Автореферат и диссертация по медицине (14.00.17) на тему:Исследование роли окситоцина в регуляции системы гемостаза

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОЛ1ИТЕТ СССР ПО НАРОДНОМУ ОБРАЗОВАНИЮ

ОРДЕНА ДРУЖБЫ НАРОДОВ ✓УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ имени ПАТРИСА ЛУМУМБЫ

На правах рукописи

БУРОВА Марина Борисовна

ИССЛЕДОВАНИЕ РОЛИ ОКСИТОЦИНА В РЕГУЛЯЦИИ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА

(14.00.17 — нормальная физиология)

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва —

1990

Работа выполнена в Саратовском ордена Трудового Красного Знамени государственном медицинском институте, г. Саратов.

Научный руководитель —

доктор медицинских наук, профессор В. Ф. Киричук. Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор С. А. Чесиокова, заслуженный деятель науки РСФСР, доктор медицинских наук, профессор В. П. Балуда.

Ведущая организация — Государственный ордена Ленина институт физической культуры, г. Москва.

Защита диссертации состоится «.^1990 г. в. ^¿^часов на заседании специализированного совета К 053.22.13 в Университете дружбы народов имени Пат-риса Лумумбы по адресу: 117198, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 8, медицинский факультет.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Университета дружбы народов имени Патриса Лумумбы по адресу: 117198, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 6.

Автореферат разослан «....»........ 1990 г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат медицинских наук, доцент

Т. М. СОБОЛЕВА

ОБЩ ХАРАКТЕРИСТИКА РАКШ

• В настоящее время широко признано существование, нараду с гладиаторами и гормонами, нового класса биологичвоких регуляторов, назкваемнзг регулятерняш пепти- ' . даш. К ним относят биологически активные сседянеияя аэптвд-кой природы, оказнвакщяе многообразные влиялпя на функции различных ^пзиологичрских систем организма. Одним из прэдота-вптолэй данного семейства биорегуляторов является пшоталаии-ческий нейропептяд окситсцяя ( Атаарин, 1982 );

В поелгдщяв года наряду в давно опзхсщшш, гйлаеоу>ч»<з«®»1!1. яляянггы окейгодина на гладкую глуейулатуру матки и налочяой железа появились данине о раке» неязЕэзтннх эффектах втого пептида, позволяпдиэ рассматривать его как один ич физиологических регуляторов СОСТОЯНИЯ СОРД9ЧН0~СОСУДЕСТОЙ системы, осмотического и водного гомаостЕза, углеводного и хврового обмела, иммунной системы ( Рмтвг н соавт», 1933^ Абвлъсоа, 1985; Бахарвв, 1989 ). Подобно окситоцину, в последнее время обнаружен« ног,кэ регуляторане »|фвктв и другого гяпоталаш-чвекоге» иойропоптлда - вазопрессина. Помимо прэссорного в ан-гадяуротичаского влияний, вазопросенк способствуй* консолидация памятк, принимает участка в рзх-уллцип основных звеньев метаболизма, играет значительнуи роль в процессах терморегуляции, оказьшает шрикешюв воздействие на систему гемостаза, вызывая агрегацию тромбоцитов, выделение я» оосудяотвй отопил в цюзлгек ¿[акгорд 411: К, фактора фок Виллебрацца и тка-негаго ьктаватра плазминегеяа ( Дшарва, Кругляк», 1983 ; Яалсуеяич и соавт., 1986,- СыА ег! ее. ( 1974. м?*«« ( 1982} Сггесг г* *е. , 1986 );

Но, несмотря на значительную структурную ттологко ексято-цина и ваяопрессяна, етличшпюсся лишь видом аминокислот« в положении 8, а также локализацию ^еста синтеза вбевх пептидов в одних в тех яо морфологических структурах мозга, физиологические з?<?'вктн, еказываемке окентрцином иа гемостаз, остаются практически неизученными. В те же время применение оксктсотла в качество утеротоническего средства сопровождается увеличение« кровопотери и радах I Персиашшов л соавт., 1970; Бот-вин, 1976 ), а в 4,2 - 23,2% случае* развитием кровотечений у реженяц ( Мороя, 1965; Струкев, 1969; Регата, 1974; СоАе/г, £<?<?<?о-г с/ , 1974 )„ Причины развития геморрагических ослеж-нений у рожениц при введении им екоитецина не совсем ясны »

связи о всеутствием данных с влияния пептида иа состсяниа сис _ темы гемостаза в фазиологичеоких условиях.

