Автореферат и диссертация по медицине (14.03.11) на тему:Дифференцированные подходы к лечению атопического дерматита пенными системами доставки с коктейлями разного газового состава

На правах рукописи

Тишаева Анна Викторовна

ДИФФЕРЕНЦИРОВАННЫЕ ПОДХОДЫ К ЛЕЧЕНИЮ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА ПЕННЫМИ СИСТЕМАМИ ДОСТАВКИ С КОКТЕЙЛЯМИ РАЗНОГО ГАЗОВОГО СОСТАВА

14.03.11 - Восстановительная медицина, спортивная медицина, лечебная

физкультура, курортология и физиотерапия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

13 ФЕВ 2014

005545185

Пятигорск - 2013

005545185

РАБОТА ВЫПОЛНЕНА НА КАФЕДРЕ КУРОРТОЛОГИИ И ФИЗИОТЕРАПИИ

ИПДО ПЮУ ВПО «СТАВРОПОЛЬСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ» МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Официальные оппоненты:

Чеботарев Вячеслав Владимирович, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой дермато-венерологии и косметологии ГБОУ ВПО «Ставропольский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Боряк Виктор Петрович, доктор медицинских наук, директор-главный врач ЛПУП Санаторий «Родник»

Ведущая организация: Государственное Бюджетное учреждение высшего профессиональнго образования «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО «РГМУ»МЗРФ)

Защита диссертации состоится «МЬ» 2013 года в /■7 часов

на заседании диссертационного совета приФГБУ ГЙПИИК ФМБА России по адресу (357501, г. Пятигорск, проспект С.М.Кирова, 30).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБУ ПГНИИК ФМБА по адресу (357501, г. Пятигорск, проспект С.М.Кирова, 30).

Автореферат разослан » _ _ 2013 года.

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, доцент Гайдамака Иван Иванович доктор медицинских наук, профессор Старокожко Леонид Евгеньевич

Научный консультант:

Ученый секретарь Диссертационного совета, кандидат медицинских наук, доцент_

Е.Н. Чалая

СПИСОК УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

ОВС - острое воспаление суставов (адъюваитпый артрит)

АГ - антиген

АТ - антитело

АД - атопический дерматит

АОК - антителообразующие клетки

АСК - ацетилсалициловая кислота

АФК - активные формы кислорода

ГЗТ - гиперчувствительность замедленного типа

ГК - глицирризиновая кислота

ГНТ - гиперчувствительность немедленного типа

ГЭКС - густой экстракт корня солодки

КС - корень солодки

МДА - малоновый диальдегид

МДСА - медленнодействующая субстанция аллергии

ПАВ - поверхностно-активные вещества

ПЗФ - показатель завершенности фагоцитоза

ПОЛ - перекисное окисление липидов

ПКС - препараты корня солодки

ФА - фагоцитарная активность лейкоцитов

ФАТ - фактор, активирующий тромбоциты

ФИ - фагоцитарный индекс лейкоцитов

ЦИК - циркулирующие иммунные комплексы

ЭБ - эритроциты барана

^М, ^А, ^Е - основные классы иммуноглобулинов

* - статистически достоверные различия изучаемых показателей по сравнению с интактным контролем

** - статистически достоверные различия изучаемых показателей по сравнению с острым воспалением суставов без лечения

з

Актуальность проблемы

Атопический дерматит (АД) до настоящего времени привлекает большое внимание отечественных и зарубежных исследователей. Это обусловлено высокой распространенностью АД, ранней манифестацией клинических симптомов и тяжестью течения, которые нередко сопровождают больных на протяжении всей жизни. Так, по данным Ю.В. Сергеева (2005), J. Lipozencic, R. Wolf (2007) атопическим дерматитом страдает до 10% населения. Причем, несмотря на множество исследований, посвященных изучению особенностей этиологии и патогенеза дерматоза, вопросам рациональной терапии, заболеваемость продолжает неуклонно расти.

Считается общепризнанным, что основным в развитии АД является иммунный механизм. Причем основная драматургия данного дерматоза связана с IgE-опосредованными реакциями (C.B. Кпючарева, В.А. Пирятинская, 2010). Однако атопия не сводится только к иммунной патологии, а представлена более сложным патогенезом, который включает как специфические (IgE-олосредованные), так и неспецифические (неиммунные) механизмы развития (Н.Г. Короткий с соавт., 2000; В.И. Пыцкий с соавт., 2002). Причем помимо различных изменений на клеточном уровне, происходит активация эндогенных протео- и липолитических ферментов, усиление процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и напряжение антиоксидантных защитных механизмов. Так, установлено, что в период обострения у данного контингента больных в 31,7% случаев отмечается снижение антиоксидантной активности плазмы крови, а у 66,1% - дефицит резервов антиоксидантной защиты, что приводит к развитию и сохранению активности аллергического воспаления при АД (В.М.Делягин, А.Г. Румянцев, 2004).

Однако результаты многочисленных исследований, к сожалению, не создают надежной основы для выбора средств, методов и технологий лечения АД. Поэтому, несмотря на выработанный единый алгоритм лечения данного дерматоза, включающий элиминационные режимы, антигистаминиые препараты, стероиды системные и для наружного применения, АСИТ и др. обнадеживающих результатов получить не удается (JI.M. Огородова, Е.В. Деева, И.А. Деев, 2009). Весьма существенное место занимают и играют несомненно позитивную роль в терапии АД природные и преформированные физические факторы. Однако и они не обеспечивают радикального снижения заболеваемости (А.Г. Сукасян, Л.Б. Смелянец, 2006).

Наш интерес на протяжении последних лет был сконцентрирован на фитотерапевтических средствах. Причем наибольшее предпочтение отдавалось густому экстракту корня солодки и разработке пенных систем доставки (пенные ванны и интрагастральные коктейли разного газового состава: кислород, углерода диоксид, азот). Было установлено их иммуномодулирующее действие, влияющее на разные звенья иммунной системы.

Поэтому не случайно нас заинтересовал поиск такой газовой составляющей, которая обладает более универсальным иммуномодулирующим эффектом, что могло бы открыть перспективу дифференцированного подхода к восстановлению нарушенного иммунного статуса.

В связи с этим, реализация указанной парадигмы у лиц, страдающих атопическим дерматитом, имеющим существенную социальную значимость, вследствие высокого уровня заболеваемости, обусловленным вторичным иммунодефицитом, прогрессирующим течением с частыми рецидивами, - является весьма важной и актуальной задачей.

Цель исследования

Повышение реабилитационного эффекта у больных атопическим дерматитом с нарушениями различных звеньев иммунной системы основанного на дифференцированном использовании пенных систем доставки, включающих коктейли разного газового состава (закись азота, кислород, углерода диоксид, азот).

Задачи исследования

1. Изучить длительность существования компонентов интрагастрального коктейля с ГЭКС, формируемого закисью азота в сравнении с другими газами (кислород, углерода диоксид, азот) и определить основные параметры пенно-солодковой ванны.

2. Провести сравнительную оценку влияния коктейлей с ГЭКС, формируемых закисыо азота и другими газами (кислород углерода диоксид, азот) на гематологический и иммунный статус экспериментальных животных с острым воспалением суставов (адъювантный артрит).

3. Дать экспериментальное обоснование возможности дифференцированного подхода к иммуномодуляции коктейлями разного газового состава.

4. Исследовать целесообразность дифференцированного использования коктейлей разного газового состава у больных атопическим дерматитом.

5. Провести сравнительную оценку ближайших и отдаленных результатов лечения больных атопическим дерматитом.

Научная новизна исследования

Впервые определено влияние закиси азота на время существования отдельного газового пузырька и пенной массы.

Установлен характер воздействия закиси азота в коктейле с густым экстрактом корня солодки на морфологические, гематологические показатели и иммунный статус животных с острым воспалением суставов (адъювантный артрит).

Впервые проведена оценка ближайших и отдаленных результатов лечения пенными ваннами и коктейлями разного газового состава у больных АД.

Впервые дано научное обоснование возможности дифференцированного подхода к иммуномодуляции коктейлями разного газового состава у больных с атопическим дерматитом.

Теоретическая значимость научных результатов

Проведенные исследования уточняют взамосвязи клинико-морфологических проявлений с нарушениями иммунного статуса и аллергической реактивностью у больных АД. В условиях эксперимента установлено ранее не известное свойство газовых составляющих газово-пенных сред оказывать иммуномодулирующее действие, обусловленное избирательным стимулирующим и тормозящим влиянием газовых носителей на отдельные звенья клеточного (фенотипические характеристики, функциональные эффекты) и гуморального звеньев иммунитета.

