Автореферат и диссертация по медицине (14.00.10) на тему:Клинико-патогенетическая характеристика НВУ-инфекции с учетом характера распределения макромолекулярных структур сыворотки крови

'/Г-■

"-> и

САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ ИМЕНИ АКАДЕМИКА И. П. ПАВЛОВА

На правах рукописи

ЯКОВЛЕВ Алексей Авенирович

КЛИНИКО-ПАТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НВУ-ИНФЕКЦИИ С УЧЕТОМ ХАРАКТЕРА РАСПРЕДЕЛЕНИЯ МАКРОМОЛЕКУЛЯРНЫХ СТРУКТУР СЫВОРОТКИ КРОВИ

14.00.10 — инфекционные болезни

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Санкт-Петербург 1992

Работа выполнена в Санкт-Петербургском медицинском институте имени акад. И. П. Павлова.

Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор, академик Е. П. Шувалова.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Казанцев А. П; доктор медицинских наук, профессор Королюк А. М; доктор медицинских наук, профессор Подлевский А. Ф.

Ведущая организация: Российский медицинский университет.

Защита состоится « » 199 г. в ча-

сов на заседании специализированного совета Д 074.37.02 в Санкт-Петербургском медицинском институте им. акад. И. П. Павлова, С.-Петербург, ул. Л. Толстого 6/8.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургского медицинского института им. акад. И. П. Павлова.

Автореферат разослан « » 199 года.

Ученый секретарь специализированного совета —

доктор медицинских наук, профессор Шостка Г. Д.

• ' ■ ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. НВУ - инфекция до настоящего времени остается одной на сшшх массовых среди инфекционных заболэвавий. Полагают, что более населения планеты охвачены этой инфекцией; а ее хроническая форма рассматривается, как самая распространенная в шре хроническая вирусная инфекция человека (Балаян М.С., 198?; Шувалова Б.П., 19861 Блвгер А.Ф.,1990} ^.

1983).

В современной клинической вирусологии нет инфекционного заболевания, которое могло бы сравниться с гепатитом В по спектру клинико-патогенетичеекпх вариантов во взаимоотношении вируса с клеткой - от клинически неуловимых и стертых проявлений, до хронических с переходом в цирроз печени и первичпую гепатому (Ананьев В.А.,1982).

Многие проявления патологического процесса при вирусных инфекциях реализуются на макромолекулпрном уровне. Они йогу® бить представлены вирусемией, антигевемиой, другими процессами взаимодействия вируса о клетками, а такге реакциями организма, направленными па поддержание гоыеостаза. К таким реакциям можно отнести образование специфических антител, ишунних комплексов, клеточные реакции а мобилизацию (¡акторов неспецифаческоИ резистентности.

До последних лет из было методических приемов, которые би позволяли анализировать весь комплекс взаимозависимых и саморегулирующихся роакци!, протекающих в организме на макромолекулярноц уровне. Такая возможность впервые предоставилась в связи с применением в клшшко-лабораторноН практике лазерной корреляционное спектроскопии о регуляризацией. Данный метод отличается от ранее применявшихся методов оптического смешения ^сличением процедура регуляризации, которая позволяет проводить измерения в гетерогенное среде, а,следовательно, делает его пригодным для клинихо-лабораториих исследований. Приоритетние исследования по этой проблеме бшш начаты в 1985 году и их результаты обобщаются в этой работе.

Цель исследования. Разработать нозое направление в изучении патогенеза ИВУ-инфекции, основанное на интегральной оценке макро-молекуляринх структур сыворотки крози, ыотодон лазерной корреля-

ЦИОЫЫОй cnei£Tpoci.;..».ui с регуляризацией.

Получить ооьвктивиый критерия хроьиаации острого вирусного гепатита В и оцсшш активности хронического гепатита В.

Задачи исследования

I* Разработать иетодику применения дазерцал корреляционной спектроскопии с регуляризацией для клшшко-ласюраторяых исследовании.

2. Провести иоделнроаанае аитигенеиид, внрусешш, шиунокошше-ксного процессе; определение физических свойств ыодельных шиуинкх коиплексов (размеры, дзета-потенциал); изучение рола укезанних процессов в фориировашш спектральных характеристик сыворотки крози.

3. Определить диагностическую и прогностическую информативность данных о иакроиолекулярных структурах сыворотки крови при острой гепатите Б и разработать способ прогнозирования хронической формы инфекции.

4. Сопоставить реаудьтиты кдшшко-лаоораториого в наркологического обследования сольных с хронически! гепатитом В с данными о характере распределения макроиолскулярних структур сыворотки кроил.

5. Разработать объективные лабораторные критерии оценки активности патологического процесса при хроническом гепатите В на основании исследования сыворотки крови методой лазерной корреляционно! спектроскопии с регуляризацией.

Основные положения» выиосшше на защиту:

- характер распределения иакроиолзкулярних структур сыворотка кроии позволяет существенно углубить представлению о патогенетическом значении изменении белковых структур сыворотки крови при НВУ-инфеиуш и иопольаовать их с диагностическим! целями;

- данные о распределении иакроиолекулярных структур сыворотка крови, определяемые ивтодои лазерной корреляционной опектроско-паи с регуляризацией иатеграглпно отражают патогенетические процессы, протекайте в жидхо! фракции крови: антигеиеии,ю, вирусешт, образование ццр.<улкруад4х иммунных коиплексов, диспротеинешщ

- прогноз развития хронических форы ИВУ-инфекции о определенней последующей активности патологического процесса индивидуально для каждого пациеиха. может быть осуществлен по спектральной характеристике иакроиодекулярных структур сыворотка крови;

- выделенные четыре варианта ндинихо-латогенетлческоВ активности хронического гепатита В:

компенсированный хронический гепатит В,

хронический гепатит В высокой активности,

хронический гепатит В умеренной активности н

хронический гепатит В низкой активности патологического процесса,

наряду о традиционный деленной на ХАГ и ХПГ, определяет подход к

патогенетической терапии.

Научная новизна. Разработав; методический подход к изучению мак-роиолекуллрных структур сыворотки крови новин биофизический методом лазерной корреляционной спектроскопии с регуляризацией. Доказан ин-тегративный характер спектральных характеристик,отражаюдий динамику основных патогенетических иамоненкй, протекающих на макромолекуляриог: уровне в хидкой фракции крови, таких как вирусемия, антнгенемия,дис-протсинемия, образование циркулирующих иммунных комплексов.

Получены принципиально новые критерии оценки активности патологического процесса, основанные на классификационной разделении гистограмм сыворотки крови, иллюстрирующих функцию распределения мокро-молекулпрных структур по размеру и относительному вкладу в рассеивание овета.

Впервые установлено:

- существование связи между характером распределения макроио-лекулпрних структур сыворотки крови и данными традиционного морфологического обследования, а также степенью капилляразацяи печеночной дольки при ХБГ п соотношением между трансыембранным и трансэндо-телиальпим транспортом;

- влияние лечео'ныг полимереодеряацпх препаратов (гемодез, peono лиглскин) на агрегационные свойства вирусов и иммуноглобулинов G, двиамнку образования иммунных комплексов и информативность приманяе-ыых серологических тестов (РНГЛ и ИФА);

- впервые изучена олсктрофоретическая подви^юегь вируссодер-ишцнх модельных иммунных комплексов разных размеров и показано влияние белков системы комплемента на изыскание их размера и дзета-по-тевцпада, определяющего биологическую активность иммунннх комплексов!

— показана возможность проведения экспресс-диагностики и дифференциальной диагностики вирусных гепатитов по результатам классификационного анализа функции распределения макромолекулярних структур сыворотки крови.

Практическая ценность райоты заключается в разработке нового клииихо-лабораторного теста, позволяющего прогнозировать развитие

хронического вирусного гепатита В, оценивать активность патологического процесса и контролировать эффектлвиость терашш.

Для решения вопроса о степени морфологических изменение в печени при хронической гапатиаа В наряду с пункциошюв биопсией печева можно воспользоваться информацией о иакроиолекудярних структурах сыворотки крови и, после классификации по специальной программ, получить ответ £ процентах вероятности наличия ХАГ или ХПГ.

На основании характера распределения макромолакудяршл; струк-хур снворотки крови можно выделить четыре объективных варианта ак-хивностя течения патологического процесса при ХВГ В* что позволяет рекомендовать два новых способа патогенетическо! терапии.

Указанные диагностические возможности охватывают 95% всего вариационного ряда. При классификационно*! разделении с 50$ и более вероятностью для ОВГ В диагностическая эффективность составляет 96,6) для ХВГ В - 96,4$. Это позволяет рекомендовать их самостоятельное использование в олхииальнои сочетании с верификацией при вирусных инфекциях.

Показана необходимость учитывать при оценке результатов серологических анализов (РИГА и И ФА) влияние полимерсодерасацих лекарственных препаратов.

Апробация и внедрение результатов рабогм. Материалы диссертации обсуждались на заседаниях отделения Всесоюзного общества инфекционистов (1986-1991) в г.Санкт-Петербурге, на проблемной комиссии "Иммунологический гоаеостаз" в С-ПО медицинском институте им.акад.И.П.Павлова (1986-1992), на Президиуме совместного васеда-вия Общества микробиологов, эпидемиологов и инфекционистов (29,06. 1989г.).

Фрагменты работы доложены на заседании научно-производственного совета из РСФСР "Инфекционные болезни взрослых11 (Тверь,1988), на Всесоюзной проблемной астрачо специалистов "Кдшвико-иммуиологичес-кве и морфологические аспекты хронических гепатитов" на ВДНХ СССР (Москва,1989), на X Евпролвйском конгресса иммунологов (¡Л ал честер, 1990), ва симпозиумах в Рижском гепатологическом центре (Рига, 1986,1987),

В 1987 году работа по применение лагерной корреляционной спектроскопии о регуляризацией при изучении НВУ-инфекции на

конкурса научных работ для молодых ученых (Лондон,1987) получила специальный приз »• Б о г'п Б/отес&са. Рг1ге. в.