В связи о яялмсвянш представляется перспективным подход, суть которого 8аклнчазгоя а изучении эффектев, вказываемых окситэцкном на состояние системы гевоотаза самок белых крыв В фИЗИЗЛСГЯЧЙСКЕХ условиях.

к зодк^йс^дедайфйд. Целью работы явилось иссладе-вани» эффектов и маханьзмов действия регуляторноге пвтида ок-• оитоцкка на сост&якпе скот вин геуэстаза интактяых животных,"

В соответствии о целью работы бшш определена задачи экспериментального исследования :

1. Научить изменения агрегационкой функция тромбоцитов, в* зываемые океигоцином а условиях ^¿'¿ге и ¿л и/и».

2. Сцепить влияние окситоцина на состояние фврмецтатсвяых систем крозя - саёртгашцай и фибринолитическей.

3. Исследовать характэр изменений сьстоякия системы гемостаза под "действием оксптоцкна в вависвиоств от доэы и пути ' введения регулятерноге пептида.

Епервыв выявлены регуляторные влияния ок-ситеднна на агрегяционкую функцию тромбоцитов, заключающиеся в способиоотх гормона ¿я ^¿¿го вызывать агрегацию кровяных пластинок, зависимую от содержали внеклеточного Са^+. Установлено дезозависпмов ингкбкрование екситоцяноы процесса АДО-индуцированнвй агрегации трембоцнтов в условиях ¿п у^го н £п усуо% р. также снижение под влиянием пептида концентрации внеклеточного кальция в крови.

Показано, что окситоция первоначально .стимулирует свёртывание кровя по внесшему пути о пооледуицей активацией внутренне« механизма образования нрогромблнйэы, связанной о ви-деланием в кровогоа ( из сосудистой стенки ) фактора 7Ш:К. Обнаружено, что избыточний тромбиногенез, вызванный введение! екситацина, не сопровождается развитием коагулопатии потребления в связи о одновременной активацией фибринолиза, приводящей к тормокешш гьмокоагуляцки, Увеличение фжбринолитичео-хкх свойств крове ибуслевлено способностью горкоио вызывать секрецию в хроаь из эндотелия сосудистой стеакп активатора мазюшогеаа тканевого типа.

Прокоагуляятный я профнбринолигичеокий эффекты скситоцина являются дезозавгсЕшаси и воспроиеводятся независимо от пути

введения регуллторяого пептпда эхспзрлменгалхкш жавстаьм.

Порцткчсскяд тздтодц. Розулматы проведанном эксиарулвя- . гального вослздоемия расширяют тэораанчоокла представления э эчячршш оксктоцнка й регуллцгя вегетатязкта: функций оргп-кммя, ъ частности, еястеуч rewooTasst.

Ирш исследования показали, что окситоцяя знат»ает Topvo-аекие АДЗ-индуцироввяяой агрогают троиботу^в я posîfiîHe г?!-погаргу.члттоттх сдглгоз я спстоне гзмоегяга, ody слезите пяюс оглмуллцярв {яфшшазй. Пелучд«ш!»в данные указываю® на воз-моянссть ясявдьзоггигл тромбоуигаркай млепг и приполччг »те • спггтзгзггссгс- гцгйблгароа ¿кйрпнадиьа дай К"»рв«»я«ал г»мерра-гичвокюс ослонпекяй, развкзавцнхвя у рожекщ со скчжвкдей контрактилхкой способностью маткп после введения пм оксим-срша.

Креме того, обнаруженной профябрлнслнтичгсков действие . гормона, связанное с его способностью вызпзаи» освобогдотте активатора пхазминегека сосудистой стенки, делает целэсе--образним исследование тромболгтичесиа: свсйстп окг.ятот^ннв,

áíUL'üÍFiESilûJCîï« Ооиогяко полвксстя дясоортавди ;;олске:;ц я ебсуадеяк m ХУ съезда Гсесоюзиото Физиологического обпост-?ц ян. И.П.Пиалеэа ( Кгпшаов, Т->87 ), на IV Бойсожном съиадл общества патофизиологов ( Кашине я, ICOS ), на IV Бочслзгтио" КОНфврйШОШ "Противэтромботкчоскрл харапяя » клйн/лаокой практике" ( Ялта, IÜ8Ö )f на II Еоосоизнсй конфвршоши по нойрокаукам ( Киев, 1983 ), uz III Всесоюзной кор^врокцлк по неЗроэадокринологии ( Харьков, 1988 ), на КуйбышзЕСКОй об-ягасткгй Kcirfepmn^ "^пзяо.тсптл ¿зготативкоЛ норвкэЯ сйстеии" ( Куйбышвв, 1920 ), на совместном заседания Саратсгского от-ячлстп Бсеоотпиго фязяологичаекого общества ям. И. 17. Павлова, Саратовского отделения Всесоозного общества патофиэаоло-гов л Саратовского отделезля Всеооюзногс общества фармакологов ( Саратов, 26.04.90 г. ).

