Автореферат и диссертация по медицине (14.00.50) на тему:Изучение апоптоза лимфоцитов крови при профаллергодерматозах
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.50
Оглавление диссертации Ткач, Алексей Валерьевич :: 2006 :: Москва
Список сокращений.-.
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. I Феномен ашмттоза и современные методы обнаружения типических клеток.*.-.,
12 Раи. нарушений процессов алоптоза в патогенезе заболеваний.*
1.3. Современные представления о клеточных механизмах н роль аногпоза лимфоцитов в патогенезе аллерз идерма ш job.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.„
2Л- Общая характеристика обследованных дни .36 2 2 Методы исследования алоптоза лимфоцитов. 41 2 2 1 Обоснование выбора методов количественной оценки алоптоза я имфоинтов.
2 2 2 Иенолкчованные в работе методы детекции алошозных КЛСГОК.
2.3. Методы цитохимических исследований.
24 Статистические приемы обработки результатов исследований)
ГЛАВА 3. СОБСТВЕННЫЕ НАБЛЮДЕНИЯ.
3.) Общая лабораторная характеристика обе л е дона иных пациентов
3 11. Результаты гематологическою обследования.
3 2 Результаты специальных исследований
3.2 ! Результаты исследования алоптоза лимфоцитов крови и определения содержания CLA+ субпопуляции лимфоцитов. .52 3,2.2. Результаты цитохимических исследований. ферментов лимфоцитов .„.
3.2.2 2. Иаспрелелсннс лимфоиктон по активности энергетических ферментов .,,.
3.2.2.3 Систсмв «свободнорнднклл иные процессы антнокс ндаш ния мпип а».
3.2.2.4 Цитохимическая характеристика аоеналш елыюй и аллергической реакции крови.,,,,.
3.3 Корреляционный шюлнтрезультатов исследований
3.4. Оценка эффективности терапии аллер( одермагепов на осмоле анализа показателей anotmm лимфоцитов крови и содержания С1Л+ субпопудячнн лимфоцитов
ГЛАВА 4 ОБСУЖДЕНИИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ S
ВЫВОДЫ.—.
Введение диссертации по теме "Медицина труда", Ткач, Алексей Валерьевич, автореферат
Профессиональный аллергический дермвтш - заболевание кожи, имеющее в силу широкой распространенности н медицинских последствий ШС1]№ социально- экономическое тиаченне. Наиболее част профал л ергодерматсп ы регистрируются у рабочих строительных и металл ообрабегыюоших профессий, когда причиной заболевания являются металлы-сенсибилизаторы, входящие a состав цемента и различных легированных сталей [9, (0,14,19.21 ] К сожалению, существующие методы профилактики и лечения не всегда окатываются эффективными в борьбе с чтим заболеванием (6,10,16.20] Такая ситуация требует разработки новых подходов к лечению и профилактике ирофаллергодерматоэов, что заставляет нас обратиться к детальному изучению патогенеза
В соответствии с современными представлениями, аллергическое кожное воспаление при профаллергодерматозах представляет собой клсточно-опосредованную реакцию, ключевую роль в которой играю; Т-лимфощлы (8,15,166,195] 111 нее iно также, что апоптот лимфоцитов является важнейшим регулятором количественного и качественного состава популяции лимфоцитом и во mi ином определяет баланс субпонуляций, соответствующий нормальному функционированию иммунной системы Изменения процессом апотттота отдельных субпопуляцнй лимфоцитов могут носить адаптационный характер, но зачастую приводят к развитию заболеваний [22,23,25].
Исследования роли алотота в патогенезе различных нммунообусловленнмх заболеваний в основном имеют своей целью выявление изменений аношота нмму некомпетентных клеток те клеток-мишеней при различных формах патологии, раскрытие механизмов активации и реализации аиопюта и выявление его паютенетнческого заболеваниях - системной красной волчанке, ревматоидном артрите, различных иммунодефипитных состояниях, включая алластнческие лимфопении. СПИД. Большую группу заболеваний, связанных с нарушениями апоптоза, составляют онкологические заболевший Исследования агимтгоза лимфоцитов ирл воспалнгедьной аллерюпагологнн проводились в основном на модели бронхиальной астмы.
