Автореферат и диссертация по медицине (14.00.39) на тему:Клинико-иммунологические аспекты периодической болезни

1 8

О

АКАДШШ ЩДИВДНСКНХ НАУК СССР ИНСТИТУТ ЕЕШАТОЛОПМ

.На правах рукописр ЗАВГОРОДНЯЯ Анаяда Мефодиевна

■ 1ШПВЖО-ИШУНОЛОПШСШЕ АСПЕКТЫ ПЕРИОДИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ

(14.00.39 - "Ревматология")

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Моек я а - 1990

Работа выполнена в Ереванском Ордена Трудового Красного Зцимени государственном медицинском институте.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор П.Я.МУЛЪТИЯРОВ доктор меддцинских наук, профессор И.Е.ШАХБАЗЯН доктор медвдшских наук, профессор А,А.ЯВШ5Н

Ведущее учреждение: Научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической терапии Министерства здравоохранения Республики Грузия.

Защита состоится "_" _1991 г. на заседании

специализированного совета (Д 001.18.01) при Институте Ревматологии АМН ССОР (115522, Москва М-522,' Каширское шоссе, 34а).

С диссертацией молено ознакомиться в библиотеке Института.

Автореферат разослан " ^^ " ¿о// 1990 г.

Ученый секретарь специализированного совета Д 001.18.01 кандидат

медицинских наук А.А.МОТОВШЮВ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Б последние десятилетия значительно возрос интерес к изучению редких, малоизученных и труднокласси-фицируемых заболеваний, что объясняется возросшими возможностями медицины, умением ввделять наиболее характерные симптомокомп-лексы, не укладывающиеся в рамки традиционной классификации 'определенной группы заболеваний. К числу таких заболеваний относится и периодическая болезнь (или семейная средиземноморская лихорадка). Проблема периодической болезни относится к числу наиболее актуальных проблем современной медицины. На актуальность изучения периодической болезни СПБ) в различных аспектах указывает значительное распространение ее по всему миру. По данным ВОЗ статистические показатели приводимых исследований из различных стран свидетельствуют о том, что ПБ на сегодняшний день - проблема мировой значимости, так как регистрируются случаи заболевания почти во всех странах, однако наибольшее распространение ПБ имеет у жителей бассейна Средиземного моря, а у нас-в Ар?лянской ССР, для которой она является краевой патологией (А.А.Айвазян, 1963-1982; Л.А.Оганесян, 1965; Яьтапп ,1964; ЗоЬаг,. 1967 и др.). В нашей стране это заболевание под термином "периодическая болезнь" впервые описано Е.".. Тареевым и В.А.Насоновой (1959), что полохшю начало этапу изучения его в Советском Союзе. Болезнь поражает цветущий возраст к в значительном проценте случаев (20-407» и более) осложняется амиловдо-зом с фатальным исходом. . ,

Несмотря на распространенность этого заболевания в настоящее время многие вопроси его патогенеза, диагностики и лечения недостаточно изучены и носят дискуссионный характер. ■

Актуальными становятся вопросы изучения патогенеза ПБ, диагностики и дафферэкциальной диагностики ее с заболеваниями со сходной клинической картиной, методы терапии.В литературе отражены различные концепции этиопатогенеза ПБ (А.А.Айвазян, 19631987; Г.П.Гращенков и др., 1963; Л.А.Оганесян и др., 1965; О.М. Виноградова, 1973; В.А.Аствацатрян и др., 1974; Э.М.Геворкян, 1973; Р.С.Мамиконян, 1984; Э.Е.Назаретян, 1985; Я&тапп,1964; 3>е#а.е ,1364; МЛ 4 «б ,1966; ЗоЬаь ,1967; //я'шои ,1970; ^Ь¿и!пЦ-Уь ¿Ь О-в- ,1904 и др.), дискутируется вопрос и о роли иммунных нарушений в патогенезе. ПБ, но почти всё работы

посвящены изучению лишь гуморальных нарушений при ней. Однако периодическая болезнь, с ее неизвестной и загадочной этиологией, сложным а многогранным патогенезом, затрагивает многие звенья иммунологической цепи и в настоящее время назрела необходимость провести широкий спектр иммунологических исследований, включаю. 'чий комплекс исследований клеточного иммунитета и расширение исследований гуморального иммунитета. Актуальными становятся вопросы выявления роли Т- и В-скстем иммунитета в развитии патогенеза заболевания, изучение корреляционных связей между клеточными и гуморальными механизмами, корреляционный анализ их с клиническими вариантами и форлами заболевания и с различными кли-• нико^лабораторными исследованиями.

Установление иммунного статуса при ПБ даст возможность выявления характерных для нее иммунных сдвигов, что поможет в рас- • крытяи многих сторон иммунопатоганеза этого заболевания, его ракней диагностике, прогнозировании наступающего приступа и осложнений, дифференциальной диагностике. Эти исследования помогут найти пути иммунокоррекции при периодической болезни.

Цель работы. Целью настоящего исследования явилось выявление основных механизмов иммунопатогенеэа ГШ, оценка иммунного статуса организма больных периодической болезнью в динамике развития заболевания с учетом стадий, вариантов и давности заболе-. вания, пола и возраста больных. На основании полученных данных впервые будет представлен комплекс наиболее информативных кли-нико-иммунологических исследований для оценки эффективности проводимого лечения и предложении новых методов иммунорегулирую-щей терапии, а также в помощь диагностике ПБ и ее осложнений, дифференциальной диагностике ее с заболеваниями со сходной клинической картиной. ¡1 . Основные задачи исследования:

' / I. Исследование функциональной и количественной характерно-. I тик общей популяции Т-лимфоцитов у больных ПБ в динамике разви-/ тия заболевания (приступ, меадриступяый период, осложнения ами-/' лоадозом), на фоне лечения колхицином и колхамином, а также о учетом варианта и давности заболевания, пола и возраста больных,

2. Исследование функциональной и количественной характеристик субпопуляций Т-лимфоцитов в динамике.

3. Исследование показателей ингибиции миграции лейкоцитов

и наличия повышенной чувствительности лимфоцитов больных перио-

дичеокой болезнью под влиянием широкого спектра антигенов различной природа в динамике.

4. Выявление тканей-мишеней у (Зольных периодической болезнью.

5. Проведение сравнительной характеристики маркера лизосо-мальных ферментов (кислая ф ос фа таза) в лимфоцитах и в сыворотке • крови больных ПБ в динамике.

6. Исследование количественной и функциональной характеристик популяции В-лимфоцитов в динамике. Исследование 0-клзток. Изучение соотношений Т-, В-, О-лимфоцитов и выявление индексов.

7. Корреляционный анализ показателей клеточного и гуморального иммунитета и составление ивдупогрвмш при периодической болезни. Корреляционный анализ показателей меточного иммунитета

с ферментативными, биохимическими, эндокринными и энцефалографи- . ческими показателями.

8. Проведение иммунологического контроля за эффективностью различных методов лечения периодической болезни. Исследование чувствительности Т-популяции лимфоцитов и их субпопуляций к Т-активину т с определением индекса сдвига.

9. Выделение наиболее информативных параметров для применения их в диагностике и дифференциальной диагностике периодической болезни.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

, I. Выявление иммунологических сдвигов, характерных для ПБ, с установлением иммунного статуса больных, их роль в генезе заболевания, развитии пароксизмов и осложнений.

2. Иммунологический контроль за эффективностью проводимого лечения ПБ (колхицин, колхамин и другие методы лечения).

3. Исследование чувствительности лимфоцитов больных ПБ к действию Т-актив'ина ¡п V Ню и предложение лечения больных пе-риодагческой болезнью Т-активином под контролем функциональных и количественных изменений'Т-клеток и их субпопуляций.

4. Выявление клинических проявлений аллергиэацли организма при периодической болезни с помощью использования в реакциях

/ (1-у о' широкого спектра антигенов.

.5. Выявление корреляционной связи между иммунологическими показателями и ферментативными сдвигами, глюкокортикоидной функцией.коры надпочечников, э^щефалографическши показателями и

некоторыми биохимическими изменениями.

Научная новизна исследования. Впервые раскрыты основные механизмы иммунопатогенеза ПБ, установлен иммунный статус с характерным для нее угнетением клеточного иммунитета и изменениями субпопуляций, выявлена повышенная чувствительность к ряду антигенов. Раскрыт механизм действия колхицина и принципов иммуно-регуляторной терапии при ПБ. Предложен комплекс наиболее информативных иммуналогических исследований в помощь диагностике ПБ и ее осложнений, дифференциальной диагностике ее с заболеваниями со сходной клинической картиной, оценке эффективности прово: дямого лечения. Впервые при периодической болезни представлен корреляционный анализ иммунологических исследований о биохимическими, ферментативными, эндокринными и диэнцефалыпши показателями.

• Практическая ценность работы и реализация результатов исследования. Результаты исследования иммунопатогенеза ПБ обосно-■ вывают новое направление кммунорегулирующей терапии и дают оценку ее эффективности. Вццелены информативные иммунологические критерии в помощь диагностике ПБ и ее дифференциальной диагностике с заболеваниями со сходной клинической картиной, что легло в основу методических рекомендаций, используемых в работе,представлены семь рационализаторских предложений. Предложена модификация метода торможения лейкоцитов "Использование .полихлорвиниловых трубок при постановке реакции торможения 'миграции лейкоцитов" (Удостоверение на рационализаторское предложение 22, выданное ЕрШ от 30 апреля 1978 г.). Разработаны и внедрены метода дифференциальной диагностики периодической болезни и получены удостоверения на рационализаторское предложение "Тест спонтанного розеткообрэзования, как один из дифференциально-диагностических показателей периодической болезни и коллагенозов" за . 23, . выданный Е£Ш в 1979 г. и "Способ дифференциальной диагностики .периодической болезни" за Й 153 от 2 апреля 1983 г. с использо-' :ванием теста кислой фосфагазы в лимфоцита/, что используется ,|'В терапевтических клиниках г.Ереы-.а,

Результаты проведенных исследований 'юпольэу^тся в учебном : процессе на кафедрах внутренних болезней Ереванского медицинско-: го института и представлены в виде методических рекомендаций для студентов.