¡к^щ^щдгл.жшжх^ш^шетлзшл. По теме длссертпдяп

опублоковая® 7 рвбот.

Структуре и ,/па&ердавад» Диссертация состоит вз введения, 6 глад, erj~ir:i0XiHj обзор литера туры, олисаяяв ебъек-тсп, материалов я методов гсследованял, результаты исслвдова- , пня я мл обсуждение, выводов я списка использованной ллтера-

турн. Работа наложена на /«£<? страницах мааинсписяогв текста, _содержит 13 таблиц и 33 рноунка. Список дитерауурв включает ; 285 источников.

СЕЬЕКШ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДУ ИССЛЕДОВАНИЯ

Опиты выпоженв на 903 кабараманных самках белых крыв ыао-оой 0,17 - 0,22 кг, находящихся в одаюй фачв естрал^нег® свк-. да - диэотрусв. Кровь дяк Есследевышй получали свлккониро-ваккой иглой из бршной аорты наркотизированнмс неыбуталом . ( 50 иг/кг ) аивстннх. В экспериментах использовали препарат с1штет714бск®ге окситсцина производства фирмы "Гедееы Рихтер" ( Венгрия ), содержащий в 1мл дистиллированной веди 5 МВ гормона. Б конгролгних исследованиях испольеовали днетаюшре-. ванную веду.

Прямое воздействие цептада на гемостаз изучено в серии пробирочных опытов на плазме крови иктактшве животных. Пэрвояа--чадыю для выявления проагрегантяых свойств гормона оярвдала-на его Ш5д ( аффективная концентрация 50$ ), При изучении »лаяния окситоцича на процесс АДЗ (1'10~'М) - индуцированной агрегации кровяных пластинок определена ( ингибирувдая концентрация 5С5 } гормона. Кроме того, в экспериментах ¿л у Иго изучено влияние окситоцина ( 0,06 а С,18 МДЛ/л плазмы ) на показатели, агрегациоггаой активности тромбоцитов, евзртшш»-щей и фибринолитической систем непосредственно поело добавления пептида к шшзме крови и чорез 3 мин предварительной инкубации плазмы о препаратом.

С целю выявления эффектов цвптИда на. гемостаз ¿л пго ек-сштоцин вводили животным однократно внутркбрхшшне или внут-рттвчио в дозах 2,5 МЕ/кг и 7,5 МВ/кг. Взятие крови для доследований осуществляли через 3, 15, СО и 350 шн после внут-" рибршинного введения гормона ( или дисталлированной »оды ) е через 30, 60 и 360 мин после внутримышечной инъекции препарата.

Состояние сосудасто-тромбоцитарного гемостаза оцеш1вали со количеству трсмбоцихсЕ в цельной крови ( Березакцева, Шу-(>ич, 1957 ), активности тромбоцитарного фактора 3 {Яабспег ^ Яга^еЛ , 1968 ) и измочешш АДФ (1*10~7М) - индуцирован. ной агрегации кровяных пластинок ( } 1962} 0'3ъ1е1 , 1Э5о ). Для характеристики процесса агрегации тромбоцитов, аызганной АДТ>, определяли следующие показатели : I) макои-

мальяуп амплитуду агрвгатограммы, или степень агрегации ; . 2) ^ угла наклона агрегатогртш (Л. ; 3) вреия агрегация п время дезагрегации ( Лесов к соавт., 1976 ).

Концентрат® пэнкзкрованяогб зцендлточяогэ калымя 2 бэд-нсЛ тромбоцита}® плазма крови определяли спввтрофотомвгрг'-ие-зи.1 мотодой, рвяемггяеваняш флр?.*ей "Ламма" ( ЧСФР ) е ес-пвль8 0всш5«м набора реактивов "Баетесс. Кальций" ( "Лахема", ЧОФР ),

Кзиаяения ичказагслей коагуляцаснноге гемостаза выявляла ' »¿щвприняткми биохэшкческшя методами. Прокэагуляятну» шстав-ивсгт. гяасгкагв цутн обпялдвяяяя протронблна$ы оцат-

