Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Изучение влияния газовой составляющей интрагастрального коктейля на фармакологические свойства препаратов корня солодки

На правах рукописи

РГ5 ОД 22 АПР 2002

Коробко Инна Юрьевна

^ЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ГАЗОВОЙ СОСТАВЛЯЮЩЕЙ ИНТРАГАСТРАЛЬНОГО КТЕЙЛЯ НА ФАРМАКОЛОГИЧЕСЖИЕ СВОЙСТВА ПРЕПАРАТОВ КОРНЯ

СОЛОДКИ

14.00.25 - фармакология, клиническая фармакология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

ПЯТИГОРСК-2002

Работа выполнена в государственном научно-исследовательском и нети курортологии МЗ РФ, Пятигорской государственной фармацевтической акадеи Ставропольской государственной медицинской академии, санатории «Ессент} ФСБ РФ.

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Л.Е. Старокожко

Научный консультант: кандидат фармацевтических наук Г.С. Гутенева

Официальные оппоненты:

доктор фармацевтических наук, академик РАМН, профессор А.П. Арзамас

доктор медицинских наук, профессор В.А. Бату

Ведущая организация - Научно-исследовательский институт фармакологии РА]

у,

Защита состоится « 7 » 2002 г. в / гУ часов на заседа

диссертационного совета Д 208.069.01 при Пятигорской государствен фармацевтической академии (357500, г. Пятигорск, проспект Калинина,! 1)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Пятигорской государствен фармацевтической академии ( г. Пятигорск, проспект Калинина,! 1)

Автореферат разослан

«/ »¿2^4^^2002 г.

Л

Л ■ ; : г I /7 !

Ученый секретарь диссертационного Совета, доктор фармацевтических наук, профессор

Е.В. Компани

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ стуальность темы. Поиск высокоэффективных средств и методов лечебного гйствия остается до настоящего времени актуальным для фармации и медицины, гывая роль иммунных нарушений в развитии патологии, практически нет такой ели медицины, где не возникала бы проблема иммунокоррекции и /нореабилитации (П.Скуркович, 1998;Л.Е. Старокожко, 2000). Наряду с этим ходимо отметить, что те или иные расстройства иммунорегуляции, качественные 1личественные изменения характера иммунного ответа становятся все более ым явлением ( Ю.М. Григоайд, 1997). В связи с этим, не случаен, значительный рес к направленной коррекции функций иммунной системы с помощью уномодуляторов. В их число входят разнообразные средства природного [схождения, а также синтетические химические соединения (Н.И. Демешко, ; H.H. Гуляева 1999). Последние нередко могут быть достаточно эффективными, )бладая зачастую селективным влиянием на отдельные звенья иммунитета, они беспечивают желаемого результата из-за патогенетически узконаправленного ействия (М.М. Абдураимова, 1993). Использование же нескольких селективных аратов, нередко приводит к полипрагмазии и, как следствие, различным гивным последствиям, в том числе и аллергическим реакциям (Т.С. Соколова ; В.И. Пыцкий, 2000). Поэтому, весьма очевиден интерес к средствам т>уровневого воздействия, особенно растительного происхождения, среди рых солодка и полученные из ее корня препараты (глицирам, густой экстракт), мают особое место (И.А. Муравьев, JI.E. Старокожко, 1990; R. Hansel, 1984).

Однако, для повышения биологической доступности и улучшения нолептических свойств заслуживает внимания изучение возможностей ie не имя препаратов корня солодки (ПКС) в виде пенных интрагастральных ейлей. Ранее было установлено преимущество пенных систем доставки с ПКС .. Муравьев, JI.E. Старокожко, З.Д. Хаджиева, 1989; 1990) перед их водными ворами, заключающееся в возрастании на 20% диализа in vitro (целлофан), рбции in vivo у экспериментальных животных. Последнее инициировало аботку технологии и определение параметров приготовления коктейлей для 1агастрального использования, где в качестве дисперсионной среды шьзовался кислород (JI.E. Старокожко, 1991). Однако, хорошо известно, что анный газ, играет важную биологическую роль в организме человека, одуется также и на образование активных форм кислорода (АФК). Причем, АФК

л

J

способны оказывать инициирование свободно-радикального перекисного окислен: липидов (ПОЛ), способствуя развитию воспаления, ишемической болезни серди бронхиальной астмы (А.Х. Коган, А.Н. Кудрин, 1994). Указанное выше, определенной степени, ограничивает использование кислорода в лечебных целях, связи с этим, интересна роль диоксида углерода. В настоящее время показано, что < является универсальным ингибитором генерации АФК клетками (А.Х. Коган 199 Kogan А.КЬ.,1995). Заслуживает внимания и азот, тем более что возможность е влияния на саногенетические механизмы при патологических процессах разно! происхождения изучено недостаточно (П. Козловский, 1990; Л.Е. Старокожко , 1995 Указанное выше свидетельствует о том, что изучение возможное использования, наряду с кислородом, других газов (диоксид углерода, азот интрагастральных коктейлях и оценка их влияния на фармакологические свойс ПКС (глицирам, густой экстракт корня солодки (ГЭКС)) является весьма важно актуальной проблемой.

Цель исследования: Изучить возможность использования в качес дисперсионной среды в интрагастральных коктейлях с препаратами корня соло (глицирам, ГЭКС) различных газов (кислород, диоксид углерода, азот) и оцеп влияния газовой составляющей на их фармакологические свойства. Задачи исследования:

1. Определить стабильность пены в интрагастральных коктейлях в зависимости ( дисперсионной газовой среды (кислород, диоксид углерода, азот) и концентрат ГЭКС.

2. Изучить влияние газовой составляющей интрагастрального коктейля препаратами корня солодки (глицирамом, ГЭКС) на гематологический и иммуннь статус на модели радиационного иммунодефицита (РИ) у экспериментальш животных (крысы Вистар).

3. Исследовать динамику изменения состава морфологических элемент периферической крови на модели адъювантного артрита (АдА) экспериментальных животных при использовании пенных коктейлей различно газового состава с ГЭКС.

4. Оценить иммуномодулирующий эффект пенных интрагастральных коктеши различного газового состава с ГЭКС на модели адъювантного артрита.

5. Определить антиоксидантные свойства изучаемых лекарственных форм на модел адъювантного артрита у экспериментальных животных при применени

грагастралыгых коктейлей с различными газовыми составляющими.

Научная новизна заключается в том, что впервые обоснована возможность гучения интрагастральных коктейлей разного газового состава. Показана и ановлена зависимость стабильности пены интрагастрального коктейля от щентрации раствора и газовой составляющей:кислород, диоксид углерода,азот.

На моделях радиационного иммунодефицита и адъювантного артрита 1влена зависимость противовоспалительных, иммуномоделирующих и иоксидантных свойств интрагастральных коктейлей от газовой составляющей.

Установлено, что генеральным вектором иммуномоделирующего действия г кислородного коктейля является иммунодепрессивный, а углекислотного и тного - разнонаправленный иммуностимулирующий эффект с преобладанием для жсида углерода влияния на гуморальное, а азота-клеточное звенья иммунной ;темы.