Роль нарушений процессов агюгггоза как функции поддержания гомеостаза иммунной системы в патогенезе поражений кожи, в том числе от воздействия иетачл ов-ее не нбшпкагоров, изучена недостаточно.
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Целью настоящей работы является изучить апонгоз лимфоцитов крови и сто значение в механизмах патогенеза у больных профаллергодерматтами от возлсйствия металлов-сенсибилизаторов
ЗАДАЧИ
1 Методами люминесцентной микроскопии и проточной щгтпфлюоримстрнн оценить уронены пиоиточа лимфоцитов крови у больных нрофвллергодерыитозами ог НШЙСПМШ МвТШЛОВ* аллергенов
2 Методом проточной щгтофлкюрнмегфни оценить циркулирующую субпоиуляшгю лнмфоиптов, тройных к коже (CLA+), и ее апопгоэ.
3, Дать характеристику цитохимических параметров свободнорадикальных процессов, энергетической активности цитоплазматических структур лимфоцитов крови у обследонаиного ми пишет а. сопоставить с показателями апоптоза лкмфоцнтоа.
4 Провести сопоставление показателей агюгггоза лимфоцитов с клинической картиной, данными цитохимических исследований, и профаллергодсрматозах от воздействия металлов-аллергенов
5. Оценить эффективность лечения больных профаллергодерматозамн от воздействия металлов-аллергенов по данным показателей апоптоза лимфоцитов крови
НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ
• С помощью разработанного комплекса клникко-лабораторных методов впервые показана роль апоптта лимфоцитов крови в патогенезе профядяергодермагоюв
• Впервые дана оценка цирку лиру килей субполу ляпни .шмфицишн, тройных к коже (CLA+) - основных эффектор кых клеток кожного воспаления крови у больных профессиональными а-пергодерматозами и выявлена взаимосвязь количества этих клеток, распространенности и выраженности кожных клинических проявлений
• Показана значимость определения показателей анонима лимфоцитов и содержания тронных к коже лимфоцитов для опенки тяжести заболевании н эффективности лечения I срофаллергод ерматозов на разных стадиях заболевания
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ
Определение показателей впатоъя лимфоцктов методами люминесцентной микроскопии и проточной нитофлюорнметрин - в совокупности с содержанием CLA* лимфоцитов, может быть использовано для характеристики тяжести заболевания при обследовании больных профаллергодерматозамн и опенки эффективности лечения.
ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ В ПРАКТИКУ Материалы исследований легли н основу.
1 Проекта методических рекомендации «Клннико-лабораторная оценка нуклеолярного аппарата и олоотгозя лимфоцитов кропи 1фи профессиональном воздействии вредных химических н физических факторов».
2. Проекта программы послевузовской профессиональной подготовки <обрам)на1ельная нрчи-рамма, учебная программа, гесговые задания) по специальности «клиническая лаборагорная диагностикам (шифр - 040107) (клиническая ординатура, 3456 часов).
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ
Основные положения дмссергацмонной работ доложены м обсуждены на конференции клинического отдела по изучению клиннко-патогенетичсскнх основ профессиональных и производствен] ю-обусловленных заболеваний НИИ медицины труда РАМН (tТ. 102006) Материалы диссертации представлены и обсуждены на Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «(Окружающая среда и здоровье» (Суздаль, 2005); на IV Всероссийском конгрессе «Профессия и здоровье» (Москва, 2005), на 28ч>м Международном конгрессе по медицине труда (Милан. Италия, 2006); на заседаниях Ученого Совета ГУ НИИ медицины труда РАМН (Москва. 2005, 2006).
