внедрены в практику работы ГУЗ «Городская клиническая больница скорой медицинской помощи № 25» Волгограда.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ ДИССЕРТАЦИИ МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ (глава 3,4)

Под наблюдением в условиях стационара находились 54 больных РеА, из которых 30 (55,6%) - с урогенным РеА (урРеА) и 24 (44,4%) - с энтерогенным РеА (энРеА). Диагноз РеА устанавливался в соответствии с диагностическими критериями, принятыми на IV международном совещании по РеА в Берлине в 1999 году с учетом Российских критериев РеА (Э.Р. Агабабова и др., 2003).

У вех больных урогенным РеА выявлена триггерная инфекция Chlamydia trachomatis в биологическом материале соскоба из цервикального канала или уретры с использованием метода ПЦР-диагностики или ИФА. У 5-ти больных энтрогенным реактивным артритом в крови методом реакции непрямой гемагглютинации диагностирован триггерный микроорганизм Campylobacter jejuni, у 15 больных - Yersinia enterocolitica, у 3 больных -Salmonella enteritidis.

Контингент больных РеА всей группы был представлен 36 (66,7%) мужчинами и 18 (33,3%) женщинами. Средний возраст больных всей группы - 31,9±1,0 (о=7,6) лет. Средняя продолжительность заболевания - 9,39±0,85 (о=6,24) мес. Острое течение (с длительностью до 6 месяцев) определялось у 20 больных, затяжное - у 19, хроническое - у 15 больных.

На основании клинико-лабораторных данных I степень активности патологического процесса установлена у 21 (38,9%) больного, II степень - у 22 (40,7%) и III степень - у 11 (20,4%) больных, из них урРеА - у 5 (45,5%) и энРеА - у 6 (54,5%) больных. I стадия по-

ражения суставов определялась у 28 (51,9%) и II стадия - у 10 (18,5%) больных. Функциональный класс суставов 1 степени (ФК-1) установлен у 14 (25,9%), ФК-2 - у 29 (53,7%) и ФК-3 - у 11(20,4%) больных.

У всех больных преобладал суставной синдром. Наиболее часто поражались коленные суставы (70,4%), голеностопные (51,9%), суставы стоп (51,9%), явления сакроилеита отмечены в 31,5% случаев. Уретрит, цервицит, простатит во время обследования или в анамнезе (не более 8 недель) отмечались у всех больных с урогенным РеА, а конъюнктивит- в 85,2% случаев. Изменения слизистой полости рта, языка наблюдались в 14,8% случаев, эрозивный баланит- в 9,3%, афтозный стоматит - в 11,1%, ониходистрофия - 11,1% и подошвенная кератодермия - в 13% случаев.

В исследование были включены 2 контрольные группы больных. Первую группу составили 22 больных анкилозирующим спондилитом (АС), вторую группу - 21 больной псориатическим спондилоартритом (ПСА). Группа сравнения была представлена 30 практически здоровыми людьми.

Выделение лимфоцитов и эритроцитов из венозной крови проводилось по методу Boyum (1980) с использованием лимфосепа (Lympho separation mudium) фирмы "JCN Biomedical" с градиентом плотности 1,077-1,079 г/мл. Количество клеток крови подсчитыва-лось под микроскопом. Лизаты клеток готовили путем замораживания, оттаивания, центрифугирования. Активность ГДА и ГЗДА определялась фенолгипохлоритным методом (W. Caraway, 1966), ГФ •— по приросту содержания гуанина (М. Yamada et al., 1989) и ПНФ — кинетическим методом (В. Robertson et al., 1973). Активность энзимов в лизатах клеток рассчитывалась в лимфоцитах на 1 мл, содержащий (до лизиса) 1 х 107 клеток, в эритроцитах —1х109 клеток (для ГДА, ГЗДА и ГФ) и 1 х 10s клеток (для ПНФ) и выражалась в нмоль/мин/мл. Для определения триггерной инфекции проводились следующие диагностические исследования сыворотки крови: РНГА с кишечно-иерсиниозным эритроци-тарным диагностикумом, сальмонеллезным групповым жидким диагностикумом, шигел-лезным эритроцитарным диагностикумом, кампилобактериозным диагностикумом, ИФА (Human Chlamydia Trachomatis IgG, IgM, IgA ELISA TEST Kit Mabtech, Швеция), ПЦР «АмплиСенс® Chlamydia trachomatis-FL» (биологический материал - соскоб из уретры или цервикального канала). Статистическая обработка данных проводилась на ПК с использованием программы "STAT1STICA 6.0" с вычислением средней арифметической (М), ошибки средней (т), стандартного отклонения средней (а), медианы, верхних и нижних кварти-

лей, достоверности различий с использованием Меритерия Стьюдента, Вилкоксона, коэффициента корреляции по Пирсону (г). Достоверность различий считали при р<0,05. Оценивалась эффективность диагностических исследований с использованием матрицы решений (четырехпольной таблицы) с определением операционных характеристик (чувствительности, специфичности) и прогностичности результата исследования (прогностическая ценность положительного и отрицательного результатов).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Реактивный артрит (глава 6). У больных РеА всей группы при поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (таблица 1) выше активность ГДА, ПНФ, ниже ГЗДА и ГФ (все р<0,001); в лизатах лимфоцитов (таблицы 2, 5) статистически значимых не наблюдалось; в лизатах эритроцитов (таблица 3) выше активность ГДА, ниже ГЗДА (все р<0,001) и ГФ (р<0,01).