Структура и объем диссертация. Рукопись диссертации представлена на 155 страницах машинописи, состоит из введения, литературного обзора (глава I), описания материала я использованиях: методов исследования (глава 2), изложения полученных результатов (глава 3), обсуждения (глава 4), основных выводов, списка литературы и приложений. Работа содержит 55 таблиц, 5 рисунков, I схему. Библиография включает 337 наименований,'из них 151 на русском языке и 186 на иностранном. '

Публикации. Материалы диссертации и ее основные положения опубликованы в 46 работах. По теме диссертации получено 7 удостоверений на рационализаторские предложения.

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на I Всесоюзном съезде нефрологов (г.Минск, 1974), на П Всесоюзном съезде врачей-протозоологов (г.Москва, 1976), на I интернациональном конгрессе протозоологов (Нью-Йорк) 1977), на П Всесоюзном съезде врачей-лаборантов (г.Ворошиловград, .1979), на клинической конференции в институте иммунологии (г.Москва,1986), на I съезде терапевтов Армении (г.Ереван, 1974), на ежегодных сессиях Epfffl, на заседаниях терапевтического о'бщеотва Армении, на клинических конференциях городских клинических больниц Jé I и J¿ 8 совместно с кафедрой внутренних болезней J¿ I.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ '

Нами проведено клинико-иммунологическое обследование 1279 больных периодической болезнью, жителей Армянской ССР, в основном армян, находящихся на стационарном обследовании и лечении . в 1-й городской клинической больнице г.Еревана (кафедра внутренних болезней й I ЕрМИ) в период с 1972 по 1988 годы. Из обследованных больных периодической болезнью 956 человек страдало не-осложненной формой заболевания, 302 -.ПБ, осложненной амилоидо-зом, 12 - ПБ, осложненной системной красной волчанкой (СКВ), 9 - ПБ, осложненной ревматоидным артритом (РА), Обследовались больные в возрасте от 15 до 60 лет и вше и были распределены на три возрастные группы: I - 15-20 лет, П - 21-50, Ш - 40-60 лет и вше. Мужчины составили 756 человек, женщины - 523. Абдоминальным вариантом страдало 678 больных, торакальным - 144, смешанным - 457. Давность заболевания колебалась.от 2 до 30 лет и более, иногда больные отмечали начало заболевания в раннем

детском возрасте. Помимо больных Ш нами обследовались контрольные группы: здоровые - 94 человека, больные СКВ - 96, РА - 101, ревматизмом - 44, хроническим рецидивирующим серозным холециститом - 170, хроническим сегментным колитом - 66 человек , что составило вместе с больными ПБ 1850 человек. На материале (периферическая кровь), полученном.нами при обследовании вышеуказанных групп больных проведено более 8000 иммунологических исследований.

Кровь бралась из локтевой вены в пробирку, смоченную гепарином (10 ед. на 10 мл крови) или I мл Ъ% раствора Версена (ЭДТА).

Лимфоциты из гепаринизированной крови получали путем центрифугирования .в одноступенчатом градиенте фиколл-верографина ( fitoll 400, Р^аттскмО- 7'fld thibniuk), Ulm'tden ; VnocjzCLfin "Спофа" ЧССР или 76$).

• Абсолютное количество лимфоцитов подсчитывалось обычным способом. В реакциях ¡и /¡Ь<?" нами использованы антигены и ми-тогены. Аллерген гемолитического стрептококка и аллерген гемолитического стафилококка получены из Казанского научно-исследовательского института эпадедшологди и микробиологии.

В каждый флакон добавлялось по 0,1 ад.соответствующего аллергена.

Антигены PioUui vui^a-'di и t^htzulua tûù получены из соответствующих культур с дальнейшим кипячением, центрифугированием и хранением надосадочной жидкости в рефрижираторе.

Паразитарные антигены (лямблиозный, амебный и токоплазмен-ный) получены из культур соответствующих простейших. После многократного замораживания и размораживания паразитарные антигены кипятились, центрифугировались и хранились в рефрижераторе и лишь после этого использовались душ постановки реакции по 0,1 мл соответствующего аитигеиа на флакон.

Лимфоцитарный мктоген (ЛМ)-получен из Белорусского ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательского института -эпидемиологии и микробиологии, фитогеммагглютинин-ФГА (2) i/o о ) и конканавалин А-Кон ( 2K-fco).

Для определения фактора торможения миграции лейкоцитов" нами была использована реакция Ш по методу ßloom , Ctaofe. (1974) со стеклянными капиллярными трубочками, а затем в нашей модификации (А.М.Завгородняя, 1978). Сущность модификации заключалась в том, что, сохраняя принцип ранее используемого нами метода,

мы предлагаем заменить ломкие стеклянные капилляры полихлорвшя-ловшли трубками того же размера. Гибкая трубка заполняется.исследуемой плазмой с добавлением антигена в предшествующей одночасовой инкубация при 37° (или без добавления антигена в контроле), укрепляется в спиральной центрифуге типа ИС-I. Одновременно могут быть поставлены 6-7 реакций. В результате центрифугирования четко разделяются слои эритроцитов и лейкоцитов, необходимый отрезок трубки отсекается острым лезвием и укрепляется в камере из органического стекла, предложенной А.Е.Карапе-тяном и М.Г.Алексанян (1971). После добавления питательной среды и антигена камера ставится на инкубацию при 37° на сутки, а затем под микроскопом с помощью микрометра определяется площадь миграции и висчитывается индекс миграции (Ш) '

ИЛ = пдощэдь миграция_в опыте

площадь миграции в контроле

При пострновке реакции бласттрансформации (РБТ) лимфоциты в количестве 1-2.10 клеток культивировали с различными антигенами (стрептококк, стафилококк |..сoü , Р- ifutyaz;*,, амебный, лямблиозный, токсоплазменный, почечный), а также с митогенами (ФГА, Ж, КонА).

В основу положены методы, описанные Jiacb , HitSchotti (1953) и Е.Ф.Чернушенко о соавт. (1978) в нашей модификации. Процент бласт-клеток определялся морфологически: подсчитывалось 100 клеток с учетом бласт-клеток, лимфоцитов и макрофагов.

Для исследования Т-супрессорной субпопулкции лимфоцитов в РБТ высчитывался индекс супрессии (ИС). Активность супрессоров, индуцированных КонА,оценивали по их способности.подавлять бласттрансформации аутологпчных лимфоцитов на Ш с дальнейшей обработкой митомицином. С . В качестве контроля, лимфоциты культивировали в тех же условиях, но без добавления КонА. Учет реакции проводили морфологически, и ИС выражали в процентах по формуле:

ИС = % лшфобластоз в контроле - % лимфобластов в опыте х jqq % лшфобластов в контроле

I

Супрессию бластогенеза лимфоцитов оценивали по индексу неточной супрессорной активности (ИКСА) (Н.М.Бережная, 1983) и определяли по формуле:

% лимфобластсв в опыте

ИКСА = ------:---—--х 100 ■

^.лимфобластов на Л<1 + % лимфобластов 49 КонА

Содержание Т-клеток оценивали в реакции спонтанного розетко-ойразования (E-РОК), основанной на-способности Т-дшфщитвв, несущих рецепторы к эритроцитам барана, образовывать фигуры, называемые розетками. Реакция ставилась по ^oncfo-í (1972) и Л «e/u (1973) в модификации Р,В,Петрова с соавт. (1976).

Подсчет розеткообразущих лимфоцитов нами проводился в камере Горяева, а также в мазках из взвеси клеток. Просушенные мазки фиксировались в парах 40$ формалина в течение 20 минут, окрашивались по Романовскому-Гимзе и подсчет клеток проводился под иммерсией.

Реакция E-РОК зависит от различных режимов ее постановки. Инкубация смеси лимфоцитов с эритроцитами барана при. 29° в течение I часа приводит к образованию Т-клетками "активных" или "ранних" розеткообразущих клеток - АЕ-РОК (А.А.Ярилин, 1981; Wy В ta У) &( ,1973,1977). Подсчет их производился вышеописанны!,i способом.

г*

Для выявления субпопуляций Т-клеток 2.10 лимфоцитов инкубировали с теофиллином (5-60 мг/мл), приготовленным -t/tetnpoic на среде 199 при подогревании, в течение I часа при 37°. Розет-кообразувдие клетки, выявляемые после инкубации с теофиллином, являются теофилшшустойчивыми Т-клетками, эквивалентными Т-хел-перзм, а разность между общим количеством E-РОК и числом теофия-линустойчивых Т-клеток является теофшшинчувствительными Т-клетками, эквивалентными Т-супрессорам (А.А.Ярилин, 1981; d¿ltn»J:!- ,

:¡ut*ia£ ,im¡-Ihote , i9w я др.).

В-лимфоциты идентифицировали с помощью выявления на их поверхности рецепторов для СЗ компонента комплёмента методом кощ-лементарного розеткообразования (ЕАС-РОК) с использованием ыето-I дов, предложенных Bi&nto &4 9Í (1У70) и Д.К.Новиковым и tí.Il.Ho-, виковой (1979).