1Ьбликяинн. 11о теме диссертации опубликовано 7 печатных работ Объем и структура работы. Диссертация изложена на 110 страницах, состоит из введения. 4 глав, выводов Иллюстрирована 20 таблицами, 10
Заключение диссертационного исследования на тему "Изучение апоптоза лимфоцитов крови при профаллергодерматозах"
ВЫВОДЫ
1 А тки поз лимфоцитов крови достоверно усиливается у пациентов с профаллергодерматозамн от воздействия мстатлов-сснсибнлизатаров и составляет по данным люминесцентной микроскопии 3-5% и проточной нптофлюориметрнн 3,5-5,5% от всей популяции циркулирующих Т-лимфощпов (в контроле -2,10 и 2,68 % соответственно).
2 Содержание в крови тронных к коже (CLA+) лимфошгтов - основных эффекторных клеток кожного воспаления - и апоптоз этих клеток увеличиваются при профалдергодерматозах. Показател11 содержания CLA+ лимфотцпов и их апоптоза положительно коррелируют с тяжестью заболевания - обширностью поражений кожи
3. У пациентов с профаллергодерматозамн наблюдается увеличение энергетической активности лимфошгтов. что по данным цитохимических исследований проявляется увеличением мнгохондриальных ферментов (показателей СДГ и а-ГФДГ) и отражает активированное состояние лимфошгтов н их предрасположенность к апонтозу
4. В патогенезе аатергодерматозов апоптоз лимфоцитов крови ноент характер защитного механизма ограничивающего количество активных лнмфошпов, повреждающих кератшюцнты
5. Определение показателей апоптоза лнмфошпов методами люминесцетптюй микроскопии и проточной шгтофлюорнметрин в совокупности с содержанием CLA*- лимфоцитов может быть использовано для характеристики тяжести заболевания при обследовании больных профатлергодерматозамн и оценки эффективности лечения
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2006 года, Ткач, Алексей Валерьевич
1. Измерена МИ Клиника, диагностика и система профилактики современных форм профсссиональных аллергических дерматозов: Автореф. дне. докт мед наук. -М., 1994 -47 с.
2. Козннец ГИ-, Иогорслов S.M., Шмаров Д.А., Е»оев С.Ф , Сазонов В.В. Слетки крови Современные технологии их анализа - М: Триада-фарм. 2002 - 200с.
3. Кудрин А.В. Скатьный А В., Жаворонков А.А., Скальная MX. Громова О.А Иммунофармакологня микроэлементов. М.: КМ К, 2000. -537 с.
4. Любчснко ПН., Плаксина Г.В,, Иванова Л,А, и др Комплекс цитохимических методов для раннего выявления профессионального воздействия токсических веществ: Информационное письмо М. 1987 12 с.
5. Российская знниклопедия по медицине труда (под ред. Н Ф Измсрова } М.: ОАО «Медицина» 2005 -656 с.
6. Скрнпкнн Ю К. Шарапова Г Я Вопросы иммунологии в клинике кожных болезней Н Вестник дерматологии и венерологии 1980 - №10-С. 13-18.
7. Скрипкин Ю.К., Седнсский Г.Д., Федоров С М. и др. Актуальные проблемы современной дерматопрофнатологин Н Вестник дерматологии и венерологии 1998. -№2 -С.4-6
8. АНсп RT, Hunter WJ, Agrewal DK Morphological and biochemical characterization and analysis of apoptosis //J Pharmacol Toxicol Methods -199737:215-228
9. Aroeisen. JC On the origin, evolution, and nature of programmed cell death a timeline of four billion years,// Cell Death Diffcr-2002- 9(4); 367-93
10. Ansan B. Coates BD. Grecnstcin BD, Hall PA In situ end labeling delects DNA strand breaks in apoptosis and other physiological and pathological slates H J Pathol-1993-170; 1-8
11. Ansel J., Репу P. Brown J. m at. Cytokine modulation of keratinocyte cytokines // J Invest Dermatol 1990 - Vol 94 - P 101 - 107
12. Antonsson, B, Montessuit, S, Lauper, S, et al Bax oligomcrization is required for channel-forming activity in liposomes and to trigger cytochrome с release from mitochondria. // Biochem J 2000- 345(Pt 2): 271-8.
