Автореферат и диссертация по медицине (14.00.08) на тему:Клинико-биохимические и иммунологические аспекты патогенеза первичной глаукомы
- Ученая степень
- доктора медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.08
Автореферат диссертации по медицине на тему Клинико-биохимические и иммунологические аспекты патогенеза первичной глаукомы
; 4.-»Л
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ МОСКОВСКИЙ. НАУЧНО ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКШ! ИНСТИТУТ ГЛАЗНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ИМЕНИ ГЕЛЬМГОЛЬЦА
На правах рукописи
КРАМОРЕНКО Юлия Семеновна
УТЛ 617. 7-007. 681: 577.1-612. 017
КЛИНИШ-БИОХИМИЧЕСКИЕ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПАТОГЕНЕЗА ПЕРВИЧНОЙ ГЛАУКОМЫ
14.00.08 - глазные болезни
Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук
Москва - 1992
Работа зыподнена в Казахской ордена "Знак Почета" ыеуч-
яо-лсследонатедьскон инстйтутв глазных бодезьей
Научш^ консультанты:
доктор медицинских наук, профессор Е.Ф.Егоров
доктор медицинских азук, профессор С.М.Племсоза
доктор медицинских наук, профессор Л.П.Царевскяй
0^хцаяЕЬ:ше оппонента:
доктор недининоких наук, профессор А.Я.Букин
докюр медицинских наук, профессор О.Б.Чекцова
доктор медицинских наук, профессор .И.А.Захарова
Ведущее организация:
Центральный институт усовершенствования врачей
4 - итХтгу.
¿авдт состоится "у ' Ы/Пуп^Ъ'Узусг. в /_/ часов на заседании сяецкагизировэкного совета (Д 084.АО.01) при Московской
научно-исследовательском институте глазных болезней ии.Гельмгояь-ца КЗ РФ (103064, Москва, ул.Сздово-Черногрязская 14/13).
■2 диссертацией иоу.но ознакомиться в библиотеке института.
ан " &"
Автореферат разослан " у/ " КЛ^/^У 1ЭЭ2 г.
Ученый секретарь
следло газированного совете
доктор медицинских наук -
И.Е.Кодзоь
Г' • ■
■ ■» i . í
>; ' í
i ^ ; -
i.SrfCCíuT'iHlv'S Г - 3 -
Актуальность проблемы. Социальная и экономическая значимость первичной глаукомы обуславливается большой распространенность!» и тяжестью исходов, болезни (А.П.Нестеров, 1968-1985; Й.Г.Мустафина, 1979,19Ь9; Л.Т.Кашинцева и др., 1982, 1984). Многочисленные исследования, проведенные в последнее время, посвященные этой проблеме и борьбе со слепотой на почве глаукомы, касаются в основном открыто-угольной Форш заболевания, которая чаще встречается на европейском континенте и отличается особенностями, предопределяющими трудности - • диагностики ее начальной стадии и прогнозирования снижения зрительных функций.
Закрытоугольная глаукома в последнее время изучается менее интенсивно. Вместе с тем» эта форма глаукомы, по данным ряда авторов, составляет от 20 до 40% от числа больных первичной глаукомой (Г.А. Шилкин, 1983; М.Б.Вургафт, 1^85; Brathney et al., 1985; Patel, Tullo, 1988; Gao et al., 1989).'
Проблема закрытоугольной глаукомы особенно актуальна для республик Средней Азии и Казахстана, где эта форма заболевания среди коренного населения является преобладающей (Ж.Г.Мустафина, 1987; С.К.Каранов и др., 1985).
Значительный удельный вес глаукомы среди основных причин слепоты привлекает внимание исследователей к проблеме патогенеза первичной глаукомы и, в частности, к изучении нарушений метаболических процессов в организме больных.
Глаукома - заболевание старшего возраста (Н.И.Затулина, 19781985; А.К.Кривицкий, 1984,1987), когда начинают ослабевать все адаптационные резервы организма и могут возникать нарушения гомео-стаза (Г.М.Бугенко, В.П.ВоЯтенко, 1983; В.В.Фролькис, 1989).
Одним из возможных путеЯ реализации адаптационных метаболических перестроек является интенсификация реакций евободнорадикадьного
/
окисления (СРО). Выявленное у больных глаукомой повышенной содержание продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в крови и тканях дренакной системы глаз способствует углубленна в ней дезинтеграции обменных процессов. Продукты перакнсного окисления липидов могут оказывать существенное влияние на метаболические процессы, тонус, реактивность сосудов и шнфоциркуляцшо глаз (А„Я.Бунин, М.А.Бабижа-ев, 1985; .Я.Бунин, 1964, 1066; Т.В.Бирич и др., 19Ь6; И.Н.Михейце-ва, 1989).
Имеются оснований считать,' что чрезмерная интенсификация парз-кисного окисления липидов, сопровоадаидаяся недостаточностью анти-оксидантов, накоплением в тканях цитотоксических продуктов, приводит к повреждениям белковых структур клеток и тканей дренажной системы глаз и приобретении иш антигенных свойств {В.Е.Каган, 1981; О.И. Лебедев, 1990; Ruasel et al., 1969).
Таким образом, анализ литературы показывает, что исследование реакций ЮЛ и состояния антиоксидантной системы (ЛОС) при глаукоме является одной из актуальных задач при изучении патогенеза и разработке патогенетически ориентированной терапии больных первичной ; глаукомой.
Изучение процессов свободнорадикального окисления в развитии дистрофических изменений в тканях дренажной системы глаз при первичной глаукоме начато недавно. Поэтому ряд вопросов этой проблемы изучен недостаточно. Так, остаются недостаточно изученными соотношения между степенью активации ПОЛ и состоянием антиокислительной системы в крови, тканях дренажной системы глаз и камерной влаге. Отсутствуют комплексные исследования изменений уровня основных показателей ЛОЛ (гидроперекисей липидов - ГЛЛ, малонового диальдег' а - ЬЩА) и антиоксидантной системы (d-токоферола, супероксиддисцута-
зы (СОД), глутатионпероксидазы (ГПО), глутатионредуктазы (ГР), ката-лаэы (ЮТ) у больных с различными формам! глаукомы. Совершенно не изучена дина!,яка процессов перекисного окисления липидов и активности антиоксидантной системы при остром приступе закрытоугольной глау-кош. I
Интенсивное изучение аутоиммунных реакций при глаукоме, проведенное в последние года, позволило с новых позиций подойти к пониманию механизма развития глаукош и развивающихся при ней функциональных и органических нарушений (А.И.Захарова, 1985-1990; Т.А.Доб-рица, 1967).
Однако ряд вопросов этой проблеш требует дальнейшего изучения. Так, крайне недостаточно данных об иммунологических реакциях у больных закрытоугольной глаукомой, особенно с острым приступом, отсутствуют исследования роли иммуноглобулина Е при глаукоме.
Комплексное исследование процессов ПОЛ, антиоксидантной защиты и иммунного статуса у больных открытоугольной и закрытоугольной глаукомой представляет интерес не только в плане углубления знаний патогенеза болезни, но и в отношении перспектив разработки новых методов фармакотерапии глаукомы, что и определило цель настоящего исследования.
Цель работы - изучение роли метаболических и иммунологических. факторов в патогенезе певвичной глаукомы, разработка принципов и методов антиоксидантного и иммунокорригируицего лечения.
Задачи:
1. Изучить активность процессов ПОЛ и антиоксидантной защиты в
крови и тканях дренажной зоны глаз больных откритоугольной и закры-
*
т угольной глаукоиой и в период острого приступа, сопоставить полученные показатели с данными у здоровых лиц соответствующего возраста.
2. Исследовать активность лизосомалышх ферментов и уровень
- б -
циклических нуклеотидов в крови больных глаукомой в зависимости от клинического течения болезни.
3. Определить состояние гуморального и клеточного иммунитета при разных формах и стадиях глаукомы.
4. Исследовать локализацию и содержание кислой фосфатазы, серо-тонина и иммуноглобулинов й, А, М в тканях дренажной системы глаз больных глаукомой.
5. Изучить роль перекисного окисления липидов, антиоксидантной н имцунной систем в патогенезе острого приступа закрытоугольной глаукомы.
6. На'основании, полученных данных определить критерии применения антиоксидантов и иммунокорректоров в комплексной терапии больных глаукомой, разработать принципы и методы ее проведения.
Основные положения, выносимые на защиту:
- Активация реакций ПОЛ, антиоксидантная недостаточность, накопление в крови и тканях мембранотоксических продуктов перекисного окисления липидов участвуют в дистрофических изменениях дренажной системы глаз при глаукоме".
- Развитие первичной глаукомы сопровождается повышением в крови активности лиэосомальных ферментов и изменением соотношения циклических нуклеотидов.
- Изменения клеточного и гуморального иммунитета развиваются как при открытоугольной, так и при закрытоугольной глаукоме.
- Для острого приступа закрытоугольйой глаукомы характерно наличие поликлональной гиперглобулинемии, увеличение числа сенсибилизированных лимфоцитов на фоне дефицита Т- и В-лимфоцитов.
- Морфологические (гистохимические, имиунофлюореецентные, электронномикроскопические) изменения в тканях дренажной
системы той остром приступе закрытоугольной глаукомы отражают форми-4 .ваше й развитие иммунопатологических реакций (I и III типа).
- Применение антиоксидантов в комплексной терапии первичной глаукомы наряду с положительным клиническим эффектом приводит к снижению в крови уровня продуктов ПОЛ, повышению активности антиокислительной системы.