Обсуждение работы также проводилось на заседании Ученого

совета института им.Паетера в 1987г.

Но материалам диссертации опубликована работа,подэно 14 заявок па изобретения, по которым получено II положительных решений.

Б результате совыеопшх работ метод лазерной корреляционно Я спектроскопии с регуляризацией, апробируемый нами в 1985 году, используется на кафедре конных и венерических болезней С-Пб медицинского института, на кафедре инфекционных болезней Государственного института усовершенствования врачей, в Научно-исследовательском институте гриппа, Научно-исследовательском институте гигиены и профпатологии, Рижском гепатологическом центре.

Материалы исследований используется в процессе преподавания цикла инфекционных болезней на кафедре инфекционных болезней Санкт-Петербургского медицинского института им.акад.И.П.ПавлоЕа.

Структура диссертации. Работа изложена на 220 страницах машинописного текста, состоит из введения, 7 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, содержащего 331 наименование, из них 157 зарубеаиых. Пллмзтрировзна 7и таблицами и 38 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И .ЧЬТОДН ИССЛЕДОВАНИЯ

Клияико-лаборпторлое обследование больных проводилось на кафедре инфекционных болезной и эпидемиологии Санкт-Петербургского медицинского института им.акад.И.П.Павлова, базирующейся в инфекционной больнице № 30 им.с.И.Воткан:!. Воего было обследовано 600 больных. Основной контингент обследованных больных был прид-отазлея пациентами о Ш-ни&екциеА (469 человек), 318 о ОВГ В и 151 о ХВГ В.В дополнение к этому были изучены клинико-лабораторныв показатели у 50 больных с ОВГ А, 39 пациентов с наличием в крови маркеров гепатита А п В одновременно, II пациентов с ОВГ В + дельта и 31 больного с клшшко-лаборатарными признаками острого гепатита, указаниями на парентеральные вмешательства или контакт о больными гепатитов В, но без паркеров ОВГ В и ОВГ А в динамике заболевания. В раде случаев нами использовались данные обследования 73 оольных с корьи и 32 пациентов с псориазом, рапсе представленные в совместных публикациях.

Оценка клинических форм вирусных гепатитов производилась в соответствия с положениям приказа УЗ СССР № 752 от 3 июля 1981г.

Характер распределения макроыолекулярных структур сыворотки

крови определяло» методом лазерном корреляционной спектроскопии с регуляризацией, на установке созданной в ЛЦЯФ АН СССР.

Сущность метода ЛКС состоит в определении спектральных характеристик квазиупруго рассеянного научаемой системой света по спех-яру флуктуацс! интенсивности регистрируемого излучения. Б попользованном варианте метод позволяв! регистрировать светорассеяние от частиц в размером от I нм до 10^ им, совершающих броуновское движение. Результаты пзиеренн! заносились а банк данных,организованный на магнитной носителе персонального компьютера РС-2 дли классификация результатов. Специальные классификационные программы были разработаны в Л11ЯФ АН СССР. Алгоритмы классификационных программ базируется на методах теории групп и заключаются в аиалнае функции распределения чаотиц по размерам (ФРР) в многомерном пространстве. Доя каждого спектра, предотавлявдего собой 32-мерный вектор, выбиралось 5-незавмсимых координат, которые и использовались при клаосвфакацв-оиио! обработке. Классификационный алгоритм обработки результатов измерений направлен на статистически и математически достоверное (»равнение многочисленных групп спектров, объединенных общим признаком между собой,и представление результатов в наглядном виде. В частности, в проценте вероятности отнесении спектра в сравниваемые группы, причем учтена 10$ вероятность того, что предлагаемый спектр не относится к сравниваемый группам вообще»

Кдшшко-лай'ораторное обследование оольпых ОВГ В, наряду о общепринятыми методами, вкльчало в себя количественное (в титрах) определение в сыворотке крови НВ5А^, НВоАв ПВсАв &, антв-НАУ 1^11 а качественное определение суимарных антп-Н%ентд-тел, ИВе Ад, в НВеАв. Так^е проводилось определение содержании в оыворогке крови иммуноглобулинов А, и, С, Д, С-3 комплементе, преальбумина, альфа-2 маироглобулпиа, яраноферрнва. Перечисленные показатели определялись в еженедельной динамике (4-9 раз).

Изучение циркулирующих иммунных комплексов проводилось методами ПЭГ преципитации ( Р>2гоп М- <^<^,1977), При обследовании пациентов с хроническим гепатитом В проводилось определение хитра маркеров НВУ (НВ^Ад, НВс 1^11 I НВо й), уровни К, А, 1дЫ, а, С-3 комплемента в циркуляру шда иммунных комплексов. В дополнение и этому нами привлекались данные морфологического обследования (все больные ХВГ В пиели морфологическую характеристику по результатам иункцпонной биопсии печени) и традиционных лабораторных

тестов. За помощь в оформлении морфологического фрагмента работы приношу искрению» благодарность доц.Я.В.Церба в с.н.с.К.В.Эса-улеико.

Определение миграционной активности лейкоцитов периферической крови проводилось ПО иетодико ¡¿.Gecr^e в модификации З.Г.Морозова в БД. Хавинсона (1Э8и) как пря ОБГ В, так и при ХВГ В,

НВТ-теот с мононуклеарзии периферической крови проводили по методике Park В.II, n Good A., 1970, также у болышх как с острой, так я с хронической формой НВУ-иифекции.

В указанных теогах воздействие на клетхя осуществляли такими антигенами как HBgAg-, HBcAg, ЛПЧ, ФГА, пирогеиел, а также модельными иммунными комплексами разного размера. Исследования проводились 3-х кратно в течение пребывания пациентов в стационаре: в период разгара заболевания, в период угасания клинических симптомов и в период ранней рекоивалесценции.

Сопоставление спектральных характеристик с традиционными лабораторными показателями проводилось путем анализа кроскорреляцвов-ых матрякс.

На первом этапе исследований потребовалось разработать в стандартизировать методи^подготовкв образцов сыворотки кровв для проведения измерения ыезодом ЛКС. Бнло определено влияние таких факторов, как разведение сивороткв, рН растворителя, параметров центрифугирования, хранения, температуры, фильтрации, а такхе пищевого режима пациентов на характер распределения макромолекулярных структур енвороткв нровя. Это позволило установить, что для максимальной стандартизации получаемых гистограмм необходимо использовать сыворотку кровв без добавления консервантов, взятую натощак, освобожденную от клеточных элементов центрифугированием при 200 ^ в течение 25-30 мин. Перед измерением оызоротка разводится в 25-30 раз физиологическим раствором о рН 7,4. Количество сыворотки,необходимое на одно исследование-0,02-U,04 мл, время измерения 4-6 ывн.

Совершенствование чисто диагностических возиомюстей метода лазерной корреляционной спектроскопии с регуляризацией привело к " разработке новой тает системы с чувствительностью IO-IUU пикограмм, что превышает чувствительность ишуноферментиого метода в 10-100 раз (Заязка на изобретение Hi 4835139/14, положительное реаенне от 25,10.91г.).

Теоретические расчеты и экспериментальные дишше показали, что существенный вклад в формирование спектральной характеристики сыворотки крови здоровых лиц вносят иммуноглобулины А,Ц и й.

Проведенные экспериментальные исследования по моделированию вируееши и антигеиеыии продемонстрировали возможность пряной индикации вирусов и субвирусных структур в сыворотке крови с чувствительность», близкой к РИГА (Заявка на изобретение 11» 4012894/29 приоритет от 17.01.86,положительное решение от 28,05.87г.).

Применение ЛКС с регуляризацией для изучения иммунокомплекс-ного процесса показало, что этот метод является наиболее удобный для определения размеров ИК (Авторское свидетельство 1й 1672972) поскольку з отличие от электронной микроскопии, ультроцентри^уги-рования и др. не вызывает изменений в нативной среде. Кроме того, поскольку размер ИК определяется по гидродинамическому радиусу (диаметру), такая характеристика наиболее полно отражает возможные особенности поведения иммунных комплексов при циркуляции в крови, как в жидкой среде.

Моделирование ишунокомплексного процесса проводилось с вирусами кори,грипа, НЕ;Ад,НВсАд, путем определения размеров иммунных комплексов в зависимости от соотношения в системе антиген-антитело и присутствия белков системы комплемента. В дополнение к этому осуществлялось определение алектрофоретической подвижности модельных иммунных комплексов,характеризующей их поверхностный заряд, как одну из важнейших характеристик биологических объектов (так назы ваемый дзета-потенциал), который во многом может определять поведени ИК в отношении клеточных мембран.

Проведенные эксперименты показали,что исходный размер вируса влияет на размер ИК только в зоне избытка антигена (147 нм для вируса гриппа и 289 нм для вируса кори). Ыоделыше иммунные комплексы, близкие по раьиеру к исходному вирусу,сохранны и свойственную ему злектрофоретическуы подвижность,а,следовательно,обладают дзета-потенциалом,характеризующим мивой вирус. В присутствии белков системы комплемента требуется значительно меньшая концентрация специфических антител для резкого изменения электрофорети-ческой подвижности цоделышх иммунных комплексов в зоне избытка антигена или примерного соответствия. Это сопровождается увеличением средних размеров выявляемых структур по сравнении с модельными иммушшмц комплексами без участия белков комплемента. В этом

оввре, предоставляется перспективным изучение патогенетических свойств комллеыеиг-содерхащих шшунлых комплексов. Наин исследования позволили разработать "Способ определения С-3 содержащих циркулирующих иммунных комплексов" (Заявка 1й 4757282/14 от 04.11,89, положительное решение от 25.Iu.9Ur.).

Таким образом,экспериментально подтверждена роль белков системы комплемента э противовирусной задав на этапе гуморального иммунного ответа.

Наиболее существенной особенностью модельных иммунных комплексов (ШК),образующихся о НВсАд к НВ5А^; отличницей, их от вируосоде-рлащих МИК; является процесс параллельного образования дзух вариантов иммунных комплексов в зоне примерного эквивалента между антигенами и антителами: мелких с размерами около 60 нм и крупных о размерами около 400 им.