13. Ashfceua/i, A Targeting death and decoy receptors of the tumour-necrosis factor superfamily // Nat Rev Cancer-2002- 2(6}; 420-30
14. Attanasio. A., and Schiller, D, Ultrastructural detection of DNA strand breaks by in situ end-labeling techniques //J Pathol 1995-176 27-35
15. Austrup F , Vcstwebcr D , Borges E. et al. // Nature 1997 - №385 -p 81
16. Banchcrcau J, Stcmman R M // Nature -1998.-J&392. -p 45-52
17. Barker J.N W.N., Mitra R S , GnfTuhs С Е М et al Keraimocytes as initiators of inflammation // Lancet 1991 - Vol,337. - P.211 -214.
18. Barker J N.W.N, Sarma V , Dixit V et al Marked synergism between tumor necrosis factor-alpha and rnterfcron gamma in regulation in kenttinocytc-derived chcmotactic and adhesion molecules // J, Clin Invest 1990 - Vol 85 ~P 605-608
19. Barnes PJ, Kann № // N, Engl J Med -1997 -№336 -p. 1066-71
20. Bratton, SB, MacFarfane, M, Cain, К and Cohen, GM Protein complexes activate distinct caspase cascadcs in death receptor and stress-induced apoptosis. //Exp Cell Res -2000 256(1): 27-33.
21. Brown, D.G. Sun. X,M,t and Cohen, G.M. Dexamethasone-mduced apoptosis involves cleavage of DNA to large fragments prior to internucleosomal fragmentation НУ Biol Chem -1993 -268: 3037-3039
22. Bursch. W„ Pafle. S, Banhel, G and Sehulte-Harmann, R Biochemistry of cell death by apoptosis //Biochem Cell Biol -1990 68 1071-1074
23. Bussolaii O. Belletii Sr Uggeri J, Galli R, et al Characterization of apoptotic phenomena induced by treatment with L-asparaginasc in NIH3T3 cells //Exp Cell Res -1995 220:283-291
24. Castcdo, Mt Hirsch, Т., Susin, S, A., ct al Sequential acquisition of mitochondrial and plasma membrane alterations during early lymphocyte apoptosis. //J. Immunol -1996 -157, 512-521
25. Caulin C, Salveson GS, Oshima RG Caspase cleavage of keratin 18 and reorganisation of intcrmediiitc filaments during epithelial apoptosis.// J Cell Biol • 1997- 138:1379-1394
26. Cavam A . Albanesi С , Tnudl С et al. U Trends Immunol 2001 - №22 -p 118
27. Didenko, V V, and Homsby, P J Presence of double-stranded breaks with single-base 3' overhangs in cells undergoing apoptosis but not necrosis HI. Cell Biol -1996 135:1369-1376
28. Didenko, V V, Tunstead, J R. and Homsby, P.J Biotm-labcled hairpin oligonucleotides: probes to delect double-strand breaks DNA in apoptotic cells
29. Eamshaw, WC, Marlins, L. M., and Kaufmann, S. H. Mammalian cjepases structure, activation, substrates and functions during apoptosis //Annu. Rev Б>ochem. -1999 68, 383-424
30. Eamshaw WC Nuclear changes in apoptosts. // Curr Opin Cell Biol. -1995.-Jim;7(3):337-43. Review
31. Emoto K, Toyama-Sorimachi N, Karasuyama H., Inouc K, Umeda M Exposure of phosphatidylethanolamuie on the surface of apoptotic cells. //Exp Cell Res-1997- 232:430-434
32. Frankfurt OS, Robb J A, Sugarbaker EV, Villa L Monoclonal antibody to a single-stranded DNA is a specific and sensitive cellular marker of apoplosis //Exp Cell Res -1996 226:387-397
33. Frankfurt OS, Robb J A, Sugarbaker EV. Villa L Apoplosis in human breast and gastrointestinal carcinomas. Detection in histological sections with monoclonal antibody to single-stranded DNAJ7 Anticancer Res -1996,- 16:19791988
34. Friedmann, P S., 1 Strickland, A. A Memon, Р M. Johnson. Early time course of recruitment of immune surveillance in human skin after chemical provocation.//Clin. Exp. Immunol. -1993.-91:351.
