Клинико-лабораторная и морфологическая характеристика хронического гепатита С с учетом распространенности гипергомоцистенемии и аминокислот (цистеин, серин), участвующих в его метаболизме

Никитина, Олеся Евгеньевна

Диссертации по медицине → Детская хирургия

Автореферат и диссертация по медицине (14.01.19) на тему:Клинико-лабораторная и морфологическая характеристика хронического гепатита С с учетом распространенности гипергомоцистенемии и аминокислот (цистеин, серин), участвующих в его метаболизме

ДИССЕРТАЦИЯ

Клинико-лабораторная и морфологическая характеристика хронического гепатита С с учетом распространенности гипергомоцистенемии и аминокислот (цистеин, серин), участвующих в его метаболизме - диссертация, тема по медицине

АВТОРЕФЕРАТ

Никитина, Олеся Евгеньевна Санкт-Петербург 2010 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.01.19

Автореферат диссертации по медицине на тему Клинико-лабораторная и морфологическая характеристика хронического гепатита С с учетом распространенности гипергомоцистенемии и аминокислот (цистеин, серин), участвующих в его метаболизме

На правах рукописи

НИКИТИНА ОЛЕСЯ ЕВГЕНЬЕВНА

КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНАЯ И МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА С С УЧЕТОМ РАСПРОСТРАНЕННОСТИ ГИПЕРГОМОЦИСТЕИНЕМИИ И АМИНОКИСЛОТ (ЦИСТЕИН,. СЕРИИ), """ УЧАСТВУЮЩИХ В ЕГО МЕТАБОЛИЗМЕ-"""""

14.01.19 - инфекционные болезни

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

003490 172

Санкт-Петербург 2009

003490172

Работа выполнена в Научно-исследовательском институте гриппа СевероЗападного отделения Российской академии медицинских наук

Научный руководитель: доктор медицинских наук

Эсауленко Елена Владимировна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук профессор Антонова Тамара Васильевна

доктор медицинских наук профессор Белозеров Евгений Степанович

Ведущая организация: ГОУ ДПО «Санкт-Петербургская государственная медицинская академия последипломного образования Федерального агентства по здравоохранению и федеральному развитию»

заседании диссертационного совета по защите докторских и кандидатских диссертаций Д.208.090.02 при ГОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию в Научно-исследовательском институте пульмонологии (197089, Санкт-Петербург, ул. Рентгена, д. 12, зал заседаний Ученого Совета)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (197089, Санкт-Петербург, ул. Л. Толстого, д.6/8)

Автореферат разослан " декабря 2009 г.

Ученый секретарь совета по защите докторских и кандидатских диссертаций,

доктор медицинских наук профессор А.Л.Александров

часов на

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. В настоящее время в мире насчитывается более 180 млн. человек, инфицированных вирусом гепатита С. До сих пор HCV-инфекция остается одной из серьезнейших проблем современной медицины, что обусловлено стабильным высоким уровнем заболеваемости, преимущественно латентным течением, значительными затратами на диагностический и лечебный процессы, а также отсутствием специфической профилактики [Антонова Т.В., 2002; Сологуб Т.В., 2002; Яковлев A.A., 2002; Шахгельдян И.В. и соавт, 2003; Гусев Д.А., 2006; Alter H., 2005].

Основным проявлением HCV-инфекции является хронический гепатит С (ХГС), который длительное время протекает бессимптомно, и финалом его естественного течения становится цирроз печени, а, в ряде случаев -гепатоцеллюлярная карцинома [Рахманова А.Г., 2004; Лобзин Ю. В. и соавт., 2006; Marcellin P. et al., 2002; Poynard T., 2003; Shepard С. et al., 2004].

Как за рубежом, так и в нашей стране множество исследований посвящено изучению патогенеза развития фиброза и цирроза печени у больных ХГС. Известно, что к механизмам его формирования относят оксидативный стресс и стресс эндоплазматического ретикулума, индуцируемые вирусом гепатита С. При этом особая роль в развитии иммуно-воспалительного процесса отводится цитокинам [Фрейдлин И.С., Тотолян A.A. 2001; Буеверов

A.О., 2002; Павлов Ч.С. с соавт., 2005; Антонова Т.В., 2006; Гарбузенко Д.В., 2008; Широнина H.J1., 2008; Shuppan D., et al., 2003; Tardif К. et al., 2005; Choi J. et al., 2006].

В 90-е годы в литературе появились единичные работы, посвященные изучению аминокислотного баланса у больных с патологией печени различного генеза [Нефедов Л.И. и соавт., 1997; Капо T. et al., 1991; Campollo О. et al., 1992]. Одним из важных, но мало изученных, аспектов данного направления остается роль гомоцистеина (ГЦ) в развитии и прогрессировании фиброза печени, особенно при его повышенной концентрации. Гомоцистеин -серусодержащая аминокислота, которая является продуктом метаболизма незаменимой аминокислоты метионина. Одним из путей утилизации ГЦ является транссульфирование с участием фермента цистотионин-бетасинтазы, кофактора витамина В6 и аминокислоты серина в результате чего образуется цистотионин, который далее превращается в цистеин [Жлоба A.A., Никитин

B.В., 2004; Medina M., 2001; Fowler В., 2005]. Поскольку ключевая роль в утилизации ГЦ принадлежит печени, нарушение ее функции в связи с недостаточностью синтеза ферментов может приводить к увеличению уровня ГЦ в плазме крови больных [Garcia-Tevijano Е. et al., 2001; Adinolfi L. et al., 2005; Ventura P. et al., 2005]. В свою очередь данные современных исследований свидетельствуют о том, что ГЦ сам способен оказывать повреждающее действие на клетки печени, вызывая оксидативный стресс, стресс эндоплазматического ретикулума гепатоцитов и индуцируя выработку провоспалительных факторов (IL-lbeta, IL-6, IL-8, NF-kappaB), а также способствуя развитию стеатоза печени

[Poddar R., 2001; Wang G., 2001; Werstuck G. et al., 2001; Zeng X. et al., 2003; Ji C., 2004; Zou C. et al., 2008]. Доказано, что ГЦ имеет одинаковые точки приложения с ВГС, структурные и неструктурные белки которого вызывают в клетках печени однотипные изменения. Ученые расценивают данный факт как возможную причину развития у больных ХГС некро-воспалительных изменений в ткани печени, а также прогрессирования фиброза с формированием у данной категории больных гепатоцеллюлярной карциномы [Li К. et al., 2002; Okuda M. et al., 2002; Mahmood S. et al., 2004; Thoren F. et al., 2004; Roblin X. et al., 2007; Teixeira R. et al., 2007]. Следует отметить, что данный вопрос остается на сегодняшний день окончательно не решенным и требует дальнейших исследований.

Вместе с тем до настоящего времени не определена частота встречаемости повышения уровня ГЦ, а именно гипергомоцистеинемия (ГГЦ), при ХГС, ее роль в патогенезе заболевании, возможность использования полученных данных для прогноза течения заболевания и своевременном применении медикаментозных средств, направленных на коррекцию данного состояния.

Цель исследования: оценить распространенность

гипергомоцистеинемии и уровень участвующих в метаболизме гомоцистеина аминокислот цистеина и серина плазмы крови у больных хроническим гепатитом С с учетом длительности инфекционного процесса и клинического течения заболевания

Задачи исследования:

1. Установить долю ХГС в общей структуре хронических вирусных гепатитов с учетом распространенности различных генотипов HCV у больных, впервые обратившихся за консультацией в гепатологическое отделение.

2. Охарактеризовать клиническое течение хронического гепатита С с учетом данных лабораторного и морфологического исследований у больных наблюдающихся в гепатологическом отделении.

3. Провести сравнительный анализ клинического течения заболевания и морфологических изменений в ткани печени у больных ХГС при различной длительности инфекционного процесса.

4. Определить уровни общего гомоцистеина, общего цистеина и серина плазмы крови у больных ХГС с различными клиническими проявлениями заболевания и длительностью инфекционного процесса.

5. Изучить частоту встречаемости гипергомоцистеинемии у больных ХГС, в том числе с учетом длительности инфекционного процесса.

Научная новизна работы

Впервые у больных ХГС с различным течением заболевания и длительностью инфекционного процесса определен уровень гомоцистеина плазмы крови, а также аминокислот цистеина и серина, участвующих в его метаболизме.

Новыми являются данные о широкой распространенности гипергомоцистеинемии, как следствия нарушения функции печени у больных ХГС.

Впервые установлена корреляционная связь между повышением уровня гомоцистеина плазмы крови и выраженностью цитолитического синдрома у больных ХГС.

Впервые при сравнительном анализе уровня общего цистеина, серина и коэффициента общий цистеин/общий гомоцистеин у больных ХГС и здоровых лиц, выявлены статистически значимые различия, что свидетельствует о дисбалансе аминокислот в плазме крови больных НСУ-инфекцией.

Впервые показано, что с увеличением длительности инфекционного процесса у больных ХГС увеличивается риск развития гипергомоцистеинемии, и нарастает дисбаланс аминокислот, участвующих в метаболизме гомоцистеина.

Практическая ценность

Полученные в ходе исследования результаты позволяют расценивать показатели уровня общего гомоцистеина, общего цистеина и серина плазмы крови у больных хроническим гепатитом С как критерии нарушения функции печени, а также использовать их для оценки прогноза заболевания.

На основании данных, полученных в результате проведенного исследования, обоснована целесообразность включения в схему обследования больных ХГС уровня гомоцистеина плазме крови, контроль за которым позволит своевременно диагностировать гипергомоцистеинемию.

Основные положения, выносимые на защиту

В структуре больных хроническим вирусным гепатитом преобладает хронический гепатит С. Доминирующими генотипами вируса гепатита С являются 1Ь и За.

Естественное течение хронического гепатита С у взрослых малосимптомно, и протекает преимущественно в латентной форме на фоне выраженного цитолитического синдрома и активного инфекционного процесса.

У больных хроническим гепатитом С формируется дисбаланс аминокислот гомоцистеина, цистеина и серина, что приводит к развитию гипергомоцистеинемии - показателя недостаточности функции печени, которая прогрессирует с увеличением срока инфекционного процесса.

Апробация работы

Материалы диссертации были представлены на Всероссийской научной конференции молодых ученых с международным участием "Актуальные вопросы инфекционной патологии - 2007" Санкт-Петербург, 2007), 2-ом международном научном конгрессе «Человек, алкоголь, курение и пищевые аддикции» (Санкт-Петербург, 2008), 10-м Юбилейном международном Славяно-Балтийском научном форуме "Санкт-Петербург - Гастро-2008" (Санкт-Петербург, 2008), Российско-итальянской конференции «Актуальные вопросы социально значимых вирусных инфекций» (Санкт-Петербург, 2008),

11-м - Славяно-Балтийском научном форуме «Санкт-Петербург - Гастро-2009» (Санкт-Петербург, 2009).

По теме диссертации опубликовано 6 работ, в том числе 2 - в журналах, рекомендованных ВАК.

Пути реализации работы

Результаты исследования используются в работе отделения экспериментальной терапии вирусных гепатитов НИИ гриппа СЗО РАМН, Государственном учреждении здравоохранения Ленинградской области «Центра по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями», внедрены в учебный процесс кафедры инфекционных болезней Санкт-Петербургской государственной медицинской академии им. И.И.Мечникова, кафедры инфекционных болезней с эпидемиологией, тропической медициной Волгоградского государственного медицинского университета, кафедры инфекционных и кожно-венерических болезней института медицины, экологии и физической культуры - подразделения Ульяновского государственного университета.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 125 страницах машинописного текста, состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа содержит 20 таблиц и 13 рисунков. Библиографический указатель включает 231 источник, в том числе 52 отечественных и 179 иностранных.