Полученные в условиях эксперимента данные открывают перспективу избирательного, индивидуализированного, дифференцированного выбора дисперсионной среды в зависимости от характера иммунных нарушений и свидетельствуют о целесообразности формирования новой концепции иммуномодуляции - газоиммуномодуляЦии.

Практическая значимость работы

По результатам исследования разработаны и внедрены в практическое здравоохранение средства и технологии восстановительного лечения больных АД с помощью пенных ванн и коктейлей разного газового состава, обеспечивающих избирательный, индивидуализированный, патогенетический подход, повышающий

реабилитационный эффект, уменьшающий частоту рецидивов заболевания и продлевающий сроки ремиссии.

Положения, выносимые на защиту

1. Доминирование многозвеньевых нарушений иммунного статуса и аллергической реактивности в патогенезе АД определяет приоритет иммуномодуляторов широкого спектра действия в терапевтичечкой тактике.

2. Закись азота может использоваться в качестве дисперсионной среды пенного интрагастрального коктейля с густым экстрактом корня солодки и оказывает иммуномодулирующий эффект отличающийся от других газовых составляющих (кислород, углерода диоксид, азот).

3. В лечении АД наряду с пенными паннами, целесообразно использовать пенные интрагастральные коктейли с густым экстрактом корня солодки разного газового состава (закись азота, кислород, углерода диоксид, азот).

4. Дифференцированный подход к иммуномодуляции пенными системами доставки с коктейлями разного газового состава обеспечивает высокую эффективность лечения больных атопическим дерматитом.

Внедрение в практику

Материалы диссертации внедрены в работу санаторно-курортных учреждений профсоюзов КМВ (ессентукском клиническом санатории «Виктория», пятигорском клиническом санатории им. М.Ю. Лермонтова, пятигорском санатории «Родник») и используются в учебном процессе при обучении врачей-интернов, физиотерапевтов и дерматовенерологов на факультете последипломного и дополнительного образования Ставропольского государственного медицинского университета.

Публикации и апробация работы

По теме диссгртации опубликовано 11 печатных работ, в том числе 3 в рецензируемых журналах ВАК, получены 3 патента РФ на изобретение: №2477118. от 31.05.2011 г., №2455883 от 31.05.2011 г. и №2477994. от 31.05.2011 г. и издано 1 практическое руководство рекомендованное учебно-методическим объединением по медицинскому и фармацевтическому образованию вузов России в качестве учебного пособия для системы послевузовского образования врачей. Основные положения диссертации обсуждены на V Международном конгрессе «Современная курортология: проблемы, решения, перспективы» [Санкт-Петербург, 27-29.04.2011], на научно-практической конференции, посвященной 25-летию кафедры физиотерапии, восстановительной медицины и курортной реабилитации института последипломного и дополнительного образования Ставропольской государственной медицинской академии «Основные направления развития курортологии и модернизации последипломного медицинского образования» (Пятигорск, 2011) и Ставропольском краевом обществе дерматовенерологов [Санкт-Петербург, 27-29.04.2011].

Объем и стру1стура диссертации

Диссертация изложена на 124 страницах машинописного текста и состоит из введения, части I — обзора литературы, представленной 1 главой, в которой изложены современные представления об этиологии, патогенезе, средствах, методах и технологиях лечения атопического дерматита, части II - собственных исследований, состоящей из 4 глав, содержащих методы экспериментального исследования, определение зависимости пенообразующих свойств пенных систем доставки, включающих пенно-солодковые ванны и интрагастральные коктейли, от концентрации густого экстракта корня солодки и газовой составляющей дисперсионной среды (закись азота, кислород, углерода диоксид, азот), клиническую характеристику больных, результаты исследований и их

обсуждение, выводы и практические рекомендации. Работа иллюстрирована 26 таблицами и 10 рисунками, оформленными в соответствие с требованиями ГОСТ 2. Указатель литературы, составленный по государственному стандарту «БИБЛИОГРАФИЧЕСКАЯ ССЫЛКА» ГОСТ Р 7.05. - 2008, включает 125 отечественных и 75 зарубежных источников.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Способность растворов образовывать пену (пенные ванны и интрагастральные коктейли) определяли по длительности времени существования пузырька и пенной массы микрофотографированием в зависимости от концентрации ГЭКС и газовой составляющей дисперсионной среды; изучали влияние давления воздуха, подаваемого компрессором, концентрации глицирризиновой кислоты и продолжительности проведения пенной ванны на органолептические свойства процедуры и эффективность терапевтического воздействия.

В экспериментальной части проведенной работы, изучались такие лечебные факторы, как интрагастральные коктейли с закисью азота и ГЭКС. Для сравнительной характеристики использовали в качестве дисперсионной среды другие газы: кислород, углерода диоксид и азот. Для исследования у крыс линии Вистар вызывали развитие острое воспаление суставов с помощью адъюванта Фрейнда. При этом проводили шестикратное определение массы тела животного (до развития острого воспаления суставов, через три недели манифестации патологического процесса, перед введением пенного коктейля и забоем); измерение периметра пораженных и «интактных» суставов в аналогичные сроки и оценку перекисного окисления липидов. Кроме этого изучали все основные звенья иммунного статуса экспериментального животного, определяли фагоцитарную активность нейтрофилов крови прямым визуальным методом по их способности связывать на своей поверхности, поглощать и переваривать микробную тест-культуру. Рассчитывали следующие показатели: ФА - процент фагоцитирующих нейтрофилов, ФИ - отношение общего количества фагоцитированных микроорганизмов на 100 нейтрофилов. ПЗФ - отношение переваренных к общему количеству фагоцитированных микроорганизмов. Состояние Т- и В звеньев иммунитета оценивали на основании определения содержания Е-РОКобщ., Е-РОКакт., Е-РОКтфр спленоцитов и АОК клеток в селезенке. Кроме этого измеряли концентрацию ЦИК, основываясь на способности полиэтиленгликоля (6000 Д) преципитировать иммунные комплексы, ктивность лизоцима определяли нефелометрическим методом, интенсивность спонтанного ПОЛ по накоплению МДА.Клинические исследования проводили у 100 больных атопическим дерматитом разного возраста, которые были разделены на 8 групп. 20 больных АД, из них основную группу составляли 10 пациентов (ОГ1) и контрольную - 10 (КГ1).

Наблюдаемым обеих групп назначали базовый комплекс, который включал диету № 5 А, прием минеральной воды источника №4 или его аналог по 200,0250,0 мл 3 раза в день за 30-45 мин до еды; пенные ванны с густым экстрактом корня солодки, температура пены - 35оС, длительность - 10 мин, в количестве 10 (КГ1). Пациенты основной группы (ОГ1) дополнительно получали 10 пенных интрагастральных коктейлей с кислородом. Коктейль с углерода диоксидом назначали 28 пациентам с АД. В основную группу входили 16 человек (ОГ2), контрольную - 12 (КГ2). Наряду с базовой составляющей комплекса, пациентам КГ2 назначали пенные ванны с ГЭКС, а ОГ2 - дополнительно 10 пенных интрагастральных коктейлей с углерода диоксидом. Коктейль с азотом получали 23 больных АД. Основная группа включала 12 человек (ОГЗ), контрольная -

11(КГЗ). Наблюдаемым обеих групп назначали базовый комплекс, причем больным КГЗ, наряду с этим, отпускали пенные ванны с ГЭКС, а ОГЗ -дополнительно 10 пенных интрагастральных коктейлей с азотом. Коктейль с закисью азота получали 29 больных АД. Основную группу составляли 19 пациентов (ОГ4), контрольную — 10 (КГ4).