Научная новизна. Осуществлен комплексный подход к изучению роли метаболических и иммунологических факторов в патогенезе основных ' форм первичной глаукомы в зависимости от стадии и компенсации процесса.
Впервые установлен дефицит витамина Е и изменение активности , антиокислительных ферментов в крови больных первичной глаукомой, свидетельствующие о недостаточности антиоксидантной системы.
Впервые обнаружены сдвиги процесса ШЛ и активности антиокислительных ферментов в имцунокомпетентных клетках и в тканях дренажной системы глаз в период острого тэиступа закрытоугольной глаукомы.
Методом рентгеноструктурного анализа в сыворотке крови больных первичной глаукомой выявлено вещество, содержащее сульфогруппу, степень изменения уровня которого может быть использована для дифференциальной диагностики первичной глаукомы и гипертензии (Положительное решение Госкомизобретений на вьщачу авторского свидетельства от 28.06.90 г. "Способ диагностики глаукомы").
В тканях дренажной системы глаз в период острого приступа обнаружено повышение уровня серотонина, кислой фосфатазы и иммунных комплексов .
Впервые показано, что в период острого приступа закрытоугольной глаукомы в плазме крови больных наблюдается повышение уровня циклических нуклеотидов и иммуноглобулина Е.
На основании юшнико-иммунологических и биохимических исследова- .
ний выдвинуто новое представление о патогенезе стрессорного повреждения тканей глава при остром приступе глаукома, в соответствии с которым кяшвбым авемем ©того процесса является чрезмерная активация ШЛ, поереадение мембранных структур ткани дренажной системы tvia&eл нарушение их физиологических функций.
Практическая значимость работы. Комплексный подход к изучению тчьёойШзвних и иммунологических аспектов первичной глаукомы позволил получись новые сведения о патогенетических механизмах развития остроге присгупа еакритоугельной глаукомы. Результаты исследований реакций П0Л и состояния антиоксидантной системы при различных форма: и стадиях глаукомы могут быть использованы для определения степени тяжести болезни и контроля эффективности лечения.
Выявленное повышение уровня вторичных продуктов ГОЛ, дефицит шдаодш Е в крови больных глаукомой дают основание рекомендовать е(-Ш{оферол и аевит для лечения больных первичной глаукомой.- Дифференцированный подход к назначению указанных препаратов с помощью лабораторного теста ЩА/гемолиз позволяет получить Положительный тера певтический эффект.
Разработан комплекс лечения первичной глаукомы, включающий витамин Е в сочетании с эмоксипином либо имцунокорректором тактивином на основе изучения влияния этих препаратов на местные и общие пато-химичзские проявления болезни.
Рекомендуется способ дифференциальной диагностики глаукомы и гипертонаии путем определения в сыворотке крови уровня хлорамин-Т-тригидрата.
Внедрение. Результаты работы внедрены в практическую деятельность офтальмологических больниц и глазных отделений 19 областей Ка захстана н г,Алма-Аты, Московской городской больницы № 15, клиничес Ких больниц г.Таллина» г.Риги, г.Бишкек и г.Карши (Узбекская РеспуС
лика), лечебно-диагностического объединения МЗ РФ(г. Москва), МСЧ ПО "Якутзолото", г. Якутск.
Полученные в работе данные используются в учебном процессе на семинарах по глаукоме, проводимых в КазНИИ глазных болезней.
По результатам работы изданы методические рекомендации: I) "Выявление, диспансерное наблюдение и реабилитация больных глаукомой в республике", 2) "Комплексная патогенетически ориентированная терапия глаукомы', 3) "Клинические особенности и лечение острого приступа глаукомы".
Апробация работы. Основные положения работы доложены на заседании Казахского республиканского (Алма-Ата, 1965-1991) и Красноярского краевого (Красноярск, 1988) научных обществ офтальмологов, на У Межреспубликанской конференции аллергологов-иммунологов Казахстана и республик Средней Азии (Алма-Ата, 1986), на УШ Всесоюзной конференции "Измерения в медицине и их метрологическое обеспечение" (Москва, 1986), I Республиканской конференции офтальмологов Киргизской ССР (Фрунзе, 1987), Всесоюзной конференции по клинической витаминологии (Москва, 1991), заседании проблемной комиссии "Глаукома" АМН СССР (Москва, 1991).
Материалы диссертации представлены в двух заключительных отчетах НИР КазНИИ глазных болезней (1985, 1990).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 30 работ, 3 методических рекомендации. По материалам исследования получено одно авторское свидетельство СССР "Способ лечения компенсированной первичной открытоугольной глаукомы" (№ 1482694), два положительных решения Госкомизобретений на выдачу авторских свидетельств , 12 удостоверений на рационализаторские предложения. '
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 253 страницах машинописи, состоит из введения, обзора литературы, 7 глав
- хо -
результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Библиографический указатель содержит 30? отечественных и 20Ь зарубежных источников. ■
Диссертация иллюстрирована ¿4 рисунками и 42 таблицами.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования
Клинико-лабораторные исследования проведены у 50Ö больных первичной глаукомой, находившихся на лечении в КазНИИ глазных болезней с 1981 по 1991 г.,и 96 практически здоровых лиц (контрольная группа) Открытоугольная форма была диагностирована у 249 больных, закрь тоугольная - у 259, из них III больных с острым приступом закрытоугольной глаукомы,
У больных глаукомой исследование проводили при поступлении, у 61,2% больных в динамике, в контрольной группе исследования проводи; однократно.
Офтальмологическое обследование вюючало общепринятые методики: определение остроты зрения, исследование центрального (на анализаторе Г.Г.Астраленко) и периферического (на сферопериметре "Карл Цейс Йена", ГДР) поля зрения, биомикроскопив переднего отдела глаза с помощью щелевой лампы ("Карл Цейсс Йена',' ГДР), гониоскопию с использованием гониоскопа М.М.Краснова или трехзеркальной линзы Гольдмана, офтальмоскопию (пряцую и обратную), топографию по упрощенной методике А.П.Нестерова (у ряда больных исследование гидродинамики глаза проводилось с помощью электротонографа).
Материалом для лабораторных исследований служила жидкая часть (сыворотка, плазма) и форменные элементы (эритроциты, лимфоциты) крови; ткани дренажной системы глаз и водянистая влага, полученные по время антиглаукоматозных операций.
Использованы следующие биохимические' методики: определение малонового диальдегида (И.Д.Стальная, Т.Г.Гаришвшш, 1977), гидроперекисей липидов (В.Б.Гаврилов, М.О.Мишкорудная, 1983), содержания витамина Е (Р.И.Черняускене и до., 1984; А.А.Покровский, 1979). Активность лизосомальных ферментов (ДНКазы, РННазы, катепсина Д и кислой фосфатазы) определяли методом В.Н.Орег-'чтч (А.А.Покровский, 1969), активность каталази, глутатионредуктазы и глутатконпероксида-зы, супероксиддисмутазы - методами, описанными В.П.Верболосич и др.' (1965), З.Н.Чумаковым, Л.Ф.Осинской (1979), тиоловых групп - по Кольтгоффу и Гаррису (В.В.Соколовский, 1969); суммарная пероксндазная активность (А.Г.Брюховецкий и др., 19о5) определялась-по модифицированной нами методике. Радиоимцунологическиш методами определяли цшипгсеские нуклеотиды и иммуноглобулин Е, рентгеноструктурным анализом - хлсранпн-Т-тригадрат, хемилюминэсизнцио (Г.А..Бабзнгсэ,1983) Использованы следующие 'иммунологические методики:
- реакция спонтанного розоткообразования для выявления Т-, В-, Д-розсткообразусщих и нулевых клеток (Т.И.Гришина, С.Мюллер, 1978);
- реакция антигенспецифического розеткообразования в напей модификации (полсяительпое решение Госкомизобретений на выдачу авторско--го свидетельства от 27.09.91 г. "Способ определения антигенсвязываю-щхх лимфоцитов"), в качестве антигенов использовали водно-соленые экстракты тканей дренажной зоны склеры и сосудистой оболочки.'
Морфологически исследованы 49 фрагментов тканей дренажной зоны склеры, полученных во время антиглаукоматозных операций по поводу отяратоугольной глаукомы - 17, эакрытоугольной - 32, в том числе при остром приступе - 16. Контролем служили 26 соответствующих фрагментов трупных глаз, взятых в первые часы после смерти у погибших в результате несчастного случая. Морфологические (гистохимические, гсе.гу-нофпыоресцентные и электронномикроскопические исследования, прове-
донше на кафедре патоморфологки Алма-Атинского института усовершенствования врачей МЗ СССР (зав. - проф. Л.П.Царевский), включали определение активности кислой фосфатазы гистохкмически по Гомори (Э.Пирс, 1962), иммунофлюоресцентные исследования для выявления иммуноглобулинов (А, G, М) (Ю.Ф.Кубица, 1967), исследования биогенных аминов и серотонина (Falk, 1962). Для количественного анализа лвми-несцируюцих структур использовалась фотометрическая насадка <Ж)Л-1.
Результаты исследований обработаны на шкроЭВМ БЗ-21 с помощью специальных программ статистического и корреляционного анализа.
I. Перекисное окисление липидов и активность антиоксидантной системы у больных первичной глаукомой
В крови больных первичной глаукомой исследовали продукты ПОЛ -гидроперекиси липидов и маленошй диальдегид, хеыилюмииесценцию и показатели антиоксидантной системы (витамин Е, антиокислитсльные ферменты).
В 26 блоках дренажной системы, полученных во время антиглауко-матозных операций,и 12 блоках, взятых у погибших (контроль), исследовали хемилшинзеценцию и суммарную пероксидазную активность.