Таблица 1 - Активность энзимов в плазме крови здоровых и больных РеА при поступлении в стационар (в нмоль/мин/мл)

Контингент Кол-во б-ых Стат. пок-ли ГДА ГЗДА ПНФ ГФ

М 1,16 2,08 0,85 1,09

Здоровые 30 а m 0,13 0,02 0,29 0,05 0,09 0,02 0,12 0,02

Больные РеА, вся группа 54 М сг m 1,30 0,10 0,01 1,9 0,10 0,01 1,00 0,09 0,01 1,02 0,08 0,01

РеА, I степень активности 21 М а m 1,21 0,05 0,01 1,99 0,08 0,02 0,93 0,06 0,01 1,06 0,08 0,02

РеА, II степень активности 22 М а m 1,31 0,06 0,01 1,88 0,06 0,01 1,01 0,07 0,02 1,01 0,07 0,01

РеА, III степень активности 11 М а т 1,44 0,02 0,01 1,77 0,05 0,01 1,11 0,03 0,01 0,97 0,05 0,02

Урогенный РеА, вся группа 30 М а ГП 1,28 0,10 0,02 1,91 0,10 0,02 0,99 0,09 0,02 1,04 0,09 0,02

Энтеренный РеА, вся группа 24 М а m 1,32 0,10 0,02 1,89 0,10 0,02 1,01 0,09 0,02 1,00 0,05 0,01

Через 7-8 дней лечения достоверно наблюдалось в плазме снижение активности ГДА, ПНФ, повышение активности ГЗДА. Перед выпиской из стационара, по сравнению со здоровыми, большинство энзимных показателей в 3 биологических средах не имели

статистически значимых различий (р>0,05), и только активность ГЗДА в лимфоцитах была выше (р<0,05).

У больных РеА всей группы с 1 степенью активности при поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (таблица 1) выше активность ПНФ (р<0,01), в лимфоцитах (таблица 2) выше активность ГЗДА (р<0,001), ГФ (р<0,001), ниже ГДА и ПНФ (р<0,01), в эритроцитах (таблица 3) ниже активность ГЗДА (р<0,01). С ростом активности патологического процесса у больных РеА в трех биосредах наблюдались однонаправленные изменения активности энзимов: увеличение активности ГДА и ПНФ и снижение активности ГЗДА и ГФ, однако, между всеми степенями активности выявлены значимые различия ферментативной активности.

У больных с рентгенологической стадией 0, по сравнению со стадией I, в плазме и лимфоцитах достоверных различий не определялось (все р>0,05), в эритроцитах ниже активность ГДА; по сравнению с больными РеА со II стадией, в плазме ниже активность ГЗДА (р<0,01), выше ПНФ (р<0,05); в лизатах лимфоцитов выше активность ГДА (р<0,05), ПНФ (р<0,01), ниже активность ГЗДА (р<0,01) и ГФ (р<0,01); в лизатах эритроцитов ниже активность ГДА (р<0,05). У больных РеА с I стадией, по сравнению с больными РеА с II стадией, в плазме ниже активность ГЗДА (р<0,05); в лимфоцитах энзимные различия недостоверны; в лизатах эритроцитов выше активность ПНФ (р<0,01), ниже ГФ (р<0,001).

Выявлена и определенная направленность в изменениях энзимной активности в зависимости от ФК суставов: чем выше ФК суставов, тем в трех биосредах выше активность ГДА. ПНФ, и ниже ГЗДА и ГФ.

У больных с острым течением, по сравнению с больными с затяжным течением, в плазме выше активность ГДА (р<0,001), ПНФ (р<0,001), ниже ГЗДА (р<0,001) и ГФ (р<0,01), в лимфоцитах выше активность ГДА (р<0,001), ПНФ (р<0,001), ниже ГЗДА (р<0,001) и ГФ (р<0,01), в эритроцитах выше активность ПНФ (р<0,001), ниже ГФ (р<0,001); по сравнению с больными РеА с хроническим течением, в плазме выше активность ГДА (р<0,001), ПНФ (р<0,001), ниже активность ГЗДА (р<0,001) и ГФ (р<0,001), в лимфоцитах выше активность ГДА (р<0,001), ПНФ (р<0,001), ниже ГЗДА и ГФ (р<0,001), в эритроцитах выше активность ПНФ (р<0,001), ниже ГФ (р<0,001).

У больных с РеА с затяжным течением, по сравнению с больными с хроническим течением, в плазме выше активность ГДА (р<0,001), ниже ГЗДА (р<0,01), в лимфоцитах вы-

10

ше активность ПНФ (р<0,05) и ниже ГФ (р<0,05); в эритроцитах выше активность ПНФ (Р<0,01).

Учитывая различия этиологических факторов в развитии урогенного и энтерогенного РеА, нами были проведены энзимные исследования в крови больных этих групп.

Урогенный РеА (глава 7). При поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (таблица 1) выше активность ГДА, ПНФ (все р<0,001), ниже ГЗДА (р<0,01), в лимфоцитах (таблица 2) ниже активность ГДА (р<0,05), ПНФ (р<0,01), выше ГЗДА и ГФ (р<0,001), в эритроцитах (таблица 3) выше активность ГДА (р<0,05), ниже ГЗДА (р<0,001).

После 7-8 дней лечения наметилась тенденция к нормализации энзимной активности. Перед выпиской из стационара большинство энзимных показателей в трех биосредах не имели отличий от здоровых (р>0,05), и только активность ГЗДА в лимфоцитах хотя и снизилась, но так и осталась повышенной (р<0,001).

Таблица 2 - Активность энзимов в лизатах лимфоцитов здоровых и больных РеА при поступлении в стационар (в нмоль/мин/мл -107клеток)

Контингент Кол-во б-ых Стат. пок-ли ГДА ГЗДА ПНФ ГФ

М 11,7 7,49 34,5 11,5

Здоровые 30 а m 0,99 0,18 0,73 0,13 3,71 0,68 1,45 0,26

Больные РеА, вся группа 54 М а m 11,7 1,12 0,15 8,10 2,41 0,33 33,9 4,48 0,61 12,21 2,17 0,30

РеА, 1 степень активности 21 М ст m 10,8 0,90 0,2 9,78 2,46 0,54 30,5 4,57 1,00 13,8 2,30 0,5

РеА, II степень активности 22 М сг ш 11,9 0,7 0,15 7,52 1,84 0,39 35,4 3,11 0,66 11,6 1,53 0,33

РеА, III степень активности 11 М с ш 13,0 0,53 0,16 6,05 0,60 0,18 37,3 1,60 0,48 10,6 0,70 0,21

Урогенный РеА, вся группа 30 М а m 11.1 0,99 0,18 9,35 2,49 0,45 31,61 3,98 0,73 13,2 2,13 0,39

Энтеренный РеА, вся группа 24 М а ш 12,4 0,81 0,17 6,54 1,01 0,21 36,7 3,34 0,68 10,9 1,45 0,30

У больных урРеА I степенью активности, по сравнению со здоровыми, определялись следующие достоверные энзимные изменения: выше активности ПНФ (р<0,05) в плазме; в лимфоцитах снижение активности ГДА и ПНФ (р<0,001), повышение - ГЗДА и ГФ (р<0,001). Через 7-8 дней терапии отмечалась тенденция к нормализации активности энзи-

мов, а к выписке активности энзимов не имели статистических отличий от здоровых (все р>0,05).