Практическая значимость работы заключается в экспериментальном >сновании возможностей фармакологической коррекции нарушений 1атологического, иммунного статуса и антиоксидантной системы грагастральными коктейлями разного газового состава с препаратами корня юдки (глицирам, ГЭКС) при воспалительных процессах и иммунодефицитах.

Внедрение результатов исследования: Разработанные интрагастральные сгейли разного газового состава (кислород, диоксид углерода, азот) с препаратами >ня солодки (глицирам, ГЭКС) используются в санаториях им. М.Ю. Лермонтова (г. шгорск), «Ессентуки» ФСБ РФ (г. Ессентуки); включены в программу ;ледигшомного образования на кафедре курортологии и физиотерапии ФПО звропольской государствешгой медицинской академии.

Апробация результатов исследования: Материалы диссертации доложены на идейных научно-практических конференциях, посвященных 80-ти летию ГШИИК тгигорск, май 2000), 65-ти летию санатория «Ессентуки» ФСБ Россини (Ессентуки, рт 2000), международном конгрессе «Традиционная медицина- 2000» (Элиста, ггябрь 2000).

Основные положения выносимые на защиту: Результаты исследования фармакологической активности препаратов корня солодки ицирам, ГЭКС) в пенных интрагастральных коктейлях и целесообразность тользования в качестве дисперсионной среды различных газов (кислород, диоксид юрода, азот).

2. Данные, подтверждающие,, что стабильность пены интрагастрального коктейля с Г2 зависит от концентрации раствора и от газовой составляющей его дисперсионной сред

3. Влияние газовой составляющей пенных интрагастральных коктейлей с препарат корня солодки (глицирам, ГЭКС) на гематологические показатели.

4. Результаты исследования подтверждающие, что пенные интрагастральные коктеш ГЭКС разного газового состава наряду с иммуномодулирующим влиянием, облад; противовоспалительным и антиоксидантным действием.

Публикации: По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ, в том Ч1 2 методические рекомендации. Получено положительное решение формаль экспертизы по заявке на патент.

Объем и структура диссертации: Диссертация состоит из введения, обз литературы, методов исследования и лечения, 3-х экспериментальных п обсуждения результатов, выводов и практических рекомендаций. Матери; изложены на 133 страницах машинописного текста, включая 29 таблиц, рисунков.

Указатель литературы содержит 193 отечественных и 60 зарубеж! источников.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования:

Для решения поставленных в работе цели и задач было провед исследование стабильности пен при диспергировании 0,2-1,5 г/% раствора Г" различными газами (кислород, диоксид углерода, азот) путем наблюденш измерения времени «жизни» отдельных пузырьков и разрушения столба пены ! Хаджиева, 1994). В проведенной работе были изучены пенные интрагастраль коктейли с глицирамом и ГЭКС разного газового состава (кислород, диок углерода, азот). Проведено три серии экспериментов на 210 крысах линии Вист; моделями радиационного иммунодефицита и адъювантного артрита. Использов; следующие методики оценки гематологического и иммунологического стат; перекисного окисления липидов: количество лейкоцитов, лейкоцитарная форм капиллярной крови, показатели фагоцитоза кишечной палочки сегментоядерш нейтрофилами (И.И. Иванову 1967), содержание в сыворотке крови лизоцима (( Бухарин 1974), циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) (В. Гашковой, 19 После иммунизации определяли содержание - общие Е-розеткообразующие клетк (Е-РОКобщ.) (А. Воуит, 1976 в модификации Е.А. Ружицкой, 1984), розеткооС

угощие клетки резистентные к влиянию теофиллина ( Е-РОКтфр) (G.F. Ciboddo et 1983 в модификации И.А. Мельник 1985), розеткообразующие спленоциты с 5 и iee эритроцитами (Е-РОКакт.) (J. Wibran, 1973 в модификации Е.А. Ружицкой) и ителообразующие клетки (АОК) (Фримель, 1985) в селезенке. Оценка [екисного окисления липидов осуществлялась по установлению интенсивности «тайного перекисного окисления липидов (ПОЛ) и накоплению малонового льдегида (МДА).

Полученные результаты экспериментов обработаны на компьютере типа -586 «Pentium» с использованием приемов вариационной статистики и оценены критерию Фишера-Стьюдента, разностным методом и с помощью регрессионно-реляционного анализа.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Глава 1. Обоснование целесообразности использования различных газов в качестве дисперсионной среды пенного интрагастрального коктейля с густым экстрактом корня солодки.

В настоящем исследовании изучалась возможность использования в качестве персионной среды в интрагастральных коктейлях с препаратами корня солодки щирам, ГЭКС) различных газов (кислород, оксид углерода, азот) и проводилась нка влияния газовой составляющей на их фармакологические свойства.

Учитывая, что ранее (Л.Е. Старокожко, 1988; И.А. Муравьев,1993) оделяли лишь влияние температуры и концентрации ПКС на состав и свойства ы кислородного коктейля, нами было проведено исследование стабильности пен [ диспергировании 0,2-1,5 г/% раствора ГЭКС различными газами (кислород, ксид углерода, азот) путем наблюдения и измерения времени «жизни» отдельных ырьков и разрушения столба пены. Было установлено (рис.1), что стабильность ы в значительной степени зависит от газовой составляющей коктейля. Самое должительное время спокойного существования сформировавшегося отдельного ырька и всего объема пены оказалось характерным для газовой составляющей, дставленной азотом и находилось в пределах с учетом концентрации ГЭКС )±1,01 - 40,5+1,82 сек (Р<0,001) и 21,6±1,1 -48,6+1,76 мин (Р<0,001). Визуально пузырьки отличались маленькими размерами и мономорфностыо. Достаточно окая стабильность пены отмечалась и при использовании в качестве персионной среды диоксида углерода соответственно 19,0+0,35 - 29,3±0,41 сек

(Р<0,001) и 10,8±0,41 - 35,2±0,48 (Р<0,001). Причем пузырьки, образованн диоксидом углерода, были несколько большего размера по сравнению с тел которые формировались кислородом.

Указанное позволяет сделать вывод о том, что, несмотря на значим различия стабильности пены в зависимости от газовой составляющей дисперсионн среды, каждый из газов может быть использован, с учетом пенообразующих свойс для изготовления интрагастрального коктейля. Однако, по пoкaзaтeJ продолжительности «жизни» пузырька и времени разрушения столба пены б01 предпочтительным является азот.

Зависимость времени «жизни» пузырька от концентрации ГЭКС и газовой составляющей коктейля

□Диоксид углерода □ Кислород ■Азот

Рис.1

Учитывая, что в многочисленных публикациях, были представлены даннь свидетельствующие об иммуномодулирующих свойствах ПКС и кислороди пенных коктейлей, содержащих указанные средства уже a priori можно бы предположить, что изменение газовой составляющей дисперсионной среды долж оказывать влияние и на их иммунеактивные свойства в изучаемой лекарственн форме (И.А. Муравьев, J1.E. Старокожко, 1990).

