Автореферат и диссертация по медицине (14.03.06) на тему:Клинико-лабораторная эффективность сочетанного применения "Фосфоглива" и иммуномодуляторов при сальпингоофорите

005001837

На правах рукописи

Цуркина Марина Анатольевна

К Л ИНИКО-ЛАБОРАТОРНАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ СОЧЕТАННОГО ПРИМЕНЕНИЯ «ФОСФОГЛИВА» И ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ ПРИ САЛЬПИНГООФОРИТЕ

14.03.06 - фармакология, клиническая фармакология

2 4 НОЯ 2011

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Курск-2011

005001837

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель:

доктор медицинских наук Конопля Алексей Александрович Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Лазарева Галина Анатольевна доктор медицинских наук Покровская Татьяна Григорьевна

Ведущая организация:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Защита диссертации состоится « 'дё&ся 2011 г. в « /сГ » часов на заседании диссертационного совета Д 208.0j9.03 при Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования \«Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО КГМУ Минздравсоцразвития России.

Автореферат разослан « » иаиеё^2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Пашин Б.Н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Несмотря на успехи в диагностике воспалительных заболеваний органов малого таза и значительно возросшие возможности терапии, их частота не имеет тенденции к заметному снижению. По данным различных авторов, она в среднем составляет 93%. Такой резкий рост связан со многими причинами: подострим началом течения заболевания и, как следствие, поздней обращаемостью, несвоевременной госпитализацией, недостаточной эффективностью проводимой традиционной терапии (Сидорова И.С. и др., 2003; Стрижаков А.Н., 2004; Уткин Е.В., 2004; Стрижаков А.Н., Давыдов А.И., 2005; Конопля A.A., 2010).

В большинстве случаев гинекологической патологии и в первую очередь при первично остром сальпингоофорите основным пусковым механизмом в развитии иммунного воспаления является микробная, вирусная инвазия. При всем разнообразии патогенных агентов развивается дезорганизация плазматических мембран не только клеток-мишеней в пораженном органе (ткани), но и иммунокомпетентных клеток и эритроцитов, причем имеется сравнительно мало общих механизмов нарушений структуры и функции мембран (Рязанцева Н.В., Новицкий В.В., 2004). Это взаимообусловленные, усиливающие друг друга процессы: усиление генерации активных метаболитов кислорода, интенсификация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ), нарушение энергообеспечения клеток. При этом в крови повышается концентрация метаболитов, обладающих иммуносупрессорным эффектом: продукты ПОЛ, аномальные метаболиты липидного обмена, гликозаминогликаны (Новицкий В.В. и др., 2000; Конопля А.И., 2008). Данные метаболиты оказывают прямое действие как на иммуноциты, изменяя их функциональную активность, так и на эритроциты, индуцируя появление у них иммуносупрессорных свойств. Патогенетическая цепочка событий в итоге приводит к развитию вторичного иммунодефицита (Лазарева Г.А., 2007).

При этом, как показали ранее проведенные исследования, использование только иммуномодулирующих препаратов в коррекции иммунных и оксидант-ных нарушений, имеющих место при сальпингоофорите, недостаточно, поэтому эффективным может оказаться применение фармакологического комплекса, включающего препараты, обладающие иммуномодулирующими и мембрано-протективными свойствами (Петров C.B., 2006; Демиденко В.А., 2007,2008).

В настоящее время не подвергается сомнению роль в поддержании го-меостаза красными клетками крови (Рязанцева Н.В., Новицкий В.В., 2004). При этом мембрана эритроцита играет ключевую роль в детерминации гомеостаза и функциональной способности клетки. От ее физико-химического состояния зависят процесс активного транспорта ионов, особенности функционирования мембранассоциированных ферментов, характер взаимодействия клетки со средой, и в первую очередь, с иммунокомпетентными клетками, играющими важную роль в патогенезе, в том числе воспаления в малом тазу (Яловега Ю.А. и др., 2006).

В связи с этим поиск эффективных фармакологических комбинаций, действующих на данные звенья патогенеза иммунологических и оксидаитных рас-

стройств при остром сальпингоофорите, является актуальной и своевременной задачей (Тихомиров А.Л. и др., 2003; Сухих Г.Т. и др., 2006; Яглов В.В., 2006).

Цель работы: поиск эффективных фармакологических схем коррекции нарушений иммунного статуса, структурно-функциональных свойств эритроцитов и процессов перекисного окисления липидов у пациенток с острым сальпингоофоритом.

Задачи исследования.

1. Установить влияние фармакотерапии, включающей сочетание «Глу-токсима» и «Фосфоглива» на иммунный статус и процессы перекисного окисления липидов у больных острым сальпингоофоритом.

2. Сравнить иммуномодулирующие и антиоксидантные эффекты сочетания «Имунофана» и «Фосфоглива форте» в комплексном лечении больных острым сальпингоофоритом.

3. Изучить эффективность сочетанного использования иммуномодулято-ров и мембранопротекторов на структурно-функциональные свойства эритроцитов в условиях острого сальпингоофорита.

4. Провести сравнение клинико-иммунологической эффективности способов фармакокоррекции, включающих иммумодулирующие и мембранопро-тективные препараты у пациенток, страдающих острым сальпингоофоритом.

5. Выявить корреляционные связи между клинической симптоматикой и лабораторными показателями у пациенток с острым сальпингоофоритом при включении в комплексную традиционную фармакотерапию сочетания иммуно-модулирующего и мембранопротективного препаратов.

Научная новизна. Впервые установлены изменения структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов у больных острым сальпингоофоритом. Установлены сравнительные фармакологические эффекты сочетаний препаратов «Имунофан» 4- «Фосфоглив форте» и «Глутоксим» + «Фосфог-лив» в коррекции оксидантных нарушений, состояния Т- и В-клеточного звена иммунитета, цитокинового статуса, системы комплемента, функции фагоцитов у больных острым сальпингоофоритом. Определена эффективность использования мембранопротекторов и иммуномодуляторов в коррекции структурно-функциональных свойств эритроцитов у пациенток с острым сальпингоофоритом. Применение в комплексной фармакотерапии пациентов с острым сальпингоофоритом «Имунофана» в сочетании с «Фосфогливом форте» и «Глутокси-ма» в сочетании с «Фосфогливом» по сравнению с традиционным лечением оказывает более выраженное влияние на показатели иммунного статуса, состояние перекисного окисления липидов, структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов, клиническую симптоматику заболевания. Максимальными иммунокорригирующим, антиоксидантным и клиническим эффектами у данной категории больных обладает схема фармакотерапии, включающая дополнительно «Глутоксим» в сочетании с «Фосфогливом».

Практическая значимость. Разработаны эффективные способы комплексной фармакотерапии больных острым сальпингоофоритом с применением «Имунофана» в сочетании с «Фосфогливом форте» и «Глутоксима» в сочетании с «Фосфогливом». Клинико-иммунологическая эффективность примененных

схем фармакотерапии больных с острым сальпингоофоритом располагается по возрастанию в следующем порядке: традиционная фармакотерапия -» традиционная терапия + «Имунофан» + «Фосфоглив форте» -» традиционная терапия + «Глутоксим» + «Фосфоглив».

Установлены корреляционные взаимосвязи между показателями иммун-нометаболического статуса и структурно-функциональных свойств эритроцитов и клинической симптоматикой, позволяющие судить об эффективности проводимого лечения, динамике симптоматики острого сальпингоофорита и прогнозировании исхода заболевания.