У больных урРеА II степенью активности, по сравнению со здоровыми, в плазме -выше активности ГДА, ПНФ (все р<0,001) и ниже ГЗДА и ГФ (все р<0,05); в лимфоцитах выше активности ГЗДА (р<0,05); в эритроцитах - ниже активности ГЗДА (р<0,001). Через 7-8 дней терапии отмечалась тенденция к нормализации активности энзимов, а к выписке активности энзимов не имели статистических отличий от здоровых, (все р>0,05).

У больных урРеА III степенью активности, по сравнению со здоровыми, в плазме и эритроцитах - повышение активности ГДА, ПНФ (р<0,001) и (р<0,05) и снижение ГЗДА и ГФ (р<0,001) и (р<0,05); в лимфоцитах - ниже активность ГЗДА (р<0,001).

Выявлены существенные энзимные различия у больных урРеА в зависимости от характера течения заболевания.

Энтерогенный РеА (глава 8). У больных с энтерогенной формой РеА всей группы при поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (таблица 1) выше активность ГДА, ПНФ (р<0,001), ниже активность ГЗДА (р<0,01) и ГФ (р<0,001), в лимфоцитах (таблица 2) выше активность ГДА (р<0,01), ПНФ (р<0,05), ниже активность ГЗДА (р<0,001), в эритроцитах (таблица 3) выше активность ГДА (р<0,01), ПНФ (р<0,05), ниже ГЗДА (р<0,001) и ГФ (р<0,01).

У больных с I степенью активности энРеА активность изучаемых энзимов в плазме и лизатах лимфоцитов статистически значимых отличий от здоровых не имела (все р>0,05). Лишь в лизатах эритроцитов определялось снижение активности ГЗДА (р<0,01). Через 7-8 дней терапии отмечалась тенденция к нормализации активности энзимов, а к выписке активность всех ферментов не имела статистических отличий от здоровых (все р>0,05).

У больных с II степенью активности энРеА в плазме и лимфоцитах выше активности ГДА, ПНФ (р<0,001) и ниже ГЗДА и ГФ (р<0,05), в эритроцитах - выше активность ГДА (р<0,001) и ниже активность ГЗДА (р<0,001). Через 7-8 дней терапии достоверно увеличилась активность ГЗДА (р<0,05) в плазме. К выписке активность всех ферментов не имела статистических отличий от здоровых (все р>0,05).

У больных с III степенью активности энРеА в плазме и эритроцитах выше активности ГДА, ПНФ (р<0,001) и ниже ГЗДА и ГФ (р<0,01); в лимфоцитах - выше активности ГДА (р<0,001), ПНФ (р<0,05) и ниже ГЗДА (р<0,001). Через 7-8 дней терапии в плазме

снизились активности ГДА и ПНФ (р<0,001), повысилась активность ГЗДА (р<0,01); в лимфоцитах — снизилась активность ГДА (р<0,05). Так, чем выше степень активности патологического процесса, тем в плазме и лимфоцитах выше активность ГДА, ПНФ, ниже ГЗДА и ГФ, в эритроцитах ГДА, ПНФ и ниже ГФ.

Таблица 3 - Активность энзимов в лизатах эритроцитов крови здоровых и больных РеА при поступлении в стационар (в нмоль/мин/мл - 10я кл. для ПНФ, 109 кл. для ГДА, ГЗДА, ГФ)

Контингент Кол-во б-ых Стат. пок-ли ГДА ГЗДА ПНФ ГФ

М 16,9 11,3 180,0 4,87

Здоровые 30 ст 1,82 0,83 17,3 0,43

m 0,33 0,15 3,15 0,08

Больные М 18,2 10,3 182,8 4,65

РеА, вся 54 ст 1,45 1,05 12,9 0,30

группа ш 0,20 0,14 1,75 0,04

РеА, I сте- М 17,5 10,5 178,7 4,73

пень актив- 21 ст 0,83 1,01 11,2 0,28

ности m 0,18 0,22 2,44 0.06

РеА, II сте- М 18,6 10,1 182,1 4,67

пень актив- 22 ст 1,76 1,01 11,5 0,27

ности m 0,38 0,21 2,44 0,06

РеА, III сте- М 19,0 10,1 196,4 4,35

пень актив- И о 0,99 1,11 5,52 0,14

ности m 0,30 0,33 1,66 0,04

Урогенный М 17,9 10,4 178,3 4,73

РеА, вся 30 ст 1,53 1,04 14,3 0,33

группа m 0,28 0,19 2,61 0,06

Энтеренный М 18,7 10,1 188,4 4,54

РеА, вся 24 CT 1,21 1,06 8,02 0,22

группа m 0,25 0,22 1,64 0,05

Выявлены существенные энзимные различия у больных энРеА в зависимости от характера течения заболевания

Урогенный и энтерогенный РеА (глава 8.4.). Сравнительные исследования показали, что в лимфоцитах у больных урРеА (всей группы) по сравнению с больными энРеА (всей группы) и у больных урРеА с I степенью активности процесса по сравнению с больными энРеА с I степенью ниже активность ГДА, ПНФ, выше ГЗДА и ГФ (все р<0,001), у больных урРеА и II степенью по сравнению с больными энРеА и II степенью ниже активность ГДА, ПНФ (р<0,001), выше ГЗДА (р<0,01) и ГФ (р<0,001), у больных с урРеА и III степенью по сравнению с больными энРеА и III степенью ниже активность ГДА (р<0,05). В эритроцитах у больных урРеА (всей группы) по сравнению с больными энРеА (всей группы) выше активность ГФ (р<0,05), ниже ГДА (р<0,05), ПНФ (р<0,01), у больных ур-

РеА с I степенью активности процесса по сравнению с больными энРеА с I ниже активность ПНФ (р<0,05).