В то хе время следует указать,что патогенетический процесс при НВУ-инфекция не ограничивается поступлением в кровь только вирусных антигенов. Как правило^ выявляется целый ряд белковых структур, таких как ЛПЧ, мптохондряальпио белка и т.д. (Блвгор Л.Ф., 1980-1Э90ГГ,), по отношению к который развивается гуморальный ответ. Это послужило поводом к моделированию иыиунокомплеконого процесса с белковыми антигвнаги» Длн этих целей нами использовался ово-альбу-мин, а такае была пг'' г гена динамика образования маяромолекулярных структур в растворе ы.' /яоглобуляна & под воздействием сыворотки крови больных, содержащих различное количество ревматоидных антител (от 0 до +++•).

Проведенные исследования показали, что саше мелкие болково-содержащвв ИК также, как и зяруосодерлацнв, образуйся в избытке антигена. Однако они значительно превосходят размер, возможный для связанных мезду собой. одной молекулы антигена я одной молекулы антитела. Это хорошо согласуется с известными сведениями о том, что в растворах коллоидов и полуколлоидов, белковые структуры образуют ассоцпаты или мицеллы, а не находятся в диспергированном состоянии.

В целом можно утверждать, что имеется выраженная общность а процессе образования иммунных комплексов с вирусами, субвируокм-ми структурами я белками. Размеры ПК могут широко варьировать от 20-30 нм до нескольких сот им, о в зоне избытка антител или при эквивалентных соотношениях аегсду антигенами к антителами достигать 1000 ни и более.

Точность определения размеров модельных нммушшх комплексов била проверена в яезависсиюа эксперименте с фильтрацией через

ядерную цембрану о диаметром пор 500 им.

Таким ойрагои, основная масса 1Ш по рашораи существенно превышает диаметр фиаиологычеокнх пор в ыеиораках, что делает назозио-нш их пассивное шаедение. Ото послужило доводои к научению воздействия 1Ж иа иктиввость ишунокомпетентных клеток,участвующих в их элиминации.

Изучение способноота модельных содэркащих иммунных комплексов влиять на подвижность лейкоцитов в РШ, а также их слоооб-вость активировать мононуклеары периферической кровв в НБТ-тесте у 280 Сольных с НВУ-шфекцве! (220 ОВГ В а 60 ХБГ В) показало, что свойства зависят от размера ШК,

Мелкие модельные иммунные комплексы (ШЛК), в целой чаде вывивают торможение итерационно! активности лейкоцитов (у 40-30,8,3 в разгар заболевания и з период угасания клинических симптомов при ОВГ В и у 48$ - при ХВГ В. Крупные ШК, напротив, стимуляцию (у 28,1р в период угасания клинических симптомом при ОВГ В в у 60% больных - ХБГ В)« Про анализе способности модельных HBSA^ содержащих иммунных комплексов стимулировать завершенный фагоцитов периферическими ыононуклеарами крови было установлено, что мелкие МШС 4 период разгара ОВГ £ способны вызывать стимуляцию более выраженную. чем пирогенал (0,2^ + 0,01 усл. ротив 0,2QtG,ol усл.ед,

При ХВГ В выявлено сшшинве стимулу. „ »'о эффекта от крупиых Ш1К до 0,15 +0,08 усл.ед, при ХАГ и 0,17 усл.ед. при ХПГ).

Сопоставление способности к завердешюау фагоцитозу периферических мононуклеароа н.рови при ОВГ В с уровнем циркулирующие иммунных комплексов показало, чю спонтанная активность ыононуклеаров тем выше, чей выше уровень ЦИК, а способность реагировать на стимуляцию, напротив - ииае.

Это позволяет считать, что активаций периферических мононукле-ороа KpoiiH как модельными НВ^А^. содержащими ПК, так в естествеины-ии циркулируем« виыуьиими комплексами идет по одному типу. Следовательно, по характеру иимуиокомплексиого процесса можно косвенно судить о функциональной активности ицмунокоипетентиих клеток, которой предается больное значение в патогенеза ИВУ-пнфекцив,

Моделирование патологического процесса in , позволило

обосновать принципы анализа гистограмм сыворотки крови.

Эксперименты пи фракционированию отдельных белковых структур сыворотки крови (крупных irlK, иммуноглобулинов й) полностью подтвердили подученные при моделировании иммунопатологического процесса

даяние о влиянии отдельных белковых структур на форииро-ваиие интегральной спектральной характеристики.

Таким образом, предлагаемый принцип и метода изучения характера распределения макроиолекулярних структур сыаоротдн крови мояно рассматривать как способ объективной оценки пвиенений,происходящих в жидкой фрлсцли крови и косвенно отрахащпИ состояние клеточного иамунигета.

Конкретный анализ патогенетического значения характера распределения 'Д!ЛС сыворотки кроззи при НВУ-инфекцпн можно было осуществить, оценив вооыожное влияние терапии, в чаотности,дезш!токсикациониой герапип полимерсодержавдыи препаратами <гемодез,реойОлнглйхин),которые широко применяются как в острый период ОВГ В,тан и з период обострений хронического гепатита Б.

В результате проведенных исследований, как ^ vitho% так и m vivo было установлено, что использование указанных препаратов существенно влияет на характер распределения ыакромолекуляр/шх структур сыворотки крови ('.!', (^усиливая агрзгационнио процессы. Следует подчеркнуть, что у гемодеза способность уомливагь агре-гационныо процессы в отношении вирусов выше, чем у реополиглюкина (и полиглшина), а в отшенни иммуноглобулина (I<j G) - ниае.

Обнаруженные изменения иакромолекулярного состава вирусоо-дэраащнх растворов и иммуноглобулина Q- з присутствии полимерсодер-¡шдос препаратов позволило предположить их влияние на ход диагностических еврологичеоких реакций. В частиост^при анализа механизма РИГА нами было уотанозлзпо (авторское свидетельство fe I57I606), что,сорбировав мономеры I^G на полимере,удается повысить чувствительность РИГА в 10 раз, не сникая специфичности. В 10 ко время указанные препараты существенно ухудшают результаты шмуноферионтного анализа при выявления HBsAi^ и НВсАв, приводя к лоано-полоаитольным или лошш-отрицательниц ответам. Полученные в эксперименте данные были проверены путем тестирования 196 сывороток крови оольиых до в/в введения лекарственных растворов л сразу же после введения в течение 4-х дней по специально разработанной схеме у 32 больных на наличие и НВсАц. После озеленяя уиаэанных препаратов анализ ешюрогкя проводился a ïeCï системах института им.А.С.Г&иался (HBc-I^M) и фирмы "Диаплюс" (liBc-IyC) з 2-х вариантах: окспрзсс-тест и полный тес». Введение лекарственных препаратов приводило и существенному изменению экстиг-нкции (в 20-43,7% проб), которое обусловливало неправильное коли-

чественное определенно иапршсешюсти НВ5-антигенеш1В,а в 6,25,; случ; ев к оаибиаи качественного определения. При определении НВсЛв доа-нополояительше резул ьтаты существенно чаще выявлялись в разведениях сыворотки l:Iuü я I:IüOü (в б из IG сери! экспериментов).

Т&кже било установлено существенное влияние этих препаратов на количественны* уровень и размеры образущихся в их присутствии модельных иммунных комплексов.

В частности,происходит уменьшение размеров крупных иммунных комплексов (на 16,6$ в присутствии геиодеза я 68,3$ - реополягдю-кияа) и ухудшение их выявления ПЭГ прецвпитациев в зове примерного эквивалента ые*ду антигенами к антителами: сдвигается максcuyи образования ПЗГ-преципитагов в сторону соотншеаиМ о избытком антител.

Таким образом,как модельные аксперименты, так я данные, полученные при обследовании пациентов с ОВГ В убедительно помазали влияние терапии полиыерсодержащшш препаратами на точность определения маркеров Ш-инфекцию я характер распределения üüiC сыворотки кров*.

Установлении! аффект для гемодеза и реополиглькина вабледался ивнее 2-х суток после их прииеиения.

При клштко-лабараторнои обследовании 73 бодыих коры) и 52 больных псориазом использовалась схема обследования, которая наряду со специфическими для каждой патология показателями включала в себя общие: определение уровня иммуноглобулинов А, U,C, С-3 комплемента в количество цирку лиру шдак ИК. Это выполнялось для того, чтобы сопоставить вклад оя укааашшх белкоимх структур в интегратив-нуи характеристику спектра с учетом нозологии.

Проведенное сопоставление показало, что при двух заболеваниях, различающихся по этиологии и патогенезу, характер распределения ШС сыворотки крови,при согласованное схеме обследования,шел корреляционную связь о различными показателями традиционного лабораторного обследования я IOQ/S спектральные различия в пределах 2 сигм иааду собой.Последнее позволяет говорить о том,что изменения ШС сыворотки крови,наблюдаемые при кори я псориазе, определяйся различными причинами. Это хикже демонстрирует возможность использования метода ЛКС в качестве диагностической процедуры при скрииингошх обследованиях. Однако,в азом случае возможности ЛКС представляются лам более ограакченкшицчеи при анализе в ранках одно* нозологии, Tax как нельзя теоретически исключить некоторую однотипность про-

явлений патологического процесса при различных заболеваниях.

Такой подход к изучению макромолекулярных структур сыворотки крови обусловил необходимость сопоставления получаемых результатов с данными традиционного обследования больных с НВУ-инфекцией. Изучение динамики HB -антигенемии при ОВГ В показало, что уровень HB антигенемии прямо пропорционален тяжести течения заболевания ( 4,12+0,14 при легкой, 5,12+0,15 при средне-тяяелой и ^ 6,2+0,14 при тяжелой форме), достигает максимальной концентрации на 1-7 день келтушного периода и монет использоваться в качестве одного из критериев тякести болезни. Однако, такое заключение не касается комагенных форм ОВГ В,при которых описывается иная динамика (Блюгер А.Ф. с соавт.,1978). Наши исследования показали необходимость дополнительного из"! лшя данного вопроса, поскольку было установлено влияние дезинтоксакационной терапии на результаты тестирования сывороток в И ФА.