Лицам обеих групп назначали базовый комплекс. Те, которые входили в состав КГ4 принимали пенные ванны с ГЭКС, а ОГ4 - дополнительно 10 пенных интрагастральных коктейлей с закисью азота. Сбор анамнеза заключался в получении ретроспективных данных о развитии, течении заболевания, осложнений, в том числе другой соматической патологией, средства и методы терапии, особенности их переносимости. Для постановки диагноза при первичном осмотре обращали внимание на длительность течения АД, наличие зуда разной интенсивности от незначительного до биопсирующего и следующих 6 признаков, входящих в критерии оценки общего индекса SCORAD: 1) эритема (гиперемия); 2) отек/папулообразование; 3) мокнутие/корки; 4) экскориация; 5) лихенификация; 6) сухость. Клиническое обследование включало визуальную оценку состояния очагов поражения. Аллергологическое исследование заключалось в том, что проводились скарификационные и внутрикожные тесты с водно-солевыми экстрактами 42 аллергенов: пищевые, бытовые, эпидермальные, пыльцевые и бактериальные. Определение популяций и субпопуляций иммунокомпетентных клеток осуществляли методом иммунофлуоресценции, основанном на использовании моноклональных антител, определяющих специфические антигенные маркеры различных популяций и субпопуляций лимфоцитов человека. Для оценки фагоцитарной системы определяли фагоцитарную и микробную активность нейтрофиллов крови. В качестве объекта фагоцитоза использовалась суточная живая культура Staphylococcus aureus штамм 209 (стандарт мутности 10 ед.). Рассчитывали следующие показатели: фагоцитарную активность — процент фагоцитирующих нейтрофилов (ФА), фагоцитарное число — среднее число фагоцитированных микробов на один фагоцит (ФЧ), фагоцитарный индекс -отношение общего количества фагоцитарных кокков на 100 нейтрофилов (ФИ). Оценку состояния Т и В звеньев иммунитета осуществляли методом иммуно-флюоресценции с помощью наборов моноклональных антител к различным CD-антигенам. Иммуноглобулины классов А, М, G на иммуннодиффузионных планшетах «Реафарм» определяли в сыворотке крови с помощью одномерной радиальной иммунодиффузии по Манчини. Количественное определение общего IgE в сыворотке крови производили методом твердофазного иммуноферментного анализа с набором Labodia - Хема [60, 84]. Полученные результаты обработаны на компьютере типа АТ-586 «Pentium» с использованием приемов вариационной статистики и оценены по критерию Фишера-Стьюдента, разностным методом и с помощью регрессионно-корреляционного анализа.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Оценка основных факторов и условий, влияющих на пенообразующую способность препаратов корня солодки.

При выяснении значения влияния концентрации ГЭКС и закиси азота была установлена продолжительность жизни отдельного пузырька и стабильность пенной массы коктейля с закисью азота в качестве дисперсионной среды.

Таблица 1

Концентрация ГЭКС (с, г/%) Время сохранения отдельного пузырька (Т, сек) (М ± т)

0,2 3,4±0,56*

0,3 8,4+0,5*

0,5 10,3+0,3*

1,0 12,0+0,4*

1,5 13,5+0,8*

Таблица 2

Концентрация ГЭКС (с, г/%) Длительность существования пенной массы (Т, мин) (М + т)

0,2 4,1±0,9*

0,3 Ю,9±1,1*

0,5 12,4+1,1*

1,0 14,4±0,6*

1,5 16,2+1,6*

Примечание: - показатель достоверности - р<0,05.

Наиболее выраженными показатели оказались при концентрации 1,5 г/% ГЭКС, а временные параметры, соответственно: 13,5±0,8 мин и 16,2±1,6 мин, что позволяет считать возможным использование интрагастрального коктейля с закисью азота в клинических условиях. Однако эти показатели оказались более предпочтительными при использовании в качестве диперсионной среды азота.

Рис. I Сравнительная характеристика времени сохранения отдельного пузырька с закисью азота и другими газами в зависимости от концентрации ГЭКС

Рис. 2 Сравнительная характеристика длительности существования пенной массы коктейля с закисью азота и другими газами в зависимости от концентрации ГЭКС

Оптимальных кондиции по всем изучаемым параметрампенной ванны показали необходимость сохранения давления воздуха в диапазоне 300-400 кПа при формировании пены, а 100-150 кПа - отпуске процедуры при количестве ГЭКС 150 - 50 мл при концентрации глицирризиновой кислоты в ГЭКС от 12 до 14 и выше. Наряду с этим бЕ.1ла выявлена прямая зависимость направленности эффекта от длительности процедуры. Так, при продолжительности ванны до 10 мин. ГК (%) определялось равной 0,018±0,002 и 15 мин. - 0,007±0,001 (р<0,01), что указывает на важность проведения «пенно-солодковой ванны» с продолжительностью процедуры до 10 минут при аллергических заболеваниях, а при заболеваниях, обусловленных вторичным иммунодефицитом - 15 минут и более.

2. Экспериментальное обоснование дифференцированных подходов к лечению атопического дерматита пенными системами доставки с коктейлями разного газового состава.

Изучение в экспериментальной части исследования влияние интрагастральных коктейлей с 1,5 % раствором ГЭКС (50 мг/кг) и закисыо азота в сравнении с другими газами (кислород, углерода диоксид, азот) на реализацию их иммуномодулирующего, противовоспалительного и антаоксидантного действия у животных с острым воспалением суставов (ОВС). у 110 крыс линии Вистар, разделенных на 11 групп по 10 особей в каждой показало, что после поения животных лишь там, где в составе изучаемого лечебного средства был ГЭКС, отмечалось уменьшение периметра суставов задних лапок (Р<0,001). Причем наилучшие результаты по данному показателю достигались при использовании коктейля с азотом 1,1±0,04 мм и его закисыо 1,2±0,04 мм при ОВС без лечения -1,64±0,1 мм (Р<0,001). Количество лимфоцитов оказалось в этих же группах 45,0±1,5% и 46±1,0% существенно ниже интактного контроля - 66,8±1,9% (Р<0,001).

Аналогичные результаты получены при определении ФА. Так, у животных, которым вводили азотный коктейль он был равен 50,6+0,7%, с закисыо азота -50,9±0,3%, тогда как с ОВС без лечения -42,7±0,7% (Р<0,001), а у интактных крыс -50,5+0,9%.

Таблица 3

Сравнительная характеристика изменения фагоцитарных показателей у животных с острым воспалением суставов под влиянием изучаемых средств и методов

терапии

N°Na пп Наименование группы ФА(%) ФИ (ед.) ПЗФ (%)

1. ОВС + коктейль с закисыо азота и 1,5% раствором ГЭКС (основная) 50,9+0,3** 0,9±0,02 34,9±0,4

0 Ингльггныс ( 1 контроль) 50,5+0,9 0,8+0,02 35,2+0,7

3. ОВС без лечения (2 контроль) 42,7±0,7 0,4±0,01 32,5+1,2

4. ОВС + 1,5% р-р ГЭКС О контроль) 48,6±0,5 0,5±0,02 32,9±0,2

5. ОВС + вода, насыщенна* кислородом (4 контроль) 46,2±1,8 0,5±0,02 32,7±0,3

6. ОВС + вода, насыщенная углерода диоксидом (5 контроль) 47,1±1,7 0,5±0,02 32,3±0,4

7. ОНС + вода, насыщенна! азотом (6 контроль) 45,0±2,9 0,5±0,03 33,1±0,3

8. ОВС + вода, насыщенна» закисью азота (7 контроль) ' 46,3±|,2 0,5±0,05 34,1±0,1

9. ОВС + кислородный кокгейль с 1,5% раствором ГЭКС (8 контроль) 47,3±0,6 0,6+0,02 33,4±0,3

10. ОВС + углекислотный коктейль с 1,5% раствором ГЭКС (9 контроль) 49,4±1,8 0,9+0,02 31,7±0,7

11. ОВС+ азотный коктейль с 1,5% раствором ГЭКС (10 контроль) 50,6±0,7** 0,9+0,03 34,2±0,6

Примечание: - показатель достоверности - р<0,01. Особенно выраженным оказалось отличие количества АОК на 106 спленоцитов. Так, у особей, получавших коктейль с закисью азота оно на 50% (146,3 ± 3,46) оказалось выше, нем у интактных - 98,1±3,8 (Р<0,001), а относительное число розеткообразующих клеток (Т-лимфоциты) даже достигло уровня интактного

контроля. 61,7 + 0,8% и 61,7±2,5%. Достоверные отличия Е-РОК отн. у животных, получавших коктейли с кислородом и углерода диоксидом стало достоверно ниже интактных особей (61,7+2,5%): 52,6+1,3% и 53,3+2,2% (Р<0,001).

Таблица 4

Сравнительная характеристика изменения содержания АОК и Е-РОКотн. в селезенке у животных с острым воспалением суставов под влиянием изучаемых

средств и методов терапии

№№ пп Наименование группы АОК (на 10" спленоцитов) Е-РОК отн.(%)

1 ОВС + коктейль с закисью азота н 1,5% раствором ГЭКС (основная) 146,3 + 3,46* 61,7 ± 0,8

2. Интак-ппле (1 контроль) 98,1+3,8 61,7+2,5

3. ОВС без лечения (2 контроль) 118,6+3,7 49,3±1,5

4 ОВС + 1,5% р-р ГЭКС (3 контроль) 108,7±5,5 55,7±2,5

5. ОВС + вода, насыщенная кислородом (4 контроль) 113,4+6,3 53,7+2,4

6. ОВС + вода, насыщенная углерода диоксидом (5 контроль) 108,3±6,1 51,7±2,1

7. ОВС + вода, насыщенная азотом (6 контроль) 121,6±6,8 52,3±1,5

8. ОВС + вода, насыщенная закисыо азота (7 контроль) !32,6±7,3 59,4+1,7

9. ОВС + кислородный коктейль с 1,5% раствором ГЭКС (8 контроль) 131,0+3,7 52,6+1,3'

10. ОВС + углекислотный коктейль с 1,5% раствором ГЭКС (9 контроль) 111,0±2,8 53,3 ±2,2*

11. ОВС+ азотный коюейль с 1,5% раствором ГЭКС (10 контроль) 114,7+6,6 56,3+1,4

Примечание: - показатель достоверности - р<0,05.

Существенных различий активности лизоцима и ЦИК во всех группах выявлено не было. Накопление малонового диальдегида оказалось максимальным при использовании кислородного коктейля 14,9±1,8 нмоль/мл и минимальным -углекислотного- 10,9+1,1 нмоль/мл, а также ниже группы ОВС без лечения (17,8±1,8 нмоль/мл) там, где применяли азотный аналог - 12,6+1,8 нмоль/мл и закись азота 12,9+1,2 нмоль/мл (Р<0,01 и Р<0,001).

Таблица 5

Сравнительная характеристика изменения содержания ЦИК и активности лизоцима у животных с острым воспалением суставов под влиянием изучаемых

средств и методов терапии

№№ пп Наименование группы Активность лизоцима (мкг/мл) ЦИ К (ед.)

1. ОВС + коктейль с закисью азота и 1,5% раствором ГЭКС (основная) И,9±0,4 92,3±!,9

2. Интактные(1 контроль) 11,2±0,4 89,6+8,3

3 ОВС без лечения (2 контроль) 15,8+0,8 118,1+4,3

4. ОВС+ 1,5% р-р ГЭКС (3 контроль) 12.3+0,3 104,9±4,3

5. ОВС + вода, насыщенная кислородом (4 контроль) 13,6±0,06 1 18,6+2,8

6. ОВС + вода, насыщенная углерода диоксидом (5 контроль) 17,2±0,б 111,6±5,9

7. ОВС + вода, насыщенная азотом (6 контроль) 13,7+0,2 1 !2,1±4,1

8. ОВС + вода, насыщенная закисью азота (7 контроль) 15,4±0,9 110,2+2,1

9. ОВС + кислородный коктейль с 1,5% раствором ГЭКС (8 контроль) 13,3+0,5 108,8±4,1

10. ОВС + углекислотный коктейль с 1,5% раствором ГЭКС (9 контроль) П,4±0,4 86,6+4,8

11. ОВС+азотный коктейль с 1,5% раствором ГЭКС (10 контроль) 12,4+0,7 89,2±7,8

Полученные экспериментальные данные могут быть интерпретированы следующим образом. Закись азота и другие газовые компоненты дисперсионной среды коктейля с ГЭКС существенно влияют на реализацию его иммуноактивных свойств. Причем, наиболее предпочтительным оказалась лекарственная форма с закисыо азота, обеспечивающая гармонизацию всех основных звеньев иммунитета, оказывая универсальный иммуномодулирующий эффект; В то же время коктейль с кислородом формирует иммуносупрессорный эффект, тогда как углекислый и азотный - иммуностимулирующее и выраженное антиоксидантное

действие, наряду е этим следует отметить, углекислота и впчеетвс ноентиш пины оказывает преимущественно стимулирующее действие па химергическое, В-звено, азот — китергическое, Т- звено. Указанное открывают перспективу избирательного, индивидуализированного, дифференцированного выбора дисперсионной среды в зависимости от характера иммунных нарушений и свидетельствуют о целесообразности формирования новой парадигмы иммуномодуляции - газоиммуномодуляции.

3. Клиническая оценка эффективности н целесообразности дифференцированного использования коктейлей разного газового состава.

Влияние коктейля с кислородом исследовали у 20 больных атопическим дерматитом (АД), из них основную группу составляли 10 и контрольную - 10 пациентов.

В результате была установлена положительная динамика клинической картины заболевания: снижалась интенсивность зуда, уменьшалась лихенификация, инфильтрация, шелушение в очагах поражения. Отличный результат зарегистрирован у 8 (80,0±8%) человек основной и у 4 (40,0±4%) пациентов контрольной групп (Р<0,001). Количество эозинофилов снизилось до 4±1% в основной группе (Р<0,05) и сохранялось на прежнем уровне в контрольной (7±2%). Фагоцитарные показатели повысились соответственно ФА до 33,1±0,2% в основной и 20,5±0,7% - контрольной группах (Р<0,001), ФИ - 0,6±0,06 и 0,3±0,02 (Р<0,001), ФЧ - 2,6+0,2 и 1,9±0,2 (Р<0,01). Существенных изменений не претерпели отдельные показатели Т-звена иммунитета. Так, количество Т-лимф. отн. увеличились до недостоверного уровня: 54,6+1,6 и 55,1±1,2% (Р>0,05), Т,, -42,2±1,1% и 44,0±1,2% (Р>0,05). Однако величина Т8 у пациентов, которым назначали кислородный коктейль повысилась значительно и достигла уровня 16,3±1,2% (Р<0,05). При этом у лиц, получавших лишь базовый комплекс, оставалась пониженной - 13,5±1,2% (Р>0,05). Количество В-лимф. отн. существенно снизилось лишь в основной группе - 10,9±1,2% (Р<0,001), тогда как в контрольной изменения оказались недостоверными - 16,2±1,1 (Р>0,05). Концентрация ^А достигла нормальных показателей у пациентов, получавших кислородный коктейль, и составляла 1,1+0,08 г/л (Р<0,01), а у лиц, получавших базовый комплекс, оставалась высокой - 1,8+0,02 (Р>0,05). Весьма показательной оказалась динамика ^Е. Так, этот показатель у наблюдаемых, получавших кислородный коктейль, уменьшился значительно и достиг уровня 127,4±13,4 МЕ/мл (Р<0,001), а в контрольной группе оставался почти на прежнем уровне -231,9+23,5 МЕ/мл (Р>0,05). Иммуноглобулины других классов (^М и 1§0) изменились незначительно - соответственно 1,0±0,09 (Р>0,05) и 1,1+0,03 (Р>0,05), 11,9±1,1 (Р>0,05) и 12,2+2,3 (Р>0,05) г/л.

При постановке скарификационных аллергических проб после лечения резко положительные (++++, +++) реакции с бытовыми, эпидермальными, пыльцевыми, пищевыми аллергенами не были зарегистрированы ни в одной группе, положительные и слабо положительные (++, +) установлены у 2 (20,0±2%), (Р<0,001) и 4 (40,0±4%), Р>0,05. Сенсибилизация на домашнюю пыль сохранялась положительной (++) У 1 (Ю±2%), Р<0,001 в основной и у 4 (40,0±4%) - в контрольной группах Р>0,05. Выраженность бактериальной аллергии снизилась незначительно у лиц, принимавших кислородный коктейль, сохраняясь положительной у 4 (40±4%), Р>0,05. Коктейль с углерода диоксидом назначали 28 пациентам с АД. Основную группу составляли 16 человек, контрольную - 12. Под влиянием указанной терапии была установлена положительная динамика клинической картины заболевания: снижалась интенсивность зуда, уменьшалась лихенификация, инфильтрация, шелушение в очагах поражения (Р<0,001).

Отличный результат констатировали у 39,1+3% основной и у 18,5+2% пациентов контрольной групп (Р<0,001). Количество эозинофилов снизилось с 6±1% до 5±1% (Р>0,05). Фагоцитарные показатели повысились соответственно: ФА - до 29,9±0,54% в основной и до 17,9±0,98% - в контрольной группах (Р<0,001), ФИ -0,79+0,03 и 0,48±0,11 (Р<0,001), ФЧ - 2,8+0,3 и 2,1+0,1 (Р<0,05). Количество Т-лимф. отн. существенно не изменилось и сохранялось на уровне 52,5±1,75% и 55,2±1,2% (Р>0,05), Т„- 43,3±2,1% и 48,8±1,1 (Р>0,05), Т5- 17,9±2,1% и 17,2+1,1% (Р>0,05). В то же время показатель В-лимф. отн. достиг нормальных цифр только в группе, где применяли коктейль с углерода диоксидом - 11,8±1,1% (Р<0,05) и оставался высоким у тех пациентов, кому назначали только базовый комплекс -13,3+1,7% (Р>0,05). Концентрация 1§А увеличилась до нормы в основной группе -1,2±0,08г/л (Р<0,05) и сохранялась низкой в контрольной - 0,92 ± 0,08 г/л (Р>0,05). Иммуноглобулины класса также приблизилась к нормальным показателям в основной группе - 11,8±1,3 г/л, хотя этот результат оказался недостоверным (Р>0,05), а у пациентов, получавших только базовый комплекс, данная тенденция не зарегистрирована (13,3±2,6 г/л). Общий [¿Е стал существенно ниже у наблюдаемых, принимавших коктейль с углерода диоксидом - 181,4+30,2 МЕ/мл (Р<0,05) и оставался высоким в контрольной группе - 270,0+28,0 МЕ/мл. Количество ^М сохранялось повышенным - 1,01±0,1 и 1,3±0,06 г/л (Р>0,05). При постановке скарификационных аллергических проб после лечения резко положительные (++++, +++) реакции с бытовыми, эпидермальными, пыльцевыми и пищевыми аллергенами зарегистрированы не были. Положительные и слабоположительные (++, +) тесты установлены (домашняя пыль, шерсть овцы, тимофеевка, цитрусовые) у 3 (18,75±2%) пациентов основной группы (Р<0,001) и 6 (50,0±5%), Р>0,05 - контрольной. Положительные и слабоположительные (++, +) внутрикожные тесты со стафилококком оказались соответственно у 2 (18,75+2%), Р<0,001 и 4 (33,3±3%), Р>0,05, а стрептококком - у 3 (25,0±2%), Р>0,05 и 3 (33,3±3%), Р>0,05. Коктейль с азотом получали 23 больных АД. Основную группу составляли 12, контрольную - 11 пациентов. Под влиянием указанной терапии была установлена положительная динамика клинической картины заболевания: снижалась интенсивность зуда, уменьшалась лихенификация, инфильтрация, шелушение в очагах поражения. Отличный результат зарегистрирован у 48,9+3% основной, и у 17,6±2% пациентов контрольной групп (Р<0,001). Количество эозинофилов снизилось до недостоверного отличия 4+1% в обеих группах (Р>0,05). Фагоцитарные показатели повысились соответственно: ФА - до 21,1±0,42% (Р<0,001) в основной и 13,5+0,87% - в контрольной группах (Р>0,05), ФИ - 0,64±0,06 и 0,52±0,02 (Р<0,001), ФЧ - 2,9±0,3 и 2,1+0,2 (Р<0,05). Количество Т-лимф. отн. достигло нормального уровня лишь в основной группе - 68,6+1,75% (Р<0,001) и сохранялась низкой в контрольной (51,1±1,2%, Р>0,05). Аналогичные изменения произошли и с Т|, - соответственно 48,3±1,4% (Р<0,001) и 41,1±1,1% (Р>0,05). Доставались, как и до лечения, сниженными - 17,1±1,8% и 14,1±1,1% (Р>0,05). Уровень В-лимф. существенно не изменился - 13,2+1,4% и 13,3+1,1% (Р>0,05). Концентрация иммуноглобулинов всех классов существенных изменений не претерпела. Так, уровень ^М оказался 1,2±0,03 и 1,3+0,06 г/л (Р>0,05), ^А -1,29±0,08г/л и 1,25+0,02 (Р>0,05), 1ёС - 12,5+1,1 и 12,3±2,2 г/л (Р>0,05), а также 1ёЕ 201,4+34,4 и 222,9±22,3 МЕ/мл (Р>0,05). При повторной постановке скарификационных и внутрикожных аллергических проб в конце курса лечения были зарегистрированы положительные и слабоположительные реакции (++, +) с бактериальными аллергенами у 5 (41,7+4%), Р<0,001 и 8 (72,7+7%), Р>0,05 пациентов.

Коктейль с закисью азота получали 29 больных АД. Основную группу составляли 19 пациентов, контрольную - 10. Установлена положительная динамика клинической картины заболевания: снижалась интенсивность зуда, уменьшалась лихенификация, инфильтрация, шелушение в очагах поражения. Отличный результат зарегистрирован у 11 (57,9±5%) человек основной и у 3 (30,0±2%) пациентов контрольной групп (Р<0,001). Количество эозинофилов, хотя и снизилось до 411% в обеих группах, однако это различие оставалось недостоверным (Р>0.05). Фагоцитарные показатели повысились соответственно: ФА -до 26,1±0,2% (Р<0,001) в основной и 13,2+0,7% - в контрольной группах (Р>0,05), ФИ - 0,5±0,06 (Р<0,001) и 0,3±0,02 (Р>0,05), ФЧ - 2,2±0,3 (Р<0,001) и 1,7±0,2 (Р>0,05). Аналогичная тенденция отмечалась с данными, характеризующими Т-звено иммунитета. Так, количество Т-лимф. отн. стало 55,6±1,6 (Р<0,01) и 48,1+1,2% (Р>0,05), Т„- 45,2+1,1% (Р<0,001) и 32,0±1,2 (Р>0,05), Т5 - 19,9+1,2% (Р<0,05) и 19,111,1% (Р>0,05). Количество В-лимф. отн. в основной группе достигло нормальных показателей - 11,8±1,1% (Р<0,001), тогда как в контрольной группе оставалось почти не измененным - 15,5±1,2% (Р>0,05). Концентрация ^М снизилась до нормального уровня 0,81±0,08 (Р<0,001) в основной группе и сохранялась на более высоком уровне - в контрольной (1,2+0,05 г/л, Р>0,05). Сходная ситуация зарегистрирована и с ДО - 109,4+12,4 (Р<0,001) и 192,9±20,3 (Р>0,05) МЕ/мл. снизился до нормального уровня в обеих группах, однако эти различия оказались недостоверными: 11,3+1,3 (Р>0,05) и 11,7+2,6 г/л (Р>0,05). Иммуноглобулины классов ^А - 1,2±0,09 и 1,110,1 г/л, а также ДО - 11,311,3 и 11,712,6 г/л сохранялись на прежнем уровне.

При постановке скарификационных аллергических проб после лечения резко положительных (++++, +++) реакций с бытовыми, эпидермальными, пыльцевыми, пищевыми аллергенами не установлено. Положительные и слабо- положительные (++, +) тесты определялись у 2 (10,5+1%) (Р<0,001) основной группы и 4 (40,0+4%) человек (Р<0,001), которым назначали исключительно базовый комплекс. При повторном проведении снутрикожных аллергических проб резко положительные (++++, +++) реакции с бактериальными аллергенами также не регистрировались. Положительные и слабоположительные (++, +) оказались у 2 (10,511%) пациентов (Р<0,001), получавших коктейль с закисью азота, и 3 (15,8+1%) наблюдаемых контрольной группы (Р<0,001). Причем сенсибилизация к кишечной палочке сохранялась у 4 (21,012%) и у 5 (50,015%) человек (Р<0,001).

Представленные данные клинического исследования в определенной степени ассоциируются с результатами эксперимента. Так, для кислородного коктейля характерным является повышение показателей фагоцитарной активности, Т5-звена иммунитета. Наряду с этим, уменьшается исходно повышенное количество В-лимф., нормализуется концентрация ^А и существенно снижается уровень ^Е, следствием чего становится снижение сенсибилизации с бытовыми, эпидермальными, пыльцевыми и пищевыми аллергенами. Углекислотиые коктейли также приводят к увеличению фагоцитарных показателей, нормализации количества В-лимф. отн., концентрации ^А и ^Е, снижению сенсибилизации к бытовым, эпидермальным, пыльцевым, пищевым и бактериальным аллергенам. Использование азота в качестве дисперсионной среды коктейля влияют на фагоцитарные показатели аналогично двум описываемым ранее газам.

Существенные изменения претерпевает Т-звено иммунитета: достигают нормального уровня количество Т-лимф. отн. и Т|,, тогда как существенно не изменяется уровень В-лимф. отн., концентрация иммуноглобулинов всех классов и сенсибилизация к бактериальным аллергенам. Весьма своеобразное влияние на иммунную систему установлено при применении коктейля с закисью азота. Так,

наряду с повышением фагоцитарных показателей, нормализуются основные субпопуляции Т- и В- звеньев иммунитета, концентрация ^М и приближается к нормальному уровню количество ^Е, что приводит к снижению сенсибилизации с бытовыми, эпидермальными, пыльцевыми, пищевыми и_„. бактериальными аллергенами.

Рис. 3 Сравнительная характеристика динамики основных показателен иммунной системы в 1- х основной и контрольной группах

Рис. 4 Сравнительная характеристика динамики основных показателей иммунной системы во 2-х основной и контрольной группах.

Рис. 5 Сравнительная характеристика динамики основных показателей иммунной системы в 3-х основной и контрольной группах

Рис. б Сравнительная характеристика динамики основных показателей иммунной системы в 4-х основной и контрольной группах

Рис. 7 Сравнительная характеристика динамики дополнительных показателей иммунной системы о 1-х основной и контрольной группах

Рис.9 Сравнительная характеристика динамики дополнительных показателей иммунной системы в 3-х основной и контрольной группах

Рис.8 Сравнительная характеристика динамики дополнительных показателей иммунной системы в 2-х основной и контрольной группах

Рис. 10 Сравнительная характеристика динамики дополнительных показателей иммунной системы в 4-х основной и контрольной группах

Таблица 6'

Динамика фагоцитарных показателей в процессе лечения пенными системами _ доставки _

№ № пп Наблюдения Показатели

Группа о ё и я ч о Й ФА (%) ФИ(ед) ФЧ (Уо)

До лечени я После лечения Р До лечения После лечения Р До лечения После лечения Р

1. ОП 10 21Д±1,4 33,110,2 <0,001 0,5210,01 0,6±0,06 >0,05 2,0310,21 2,01Ю,12 >0,05

2. КГ1 10 20,2Ю,9 20,510,7* >0,05 0,5310,03 0,310,12* >0,05 2,6Ю,2 1,910,2 >0,05

3. ОГ2 16 14,9И,1 29,910,54 <0,001 0,3810,04 0,7910,03 <0,001 1,8510,29 2,810,3 <0,001

4. КГ2 12 13,6±1,4 .17,910,98 * <0,05 0,3610,07 0,4810,11 * >0,05 1,7610,42 2,110,1* >0,05

5. огз 12' 12,111,6 21,110,42 <0,001 0,3610,03 0,6410,06 <0,001 1,6310,24 2,910,3 <0,001

6. кгз 11 12,4±0,9 13,510,87 * >0,05 0,3810,06 0,5210,02 * >0,05 1,68Ю,23 2,110,2* >0,05

7. ОГ4 19 11,111,2 26,110,2 <0,001 0,2610,03 0,5010,06 <0,001 1,5310,24 2,210,3 <0,01

8. КГ4 10 11,410,8 13,210,7* >0,05 0,28Ю,06 0,310,02* >0,05 1,5610,13 1,710,2 >0,05

Примечание: *- показатель достоверности-р<0,05.

Таблица 7

Динамика показателей Т-звена иммунитета в процессе лечения пенными системами доставки

№ № пп Наблюдения (группы, количество наблюдений) Показатели

СБЗ(%) СВ4 (%) СБ8 (%)

До лечения После лечения Р До лечения После лечения Р До лечения После лечения ?

1. ОП 10 50,3±2,1 54,б±1,6 >0,05 4б,3±1,0 42,2±3,1 >0,05 12,7:11,1 16,3±1,2 <0,001

2. КГ1 10 51,1±2,2 55,1±1,2 >0,05 46,1±1,2 44,0±1,2 >0,05 12,5±1,1 13,5±1,2* ■ >1X05

3. ОГ2 16 51,1±2,8 52,5±1,75 >0,05 43,3±2,1 43,3±2,1 >0,05 15,9±2,9 17,9±2,1 >»05

4. КГ2 12 51,8±4,7 55,2±1,2 >0,05 42,5±1,7 48,8±1,1* <0,001 16,«±1,7 17,2±1,1 >»05

5. ОГЗ 12 48,б±3,1 68,6±1,75 <0,001 40,3±1,04 48,3±1,4 <0,001 14,8±1,8 17,1±1,8 >№05

6. КГЗ 11 49,2±2,38 51,1±1,2* >0,05 41,4±],12 41,¡¿1,1* >0,05 15,5*1,1 14,1±1,1 >«. 05

7. ОГ4 19 45.6±3,1 55,б±1,6 <0,01 30,2±],04 45,2±1,1 <0,001 1б,0±1,1 19,9±1,2 <{<01

8. КГ4 10 43,2±2,4 48,1*1,2* >0,05 31,1=4,2 32,0±1,2* >0,05 1б,7±1,8 19,1±1,1 >«105

Примечание: - показатель достоверности - р<0,05.

Таблица 8

Динамика показателей В-звена иммунитета в процессе лечения пенными системами доставки

№№ пп Наблюдения (группы, количество наблюдений) Показатели

CD22 (%) IgA (г/л) IgM (г/л) IgG (г/л) IgE (МЕ/мл)

До лечения После лечения Р До лечения После лечения Р До лечения После лечения Р До лечения После лечения Р До лечения После лечения Р

1. ОГ1 10 17,4±1,0 1й,У±1,2 <0,001 1,8±0,08 1,1±0,08 <0,001 1,1±0,07 1,0±0,09 >0,05 12,9±1,2 11,9±1,1 >0,05 247,4 ±13,4 127,4±1 3,4 <0,0 01

2. КГ1 10 16,7±1,1 16,2±1,1* >0,05 1,9±0,2 1,8±0,02* >0,05 1,2±0,04 1,1±0,03 >0,05 12,1 ±2,4 12,2±2,3 >0,05 251,9±20 ,3 231,9±2 3,5 >0,0 5

3. ОГ2 16 15,1±1,1 11,8±1,1 <0,001 0,8±0,05 1,2±0,1 <0,001 1,06±0,Н 1,01±0,1 >0,05 13,5±1,3 11,8±1,1 >0,05 285,4±31 ,7 181,4±3 0,2 - <0,0 1

4. КГ2 12 15,3±1,7 13,3±1,7 >0,05 0,88±0,03 0,92±0,1* >0,05 1,11±0,09 1,3±0,06 >0,05 14,3±2,6 13,3±1,7 >0,05 274,9±28 ,3 270,0±2 8,0 >0,0 5

5. ОГЗ 12 15,2±1,1 13,2±1,4 >0,05 1,2±0,1 1,29±0,08 >0,05 1,1 ±0,09 1,2±0,03 >0,05 13,5±1,3 12,5±1,1 >0,05 245,4±38 ,4 201,4±3 4,4 >0,0 5

б. КГЗ 11 15,3±1,2 13,3±1,1 >0,05 1,22±0,12 1,25±0,02 >0,05 1,1±0,06 1,3±0,06 >0,05 14,3 ±2,6 12,3±2,2 >0,05 232,9±25 ,3 222,9±2 2,3 >0,0 5

7. 0Г4 19 19,8±1,1 11,8±1,1 <0,001 1,1±0,09 1,2±0,09 >0,05 1,2±0,08 0,81±0,08 <0,001 12,1±1,3 11,3±1,3 >0,05 249,4±18 ,4 109,4±1 2,4 <0,0 01

8. КГ4 10 19,7±1,2 15,5±1,2* <0,001 1,2±0,1 1,1±0,1 >0,05 1,3±0,05 1,2±0,05* >0,05 12,3±2,6 11,7±2,6 >0,05 252,9±22 ,3 192,9±2 0,3 >0,0 5

Примечание: *- показатель достоверности - р<0,05.

1В

Таблица 9

Динамика выраженности сенсибилизации пыльцевыми, бытовыми и эпидермальными аллергенами под влиянием

. .терапии пенными системами доставки с ГЭКС

№№ ГШ Наблюдения (группы, количество наблюдений) Выраженность аллергических реакций

Резко положительные (3+, 4+); абс. (%) Положительные и слабо положительные (2+, +); абс. (%) Отрицательные (-); абс. (%)

До лечения После лечения р До лечения После лечения Р До лечения После лечения Р

1. ОГ1 10 3 (30,0±3) 0(0±0) <0,01 5 (50,0±5) 2 (20,0±2) <0,001 2 (20,0±2) 8(80,0±8) <0,001

2. КГ1 10 3 (30,0±3) 0(0±0) <0,01 4 (40,0±4) 4 (40,0±4) >0,05 3 (30,0±3) 6 (60,0±6) >0,05

3. ОГ2 16 3 (18,75±2) 0(0±0) <0,001 5(Э1,25±Э) 3(18,75±2> <0,001 8(50,0±5) 13 (81,25±8) <0,001

4. КГ2 12 3 (25,0±2) 0(0±0) <0,001 4(33,3±3) б(50,0±5) <0,001 5 (41,7±4) 6 (50,0±5) >0,05

5. ОГЗ 12 0 (0±0) 0(0±0) >0,05 0 (0±0) 0(0±0) >0,05 12 (100,0±10) 12(100,0410) >0,05

6. КГЗ 11 0 (0±0) 0(0±0) >0,05 0 (0±0) 0(0±0) >0,05 11 (100,0±10) 11 (100,0±10) >0,05

7. ОГ4 19 3(15,8±1) 0(0±0) <0,001 5 (26,3±2) 2 (10,5±1) <0,001 11 (57,9±5) 17(89,5±9) <0,001

8. КГ4 10 3 (30,0±3) 0 (0±0) <0,001 4 (40,0±4) 4 (40±4)* >0,05 3 (30,0±3) 4(40±4)* >0,05

Примечание: - показатель достоверности - р<0,05.

Таблица 10

Динамика выраженности сенсибилизации бактериальными аллергенами под влиянием терапии пенными системами

доставки с ГЭКС

№№ пп Наблюдения (группы, количество наблюдений) Выраженность аллергических реакций

Резко положительные (3+, 4+); абс. (%) Положительные и слабо положительные С2+, +); абс. (%) Отр (- ицательные ; абс. (%)

До лечения После лечения р До лечения После лечения Р До лечения После лечения Р

1. ОГ1 10 3 (30,0±3) 0 (0,0±0) <0,01 5 (50,0±5) 4 (40,0±4) >0,05 2 (20,0±2) 6(60,0±6) <0,001

2. КГ1 10 3 (30,0±3) 0 (0,0±0) <0,01 4 (40,0±4) 6 (60,0±6) <0,01 3 (30,0±3) 4(40,0±4) >0,05

3. ОГ2 16 0 (0,0±0) 0 (0,0±0) - 7 (43,75±4) 2 (12,5±1) <0,001 9 (56,25±5) 14 (87,5±5) <0,001

4. ЮГ2 12 0 (0,0±0) 0 (0,0±0) - 6 (50,0±5) 4(33,3±3) >0,05 6 (50,0±5) 8 (66,6±6) >0,05

5. ОГЗ 12 1 (8,3±1) 0 (0,0±0) - 10 (83,4±8) 5(41,6±4) <0,001 1 (8,3±1) 7 (58,3±5) <0,001

6. КГЗ 11 1 (9,1±1) 0 (0,0±0) - 9 (81,8±8) 8 (66,6±6) >0,05 1 (9,1±1) 3 (27,2±2) <0,001

7. ОГ4 19 1 (5,3±1) 0 (0,0±0) <0,001 4 (21,0±2) 2 (10,5±1) <0,001 11 (57,9±7) 17 (89,5±8) >0,05

8. КГ4 10 1 (10,0±1) 0 (0,0±0) <0,001 5 (50,0±5) 3(30,0±3) <0,001 4 (40,0±4) 7 (70,0±7) <0,001

Как видно из таблиц 9 и 10 существенное влияние на уровень сенсибилизации пыльцевыми, бытовыми и эпидермальными аллергенами оказали лечебные комплексы с коктейлями, содержащими кислород, углерода диоксид и закись азота (Р<0,001), тогда как выраженность бактериальной, аллергии, снижалась под влиянием изучаемых лечебных форм, содержащих кислород, углерода диоксид и азот (Р<0,001).

Таблица 11

___Оценка ближайших результатов терапии_

№№ пп Группа наблюдений Результаты лечения (%)

Значительное улучшение Улучшение Без эффекта Ухудшение

1 ОП 3 (30,0±3) 7(70,0±7) 0 (0,0±0) 0 (0,0±0)

2 КГ1 1(10,0±1) 7(70,0±7) 2 (20,0±2) 0 (0,0±0)

3 ОГ2 5(31,25±3) 11 (68,75±7) 0 (0,0±0) 0 (0,0±0)

4 КГ2 1(8,3±1) 9 (75,0±7) 2 (16,7±1) 0 (0,0±0)

5 ОГЗ 4 (33,3±3) 8 (66,7±7) 0 (0,0*0) 0 (0,0±0)

6 КГЗ 1 (9,1±1) 8 (72,8±7) 2(18,1*2) 0 (0,0±0)

7 ОГ4 12 (63,2±6)* 7 (36,8±4)* 0 (0,0±0) 0 (0,0±0)

8 КГ4 1(10,0±1) 7(70,0±7) 2 (20,0±2) 0 (0,0±0)

Примечание: - показатель достоверности - р<0,05.

Таблица 12

Оценка отдаленных результатов терапии_

№№ пп Группа наблюдений Результаты лечения (мес.)

До 5 6-8 9-11 12 и более

] ОГ1 0 (0,0±0) 2 (20,0±2) 8(80,0±8) 0 (0,0±0)

2 КГ1 1(10,0±1) 7(70,0±7) 2 (20,0+2) 0 (0,0±0)

3 ОГ2 1 (б,25±1) 4 (25,0±2) 10 (62,5+6) 1 (б,25±1)

4 КГ2 1(8,3±1) 9 (75,0±7) 2(16,7±1) 0 (0,0±0)

5 ОГЗ 0 (0,0±0) 4 (33,3±3) 6 (50,0±5) 2 (16,7±0)

6 КГ3 1 (9,1±1) 8 (72,8+7) 2 (18,1±2) 0 (0,0±0)

7 ОГ4 2 (10,5±1) 5 (26,3±3) 7 (36,9±4) 5 (2б,3±3)*

8 КГ4 1(10,0±1) 7(70,0±7) 2 (20,0+2) 0 (0,0±0)

Примечание: - показатель достоверности - р<0,05.

Оценка эффективности лечения в ближайших результатов, представленая в таблице 11 свидетельствует о том, что эффективность во всех основных группах была достоверно выше, определяет целесообразность включения в лечебный комплекс, состоящий из ПСД, интрагастральных пенных коктейлей разного газового состава (Р<0,001).

В то же время при сравнении результатов лечения в основных группах, было установлено, что только интрагастральный пенный коктейль с закисью азота обеспечивал самые предпочтительные позитивные изменения в течение дерматоза, что, по-видимому, связано с его универсальным иммуномодулирующим влиянием. Аналогичными оказались и отдаленные результаты терапии больных АД: максимальная продолжительность ремиссии установлена в группе наблюдаемых, которым назначали лечебный комплекс, включавший коктейль с закисью азота (таблица 12). Причем длительность ремиссии более 12 месяцев у этих пациентов отмечалась в 26,3±3% случаев.

ВЫВОДЫ

1. Независимо от характера дисперсионной среды интрагастрапьного коктейля, наиболее выраженные показатели времени существования отдельного газового пузырька и пенной массы установлены при концентрации густого экстракта корня солодки - 1,5 г/%, а газовую составляющую по ее влиянию на ценообразование можно расположить в следующем порядке: азот, кислород, углерода диоксид и закисьа зота. При определении основных параметров пенно-солодковой ванны наиболее оптимальным количеством густого экстракта корня солодки является диапазон от 150 до 50 мл на 1 ванну при концентрации глицирризииовой кислоты от 12 до 14 % и выше, давление воздуха 300-400 кПа, до погружения пациента и 150 кПа во время проведения процедуры. У пациентов с аллергическими заболеваниями продолжительность сеанса не должна превышать 10 мин, а при патологии, развивающейся на фоне вторичного иммунодефицита -15-20 мин .

2. В условиях эксперимента у крыс линии Вистар с острым воспалением суставов, под влиянием пенных интрагастральных коктейлей разного газового состава, установлено статистически значимое восстановление как нарушенного патологическим процессом гематологического статуса, так и основных звеньев иммунитета. Так, фагоцитарная активность достигала уровня показателей интактных животных (50,9±0,3% и 50,5±0,9%), значительно превышая этот показатель у крыс с острым воспалением суставов (42,7+0,7%). Аналогичными оказались данные, характеризующие Т- звено иммунитета (61,7 + 0,8%, 61,7+2,5% и 49,3±1,5%), а количество антителообразующих клеток на 106 спленоцитов определялось в 1,5 раза чаще, чем у здоровых животных, не принимавших интрагастральные коктейли (146,3 + 3,46 и 98,1+3,8).

3. Полученные в условиях эксперимента данные открывают перспективу дифференцированного выбора газовой составляющей в зависимости от характера иммунных нарушений и свидетельствуют о целесообразности формирования новой концепции иммуномодуляции - газоиммуномодуляции.

4. Результаты лечения больных атопическим дерматитом свидетельствуют о необходимости дифференцированного выбора газовой составляющей интрагастральных пенных коктейлей с учетом особенностей нарушения иммунного статуса. Установлено, что коктейль с закисью азота обладает универсальным иммуномодулирующим действием, о чем свидетельствует тенденция к достижению уровня контрольной группы по показателю фагоцитарной активности (26,1±0,2% и 33,1 ±0,2%). Такая же направленность изменений определялась в отношении количества CD4 клеток с хелперно-

индукторными свойствами (45,2±1,1% и 42,2±3,1%) и В-лимфоцитов (11,8±1,1% и 10,9±1,2%), что приводило к наиболее выраженному снижению концентрации IgE и наиболее существенному регрессу кожных проявлений заболевания по сравнению с другими исследуемыми группами.

5. Сравнительная оценка ближайших и отдаленных результатов эффективности терапии больных атопическим дерматитом также указывает на преимущества использования лечебного комплекса, включающего коктейль с закисью азота. Так, значительное улучшение в основной исследуемой группе регистрировалось существенно чаще, чем у остальных пациентов [63,2±6%, 33,3±3% 31,25±3% и 30,0±3 (p<0,001)J, что коррелировало с продолжительностью ремиссии свыше 12 месяцев в 1,6-4,2 раза чаще по сравнению с больными других групп.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В арсенал средств и технологий восстановительного лечения атопического дерматита целесообразно включать пенные системы доставки с густым экстрактом корня солодки (пенные ванны, интрагастральные коктейли разного газового состава: кислород, углерода диоксид, азот, закись азота.

2. Для отпуска пенно-солодковой ванны необходимо учитывать содержание глицирризиновой кислоты. Причем при колебании ее концентрации от 12 до 14% и более, количество густого экстракта корня солодки следует использовать в диапазоне 150 -50 мл, а формирование пены осуществлять при давлении воздуха 300-400 кПа до погружения пациента, с последующим снижением давления до 100-150 кПа и продолжительностью процедуры до 10 минут у лиц с аллергическими заболеваниями, в том числе АД.

3. Для образования пенного коктейля следует использовать коктейлер А31 «Здоровье» с кислородным баллоном А31.03.010, а также с баллоном, содержащим углерода диоксид (ГОСТ 8050-85), газообразный азот особой чистоты 5.4 ТУ 2114-007-53373468-2008 (99,9994%), ГОСТ 9593-74 или закись азота БЗ-2-2УЛ ППТД.5887.160ТУ (ГОСТ 949). На один прием используют 100200-250 смЗ пены, в зависимости от возраста пациента, за 15-20 минут до еды один раз в день. Курс лечения - 10 процедур.

4. Показаниями для назначения коктейля с кислородом является АД (L 20.0) с сенсибилизацией к пыльцевым, бытовым, эпидермальным и пищевым аллергенам, развивающейся по немедленному типу, сниженных уровнях фагоцитарных показателей и Т-супрессоров; повышенных количествах В-лимфоцитов относительных, IgA и специфического IgE.

5. Коктейли с углерода диоксидом назначаются больным АД (L 20.0) с сенсибилизацией к бытовым, эпидермальным, пыльцевым, пищевым и бактериальным аллергенам, развивающейся гиперчувствительности по немедленному и замедленному типам; сниженных уровнях фагоцитарных показателей; увеличенном количестве В-лимфоцитов и концентрации IgA и IgE.

6. Коктейли с азотом следует принимать пациентам, страдающим АД (L 20.0) с сенсибилизацией к бактериальным аллергенам, развивающейся гиперчувствительности по замедленному типу; сниженных уровнях фагоцитарных показателей, а также общего количества Т-лимф. отн. и Т хелперов-индукторов.

7. Коктейли с закисью азота рекомендуются при АД с сенсибилизацией к пыльцевым, бытовым, эпидермальным и бактериальным аллергенам, развивающейся по немедленному (ГНТ) и замедленному (ГЗТ) типам; сниженных уровнях фагоцитарных показателей; изменении общего количества Т-лимф. отн., Т-хелперов-индукторов, Т-супрессоров - цитотоксических

лимфоцитов; повышенных цифрах В-лимф. отн., дисиммуноглобулинемии классов IgM и IgE.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Старокожко, Л.Е. Изучение противоаллергических свойств пенных систем доставки у больных атопическим дерматитом / Л.Е. Старокожко, И.И. Гайдамака A.B. Тишаева // Сборник материалов V Международного научного конгресса «Современная курортология: проблемы, решения, перспективы, СПб., 2011. - С. 180-182.

2. Старокожко, Л.Е. Исследование иммуномодулирующего действия интрагастральных коктейлей с препаратами корня солодки разного газового состава у животных с моделью адъювантного артрита /Л.Е. Старокожко, И.И. Гайдамака, A.B. Тишаева [и др.]. //Сб. тезисов и материалов науч.-практич. Конф.: Основные направления развития курортологии и модернизации последипломного образования. Ставрополь. Изд.: СтГМА, 2011. - С. 191-194.

3. Старокожко, Л.Е. Оценка влияния на пенообразующуго способность препаратов корня солодки газовой составляющей дисперсионной среды / Л.Е. Старокожко, И.И. Гайдамака A.B. Тишаева [и др.]. //Сб. тезисов и материалов науч.-практич. кснф.: Основные направления развития курортологии и модернизации последипломного образования. Ставрополь. Изд.: СтГМА, 2011. -С. 144-147.

4. Старокожко, Л.Е. Оценка иммуномодулирующих свойств пенных систем доставки у больных атопическим дерматитом / Л.Е. Старокожко, И.И. Гайдамака A.B. Тишаева // Сборник материалов V Международного научного конгресса «Современная курортология: проблемы, решения, перспективы, СПб., 2011. — С. 179-180.

5. Старокожко, Л.Е. Пенные коктейли разного газового состава с препаратами корня солодки для иммуномодуляции при заболеваниях, обусловленных вторичным ммунодефицитом: Практическое руководство /Л.Е. Старокожко, A.B. Тишаева [и др.]. Ставрополь, 2011.- 160 с.

6. Старокожко, Л.Е. Способ лечения атопического дерматита с нарушением основных звеньев иммунитета /И.И.Гайдамака, А.В.Тишаева //Патент на изобретение №2477118 от 10.03.2013 г., приоритет изобретения 31.05.2011 г.

7. Старокожко, Л.Е. Способ лечения атопического дерматита с иммунодефицитом по Т-типу /И.И.Гайдамака, А.В.Тишаева //Патент на изобретение №2455883 от 10.11.2012 г., приоритет изобретения 31.05.2011 г.

8. Старокожко, Л.Е. Способ лечения атопического дерматита с иммунодефицитом по B-типу / Л.Е. Старокожко, И.И.Гайдамака, А.В.Тишаева //Патент на изобретение №2477994 от 27.03.2013 г., приоритет изобретения 31.05.2011 г.

9. Старокожко, Л.Е. К вопросу о применении пенного интрагастрального коктейля с азотом у больных атопическим дерматитом / Л.Е. Старокожко, И.И.Гайдамака, А.В.Тишаева //Медицинский вестник Северного Кавказа. -2012 . - №2. -С 69-71.

10. Старокожко, Л.Е. Оценка эффективности пенного интрагастрального коктейля с углерода диоксидом у больных атопическим дерматитом / Л.Е. Старокожко, И.И.Гайдамака, А.В.Тишаева //Медицинский вестник Северного Кавказа. -2012 . - №3. - С 70-72.

11. Старокожко, Л.Е. Сравнительная характеристика иммуномодулирующего действия пенных интрагастральных коктейлей разного газового состава у больных атопическим дерматитом / Л.Е. Старокожко, И.И.Гайдамака, А.В.Тишаева //Медицинский вестник Северного Кавказа. -2013 . - №1. — С 62-65.

Подписано в печать 26.11.2013. Бумага офсетная. Гарнитура Тайме. Печать офсетная. Усл.печ.л. 1,0.

Тиражирование и брошюровка "Университетские телекоммуникации» Тираж 100. Зак. №264.