Анкилозирующнй спондилоартрит (глава 9.1.). У больных АС всей группы при поступлении на лечение, по сравнению со здоровыми, в плазме (таблица 4) выше активность ГДА, ПНФ, ГФ и ниже ГЗДА (все р<0,001), в лимфоцитах (таблица 5) выше активность ГЗДА и ГФ (р<0,001), в эритроцитах (таблица 5) выше активность ГДА (р<0,01), ГФ (р<0,001).

С увеличением степени активности патологического процесса у больных АС наблюдается в плазме нарастание активности ГДА, ПНФ и ГФ, снижение активности ГЗДА; в лимфоцитах - снижение активности ГДА и ПНФ, увеличение активности ГЗДА и ГФ; в лизатах эритроцитов снижение активности ГДА, ГЗДА, ПНФ и уменьшение ГФ.

Таблица 4 — Активность энзимов в плазме крови больных анкилозирующим спондило-артритом и псориатическим спондилоартритом (в нмоль/мин/мл)

Контингент Кол-во б-ых Стат. пок-ли ГДА ГЗДА ПНФ ГФ

АС, вся группа 22 М CT m 1,55 0,12 0,02 1,77 0,17 0,04 1,21 0,17 0,04 1,38 0,13 0,03

АС, I степень активности 8 М CT m 1,49 0,09 0,03 1,93 0,13 0,05 1,07 0,11 0,04 1,25 0,09 0,03

АС, II степень активности 7 М CT m 1,50 0,10 0,04 1,73 0,09 0,03 1,16 0,03 0,01 1,41 0,08 0,03

АС, III степень активности 7 M CT m 1,66 0,04 0,02 1,63 0,12 0,05 1,34 0,04 0,01 1,50 0,05 0,02

Больные ПСА, вся группа 21 M а m 1,68 0,14 0,03 2,35 0,14 0,03 1,12 0,09 0,02 1,20 0,07 0,02

Больные ПСА, I степень активности 12 M а m 1,59 0,10 0,03 2,25 0,06 0,02 1,07 0,09 0,03 1,17 0,09 0,03

Больные ПСА, II степень активности 9 M а m 1,85 0,05 0,02 2,49 0,08 0,03 1,18 0,05 0,02 1,25 0,06 0,03

Псориатический спондилоартрит (глава 9.2.). Исследования активности ферментов были проведены только в плазме крови больных (таблица 4). По сравнению со здоровыми, у больных все группы выше активность всех ферментов: ГДА, ПНФ (р<0,001), ГЗДА и ГФ (р<0,01); у больных с I степенью активности патологического процесса выше активность ГДА, ПНФ (р<0,001), ГФ и ГЗДА (р<0,05); у больных с II степенью выше ак-

тивность всех ферментов (р<0,001). Сравнительные исследования показали, что у больных с I степенью, по сравнению с больными со II степенью, в плазме ниже активность ГДА (р<0,001), ПНФ (р<0,05), ГЗДА (р<0,001).

С целью выявления энзимных особенностей крови, способствующих дифференциации РеА, АС и ПСА нами были проведены сравнительные исследования энзимной активности крови при этих трех заболеваниях.

РеА и АС (глава 10.1.). У больных РеА (всей группы) по сравнению с больными АС (всей группы) в плазме ниже активность ГДА, ПНФ, ГФ (все р<0,001) и выше ГЗДА (р<0,05), в лимфоцитах ниже активность ГЗДА (р<0,05), ГФ (р<0,001), в эритроцитах ниже активность ГДА, ГФ (р<0,001), ГЗДА (р<0,01).

Выявлены энзимные различия у больных РеА всей группы и больных АС в зависимости от степени активности патологического процесса. Для дифференциации РеА и АС в клинической практике необходимо ориентироваться на минимальные и максимальные величины активности энзимов, полученные нами в проведенных исследованиях у больных РеА и АС, указанные в «практических рекомендациях».

РеА и ПСА (10.2.). У больных РеА (всей группы) по сравнению с больными ПСА (всей группы) в плазме ниже активность всех ферментов (р<0,001). Аналогичные изменения энзимной активности наблюдались при сравнении данных групп в зависимости от степени активности патологического процесса.

Учитывая, что в группу больных РеА вошли больные с урогенным РеА и энтероген-ным РеА и с различной активностью патологического процесса, и что эти факторы оказывают существенное влияние на энзимные показатели, нами были проведены сравнительные исследования у больных РеА и ПСА с учетом этих факторов и выявлены существенные энзимные различия.

АС и ПСА (глава Ю.З.). У больных АС (всей группы) по сравнению с больными ПСА (всей группы) в плазме ниже активность ГДА (р<0,001), ГЗДА (р<0,001), выше активность ГФ (р<0,001) и незначительно выше ПНФ (р>0,05). Аналогичные энзимные различия определялись у больных АС и ПСА и между степенями активности процессов.

Таким образом, проведенные нами сравнительные исследования энзимной активности крови больных РеА, АС и ПСА показали, что, несмотря на некоторые общие клинические симптомы этих заболеваний, имеется достаточно много энзимных различий, которые в

15

комплексе с клинико-инструментальными данными способствуют их дифференциации и назначению адекватной терапии.

Таблица 5 - Активность энзимов в лизатах лимфоцитов и эритроцитов больных анкилози-рующим спондилоартритом (в лимфоцитах: в нмоль/мин/мл - 107 кл.; в эритроцитах: в нмоль/мин/мл - 108 кл. для ПНФ, 10'' кл. для ГДА, ГЗДА, ГФ)

Контингент Кол-во б-ых Стат. пок-ли ГДА ГЗДА ПНФ ГФ

Лизаты лимфоцитов

АС, вся группа 22 М ст m 12,9 4,51 0,96 10,8 3,83 0,82 37,6 9,15 1,95 21,8 8,39 1,79

AC, I степень активности 8 М CT ш 12,7 0,44 0,16 7,62 0,57 0,20 38,9 2,44 0,86 13,9 0,56 0,20

AC, II степень активности 7 М CT ш 18,4 1,78 0,67 9,07 0,87 0,33 47,5 3,25 1,23 19,4 0,60 0,23

