Автореферат и диссертация по медицине (14.00.43) на тему:Изменения транспорта одновалентных катионов в эритроцитах больных бронхиальной астмой

ДИССЕРТАЦИЯ
Изменения транспорта одновалентных катионов в эритроцитах больных бронхиальной астмой - диссертация, тема по медицине
АВТОРЕФЕРАТ
Изменения транспорта одновалентных катионов в эритроцитах больных бронхиальной астмой - тема автореферата по медицине
Супранович, Ирина Юрьевна Санкт-Петербург 2009 г.
Ученая степень
кандидата медицинских наук
ВАК РФ
14.00.43
 
 

Автореферат диссертации по медицине на тему Изменения транспорта одновалентных катионов в эритроцитах больных бронхиальной астмой

На правах рукописи

Супранович Ирина Юрьевна

ИЗМЕНЕНИЯ ТРАНСПОРТА ОДНОВАЛЕНТНЫХ КАТИОНОВ В ЭРИТРОЦИТАХ БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ

14.00.43 - пульмонология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

1 4 МАЙ 2009

Санкт-Петербург 2099

Работа выполнена на кафедре госпитальной терапии им. акад. М.В. Чер-норуцкого Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Валерий Николаевич Минеев

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Татьяна Евгеньевна Гембицкая

заслуженный деятель науки РФ, член-корреспондент РАМН, доктор медицинских наук, профессор Вадим Иванович Мазуров

Ведущая организация:

Российская военно-медицинская академия им. С.М. Кирова

Защита диссертации состоится «16» 2009 г. в /о часов

на заседании диссертационного Совета Д.208.090.02 при Санкт-Петербургском государственном медицинском университете им. акад. И.П. Павлова в Научно-исследовательском институте пульмонологии (197089, Санкт-Петербург, ул.Рентгена 12, зал заседаний Ученого Совета).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова (197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6/8).

Автореферат разослан « 3 О »

Ученый секретарь диссертационного Совета доктор медицинских наук, профессор

й^ии^ 2009 г.

А. Л. Александров

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы

Бронхиальная астма (БА) является одной из важнейших проблем в современной пульмонологии (Федосеев Г.Б. и соавт., 2006; Чучалин А.Г. и соавт., 2006; Илькович М.М. и соавт., 2008; Трофимов В.И. и соавт., 2008). Отмечается неуклонный рост заболеваемости, нарастает тяжесть течения БА (Чучалин А.Г., 2007). Сложившаяся ситуация требует поиска новых путей решения проблемы диагностики и лечения БА.

В последние годы все большее внимание уделяется неиммунологическим механизмам заболевания, в частности, изучению структуры и функции плазматической мембраны клеток. В то же время транспорт одновалентных катионов Na+ и К+ и изменения поверхности клеток (гликокалик-са) изучены недостаточно, хотя они определяют фундаментальные проявления функциональной активности любой клетки. Как правило, изучались отдельные типы транспорта катионов Na+ и К1" через плазматические мембраны. Однако важно иметь представление о комплексе основных процессов транспорта одновалентных катионов через мембраны клеток и возможных взаимосвязях этих транспортных процессов с гликокаликсом как регуляторной компонентой мембраны (Снопов H.A. и соавт., 1990).

Несмотря на важную роль регулирующего влияния адренергической системы при БА (Минеев В.Н., 1993), отсутствует информация об этом влиянии на катион-транспортную функцию и гликокаликс эритроцитов в условиях воздействия адренергическими агентами.

Также представляется важным изучение изменений кати-он-транспортирующих систем в формировании бронхиальной гиперреактивности у больных БА, что обусловило наш интерес к исследованию ка-тионного состава конденсата влаги выдыхаемого воздуха у больных БА. Известно, что нарушения обмена Na+ и К+ имеют определенное значение в развитии воспаления дыхательных путей. Поэтому представляет большой интерес изучить клинические особенности течения БА у лиц с различной вкусовой чувствительностью к хлориду натрия и калия.

Таким образом, более глубокое изучение возможных патогенетических механизмов БА с позиций катионного дисбаланса позволит расширить представление о механизме формирования патологических изменений, характерных для БА и внести дополнения в современные представления о патогенезе заболевания.

Цель исследования: выявить изменения транспорта одновалентных катионов Na+ и К+ в эритроцитах больных бронхиальной астмой и устано-

вить их связь с состоянием гликокаликса, вкусовой чувствительностью к хлориду калия и натрия, а также с клиническими особенностями заболевания.

Задачи исследования:

1. Охарактеризовать состояние основных типов транспорта ионов

и К' (активный транспорт, Иа+, К+, 2СГ - котранспорт, пассивный транспорт) в эритроцитах больных бронхиальной астмой.

' 2. Выявить изменения сорбционной емкости гликокаликса эритроцитов для альцианового синего у больных бронхиальной астмой и их взаимосвязь с изменениями активного транспорта, Ка+, К+, 2СГ - котранс-порта, пассивного транспорта.

5 3. Определить в условиях модуляции адренергическими агентами (адреноагонистами - изопротеренолом, адреналином, антагонистом - об-зиданом) особенности основных типов транспорта ионов Ыа+ и 1С и сорбционной емкости гликокаликса эритроцитов для альцианового синего.

4. Исследовать в конденсате влаги выдыхаемого воздуха содержание и К+ у больных бронхиальной астмой и его взаимосвязь с изменениями активного транспорта, Иа+, К+, 2СГ - котранспорта, пассивного транспорта.

5. Оценить порог вкусовой чувствительности к хлориду натрия и хлориду калия у больных бронхиальной астмой и его взаимосвязь с изменениями активного транспорта, К+, 2СГ - котранспорта, пассивного транспорта.

Положения, выносимые на защиту:

1. Для больных бронхиальной астмой характерны изменения активного транспорта К+ и К+, 2СГ - котранспорта. Для больных аллергической бронхиальной астмой характерно снижение активного транспорта иГи увеличение Ка+, К+, 2СГ - котранспорта, для больных неаллергической бронхиальной астмой - увеличение активного транспорта и снижение К+, 2СГ - котранспорта. Характерно также парадоксальное влияние изопротеренола - торможение активности На", К+, 2СГ -котранспорта - у больных аллергической бронхиальной астмой. Установлено модулирующее (активирующее) влияние системных глюкокортико-стероидов при бронхиальной астме на активный транспорт, а также на Ыа+, К+, 2СГ - котранспорт и пассивный транспорт.

2. Для больных бронхиальной астмой характерно уменьшение сорбционной емкости гликокаликса эритроцитов для альцианового синего, наиболее выраженное у больных неаллергической бронхиальной астмой. Показана взаимосвязь сорбционной емкости гликокаликса для альцианового синего с активным транспортом Иа+ и 1С, а также Иа+, К+, 2СГ -

котранспортом.

3. У больных бронхиальной астмой выявлены изменения катионного состава конденсата влаги выдыхаемого воздуха (Ыа+ и К"1") и их взаимосвязь с содержанием Ыа+ и К+ в эршрощггах.

4. Выявлены изменения порога вкусовой чувствительности к хлориду натрия и хлориду калия у больных бронхиальной астмой и установлена взаимосвязь этого порога с активным транспортом Ыа+, К*' и К+, 2СГ - котранспортом.

Научная новизна исследования

Впервые в результате комплексного исследования охарактеризованы маркерные особенности активного транспорта и Ыа4", К+, 2С1~ — котранс-порта в эритроцитах больных бронхиальной астмой. Установлена связь с особенностями состава конденсата выдыхаемого воздуха в отношении содержания и К+.

Впервые выявлены изменения сорбционной емкости гликокаликса для альцианового синего в эритроцитах больных бронхиальной астмой и их взаимосвязь с отдельными параметрами ионного транспорта.

Впервые выявлено влияние адренергических агентов (изопротерено-ла, адреналина и обзидана) на катион-транспортную функцию мембран эритроцитов и сорбционную емкость гликокаликса для альцианового синего у больных бронхиальной астмой.

Впервые получены данные об изменении порогов вкусовой чувствительности к хлориду натрия и хлориду калия у больных бронхиальной астмой. Выявлена зависимость между транспортными системами в эритроцитах и изменениями порогов вкусовой чувствительности к хлориду натрия и хлориду калия у больных бронхиальной астмой.

Практическая ценность работы:

1. Выявленные особенности внутриклеточного содержания и К+ в эритроцитах, изменения К+, 2СГ - котранспорта, сорбционной емкости гликокаликса для альцианового синего, а также уровня содержания Ыа+ и К+ в конденсате влаги выдыхаемого воздуха позволяют проводить дифференциальную диагностику аллергического и неаллергического вариантов бронхиальной астмы.

2. Выявленные в условиях модуляции адренореактивной системы маркерные для атопического состояния изменения Ка\ К+, 2СГ -котранспорта, сорбционной емкости гликокаликса для альцианового синего также позволяют уточнить наличие аллергического или неаллергического вариантов бронхиальной астмы.

3. Установленные нарушения порога вкусовой чувствительности к хлориду натрия у больных бронхиальной астмой являются одним из фак-

торов риска в развитии бронхиальной астмы.

Апробация работы

Материалы диссертации были представлены на Межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием «Санкт-Петербургские научные чтения» (2002), 3-й и 4-й Всероссийских конференциях с международным участием "Механизмы функционирования висцеральных систем" (СПб, 2003; СПб, 2005), 13-м Национальном конгрессе по болезням органов дыхания (СПб, 2003), Научно-практических конференциях «VI, X и XI Булатовские чтения» (СПб, 2001; СПб, 2005; СПб, 2006), Международном молодежном медицинском Конгрессе «Санкт-Петербургские научные чтения» (2005).

По результатам 7 и 8 Санкт-Петербургского конкурса грантов для студентов, аспирантов и молодых специалистов, проводимого Министерством образования РФ, Российской Академией наук и Администрацией Санкт-Петербурга, конкурсные проекты «Разработка нового лечебного подхода при бронхиальной астме на основе особенностей катион-транспортной функции клеточных мембран» и «Механизмы терапевтического действия ингаляций фуросемида при бронхиальной астме» стали победителями конкурсов 2002 и 2003 годов (шифр грантов: М02-4.0К-17, M03-4.0K-15). На 16 Национальном конгрессе Российского респираторного общества и 2 конгрессе Евроазиатского респираторного общества в конкурсе постерных докладов доклад «Особенности обмена калия и натрия у больных БА» занял призовое место (2006). Работа отмечена дипломом академика М.В. Черноруцкого (2009).

Первичная апробация работы проведена на заседании проблемной комиссии «Патология органов дыхания» Санкт - Петербургского Государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова 14.05.2007.

По материалам диссертации опубликовано 16 печатных работ. Из них 4 статьи, 3 из которых опубликованы в журналах, рекомендованных ВАК, 3 работы в зарубежной литературе.

Внедрение результатов исследования. Результаты исследования внедрены в практическую работу клиники госпитальной терапии СПбГМУ имени академика И.П. Павлова и отделения врача общей практики поликлиники №31 СПбГМУ имени академика И.П. Павлова.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 145 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, двух глав с результатами собственных наблюдений, обсуждения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, включающего 222 работы (73 отечественных и 149 иностранных авторов). Работа иллюстрирована 18 таблицами и 10 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Для решения поставленных задач было обследовано 244 человека, среди них 195 больных БА, 20 больных с внелегочными проявлениями аллергии и 29 практически здоровых лиц.

Диагноз бронхиальная астма устанавливали в соответствии с классификацией и критериями международного консенсуса по вопросам диагностики и лечения БА (GINA, 2006). В группу больных аллергической БА вошли 113 человек, а в группу неаллергическая Б А - 82 человека. Отдельную группу составили больные, постоянно получающие системные глю-кокоргикостероиды (стероидзависимая БА) - 16 человек. Всем больным БА проводили клинико-лабораторное и инструментальное обследование: общеклинические методы, исследования функции внешнего дыхания, цитологическое исследование мокроты, аллергологическое обследование.

Методологическая схема исследования включала: сопоставление катион-транспортной функции эритроцитов с сорбционной емкостью глико-калихса для алыдаанового синего - клеточный уровень; сопоставление электролитного состава конденсата влаги выдыхаемого воздуха с содержанием Na+ и К+ в эритроцитах больных БА - органный уровень; определение порога вкусовой чувствительности к хлориду натрия и хлориду калия и его зависимости с транспортными системами эритроцитов у больных БА - организменный уровень.

В исследованиях для измерения потоков катионов Na+ и К* в качестве адекватной и патогенетически обоснованной модели были использованы эритроциты. Для измерения входного потока калия использовали рубидий, который является аналогом калия в основных системах переноса ионов через мембрану, таких как Na+, К+ - насос и Na+, К+ , 2СГ -котранспорт. Анализ потоков с использованием рубидия проводили по схеме, разработанной для эритроцитов в лаборатории физиологии клетки Института цитологии РАН, доктором биологических наук A.A. Веренино-вым. Определение концентрации катионов проводили пламенно-эмиссионным анализом на атомно-абсорбционном спектрофотометре Perkin-Elmer АА 306 при эмиссионном режиме в воздушно-пропановом пламени (Веренинов A.A., 1982). Кроме этого входные потоки Rb+ и выходные потоки Na+ и К1" эритроцитов оценивали в условиях модулирующего влияния адреноагониста (изопротеренола). Исследования катион-транспортной функции эритроцитов проводили в лаборатории физиологии клетки Института цитологии РАН.

