Автореферат и диссертация по медицине (14.00.17) на тему:Изучение взаимоотношений между оборонительным и пищевым поведением виноградных улиток: роль глюкозы и гастроинтестинальных пептидов



ОРДЕНА ЛЕНИНА АКАДЕМИЯ МЕДИЦИНСКИХ НАУК СССР НАУЧНО-ШЗЛЕЛОВАТЕЛЬСКМИ ИНСТИТУТ НОРМАЛЬНОЙ ФИЗИОЛОГИИ им. П.К. АНОХИНА

На права:: рукописи УЖ 612.021.6 + 612.316.7:547.964 .4: 594.382

Шевёлкин Алексей Валерьевич

ИЗУЧЕНИЕ ВЗАИМООТНОШЕНИЯ МЕЖДУ ОБОРОНИТЕЛЬНЫМ И ПИЩЕВЫМ ПОВЕЛЕНИЕМ ВИНОГРАДНЫХ УЛИТОК: РОЛЬ ГЛЮКОЗЫ И .

гастроитгестанальньк пептидов

2 4. оо .17 - нормальная фюиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

МОСКВА 1990

Работа вшо/шена в НИИ нормальной фиэкополм нм. П.К.Анохина АМН СССР

Научный руководитель:

доктор медицинских наук С.К. Судаков.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Ю.А. Фадеев, доктор онологических наук П.М. Балабан.

Ведущее учреждение: НИН экспериментальной медицины АМН СССР

Зашита состоится1" ■Л .. _________1990 Г.

в ¡0 часов на заседании Специализированного Ученого Совета Д.001.08.01 по нормальной физиологии при НИИ нормальной фгзиологда им. П.К.Анохина АМН СССР (Москва, юэооэ, ул. Герцена.

Д. 6) .

С диссертацией можно ознакомиться,.х> библиотеке Института. Автореферат разослан "____Ь^^Ь^г-____1990 г.

Учета*! секретарь Специализированного Совета доктор биолотчоскда наук

Т.Н. Белова

ОКИ/Я ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

• ¿етхзпьность,исследования. Изучение молекулярио-клето^шых механиэ-

• мов целенаправленного поведения является одной из актуяьпых проблем современной нейробиологии. Исследователями получены экспериментальные доказательства спеиис£ичности нейрофизиологических (Судаков К.В. И Др., 1973; Фадеев Ю.А. 1980, 1982: Швырков В.Б. 1382; Багуев A.C., 1984; Журавлев Б.В., 1986-, '¿[шркова Н. A, 1S87; Wount-castl V.B., 137Я) и нейрохимических (Андрианов В. 8., 1900; Анохин К.В., 1994; Судаков С. К, 1S85; ШерсТНев В. В. , 1985; Kupfermann I., 1970; Scheller R.ll. et el., 1984) механизмов определенних форм II отдельных стадий целенаправленного поведения животних.

¡Ьвестно, что между различшгмл видами поведенческой активности животных существуют тесные взаимоотношения (Котов A.B., 1382, 1987; БобрОВНИКОВ Л. В. , 1982, 1986; КореКЯН Т.П. >1 соавт. , 198В; Davis M.J. et al., 1974; Everett R.A. et ol. , 1992). Так, например, оборонительное поведение, как правило, доминирует над другими формами повелепчосксй активности. Вместе с тем, рядом авторов вняв лена зависимость выраженности оборош.тельнцх реакций животкгж от уровня гаыювой и половой мотиваций (Погорелом П. М, Хамнс Р, 1977; Емельяненко И. В. , 1977; Судаков С. К. , 1989; Lukowiek К., Frgedrean L. 1383 ; Lukowiak К., 1987). Однако, необходимо ОТМСТИТЬ, что молскулярно-клеточные механизмы взаимоотношения ряэлпчннх форм поведения остаются малоизученными.

Перспективным объектом для подобного рода исследований являются моллюски. Они облапают достаточно богатым поведенческим репертуаром. Идентифицированы нервные клетки, участвующие в нейрональном обеспечении оборонительного и пищевого, поведения этих животных (Балабан П. М. , Литвинов Е. Г. , 1977; Галагоша Г.Н. и соавт. , 198в; Карпенко Л.Д. И Яр,'198В; Cottrell O.A., Macon J.3., 1974; S.-Iioz-sa к., Zhuraviev v.t.., 1381). Описаны морфологические (Аракелоз Г.Г. И соавт., 1989; Knmenns G. et al.. 1985; Altrup U., 1987; Harnadi L. et ol . , 1987 И Др.), ЗЛеЧТрОфИЗИОЛОГИЧеСКИе (СОКОЛОВ E.H., Термаргарян А. Г, 1984 ; Логунов Д. Б., 1935; Konononko N.I., Osipenko c.N. , 1986 и др. ) и биохимические (Костюк П.Г. и соавт. , 1989; Борисова O.A., 19U9; Сторожук М.В. , 1989; Пивоваров A.C.-, 1989) характеристики этих нейронов, особенности их эргичности и

l-.'11/y

чувствительности к ряду нейрсмедиаторных соединений (Норекян Т. П. , Логунов Д. Б. , 1985; ЧИСТЯКОВЭ М. В. , 1988: S.-Rozsa К., 1984 я ар).

В последние годы в организме животных, в том числе и беспозвоночных были идентифицированы молекулярные факторы, относящиеся к классу регуляторшх пептидов ICbborue N.N. et al., 1982; Vigna S.H., et al., 1984: Campanelli J.T., Scholler R.H., 1987; Lloyd P.E., Connolly C.M., 1969; и др.). Исследованы молекулярные механизм действия ряда пептидов на активность идентифицированных нейронов (Кононенко H.H. , Осипенко O.K., 1988; Кудряшова И.В. , 1S89: ■ Cottre 11 G.A., 1980; S.-Rozsa К., Solntseva E.J., 1986; S.-Rozsa к., Dyakonovn T.L., 1987), изолированных мышц и внутренних органов моллгзсков (Weiss S. et al., 1984: Richmond J.E. et al. , 1986 И др.). Вместе с тем, недостаточно изучена роль большинства Пептидов в организации целостного поведения моллюсков и, в частности, в регуляции взаимоотношений оборонительного и пищевого поведения.

Одним иэ эндогенных молекулярных факторов, участвующих в регуляции пищевого поведения животных является глюкоза (Bailey с.к. et ol., 1971; Campfiold L.A. et al., 1905; Bentivegna F. et al., iэ8в). Показано участие глюкозы а нейрофизиологических механизмах целенаправленного' поведения млекопитающих (Фадеев Ю.А., Андрианов В.В., 1873; Журавлев Б. В., 19В6; Oomura Y. et al . 1974) И моллюсков (Захаров И. С., Балабан П. М. , 1988). Однако, в настоящее

время практически отсутствуют данные "о . конкретных молекулярных ме-

v - > .