Численность 0-клеток определялась косвенным путем, вычитывая из 100$ сумму процентного содержания E-РОК и ЕАС-РОК (А.А. Яриллин, 1931; fioUnd ,1973; & loé е4 Q t ,1978).

Цитотоксический тест - это действие ]У) Wízo лимфоцитов, полученных пз периферической крови больного человека или здоро-

вого донора, на рост человеческих эмбриональных тканей. Исполь-. зован принцип метода, предложенного З^аИкну & ^ (1975) и Д.С.Новиковым (1979) в нашей модификации. Нами в качестве тканей - мишеней были использованы ткани почки, печени, надпочечников, легкого, мозга, тимуса, селезенки, гипоталамуса, миокарда 8-10 недельного человеческого эмбриона. Культивирование размельчен-, ных тканей производилось в вышеуказанных камерах из органического стекла. Среда для.культивирования состояла из 85$ среды ' 199,10$ лошадиной сыворотки и 5$ эмбрионального экстрата. Рост клеток под микроскопом (15x20) отмечался ежедневно и на третий день, при наличии роста клеток вокруг, эксплантата, в камеру добавлялись 'лимфоциты, полученные вышеописанным способом, в количестве 2-3.10 клеток.

Енедневно учитывалось наличие или угнетение роста клеток с расчетом их площади микрометром.

Выявлялась активность кислой фоефатазы в лейкоцитах по Е.Ф. Чернушенко с соавт. (1978). Нами отдельно проводился подсчет ь . лимфоцитах и нейтрофилах.

Полученный материал подвергнут математической обработке, В работе использованы следующие статистические приемы: вычисление средней (М), квадратического отклонения ), квадратической ошибки (С? ), коэффициента вариаций, сравнение выбора величин, ' распределяющихся с использованием критерия Стьюдента, корреляционный анализ, зависимость между параметрами изучалась на основании линейных регрессионных моделей (Н.Бейли, 1962; П.Ф.Рокиц-кий, 1973).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУВДЕНИЕ '

В работе мы придерживаемся классификация ПБ, предложенной А.А.Айвазяном (1962-1987), по которой выделяют три варианта заболевания: абдоминальный, когда приступ возникает вследствие диффузного перитонита (в- 58,8$ случаев), торакальный - приступ возникает вследствие плеврита (10$) и смешанный (абдоминальна-. торакальный - 24,6$ ц торако-абдоминальный - 10,2$). В 40$ случаев ПБ может сопровождаться артритами с поражением крупных суставов, протекающими доброкачественно (А.А.Айвазян, 1982; Л.С. Оганесян, 1987). Артропатия настолько характерна для ПБ, что в экспериментальной классификации артритов и ревматизма Американской ревматологической ассоциации ПБ, под названием "Средиземно-

морская лихорадка", включена в раздел "Заболевания, с которыми часто ассоциируются артриты" (Б.Н.Анохин, 1983; 2кспах* ,19831.

Проведен анализ по современному состоянию работ, посвященных иммунологическим исследованиям при периодической болезни. Несмотря на значительное количество сведений, относящихся в основном к изучению гуморального иммунитета, изучение патогенеза а иммунного статуса в динамике ее развития остаются почти не ■ затронутыми, хотя и являются одной из ведущих проблем современ- -ной медицины при изучении ГШ.

В настоящее время обследование иммунной системы в клинике приобретает важное, а подчас и первостепенное значение, так как многие патологические состояния являются следствием различных расстройств иммунитета.

В основу настоящей работы положено комплексное клинико-иммунологическое обследование больных ПБ с целью раскрытия механизмов ее иммунопатогенеза и установления иммунного статуса при этом заболевании, а также характера его изменений в динамике в зависимости от стадии заболевания и после проведения соответствующей терапии.

В результате проведенных исследований выработаны иммунологические критерии в помощь'клинической диагностике ПБ, прогнозированию наступающего приступа, раннему распознаванию амилоидоза, осложняющего заболевание, дифференциальной диагностики ПБ с заболеваниями со сходной клинической картиной и объективных показателей, позволяющих судить об эффективности проведенного лечения.

Нами дана оценка различных звеньев иммунной системы при ПБ, проведен широкий спектр иммунологических исследований, изучены основные, не затронутые до этого вопросы клеточного иммунитета, его основных параметров и их корреляции с показателями гуморального иммунитета и с другими клинико-лабораторными исследованиями. Это открыло широкие перспективы для изучения патогенеза ПБ и внедрения в клиническую практику новых методов оценки состоя- '-ния иммунной системы при периодической болезни и ее осложнениях, а также дана возможность наметить более целенаправленный-подход к выбору методов лечения.

Как известно, ведущую роль в регуляции иммунных процессов играют Т-лимфоциты. Функциональная активность Т-лимфоцитов при ПБ '-чми исследовалась с учетом возраста, пола и .вариантов забо-

левашш.

Как показано наш (табл.1), угнетение функциональной активности Т-популяции лимфоцитов увеличивается с возрастом, тогда как пол и варианты заболевания почти не отражаются на этих пока-. зателях. Резкое угнетение наблюдается при периодической болезни, ' осложненной амилоидозом, особенно во П-Ш стадиях.

Многообразие выполняемых задач Т-димфоцитами, позволяет выделить имыунорегуляторные субпопуляции направленного действия: Т-супрессоры я Т-хелперы. Во многих случаях характеристика общей популяции Т- и В-димфоцитов не всегда отражает степень иммунопатологических нарушений в организме (Р.В.Петров с соавт., 1978; Е.В.Бененсон с соавт., 1982; J^ioxtÜci чЛ. at ,1977; '/au-Сi «¿,1978; ÜncchUct ei at ,1980). Полноценное определение клеточно-опосредованного иммунитета возможно лишь при определении субпопуляций лимфоцитов (Р.В.Петров с соавт., 1980). Т-супрессоры рассматриваются как главные регуляторы иммунного ответа (Г.В.Порядкина с соавт., 1980; И.1.1.Бережная с соавт., 1982; Б.Д.Брондз, 1987; Д/.'¿¿et, ,1975; <?еtSon r 1976; AWo , lietaKQ ,1979 и др.). Они являются основными контролирующими звеньями иммунологического ответа на антиген, чем и объясняется необходимость их изучения при различных патологических состояниях, характеризующихся дисфункцией иммунитета (аутоиммунные, аллергические и иммунодефицитныэ заболевания)-. Четкам показателем иммунодефицита является отклонение Т-субнспуляцш: Т-супрес-соров и Т-хелперов (Р.В.Петров с соавт., 1980; Е.В.Бененсон с соавт., 1982; Hotowitl e.f bt ,1977; 6uf>-tQ efcti ,1979). .

Нами при ПБ отмечено иммунодефицитное состояние. При изучении общих популяций Т- я В-лимфоцятов и их субпопуляции (табл.2 и 4) установлено статистически достоверное снижение относительного и абсолютного количества Т-лимфоцитов и их функциональной активности, повышение количества Вчкшфоцятов с повышением ■

и и снижением и S , снижение количества и функции Т-супрессоров, относительное повышение количества Т-хелперов. Так, при сравнении с контрольной группой здоровых лиц отмечается довольно'резкое ;снижение теофиллинчувствительных Тчшлфоцитов (супрессоров) и-относительное повышение теофдялинустойчивых Т-лимфоцитов (хелперов) и поэтому их соотношения выражены нерезко, что характерно для ПБ.

Показатели PET с Ж у больных ПБ (в %)

Группа обследованных Контроль Неосложненная ПБ (варианты) ПБ, осложненная амилоидозом (стадии)

смешанный абдоминальный торакальный I П-Ш

м 46,86+0,55 46,62+0,35 46,75+0,52 42,07+0,55 38,3+0,56

I . ж • 56,08+1,26 (12) (44) 44,5±1,52 (42) (69) 46,2+0,58 (20) (24) 47,2+0,54 (5) (13) 42,4+0,87 Тю) (13) 36,0+1,06 (4)

м 43,78+0,26 44,86+0,35 44,3+0,55 42,0+0,58 37,65+0,43

П .Е 54,95+1,16 (21) (76) (98) (20) (26) (32)

43,97+0,5 (46) 44,55^0,29 (69) . 44,64+0,7 (17) 4I,82j;0,87 (17) 37,8+1,37 (16)

М- 43,76+0,4 43,26+0,37 43,33±0,8 40,75+0,87 38,58+1,5

. (31) - (38) (3) (16) • (12)

ш- ж 54,1±1,56 (10) ' 42,64+0,68 (17) 43,45+0,43 (31) 40,55+0,36 (П) 37,87+1,39 (В)

Достоверность отличия по сравнению с контролем (во всех случаях Р 0,001) и с ПБ, осложненной .амилоидозом - I стадия (во всех случаях Р 0,005-0,001), П стадия (во всех случаях Р 0,001), между I и-Ш группами, (во всех случаях . Р 0,001).

Таким образом, дал ПБ характерно снижение общей популяции Т-лимфоцитов периферической крови за счет снижения Т-супрессо-ров. С нашими данными согласуются результаты исследований ■^Ш Ж аХ (198Г) и &{ в I (1984).

При ПБ нарушена кооперация клеток в иммунном ответе. Нами ' 1 отмечено, что угнетение функции Т-супрессорной субпопуляции и активация Т-хелперной индуцирует синтез иммуноглобулинов. Найдена положительная корреляционная связь показателей супрессорной субпопуляции и иммуноглобулинов А и Е, что характерно дош периодической болезни. • .