Разработанные методы фармакологической коррекции иммунологических расстройств у больных острым сальпингоофоритом с включением в традиционную фармакотерапию различных форм «Фосфоглива», «Имунофана» и «Глу-токсима» внедрены в работу ОГУЗ «Областной перинатальный центр» г. Курска, ГУЗ «Белгородская областная клиническая больница Святителя Иоасафа».

Материалы диссертации вошли в учебные рабочие программы и используются в лекционных курсах и на практических занятиях ряда кафедр Курского, Российского, Санкт-Петербургской, Самарской, Волгоградского государственных медицинских университетов и академий и медицинских факультетов Белгородского и Орловского государственных университетов.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Включение сочетания иммуномодуляторов («Имунофан» и «Глутоксим») с мембранопротекторами (различные формы «Фосфоглива») в комплексную фармакотерапию больных острым сальпингоофоритом снижает количество иммунно-лабораторных показателей, требующих дополнительной коррекции.

2. Использование в традиционном лечении острого сальпингоофорита сочетаний «Имунофан» + «Фосфоглиф форте» и «Глутоксим» + «Фосфоглив» оказывает выраженное фармакокорригирующее влияние на показатели структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов.

3. Клинически обосновано включение в комплексную фармакотерапию больных острым сальпингоофоритом комбинаций «Имунофан» + «Фосфоглив форте» и «Глутоксим» + «Фосфоглив».

4. Определены лабораторные показатели, позволяющие судить о течении и эффективности лечения острого сальпингоофорита.

Апробация работы. Основные положения диссертации представлены на Объединенном иммунологическом форуме - 2008 (Санкт-Петербург, 2009), VII Съезде аллергологов и иммунологов СНГ (Санкт-Петербург, 2009), Межрегиональной научно-практической конференции «Инновации в анестезиологии и медицине критических состояний» (Курск, 2009), межвузовской научной конференции «Актуальные вопросы фармакологии и фармации» (Курск, 2009), III Всероссийской конференции молодых ученых (Воронеж, 2009), IV Международной научной конференции молодых ученых-медиков (Курск, 2010), Межрегиональном форуме «Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии -междисциплинарные проблемы» (Санкт-Петербург, 2010), XV Международном конгрессе по реабилитации в медицине и иммунореабилитации (Дубай, 2010), совместном заседании кафедр фармакологии, акушерства и гинекологии фа-

культета последипломного образования, биологической химии, микробиологии, вирусологии и иммунологии Курского государственного медицинского университета (2011 г.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 работ, 7 из которых в рекомендуемых изданиях ВАК РФ. В работах содержится полный объем информации, касающейся темы диссертации.

Личный вклад автора. Автором составлен план и дизайн исследования, проведен анализ отечественных и зарубежных источников литературы по теме диссертации, лично проводилось обследование пациенток с острым сальпинго-офоритом, забор крови, анализировались лабораторные показатели адаптивного и врожденного иммунитета. Диссертантом под контролем руководителя выполнялся анализ и обобщение результатов, составление таблиц и графиков, написание диссертации, сопоставление с литературными данными. Доля автора в сборе, анализе и обобщении информации по теме диссертации составила 90%.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 117 страницах машинописного текста, иллюстрирована 29 таблицами и 6 рисунками, состоит из введения, обзора литературы (2 главы), описания методов исследования, изложения собственных результатов (3 главы), заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя, включающего 159 отечественных и 75 иностранных источников.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Материалы и методы исследования

Характеристика клинических наблюдений. Под постоянным наблюдением на базе ГУЗ «Белгородская областная клиническая больница Святителя Иоасафа» находились 56 пациенток с острым сальпингоофоритом в возрасте 18-35 лет. Клинический диагноз устанавливали на основании жалоб, анамнеза заболевания, данных объективного и лабораторно-инструментального исследований. Группа контроля состояла из 20 здоровых доноров-добровольцев того же возраста.

Критериями включения в исследование были:

- возраст - 18-35 лет;

- верифицированный диагноз - острый сапьпингоофорит;

- тяжесть состояния не выше среднетяжелого;

- отрицательные результаты на ИППП;

- переносимость использованных в исследовании фармакологических препаратов;

- письменное согласие на участие в проводимых исследованиях.

Критерии исключения:

- пациентки в тяжелом и крайне тяжелом состоянии;

- лица, ранее подвергнутые оперативному вмешательству;

- лица с верифицированной специфической ИППП;

- лица с сопутствующей соматической патологией в стадии неполной ремиссии и стадии обострения;

- лица с аллергической реакцией на проводимое лечение;

- пациенты, отказавшиеся от проводимого исследования.

Во всех случаях для исключения гонококковой инфекции проводилось бактериоскопическое (готовились мазки, окрашивались 1% водным раствором метиленового синего и по Граму) и бактериологическое (посев на специальную среду для выявления гонококков) исследование вагинально-цервикального смыва.

Для выявления трихомонад исследовались нативные и окрашенные водным раствором метиленового синего препараты, посев отделяемого на питательные среды для культуральной диагностики трихомониаза.

Диагностику хламидийной, микоплазменной, уреаплазменной, гардне-реллезной инфекции также производили путем исследования полученных со-скобов методом полимеразной цепной реакции с использованием коммерческих наборов фирмы «ДНК-диагностика». Все больные подвергались обследованию на сифилис и ВИЧ-инфекцию, для чего ставились стандартные серологические реакции. Всем больным произведено бактериоскопическое и бактериологическое исследование содержимого цервикального канала и уретры, выполнена кольпоскопия, УЗ-исследование.

Лабораторные методы исследования крови проводились по общепринятым методикам. При оценке гемограмм брались за основу физиологические нормы, соответствующие международной системе единиц (СИ) в клинических исследованиях (Меньшиков В.В., 1987).

Все больные были разделены на три группы, по возрасту, минимальным сопутствующим заболеваниям, прогнозируемой тяжести заболевания и проводимому лечению (табл. 1).

Таблица 1

Распределение больных по способу проводимого лечсння

№ группы Метод лечения Количество

Больные ОСО 1 Традиционная фармакотерапия 17

2 Традиционная фармакотерапия + «Имунофан» + «Фосфоглив форте» 19

3 Традиционная фармакотерапия + «Глутоксим» + «Фосфоглив» 20

Всего 56

Доноры 20

Первая опытная группа включала 17 пациенток с ОСО, которым проводили традиционную консервативную терапию: цефазолин (1,0 внутримышечно 4 раза в день № 20), гентамицин (80 мг внутримышечно 3 раза в день № 21), нистатин (500 тыс. ЕД внутрь 4 раза в день № 28), трихопол (0,5 внутрь 3 раза в день № 15), индометацин (100 мг per rectum однократно № 10) и местно клот-римазол (1 табл. per vagina вечером однократно № 10).

Во вторую группу включены больные (19 женщин), которым дополнительно назначались «Имунофан» (50 мкг внутримышечно через 24 часа

14 дней) в сочетании с «Фосфогливом форте» (0,3 фосфатидилхолина внутрь через 8 часов 14 дней).

В третьей группе (20 больных) пациентки получали дополнительно к традиционной схеме лечения «Глутоксим» (3% по 1,0 внутримышечно через 24 часа 14 дней), «Фосфоглив» (0,5 фосфатидилхолина внутривенно через 12 часов 14 дней).