хаюгзшх регуляции глюкозой активности нервных клеток и ее взаимодействия с другими биологически активными факторами.

Таким образом, вопросы, связанные с изучением взаимоотношений между основными формами поведения улиток - оборонительным и пш1еш,-м, роли глюкозы и ояиголелтидов в молекулярно-клеточных механизмах этих процессов требуют дальнейшего изучения. U£üb_i!S2ü252S5ffiIüv В связи с вышеизложенным, цельо настоящего исследования явилось изучение молекулярно-клеточных механизмов взаимоотношений оборонительного и пищевого поведения виноградных улиток на различных стадиях удовлетворения пищевой потребности.

I) ¡Ьучс-нис выраженности оборонительных реакций моллюсков на различных стадиях удовлетворения пищевой потребности - у голодных

животных, а также в промежутках метлу 15-минутными "ссапса/п:" потребления гпадш вплоть до насыщения; исследование зависимости оборонительных реакций улиток от продолжительности голодания;

2) Определение уровня глокоэы в гемолимфе голодных моллюскоз, а также во время и после потребления пиши, изучение эффектов глвкоэы на оборонительные реакции улиток и активность командных нейроноЕ оборонительного поведения;

3) Исследование активности командных нейронов оборонительного поведения улиток при предъявлении животным естественных пищеьих СТИМУЛОВ;

4) Анализ эффектов различных олт'епептидов на оборонительные реакции голодных и предварительно накормленных улиток,

5) Изучение действия олигопептидов на активность командних нейронов оборонительного поведения моллюсков;

и§Ой5,^овнзна_£абдты. В работе БперЕые изучена шшач5ц<л оборонительных реакций у виноградных улиток на различных стадиях удовлетворения пищевой потребности. Обнаружено, что к 15-20 мин после начала еды, а такге после 15-минутного псевдокормлення . (моллюскам подменяли морковь в кормушках кусочками ткани, смоченными морковным соком) у животных происходит облегчение генерализованных оборонительных реакций (ГОР). Впервые определено содержание глюкозы в гемолимфе голодних виноградных улиток, а также во время и после потребления пиши. Продемонстрировано, что повышение уровня глюкозы в гемолимфе до уровня, присутствутаиего в гемолимфе во время еды, при введении ее ъ полость тела животннх. а также введение аналогов гастроинтестинаяьши пептидов (пентагастрина или яолецистокининэ-октапептида) в полость тела голодных моллюсков вызывает облегчение ГОР, сходное с обнаруженным при кормлении улиток. IIa оборокитель-тельнсе поведение предварительно накормлен гних улиток эти пептиды не влияют. Показано, что направленность изменений активности нейронов Л-ППп1 при нанесении на губу полуинтактного препарата голодних улиток морковного сока зависит от наличия глюкозы в растворе, омывающем ШС. Подобные глокозо-эаьисимые изменения били обнаружена при аппликации на ШС голодных улиток октапептида холецястокияина (Х1Ж-8), но не рмпгамила, тогда как изолированное подведение глюкозы таким действием не обладало. Обнаружено, что

наиболее чувствительны к изменение концентрации глюкозы и ХЦК-8 в перфузато нейроны Л-ППл1.

Полученные

результаты имеют теоретическое значение и вносят вклад в понимание молекулярно-клеточных ослов взаимоотношения оборонительного и пидевого поведения, выяснению физиологической роли и механизмов действия олнгопептидов и участия глюкозы в нейромальньсс эффектах: олигспсптидоБ. Получению данные позволяют характеризовать гастро-ннтестнальные пептиды и глюкозу как молекулярные факторы, не толь-■ко' участвующие в реализации пищевой функциональной системы, ко и, р определенных случая::, вовлекающиеся в молекулярное обеспечение оборонительной функциональной систе№1,

Экспериментальные данные об уровне глюкозы в гемолимфе виноградных улиток ч зависимости нейрональных эффектов ХЦК- о и- РЮТ-амида от наличия в перфузируемом растворе глскозы могуг быть использованы для моделирования функциональных состояний моллюсков и проведения исследований по изучению' эффектов различных -молекулярных факторов на активность .идентифицированных нейронов. П5П25§Ц5!я_6®осимце _на _заиштх.

1. На реализацию "оборонительного поведения влияет уровень пищевой мотивации виноградных улиток. В процессе удовлетворешш пищевой потребности у моллюсков происходит облегчение оборонительных реакций. Сходное облегчение оборотггегашых реакций возникает при ггеевдокермлении улиток (при замене моркови в кормушках кусочками ткани, смоченными морковным соком).

2. Эффекты олигопептидов на оборонительное поведение улиток зависят от уровня пищевой мотивации: у голодным моллюсков пентагастрин и МЖ-8 вызывают облегчение оборонительных реакции, тогпа кап. гмигампд и вещество Р подобным действием не обладают; у предварительно ..накормленных улиток только рыягамид облегчает оборонительные реакции, тогда как те же дозы Х11К-а, пентагастрина и вешостъа Р - иезффэктивны.

3. Аппликация на губу улитки пищевого раздражителя или подведение к 1ШС гмпгаммка. или ХЦК-8 изменяет активность командны): нейронов оборонительного поведения моллюска, однако направленность изменений зависит от наличия в перфузируемом растворе глюкозы.

4. Облегчение оборонительных реакций при достижении моллюском этапного результата пищевой функциональной системы, по-видимому, происходит за счет высвобождения в гемолимфу животного глюкозы и гастрин/ХЦК-подобнсго пептидного фактора.

Внедрение результатов исследования. В. процессе выполнения диссертационной работы в практику научных исследований Hill нормальной физиологии им. П. К. Анохина АМН СССР внедрен новый подход к проведению поведенческих и нейрофизиологических экспериментов, в которых учитывается уровень пишевой мотивации подопытных виноградных улиток. При изучении действия биологически активных веществ на активность нейронов учитывается необходимость добавления глюкозы в перфуэируемнй раствор. Полученные результаты используются в курсе лекций 1для слушателей факультета повышения квалификации i ИМИ им. И. М. Сеченова ИЗ СССР и на занятиях со студента»ш медико-технического факультета МВТУ им. Н.Э.Баумана, а также в других учреждениях, используюиЛх аналогичные экспериментальные модели.