AC, III степень активности 7 М CT ш 7,66 0,66 0,25 16,1 0,52 0,20 26,2 2,60 0,98 33,3 0,37 0,14

Лизаты эритроцитов

АС, вся группа 22 М CT ш 23.4 10.5 2,25 11,1 0,91 0,20 186,5 21,0 4,47 7,23 1,08 0,23

АС, I степень активности 8 М CT ш 20,4 3,14 1,11 12,0 0,12 0,04 195,8 6,29 2,22 6,00 0,37 0,13

АС, II степень активности 7 М CT m 37,3 3,33 1,26 11,1 0,24 0,09 205,7 10,4 3,91 7,44 0,33 0,12

АС, III степень активности 7 М CT m 13,0 1,06 0,40 9,90 0,32 0,12 161,6 2,28 3,13 8,42 0,28 0,10

Все изучаемые нами ферменты взаимосвязаны, и их активность во многом обусловлена содержанием в клетках крови их субстратов. Так, у больных РеА (всей группы) на фоне несколько сниженных активностей ГЗДА и ГФ, незначительно повышена активность ПНФ. Это может свидетельствовать о том, что содержание гуанозина, основного субстрата ПНФ, этим ферментом и контролируется. Вероятно, что содержание гуанозина в лимфоцитах больных несколько снижено, а так как сродство ПНФ к гуанозину выше, чем у ГЗДА и ГФ, то в основном гуанозин утилизируется за счет ПНФ. Некоторую ясность в этом вопросе могли бы внести сведения об активности 5'-НТ, так как за счет этого фермента продуцируется гуанозин из гуанозин-5-фосфата. Но сведения об активности 5'-НТ при РеА не имеется, и изучение активности этого фермента при РеА в лимфоцитах имеет хорошие

перспективы. В то же время можно отметить особенности активности ферментов ПМ в зависимости от степени активности патологического процесса, о которых говорилось выше.

В эритроцитах больных РеА, также как и в лимфоцитах, утилизация гуанозина идет за счет некоторого повышения активности ПНФ на фоне снижения активности ГЗДА и ГФ. Но в отличие от лимфоцитов в эритроцитах имеет место повышение активности ГДА, что свидетельствует об увеличении продукции ксантина.

У больных АС в лимфоцитах отмечено повышение активности всех ферментов. Причем, утилизация гуанозина идет в основном за счет его дезаминирования (повышение активности ГЗДА на 38,6%) и фосфорилирования за счет ГФ (повышение активности ГФ на 90%). А учитывая, что и активность ПНФ повышена, можно предположить, что в лимфоцитах высокое содержание гуанозина за счет высокой активности 5'-нуклеотидазы, и активность всех трех ферментов (ГЗДА, ПНФ, ГФ) направлена на утилизацию гуанозина. В результате этих реакций должно увеличиться содержание гуанина и для его утилизации должна увеличиться активность ГДА, что и имеет место в лимфоцитах при АС. Некоторые особенности ПМ отмечались при различных степенях активности процесса. Особенно это было выражено при III степени, где утилизация гуанозина проходила в основном за счет повышения активности ГЗДА и ГФ (107% и 190%) на фоне снижения активности ПНФ (24%) и ГДА (35%). Возможной причиной снижения активности ПНФ при этом могло быть наличие антител к ферменту (A.B. Александров, 2009 г.).

В эритроцитах больных АС изменения активности ферментов были сходными с изменениями в лимфоцитах, но в количественном аспекте менее выраженными. Основным отличием было незначительное снижение активности ГЗДА, а в лимфоцитах было значительное повышение ГЗДА. При I степени активности процесса для утилизации гуанозина была повышена активность всех трех ферментов (ГЗДА, ПНФ, ГФ); при II степени - в этом принимали участие только два фермента ПНФ и ГФ, а активность ГЗДА была снижена; при III степени - только активность ГФ, которая была повышена на 73%, а активность ГЗДА и ПНФ была снижена на 12,4% и 10%, соответственно. При этом надо обратить внимание на то, что активность ГДА также была снижена на 23%, что, вероятно, свидетельствовало о низком содержании в клетках гуанина, для утилизации которого даже не требовалось нормальной активности ГДА. Одним из объяснений этого феномена может быть недостаточная утилизация гуанозина только за счет повышения активности ГФ на фоне снижения активности ГЗДА и ПНФ. Вероятным исходом подобной ситуации может

быть накопление гуанозина в клетках, а по данным литературы (T. Priebe, 1990; А.Е. Nixon et.al., 1998; Т. Sato et.al., 1998) повышенное содержание гуанозина ингибирует активность рибонуклеотидредуктазы, что ведет к нарушению синтеза ДНК в Т-лимфоцитах, их функциональной несостоятельности, нарушению процессов созревания, пролиферации, дифференциации лимфоцитов, нарушению их иммунных свойств.

Анализируя энзимные показатели в лимфоцитах больных РеА и АС, можно сделать заключение о том, что у больных РеА, вероятно, происходит более значимое накопление гуанозина, чем у больных АС. Так, если у больных РеА активность ПНФ повышена незначительно на фоне снижения активности ГЗДА и ГФ, то у больных АС в лимфоцитах повышена активность трех ферментов (ГЗДА, ПНФ и ГФ), утилизирующих гуанозин. Исходя из этого, можно предположить о более значительных иммунных нарушениях у больных РеА, по сравнению с больными АС. Выявленные энзимные изменения предполагают и новые подходы к лечению больных серонегативными спондилоартропатиями с включением в комплексную терапию препаратов, направленных на коррекцию нарушений пуринового метаболизма с использованием активаторов или ингибиторов изучаемых ферментов.

ВЫВОДЫ

1. У практически здоровых лиц в лизатах эритроцитов, лимфоцитов и плазме крови существенных различий активности ГДА, ГЗДА, ПНФ и ГФ в зависимости от пола и возраста не выявлено.

2. У больных РеА, по сравнению со здоровыми, в плазме крови выше активность ГДА, ПНФ и ниже активность ГЗДА и ГФ, в лизатах эритроцитов выше активность ГДА, ниже ГЗДА и ГФ.