Все препараты вводили согласно рекомендациям, изложенным в справочнике «Лекарственные средства» (Машковский М.Д., 2000) и прилагаемых инструкциях.

Иммунологические и биохимические методы исследования. В работе фенотип лимфоцитов определялся методом иммунофлюоресцентного анализа с помощью моноклональных антител (ООО «Сорбент», г. Москва) к структурам CD3 (общие Т-лимфоциты), CD4 (Т-хелперы), CD8 (цитотоксические клетки), CD 16 (NK-клетки), CD25 (рецептор к ИЛ-2), CD95 (индукторный фактор апоп-тоза), CD22 (В-лимфоциты) (Лесков В.П. и др., 1997).

Содержание С3, С4-компонентов комплемента, фактора Н, Сринг., ФНОа, ИЛ-1/3, ИЛ-6, ИЛ-8, гранулоцитарного колониестимулирующего фактора, ИЛ-4, ИЛ-10 определяли в плазме крови с помощью набора реагентов РгоСоп (ООО «Протеиновый контур», г. Санкт-Петербург) методом твердофазного иммуно-ферментного анализа.

Активность и интенсивность фагоцитоза нейтрофилов периферической крови оценивали по проценту фагоцитоза, фагоцитарному числу и индексу активности фагоцитоза (Медведев А.Н., Чаленко В.В., 1991; Фримель Г., 1987). Активность кислородзависимых систем нейтрофилов оценивали по реакции восстановления нитросинего тетразолия, спонтанного и стимулированного зи-мозаном, с расчетом функционального резерва (Виксман М.Е., Маянский А.Н., 1979; Щербаков В.И., 1989).

Выраженность перекисного окисления липидов оценивали по содержанию в крови малонового диальдегида и ацилгидроперекисей (Бенисевич В.И., Идельсон Л.И., 1973; Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И., 1983). Кроме этого, определяли активность каталазы (Королюк М.А. и др., 1988).

Исследование структурно-функциональных свойств эритроцитов. Эритроциты получали из 5 мл гепаринизированной крови больных по методу Е. Beutler (1985) с незначительной модификацией. Цельную кровь отстаивали дважды в 10 мМ Na-фосфатном буфере (рН=7,4), содержащем 0,9% хлорида натрия и 3% декстрана Т-500, в течение 30 минут при температуре 37°С. После этого кровь центрифугировали, удаляли надосадочную жидкость аспирацией. Эритроцитарную массу подвергали дополнительной очистке на хроматографи-ческой колонке через HBS-целлюлозу.

В целях определения общей сорбционной способности эритроцитов, обусловленной наружной архитектоникой клеточной мембраны по отношению к витальным красителям, 1 мл суспензии эритроцитов смешивали в пробирке с 3 мл 0,025% раствора метиленового синего, инкубировали 10 мин при комнатной температуре и центрифугировали в течение 10 мин при 3000 об/мин. При длине волны 630 нм определяли оптическую плотность исходного раствора и

надосадочной жидкости в единицах экстинкции по отношению к изотоническому раствору натрия хлорида (Тогайбаев А.А. и др., 1988). Количество поглощенного красителя выражали в процентах по формуле (1):

ССЭ=100- lOOCi/Ci, (1)

где ССЭ - сорбционная способность эритроцитов в % поглощенного красителя; Ci - оптическая плотность раствора до инкубации с эритроцитами в ед. экстинкции; С2 - оптическая плотность раствора после инкубации с эритроцитами, ед. экстинкции.

Исследовали также сорбционную емкость гликокаликса эритроцитов для альцианового синего, который является катионным красителем фталоцианино-вой группы и обладает способностью связываться с гликолипидами, гликопро-теидами и кислыми мукополисахаридами. В низкой концентрации альциановый синий не повреждает клетки, не проникает в цитоплазму, но сорбируется в количестве, пропорциональном содержанию белков и углеводов в гликокаликсе, отражая степень его вязкости (Семко Г. А., 1998).

Для определения сорбционной емкости гликокаликса 1 мл суспензии эритроцитов, содержащий 4х107 клеток, смешивали с равным объемом изотонического раствора натрия хлорида, содержащего 0,005% альцианового синего, инкубировали 10 мин при температуре 21°С и центрифугировали в течение 10 мин при 1000 об/мин. При длине волны 617 нм, используя в качестве контроля изотонический раствор натрия хлорида, измеряли концентрацию красителя в надосадочной жидкости. Количество поглощенного альцианового синего рассчитывали в граммах на 1 эритроцит.

О функциональном состоянии эритроцитов судили также по накоплению малонового диальдегида, который определяли в мембранах эритроцитов соответственно уровню связывания его с тиобарбитуровой кислотой (Банкова В.В. и др., 1987).

Мембраны эритроцитов получали методом G.T. Dodge (1963), разрушая эритроциты осмотическим и механическим гемолизом в 10 мМ Na-фосфатном буфере, после чего проводили отмывку теней от гемоглобина в 10 мМ и 5 мМ Иа-фосфатном буфере. Электрофорез проводили в присутствии додецилсуль-фата натрия в вертикальных пластинах полиакриламидного геля по методу U.K. Laemmli (1970). Белки окрашивали кумаси голубым R-250 по модифицированной методике G. Fairbanks (1971)1.

Статистическая обработка результатов. Статистическую обработку результатов исследования проводили, используя непараметрические методы, факторный анализ, кластерный анализ, критерий X2, а также коэффициент ранговой корреляции Спирмена (Гублер Е.Г., Генкин А.Р., 1973; Лакин Г.Ф., 1980). Статистически значимыми считали различия с р<0,05.

' Примечание. Определение иммунологических показателей проведено в лаборатории иммунофер-ментного анализа НИИ экологической медицины Курского государственного медицинского университета, за что выражаем сотрудникам соответствующего подразделения глубокую признательность.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Влияние традиционной терапии на показатели иммунного и окси-дантного статусов и структурно-функциональные свойства эритроцитов при остром сальпингоофорите. У больных ОСО наблюдается повышение количества лейкоцитов за счет сегментоядерных нейтрофилов с одновременной моноцитопенией и эозинопенией, при этом повышены значения ЛИИ и ИСЛ. При использовании традиционной фармакотерапии у больных ОСО наблюдается нормализация нарушенных показателей лейкоформулы.

При поступлении в клинику у пациентов с ОСО выявлены разнонаправленные изменения показателей Т-клеточного звена иммунитета, что проявляется снижением количества Т-хелперов, ЫК-клсток и клеток-маркеров ранней активации и повышением представительности клеток-маркеров фактора апоптоза, цитотоксических Т-клеток и В-лимфоцитов (табл. 2).

Таблица 2

Иммунофенотипированные лимфоциты и уровень цитокинов __в крови у больных PCO (М±т) _

Иммунофенотипированные лимфоциты Единицы измерения 1 2 1 3

Здоровые Больные

До лечения После традиционного лечения

CD3 % 58,1±4,2 51,1±3,1 53,7±3,2

ю7л 1,13±0,09 1,18±0,10 1,08±0,11

CD4 % 43,8±3,7 27,3±2,0"1 36,5±1,7''"г

107л 0,31±0,03 0,54±0,04м 0,57±0,04"'

CD8 % 25,2±2,2 29,1±1,3'' 28,9±1,Г'

Ю7л 0,49±0,03 0,59±0,04"' 0,56±0,04''

CD16 % 12,8±1,2 8,1±0,6*' 7,9±0,5"'

CD25 % 10,3±1,1 6,4±0,5"' 6,1±0,5*'

CD95 % 9,1 ±0,9 15,7±0,5'' 15,1±0,9''

CD22 % 15,1±1,2 17,ад, г* 14,6±0,8'"

107л 0,28±0,02 0,35±0,03"' 0,29±0,03'^

ФНОа пкг/мл 22,1±2,2 70,5±4,9"' 47,3±5,Г'-'

ИЛ-10 пкг/мл 5,9±0,4 29,4±3,5'' 28,2±2,8*'

ИЛ-6 пкг/мл 70,3±6,9 176,9±27,б"' 145,5±12,7"'-!