Материалы диссертационной работы докладывались на: конференциях молодых ученых НИИ нормальной физиологии им. П.К. Анохина .АМН СССР в 1988 и 1989 гг.; конференциях молодых ученых Института ВНД и НФ АН СССР в юаа и 1989 гг.¡ Всесоюзной конференции "Физиология пептидов", Ленинград, 1988 г.; Международном симпозиуме "Интегративная деятельность нейрона: молекулярные основы", Ялта, 1988 r.¡ 2 Всесоюзной конференции по нейронаукам, Киев, 1988 г. ¡ 2 Всесоюзной конференции "Простые нервные системы", Казань, 1Э88 г.; 9 Всесоюзной конференции по нейрокибернетихе, Ростов-на-Дону, i989^r.; Всесоюзном совещании по проблемам ВНД, посвященной 140-летию со дня рождения И.П.Павлова, Ленинград, 1989 г.: Всесоюзной конференции "Химия пептидов-, Рига, ig до г. Апробация диссертации состоялась на' заседании межлаборатерной конференции сотрудников НИИ нормальной физиологии им.П.К.Анохина АМН СССР (апрель,1990) Шь|!У..и_9ХЕУ£ТН23-®1ссе2тащ1и • Материалы диссертации изложены на ¡13 страницах машинописного текста, включая 16 рисунков. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, 7 глав собственных результатов, обсуждения, выводов и списка литературы, содержащего наименований, из них (¡Q

отечественных и зарубежных авторов.

2-Я /у

а

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Опыты выполняли на 316 моллюсках ИеНх 1исогип весом 25-30 г, отловленных в окрестностях г. Севастополя. Моллюсков содержали в боксах, где поддерживали естественный световой режим, высокую влажность и температуру 18-22°. Животные имели сободнмй доступ к пшие (вареной моркови). За 1-7 дней до экспериментов моллюсков лишали корма.

Оборонительное поведение моллюсков оценивали по выраженности генерализованной оборонительной реакции (ГОР), которая состоот в .полном втягивании тела моллюска в раковину в ответ на аверсивный стимул. Для количественной оценки ГОР нами били разработаны и использованы две экспериментальные модели.

В первой модели после нанесения па губу моллюска 50 мкл 0.01М раствора хинина гидрохлорида ("РеахНм", СССР) регистрировали патентный период ГОР- время от момента нанесения капли до полного втягивания улитки в раковину. После каждого воздействия хинином губу моллюска и экспериментальную площадку отмывали проточной водой.

Во второй модели улиток помешали на металлическую пластину и с помошью серебряного электрода (диаметром о. 5 мм) наносили на основание глазного щупальца серию из 10 градуально нарастающих от о до 1 мА (с шагом 0.1 мА) электрических импульсов (длительность одного импульса - 4о мс, частота - 1.25 Гц). ГЪдачу импульсов прекращали сразу после полного втягивания улитки в раковину. Регистрировали сил/ тока последнего импульса;* необходимого для полного втягивания улитки в раковину (порог ГОР). В обеих экспериментальных моделях определяли время восстановления исходной позы жиеотного.

Для определения оборонительных реакций на различных стадиях удовлетворения пищевой потребности, моллюсков каждые 15 мин из кормушек переносили на короткий срок на экспериментальную площадку и после определения параметров ГОР возвращали обратно. В части опытов определяли количества пищи, съеденное улиткой за 15-минутный интервал времени. Контрольные животные в это время находились в отдельном боксе без пищи, из которого их брали каждые 13 мин для тестирования.

Для изучения влияния биологически активных веществ на оборонительное поведение, после определения исходных параметров ГОР

в

моллюскам вводили о. s мл раствора Рингера, в котором содержалось 50 нМ одного из пептидов ("Serva", ФРГ): пеитагастрина (20 irr), XIIK-8 (30 нг), вещества П (з 5 иг), fmbf (15 ir) или 2.5-10 мМ раствор глюкозы ("Реахим", ОХР). Контрольным животным инъецировали о.5 мл раствора Рингера для моллюсков. После инъекции оборонительные реакции исследовались у животных всех групп каждые ю-2о мин в течение go - 120 мин. При псевдокормлешш, улиток помещали е кормушки, где морковь заменяли кусочками ткани, смоченными морковным соком.

Эксперименты по определению концентрации глюкозы в гемолимфе улиток проводили совместно с Шумовой Е.А. Отбор 50-100 .мкл гемолимфы производили из висцеральной полости 2-4 раза у одного и того же животного. Уровень глюкозы определяли у моллюсков до и во время еды, а также до и после псевдокормлепия. Регистрировали также количество съеденной животными моркови. У контрольных животных, не получавших корма, забор гемолимфы производили 4 раза с 20 мин интервалом. Определение содержания глюкозы проводили на "Глюкоэном анализаторе Ii" ("Beckman". США),

Нейрофизиологические исследования проводились на 170 командных нейронах оборонительного поведения Л-ППл1, ЛПа2-3 и ППа2-3 7 4 полуинтактных препаратов голодных виноградных улиток по стандартной методике. Анализировали количество ГШ в ответах нейронов на тактильное раздражение передней части ноги и мантийного валика животного, амплитуду БПСП и изменетю возбудимости мембраны. Возбудимость мембраны оценивали по количеству ПЛ. генерировавшихся при пропускании прямоугольного деполяризующего импульса тока силой 1-3 нА и длительность» юс через регистрирующий микроэлектрод. В качестве пишевого стимула использовали аппликацию на губу моллюска морковного сока. Аппликация производилась ю-20 мин капельно ti . капля в ю-20 сек), после чего губу животного отмывали. ХЦК-н (юо нМ) или FMHFaMinj (100 нМ) (-servn", ФРГ) подводили le нейронам, апплицируя 20 мкл i мкМ раствора пептида непосредственно на ЦНС.