Полненные данные выявили повьиение содержания а сыворотке, эритроцитах и лимфоцитах крови продуктов ПОЛ, что свидетельствует об активации процессов ПОЛ у больных- глаукомой и согласуется с результатами других исследователей (Т.Ь.Бирич и др., I9U3; 0.И.Лебедев, 1990) (табл.1). Выявлено таю;-.е, что информативным показателем активности реакции ПОЛ при глаукоме является MiiA, так как повышение его содержания в сыворотке крови и эритроцитах статистически досто-изрно.
¡Ьучсгив реакций ПОЛ ь крови в аависютсти от стадии заболева-: кл r.vsaiuvic, что у öw..=:!ue о начальной и разнято» стадклг.З! глаукеш
Таблица I
Показатели перекисного окисления липидов в крови больных глаукомой
Исследуемые! Ко"^?ная
показатели
группа
'0ткрытоуголь-|Закрытоуголь-| Острый
мая глаукома
л | и!+л
кая,глаукома ; приступ
п |
М+-И
; .Малоновый диальдегид, нмоль/мл
Сыворотка 32 1,1+0,1 107 3,0+0,4*61 2,7+0,3* 31 3,8+0,5*
Зритроц/.': : 17,8+1,9 76 36,2+4,2*44 33,9+3,5* 27 31,3+7,6*
Двфяртв 22 0,23+0,05 23 0,27+0,04 19 0,39+0,11 9 0,36+0,0-1*
Гидроперекиси липидов, ед/мл
Сыворотка 32 2,4+0,2 107 3,7+0,6* 61 3,6+0,2* 31 2,7+0,3
Эритроциты 32 22,9+2,6 76 26,5+3,1 44 26,5+3,1 27 34,4+3,7*
Лимфоциты 22 0,214-0,05 23 0,31+0,03 19 0,40+0,06* 9 0,54ь0,06*
* Достоверность по отнапениэ к контролю, РА 0,05.
уровень ПОЛ незначптзлыго отличается от данных контрольной гругаал. При прргрессирован:::! болезни отмечается достоверное увеличение ГПЛ к
Изменение уровня гидроперекисей яшидов и малонового дпольдеги-да з екзеротко и форменных элементах крова имело однонаправленный характер как у больных с открэтоугодьиой, так и с захритоугольной
гдаукомой.
й пагиод острого приступа сэкрнтоугольной глаукош, по срэзнснют с обз,ьЯ групгой болыпэс отой фермой глаукомы, концентрация ГШ1 в большой степ они уселич^валась в эритроцитах и ллпаюци'гах. На 2-4 день после птоступе. уровень ШЩ. существенно не менялся, а содержание ПШ посылалось (Р'-'-0,05) как в эритроцитах, так и в плазме кроь,;; на 8-12 день уроьоиь НОЛ остается по-прекнеау высоким.
Пнтс-нсполнрция процессов ПОЛ при глаукоме лодгвсрадастея у силе-
нием хемиламинесцепции (ХЛ). В сыворотке крови больных глаукомой спонтанная ХД повышена в 1,56 раз, светосумма ХЛ, инициированной пе- ■ рекисыэ водорода и двухвалентным железом, также увеличивалась в среднем в 1,6 раза. В гомогенате тканей дренажной системы глаз светосумма ' ХЛ, инициированной перекисью водорода, увеличивалась у больных глаукомой в среднем в 2,8 раза. Светосумма ХЛ, инициированной двухвалентныЯ яелезоы, в тканях дренажной зоны глаукоматозных глаз снижалась в 2,73 раза, что мозкет быть обусловлено неодинаковой чувствительностью липидных компонентов сыворотки крови и тканей дренажной зоны глаз к ионам иелеза.
Существенных различий интенсивности индуцированной вспышки ХЛ у больных с открыто- и закрытоугольной формой глаукомы не выявлено. У больных с дадекозшедшей и терминальной стадиями обеих глаукомы величина светосуммы вспышек ХЛ била несколько больше, чем у больных с начальной и развитой стадиями, что свидетельствует об усилении ЮЛ в продвинутых стадиях болезни.
Сравнение ХЛ тканей дренажной системы и сыворотки !гровк больных глаукомой показало, что в целом характер кривой хемилюг.шнесценцпи гомогенага соответствовал профилю кривой ХЛ сыворотки крови, но высота амплитуды вспыли: ХЛ, индуцированной ионами гелеза, была значительно нике, чем в сыворотке (?/- 0,05), как и величина, свстосуыьи ее всшдшш (Р 0,05).
У больных, перенесших острый приступ закрытоугольной глаукодш, светосумма вспшзк ХЛ при введении двухвалентного г;слеза увеличивалась в сыворотке крови и в тканях дренажной зоны глаз по отношению к контролю и во внепрпступный период. Свечение сыворотки крови в присутствии ионов двухвалентного железа обусловлено перекислим окислением л>шопротеидов (Т.В.Котенко и др., 1979; Б.Г.Ляшсов, 1.305). У 'е-ние ХЛ, индуцированной ионаш хелеза, у большее о остри« приступов
глаукомы, возможно, связано с тем, что исчерпывается фонд тканевых антиоксидантов.
Усиление перекисной хеш«шшшесценции указывает на увеличение скорости зарождения цепи свободнорадикального окисления липидов, а также на ускорение расходования продуктов ПОЛ вследствие их взаимодействия с природными антиоксидантами (Ю.А.Владимиров, А.И.Арчаков, 1972; Г.А.Бабенко и др., 1963).
В сыворотке крови большие первичной глаукомой выявлен дефицит витамина £, степень которого не- зависела от формы глаукомы, но коррелировала со стадией болезни: у бояьннх с' начальной стадией уровень витамина Е составлял 66,5% от контроля, а с далекозашедшэй - 76$. Снижение уровня токоферола, особенно на позднем этапе развития глаукомы (до 0,66+0,02 мг$> против 0,96+0,04 в контроле), по Есей вероятности, отражает истощение антиоксидантной защиты.
Выявлена обратная корреляционная связь мевду уровнем продуктов ПОЛ и концентрацией токоферола в-крови (для ЭДЦА г= -0,41).
Отражением недостаточности витамина Е является усиление перекис-ного окисления мембранных липидов, ведущее к поврежден!® клеточных мембран и проявляющееся, преэде всего, в снижении резистентности эритроцитов. На этом эффекте основан косвенный метод оценки обеспеченности организма витамином Е, который заключается в изменении степени гемолиза, развивающегося спонтанно (В.Б.Спиричев и др., 1979). Метод использован нами для определения соотношения ЦЦА/гемолиз, характеризующего патологические изменения состояния цитоплазматических мембран. В начальной стадии обеих форм первичной глаукомы это соотношение составило в среднем 3,8+0,3 и не отличалось от контроля, прогрессировать болезни вызывало его повышение до 6,5+0,7 в далекозашед-ией стадии. В период острого приступа соотношение ЗДА/геыолиз еще более повышалось (до 3,54+0,06), что, по-видимому, связано с задержкой
в клетке ВДА, способного связывать липида и белки момбраи, повышая их вязкость, жесткость, уменьшая способность к деформации, снижая активность многих ферментов (У.Прайор, 1975)..
Важными компонентами шниокислктельной сиетош являются фораеь-ты супероксщцщсмутаза (СОД), глутатионнероксидаза (П10), глутатион-редуктеза (ГР), каталаза (КАТ), физиологическая роль которых состоит е разрывши'различных перекисей и обезвреживании метаболитов ШЛ, Результаты исследований активности антиокислительной системы эритроцитов и лимфоцитов предетавлены в таблице 2.
Таблица 2
Активность антиокислительных ферментов крови больных глаукомой
Показатели
1-
!контрольная! | группа {
Обслоруемыв группы
!
1<?ткрыто-I угольной
Больнее глаукомой.
'{закрыто- 1 1угольной 1
с острым приступом
Эритроциты;
СОД, ед/мл
КАТ, ед/мл
ГШ, ыкМ /час/м
ГР, НАДШ/мл
обшие 5Н -группы, мвд/нл
¿¡-^-группы, мкМ/ыл
Лимфоциты; КАТ, од/*0б кл ГШ, ика /час 10й кл
а = 30 243,0440,8 139+18 49,1+4,1 1,32+0,2
2,1+0,1 3,0+0,2
п « 21 1,52+0,24
п = 63 406,0+47,1* 269+68* 56,3+4,1 1,03+0,15
1,9+0,2. 2,9+0,3
п -"44 2,18+0,41
3,25+0,32 3,9Ь+0,65
18,1+2,2 17,96+1,62
0,53+0,05 0,46+0,04
1,03+0,16 0,42+0,22
ДССТОГ;Ср!ЮСТЬ по отношению к контроля, Р-
ГР, мхи НАД-2Н/ Ш-» кл
¿Нтгруппи, №-¿5/ 10° кл
¿Чс-1'рупгш, мкМ/ 10° кл
п = 43 436,6+41,3* 195+39 72,4+3,6* ' 1,14+0,16
1,8+0,21 3,1+0,4
п = 19 1,56+0,26
3,1+0,92
15,0+2,3
0,45+0,07
1,29+0,2
10,05.
п = 27 365,2+41,2* 97,5+2,1* £5,1+11,1* 0,87+0,1*
1,4+0,2* 3,6+0,3.