Сорбционную емкость гликокаликса определяли с помощью метода прижизненного, количественного окрашивания эритроцитов альциановым

синим (Арцишевская P.A., Самойлова К.А., 1983), модифицированного применительно к условиям работы с малыми объемами крови (Снопов С. А. и др., 1987). При исследованиях в условиях модуляции адренергичес-кими агентами для определения сорбционной емкости гликокаликса для алыдаанового синего использовали гидрохлорид адреналина и обзидана.

Конденсат влаги выдыхаемого воздуха собирали с помощью стандартной методики (Анаев Э.Х., Чучалин А.Г., 2002). В полученных образцах конденсата определяли содержание калия и натрия пламенно-эмиссионным анализом на атомно-абсорбционном спектрофотометре Perkin-Elmer АА 306. Для определения порога вкусовой чувствительности к хлориду натрия и хлориду калия в исследовании применен метод определения порога вкусовой чувствительности, описанный R.I.Henkin (1963).

Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью общеупотребительных методов параметрической и непараметрической статистики в соответствии с рекомендациями по обработке результатов медико-биологических исследований (Гланц М. и др., 1992). Статистическая обработка материала выполнялась на ПЭВМ с использованием стандартного пакета прикладного статистического анализа SPSS для Windows (Statistical Package for the Social Science) (версия 13.0). Критический уровень достоверности нулевой статистической гипотезы (об отсутствии различий и влияний) принимали р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Концентрация Na* и К+ в эритроцитах у больных БА

Содержание Na+ и К+ в эритроцитах практически здоровых лиц и у больных БА достоверно различалось (р<0,05). В группе практически здоровых лиц содержание Na+ и К+ (мМ/г гемоглобина) составило 25,29+1,58 и 427,15±18,33; у больных аллергической БА - 26,03±1,12 и 448,85±10,50; у больных неаллергической БА - 21,48±1,24 и 417,33+40,14; у больных стеровдзависимой БА - 24,2210,37 и 425,00±15,56; у больных с внелегоч-ными проявлениями аллергии - 25,6411,72 и 428,64120,94, соответственно. В фазе ремиссии заболевания имеет место снижение показателей содержания Na+ и К+ в эритроцитах больных аллергической Б А на 15% и 6%, соответственно (р<0,05). У больных неаллергической БА имеет место увеличение данных показателей на 10% и 8% (р<0,05), соответственно. При усилении тяжести заболевания отмечается снижение содержания Na+ и К+ в эритроцитах у больных аллергической Б А на 16% и 7%, соответственно (р<0,05). У больных неаллергической БА данные показатели имеют обратную тендейцию и увеличиваются на 19% и 3%, соответственно (р<0,05).

Транспортные потоки Na+ и К+ у больных аллергической БА Полученные результаты, представленные в табл.1, свидетельствуют о снижении активного транспорта, отвечающего за вход Rb+ в эритроциты и сопряженного с ним выхода Na+. При этом изменяется стехиометрия Na+, К+- насоса - 1К+о.1-2,Ша+^ за счет уменьшения входных уабаин - чувствительных потоков Rtf и увеличения выходящих уабаин - чувствительных потоков Na+. Более высокая скорость выхода Na+ обусловлена, вероятно, тем, что часть молекул Na+, К+ - АТФазы осуществляет наряду с 2K+0.¡:3Na+¡4) обменом Na/Na обмен.

Таблица 1

Константы выхода К1", Na+ и входа Rb+ (мин'хЮ"4)

для здоровых лиц (п=29) и больных аллергической БА (п=113)

Здоровые лица Больные аллергической БА

Кк KRb KN3 Кк KRb Кка

ОбТ 5,29±0,33 1,39±0,06 31,23±2,29 5,79±0,29* 1,17±0,05' 34,82±1,44*

АТ 0,84±0,14 0,79±0,05 15,65±1,51 0,83±0,07 0,68±0,03* 18,41±1,23"

КТ 1,44±0,14 0,45±0,04 10,20±1,23 1,69±0,16* 0,39±0,03 14,69±5,07*

ОТ 3,26±0,30 0,30±0,03 13,19±1,23 3,61±0,29* 0,23±0,01 20,77±5,96*

Примечание: 1. ОбТ - общий транспорт, АТ - активный транспорт,

КТ - котранспорт, ОТ - остаточный транспорт.

2. Кк, КМа - константы выхода К+, Ка"1"; Км, - константа входа Ш>+.

3. * - р < 0,05 по сравнению со здоровыми лицами.

Активный транспорт имеет прямую взаимосвязь с показателями ФВД: ЖЕЛ, ОФВ1 (г = 0,45, р = 0,01; г = 0,33, р = 0,02), эозинофилией мокроты (г = 0,58, р = 0,04) и обратную взаимосвязь с эозинофилией крови (г = - 0,45, р = 0,04).

При анализе №+, К+, 2СГ - котранспорта установили увеличение активности данной транспортной системы (табл. 1). При этом выявили прямую зависимость между К+, 2СГ - котранспортом и содержанием Ыа в эритроцитах, что свидетельствует об активирующем влиянии Ыа+ на активность котранспорта (г = 0,28, р = 0,04). Также имеет место взаимосвязь между К+, 2СГ - котранспортом и содержанием эпителиальных клеток в цитологическом анализе мокроты (г = - 0,43, р = 0,04), котранспортом и степенью выраженности воспаления в мокроте (г = 0,68, р = 0,01).

Как видно из табл. 1 остаточный транспорт повышен за счет увеличения пассивной проницаемости выходных потоков К+ и

Таким образом, прирост в эритроцитах у больных аллергической БА обусловлен снижением активного транспорта, при этом несколько компенсирован за счет увеличения Ыа+, К+, 2СГ - котранспорта и остаточного транспорта.

Транспортные потоки и К+ у больных с внелегочными проявлениями аллергии

При анализе потоков и К+ установили увеличение активного транспорта по константам входа ЯЬ+ на 10% и 33% (р<0,05) по отношению к здоровым лицам и к больным аллергической БА, соответственно. При этом константа выхода увеличена на 6% по сравнению со здоровыми лицами и уменьшена на 10% по сравнению с больными аллергической Б А (р<0,05). К+, 2СГ - котранспорт по константе входа Ш)+ увеличен на 16% по отношению к здоровым лицам (р<0,05). Таким образом, увеличение К+, 2СГ - котранспорта позволяет диагностировать атопическое состояние не только на этапе клинических проявлений БА, но и на этапе внелегочных проявлений аллергии.

Транспортные потоки N3* и К+ у больных неаллергической БА Полученные результаты (табл.2) свидетельствуют об увеличении активного транспорта по константе входа При этом стехиометрия К+ - насоса составила 1К+0.;:1,5Ыа+;.0, что свидетельствует о работе активного транспорта в режиме сопряженного переноса Ыа+ и К+.

Таблица 2

Константы выхода 1С, Ыа^ и входа (мш'хЮ4)

для здоровых лиц (п=29) и больных неаллергической БА (п=82)

Здоровые лица Больные неаллергической БА

Кк Кщ, К,., Кк К„ь Кь'а

ОбТ 5,29±0,33 1,39±0,06 31,23±2,29 5,07±0,51* 1,35±0,09 32,73±2,14*

АТ 0,84±0,14 0,79±0,05 15,65±1,51 0,71±0,15 0,84±0,05* 13,77±2,18'

КТ 1,44±0,14 0,45±0,04 10,20±1,23 0,86±0,19* 0,42±0,04* 7,74±1,52*

ОТ 3,26±0,30 0,30±0,03 13.19il.23 3,51±0,47* 0,25±0,02 14,11±1,60*

Примечание: 1. ОбТ - общий транспорт, АТ - активный транспорт,

КТ - котранспорт, ОТ - остаточный транспорт.

2. Кк, - константы выхода К+, №+; КЕЬ - константа входа Ш)+.

3. * - р < 0,05 по сравнению со здоровыми лицами.

Выявили обратную взаимосвязь между активным транспортом и степенью выраженности воспаления в мокроте (г= - 0,81, р=0,04). Установили снижение Иа+, К+, 2СГ - котранспорта и увеличение активности остаточного транспорта (табл.2). Выявили обратную взаимосвязь между Иа+, К+, 2СГ - котранспортом и основными показателями ФВД (ЖЕЛ, ОФВ1 (г= - 0,65, р=0,04; г= - 0,74, р=0,02; соответственно)) и степенью выраженности воспаления в мокроте (г= - 0,96, р=0,01).

Транспортные потоки и К+ у больных стероидзависимой БА При анализе активного транспорта установили увеличение константы входа Шэ+ на 21% и константы выхода Ыа+ на 83% (р<0,05). При оценке Ыа',

К+, 2СГ - котранспорта выявили увеличение константы входа Rb* на 36% и константы выхода Na+ на 7% (р<0,05). При анализе остаточного транспорта установили увеличение констант выхода Na+ и К+ на 53% и 45%, соответственно (р<0,05). Таким образом, установили модулирующее (активирующее) влияние системных глюкокортикостероидов на активный транспорт, Na+, К+, 2СГ - котранспорт и остаточный транспорт, что определяет близкое к нормальному содержание Na+ и К+ в эритроцитах.

Выявлены достоверные корреляционные связи между дозой перо-ральных глюкокортикостероидов (от 15 до 30мг в пересчете на преднизо-лон) и активным транспортом (г = - 0,61; р = 0,04), Na+, К+, 2СГ -котранспортом (г = 0,97; р = 0,01), а также между суточной дозой парентеральных глюкокортикостероидов на день обследования (от 100 до 500 мг гидрокортизона) и Na+, К+, 2СГ - котранспортом (г = - 0,49; р = 0,01). Катион-транспортные нарушения в условиях модуляции адренергическон системы у больных БА

С целью выяснения роли адренергических нарушений у больных БА проводили определение чувствительности транспортных систем Na+ и К+ к p-адреноагонисту - изопротеренолу. Изоцротеренол у здоровых лиц увеличивает общий транспорт Na+ и К+ на 10% (р<0,05), активный транспорт на 11% (р<0,05) и Na+, К+, 2СГ - котранспорт на 14% (р<0,05). У больных аллергической БА наблюдали снижение общего транспорта Na+ и К+ на 25% (р<0,05) и Na+, К+, 2СГ - котранспорта на 26% (р<0,05), увеличение остаточного транспорта на 30% (р<0,05). У больных неаллергической БА наблюдали увеличение Na+, К+, 2СГ - котранспорта на 66% (р<0,05).

Таким образом, выявлено влияние Р - адреноагониста изопротеренола на параметры Na+, К+, 2СГ - котранспорта в эритроцитах здоровых лиц и больных Б А, что указывает на сопряжение котранспортной функции с р-адренергической системой клетки, при этом у больных аллергической БА наблюдается парадоксальное влияние изопротеренола - снижение активности Na+, К", 2СГ - котранспорта.

Сорбционнан емкость гликокаликса эритроцитов и ее взаимосвязь с транспортом одновалентных катионов Исходная величина сорбционной емкости гликокаликса для альциа-нового синего (СЕГАС) в группе здоровых лиц составила 19,2*10"''г/эр. Для больных БА характерно снижение СЕГАС, наиболее выраженное у больных неаллергической БА (11,8*10""г/эр), что может быть связано с повреждающим влиянием бактериальной инфекции и вирусов на гликока-ликс эритроцитов. Увеличение СЕГАС в динамике наблюдали преимущественно у больных неаллергической БА, что может быть связано с элими-

нацией вирусной инфекции и восстановлением способности к мембранной рецепции. У больных аллергической БА также выявили снижение СЕГАС (13,8*10~пг/эр). Наиболее вероятной причиной снижения СЕГАС являются количественные и качественные (конформадионные) изменения рецеп-торных гликопротевдов, столь характерные для аллергической БА. Отметим, что СЕГАС у больных аллергической БА не зависит от тяжести течения БА и сохраняется в фазе ремиссии заболевания. У больных аллергической БА установили парадоксальное действие адреналина на СЕГАС -значительное снижение в условиях блокады Рг - адренорецепторов обзи-даном, сохраняющееся даже в фазе затихающего обострения заболевания. Снижение СЕГАС у больных с внелегочными проявлениями аллергии (15,2*10"пг/эр) свидетельствует о том, что изменения СЕГАС присущи атоническому состоянию независимо от клинических проявлений (легочных, кожных и других). Наиболее значимое снижение СЕГАС (10,4*10" 11 г/эр) выявили у больных стероидзависимой Б А. Это связано с тем, что больные данной группы непрерывно используют в терапии пероральные глюкокортикостероидные препараты, что, по-видимому, приводит к снижению ответа глюкокортикостероидных рецепторов. Выявили обратную взаимосвязь между СЕГАС и содержанием Ыа+ в эритроцитах (г = - 0,58; р= 0,001), активным транспортом (г = - 0,50; р = 0,001) и К+, 2СГ -котранспортом у больных аллергической БА (г = - 0,31; р=0,04). Таким образом, выявлены особенности СЕГАС у больных БА и их тесная взаимосвязь с изменениями транспортных систем эритроцита.