Все экспериментальные данные обрабатывались на компьютере "Apricot" (модель A'iüV-i XD-45, Великобритания) , с помощью пакета программ "Microstat" (uicrosoft corp., США; и программы "SuperCaIc4" (Computer Associates International. Inc). ЛлЯ оценки

уровня достоверности различий использовался «-критерий Стыэдента и критерий знаков.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИИ

__ОЕУ__пдтреблещт__пщи__и

псевддкоЕмлент. Проведенные эксперименты показали, что реакция на аппликашло хинина до кормления у голодных улиток зависела от сроков пишевой деприьации. В группе животных, лишенных пиши за г дня до эксперимента, ГОР в ответ на аппликацию хинина лт-циирсвалась у б из 9 животных (бвх) с латентным периодом 27.8±4.8 с, тогда как з моллюска реагировали только втягиванием щупальцев. Через 20 и 6о мин после первого тестирования еще 2 улитки перестали отвечать на аппликацию хинина ГОР - после нанесения на губу хинина у этих животных отмечали только втягивание щупалец, тогда как у других 4 улиток латентный период ГОР составлял 31.8±з /о. В группе улиток, голодавших 5 дней, первая аппликация хинина инициировала ГОР у х из 8 улиток (12.5Х) с латентным периодом 21 с. Спустя 60 мин после первого тестирования у этого моллюска в ответ на аппликацию хинина также отмечали ослабление оборонительных реакций и регистрировали лишь втягивание щупалец. Необходимо отметить, что использование вместо раствора хинина дистиллированной воды никогда не инициировало ГОР у голодных моллюсков. * р

После 15-минутного кормления у всех' животных аппликация хинина вызывала ГОР с латентным периодом 25.8*5.9 с. Достоверность изменений по сравнению с контрольной группой животных составляла р=о.оо1. Дальнейшее кормление моллюсков сопровождалось постепенным увеличением латентного периода ГОР. Подобных изменений оборонительных реакций не отмечали у животных, не получавших в этот период морковь. Спустя Ч"час носче скончания еды у улиток восстанавливался исходный латентный период ГОР. Достоверных отличий г.родолжительности восстановления исходной позы после нанесения оборонительного стимула мэжду контрольной и опытной группами обнаружено не было.

В ответ на электрическое раздражение у 8 голодных моллюсков с я-дневной пищевой депривацией регистрировали порог ГОР о.3-0.6 мА.

О

ГОР никогда не регистрировалась при прикосновении к коже моллюска стимулирующего электрода или стимуляцией импульсами тока 0.1-0.2 мА. В течение часа величина порогов реакций возрастала до 0.5-0.7 мА (на 15-60*). Поедание моркови в течение 15 юш приводило к достоверному снижению величины порога ГОР на 20-40* (р=о.оо1). Продолжение кормления сопровождалось постепенны!.! увеличением порога реакций. За время кормления улитки съедали 2.1-3.о г моркови. Была выявлена положительная корреляция между порогом реакции непосредственно перед кормлением и весом съеденной пищи (г=о.81), т.е. чем выше был порог ГОР до еды, тем больше моркови моллюск съедал при последующем кормлении. 'Продолжительность восстановления исходной позы моллюсками также достоверно не отличалась от таковой у контрольных улиток.

При исследовании зависимости порогов ГОР моллюсков от продолжительности голодания было установлено, что величина порогов ГОР непосредственно перед едой достоверно не отличалась в' группах животных, голодавших 1, з. или б суток Со.пг±0.04 мА, о.75±0.13 мА и о.аз±0.04 мА, соответственно). Через 20 мин после начала еды наиболее выраженное снижение порогов ГОР было обнаружено в з группе улиток, голодавших в суток, (на 19%, />=0.006), тогда как в 1 и 2 группах пороги реакций снизились в среднем на 7% (р=о.00) и юх (/>=0.024), соответственно.

Для уточнения стадии гшшзвого целенаправленного поведения, на которой происходит облегчение оборонительных реакций моллюсков, группе из 5 животных вместо моркови в кормушках предъявили кусочки ткани, смоченные морковным соком. Пищевое поведение, направленное на "жевание" ткани не приводило к наполнению желудка пищей, а, следовательно, не вызывало истинного насышсния. Тем не менее, через 15 мин "жевания" величина порогов ГОР снизилась на 20-30% по сравнению с контролем (Р~о.ооз). Следовательно достижение улиткой этапного результата пищевого поведения (нахождение пиши и контакт с ней) приводит к снижению порогов ГОР виноградных улиток.

5ВЕё5?И'Ьи5_й05ержащя_глюкозн__в___гемолимфе__"¿литок__питевом

поведении __и ._влиянке_гяюкдзы___на__строительные__реакции__голодных

При определении концентрации глюкозы в генолпм}© улиток с различным сроком пиш.евой деприваиии не было отмечено достоверных

з-а /у

9

различий уроькя глюкоои. У голодных мслпюоко^, лншс-тшх пиши & течение i, з или б дней, концентрация глюкозы в гемолимфе составляла, соответственно, о.4±о.г í.iM (п=э), о. 5±о. i i¿l (п=7> и o.sío.i t.iM (n-7). После 20-30 мин еды концентрация глюкозы достоверно (р=0.042) увеличивалась до •о.ato.5 мМ. За ото время моллюски сьедали о.1-0;9 г моркови. Было выявлено, что вес съеденной моркови положительно коррелировал с уровнем глюкозы в гемолимфе в этот период времени (г=о.84). В момент отказа моллюска от пиши уровень глюкозы составлял i.6¿0.5 мМ и сохранялся, по крайней мере, а .теч.'ние зо-эо мин после еды. У контрольной группы улиток изменений уровня глюкозы в гемолимфе отмечено не было. Подобное- увеличение уровня глюкозы в 1.2-6 раз (до 0.6-1.5 мМ) было отмечено сразу и через 20-120 мни после псевдокормления. Сравнение проб гемолимфы, отобранных из висцеральной полости и педального синуса продемонстрировало совпадение значений уровня глюкозы в обоих случаях. Этот факт позволяет утверждать, что ЦНС и другие органы омываются гемолимфой педального синуса с таким 'же уровнем глюкозы, как и в висцеральной полости улиток.

Было обнаружено, что только введение в полость тела о.5 мл 5 мМ, но не 2. í) и/ш ю мМ растворов глюкозы вызывало к ю-12 мин достоверное (¿>=o.oi4) снижение порогов реакций на ю-20* по сравнению с исходными значениями. Восстановление исходных оборонительных реакций животных отмечали через, 20-30 мин. Шменеииеактивности команды;:_нейронов_ обсро1штелы1ого_ поведения при _ действии шщевого стамула. При исследовании фоновой активности командных нейронов оборонительного поведения Л-ППл1 и Л-ПШ2-3 голодных виноградных улиток, как правило, регистрировали редкие ВПСП и ПЛ. Уровень мембранного потенциала нейронов составлял 65±5 мВ. Раздражение ноги или мантийного валика моллюска вызывало возникновение ВПСП, ^сопровождающихся, как-правило, генерацией одного или нескольких ГШ. При этом Л-ППп1 нейроны более выражешю реагировали па стимуляцию илсилатеральной по отношению к регистрируемому нейрону сторону передней часта ноги, а Л-ППа2-3 - на раздражение мантийного валика животного.