Анализ вышеизложенного подтверздает наличие иммунодефицит-ного состояния при ПБ, на что указывает не только снижение Т-супрессорной субпопуляции, но и снижение показателей иммуноглобули-. нов А и Е.

Следует отметить, что при беременности и в период лактации у больных ПБ приступы прекращаются примерно в 90% случаев (А.А. Айвазян, 1982; К.Б.Акунц, 1988). С иммунологических позиций это монет быть объяснено тем, что в период беременности (как и в период ремиссии) у болышх ПБ относительно повышается содержание Т-супрессоров.

Снижение уровня Т-супрессорной активности в предпристулный период предшествует смепе клинического статуса и является важным звеном в патологической цепи заболевания,-Следует ташке отметить, что активность Т-супрессоров отмечена не только на разит стадиях заболевания, но и в зависимости от характера его течения. Так, при ПБ с частыми приступами показатели Т-клеток . ■ снижены несколько больше, чем при ПБ с редкими приступами, а у больных с осложнением ПБ амилоидозом отмечаются стабильно низкие показатели функции супрессоров. Выявленное снижение супрессорной активности при ПБ может привести к развитию аутоиммунных процессов ( ,1975; Р?ои*;ег <f <*£ , 1978). На аутоиммунные нарушения указывает и дисбаланс Т-супрессоров и Т-хелперов (Л.В. Ковальчук с соавт., Г981). В наших исследованиях, как указано выше, отмечается относительное повышение Т-хелперов на фоне значительного снижения Т-супрессоров. Для определения реального соотношения Т-супрессоров и Т-хелперов необходимо учитывать общее количество лейкоцитов и лимфоцитов периферической крови, определение истинной супрессорной активности. Следовательно,при лимфопении, при тех же показателях ИС снижение функциональной

активности Т-супрессоров выражено значительно больше. Такое соотношение иммунорегуляторных-клеток отражает закономерность динамики периодической болезни, учитывая приступы, внепристулныэ ■периоды и осложнение периодической болезни амилоидозом. Дисбаланс, затрагивающий Клетки, выполняющие важные иммунорегулятор-■ ные функции в ходе шлщтого ответа, делает необходимым поиск чредств, способных обеспечивать коррекцию иммунологических нарушений. Под влиянием колхицинотерапии общая популяция Т-лимфо- . цитов практичесш не изменяется, тогда как имеется значительное, хотя статистически и недостоверное (Р> 0,1) повышение активности Т-суирессорной субпопуляции, повышение индекса супрессии и снижение супрессии бластогенеза (табл.2). Наши исследования показывают, что лечебное действие колхицина связано с пролиферацией определенных субпопуляций Т-лимфоцитов (супрессорной), на что указывают также УЦМ (1982) и ^ккипЦгЧ- ^ (1984), и непосредственно моделирует иммунорегуляторные клетки, повышая соотношения Т-супрессоров и Т-хелперов. Б работе также показано, что активация Т~супрессорного звена иммунитета под влиянием колхицина, связана с ферментативными сдвигами, приводящими к уменьшению стационарной концентрации аденоаина, а татее к снижению глюкокортикоидной функции коры надпочечников и к значительному восстановлению функционального состояния гипоталамических центров. Улучшение и частичное восстановление вышеуказанных показателей четко коррелирует с клинической картиной: с прекращением или урежением приступов.

Наряду со снижением функциональной активности Т-популяции и ее супрессорной субпопуляции Hai.ni отмечено и количественное их снижение, что особенно наглядно при оценке лейко-Т-клеточного индекса (табл.3), который при неосложненной ПБ увеличивается в 1,92 раза, а при осложнении ПБ - в 2,3 раза. Под влиянием колхи-; цина данные ЛТИ значительно уменьшаются, хотя и не достигают / нормы.

Динамика ЛТИ связана с клиническими проявлениями ПБ, более •. четко отражая тяжесть ее течения, и показывает истинное измене-' ние Т-клеток. Эти исследования проведены нами впервые при ПБ. Наш в реакциях Е-РОК применен теофиллин и определен уровень теофиллинчувствительных (Т-ч) лимфоцитов, обогащенные клетками с супрессорной активностью, и теофиллинустойчивыми '.. (Т-у),обо- \

■ Показатели Т-супрессорной активности лимфоцитов у больных ПБ до. и после лечения колхицином (в %)

Группа обследовании х

% супрессии % акти- ИКСА вации

РБТ с Ж

Контрольная группа

До лечения

ПБ неосложненная

Р1 . ПБ,осложненная

Р1

После лечения:

ПБ, неосложнен-ная

Р2

ПБ,осложненная амилоидозом .

43,10+1,83

22,98+1,77

с 0,001

19,54±1,52 0,001

25,24±1,76 ¿0,1

23,29+1,34 2. 0,1

38,59±1,3

-11,43. 52,29+2,8

?1 ¿0,001 ■

-12,5 60,92^2,94 Р-^ 0,001

49,38^2,3 Р2 ? 0,1

54,39+3,1 Р2 ¿0,01

58,8±2,7 43,4±1,41

38,94±1,2

41,30^1,26 38,00^1,34

Р^'- с донорами; Р2 - до и после лечения.

гащенные метками с хелперной активностью (табл.4). Оценка чув-^ ствительности этих клеток к теофиллину имеет реальное клиническое значение (Г.С.Неприна, А.А.Ярилин с соавт., 1980; Е.С.Пантелеева с соавт., 1988). В настоящее время существует представление, что Тч РОК принадлежит к клеткам супрессорно-киллерного ряда (А.А.Ярилин .,1985),

В работах С.С.Гамбарова с соавт. (1985) также указывается на снижение функциональной активности Т-лимфоцитов при обследовании 47 детей, страдающих ПБ. Авторы считают, что у детей имеет место дефицит не количества Т-супрессоров, а их функциональной активности, что может быть обусловлено либо дефектом Т-супрессоров, либо повышением антагонистической системы - контрсу-прессоров. '

Таблица 3

Изменение лейко-Т-клеточного индекса у больных периодической болезнью до и после лечения

- Группы обследованных .

Контроль ПБ неосложненная ПБ, осложненная

амилоидозом

до лечения колхи-колха-цин мин до лечения колхицин ■колхамин

Лейкоциты в 10 /л 5,67+0,43 6,56+ 1,10" 5,73+ 6,07+ 0,56 0,35 8,23+ 1,02 6,22+ 0,41" 6,41± 0,31

Е - РОК . в Ю9/л 1,25+0,08 0,75+ 0,09 0,73± 0,70± 0,08 0,07 0,78+ 0,09 . С,72± 0,08 0,76+ 0,07

Л' т и 4,55 8,70 7,81 8,19 10,55 .8,63 • 8,43

Нами проведена иммунологическая дифференциальная диагностика между ПБ и СКВ при динамическом наблюдении за больными вне ' лечения. Нами выявлено, что при периодической болезни количественные показатели Т-клеток снижаются во время приступов, несколько восстанавливаясь во внепристуяном периоде и резко снижаясь при амилоидозе, тогда как даже при неусложненной СКВ они остаются на низком уровне (табл.4). При дифференциальной даагностл- " ке ПБ, осложненной амилоидозом и СКВ (при близких средних значениях) нами использован таете регрессионный анализ показателей (рис.1). Наблюдается зависимость мезду Т- и Т-ч клетками, при этом при ПБ тлеется тенденция при увеличении Т-ч к уменьшению Т—, а при СКВ, наоборот, при увеличении Т-ч Т-клетки также уве-■личиваются. Таким образом, уравнение линейной регрессии дгезду / Т- и Т-ч клетками при ПБ, осложненной амилоидозом ( ё =-0,8) и I СКВ ( $ = 1,2) имеют наглоны противоположного знака. При диффе- , [ ренциальной диагностике ПБ с хроническим рецидивирующим сероз-; ным холециститом, хроническим серозным колитом, неспецифищеским ; ; язвенным колитом и другими заболеваниями отмечается значительное снижение функциональных и количественных показателей Т-лимфоци-тов при ПБ по.сравнению с вышеуказанными заболеваниями.

Нами также впервые исследован ¡н к^го отечественный пре- .

- Таблица 4

Показатели спонтанного Е-РОК и Е-РОК с теофиллином.

Группы обследуемых Количество больных . Е-РОК Р Т-устой-чивые Р Т-чувстви-тельные Р Чч/Ту

ПБ неосложненная 91 " • :46,75^4,05 0,89^0,085 ¿0,001 33,35*1,45 0,71*0,06 ¿0,01 10,6*0,23 0,21*0,02 £ 0,001 0,31

ПБ, осложненная амилаидо-зом 24 39,8*1,32 0,74*0,08 ¿.0,001 31,64*2,06 0,49*0,05 ¿ 0,01 8,57*0,47 0,14*0,02 ¿ 0,001 0,27

СКВ 10 40,0*1,06 ¿ 0,001 31,6^0,75 ¿ 0,01 8,4*0,42 ¿ 0,001 0,26 •

Хронический . холецистит 16 48,06*2,23 ¿0,005 35,87*1,82 ¿.0,05 13,31*0,98 ¿ 0,1 0,37

Контроль 12 57,55*3,13 1,25*0,08 41,54*1,79 . 0,87*0,08. 15,75*0,36 0,374:0,025 0,38

ПРИМЕЧАНИЕ: Р - вероятность отличия от уровня в контроле.

В числителе процентное содержание, в знаменателе' - в 10^/л.