Снижение уровня НВ„ A<j у 27% обследованных больных носило волнообразный характер,и,в целом, чаще отмечалось при тяжелой форме заболевания (у 25^5 больных). Указанный характер НВ3Ag-генемии соответствует результат»,полученным и другими авторами (Глушкова Е.С., 1989), Элиминация НВ5-антигена существенно чаще и быстрее отмечалась при легкой форме: у 11% больных к моменту выписки из стационара (5 неделя от начала желтушного периода). Таким образом,полученные данные о характере HB -антигенемии подтвердили зависимость между ее напряженностью, длительностью и тяжестью заболевания.

Результаты определения НВеА^ в сопоставлении со средними о титров HBS Aq показали абсолютную зависимость между уровнем НВ5 антигенемии и выявлением НВе А^. Это позволяет утверждать, что количественное определение HBSA^ информативно в отношении реплика-ционной активности вируса. Полученные результаты хорошо согласуются с данными Волского H.A. Ц990).

Суммарные анти-НВ5Ав выявлялись в значимых количествах лишь у болышх легкой формой, начиная с 5 недели от начала желтухи. При средне-тяжелой и тяжелой формах заболевания ми отметили колебание "подпороговнх" значений экстинкций (близких к отсекающей). Эти колебания были обратно пропорциональны уровню HBsAg в крови: при волнообразном течении антигенешы в период снижения уровня HBjА£. подпороговие значения анти-НВ&Ав увеличивались,а при повышении - снижались. Таким образом,несмотря на то, что подпороговне значения не могут быть использованы как диагностические, тем не менее,

нх кодобания, связанные с уровней аитигвиьиап, позволит интерпретировать их в сопоставлении с оценкой шшувокомллексного процесса.

Изучение динамики уровня НВсАв в остры* период О ¿Г В показало, что он бьд з?ец лише,чем тяжелее протекало заболзвашз, Лшь у 1%% больных в сыворотке крови выявлялись НВсАв 1^1! в отсутствии ВВ^Ар, У ода повторяли дииаывку НВ<,А^.

Наряду с изучением динамики специфических маркеров ИВУ—па— фекции проводилось определение уровня в сыворотке крови иммуноглобулинов А,Ы,С,Д,С-3 комплемента, преальбуиина,травоф«ррвна в альфа-2 ыакроглобулииа в динамике заболевания (еженедельно). Результаты такого наблюдения показали, что все перечисленные показателе существенно изменяются при ОГ' причем их изменения носила отчетливую связь с тяжестью течеь. 1 заболевания и сроками обследования. Наиболее четкая зависимость между степенью изменении и клинической тяжестью заболевания выявлена для преальбумина, что позволило разработать "Способ оценки тякести ОВГ В" (заявка на изобретение № 4В39953/14 от I5.06.9Dr,, положительное решение от I3.Q5.9Ir.).

Сопоставление уровня иммуноглобулинов сыворотки крова с особенностями Ш^-антигенемин позволило разработать "Способ прогнозирования течения вирусного гепатита" (заявка иа изобретение 1Ё 4839и70/14 от I2.G6.9Qr.» положительное рвыеиие от 29.03.91г.). Указанный способ основан на выявлении количественного содержания НВ5антигена в сыворотке крови в динамике заболевания в сопоставлении его о уровнем иммуноглобулина Д. Его применение позволило повысить точность прогноза развития хронического гепатита в 2 раза по сравнению со способами, основанными на определении длительности НВ/антигенешш.

Изучение количественного содержания ДНК в сыворотке крови при ОВГ В показало,что существенно чаде (89,1-81,3^) онв выявляются при тяжелом течении заболевания и на более высоком уровне (0,156+0,0080,231+0,011 ед.О.П,). Частота выявления ЦЦК была в целом максимальное при ОВГ В в разгара заболевания (бб,7#) в в период угасания клинических симптомов (63,8%). Такхе заслуживает внимания то,что максимальный уровень ЦИК при телом течении ОВГ В наблюдается а период ранне! реконвалеоценции.

Анализ корреляционных связе! между изучаемыми показателями при ОВГ В продемонстрировал, что,характеризуя ОВГ В в целом,можно вы-

делить четыре группы показателей: I группа - все специфические маркеры, П группа - АлЛт, Вил., день болезни и день лелтухп, Ш группа - иммуноглобулины Л,М,0-,С-3 комплемент и транс^еррик, 1У группа - иммуноглобулин Д,прегльс>уцпн,алБ$а-<': иакроглобулин. В каждой По указанных групп отмечамгея довольно выр.гсонныв корреляционные связи ;ле*ду воиедиими з нес отдельная показателями, з то время как ме»ду иоконателпцй разных гр^лп корреляционные связи либо итсуютвуэт , либо лвляится слзбици.

как иавоещо»показатели, имекчио сильные корреляционные связи ые».ду собой.менее-объективно характеризует совокупное явление, чем сравнительно независимые, но при условии, что эти независимые показатели имеет доказанное патогенетическое значение. Последнее позволяет считать,что выделенные четыре группы показателей характеризуют патогенетический процесс при СВР с различных сторон, а. следовательно,к наиболее объективно.

В целом,Подводя итог анализа корреляционных связей иеч:ду отдельными лабораторными показателям при ОВГ В, в тоы числе с учетом клипяческой тяжести заболевания, можно отметить, что наиоолсс стабильными является стаи специфических маркеров мепду собой, срокоа обследования н уровня алашшаминотрансфсраземия и билирубинецпл.

Изучение характера распределения макромолекулярных структур при ОВГ В а процесса болезни на 1-6 неделе от начала желтушного периода показало, что основной тенденцией является увеличение р 1 з— иероз крупных структур к их относительного количества, а такав нарастание нолпдлсперсности ¿ынвляеиих структур. Эти результаты хорошо согласуется о экспериментальными данными о динамике ишу-нокомплексного процесса в сочетании с перераспределением соотношений белковых структур сыворотки крови по результатам традиционного обследования (иммуноглобулины, С-3 комплемент, и др.).

Последнее позволяло рассчитывать на то,что удается установить наличке корреляционных связе? между изиенениями спектральных характеристик и результатами традиционного лабораторного обследования.

Для того, чтобы составить более определенное представление о "спецИ'? нчиостн" выязлломых изменений з гистограммах скворотки .тро-вп при ОВГ В, били проанализированы корреляционное связи мосду спектральными характеристиками сыворотки крози и содер-пнием спе-цп}п аешх карваров НВУ-ан^екции. Ото показало, что на протяжении всего периода ¿аболевлния отмечается корреляционная связь от уме-

реиноМ до ciubiiois ио*ду опактрильийы характером, уровнем НВ^аатвхе веиии, титром НВсАз Ig U и "подпорогошмп" значениями антв HBjAb.

Таким образом,результаты корреляционного анализа спектральных характеристик сыыоротки крови с диаащкой специфических иаркеров при ОВГ В отчетливо подтвердили экспериментальные данные о том,что характер перераспределения сыворотки крош пригоден для контроля аа специфическим процессом,так как тесно связей с этиологическое причиной! заболевания. Это отирало возможность использования метода ЛкС с регуляризацией для диагностики заоовеваний. Выявленные коррелпциошше связи спектральных характеристик с уровнем иммуноглобулинов А ,/4,(},Д,циркулирующими иммунными комплексами к остальными научаемыми белками были вырааены в разной степени на разных сроках болезни (анализ проводился ыа примере средне-тяжелого течения ОВГ В как цаиоолзэ часто встречаемого к типичного для данной инфекции).

Сравнительна« оценка коэффициентов корреляции спектральных характеристик с количественным содержанием маркеров в сыворотке крови показала,что чем тяжелее протекает заболевание,тем выра^ек-ве£ становятся корреляционные связи.

Классификационный анализ гистограш больных острим гепатитом с наличием маркеров ИВУ-инфекции а крови и здоровых лиц из контрольное группы установил, что точность диагностики составляет 96,6$, специфичность 95,'^чувствительность 97,1$,диагностическая эффективность Эв,6,!/ (яри SOj2 и оолве вероятности классификационного разделения). Клиническая тяжесть гаоолвьания окиьывала влияние на степень разделения. При легко! форме разделение больных от здоровых составило 100^, при средне-тяжелой так как 11$ спектров было отнесено з группу "ELSE", При тяжелой форме Ъ,', спектров больных ОВГ В были отнесены в группу здоровых лиц, а еще 3£-в группу "ELSB".

При анализе клинико-лаоираторных данных пациентов о маркерами ИВУ инфекции в сыворотке крови, чьи пробы били отнесены классификационное лрогракаой в группу "EiSK11, оказалось, что у них кроме маркеров НйУ выявлялись анти- НАУ 1^11 s диагностических количествах,

В указанной варианте сопоставления учитывались пробы сыворотки крозд^ полученные во всех точках динамики. Для определения возаочного влияния сроков обследования ни кдисоификациониое разделение бодышх ОВГ В а здоровых лиц был выполнен понедельны! анализ. Это позволило установить, что на 1-2 неделе желтушного периода и на 4-5 неделе от Ъ% до % больных ОВГ В были отнесены s группу здоро-

"H

BliX ЛИЦ. В ТО .лО ВРСМЛ ТОЛЬКО 2,'j ГНСЮГрШШ сыворотки крови здоровы лиц били отпасены в группу uuju.umx ОВГ В и тольго ¡п I-;1 недоле '«.слтуаиого периода. Таким обрзао:.'.,срс,',няд ojiiói-.a отгооонип больных к здоровий лицам в целом при ОВР В по предала 5JÎ, а здоровых к больным ,67.;.. leu не монио, довольно нисокая ctjiiííht. разделения спектральных: характеристик с ¡¡воротки крови больпмх с нзлпчиеи И£У-иаризроп от .'.дороги лиц еце ¡.с достаточна ,»ля реального использован».)! дамшх о :.!,:С емворохгн upoi;n в клииическоП щ-авгикв. Ha san взгляд ошга необходимо определить степень самостоятельности спектральных характеристик сыворотки больных üßf В в сравнении с гепатитами другой уткологии. ¿'г о úuhq прелеереио путем класси'Ликециойко-го сравнения спектров сыворотки кроьи сильных ОСГ Л, Ш'Г В * дельте ОBf л + В, с острым гепатитом без ыарнороз и тохеичеекгм гепатитом па 'Jone иронической интоксикации хлоро)осно?. этиологии.