Аппликация сока на губу моллюска вызывала в Л-ППл1 нейронах (n=i¡?) гнперпеляризацию мембраны клеток на 1-2 мВ, сопровождавау-

юся уменьшением возбудимости (до 79±юх, />=0.03, <=2.2) и количества ГШ в ответах нейронов на тактильную стимуляцию ипси- пли контрлатеральной стороны передней части ноги (на 2б±1, р-0.015, 1*1.9), при этом достоверны:: ¡гэменений ответов этих клеток на тактильное раздражение мантийного валика обнаружено не было. Изменение ответа нейронов на тактильное раздражение передней части ноги выряжалось в уменьшении числа и частоты ПД, а также появлении ВПСП, не сопровождающихся ПД, или уменьшении амплитуд» ВПСП.

Б Л-ППаз клетках (п=12) после аппликации сока возбудимость и количество ГШ в ответах нейронов на тактильное раздражение передней части ноги или мантийного валика, как правило, снижались в 1.1-2 раза. Достоверных изменений уровня мембранного потенциала Л-ППаз1нейронов после аппликации сока отмечено не было.

Указанные изменения активности нейронов наступали, как правило, не позднее г-7 мин после начала аппликации, восстановление ' исходных значений регистрируемых параметров отмечали через 5-эо ' 1.-зш после отттания сока с губы г.юллгсека.

Каких-либо достоверных изменений спонтанной и вызванной активности Л-ППаг нейронов обнаружено не бало.

При перфузии ШС улитки раствором, содержащим 0.5 иМ глюкозы, что соответствует уровню глюкоза в гемолимфе голодных моллюсков, направленность изменений в Л-Шл1 (п=Ю) нейронах поело нанесения на губу улитки сока оказалась противоположной: в 9 из ю нейронов была обнаружена небольшая деполяризация мембрзхм (1-1.5 мЗ), соп-ровождавиаяся увеличением количества Щ в ответах нейронов» на тактильную.^ стимуляцию передней части ноги в 2-1 о раз (р=о.С>з, 4=2.1). Усиление ответа выражалось в увеличении числа пд, при этом частота следования спайков не изменялась. Возбудимость клеток и число пд в ответах этих нейронов на раздражение мантийного валика достоверно не изменялись (р;о. 1 з и р-о.25. соответстве-гаго).

В Л-ПШ2-3 нейронах !п = и) после аппликации сока на губу улитки возбудимость и количество ПД в ответах клеток, как правило, не изменялись или снижались в 1.2-5 раз. Обнаруженные изменения выявлялись через 2-в ми» после начала аппликации сока. Восстановление исходных значений регистрируемых параметров отмечали через ю-125 мин поело сшивания сока с губы.

Перфуоия ЦНС раотьором о 0.5 мМ глюкоон до ишеоемия пншввопо раздражителя на губу моллюска, а также в контрольных экспериментах приводила через 15-20 мин после начала перфузии к увеличению возбудимости Л-ППл1 клеток в г.з-2 раза (р=о.ооэ, «гЗ.э, п=1в), при этом количество ПД в ответах нейронов на стимуляцию передней части ноги достоверно не изменялось. Указанные изменения активности клеток сохранялись в течение всего опыта. .Достоверных изменений уровня мембранного потенциала, а также ответов этих нейронов на тактильное раздражение мантийного валика отмзчено не было. Не было выявлено также достоверных изменений спонтанной и вызванной активности Л-ППаг <п=1 £) и JI-ППаз (п=13) нейронов.

Влияние__о ni гго псптидоа__на _ льнне__реакции___голодщгх___и

УЗкс£1ллоннух_хлнток. Введение о.5 мл раствора Рингера для (.юллвсков голодным и предварительно накормленным моллюскам" вызывало к 20 мин небольшое (на 2-5$) статистически недостоверное уменьшение порогов ГОР, через до мин после инъекции каких-либо достоверных отличий порогов реакций от исходных значений не выявлялось, К 20 мин после инъекции голодным моллюскам пентагаст-рина или ХШ-8 происходило достоверное (р=о. 01) уменьшение порогов ГОР на ю-20* 'от исходных значения. Восстановлешге исходных порогов наблюдали к 4о и 60 мин после иньекции пептидов, соответственно. Введение голодным моллюскам вещества Р или FMRKaMUfla не вызывало достоверных изменений порогов ГОР.

Спустя 20 мин после инъекции FHRFaMiika у накормленных перед экспериментом улиток наблюдали достоверное (Р=0.04) снижение порогов реакций. Восстановление исходных значений наблюдали к б о мин после иньекции. Введение пентагастрина, ХЦК-8 или вещества Р накормленным животным не вызывало изменений порогов ГОР.

jja_aKTHBijoc __Зе-

ните л ыюго_ncg£geHijgnogmoc_'/лоток,• ГЪцведеиие ХЦК-8 <100 нМ) к ЦНС голодных улиток в растворе, не содержащем глюкозы, не вызывало достоверных изменений возбудимости < р=о.38, t=o.33), уровня мембранного потенциала и количества ПД в ответах Л-Шл1 нейронов (п=15) на раздражение передней части ноги (р=0.12. í=l. 25) и мантийного калика животного (р=о. 1 я . t=o.9l¡. Не было выявлено также достоверных изменений спонтанной и вызванной активности

Л-ППа2-3 (л=21) нейронов.

При подведении ХЦК-8 О со нЫ) к ШС голодти улиток в растворе, содержащем 0.5 мМ глюкозы, через з-40 мин поело аппликашш пептида в Л ППл1 нейронах (г> -11) регистрировали увеличение количества ПД в ответах на раздражение передней части ноги в 2-ю раз (р-0.004, t=3,25). Необходимо отметить, что увеличение выраженности ответов Л-ППл1 нейронов на раздражение передней части ноги заключалось в увеличении количества ПД в ответе dea изменения частоты следования спайков. Восстановление исходных ответов Л-ППл1 нейронов отмечали через 15-100 мин после аппликашш. Достоверных изменений уровня мембранного потенциала, возбудимости и ответов нейронов Л-ГЛШ на тактильное раздражение мантийного валика обнаружено не было. Не было выявлено также достоверных изменений спонтанной и вызванной активности Л ППаЕ-3 (п=13) нейронов.