ОБЪЕМ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Настоящее исследование проводилось в отделении экспериментальной терапии вирусных гепатитов НИИ гриппа СЗО РАМН в период с 2006 по 2009 гг.

Обследовано 767 пациентов в возрасте от 19 до 73 лет (53% мужчин и 47% женщин), впервые обращавшихся за консультацией по поводу хронического вирусного гепатита (ХВГ). Для оценки этиологической структуры хронических вирусных гепатитов у всех больных применялись серологические методы исследования (определение HBsAg, HBsAb, HBcorAb, HBeAg, HBeAb, HCVAb, антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 методом ИФА) и вирусологические методы (качественное определение РНК HCV в плазме крови на тест-системах «Амплисенс» ЦНИИ эпидемиологии МЗ РФ (Москва, Россия), количественное определение РНК HCV в 1 мл крови с учетом результата в режиме real time тест-системами «Амплисенс HCV FRT» ЦНИИ эпидемиологии МЗ РФ (г. Москва, Россия), генотип HCV определяли на тест-системах «Амплисенс» ЦНИИ эпидемиологии МЗ РФ (г. Москва, Россия) с электрофоретической детекцией la, lb, 2 и За генотипов, ДНК HBV с использованием тест-системы «АмплиСенс HBV-470S/BKO-770» («ИнтерЛабСервис», ЦНИИ Эпидемиологии МЗ РФ, Москва).

Была сформирована группа из 106 больных хроническим гепатитом С в репликативной фазе, средний возраст которых составил 31±6 лет (от 20 до 49

лет), из них 68 мужчин (64,2%) и 38 женщин (35,8%) с известным сроком инфицирования вирусом гепатита С. Все пациенты были разделены на три группы: 1 группа - инфицированные 5 и менее лет, 2 группа - инфицированные 6-10 лет, 3 группа - инфицированные 11 и более лет.

Всем пациентам проводилось клинико-лабораторное исследование: оценивались жалобы пациентов, производился общий осмотр, учитывался индекс массы тела (ИМТ). Функциональное состояние печени оценивали по общепринятым биохимическим тестам: активности АлАТ, АсАТ, уровня билирубина и глюкозы крови.

Из 106 больных ХГС у 58 было проведено морфологическое исследование гепатобиоптатов. Выраженность воспалительных изменений оценивалась по индексу гистологической активности в баллах по R. G. Knodell и соавт., (1981) и степень фиброза по четырех бальной шкале МЕТА VIR.

У 55 больных ХГС определяли уровень общего гомоцистеина, общего цистеина, серина и коэффициента общий цистеин/общий гомоцистеин плазмы крови. Результаты сравнивались с данными полученными в ходе исследования соответствующих показателей у группы здоровых лиц, число которых составило 20 человек. Уровень аминокислот определялся в мкмоль/л методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЖХА) . при непосредственном участии заведующего клинической лабораторией НИИ гиппа СЗО РАМН, д.м.н., профессора В. К. Поздеева. В состав ВЭЖХ-системы входил насос высокого давления модель 303 (Gilson, France), манометрический модуль модель 802С (Gilson, France), инжектор проб Rheodyne 7125 с петлей 100 мкл, колонка Biophase DDS 3,5x250мм (Bioanalytical system), флюоресцентный детектор Fluoromonitor 111 (LDC /Milton Roy Co., USA).

Полученные в процессе исследования данные обрабатывали с помощью программы SPSS 15.0. Критический уровень достоверности нулевой статистической гипотезы (об отсутствии различий и влияний) принимали равным 0,05. Характеристики выборок представлены в виде средних величин (М), стандартных отклонений (SD) и ошибок средних величин (SE). Для анализа качественных переменных использовали критерий у2 Пирсона или критерий Фишера для таблиц 2x2. Проверка закона распределения при необходимости анализа количественных переменных проводилась при помощи теста Колмогорова-Смирнова. В последующем в случаях нормального распределения для сравнения двух выборок использовался t тест Стьюдента для независимых выборок, в случаях ненормального распределения U тест Манна и Уитни. Для сравнения более двух независимых выборок использовали Н-тест по методу Крускала и Уоллеса. Для определения силы связи использовали двухсторонний ранговый корреляционный анализ Спирмена в случае ненормального распределения переменных или двухсторонний корреляционный анализ Пирсона для нормального распределения.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Из 767 человек обратившихся в отделение экспериментальной терапии вирусных гепатитов НИИ гриппа СЗО РАМН на первичную консультацию по поводу хронического вирусного гепатита у 552 пациента (72%) диагностировался хронический гепатита С, у 79 пациентов (10,3%) -хронический гепатита В; у 9 (1,2%) больных имел место микст гепатит В+С. Остальную группу - 116 человек (15,1%) составили больные с различными вариантами микст-инфекции: больные ХГС+ВИЧ, ХГС+В+ВИЧ, ХГВ+ВИЧ, ХГВ+Д, ХГВ+С+Д.

При оценке генотипической структуры у 592 больных ХГС, в крови которых определялась РНК HCV, lb генотип был установлен в 42,4%случаев, За генотип - в 41,8%, 1а - в 2,4%, 2 генотип - в 6,3%, сочетание двух генотипов - в 2% случаев. У 5,1% больных установить генотип вируса не удалось.

При обследовании группы пациентов с известным сроком инфицирования, которую составили 106 человек, было установлено, что у 67 пациентов (63,2%) какие-либо жалобы отсутствовали. Причиной их обращения послужило выявление при профилактической сдаче анализов крови на маркеры* гепатитов антител к HCV. Таким образом, полученный результат подтверждает данные литературы о том, что у большинства пациентов с ХГС заболевание протекает бессимптомно.

У 39 (36,8%) пациентов были следующие жалобы: ощущение тяжести или периодически возникающие боли в правом подреберье-у 28 пациентов (71,8% пациентов, предъявлявших жалобы), общая слабость - у 23 пациентов (59% от пациентов, предъявлявших жалобы). При этом, у 7 пациентов (18% от числа предъявлявших жалобы) наблюдалась как слабость, так и тяжесть/боли в правом подреберье. У 5 пациентов (12,8%), предъявлявших жалобы на тяжесть/боли в правом подреберье, отмечалась также тошнота, преимущественно по утрам. У 5 пациентов (12,8%) имело место снижение аппетита, 4 пациента (3,8%) жаловались на субфебрильную лихорадку и 1 пациент (2,8%) - на боли в крупных суставах.

При анализе частоты возникновения жалоб у пациентов с ХГС при первичном обращении установлена прямая корреляционная связь с длительностью инфицирования (коэффициент корреляции Спирмена равен 0,426, р - значение статистики у2 равно 0,001).

Чаще всего у пациентов наблюдался астено-вегетативный синдром -жалобы на слабость и снижение работоспособности, при этом также установлена прямая корреляционная связь с длительностью инфицирования пациентов (коэффициент корреляции Спирмана равен 0,34; р - значение статистики у2 равно 0,001). Второй по распространенности жалобой оказался дискомфорт в правом подреберье (тяжесть, боли). Показатель частоты встречаемости данного явления статистически значимо в группах не различался (коэффициент корреляции Спирмана равен 0,2; р - значение статистики %2 равно 0,11).

При объективном осмотре всем пациентам проводилась оценка индекса массы тела. Результаты анализа представлены на рисунке 1:

□ Недостаток веса Е§ Нормальный вес ^ Избыточный вес О Ожирение 1 степени ■ Ожирение 2 степени

Рисунок 1. Вес пациентов с хроническим гепатитом С (п=106)

У 21 пациента (19,8%) показатель индекса массы тела превышал нормальное значение (18,5 - 24,9 кг/м2) и расценивался как избыточный (от 25 до 29,9 кг/м2). У 11 пациентов (10,4%) ИМТ находился в пределах от 30 до 34,9 кг/м2, что соответствует ожирению 1 степени. У 4 пациентов (3,8%) ИМТ был в предела от 35 до 39,9 кг/м2 - ожирение 2 степени. У 2 пациентов (1,9%) отмечался недостаток веса - ИМТ был ниже 18,5 кг/м2.

Также при объективном обследовании у 6 пациентов (5,7% от всех обратившихся) наблюдалась желтушность кожных покровов, у 10 (9,4%) -были обнаружены телеангиоэктазии. У 87 пациентов (82,1%) пальпаторно определялась гепатомегапия: у 56 пациентов (52,8% всех пациентов) до 3 см ниже реберной дуги по 1. тес1юс1ау1си1ап5, у 31 пациента (29,2% всех пациентов) - 3 см ниже реберной дуги по 1. тес1юс1ауки1ап5 и более. У 19 пациентов (17,9%) пальпаторно печень имела нормальные размеры. Спленомегалия наблюдалась у 9 пациентов (8,5% всех пациентов). Асцита и периферических отеков ни у кого из пациентов выявлено не было.

У 16 пациентов из 106 (15,1%) уровень активности АлАТ соответствовал норме, у 35 пациентов (33%) наблюдалось повышение активности АлАТ до двух норм, у 37 (34,9%) пациентов уровень активности АлАТ составлял 2-4 нормы и у 18 пациентов (17%) показатели активности АлАТ превышали 4 нормы.

При анализе активности АсАТ было установлено, что нормальный ее уровень наблюдался у 22 пациентов (20,8%), АсАТ в пределах двух норм у 53 пациентов (50%), активность в пределах 2-4 норм у 26 пациентов (24,5%) и более 4 норм у 6 пациентов (5,7%).

Полученные данные свидетельствуют о том, что, несмотря на бессимптомное течение ХГС, лишь у немногих пациентов показатель активности АлАТ остается в пределах нормы, а у половины обследованных

превышает 2 нормы. В то же время, повышение активности АсАТ более 2 норм наблюдается менее чем у трети пациентов.

Гипербилирубинемия была выявлена у 34 пациентов (32,1%), однако у большинства из этих пациентов повышение билирубина было незначительным и клинические проявления в виде желтушности кожных покровов и склер наблюдалось только у 6 больных.

Выяснилось, что статистически значимых различий показателей активности АлАТ и АсАТ, а также уровня билирубина у пациентов, не имевших субъективных ощущений по сравнению с больными, предъявляющими жалобы, не было.

Таким образом, полученные результаты соответствуют данным литературы и свидетельствуют о том, что хронический гепатит С может протекать бессимптомно, несмотря на повышение активности трансаминаз в 2 и даже в 4 раза, а также при незначительном повышение уровня билирубина.

Статистически значимых различий при оценке частоты встречаемости отклонений (желтуха, гепатомегалия, спленомегалия), выявляемых при объективном осмотре в зависимости от давности инфицирования выявлено не было (р>0,05).

Статистически значимых различий средних значений биохимических показателей в группах с различной длительностью инфекционного процесса выявлено не было (р>0,05).

Помимо биохимических показателей были также проанализированы результаты клинических анализов крови пациентов с ХГС. Было установлено, что у 7 пациентов (6,6%) наблюдалось снижение числа эритроцитов, у 11 пациентов (10,4%) имело место снижение уровня гемоглобина, у 29 пациентов (27,4%) наблюдалась тромбоцитопения. Анализируя уровень лейкоцитов и соотношение клеток лейкоцитарной формулы, было установлено, что у 11 (10,4%) обследуемых больных наблюдалась лейкопения, а у 5 пациентов (4,7%) - лейкоцитоз. У 6 пациентов (5,7%) была выявлена нейтропения. Изменения в процентном соотношении лимфоцитов и нейтрофилов (сдвиг лейкоцитарной формулы вправо) наблюдался у 47 пациентов (44,3%).