Конденсат влаги выдыхаемого воздуха у практически здоровых лиц и у больных БА

Результаты исследований конденсата влаги выдыхаемого воздуха (КВВВ) представлены в табл.3.

Таблица 3

Характеристики КВВВ для больных аллергической БА (АБА) и

неаллергической БА (НАБА) и здоровых лиц

Группы Объем (мл/24часа) К+ (мкМоль/ЗОмин) (мкМоль/ЗОмин)

Здоровые, п=25 288+21 4.31±0,42 11,33+1,32

АБА, п=31 186±13* 3,92±0,51* 8,23±1,77"

НАБА, п=26 157±11* 5,85±0,9б" 10,83±2,11

Примечание: * - р < 0,05 по сравнению со здоровыми лицами.

У больных аллергической БА выявили низкое содержание и К+, а у больных неаллергической БА - высокое содержание К+, при уменьшении объема КВВВ, наиболее выраженное у больных неаллергической БА. В фазе ремиссии заболевания выявлена тенденция к увеличению концент-

рации К+ и Ма+. Сопоставление содержания К+ и в КВВВ и внутриклеточного содержания К+ и Ыа+ в эритроцитах у больных БА с разными вариантами заболевания показало, что у 58% (р<0,05) больных аллергической БА повышение концентрации Ыа+ в эритроцитах было связано с понижением содержания Ыа+ в КВВВ. Содержание Ыа+ и К+ в КВВВ у больных БА связано с отдельными показателями степени тяжести заболевания: частотой приступов удушья (г = - 0,44; р = 0,04), с (г =- 0,58; р= 0,04) и наличием стойкой эозинофилии в крови (г = - 0,70; р = 0,02). Таким образом, у больных Б А выявлены изменения КВВВ в отношении объема и содержания и К+, зависящие от варианта, тяжести заболевания и его фазы и их взаимосвязь с содержанием Ыа+ и К+ в эритроцитах.

Порог вкусовой чувствительности к хлориду натрия и хлориду калия у практически здоровых лиц и у больных БА

Для больных БА характерно повышение порога вкусовой чувствительности (ПВЧ) к хлориду натрия, максимально выраженное у больных неаллергической БА, при этом выявили два пика повышения порога вкусовой чувствительности к хлориду натрия (рис.1). Одной из возможных причин наличия второго пика ПВЧ к хлориду натрия, может являться присутствие в суммарных результатах определенной доли лиц с сопутствующей патологией.

Рис.1. Распределение ПВЧ к хлориду натрия у больных аллергической БА (АБА) и неаллергической БА (НАБА).

Примечание: по оси абсцисс: порядок разведения хлорида натрия: 10,0025%, 2-0,005%, 3-0,01% 4-0,02% 5-0,04%, 6-0,08%, 7-0,16%, 80,32%, 9-0,64%, 10-1,28%, 11-2,56%; по оси ординат: % больных БА.

Наиболее высокое содержание Na+ в эритроцитах выявили у больных БА с высоким ПВЧ к хлориду натрия (более 0,16%). У больных неаллергической БА с высоким ПВЧ имеет место снижение активного транспорта

на 11% (р<0,05) по сравнению с больными БА с низким ПВЧ (менее 0,16%), при этом активность Na+, К+, 2СГ - котранспорта увеличивается на 65% (р<0,05). У больных аллергической БА с высоким ПВЧ к хлориду натрия выявили снижение активного транспорта на 46% (р<0,05) и Na4", К+, 2СГ - котранспорта на 38% (р<0,05). Данные результаты обусловлены тем, что активный транспорт и Na+, К4", 2СГ - котранспорт связаны с солевой чувствительностью (Weder A.B., 1991).

Результаты исследований ПВЧ к хлориду калия у больных БА (рис.2) свидетельствуют о наличии бимодального распределения, в котором один пик характеризует пациентов, ощущающих горький вкус, а другой - не ощущающих. Увеличение ПВЧ к хлориду калия вплоть до отсутствия ощущения горького вкуса у больных БА, возможно, обусловлено десенси-

здоровые """больные НАБА-*1""больные АБА

Рис.2. Распределение ПВЧ к хлориду калия у больных аллергической БА (АБА) и неаллергической БА (НАБА).

Примечание: по оси абсцисс: порядок разведения хлорида калия: 10,0025%, 2-0,005%, 3-0,01%, 4-0,02%, 5-0,04% 6-0,08%, 7-0,16%, 8-0,32%, 9-0,64%, 10-1,28%, 11-2,56%, 12-5,12%; по оси ординат: % больных БА.

У больных НАБА установили связь ПВЧ к хлориду калия с активным транспортом и котранспортом (г= - 0,65; р=0,03 и г= - 0,63; р=0,04), а у больных АБА - с активностью котранспорта (г=0,45; р=0,03).

Таким образом, принимая во внимание возможное единство регуляции обмена Na+ и К+ как на клеточном, так и на органном и организмен-ном уровнях, изменения катион-транспортной функции для одновалентных катионов эритроцитов, электролитного состава КВВВ, сорбционной емкости гликокаликса, вкусовой чувствительности к хлориду натрия и калия являются фундаментальными, интегральными характеристиками нарушений обмена Na+ и К+ у больных Б А. Данные изменения не только

отражают различия в патогенетических особенностях основных вариантов БА, но и, по-видимому, участвуют в формировании некоторых из них. ,

ВЫВОДЫ

1. У больных Б А выявлены изменения содержания Na+ и К+ в эритроцитах, зависящие от варианта заболевания и его фазы. При аллергической БА в фазе обострения содержание этих ионов выше, чем у практически здоровых лиц, а при неаллергической БА содержание этих ионов ниже. Эти изменения связаны с особенностями состава конденсата влаги выдыхаемого воздуха в отношении содержания Na" и К+ при аллергической БА (низкое содержание Na+ и К+) и при неаллергической БА (высокое содержание К ).

2. У больных аллергической Б А в фазе обострения наблюдается снижение активного транспорта Na~ и К+ и увеличение Na". К+, 2СГ - котранс-порта в их общем потоке через мембраны эритроцитов. Выявлена прямая зависимость активного транспорта с показателем функции внешнего дыхания (OOBi), с эозинофилией мокроты и обратная с эозинофилией крови.

3. У больных неаллергической Б А в фазе обострения выявлено увеличение активного транспорта Na+ и К+ и снижение Na+, К+, 2СГ - котранс-порта. Выявлена обратная зависимость транспортных систем с показателем функции внешнего дыхания (ОФВО и степенью выраженности воспаления в мокроте по данным цитологического исследования. Установлено модулирующее (активирующее) влияние системных глюкоксртикостероидов при БА на общий поток Na+ и К+ через мембраны эритроцитов, на активный транспорт, а также на Na+, К+, 2СГ - котранспорт, что определяет близкое к нормальному содержание Na" и К+ в клетке.

4. Выявлено влияние р2 - адреноагониста изопротеренола на параметры Na+, К+, 2СГ - котранспорта в эритроцитах здоровых лиц и больных БА, что указывает на сопряжение ксггранспортной функции с р - адренергиче-ской системой клетки, при этом у больных аллергической БА наблюдается парадоксальное влияние изопротеренола - торможение активности Na+, К+, 2СГ - котранспорта.

5. При Б А выявлено уменьшение сорбционной емкости гликокаликса эритроцитов в отношении альцианового синего, наиболее выраженное у больных неаллергической БА и у больных стероидзависимой БА. При этом показано, что гликокаликс связан с активным транспортом Na+ и К+, а также Na+, К+, 2СГ - котранспортом.

6. Для больных БА характерно повышение порога вкусовой чувствительности к хлориду натрия. Выявлена прямая зависимость Nax, К+, 2СГ -котранспорта и порога вкусовой чувствительности к хлорид)' натрия у больных неаллергической БА.

У больных БА с высоким порогом вкусовой чувствительности к хлориду натрия имеет место снижение активного транспорта Na+ и К\ что может приводить к повышенному содержанию натрия в эритроцитах данных больных. При этом у больных аллергической БА наблюдается снижение Na+, К+, 2СГ - котранспорта, а у больных неаллергической БА увеличение параметров данной транспортной системы.

7. При исследовании вкусовой чувствительности к хлориду калия установлена связь между ее порогом и активным транспортом Na+ и К+ и активностью Na+, К+, 2СГ - котранспорта. При этом у больных неаллергической БА выявлена обратная связь с обеими транспортными системами, а у больных с аллергической БА - только прямая связь с активностью Na+, К+, 2СП - котранспорта. У больных БА имеет место увеличение порога вкусовой чувствительности к хлориду калия вплоть до отсутствия ощущения горького вкуса, что может отражать десенситизацию вкусовых рецепторов к хлориду калия.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Определение константы обмена Na+, К+, 2СГ - котранспорта как исходно, так и в условиях модуляции адренореактивной системы рекомендуется использовать для дифференциальной диагностики аллергического и неаллергического вариантов БА.

2. Определение содержания Na+ и К+ в конденсате влаги выдыхаемого воздуха можно рекомендовать для дифференцировки аллергического и неаллергического вариантов БА.

3. Исследование порога вкусовой чувствительности к хлориду натрия может быть использовано как один из методов при выявлении больных БА с пониженной чувствительностью вкусовых рецепторов к хлориду натрия (фактор риска в развитии БА), что определяет рекомендации в отношении малосолевой диеты.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Минеев В.Н., Нестерович И.И., Лалаева Т.М., Супранович И.Ю. и др. Сигнальные системы при бронхиальной астме // Ученые записки СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова. - 2001 - Т.8, №1. - С. 17-22.

2. Минеев В.Н., Веренинов A.A., Супранович И.Ю., Адамова И.В., Синицина Т.М. Исследование катион-транспортных функций клеточных мембран у больных бронхиальной астмой с гиперреактивностью бронхов на неизотонические провокации // Актуальные вопросы пульмонологии и

клинической аллергологии (VI Булатовские чтения, посвященные 100-летию кафедры госпитальной терапии им. акад. М.В. Черноруцкого СПб ГМУ им. акад. И.П. Павлова): материалы науч.-практ. конф.: 19-21 июня 2001г., Санкт-Петербург. - СПб., 2001. - С.11.

3. Минеев В.Н., Веренинов A.A., Супранович И.Ю., Адамова И.В., Синицина Т.М. Анализ трансмембранного транспорта натрия и калия в эритроцитах у больных бронхиальной астмой с гиперреактивностью бронхов на неизотонические провокации // Санкт-Петербургские научные чтения - 2002: Межрегиональная науч.-практ. конф. молодых ученых и студентов с международным участием: тез.докл.: 30-31 января 2002, Санкт-Петербург. - СПб., 2002. - С.52-53.

4. Супранович И.Ю. Разработка нового лечебного подхода при бронхиальной астме на основе особенностей катион-транспортной функции клеточных мембран // Аннотация работ по грантам Санкт-Петербургского конкурса 2002 г. для студентов, аспирантов и молодых специалистов (Седьмая Санкт-Петербургская ассамблея молодых ученых и специалистов). - СПб., 2002. - С. 104.

5. Супранович И.Ю. Механизмы терапевтического действия ингаляций фуросемида при бронхиальной астме // Аннотация работ по грантам Санкт-Петербургского конкурса 2003 г. для студентов, аспирантов и молодых специалистов (Восьмая Санкт-Петербургская ассамблея молодых ученых и специалистов). - СПб., 2003. - С.96.

6. Минеев В.Н., Веренинов A.A., Супранович И.Ю. Исследование катион-транспортных функций клеточных мембран у больных бронхиальной астмой с гиперреактивностью бронхов на неизотонические провокации // Механизмы функционирования висцеральных систем (3 Всерос. конф. с междунар. участием, посвященная 175-летию со дня рождения Ф.Б. Овсянникова): материалы междунар. конф.: 29 сентября-1 октября 2003г., Санкт-Петербург. - СПб., 2003. -С.205-206.

7. Минеев В.Н., Веренинов A.A., Супранович И.Ю. Катион-транспортные нарушения у больных бронхиальной астмой в условиях модуляции адренергической системы // 13-й нац. конгресс по болезням органов дыхания: тез.докл.: 9-13 ноября 2003г., Санкт-Петербург. - СПб., 2003. -С. 137.

8. Супранович И.Ю. Катион-транспортные нарушения в эритроцитах у больных бронхиальной астмой в условиях модуляции адренергической системы // Санкт-Петербургские научные чтения - 2004 (4 Междунар. науч.-практ. конф.): материалы науч.-практ.конф.: 4-7 февраля 2004г., Санкт-Петербург. - СПб., 2004. - С.55.

9. Минеев В.Н., Нестерович И.И., Супранович И.Ю. Особенности гликокаликса у больных бронхиальной астмой как регуляторного компонента мембраны // Актуальные вопросы пульмонологии и клинической аллергологии - врачу общей практики (X Булатовские чтения): материалы науч.-практ. конф.: 22-23 июня 2005г., Санкт-Петербург. - СПб., 2005. -С.88-89.