При подведении fmякамида (юо нМ) к Ш1С голодных моллюсков в растворе, не содержащем глюкозы, в Д-ППл1 (ч=4). Л-ППаг (n=G) и Л-ППаз (п=в) нейронах была отмечена гиперполяризация мембраны клеток на з-б мВ, которая сопровождалась уменьшением возбудимости нейронов в 1.3-2 раза (не позднее 2-4 мин после начала аппликации), а также количества ПД или амплитуды ВПСП в ответах на тактильную стимуляцию передней части ноги или мантийного валика животного на ю-08Х. Реакции Л-ППл1 клеток на тактильную стимуляцию передней части ноги после аппликации пептида не изменялись. Восстановление исходных параметров' активности нейронов отмечали через 20-55 мин после аппликации пептида.

Подведение FMRFaMHfla (юо нМ) к ШЮ голодных моллюсков в растворе, содержащем 0.5 мМ глюкозы, приводило к деполяризации мембраны клеток на 1-8 мВ, сопровождавшейся увеличенном возбудимости Л-ППл1 (п=5), Л-ППаг (и = 7), Л-ППаз (п=б) нейронов в 1.5-5 раз не позднее г-з мин после аппликации пептида. Количество ПД в ответах Л-ППл1 нейронов на тактильное раздражение передней части ноги и мантийного валика после подведения пептида достоверно но изменялось (р=о.19, t=l.i5). В ЛПа?.-3 и ПШ2-3 нейронах после аппликации FMRFawiaa увеличивались количество ГШ или амп.:итуда ВПСП в реакциях клеток только на тактильное раздражение мантшшого валика (в 2 5-4 раза), при этом ответы на стимуляцию передней

Ы

частя ноги уменьшались (в среднем на 60%) иди не изменялись. Восстановление исходных параметров наблюдали через 30-90 мин после аппликации пептида.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Полученные ¡¡ami экспериментальные данные демонстрируют тесную взаимосвясь оборонительного и ' пищевого поведения моллюска.

Согласно полученным нами результатам' облегчен« формирования оборонительного поведения после 15-20 №ш потребления пищи прямо коррелировало с продолжительностью голодания. В естественных условиях обитания подобная пищевая депривация вызывается, вероятно, различными неблагоприятными факторами окружающей среды и обнаруженный в наших экспериментах феномен, по-видимому, отражает приспособление моллюска к этим условиям.

Нами не было выявлено достоверных изменений продолжительности восстановления улиткой исходной поэы после нанесения аверсивных стимулов в этот же период времени, следовательно можно полагать, что после кратковременного приема пяш происходит специфическое облегчение, главным образом, оборонительных реакций, а не обшей двигательной активности животного.

В ОПЫТаХ На ДРУГОМ брЮХОНОГОМ МОрСХОМ МОЛЛЮСКе Aplysie Preston H.J. & Loa R.M. (1973), Advocat.C. at al. (1976), Ha»kins fl.O. t Advocat C. (1*378/ , И tukowiak К. (1980, 19S7) обнаружили, чго в состоянии пищевого возбузде-ния, а также у только что поевших животных амплитуда реакции втягивания жабры в ответ на тактильное раздражение сифона снижена. Если сравнивать эти данные с получен-ньап! в наши опытах, то можно видеть, что, по сравнении с голодным состоянием, после приема тиш выраженность оборонительных реакций виноградных улиток, также била снижена. Однако после 15-20 мин еда происходило облегчение оборонительных реакций моллюсков. У Aplrsia оборонительные реакции в процессе насыщения не тестировались.

При объяснении возможных причин обнаруженного феномена нельзя, однако, исключить влияние общего возбуждения ("arousal") моллюска, сопровождающего потребление паши. Кроме того, облегчение оборонительных реакций может быть вызвано рассогласованием, связанным с переносом моллюска иэ кормушки на ¡экспериментальную пло-

14 в

шадку, и возникновением ориетировочно-исследовательского поведения.

При изучении молекулярно-клеточкда механизмов обнаруженного феномена, мы обнаружили, что при аппликации сока на губу улитки изменения происходят, главным образом, в,Л-ППл1 нейронах и заключаются в разнонаправленных изменениях спонтанной и вызванной активности в зависимости от наличия в перфузируемом растворе глюкозы. Эта зависимость может быть связана со способностью нейронов интегрировать разномодальную информацию в соответствии с уровнем глюкозы - чрезвычайно важного для нейронов энергетического субстрата.

Памп также отмечено, что увеличение выраженности ответов Л -ПЛл1 клеток на тактильное раздражение передней части ноги после нанесения на губу моллюска сока обеспечивается за счет увеличения количества, но не частоты следования потенциалов действия. Эти данные дают основание полагать, что сенсорная афферентация от губы моллюска приводит к изменению акчивности Не только Л-ППл1 нейронов, но н активности пресинаптических по отношению к ним клеток.

В ЛШ2-3 и ППа2-3 нейронах при аппликации сока изменения спонтанной и вызванной активности были выражены слабо или совсем отсутствовали. Известно, что командные нейроны оборонительного поведения плеврального", и париотального ганглиев имеют различные рецептивные и эфферентные поля (Браваренко Н.И. и соавт., 1982; Максимова O.A., Балабан П.М., 1983). ГЪкаэано также, что командные нейроны оборонительного поведения виноградной улитки тлеют отдельные афферентные "входы- от различных областей тела (Аракелов Г.Г., Шехтер Е.Д., 1981; Аракелов Г.Г. и соавт., 1982; Браваренко Н.И. и соавт., 1982). Можно полагать, что при действии пищевого стимула происходит избирательная модуляция отдельных "входов" Л-ППл1 нейронов, для которых специфическим полем является передняя часть ноги улитки. Биологическая значимость этого процесса заключается, вероятно, в том, что эта область тела моллюска при потреблешш пиит остается незащищенной, поэтому у животного в эволюции возникли механизмы, повышающие значимость оборонительного стимула от этой области тела во время еды.

В работе Максимовой O.A. и Балабана П.М. (1983) не было обнаружено каких-либо изменений спонтанной активности нейронов Л-ППа2-3 при нанесении на губу моллюска морковного сока, что

!»

совпадает с результатами наших опытов. В этих экспериментах не изучали вызванной активности этих клеток, а также не регистрировали активности Л-ПГ1л1 нейронов, которые, как было показано в наших исследованиях, наиболее выражение реагируют на предъявление пищевого раздражителя, *

Таким образом, на основании наших исследований можно заключить, что предъявление пшш сопровождается модуляцией активности клеток, участвующих в нейроиальном обеспечении оборонительной функциональной системы виноградной улитки.

I!aim определена концентрация глюкозы у голодных моллюсков, а также при потреблении пиши. Полученные результаты свидетельствуют о том, что у моллюсков содержание глюкозы не изменяется с увеличением продолжительности голодания и находится на относительно постоянном уровне. Эти данные указывают на то, что концентрация глюкозы в гемолимфе является для моллюсков одной иэ констант организма.