Г л и:си]ш:ациошш£ анализ спектров сыворотки боныг'.х ОЗГ В и ОЛГ Л нока.^л bifjj разделение, лииь Z,'> ravi 0141а;,v., ci::o¡>nг п щ>ом болпшх ОБГ В смлн отнесены з группу ОВГ А оиноочно.

Рап.г.'Л'Шв с группой иацяеитом с ш.сичесыпи гензгитом составило 'A/i, н олмоочно бпли отнесены в группу с хронической химической интоксикацией.

Сопоставление спектральних характеристик UBI' !J f дельта я OBI1 В покапли шикую (45,5) вероятность его разделения, однако при ОВР В + дельта отличил от глстогрлми адорозих лиц б*лп I U...

При однойримепном обнаружении в сыворотке кроии мериеров HB¿' л 11/1У спектральные характеристики позволяли хороло отличать их от сивороток пациентов с гепатитом A (ib,;) и значительно хуже от гепатита В (77;:), ото,видимо,показывает,что при микст инфекции определяющее значение а изменение характера распределения '''С сыворотки крони имеет НВУ-инфекция.

При классификационном анализа группы спектров сыворотки крони пациентов оез иаркеров ИВУ и КАУ и указанием на парентеральное вме-шательегзо или контакт с гепатптои В было установлено, что только гистограмм 'íopnпровали самостоятельную группу, с 16, спектров были отнесены и группу токсических гепатитов и в группу гепатита В. Б нашей работе, среди нацистов без маркеров в сыгоротке крови у 9 nj 31 пациента сил осшпру:геп и состаге Ш!К после пх диссоциации.

Таким образом, ио^но ух'кергдать, что к ряде слу^ес ОВГ В протекает ni ч отсутствии езободнмх маркеров в сыворотке kj.o1;«. Такие

¿и

пациенты «л'ут рассматрт-атьон - качеств« сиаосмывльыои группы о силу ооооьиностьй патогенетического процесса.

Прошдвпиоо сопоставление характера распределения i-ii.lt; си.>о-ротиИ крови при ОБГ Б и гепатитах инок этиологии показало, что указанная характеристика ьпедье яригодьа для иссарисс-лиагностыин (время ьн:лиаа 4 минуты) и скршшнгових исследоиакмй, учитывая, что при всех изученных заоолеваьия-с степень отличиЬ от группы здоровых лиц составляла 84-.100;:;, а от пациентов с ОЬГ А и топоы-юски-ыи гепатитами 89-1'Л,2.

Таила об^аооы, я^учеаце -¡МС сыворотки крови при ОБР и подтвердило, что они отрашиьт динамику специфических маркеров и перераспределении содержания белков сыворотки крови и циркулирующих ПК, и могут раосиатрмбач-ься в ычествь интигри;ь но* характеристики пато-гонетйческого процесса.

'Ото послужило поводов дл;; инучсшш ^о^мо^иостей прогиооировз-иии развития хронического гепатита Б по гистограммам,отрлкакл'Ш Характер распределения ЖС сыворотки «розв.

Классификационный авэлиз спектров сыворотки крови ;.'7о оилашх, нерионачально трактовавшихся ^ик ОВГ В (среди лих 59 пациентов с маркерами ВГ>У и КЛУ, ГТ с Н^У + дельта и 220 - с наличием только маркеров ¡1ВУ}„ в сравнений с дишимп оиолидшипия Па иог.ььых ХВГ В показал, 1Т0 II,спектральных характеристик uo.ni.ux оы1 В были отпесыш 1С ХВГ В, а о,5/. в группу "£¿^1:". Лля ОВГ Б в анализ были вюыичаШ! ьсе точки ¿.ииаиыки. Клиническая тнтссть ..аиоле^ная на указан.и;* характер распределении существенно не влияла.

Таким обр&^ол,с веронтностьп 811-100/.' в группу ХВГ В оилм отнесены пробы от 9 пациентов (4 только о маркерами 11БУ, 3 - с ИВУ и 11АУ икс НВУ + дельта). С вероятностью 50/« и более и группу ХВГ В были отнесена адозы 21 пациента (I? с ми^ерзии НВУ, 6 с »¡арксерамм Ш+Н..У, и 3 с НВУ+дьльта).

В дрооехх выворотки крон»; .отнесенных к ХВГ В с вероятностью ¿0-1 иО^ по Ср.внйнцы с имыропами Крови сольных СВГ (в целом), еуцисим.лши Ы'.„.и ОМЛ уровень ИВс'и 1дЦ (¿д 1,79+0,04), 1дД (0,07+ 0,ои4 г/л), альфа-!: иакроглабулипа (Г:,; 7+0,11 г/л) и лле содержание иммуноглобулинов С-3 конплелента (3,04+0,11 г/л, 15,2+0,5 г/л и 1,12+0,>4 г/л соответственно). При сопоставлении оо средними „¡ни чеинями показателей о учетом тнжооти точения ОВГ В и периода обследования било установлено, что в просах,отнесенных к ХВГ В с вероятностью 80-100,1 уроаеиь Ш^Аф бил шше,чеы в соот-ветстау<ифп. период болезни при ОоГ В как при тяжелом, средне-тн-е-

лом и легком течении заболевания. Также ниже был уровень НБс Ав

М и иммуноглобулинов М,С и Д. При сопоставлении лабораторных показателей проб,отнесенных к ХВГ В с 50% и более вероятностью и 80100/», было установлено,что,чен ниже был уровень НВс М и Д и выше содержание НВ5 Ад и иммуноглобулинов М и тем с большей вероятностью по спектральным характеристикам пробы относились к ХВГ В.

Анализ классификационного разделения в зависимости от сроков обследования показал,что у 7 человек из 21 уке на ранних сроках болезни (9,3+0,7 д/б,2,17+0,07 д/ж) распределение ММС сыворотки крови соответствовало типичному для ХВГ В. Как было установлено впоследствии у ^ из них,госпитализация была обусловлена впервые диагностированным ХАГ В, а трое переносили ОВГ А на фоне ХПГ В (диагнозы были подтверждены при морфологическом анализе биоптатов печени и по динамике серологических маркеров в сочетании с традиционными критериями).

У остальных 14- пациентов первые две недели желтушного периода характер распределения ММС сыворотки крови соответствовал типичному для ХВГ В,однако с третьей-четвертой недели они стали соответствовать ХВГ В. Развитие хронического гепатита у всех этих пациентов было подтверждено последующим клиническим наблюдением.

Сравнение клинико-иммунологических показателей пациентов, чьи пробы были отнесены в группу ХВГ В на I неделе желтушного периода, и тех, кто попал в группу ХВГ В на третьей-четвертой неделе продемонстрировало,что,несмотря на резкие отличия серологических профилей, они имели общие характеристики, такие как: низкий уровень НВс М, более низкий,чем при циклическом течении, уровень Д, альфа-2 макроглобулииа, более высокий в целом в динамике заболевания, уровень 1ч И и более длительную гиперферментемив.

Таким образом .пациенты,отнесенные к ХВГ В по данным спектральных характеристик,отличались от остальных больных ОВГ В по всем 4 группам независимых показателей. Это позволяет говорить об особенностях патогенетического процесса,приводящего к хроническому течению НВУ-инфекции.

На основании нлшшко-лабораторнмх показателей у больных с ОВГ В,перешедшим в хронический гепатит В, мохно выделить два патогенетических варианта формирования ХВГ В.

I. Высокая репликациопная активность вируса, проявляющаяся высоким уровнзм НВ -антигенеыии и слабый гуморальный ответ - вы-ракавдийсл в низком уровне образования специфических антител класса

I д ¿1 (в частности НВс ¿1), еон^овомдаадйся аоштошои ой него содержания а в аезисшатилькии поиииением I д Д в резким сии-иением ингийиторной активности (по данный контроля за альфа-2 макроглобулином).

2, Низкая релллкациоллая активность вируса - лроядшвдаяся ии-шш уровней антигенемии и соотьатствуицш* такому слабому антигенному раздражению слабый гуморальный ответ, сопровождающийся активацией факторов неспецифичеслой резистентности.

Полученные представления о патогенетических механизмах хро-низацив ОВГ В позволили разработать терапию у больных с високоЕ степенью риска развития хронического гепатита В ("Способ лечения аатяшшх форм острых вирусных гепатитов", авторское свидетельство 1а 1593666).

Результаты^полученные при обследовании больных с ХВГ В показали, что они в основном хорошо согласуются о известными из литературы даашши (Логинов л.С. о соам.,19,.7). Однако динамика некоторых показателей заслухньла отдельного анализа. В частности, у 82 пациентов из 151 больных ХВГ В был установлен диагностический титр аятыотрептолиэшт-О, что могло расцениваться как наличие сопутствующей стрептококковой инфекции у больных ХВГ В. Проведенные нами исследования ^

и сп показали, что при ХВГ и ОБГ В неспецифическое иовшеиае тичра в реакции ыеЕтра-лизации происходит ьа счет свободного холестерина сыворотки крови. Это позволило разработать "Способ определении вторично! стрептококковой инфекции при пирусном гепатите", авторское свидетельство 1ё 154399:3. Так же было выявлено резкое снижение Е в сыворотке крови 4-х больных ¿АГ (25-30 иг/ил) при отсутствии достоверно! разницы в его уровне при ХАГ и ХЛГ о учетом активности процесса, по средний значениям. Поскольку по мнению ряда исследователе! (Й^ч&Ип к 1971; Сг.^и^ У./О Са.Шп 3. 1974)

резким сши-.сниои уровня Е сопровождается развитие злокачествец-вих олухоле»:, это позволяет предположить, что дальнейшее наблюдение за пациентами с низким уровиеи Б в сыворотке крови позволит установить связь этого показателя с риском развития первичного рака печени. Повышение содержания 1д £ при ХВГ В отмечалось только у Л'Щ с отягощенным аллергологичес*еу ипыц&ои или с проявлениями аллергических реакций на продукты и медикаменты (такими,как появление эудяцеЯ сипи, отечности лица л т.д.).