пялп пв првтрсийлийиоиу враывви ( , 1966 ), эпутрен-

нег» путл - пв индексу диапазона контактной ыктавэцм { ИДКА. ) ( Баркагян, Ерёшш, 1973 ), активированному частичному тромбопластиновему вренога ( АЧТВ ) ( Сет*те? аjgss ), активности факнра ПИ ( Ш1:К ) ( Sout¿*t, .xtr **<>«• , 1968 ). Камцентрсцюо фпбряногеиа в пламм кревя определи« методом Рутоврг ( 1961 ). О присутствия в цнрхулврупцвй крови растворимых кемплвксов фчбрни-моавмервв ( РЖК ) судила па осиоваигл результатов этаноловеге ( Go^cré" , ^

1971 ), нретанинсудьфагного (

i960 ) тзстов и ß -нафтоловой проби ( G vs>?sn ¿s? е f

, I94S )„ Антихсагудянтная активность крона ецонв-гглась п? показателям трсмбиневего времени ( ,

■¿erste , 1962 ), уровня гепарина и гепарииоподобыых аещпств ( Warwci ^ eré't 3958 в модификация Коршунова а соавт., I96S ), активности антитромбина III ( , 1970

в мвдлфякация Башкева, 1987 ).

Для характеристики фнбрянелнза определяли : суммарную фа<5— ркнолжтачвегуо активность ( СФА ) ( -¿siiu/t , 1952 ), фнб-рннолнтичоскую активность шгазмннп ( cAése/i , 1957 )

я активаторов плммяногена (-¿bSfe г г?*, ^<rssen t 1952), актягность антиллаашшоа ( , 1964 ) бодяеЯ трвнбецп-

томя плаямн грвви.

Веч получении» результаты обработали етагастячевия с определением достоверности равллтг.П пс критерию Стьюдеата С Венчиков, l'es'iKKoe, IS74 ) * парному критерию Вжляоксвва ( Дублер, 1978 ).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

WJPLE* сост

УСТаКвЛЛвВО, чт» оксятвцси ¿п. vitzo г дози 0,5 - 2,0 Ш/пл вы«ывает ивмен'еи*» фврык трембацитвв и их агрегацию. Степень •кенгецнк-яндуцир&ваавей агрегсдта крввяннх пяастпц«к достигает ж велхчхвв её прями гтреп^рцяеяадьяе ааанеит дмы. вхсв1»цкна сеегавма I Щ/мл., ДдккыЯ гффокс гермека отыечаатся лишь в пя&яма крев*, етабзшгеирмаянвй гвиаржыви. При анесегкк пептида в цктратнув длаему кревя, а также ва {»не блокады кальциезих каналов трем-йоцатьв вврапюялеи (0,06 иг/их гепарши*нрев»ян»й сжаиш ) проагрегкнткео двйсгвве г*рм®на преявляется ( jpnc. I» ).

В свяян е этим песлвдущя» эксперименты но и&учвяню ввв-действия пептида на агрегацнмшую фунюуш трембвцимв пр»ве-доли с иападмвваяиеи плати хрови, етабилгвкроааннвЯ гецариг вей.

При »сследьвакяк влияиил вксйтвцяка на АД^индуциреванну» агрвгецмэ тромбоцитов в услеавях ¿n w^f ебнаружвне ин-гибировагав её пвд влвдкивн гериеиа : проясхедвт снхжеявв степени arperwtra в уиеньшенхе начальной скорости процесса. Одхевреиевые наблюдается умречеиве временя агрегация и времени де»агрегацгл. ÍCP,g »хсвгецняа сэстамла 2 МЦ/мх ( рис. Id ),

Окситоцен 0,5 MS/мл

2 Щ/мд

0,5 - 2 Ш/ш ( -Са2+ ) ■i^--- .. — —i. . i. , ■ ■ —i-..-. . ■" ■■

Ада + Н20

АДФ + сксетоцин

Fue. I. Тшшчяяе крпвае агрегации тромбоцитов, вызванной 0КСВТ01ХИН0М (а) и АДФ в присутствии окситоцнна (б)

Аналегечинв хгмвнвяля гврауетрвз атрьгацил уролялюс птас-танвк, вкав&ннвй АДФ, втнечаютея я пра эднввреывкшш вивоапмз а извету агрвгвыагра ладукмри л 0,06 и 0,18 «сентоизтна/»« плагин. Скяжеиив степени агреггдли беле? выраяапе ( на 32,4;?; $ <0,01 ) при всяэльггвшшн дозы гормвва 0,18 МД/мт, чей прп дайетвжи доек 0,06 МЕ/цд ( иа 20,3$; jk'O.OI ).'