3. Наибольшее влияние на показатели активности оказывает активность воспалительного процесса. Чем выше клинико-лабораторная активность воспалительного процесса, тем в плазме и лизатах лимфоцитов больных РеА выше активность ГДА, ПНФ и ниже активность ГЗДА и ГФ, в лизатах эритроцитов - выше ГДА, ПНФ и ниже активность ГФ.

4. У больных РеА в трех биосредах выявлены существенные изменения активности ГДА, ГЗДА, ПНФ, ГФ в зависимости от варианта течения заболевания. У больных с хроническим течением РеА в лимфоцитах снижена активность ГДА и ПНФ, повышена активность ГЗДА и ГФ, у больных с затяжным течением РеА в лимфоцитах повышена активность ГЗДА, у больных с острым течением РеА в лимфоцитах повышена активность ГДА и ПНФ,

снижена - ГЗДА и ГФ. Между всеми вариантами течения выявлены существенные энзимные различия, способствующие их дифференциации.

5. У больных РеА с более высоким ФК суставов в трех биосредах более высокие показатели активности ГДА, ПНФ, и низкие - ГЗДА и ГФ. Стадии поражения суставов и ФК имеют менее выраженное влияние на показатели активности ферментов крови и не затрудняют дифференциацию степени активности патологического процесса.

6. У больных РеА этиологический фактор оказывает определенное влияние на активность изучаемых энзимов. У больных урогенным РеА, по сравнению с энтерогенным РеА, в лимфоцитах ниже активность ГДА, ПНФ, выше ГЗДА и ГФ, в эритроцитах выше активность ГФ, ниже ГДА и ПНФ.

7. В процессе терапии больных РеА положительная клиническая динамика сопровождалась достоверной положительной динамикой активности ГДА, ГЗДА, ПНФ, ГФ в трех биосредах, что позволяет использовать энзимные показатели в оценке эффективности проводимой терапии.

8. У больных АС, по сравнению со здоровыми, в плазме выше активность ГДА, ПНФ, ГФ и ниже ГЗДА, в лимфоцитах выше активность ГЗДА и ГФ, в эритроцитах выше активность ГДА и ГФ. Чем выше активность процесса, тем в плазме ниже ГЗДА, выше активность ГДА, ПНФ, ГФ; в лимфоцитах - выше активность ГЗДА, в эритроцитах - выше активность ГФ, ниже ГЗДА.У больных ПсА, по сравнению со здоровыми, в плазме выше активность ГДА, ГЗДА, ПНФ и ГФ. Чем выше активность процесса, тем в плазме выше активность всех ферментов.

9. У больных РеА, по сравнению с больными АС, в плазме выше активность ГЗДА, ниже ГДА, ПНФ и ГФ, в лимфоцитах ниже активность ГЗДА и ГФ, в эритроцитах ниже активность ГДА, ГФ и ГЗДА; по сравнению с больными ПсА в плазме ниже активность ГДА, ГЗДА, ПНФ и ГФ. У больных АС, по сравнению с больными ПсА, в плазме ниже активность ГДА, ГЗДА, выше активность ГФ.

10. Исследования активности ГДА, ГЗДА, ПНФ и ГФ в плазме крови, лизатах лимфоцитов, эритроцитов больных РеА, АС, плазме крови больных ПсА в комплексе с клинико-инструментальными данными способствуют уточнению степени активности патологического процесса, характера течения заболевания, объективизации оценки эффективности терапии больных РеА, индикации обострения воспалительного процесса с минимальной ак-

тивностью, дифференциации АС, РеА и ПсА, что может быть обусловлено различиями в патогенетических механизмах этих заболеваний.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Следует ориентироваться на следующие референтные пределы величин активности энзимов у здоровых людей (условную норму), вычисленные по формуле: М ± 2 а (95% вероятность): плазма (нмоль/мин/мл) ГДА: 0,9-1,42; ГЗДА: 1,5-2,66; ПНФ: 0,67-1,03; ГФ: 0,85-1,33. Лизаты лимфоцитов (нмоль/мин/мл-107 клеток) ГДА: 9,6913,65; ГЗДА: 6,03-8,95; ПНФ: 27,1-41,94; ГФ: 8,57-14,37. Лизаты эритроцитов (нмоль/мин/мл-109 клеток) ГДА: 13,3-20,58; ГЗДА: 9,61-11,44; ГФ: 4,01-5,73; ПНФ (нмоль/мин/мл-108 клеток): 145,47-214,59.

2. При дифференциации РеА и АС следует ориентироваться на следующие показатели активности изучаемых ферментов: о РеА будут свидетельствовать в плазме уровень ГДА менее 1,27 нмоль/мин/мл, ПНФ менее 0,88 нмоль/мин/мл, ГФ менее 1,12 нмоль/мин/мл. Следующие уровни активности изучаемых энзимов будут свидетельствовать об АС: в плазме ГДА более 1,48 нмоль/мин/мл, ПНФ более 1,16 нмоль/мин/мл, ГФ более 1,28 нмоль/мин/мл; в лимфоцитах ГДА менее 9,6 или более 13,8 нмоль/мин/мл, ГЗДА более 12,5 нмоль/мин/мл, ПНФ менее 25,6 или более 40,3 нмоль/мин/мл, ГФ более 16,5 нмоль/мин/мл; в эритроцитах ГДА менее 15,2 или более 21 нмоль/мин/мл, ПНФ менее 155 или более 205 нмоль/мин/мл, ГФ более 5,4 нмоль/мин/мл.

3. При дифференциации РеА и ПсА: свидетельствуют в пользу РеА в плазме активность ГДА не менее 1,29 и не более 1,48 нмоль/мин/мл, ГЗДА не менее 1,99 и не более 2,11 нмоль/мин/мл, ПНФ не менее 0,87 и не более 1,16 нмоль/мин/мл, ГФ менее 0,99 нмоль/мин/мл. О наличии ПсА свидетельствует в плазме активность ГДА более 1,48, ГЗДА более 2,11, ПНФ более 1,16, ГФ более 1,28 нмоль/мин/мл.

4. При дифференциации АС и ПСА в пользу ПСА свидетельствуют в плазме: активность ГДА более 1,48 нмоль/мин/мл, ГЗДА более 2,11 нмоль/мин/мл, ПНФ более 1,16 нмоль/мин/мл, ГФ более 1,28 нмоль/мин/мл. При дифференциации РеА, АС и ПСА не обязательно сочетание всех энзимных различий, описанных выше. Но чем больше выявлено этих различий, тем более вероятен диагноз заболевания.