Методом Н-тест Крускала и Уоллеса для нескольких независимых выборок, нам удалось установить, что статистически значимых различий средних показателей клинического анализа крови у пациентов с различной длительностью инфицирования не наблюдалось (р>0,05).

При анализе результатов исследования вирусной нагрузки у больных ХГС было установлено, что у 39 человек (36,8%) наблюдалась низкая вирусная нагрузка (менее 2х106 копий/мл), а у 67 (63,2%) - высокая вирусная нагрузка. Корреляционной связи между степенью вирусной нагрузки и наличием жалоб у пациентов, а также уровнем активности АлАТ и АсАТ в сыворотке крови выявлено не было (р>0,05).

При анализе данных полученных в результате исследования гепатобиоптатов было установлено, что минимальная активность воспалительных изменений (ИГА 1-3) наблюдалась только у одного пациента

(1,7%), малая степень активности (ИГА 4 - 8) - у 23 пациентов (39,7%), умеренная активность (ИГА 9 - 12) - у 31 пациента (53,4%), а выраженная активность (ИГА 13 - 18) - у 3 пациентов (5,2%).

У 2 пациентов с ХГС (3,4%) фиброз отсутствовал (Р 0), у 38 пациентов (65,5%) соответствовал степени Р 1, у 6 пациентов (10,3%) определялась степень Б 2, у 8 пациентов (13,8%) - Р 3 и И 4 диагностирована у 4 больных (6,9%). Таким образом, в обследованной группе больных ХГС преобладали случаи умеренно выраженного фиброза.

Стеатоз печени морфологически диагностирован у 22 пациентов из 58, что составило 37,9% всех обследованных.

Установлена прямая корреляционная связь между степенью ИГА и степенью фиброза у обследованных пациентов - г=0,4 (по Спирману), р=0,006. В то же время, статистически значимых различий степени ИГА и степени выраженности фиброза у пациентов с наличием и отсутствием стеатоза не выявлено (соответственно, р=0,936, р=0,12).

Установлена прямая корреляционная связь между уровнем активности АлАТ, АсАТ и степенью ИГА, фиброза и наличием у пациентов стеатоза печени (табл. 1).

Таблица 1

Корреляционная связь между морфологическими изменениями и биохимическими показателями у больных хроническим гепатитом С

Биохимические Степень ИГА Степень Наличие

показатели фиброза стеатоза

АлАТ г 0,327 0,3 0,346

Р 0,012 0,022 0,008

АсАТ г 0,395 0,398 0,435

р 0,002 0,002 0,001

Было установлено, что у пациентов со стеатозом печени индекс массы тела превышал норму у 17 пациентов из 22 (77,3%), а у пациентов без стеатоза печени - только у 8 из 36 (22,2%) - различие статистически значимо, р<0,001. Также удалось выяснить, что средний уровень трансаминаз у пациентов со стеатозом и без него различались статистически значимо. Так, уровень АлАТ у пациентов со стеатозом печени был более чем в 1,5 выше, чем у больных ХГС без стеатоза печени (р=0,009), а уровень АсАТ почти в 2 раза превышал средний показатель у больных без стеатоза печени (р=0,003) (табл 2).

Проанализировав данные, полученные при морфологическом исследовании биоптатов печени у больных ХГС, было установлено, что показатели степени ИГА в группах с различной длительностью инфицирования статистически значимо не разтличались и корреляционной связи не было (р -значение статистики у2 равно 0,59; коэффициент корреляции Спирмана равен 0,048, р=0,72).

Таблица 2

Сравнительная характеристика больных хроническим гепатитом С со стеатозом

и без стеатоза печени

Фактор Пациенты со стеатозом печени (п=22) Пациенты без стеатоза печени (п=36) Значение р

% выявления ИМТ >24,9 кг/м2 77,3 22,2 <0,001

Средний уровень АлАТ, М±8Э, Ед/л 139,0±85,3 80,4±51,6 0,009

Средний уровень АсАТ, М±5Б, Ед/л 91,0±72,8 47,5±24,0 0,003

Выявлена прямая корреляционная связь между длительностью инфицирования и степенью фиброза (коэффициент корреляции Спирмана равен 0,304, р=0,024). Кроме того, статистически значимыми оказались различия частоты встречаемости высокой степени фиброза в группе пациентов, инфицированных свыше 10 лет, по сравнению с пациентами инфицированными менее 10 лет (р - значение статистики -/2 равно 0,017; коэффициент корреляции по Спирману равен 0,27, р=0,047), в то время как степень ИГА в анализируемых группах статистически значимых различий не имела.

Среднее значение уровня оГЦ в плазме крови у пациентов с ХГС составило 15,9±5,7 мкмоль/л, что в 2,5 раза превышало данный показатель у здоровых лиц (6,3±2,5 мкмоль/л) (р < 0,001).

Средний уровень оЦис плазмы крови также статистически значимо различался в двух представленных группах, и в среднем у пациентов с ХГС составил 252,9±49,7 мкмоль/л, а в контрольной группе в 1,5 раза ниже -172,3±35,3 мкмоль/л (р < 0,001).

Средний уровень серина плазмы крови у пациентов с ХГС составил 113,1±23,3 мкмоль/л, и в 1,4 раза превышал показатель среднего уровня серина у здоровых лиц - 80,9±21,6 мкмоль/л (р=0,001).

Соотношение между уровнем оЦис и уровнем оГЦ (коэффециент оЦис/оГЦ) плазмы крови у пациентов с ХГС в среднем составил 16,99±4,91, а в группе обследованных без заболевания печени - 30,38±9,96 (р<0,001) (табл. 3).

Коэффициент корреляции (по Пирсону) уровня оГЦ и оЦис у пациентов с ХГС составил 0,312, и был статистически значим (р=0,022). Из этого следует, что уровень оЦис у пациентов с ХГС имеет прямую корреляционную зависимость от уровня оГЦ - чем выше уровень оГЦ, тем выше уровень оЦис как продукта метаболизма оГЦ, что указывает на включение компенсаторного механизма превращения оГЦ, направленного на нормализацию его уровня.

Таблица 3

Значение показателей уровня общего гомоцистеина, общего цистеина, общего серина и коэффициента общий цистеин/общий гомоцистеин у обследованных __пациентов

Показатель Группы обследованных Значение р

Больные хроническим гепатитом С, п=55, М±8Э Пациенты группы сравнения, п=20, М±БО

Общий гомоцистеин, мкмоль/л 15,5±4,2 6,3±2,5 <0,001

Общий цистеин, мкмоль/л 252,9±49,7 172,3±35,3 <0,001

Серин, мкмоль/л 113,1±23,3 80,9±21,6 0,001

Коэффициент оЦис/оГЦ 17,0±4,9 30,4±10,0 <0,001

Поскольку серин напрямую участвует в утилизации гомоцистеина, для нас представляло интерес наличие связи между уровнем этой аминокислоты и уровнем оГЦ, а также продуктом метаболизма оГЦ - оЦис. Однако было установлено, что показатели уровня серина не имели корреляционной связи ни с показателями уровня оГЦ плазмы крови (г=0,113, р=0,559), ни с уровнем оЦис (г=-0,176, р=0,362).

Было установлено, что уровень оГЦ, не имеет корреляционной связи с такими показателями как возраст пациентов, активность АсАТ и уровень билирубина. Уровень оЦис (продукта метаболизма ГЦ) и серина (аминокислоты, вступающей в связь с ГЦ в процессе его превращения путем транссульфирования), а также коэффициент оЦис/оГЦ не имеют корреляционной связи ни с возрастом пациентов, ни с биохимическими показателями крови - АлАТ, АсАТ, билирубином. Однако, было выявлено, что существует корреляционная связь между уровнем оГЦ и активностью АлАТ крови (г=0,28, р=0,04). Следовательно, у пациентов с высокой активностью АлАТ можно ожидать увеличение оГЦ плазмы крови, что является риском развития гипергомоцистеинемии и ее последствий.

Была проведена сравнительная оценка уровня исследуемых аминокислот и коэффициента оЦис/оГЦ в зависимости от генотипа вируса гепатита С и вирусной нагрузки. Статистически значимых различий в группах обнаружено не было (р>0,05).

При анализе частоты встречаемости ГГЦ среди пациентов с ХГС было установлено, что из 55 обследованных уровень оГЦ был ниже 15 мкмоль/л у 26 пациентов (47,3%). При этом у 13 из них (23,65% от общего числа обследованных) было установлено пограничное значение уровня оГЦ (12<оГЦ<15 мкмоль/л). В среднем показатель оГЦ у пациентов, без ГГЦ

составил 12±1,3 мкмоль/л, что приближается к верхней границе нормы, и, кроме того, почти в 2 раза превышает средний показатель уровня оГЦ (6,3±2,5 мкмоль/л) контрольной группы здоровых лиц (р<0,001).

Гипергомоцистеинемия, определяемая как повышение уровня оГЦ более 15 мкмоль/л, отмечалась у 29 человек (52,7%). Средний уровень оГЦ у этих пациентов составил 19±3,4 мкмоль/л. При этом, у 28 пациентов (50,9% всех обследованных в группе с ХГС) имела место умеренная ГГЦ (15<оГЦ<30 мкмоль/л) и у 1 пациента (1,8%)- промежуточная ГГЦ (30<оГЦ<100 мкмоль/л). Тяжелой степени ГГЦ (оГЦ>100 мкмоль/л) ни у кого из обследованных выявлено не было (рис. 2)

Ш А - ГГци нет в Б - Пограничная ГГци

О В - Умеренная ГГци □ Г - Промежуточная ГГци

Рис. 2 Распределение больных по степени выраженности ГГЦ (п=55)

В ходе исследования был проведен сравнительный анализ показателей уровня аминокислот цистеина и серина, а также коэффициента оГЦ/оЦис у пациентов с ХГС с повышенным и нормальным уровнем оГЦ (табл. 4)

Таблица 4

Показатели уровня общего цистеина, общего серина и коэффициента общий цистеин/общий гомоцистеин у пациентов с ХГС на фоне нормального и

повышенного у| эовня общего гомоцистеина плазмы крови

Показатель Пациенты с ГГЦ, п=29 Пациенты без ГГЦ, п=26 Значение р

Общий цистеин, мкмоль/л, \liSD 267,7±52,7 235,6±40,3 0,048

Коэффициент Общий цистеин/общий гомоцистеин, М±БО 14,3±3,6 20,1±4,4 <0,001

Серин, мкмоль/л, М±80 117,1±17,1 110,6±26,6 0,281

Было установлено, что у пациентов с ХГС на фоне ГГЦ уровень оЦис составлял 267,7±52,7 мкмоль/л, и статистически значимо превышал уровень оЦис у пациентов с ХГС без ГГЦ (р=0,048), который в среднем составил 235,6±40,3 мкмоль/л, но был, тем не менее, выше соответствующего показателя группы сравнения - 172,3±35,3 мкмоль/л (р<0,001). Данный факт объясняется тем, что оЦис является продуктом метаболизма ГЦ, и, его концентрация в плазме крови тем выше, чем выше уровень оГЦ.

Коэффициент оЦис/оГЦ у пациентов с ГГЦ составил 14,3±3,6, а у больных без ГГЦ - 20,1±4,4 (р<0,001). В группе пациентов с ХГС, не имевших ГГЦ, коэффициент оЦис/оГЦ, тем не менее, был значимо ниже, чем в группе сравнения - 30,4±10,0 (р=0,003).