т

50 40 30 го т

5 1

2 • Г~ _^— _ /---о-—- —О----- "

го о

5 10 15 Т-Ч

Рис..I.' Линейная регрессионная зависимость между Т и Т-ч; I - норма, 2 - ПБ неосложненная, 3 - ПБ осложненная амилоидозом, 4 - СКВ, 5 - хроничес-. кий серозный холецистит. •

Таблица 5

Действие" Т-активина >п у'¡{го на функциональную активность Т-лимфоцитов

Группы исследо- РБТ с ЛМ ■ РБТ с ДМ+Т- . Р Индекс ИС ИС+Т-акти- Р Индекс

ванных • активин сдвига вин сдвига -

Контроль 58,8*2,7 68,42*3,97 ¿0,05 1,16 43,10*1,85 50,11*1,76 ¿0,1 1,18

ПБ. неосложяен- -

ная . 43,42*1,41 69,3±2,89 1 0,001 1,59 22,98*1,77 43,26*2,15 ¿ 0,001 1,88 ■

ПБ, неосложнен- 38,94*1,2 60,18*1,88 ¿. 0,001 1,54 19,54*1,52 33,44*1,83 ¿-0,001 1,71

ная амилоидозом

Действие Т-активина на количество Т-лимфоцитов

Группа исследованных Е-РОК Е-РОК с Т-акти- Индекс сдвига : вином

контроль 64,5+3,13 79,72+4,81 1,23

ПБ неосложненная 46,75+4,05 88,87+ 6,63 1,91

ПБ, осложненная 37,8+1,32 64,32 + 3,68 1,70

амилоидозом

аарат Т-активин, принадлежащий к иммунологически активным поля-Лептддам тимуса. Исследования ряда авторов (С.С.Кирэон, А.Н.Че-редеев с доавт., 1982; Д.П.Лшдер, В.Я.Арион с соавт., 1985 и др.) позволили заключить, что Т-активин является шмуномодуля-тором я под его влиянием увеличивается содержание Т-супрессор- ' ных клеток и снижение Т-хелперов (Ю.М.Лопухин, Р.В.Петров с соавт., 1986).

Нами впервые у больных ПБ не осложненной и осложненной ами-лоидозом выявлен индекс сдвига под влиянием Т-активина ¡п ¿Ню ■ (табл.5 и 6) и отмечено его значительное увеличение в реакциях РБТ с ЛМ и Е-РОК. Исследования показали положительное действие Т-активина не только на общую, но и на сулрессорную популяции Т-клеток, его стимулирующее действие регуляторной активности Т-лпмфоцитов, что указывает на целесообразность применения этого препарата в клинике при лечения ПБ. Исходя из наших исследований, нами предложено лечение Т-активином больных ПБ. Проведенные предварительные исследования при лечении 25 больных периодачес- ■ кой болезнью дали положительный результат.

Еще одним доказательством угнетения Т-системн иммунитета при периодической болезни, особенно осложненной амилоидозом, является значительное снижение одной из субпопуляций Т-клеток -активных розеток, представляющих собой фушционально активные клетки крови.

В качестве дополнительного теста при оценке- иммунного ста-туеа нами также отмечено снижение нейтрофнльных розеток, особенно при периодической болезни, осложненной амилоидозом.

При исследовании цитохимического маркера Т-лимфоцитов чело-' века, маркера лизосом-кислой фосфатазы нами впервые показано,что

наибольшее накопление кислой фосфатазы.в лимфоцитах отмечается в предприступный период с резким снижением ее уровня в сыворотке крови и с выбросом в сыворотку из лимфоцитов во время приступов. Наибольшее истощение.лимфоцитов кислой фосфатазой наступает во время приступов, в межприступном периоде количество ее умеренно- возрастает, а при амилоидозе нами отмечено напряжение как в лимфоцитах, так и в сыворотке крови. Выброс кислой фосфа-тазы в сыворотку крови совпадает с подъемом температуры. Вполне возможно предположить, что процесс выделения биологически активного вещества - кислой фосфатазы за пределы клетки вследствие увеличения проницаемости лизосомалышх мембран может участвовать помимо пирогенной реакции и в развитии таких клинических проявлений периодической болезни, как асептическое воспаление. Следует также отметить, что но время приступов отмечается резкое повышение фракции 17 КС-этиохоланолона, являющегося лябпли-затором клеточных мембран (Д.А.Овсепян, 1972; ^йгье ,1971).

Нами в работе, помимо штогенов ФГА, ЛМ, КонА, пршенен и почечный антиген. Как показано нами, лимфоциты больных периодической болезнью сенсибилизированы к почечному антигену и выделяют, по-видимому, фактор, угнетащий рост клетск-мишеней. Тка-нями-шппенлми при периодической болезни, как показано впервые в наших публикациях, являются почечная, иадпочечниковая и селезеночная (табл.7) ткани. Нами также отмечена повышенная чувствительность по реакциям ¡л V ИгО (РБТ, РШЛ.) к почечному антигену (табл.8). Характерным для ПБ является и то, что повышенная чувствительность зависит от давности заболевания и частоты прист-тупов (рис.2-4), почтя не зависит от пола, но несколько увеличивается с возрастом и при брюшном варианте периодической болезни, а особенно повышена при осложнении периодической болезни амилоидовом и может, служить прогностическим тестом наступающего осложнения или раннего выявления амилоидаза. Этот тест также может быть использован при дифференциальной диагностике ПБ с СКВ и ревматоидным артритом, хроническим рецидивирующим серозным холециститом, хронически/ серозным колитом, неспецифическим язвенным колитом и другими заболеваниями.

Нами также проведены исследования на выявление наличия ' повышенной чувствительности к антигенам различной природы:микробным и паразитарным. Постановка РБТ и РШЛ со стрептококке-

Цитотоксическое действие лимфоцитов доноров и больных ПБ на эмбриональные ткани

Эмбриональные ткани Лимфоциты доноров Лимфоциты больных ПБ

количество эксплантатов количество эксплантатов %

Почка 3 12,50 ■ 12 • 76,92

24 52

Надпочечник '• 3 21,43 28 82,35

14 34

Селезенка 4 12,24 15 80,00

17 25

Легкие 4 ' 16,67 12. 57,14

24 21

Тимус 4 36,66 11 61,11

12 18

Гипоталамус 5 23,80 Л 40,74 '

21 27

Печень 4 22,22 29 58,82 •

18 51

Миокард 2 12,66 £- 25,00

12 16

Примечание: Б числителе - число эксплантатов с угнетением роста, в.знаменателе - общее,число эксплантатов.

вым антигеном может быть использована при дифференциальной диагностике ПБ с равматизмом, особенно в его активной фазе, где показатели значительно превышают показатели при ПБ (табл.9).

Относительно повышенная чувствительность больных периоди- . ческой болезнью к стрептококковому антигену еще не указывает на его этиологическую роль, однако у больных периодической болезнью имеются явления параллергии и, возможно, в тканях присутствуют формы стрептококков. Наши многочисленные посевы крови на выявление гемолитического стрептококка не дали положительных

Таблица 8

Показатели РБТ с почечным антигеном у больных ПБ (в %)

Группы обследованных Контроль Неосложненная ПБ (варианты) ПБ, осложненная амиловдо-зом Рт рз

смешанный абдоминальный торакальный

I • 15-20 лет 2,69+0,47 8,3*0,49 7,83*0,28 7,88+1,17 11,21+1,03 Р1 0,2

13 20 56 9 14 Р? > 0,2

р4 ¿о, 02 ¿0,01 ¿0,1- рз 0,5

П 21-40 лет 2,73+0,25 26 9,42+0,29 64 9,55+0,57 81 9,16+0,92 - 18 . 11,7+0,41 38 Р1 > > 0,2 0,2

Р4 1 0,001 ¿ 0,05 ¿0,02 рз > 0,2

Ш -41-60 и более 2,91*0,55 - 12 9,47+0,62 23 9,74+0,34 ' 47 9,00*0,04 3 11,85+0,62 21 р1 р? > > 0,2 0,2

'?4 ¿0,02 ^ 0,005 ¿ 0,001 рз > 0,2

Р5 ¿.0,1 ¿0,001 /0,001 >0,1

Р - достоверность отличил по-сравнению с контролем (во всех случаях ¿. 0,001); Р1 - достоверность отличия смешанного и брюшного вариантов; Р2 - смешанного и грудного

. ' вариантов*» Рд - брюшного и грудного вариантов; Р^ - с ПБ, осложненной амилоидозом ; Р5 - I в И группы. -

РТМЛ, им

норма 0,8

0,6

0,4

№

2 Ю 20 Годы

Рис. 2. Изменение РТМЛ с почечнимантигеном в зависимости' от давности заболевания.

РбТ.%

норма 2

2 Ю 20 Годы

Рис. 3. Изменение РТБ с почечним антигеном в зависимости от давности заболевания,.

%

10 ö 6 4 2 О

©

©

©

®

Рис. 4. Показатели РБТ с почечным антигеном

в зависимости от частоты приступов ПБ; I - норма, 2 - умеренная частота, 3 - частые приступы, 4 - осложнение амилоидозсм,

результатов. На наш взгляд, стрептококк, не шлея решающего значения в генезе периодической болезни, лишь участвует в его развитии.