35. Fujita 1С, Ohyama H, Yamada T Quantitative comparison of in situ mediods lor detecting apoptosis induced by X-ray irradiation ш mouse thymus, //llislochem J -1997 29:823-830
36. Grabbe S, Slcmcrt M, Mahnkc K. ct a! // 1 Clin Invest -1996 -№98 ■ p. И 58- 64
37. Grabbe S., Schwaiz T II Immunol. Today 1998,- №19.- p, 37-43
38. Green, D R and Reed, J, С Mitochondria and apoplosis./v' Science -1998 -281,1309-1312
39. Grimm, S, Bauer, MK, Baruerlc, PA and Schubx-OstholT, К Bcl-2 down regulates the activity оГtranscription factor NF-kappaB induced upon apoptosis,// J Cell Biol -1996 -134(1); 13-23
40. Groves R,W, Ross E, Barker J.N et al- // J. Invest Dermatol -1992.-№98-p 384-387
41. Hoffman, WH, Biade. S, Zflfou, JT, Chen, J and Murphy, M (2002). "Transcriptional repression of the anti-apoptotic survivin gene by wild type p53"
42. Holm AM, Aukrust P, Damas JK, Mutler F, Haivorsen B, Froland SS. Abnormal interieukin-7 function in common variable immunodeficiency //Blood 2005 Apr 1,105(7) 2887-90 Epub 2004 Dec 14
43. Kamentsky, L. A., Burger, D. E., Gershman, R. J., Kamctsky. L. D,, and Luther, E. (1997) Slide-based laser scanning cytometry ActaCytol. 41, 123-143
44. Karin, M and Lin, A (2002) "NF-kappaB at the crossroads of life and death " Nat Immunol 3(3); 221-7
45. Kehrcn, J,, C, Dcsvigncs, M Krasteva, M T Docluieau, О Assossou, F Honmd, M Hahne, D Kagi, D Kaiserlian, J F. Nicolas 1999 Cytotoxicity is mandatory for CDS* T cell-mediated contact hypersensitivity J Exp Med 189.779
46. N2. Kockx MM, Muhnng J, Knaapen MWM, dcMcycr GRY (1998) RNA synthesis and splicing interferes with DNA in situ end labeling techniques used to detect apoptosis Am J Pathol 152 885-888
47. Kocslcr SK. Roth P, Mikulka WR, Schlossman SF, Zhang C, Bolton WE (1997) Monitonng early cellular responses in apoptosis is aided by the mitochondrial membrane protcm-spccific monoclonal antibody AP02 7
48. К faster. S К and Bolton, W E. (2001) Cytometry of caspases. Methods Cell Biol 63.487-504.
49. Komoriya, A., Packard, B. Z , Brown, M J,, Wu, M L, and Henkart, P. A. (2000) Assessment of easpase activities in intact apoptotic thymocytes using cellpermeablc fluorogemc easpase substrates. J Exp. Med. 191,1819-1828
50. Koopman O, Rcutelingspcrger CP, Ituijtcn OA, Keehnen RM. Pasla ST, van Oers MH (1994) Annexm V for flow cytometric detection of phosphatidylsenne expression on В cells undergoing apoptosis Blood 84 1415-1420
51. Krasteva M, Kehren J., Ducluzeau M. T. et. al. H Eur. J. Dermatol. 1999-№9-p, 65.
52. Kroemer, G and Reed. JC (2000) "Mitochondrial control of cell death " Nat Med 6(5): 513-9
53. Kroemer, G, Zamzami, N and Susm, SA (1997) "Mitochondrial control of apoptosis " Immunol Today 18(1): 44-51
54. Kupper T.S, Immune and inflammatory processes in cutancous tissues mechanisms and speculations H J. Ctei. Invest 1990 Vol 86 » P. 1783 -1789.