Уровень серина статистически значимо не различался у пациентов с ГГЦ и без ГГЦ и составлял соответственно 117,1±17,1 мкмоль/л и 110,6±26,6 мкмоль/л. Однако при сравнении полученных показателей с данными группы контроля (средний уровень серина - 80,9±21,6 мкмоль/л) было выявлено статистически значимое различие как с показателем пациентов с ГГЦ (р=0,002), так и с результатом пациентов без ГГЦ (р=0,006).

Таким образом, полученные данные позволяют предполагать, что увеличение концентрации оГЦ в плазме крови больных ХГС ведет к активации путей превращения ГЦ путем ее транссульфирования, что объясняет повышение уровня оЦис у этих пациентов. Тем не менее, коэффициент оЦис/оГЦ у пациентов с ХГС оказывается ниже, чем у здоровых лиц, что отражает нарушение функции печени.

Однако коэффициент оЦис/оГЦ отличается от такового у здоровых лиц с нормальным уровнем оГЦ, что может быть связано с недостаточностью механизмов инактивации ГЦ при ХГС.

Проанализировав показатели уровня оГЦ, оЦис, коэффициента оЦис/оГЦ и уровень серина плазмы крови пациентов с различной длительностью инфицирования НСУ, мы получили результаты, представленные в таблице 5.

При сравнении показателей уровня оГЦ статистически значимых различий в группах обнаружено не было (1-2 группа р=0,504, 1-3 группа р=0,087, 2-3 группа р=0,242). Следует отметить, что средний уровень оГЦ в 1 группе находится в пределах нормы (до 15 мкмоль/л), однако статистически значимо превышает показатель уровня оГЦ в группе здоровых лиц (р<0,001). Кроме того, данные указывают на то, показатель среднего уровня оГЦ при более длительном инфицировании имеет тенденцию к нарастанию.

Статистически значимых различий при сравнении показателей уровня оЦис в группах также выявлено не было: 1-2 группа р=0,544, 1-3 группа р=0,661,2-3 группа р=0,301.

Показатели коэффициента оЦис/оГЦ также статистически значимо в группах не различались: 1-2 группа р=0,4, 1-3 группа р=0,059, 2-3 группа р=0,824. Однако обращает на себя внимание тенденция к снижению среднего значения коэффициента в группах с более длительным инфицированием, что указывает на дисбаланс исследуемых аминокислот и свидетельствует о более

выраженных нарушениях функции печени у больных с более длительным инфекционным процессом.

Таблица 5

Показатели уровня оГЦ, оЦис, коэффициента оЦис/оГЦ и серина у пациентов с

Группы о ГЦ, мкмоль/л, М±БО оЦис, мкмоль/л, М±БО Коэффициент оЦис/оГЦ \fcfcSD Серин, мкмоль/л, М±8Э

Инфицированные 5 лет и менее (п=1б) 14,5±4,1 253,2±40,6 18,5±5,2 104,0±21,7

Инфицированные 6-10 лет (п=26) 15,4±4,5 246,6±49,5 16,8±5,8 114,7±21,5

Инфициро ванные 11 лет и более (п=13) 17,0±4,0 265,7±62,1 15,8±1,9 134,2±26,5

Контрольная группа (п=20) 6,3±2,5* 172,3±35,3* 30,4±10,0* 80,9±21,6*

Примечание: * - при сравнении показателей контрольной группы с показателями групп с различной давностью инфицирования выявлено статистически значимое различие - р<0,05

При анализе частоты встречаемости гипергомоцистеинемии в группах с различным сроком инфекционного процесса получены следующие данные, представленные в таблице 6.

Таблица 6

Частота выявления ГГЦ у пациентов с различным сроком инфекционного __процесса__

Группы оГЦ <15 мкмоль/л оГЦ>15 мкмоль/л

1 группа (п= 16)*" 63% 37%

2 группа (п=26)*х 50% 50%

3 группа (п=13)#х 23% 77%

Примечание: * - при сравнении 1 и 2 группы р > 0,05; х - при сравнении 2 и 3 групп р > 0,05; # - при сравнении 1 и 3 группы р = 0,037

Было выявлено, что с увеличением срока заболевания увеличивается частота выявления повышенного уровня оГЦ в плазме крови. В частности, установлено, что существует статистически значимое различие в частоте встречаемости ГГЦ среди пациентов с длительностью заболевания ХГС менее 5 лет и пациентами и страдающими ХГС более 10 лет (р=0,037). Коэффициент корреляции между длительностью инфицирования НСУ и частотой встречаемости ГГЦ по Спирману составил 0,279, р=0,047.

выводы

1. В структуре больных хроническим вирусным гепатитом, наблюдающихся в гепатологическом отделении преобладает хронический гепатит С, доля которого составляет 73,4%. Доминирующими генотипами вируса гепатита С являются 1Ь (42,4%) и За (41,8%).

2. Течение хронического гепатита С характеризуется слабо выраженной клинической симптоматикой (отсутствие жалоб у 63,2% и гипербилирубинемией у 32%), с наличием гепатомегапии (у 82%), синдрома цитолиза (у 85%) и высоким уровнем виремии (у 63%).

3. У обследованных больных ХГС превалирует малая (39,7%) и умеренная (53,4%) степени гистологической активности при среднем возрасте больных 31 ±6 лет и давностью инфекционного процесса у 69% больных до 10 лет. У 2/3 больных (65,5%) фиброз соответствует степени И1, а у 20,7% - РЗ-Р4. Индекс гистологической активности, степень выраженности фиброза, а также наличие стеатоза печени коррелируют с показателями активности трансаминаз.

4. Средний уровень общего гомоцистеина у больных ХГС в 2,5 раза превышает соответствующий показатель здоровых лиц и коррелирует с активностью АлАТ. Гипергомоцистеинемия, как показатель угнетения синтетической функции печени, выявляется у 76,4% больных ХГС, из них у 23,7% наблюдается пограничная ГГЦ.

5. Средний уровень общего цистеина и коэффициент общий цистеин/общий гомоцистеин статистически значимо различается у пациентов с наличием и отсутствием ГГЦ. Статистически значимые различия в уровне серина отсутствуют.

6. Гипергомоцистеинемия у больных ХГС с длительностью инфицирования более 10 лет встречается статистически значимо чаще, чем у пациентов, инфицированных менее 5 лет. Уровень общего гомоцистеина имеет тенденцию к нарастанию с увеличением срока инфекционного процесса, средний уровень общего цистеина и серина при этом не меняется, а коэффициент общий цистеин/общий гомоцистеин имеет тенденцию к снижению.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для исключения у больных хроническим гепатитом С гипергомоцистеинемии следует определять уровень общего гомоцистеина плазмы крови.

2. Для оценки функционального состояния печени у больных хроническим гепатитом С следует включить в диагностический алгоритм определение уровня общего цистеина плазмы крови с расчетом коэффициента общий цистеин/общий гомоцистеин.

3. В комплексной терапии больных ХГС при выявлении гипергомоцистеинемии целесообразным является включение препаратов фолиевой кислоты и витаминов В6 и В12.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Никитина O.E., Поздеев В.К., Эсауленко Е.В. Уровень гомоцистеина у пациентов с хроническим гепатитом С // Вестник Санкт-Петербургской государственной медицинской академии им. И.И. Мечникова. -2007.-№4(8).-С. 155- 157.

2. Никитина O.E., Дунаева Н.В. Метаболизм гомоцистеина у пациентов с хроническим гепатитом С // Ученые записки Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова. - 2009. - №1. - С. 36 - 37.

3. Никитина O.E., Селькова М.С. Клинико-биохимическая характеристика больных хроническим гепатитом С // Вирусные гепатиты -эпидемиология, диагностика, лечение и профилактика. Материалы VII Российской научно-практической конференции с международным участием. 29-31 мая 2007 г. Москва. - 2007. - С. 220 - 221.

4. Никитина O.E., Поздеев В.К., Эсауленко Е.В. Гипергомоцистеинемия при хроническом гепатите С // Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. - 2008. - № 2-3. - М87-М88.

5. Никитина O.E. Гомоцистеинемия у больного хроническим гепатитом С (клиническое наблюдение) // Мир вирусных гепатитов. - 2008. -№6.-С. 15-16.

6. Никитина O.E., Поздеев В.К. Уровень цистеина в плазме крови при гипергомоцистеинемии у пациентов с хроническим гепатитом С // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. Приложение № 33 Материалы Четырнадцатой Российской конференции «Гепатология сегодня» 16-18 марта 2009 г, Москва. - 2009. - Том XIX. - №1 . - С. 41.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВИЧ - вирус иммунодефицита человека

ГГЦ - гипергомоцистеинемия

ИГА - индекс гистологической активности

ИМТ - индекс массы тела

оГЦ - общий гомоцистеин

оЦис - общий цистеин

ПЦР - полимеразно-цепная реация

РНК - рибонуклеиновая кислота

ХВГ - хронический вирусный гепатит

ХГС - хронический гепатит С

HCV - вирус гепатита С

IL - интерлейкин

ЛР№ 020365

Подписано в печать 04.12.2009 г. Заказ № 1624 Формат бумаги 60x84. Тираж 100 экз. усл. п.л. 1,0

Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова Типография ООО «КАРО» Санкт-Петербург, Красногвардейская пл., д. 3

Оглавление диссертации Никитина, Олеся Евгеньевна :: 2010 :: Санкт-Петербург

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О ХРОНИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ С: ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ, ПАТОГИНЕТИЧЕСКИЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Гепатит С: доля в структуре хронических болезней печени, эпидемиология, распространенность различных генотипов вируса гепатита С.

1.2. Особенности течения и клинико-лабораторные проявления HCV-инфекции.

1.3. Патогенетические аспекты хронического гепатита С.

1.4. Гомоцистеин: метаболизм, патогенез токсического эффекта, роль гипергомоцистеинемии в развитии патологических изменений в печени, методы медикаментозной коррекции.

Введение диссертации по теме "Детская хирургия", Никитина, Олеся Евгеньевна, автореферат

Актуальность проблемы

В настоящее время в мире насчитывается более 180 млн. человек, инфицированных вирусом гепатита С. До сих пор HCV-инфекция остается одной из серьезнейших проблем современной медицины, что обусловлено стабильным высоким уровнем заболеваемости, преимущественно латентным течением, значительными затратами на диагностический и лечебный процессы, а также отсутствием специфической профилактики [12, 45, 49, 51, 57].

Основным проявлением HCV-инфекции является хронический гепатит С (ХГС), который длительное время протекает бессимптомно, и финалом его естественного течения становится цирроз печени, а, в ряде случаев — гепатоцеллюлярная карцинома [23, 38, 145, 169, 185].

В 90-е годы в литературе появились единичные работы, посвященные изучению аминокислотного баланса у больных с патологией печени различного генеза [29, 69, 120]. Одним из важных, но мало изученных, аспектов данного направления остается роль гомоцистеина (ГЦ) в развитии и прогрессировавши фиброза печени, особенно при его повышенной концентрации. Гомоцистеин -серусодержащая аминокислота, которая является продуктом метаболизма незаменимой аминокислоты метионина. Одним из путей утилизации ГЦ является транссульфирование с участием фермента цистотионин-бетасинтазы, кофактора витамина В6 и аминокислоты серина, в результате чего образуется цистатионин, который далее превращается в цистеин [17, 94, 149]. Поскольку ключевая роль в утилизации ГЦ принадлежит печени, нарушение ее функции в связи с недостаточностью синтеза ферментов может приводить к увеличению уровня ГЦ в плазме крови больных [54, 100, 206]. В свою очередь данные современных исследований свидетельствуют о том, что ГЦ сам способен оказывать повреждающее действие на клетки печени, вызывая оксидативный стресс, стресс эндоплазматического ретикулума гепатоцитов и индуцируя выработку провоспалительных факторов (IL-lbeta, IL-6, IL-8, NF-kappaB), а также способствуя развитию стеатоза печени [91, 117, 167, 211, 221, 228. 231]. Доказано, что ГЦ имеет одинаковые точки приложения с ВГС, структурные и неструктурные белки которого вызывают в клетках печени однотипные изменения. Ученые расценивают данный факт как возможную причину развития у больных ХГС некро-воспалительных изменений в ткани печени, а также прогрессирования фиброза с формированием у данной категории больных гепатоцеллюлярной карциномы [133, 144, 162, 172, 197, 198]. Следует отметить, что данный вопрос остается на сегодняшний день окончательно не решенным и требует дальнейших исследований.