Показатели вышеназванных реакций с паразитарными антигенами (лямблиозный, амебназный, токсоплаздгенный)могут служить диагностическим тестом при дифференциации периодической болезни от соответствующих паразитарных инфекций," так как при периодической болезни они, в основном, отрицательны или слабо положитель-. ны (табл.10). . '

Известно, что шперчувствигельность замедленного типа \ обусловлена сенсибилизированными клетками лимфоидного ряда,что . нашло отражение в наших исследования .. указавших с помощью РБТ и РТМЛ на сенсибилизацию лимфоцитов больных ПБ к почечному и, частично, стрептококковому антигенам. Проведенное нами лечение ' антили!,1фоцитарншл глобулином дало положительные результаты, на

Таблица 9

Показатели РЖП и РБТ при ПБ, ревматизме и СКВ

Группы обследованных РТШ1 (ИМ) РБТ <$)

стрептококк почка стрептококк почка

Контроль без антигена 0,87+0,08 (0,6-1,0) 2,8+0,4 (0-5)

П = 20

ПБ неосложненная:

вне приступа 0,48+0,05 0,51*0,07 7,56+0,81 8,23*0,72

п = 57 п = 86 п.= 102 п=166

приступ 0,45*0,06 0,44*0,08 8,18+0,80 9,51*0,91

п = 24 п = 24 п = 42 п=42 ■

ПБ, осложненная амилоядозом 0,41+0,07 0,38+0,06 9,12+0,82 11.58+ оДз "

п = 16 п = 18 ■ п = 32 п =73

Ревматизм:

неактивная фаза 0,22+0,06 п = 18 - ; 9,8+1,20 п = 24 —

активная фаза 0,14*0,05 п = 14 12,5*0,93 • ■ п = 20" - ■

СКВ 0,58+0,07 0,59±0,08 6,4*0,71 7,30*0,92

п = 12 п = 12 п = 17 п = 17

Хронический рецидивирующий серозный холецистит — 0,69*0,05 п = 14 6,88+0,81 , п = 54

Хронический сегментный колит - 0,63*0,04 п = 15 7,33*0,64 п =34 ;

что указывает урежение и прекращение приступов, а также улучшение показателей по реакциям ¡п гЦю . Полученные данные указывают на наличие аллергизации организма у больных ПБ. Однако, инди- ". видуальные особенности патологического процесса должны сказаться на характере не только клеточных, но и гуморальных сдвигов и эти процессы не отделимы друг от друга. Нами совместно с М.К.Абрамян

Таблица 10

Изменение процента бласт-клеток п ИМ под воздействием антигенов .различной природы у больных ПБ и паразитарными заболеваниями

Антигены ПБ не осло: гнегша я Амебизз нише чн.йоилы Лямбллоз Токсоилазмоз

% бласт-клеток ИМ Г» Р ИМ % ИМ % ИМ

Стафилококк % ■ соИ Р. /у С^аг.; $ Печень 'Амебный Лямблиозный Токсоплазиенный 6,2±0.7 5,8+0,3 4,0+0,9 3,6+0,7 3,8+0,28 3,1+0,23 2,9+0,3 0,53+0,07 0,71+0,09 0,90+0,11 0,79+0,12 0,75+0,03 0,80+0,02 0,90+0,01 9,8+ 0,6 0,2± 0,01 10,1+ 0,15+ 0,7 " 0,02 1 го <£> 1 8,7+0,7 0,25+0,01

выявлена прямая корреляционная связь показателей-циркулирующих . антител по реакции Уанье и РБТ с почечным антигеном. С применением почечного антигена проведены также параллельные исследования показателей клеточного иммунитета с состоянием сывороточных белков и белков культуральной жидкости. При этом отмечена положительная корреляция показателей РБТ и ШТЛ с почечным антигеном и ¿¿^ и Ь^ -глобулинами сыворотки крови при ПБ неосложненной и осложненной амилоидозом. Увеличение содераания ^ -глобулинов, как и показатели клеточного иммунитета, указывают на усиление иммуногенеза. Интересны наблюдаемые повышения <

глобудкиовых. фракций, наиболее выраженные в предпркступный период и во время приступов, что может служить одним из показателей наступающего приступа. Все эти исследования указывают на наличие аллергизации организма с изменениями клеточного и гуморального характера и их корреляций.

Реактивность.организма также снижена, что показано по реак-. циям фагоцитоза и титра комплемента.

На дисфункцию иммунной системы указывают повышение количества В- и 0-клеток, снижение соотношений Т- и В, Т- и 0-кле-ток и повышение соотношений В- и 0-клеток, снижение индекса активности лимфоцитов (ИМ) , что особенно выражено во время приступов (при "иммунологическом поломе") и особенно при осложнении ПБ амилоидозом (табл.11). Изучение ИАЛ у индивидуальных больных в динамике может указать на наступление приступа и является еще одним показателем предприступа.

При исследовании.корреляции между показателями количественных и функциональных соотношений В-систош иммунитета нами совместно с М.К.Абрамян выявлено, что на фоне дисфункции функциональных показателей В-системы иммунитета - отдельных классов иммуноглобулинов,(резкого повышения , умеренного - и

снтеттУдЯ Л), отмечена прямая корреляционная связь с показателями и и обратная - с УцИ и I , что характерно дая ПБ. Исследована также корреляция ИС с отдельными массами иммуноглобулинов. При неосложненной ПБ и при ПБ, ос-, ложненной амилоидозом, отмечается, обратная корреляционная связь супрессорной субпопуляции с и УцЛ и прямая - с а

& . Возможно синтез Я и & связан с Т-лимфоцитамя и особенно с активностью их супрессорной субпопуляции, на что

. Таблица II Соотношения Т-, В-, и О-лимфоцитов пряПБ

Тип клеток Группы обследованных

ПБ- неослотаен- ПБ, осложненная Контроль

ная амилоидозом

п = 44 п - 16 , п = 9

Т, в %. . 45,27+4,3 37,7+11 61,1*2,7

рХ Ч 1 0,001 ¿.0,001 ■ •

в 10 /л 0,89+0,09 0,74+0,08 1,25*0,08

В в % 27,04+0,7 30,21*1,2 15,3+1,3

РХ . ¿0,01. ¿0,01

в ю9/л 0,51+0,03 0,74+0,08 0,31*0,03

0 в % 27,82+0,75 » 30,43+1,32 23,3*2,2

Р ¿0,2 ¿0,1

Т/В 1,67 1,24 3,92

-0,22 -0,51

Р ¿. 0,05 • 1 0,05

Т/0 1,57 1,23 2 (.34

-0,36 -0,64 '

Р ¿ 0,002 ¿0,01

В/о 0,93 0,99 0,65

0,51 0,75

р ¿0,001 ¿ 0,001 •

И А Л 2,63 2,22 3,28

рх - достоверность отличий по сравнении с контролем.

указывает ^(1977), выявив снижение тимическо-

го гормона в сыворотке. Следует также отметить, что.колхицин оказывает большее влияние на функциональную активность В-клеток, чем на их количество.

Нами проведена сравнительная характеристика.ПБ с СКВ и РА о учетом показателей функциональной активности Т- и В-клеток и ревматоидного фактора (РФ) и получены довольно четкие различил. В исследуемых группах больных наиболее высокие показатели УаМ

и РФ, относящегося к нему и являющегося аутоантителом, отмечают-' ся у больных РА, .у бальных СИ при незначительном повышении титр РФ более чем вдвое превышает показатели контрольной группы, а при ПБ, при умеренном повышении Уц^ , тигр РФ приближается к контролю, что характерно для ПБ.

Помимо анализа количества клеток и их функциональной активности необходимо проводить оценку индексов, так как во многих случаях они имеют преимущества, особенно при индивидуальной сценке дисфункции иммунной системы, обнаруживая серьезные взаимосвязи между показателями.

С помощью ЦТТ нами отмечено, что при ПБ но только почечная, но и надпочечниковая ткань является тканью-мишенью (табл.7). Лимфоциты, в свою очередь, являются "открытой" мишенью для воздействия глюкокортикоидов (П.П.Голиков, 1988). Имеющее место при ПБ снижение глюкокортикоидной функции коры надпочечников коррелирует со снижением функциональной активности Т-лимфоцитов, . особенно их супрессорной субпопуляции, что наиболее выражено при осложнении ПБ амилоидозом. Под влиянием колхицшотерапии значительно повышается глюкокортикоидная функция коры надпочечников при неосложненной форме ПБ, тогда как при 'осложнении ее амилоидозом эффект незначительный (работа совместно с Л.А.Овсе-пян).

Совместно с В.А.Мартиросяном нами показано,что при неослож-ненной форме ПБ тлеется умеренно выраженное хронически' возбужденное состояние гипоталамических центров, которые на ЗЭГ проявляются симметричными тета-ритмами, тогда как при ПБ, осложненной амилоидозом, появляются симметр:1чние высокочастотные ^ и патологические V ритмы. Обнаруженные нами биоэлектрические сдвиги указывают на наличие стационарного возбудительного процесса высокой частоты в подкорковых гипоталзмяческих образованиях мозга у больных с ПБ, осложненной амилоидозом. Сопоставление этих данных с иммунологическими показателями дало отрицательную корреляцию с показателями клеточного иммунитета и положи- . тельную - с показателями гуморального иммунитета. Терапевтичес- ' кий эффект колх1щина выражен больше, чем колхамина, Бсо эти данные еще раз указывают на связь иммунологических сдвигов с нейроэндокришшми нарушениями при ПБ.

Нами совместно с Э.Е.Назаретяпом показано, что в лейкоци-

тах крови больных ПБ, особенно во время приступов, создаются благоприятные условия для аккумулирования аденозша, способного участвовать в угнетении функций лшлфоидных клеток иммунной системы. Исследование ранговой корреляции показателей общей популяции Т-лшфоцитов и их супрессорной субпопуляции с АМФ-дезамина-эой выявило их прямую корреляционную связь. Под влиянием колхицина уменьшается активация Т-супрессорной субпопуляции и стационарная концентрация аденозина, что еще раз подтверждает взаимосвязь иммунных процессов с ферментативными при этом заболевании.