55. Labat-Moleur F, Guillermct C, Lonmcr P, Robert C, Lantucjoul S, Brambilla E, Ncgoescu A (1998) TUNEL apoptotic cell detection in tissue sections: critical evaluation and improvement. J Histochem Cytochcm 46:327-334
56. Lastcr SM, Mackenzie JM (1996) Bleb formation and P-actm distribution dunng mitosis and tumor necrosis factor-tnduecd apoptosis Microsc Res Tech 34:272-280
57. Lazebnik, Y , Kaufmann, S, H., Desnoyers, S , Poirier, G. G., and Eamsbaw, W. С (1994) Cleavage of poly(ADP-nbosc) polymerase by proteinase with properties like ICE, Nature 371, 346-347.
58. Nakamura M. Yagi H, Ishn Tr Kay aba S. Soga H, Gotoh T, Ohsu S, Ogata M, ltoh T (1997) DNA fragmentation is not the primary event in glucocorticoid-induced thymocyte death in vivo. Eur J Immunol 27:999-1004
59. Nakamura К. I. R Williams. T. S Kuppcr 1995 Keratinocytc-dcrivcd monocyte chcmoattractant protein I (MCP-1): analysis in a transgenic model demonstrates MCP-I can recruit dendntic and Langerhans cells to skin J Invest Dermatol 105:635.
60. Karuse I. Keino H, Kawarada Y (1994) Antibody against single-stranded DNA detects both programmed cell death and drug-induced apoptosis. Histochemistry 10 Г 73-78
61. Ncchushtan, A, Smith, CL, Lamensdorf, I, Yoon, SH and Youle, RJ (2001). "Bax and Bak coalesce into novel mitochondria-associated clusters during apoptosis * JCellBtol 153(6); 1265-76
62. NegocHcu A, Lorimier P, Labal-Moleur Г, Drouct C, Robert C, Guillermet C, Bnimbilla C, Brantbilla E (1996) In situ apoptotic cell labeling by the TUNEL method improvement and evaluation on cell preparations J Histochem Cytochem 44:959-968
63. NickololT В J. Role of epidermal keratinocytes as key inrtialors of the contact dermatitis due to allergic sensitization and irritation // Am, J Contact Dermatitis, 1992 - Vol.3 -P.65-69.
64. Packard. В. Z, Komonya, A. Brotz, T M-, and Henkart, P A. (2001) Caspase S activity in membrane blebs after anti-Fas ligation J Immunol 167, 5061-5066.
65. Packard. B. Z., Topygin. D. D., Komoriya, A . and Brand L. (1996) Profluorescent protease substrates: intramolecular dimers described by the cxciton model Proc Natl. Acad Sci USA 93, 11,640-11,645
66. Piguet, P. F., G. H. Grau, C. Hauser, P Vassalli 1991 Tumor necrosis factor is a critical mediator in hapten induced imlant and contact hypersensitivity reactions. S, Exp Med 173:673,
67. Poppcma S, Maggio E, van den Berg A Development of lymphoma in Autoimmune Lymphoproliferahvc Syndrome (ALPS) and its relationship to Fas gene mutations //Lcuk Lymphoma, 2004 Mar;45(3);423-31. Review
68. Pulkkmcn JO, Elomaa 1., Jocnsuu H, Marukaincn P. Scrvomaa K, Grcnman R (1996) Pactitaxel-induccd apopiotic changes followed by time-lapse video microscopy in cell lines established from head and neck cancer, J Cancer Res Clin Oncol 122:214-218
69. Raff, MC, Barres, BA, Bume, JFt Coles, HS, Ishizaki, V and Jacobson. MD (1993) "Programmed cell deatli and the control of cell surv ival lessons from the nervous system " Science 262(5134): 695-700
70. Rand, M- L , J. S. Warren. M. K. Mansour, W Newman, D J. Rtnglcr. 1996. Inhibition of T cell recruitment and cutaneous delayed-type hypersensitivity-mduced inflammation will) antibodies to monocyte chemoattractant protein-1 Am. J Pathol 148 855