- 9 1,3+0,21
4,28+0,34*
7,68+1,1*
0,34+0,07*
1,0+0,17*
У больных глаукомой значительно (в 1,7-1,8 раза) по сравнению с контролем повышена-активность супероксидцисмутазы в эритроцитах крови, активность каталазы повышена в 1,94 раза у больных с открыто-угольной и в 1,4 раза у больных с закдатоугольной глаукомой.
Вместе с тем, анализ результатов исследования показал, что у больных закрытоугольной глаукомой четко прослеиивается снижение активности каталазы и глутатионредуктазы от начальной к далекозашед-шей и терминальной стадиям, в период острого приступа наблюдается' достоверное снижение активности указанных энзимов и активация глута-тионпероксидазы. Аналогично меняется активность глутатионредуктазы и глутатионпероксидазы в лимфоцитах у больных с острым приступом.
Нарушение синхронной работы ГР и ГШ ( г= -0,51) может повлечь за собой уменьшение запасов восстановленного глутатиона, а, следовательно, повреждения глутатионпероксидазной реакции.- Изменение функционирования одного из ферментов является предпосылкой для накопления промежуточных '»продуктов ПОЛ, инактивирующих тиоловые ферменты.
У больных закрытоугольной глаукомой- уровень сульфгидрильных групп снижается в эритроцитах и лимфоцитах при остром приступе глаукомы, что, по-видимому, представляет собой сдвиг патологического характера. Повышение активности суп ер с к с идди ему тазы и глутатионпероксидазы, вероятно, может рассматриваться как компенсаторная реакция. Можно думать, что активирование этих ферментов направлено на повышение эффективности антиокислительной системы и тем, самым на снижение повреждающего действия перекисного окисления липидов.
Отражением снижения глутатионпероксидазной активности в тканях дренажной зоны склеры и водянистой влаге у больных _глаукомой является уменьшение суммарной пероксидазной активности (табл.3). Как'видно из таблицы, суммарная пероксидазная активность водянистой влаги у больных глаукомой была достоверно ниже, чем в трупных глазах.
Таблица 3
Суммарная пероксидазнал активность водянистой влаги и тканей дренажной системы глаз
Исследуемые объекты
Водянистая влага! Ткани дренажной системы
Чпроб ед/мл[Число блоков¡СПА, ед/мг ткани
Трупные глаза
Глаза больных глаукомой:
открытоугольной
закрытоугольной
с острым приступом
18 1,67+0,16 22
27 1,13+0,21* 26
8 1,09+0,2* 9 10 1,16+0,17* . 9
9 0,79+0,12* О
1,43+0,21
1,21+0,34 1,11+0,22 1,25+0,16 0,84+0,24*
Достоверность по отношению к контролю (Р ^ О.ОЬ)
Существенного различия СПА в тканях дренажной зоны и водянистой влаге глаз в зависимости от формы глаукомы не выявлено. Анализ результатов в зависимости от стадии 'болезни показал, что при далеко зашедшей и терминальной глаукоме уровень СПА иногда снижался почти в 2 раза по сравнению с начальной стадией. Самый низкий уровень СПА во влаге передней камеры и в тканях дренажной систем.! глаз по сравнению с контролем отмечен у больных, оперированных по поводу острого приступа закрытоугольной глаукомы; после купирования острого приступа пероксидазная активность соответствовала' ее з'ровню во вне-приступный период.
Как показали результаты наших исследований, важным патогенетическим звеном острого приступа закрытоугольной глаукомы является изменение проницаемости мембран лизосом и активация лизосомальных ферментов (табл.4). У обследованных больных максимальное значение активности кислой фосфатазы, катепсина Д и ДНКазы приходилось на 1-2 сутки острого приступа глаукомы.
Таблица 4
Активность лизосомальных ферментов крови больных глаукомой
(в мкД/мл)
!
Показатели !_ Обследуемые группы_
¡контрольная ;_больные глаукомой
( группа 1 1 г-
Кислая фос&а-
таза " 1,17+0,07 2,46+0,5* 2,13+0,27 3,08+0,57*
Катепсин Д 9,3+1,8 13,7+1,04 12,29+1,1 21,47+2,05*
ДНКаза 1,4+0,1 2,15+0,36* 1,57+1,1 2,4+0,35*
РНКаза 9,5+1,4 14,74+2,4 17,1+2,7* , 15,92+2,7*
rpj/uua !открытоуголь;закрытоуголь-; острый прис-! п = 01 iная п = 47 тая и = 42 !туп п = 13
* Достоверность по отношению к контролю (Р<с0,05).
В то ае время активность РНКазы, хотя и не достигала высоких значений в перЕые сутки острого приступа, в последующем, после купирования приступа, в отличие от других ферментов, повышалась, сохраняя стабильно высокий уровень.
У больных с Ш-1У стадией обеих форм глаукош и при остром приступе закрытоугольной глаукош наблюдался параллелизм между активностью лизосомальных ферментов и накоплением продуктов ПОЛ.
Повышение в 1,7 раза активности кислой фосфатазы, выявленное цктофлгоориметрически,в тканях дренажной системы глаз в период острого приступа свидетельствует о патогенетической роли указанного энзима в развитии приступа. Одновременно в этих тканях наблюдался выброс серотонина (0,78+0,03 усл.ед. против 0,26+0,01 в контроле).
Стабилизирующее действие на лиэосомальные мембраны оказывает цАШг (Б.5.Коровин, 1982; Н.А.Федоров, 1979). В период острого приступа в сыворотке крови на)¿и выявлено достоверное увеличение цА/.Э (23,0+0,43 пмоль/д против 12,6+2,3 в контроле) па фоне повышенного
цГМФ (9,1+1,6 против 5,3+0,7).
Косвенное отношение к процессам ПОЛ, усиливающимся при гнпок-сии, по-видимому, может иметь вещество, содержащее сульфогруппу, впервые выявленное наш в образцах сыворотки крови здоровых и больных глаукомой и идентифицированное как хлорамин-Т-тригндпат.
Существенное повышение уровня этого вещества в сыворотке крови больных первичной глаукомой по сравнению с гкпертензией позволило использовать его определение как критерий в дифференциальной диагностике глаукомы и гипертензии (Положительное, решение ГоскошзобретениЙ от 21.06.90 г. на "Способ диагностики глаукомы").
2. Состояние .клеточного и гуморального иммунитета у больных первичной глаукомой
■Полученные нами данные выявили изменения показателей как гуморального, так и клеточного иммунитета у больных первичной глаукомой по сравнению с донорами соответствующего возраста (табл.5). "
Изменения клеточного иммунитета .проявились в основном в снижении количества Т-лимфоцитов'. При открытоугодьной глаукоме выраженная Т-лимфопения встречалась чаще, чем при закрытоугольной и определялась уже в начальных стадиях. Указанные изменения у больных закрытоугольной глаукомой в период острого приступа наблюдались у 87$ больных.
Есть мнение, что депрессия иммунных ответов может быть результатом изменения свободнорадикальных параметров иммунокомпетентних клеток (А.Я.Кульберг, 1985; А.Б.Дкунелоз, 1988; А.А.Нелаева, 1990).
Обнаруженные в крови больных глаукомой лимфоциты, сенсибиянэиро-'санные к тканям дренажной зоны склеры и увеа, появляются уже в начальной стадии болезни. Их уровень у больных с открытоугояьней глау-кс.чой снас, .чем при закрытоугольной. В период острого приступа за-
Таблица 5
Иммунологические показатели у больных первичной глаукомо
Исследуемые показатели
Обследуемые группы
контрольная группа
больные глаукомой
отктатоугольнойI закрытоугольной| с остри.! приступом
М+ т
М±ш
М± т
М± ш
29 29
16 16
56,1+1,3 1066,8+30,0 11,8+0,8 224+16,1
1,2+0,4
27,0+8,8
1,4+0,4
Сыворотка крови: Т-лиыфоциты, кл/мкл
В-лимфоциты, кл/мкл
Лимфоциты,сенсибилизированные
к трабекулярной ткани, кл/мкл
к увеальной ткани,, кл/мкл
Иммуноглобулины, мг%: а А М
Иммуноглобулин Е, КЦ/л
Ткани дренажной систеш глаз: суммарные иммуноглобулины ■
иммуноглобулин Достоверность по отношению к контролю, Р-^0,05
105 105
26 26
46,8+1,2 * 780+29,3* 9,0+0,4 150+6,7*
10,0+0,9* 181+22,6* 8,1+0,8*
34,0+9,8
34 1460+86,8 139
34-197,0+10,8 139
34 93,0+6,8 139
21 23,6+3,7 51
2,65+0,31 2,7+0,45
71 71
25 25
133+12,4*
1533+60,5 87
273+12,6* 87
136+9,5* 87
57,0+9,9* 32
48,6+1,8 * 668+84,2* 9,6+0,4* 158+18,5*
5,4+0,7*
87,0+11,1*
4,7+0,7*
73+11,2*
1516+53,3 219,0+8,3 120,0+7,4* 51,8+8,9*
3,56+0,36 3,47+0,25
32 32
14 14
23 23 23 16
49,1+1,8* 838+42,4* 9,4+0,3* 166,1+9,3*
7,3+0,4* 121,0+8,1* 9,6+076* 148+7,1* 2673+20,3* 342+27,1* 144,1+14,6* 67,3+0,99*
5,79+0,16* 7,0+0,28*
1
крытоугольной глаукомы, число лимфоцитов, сенсибилизированных к тра-бекулярному и увеальному антигенам, увеличивается по сравнению с внеприступньм, что может свидетельствовать об усилении в этот период иммунных реакций против собственных тканей глаза.