В связи с этим, нами было предпринято экспериментальное исследование 210 животных с моделями РИ и АдА.

ава 2. Изучение роли газовой составляющей дисперсионной среда,I пенного коктейля в ализации фармакологических свойств препаратов корня солодки (густой экстракт, пцирам) на модели радиационного иммунодефицита.

В первой серии исследования на 36 крысах-самцах линии Вистар в качестве сперсионной среды использовали кислород и диоксид углерода, а дисперспую зу представлял раствор глицирама. Такой выбор обусловлен тем, что как было гановлено, водный раствор последнего обладает при пероральном и рентеральном применении, однонаправленным иммунодепрессивным действием .Е. Старокожко,1993). Указанное выше, свидетельствует о том, что данный епарат является идеальным средством для предварительной оценки модуляции его муноактивных свойств при изменении лекарственной формы (пенный коктейль) и ювой составляющей, используемой для ее приготовления. Полученные данные азались убедительным подтверждением сделанному предположению. Так, у крыс, горым вводили кислородный коктейль после облучения, уровень лейкоцитов был

сим же, как и во второй контрольной группе соответственно 11,0±0,48 и 11,1±0,9, при применении углекислотного варианта (28 день) определялась тенденция к мпенсации данного показателя- 11,1±0,9 и 12,4+0,7. В то же время после приема слородного коктейля у животных, не подвергавшихся облучению, количество якоцитов, было достоверно ниже, чем у интактных- 11,1+0,9 и 16,7+1,12 £0,001). Наряду с этим, к 14-му дню исследований, по сравнению с интактными и пученными не лечеными особями, в группах, принимавших углекислотный ктейль, увеличивалось количество палочкоядерных лейкоцитов соответственно 0,8

',04, 0,12+0,04; 1,6±0,09 (Р<0,001) и 1,0+0,07 (Р<0,001). Уровень сегментоядерных гггрофилов становился достоверно выше контроля с облучением при пользовании обоих вариантов коктейля- 0,12+0,03- 4,4±0,5 (Р<0,001) и 3,7±0,2 с0,001). У облученных, получавших коктейли с кислородом и диоксидом углерода, сравнению с радиационным контролем, компенсировалась и лимфоцитопения -6,6

,3 и 5,4+0,5 (Р>0,05), 7,7+1,8 и 5,4±0,5 (Р>0,05).

То есть, в процессе проведения эксперимента, дополнительно поставленной задаче об оценке иммуномодулирующих свойств, изучаем1 лекарственных форм, удалось получить данные, свидетельствующие об : положительном влиянии на гематологические показатели, более выраженном п] использовании коктейля с диоксидом углерода.

При использовании кислородного коктейля к 28-му дню исследования группе, получавшей кислородный коктейль по сравнению с интактным контроле

отмечалось достоверное снижение фагоцитарной активности (ФА) 29,6+5,9 и 56,( 2,6 (Р<0,001). При. поении же углекислотным аналогом ФА увеличивалась достигала достоверно значимых величин на 14-ый и 28- ой дни, по сравнению

радиационным контролем, соответственно 39,2+4,3 и 26,0±4,7 (Р<0,05); 43,3±4,8

29,6+5,0 (Р<0,05). Фагоцитарный индекс (ФИ) оказался достоверно выше облученных животных, принимавших как коктейль с кислородом, так и диоксид» углерода - 0,4+0,05 и 0,8±0,1(Р<0,001) , 0,4+0,05 и 0,9±0,2 (Р<0,01). В то же вре; показатель завершенности фагоцитоза (ПЗФ) у облученных крыс, получавш только кислородный коктейль оказался на 14-ый и 28-ой дни исследования значи!

выше радиационного контроля- 38,8±6,7 и 18,3±4,1(Р<0,05); 36,7±3,5 и 27,0±^ (Р<0,001).

Рецепция Т-лимфоцитов по данным Е-РОКобщ. снижалась на 30-44% облученных группах, по сравнению с интактным контролем (Р<0,01), хотя п использовании углекислого коктейля эти изменения были менее выраженные, ч после кислородного аналога (42,0+1,4 и 65,6+1,54; Р<0,01). Уровень АОК в селезен под влиянием изучаемых лекарственных форм, особенно углекислотного варим снижался на 33% (33,2±2,71 и49,6±6,28; Р<0,05).

Анализ полученных данных в первой серии эксперимента свидетельствуе" положительном влиянии новых лекарственных форм с глицирамом и диоксид углерода на гематологические показатели. Наряду с этим, установл иммуномодулирующий эффект. Так, отмечаемая активация фагоцитарного зве иммунитета и снижение антителообразования в селезенке под влияни углекислотного коктейля свидетельствуют о связи подавленного гуморальнс иммунного ответа с повышением фагоцитарной активности (г= -0,67; Р<0,0 Установленное увеличение ПЗФ при применении кислородных коктейлей, очевид]

жет быть обусловлено значительной ролью кислородозависимых механизмов в ¡ершающей стадии фагоцитоза. Снижение при использовании кислородного стейля и восстановление после приема углекислотного аналога рецепторной нкции Т-лимфоцитов свидетельствует о разнонаправленном характере воздействия ^чаемых лекарственных форм с глицирамом на клеточное звено иммунной ¡темы, в зависимости от газового состава.

Обращено также внимание на то, что указанный газовый состав не ¡спечивает восстановления угнетённой, в результате облучения, рецепторной якции Т-лимфоцитов. В связи с этим, для изучения возможности расширения 1яния на иммунный статус животного газовой компоненты пенного коктейля, нами введено исследование в качестве дисперсионной среды азота в сравнении с жсидом углерода. Дисперсной фазой пенного коктейля в этой части работы и в [ьнейшем был избран вместо глицирама ГЭКС. Это вызвано тем, что в его состав щит как глицирризиновая кислота ее соли и основания, являющиеся муподепрессантами (Г.А. Толстиков,1991), так и флавоноиды, обладающие муностимулируюшим эффектом (А.Н. Бондарев, 1995). Указанное, на наш взгляд, гло позволить получить более полные и разносторонние сведения об изменении тора влияния газовой составляющей дисперсионной среды на иммуноактивные |йства дисперсной фазы пенного коктейля. Принимались в расчет и такие :дпочтительные для ГЭКС факторы как доступность и существенно более низкая имость препарата.