При потреблении улитками пиши (уже к 15 мин) нами было выявлено повнкение уровня глюкозы в 1.2-6 раз (до 0.9-1.5 kW). Этот уровень сохранялся, по крайней мере, в течение ао-эо мин после еды. Увеличение глюкозы прямо коррелировало с количеством съеденной к этому моменту пиши, на.основании чего можно было бы предположит*, непосредственную связь между поступлением пиши в желудочно-кишечный тракт и"последующим увеличением в гемолимфе содержания глюкозы. Однако, тот факт, что подобное увеличение глюкозы происходит и при пссвдокормлении улиток, свидетельствует о высвобождении глюкозы из эндогенного депо, а сигналом к высвобождению является сенсорная афферентация о достижении этапного результата лицевого поведения (контакте с пишей) от рецепторов околоротовой поверхности кожи, ротовой полости и, возможно, пищевода.

Повышение уровня глюкозы после еды было показано также у гигантского СЛИЗНЯ Li max mexiuus (Cresa D.S., Prior D.J., 1985). , Авторы обнаружил:!, что у голодавших в течение 7 дней слизней уровень глюкозы составлял о.2б±о.1 мМ, тогда как через 1 час после еды отмечено увеличение уровня глюкозы в s раз до i.32±o.57 мМ. В гемолимфе других моллюсков - лумпаоя Stahna!is, голодавших перед опытом 24 часа, - содержание глюкозы составляло 23-43 мкг/мл (о.13-

0.24 *nM) (Wusman Т.С.И. et al. , 1988). Эти уровни бЛИЭКИ К значениям концентрации глюкозы в'гемолимфе виноградных улиток, обнаруженным в наших экспериментах.

Результаты проведенных нами опытов дают основание полагать, что параметры пищевого поведения (количество необходимой организму пиши и уровень повышения глюкозы в гемолимфе). по-видимому, определяется еше до начала еды, на стадии афферентного синтеза, и не связаны, по крайней мере в начальный период потребления пиши, с оценкой достигнутого результата. Это предположение косвенно подтверждается тем, что количество съеденной моллюсками моркови прямо коррелирует с величиной порога ГОР, измеренного непосредственно перед потреблением пиши.

По-видимому, процесс потребления галди и ее количество регулируются какими-то молекулярными факторами, выделяющимися при контакт© животного с пищей. Одним из факторов, участвующим в регуляции пдаевого поведения, является глюкоза. Так, в работе Bentivegna F. et al. (1988) было показано, что введение в полость тела Apiysia глюкозы во время еды обладало дозо-зависдаым насыщающим действием и приводило к уменьшении количества съедаемой пиши. Кроме эюго, способность экэогенно введенной глюкозы облегчать генерализованную реакцию у голодных моллюсков, как это было показано в наших экспериментах, свидетельствует о возможности ее * вовлечения в молекулярное обеспечение оборонительной функциональной системы.

При исследовании влияния глюкозы на активность командных нейронов оборонительного поведения нами было показано, что подведение 0.5 мМ глюкозы к ЦНС голодных моллюсков увеличивает возбудимость нейронов Л-ППл1, при этом доствернцх изменений ответов этих клеток на тактильные раздражения и активности нейронов Л-ППа2-3 не обнаружено. Эти данные дают основание полагать, что командные нейроны оборонительного поведения Л-ППл1 принимают участие и в нейрональ-ном обеспечении пищевой функциональной системы. Данное предположение подтверждается и результатами, полученными Балабаном П.М. и Максимовой О.А. (1988), которые обнаружили, что аппликация сока на губу предварительно накормленных моллюской вызывает в Л-ППл1 нейронах волну деполяризации и генерацию потенциалов действия, чего не происходит в этих клетках у голодных улиток. 1Ъ-видимому, глюкоза

изменяет функциональное состояние Л-ППл1 и связанных с ними нейронов, а также характер реагирования на молекулярные факторы, высвобождающиеся при предъявлении пищевых раздражителей. Вероятно, эти и связанные с ними нервные клетки (Логунов Д.Б., Балабан П.М. , 1978; Логунов Д.5., 1983-, Захаров И.С., Балабан П.М. , 198В; Аракелов Г.Г. и соавт. 1989), являются своеобразным "центром насыщения" у виноградных улиток, чувствительным к изменению содержания в гемолимфе факторов, регулирующих пищевое поведение.

Предположив, что одним из таких гуморальных веществ является фактор пептидной природы, мы исследовали влияние структурно различных олигопептидов на оборонительное поведете голодных моллюсков. Оказалось, что только аналоги гастроинтестинальных пептидов пентагастрин и XUK-8 облегчают оборонительные реакции голодных, но не предварительно накормленных улиток, в то время как другие пептиды подобным действием не обладали'. Братышевым П.И. (1987) было выявлено разонаправленяое действие этих пептидов на пищевое поведение моллюсков при введении их непосредственно перед кормлением. Эти данные, а также результаты наших экспериментов демонстрируют' способность гастроинтестинальных олигопептидоз участвовать в нейрохимическом обеспечении как пищевой, так и оборонительной функциснальчнх систем. .

В наших исследованиях нейрональных эффектов олигопептидов было продемонстрировано, что изменения активности командных нейронов оборонительного поведения после подведения ХЦК-8 оказались сходньми с обнаруженными в этих нейронах после нанесения морковного сока на губу моллюска. Так же, как и после аппликации на губу моллюска сока, было обнаружено увеличение количества ПД в ответах нейронов на тактильную стимуляцию без изменения частоты следования потенциалов дейстьия, Все эти данные могут свидетельствовать о действии ХШ.-8 не только на активность Л-ППл1 нейронов, но, по-видимому, и на афферентные по отношению к ним клетки.

Известно, что ЛПл1 и Шл1 нейроны пришагают непосредственное участке в реализации оборонительной функциональной системы моллюсков (Максимова O.A., Балабан П.М., 1983) , поэтому выявленные наш изменения активности этих клеток после аппликации XUK-8 являются, по-видимому, одним из нейрональных механизмов действия этого

поптида па о-Зоронитвльпоо по&едоиио гопояп'^х втюгралних упиток. Можно полагать, что высвобождение эндогенного гастрин/ХДО-лодоб--ного пептида происходит после поступлепг.я сенсорной афферентации о контакте животного с пищей от неидентифииировашшх XUK-содержаших нейронов, которые, как было показано Bokiach A.J. et al . (1983), присутствуют в подглоточном комплексе ганглиев. Избирательность действия пептида на отдельные "входы" нейронов Л-ППл1 обусловлена, по-видимому, специфическим распределением рецепторов X1IK-8 на пресинаптических окончаниях клеток, афферентных пс отношение к нейронам Л-ППл1. Однако, это предположение требует проведения специальных экспериментов.