Частота обнаружения высоких показателей сенсибилизации к трабе-кулярному антигену у больных огкрытоугольной глаз'комой составила 81,5%, к увеальному антигену - 73,]$. У больных закрытоугольной глаукомой уровень лимфоцитов, сенсибилизированных к антигенам из тканей трабекулы и увеа превышал данные контроля у 45,55 и 25% обследованных соответственно. В период острого приступа глаукомы высокое со держание антигенсенсибилизированных лимфоцитов определялось у всех обсдедованных больных (100%). Преимущественное распределение сенсибилизированных к глазным антигенам лимфоцитов в популяциях незрелых малодифференцированных клеток (нулевых) может свидетельствовать о развитии специфического клона лимфоцитов в ответ на антигенную стимуляцию.
Изменение аутотолерантности к органоспецифическим антигенам тка ней глаза, возможно, обусловлено нарушением механизмов иммуносупрес-сии, осуществляемой сенсибилизированными к этим антигенам лимфоцитами, так как имеются сведения об ослаблении супрессивного контроля Т-системы иммунитета у больных глаукомой (И.А.Захарова, 1965).
Нарушение гуморального звена иммунного ответа проявлялись в ст кении уровня В-лимфэцМЯОБ у больных открытоугоЛьной глаукомой, начиная с развитой стадии процесса, в то время как при закрытоугольной форме достоверные различия отмечены лишь при П1-1У стадиях болезни.
Общие тенденции дисиммуноглобулинемии при обеих формах глауком проявлялись в увеличении уровня иммуноглобулинов классов А и М при умеренно повышенном содержанки иммуноглобулинов класса о, преимущес вснно у больных с далекозашедией и терминальной стадиями, и пммуно-
глобулинов Е - у больных с начальной и развитой стадиями.
Обращает на себя внимание тот факт, что при остром приступе закрытоугольной глаукомы чаще (Рл 0,05), чем при хроническом течении болезни выявляется гиперпродукция 1е А и Iв 0. Концентрация иммуноглобулина Е в отот период была в 2,3 раза выше показателей контроля и на 20% выше, чем у больных с хроническим течением закрытоугольной глаукомы.
Повышение концентрации иммуноглобулина Е в сыворотке крови объясняют недостаточной функцией Т-супрессорной субпопуляции (Л.М. Гарумова и др., 1989), поэтому можно предположить, что высокий уровень Е у больных с острым приступом глаукомы также отражает патогенетические механизмы, связанные с депрессией Т-нлеток, выявленной в этот период.
В тканях дренажной системы глаз при остром приступе закрытоугольной -глаукомы с помощью метода иммунофлюоресценции выявлялась локализация иммуноглобулинов с, А, М. Во всех образцах трабекул наблюдалось свечение, нередко диффузно пропитывающее отечную ткань. Желто-зеленая флюоресценция иммуноглобулина а определялась в основном в зонах альтерации тканей.
Во внеприступный период также определялись иммуноглобулины А и М, что же касается хб с, то он обнаруживался непостоянно (из 14 исследованных образцов лишь в 4),
3. Участие процессов ПОЛ и иммунологических реакций в развитии острого приступа закрытоугольной глаукомы
Как показали наши исследования, при остром приступе закрнтоуголь-
*
ной глаукомы имеются характерные особенности, выражающиеся в степени изменений отдельных показателей ПОЛ л компонентов антиоксидантной систс?/ы (табл.6). В период острого приступа отмечается значительное
Таблица 6
Показатели обмена веществ у больных первичной закрытоугольной глаукомой в сравнении с контролем
Закрытоугольная глаукома
Показатели !вне присту- г острый {Ь—12 день
! па |приступ ¡после прие-! тупа
Сыворотка крови: МДА II ш И
ГПЛ 111 11 111
хемилюминесценция И ш II
витамин Е и 11 II
кислая фосфатаза и ш 1
катепсин Д 1 111 I
ДНКаза I и 1
РНКаза и 11 111
цАШ> -плазмы - ш I
цГМФ плазмы 1 II 1
Эритроциты: ЬЩА II 111 11
ГШ1 и 111 111
супероксиддисмутаза ш ш ш
каталаза 1 и ш
глутатионпероксидаза п 111 11
глутатионредуктаза - и -
общие зн-группы - «
дисульфидные группы - - -
Лимфоциты: ВДА и ш 11
ГШ 1! ш
каталаза - - -
глутатионпероксидаза - 1 -
глутатионредуктаза ' . 1 ш I
общие ЗН-группы - и I
дисульфидные группы - и I
Ткани дренажной системы: № 11 •
хемилвминесценция
кислая фосфатаза - ш 1
серотонин 1 ш 1
суммарная пероксидазная активность | ш 1
111 - Повышение, Ш - снижете показателей различной стелет, — - отсутствие изменений.
накопление 14ДА и ГШ в сыворотке, эритроцитах и лимфоцитах, снижение активности каталазы и глутатйонредуктазы крови, повышение активности кислой фосфатазы и катепсина Д, подъем уровня циклических нуклео-тидов й сравнении с данными больных, обследованных вне приступа, й с контролем.
В этот период выявлены существенные изменения в тканях дренажной зоны склеры: усиление хемилюшшесценции на фоне снижения йероксидаз-ной активности, цитодеструкция, выход Кислой фосфат&йы й серотониНа.
Помимо указанных метаболических нарушений; у больных 8 острым Приступом закрктоугольной глаукомы определяются сдвиги в йЩ/нНой системе: это снижение содержания Т-лкмфоцитоп и увеличение числа лимфоцитов, сенсибилизированных к тканям глаза, Повышение уровня иммуноглобулинов в'сыворотке и тканях дренажной системы глаза (табл.7)
! Таблица 7
Иммунологические показатели у больных закрытоугольной глаукомой в сравнении с контролем
Показатели ' '¡, Зак^тотгольная глаукома
вне прис- I острый ¡8-12 день ! тупа } приступ ¡после пркс-___________________ _!_!_! тупа_
Т-лимфоциты и ш II
В-ЛИМфОЦИТЫ и II III
Лимфоциты, сенсибилизированные: 11
к трабекулярной ткани 11 111
к увеальной ткани и ш и
Иммуноглобулины сыворотки крови:
1] — ш -
А - ш и
м II 111 11
Е и ш и
Ткани дренажной зоны глаз:
суммарные тохуноглобулинн п ш II
) М.Гу'Н 01Ч' С б у Л И Н О i III и
II! - ПовшаниеДЦ - снижений показателей различной степени, — - отсутствие изменений.
Таким образом, как показывают исследования, общие и местные нарушения метаболических и иммунологических процессов при закрытоугольной глаукоме в большей степени выражены в период острого приступа. После купирования приступа на 8-12 день исследуемые показатели в основном соответствовали уровню внеприступного периода.
На основании биохимических, иммунологических и патоморфологичес-ких исследований, проведенных нами у больных глаукомой, а также с учетом данных литературы, разработана концепция патогенеза острого приступа закрытоугольной глаукомы, схема которой представлена на рисунке.
Основными метаболическим! звеньят в цепи развития острого приступа глаукомы являются:
1. Нарушение нейрогуморальной и эндокринной регуляции метаболизма, выраженные сдвиги в системе ПОЛ-антиоксиданты.
2. Повышение проницаемости зслеточных мембран, цитодеструкцкя, нарушение структуры коллагена в тканях дренакной системы глаза.
3. Аутосенсибилизация, аутонммунизация организма,реактивно-воспалительный компонент в тканях дренакной системы.
Известно, что острый приступ закрытоугольной глаукомы является следствием обтурации путей оттока водянистой влаги. Повышение внутриглазного давления у лиц, предрасположенных к закрытоугольной глаукоме, могут вызвать реакции на различные эндогенные к социальные факторы, изменения окружающей среды (температура, атмосферное давление, отрицательные эмоции к др.) (З.А.Алиева и др., 1960; Ф.Я.Гуламова, 1966; НухаЬегй ех а1., 1981; ^опаа( 1966). Указанные реакции происходят при участии системы гипоталамус-гипофиэ-надпочечники (Е.Т.Ми-хеева, 1981; И.Н.Михейцева, 1989; В.А.Евтушенко, 1990;Ну1<1Ье^ л 1967).
í
ЭКЗО- И ЭНДОГЕННЫЕ ФАКТОРЫ
ч
МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ] ПАТОГЕНЕЗА ОСТРОГО ПРИСТУПА ЗАКРЫТОУГОЛЬНОЛ ГЛАУКОМЫ
За П о
X р
я
' x о
Как компенсаторную реакцию, направленную на снижение напряжения адренергических систем при остром приступе, можно рассматривать значительный подъем уровня цАМФ в сыворотке крови, при одновременном умеренном повышении уровня цГМФ. Выявленная при этом несбалансированная активация процессов перекисного окисления липидов на фоне ан-тиоксидантной недостаточности может быть, по-видимому, следствием как общих, так и локальных циркуляторных нарушений. Обладая высокой реакционной способностью, продукты ПОЛ являются одним из факторов, наиболее повреждающих клеточные мембраш. Окислительное повреждение клетки может обусловить также снижение в периферической крови активности каталазы и глутатионредуктазы.
В связи с зтим активация процессов ПОЛ и угнетение антиокислительной активности (СНА) в тканях дренажной системы глаз в период острого приступа может стать одной из причин отека этих тканей.
Действительно, как показали наши морфологические исследования блоков дренажной зоны склеры, при остром приступе определяется значительный межтрабекулярный отек. Среди отечной и разволокнениой ткат видны расположенные гнездно и единично тканевые базофилы (тучные «тетки, фибробласты).