В результате проведенного исследования во 2 серии эксперимента было ановлено, что по завершении приема 10-ти коктейлей с азотом у облученных

зотных (14-й день) отмечалась тенденция к компенсации лейкопении- 14,4+5,8 и

3±0,51 (Р>0,05), а к 28-му дшо количество лейкоцитов стало выше не только

иационного- 26,9+0,86 и 16,9+0,8 (Р<0,001), но даже интактного контроля- 26,9+

5 и 20,4+1,1 (Р<0,001). Аналогичные изменения были зарегистрированы и при нке динамики изменения количества сегментоядерных лейкоцитов, которое залось выше, чем в обоих контролях (Р<0,001).Уровень лимфоцитов, сниженный »езультате облучения, у животных, принимавших как углекислотный, так и

гный коктейль к 28-й дню исследования восстанавливался: 20,1+1,4 и 13,06+1,1

0,001), 18,4 ±0,7 и 13,06±1,1 (Р<0,001). Наряду с этим, число моноцитов на 28-е

11

сутки, под влиянием изучаемых средств, стало выше там, где использовался азотя! коктейль- 4,4+1,3 и 1,08+0,2 (Р<0,01). Коктейли с диоксидом углерода и азотом облученных группах на 14-е и 28-е сутки вызывали увеличение ФА соответствен 30,6±1,6 и 21,4+1,3 (Р<0,001), 29,0+1,2 и 21,4+1,3 (Р<0,001), 40,1+2,5 и 30,0+;

(Р<0,01), 39,3+1,2 и 30,0+2,2 (Р<0,01). В то же время ФИ существенно не отличал во всех группах, а ПЗФ оказался достоверно сниженным только в облученной грул животных, получавших углекислый коктейль- 22,1±2,6 и 31,4+2,4 (Р<0,01).

Рецепция спленоцитов, как видно на рис. 2, по данным определен количества Е-РОКобщ., оказалась выше в той группе, которая получала азотт

коктейль- 51,8±1,0 и 48,0±1,5 (Р<0,05). Причем, показатель Е-РОК акт. оказал даже выше интактного контроля на 35% (Р<0,001).

Сравнительная характеристика влияния коктейлей с ГЭКС разного газовой состава на клеточное звено иммунитета экспериментальных животных с радиацнонным иммунодефицитом

□ Е-РОКакт. ОЕ-РОКтфр.

Условные обозначения 2-ой серии эксперимента

Группы наблюдений

1 - Интактные; 2 - Облученные; 3 — Без облучения + С02 коктейль; 4 — Облученньи С02 коктейль; 5 - Без облучения + N2 коктейль; 6 - Облученные + N2 коктейль * - статистически достоверное различие с интактным контролем **- статистически достоверное различие с радиационным контролем

Рис. 2

Уровень АОК в селезенке увеличивался более существенно г использовании углекислотного варианта изучаемой лекарственной формы на 3; (Р<0,01). В то же время сравнение данного показателя у облученных животш

имавших углекислотный и азотный коктейли, показывает, что диоксид эода,как дисперсионная среда, оказывает на процесс антителообразования в ¡енке более существенное влияние, чем азот (Р<0,01).

Количество ЦИК достоверно уменьшалось, по сравнению с радиационным ролем, только у облученных животных, которым вводили азотный коктейль-

5+11,1 и 161,1+8,2 (Р<0,05).

Наряду с этим, в облученных группах, принимавших коктейль с диоксидом рода и азотом, достоверно, по сравнению с радиационным контролем,

ичивалась активность лизоцима соответственно 19,8+1,2 и 10,7+1,0 (Р<0,001);

¿0,8 и 10,7+1,0 (Р<0,001); 19,8±1,2 и 16,7±0,8 (Р<0,05). Отмеченные тенденции в лгаке иммунологических показателей были зарегистрированы и в отдаленные и эксперимента. Однако, следует обратить особое внимание, что во всех гных группах, получавших азотный коктейль, показатели рецепции спленоцитов и выше, чем у тех животных, которым вводили углекислотный аналог ветственно 72,3+2,3 и 64,2+2,3 (Р<0,05), 58,8+1,1 и 35,4+1,8 (Р<0,001), 51,0+2,6 и +2,1 (Р<0,01), 73,0+1,6 и 53,7+3,0 (Р<0,001), 52,0+2,6 и 37,3+4,1 (Р<0,01), 53,3+2,3 3,3+2,0 (Р<0,001). Менее убедительными оказались сравнительные данные гчества АО К, которые к 109 дню лишь у необлученных животных под влиянием ного коктейля стали достоверно ниже, чем у тех особей, которые получали

кислотный вариант: 43,4+2,0 и 51,8+2,6 (Р<0,05).

Концентрация ЦИК в облученной группе под влиянием углекислого гейля стала значимо ниже по сравнению с радиационным и интактным (20 и 61%) фолем. Аналогичное направление изменения данного показателя гестрировано у необлученных крыс, получавших азотный коктейль (Р<0,001).

Наконец, активность лизоцима в необлученных группах после применения ¡кислотного и азотного коктейлей была достоверно выше интактных особей: 21,7

5 и 16,4+0,9 (Р<0,01), 23,3+0,6 и 16,4+0,9 (Р<0,001).

Анализ данных, полученных во второй серии эксперимента, свидетельствует о аильном выборе в качестве дисперсной фазы 1,5% раствора ГЭКС и дисперсной 1ы- азота и диоксида углерода. Указанное, позволило получить данные, аетельствующие о модуляции газовой составляющей фармакологических свойств персной фазы пенного интрагастралыюго коктейля.

13

Как следует из вышеизложенного, установлено благотворное влия изучаемых лечебных средств на гематологические показатели. Причем, изменения были более существенными, особенно при использовании азотн коктейля, чем те, которые отмечены в первой серии эксперимента. Оба изучаем средства, оказывали значимое позитивное влияние на фагоцитарную фунм нейтрофилов, несколько более выраженное у азотного коктейля. Тогда как коррекции антителообразования, концентрации ЦИК и муромидазной активно более предпочтительным оказался углекислый коктейль.В то же время азот! коктейль обеспечивал более значительное и многостороннее действие на клеточ звено иммунного ответа, проявляющееся в повышение розеткообразукн способности спленоцитов, количества активных розеток и клеток с хелпер индукторной функцией. Следует особо подчеркнуть, что полученные нами данные однонаправленном иммуномодулирующем действии изучаемых средств не тольк ближайщие, но и отдаленные сроки дают основания считать результ; исследований достаточно убедидельными для того, чтобы сделать соответствую! выводы.

Итак, пенные интрагастральные коктейли с ГЭКС разного газового сост

обладают выраженными иммуномодулирующими свойствами. Причем 1

нарушениях клеточного звена иммунитета предпочтение следует отдавать в качес

дисперсионной среды - азоту, а гуморального - диоксиду углерода.

Глава 3. Изучение влияния газовой составляющей (кислород, диоксид углерода, а дисперсионной среды пенного инграгасгрального коктейля на фармакалогичес свойства густого экстракта корня солодки у животных с адыовантным артритом.

В третьей серии эксперимента на модели АдА было установлено, что по поения животных лишь в тех группах, где в составе изучаемого лечебного средс был ГЭКС, отмечалось уменьшение периметра суставов задних лапок, бо. выраженное в месте введения адыованта. Причем, наилучшие результаты данному показателю достигались при использовании коктейля с азотом в сравнени кислородным аналогом: 1,1±0,04 и 1,31+0,08; Р<0,05. Существенное снижен увеличенного в результате развития АдА количества лейкоцитов отмечалось так там, где использовались лекарственные формы, содержащие ГЭКС.