Проведении! анализ корреляционных связей иеиду показателями при ХЕГ В установил, что при ХЛГ устойчивая корреляционная связь

отменится между уровней гамма-глобулинов сыворотки кройи и аль-буци! ;ин. При ХПГ отмечается устойчивая корреляционная связь меаду всеми белками протеннограммы. Такай обра;юи?полученные данные подтверждают иарастащуи дисиротцинемии при ХЛГ и демонстрируют, чао при ХПГ нсменених в протеинограшо пооят более сбалансированный характер.

Обострение ¿аболевашя как при Ш',так и Х11Г сопровождается появлением пряных корреляционных связе! между "индикаторный фер-ивнтоы" ГГТП, "экскреторный ферментои" ШФ, клеточноопецифвчеокви ферментом 5 ПУК и альфа I-глобулинами. Па над взгляд^ото свидетельствует о патогенетическое общности природы обострений при разной степени морфологических изменений.

Научение характера распределения ШС сыааротни крови при ХВГ В показало выраженный полиморфизм, который ,видимо,определил небольшое количество сильных корреляционных связей меаду лабораторными показателями (только для альбуминов в гамма-глобулинов) и спектральными характеристиками.

Избирательное осавдемие мис с гидродшаиичооквмв размерами (в) 5и0-1000 ни в сыворотке крови 20 больных ХБГ В показало, что они являится крупными иммунными комплексами, в состав которых входил а основном и (49,4/5), а у 14 пациентов - 11В<,Ад. Это позволило проанализировать некоторые ышыико-лабораторнш данные сольных с ХВГ В в зависимости от наличия в их сыворотке структур о размерами 1^00 ни. В результате аило устаноьлено, что у пациентов с наличием в сыворотке крови крупных структур уровень сывороточных I ^ Ы в I ^ 0-, а тек*^ С-3 комплемента был выше, чем у больных без них.

Анализ оиоптатов печени в зависимости от наличия крупных ШС в сыворотке крови (идентифицированных как крупные ИК) показал, что при их выявлении увеличивается относительное число нектрофилов в клеточном инфильтрате до 51,9*4,08/4, вмеется тенденция к увеличении моноцитов (до 2^,313,2^), Возрастает активность ЩФ на периферии печеночной дольки до 17,3±и,4 усл.ед. по сравнению о II:,27 ±о, у больных бее крупных, структур. Коэффициент капшшяризации печеночной дольки и,873±и,045 свидетельствует о выраженных процессах капнлляризацаи. Таким образом,появляется возможность говорить о овя-аи меаду ди»шшко* шмунологаческого процесса в сыворотке крови в в морфологическими характеристиками. Это позволяет считать, что появление в сыворотке кроаи кранных иммунных комплексов приводит к относительному увеличении в пирахэнмом органе клеток, осуцествля-

щях алиминацию иммунных комплексов и обуславливает болев выраженное нарушение проницаемооти капилляров. Такой вариант оцени- паго-л отческого процесса при ХВГ В позволяет по-новому аодойта д принцип аи терапии сольных ХВГ В, в честности, рекомендовать методы, дозволяющие выводить крупные ПК из циркуляции ("Способ очистки крови"* авторское свидетельство № 1588139} с целью - добиватьоя ремиссии»

Классшрдкациошшй анализ гистограмм сыворотки крови оолышх ХВГ В показал, что он позволяет выявлять их среди здоровых лиц о диагностической эффективностью 36,4$, точностью 96,4$, чувствительностью 96,6^ и специфичностью 96^5 (при 5,.% и более вероятности).

Классификационное разделение спектральных характеристик в зависимости от традиционного деления ХВГ на ХАГ и ХПГ показ влц что у Зб£ больных ХАГ и 43£ больных ХПГ наблэдается обцность в характере распределения ЫМС сыворотки крови. Дальнейший классификационные аналив с учетом хлииико-ыорфологичоохях признаков обоотрспия иди ремиссии установил, что при ХПГ у 97% больных результаты классификационного разделения соответствовали представлениям о низкой активности патологического процесса и у 71% - о повышении активности, при ХАГ такое соответствие установлено для 63% больных с обостренней и 13% о ремиссией.

Таким образом,стало очевидно, что использование дополнительной информации об активности патологического процеоса существенно улучшает результаты классификационного разделения* Это показало необходимость продолжить поиск таких дополнительных критериев, которые смогли бы существенно повлиять на формирование сравниваемых групп, с целью более точной характеристики патологического процесса.

В нашей раооте в качестве таких дополнительных критериев были использованы коэффициент канилляризации печеночной дольки и соотношение между траиомембраиныи и траясэндотелиалышм транспортом и центре печеночной дольки, разработанные проф.Прочухаиовым Р.А. и от.научным сотрудником ЦНИЛ СПбМ ни.акал.И.[I.Павлова Е.В.Эоауленко.

Анализ спектральных характеристик в зависимости от соотношения меаду траномеибранным и трансаядотелиальныи транспортом в центре печеночной дольки показал, что при превалировании гралеэндотели-ального транспорта в сыворотке крови выявлялись крупные структуры о радиусом 6011-10 им и вкладом в рассеяние света 35,7^5. Превалирование трансмембраиного транспорта отмечалось у пациентов с наличием в сыворотке к[юви структур 397+11 км и их вкладов в рассеяние

света 27,8/0. Улааанние структуры ндитцицириааны как лрушша ишун-нив комплексы. При сопоставлении двух характеристик ородкего размера и относительного вклада и рассеишаие света ошю установлено, что существенные различия иооаится разнеров вылвлнемых структур, а ни их вклада в рассеивание света, ^то показывает, что для патогенетического процесса^обусловливавшего превалировании тр.люмеыбран-ного транспорта над траисзндотелиильниц^оолыаие значение имеет диаметр циркулирующих иммунных комплексов, а не их количество. Зто^ на ниш взгляд, является еще одним доказательством существенной роли ишуцокоцпликсного процесса в характере структурных изменении в печени при хроническом гепатите В.

м раоотах но изучении и р^ологпчеокмх а ию^ахпимч1.сцшс параметров блоптатов печени при Х.АГ и Х11Р сило показана, что наиоолыпео лабораторные и морфологические отличия отмечается ме;г:ду пациентами о коэффициентом капилляризации печоыочной дольни К болео 0,7 и К менее (Шувалова Ji.il.-, Прочуханов Г.А. с зоивх. ,199и). Клиссифшсациошш1 анализ показал отличия в пределах 2 сигм между их спектральными параметрами. ;>то позволило мспольоо^ать сформированные группы в качестве отилоиних и о помощь» клаосифшш-ционыоМ программы в реаимо п5РИ'Г» сгруппировать опектральные характеристики всех обследованных иольиых ХЬГ В, Таким образом,удилось иыделить три группы спектр.»лышх характеристик: две соответствующие ¿талонным и третьи, так наоНиаомую "независимую" грунпу(Рис1) ¡Л'«.ь;ду соаой ати группы хорошо разделялись и продолах и5-Ьл.'% по спектральным показотел»ы5^1о данный традиционного ооиле^ошаля си-воротки крови пациентов, классифицнровалние в соответствии о коэффициентам капылляриаации, отличались ме^ду оооо« с высокой лосто-вириостьи по Г? из15 контролируемых параметров, .»ти убедительно подтвердило ив случайны! характер разделения в .^виеимости от эталонных групп„сформированных ни осиоьаннн коэ^нционта канилляриаа-цни (К более и,7 и К иенео >,?). Средние значения контролируемых показателей у аольпих, чьи спектральные характеристики не могли иить отнесены к сформированным по гистохимическому критерию группам, отличились более низким уровней иилируоинеипи (практически на уровне физиологическим нормы); менее вираьеииоИ гииорышиинаиинотрансфе-раасмиеМ, минимальными и-мен^иияаи и протеинограмма.

Провиденное сопоставление продеионстрироиало, что шьмтральиив различия хорошо согласуется с гистохимическими изменениями а оиоп-татах печени и стопоньи отклонений обычных клипико-лаооратирнмх

Intensity distribution.

K<B, 7

]

й\\\\)ш

ВС пи» У.

494.82 17 3D

56.34 49 18

11.15 27 99

4.23 5 53

ГЬ 1

Intensity distribution.

K>0, 7

---г.- ^ | r-f—l]

10

190

R<nn) /. 448.00 68.88 44.61 22.14 6.os 3.39 3.88 3.22 2.84 1.78 2.48 d. 61

1980

R(ni

Intensity distribution. IndeptnJent variant

R(im> •/.

148.55 B3.B5 13.79 15.31 3.39 D.20 2.71 0.65

nnrtTinn~o-ii-J~

Рис . I

Средние значения ФРР сыворотки крови больных ХВГ В соответствующие классификационному разделению по степени выраженности капилляризат печеночной дольки ( К>0,7 - выраженная капгтллярнзация; К<0,7 -слабо выраженная катшщризация. independent variant - средние значения ФРР сывороток крови вольных не поддающиеся классификации

от степени капилляризации)

Рис. 2

Классификационное разделение спектров сыворотки крови вольных ХВГ В в соответствии с эталонными группами, сформированными на основании выраженности капилляризации печеночной дольки I группа - К <-0,7 ; 2 группа - К>0,7 ; 3 группа -независимая

показателей. Это обосновывает вероятность точной морфологической характеристики на основании анализа крови, что делает вовмозтзд, в рлдо случаон, отказаться от нункционной оиопсии, без потери объема информации о патологическом процессе.