Анализ приведенных в работе данных позволяет подтвердить, что ПБ является своеобразным генетически детерминированным имму-нодефицитным состоянием. В иммунопатогенезе ПБ, в развитии ее мониторинга ведущим компонентам является Т-система иммунитета и особенно ее супрессорная субпопуляция. Нарушения в Т-системе иммунитета, особенно снижение ее супрессорной функции, вызывает сложную цепь взаимосвязанных и взашлообуслсвленных патологкчес-ких сдвигов, таких, как дисфушсцпя В-систеш кглмунитета с нарушением в ее функции и количестве циркулирующих клеток, с характерным для периодической болезни снижением Уд f! и % при повышенных rJß G и Характерным для ПБ является также повышение количества 0-клеток, соотношения между Т-, В- и О-клетками, изменение индексов: Ш, ИС, ИКСА, IM, ITH, смещение ишунограи-ш вправо, поражение тканей-мишеней (почечной и надпочечншеовой) с нарушением функции этих органов при ПБ. Помимо иммунологических сдвигов, характерны также ферментативные, такие как изменение концентрации КФ в клетках, особенно лимфоцитах, в зависшос-ти от стадии заболевания, нарушения метаболизма аденозина,избыточный синтез (f -.глобулинов и повшение J-x, -глобулинов, а также белков острой фазы, снижение глюкокортикоидной функции коры надпочечников, возбужденное состояние гипоталампческих центров.

Для углубленного изучения патогенеза ПБ и в помощь ее клинической диагностике нами впервне предложен широкий комплекс щыунологических исследований с проведением корреляционного анализа их с биохимическими, ферментативными, эндокринншли, нейрофизиологическими и другими показателями. При динамическом наблюдении за больными ПБ предложенные исследования позволят' выявить предприступный период, помочь резней диагностике амиловдо-за, осложняющего ПБ, а также провести дифференциальную днагнос-

Таблица 12

Показатели, выявляющие предприступы ПБ и осложнение ее амилоидозом

Методы исследования Контроль Предприступ Осложнение амиловдозом почек I ст

Лейкоциты (Ю9/л) ■ 6,00 7,00 8,00

Лимфоциты (109/л) 0,30 0,28 0,26

Р!ШЛ с почечным антигеном (ИМ) . 0,80 . 0,50 0,40

РБТ с почечным антигеном (%) 4,00 . 8,00 10,00

РБТ с т {%) 60,0 44,00 40,00

РБТ с ЛМ (109/л) 1,30 0,90 0,80

ИС (/Л 43,0 20,0 19,0

Е-РОК {%) 60,0 40,0 38,0

Е-РОК (Ю9/л) 1,20 0,80 0,75 ■

Т- ъ {%) 15,0 10,0 8,50

О-лимфоциты {%) 23,0 28,0 30,0

ЕАС-РОК Ф 15,0 27,0 30,0

ЕАС-РОК (Ю9/л) 0,31 0,61 0,74

АЕ-РОК {0%) 30,0 25,0 21,0

(г/л) 13,0 26,0 23,0

М (г/л) 1,37 1,55 ' 1,65

А (г/л) 2,40 1,60 1,30

Е (кл/л) 38,0 9,00 . 7,00

'2-фракцкя глобулинов (г/л) 0,08 0,19 . 0,16 •

I® в лимфоцитах {%) 0,80 1,60 1,30

тику ее с заболеваниями со сходной клинической, картиной (табл. 12).

Нами впервые- при ПБ доказана высокая эффективность при при-. менении !п к.Чго в реакциях клеточного иммунитета отечественного препарата Т-акт1Шина, его восстанавливающее действие на функции и количества Т-лимфоцитов. Исхода из вышеизложенного, нами предложено применение Т-активина в клиника при лечении больных ПБ. По предварительным данным, полученным при лечении 25 больных ПБ, леченных полнил курсом колхицина и Т-активином (6 дней) получен«'положительные клинические результаты.(прекращение приступов) и функциональная активность Т-лимфоцитов повышена до 50$.

В заключение отметим, что до настоящего времени в литературе не представлено работ, многосторонне раскрывающих сложные механизмы иммунопатогенеза ПБ. В настоящей'работе на большом клиническом материале (1279 больных ПБ) проведен иммунологический мониторинг, показавший напряжение иммунного процесса у больных ПБ в динамике, что позволило выявить иммунологические'сдвиги, характерные для этого заболевания. Для наглядности нами впервые выведена шомунограша при неосложненкой ПБ (рис.5). Сдвиг иммунограммн вправо указывае'т на характерные для ПБ изменения с угнетением функциональной-активности и количественных соотношений Т-популяции лимфоцитов, увеличением количества В-популяции с дисфункцией по отдельншл классам иммуноглобулинов, с понижением реактивности организма, повышением уровня аутоантител. В клинических условиях выведение индивидуальных иммунограмм у больных ПБ до и после лечения поможет в оценке его эффективности с иммунологических позиций п подскажет правильный терапевтический' подход в каждом отдельном случае.

.Основные звенья иммунопатогенеза ПБ представлены нами в ви- . де обобщающей схемы (схема I), указывающей на ведущую роль Т-системы иммунитета', ее иммунорегуляторных механизмов в пммуно-патогенезе ПБ, в возникновении приступов при этом заболевании.

СХ(ЗШ ï

Пммунопатогенез ПБ

Примечание ; 1ДИС - генетически детерминированное;

иммунодефицитное состояние.

ВЫВОДЫ

1. Впервые установлен иммунный статус у больных ПБ. Разработаны наиболее информативные иммунологические показатели для изучения патогенеза, эффективности лечения и дифференциальной диагностики ПБ. Впервые выведена иммунограмма при ПБ. Смещение" ее вправо указывает на дисбаланс в иммунной системе с угнетением Т-'и активацией В-систем. >

2. При ПБ установлено снижение функциональной активности и количественного содержания Т-лимфоцитов, особенно их супрес-сорной субпопуляции.

3. Выявлено при ПБ повышение количественных показателей В-лимфоцитов и изменение содержания У у -ов с повышением Уд Q и *3gJJ и снижением й и ¿ , что свидетельствует о дисфункции В-системы.лимфоцитов.

4. Впервые при ПБ выявлено повышение количества 0-клеток, снижение соотношений Т- иВ-, Т- и О-клеток.

5. Установлена при ПБ повышенная чувствительность к почечному антигену.

6. Выявлено, что тканями-мишенями при ГШ являются почечная, надпочечниковая и селезеночная ткани.

7. île отмечено повышенной чувствительности к микробным (стафилококк, %. cot' , Р- Vuf^ouiS ) и паразитарным (лямблиоз-ный, амебиазный, токсоплазменный) антигенам .

8. Впервые выявлен характер корреляционных связей показателей Т-системы иммунитета с показателями В-системы, О-клетками, Y и J.^ --глобулиновыни фракциями, ЛШ-дезаминазой, глюкокор-тикоидной функцией коры надпочечников, функциональной активностью гштоталамичсских центров. ,

9. Выявлены иммунологические параметры, соответствующие предориступнсму периоду и раннему- выявлению амялоидоза при ПВ.

10. Дана сравнительная характеристика иммунологических показателей ПБ с СКВ и РА.

11. Впервые юинпко-клмуиологическами исследованиями раскрыт механизм благотворного влияния колхицина при ПБ. Впервые '■ при ПБ в реакциях ¡и niпоказано спьмулирующес действие Т-активкна на общую и супрессорную популяцию Т-лимфоцитов, что позволило рекомендовать его при лечении ПБ.

12. Выявлено, что решающее значение в повышении проницаемости .биологических мембран, выбросе лиэосомалышх ферментов и воз-■ ншшовении приступов ПБ имеет подавление функции Т-супрессоров.-

Рекомендации для внедрения в практику ' . здравоохранения

1. Показатели функциональной активности Т-лимфодимзз и их супрессорной субпопуляции, а также их количественные показатели используются в терапевтических клиниках г.Еревана для диаг-

. постики, прогнозирования наступающего приступа, раннего .распоз-. навання амилоидоза и организации лечения больных ПБ.

2. Рекомендован комплекс информативных иммунологичесшсс критериев в помощь диагностике ПБ и ее дифференциальной диагностике с заболеваниями со сходной клинической картиной.

3. Предложено составлеш:з индивидуальных иммунограш у больных ПБ для организации более целенаправленного лечения.

4. Предложено применение Т-активина в комплексной терапии ' ПБ с целью шалунокоррекции.

5. 1,5атеркали диссертации внедрены в учебный процесс на 1У-У1 курсах ЕрШ.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Реакция бласттрансформации и торложешш миграции макрофагов у больных периодической болезнью. - Е.экспер.и клин.мед. АН АрлССР, 1974, т. 14, is 2, с.72-75.

2. Некоторые иммунобиохшические исследования при периоди- , ческой болезни. - Труда Ереванского медицинского института, Ереван,-1974, т.Т6,'кн.2, c.65-S7 (соавт.Гушдаян И.О.).

3. Сравнение. некоторых иммунологических показателей при

. периодической болезни. - Там же,, с.73-74 (соавт. Абрамян М.К.).

4. Значение иммунологических и эндокринологических сдвигов . в патогенезе амилоидного нефроза. Материалы I Всесоюзного съезда . нефрологов 1-4 октября 1974 г. г.Минск, 1974, с.301-302, соавторы Симонян А.Т., Айвазян A.A.,' Абрамян М.К., Овсепян I.A.). :

5. Некоторые вопросы клеточного' иммунитета при'периодической болезни. - Материалы I съезда терапевтов Ар,гении. Ереван,

1974, с.14-16 (соавторы Скмонян АЛ., Карапетян А.Е., Абрамян М.К.).