Во всех группах с различными методами воздействия, как видно на рис ФА была выше контроля с АдА без лечения. Причем, этот показатель приблизилс

;тному контролю у крыс, которым вводили углекислый коктейль- 49,4±1,8 и 0,9 (Р>0,05) и достиг его у тех, кто получал - азотный 50,6±0,7 и 50,5+0,9 05). Аналогичная направленность изменений оказалась характерной и для ФИ, >ый даже превзошел показатель интактной группы у животных, получавших :ислотный- 0,9+0,02 и 0,8±0,02 (Р>0,05) и азотный- 0,9+0,03 и 0,8±0,02 (Р>0,05) !йли. ПЗФ почти восстанавливался до уровня интактного контроля в группе тных, которых поили азотным коктейлем 34,2+0,6 и 35,2±0,7 (Р>0,05) и оказался контроля с АдА без лечения у крыс, принимавших углекислотный коктейль . :1,2 и 31,7+0,7 (Р>0,05).

денка влияния коктейлей с ГЭКС разного газового состава на показатели фагоцитоза у животных с АдА

ШФА О ПЗФ

>вные обозначения 3-ей серии эксперимента

пы наблюдений

[нтактные; 2 - АдА без лечения; 3 АдА+ 1,5% раствор ГЭКС; 4 - АдА+ вода, ащенная 02; 5 - АдА+ вода, обогащенная С02; 6 - АдА+ вода, обогащенная N21 \+ кислородный коктейль 1,5 % раствором ГЭКС; 8- АдА+ углекислотный ейль с 1,5% раствором ГЭКС; 9 - АдА+ азотный коктейль с 1,5% раствором С

гатистически достоверное различие с интактным контролем :татистически достоверное различие с контролем АдА

Рис.3

Количество АОК спленоцитов во всех группах сохранялось выше интактного роля. Эти отличия достигали статистически значимого уровня и в основных пах: 131,0±3,7 и 98,1+3,8 (Р<0,001), 111,0+2,8 и 98,1+3,8 (Р<0,001); 114,7+6,6 и +3,8 (Р<0,01). У животных, получавших кислородный коктейль, этот показатель

оказался выше на 34% интактного контроля -131, 0±3,7 и 98,1±3,8 (Р<0,05), i тех, кому вводили углекислотный- 131, 0±3,7 и 111,0±2,8 (Р<0,001) и азотный-0+3,7 и 114,7+6,6 (Р<0,05) аналоги.

Более выраженное розеткообразование спленоцитов отмечалось в интаю контроле по сравнению с другими группами. Однако, лишь у животных, i вводили азотный коктейль, он приближался к уровню интактного контроля- 56,3 и 61,7+2,5 (Р>0,05). Наглядным свидетельством, представленным сведен является рис. 4

Оценка влияния коктейлей с ГЭКС разного газового состава на показател гуморального и клеточного иммунитета у крыс с АдА

140%*--—:-—-

120% 100% 80% 60% 40% 20% 0%

12 3 4 5 6 7 8 9

®АОК на 10 млн. спленоцитов РЕ-РОК общ. %

Рис.4

Концентрация ЦИК достигла уровня интактного контроля только у к] получавших углекислотный- 86,6±4,8 и 89,6+8,3 (Р>0,05), а также азотный кокте; . 89,2+7,8 и 89,6+8,3 (Р>0,05). Активность лизоцима приближалась к показат интактного контроля лишь у животных, получавших углекислотный коктей. 11,4+0,4 и 11,2±0,4 (Р>0,05).

Определение перекисного окисления липидов позволило установить (рис что этот показатель у животных с АдА без лечения возрастал по сравнени интактным контролем на 59% и стал достоверно ниже у тех особей, которым ввод коктейли с азотом и диоксидом углерода: 17,8±1,8 и 12,6+1,8 (Р<0,05); 17,8±1 10,9±1,1 (Р<0,001). Однако, более выраженные изменения зарегистрированы применении последнего и стали ниже интактного контроля- (11,2+1,4 и 10,9±1,1).

енка влияния коктейлей с ГЭКС разного газового состава у крыс с АдА иа интенсивность спонтанного ПОЛ

ОМ ДА нмоль/мл

Рис. 5

Наряду с этим, следует подчеркнуть, что нами была установлена еляционная связь изменений ПОЛ по уровню МДА и показателями иммунного 'са в процессе лечения коктейлями с ГЭКС разного газового состава. При едении корреляционного анализа данных, полученных у крыс с АдА в процессе гия изучаемыми средствами, оказалось, что в группе животных, получавших ;йль с диоксидом углерода обнаружена, хотя и разнонаправленная, взаимосвязь iy уровнем МДА и такими показателями иммунного статуса как ФА (г= -0,84; )01), ПЗФ (г= +0,69; Р<0,01), а также E-РОК общ. (г= -0,79; Р<0,01).

Анализ 3-й серии экспериментального исследования, свидетельствует о жительном влиянии изучаемых новых лекарственных форм на такие тические показатели как масса тела и периметр поражегшых суставов задних к животных. Наряду с этим, там, где применялся 1,5% раствор ГЭКС и коктейли ш, происходило восстановление нарушенного патологическим процессом чества лейкоцитов. Причем, под влиянием азотного коктейля эти позитивные нения были более значительными. Отмеченное, на наш взгляд, свидетельствует раженном противовоспалительном эффекте изучаемых средств, интенсивность poro можно расположить в следующем порядке: азотный, углекислотный и, нец, кислородный коктейли.

Наряду с этим, изучаемые лекарственные формы, обеспечивали ;ственный иммуномодулирующий эффект, хотя он носил и неоднозначный ¡стер. Так, все используемые коктейли вызывали активацию фагоцитарного звена /нитста, но более выраженной она была там, где применяли углекислотный и

17

азотный варианты. Причем, это относилось к ФА и ФИЛ, а ПЗФ под влиян угле кислотного коктейля напротив снижался.

Рецепция лимфоцитов, по данным Е-РОКобш., восстанавливалась толы тех случаях, когда новая лекарственная форма содержала азот. Уровень А напротив, достоверно увеличивался только в группе, где вводили кислород] коктейль. Концентрация ЦИК достигала нормального уровня под влиян углекислотного и азотного коктейлей и сохранялась высокой - при введе кислородного аналога. Активность лизоцима нормализовалась у живот! получавших изучаемую лекарственную форму с диоксидом углерода.

Указанное свидетельствует о разнонаправленном иммуномодулирукм действии изучаемых средств: кислородный коктейль- с более определеш иммунодепрессивным эффектом, углекислотный и азотный иммуностимулирующим. Причем, у последнего более выражено влияние клеточное звено иммунной системы.