Клеточные системы реагируют на воздействие агентов, нарушающих проницаемость мембран повышением секреции лизосомальных ферментов.При этом в тканях дренажной системы цитофотометрически было подтверждено увеличение активности кислой фосфатазы в среднем в 1,6 раза. Гистохи-мически определялось тотальное распространение высокой активности кислой фосфатазы, включая эндотеллальные клетки и соединительнотканные волокна. В сыворотке крови в период острого приступа, как показали наши исследования, наблюдалось достоверное (более, чем в два раза) повышение активности кислой фосфатазы и катепсина Д.
Вполне вероятно, что повышение активности лизосомальных фермен-
тов при остром приступе глаукомы приводит к расщеплению белков, иук- 1 леиновых кислот до промежуточных продуктов и является, по-видимому, одним из механизмов развития в тканях дренажной системы дегенеративно-дистрофических процессов.
Допускается, что активация ЮЛ может служить одной из причин освобождения биологически активных веществ из тучных клеток.
Нами показано, что при остром приступе закрытоугольной глаукомы тучные клетки и макрофаги трабекул находились в состоянии дегрануля-ции. В трабекуле выделялись тучные клетки с интенсивными метахрома-тнческимк гранулами, содержащими серотонин. Флюорометрически определено,' что уровень серотонина в трабекулярных тканях в этот период повышался в 2-3 раза по сравнению с внеприступным периодом и контролем. В период острого приступа уровень суммарных иммуноглобулинов и иммуноглобулина G при флюорометрическом исследовании тканей дренажной! системы был повышен в 2-2,5 раза по сравнению с контролен.
В сыворотке крови во время острого приступа наблюдалась поликло-нвльная гиперглобулинеыия причем наиболее значительным
было повышение lg Е и lg G.
Образование иммунных ког.шлексов с антигенами, в качестве к о торг л выступают структурно измененные ткани дренажной систеш глаз, отложение иммуноглобулинов на цитоплазматических мембранах, изменение концентрации веществ со свойствами свободных радикалов приводит к нарушению структуры и функции биомембран клеток, лизису коллагено-вых фибрилл и выработке антител.
В ответ на попадание продуктов'белкового метаболизма в кровь возникает реакция на трабекудярную ткань в виде появления сенсибилизированных лимфоцитов. В период острого приступа высокое содержание антигенсеисибилиэированных лимфоцитов в крови определялось у всех обследованных Сольных.
Учитывая закономерности протекания аутоиммунных реакций (И .Г. Нрыгин и др., L980), можно полагать, что комплексы антиген-антитело, аутоиммунные лимфоциты могут оказывать повреждающее действие на уке измененные трабекули и окружающие, их ткани, способствуя проявлению ' реактивного воспаления, основу которого составляет развитие реакций гилерчувствитпьноети немедленного тина.
Kai: доказали Л.Л.Нестеров (1967, 19Ü2) и И.н.Шевелеп (1956), 1юпгтлит0льный компонент острого приступа закрытоугольной глаукомы хкрнктериау&тея соотватствуедий клинической картиной я виде задних синений, гониоейнехий и экссудата в области зрачка.
Эффективность медикаментозного лечения первичной глаукомы, сшшуащого антиоксиданты и тактивич
Исходя из получошгьк наш данных о дефиците эндогенных антиокси-дантов и пошшиши продуктов ИОЛ в сыворотке крови и тканях дренагшой систем! глаз больных глаукомой, патогенетически обоснованным является использование в лечении этой болезни витамина iü (¿¿-токоферола) и эмоксипина, обладающих антиоксидантным действием, аффективно ингиби-рующих реакции 110J1.
Наряду с этим проведенные нами исследования подтверждают значение иммунологических факторов в развитии первичной глаукомы. Учитывая, что в патогенезе иммунной недостаточности важная роль принадлежит клеточному звену, большой интерес представляет препарат тимуса тактивин, главным фармакологическим эффектом которого является стимуляция созревания и дифференцировки претимоцитов в Т-клетки.,
■ Нем принадлежит приоритет использования тактивина а лечении больных открытоугольной глаукомой (A.c. № 1462694 на "Способ лечения компенсированной открытоугольной глаукомы"), вместе с тем, представляет интерес изучение эффективности совместного применения тактивина с препаратами витамина Е.
Эффективность проводимого лечения оценивали по состоянию центрального и периферического зрения, а также по изменению основных показателей ПОЛ и иммунной системы, определяемых слепым методом. ВГД у всех больных глаукомой было нормализовано оперативным вмешательством либо местной гипотензивной терапией.
Лечение, включающее витамин Е (<=с_токоферол), получали 33 больных глаукомой (20 - с открытоугольной, 13 - с закрытоугольной формой), аевит получали 43 больных (27 - с открытоугольной и 16 - с закрытоугольной глаукомой).
Витамин Е назначали по 100 мг масляного раствора изолированно или в сочетания с 0,035 г витажна А (аевит) ежедневно внутрь или внутримышечно в течение 10-12 дней в стационаре, 20-25 дней анбула-торно.
Содержание витамина Е в сыворотке кроем больных, получавших токоферол и аевит, повысилось в среднем на 15% по сравнении с исходит* (0,82+0,03 мг% против 0,71+0,04 до лечения, Р^0,05). Уто указывает на то, что используемая доза была терапевтической и могла оказать влияние на метаболические процосси.
Отмечено, что после лечения антионсидантятщ уровень МДА. и ГПЛ в эритроцитах и сыворотке крови болыпя открытоугольной глаукомой снижался в среднем на 40$ (Р-^0,05) по сравнению с данными до лечения. У больных закрытоугольной глаукомой наблюдалось достоверное снижение продуктов ПОЛ в эритроцитах'1фови: ЦЦА унспыиался в среднем на 50%, ГПЛ - на 30$ и более от исходного уровня. Таким образом, прп-гленешю витамина Е снижало пероксидац^ю, хотя и не приводило к полной норчалкпгнрли содержания продуктов ПОЛ в крови.
После проведенной терапии отношение ВДА/гемолиз, косиснно :<•'-растеризующее структурные изменения в мембранах эритроцитов, ушнь-гшлось Ii 1,5 раза. Дянаотка втого показателя у 77,6е? из 56 болыялх,
получавших препараты витамина Е, совпадала с полученным эффекта?.!, что и послужило основанием для разработки критерия, подтветеед&щего целесообразность включения токоферола к аевита и комплексную терапию больных'глаукомой. С этой целью у 2В больных глаукомой до назначения общей терапии определяли отношение «ЩА/гемолиз до и после инкубации эритроцитов с витамином Е, либо аевитом. 19 больны;.!, у которых в пробе с витамином наблюдалось уменьшение коэффициента :,!ДД/ гем*>-лиз, было проведено лечение указанным препаратом; у из них отмечено улучшение либо временная стабилизация зрительных функций. У четырех больных, у которых при предварительном лабораторном исследовании не наблюдалось уменьшения коэффициентов ¡.'ДА/гемолиз, указанное лечение не повлияло на состояние зрительных функций.
Исследование активности антиокислитольных ферментов эритроцитов у больных открыто- к закрктоугольной глаукомой, получавших витамин Е и аевит, показало, что их активность достоверно ке отличалась от данных до лечения.
Активность лизосомольных ферментов после лечения витамином Е, несмотря на общую тенденцию снижения (Р— 0,05), наиболее значительную в отношении РККезы '.на 53,Ьд.) и ДО{азы (на 2б,4"з), была кшэ, чем в контрольной группе.
Анализ результатов исследования иммуноглобулинов в сывэротко кропи больных первичной глаукомой показал, что препараты ьптампые Е существенно не влипли на уровень и'.г.гуноглойу.глноз а , А, 1.'. и Е как при открытоугольной, так и при закрктоугольной глаукоме.
Следует отметить достоверное увеличение относительного чнель Т-лимфоцитов в криви, после лечения аевитом, что, по-видимому, связано с положительны:« сдвигами реакций ПОЛ в результате лечения аигк-окс/дактами, так как известно, что ипгибироваже процесс г, перекпеко-го окисления ляпидов благоприятно сказывается на показателях к.леточ-
ного и гуморального иммунитета (С.М.Дпешкова и др., 1989).
После лечения витамином Е острота зрения повысилась в 10 (из 4?) глаз (21,3%), визус не изменился в 32, снизился - з 5 глазах. Расширение границ периферического поля зрения наблюдали в 10 глазах (21,3^5; границы его в суммарных градусах после лечения составили 364+22,1° против 304,0+16,1° до лечения (Р-^0,05).
После терапии аевитом повышение остроты зрения отмечалось в 23 (из 76)глазах (30,3%), зизус не изменился в 48, снизился в 5 глазах. Расширение границ периферического поля зрения наблюдали в 30 глазах (39,5%), границы его возросли после лечения до.355,В+19,1° против 305,8+23,4° до лечения (Р-^0,05).
Существенных различий в клиническом эффекте у больных открыто-угольном и закрытоугольно'й глаукомой лосле лечения токоферолом не Еыявлено.
Терапевтический эффект был более выражен от применения аевита, чем при использовании витамина Е, что, вероятно, обт^ясняется сикер-гическим действием ретинола и токоферола, направленном на повышение устойчивости тканей к гипоксии. (Б.А.Лидер, 1966; Бгозйз еЬ з1.,19й9а
Эффективность комплексной терат:и, включающей эмоксипин, исследовали у 72 больных первичной глаукомой (отггрнтоугольиой - 47, зак-рытоуголькой - 25). Среди них одна группа больных (17 человек, 30 глаз) получала эмоксипин в виде парабульбарпых инъекций по 0,5 мл 1% раствора ежедневно I раз в течение 4-5 дней. Вторая группа (22 человека, 41 глаз) получала эмокекпин внутримышечно по 2,0 мл раствора ежеднэпно п течение 10-12 дне:;. Третьи группа (¿3 человека, 62
»
глаза) получала комплексное лечение, вклхкзвзее эчоксипкк вкутрихн-гочио + витакик Е или ас вит внутрь, в течение 1У-12 дней.