ИЛ-8 пкг/мл 51,4±8,3 227,1±24,4'' 170,0±20,5'|,'!

Г-КСФ пкг/мл 82,3±7,7 88,2±6,1 81,3±7,1

ИЛ-4 пкг/мл 17,1±4,2 12,0±1,8'' 11,3±1,9*'

ИЛ-10 пкг/мл 29,2±6,3 28,9±2,Г' 47,5±3,Г'

Примечание. Здесь и далее звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических (р < 0,05); цифры рядом со звездочкой - по отношению к показателям какой группы эти различия.

Традиционное лечение позволило нормализовать уровень В-лимфоцитов, содержание других субпопуляций лимфоцитов остается на прежнем уровне (табл. 2).

У больных ОСО снижается активность фагоцитоза нейтрофилов периферической крови, при этом активность кислородзависимых систем у данной категории больных повышена, так же как и ФРН (рис. 1).

Рис. 1. Состояние показателей врожденного иммунитета и ПОЛ в плазме крови у больных ОСО до и после традиционной фармакотерапии.

Примечания: 1- радиус окружности - значение показателей у здоровых доноров (1 группа); 2 - сплошная линия - значения показателей у больных ОСО до лечения (2 группа); 3 - пунктирная линия - значения показателей у больных ОСО после традиционной фармакотерапии (3 группа); 4 -О - р < 0,05 по отношению к 1 группе; 5 - <ТГ>- р > 0,05 между 2 и 3 группами.

Традиционное комплексное лечение больных ОСО позволило нормализовать показатели фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови и корригировать НСТ-тест стимулированный (рис. 1).

При поступлении у пациенток с ОСО повышена концентрация всех изученных провоспалительных цитокинов, в большей степени ФНОог, ИЛ-1/3, ИЛ-8, тогда как содержание противовоспалительного цитокина ИЛ-4 снижена, а ИЛ-10 остается на уровне нормы (табл. 2).

На фоне проводимого традиционного лечения наблюдается снижение, но не до контрольных значений концентрации ИЛ-6, ИЛ-8, ФНОа и повышение выше уровня нормы ИЛ-10 (табл. 2).

В условиях ОСО выявлено повышение активности комплемента, концентрации в плазме крови как активных продуктов (С3а, С4), так и их компонентов, обладающих ингибирующей активностью - фактор Н и Сгинг. (рис. 1). Таким образом, у больных ОСО наблюдается стимуляция системы комплемента как по классическому, так и по альтернативному путям. Компенсаторно у больных ОСО имеет место повышение концентрации и ингибиторов как классического,

так и альтернативного путей активации комплемента (повышение концентрации С]-инг. и фактора Н соответственно) (рис. 1).

На фоне традиционного лечения еще больше возрастает концентрация Сгинг. и снижается, но не до уровня нормы, концентрация С4, фактора Н и С3-компонента комплемента (рис. 1).

При поступлении в клинику больных с обострением ОСО регистрировалось повышение концентрации продуктов ПОЛ, как МДА, так и АГП, тогда как активность каталазы снижается. После проведенного консервативного лечения у больных ОСО показатели, отражающие состояние оксидантного статуса на системном уровне, снижаются, но не до уровня нормы (рис. 1).

Интерес представляло распределение изменений у пациенток по сгруппированным показателям. В период обострения заболевания у испытуемых лиц отмечалось математически значимое изменение 9,9% гематологических тестов, 8,5% - биохимических и остальные 69,8 - иммунологических. Распределение по конкретным звеньям иммунной защиты оказалось следующим: клеточное звено - 6,6%, ФМА нейтрофилов - 18,2%, цитокиновое звено - 27,5%, система комплемента - 17,5%. Таким образом, у больных ОСО при поступлении 88,2% изучаемых показателей оказались отличными от уровня нормы, при этом после проводимой традиционной фармакотерапии процент таких показателей снизился лишь до 68,4%.

При ОСО снижается прочность мембраны, о чем свидетельствует снижение представительности подфракций спектрина, анкирина и повышение уровня дематина; повышается эластичность - повышение уровня актина, паллидина, тропомиозина, белка полосы 4.1; снижается метаболическая активность - снижено количество белка полосы 4.5 и повышена концентрация внутри клеток МДА. Выявленные перестройки в представительности белков в мембране красных клеток крови приводят к повышению ССЭ у данной категории больных (рис. 2; табл. 3).

На фоне проводимого лечения нормализуется ССЭ и концентрация МДА, корригируется количество белка дематина, белка полосы 4.1 (рис. 2; табл. 3).

Таблица 3

Структурно-функциональные свойства эритроцитов у больных с неосложненным течением ОСО на фоне _ проводимого лечения (М±ш)_

Показатели Здоровые ОСО

доноры до лечения традиционное леченне

1 2 3

СЕГ 1,42±0,11 1,61±0,13 1,52±0,12

ССЭ 32,8±1,23 46,1±3,85*' 26,7±2,32"' ■

МДА 3,5440,15 5,36±0,35'' 3,82±0,35'' .

Рис. 2. Представительность белков мембран эритроцитов у больных ОСО и сорбционные свойства мембраны на фоне проводимой традиционной фармакотерапии.

Примечания: 1 - радиус окружности - значения показателей у здоровых доноров

(1 группа); 2 - - - значения показателей у больных ОСО (2 группа); 3-----

значения показателей у больных ОСО после традиционной фармакотерапии (3 группа); 4 - О _ р<0,05 по отношению к 1 группе; 5 - С - р<0,05 3 группы по отношению ко 2 группе.

Влияние «Имунофана» и «Фосфоглива форте» на показатели иммунного статуса, состояние перекисного окисления липидов и структурно-функциональные свойства эритроцитов у больных с острым сальпинго-офоритом. Применение «Имунофана» и «Фосфоглива форте» нормализует абсолютное содержание в крови С025, С095-лимфоцитов и корригирует представительность ЫК-клеток (рис. 3).

Использование дополнительно «Имунофана» и «Фосфоглива форте» в отличие от традиционного лечение снижает у пациенток с ОСО, но не до уровня нормы, значения НСТ-теста как спонтанного, так и стимулированного (рис. 3).

«Имунофан» и «Фосфоглив форте» у больных ОСО дополнительно к традиционному лечению нормализует уровень ИЛ-1/3, снижает, но не до уровня нормы, концентрацию в плазме крови ИЛ-6, ИЛ-8 и повышает уровень Г-КСФ и ИЛ-4 (рис. 3).

СС4

Каталаза зоо

СБ8

НСТ стим.

НСТ-сп,

ФЧ

Фактор Н

С4

КСФ

сз

НЛ-4

НЛ-10

Рис. 3. Состояние нарушенных параметров иммунного статуса, ПОЛ у больных ОСО на фоне терапии «Имунофаном» и «Фосфогливом форте».