Ира продзари*ел»н»й инкубация гдаямн крэзя в sineana 3 май с оксятецинеи првиехвдт*, яврэятяэ, двгрядьция части папгвдо, плазменный« првтиияаэомн, что ярилодя? к егяжеялг yfxIoKva горняка. Двеа зкснтецпйа 0,18 М£/мл яывияав? ¿нмватя иаксгшаяа-явй амплягудн агрвгатйгпям"ч яп 22,7® ( í><C,05 ук-рячкяз arpsrauaa а *р»чеяя дгзгсгрегздк на 23, G^ ( р <0,01 ) н 34,6* í р <0,01 ) сввтавтстввнн». В te жэ ире»я повивал доза гормона вызывает лишь яоаяячлгвлгхм ( па 5,55?; р <0,05 ) ештяепие степей агрегации гримбецятва, не влияя на другие параметры агрегатеграмми.

Таким обра»ем, в условиях in v¿¿zo екеитвция ввавквавт яводнозначку« рвгулятсрныв ввядвйстввя на агрегацнокауо функцию тромбоцитов, с одной сторон)), язляяса слабым кальций-га-зпсямым пкцуктором агрегации кровяных пластинок, е другой стороны, подавляя лакни,1 п;оцэсо, вызванный АД1>.

В апчтах с внутрябрюянияизи »заданием прэпарата л дозе 2,5 Ж/кг установлено, что ¿n vivo охсятецпн на оказывает влияния яа количество тромбоцптсэ з циркулирующей крозп, го вызнгачт погьетни® кх Функциональней активности, На этэ ука-зкзае? наблюдаемое через 3 и 15 мик поело введения гермвка увеличение индекса тренбецнтарнвй активации, еввдвтбльству»-щве в висвобожцвяии активнестн фактора 3 крввяязх пластине*;

Учнтивая эначлтолжую структурную гомологию гнлеталамичм-scrx нвЯропаптидез окситецпна а зазвпрвссина и даннн» в овязм-гакия вкситецява в рецепторами валвпрвссика ( 9¿<rs t Aossoi , 1972 ), а также выраженное агрвгоциочнве действие зтэге гормона ( K^^ss , 1932 модно предположить, что прзагрогантикй эффект екептацпна опэеред*вач через aro взаимодействие с аазолрессиновымл рецепторами тромбвцитоэ.

В re .те гремя окситецин вызывает янгибироваяле агрегация тромбоцитов, иадуцирогакнай АДФ. Ччреа 3, 15 и 60 мин после вкутрпбргйяшного введения пептида отмечается снижение ыаяси-млиадей амплитуды агрегатмраммк на 19,6 ~ 33,2% ( р <0,01 ), сопровоздаздкеся.уменьшением начальной скорости процесса не 23,7$ ( р <0,01 )« Одновременно происходит укорочение враыв-

ни агрегации на 28,5 - 30,4$ ( р<0,05; р<0,01 ) я времени ^дезагрегации на 20,7 - 25,% ( р<0,01; р <0,05 ). Через 360 шн после инъекции оксктзцлнг при аналиае агрегатограмм животных контрольной и опытной групп статистически достсварнях рагтачий показателей агрегации кровяных плсстеусе кв обнару- ' . живавтся.

Аналогичные изменения состояния сосудисто-тромбоцитарнеге гемостаза набдадаются к при внутримышечном введении пептида В догах 2,5 МБ^кг и 7,5 МЕ/кг. На нарушения АДФ-кндуцировац-яой агрегедая тромбоцитов, вызванное дозой препарата 7,5 Мй/кг, сохраняются в течение 6 часов, и степень зшратсанностл эффекта пря этом а на 20% меньше, чем при лспользовалии дезн ок-оитоцина 2,5 МЕ/кг.

При определении концентрации внеклеточного кальция в плазма крови через 15 и 60 мин после внутрябрюшинной инъекции ек-сптоцина отмачаеуоя уменьшение ее на 11,9 - 12,6$ ( р <0,01 )} нормализация величин» данного показателя происходит в течяша С часов. Гипокальциемический аффект гормона наблвдаатся л при внутримышечном введении препарата, причём степень его выраженности нэ зависит от дозы окситоцина.1

Вызываемое окситоцином торможение способности кровяных пластинок отвечать на действие АДО объясняется, вероятно, по-вышеякам функциональной активности тромбоцитов под влиянием гормона. На развитие резистентности кровяных пластинок указывает снижение максимальной амплитуды агрегатограмми и укорочение времени дезагрегации ( Габривлян, Акопов, 1985 ), наблюдаемые в условиях ¿л у ¿¿го и ¿л . Состояние реФрак-терности обусловлено, по-видимому, активацией кальциевых каналов тромбоцитов с последующим перераспределением внутриклеточного кальциевого пула. Кроме того, ингибированнэ АНФ-ияду-цированной агрегации тромбоцитов на фоне действия екситоцина может быть связано се снижением уровня внеклеточного кальция, , развпзаодимсл в результате активации входа в зндегелиаль-пыо клетки сосудов { З^г.^^ап , Ягюа'г^С' , 1986 что вызывает выброс проотздиклинг в кровоток { с?^ 1908