Анализ получении< данных покивал, что при гнуткгдзечном введении эмокенпина гылвлена тенденция к снижению уровня продуктов Г. С Л
крови по сравнений с исходным (достоверно снижался уровень ИДА в сыворотке крови с 3,25+0,23 до 2,5+0,1 нмоль/мл, Р~0,и5).
Сочетание двух антиоксидантов - эмоксипина и токоферола, обладает более выраженным действием, что проявляется в достоверном сни-1 жении продуктов ПОЛ как в сыворотке крови, так и в эритроцитах в среднем на 20-ЭД> (Р<£0,05). На активность антиокнелительных ферментов крови речение эмоксипином существенного влияния не оказывало.
У больных, леченных эмоксипином в виде парабульбарных инъекций, уровень суммарной пероксидазной. активности водянистой влаги повысился в 1,3 раза (Р<!0,0Ь). В тканях дренажной системы глаз, полученных во время гипотензивных операций у этих больных, как показало цито-фшюорометрическое исследование, отмечено уменьшение уровня кислой фосфатазы и серотонина в 1,5-1,7 раза по сравнению с данными до лечения (Р/0,05). Это согласуется с данными Марковски (1991), установившей высокую и быстро проявляющуюся местную антиокскдантную активность эмоксипина.
Сравнительный анализ результатов, исследования динамики поля ■ зрения при лечении эмоксипином в указанных выше трех группах больных глаукомой выявил расширение, границ поля зрении в 63,3%, 43,2% и 50% обследованных глаз соответственно, повышение остроты зрения в 60'/4 02,6% 61,4%.
У Ь (из 22) больных, получавших эмоксигаш (внутри.'.хшечно) и у .7' (из 33), леченных омоксипинои + витамином Е, улучшения зрительных функций не.отмечено.
Эффективность лечения эмоксипином больных закрыто- к открато-'угольной глаукомой была практически одинаковой. Стойкость клинического эффекта изучалась у 17 больных в сроки до 2-6 месяцев. Анализ показал, что уровень зрительных функций, достигнутый поели лечения эмоксипином, стабильно сохранялся не более'полугода. '
Основанием для проведения иммунокорркгирунцей терапии послужило резкое снижение содержания Т-клеток в периферической крови у больных глаукомой,
Учитывая, что более выраженные и ранние проявления иммунопатологии определяются йри открытоугольной глаукоме, лечение, включающее тактивии, получали 35 больных (52 глаза) открытоугольной глаукомой с прогро сиругацим течением болезни, 16 из них дополнительно получали витамин К. :
Для положительного эффекта тактивина было характерно достоверное повышение содержания Т-лимфоцитов в крови.
Среднегрупповой показатель содержания в сыворотке иммуноглобулинов о, А и М после лечения не отличался от исходного. Уровень иммуноглобулина Е существенно снижался, приближаясь к данным контрольной группы. Нормализация содержания всех исследуемых классов иммуноглобулинов отмечена у 22,8% больных.
Средний уровень витамина Е в сыворотке нрови больных, получавших тактивин, было таким же, как и до лечения (0,79+0,04 мг%); у больных, в комплекс лечения которых входил тактивин и Л-токоферол, уровень витамина Е достигал 0,64+0,03 мг% против 0,71+0,02 до лечения (Р-с. 0,05).
Результаты исследования системы ПОЛ-антиоксиданты показали, что после лечения больных с открытоугольной глаукомой тактивином в сочетании с витамином Е, отмечалось снижение уровня промежуточных продуктов ЮЛ в сыворотке и в форменных элементах крови - эритроцитах, лимфоцитах в среднем на 26% (Р/~ 0,05). В эритроцитах нормализовался уровень тиоловых групп и активность глутатионперокридазы,в лимфоцитах, кроме того, активность каталазы.
Острота зрения повысилась на 0,02-0,4 в 21 глазу, в 2В оставалась без изменений (в 10 из них острота зрения до и после лечения
была равна 1,0), снизилась -в трех.
Границу периферического поля зрения расширились на 30° и более в 27 глазах, не изменились в 22.
Спустя 1,5-2 года после курса лечения тактивином были обследованы II человек (16 глаз). В II острота зрения не изменилась в сравнении с данными при выписке, в 5 - снизилась.
Иммунологические показатели через 1,5-2 года после проведенной терапии тактивином были сниженными, однако аде оставались на уровне, превосходящем таковой у больных до лечения.
ВЫВОДЫ
'I. Установлено участие процесса перекисного окисления липидов в патогенезе открыто- и закрытоугольной глаукомы.
Отмечается активаций процессов ПОЛ в крови и тканях дренажной системы глаз по мере прогрессирования болезни, проявляющаяся в повышении уровня первичных и вторичных продуктов ПОЛ. Наибольшая активность 1ЮЛ имеет место при остром приступе закрытоугольной глаукомы.
Интенсификация ПОЛ с развивающимся дефицитом витамина Е в крови и дисбалансом в системе йнтиокислительных ферментов (СОД, КАТ, ГШ, ГР) формируют явления ыембранодеструкции, что проявляется нестабильностью мембран эритроцитов, увеличением соотношения ВДА/гемолиз.
Активация процессов ПОЛ, по-видимому, является фактором, способствующим возникновению других метаболических сдвигов у больных первичной глаукомой.
2. В крови больных глаукомой выявлено достоверное снижение уровня Т- и В-лимфоцитов и появление в ранней стадии болезни лимфоцитов, сенсибилизированных к тканям дренажной системы глаз.
Нарушение гуморального звена иммунитета выражалось в высокой частоте обнаружения в крови повышенной концентрации иммуноглобулинов
О, А, М. При остром приступе глаукомы гипериммуноглобулинемия в, А, Е определялась у 93% больных.
3. Выявлена активация лизосомальных ферментов - кислой фасфата-эы, катепсина Д, ДНКазы, РНКазы в сыворотке крови больных первичной глаукомой. Уровень активности указанных энзимов (кроме РНКазы) повышался по мере прогрессировать болезни при обеих формах глаукомы, достигая максимальных значений в период острого приступа закрыто-угольной глаукомы. ,
В тканях дренажной системы глаз у больных с острым приступом закрытоугольной глаукомы реакция на кислую фосфатазу усилена. Полученные данные указывают на повышение проницаемости мембран лизосом.
4. В плазме крови больных открытоугольной и закрытоугольной глаукомой выявлен дисбаланс циклических нуклеотидов (повышение цГМФ и снижение цШ>), более выраженный в далекозашедаей и терминальной стадиях.
В период острого приступа закрытоугольной глаукомы наблюдалось существенное повышение цАМФ, что, по-видимому, может рассматриваться как компенсаторная реакция, направленная на нормализацию клеточного метаболизма.
5. В клинической картине острого приступа закрытоугольной глаукомы проявляется аутоаллергический воспалительный компонент. Острый приступ закрытоугольной глаукомы характеризуется лабилизацией мембра тканевых базофилов (тучных клеток) и макрофагов в тканях трабекулы, выраженным экзоцитозом гранул, содержащих биогенные амины, что способствует альтерации и отеку этих тканей.
6. Установленное при первичной глаукоме снижение обеспеченност. организма витамином Е, повышение активности ПОЛ дает патогенетическое, обоснование для применения в лечении больных глаукомой с нормализованным ВГД антиоксидантсв (.«»(-токоферол, аевит). После курса лечения этими препаратами у ряда больных отмечено улучшение зрительных функ-
ций и тенденция к нормализации показателей ГОЛ. Дифференцированный подход к назначению витамина Е - терапии с помощью лабораторного теста ВДАУгемолиз позволяет получить временный положительный эффект у большинства леченных больных с возможностью проведения повторных курсов лечения. ^
7. Показан положительный терапевтический эффект эмоксипина при первичной глаукоме, проявляющийся в снижении в крови больных обеих форм глаукомы уровня продуктов ПОЛ. При парабульбарном введении эмоксипин оказывает стабилизирующее влияние на клеточные мембраны, что подтверждается уменьшением активности кислой фосфатазы и серотонина в тканях дренажной системы глаз при цитофлгаорометрическом исследовании. Временное улучшение зрительных функций при этом способе введения наблюдалось у большего числа больных (63,3$), чем при внутримышечном (43,2%). Результаты исследования дают основание рекомендовать эмоксипин для лечения больных первичной глаукомой.
8. Установлено, что совместное применение в терапии больных открытоугольной глаукомой иммунокорректоров и антиоксиДантов (такти-вин и витамин Е), помимо стимуляции Т-клеточного имцунитета, способ- . сгвует нормализации показателей перекисного окисления липидов и ан-тиоксидантной системы. Стабилизация зрительных функций у 69,7% (к
ных наблюдается в течение 1,Ь-2 лет. Назначение указанных препаратов показано при выраженном'клеточном дефиците и повышении в крови больных уровня малонового диальдегида.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
1. К определению иммунологического статуса больных глаукомой // Здравоохранение Казахстана. - 1983. - № '¿. - С. 25-27 (соавт. К|Г. Мустафина, Т.А.ДоСрица). |
2. Ферментный спектр внутриглазной жидкости при некоторых эаболе-
- ЗУ -
ваниях глаз // Заболевания оптических сред глаза: Сб.научн.тр. КазНйИ! ГБ. - Алма-Ата, хУ&4, - С. 60-62 (соавт. А.И.Гутенко).