Определение перекисного окисления липидов по интенсивнс спонтанного ПОЛ и накоплению МДА позволило установить, что этот показа-; достоверно снижался в тех случаях, когда вводили коктейли с азотнш углекислотным коктейлями. Однако более выраженные изменения зарегистриров при применении последнего. Представленные данные свидетельствуют антиоксидантном действии указанной группы коктейлей, особенно- углекислота Наряду с этим, следует подчеркнуть, что установленная нами корреляционная а изменений ПОЛ по уровню МДА и показателями иммунного статуса в прощ лечения коктейлями с ГЭКС разного газового состава, подтверждает, что б отмечено ранее, участие антиоксидантной системы в регуляции иммунного отве-модуляции его антиоксидантами.

Итак, пенные интрагастральные коктейли с ГЭКС разного газового сос обладают выраженными противовоспалительными, иммуноактивными антиоксидантными свойствами. Причем, учитывая обнаруженные в 3 се эксперимента различия в их действии, они могут применяться при / дифференцированно: кислородные коктейли - для стимуляции проц( антителообразования, а при нарушениях клеточного звена иммунитета предпочте следует отдавать в качестве дисперсионной среды в зависимости от выражение процесса в первую очередь азоту, а затем - диоксиду углерода.

В то же время, каких либо особенностей, тенденций или, тем более, томерностсй в тех контрольных группах, где применяли воду, обогащенную иемыми газами, установить не удалось, а имеющие место колебания показателей, «га беспорядочный, флюктуирующий асимметричный характер.

Таким образом, интегральная оценка проведенного исследования свидетельствует о что изменение газовой составляющей обеспечивает модуляцию иммуномодулирующих ¡ста ПКС, причем генеральным вектором достигаемого результата для кислородного ейля является иммунодепрессивный, а ушекислошого и азотного - иммуностимулирующий екг. Однако, при нарушениях клеточного звена иммунитета предпочтение следует отдавать у, а гуморального-диоксиду углерода.

ВЫВОДЫ

1. Разработаны методы получения пенных шпрагастральных коктейлей с препаратами корня солодки разного газового состава (кислород, диоксид углерода, азот).

2. Установлено, что стабильность пены шпрагастрального коктейля с ГЭКС зависит не только от концентрации раствора, но и от газовой составляющей его дисперсионной среды. Наиболее выраженными пенообразующими свойствами обладает азот.

3. Гемопоэтический и противовоспалительный эффекты изучаемой лекарственной формы связаны с газовой компонентой ее дисперсионной среда, которую по выраженности действия можно ранжировать следующим образом: азот, диоксид углерода, кислород.

4. Выявлено влияние газовой составляющей дисперсионной среды пенных шпрагастральных коктейлей на иммуномодулирующие свойства препаратов корня солодки (глидирамом, ГЭКС).

5. Показано, что кислород повышает фагоцитарную активность, показатель завершенности фагоцитоза нейтрофилов, уровень антителообразукнцих спленоцитов, снижает рецепторную функцию Т-лимфоцитов.

6. Установлено положительное активирующее влияние диоксида углерода на фагоцитарное звено иммунитета, розетко-образующую функцию Т-лимфоцитов.

7. Диоксид углерода снижает антителообразование в селезенке, восстакавш концентрацию ЦИК и повышает активность лизоцима в сыворотке крови.

8. Выявлено, что азот стимулирует фагоцитарную функцию нейтроф! максимально повышает розеткообразующую способность спленощ увеличивает количество активных розеток, клеток с хелперно-индукто функцией, нормализует уровень ЦИК и увеличивает активность лизоцга сыворотке крови.

9. Интегральная оценка обнаруженных феноменов свидетельствует о том, генеральным вектором достигаемого результата при использовании кисло является иммунодепрессивный эффект, диоксида углерода и а иммуностимулирующий. Причем, у последнего боле выражено влияни клеточное звено иммунной системы.

10. Установлено снижение перекисного окисления липидов под влиянием азота углекислотного коктейля, более выраженное при применении диоксида углер

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ Проведенное клиническое испытание пенных интрагастральных коктейле диоксидом углерода и азотом в санаторно-курортных учреждениях КМВ (санап «Ессентуки» ФСБ РФ и им. М.Ю. Лермонтова), подтвердило их эффективность заболеваниях, обусловленных иммунодефицитсзм и позволило определить показ для их применения: Для коктейля с диоксидом углерода:

1 .Атопический дерматит (Ь 20) с сенсибилизацией к бактериальным аллерге развивающейся по типу гиперчувствительности замедленного типа, умер! сниженных уровнях фагоцитарных показателей, количестве Е-РОК отн., Е-РОКтс ^А.

2. Астма (145), в том числе астма с преобладанием аллергического компонента (1' с вышеуказанными изменениями иммуноаллергической реактивности. Для коктейля с азотом:

1 .Атопический дерматит (Ь 20) с сенсибилизацией к бактериальным аллерге развивающейся по типу гиперчувствительности замедленного типа, значите, сниженных уровнях фагоцитарных показателей, Е-РОК отн., Е-РОК тфр. и 1цА.

тма (J45), в том числе астма с преобладанием аллергического компонента (J45.0) неуказанными изменениями иммуноаллергической реактивности. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ: Экспериментальное исследование антиоксидантных свойств пенных коктейлей с :идом углерода и густым экстрактом корня солодки //Актуальные проблемы ановительной медицины,курортологии и физиотерапии:Тез. докл...Всерос. м «Здравница».-М.:Рос. науч. восст. мед-ны и курортологии, 2001. - С. 183 ¡торы: Л.Е.Старокожко, Н.М. Самутин, Е.И. Самутина).

Физическая биотерапия- одно из основных направлений развития курортной а (проблемы, перспективы) // Проблемы совершенствован™ восстановительной цины и реабилитации больных с распространенной патологией:Материалы [. межвед. науч.-практ. конф. посвящ. 65-летию санатория «Ессентуки» ФСБ ни.-Ставрополь:Изд-во СГМА,2000.- С. 42-45 (Соавторы: Л.Е. СтарокожкоДО.М. зайд, Н.М. Самутин, Г.С. Гутенева, A.A. Бучко, Е.И. Самутина, Э.Г. Шогенов). Модуляция в экспериментальных условиях некоторых иммунологических и имических показателей интрагастральными коктейлями разного газового та и фармакологически активными препаратами растительного и животного схождения //Съезд иммунологов и аллергологов СНГ (3; 16-20 сент. 2000;Сочи): ¡риалы.../Аллергология и иммунология,- М., 2000,- Т.1,- № 2. - С 132 (Соавторы: Итарокожко, Н.М. Самутин, Г.С. Гутенева, Е.И. Самутина, М.Е. Котова). Экспериментальное исследование иммуномодулирующего влияния коктейлей с аратами корня солодки //Традиционная медицина:Материалы конгр.(27-29 сент. ,Элиста).- М., 2000.-С 268-269 (Соавторы: Л.Е.Старокожко, Н.М. Самутин, [. Гринзайд, Г.С. Гутенева, Е.И. Самутина).