Как оило установлено, характер распределения иакромолскулпр-ных структур сыворотки крови интегрально отряжает ва::.':е?аие патогенетические процессы: такие как антигенешю и вирусешпо, ослко-вие норулешш, имыуноконнлексным процесс и хорошо согласуется как с данными традиционного морфологического обследования, так и гистохимическими и иымуномор^ологическиии критериями, '¿то позволяло провсстл анализ активности хронического гепатита В у обследованных пациентов в зависимости от особенностей распределения макромолекул ярных структур сыворотки крови.

Для достоверного разделения на спектральные группы нлш бала использована классификационная программа, работаючая в автоматическом режиме "ЗРИТ". Т&кш оорл~ои аили получены четырз группы спектральных характеристик оолышх ХВГ В, наиболее однородных внутри себя и максимально отличавшийся мему собой. Степень самостоятельности спектральных характеристик составляла 84-101$ (рис,3-4). Определить диагностическую ценность такого классификационного разделения мохно было,проведя сопоставление с данными традиционного клинико-лас'ораториого обследования пациентов.

Такое сопоставление позиолило установить, что все группы отличались между собой ыинииуц по шести из 15 определяемых показателе!, причем, чем вше оыл процент различии по спектральным характеристикам, тем больше выявлялось достоверных отличий в средних значениях традиционных лабораторных тестов.

По даннш традиционного морфологического обследования^ I группу относились пациенты с ХЛГ вне обострения, а в 1У только пациенты с ХПГ вис обострения. Во П и Ш спектральных группах были пробы больных как с ХЛГ, гак и с ХПГ. Гистохимическое исследование биоптатов ткани печени у пациентов 1-Ш групп показало, что максимально выраженная капилляризация печеночной дольки отмечалась у пациентов П спектральной группы, а минимальная-у больных Ш группы. Такде они отличались по коэффициенту^отражающему соотношение трано-мембранпого и триисэыдотелыального транспорта как в центре дольки, гак и на ее периферии.

Таким образом^все четнри спектральные группы могли быть четко охарактеризовали как по лабораторным, ток и по морфологическим критериям.

первая спектральная группа

четвертая спектральная группа

Intensity distribution.

RCrm> •А

165.ев 87.64

21.74 3.41

13.99 8.61

5.47 0.(32

2.74 0.32

10ВВ

R(nn)

В IB '108

Рис. 3

Средние значения ФРР макромолекулярных структур сыворотки крови больных ХВГ В соответствующие классификационному разделению на четыре спектральные группы

КЛАССИФИКАЦИОННАЯ КАРТА

И

shg3 shgl

е Ise 10А Т/. 8 А

shg3 70А 93 У. О'А

shgl 20-х От/, 92 У.

первая спектральная группа третья спектральная группа

Ряс. 4

Степень самостоятельности спектральных характеристик сыворот крови сольных ХВГ В в зависимости от классификационного разд ления в режиме " split

КЛАССИФИКАЦИОННАЯ КАРТА

shg3 shg2

else 10/. вх ЗУ.

shg3 52 У. вбх 37.

shg2 38 Y. 5K 94*

2 вторая спектральная группа

3 третья спектральная граппа

Рис. 4 ( продолжение )

КЛАССИФИКАЦИОННАЯ КАРТА

КЛАССИФИКАЦИОННАЯ КАРТА

•н

з1лд4 5Ьд2

е1зе 10/, 0 V. 10У.

<0>д4 24/. 100/. ОУ.

ьь-л 0/. 90У.

о 2 спектральная гриппа 4- 4 спектральная группа

+

Рис. 4 (продолжение)

Анализ особенностей клинических проявления ХВГ В зал; ..,ати от принадлежности к то« или другой т указанных спектральных групп показал, чтоб? споктра-чьшзи группа соответствовало такое течение ХВГ В, при которой клинические признаки были минимально .еыраженны-ми. В частности, проявления диспептичеокого и астеио^егетативыого оиндроаов отмечались у 2/3 больных, в то время как у остальных они отсутствовали. Гепатомегллия Пила незначительной.

У пациентов I спектральной группы существенно чаще (41$) отмечались сплеиомегалия, проявления геморрагического синдрома и "печеночные знаки", зстрачался асцит. В то не время симптомы интоксикации были вырадени умеренно и значительно менее, чем у болышх П и Ш спектрильных групп. Это позволяет сделать заключение, что в I спектральной группе бнли отнесены пробы оыворотки крови, полученные от больных с хронический активным гепатитом В о цирротичес-кой стадией заболевания, которую ыожно рассматривать как определенный итог развития патологического процесса.

У больных,отнесенных к Ш спектральной группе,иаблвдзлись максимально выраженные проявления диспептического и астеновегетативаого синдромов, увеличение размеров иечвни в среднем составляло 2,35+0,15 см, более чей у 1/3 пациентов отмечалась сплеиомегалия, у 1/5 - артралгив. Среди лаоораторных показателей обращали на себя внимание наиболее высокий уровень гиперферментемии и оилируйинемии. Это позволяет сделать уакличенае, что ля клинико-либораториым данный активность патологического процесса у пациентов этой группы была максимальной.

Пациенты, отнесенные ко П спектральной группе,по своим клиыа-ко-лабораториыи данным занимали промежуточное положение меаду I а О группами.

Таким образом, группы^сформированные на основании спектральных характеристик, независимым от исследователя методом, имели достоверные различия как и клинических прояздонлях заболевания, так и в стопени морфологических изменений в ткани печени.

Указанные клинико-лаоораторные различия в характере ¡¡атологи-чеокого процесса у больных выделенных групп позволяют их охарактеризовать в целом следувдим обраооы:

1. Компенсированный хронически! гапатит В (1У спектральная группа).

2, ХВГ В с высокой активиоотьв патологического процесса (Ш группа).

•»- ХВГ В с уисрешюй активностью патологического процесса (П группа).

ХВГ В о нивкой активностью патологического процесса (I группе).

Такое определение активности существенно дополняет применяемую в стационарах клшшко-лабораторную и морфологическую оценку.

При научении МПС сыворотки крови при остром вирусном гепатите В было показано, что по этим характеристикам возможно прогнозирование развития хронического гепатита В. Выделенные четыре варианта активности патологического процесса позволили проанализировать, в какие группы попалаит гистограммы больных о ОВГ В, у которых- впоследствии формировалось хрояячеокое заболевание печени. Классификационная программа относила их спектры либо к 1У спектральной группе (компенсированный ХВГ В), либо к Ш (ХВГ В о вноо-кой активностью патологичеокого процесса). Полученные данные хорошо согласуются о представлениями о дьух вариантах развития хронического гепатита после ОВГ В, описанными нами ранее.

В то кз время это также соответствует широко распространеной точке зрении, что ОВГ В модет заканчиваться формированием хронического компенсированного процесса, после которого возможно полное выздоровление, либо патологический процесс сохраняет высокую активному приводящую к существенным структурный изменениям в печена о последующим возможным снижением активности до умеренпой или низкой.

Таким образом,использование полученных данных об активности патологического процесса при ХВГ В при аналиае прогноза ОВГ В позволяет не только с высоком степенью достоверности предсказать развитие хронического заболевания, но и определить его активпооть.

Это открывает новые возможности для терапии больных о НВУ-инфекциай.

В заключение приношу искреннюю благодарность физикам: д.ф,-м.н. В.Л.Ноокину, Л.Л.Лебедеву, Л. Р. Клейнеру, без которых выполнение данной работы было бы невозможно.

ВЫВОДИ

I. Научен характер распределения ыанромолекулярных структур сыворотки крови■ при НВУ инфекции, что существенно углубляет представления о патогенезе заболевания и позволяет усовершенствовать его практическую диагностику и лечение.

2. (¿«год лазерной коррадяциошюк спектросвошш о регуляризацией

а классификационными программами полет бить использовав для клвии-но-лабораториого обследования пациеитов с вирусный гепатитом В в другаии заболозанияш!.

3, Характер раопродилешш иаироиоливулярише структур сызоротки кроля явтогральио отражает перераспределение различных белковых озруи-тур,включая вируон, вируоаио антигены, иммуноглобулины, бедки систецц комплемента, альбушты, атипичные болковме структуры и вииуиаые комплекси разных разборов.

4« В динамике патологического процесса при острой вирусной гепатите В изменения иакроиолекулирних структур а диап&аоио рашоров(и) 20-50 вы, 50-60 ни, 500 ви и более, являются наиболее типачныив, о чей свидетельствуст сшшшо корреляционные овязи отих трупа Ш1С о другими диагностическими показателями клинико-лаоораторного обследования.

5, По характеру изменений и ¡шроиолокулярных структур сыворотки крова при острой аируоноы гопатнто В возможно прогнозирование развития хронического гепатита В о диагностической оффектавноотьо к определение активности фориарувдегооя хронического процесса.

6, Пациенты о хронический вирусным гепатитом В, кмещиа четкие иор^ологическио, гистохииаческие и ишувоморфологичеоиие различия существенно (84-100>) отличаются по характеру распределения иакро-колекулярных структур сыворотки крови, что позволяет нспольоова» предлагаемый иетод обследования в качестве самостоятельного диар-постлчзсного теста.

7, В аазисииости от характера распределения макромолекулпрных структур сыворотка крови можно выделить, независимым от исследователя методой, четыре варианта течения ХВГ В с достоверными кл;шико-лабо-раторвши и морфологическими различиями з активности патологического процесса! коипонсированпый хронические гепатит В, хронические гепатит В высокой активности, хроннчоекий ranaiaT В yuapemios активноо-ти и хронический гепатит Б низкой активности ^отологического процесса.

В, KouncHciipouuhUMii лВГ характеризуется иинималькими клаинчеокиии пропаданиями и незначительными иименонилиа стандартных показателей лабораторного обследования, а морфологически соотьитст^ует хронв-ческому перснстирущоиу гапитнту В нивкой активности. L> сыворотке крови больных,по данный ЛКО,отсутствует значишь шаад от макромо-лваулярнмх структур в размерами болаа ЗиО ни (по р^^^ ).