Зкмшшм шшАЖъжтт. жJmмш^шшшшz

дого гемрс,тазц Флбрицодаа^. С целью выявления прямого действия екситоцина на коагуллционний гемостаз и фибринолиз поставлена пробирочные спиты с использованием двух доз гормона -

-3 л 0,18 Ш/ил плати казня, сгабилпзкразанкэЯ цатрагвн натрия, •

Отсутотзив хзмененяй л локагагзлях сыкконсзого г. лктпез-ровапявго врвмонп рекалздкТл кидая бедной тромбоцитами ляаши кров«, ИДКА, ярвтроглбяяоз5го вр4игш1 я АЧТБ свидет9л:ьсг\вует з том, что пептид пе оказывает пепосрэдстлчнкого Ълплнкя ия ео-стеяшв плазменного гамостааа,

Б экспериментах ¿я уг11го установлено, чтя окситоштн ебла-дает прямом ингибкрутим действлем на фибрином», вкякаая яая-женло СФА плазмы кровя на 10,8 - П,9Й { р -<0^05 еа С7?? гзр-

Фгбранмвка ыаимндетя плкямина г кс окгзиэдя вэтлнкл на активность активаторов плазмлногона л лнтиплазмгнов. При этом отмечается зависимом! эффекта от доза гормона : доза препарата 0,06 МЕ/мл вызывает снижение албрянолитипеской активности плазмвна на 12,0^ ( р <0,01 ), доза екеитоцяна 0,18 Щ/мл - на 24,855 ( р <0,01 ) ( рио. 2 ). Угнетение фиб--рннолитичэской активности плазшна обусловлено, по-видимому, гомологией учазтка молбиулы гормона с амянсккслотннм срсгйво!1.? рзаглишого центра ингибиторов свриновкх прстэппаз ( Кирееаа, Струкова, 198? ).

Ш ПА АПг Ш

Рис,4 2. Влияния окситошша ( 0,06 ME/мл и 0,18 MF/ад ) пп

показатели гТкбрпнолиза в условиях f' r^Yza

CIA - суьшарна« фибринолитичвская активность плазми крогзя ; ПА - '¿ибрииплг.тичоскБя активность млазмина ; АПг - активность актилатороа гиазминогбна ; АЛА - активность антишгазтиов.

За 100$ принята показатели фибрииализа ирп ¡Знзсвнин в плазму кропи дистиллированной вода.

|--1 - 0,06 МЕ/мл ; EZ3 - 0,16 ЫЕ/т

* - р ¿0,05

При исследовании вхшод окситоцина на состояние коагуля-_циэшюго гемоотааа ¿п у^^о показано, что через 3 и 15 млн после гну трл бредши ого введения пептида в доз» 2,5 МЕ/кг развивается глперкоагулщкя, обусловленная активацией как внешнего, так и впутреипогв мэханкзмь образования аротромбнказц, . О стимуляции внеанаго путп свёртывания крови стадетедьствуот укорочанио лротромбкновэго вреыанк на 21,2 - 22,1$ ( р<0,01; р<0,001 ), в!гутрэннэгс пути - уменьшение ИДКА на 17,9 - 21,1% ( р<0,01 ), укорочение АЧТВ на 7,Э£ ( р <0,С5 ), уволичэяаа активности УШ«.К на 15,77, ( р<0,01 > ( рис. 3 ),

Дашше измоненил ь система гемостаза сопровождаются избк-точкш тромбиногенеэом, на что указывает обнаружение а 1о,7 -66,7% случаев ( р<0,05; р <0,01 ) г крова РФМК, а потребление антитромбина III на инактивацию факторов свёртывания кровп.

Чороз 60 г.шн после введения препарата гдперкЬагуляциовдай сдвиг в системе гемостояа сменяется гяпахоа17ляцивй. Развитию гипокоагуляции способствуют снижение содержания ^ибрииогена . и накопление в крови продуктов деградации фибрина и фибрико-гона, обладающих антикоагуяятним действием.