Цель исследования: оценить распространенность гипергомоцистеинемии и уровень участвующих в метаболизме гомоцистеина аминокислот цистеина и серина плазмы крови у больных хроническим гепатитом С с учетом длительности инфекционного процесса и клинического течения заболевания.

Задачи исследования:

1. Установить долю ХГС в общей структуре хронических вирусных гепатитов с учетом распространенности различных генотипов вируса гепатита С у больных, впервые обратившихся за консультацией в гепатологическое отделение.

Основные положения, выносимые на защиту

В структуре больных хроническим вирусным гепатитом, обратившихся за консультацией в гепатологическое отделение, преобладает хронический гепатит С. Доминирующими генотипами вируса гепатита С в Санкт-Петербурге и Ленинградской области являются lb и За.

Естественное течение хронического гепатита С у взрослых малосимптомно, и протекает преимущественно в субклинической форме на фоне выраженного цитолитического синдрома и активного инфекционного процесса.

У больных хроническим гепатитом С формируется дисбаланс аминокислот гомоцистеина, цистеина и серина, что приводит к ,развитию гипергомоцистеинемии — показателя недостаточности функции печени, которая прогрессирует с увеличением срока инфекционного процесса.

Научная новизна работы

Практическая значимость работы

Апробация работы и публикации

Материалы диссертации были представлены на Всероссийской научной конференции молодых ученых с международным участием "Актуальные вопросы инфекционной патологии — 2007" Санкт-Петербург, 2007), 2-ом международном научном конгрессе «Человек, алкоголь, курение и пищевые аддикции» (Санкт-Петербург, 2008), 10-м Юбилейном международном Славяно-Балтийском научном форуме "Санкт-Петербург - Гастро-2008" (Санкт-Петербург, 2008), Российско-итальянской конференции «Актуальные вопросы социально значимых вирусных инфекций» (Санкт-Петербург, 2008), 11-м - Славяно-Балтийском научном форуме «Санкт-Петербург - Гастро-2009» (Санкт-Петербург, 2009).

По теме диссертации опубликовано 6 работ, в том числе 2 - в журналах, рекомендованных ВАК.

Пути реализации работы

Результаты исследования используются в работе отделения экспериментальной терапии вирусных гепатитов НИИ гриппа СЗО РАМН, Государственном учреждении - здравоохранения Ленинградской области «Центра по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями», внедрены в учебный процесс кафедры инфекционных болезней Санкт-Петербургской государственной медицинской академии им. И.ИМечникова, кафедры инфекционных болезней с эпидемиологией, тропической медициной Волгоградского государственного медицинского университета, кафедры инфекционных и кожно-венерических болезней института медицины, экологии и физической культуры — подразделения Ульяновского государственного университета.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 125 страницах машинописного текста, состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка

Заключение диссертационного исследования на тему "Клинико-лабораторная и морфологическая характеристика хронического гепатита С с учетом распространенности гипергомоцистенемии и аминокислот (цистеин, серин), участвующих в его метаболизме"

выводы

1. В структуре обследованных больных хроническим вирусным гепатитом, обратившихся за консультацией в гепатологическое отделение, преобладает хронический гепатит С, доля которого составляет 73,4%. Доминирующими генотипами вируса гепатита С в Санкт-Петербурге и Ленинградской области являются lb (42,4%) и За (41,8%).

2. Течение хронического гепатита С характеризуется слабо выраженной клинической симптоматикой (отсутствие жалоб у 63,2% и гипербилирубинемией у 32%), с наличием гепатомегалии (у 82%), синдрома цитолиза (у 85%) и высоким уровнем виремии (у 63%).

3. У обследованных больных хроническим гепатитом С превалирует малая (39,7%) и умеренная (53,4%) степени гистологической активности при среднем возрасте больных 31±6 лет и давностью инфекционного процесса у 69% больных до 10 лет. У /3 больных (65,5%) фиброз соответствует степени F1, а у 20,7% - F3-F4. Индекс гистологической активности, степень выраженности фиброза, а также наличие стеатоза печени коррелируют с показателями активности трансаминаз.

4. Средний уровень общего гомоцистеина у больных хроническим гепатитом С в 2,5 раза превышает соответствующий показатель здоровых лиц и коррелирует с активностью АлАТ. Гипергомоцистеинемия, как показатель угнетения синтетической функции печени, выявляется у 76,4% больных хроническим гепатитом С, из них у 23,7% наблюдается пограничная гипергомоцистеинемия.

5. Средний уровень общего цистеина и коэффициент общий цистеин/общий гомоцистеин статистически значимо различается у пациентов с наличием и отсутствием гипергомоцистеинемия. Статистически значимые различия в уровне серина отсутствуют.

6. Гипергомоцистеинемия у больных хроническим гепатитом С с длительностью инфицирования более 10 лет встречается статистически значимо чаще, чем у пациентов, инфицированных менее 5 лет. Уровень общего гомоцистеина имеет тенденцию к нарастанию с увеличением срока инфекционного процесса, средний уровень общего цистеина и серина при этом не меняется, а коэффициент общий цистеин/общий гомоцистеин имеет тенденцию к снижению.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

3. В комплексной терапии больных ХГС при выявлении гипергомоцистеинемии целесообразным является включение препаратов фолиевой кислоты, витаминов В6 и В12.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Никитина, Олеся Евгеньевна

1. Антонова Т.В. Уровень фактора некроза опухолей-А и трансформирующего фактора роста-В в субклинической фазе хронического гепатита С // РЖГГК. 2006. - № 1. - С. 1 - 2.

2. Беляева Т.В., Лиознов Д.А., Антонова Т.В. Медико-социальные последствия инфекционных осложнений наркомании // Тез. докл. Научно-практической конф. «Вирусные гепатиты и ВИЧ-инфекция у подростков». — СПб. -2003.-С. 6

3. Блюм Х.Е. Гепатит С: современное состояние проблемы // РЖГГК. — 2005. -№ l. С. 20-25.

4. Болезни печени и желчевыводящих путей: Руководство для врачей / Под ред. В. Т. Ивашкина. М.: ООО "Издат. дом "М-Вести". - 2005. - 536 с.

5. Буеверов О.А. Оксидативный стресс и его роль в повреждении печени // РЖГГК. 2002. - № 4. - С. 21-25.

6. Буеверов О А. Стеатоз печени при хроническом гепатите С: нужно ли вносить изменения в стандартные схемы лечения // Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. 2005. - № 2. - С. 31 — 36.

7. Буеверов О.А., Грязин А.Е. Клинические аспекты изучения апоптоза при хронических вирусных гепатитах // РЖГГК. 2006. - № 2. - С. 4 - 10.

8. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Соросовский Образовательный журнал. — 2000. № 12. — С. 13-19.

9. Гарбузенко Д.В. Механизмы компенсации структуры и функции печени при ее повреждении и их практическое значение // РЖГГК. — 2008. № 6. - С. 14-21.

10. Гепатит С: консенсус 2002, Национальный институт здоровья (США), 1012 июня 2002 // Вирусные гепатиты. Достижения и перспективы. Инф. бюллетень. 2002. -№2(15).-С.З-11.

11. Горячева Л.Г., Аксенова О.А., Железникова Г.Ф., Пономарева М.А., Рогозина Н.В., Мукомолова А.Л., Шилова И.В, Крыга Л.Н. Возрастныеособенности диагностики и прогноза вирусного гепатита С: Пособие для врачей. СПб. - 2003. - 15 с.

12. Гусев Д.А. Хронический гепатит С: течение, прогноз и лечение больных в военно-медицинских учреждениях: Дис. . д-ра мед. наук. — Санкт-Петербург. 2006.-334 с.

13. Дуболазова Ю.В., Буеверов А.О. Стеатоз печени при хроническом гепатите С: две причины два решения // Российские медицинские вести. — 2008. - Том XIII, № 3. - С. 3 - 10.

14. Дунаева Н.В., Эсауленко Е.В. Структурно-функциональная организация генома вируса гепатита С // Вопросы вирусологии. 2006. - № 2. - С. 10 — 14.

15. Жданов К.В Латентные формы вирусных гепатитов В и С у лиц молодого возраста: Дис. . д-ра мед. наук. — Санкт-Петербург. — 2000. — 330 с.

16. Жербун А.Б. Вирусные гепатиты в Российской Федерации. Аналитический обзор. 7 выпуск. СПб.: ФГУН НИИЭМ имени Пастера Роспотребнадзора. - 2008. - 160 с.

17. Жлоба А.А., Никитина В.В Выявление и лечение гипергомоцистеинемий. Пособие для врачей. М.: Дружба народов. — 2004. — 40 с.

18. Змушко Е.И., Белозеров Е.С., Иоанниди Е.А. Вирусный гепатит. — Элиста, Джангар.-2002.- 160 с.

19. Игнатова Т.М. Хронические заболевания печени вирусной и невирусной этиологии у беременных: тактика ведения, лечения // Вирусные гепатиты. Достижения и перспективы. Инф. бюллетень. 2002. — № 1 (14). — С .3 — 11.

20. Казимирко В.К., Мальцев В. И. Антиоксидантная система и ее функционирование в организме человека // Здоров'я Украшни. — 2004. № 6. -С. 10-15.

21. Карпов С.Ю., Крель П.Е. Клиническая характеристика и особенности течения хронического гепатита С низкой степени активности // Клиническая медицина.-2005.-Т. 83, № 1.- С. 14-19.

22. Корочкина И.Э. Гастроэнтерологические аспекты метаболического синдрома (Обзор литературы) // РЖГГК. 2008. - № 1. - С. 26 - 37.

23. Лобзин Ю.В., Жданов К.В., Волжанин В.М., Гусев ДА Вирусные гепатиты: клиника, диагностика, лечение. — М.: Фолиант. — 2006. — 192 с.

24. Львов Д.К., Самохвалов Е.И., Миширо С. Закономерности . распространения вируса гепатита С и его генотипов в России и странах СНГ // Вопросы вирусологии. 1997. - № 4. - С. 157-161.

25. Маевская М.В. Лечение пациентов хроническим гепатитом С с исходно нормальным значением аланиновой аминотрансферазы // РЖГТК. 2005. - №2. -С. 22-26.

26. Майер К.-П. Гепатит и последствия гепатита. — М.: ГЭОТАР Медицина. — 2004. 720 с.

27. Мартынюк Г.А., Шахгильдян И. В. Кузин С. Н. Гепатит С на территории Северо-Западной Украины // Эпидемиология и инфекционные болезни. — 1998. № 4. - С. 25 - 28.

28. Михайлов М.И Лабораторная диагностика гепатита С. (Серологические маркеры и методы их выявления) // Вирусные гепатиты. Достижения и перспективы. Инф. бюллетень. 2001. — № 2 (12). - С. 8 - 18.

29. Нефёдова Л.И., Маслакова Н.Д., Смирнов В.Ю, Курбат Н.М. Аминокислоты и их производные в патогенезе и лечении поражений печени // Новости гепатологии и медицины. — 1997. — № 1 (2). — С.2 — 9.