Примечания:

1. Радиус окружности - показатели у больных ОСО после ТЛ (1 группа);

2. Сплошная линия - показатели у больных ОСО после проводимой фармакотерапии (2 группа);

3. О - р < 0,05 по отношению к показателям 1 группы;

4. СИ?- р > 0,05 по отношению к показателям группы здоровых доноров.

Использование «Имунофана» и «Фосфоглива форте» позволило к моменту выписки у больных ОСО нормализовать уровень продуктов ПОЛ (АГП и МДА), снизить, но не до уровня здоровых доноров, концентрацию в плазме крови С4-компонента системы комплемента и повысить уровень Сгинг. и активность каталазы (рис. 3).

После использования традиционной фармакотерапии к моменту выписки у 78% больных остаются эхографические признаки воспаления придатков, у 37,7% пациенток остаются патологические выделения, а у 25% больных выявляется лейкоцитоз (табл. 4).

Использование «Имунофана» и «Фосфоглива форте» купирует к выписке болевой синдром и повышенные значения СОЭ, дизурические расстройства (табл. 4).

Таблица 4

Сравнительная клиническая эффективность дифференцированного лечения хронического сальпингоофорита_

Показатели До лечения тл ТЛ + «Имунофан» + «Фосфоглив форте» ТЛ + Глутоксим + Фосфоглив

Болевой синдром 100,0 18,6 - -

Слабость 37,0 1&,6 5,0 5,0 '

Лихорадка 62,1 - - -

Патологические выделения 100,0 37,7 16,5 15,0

Дизурические расстройства 45,7 14,6 - -

Увеличение бимануально придатков матки 100,0 14,6 - -

Повышение СОЭ 51,2 18,6 16,5 -

Лейкоцитоз 72,1 25,0 16,5 10,0

Острофазные белки 45,7 14,6 11,0 10,0

Отсутствие положительной эхографической динамики 100,0 78,0 47,5 40,0

При изучении данной фармакологической комбинации на структурно-функциональные свойства эритроцитарной мембраны, выявлено, что «Имуно-фан» и «Фосфоглив форте» нормализуют количество (5-спектрина, белка полосы 4.1 и дематина и корригируют уровень остальных измененных белков мембран красных клеток крови (за исключением уровня тропомиозина) (табл. 5).

Таблица 5

Структурно-функциональные свойства эритроцитов у больных ОСО

в стадии обострения на фоне проводимой фармакотерапии

ТЛ + ТЛ +

Показатели После ТЛ «Имунофан» + «Фосфог- «Глутоксим» + «Фос-

лив форте» фоглив»

1а ; коррекция нормализация

1/3 нормализация коррекция

Анкирин коррекция нормализация

4.1 т нормализация нормализация

Паплидин т коррекция нормализация

Дематин т нормализация нормализация

Актин г коррекция коррекция

Тропомиозин т - коррекция

Коррекция нммуномстаболических нарушений сочетанием «Глуток-сима» и «Фосфоглива». Применение в сочетании с «Фосфогливом» препарата

«Глутоксим» по сравнению с традиционной фармакотерапией существенно не изменяет показатели общего анализа крови.

Сочетание «Фосфоглива» и «Глутоксима» в отличие от традиционной фармакотерапии нормализует содержание Т-хелперов, СБ25 и СП95-лимфоцитов, корригируя представительность СП 16-лимфоцитов (рис. 4).

Назначение больным ОСО «Глутоксима» и «Фосфоглива» нормализует функционально-метаболическую активность нейтрофилов периферической крови, что проявляется снижением до контрольных значений показателей НСТ-теста и ФЧ (рис. 4).

Включение в стандартную схему фармакотерапии ОСО «Глутоксима» и «Фосфоглива» приводит к нормализации концентрации в плазме крови Г-КСФ и большему снижению, но не до уровня нормы, концентраций большинства провоспалительных цитокинов (рис. 4).

Рис. 4. Состояние нарушенных параметров иммунного статуса, ПОЛ у больных ОСО на фоне терапии «Глутоксимом» и «Фосфогливом». Примечания:

1. Радиус окружности - показатели у больных ОСО после ТЛ (1 группа);

2. Сплошная линия - показатели у больных ОСО после проводимой фармакотерапии (2 группа);

3. О - р < 0,05 по отношению к показателям 1 группы;

О- р > 0,05 по отношению к показателям группы здоровых доноров.

Применение «Глутоксима» и «Фосфоглива» в комплексе с традиционной фармакотерапией достоверно снижает концентрацию в плазме крови С4, нормализует уровень продуктов ПОЛ и повышает активность каталазы (рис. 4).

Использование традиционной фармакотерапии, дополненной «Глутокси-мом» и «Фосфогливом», приводит к тому, что при выписке лишь 15% больных отмечают патологические выделения и у 10,0 % остаются повышенными концентрации острофазных белков в крови, а у 40% больных остаются сонографи-ческие признаки воспаления придатков (табл. 4).

Что касается влияния данной фармакологической комбинации на структурно-функциональные свойства эритроцитарной мембраны, выявлено, что «Глутоксим» в сочетании с «Фосфогливом» дополнительно, в отличие от предыдущей группы, нормализует представительность а-спектрина, анкирина, паллидина и корригирует представительность тропомиозина (табл. 5).

Таблица 5

Результаты факторного анализа иммунометаболических показателей

Показатели Фактор 1 Фактор 2 Фактор 3

ФН Оа -0,97 0,23 0,66

ИЛ-10 -0,62 0 0,08

ИЛ-6 -0,16 0,14 -0,91

ИЛ-8 0,56 0,87 0,26

ИЛ-4 -0,7) -0,06 0,2

ИЛ-10 -0,56 -0,88 -0,2

СЗ -0,08 0,92 0,05

С4 -0,4 -0,27 0,87

МДА -0,21 0,99 -0,31

АГП 0,46 0,63 0,33

ФИ -0,5 -0,41 0,76

ФЧ 0,32 0,24 0,97

Кат -0,39 0,12 0,91

НСТ-сп. 0,93 0,3 0,04

НСТ-стим. 0,84 0,12 0,12

Общ. лисп. 7,65 6,33 5,34

Доля общ., % 36 30 25

Примечание: р<0,05.

С помощью матрицы множественной корреляции между показателями иммунометаболического статуса и клиническими проявлениями установлены достоверные как положительные, так и отрицательные связи, свидетельствующие о взаимообусловленности лабораторных и клинических показателей. Для выявления независимых факторов в поддержании иммунного и оксидантного гомеостаза в исследуемых группах больных сальпингоофоритом нами был проведен факторный анализ, результаты которого разделены на три группы факторов, два из которых более главные, чем третий, при этом наиболее значимые показатели - концентрация ФНОа, С3-компонента системы комплемента, МДА и ФЧ нейтрофилов периферической крови.

Таким образом, по клинической эффективности и положительному влиянию на состояние иммунного стату са, перекисного окисления липидов и структурно-функциональные свойства красных клеток крови схемы фармакологической иммунореабилитации больных острым сальпингоофоритом располагаются по возрастанию в следующем порядке: традиционная фармакотерапия -> традиционная терапия + «Имунофан» + «Фосфоглив форте» -> традиционная терапия + «Глутоксим» + «Фосфоглив».