5. О переходе фазы клинической ремиссии РеА в фазу обострения с минимальной активностью патологического процесса терапии свидетельствует: в плазме - повышение активности ПНФ, в лимфоцитах - повышение активности ГЗДА, ГФ, снижение активности ГДА и ПНФ, в эритроцитах - снижение активности ГЗДА.

6. Об адекватности назначенного комплекса лечебных мероприятий у больных РеА с минимальной активностью патологического процесса в первые 7-8 дней терапии свидетельствуют: в плазме - снижение активности ГДА и ПНФ, в лизатах лимфоцитов - повышение активности ГЗДА и снижение активности ПНФ, в лизатах эритроцитов - повышение активности ГДА. В процессе лечения больных РеА о наступающей фазе клинической ремиссии свидетельствуют: при I степени - в плазме: нормализация активности ПНФ, при II-III степенях активности процесса - нормализация активности всех ферментов в трех биосредах.

Перспективы дальнейшей разработки темы

Представляется перспективным исследования активности ферментов адениловой ветви пуринового метаболизма, тесно связанной с гуаниловой ветвью, изученной нами, а также исследования количественного содержания нуклеиновых метаболитов, концентрация которых регулируется ферментами. Это позволит более глубоко понять патогенетические механизмы РеА, выработать новые подходы к лечению больных РеА на основе коррекции ферментных нарушений и проводить дифференциацию заболеваний суставов.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Публикации в изданиях, рецензируемых ВАК РФ

1. Евдокимова, Е.В. Урогенный реактивный артрит и энзимы пуринового метаболизма / Е.В. Евдокимова, А.И. Романов, В.Ф. Мартемьянов [и др.]// Кремлевская медицина. Клинический вестник.-2012. -JSr»4. -С. 105-108.

2. Евдокимова, Е.В. Клинико-патогенетическое значение исследования активности ферментов пуринового метаболизма в лизатах лимфоцитов и плазме крови больных реактивным артритом/ Е.В. Евдокимова, А.И. Романов, В.Ф. Мартемьянов [и др.]// Кремлевская медицина. Клинический вестник. - 2013. - №2.-С. 150-154.

3. Евдокимова, Е.В. Активность энзимов пуринового метаболизма в плазме крови больных серонегативными спондилоартритами [электронный ресурс]/ Е.В. Евдокимова, А.Б. Зборовский, Е.Э. Мозговая [и др.]// Современные проблемы науки и образования (электронный журнал).-2013. - №6. - С. 626. - Режим доступа: www.science-education.ru/113-11274.

Другие публикации по теме диссертации

4. Зборовский, А.Б. Энзимные показатели крови в дифференциации ревматоидного артрита и анкилозирующего спондилоартрита / А.Б Зборовский, Е.Э. Мозговая, В.Ф. Мартемьянов, В.В. Пересыпкин, Е.В. Евдокимова // Актуальные проблемы современной

ревматологии: сб. науч. работ / Под ред. акад. РАМН А.Б. Зборовского. — Вып. XXVII. — Волгоград, 2010. — С. 41-42.

5. Мартемьянов, В.Ф. Активность энзимов гуаниловой ветви пуринового метаболизма в лизатах лимфоцитов у больных анкилозирующим спондилитом / В.Ф. Мартемьянов, И.А. Зборовская, Е.В. Евдокимова, Е.Э. Мозговая, М.Ю. Стажаров, С.А. Бедина// Системные ревматические болезни и спондилиты: тезисы ежегодной научно-практической конференции.— М., 2010.- С.33.

6. Абрамов, Н.Б. Активность энзимов гуаниловой ветви пуринового метаболизма в лизатах эритроцитов больных с урогенной формой реактивного артрита/ Н.Б. Абрамов, С.П. Некрасова, В.Ф. Мартемьянов, Е.В. Евдокимова, Е.Э. Мозговая// Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ/ Под. ред. А.Б. Зборовского. -Вып. XXVIII. - Волгоград, 2011.-С. 3.

7. Галаева, О.Ю. Активность энзимов нуклеинового метаболизма в лимфоцитах больных реактивным артритом в зависимости от стадии поражения суставов и активности процесса/ О.Ю. Галаева, М.Ю. Стажаров, Т.Ф. Рогаткина, Е.В. Евдокимова, В.Ф. Мартемьянов// Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ/ Под. ред. А.Б. Зборовского. - Вып. XXVIII. - Волгоград, 2011.-С. 28.

8. Евдокимова, Е.В. Активность энзимов пуринового метаболизма в лизатах эритроцитов больных реактивным артритом в зависимости от функционального класса суставов и активности процесса / Е.В. Евдокимова, С. А. Бедина, В.Ф. Мартемьянов и др.// Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ/ Под. ред. А.Б. Зборовского. - Вып. XXVIIL- Волгоград, 2011,- С. 41.

9. Зборовская, И.А. Активность энзимов в плазме крови больных реактивным артритом в зависимости от активности процесса и стадии поражения суставов / И.А. Зборовская, Е.Э. Мозговая, В.В. Пересыпкин, М.В. Пересыпкин, Е.В. Евдокимова // Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ/ Под. ред. А.Б. Зборовского. - Вып. XXVIII. - Волгоград, 2011,- С. 50.

10. Мартемьянов, В.Ф. Активность энзимов нуклеинового метаболизма в эритроцитах больных реактивным артритом с различными стадиями поражения суставов / В.Ф. Мартемьянов, В.И. Кузнецов, С.А. Бедина, С.С. Хортиева, Е.В. Евдокимова // Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ / Под. ред. А.Б. Зборовского - Вып. XXVIII. - Волгоград, 2011.- С. 64.

11. Пересыпкин, В.В. Активность энзимов нуклеинового метаболизма в лизатах эритроцитов больных анкилозирующим спондилитом / В.В. Пересыпкин, A.C. Чернов, Е.В. Евдокимова и др. // Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ / Под. ред. А.Б. Зборовского. - Вып. XXVIII. - Волгоград, 2011,- С. 81.