30. Никитин И.Г. Клиника, диагностика и этиопатогенетическое лечени хронического HCV-гепатита: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. М. - 2000. - 32 с.

31. Онищенко Г.Г. О государственных мерах по предупреждению распространения в Российской Федерации заболеваемости вирусными гепатитами // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2002. - № 3. — С.4 — 8.

32. Осипов А.Н., Азизова О.А. Владимиров Ю.А. Активные формы кислорода и их роль в организме // Успехи биологической химии. 1990. - № 1 (31).-С. 180-208.

33. Павлов Ч.С., Ивашкин В.Т., Шульпекова Ю.О., Золоторевский В.П. Современные представления о патогенезе, диагностике и лечении фиброза печени // РЖГГК. 2005. - Том. XV, № 5. - С. 13 - 20.

34. Пинцани М. Эволюция фиброза печени: от гепатита к циррозу // РЖГГК: Материалы VII Российской конференции "Гепатология сегодня". — 2002. -№ 5. С.4-9.

35. Подымова С.Д. Болезни печени. Руководство для врачей. М.: Медицина. -2005.-768 с.

36. Поздеев В.К. Гипергомоцистеинемия, ВЭЖХ-диагностика // Медлайн-экспресс.-2007. № 1 (190).-С. 19-22.

37. Радченко В.Г, Шабров А.В, Зиновьева Е.Н. Основы клинической гепатологии. Заболевания печени и билиарной системы. М.: Диалект, Бином. -2005.-890 с.

38. Рахманова А.Г. Хронические вирусные гепатиты и цирроз печени. — СПб: Специальная литература. 2006. - 413 с.

39. Серов, Апросина З.Г., Крель П.Е. Хронический вирусный гепатит одна из наиболее важных проблем медицины // Журнал Архив патологии. — 2004. -№6.-С. 6-11.

40. Скляр Л.Ф., Маркелова Е.В., Полушин О.Г., Токмалаев А.К., Попов А.Ф. Хроническая HCV-инфекция: современные иммуноморфологические аспекты: монография / Под ред. Каминского Ю.В. М.: Издательство Российского Университета дружбы народов. - 2006. - 213 с.

41. Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты. СПб.: ТЕЗА. - 1998. - 325 с.

42. Сюткин В.Е., Лопаткина Т.Н., Попова И.В. Факторы риска прогрессирования поражений печени при хроническом гепатите вирусной этиологии // Кремлевская медицина (клинический вестник). — 2000. — № 1. — С. 40 44.

43. Фрейдлин И.С., Тотолян А.А. Клетки иммунной системы. СПб: Наука. -2001.-390 с.

44. Хронический вирусный гепатит / Под ред. В.В. Серова, З.Г. Апросиной. — М.: Медицина. 2004. - 384 с.

45. Шахгельдян И.В., Михайлов М.И., Онищенко Г.Г. Парентеральные вирусные гепатиты (эпидемиология, диагностика, профилактика). — М.: ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ. 2003. - 384 с.

46. Шевченко О.П., Олефриенко Г. А. Гипергомоцистеинемия и ее клиническое значение // Лаборатория. 2002. — С. 3 — 7.

47. Шерлок Ш., Джули Дж. Болезни печени и желчевыводящих путей. М.: ГЭОТАР Медицина. - 1999. - 864 с.

48. Широнина Н.Л. Клинико-патогенетическое значение фактора некроза опухоли-альфа, интерлейкина-6 и трансформирующего фактора роста-бета1 при хроническом гепатите С: Дис. .к-та. мед. наук. — Санкт-Петербург. 2008. - 149 с.

49. Эколого-эпидемиологические, патогенетические аспекты вирусных гепатитов и принципы эффективной безопасной терапии: Пособие для врачей / Под общ. ред. Т.В. Сологуб, Л. Г. Горячевой. М.: Б.и. - 2002. - 55 с.

50. Эсауленко Е.В., Ветров Т.А., Дунаева Н.В., Го А.А. Распространение генотипов вируса гепатита С в Санкт-Петербурге // Вирусные гепатиты. Достижения и перспективы. Инф. бюллетень. 2004. - № 1. — С. 14 - 16.

51. Яковлев А.А., Виноградова Е.Н., Рахманова А.Г. Хронические вирусные гепатиты (клинико-лабораторные аспекты). СПб: Издательство НИИ СПбГУ. -2002.-290 с.

52. Abdalla М. Y., Ahmad I. М., Spitz D. R., Schmidt W. N., Britigan В. E. Hepatitis С virus-core and non structural proteins lead to different effects on cellular antioxidant defenses // J. Med. Virol. 2005. - Vol. 76, № 4. - P. 489 - 497.

53. Afdhal N. H. The natural history of hepatitis С // Semin. Liver Dis. 2004. -Vol. 24, Suppl 2.-P. 3-8.

54. Agarwala K. L., Kokame K., Kato H., Miyata T. Phosphorylation of RTP, an ER stress-responsive cytoplasmic protein // Biochem. Biophys. Res. Commun. -2000. Vol. 272, № 3. - P. 641 - 647.

55. Alter H. J. HCV natural history: the retrospective and prospective in perspective // J. Hepatol. 2005. - Vol. 43, № 4. - P. 550 - 552.

56. Althausen S., Paschen W. Homocysteine-induced changes in mRNA levels of genes coding for cytoplasmic- and endoplasmic reticulum-resident stress proteins in neuronal cell cultures // Brain Res. Mol. Brain Res. 2000. - Vol. 84, № 1-2. - P. 32 -40.

57. Antonio С. M., Nunes M. C., Refsum H., Abraham A. K. A novel pathway for the conversion of homocysteine to methionine in eukaryotes // Biochem. J. 1997. — Vol. 328 (Ptl).-P. 165-170.

58. Arsura M., Cavin L. G. Nuclear factor-kappaB and liver carcinogenesis // Cancer Lett. 2005. - Vol. 229, № 2. - P. 157 - 169.

59. Bostom A. G., Lathrop L. Hyperhomocysteinemia in end-stage renal disease: prevalence, etiology, and potential relationship to arteriosclerotic outcomes // Kidney Int. 1997. - Vol. 52, № 1. - P. 10 - 20.

60. Brown M. S., Goldstein J. L. A proteolytic pathway that controls the cholesterol content of membranes, cells, and blood // Proc Natl. Acad. Sci.U.S.A. -1999.-Vol. 96, №20.-P. 11041 11048.

61. Butz L. W., du Vigneaud V. The formation of a homologue of cystine by the decomposition of methionine with sulfuric acid // J.Biol.Chem. 1932. - Vol. 99. -P.135- 142.

62. Cai Z., Liang T. J., Luo G. Effect of mutations of the initiation nucleotides on hepatitis С virus RNA replication in the cell // J.of Virol. 2004. - Vol. 78, № 7. -P. 3633-3643.

63. Calfon M., Zeng H., Urano F., Till J. H., Hubbard S. R., Harding H. P., Clark S. G., and Ron D. IRE1 couples endoplasmic reticulum load to secretory capacity by processing the XBP-1 mRNA // Nature. 2002. - Vol. 415, № 6867. - P. 92 - 96.

64. Campollo O., Sprengers D., Mclntyre N. The BCAA/AAA ratio of plasma amino acids in three different groups of cirrhotics // Rev. Invest Clin. 1992. - Vol. 44, №4.-P. 513-518.

65. Castera L. Steatosis, insulin resistance and fibrosis progression in chronic hepatitis C// Minerva Gastroenterol. Dietol. 2006. - Vol. 52, № 2. - P. 125 - 134.

66. Cavaillon J. M. Cytokines and macrophages // Biomed. Pharmacother. 1994. - Vol. 48, № 10. - P. 445 - 453.

67. Chamberlain R. W., Adams N., Saeed A. A., Simmonds P., Elliott, R. M. Complete nucleotide sequence of a type 4 hepatitis С virus variant, the predominant genotype in the Middle East // J. Gen. Virol. 1997. - Vol. 78 (Pt 6). - P. 1341 -1347.

68. Chen S. L., Morgan T. R. The natural history of hepatitis С virus (HCV) infection // Int. J. Med. Sci. 2006. - Vol. 3, № 2. - P. 47 - 52.

69. Cheung G. Т., Siow Y. L., О К Homocysteine stimulates monocyte chemoattractant protein-1 expression in mesangial cells via NF-kappaB activation // Can. J .Physiol Pharmacol. 2008. - Vol. 86, № 3. - P. 88 - 96.

70. Choi J., Ou J. H. Mechanisms of liver injury: III. Oxidative stress in the pathogenesis of hepatitis С virus // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. — 2006. Vol. 290. - G847-G851.

71. Choi S. H., Hwang, S. B. Modulation of the transforming growth factor-beta signal transduction pathway by hepatitis С vims nonstructural 5A protein // J.Biol.Chem. 2006. - Vol. 281, № 11.-P. 7468-7478.

72. Choo Q., Kuo G., Weiner A. Isolation of a CDNA clone derived from a blood-borne non-A, non-B viral hepatitis genome // Science. 1989. - Vol. 244. - P. 359 -362.

73. Collins Т., Cybulsky M. I. NF-kappaB: pivotal mediator or innocent bystander in atherogenesis? // J. Clin. Invest. 2001. - Vol. 107, № 3. - P. 255 - 264.

74. Cooreman M.P., Weegink C., Reesink H. W. The management of acute hepatitis С and needlestick accidents with hepatitis-C virus positive blood // Ned. Tijdschr. Geneeskd. 1998. - Vol. 142, № 42. - P. 2298 - 2300.

75. Cravo M. L., Camilo, M. E. Hyperhomocysteinemia in chronic alcoholism: relations to folic acid and vitamins B(6) and B(12) status // Nutrition. 2000. - Vol. 16, №4.-P. 296-302.

76. Dimitrova K. R., DeGroot K., Myers A. K., Kim Y. D. Estrogen and homocysteine // Cardiovasc. Res. 2002. - Vol. 53, № 3. - P. 577 - 588.

77. Ducoulombier D., Roque-Afonso A. M., Di Liberto G., Penin F., Kara R., Richard Y., Dussaix E., Feray C. Frequent Compartmentalization of Hepatitis С Virus Variants in Circulating В Cells and Monocytes // Hepatology. — 2004. Vol. 39.-P. 817-825.

78. Elsharkawy A. M., Mann D. A. Nuclear factor-kappaB and the hepatic inflammation-fibrosis-cancer axis // Hepatology. 2007. - Vol. 46, № 2. - P. 590 -597.

79. Ferretti, G., Bacchetti, Т., Marotti, E., and Curatola, G. Effect of homocysteinylation on human high-density lipoproteins: a correlation with paraoxonase activity// Metabolism. 2003. - Vol. 52, № 2. - P. 146 - 151.

80. Fierbinteanu-Braticevici C., Mohora M., Cretoiu D., Cretoiu S., Petrisor A., Usvat R., Ion D. A. Role of oxidative stress in the pathogenesis of chronic hepatitis С (CHC) // Rom. J. Morphol. Embryol. 2009. - Vol. 50, № 3. - P. 407 - 412.

81. Finkelstein J. D. Methionine metabolism in mammals // J. Nutr. Biochem. — 1990. Vol. 1, № 5. - P 228 - 237.

82. Fodinger M., Wagner О. F., Horl W. H., Sunder-Plassmann G. Recent insights into the molecular genetics of the homocysteine metabolism // Kidney Int. Suppl. -2001. Vol. 78. - S238 - S242.