Нами впервые было показано, что добавление в раствор, омыва-•гжий UHG улитки, глюкозы до уровня, присутствующего в гемолимфе голедных улиток (o.S мМ). нпменяет направленность эффектов пептидов на спонтанную и вызванную активность командных нейронов оборонительного поведения моллюсков. Ранее нами также былэ выявлена зависимость эффектов FMRFawuia на активность ЛПа2-3 и ПГ1а2-3 нейронов от уровня пищевой мотивации моллюсков (Шевелкин A.B., Никитин В.П., 1988). Результаты, полученные в настоящих исследованиях свидетельствуют 'о том, что глюкоза может являться одним из молекулярши факторов, модулирующих активность нейронов и их реакции на подведение олигопептидов. ,

Известно, что процесс пишеього насыщения развивается в организме уже во время приема пиши, когда питательные вещества поступают только в желудок и в кровь еще не проникли. Эта фаза пищевого насыщения, имеющая свои нейрофизиологические (Судаков К.В. и соавт., 1973; Хапажев Т.Ш., 1983) и нейрогуморальные (Быков K.M.. 1948; Асатиани A.B., Бакурадзе А.Н., 1975; Журавлев Б.В. , 1986) проявления была названа Судаковым К.В. и Анохиным П.К. фазой "сенсорного насыщения" (Анохин П.К., Судаков К.В., ю71; Судаков К.В. , 1971; 1979). Результаты наших экспериментов свидетельствуют о том, что облегчение оборонительного поведения, возникающее после удовлетворения минимальной пищевой потребности улиток опосредовано молекулярными механизмами пишевого сенсорного насыщения.

выводы

1. Выраженность реакции на аверсивные стимулы у виноградных улиток зависит ог уровня гпшевой( мотивации: у моллюсков после удовлетворения минимальной пищевой потребности происходит облегчение оборонительных реакций. Подобное облегчение оборонительных реакций возникает при псевдокормлении улиток (при замене моркови в кормушках кусочками ткани, смоченными морковным соком).

2. Уровень глюкозы в гемолимфе голодных улиток составляет о.5±о.1 мМ. Через го-зо мин после начала еды, а также после псевдокормления содержание глюкозы возрастает в 1.2-е раз (до 0.9-1.6 мМ). При пищевом насыщении, в момент отказа от пиши концентрация глюкозы составляет 1.б±о.5 нМ и сохраняется на этом уровне не менее 30-90 мин.

3. Увеличение содержания глюкозы*в гемолимфе голодных улиток до уровня, присутствующего у накормленных животных, виэывает облегчение оборонительных реакций моллюсков.

4. Предъявление улитке пищевого стимула изменяет активность нейронов Л-ППл1. при чем эффекты зависят от наличия в перфузируемом растворе глюкозы: при перфузии ШС раствором, не содержащим глюкозу, пищевой стимул -вызывает уменьшение возбудимости (до 79±юх) и количества ГШ (на гб±14%) в ответах нейронов Л-ПГ1л1 на тактильное раздражение. При перфузии ШС раствором, содержащим глюкозу (о.5 мМ), предъявление пищевого стимула приводит к увеличению количества ГШ в ответах нейронов Л-ППл1 на тактильные раздражения;(в 2-Ю раз), тогда как достоверных изменений возбудимости'плазматической мембраны не происходит.'

5. Действие олигопептидов на оборонительное поведение улиток зависит от уровня пищевой мотивации: у голодных моллюсков пентагастрин и ХПК-в вызывают облегчение оборонительных реакций животных, тогда как рметамиа и вещество Р подобным действием не обладают-, у предварительно накормленных улиток только РМЕРамид облегчает оборошттель:те реакции, тогда как ХЦК-0, пентагастрин и вещество Р - неэффективны.

6. Направленность эффектов гмакамида на командные нейроны голодных моллюсков зависит от наличия в перфузируемом растворе глюкозы: при перфузии ВДС раствором, не содержащим глюкозу, пептид уменьшает

возбудимость и iMtrpaRomiooTb отвотои нейронов Л-ППл1 п Л-Г1Па2-3 вызванных тактильными раздражениями. При перфузии ЩЮ раствором, содержащим глюкозу, направленность эффектов ¡-мнгамида противоположна. ХЦК-8 увеличивает выраженность ответов нейронов Л-ПГ1л1 на тактильные раздражения только при наличии глюкозы в растворе, смывавшем ЦНС, при отсутствии глюкозы в перфуоате пептид неэффективен'.

7 . Облегчение оборонительных реакций при достижении моллюском этапного результата пищевой функциональной система (нахождением пиши и контакте с ней), по-видимому, происходит эа счет выделения в гемолимфу улитки глюкозы и гастриг/HJK-подобного пептидною фактора.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ: ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Участие нейропептидов в регуляции пищевого и оборонительного поведения виноградных улиток. В Сб. "Физиология гептндов". issh, Л,. Наука, С.25 -26, (совместно с Братищевым П.И.).

2. Участие нейропептидов ьо взаимоотношениях оборонительной и пшаевоЯ функциональных систем при сенсорном насыщении у виноградных улиток, В Сб. "Интегративная деятельность нейрона: молекулярные основы", M,"ig88. С. 134.

3. Роль олигопептидов в механизмах взаимодействия пищевого и оборонительного поведения виноградных улиток.В Сб."2 Всес. конференция по нейронаукам, Киев, 1908, С. 169-160, (совместно с Шерстневым В.В. и Ератышевым П.И.).

4. Активация оборонительного поведения виноградных улиток при пищевом сенсорном насыщении. Н.высш.нервн.деят,, 1983, т.зо, no.а, С.379-381.

5. Об общности нейрогуморальных механизмов пищевого и оборонительного поведения виноградных улиток. В Сб."5 Всес. конф. по нейрокибернетике", Ростов-на-Дону, 1эзэ, С. 37S-300.

6. Роль гастроннтестинальных олигопептидов в процессе формирования оборонительной доминанты у виноградюк улиток. В Сб. "Всес. совещание по проблемам ВИД", Л., 1989, С. iдо.

7. Олигопептшш в организации пищевого и оборошггельного потения

ВИНГраДНЫХ УЛИТОК. Biomedical Science, 1990, V.1, Но.), 1>|>.7й--7'.

(совместно с Братшиегым П.И.) .

ai