Обеспеченность витамином В^ больных первичной глаукомой // Здравоохранение Казахстана. - 1984. - № 12. - С. 53-55 (соавт. Г.Г. Каржаубаева, <2.А.Рахметова).
4. Клинико-биохимические показатели сосудистой патологии при глаукоме // Патология сосудов и сердца: Сб.научн.тр.АГИУВ. - Алма-Ата, 19ЬЬ. - С. 87-90 (соавт. Ж.Г.Мустафина, Г.Г.Каржаубаева).
Ь. Содержание витамина К в сыворотке крови больных глаукомой // Тезисы докладов У1 Всесоюзного съезда офтальмологов. - М., 1986. -С. 24-26 (соавт. Г.Г.Каржаубаева).•
6. Иммунологическая реактивность больных первичной глаукомой //
У Межреспубликанская конференция аллергологов: Тез.докл. - Алма-Ата, 1986. - С. 181-182 (соавт. Т.А.Добрица).
7. Активность сукцинатдегидрогеназы и ее связь с обеспеченностью рибофлавином у больных глаукомой // 1У конференция биохимиков республик Средней Азии"и Казахстана: Тез.докл. - Ашхабад, 1986. - С. 75-76 (соавт. А.И.Гутенко, С^М.Урашева).
6. Значение исследования процессов перекисного окист<?ния липидов при глаукоме // Вестн.офтальмол. - 1986. - № 5. - С. 6-8 (соавт. Г.Г.Каржаубаева). - • .
9. Выявление, диспансерное наблюдение и реабилитация больных глаукомой в республике // Методические рекомендации. - Алма-Ата: МЗ Каз ССР. - 1987. - 13 с. ;соавт. Ж.Г.Мустафина, С.К.Жулмурзин, Т.К.Бота-бекова).
10. Иммунологическое исследование тканей глаза при глаукоме // Актуальные вопросы сосудистой патологии органа зрения: Сб.научн.тр. КазНИИ ГБ. - Алма-Ата, 1987. - С. 16-18 (соавт. Т.А.Добрица, Л.П.Ца-ревский).
11. Коррекция клеточного иммунитета у больных первичной глаукомой //• Офтальмол.журн. - 1987. - № 7. - С. 404-406 (соавт. Г.А.Ульданов,, Т.А.Добрица, Ж.Г.Мустафина).
12. Комплексное лечение больных первичной.глаукомой с применением антиоксидантов // Информационный листок. - Алма-Ата: КазНИИНТИ, 1988. - 3 с. (соавт. Ж.Г.Мустафина, Н.Г.Печулис).
13. О возможности применения тактивина в терапии первичной глаукомы // Вестн.офтальмол. - 1988. - № 4. - С. 22-24 (соавт. Т.А.Добрица, Е.А.Егоров, Ж.Г.Мустафина).
14. Иммунотерапия первичной глаукомы // Тезисы докладов У1 Украинской конференции по иммунологии и иммунотерапии. - Киев: Здоров'я,
1988.- - С. 83 (соавт. Т.А.Добрица).
15. Активность лизосомальных ферментов у больных первичной глаукомой // Совершенствование офтальмологической помощи населению: Сб. научн.тр. КазНИИ ГБ., - Алма-Ата, 1988. - С. 91-93.
16. Лечение первичной глаукомы антиоксидантными препаратами в условиях диспансерного наблюдения // Здравоохранение Казахстана. -
1989. - № 7. - С. 29-30 (соавт. Т.А.Добрица, Т.Н.Чекурова).
17. Иммунологический статус больных первичной глаукомой // Молекулярные и клеточные аспекты клинической иммунологии: Сб.научн.тр. II ЩМШ. - и., 1989. - С. 158-161 (соавт. Т.А.Добрица).
18. Антиперекисные ферменты лимфоцитов у больных с офтальмопато-логией // Аллергология и клиниче.ская иммунология: Сб.научн.тр. -Алма-Ата, 1989. - С. 102-104 (соавт. К.А.Кайнарбаева, Т.А.Добрица, С.М.Урашева).
19. Качественная и количественная характеристика лимфоцитов периферической крови больных с офтальмопатологией // Сборник научных трудов КазНИИ ГВ. - Алма-Ата, 1989. - С. 134-138 (соавт. Т.А.Добрица, К.А.Кайнарбаева, С.М.Урашева).
20. Об обеспеченности витамином Е больных первичной глаукомой // Актуальные вопросы питания и проблемы алиментарно зависимых заболеваний в республиках Средней Азии и Казахстана: Мат.научн.-практ.конф
- Карши, 1990. -С. 157-158 (соавт. Ж.Г.Мустафина). •
21. Иммуноглобулин Е у больных первичной глаукомой // Сборник трудов АГЙУВ, - Алма-Ата, 1990. - С. 177-178.
' 22. Биохимические показатели в оценке эффективности лечения вита: мином Е больных глаукомой // Тезисы докладов УШ съезда офтальмологов УкрССР. - Одесса, 1990. - С. 373-374 (осавт. Ж.Г.Муетафшт, Т.А.Доб-рица, С.М.Урашева).
23. Комплексная патогенетически ориентированная терапия'глаукомы' // Методические рекомендации. - Алма-Ата: МЗ КазССР, 1990, - 10 с. ^соавт. Ж.Г.Мустафина, Т.А.Добрица, Е.А.Егоров).
24. Значение исследования коэффициента накопления мало.чового ди» альдегида в эритроцитах при антиоксидантной терапии больных с офталъ-мопатологией // Сборник научн.-практ.работ юбилейн.конф. офтальмологов Чимкентской области. - Чимкент, 1990. - С. 84-85 (соавт. С.М. Урашева, Т.А.Добрица, К.А.Кайнарбаева).
25. Хемилюминесценция сыворотки крови и тканей дренажной зоны глаза у больных глаукомой // Актуальные вопросы борьбы со слепотой и слабовидением в республике: Сб.научн.тр. КазНИИ ГБ. - Алма-Ата, 1990.
- С. 152-158 (соавт. С.Н.Петрина, Е.К.Мамбетов).
26. Циклические нуклеотиды у больных первичной глаукомой // Там ж
- С. 158-162.
27. Метаболические и иммунологические аспекты в комплексной патогенетически направленной терапии больных открытоугольной глаукомой V, Физиология и патология внутриглазного давления: Сб.тр. П МОЛГМИ. -М., 1990. - 0. 76-61 (соавт. Т.А.Добрица, Ж.Г.Мустафина).
28. Микрометод комплексного определения лимфоцитов в капиллярной
крови. - Рук. деп. в НПО "Союзмединформ" 17.07:90. - » Д-20096 (со-авт. С.М.Урашева, В.К.Байсалбаева, Т.А.Добрица).
29. Иммунопатологические аспекты первичной глаукомы // Тезисы докладов I съезда иммунологов, аллергологов Таджикистана. - Душанбе,'
1991. - С. III (соавт. Т.А.Добрица).
30. Влияние <-' -токоферола и аевита на обеспеченность витамином Е больных глаукомой' // Тезисы докладов Всесоюзной конференции по клинической витаминологии. - М., 1991. - С. 202 (соавт. Ж.Г.Мустафина).
31. Клинические особенности и лечение острого приступа закрыто-угольной глаукомы // Методические рекомендации. - Алма-Ата: МЗ Каз ССР, 1991. - II с. (соавт. Ж.Г.Мустафина," Т.А.Добрица, Е.К.Мамбетов, Е. А.Егоров).
32. Клеточная и гуморальная иммунореактивность у больных закрыто-угольной глаукомой // Сборник научных трудов АГИУВ. - Алма-Ата, 1991. -С. IQB-III (соавт. Т.А.Добрица).
33. Эмоксипин в лечении первичной глаукомы // Вестн.офтальмол. -
1992. (соавт. Т.А.Добрица, З.А.Иманбаева, Е.А.Егоров).
Изобретения
1. Способ лечения компенсированной открытоугольной глаукомы / A.c. № 1482694 (соавт. Т.А.Добрица, Ж.Г.Мустафина, Е.А.Егоров).
2. Способ диагностики глаукомы / Положительное решение Госкомизо-бретений от 28.06.90 г. (соавт. Г.А.Дьякова, Ж.Г-Мустафина, Е.А.Его- , ров). ■"''•!
- Ь. Способ определения антигенсвязываицих лимфоцитов / Положительное решение Госкомизобретений от 27.09.91 г. (соавт. Б.Б.Каральник, 'В.А.Шамардин, Т.А.Добрица). :
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СРО - свободнорадикальное окисление
ПОЛ - перекисное окисление липидов
АОС - антиоксидангная система
МДА - малоновый диальдегид
ГПЛ - гидроперекиси липидов
СОД - суперсксиддисмутаза
ГПО - глптатионпероксидаза
ГР - глютатионредуктаза
КАТ - каталаза
ХЛ - хемилиминесценпир
5Н - сульфгидрильные группы
5-5 - дисульфидные группы
ДККаза - дезоксирибонуклеиновая кислота
РНКзэа - рибонуклеиновая кислота
цАМФ - циклический аденозинмонофосфат
цГ!а$ - гуаиозинмонофосфат
Отпечатано з АСПЙ закаг К 4274 тираз 1ВД эхаеипмрсз.
Отпечатано в АСПИ заказ ® 4274 тиран 100 экземпляров.