83. Forman H. J., Fukuto J. M., Torres M. Redox signaling: thiol chemistry defines which reactive oxygen and nitrogen species can act as second messengers // Am. J. Physiol Cell Physiol. 2004. - Vol. 287, №> 2. - C246 - C256.

84. Fowler B. Homocysteine: overview of biochemistry, molecular biology, and role in disease processes // Semin. Vase. Med. 2005. - Vol. 5, № 2. - P. 77 — 86.

85. Franken D. G., Boers G. H., Blom H. J., Trijbels F. J., Kloppenborg P. W. Treatment of mild hyperhomocysteinemia in vascular disease patients // Arterioscler. Thromb. 1994. - Vol. 14, № 3. - P. 465 - 470.

86. Friedman S. L. Molecular regulation of hepatic fibrosis, an integrated cellular response to tissue injury // J.Biol.Chem. 2000. - Vol. 275, №4. - P. 2247 - 2250.

87. Gong G., Waris G., Tanveer R., Siddiqui A. Human hepatitis С virus NS5A protein alters intracellular calcium levels, induces oxidative stress, and activates STAT-3 and NF-kappa В // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2001. - Vol. 98, № 17. -P. 9599-9604.

88. Gryglewski R. J., Palmer R. M., Moncada S. Superoxide anion is involved in the breakdown of endothelium-derived vascular relaxing factor // Nature. — 1986. — Vol. 320, № 6061. P. 454 - 456.

89. Harding H. P., Zhang Y., Ron D. Protein translation and folding are coupled by an endoplasmic-reticulum-resident kinase // Nature. 1999. - Vol. 397, № 6716. - P. 271-274.

90. Haynes W. G. Hyperhomocysteinemia, vascular function and atherosclerosis: effects of vitamins // Cardiovasc. Drugs Ther. 2002. - Vol. 16, № 5. - P. 391 - 399.

91. Hoffman D. R., Cornatzer W. E., Duerre J. A. Relationship between tissue levels of S-adenosylmethionine, S-adenylhomocysteine, and transmethylation reactions // Can. J. Biochem. 1979. - Vol. 57, № 1. - p. 56 - 65.

92. Horton J. D., Shimomura I. Sterol regulatory element-binding proteins: activators of cholesterol and fatty acid biosynthesis // Curr. Opin. Lipidol. — 1999. — Vol. 10, №2.-P. 143-150.

93. Hultberg В., Andersson A., Isaksson A. Hypomethylation as a cause of homocysteine-induced cell damage in human cell lines // Toxicology. 2000. — Vol. 147, №2.-P. 69-75.

94. Jain S. K., Pemberton P. W., Smith A, McMahon R. F., Burrows P. C., Aboutwerat A., Warnes T. W. Oxidative stress in chronic hepatitis C: not just a feature of late stage disease // J. Hepatol. 2002. - Vol. 36, № 6. - P. 805 - 811.

95. Jakubowski H. Molecular basis of homocysteine toxicity in humans // Cell Mol. Life Sci. 2004. - Vol. 61, №4.-P. 470-487.

96. Jakubowski H. Translational incorporation of S-nitrosohomocysteine into protein // J. Biol. Chem. 2000. - Vol. 275, № 29. - P. 21813 - 21816.

97. Jakubowski H. Protein homocysteinylation: possible mechanism underlying pathological consequences of elevated homocysteine levels // FASEB J. 1999. — Vol. 13, № 15. - P. 2277 - 2283.

98. Ji C., Kaplowitz N. Hyperhomocysteinemia, endoplasmic reticulum stress, and alcoholic liver injury // World J. Gastroenterol. 2004. - Vol. 10, № 12. - P. 1699 -1708.

99. Ji C., Kaplowitz N. Betaine decreases hyperhomocysteinemia, endoplasmic reticulum stress, and liver injury in alcohol-fed mice // Gastroenterology. 2003. — Vol. 124, № 5. - P. 1488 - 1499.

100. Капо Т., Nagaki M., Takahashi Т., Ohnishi H., Saitoh K., Kimura K., Muto Y. Plasma free amino acid pattern in chronic hepatitis as a sensitive and prognostic index // Gastroenterol. Jpn. 1991. - Vol. 26, № 3. - P. 344 - 349.

101. Kaufman R. J. Orchestrating the unfolded protein response in health and disease // J. Clin. Invest. 2002. - Vol. 110, № 10. - P. 1389 - 1398.

102. Kaufman R. J. Stress signaling from the lumen of the endoplasmic reticulum: coordination of gene transcriptional and translational controls // Genes Dev. 1999. — Vol. 13, № 10.-P. 1211 - 1233.

103. Kaufman R. J., Scheuner D., Schroder M., Shen X., Lee K., Liu C. Y., Arnold

104. M. The unfolded protein response in nutrient sensing and differentiation // Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2002. - Vol. 3, № 6. - P. 411 - 421.

105. Ко W. S., Guo С. H., Yeh M. S., Lin L. Y., Hsu G. S., Chen P. C., Luo M. C., Lin C. Y. Blood micronutrient, oxidative stress, and viral load in patients with chronic hepatitis С // World J. Gastroenterol. 2005. - Vol. 11, № 30. - P. 4697 -4702.

106. Kokame K., Agarwala K. L., Kato H., Miyata Т. Herp, a new ubiquitin-like membrane protein induced by endoplasmic reticulum stress // J. Biol. Chem. 2000. - Vol. 275, № 42. - P. 32846 - 32853.

107. Lakshmi A. V., Maniprabha C., Krishna T. P. Plasma homocysteine level in relation to folate and vitamin B6 status in apparently normal men // Asia Рас. J. Clin. Nutr. -2001. — Vol. 10, №3. -P. 194- 196.

108. Lauer G. M., Walker B. D. Hepatitis С virus infection // N. Engl. J. Med. -2001.-Vol. 345, № 1.-P. 41-52.

109. Li K., Prow Т., Lemon S. M., Beard M. R. Cellular response to conditional expression of hepatitis С virus core protein in Huh7 cultured human hepatoma cells // Hepatology. 2002. - Vol. 35, № 5. - P. 1237 - 1246.

110. Li Y., Jiang C., Xu G., Wang N., Zhu Y., Tang C., Wang, X. Homocysteine upregulates resistin production from adipocytes in vivo and in vitro // Diabetes. -2008. Vol. 57, № 4. - P. 817 - 827.

111. Liberman E., Fong Y. L., Selby M. J., Choo Q. L., Cousens L., Houghton M., Yen T. S. Activation of the grp78 and grp94 promoters by hepatitis С virus E2 envelope protein // J. Virol. 1999. - Vol. 73, № 5. - P. 3718 - 3722.

112. Lin С., Lindenbach В. D., Pragai В. M. Processing in the hepatitis С virus E2-NS2 region: identification of p7 and two distinct E2-specific products with different С termini // J. of Virol. 1994. - Vol. 68, № 8. - P. 5063 - 5073.

113. Liu C. Y., Schroder M., Kaufman R. J. Ligand-independent dimerization activates the stress response kinases IRE1 and PERK in the lumen of the endoplasmic reticulum//J. Biol. Chem. 2000. - Vol. 275, № 32.-P. 24881 - 24885.

114. Lonardo A., Adinolfi L. E., Loria P., Carulli N., Ruggiero G., Day, C. P. Steatosis and hepatitis С virus: mechanisms and significance for hepatic and extrahepatic disease // Gastroenterology. 2004. - Vol. 126, № 2. - P. 586 - 597.

115. Loscalzo J. The oxidant stress of hyperhomocyst(e)inemia // J. Clin. Invest. -1996. Vol. 98, № 1. - p. 5 - 7.

116. Ma Y., Hendershot L. M. The mammalian endoplasmic reticulum as a sensor for cellular stress // Cell Stress.Chaperones. 2002. - Vol. 7, № 2. - P. 222 - 229.

117. Marcellin P., Asselah Т., Boyer N. Fibrosis and disease progression in hepatitis С // Hepatology. 2002. - Vol. 36, № 5 Suppl. 1. - S47 - S56.

118. Matsumoto M., Hwang S. B. Jeng K. S. Homotypic interaction and multimerization of hepatitis С virus core protein // Virology. — 1996. — Vol. 218, №1. -P. 43-51.

119. McCully K. S. Homocysteine, folate, vitamin B6, and cardiovascular disease // JAMA. 1998. - Vol. 279, № 5. - P. 392 - 393.

120. Medina M., Urdiales J. L., Mores-Sanchez M. I. Roles of homocysteine in cell metabolism: old and new functions // Eur.J.Biochem. 2001. - Vol. 268, № 14. - P. 3871 -3882.

121. Mizushima H., Hijikata M., Asabe S. Two hepatitis С vims glycoprotein E2 products with different С termini // J. of Virol. 1994. - Vol. 68, № 10. - P. 6215 -6222.

122. Moat S. J., Bao L., Fowler В., Bonham J. R., Walter, J. H., Kraus J. P. The molecular basis of cystathionine beta-synthase (CBS) deficiency in UK and US patients with homocystinuria // Hum.Mutat. 2004. - Vol. 23, № 2. - P. 206.

123. Mori K. Tripartite management of unfolded proteins in the endoplasmic reticulum // Cell. 2000. - Vol. 101, № 5. - P. 451 - 454.

124. Neddermann P., Tomei L. Steinkuhler C. Gallinari P. Tramontano A. De Francesco R. The nonstructural proteins of the hepatitis С virus: structure and functions // Biol. Chem. 1997. - Vol. 378, № 6. - P. 469 - 476.

125. Negro F. Mechanisms and significance of liver steatosis in hepatitis С virus infection // World J. Gastroenterol. 2006. - Vol. 12, № 42. - P. 6756 - 6765.

126. Nolandt O., Kern V. Muller H. Analysis of hepatitis С virus core protein interaction domains // J.Gen.Virol. 1997. - Vol. 78, № 6. - P. 1331 - 1340.

127. Nousbaum J. В., Pol S., Nalpas В., Landais P., Berthelot P., Brechot C. Hepatitis С virus type lb (II) infection in France and Italy. Collaborative Study Group // Ann. Intern. Med. 1995. - Vol. 122, № 3. - P. 161 - 168.

128. Okuda K., Hayashi H., Yokozeki K., Kobayashi S., Kashima Т., Irie Y. Acute hepatitis С among renal failure patients on chronic haemodialysis // J. Gastroenterol. Hepatol. 1998.-Vol. 13, № l.-P. 62-67.

129. Paradis V., Kollinger M., Fabre M., Holstege A., Poynard Т., Bedossa P. In situ detection of lipid peroxidation by-products in chronic liver diseases // Hepatology. 1997. - Vol. 26, № 1. - P. 135 - 142.

130. Pawlotsky J. M. Pathophysiology of hepatitis С virus infection and related liver disease // Trends Microbiol. 2004. - Vol. 12, № 2. - P. 96 - 102.

131. Perna A. F., Ingrosso D., Castaldo P., De Santo N. G., Galletti P., Zappia V. Homocysteine, a new crucial element in the pathogenesis of uremic cardiovascular complications // Miner. Electrolyte Metab. 1999. - Vol. 25, № 1 - 2 . - P. 95 - 99.

132. Poli G. Pathogenesis of liver fibrosis: role of oxidative stress // Mol.Aspects Med. 2000. - Vol. 21, № 3. - P. 49 - 98.

133. Prostko C. R., Dholakia J. N., Brostrom M. A., Brostrom С. O. Activation of the double-stranded RNA-regulated protein kinase by depletion of endoplasmic reticular calcium stores // J. Biol. Chem. 1995. - Vol. 270, № 11. - P. 6211 - 6215.