10. Нестерович И.И., Супранович И.Ю. Особенности гликокаликса как регуляторного компонента мембраны при бронхиальной астме.// Механизмы функционирования висцеральных систем (4 Всерос.конф. с меж-дунар. участием, посвященная 80-летию Института физиологии им. И.П.Павлова РАН): материалы всерос. конф.: 04-06 октября 2005г., Санкт-Петербург. - СПб., 2005. - С. 172.

11. Минеев В.Н., Нестерович И.И., Супранович И.Ю. Особенности гликокаликса как регуляторного компонента мембраны при бронхиальной астме // Клинич. патофизиология. - 2006. - №2. - С.24-31.

12. Минеев В.Н., Веренинов А.А., Супранович И.Ю., Адамова И.В. Транспорт одновалентных катионов через мембрану эритроцитов и бронхолитическое и протективное действие ингаляции фуросемида при бронхиальной астме // Пульмонология. - 2007,- №1.-С.82-87.

13. Минеев В.Н., Супранович И.Ю. Вкусовая чувствительность к хлориду натрия и хлориду калия и некоторые показатели натриевого обмена у больных бронхиальной астмой // Клинич. медицина. - 2008. -№10. - С.32-36.

14. Mineev V.N., Vereninov А.А., Adamova I.V., Supranovich I.Y., Sinitzina T.M. The peculiarities of the cation transport functions of erythrocyte cells membranes in asthmatic patients with bronchial hyperreactivity to hypo-and hypertonic aerosols // Eur.Resp.J. - 2001. - Vol.18, Suppl.33. - P.722.

15. Mineev V.N., Vereninov A.A., Adamova I.V., Sinitzina T.M., Supranovich I.Y. The relation of bronchoprotective action of furosemide with cell membranes ion - transport function in asthmatic patients // Eur.Resp.J. -2002. - Vol.20, Suppl.38, - P1209.

16. Mineev V.N., Vereninov A. A., Supranovich I.Y. The features of the metabolizm kalii and natri at the patients with the bronchial asthma and their clinic-pathogenetic significant //3-rd Congress of European Region International Union against Tuberculosis and Lung Diseases (IUATLD), 14-th Russian National Congress of Lung Diseases: 22-26 June 2004, Moskow. - M., 2004. -P.201.

Лицензия от ИД № 00597 от 15.12.99 Подписано в печать 22.04.2009 Усл. печ. л. 1.25 Формат 60x84 1/16 Печать офсетная Тираж 100 экз. Заказ 790/09 197089, Санкт-Петербург, ул. Л. Толстого 6/8 Издательство СПбГМУ

 
 

Оглавление диссертации Супранович, Ирина Юрьевна :: 2009 :: Санкт-Петербург

Перечень условных обозначений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУЩ

1.1. Транспорт одновалентных катионов Na+ и К+ через мембраны 12 клеток и его функциональное значение

1.2. Изменения активного транспорта одновалентных катионов Na и 22 К+ через мембраны клеток при бронхиальной астме

1.3. Изменения Na+, К+, 2СГ - котранспорта при бронхиальной астме

1.4. Структурно-функциональная роль гликокаликса при 27 бронхиальной астме

1.5. Конденсат влаги выдыхаемого воздуха при бронхиальной астме

1.6. Вкусовая чувствительность к хлориду калия, хлориду натрия и 33 бронхиальная астма

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Критерии отбора группы практически здоровых лиц ■

2.2. Общая характеристика обследованных больных

2.3. Методы исследования

2.3.1. Методы определения общего трансмембранного потока, 47 активного транспорта, Na+, К+, 2СГ - котранспорта и остаточного транспорта одновалентных катионов Na+ и К+ в мембранах эритроцитов

2.3.2. Методы определения сорбционной емкости гликокаликса 50 эритроцитов для альцианового синего

2.3.3. Определение содержания Na+ и К+ в конденсате влаги 51 выдыхаемого воздуха

2.3.4. Методы определения порога вкусовой чувствительности к 51 хлориду натрия и хлориду калия

2.4. Методы статистического анализа

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Трансмембранный транспорт одновалентных катионов Na+ и К+ 53 через мембраны эритроцитов у больных бронхиальной астмой

3.1.1. Содержание Na+ и К+ в эритроцитах практически здоровых 53 лиц и у больных бронхиальной астмой

3.1.2. Трансмембранный поток одновалентных катионов Na и К в 55 эритроцитах практически здоровых лиц и у больных бронхиальной астмой

3.1.3. Катион-транспортные нарушения в условиях модуляции 67 адренергической системы у больных бронхиальной астмой

3.2. Сорбционная емкость гликокаликса эритроцитов и ее 69 взаимосвязь с транспортом одновалентных катионов Na+ и К+ у больных бронхиальной астмой

3.3. Конденсат влаги выдыхаемого воздуха в группе практически 73 здоровых лиц и у больных бронхиальной астмой

3.4. Порог вкусовой чувствительности к хлориду натрия и хлориду 76 калия в группе практически здоровых лиц и у больных бронхиальной астмой

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

 
 

Введение диссертации по теме "Пульмонология", Супранович, Ирина Юрьевна, автореферат

Актуальность темы

Бронхиальная астма (БА) является одной из важнейших проблем в современной пульмонологии (Федосеев Г.Б. и соавт., 2006; Чучалин А.Г. и соавт., 2006; Илькович М.М. и соавт., 2008; Трофимов В.И. и соавт., 2008). I

Отмечается неуклонный рост заболеваемости, увеличивается распространенность этой патологии во многих странах мира, составляя в настоящее время 10-15% среди детей и 5-10% среди взрослых. Нарастает тяжесть течения БА, что проявляется неблагоприятной динамикой смертности от этого заболевания (Чучалин А.Г., 2007). Такая ситуация обусловлена отсутствием полной картины патогенеза заболевания и исчерпывающих данных о первичных, наследуемых биологических дефектах, приводящих к возникновению аллергического воспаления.

В последние годы все большее внимание уделяется неиммунологическим механизмам заболевания, в частности, изучению структуры и функции плазматической мембраны клеток и мембранозависимых клеточных реакций.

В 1989 году С.С. Жихаревым и В.Н. Минеевым постулировано положение об аллергической БА, как патологии мембрано-рецепторного комплекса, с наличием адренергического дисбаланса, обусловленного изменениями мембрано-рецепторного аппарата клетки. Отмечено изменение кальциевого гомеостаза у больных БА, как на уровне клетки (Middleton Е., 1984), так и на уровне всего организма (Чучалин А.Г. и соавт., 1989). В то же время транспорт одновалентных катионов Na+ и К+ и изменения поверхности клеток (гликокаликса) изучены недостаточно, хотя они определяют фундаментальные проявления функциональной активности любой клетки.

Особенности транспорта ионов через клеточные мембраны при БА первоначально пытались изучать в клетках органов, принимающих непосредственное участие в регуляции бронхиальной проходимости. Однако эти клетки, в частности, гладкомышечные клетки бронхов и клетки эпителия дыхательных путей, являются труднодоступными для изучения (Boucher R.C., 1994). Поэтому основное внимание исследователи сосредоточили на изучении дефектов транспорта ионов в клетках крови, в частности, в эритроцитах.

Было показано, что у больных БА основные типы транспорта катионов претерпевают те или иные изменения, но данные, полученные различными авторами, противоречивы. Это касается практически всех изучаемых типов ионного транспорта: активного транспорта (Bichonski R. et al., 1984; Zoltan Т. et al., 1986; Skoner D.P. et al., 1991), Na+, K+, 2C1 - котранспорта, пассивной диффузии (Орлов С.Н. и соавт., 1991, 1999; Barg W. et al., 1994; Dolganov G.M. et al., 2001). Как правило, изучались отдельные типы транспорта катионов Na+ и К+ через плазматические мембраны. Однако важно иметь представление о комплексе основных процессов транспорта одновалентных катионов через мембраны клеток и возможных взаимосвязях этих транспортных процессов с гликокаликсом как регуляторной компонентой мембраны (Снопов Н.А. и соавт., 1990).

В целом, регуляция функциональной активности клеток, участвующих в патогенезе БА, сводится к созданию в клетке баланса так называемых вторичных мессенджеров, таких как цАМФ, диацилглицерин, инозиттрифосфат, Са2+ (Капилевич JI.B. и соавт., 2001). При этом существуют две основные сигнальные системы (аденилатциклазная и фосфоинозитидная), активация которых ведет к накоплению в клетке вторичных мессенджеров. Несмотря на важную роль регулирующего влияния адренергической системы при БА (Минеев В.Н., 1993), отсутствует информация об этом влиянии на катион-транспортную функцию эритроцитов в условиях воздействия адренергическими агентами. Кроме этого, практически отсутствуют сведения об особенностях гликокаликса в условиях модуляции адренореактивной системы, значение которых в настоящее время считается определяющим в ионном транспорте клетки.

Одно из основных положений «мембранной теории» БА -генерализованный характер дефекта клеточных мембран. Согласно представлениям С.С. Жихарева и соавт. (1989), легкие представляют собой наиболее крупную биологическую мембрану организма. Внешняя поверхность ее представлена альвеолярным эпителием и сурфактантом, внутреннюю поверхность этой мембраны выстилают эндотелиальные клетки легочных капилляров. В связи с этим представляется важным изучение изменений катион-транспортирующих систем в формировании бронхиальной гиперреактивности у больных БА, что обусловило наш интерес к исследованию катионного состава конденсата влаги выдыхаемого воздуха у больных БА. Считается, что основные нелетучие компоненты этой жидкости являются метаболическими продуктами клеток, выстилающих воздухопроводящие пути (Анаев Э.Х. и соавт., 2002).

В рамках обсуждаемой проблемы особого внимания заслуживают данные о влиянии натрия как компонента питания на особенности течения БА. Известно, что пищевые добавки поваренной соли приводили к увеличению частоты обострений заболевания, ухудшению бронхиальной проходимости, повышению неспецифической гиперреактивности бронхов и потребности больных в ингаляционных глюкокортикостероидах (Sonhrada М. et al., 1985; Skoner D.P. et al., 1991; Demissie K. et al., 1994; Liu X.S. et al., 2005). He исключено, что именно нарушения обмена Na+ и К+ имеют определенное значение в развитии воспаления дыхательных путей. Поэтому представляет большой интерес изучить клинические особенности течения бронхиальной астмы у лиц с различной вкусовой чувствительностью к хлориду натрия и калия.

Таким образом, более глубокое изучение возможных патогенетических механизмов БА с позиций катионного дисбаланса позволит расширить представление о механизме формирования патологических изменений, характерных для БА, и внести дополнения в современные представления о патогенезе БА.

Цель работы

Выявить изменения транспорта одновалентных катионов Na+ и К+ в эритроцитах больных бронхиальной астмой и установить их связь с состоянием гликокаликса, вкусовой чувствительностью к хлориду калия и натрия, а также с клиническими особенностями заболевания.

Задачи исследования:

1. Охарактеризовать состояние основных типов транспорта ионов Na+ и К+ (активный транспорт, Na+, К+, 2С1 - котранспорт, пассивный транспорт) в эритроцитах больных бронхиальной астмой.

2. Выявить изменения сорбционной емкости гликокаликса эритроцитов для альцианового синего у больных бронхиальной астмой и их взаимосвязь с изменениями активного транспорта, Na+, К+, 2СГ- котранспорта, пассивного транспорта.

3. Определить в условиях модуляции адренергическими агентами (адреноагонистами, - изопротеренолом, адреналином, антагонистом -обзиданом) особенности основных типов транспорта, ионов Na и К и сорбционной емкости-гликокаликса эритроцитов для альцианового синего.

4. Исследовать в конденсате влаги выдыхаемого воздуха содержание Na+ и К+ у больных бронхиальной астмой и его взаимосвязь с изменениями активного транспорта, Na+, К+, 2С1- котранспорта, пассивного транспорта.

5. Оценить порог вкусовой чувствительности к хлориду натрия и хлориду калия у больных бронхиальной астмой и его взаимосвязь с изменениями активного транспорта, Na+, К+, 2С1 - котранспорта, пассивного транспорта.

Научная новизна:

1. Впервые в результате комплексного исследования охарактеризованы % маркерные особенности активного транспорта и Na+, К+, 2С1 - котранспорта в эритроцитах больных бронхиальной астмой. Установлена связь с особенностями состава конденсата влаги выдыхаемого воздуха в отношении содержания Na+ и К+.

2. Впервые выявлены изменения сорбционной емкости гликокаликса для альцианового синего в эритроцитах больных бронхиальной астмой и их взаимосвязь с отдельными параметрами ионного транспорта.

3. Впервые выявлено влияние адренергических агентов (изопротеренола, адреналина и обзидана) на катион-транспортную функцию мембран, эритроцитов и сорбционную емкость гликокаликса для альцианового синего у больных бронхиальной астмой.

4. Впервые получены данные о нарушении порогов вкусовой чувствительности к хлориду натрия и хлориду калия у больных бронхиальной астмой. Выявлена зависимость между транспортными системами в эритроцитах и изменениями, порогов вкусовой чувствительности к хлориду натрия и хлориду калия у больных бронхиальной астмой.