ВЫВОДЫ

1. У больных острым сальпингоофоритом снижена прочность и повышена эластичность мембраны эритроцитов, снижена их метаболическая активность и общая сорбционная способность эритроцитов, при этом традиционная фармакотерапия не позволяет корригировать представительность большинства белков мембраны и ее сорбционные свойства.

2. Сочетание «Имунофана» и «Фосфоглива форте» дополнительно к традиционной фармакотерапии нормализует у пациенток с острым сальпингоофоритом количество СБ25 и С095-лимфоцитов, концентрацию ИЛ-1/3, Г-КСФ, активность нейтрофилов и представительность в мембране эритроцитов /3-спектрина, белка полосы 4.1, дематина и сорбционную емкость мембраны эритроцитов.

3. Использование комбинации препаратов «Глутоксима» и «Фосфоглива» дополнительно нормализует у пациенток с острым сальпингоофоритом фагоцитарную активность нейтрофилов, уровень С04-лимфоцитов, представительность а-спектрина, анкирина, паллидина в мембране красных клеток крови.

4. Применение «Имунофана» и «Фосфоглива форте» у больных острым сальпингоофоритом снижает количество измененных показателей с 68,4% после традиционного лечения до 46,8%, а назначение «Глутоксима» и «Фосфоглива» у данной категории пациенток снижает до 36,2%.

5. По клинико-лабораторной эффективности способы фармакологической иммунореабилитации больных острым сальпингоофоритом располагаются по возрастанию в следующем порядке: традиционная фармакотерапия -» традиционная терапия + «Имунофан» + «Фосфоглив форте» традиционная терапия + «Глутоксим» + «Фосфоглив».

6. Наиболее диагностически ценными для оценки эффективности лечения, динамики течения заболевания, прогнозирования его исхода у больных острым сальпингоофоритом являются в крови концентрация ФНОа, Сз-компонента системы комплемента, малонового диальдегида, уровень фагоцитарного числа нейтрофилов периферической крови и общая сорбционная способность эритроцитов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Использовать в комплексном лечении больных острым сальпингоофо-ритом сочетание «Имунофана» (50 мкг внутримышечно через 24 часа 14 дней) с «Фосфогливом форте» (0,3 фосфатидилхолина внутрь через 8 часов 14 дней).

2. Применять в комплексном лечении больных острым сальпингоофори-том «Глутоксим» (3% по 1,0 внутримышечно через 24 часа 14 дней) и «Фос-фоглив» (0,5 фосфатидилхолина внутривенно через 12 часов 14 дней).

3. Для оценки динамики течения острого сальпингоофорита и прогнозирования его исхода в дополнение к традиционным лабораторным методикам исследовать в крови концентрацию ФНОа, С3-компонента системы комплемента, малонового диальдегида, уровень фагоцитарного числа нейтрофилов периферической крови.

4. Использовать в учебном процессе медицинских вузов знания о способах коррекции нарушений иммунного статуса, состояния перекисного окисления липидов и структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов у больных острым сальпингоофоритом сочетанием иммуномодуляторов («Имунофана» и «Глутоксима»), мембранопротекторов (различных форм «Фосфогли-ва»).

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Использование лонгидазы в лечении обострений хронического сальпингоофорита / Е.А. Юдина, М.А. Цуркина, A.A. Конопля и др. // Курский науч.-пракгг. вестн. «Человек и его здоровье». - Курск, 2008. -№ 3. - С. 104-111.

2. Фармакотерапия иммунных нарушений при обострении хронического сальпингоофорита / М.А. Цуркина, В.П. Гаврилюк, A.A. Конопля и др. // Российский аллергологический журнал. - 2009. -№ 3. - С. 242.

3. Взаимосвязь иммунных нарушений и структурно-функциональных свойств эритроцитов у больных хроническим сальпингоофоритом / A.A. Конопля, М.А. Цуркина, A.A. Кеня и др. // Медицинская иммунология. - 2009. - Т. 11, № 4-5. - С. 409.

4. Изменения иммунного и оксидантного статуса у больных хроническим сальпингоофоритом на фоне оперативного вмешательства / A.A. Конопля, М.А. Цуркина, A.A. Кеня и др. // Материалы межрегиональной науч.-прак. конф. «Инновации в анестезиологии и медицине критических состояний». -Курск: ГОУ ВПО КГМУ Росздрава, 2009. - С. 103-106.

5. Структурно-функциональные свойства эритроцитов и иммунные нарушения у больных хроническим сальпингоофоритом / М.А. Цуркина, A.A. Конопля, A.A. Кеня и др. // Актуальные вопросы фармакологии и фармации: сб. трудов межвузовской иауч. конф., посвящ. памяти проф.

B.B. Пичугина и 75-летию КГМУ. - Курск: ГОУ ВПО КГМУ Росздрава, 2009. -

C. 209-210.

6. Иммунореабилитация пациенток с обострением хронического сальпингоофорита / A.A. Конопля, М.А. Цуркина, Ю.И. Кобелева, A.A. Кеня // Материалы III Всеросс, конф. молодых ученых, организованной ВГМА им. H.H. Бурденко и КГМУ. - Воронеж, 2009. Т. 1. - С. 40-42.

7. Иммунометаболические нарушения у больных острым и обострением хронического сальпингоофорита / М.А. Цуркина, A.A. Конопля, A.A. Кеня, Ю.И. Кобелева II Материалы IV Международной науч. конф. молодых ученых-медиков. - Курск: ГОУ ВПО КГМУ Росздрава, Т. 2, 2010. - С. 105-107.

8. Структурно-функциональные свойства эритроцитов в условиях обострения хронического сальпингоофорита / М.А. Цуркина, A.B. Караулов, A.A. Конопля, Ю.И. Кобелева // Международный журнал по иммунореабилитации. - 2010. - Т. 12, № 2. - С. 136.

9. Иммунный статус и структурно-функциональные свойства эритроцитов в условиях хронического сальпингоофорита / М.А. Цуркина, Ю.И. Кобелева, A.A. Конопля, Ж.П. Омашарифа // Российский аллергологический журнал. - 2010. - № 5, вып. 1. - С. 143-144.

10. Причинно-следственная связь между нарушениями иммунного статуса и структурно-функциональных свойств эритроцитов при хроническом сальпингоофорите / М.А. Цуркина, A.A. Конопля, Ю.И. Кобелева и др. // Научные ведомости БелГУ. Сер. Медицина и фармация. - 2011. - № 4 (99), вып. 13. - С. 97-101.

11. Фармакологическая коррекция иммунного статуса и структурно-функциональных свойств эритроцитов при воспалительных заболеваниях органов малого таза у женщин / Ю.И. Кобелева, A.A. Конопля, М.А. Цуркина и др. // Научные ведомости БелГУ. Сер. Медицина и фармация. - 2011. - № 4 (99), вып. 13/2. - С. 44-48.

Принятые сокращения

АГП - ацилгидроперекиси, усл. ед.

Г-КСФ - гранулоцитарный колониестимулирующий фактор, пг/мл

ИАФ - индекс активности фагоцитов

ИЛ-1(3 -интерлейкин-1 бета, пг/мл

ИЛ-4 - интерлейкин-4, пг/мл

ИЛ-б - интерлейкин-6, пг/мл

ИЛ-8 - интерлейкин-8, пг/мл

ИЛ-10 - интерлейкин-10, пг/мл

ИППП - инфекции, передаваемые половым путем

МДА - малоновый диальдегид, мкмоль/л

НСТ - тест восстановления нитросинего тетразолия

НСТ-сп. - спонтанный тест восстановления нитросинего тетразолия, %

НСТ-стим. - стимулированный тест восстановления нитросинего тетразолия, %

ПОЛ - перекисное окисление липидов

Ci-инг. - Ci-ингибитор, мг/л

С3 - компонент комплемента Сз, мг/л

С4 - компонент комплемента С4, мг/л

СЕГ - сорбционная емкость гликокаликса, 10' г/эр.