Кроме того, гипокоагуляционныа сдвиги з системе гемостаза, вызванные окситоцином, обусловлены активацией фкбринолиэа. свя-занко!» а поступлением а кровоток активатора штзммогена тканевого тина ( рис. 4 ). При введении гормона отмечается повышение СФА плазмы крови ( на 14,7 - 37,р <0,05; р <0,01 ), фибринолятичэскйй активности илавминв ( ва ТО,6 - 30,15? ; р <0,05; р <0,01 ) к активности активаторов плаамнногепа ( на 15,8 - 39,2Я; р <0,05; р <0,01 ). Одновременно пептид вызывает торможение активности ингибиторов фибринолиэа ( на 27,; р <0,01 >. Гипо^сагулемическио изменения сохраняются в течение С> часов поел» инъекции окситоцмна.

Эффект окелтоцина на коагуляциоикий гемостаз и ^ибринолиз не зависит от пути введения препарата : аналогичное изменения изучаемых показателей наблюдаются и кри внутримышечном введении гормона в той же дозе. Кроме того, в данной сярял экспериментов дополнительно к перечисленном показателям изучена динамика уровня гепарина в гепаркноподебних веществ плазмы. Ок-сйтоцин вызывает сюжение на 18,?.?? ( р <0,01 5 содержания ан~ тикоагуляктов через 30 и СО мни поме внутримышечной инъекция с нормализацией данного показателя в течение 6 часов. Полученные результаты можно объяснить образованием комплексов гапа-рин-тромбопластин, приводящим к снижению антиксагулянтной ак-

100

Иротрсг-'Сшгозое кре».*л АЧТЬ

/

N4 ------- VJIItK

4. /

ь______ j/

3 15 60 360 "~мкн

Рио. 3. Влияние оксятоцина ( 2,5 МЕ/кг вкутрибрмзшно ) иа показатели внесшего и внутреннего тхитзмъ ... образования протронбикази

За приняты ииАичию,- показателей у хявоттш, получавших ДИСТИЛЛИрОЕаИНУЮ воду

h

100

3. 15 60 360 MWi

flic; 4, Изменения локааатолей фнбриноляза под влиянием окситоцяна ( 2,5 МЕ/кг зпутрябршшшо )

За 100$ приняты показатели суммарной фябрянрлитической активности lurasMw кров» (ОФА) и активности активаторов шгаэ-МЯНОГОНЧ (Allr) у животных контрольной групп«

тиености гепарина ( Кудротов, 1972

При введении скситоцкна в доз» 7,5 ME/кг происходит насколько болов выраженноо уменьшение ИДКА, отмзчается стабиль-пая гипофибриногеиемия, чаще наблюдаются положительные результаты проб нп наличие РФМК. Кроме того, отмечается в два раза ccotse выражэнноо снижение активности антитромбийа III , Эти данные свидетельствуют о большей интенсивности тромбиногановв, сопровоадаицггося белыми потроблоняеы субстрата тромбина ( фибриногена ) и ere естественного ингибитора ( антятроыби-ка III ), при увеличении доза вводимого гормона ( таблица ).

Таблица

Сравнительная оценка изменений основных показателей системы гемостаза при внутримышечном вердоыпи различных дов оксигоцика

Время t ± д в %% )

Показатели после введения

окситсцина (шщ) I 2,5 МЕ/кг{ 7,5 Ш/хг

ИДКА 30 1 - 12,4 1 - 18,3

60 ! + 10,4 ! + 10,7

360 f + 15,8 ! + С,9

Содержание 30 ! 0 ! 0

фибриногена 60 ! - 34,8 ! - 37,6

360 ! - 25,7 ! - 34,1

Активность 30 ! г 1 - 34,9

60 i - 24,9 ! - 38,9

антитрембкна III 360 ! - 18,5 ! - 33,2

Примечание : "+" - увеличение величины показателя ;

- умоньяоннэ величины показателя

Одновременно с состоянием коатуштотото механизма гемостаза у данных животнях изучено влияние большей дозы оксито-цина на показатели фибрянодпза. Червя 30, 60 и 360 мин после ввадвиял пептида отеечаетея депрессия фибринолиза : снижение СФА плазмы крем: на 30,9 - 35,3% ( р<0,01 ), фибринолити-ческой активности плазмина на 20,7 - 23,3% ( р<0,01 ) и активности активаторбв плазминогена на 33,7 - 39,6?! ( р<0,01 ).