Практическая ценность работы:

1. Выявленные особенности, внутриклеточного содержания Na+ и К+ в эритроцитах, изменения Na+, К+, 2С1 - котранспорта, сорбционной емкости гликокаликса для альцианового синего, а также уровня содержания Na+ и К+ в конденсате влаги выдыхаемого ' воздуха позволяют проводить дифференциальную диагностику аллергического и неаллергического вариантов бронхиальной астмы.

2. Выявленные в условиях модуляции адренореактивной системы маркерные для атопического состояния изменения Na+, К+, 2СГ -котранспорта, сорбционной емкости гликокаликса для альцианового синего также позволяют уточнить наличие аллергического или неаллергического вариантов бронхиальной астмы.

3. Установленные нарушения порога вкусовой чувствительности к хлориду натрия у больных бронхиальной астмой являются одним из факторов риска в развитии бронхиальной астмы.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Для больных бронхиальной-астмой характерны изменения активного транспорта Na+, К+ и Na+, К+, 2С1 - котранспорта. Для больных аллергической бронхиальной астмой характерно снижение активного транспорта Na+ и К+ и увеличение Na+, К+, 2СГ - котранспорта, для больных неаллергической бронхиальной астмой - увеличение активного транспорта и снижение Na+, К+, 2СГ-котранспорта. Характерно также парадоксальное влияние изопротеренола - торможение активности Na+, К+, 2С1 - котранспорта - у больных аллергической бронхиальной астмой. Установлено активирующее влияние системных глюкокортикостероидов при бронхиальной астме на общий поток Na+ и К+ через мембраны эритроцитов, на активный транспорт, а таюке на Na+, К+, 2С1 - котранспорт и пассивный транспорт.

2. Для, больных бронхиальной астмой характерно уменьшение сорбционной емкости- гликокаликса эритроцитов для, альцианового синего, наиболее выраженное у больных неаллергической бронхиальной астмой: Показана взаимосвязь сорбционной емкости гликокаликса для альцианового синего с активным транспортом Na+ и К+, а таюке Na+, К+, 2С1 — котрансп ортом.

3. У больных бронхиальной астмой выявлены изменения катионного состава конденсата влаги выдыхаемого воздуха (Na+ и К+) и их взаимосвязь с содержанием Na+ и К+ в эритроцитах.

4. Выявлены изменения порога вкусовой чувствительности к хлориду натрия и хлориду калия у больных бронхиальной астмой и установлена взаимосвязь этого порога с активным транспортом Na+, К+ и Na+, К+, 2С1 -котранспортом.

Реализация и апробация.работы.

Результаты исследования внедрены в- практическую работу клиники госпитальной терапии имени акад. М.В. Черноруцкого СПбГМУ имени академика И.П. Павлова и отделения врача общей практики поликлиники №31

СПбГМУ имени академика И.П. Павлова.

Материалы диссертации докладывались на Межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых и студентов с международным участием «Санкт-Петербургские научные чтения-2002» (СПб, 2002); на третьей и четвертой Всероссийских конференциях с международным участием "Механизмы функционирования висцеральных систем" (СПб, 2003; СПб, 2005); на 13 Национальном конгрессе по болезням органов дыхания (СПб, 2003); на Научно-практических конференциях «VI, X и XI Булатовские чтения» (СПб, 2001; СПб, 2005; СПб, 2006); на Международном молодежном медицинском конгрессе «Санкт-Петербургские научные чтения» (СПб, 2005). По результатам седьмого и восьмого Санкт-Петербургского конкурса грантов для студентов, аспирантов и молодых специалистов, проводимого Министерством образования РФ, Российской Академией наук и Администрацией Санкт-Петербурга, конкурсные проекты «Разработка нового лечебного подхода при бронхиальной астме на основе особенностей катион - транспортной функции клеточных мембран» и «Механизмы терапевтического действия ингаляций фуросемида при бронхиальной астме» стали победителями конкурсов 2002 и 2003 годов (шифр грантов: М02-4.0К-17, M03-4.0K-15).

На 16 Национальном конгрессе Российского респираторного общества и втором Конгрессе Евроазиатского респираторного общества в конкурсе постерных докладов 2006 года доклад «Особенности обмена калия и натрия у больных бронхиальной астмой» занял призовое место.

В 2009 году работа отмечена дипломом академика М.В. Черноруцкого.

По материалам диссертации опубликовано 16 печатных работ. Из них 4 статьи, 3 из которых опубликованы в журналах, рекомендованных ВАК, 3 работы в зарубежной литературе.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Изменения транспорта одновалентных катионов в эритроцитах больных бронхиальной астмой"

ВЫВОДЫ

1. У больных бронхиальной астмой выявлены изменения содержания Na+ и К+ в эритроцитах, зависящие от варианта заболевания и его фазы. При аллергической бронхиальной астме в фазе обострения содержание этих ионов выше, чем у практически здоровых лиц, а при неаллергической бронхиальной астме содержание этих ионов ниже. Эти изменения связаны с особенностями состава конденсата влаги выдыхаемого воздуха в отношении содержания Na+ и К+ при аллергической бронхиальной астме (низкое содержание Na+ и К+) и при неаллергической бронхиальной астме (высокое содержание К*).

2. У больных аллергической бронхиальной астмой в фазе обострения наблюдается снижение активного транспорта Na+ и К+ и увеличение Na+, К+, 2СГ - котранспорта в их общем потоке через мембраны эритроцитов. Выявлена прямая зависимость транспортных систем и показателей функции внешнего дыхания (ОФВ1), с эозинофилией мокроты и обратная с эозинофилией крови.

3. У больных неаллергической бронхиальной астмой в фазе обострения * * выявлено увеличение активного транспорта Na+ и К+ и снижение Na+, К+, 2СГ -котранспорта. Выявлена обратная зависимость транспортных систем с показателем функции внешнего дыхания (ОФВ]) и степенью выраженности воспаления в мокроте по данным цитологического исследования. Установлено модулирующее (активирующее) влияние системных глюкокортикостероидов при бронхиальной астме на общий поток Na+ и К+ через мембраны эритроцитов, на активный транспорт, а также на Na+, К+, 2СГ - котранспорта, что определяет близкое к нормальному содержание Na+ и К+ в клетке.

4. Выявлено влияние р2 - адреноагониста изопротеренола на параметры Na+, К+, 2СГ - котранспорта в эритроцитах здоровых лиц и больных бронхиальной астмой, что указывает на сопряжение ко-транспортной функции с (3-адренергической системой клетки, при этом у больных аллергической бронхиальной астмой наблюдается парадоксальное влияние изопротеренола - торможение активности Na+, К+, 2СГ - котранспорта.

5. При бронхиальной астме выявлено уменьшение сорбционной емкости гликокаликса эритроцитов в отношении альцианового синего, наиболее выраженное у больных неаллергической бронхиальной астмой и у больных стероидзависимой бронхиальной астмой. При этом показано, что гликокаликс связан с активным транспортом Na+ и К+, а также Na+, К+, 2СГ - котранспортом.

6. Для больных бронхиальной астмой характерно повышение порога вкусовой чувствительности к хлориду натрия. Выявлена прямая зависимость Na+, К+, 2G1- - котранспорта и порога вкусовой чувствительности к хлориду натрия у больных неаллергической бронхиальной астмой. У больных бронхиальной астмой с высоким порогом вкусовой чувствительности к хлориду натрия имеет место снижение активного транспорта Na+ и К+, что может приводить к повышенному содержанию натрия в эритроцитах данных больных. При этом у больных аллергической бронхиальной астмой наблюдается снижение Na , К , 2СГ-котранспорта, а у больных неаллергической бронхиальной астмой увеличение параметров данной транспортной системы.

7. При исследовании вкусовой чувствительности к хлориду калия установлена связь между ее порогом и активным транспортом Na+ и К+ и активностью Na+, К+, 2СГ - котранспорта. При этом у больных неаллергической бронхиальной астмой выявлена обратная связь с обеими транспортными системами, а у больных с аллергической бронхиальной астмой - только прямая связь с активностью Na+, К+, 2СГ - котранспорта. У больных бронхиальной астмой имеет место увеличение порога вкусовой чувствительности к хлориду калия вплоть до отсутствия ощущения горького вкуса, что может отражать десенситизацию вкусовых рецепторов к хлориду калия.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Определение константы обмена Na+, К+, 2СГ - котранспорта как исходно, так и в условиях модуляции адренореактивной системы рекомендуется использовать для дифференциальной диагностики аллергического и неаллергического вариантов бронхиальной астмы.

2. Определение содержания Na и К в конденсате влаги выдыхаемого воздуха можно рекомендовать для дифференцировки аллергического и неаллергического вариантов бронхиальной астмы.

3. Исследование порога вкусовой чувствительности к хлориду натрия может быть использовано как один из методов при выявлении больных бронхиальной астмой с пониженной чувствительностью вкусовых рецепторов к хлориду натрия (фактор риска в развитии бронхиальной астмы), что определяет рекомендации в отношении малосолевой диеты.

 
 

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Супранович, Ирина Юрьевна

1. Авдонин П.В. Структура и сигнальные свойства сопряженных с G— белками рецепторных комплексов // Биол. мембраны. -2005-Т.22, №1-С.3-26.

2. Анаев Э.Х., Чучалин А.Г. Исследование конденсата выдыхаемого воздуха в пульмонологии (обзор зарубежной литературы) // Пульмонология. 2002. №2. - С.57 - 66.

3. Арцишевская Р.А., Самойлова К.А. Функциональные и структурные изменения поверхности эритроцитов человека после облучения УФ лучами разной длины волны // Цитология. 1983. Т.25, №12. - С.1387-1392.

4. Богданов Н.Б., Петрушанко И.Ю., Болдырев А.А. и др. Транспорт калия через мембрану гранулярных клеток мозжечка крыс: влияние парциального давления кислорода // Биол. мембраны. 2008. - Т. 25, №1. - С.25-33.

5. Болдырев А.А. Биологические мембраны и транспорт ионов. М.: Изд-во МГУ, 1985.-208 с.

6. Болдырев А.А. Na/K АТФаза - свойства и биологическая роль // Соросовский биол. журн. - 1998. - №4. - С.2 - 9.

7. Болдырев А.А. Новая гвардия приходит на смену старой (впечатления с XI международной конференции «Na+,K+-ATPa3a и родственные ей ионные насосы», 7-11 сентября 2005 г., Woods Hole, MS, USA) // Биол. мембраны. -2006. Т. 23, №1. - С.74-78.

8. Брюханов В.М., Зверев Я.Ф. Ингаляционное применение диуретиков -новое лечение бронхообструктивного синдрома // Клинич. фармакология и терапия. 2002. - Т.И, №5. - С.57-64.

9. Веренинов А.А., Юринская В.Е., Рубашкин А.А. Апоптозная дегидратация лимфоидных клеток: моделирование изменения баланса ионных потоков // Докл. РАН. 2006. - Т. 411, №6. - С. 824 - 828.

10. Веренинов А.А. Виноградов Т.А., Ивахинова И.С. и др. Применение пламенно-эмиссионного анализа для измерения потоков щелочных катионов через клеточную мембрану // Цитология. 1982. - Т.24, №1. - С.98 - 103.

11. Веренинов А.А., Марахова И.И. Транспорт ионов у клеток в культуре. -Л.: Наука, 1986.-292с.

12. Веренинов А.А. Транспорт ионов через клеточную мембрану: Анализ потоков. Л.: Наука, 1978. - 286с.

13. Воскобойник Т.В. Изменение электролитного состава и осмолярности бронхиального секрета у больных бронхиальной астмой: Автореф. дисс. . канд. мед. наук : 14.00.43 Л., 1989. - 18 с.

14. Гембицкая Т.Е., Желенина Л.А. Муковисцидоз // Новые Санкт-Петерб. врачеб. ведомости. 2006. -№1. - С.45-52.

15. Герасимов И.Г. О стехиометрии Na+/K+ -обмена // Биофизика. 2007. №1. - С. 69-74.

16. Гланц С. Медико-биологическая статистика: Пер. с англ. М.: Практика, 1999.-459с.

17. Голованов М.В. Биофизическая структура внешнего слоя-плазматической мембраны опухолевых клеток (гликокаликса) // Вестн. РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН-2006.- Т. 17. №1. С.4-6.

18. Гунина Л.М., Кабан А.П., Коробко В.Б. Роль изменений структурно-функционального состояния мембраны эритроцита в развитии анемии у больных раком желудка // Онкология. 2000. - Т.2, №4. - С. 247-249.

19. Гусев Г.П., Агалакова Н.И. Активация Na+/K+ насоса изопротеренолом, метилксантинами и иодоацетатом в эритроцитах лягушки Rana Temporaria // Журн. эвол. биохимии и физиологии. - 2000. -Т.36, №2. -С. 106-1 И.

20. Добрых В.А. Диспергационный транспорт и физические свойства бронхолегочного содержимого у больных хроническими неспецифическимизаболеваниями легких: Автореф. дис. . д-ра мед. наук: 14.00.43.-JI., 1989.-35с.

21. Дыгало Н.Н., Калинина Т.С., Носова А.В. и др. Регуляция экспрессии адренергических рецепторов стероидными гормонами // Рос. физиол. журн. им. И.М.Сеченова. 1998. - Т. 84, №10. - С.1115-1120.