СИР - степень иммунных расстройств

ССЭ - сорбционная способность эритроцитов, %

ТЛ - традиционное лечение

ФИ - фагоцитарный индекс, %

ФМА - функционально-метаболическая активность

ФНОа - фактор некроза опухолей альфа, пг/мл

ФРН - функциональный резерв нейтрофилов, %

ФЧ - фагоцитарное число

ОСО - острый сальпингоофорит

CD3 - общие Т-лимфоциты, %

CD4 - Т-хелперы, %

CD8 - цитотоксические клетки, %

CD 16 - NK-клетки, %

CD22 - В-лимфоциты, %

CD25 - рецептор к ИЛ-2, ранний маркер активации, %

CD95 - индукторный фактор апоптоза, %

HLA-DR - поздний маркер активации, %

АТБ - анионтранспортный белок

ЛИИ - лейкоцитарный индекс интоксикации

Г-S-T - глутатион-8-трансфереза

Г-З-ФД - глутатион-3-фосфатдегидрогеназа

Лицензия ЛР № 020862 от 30.04.99 г. Сдано в набор 03.10.2011 г. Подписано в печать 12.10.2011 г. Формат 30x42'/g Бумага офсетная. Гарнитура Times New Rom. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ № 172" А" Издательство Курского государственного медицинского университета 305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3.

Актуальность проблемы. Несмотря на успехи в диагностике воспалительных заболеваний органов малого таза и значительно возросшие возможности терапии, их частота не имеет тенденции к заметному снижению. По данным различных авторов, она в среднем составляет 93%. Такой резкий рост связан со многими причинами: подострым началом течения заболевания и, как следствие, поздней обращаемостью, несвоевременной госпитализацией, недостаточной эффективностью проводимой традиционной терапии (Сидорова И.С. и др., 2003; Стрижаков А.Н., 2004; Уткин Е.В., 2004; Стрижаков А.Н., Давыдов А.И., 2005; Конопля A.A., 2010).

В большинстве случаев гинекологической патологии и в первую очередь при первично остром сальпингоофорите основным пусковым механизмом в развитии иммунного воспаления является микробная, вирусная инвазия. При всем разнообразии патогенных агентов развивается дезорганизация плазматических мембран не только клеток-мишеней в пораженном органе (ткани), но и иммунокомпетентных клеток и эритроцитов, причем имеется сравнительно мало общих механизмов нарушений структуры и функции мембран (Рязанцева Н.В., Новицкий В.В., 2004). Это взаимообусловленные, усиливающие друг друга процессы: усиление генерации активных метаболитов кислорода, интенсификация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ), нарушение энергообеспечения клеток. При этом в крови повышается концентрация метаболитов, обладающих иммуносупрессорным эффектом: продукты ПОЛ, аномальные метаболиты липидного обмена, гликозаминогликаны (Новицкий В.В. и др., 2000; Конопля А.И., 2008). Данные метаболиты оказывают прямое действие как на иммуноциты, изменяя их функциональную активность, так и на эритроциты, индуцируя появление у них иммуносупрессорных свойств. Патогенетическая цепочка событий в итоге приводит к развитию вторичного иммунодефицита (Лазарева Г.А., 2007).

При этом, как показали ранее проведенные исследования, использование только иммуномодулирующих препаратов в коррекции иммунных и оксидант-ных нарушений, имеющих место при сальпингоофорите, недостаточно, поэтому эффективным может оказаться применение фармакологического комплекса, включающего препараты, обладающие иммуномодулирующими и мембрано-протективными свойствами (Петров C.B., 2006; Демиденко В.А., 2007, 2008).

В настоящее время не подвергается сомнению роль в поддержании го-меостаза красными клетками крови (Рязанцева Н.В., Новицкий В.В., 2004). При этом мембрана эритроцита играет ключевую роль в детерминации гомеостаза и функциональной способности клетки. От ее физико-химического состояния зависят процесс активного транспорта ионов, особенности функционирования мембранассоциированных ферментов, характер взаимодействия клетки со средой, и в первую очередь, с иммунокомпетентными клетками, играющими важную роль в патогенезе в том числе воспаления в малом тазу (Яловега Ю.А. и др., 2006).

В связи с этим поиск эффективных фармакологических комбинаций, действующих на данные звенья патогенеза иммунологических и оксидантных расстройств при остром сальпингоофорите, является актуальной и своевременной задачей (Тихомиров A.JI. и др., 2003; Сухих Г.Т. и др., 2006; Яглов В.В., 2006).

Цель работы: поиск эффективных фармакологических схем коррекции нарушений иммунного статуса, структурно-функциональных свойств эритроцитов и процессов перекисного окисления липидов у пациенток с острым саль-пингоофоритом.

Задачи исследования.

1. Установить влияние фармакотерапии, включающей сочетание «Глу-токсима» и «Фосфоглива» на иммунный статус и процессы перекисного окисления липидов у больных острым сальпингоофоритом.

2. Сравнить иммуномодулирующие и антиоксидантные эффекты сочетания «Имунофана» и «Фосфоглива форте» в комплексном лечении больных острым сальпингоофоритом.

3. Изучить эффективность сочетанного использования иммуномодулято-ров и мембранопротекторов на структурно-функциональные свойства эритроцитов в условиях острого сальпингоофорита.

4. Провести сравнение клинико-иммунологической эффективности способов фармакокоррекции, включающих иммумодулирующие и мембранопро-тективные препараты у пациенток, страдающих острым сальпингоофоритом.

5. Выявить корреляционные связи между клинической симптоматикой и лабораторными показателями у пациенток с острым сальпингоофоритом при включении в комплексную традиционную фармакотерапию сочетания иммуно-модулирующего и мембранопротективного препаратов.

Научная новизна. Впервые установлены изменения структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов у больных острым сальпингоофоритом. Установлены сравнительные фармакологические эффекты сочетаний препаратов «Имунофан» + «Фосфоглив форте» и «Глутоксим» + «Фосфо-глив» в коррекции оксидантных нарушений, состояния Т- и В-клеточного звена иммунитета, цитокинового статуса, системы комплемента, функции фагоцитов у больных острым сальпингоофоритом. Определена эффективность использования мембранопротекторов и иммуномодуляторов в коррекции структурно-функциональных свойств эритроцитов у пациенток с острым сальпингоофоритом. Применение в комплексной фармакотерапии пациентов с острым сальпингоофоритом «Имунофана» в сочетании с «Фосфогливом форте» и «Глутокси-ма» в сочетании с «Фосфогливом» по сравнению с традиционным лечением оказывает более выраженное влияние на показатели иммунного статуса, состояние перекисного окисления липидов, структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов, клиническую симптоматику заболевания. Максимальными иммунокорригирующим, антиоксидантным и клиническим эффектами у данной категории больных обладает схема фармакотерапии, включающая дополнительно «Глутоксим» в сочетании с «Фосфогливом».