12. Евдокимова, Е.В. Энзимный профиль плазмы крови у больных с энтерогенным и уро-генным реактивным артритом/ Е.В. Евдокимова, В.Ф. Мартемьянов, И.А. Зборовская и др. // II конгресс ревматологов России: сборник материалов конгресса (тезисы). - Ярославль, 2011,- С.23.

13. Мартемьянов, В.Ф. Активность энзимов в лизатах лимфоцитов больных энтерогенной формой реактивного артрита в зависимости от характера течения заболевания/ В.Ф. Мартемьянов, С.А. Бедина, Е.Э. Мозговая, Е.В. Евдокимова, М.Ю. Стажаров // II конгресс ревматологов России: сборник материалов конгресса (тезисы).- г. Ярославль, 2011,- С.44.

14. Евдокимова, Е.В. Активность энзимов пуринового метаболизма в лизатах эритроцитов больных реактивным артритом / Е.В. Евдокимова, В.Ф. Мартемьянов, Е.Э. Мозго-

вая и др. // VII Всероссийская конференция ревматологов России: сборник материалов конференции (тезисы). - г. Владимир, 2012.-С.21.

15. Евдокимова, Е.В. Энзимы пуринового метаболизма у больных урогенным реактивным артритом и анкилозирующим спондилитом / Е.В. Евдокимова, А.Б. Зборовский, Е.Э. Мозговая и др. // Науч.-практ. ревматология. - М., 2013(51).- С.53.

16. Зборовский, А.Б. Энзимный профиль крови у больных реактивным артритом и анкилозирующим спондилитом / А.Б. Зборовский, Е.Э. Мозговая, С.А. Бедина, М.Ю. Стажа-ров, Е.В. Евдокимова, В.Ф. Мартемьянов // XIII Северо-западная научно-практическая конференция по ревматологии: материалы конференции / Под ред. В.И. Мазурова, К.В. Раймуева, C.B. Столова и др. - СП6.-2013. - С.41-42.

17. Бедина, С.А. Активность энзимов в сыворотке крови больных реактивным артритом, дискоидной и системной красной волчанкой / С.А. Бедина, Е.В. Евдокимова, М.В. Мякишев и др. //Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ/ Под ред. А.Б. Зборовского. - Вып. XXVIV.- Волгоград, 2013,- С. 13-14.

18. Григорьянц, С.Р. Активность энзимов пуринового метаболизма в плазме крови больных энтерогенным реактивным артритом и подагрическим артритом / С.Р. Григорьянц, С.А. Бедина, Е.Э. Мозговая, В.Ф. Мартемьянов, А.И. Романов, Е.В. Евдокимова //Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ / Под ред. А.Б. Зборовского. - Bbin.XXVIV. - Волгоград, 2013,- С. 29-30.

19. Евдокимова, Е.В. Активность энзимов пуринового метаболизма в плазме крови больных урогенным реактивным артритом и подагрой / Е.В. Евдокимова, С.Р. Григорьянц, А.Б. Зборовский и др.//Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ/ Под ред. А.Б. Зборовского. - Bbin.XXVIV. - Волгоград, 2013.- С. 34.

20. Евдокимова, Е.В. Энзимные различия в эритроцитах и плазме больных урогенной и энтерогенной формами реактивного артрита / Е.В. Евдокимова, М.В. Пересыпкин, В.В. Пересыпкин и др. //Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ/ Под ред. А.Б. Зборовского. - Bbin.XXVIV. - Волгоград, 2013,- С. 35.

21. Зборовская, И.А. К исследованию активности энзимов гуаниловых производных у больных реактивным артритом с различным характером течения заболевания / И.А. Зборовская, Е.В. Евдокимова, С.А. Бедина и др.//Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ / Под ред. А.Б. Зборовского. - Bbin.XXVIV. -Волгоград, 2013,-С. 42.

22. Мартемьянов, В.Ф. Энзимные различия в крови больных урогенным реактивным артритом и анкилозирующим спондилитом/ В.Ф. Мартемьянов, С.А. Бедина, М.Ю. Ста-жаров, Е.В. Евдокимова, А.Б. Зборовский //Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ / Под ред. А.Б. Зборовского. - Bbin.XXVIV. - Волгоград, 2013,- С. 58.

23. Мозговая, Е.Э. Клиническое значение исследований активности энзимов гуаниловой ветви пуринового метаболизма в крови больных ревматоидным и реактивным артритами / Е.Э. Мозговая, Е.В. Евдокимова, В.Ф. Мартемьянов и др.//Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ / Под ред. А.Б. Зборовского. -Bbin.XXVIV.- Волгоград, 2013.- С. 65-66.

24. Мозговая, Е.Э. Энзимные различия в лизатах лимфоцитов больных реактивным артритом и подагрой / Е.Э. Мозговая, М.Ю. Стажаров, В.Ф. Мартемьянов, Е.В. Евдокимова, И.А. Зборовская //Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ/ Под ред. А.Б. Зборовского. - Bbin.XXVIV. - Волгоград, 2013.- С. 66-67.

25. Евдокимова, Е.В. Клиническое значение энзимных исследований в плазме крови больных реактивным артритом и псориатическим спондилитом / Е.В. Евдокимова,

А.Б. Зборовский, В.Ф. Мартемьянов и др.// Актуальные проблемы современной ревматологии: сборник научных работ/ Под ред. А.Б. Зборовского. - Вып.ХХХ1. - Волгоград, 2014,- С. 58-59.

ЕВДОКИМОВА Елена Вячеславовна

КЛИНИКО-ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ ГУАНИЛОВОЙ ВЕТВИ ПУРИНОВОГО МЕТАБОЛИЗМА В ЛИЗА-ТАХ ЛИМФОЦИТОВ, ЭРИТРОЦИТОВ И ПЛАЗМЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ РЕАКТИВНЫМ АРТРИТОМ

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук по специальности 14.01.22 Ревматология

Подписано в печать 30.10.2014. Формат 60x90/16 Бумага офсетная №2. Печать офсетная Гарнитура «Тайме» Усл.печ.л. 1,0. Уч.-изд.л. 0,9 Тираж 100 экз. Заказ № 102

Отпечатано в ООО «Копировальный центр «Дабл принт» 400131, г. Волгоград, ул. Советская, 26.