22. Дулатова Н.Х., Клиорин А.И., Самойлов В.О. и др. О связи конституционального теста способности ощущать вкус фенилтиокарбамида -с состоянием системы циклических нуклеотидов // Физиология человека. -1989. - Т.15, №5. - С. 127-132.

23. Емельянов А.В., Петрова М.А., Лаврова О.В. и др. Нарушение минерального обмена на различных стадиях развития, бронхиальной астмы // Терапевт, арх. 1995. - Т.67, № 8. - С. 45-47.

24. Жихарев С.С. Роль нарушения некоторых субклеточных механизмов в патогенезе и клинике бронхиальной астмы и возможности их коррекции: Автореф. дисс. . д-ра мед. наук: 14.00.05. Л., 1982.-42 с.

25. Жихарев С.С., Минеев В.Н., Яблонская В.Н. и др. Атопическая бронхиальная астма, как патология мембранно-рецепторного комплекса // Веста. АМН СССР. 1989. - №2. - С.9-12.

26. Жихарев С.С., Минеев В.Н., Лукашевская Н.Н. Мембранорецепторные нарушения в патогенезе бронхиальной астмы // Терапевт, арх. 1991. - Т.63, №3. - С.81-85.

27. Зверев Я.Ф., Брюханов В.М. Фармакология и клиническое использование экстра ренального действия диуретиков -М.: Мед. книга; 2000256 с.

28. Илькович М.М., Суховская О.А., Илькович Ю.М. и др. Болезни органов дыхания в Санкт-Петербурге в 2007 г. (Анализ состояния и тенденции) // Болезни органов дыхания. 2008. - №1. - С.3-10.

29. Кабанов Д.С., Иванов А.Ю., Мелцер М: и,др. Влияние поверхностных белков мембраны эритроцитов человека на взаимодействие с липополисахаридом Escherichia coli 055:В5 // Биол. мембраны. 2008. - Т.25, №2. - С.117-121.

30. Капилевич Л.В., Носарев А.В., Ковалев И.В. и др. Внутриклеточные сигнальные системы в эпителий- и эндотелий-зависимых процессах расслабления гладких мышц // Успехи физиол. наук.-2001.-Т.32, № 2.-С.88-98.

31. Капилевич Л.В., Дьякова Е. Ю., Носарев А. В. и др. Спектральный анализ состава выдыхаемого воздуха в условиях формирования гиперреактивности воздухоносных путей // Пульмонология. 2007. - №6. -С.63-66.

32. Константинов Е.Н., Некрасова А.А., Гундаров И.А. и др. Определение порогов вкусовой чувствительности к поваренной соли в популяционном исследовании // Бюл. ВКНЦ. 1983. - №1. - С.30-34.

33. Крыленков В.А., Левин С.В., Самойлова К.А. и др. Прижизненное выявление внешних примембранных слоев (гликокаликса) клеток с помощью альцианового синего. I. Обоснование и описание метода // Цитология. 1979. -Т.21, №2. - С. 157-163.

34. Крылов Б.В., Дербенев А.В., Подзорова С.А. и др. Морфин уменьшает чувствительность к потенциалу медленных натриевых каналов // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 2002. - Т.85, №2. С.225-236.

35. Крутецкая З.И., Лонский А.В. Биофизика мембран. СПб.: Изд-во СПбГУ, 1994.-288 с.

36. Лопина О.Д. Взаимодействие каталической субъединицы Na+/K+ -АТФазы с клеточными белками и другими эндогенными регуляторами

37. Биохимия. 2001. -Т.66, №10. - С.1389-1400.

38. Мазуров В.И., Нови В.И., Богданов А.Н. Принципы диагностики и лечение поражений легких при некоторых ревматических заболеваниях в практике семейного врача // Рос. семейный врач. 1998. - №2. - С.15-18.

39. Мельницкая А.В., Крутецкая З.Е., Лебедев О.Е. Структурно-функциональная организация транспорта Na+ в эпителиальных системах. Г. Эпителиальные Na+ каналы //Цитология. 2006. - Т.48, №10. - С.817-840.

40. Минеев В.Н. Патогенетические и клинические аспекты нарушений мембрано-рецепторного комплекса эритроцитов при бронхиальной астме: Автореф. дис. .д-ра мед.наук: 14.00.43.-JI., 1993.-32 с.

41. Нестерович И.И. Нарушения апоптоза клеток-мишеней при различных вариантах бронхиальной,астмы: Дис . д-ра мед. наук: 14.00.43. СПб., 2006. -296с.

42. Орлов С.Н., Баранова И.А., Чучалин А.Г. Внутриклеточные системы сигнализации и патологии легких. Транспорт ионов > в клетках эпителия^ дыхательных-путей // Пульмонология: 1999. - №Г. - С.77-83.

43. Орлов С.Н., Баранова И.А., Покудин Н.И. и др. Транспорт одновалентных катионов и кальция в эритроцитах у больных бронхиальной астмой // Вестн. АМН СССР. 1991. -№3. - С.43- 49.

44. Орлов А.В:, Гембицкая Т.Е. Бронхиальный секрет: образование, выведение, изменения под влиянием лекарств //Аллергология 1999. - №4. С.37-42.

45. Пальцев М.А., Иванов А.А. Межклеточные и клеточно-матриксные взаимодействия в патологии // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 2007. -Т.93, №5. - С.485-493.

46. Петруняка В.В., Панюшкина Е.А., Северина Е.П. Активизация и ингибирование АТФазы мембран эритроцитов эндогенными Са2+ -зависимыми регуляторами . Са — зависимое действие уабаина на1. Са АТФазу

47. Биол. мембраны. 1990. - Т. 7, №4,- С.352-358.

48. Постнов Ю.В., Орлов С.Н. Первичная гипертензия как патологияклеточных мембран. -М.: Медицина, 1987. 192с.

49. Решетова Т.Г., Рыбкин А. И., Побединская Н. С. и др. Особенности минерального гомеостаза у детей с бронхиальной астмой // Микроэлементы в медицине. 2001. - Т.2, №4. - С.47^19.

50. Романов Р.А., Кабанова Н.В., Малкин C.JI. и др. Неселективные потенциал-зависимые каналы во вкусовых клетках типа II // Биол. мембраны. -2009. Т.26, №1. - С.64-74.

51. Семко Г.А. Структурно-функциональные изменения мембран и внешних примембранных слоев эритроцитов при гиперэпидермопоэзе // Укр. биохим. журн. 1998. - Т.70, №3. - С.113-118.

52. Сергеев П.В., Шимановский H.JI. Рецепторы: от теории к практике // Фармакология и токсикология. 1990. - Т.53, №2. - С.4-8.

53. Скрябин Г.А., Орлов С.Н. и др. Флоретин ингибирует вход Na+ и К+ в альвеоциты II типа через снижение внутриклеточного содержания АТФ // Пульмонология. 1996. - №3. - С.58-64.

54. Снопов Н.А., Торопова Ф.В., Самойлова К.А. и др. О связи калий-транспортной функции мембран эритроцитов человека со структурным состоянием гликокаликса // Цитология. 1990. - Т.32, №5. - С. 98-103.

55. Тора С., Хамет П., Орлов С.Н. Na/K насос и внутриклеточные моновалентные катионы: новый механизм сопряжения возбуждения с транскрипцией, участвующий в подавлении апоптоза // Молекулярная биология. 2003. -Т.37, №3. - С.371-381.

56. Трофимов В.И., Миронова Ж.А., Янчина Е.Д. и др. Фармакогенетические аспекты тяжелой астмы // Пульмонология. 2008. - №2. -С.111 -116.

57. Уразаев А.Х. Натрий-калий-хлорный котранспорт клеточной мембраны // Успехи физиол. наук. 1998. - Т.29, №2. - С. 12-37.

58. Фаллер Дж. М., Шилдс Д. Молекулярная биология клетки М., 2006. С. 211-217.

59. Федорова О.В., Багров А.Я. Эндогенные дигиталисподобные ингибиторы Na+/K+ АТФазы в патогенезе солечувствительной артериальной гипертензии // Артериальная гипертензия. - 2005. -Т.11, №2. - С. 132-137.

60. Федосеев Г.Б., Трофимов В.И. Бронхиальная астма. СПб.: Нордмедиздат, 2006. - 308 с.

61. Финкельштейн Б.Б., Шевченко Е.В., Малыгин A.M. Естественная цитотоксичность и морфофункциональное состояние мононуклеаров крови при нейродермите у детей // Вестн. дерматологии и венерологии. 1989. №8. -С.38-41.

62. Хомутовский О.А. Структура и функция примембранных слоев клеток. Киев: Наук, думка, 1984. - 154с.

63. Циркин В.И., Кононова Т.Н., Сизова Е.Н. и др. О возможной роли эндогенных модуляторов Р-адрено- и М-холинореактивности в патогенезе бронхиальной астмы // Пульмонология. 2007. - №5. - С.46-50.

64. Чучалин А.Г., Цой А.Н., Архипов В.В. и др. Бронхиальная астма в России: результаты национального исследования качества медицинской помощи больным бронхиальной астмой//Пульмонология.-2006 -№6.-С.94-102.

65. Чучалин А.Г. Закономерности обмена кальция у человека при различных патологических процессах // Терапевт, арх. 1987. - Т. 59, №1. -С.121-127.

66. Чучалин А.Г. Гиперэозинофилия при заболеваниях органов дыхания // Рус. мед. журн. -2002. -№23. С. 1047-1056.

67. Чучалин А.Г. Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы (пересмотр 2006г.). М.: Атмосфера, 2007. - 104 с.

68. Чучалин А.Г., Берова М.М. Функциональное состояние кальцийрегулирующей системы у больных бронхиальной астмой // Клинич.мед. 1989. - Т. 67, №8. - С.56-59.

69. Шкпярова Б.С., Ватутин В.А., Прибылова Н.Н. и др. Опыт использования ингаляции фуросемидом в лечении больных бронхиальной астмой и хроническим бронхитом // Человек и лекарство. IV Рос. Национальный конгресс: Тез. докл. М., 1997. - С. 146.

70. Шмидт Е.И., Тец В.В. Роль бактерий в аллергии // Аллергология. -СПб., 2001. Т. 1. Общая аллергология. - С.51-78.

71. Яковлева Н.В. Вирусоиндуцированная аллергия // Аллергология. -СПб., 2001. Т.1. Общая аллергология. - С.78-98.

72. Abaffy Т., Trubey K.R., Chaudhari N. Adenylyl cyclase expression and4 modulation of cAMP in rat taste cells // Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2003. -Vol.284, №6. - C. 1420-1428.

73. Adler P.N., Liu J., Charlton J. Cell size and the morphogenesis of wing hairs in Drosophila // Genesis. 2000. - Vol.28, №2. - P.82-91.

74. Adragna N., Zhang J., Di Fulvio M. et al. KCL cotransport regulation and protein kinase G in cultured vascular smooth muscle cells // J. Membr. Biol. 2002. -Vol. 187, №2. - P.157-165.

75. Adragna N.C., Fulvio M.D., Lauf P.K. Regulation of K-Cl cotransport: from function to genes // J. Membr. Biol. 2004. - Vol.201, № 3. p.109-137.

76. Agrawal A., Agrawal K.P., Ram A. et al. Basis of rise in intracellular sodium in airway hyperresponsiveness and asthma // Lung. -2005. Vol. 183, № 6. -P. 375-387.

77. Aizman O., Uhlen P., Lai M. et al. Ouabain, a steroid hormone that signals with slow calcium oscillations //Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 2001. - Vol.98, №23. - P.13420-13424.

78. Akar F., Jiang G., Paul R.J. Contractile regulation of the Na+,K+,2CP cotransporter in vascular smooth muscle //Am. J. Physiol. Cell. Physiol. 2001. -Vol. 281, №2.-P. 579-584.

79. Al-Bazzar F. J., Kesley J. G., Kaage W. D. Substance P stimulation of chloride secretion by canine tracheal mucosa // Am. Rev. Respir. Dis. 1985.1. Vol.131, № l.-P. 86-89.

80. Alton E., Kingsleigh-Smith D., Munkonge F. et al. Asthma prophylaxis agents alter the function of an airway epithelial chloride channel // Am. J. Respir. Cel.l Mol. Biol. 1996. - Vol.14, №4. - P.380-387.

81. Arnon A., Hamlyn J.M., Blaustein M.P. Ouabain augments Ca2+ transients in arterial smooth muscle without raising cytosolic Na+ // Amer. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2000. - Vol.279, № 2. - P.H679-H691.

82. Arrebola F., Fernandez-Segura E., Campos A. et al. Changes in intracellular electrolyte concentration during apoptosis induced by UV irradiation of human myeloblasts cells // Amer. J. Physiol. Cell. Physiol. 2006. - Vol.290. -P.C638-C649.

83. Barg W., Malolepszy J. Aktywnosc adenozynotrojfosfatazy sodowo-potasowej i wspoltransportu jonow sodu, potasu i chloru u chorych na astme oskrzelowa i przewlekla obturacyjna chorobe pluc // Pneumonol. Alergol. Pol. -1994. Vol.62, №7-8. - P.381-385.

84. Bartoshuk L. Influence of chemoreception and psychologic state on food selection // Int. J. Obes. 1980. - Vol.4, №4. - P.351-355.

85. Blankenburg Т., Schaedlich S., Schuette W. Exhaled breath condensate as a sensitive diagnostic aid in asthma bronchiale // Eur. Respir. J. 2000. - Vol.16 (suppl. 31). -P.A1907.

86. Blanko G., Mercer R.W. Isozymes of the Na-K-ATPase: heterogeneity in structure, diversity in function //Am. J. Physiol. 1998. - Vol. 275, №5, Pt.2.1. P.F633-F655.

87. Bogdanova A., Grenacher В., Nikinmaa M. et al. Hypoxic responses of the Na/K ATPase in trout hepatocyte primary cultures // J. Exp. Biol. 2005. - Vol.208, Pt. 10.-P. 1793-1803.

88. Bogdanova A., Petrushanko I., Boldyrev A. et al. Oxygen- and redox-induced regulation of the Na/K ATPase // Curr. Enzyme Inhibition. 2006. - Vol.2, №1. - P.37-59.

89. Bogdanova A., Nikinmaa M. Reactive oxygen species regulate oxygen-sensitive potassium flux in rainbow trout erythrocytes //J. Gen. Physiol. 2001. -Vol.117, №2. -P.181-190.

90. Bossios A., Papadopoulos N.G. Viruses and asthma exacerbations // Breathe. 2006. - Vol.3, №1. - P.50-58.

91. Boucher R.C. Human airway ion transport. Part 1 // Am. J. Resir. Crit. Care Med. 1994. - Vol.150, №1. - P.271-281.

92. Boucher R.C. Human airway ion transport. Part 2 // Am. J. Resir. Crit. Care Med. 1994. -Vol.150, №2. - P.581-593.

93. Bradding P. Mast cell ion channels // Chem. Immunol. Allergy. 2005. -Vol.87.-P.163-178.

94. Britton Y., Pavord I., Richards K. Dietary sodium intake and the risk of airway hyperreactivity in a random adult population // Thorax. 1994. - Vol.49, №9. -P. 581-593.

95. Buck L.T., Hochaclika P.W. Anoxic suppression of Na-K-ATPase and constant membrane potential in hepatocytes: support for channel arrest //Am. J. Physiol. 1993,- Vol.265, №5, Pt.2. -P.R1020-1025.

96. Burdyga Т., Wray S. On the mechanisms whereby temperature affects excitation-contraction coupling in smooth muscle // J. Gen. Physiol. 2002. -Vol.119 №1. -P.93-104.

97. Burney P.G.J., Neid J.E., Twart C.H.C. et al. Effect of changing dietary sodium on the airway response to histamine // Thorax. -1989.-Vol.44, №1.-P.36-41.

98. Burney P.G.J. A diet rich in sodium may potentiate asthma:epidemiological evidence for a new hypothesis // Chest. 1987. - Vol. 92, Suppl. -P.143-186.

99. Butt A.N, Tennant B.P., Gillingwater S.D. et al. Binding ofouabain and human ouabainlike substance to different Na+, K+ ATPase isoforms // Hypertens. Res. - 2000. - Suppl.23. - P.S45-S50.

100. Canessa C.M., Bize J., Adranga N. et al. Na countertransport and cotransport in human red cells: function, dysfunction and genes in essential hypertension // Clin. Exp. Hypertension. 1981. - Vol.5, №4. - P.783-795.

101. Carey O.J., Locke C., Cookson Y.B. Effect of alteration of dietary sodium on the severity of asthma in men // Thorax. 1993. - Vol. 48, №7. - P.714-718.

102. Cass A., Dalmark M. Chloride transport by self-exchange and by KC1 salt diffusion in gramicidin-treated red blood cells // Acta. Physiol. Scand. 1979. -Vol.107, №3.-P.193-203.

103. Chandrashekar J., Mueller K.L., Hoon M.A. et al. T2Rs Function as Bitter Taste Receptors // Cell. 2000. - Vol.100, № 6. - P.703-711.

104. Chao A.C., Widdicombe J.H., Verkman A.S. Chloride conductive and cotransport mechanisms in cultures of canine tracheal epithelial cells measured by an entrapped fluorescent indicator // J. Membr. Biol. 1990. Vol.113, №3. - P.193-202.

105. Chasis J.A., Mohandas N., Shohet S.B. Erytrocytes membrane rigidity induced by glycophorin A-ligand interaction. Evidence for a ligand-induced association between glycophorin A and skeletal proteins // J. Clin. Invest. 1985. -Vol.75. № 6.-P.1919-1926.

106. Chasis K.A., Shohet S.B. Red cell biochemical anatomy and membrane properties // Ann. Rev. Physiol. 1987. - Vol.49. - P.237-248.

107. Chhabra S.K., Khanduja A., Jain D. Decreased sodium-potassium and calcium adenosine triphosphatase activity in asthma: modulation by inhaled and oralcorticosteroids // Indian J. Chest Dis. Allied Sci. 1999. - Vol.41, №1. - P.15-26.

108. Chipperfield A., Harper A. Chloride in smooth muscle // Prog. Biophys. Mol. Biol. 2001. - Vol.74, №3-5. - P. 175-221.

109. Clausen Т., Flatman J.A. p2 adrenoceptors mediate the stimulating effect of adrenaline on active electrogenic Na-K transport in rat soleus muscle // Br. J. Pharmocol. - 1980. -Vol.68, №4. - P.749-755.

110. Clausen T. Clinical and therapeutic significance of the Na+/K+- pump // Clinical Sci. 1998. - Vol.95, №1. -P.3-17.

111. Crambert G., Hasler U., Beggah A.T. et al. Transport and pharmacological properties of nine different human Na+/K+ ATPase isozymes // J. Biol.' Chem.2000.- Vol.275, №3.-P. 1976-1986.

112. Dada L.A., Chandel'N.S., Ridge K.M. et al. Hypoxia-induced endocytosis of Na,K-ATPase in alveolar epithelial cells is mediated by mitochondrial reactive oxygen species and PKC-zeta // J. Clin. Invest. -2003. -Vol.111, №7.-P. 1057-1064.

113. Dagher G., Brossard M., Feray J.C. et al. Modulation, of erythrocyte4Na transport pathway(s) by excess Na intake // Life Sci. -1985. -Vol.37, №3.-P.243-53.

114. Demissie K., Ernst P. Is increased dietary salt intake a cause of increased airway responsiveness or a marker of an unhealthy life style? // Respir. Med». 1994. - Vol.88, №2.-P.79-81.

115. Dobrota D., Matejovicova M., Kurella E.G et al. Na/K-ATPase under Oxidative Stress: Molecular Mechanisms of Injury // Cell. Mol. Neurobiol. 1999. -Vol.19, №1.-P.141-149.

116. Doris P.A., Bogrov A.Y. Endogenous sodium pump inhibitors and bloods pressure regulation: an update on recent progress // Proc. Soc. Exp. Biol. Med: -1998. Vol.218, № 3. - P.156-167.

117. Duhm J., Gobel B.O. Sodium-lithium exchange and sodium-potasiumcotransport in human erythrocytes I I Hypertension. -1982. Vol.4, №4. - P.477-482.

118. Eaton D.C., Chen J., Ramosevac S. et al: Regulation of Na+ Channels in Lung Alveolar Type II Epithelial Cells // Proc. Am. Thorac. Soc. 2004. Vol.1, № 1. -P.10-16.

119. Esteves M.B., Marques-Santos L.F., Affonso-Mitidieri O.R. et al. Ouabain' exacerbates activation-induced cell death in human peripheral blood lymphocytes // Ann. Acad. Bras. Cienc. 2005. - Vol.77, № 2. -P.281-292.

120. Ewart H. S., Klip A. Fahy J.V. Remodeling- of the airway epithelium in asthma //Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2001. -Vol. 164, №10, Pt.2. -P.S46-S51.

121. Gametchu В., Watson C.S. Correlation of membrane glucocorticoid receptor levels with glucocorticoid-induced apoptotic competence using mutant leukemic and! lymphoma cells lines // J. Cell. Biochem. 2002. - Vol.87, №2. -P.133-146.

122. Garrahan P.J., Glynn I.M. The incorporation of inorganic phosphate into adenosine triphosphate by reversal of the sodium pump // J. Physiol. 1967. -Vol.192, № 1. -P.237-256,

123. Gentile D.A., Skoner D.P. The relationship between airway hyperreactivity (AHR) and sodium, potassium adenosine triphosphatase (Na+, K+ ATPase) enzyme inhibition // J. Allergy Clin. Immunol. 1997. - Vol.99, №3. - P.367-373.

124. Gergion G.N., Morrison L.E., Cherry R.J. Digital fluorescence imaging of fusion of influenza virus with erythrocytes // FEBS Lett. 1989. - Vol.250, №2. -P.487-492.

125. Gilbert M., Knox S. Influence of Bcl-2 overexpression on Na+, K+ ATPase pump activity: correlation with radiation-induced programmed cell death // J. Cell. Physiol. 1997. - Vol.171, № 3. - P.299-304.

126. Gilbertson T.A., Damak S., Margolskee R.F. The molecular physiology of taste transduction // Curr. Opin. Neurobiol. 2000. - Vol.10, N4. - P.519-27.

127. Gilliland F.D., Berhane K.T., Li Y.F. et al. Dietary magnesium, potassium, sodium, and children's lung function // Am. J. Epidemiol. 2002. -Vol.155, №2. -P.125-131.

128. Global strategy for asthma management and prevention, Global Initiative for Asthma (GINA) 2006 / National Institutes of Health, National Heart, Lung and Blood Institute. Bethesda, Maryland., 2006. - xiii, 110 p.

129. Glynn I.M. The Na+, К--transporting adenosine triphosphate // Theenzymes of biological membranes / Ed. A.N.Mortonosi. New York: London: Plenum Press. 1985. - Vol.3. - P.35-114.

130. Green S.A., Cole G., Jacinto M. et al. A polymorphism of the human |32-adrenergetic receptor within the fourth transmembrane domain alters ligand binding and functional properties of the receptor // J. Biol. Chem. 1993. - Vol.268, №31. -P.23116-23121.

131. Haas M., McBrayer D.G. Na-K-Cl cotransport in nystatin-treated tracheal cell: regulation by isoproterenol, apical UTP, and Cl.i // Am. Physiol. Society . -1994. Vol. 266, №5, Pt.l. - P. 1440-1451.

132. Haas, M., Forbush, B. The Na-K-Cl cotransporter of secretory epithelia // Annu. Rev. Physiol. 2000. - Vol. 62. - P.515-534.

133. Haas M. The Na-K-Cl cotransporters // Am. J. Physiol. 1994. - Vol.267, №4, Pt.l. - P.869-885.

134. Haas M., Johnson L.G., Boucher R.C Regulation of Na-K-Cl cotransport in cultured canine airway epithelia: a 3H.bumetanide binding study // Am. J. Physiol. -1990. Vol.259, №4, Pt.l. - P.C557-C569.

135. Henry C.B., Duling B.R. TNF-alpha increases entry of macromolecules into luminal endothelial cell glycocalyx // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. -2000. -Vol.279, №6. P.H2815-P2823.

136. Herness M.S., Gilbertson T.A. Cellular mechanisms of taste transduction //Annu. Rev. Physiol. 1999. - Vol.61. -P.873-900.

137. Inoue K., Ogonuki N., Yamamoto Y. et al. Improved postimplantationdevelopment of rabbit nuclear transfer embryos by activation with inositol 1,4,5-trisphosphate // Cloning Stem. Cells. 2002. - Vol.4, №4. - P.311-317.

138. Jain D., Raj H.G., Gangal S.V. et al. Relationship between intracellular calcium and airway reactivity in guinea pigs // Jpn. J. Physiol. 2001. - Vol.51, №5. — P.577—583.

139. Jorgensen P.L., Hakansson K.O., Karlish S.J. Structure and mechanism of Na+/K+ ATPase: functional sites and their interactions // Annu. Rev. Physiol. -2003. - Vol.65. -P.817-849.

140. Kaji D.M., Thakkar U., Khan T. Glucocorticoid-induced alteration in the sodium potassium pump of the human erythrocyte // J. Clin. Invest. 1981. - Vol.68, №2. - P.422-^430.

141. Kaupp U.B., Seifert R. Cyclic nucleotide-gated ion channels // Physiol. Rev. 2002. - Vol.82, №3. - P.769-824.

142. Keal E., Reid L. Der Bronchialschleim seine Bildung, Zussmmenseit-zung und physicalischem Eigenschrften // Internist. -1971 -Bd.12, №10.-S .416-^424.

143. Khan A.I., Drew C., Ball S.E. et al. Oxygen dependence of K+-C1-cotransport in human red cell ghosts and sickle cells // Bioelectrochemistry. 2004. -Vol.62, №2.-P.141-146.

144. Kinnamon S.C., Margolskee R. Mechanisms of taste transduction // Curr. Opin. Neurobiol. 1996. - Vol.6, №4. - P.506-513.

145. Kitamura K., Yamazaki J. Chloride channels and their functional roles in smooth muscle tone in the vasculature // Jpn. J. Pharmacol. 2001. - Vol.85, №4. -P.351-357.

146. Kuriyama H., Kitamura K., Itoh T. et al. Physiological features of visceral smooth muscle cells, with special reference to receptors and ion // Physiol. Rev. -1998. Vol. 78, № 3. -P.811-920.

147. Kurella E.G., Tyulina O.V., Boldyrev A.A. Oxidative Resistance of Na/K-ATPase //Cell. Mol. Neurobiol. 1999. - Vol. 19, №1. - P. 133-140.

148. Lamb F., Kooy N., Lewis S. Role of CI- channels in alpha-adrenoceptor-mediated vasoconstriction in the anesthetized rat // Eur. J. Pharmacol. (Neth). 2000.-Vol.401, №3. P. 403^12.

149. Lauf P., AdragnaN. K-Cl cotransport: properties and molecular mechanism // Cell. Physiol. Biochem. (Switzerland). 2000. - Vol.10, №5-6. -P.341-354.

150. Liedtke C.M. Alpha-adrenergic regulation of Na-Cl cotransport in human airway epithelium // Am. J. Physiol. 1989. - Vol.257, №2, Pt: 1. -P.L125-L129.

151. Liedtke C.M. Calcium and alpha-adrenergic regulation of Na-C1(K) cotransport in rabbit tracheal epithelial cells //Am. J. Physiol. -1990. Vol. 259, №2, Pt.l. -P.L66-L72.

152. Liedtke C.M. Differential regulation of Na-K-Cl Cotransport: Electronic resource., http://www.researchgrantdatabase.eom/g/2R01HL058598-Q5/Differential-Regulation-of-Na-K-Cl-Cotransport. (дата обращения 27.01.2007)

153. Lindemann В. Receptor and transduction in taste // Nature. 2001. -Vol.413, № 6852. - P.219-225.

154. Lindemann B. Taste reception // Physiol. Rev. 1996. - Vol.76. №3. -P.719-766.

155. Lipworth B.J., Hall I.P., Tan S. et al. Effects of genetic polymorphism on ex vivo and in vivo function of beta 2-adrenoceptors in asthmatic patients // Chest. -1999,-Vol.115, №2.-P.324-341.

156. Liu X.S., Xu Y.J. Potassium channels in airway smooth muscle and airway hyperreactivity in asthma //Chin: Med. J. (Engl). -2005. -Vol.118, №7. -P.574-580.

157. Manolis A. The diagnostic potencial of breath analysis // Clin. Chem. -1983. Vol.29, № 1.-P.5-15.

158. Max M., Shanker Y.G., Huang L. et al. Taslr3, encoding a new candidate taste receptor, is allelic to the sweet responsiveness locus Sac // Nature Gen. 2001. - Vol.28, №l.-P.58-63.

159. Middleton E. Airway smooth muscle, asthma, and calcium ion //J. Allergy Clin. Immunol. 1984. - Vol. 73, № 5, Pt. 2. - P.643-650.

160. Mobasheri A., Avila J., Cozar-Castellano I. et al. Na+,K+-ATPase isozyme diversity; comparative biochemistry and physiological implications of novel functional interactions // Biosci. Reports. 2000. - Vol.20, №2. - P.51-91.

161. Murphy S.C., Samuel B.U., Harrison T. et al. Erythrocyte detergent-resistant membrane proteins: their characterization and selective uptake during malarial infection //Blood. 2004. - Vol.103, №5. - P.1920-1928.

162. Nair A., Mungantiwar A., Kamal K. et al. Antiallergic potential of furosemide // Indian J. Exp. Biol. 1997. - Vol.35, №5. - P.466-469.

163. Nikinmaa M., Bogdanova A., Lecklin T. Oxygen dependency of the adrenergic Na/H exchange in rainbow trout erythrocytes is diminished by a hydroxyl radical scavenger //Acta Physiol. Scand. 2003. -Vol.178, №2. - P.149-154.

164. O'Neill W.C. Physiological significance of volume-regulatory transporters // Am. J. Physiol. Cell. Physiol. 1999. Vol.276, №45. - P.C995-C1011.

165. Pavord I.D., Dutt S., Carey O.Y. et al. Red blood cell sodium transport in asthma // Thorax. 1990. - Vol.45, №.10. - P.799.

166. Payne J.A., Forbush B. Molecular characterization of the epithelial Na-K-C1 cotransporter isoforms // Cur. Opin. Cell Biol. 1995. - Vol.7, №4. - P.493-503.

167. Pendino J., Nannini L., Chapman K. et al. Effect of inhaled furosemide in acute asthma// J. Asthma. -1998. -Vol.35, №.1. -P.89-93.

168. Petrushanko I., Bogdanov N., Bulygina E. et al. Na-K-ATPase in rat cerebellar granule cells is redox sensitive //Am. J. Physiol. Regul. Integr. Сотр. Physiol. 2006. - Vol.290, №4. - P.R916-R925.

169. Pistelli R., Forastiere F., Corbo G.M. et al. Respiratory symptoms and bronchial responsiveness are related to dietary salt intake and urinary potassium excretion in male children // Eur. Respir. J. 1993. - Vol.6, № 4. - P.517-522.

170. Platts S.H., Linden J., Duling B.R. Rapid modification of the glycocalyx caused by ischemia-reperfiision is inhibited by adenosine A2A receptor activation //Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2003. - Vol.284, №6. - P. H2360-H2367.

171. Poole J. Red cell antigens on band 3 and glycophorin A // Blood Rev. -2000,-Vol.14, №1,- P.31-43.

172. Redrup A.C., Pearce F.L. Effect of diuretics on rat peritoneal and human lung mast cells // Agents Actions. 1994. - V.41, Spec. No. - P. C47-C48.

173. Rhoden K.J., Douglas J.S. Evidence of Na-K-Cl cotransport in airway smooth musle // Am. J. Physiol. 1995. - Vol.268, № 4, Pt.l. -P.L551-L557.

174. Richard С. B. Relationship of Airway Epithelial Ion Transport to Chronic Bronchitis //Am. Thor. Soc. 2004. - Vol.1, № 1. - P.66-70.

175. Robinson T.W., Kim K.J., Air-interface cultures of guinea pig airway epithelial cells: effects of active sodium and chloride transport inhibitors on bioelectric properties // Exp. Lung. Res. 1994. - Vol. 20, №2. - P.101-117.

176. Rdssler P., Kroner C., Freitag J. e al. Identification of a phospholipase С beta subtype in rat taste cells // Eur. J. Cell. Biol. 1998. - Vol.77, №3. - P.253-261.

177. Runnels L.W., Yue L., Clapham D.E. The TRPM7 channel is inactivated by P1P(2) hydrolysis //Nat. Cell. Biol. 2002. - Vol.4, №5. - P.329-336.

178. Russell J.M. Sodium-Potassium-Chloride Cotransport// J. Physiol. Rev. -2000. Vol.80, №.1. -P.211-276.

179. Satoh M., Yamaya M., Shimura S. et al. Isoproterenol augments ATP-evoked "CI- secretion across canine tracheal epithelium // Respir Physiol. 1995. -Vol.99, №1.-P.13-18.

180. Scheideler L., Manke H.G., Schwulera U. et al. Detection of nonvolatile macromolecules in breath. A possible diagnostic tool? //Am. Rev. Respir. Dis. -1993. -Vol.148 №3. -P.778-784.

181. Schiener-Boris G. The sodium pump. Its molecular proporties and mechanics of ion transport // Eur. J. Biochem.-2002.-Vol.269, № 10. P.2424-2433.

182. Schiener-Boris G., Schoner W. A fresh facet for ouabain action // Nat. Med. 2001. Vol.7, № 12. -P.1288-1289.

183. Schoner W. Endogenuos cardiac glycosides, a new class of steroid hormones // Eur. J. Biochem. 2002. - Vol.269, № 10. - P.2440-2448.

184. Shabarek F., Xu F., Oelberg D.G. Sodium chloride cotransport at the basolateral membrane of type II pneumocytes // Biochem. Med. Metab. Biol. 1994.- Vol.52, №l.-P.76-83.

185. Skoner D.P., Gentile D., Evans R.W. A circulating inhibitor of the platelet Na К adenosine triphosphatase (ATPase) enzyme in allergy // J.Allergy Clin. Immunol. 1991. - Vol.87, №2. - P.476^186.

186. Skou J.C. The influence of some cations on an adenosine triphosphatase from peripherical nerves // Biochim. Biophys. Acta. -1957.-Vol.23, №2.-P.394^401.

187. Smith J.B., Wade M.B., Fineberg N.S. et al. Sodium pump parameters of red blood cells in men, women and women taking oral contraceptives // Clin. Exp. Hypertension. Part A. Theory and Practice. 1986. - V0I.A8, №7. - P.l 189-1209.

188. Smith J.B., Wade M.B., Fineberg N.S. et al. Influence of race, sex and blood pressure on erythrocyte sodium transport in human // Hypertension. 1988. -Vol.12, №3.-P.251-258.

189. Songu-Mize E., Bealer S.L., Hassid A. Centrally administered ANF promotes appearance of a circulating sodium pump inhibitor // Amer. J. Physiol. -1990. Vol.258, №6, Pt.2. - P. H1655-H1659.

190. Sonhrada M., Sonhrada J.F. Sensitization induced sodium influx in airway smooth muscle cells //Am. Rev. Respir. Dis. - 1985. - Vol.131, №4, Pt 2. - A.356.

191. Stoesser A.V., Cook M.M. Possible relation between electrolyte balance and bronchial asthma // Am. J. Dis. Child. 1938. - Vol.56. - 943PP.

192. Sweadner K.J. Na,K-ATPase and its isoforms // Neuroglia. New. York;1. Oxford, 1995. P.259-272.

193. Szczeklik A. Mechanism of aspirin-induced asthma // Eucosanoids, Aspirin and Asthma / Ed. A. Szczeklik et al. New York, 1999. - P.299-315.

194. Sznaider J.I., Jain M. Effects of Hypoxia on the Alveolar Epithelium // Proc. Amer. Thor. Soc. 2005. - Vol.2, № 3. -P.202-205.

195. Therien A.G., Blostein R. Mechanisms of sodium pump regulation // Am. J. Physiol. 2000. -Vol.279, №3. - P.541-566.

196. Vachier I., Le Doucen C., Loubatiere J. et al. Imaging reactive oxygen species in asthma // J. Biolumin. Chemilumin. 1994. - Vol.9, №3. - P.171-175.

197. Venkatachalam К., Ma H.T., FordD.L. et al. Expression of functional receptor-coupled TRPC3 channels in DT40 triple receptor InsP3 knockout cells // J. Biol. Chem. 2001. - Vol.276, №36. -P.33980-33985.

198. Voilley N., Galibert A., Bassilana F. et al. The amiloride-sensitive Na+ channel: from primary structure to function // Сотр. Biochem. Physiol. A. Physiol. -1997. Vol.118, №2. - P. 193-200.

199. Wasserman S.I., Barret K.E., Huott P.A. et al. Immune-related intestinal CI- secretion. I. Effect of istamine on the T84 cell line // Amer. J. Physiol. 1998. -Vol.254, №1. -P. C53-C62.

200. Weder A.B., Torretti B.A., Julius. Radical differences in erythrocyte cation transport // Hypertension. 1984. - Volt6, № Г. - P.l 15-123.

201. Weder A.B. Membrane sodium transport and salt sensitivity of blood pressure // Hypertension. 1991. - Vol.17, №1. - P. 174-180.

202. Wei J.Y., Roy D.S., Leconte L. et al. Molecular and pharmacological analysis of cyclic nucleotide-gated channel function in the central nervous system // Prog. Neurobiol. 1998. - Vol.'56, №1. - P.37-64.

203. Xie Z., Askari A. Na+/K+ ATPase as a signal transducer // Eur. J. Biochem. - 2002. -Vol.269, №10. - P.2434-2439.

204. Yager D., Komm B.D., Drazen J.M. Airway wall liquid. Source and role as an amplifier of bronchoconstriction // Chest.-1995.-Vol.107, №3, Suppl.-P. 105-110.

205. Yamazaki J. Chloride channels and their functional roles in smooth muscle tone in the vasculature // Jpn. J. Pharmacol. 2001. - Vol.85, № 4. - P. 351-357.

206. Yan W., Sunavala G., Rosenzweig S. et al. Bitter taste transduced by PLC-beta(2)-dependent rise in IP(3) and alpha-gustducin-dependent fall in cyclic nucleotides //Am. J. Physiol. Cell. Physiol. 2001. - Vol.280, №4. - P.C742-C751.

207. Yu S.P. Regulation and critical role of potassium homeostasis in apoptosis // Prog. Neurobiol. 2003. - Vol.70, № 4. - P.363-386.

208. Zhang Y., Hoon M.A., Chandrashekar J. et al. Coding of sweet, bitter, and umami tastes: different receptor cells sharing similar signaling pathways // Cell. -2003. Vol.112, №3. -P.293-301.

209. Zoltan Т., Gyurkovits K. Plasma Na+, K+ concentration in children with chronic bronchitis and mucoviscidosis // Orv. Hetil. 1986. - Vol.127, №41. -P.2497-2499.