71. Randolph D. A, Carruthers C. J. S/abo S. J et al. It J Immunol. -1999.-№162.-p. 23 75.
72. Robert 1С, Kupper I S. Inflammatory skin diseases, T cells, and immune surveillance //N Engl J Med 1999 - Vol.341 -P 1817 - 1828,
73. Sallusto F, Krcmmer E., Palermo В et at // Eur. J Immunol -1999 №29 -p,2037
74. Salvesen. GS and Duckett, CS (2002a) "IAP proteins blocking the road to death s door." Nat Rev Mot Cell Biol 3(6): 401-10
75. Sanders EJ (1997) Methods for detecting apoptouc cells in tissues. Histol I tistopathol 12 1169-1177
76. Santamaria Babi L F , Picker L.J., Perez Soler M.T , et al // J F:sp. Med -199518l-p. 1935-40.lTl.Sartorius, U, Schmitz, 1 and Krammer, PH (2001). "Molecular mechanisms of death-rcceptor-mediated apoptosis * Chembiochem 2(1): 20-9
77. ScafTtdi, C, Fulda, S, Srinivasan, A, f nesen, Ct Li, F, Tomaselli, KJ, Debaltn, KM, Krammer, PH and Peter, ME (1998) Two CD95 (APO-l/Fas) signaling pathways " Embo J 17(6): 1675-87.
78. Schulzc-OsthofF K, Walczak H, Drogc W, Krammer PH (1994) Cell nucleus and DNA fragmentation arc not required for apoptosis. J Cell Biol 127 15-20
79. Schwartz,, A, P W Askenase, R. K. Gershon 1977 The effect of locally injected vasoactive amines on the ehcitation of dclaycd-typc hypersensitivity J Immunol 118 159
80. J77.Smolcwski, P., Bedner, E. Du, L„ et al (2001) Detection of caspascs activation by fluoroehrome-lubcled inhibitors: mutiiparamctcr analysis by laser scanning cytometry. Cytometry 44, 73-82 178. Springer Т А П Cell -1994 -J&76- p 301 -14
81. Tateyama H. Tada T. Hatiori H, Murase T, Li W-X, Eimoto T (1998) Effects of prefixation and fixation times on apoptosis detection by in situ end-labeling of fragmented DNA. Arch Pathol Lab Med 122:252-255
82. Tatton NA, Maclearv-Fraser A, Tatton WG, Perl DP, Olanow CW (1998) A fluorescent double-labeling method to detect and confirm apoptotic nuclei in Parkinson's disease. Ann Neurol 44.SI42-148
83. Telford, W. G., Komoriya. A , and Packard, B. Z. (2002) Detection of localised caspase activity in early apoplottc cells by laser scanning cytometry Cytometry 47, 81-88
84. Tittel. JN and Stcller, H (2000) "A comparison оГ programmed cell death between species." Genome Biol 1(3): REV1EWS0003
85. Trautmann A , Akdis M, Blascr K., Akdis С. A // Apoptosis 2000 - №5-p.425-9
86. Tsujtmolo, Y and Shimutu, S (2000) "VDAC regulation by the Bcl-2 family of proteins n Cell Death Differ 7(12); 1174-81
87. Yang К В., Mark MR . Gray A, et al //Nature-1998.-№395.-р.284-8,
88. I.Zhang C, Ao Z, Seth A, Schlossman SF (1996) A mrtochondnal membrane protein defined by a novel monoclonal antibody is preferentially detected in apopiotic cells J Immunol 157:3980-3987
89. Zhang G, Gurtu V, Kain SR. Yan G (1997) Early detection of apoptosis using a fluorescent conjugate of annex in V. Biotechmques 23:525-531
90. Zhu L. Chun J (1998) Apoptosis Detection and Assay Methods Natick, MA, Biotechmques Books, Eaton Publishing