Практическая значимость. Разработаны эффективные способы комплексной фармакотерапии больных острым сальпингоофоритом с применением «Имунофана» в сочетании с «Фосфогливом форте» и «Глутоксима» в сочетании с «Фосфогливом». Клинико-иммунологическая эффективность примененных схем фармакотерапии больных с острым сальпингоофоритом располагается по возрастанию в следующем порядке: традиционная фармакотерапия -» традиционная терапия + «Имунофан» + «Фосфоглив форте» —> традиционная терапия + «Глутоксим» + «Фосфоглив».

Установлены корреляционные взаимосвязи между показателями иммун-нометаболического статуса и структурно-функциональных свойств эритроцитов и клинической симптоматикой, позволяющие судить об эффективности проводимого лечения, динамике симптоматики острого сальпингоофорита и прогнозировании исхода заболевания.

Разработанные методы фармакологической коррекции иммунологических расстройств у больных острым сальпингоофоритом с включением в традиционную фармакотерапию различных форм «Фосфоглива», «Имунофана» и «Глутоксима» внедрены в работу ОГУЗ «Областной перинатальный центр» г. Курска, ГУЗ «Белгородская областная клиническая больница Святителя Иоасафа».

Материалы диссертации вошли в учебные рабочие программы и используются в лекционных курсах и на практических занятиях ряда кафедр Курского, Российского, Санкт-Петербургской, Самарской, Волгоградского государственных медицинских университетов и академий и медицинских факультетов Белгородского и Орловского государственных университетов.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Включение сочетания иммуномодуляторов («Имунофан» и «Глуток-сим») с мембранопротекторами (различные формы «Фосфоглива») в комплексную фармакотерапию больных острым сальпингоофоритом снижает количество иммунно-лабораторных показателей, требующих дополнительной коррекции.

2. Использование в традиционном лечении острого сальпингоофорита сочетаний «Имунофан» + «Фосфоглиф форте» и «Глутоксим» + «Фосфоглив» оказывает выраженное фармакокорригирующее влияние на показатели структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов.

3. Клинически обосновано включение в комплексную фармакотерапию больных острым сальпингоофоритом комбинаций «Имунофан» + «Фосфоглив форте» и «Глутоксим» + «Фосфоглив».

4. Определены лабораторные показатели, позволяющие судить о течении и эффективности лечения острого сальпингоофорита.

Апробация работы. Основные положения диссертации представлены на Объединенном иммунологическом форуме - 2008 (Санкт-Петербург, 2009), VII Съезде аллергологов и иммунологов СНГ (Санкт-Петербург, 2009), Межрегиональной научно-практической конференции «Инновации в анестезиологии и медицине критических состояний» (Курск, 2009), межвузовской научной конференции «Актуальные вопросы фармакологии и фармации» (Курск, 2009), III Всероссийской конференции молодых ученых (Воронеж, 2009), IV Международной научной конференции молодых ученых-медиков (Курск, 2010), Межрегиональном форуме «Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии -междисциплинарные проблемы» (Санкт-Петербург, 2010), XV Международном конгрессе по реабилитации в медицине и иммунореабилитации (Дубай, 2010), совместном заседании кафедр фармакологии, акушерства и гинекологии факультета последипломного образования, биологической химии, микробиологии, вирусологии и иммунологии Курского государственного медицинского университета (2011 г.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 работ, 7 из которых в рекомендуемых изданиях ВАК РФ. В работах содержится полный объем информации, касающейся темы диссертации.

Личный вклад автора. Автором составлен план и дизайн исследования, проведен анализ отечественных и зарубежных источников литературы по теме диссертации, лично проводилось обследование пациенток с острым сальпинго-офоритом, забор крови, анализировались лабораторные показатели адаптивного и врожденного иммунитета. Диссертантом под контролем руководителя выполнялся анализ и обобщение результатов, составление таблиц и графиков, написание диссертации, сопоставление с литературными данными. Доля автора в сборе, анализе и обобщении информации по теме диссертации составила 90%.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 117 страницах машинописного текста, иллюстрирована 29 таблицами и 6 рисунками, состоит из введения, обзора литературы (2 главы), описания методов исследования, изложения собственных результатов (3 главы), заключения, выводов, практических рекомендаций, библиографического указателя, включающего 159 отечественных и 75 иностранных источников.

ВЫВОДЫ

1. У больных острым сальпингоофоритом снижена прочность и повышена эластичность мембраны эритроцитов, снижена их метаболическая активность и общая сорбционная способность эритроцитов, при этом традиционная фармакотерапия не позволяет корригировать представительность большинства белков мембраны и ее сорбционные свойства.

2. Сочетание «Имунофана» и «Фосфоглива форте» дополнительно к традиционной фармакотерапии нормализует у пациенток с острым сальпингоофоритом количество С025 и СБ95-лимфоцитов, концентрацию ИЛ-1(3, Г-КСФ, активность нейтрофилов и представительность в мембране эритроцитов Р-спектрина, белка полосы 4.1, дематина и сорбционную емкость мембраны эритроцитов.

3. Использование комбинации препаратов «Глутоксима» и «Фосфоглива» дополнительно нормализует у пациенток с острым сальпингоофоритом фагоцитарную активность нейтрофилов, уровень СБ4-лимфоцитов, представительность а-спектрина, анкирина, паллидина в мембране красных клеток крови.

4. Применение «Имунофана» и «Фосфоглива форте» у больных острым сальпингоофоритом снижает количество измененных показателей с 68,4% после традиционного лечения до 46,8%, а назначение «Глутоксима» и «Фосфоглива» у данной категории пациенток снижает до 36,2%.

5. По клинико-лабораторной эффективности способы фармакологической иммунореабилитации больных острым сальпингоофоритом располагаются по возрастанию в следующем порядке: традиционная фармакотерапия -» традиционная терапия + «Имунофан» + «Фосфоглив форте» —» традиционная терапия + «Глутоксим» + «Фосфоглив».

6. Наиболее диагностически ценными для оценки эффективности лечения, динамики течения заболевания, прогнозирования его исхода у больных острым сальпингоофоритом являются в крови концентрация ФНОа,

Сз-компонента системы комплемента, малонового диальдегида, уровень фагоцитарного числа нейтрофилов периферической крови и общая сорбционная способность эритроцитов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Использовать в комплексном лечении больных острым сальпингоофо-ритом сочетание «Имунофана» (50 мкг внутримышечно через 24 часа 14 дней) с «Фосфогливом форте» (0,3 фосфатидилхолина внутрь через 8 часов 14 дней).

2. Применять в комплексном лечении больных острым сальпингоофори-том «Глутоксим» (3% по 1,0 внутримышечно через 24 часа 14 дней) и «Фосфоглив» (0,5 фосфатидилхолина внутривенно через 12 часов 14 дней).

3. Для оценки динамики течения острого сальпингоофорита и прогнозирования его исхода в дополнение к традиционным лабораторным методикам исследовать в крови концентрацию ФНОа, Сз-компонента системы комплемента, малонового диальдегида, уровень фагоцитарного числа нейтрофилов периферической крови.

4. Использовать в учебном процессе медицинских вузов знания о способах коррекции нарушений иммунного статуса, состояния перекисного окисления липидов и структурно-функциональных свойств мембраны эритроцитов у больных острым сальпингоофоритом сочетанием иммуномодуляторов («Имунофана» и «Глутоксима»), мембранопротекторов (различных форм «Фосфогли-ва»).