Оценка влияния пенного азотного коктейля с густым экстрактом корня солодки иммунный статус экспериментальных животных // Традиционная щина:Материалы конгр.(27-29 сент. 2000,Элиста).- М., 2000.-С 268-269 вторы: Л.Е.Старокожко, Н.М. Самутин, Ю.М. Гринзайд, Г.С. Гутенева, Е.И. /тина).

Интрагастральные пенные коктейли разного газового состава с препаратами я солодки для иммуномодуляции при заболеваниях,обусловленных вторич-ным унодефицитом // Методические рекомендации.- Ставрополь:Изд-во СГМА, 10 с.

(Соавторы: Л.Е.Старокожко, Ю.М. Гринзайд, Н.М. Самутин, Г.С. Гутенева, Е Самутина).

7.Интрагастральные пенные коктейли разного газового состава с препарата корня солодки для иммуномодуляции при заболеваниях иммуно-аллергичесю генеза // Методические рекомендации,- Ставрополь:Изд-во СГМА,2001- 10 (Соавторы: Л.Е.Старокожко, Ю.М. Гринзайд, Н.М. Самутин, Е.И. Самутина).

8.Изучение влияния пенных коктейлей разного газового состава на перекис1 окисление липидов у крыс //Человек и лекарство: Тез. докл. Рос. Нац. Конгр. (8; апр.2001;Москва).- М.:ООФ «Здоровье человека», 2001.-С.559 (Соавторы: Г Гутенева, Л.Е. Старокожко, Ю.М. Гринзайд, М.Т. Гутенев)

9. Пенные коктейли с диоксидом углерода и препаратами корня солодки курортном этапе реабилитации больных атопическим дерматитом//Актуалын проблемы восстановительной медицины,курортологии и физиотерапии:! докл...Всерос. форум «Здравница».-М.:Рос. науч. восст. мед-ны и курортолог 2001. - С. 183 (Соавторы: Л.Е.Старокожко, Н.М. Самутин, Е.И. Самутина).

Ю.Положительное решение формальной экспертизы по заявке на пат< «Иммуномодулятор» № 2001104858 от 2 .08.2001 (2001 (Соавторы: Л.Е. Старокож Г.С. Гутенева, Н.М. Самутин, Ю.М. Гринзайд)

Коробко Инна Юрьевна

Изучение влияния газовой составляющей интрагастрального коктейля на фармакологические свойства препаратов корня

солодки

Автореферат

Подписано в печать: 30.01.2002 Формат 60*84-1/16. Бумага кн.-журнальная. Печать ротапринтная Ус.печ.л.1.0. Уч.-изд.л.1.0.тираж I ООэкз.Заказ № ^уО

Пятигорская государственная фармацевтическая академия 357532,г. Пятигорск,пр. Калинина, 11

Ротапринт ПятГФА. Г. Пятигорск, пр. Калинина, 11

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Несмотря на очевидный прогресс в развитии фармации и медицины поиск высокоэффективных лекарственных средств и методов лечения, больных с распространенной патологией, остается в центре внимания отечественных и зарубежных ученых. Это обусловлено в определенной степени и тем, что ведущим направлением фармакологии является создание селективных препаратов, сфера применения которых часто носит симптоматический и/или узко направленный патогенетический (рецептор, клетка или орган- мишень) характер (1, 22, 24),

Однако в медицинской практике наиболее часто встречаются пациенты с мультифакториальной патологией (84, 111). В этих случаях, на различных этапах реабилитации больного, предпочтение отдается лечебным средствам, оказывающим влияние на различных уровнях иерархии от молекулярного до организменного уровня (139,157). Такую роль могут выполнять лечебные средства растительного происхождения (121, 125, 126, 158). В связи с этим, очевиден интерес к солодке и ее препаратам. Однако, традиционные лекарственные формы (настои, отвары, сиропы и др.) не обладают достаточной биологической доступностью. В исследованиях отечественных ученых (115,125) показана целесообразность их использования в виде пенных систем доставки (интрагастральные коктейли). Ранее было установлено,что преимущество пенных систем доставки в сравнении с водными растворами, заключается в возрастании на 20% диализа in vitro (целлофан) и резорбции in vivo у экспериментальных животных. В то же время имеются данные, свидетельствующие об отрицательных свойствах этой лекарственной формы, где в качестве дисперсионной среды используется кислород (19, 23). Кроме этого, необходимо учитывать, что этот вариант коктейля может инициировать продукцию активных форм кислорода. Причем, как известно, АФК способны оказывать не только позитивный эффект (антимикробный, тумороцидный; участвуют в синтезе лейкотриенов и фагоцитозе), но и повреждающее действие (деградация гиапуроиовой кислоты, коллагена, изменение структуры ДНК, либерация гистамина, инициирование свободно-радикального ПОЛ), осуществляя деструкцию компонентов клеточных мембран и разрушение клеток (эндотелиальных, кардиомиоцитов, тромбоцитов, энтероцитов, фибробластов), способствуя развитию воспаления, ишемической болезни сердца, бронхиальной астмы (3, 69, 96, 112, 149, 225). Указанное, в определенной степени, ограничивает использование кислорода в лечебных целях. В связи с этим, интересна роль диоксида углерода. В настоящее время показано, что он является универсальным ингибитором генерации АФК клетками (72, 73, 75, 226). Также заслуживает внимания азот, входящий, как обязательный компонент, в газовый состав атмосферы, тем более, что возможность его влияния на саногенетические механизмы при патологических процессах разного происхождения изучено крайне недостаточно (166, 168). Указанное свидетельствует о том, что изучение возможности использования, наряду с кислородом, других газов (диоксид углерода, азот) в интрагастральных коктейлях и оценка их влияния на фармакологические свойства ПКС (глицирам, ГЭКС) является весьма важной и актуальной проблемой.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ: изучить возможность использования в качестве дисперсионной среды в интрагастральных коктейлях с препаратами корня солодки (глицирам, ГЭКС) различных газов (кислород, оксид углерода, азот) и оценка влияния газовой составляющей на их фармакологические свойства.

В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:

1. Определить стабильность пены в интрагастральных коктейлях в зависимости от дисперсионной газовой среды (кислород, диоксид углерода, азот) и концентрации ГЭКС.

2. Изучить влияние газовой составляющей интрагастрального коктейля с препаратами корня солодки (глицирамом, ГЭКС) на гематологический и иммунный статус на модели радиационного иммунодефицита у экспериментальных животных (крысы Вистар).

3. Исследовать динамику изменения морфологических элементов периферической крови на модели адъювантного артрита у экспериментальных животных при использовании пенных коктейлей разного газового состава с ГЭКС.

4. Оценить иммуномодулирующий эффект пенных интрагастральных коктейлей различного газового состава с ГЭКС на экспериментальной модели адъювантного артрита.

5. Определить антиоксидантные свойства изучаемых интрагастральных коктейлей с различными газовыми составляющими с ГЭКС на модели адъювантного артрита.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА заключается в том. что впервые обоснована возможность получения интрагастральных коктейлей разного газового состава. Показана зависимость стабильности пены интрагастрального коктейля от концентрации раствора и газовой составляющей: кислород, диоксид углерода, азот.