Параллельна наблвдветоя повышение октпяпостл пптяплаямияов па' _ 29,3 - 50,6^ ( р < 0,01; р <0,05 ), Для установлен)« причины развнвшцвгеея угнетения фибринолвва произведено взятке крови-

в более раняиэ сроки посла впадения горяокп. При ятем показано, что депрессия фибркнелгза является оладстккем ог& стхшу-, . ляции за счёт повышения активности активаторов плгэмшшгеиа на 59,5$ ( р < 0,01 ) я фнбрпнолитмчеоквй. активности пляямиза пп 20,0% ( р<0,01 }. Степень активация фнфпнолаэа, п» вела- ' чинки показателя ОФА пласта кревп, я дздном случае kr 20,3$ выше, чем при исполмовевлп дозн гормона 2,5 МЕ/кг.

ВЫВОДЫ

I» Окситсцнц является слабым индуктором агрегации тромбоцитов в условиях у ¿¿га . проагрогантное действие пептид» зависит от концентрации внеклеточного

2, Окситощш способян подавлять АДФ-индуцированну» агркга-щш кровяных пластинок при пнутрибрпшгняом н впутримшечявм ■ лйоденги er« óexm крксам, а уа^.в » условиях ¿ч и

3, Онсптоцин сеупои&чилто актидарур" съёртпвыпм крона па втшпгму пути о нлследусцеЗ стимуляцией внутреннего нехаяязуп обраао^шпУ! претрембичази. евлэошю" о т.идьлытси под влилня-т пвЯроаши'пда й кровоток фактора :К»

4, Ивбиточыий трсглбкнегвкьа, шзвашшй йведонгеи оксятецп-на, ае сопровождается развитием дассеш'виров&писгв üsyspacoey-дистиго свёртиванил крови в связи с одновременно!} отпмулщиеЯ фибринояияа, приводящей к тормоквтш гвмокеогулящга,

5, Увоавпсхтв $~бряколптетзо?:т:х з?.о5стя кссгл обусловлено снсссбнссты) оксктоцпна вызыватг евкр^цив й креветок лют.ап-торов плазминогеид.

6, Прокоагулянтный и профибринолитическяй эффекты окелтогш-на являются дозоаовиолшаш и воспроизводятся нэзавиоиыо от лу-TK ЦРОДОкШЯ, ЧТО сппдотпльстнуот о спеии^ичноотп рвГуЛЯТОриЯХ влилпий нойропоптпда s отноиошч; систему гемостаза,

С1ЫС0К РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО 'хШ ДИССЕРТАЦШ

л

I. Бурова М.Б,, Росселевский H.A., Семёнова C.B. Гуморальные факторы регуляции агрегатного состояния крови // ХУ съезд Бсеоогзн. $изиел. об-ва им.И П.Павлова.-Л.,1987,- T.2.-G.442.

2. Киричук В.Ф., Бурова М.Б. Участие вейропептяда оксято-„циип в развитии диооеминированного внутриоооудаотого свЗрты-

а--ашя кроил // Т»э. докл. III Бовооюзя. конф. по иаЯроэвдо-крянслогик. - Д.,1988. - С.120,

3. Киричук Б.Ф., Буров» iM.B. Ивйрспоптид екситоцин'как фак-• тор раавктия синдроиа диесваиниревьЕнсге вкутрисооуднстого

свёртк'ваиЕя крови // II Боесоюзн, конф. по цэйроиаукам. íes. дою;. - Киев, 1968. - С. 123 - 125.

4. Бурова М.Б. Нхвяви* скситоцяиа на показатель коагуляци-ОШЮГ9 механизма гемостаза // Тез. дога. Куйбышевской обл. конф, "Физиология вегетативной норвной систему". - Куйбшаа, IS88. - С.22 - 23.

5. Киричук В.Ф., Бурова М.Б, Влияние окситоцина на фмбря-нслкэ и сосгоягаза хшликрюш-кннгшовоЯ' енотами // Пробл. ан-двкрпнол, - 1989. - tf2,v - C.8I - 84,

6. Клрнчук И.Ф., Токаова Л.К., Головченко D.M., Назарова C.B., Бурова М.Б.. Семёнова C.B. Рол& тканевого звена в coy-, цветвленйи гемоотатнчаокой функции на изменённом гормональном фоке // Нарушениэ механизмов регуляция н их коррекция. Твя, докл. 1У Боесоюзн. съезда патофизиологов, - M., 1989. -С.176.

7. Кпричук В;Ф,, Токпова Л.К,, Синькеова М.В., Бурова М.Б., РосооловокиЛ H.A.' Гермоци как патогенетический фактор« развития диссвмянирэванного внутрисооудиотого свЗртквшшя кревв // Медицинская цаука - практическому здравоохранению. Сб. иаучн. работ, - Саратов! Иад-во СГ7, 1989. - С,'2Э - 34.