134. Roblin X., Pofelski J., Zarski, J. P. Steatosis, chronic hepatitis virus С infection and homocysteine // Gastroenterol. Clin. Biol. 2007. - Vol. 31, № 4. - P. 415 - 420.

135. Roccasecca R.M., Asuini H., Vitelli A. Binding of the hepatitis С virus E2 glycoprotein to CD81 is strain specific and is modulated by a complex interplay between hypervariable regions 1 and 2 // J. of Virol. — 2003. — Vol. 77, № 3. — P. 1856-1867.

136. Roingeard P., Hourioux C. Hepatitis С virus core protein, lipid droplets and steatosis // J. Viral Hepat. 2008. - Vol. 15, № 3. - P. 157 - 164.

137. Rossi R., Milzani A., Le-Donne I., Giustarini D., Lusini L., Colombo R., Di Simplicio P. Blood glutathione disulfide: in vivo factor or in vitro artifact? // Clin.Chem. 2002. - Vol. 48, № 5. - P. 742 - 753.

138. Salem T. A., El-Refaei M. F., Badra, G. A. Study of antioxidant enzymes level and phagocytic activity in chronic liver disease patients // Egypt. J. Immunol. 2003. -Vol. 10, № 1.-P. 37-45.

139. Santolini E., Migliaccio G., La Monica N. Biosynthesis and biochemical properties of the hepatitis С virus core protein // J.of Virol. — 1994. Vol. 68, № 6. -P. 3631 -3641.

140. Santolini E., Pacini L., Fipaldini C. The NS2 protein of hepatitis С virus is a transmembrane polypeptide // J.of Virol. 1995. - Vol. 69, № 12. - P. 7461 - 7471.

141. Schuppan D., Krebs A., Bauer M., Hahn E. G. Hepatitis С and liver fibrosis // Cell Death.Differ. 2003. - Vol. 10, Suppl. 1. - S59 - S67.

142. Selhub J. Homocysteine metabolism // Annu. Rev. Nutr. 1999. - Vol. 19. - P. 217-246.

143. Selhub J., Miller, J. W. The pathogenesis of homocysteinemia: interruption of the coordinate regulation by S-adenosylmethionine of the remethylation and transsulfiiration of homocysteine // Am.J.Clin.Nutr. 1992. - Vol. 55, № 1. - P. 131 -138.

144. Shen J., Chen X., Hendershot L., Prywes R. ER stress regulation of ATF6 localization by dissociation of BiP/GRP78 binding and unmasking of Golgi localization signals // Dev.Cell. 2002. - Vol. 3, № 1. - p. 99 - 111.

145. Shepard C. W., Finelli, L., and Alter, M. J. Global epidemiology of hepatitis С virus infection // Lancet Infect.Dis. 2005. - Vol. 5, № 9. - P. 558 - 567.

146. Sies H., Cadenas, E. Oxidative stress: damage to intact cells and organs // Philos. Trans.R. "Soc. Lond В Biol. Sci. 1985. - Vol. 311, № 1152. - P. 617 - 631.

147. Stanger O., Weger, M. Interactions of homocysteine, nitric oxide, folate and radicals in the progressively damaged endothelium // Clin. Chem. Lab. Med. 2003. -Vol. 41, № 11.-P. 1444-1454.

148. Sumner J., Jencks D. A., Khani S., Matthews R. G. Photoaffinity labeling of methylenetetrahydrofolate reductase with 8-azido-S-adenosylmethionine // J. Biol. Chem. 1986. - Vol. 261, № 17. - P. 7697 - 7700.

149. Tacke F., Luedde Т., Trautwein, C. Inflammatory pathways in liver homeostasis and liver injury // Clin. Rev. Allergy Immunol. 2009. - Vol. 36, № 1. -P. 4-12.

150. Takada N., Takase S., Takada A., Date T. Differences in the hepatitis С virus genotypes in different countries // J. Hepatol. 1993. - Vol. 17, № 3. - P. 277 - 283.

151. Taniguchi H., Kato N., Otsuka M., Goto Т., Yoshida H., Shiratori Y., Omata, M. Hepatitis С virus core protein upregulates transforming growth factor-beta 1 transcription // J. Med. Virol. 2004. - Vol. 72, № 1. - P. 52 - 59.

152. Tardif К. D., Mori К., Kaufman R. J., Siddiqui A. Hepatitis С virus suppresses the IRE1-XBP1 pathway of the unfolded protein response // J. Biol. Chem. — 2004. -Vol. 279, № 17.-P. 17158- 17164.

153. Tardif K. D., Mori K., Siddiqui A. Hepatitis С virus subgenomic replicons induce endoplasmic reticulum stress activating an intracellular signaling pathway // J. Virol. 2002. - Vol. 76, № 15. - P. 7453 - 7459.

154. Tardif K. D., Waris G., Siddiqui A. Hepatitis С virus, ER stress, and oxidative stress// Trends Microbiol. 2005. - Vol. 13, № 4. - P. 159 - 163.

155. Tawakol A., Omland Т., Gerhard M., Wu J. Т., Creager M. A. Hyperhomocyst(e)inemia is associated with impaired endothelium-dependent vasodilation in humans // Circulation. 1997. - Vol. 95, № 5. - P. 1119 - 1121.

156. Taylor D. R., Shi S. Т., Romano P. R., Barber G. N., Lai M. M. Inhibition of the interferon-inducible protein kinase PKR by HCV E2 protein // Science. 1999. -Vol. 285, №5424.-P. 107-110.

157. Teixeira R., Marcos L. A., Friedman S. L. Immunopathogenesis of hepatitis С virus infection and hepatic fibrosis: New insights into antifibrotic therapy in chronic hepatitis С // Hepatol. Res. 2007. - Vol. 37, № 8. - P. 579 - 595.

158. Triyatni M., Saunier В., Maruvada P. Interaction of hepatitis С virus- like particles and cells: a model system for studying viral binding and entry // J. of Virol. -2002.-Vol. 76, № 18.-P. 9335-9344.

159. Tsukiyama-Kohara K., Iizuka N. Kohara M. Nomoto A. Internal ribosome entry site within hepatitis С virus RNA. // J. of Virol. 1992. - Vol. 66. - P. 1476 -1483.

160. Ueland P. M., Refsum, H. Plasma homocysteine, a risk factor for vascular disease: plasma levels in health, disease, and drug therapy // J. Lab Clin. Med. -1989.-Vol. 114, №5.-P. 473-501.

161. Urbani S., Uggeri J., Penna A., Malpeli M., Mori C., Missale G., Ferrari C. Longitudinal analysis CTL of HCV-specific responses in acute hepatitis С // J. Hepatol. 2002. - Vol. 34, S1. - P. 205.

162. Vrba J., Modriansky, M. Oxidative burst of Kupffer cells: target for liver injury treatment // Biomed. Pap. Med. Fac. Univ Palacky. Olomouc. Czech. Repub. — 2002. -Vol. 146, №2.-P. 15-20.

163. Wang X.W., Hussain S.P., Huo T.I., Wu C.G., Forgues M., Hofseth L.J., Brechot C., Harris C.C. Molecular pathogenesis of human hepatocellular carcinoma // Toxicology. 2002. - Vol. 181-182. - P. 43 - 47.

164. Wang G., О К. Homocysteine stimulates the expression of monocyte chemoattractant protein-1 receptor (CCR2) in human monocytes: possible involvement of oxygen free radicals // Biochem. J. 2001. - Vol. 357, Pt. 1. - P.233 -240.

165. Wang G., Siow Y. L., О К. Homocysteine induces monocyte chemoattractant protein-1 expression by activating NF-kappaB in THP-1 macrophages // Am. J. Physiol Heart Circ. Physiol. 2001. - Vol. 280, № 6. - H2840 - H2847.

166. Waris G., Siddiqui A. Regulatory mechanisms of viral hepatitis В and C// J. Biosci. 2003. - Vol. 28, № 3. - P. 311 - 321.

167. Waris G., Siddiqui, A. Hepatitis С virus stimulates the expression of cyclooxygenase-2 via oxidative stress: role of prostaglandin E2 in RNA replication // J. Virol. 2005. - Vol. 79, № 15. - P. 9725 - 9734.

168. Waris G., Tardif K. D., Siddiqui A. Endoplasmic reticulum (ER) stress: hepatitis С virus induces an ER-nucleus signal transduction pathway and activates NF-kappaB and STAT-3 // Biochem. Pharmacol. 2002. - Vol. 64, № 10. - P. 1425 - 1430.

169. Waris G., Turkson J., Hassanein Т., Siddiqui A. Hepatitis С virus (HCV) constitutively activates STAT-3 via oxidative stress: role of STAT-3 in HCV replication И J.Virol. 2005. - Vol. 79, № 3. - P. 1569 - 1580.

170. Warren C. J. Emergent cardiovascular risk factor: homocysteine // Prog. Cardiovasc. Nurs. 2002. -Vol. 17, № 1.-P. 35-41.

171. Welch G. N., Loscalzo J. Homocysteine and atherothrombosis // N. Engl. J. Med.-1998.-Vol. 338, № 15.-P. 1042-1050.

172. Welihinda A. A., Tirasophon W., Kaufman R. J. The cellular response to protein misfolding in the endoplasmic reticulum // Gene Expr. 1999. - Vol. 7, № 4-6.-P. 293-300.

173. Wickner S., Maurizi M. R., Gottesman S. Posttranslational quality control: folding, refolding, and degrading proteins // Science. 1999. - Vol. 286, № 5446. -P. 1888- 1893.

174. Woo C. W., Siow Y. L., О К. Homocysteine induces monocyte chemoattractant protein-1 expression in hepatocytes mediated via activator protein-1 activation // J. Biol. Chem. 2008. - Vol. 283, № 3. - P. 1282 - 1292.

175. Xu Z., Choi J., Yen T. Synthesis of a novel hepatitis С virus protein by ribosomal frameshift//EMBO. -2001. -Vol. 20, № 14. P. 3840-3848.

176. Ye J., Rawson R. В., Komuro R., Chen, X., Dave U. P., Prywes R., Brown M. S., Goldstein J. L. ER stress induces cleavage of membrane-bound ATF6 by the same proteases that process SREBPs // Mol. Cell. 2000. - Vol. 6, № 6. - P. 1355 - 1364.

177. Yoshida H., Matsui Т., Yamamoto A., Okada Т., Mori К. XBP1 mRNA is induced by ATF6 and spliced by IRE1 in response to ER stress to produce a highly active transcription factor // Cell. 2001. - Vol. 107, № 7. - P. 881 - 891.

178. Zeng X., Dai J., Remick D. G., Wang X. Homocysteine mediated expression and secretion of monocyte chemoattractant protein-1 and interleukin-8 in human monocytes // Circ. Res. 2003. - Vol. 93, № 4. - P. 311 - 320.

179. Zhang L., Jin M., Ни X. S., Zhu J. H. Homocysteine stimulates nuclear factor kappaB activity and interleukin-6 expression in rat vascular smooth muscle cells // Cell Biol. Int. 2006. - Vol. 30, № 7. - P. 592 - 597.

180. Zou C. G., Gao S. Y., Zhao Y. S., Li S. D., Cao X. Z., Zhang Y., Zhang, K. Q. Homocysteine enhances cell proliferation in hepatic myofibroblastic stellate cells // J. Mol. Med. 2009. - Vol. 87, № 1. - P. 75 - 84.

Оглавление диссертации Никитина, Олеся Евгеньевна :: 2010 :: Санкт-Петербург

Введение диссертации по теме "Детская хирургия", Никитина, Олеся Евгеньевна, автореферат

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Никитина, Олеся Евгеньевна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций