Автореферат и диссертация по медицине (14.03.06) на тему:Изучение гастропротекторного действия когитума при экспериментальной гастропатии

НА ПРАВАХ РУКОПИСИ

САВЕНКО ИВАН АНДРЕЕВИЧ

ИЗУЧЕНИЕ ГАСТРОПРОТЕКТОРНОГО ДЕЙСТВИЯ КОГИТУМА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ГАСТРОПАТИИ

14.03.06 - ФАРМАКОЛОГИЯ, КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ

АВТОРЕФЕРАТ ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК

ПЯТИГОРСК-2012

005008965

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Сергиенко Аэлита Валерьевна Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Болиева Лаура Зелимхановна кандидат фармацевтических наук Дьякова Ирина Николаевна Ведущая организация: ГБОУ ВПО Курский ГМУ

Минздравсоцразвития России

Защита диссертации состоится «21» февраля 2012 г. в 9 22 часов на заседании диссертационного совета Д 208.069.01 при ГБОУ ВПО Пятигорская ГФА Минздравсоцразвития России (357532, Ставропольский край, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО Пятигорская ГФА Минздравсоцразвития России (357532, Ставропольский край, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11).

Автореферат разослан «20» января 2012 г.

Учёный секретарь диссертационного совета

Е.В. Компанцева

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследования

Фармакотерапия язвенно-эрозивной патологии желудка - актуальная проблема армакологии на современном этапе. Это определено большой степенью аспространения гастропатий: на их долю приходится свыше 1/3 всех болезней - строэнтерологического профиля. Согласно статистическим данным в мире язвой елудка страдает до 10% взрослого населения, приблизительно у 1/2 из них в ечение 5 лет появляется осложнения в виде обострения процесса (Торгало В.В., 008г.). При хронической гастропатии больные должны находиться под епрерывным контролем, диспансерным наблюдением, получать курс сезонного ротиворецидивного лечения (весной, осенью). Профилактическая фармакотерапия аже без выраженных обострений должна проводиться в течение 3-5 лет еумывакин И.П., 2005г.). Полиэтиологичность язвенно-эрозивной болезни елудка диктует необходимость ее разносторонней комплексной фармакотерапии, то могут обеспечить лекарственные средства разных фармакологических групп с азнонаправленными фармакодинамическими параметрами: антацидные, нтисекреторные, гастропротекторные, противомикробные средства, препараты, лияющие нервную систему (Наумов A.B., 2011г.). Широкий арсенал медикаментов ри данной патологии определен многообразием факторов, инициирующих и опровождающих это заболевание, нередкими рецидивами, необходимостью омбинированной терапии (Kenneth R„ 2008г.). Такое направление в армакотерапии гастропатии актуально при постоянном наличии факторов грессии, которые присутствуют в современной жизни человека, при ерациональном питании, применении лекарственных препаратов. Применение олько антацидных и антисекреторных препаратов не приводит к полному збавлению от недуга, так как механизм организации язвенного процесса остаточно сложен и требует применения гастропротекторных средств с иным еханизмом действия (Старченко В.В., 2010г.). Язвенно-эрозивное поражение елудка как причина, либо следствие патологии других органов и систем, арактеризует последовательность образования морфологических и

функциональных нарушений желудочно-кишечной системы, приводящая к эндоэкологическому дисбалансу, снижению тканевой резистентности, метаболическим нарушениям (Полунина Т.Е., 2011 г.).

В связи с тем, что гастропатии любой этиологии сопровождаются катаболизмом и нейродепрессией, необходим поиск лекарственных средств, нивелирующих этот недостаток. Препараты аминокислотной структуры способны устранять метаболический дефицит в слизистой оболочке желудочно-кишечной системы, и наряду с этим, предотвращать нейрогенную дистрофию. Поэтому поиск средств метаболической коррекции из ассортимента известных препаратов актуально. Это определяет перспективность исследования Препарата когитум (производное ацетиламиноянтарной кислоты) в данном направлении..

Цель исследования: Изучение гастропротектаого действия когитума при экспериментальном ульцерогенезе различной этиологии на лабораторных животных.

Основные задачи исследования:

1. Изучить активность когитума . при экспериментальной гастропатии на моделях: острого стероидно-этанолового, подострого аспирин-индуцированного, симпатолитического адельфан-индуцированного, пептического, стрессорного ульцерогенеза крыс и мышей.

2. Ранжировать полученные данные с классическими противоязвенными препаратами: ранитидином, метилурацилом, облепиховым маслом и аналогом по структуре аспаркамом.

3. Изучить влияние когитума на макро- и микроморфологические показатели состояния слизистой оболочки желудка при экспериментальных гастропатиях различной этиологии

4. Изучить влияние когитума на секреторную активность желудка: количество и характер секреции на модели стероидно-этаноловой, аспириновой, пептической и стрессорной гастропатии крыс.

5. Определить влияние когитума на моторно-эвакуаторную функцию ЖКТ мышей in vivo, тонус отрезка изолированного кишечника крыс in vitro.

Научная новизна исследования

1. Впервые экспериментально доказана гастропротекторная активность когитума на моделях гастропатий различного генеза: острый ульцерогенез (стероидно-этаноловый), субхронический (аспирин-индуцированный), симпатолитический (адельфан с системной гипотермией) ишемический (лигирование привратника) и стрессорный ульцерогенез (фиксация и антиортостаз).

2. Впервые проведены сравнительные исследования показавшие, что по лечебному противоязвенному действию эффекты когитума достоверно превышают результаты препаратов сравнения: ранитидина, метилурацила, облепихового масла и аналога по строеншо аспаркама.

3. Установлено, что когитум предотвращает дистрофические процессы в желудке, снижает по количеству и характеру язвенно-эрозивные повреждения. По механизму действия исследуемый препарат можно отнести к группе средств, повышающих регенеративную активность и резистентность слизистой оболочки желудка к факторам агрессии!

4. Установлен дозозависимый антисекреторный эффект когитума, по снижению кислотности и количества секреции желудка крыс, а также снижение моторно-эвакуационной активности кишечника мышей.

5. Впервые выявлено спазмолитическое влияние когитума на тонус интактного отрезка кишечника экспериментальных животных, на возникновение ацетилхолинового спазма когитум влияния не оказал.

Научно-прат-ическая значимость исследования Доказаны принципиально новые фармакологические свойства 1ейропротектора когитума - воздействия на патологии желудочно-кишечного акта. Полученные данные о гастропротекторном эффекте когитума при оздействии на желудок различных ульцерогенов, влияние когитума на екреторную и моторно-эвакуаторную активность желудочно-кишечного тракта лужйт основой для дальнейших клинических исследований.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Когитум оказывает выраженное протекторное действие на слизистую оболочку желудка животных на различных моделях гастропатии (стероидно-этаноловая язва, адельфановая, аспириновая, пептическая и стрессорная гастропатия крыс и мышей).

2. Когитум снижает тонус гладкой мускулатуры кишечника, количество и агрессивные свойства желудочного сока.

3. Когитум предохраняет желудок от дистрофических процессов, снижает язвенно-эрозивные повреждения по количеству и характеру.

4. По механизму действия когитум можно отнести к группе средств, повышающих регенеративную активность слизистой оболочки желудка и резистентность к факторам агрессии.

Внедрение результатов исследования в практику Результаты проведенных исследований включены в план НИР кафедры биологии и физиологии Пятигорской ГФА (акт об использовании НИР, составленный на основе информационного письма «Гастропротекторный эффект аминокислотного препарата когитума» от 1 ноября 2011г.) и в лечебно-профилактическую деятельность МБУЗ Участковая больница « Старокорсунская» (акт об использовании НИР от 10 января 2012г.).

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук Диссертационная работа выполнена в Пятигорской государственной фармацевтической академии в соответствии с планом научно-исследовательских работ Пятигорской государственной фармацевтической академии .

Апробация и публикация результатов исследования Материалы исследований, отраженные в диссертации доложены на 66-й межрегиональной конференции по фармации и фармакологии «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск 2011г.), 5-ой Международной конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам» (Москва, 1-4. июня 2010 г.), 16th World Congress of Basis and Clinical Pharmacology (Copenhagen, Denmarc, 17-23 July

010), 2-ой Международной конференции «Информация о лекарственных средствах качественному использованию лекарств» (Казань, 15-16 октября 2010 г.), 17 Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 12-16 апреля 010 г.).

Г1о материалам исследований опубликовано 15 печатных работав том числе 5 журналах, рекомендуемых ВАК РФ

Объем и структура диссертации Диссертационная работа изложена на 151 странице компьютерного текста, шлюстрирована 25 таблицами и 57 рисунками. Диссертационная работа состоит из ведения, обзора литературы • (глава 1), описания материалов и методов ^следования (глава 2), собственных результатов исследований (глава 3,4, 5,6, 7, 8), заключения, общих выводов и списка литературы. Список литературы включает 167 1сточш1ков, в том числе 44 зарубежных автора.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования Экспериментальные исследования проведены на 194 бодрствующих и наркотизированных белых крысах линии Wistär массой 220 т 250 г, на. 108 белых мышах обоего пола 20 - 22 г. В качестве наркозного средства использовали юралгидрат в. дозе 350,0 мг/кг, внутрибрюшинно. Исследованию подвергался екарственный препарат - когитум (двукалиевая соль ацетиламиносукцината). Когитум (Патеон Франс, Франция) выпускается в виде 2,5% раствора для приема внутрь в ампулах по 10 мл. Препарат вводили однократно методом принудительного зондирования per os с учетом межвидового коэффициента пересчета доз в экспериментальной дозе 1,0 мл/кг, 2,0 мл/кг и 3,0 мл/кг веса животного. В качестве препаратов сравнения использовались официнальные препараты: тканевой регенератор растительного происхождения - облепиховое масло (ООО НПФ «Алтайский букет», г. Барнаул, Россия) в дозе 2,0 мл/кг, тканевой регенератор синтетического строения - метилурацил (ОАО "Биохимик", г. Саранск, Россия) 170,0 мг/кг, блокатор Н2 — гистоминовых рецепторов - ранитидин (ОАО «Мосхимфармпрепараты» им. H.A. Семашко», г. Москва, Россия) 25,0 мг/кг, и

аналог по строению - аспаркам (ОАО «Луганский Химфармзавод», г. Луганск, Украина) 120,0 мг/кг. Приготовление растворов препаратов сводилось к механическому растиранию в керамической ступке и добавлению рассчитанного, объёма изотонического раствора Рингера-Локка. Контрольной группе животных вводили изотонический раствор Рингера-Локка. Все животные получали исследуемые препараты в эквиобъемном количестве 3,0 мл/кг.

Эксперимент начали с изучения влияния исследуемого препарата в разных дозах на формирование острой стероидно-этаноловой гастропатии. Острый стероидно - этаноловый ульцерогенез крыс моделировали путем однократного интрагастрального введения 20,0 мг/кг преднизолона, в 80% этаноле (фактор агрессии) в объеме 8 мл/кг (Зупанец Н.Б., 1993г., Каратеев А.Е., 2006г.). На следующем этапе моделировали подострую НПВС-гастропатию. Субхроническое повреждение слизистой оболочки желудка вызывали введением крысам в желудок 150,0 мг/кг аспирина дважды с интервалом в четыре часа (Лычкова А.Э., 2002г), Далее исследовали влияние когитума на острое симпатолитическое повреждение слизистой оболочки желудка вызванное интрагастральным. введением адельфана. Адельфан вводили однократно (в пересчете на резерпин) в дозе 2,5 мг/кг в водном растворе с последующим системным охлаждением животных в холодовой камере до 7°С в течение двух часов (Сперанская А.С„ 2004г.).

Следующим этапом нашего исследования явилось изучение влияния когитума на стрессорную гастропатию, которую моделировали путем иммобилизации крыс самцов на спине в условиях антиортостаза (угол наклона составлял 45°) и затемнения в течение 5 часов, вследствие чего у животных развивался эмоционально-болевой стресс «безвыходной ситуации» (Рапопорт С.И., 2009г.). .

Далее исследовали действие когитума на ишемическую (пептическую) гастропатию, которую моделировали по (Н.ЗЬау е1 а1., 1945г.), что выражалось в полной Зх часовой перевязке лигатурой пилорической части желудка крыс. (Тарасенко Л.М., 2001г., Рапопорт С.И., 2009г.). Перед воспроизведением экспериментальных язвенно-эрозивных поражений слизистой оболочки желудка животных лишали пищи за 24 ч до воздействия ульцерогена для активации фактора

рессии (Голиков С.Н., 1993г.). Для выявления действия когитума на тканевом овне проводилось гистологическое исследование. Изъятый желудок после кроскопической оценки состояния взвешивания фиксировали в нейтральном 10% створе формалина, обезвоживали в спиртах возрастающей концентрации, ивали в парафин. Готовили микротомом ультратонкие срезы, фиксировали, вшивали гематоксилином и эозином (Улумбеков Э.Г., 2001г.). Изучение отологических срезов желудков крыс проводили с использованием светового икроскопа JIOMO при увеличении х150, в проходящем свете. (Автандилов Г.Г., 90г.). Состояние кинетической активности желудка и кишечника при введении учаемых препаратов изучено на беспородных белых мышах массой 20-24 г етодом «меток». В качестве метки в пищеварительный тракт вводили 10% взвесь тивированного угля, приготовленного на 2% слизи картофельного крахмала, в "ъеме 0,5 мл. Когитум в дозах 1,0 мл/кг, 2,0 мл/кг и 3,0 мл/кг вводили за 2 ч до едения активированного угля, однократно через зонд йнтрагастрально 4асловский Л.В., 2008г.).

Влияние когитума на моторику гладкой мускулатуры тонкой кишки крысы in itro изучали на отрезках тонкой кишки крыс длинной 4 см. Для моделирования ишечного спазма использовали ацетилхолин в рекомендуемой концентрации :2000000 (Гацура В.В.. 1974г., Каркищенко Н.Н., 2007г,).

Статистическую обработку опытов проводили с использованием t-критерия тьюдента для независимых рядов с учетом поправки Бонферрони.. Изменение сследуемых показателей считали статистически значимыми при . р< 0,05 еленький М.Л., 19.63г., Реброва О.Ю., 2003 г.). Расчёты результатов проводились в акете компьютерной программы Microsoft Excel Ver 9, 2000 (Макарова Н.В., 002г.).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Влияние когитума на острую стероидно-этаноловую гастропатию

В ходе изучение влияния когитума на макроморфологические характеристики лизистои оболочки желудка установлено, что когитум в экспериментальной дозе

для крыс 3,0 мл/кг практически полностью предотвращал язвенно-эрозивное повреждение на 99,7% (р<0,05), а в дозе 2,0 мл/кг на 89,4% (р<0,05). По площади, глубине и весу язвенно-эрозивных дефектов гастропротективный эффект когитума достоверно превышал результаты препаратов сравнения: блокатора Н2-гистаминовых рецепторов - ранитидина, тканевых регенераторов синтетического и растительного происхождения (метилурацил и облепиховое масло) и аналога по строению аспаркама. Изучение гистоморфологической картины состояния тканей желудка подтвердило, что наилучший протективный эффект продемонстрировал исследуемый препарат в дозе 3,0 мл/кг превосходя показатели препаратов сравнения. Состояние слизистой оболочки желудка на тканевом уровне в данной группе приближено к интактной группе животных.

Проведенное исследование позволило ранжировать исследуемые препараты по сохранению массы желудка и весу язвенно-эрозивных дефектов. Результат представлен на рисунках № 1, № 2, № 3.

180 160 140 120 100 80 60 40 20 -)

0,26*

п

10,6*

13,97*

100

40,62*

52,1*

22,8*

13,62*

Юр 102,77 85,23 69,2$ 61,89$ 69,0$$ 71,81 70,7 59,4?$

А*

/V

/

/

/

/

№

,л отношение веса желудка, % к интакту

I отношение веса язв, % к контролю

Примечание: 1.5- достоверно относительно ингактных животных;

2. * - достоверно относительно контрольной группы

Рисунок 1 - Ранжирование по соотношению веса желудка и веса язвенных дефектов при стероидно-этаиоловом ульцерогенезе

Контроль

Метилурацил

Ранитидин

Когитум 1,0мл/кг Когитум 2,0мл/кг Когитум 3,0мл/кг Рисунок 3 - гистологическая картина слизистой желудка под влиянием препаратов при стероидно-зтаноловой гастропатии крыс

Когитум 2,0мл/кг Когитум 3,0мл/кг Рисунок 2 - Цифровое фото слизистой желудка под влиянием препаратов при стероидно-зтаноловой гастропатии крыс

Интакт

Аспаркам

Облепиховое масло

Контроль

Ранитидин

Аспаркам

Облепиховое масло

Когитум 1,0мл/кг

Метилурацил

При изучении влияния когитума установлено, что на данной модели гасгро патологии когитум дозозависимо снижал секреторную функцию желудка, наиболее выраженный эффект наблюдался при применении дозы 3,0 мл/кг. Объем секреции под действием препарата снижался в 8,3 раза, а кислотность составила 6,0ед рН, что на 20,0% (р<0,05) ниже показателей контрольной группы. Изучаемый препарат препятствовал развитию дистрофических процессов в слизистой оболочке желудка при иммунодепрессии. Результаты представлены на рисунке № 4.

контр.

аспаркам^"' __________________когитум 1,0мл/кг

метилурацил ■

Рисунок 4 - Влияние лекарственных средств на секреторную функцию желудка при стероидно-этаноловом ульцерогенезе

Обсуждая результаты, представленные на данных рисунках, следует отметить, что превентивное применение лекарственного препарата когитум существенно повышает защитные, свойства слизистой оболочки желудка и ее устойчивость к воздействию фактора агрессии, которым в данной модели является этиловый спирт высокой концентрации (80%) на фоне смоделированной иммунодепрессии желудка крыс преднизолоном. Моделирование язвенной патологии не только снижает защитные функции слизистой оболочки, но й кровоснабжение желудка, о чем свидетельствуют дистрофические процессы в данном органе, зарегистрированные нами как по результатам измерения массы желудка, так и с использованием цифрового микрофотографирования. Учитывая коэффициент переноса физиологических параметров с организма человека на организм животного и обратно, язвенное поражение формируется за 3 часа в организме крыс, для человека

гот-показатель составит 120 часов или 5 суток.. В течение этого времени истрофические изменения желудка могут быть, как сформированы,, так и редотвращены. Именно это обстоятельство побуждает нас к рекомендации елесообразности приема лекарственного средства когитум в качестве астропротекторного средства на раннем этапе состояния, сопровождающегося гнетением работы иммунной системы и не снижающихся факторов агрессии, что бусловлено особенностями жизни современного человека. Данная модель декватна ситуации нарушения диеты и злоупотребления алкоголя на фоне пиженного иммунитета.

Влияние когитума иа субхроническую НПВС-индуцироваиную гастропатию

При моделированной НПВС-гастропатии наиболее благоприятная картина без трицательного влияния на трофику желудка и состояние его слизистой оболочки тмечена при воздействии когитума в экспериментальной дозе. 3,0 мл/кг. Модель (екватна клинической ситуации, при которой человек принимает НПВС курсом -7 дней (160ч).

При введении когитума в экспериментальной дозе 2,0 мл/кг, язвенные ефекты были снижены по площади и количеству на 82,0% (р<0,05), что февосходило результаты препаратов сравнения. В группе животных, получавших огитум 1 мл/кг, язвообразование было снижено на 51,0% (р<0,05), что по стропротекторной активности сопоставимо с препаратами сравнения, редотвращение изменений в тканях желудка - при применении • коппума. юдтверждено при изучении микроморфологических препаратов. Ранжирование репаратов по гастропротективному эффекту представлено на рисунке № 5.

180 •

160

140 -

120 0* 0*

100 - Н

80 г и . |

60 |1

40 -

20 100 102,9

0 ** У Л'

17,17*

48,16*

69,09*

38,18* 38,8*

'V

25,66* Щ ||| '

Р В ■■'

100 102,92 95,03 62,87$ /8,07 66,76$ 58,96$ 61,75$ 58,48$

/

/

ч-0

I отношение веса язв, % к контролю

отношение веса желудка, % к интакту

Примечание: 1. $ - достоверно относительно интактных животных;

2. * - достоверно относительно контрольной группы

Рисунок 5 - Ранжирование по соотношению веса желудка и веса язвенных дефектов при аспирин-индуцированном упьцерогенезе

При моделированной НПВС-гастропатии наиболее благоприятная картина без отрицательного влияния на трофику желудка и состояние его слизистой оболочки отмечена при воздействии когитума в экспериментальной дозе 3,0 мл/кг. Выявлен дозозависимый эффект когитума. Эрозивные повреждения в слизистой оболочке экспериментальных животных, получивших изучаемый препарат в дозе 3,0 мл/кг, полностью отсутствовали,

В ходе эксперимента по влиянию препаратов на секреторную активность желудка при данной модели было установлено что, когитум в дозах 3,0 и 2,0 мл/кг значимо снижает кислотность желудка на 66,6% (р<0,05) относительно контрольных животных, объем секреции также снижался на 44,4% (р<0.05). Когитум в дозах 3 и 2 мл/кг значимо снижает объем секреции, кислотность содержимого желудка и сохраняет его от дистрофических изменений.

Результаты исследования представлены на рисунке № 6.

контр

аспаркам.

/

когитум '4.,0мл/кг

—«»»масса жел,% к контролю

ранитидин

обл. масло

/

укогитум 3,0мл/иг

\ когитум / 2,0мл/кг

"-йг-« кислотность, %к контролю

объем,% к контролю

метилурацил

Рисунок 6 - Влияние лекарственных средств на секреторную функцию желудка при аспирин-индуцированном улыдерогенезе

На основании выше изложенного, можно сделать предположение о елесообразности применения когитума в клинической практике в качестве рофилактического средства при НПВС-индуцированной гастропатии пациентам с ониженной резистентностью слизистой оболочки желудка, вынужденным .ринимать нестероидные противовоспалительные препараты.

Действие когитума при симпатолитической гастропатии мышей

На модели симпатолитической гастропатии мышей, индуцированной дельфаном (в пересчете на резерпин) 2,5 мг/кг в водном растворе с последующим |хлаждением животных до 7°С в течение двух часов. Установлено, что на трофику селудка все исследуемые препараты (когитум, метилурацил, облепиховое масло и анитидин) практически не оказали существенного влияния. Язвообразованиё в руппе животных получавших когитум 3,0 мл/кг снижалось на 79,4% (р<0,05), а в руппе получивших когитум 2,0 мл/кг на 74,0% (р.<0,05) и превосходило показатели репарагов сравнения. Изучение микроморфологических показателей состояния каней желудка подтверждает способность когитума защищать слизистую оболочку

селудка от органических изменений. Ранжирование препаратов по

..

астропротекгорному действию на модели симпатолитической гастропатии см. исунок № 7.

. 200

91,01

%

150 -

100 Н

50

0*

I

100 96.83 93,ОБ 93,09 92,39 92,52 92,74 93,14 92,74

о

я отношение веса желудка, % к интакту У отношение веса язв, % к контролю

Примечание: }. $ - достоверно относительно интактных животных: 2. * - достоверно относительно контрольной группы

Рисунок 7 - Ранжирование по соотношению веса желудка и веса язвенных дефектов при адельфановом ульцерогенезе

Установлено, что когитум обладает выраженной гастропротекторной активностью. Препарат может использоваться для защиты слизистой оболочки желудка и кишечника от негативного воздействия симпатолитиков при длительной антигипертснзивной терапии. Наилучший защитный эффект когитума был отмечен при применении дозы 3,0мл/кг, который превосходил по показателям препараты сравнения как из группы тканевых регенераторов, синтетического - метилурацил и растительного происхождения - облепихового масла так и блокатора Н2-гистаминовых рецепторов ранитидина.

При моделированной пептической язве крыс, когитум в дозах 3 и 2 мл/кг снижал язвообразование на 100,0% (р<0,05), а в дозе I мл/кг на 99,6% (р<0,05), при этом превосходя показатели по площади поражения ранитидин, метилурацил, облепиховое масло и аналог по строению аспаркам. При пептической язве когитум сохранил трофику желудка практически полностью. Изучение гистологических препаратов тканей желудка позволяет подтвердить выраженный гастропротекторный эффект когитума при пептической гастропатии. Применение

Изучение влияния когитума на пептическую гастропатии)

югитума позволяет защитить ткани желудка от повреждающего действия :обственных протеолитических ферментов. По результатам макро- и микроскопического исследования препараты были распределены по 'астропротекторной активности см. рисунок № 8.

100

180

160

140

120 0*

100

80

60

40

20 юс

п л____

О*

О* 0)39* 13,49* 13,49* 13)04* 22'28*

100 100,64 96,49 91,8

# «Р

У ^ .

1 87,72 83.8 81,87 79,12 55,56$

^ ¿Я'

Г'

л1

й отношение веса Желудка, % к интакту И отношение веса язв, % к контролю Примечание: 1.$ - достоверно, относительно интактных животных;

2.* - достоверно относительно контрольной группы

Рисунок 8 - Ранжирование по соотношению веса желудка и веса язвенных дефектов при пептическом ульцерогенезе

При изучении влияния препарата на секреторную активность желудка на анной модели экспериментальной гастропатии изучаемый препарат - когитум не

казывает значимого влияния на объем и кислотность содержимого желудка, не

I * ' ■

¡роявляя дозозависимый эффект, несмотря на это, при применении когитума нижается количество животных с эрозивными повреждениями слизистой оболочки ;елудка, что имеет благоприятный фармакотерапевтический прогноз для лечения астрита и язвенно-эрозивного повреждения желудка; Изучаемый препарат репятствует развитию дистрофических процессов в слизистой оболочке желудка .ри ишемии привратника. Модель адекватна состоянию у человека дискинезии селчевыводящих путей, застою желчи, спазму кишечника, гиподинамии и бстипадии. Результаты исследован™ представлены на рисунке № 9.

контроль

аспаркам,-

ранитидин«:

облепиховое. масло

»когитум 1,0мл/кг

: когитум2,0мл/кг

когитум 3,0мл/кг

—♦—масса жел,% к контролю

« й объем,% к контролю

«чйг'кислотность, % к контролю

метилурацил

Рисунок 3 - Влияние лекарственных средств на секреторную функцию желудка при пептическом улыдерогенезе

Учитывая полученные данные, можно предположить, что гастропротекгивный эффект исследуемого препарата когитум связан с активацией местных и системных механизмов защиты и, улучшением микроциркуляции, стимуляцией метаболических процессов в слизистой оболочке.желудка, что, вероятно и является одним из механизмов гастропротекторной активности когитума.

Исследование действия когитума при стрессорной гастропатии

При изучении влияния когитума на модели стрессорной гастропатии установлено, что когитум снижал язвообразование в дозе 3,0мл/кг на 85,4% (р<0,05), в дозе 2,0 мл/кг на 69,9% (р<0,05), при этом превосходя результаты препаратов сравнения. Модель адекватна нейропсихическому перенапряжению и стрессу у человека.

Результаты, полученные при изучении микропрепаратов желудков при моделированной стрессорной гастропатии, подтверждают выраженный гастропротекторный эффект препарата когитум, его способность предотвращать развитие органических изменений на тканевом уровне. Это наилучшим образом проявилось при применении препарата в дозе 3,0 мл/кг. Ранжирование препаратов по противоязвенному эффекту на модели стресс-язвы представлено на рисунке №10.

%

180 160 140

120 -100 80 60 40 20

0* 14*56*

7476 81,55 85,44 100 39,81* 49'51* 'ш Ш Я

30

■ Я

0 ......

10Ö 93,Ь4 82,22 80,71 77,29 73,39 72.11 69,09$ 63,0^$

/ У V

А*

& Л'

о ^

У отношение веса желудка к интакту %

f

#

Ш отношение веса язв к контролю

Примечание: 1. $ - достоверно относительно шгтактных животных;

2.* - достоверно относительно контрольной труппы

Рисунок 10 - Ранжирование по соотношению веса желудка и веса язвенных дефектов при стрессорном ульцерогенезе

При изучении секреторной функции желудка на модели стрессорного тьцерогенеза установлено, что когитум не оказывает значимого влияния на [плотность и объем содержимого желудка и предотвращает развитие ^строфических изменений в нем, Результаты представлены на рисунке №11.

контр.

аспаркам

ранитидин

обл. масло

когитум 1,0мл/кг

когитум 2,0мл/кг

.огитум 3,0мл/кг

-Ф-масса жел,% к контролю

объем,% к контролю

-«"КИСЛОТНОСТЬ, % к контролю

метилурацил

Рисунок 11 - Влияние лекарственных средств на секреторную функцию желудка при стрессорной гастропатии при стрессорном

ульцерогенезе

Изучение влияния когитума на моторно-эвакуаторную функцию кишечника

На кинетические свойства кишечника мышей когитум оказывай озозавйсимое влияние, что важно при курсовой гастропротекторной терапии.

Препарат когитум обладает дозозависимым обстипационным эффектом, проявляя тенденцию к замедлению эвакуаторной функции кишечника. В дозе 1,0 мл/кг он снижает моторику кишечника на 11,6% (р<0,05), в дозе 2,0 мл/кг - 26,8% (р<0,05), а в дозе 3,0 мл/кг замедляет моторику кишечника на 38,9% (р<0,05) относительно контрольной группы животных. Результаты представлены на рисунке № 12.

40 30 20

л

¡1 10 II °

а 1 1 ГУ

X о -Ю

I К <У ■£ X V

(П £

-20 -30 -40 -50

28*

В когитум 1,0мл/кг

а когитум 2,0мл/кг

а когитум 3,0мл/кг

И ранитидин 25,0мг/кг

Ш метилураци 170,0 мг/кг

И аспаркам 120,0мг/кг

а облепиховое масло 2,0 мл/кг

Примечание: 1. результаты эксперимента считать достоверными при р<0,05 .

2. * - достоверно относительно контрольной группы животных

Рисунок 12 - Влияние лекарственных средств на моторно-эвакуаторную функцию кишечника мышей

Это свойство препарата может быть использовано для нормализации моторно-эвакуаторных компонентов функционирования желудочно-кишечного тракта при повышенной моторике, что приведет к ускорению процессов рубцевания при таких состояниях как дисбиоз, болезнь Крона, синдром раздраженного кишечника. Препарат когитум может использоваться как средство выбора для рациональной фармакотерапии заболеваний ЖКТ.

По результатам исследования влияния когитума на тонус изолированного участка тонкого кишечника крыс установлено, что тонус изолированного отрезка интактного кишечника под влиянием когитума снижался: при введении 0,1 мл на 18,75% (р<0,05), 0,2 мл на 28,3% (р<0,05), 0,3 мл 48,0% (р<0,05). Влияние на возникновение ацетилхолинового спазма исследуемый препарат когитум не оказал.

ВЫВОДЫ:

1.. На основании системного анализа и выбора адекватных биомоделей спериментально доказана гастропротекторная активность когитума при кспериментальных гастропатиях: острый ульцерогенез (стероидно-этаноловый), бхронический (аспирин-индуцированный), симпатолитический (адельфан с стемной гипотермией) ишемический (лигирование привратника) и стрессорный ьцерогенез (фиксация и антиортостаз).

2. Сравнительные исследования показали, что по . лечебному ротивоязвенному действию эффекты когитума достоверно превышает результаты репаратов сравнения: ранитидина, метилурацнла, облепихового масла и аспаркама.

3. Когитум предотвращает дистрофические процессы в желудке, снижает о количеству и характеру язвенно-эрозивные повреждения и предотвращает азвитие дистрофических изменений в слизистой оболочке. Препарат можно тнести к 1руппе средств, повышающих регенеративную активность слизистой болочки желудка и резистентность к факторам агрессии.' ■

4. Установлен дозозависимый антисекреторный эффект когитума по нижению кислотности и количества секреции желудка крыс, а также снижение оторно-эвакуационной активности кишечника мышей.

5. Установлено спазмолитическое влияние когитума на тонус интактного трезка кишечника экспериментальных животных.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Влияние когитума на состояние слизистой оболочки желудка крыс при экспериментальной стероидно-этаноловой гастропатии / А-В- Сергиенко, И.А. Савенко, Ю.А. Огурцов [и др.] // Кубанский научный медицинский вестник. -2011.-№5(128).-С. 150-154.

2. Изучение гастропротекторной и гепатопротекторной активности лекарственных средств при моделированной патологии / A.B. Сергиенко, И.А.Савенко, Ю.С. Струговщик [и др.] // Аллергология и иммунология. - 2011. - Т. 12, № 1. - С. 4344.

3. Сергиенко, A.B. Протективный эффект когитума при экспериментальной гастропатологии / A.B. Сергиенко, И.А. Савенко, //Клинич. фармакология и терапия. - 2010. - Т. 19, № 6. - С. 83 - 85.

4. Фармакологическое исследование влияния когитума на моделированную патологию желудка крыс / И.А.Савенко [и.др.] // Биомедицина. - 2010. - № 5. -С. 123 - 125.

.. 5. Савенко, И.А. Энтеропротекторное действие когитума.на моделированный спазм в эксперименте /И.А.Савенко // Биомедицина. - 2010. - № 5. -С. 120.-122.

6. Савенко, И.А. Новый эффект когитума при.моделированной гастропатии крыс / И.А. Савенко, A.B. Сергиенко, В.П. Анисимова // Эксперим. и клинич. фармакология. - 2010. - С. 76.

7. Фармакологическое исследование биологически активных соединений на кафедре фармаколргии в 2010 году М.Н. Ивашев, A.M. Куянцева, И.А. Савенко [и др.]: под ред. М.В.Гаврилйна // Разработка, исследование и маркетинг новой

. фармацевтической продукции: сб. науч. тр.- Пятигорск: Пятигорская ГФА, 2011. -Вып. 66.-С. 521-522.

8. Савенко, И.А. Перспективы использования когитума при гастропатии / И.А. Савенко, A.B. Сергиенко; под ред. М.В.ГавриЛина // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр.- Пятигорск: Пятигорская ГФА, 2010. - Вып. 65. - С. 497 - 498.

9. Савенко, H.A. Восстановление нормальной физиологии слизистой оболочки желудка крыс при НПВС-индуцированном ульцерогенезе препаратом когитум / И.А. Савенко, A.B. Сергиенко // Современные проблемы системной регуляции физиологических функций: тез. докл. Междунар. междисциплин, конф. 10-21 дек. 2010 г. - Сафага, 2010. - С.164 - 165.

10. Savenko, I.A. Cogitum effects at the experimental gastropathy / I.A. Savenko, A.V. Sergienko // Basic and Clinical Pharmacology and Toxicology. - 2010. - V. 107. - P. 563.

11. Савенко, И.А. Целесообразность использования когитума в лечении НПВС-индуцированных гастропатий крыс / И.А. Савенко, A.B. Сергиенко // Бюл. Федерального Центра сердца, крови и эндокринологии им. В.А. Алмазова. -2010.-№ 2.-С. 202.

12. Перспективы применения когитума при патологии слизистой оболочки желудка, возникающей при лечении ревматоидных заболеваний / A.B. Сергиенко, И.А. Савенко, М.У. Алиева [и др.] // Актуальные проблемы современной ревматологии: сб. науч. тр. - Волгоград: НИИ клинич. и эксперим. ревматологии РАМН, 2010. - Вып. 27. - С. 83 - 84.

13. Савенко, И.А. Гастропротекторный эффект когитума при острой стерондно-этаноловой гастропатии крыс / И.А. Савенко, A.B. Сергиенко //. Человек и лекарство: тез. докл. 16 Рос. нац. конгр. 12 -16 апр. 2010 г. - М., 2010. - С. 713.

14. Фармакологическое изучение аминокислотных препаратов при моделированной патологии / A.B. Сергиенко, М.У. Алиева, И.А. Савенко [и др.] // Человек и лекарство: тез. докл. 16 Рос. нац. конгр. 12 -16 апр. 2010 г. - М., 2010. - С. 716.

15. Савенко, И.А. Применение когитума при адельфан-индуцированной гастропатии крыс / И.А. Савенко // Экология и здоровье: сб. науч. тр. - Ессентуки: Ассоциация мед. центров ЮНЕСКО, 2009. - Вып. 13. - С. 47 - 60.

САВЕНКО ИВАН АНДРЕЕВИЧ

ИЗУЧЕНИЕ ГАСТРОПРОТЕКТОРНОГО ДЕЙСТВИЯ КОГИТУМА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ГАСТРОПАТИИ

14.03.06 - ФАРМАКОЛОГИЯ, КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ

АВТОРЕФЕРАТ ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ НАУК

Подписано к печати «20» января, 2012 г. Формат бумаги 60x84 1/16 Бумага книжно - журнальная. Печать ротапринтная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

(357532, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11)