6. 0 гистаминовом обмене при периодической болезни. - Там же, с.30-31 (соавторы Абрамян М.К., Гуюмджян И.О., Овсешш Л.А.).

7. О гуморальном иммунитете при периодической болезни. -Там же, с.,24-25 (соавтор Абрамян М.К.).

8. Корреляция некоторых данных клеточного иммунитета с глобулиновыми фракциями плазмы крови при периодической болезни. - Н.экспер, и клин.мед.АН АрмССР,1976, т.16, № 5, с.70 (соавтор Црвджян И.О.).

9. Об использовании аллергических реакций замедленного типа при диагностике лямблкоза и амебиаза. - Натер.П Всесоюзного съезда протозоологов. Киев, .1976, ч.2, с.46-47 (соавтор lía- , рапетян А.Е.).

10. О сравнительной ценности серологических методов диагностики и аллергодиагностики при токсоплазмозе. Там'же, с .1920 (соавтор Восканян К.М.).

11. О меточном и гуморальном иммунитете при периодической болезни. Тр.Ереванского мед.ин-та. Вопросы иммунологии и иммунопатологии. Ереван, 1977, вып.17, кн.З, с.45-47 (соавторы: Айвазян А.А., Абрамян U.K., Пашинян С.А.).

12. Некоторые показатели иммунологической реактивности организма при периодической болезни. Там же, с.60-61 (соавторы: \ Абрамян М.К., Овсепян. Л.А.).

13. Изучение цитотоксического эффекта при периодической болезни. Там же, с.62 (соавтор Гушджян И.О.).

14. Применение аллергических реакций замедленного типа для диагностики некоторых протозойных заболеваний. Там же, с.69-72, (Соавторы: Карапетян А.Е., Ыанучарян Д.Ш.).

15.оте aspects o-f oMtxb^. immunity in-z у/ъе.х! упя n "¿л С a.moe$¡eii¡í , й Уп-кгна^.; он« С Cotig-год5 о/ pío-tozo о (о^. л'- У., 2.6 jupe, - tjufe. -ISyj, pül (Co-cu,ihotf: Katcxfyciiah fi-t>. , JT.CV

ecLjaV, ал/;. ' *

16. Об иммуногенезе периодической болезни. - Клиническая медицина, 1977, 13 I, C.9Í (соавторы: Айвазян А.А., Абрамян М.К.', Пашинян СiА. и др.).

. 17. Гуморальные и меточные факторы иммуногенеза при перио-

"дической болезни, К.экспер. и клин.мед.АН АрыССР, 1977, т.17, J& I, с.23 (соавторы: Айвазян A.A., Абрамян М.К., Пашинян С.А.).

18. Цитотоксичеокий тест, как один из диагностических показателей замедленной аллергии при периодической болезни. -

П Всесоюзный съезд врачей-лаборантов. Ворошиловград, 1979,с.103 (соавтор Гушдаян И.О.).

19. Некоторые показатели Т- и B-систем иммунитета при периодической болезни. Там же, с.117 (соавтор Абрамян М.К.).

20. Использование реакции ингибиции миграции лейкоцитов (РНШ1) для диагностики лямблиозов. Там же, с.162-164 (соавторы: Карапетян А.Е., Манучарян Д.Ы.).

• 21. Использование реакции торможения миграции лимфоцитов при лямблиозе. - Ж.экспер.и клин.мед.АН АрлССР, 1979, т.19,М, с.59-61 (соавторы: Карапетян А.Е., Маиучарян Д.Ш.).

22. Корреляционная связь показателей гистамина в сыворотке крови и РВТ с почечным антигеном при периодической болезни. -Tp.EjfvU'I "Биогенные амины", 1980, вып.19, кн.2, с.130-135 (соавторы: Абрамян U.K., Овсепян Л.А.).

23. Показатели Т-системы тиснитета у больных периодичес-. кой болезнью. - Н.окспер.и клин.мед.АН АрлССР, I960, т.20, М, с.423—126.

24. Изменение активности кислой фосфатазы в лимфоцитах и сыворотке крови больных периодической болезнью. - Ж.Экспер. и клин.мед.АН АрмССР, 1981, т.21, с.208 (соавторы: .Гушдаян И.О., Слкуни М.Е.).

25. Изучение отдельных популяций лимфоцитов при периодической болезни. - Иммунология, 1980, JS 6, с.69-71.

26. Дифференциальная диагностика периодической болезни. -Методические рекомендации (соавторы: Айвазян A.A., Абрамян U.K., Тер-Захарян З.А.).

27. К вопросу о патогенезе амилоидоза при периодической ' болезни. - Клиническая медицина, 1982, & I, с.65-68 (соавторы:

, Айвазян A.A., Гюликехвян Н.Г., Абрамян U.K., Пашинян С.А., IIa— ; зарстян Э.Е. и др.).

28. Q лечении периодической болезни колхицином. - Тер.ар-хив, 1982, J5 С, с.125 (соавторы: Айвазян A.A., Багдэсарян Г.Б., Абрамян М.К., Овсепян Л.А. и др.).'

! . 29. Некоторые биохимические тесты как вспомогательные.

диагностические показатели периодической болезни, - Методические рекомендации. Ереван, 1982 (соавтор Назаретян Э.Е.).

30. Изучение показателей розеткообразования при периодичес-\ кой болезни. - Ж.экспер.и клин.мед.All АрмССР, 1982, т.21, Jé 5, ■

с.474 (соавторы Назаретян Э.Е., Хачатрян Г.К.).

31. Динамическое изучение активности некоторых ферментов , пуринового обмена в гемолизатах эритроцитов при периодической болезни. - Ж.экспер. и-клин.мед. АН АрмССР, I9S3, т.23, J3 4,

с.389 (соавторы: Назахютяи Э.Е., Гулян Э.А.).

32. Показателя клеточного иммунитета в диагностике периодической болззни. - Методические рекомендации. Ереван, 1984.

33. Оценка показателей Т-лимфоцитов и Т-супрессорной субно-пуляции у больных периодической болезнью. - Е.эксиер.и клин.мед. АН АрмССР, Г985, т.25, с.509. Полный текст статьи депонирован

в ЕНЖМИ МЗ СССР за Д-10135 от 26/У1Е-1985 г.

34. Корреляция некоторое показателей клеточного иммунитета и гипоталамо-надпочечникового коглплекса у больных периодической болезнью. - Е.экслер. и клин.мед.АН Ар;лССР, 1985, т.25, J5 5,

с.443-447 (соавторы: Айвазян A.A., Мартиросян В.А., Овсепян Л.А.).

35. Роль гипоталамо-надпочечникового комплекса и клеточного иммунитета в патогенезе периодической болезни. - Арохчапаутюн (на арм.яз.), 1985, Ji 4, с.3-4 (соавторы: Айвазян A.A., Мартиросян В.А., Овсепян I.A.). '

36. Количественная оценка субпопуляции Т~лшфоцитов при периодической болезни. - ¡¡[.экспер. и клин.мед.АН АрмССР, 1986, т.26, J'j 4, с.372-375 (соавтор Айвазян A.A.).

37. Изучение отдельных параметров Т-системы иммунитета при периодической болезни. Сб.научных трудов "Вопросы диагностики

и лечения периодической болезни". Ереван, 1987, с.33-36. .

38. Изучение О-лшлфоцитов пра периодической болезни. -Там же, с.29-32.

39. Изменение функциональной активности Т-лимфоцитсв и уровня глкжокортшеоздов коры надпочечников при периодической болезни под влиянием колхицинотеропии. - Иммунология, 1987, И2,

'с.86-87 (ооавторц: Овсеюш Л.А., Айвазян Ал.А.).

40. Показатели меточного,иммунитета у больных периодической болезнью в зависимости от вариантов заболевания, пола и

Еозраста. Ж.экспер. п клин.мед.АН АрмССР, 1988, т.28, Л 4,' с.З,

41. Корреляционные связи некоторых показателей гипоталамо-надпочечникового комплекса и клеточного.иммунитета у больных периодической болезнью, леченных колхицином и колхамином. - , Ж.экспер.и клин.мед.АН АрмССР, 1989, т.29, JS 3, с.229-231 (соавторы: Мартиросян В.А., Овсепян Л.А.).

42. Влияние колх1щина на некоторые биохимические показатели у больных периодической болезнью. Ж.Экспер. и клин.мед.АН АрмССР, 1989,.т.29, Д 3,с.208-212 (соавторы: Мамиконян P.C., Назаретян Э.Е., Овсегшн Л.А.).

43. О некоторых нейрозндокринных сдвигах при периодической болезни. - Арохчапаутюн (на арм.яз.), 1988, й 5, с.12-13 (со- -авторы: Мартиросян В.А., Багдасарян Г.В., Овсепян Л.А. и др.).

44. Состояние популяции О-лимфоцитоз при периодической болезни. - Тезисы 68-ой отчетной научной сессии ЕрШ, 1989,с.52,

45. Показатели Т-супрессорной активности и при периодической болезни. - НПО Союз, мед.информ.Деп. I8I30 от 3.8.1989 г. (соавторы: Мамиконян P.C., Казначеев В.П., Назаретян Э.Е., Абрамян U.K.).

46. Показатели повышенной чувствительности к почечному антигену в острой фазе периодической болезни. - Билл,СО АМН СССР 1989, а 2, с.36-38 (соавторы: Мамшсонян P.C., Назаретян Э.Е.)

Заказ 51_;_;_Тираж 100

Отпечатано на ротапринтам» участке Центра научной информации АН Армении. Ереван I, ул. Абовяна, 15