9. Хронически! вирусиий гепатит В высокой активности харакхерв-вуется максимальном выраженностью симптомов интоксикации« гипер-¿ермеатемии и гипорбилируйияемии. и может наблюдаться как у пациентов с морфологическими признаками ХАГ, так в ХПГ. В составе иакромолекулярных структур сыворотки крови больных отмечаегоя максимальный вклад в рассеивание света от структур R более 300 км, с резким уменьшением суммарного вклада от мелких структура 0-30 ны

10. Хронический гепатит В умеренно! активности характеризуется уиерзнно-вираженниип симптомами интоксикация, морфологически чаще всего соответствует ХЛГ, но иожет встречаться н при ХПГ. Распределение макромолекулярных структур в сыворотке крови больных при ХВГ В умеренной активности напоминает их распределение при высокое активности патологического процесса, отличаясь от него уыеньпениеи относительного количества крупных структур (R 300 им - 5U0 ям и более) И увеличением вклада в рассеивание света от мелких структур (R-3Ü ни).

11. Хронический вируоний гепатит В низкой активности сопровождается частыми проявлениями геморрагического синдрома, спленомега-лией и морфологически соответствует ХЛГ цирротическо! стадии. Распределение макромолокулярных структур в сыворотке крови больных характеризуется резким увеличением суммарного вклада от мелких структурно - 30 нм) и незначительным вкладом от крупных структур

( R 50J ни и более) в рассеивание света по сравнению с остальными выделенными спектральнгыи группами.

ПРЛКГИ 4LCKHE PLKüMElW АЦИЙ

С цельс совершенствования диагностики н лечения больных о НВУ-кн^екциоа рекошзндуется:

- при выборе тактики ведения больных с ХВГ В руководствоваться объективным определением активности патологического процесса

по характеру распределения мекроыолекулярных структур сыворотки крови, интегрально отражающему основные патогенетические изменения, происходящие в жидкой фракции крови;

- испольаовать данные о ШС сыворотки крови для прогнозирования развития хронического течения при НВУ-ин^екции;

- при обследовании больных с ХВГ В использовать данные о ЬОС сыворотки крови для решения вопроса о степеыи морфологических изменений в печени (ХЛГ или ХПГ). путем классификаций о эталонными

группами и вероятности! оценкой, выраженном а

- определение уровня проальбумина в сыворотке крош для оценки тяжести течения заболевании при ОВГ В(

- в патогенетической терапии активного патологического процесса при ХВГ В использовать "Способ очистки крови",основании! на выведении крупных иммунных комплексов из циркуляции с цельо снижения активности заболевания;

- при обследовании больных на стрептококковую инфекцию учет титра антистрэлтоллзииа 0 проводитьв сопоставлении с уровней свободного холестерина сыворотки крови;

- использовать метод лазерной корреляционном спектроскопии о регуляризацией и классификационный» программами при проведении скря-нинговых обследований, как экспресс-диагностическим тест;

- при количестьийноы определении маркеров ХВУ-иифекции в сыворотке крови учитывать влияние терапии полиыерсодсраащшн препа-раташ на результаты ИФА и РИГА, и проводить заоор крови на исследования на ранее, чей чероа сутки поел-- их введения.

Список изобретений и заявок, по которым получено положительное решение]

1. Способ определения вторично* стрептококковой инфекции при вирусном гепатите» Авторское свидетельство № 1543999.

2. Способ определения противовирусных аититед. Авторское свидетельство К» I57I506,

3* Способ очистки крови, авторские свидетельство и 15ь8139.

4. Способ лечения эатяшшх £дрм острых вирусных гепатитов. Авторское свидетельство & 1593666.

5. Способ определения размеров ЦИК. Авторское свидетельство b 1673972.

6. Способ выявления вирусемин. Заяака Iii 4ül2b94/2ö, пол.решение OT28.G5.87r.

7. Способ прогноза течения гепатиты В, Заявка te 4Л433В/14-48 220 пол.решение от II.05.8Pr.

8. Споооб определении ь-з содержащих ЦИК. Заявка te 475V28r:/I4 пол, решение от 25.Iü.9Ur.

9. Способ выявлания антигенов и антител. Заявка « 4ü3;>I39/I4. Под. решение от 25.10.91г.

10. Способ прогнозирования точения вирусного гепатита. Заявка Ш 483907/14 под.решение от 29.04.91г.

II. Способ оценки тлиеоти ОВГ В. Заявка 4839953/14, пол. решони-ние от 13,05.91г.

Список работ, опубликованных по теме диссертации;

1. Клинико-нммунояогичеокие и морфологические особенности хронического вирусного гепатита. Доклад на продленной встрече специалистов "Кяшшко-иммунологич. и иор^ологич.аспекты хронических гепатитов". И,, ВДНХ СССР,1989г. (соавт.йувалова Е.П. и др.)*

2. Лазерная корреляционная спектросокпия для скриниговых обследование. ((Сб.науч.трудов "Диспансер.больных с инфекционной пат.".Л.,1987,С.77-83 (соавт.Яковлев А,И,»Омельченко B.C. и др.)

3. Возможности методов, восстанавливающих функцию распределения частиц пи размерам в вирусологии и шшунологии. Препринт АН СССР, ЛИЯФ, Л., te 1330, 1987 - 24с. (соавт.Блюгер А.Ф., Яковлев A.M., Ноский В.Д., Носков Ф.С. и др.).

4. ¿Экспериментальная оценка детоксикационного эффекта плаз-мофереаа, связанного с элиминацией циркулирующих иммунных комплексов ((Респб.сб.науч.трудов "Детоксикац.терапия при травмат.болезни

и острых хирургич.заболеваниях".Л,19,9. - С,91-94 (соавт.Громов U.H., Омельченко B.C.).

5. Диагностические возможности метода ЛКС при изучении хронического вирусного гепатита о использованием алгоритма классификации ((Стенд.докл.иа ВДНХ СССР,19в9 (соавт.Лебедев А.Д., Ломакин А,В., Носкин Б.Л. и др.).

6. Оценка реакции антиген-антитело на иодели вируса гриппа методом ЖС ((Тез.дохсл.П съезда гигиен.сан.врачей, ыикробиол., эпидемнол. и паразитол. Молд.ССР "Проблем:! эпидемиол..микройиол. в па ре антологии", Кишинев, 1987 -с 25'..,

7. Иовме принципы и методы о иммунологических исследованиях при инфекционных заболеваниях. Там zet С. 78 (соавт.Яковлев A.M., Карзова Б.;;.).

tí. ЖС в оценке гуморального иммунитета у больных корью ((Сб. "Новое з лабораторн.дипгн.болезной внутренних органов. Тез. докл. 1У съезда реопублчк,научи.общества врачей лаборантов. Ворошиловград, 1989,с.516 (соавт,Лучшвв В.П., Паров С.Н, и др,)

9. Результаты сопоставления данных ЛКС сыворотки крови и лик-вора у больных ОРВИ оолохиенними серозным менингитом (Сб.института гриппа, 1990г. - С,134-137 (соавт.Рахманова л.Г., Исаков В.Л., Омельченко B.C.).

10. i вопросу о дифференциальной диагностике рака головы н

шеи ((УН съеад рентгенологов и радиологов УССР,Tea.докладов. Винница, 19Б9г.,27-29 сентября,С.315 (соавт.Шеломенцев г).А., Меркулов Ь,Г., Дегтярева О.Л., Евсеев H,.i,),

11. Иммуноглобулин К при хронической гепатите В. Постер. Пловдив, 19ЭОг. (соавт, Е,П.Шувалова, Эсауленко Ь.В,, Романова А.В.).

12. Новые принципы оценки патологического процесса при вирусной гепатите В ((В кн. Молекулярные механизмы развития инфекционных заболеваний Тез .докл. Всес.конф. Минздрава СССР,Ш СССР,1990, C.I3G-I3I (соавт.Шувалова Е.П., Эсаулеяко Е.В.,Носкин В.А.).

13. Динаыика формирования иммунного ответа при кори у взрослых. В кн.Факторы клеточк.и гумор.вммук.при различных фиаиол. и патологических соогояниях((Теа.докл.Хиаучн.конф.,Челябинск,1990,

С. 53-54 (соавт.Жаров С.Н., Санин Б.П., Лучшев В,И. а др.)

14. Новые аспекты патогенеза хронических гепатитов. В кп,» Материалы оьеада. ЦЪсво,съезд г&арэатбрологов. 1990,3Ujc.(Соавт.Эсаулеако К.В.).

15. Особенности гуморального иммунитета при кори у взрослого городского населения. В кн.{Влияние факторов внешне* среды на реактивность организма. Киев-Ворошиловград,1990,1.2,С.П (соавторов С.Н., Санин Б.Н., Ведунова С.Л.).

16. Новые аспекты патогенеза псориаза. В кн,:Уат-риалы науч-но-практич,конференции дерматовенерологов Латвии.Рига,1990г.С.24

(соавт.Абрашсина Li,Д., РазнатовскиИ 10.!!,).

17. иеханизм развития осложнэнных ¿ори гриппоаной инфекции. Материалы научн.практ.конферонц.Актуалыше вопросы инфекц,патологии.1990.Тольятти,С, 21 (соавт.Исаков В.А., Рахманова А.Г,,0моль-чеико B.C.),

18. Новые направления в научении патогенеза В144 ин^кщш. Там ке, 1990 - С.55-17 (соавт. Исаков В.А,, Бодосова Н.А,, Омель-ченко B.C.).

19. Использование ДКС а иаучоили патогенеза вирусных ин^екцик ((Сб.врудов ин-та Гриппа U3 СССР, Л.,1991, С.68-96 (соавт.Иса-коз в.А,, Омольченко B.C., Цоскин В,А.).

20, Use of correlative laser spectroscopy for hepatitis B virus and its substructure indication in blood serum. The }Sg7 International Symposium on Viral Hepatitis and Liver Disease.1987,London, p|P< ( A.F.Bluger, V.A.Noskin

et al.7

21. The Employment of Hew Methods of Evaluation of Immune System Distnrtations in HIV-infected People.Saglik Dergi 62,N 1, 1990s ( Rachmanova- A.G., Isakov V.S., Omelchenls