На моделях радиационного иммунодефицита и адъювантного артрита выявлена зависимость противовоспалительных, иммуномоделирующих и антиоксидантных свойств интрагастральных коктейлей от газовой составляющей.

Установлено, что генеральным вектором иммуномоделирующего действия для кислородного коктейля является иммунодепрессивный, а углекислого и азотного разнонаправленный иммуностимулирующий эффект с преобладанием для диоксида углерода влияния на гуморальное, а азота-клеточное звенья иммунной системы.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ работы заключается в экспериментальном обосновании возможностей в фармакологической коррекции нарушений гематологического, иммунного статуса и антиоксидантной системы интрагастральными коктейлями разного газового состава с препаратами корня солодки (глицирам, ГЭКС) при воспалительных процессах и иммунодефицитах.

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1. Результаты исследования фармакологической активности препаратов корня солодки (глицирам, ГЭКС) в пенных интрагастральных коктейлях и целесообразность использования в качестве дисперсионной среды различных газов (кислород, диоксид углерода, азот).

2. Данные, подтверждающие, что стабильность пены интрагастрального коктейля с ГЭКС зависит от концентрации раствора и от газовой составляющей его дисперсионной среды. По показателю продолжительности «жизни» пузырька пенообразующие свойства увеличиваются в следующей последовательности: диоксид углерода, кислород, азот.

3. Влияние газовой составляющей пенных интрагастральных коктейлей с препаратами корня солодки (глицирамом, ГЭКС) на гематологические показатели. В процессе эксперимента было установлено, что кислородный коктейль оказывает иммунодепрессивный, а углекислотный и азотнный - иммуностимулирующие эффекты.

4. Результаты исследований подтверждающие, что пенные интрагастральные коктейли с ГЭКС разного газового состава оказывают иммуномодулирующее, противовоспалительное и антиоксидантное действие.

Материалы диссертации доложены на юбилейной научно-практической конференции, посвященной 80-ти летию ПНИИК (Пятигорск, май 2000), III съезде иммунологов и аллергологов СНГ (Сочи, сентябрь 2000), международном конгрессе «Традиционная медицина- 2000» (Элиста, сентябрь 2000)

По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ, в том числе 2 методические рекомендации. Получено положительное решение формальной экспертизы по заявке на патент:

1. Интрагастральные пенные коктейли разного газового состава с препаратами корня солодки для иммуномодуляции при заболеваниях, обусловленных вторичным иммунодефицитом (соавт. J1.E. Старокожко, Ю.М. Гринзайд, Н.М. Самутин, Г.С. Гутенева, Е.И. Самутина). Ставрополь, 2001.- 10 с.

2. Интрагастральные пенные коктейли разного газового состава с препаратами корня солодки для иммуномодуляции при заболеваниях иммуноаллергического генеза (соавт. JI.E. Старокожко, Н.М. Самутин, Ю.М. Гринзайд, Е.И. Самутина). Ставрополь, 2001.- 10 с.

3. Иммуномодулятор (соавт. Л.Е. Старокожко, Г.С. Гутенева, Н.М. Самутин, Ю.М. Гринзайд) - положительное решение формальной экспертизы по заявке на патент № 2001104858/20 (005209) от 22.02.2001.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА РАБОТЫ. Диссертация изложена на 133 страницах машинописного текста, иллюстрирована 29 таблицами, 14 рисунками и состоит из введения, обзора литературы, методов исследования и лечения, 3-х экспериментальных глав, обсуждения результатов, выводов и практических рекомендаций.

ВЫВОДЫ

1. Разработаны методы получения пенных интрагастральных коктейлей с препаратами корня солодки разного газового состава (кислород, диоксид углерода, азот).

2. Установлено, что стабильность пены интрагастрального коктейля с ГЭКС зависит не только от концентрации раствора, но и от газовой составляющей его дисперсионной среды. Наиболее выраженными пенообразующими свойствами обладает азот.

3. Гемопоэтический и противовоспалительный эффекты изучаемой лекарственной формы связаны с газовой компонентой ее дисперсионной среды, которую по выраженности действия можно ранжировать следующим образом: азот, диоксид углерода, кислород.

4. Выявлено влияние газовой составляющей дисперсионной среды пенных интрагастральных коктейлей на иммуномодулирующие свойства препаратов корня солодки (глицирамом, ГЭКС).

5. Показано, что кислород повышает фагоцитарную активность, показатель завершенности фагоцитоза нейтрофилов, уровень антительообразующих спленоцитов, снижает рецепторную функцию Т-лимфоцитов.

6. Установлено положительное активирующее влияние диоксида углерода на фагоцитарное звено иммунитета, розеткообразующую функцию Т- лимфоцитов. Диоксид углерода снижает антителообразование в селезенке, восстанавливает концентрацию ЦИК и повышает активность лизоцима в сыворотке крови.

7. Выявлено, что азот стимулирует фагоцитарную функцию нейтрофилов, максимально повышает розеткообразующую способность спленоцитов, увеличивает количество активных розеток, клеток с хелперно-индукторной функцией, нормализует уровень ЦИК и увеличивает активность лизоцима в сыворотке крови.

8. Интегральная оценка обнаруженных феноменов свидетельствует о том, что генеральным вектором достигаемого результата при использовании кислорода является иммунодепрессивный эффект, диоксида углерода и азота- иммуностимулирующий. Причем, у последнего боле выражено влияние на клеточное звено иммунной системы.

9. Установлено снижение перекисного окисления липидов под влиянием азотного и углекислотного коктейля, более выраженное при применении диоксида углерода.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Проведенное клиническое испытание пенных интрагастральных коктейлей с диоксидом углерода и азотом в санаторно-курортных учреждениях КМВ (санатории «Ессентуки» ФСБ РФ и им. М.Ю. Лермонтова), подтвердило их эффективность при заболеваниях, обусловленных иммунодефицитом и позволило определить показания для их применения: Для коктейля с диоксидом углерода:

1. Атопический дерматит (L 20) с сенсибилизацией к бактериальным аллергенам, развивающейся по типу гиперчувствительности замедленного типа, умеренно сниженных уровнях фагоцитарных показателей, количестве Е-РОК отн., Е-РОКтфр. и IgA.

2. Астма (J45), в том числе астма с преобладанием аллергического компонента (J45.0) с вышеуказанными изменениями иммуноаллергической реактивности. Для коктейля с азотом:

1 .Атопический дерматит (L 20) с сенсибилизацией к бактериальным аллергенам, развивающейся по типу гиперчувствительности замедленного типа, значительно сниженных уровнях фагоцитарных показателей, Е-РОК отн., Е-РОК тфр. и IgA.

2. Астма (J45), в том числе астма с преобладанием аллергического компонента (J45.0) с вышеуказанными изменениями иммуноаллергической реактивности.