Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему:Иммуноферментный метод определения трофобластического бета1-глобулина в сыворотке крови человека и его применение при исследовании герминативных опухолей яичка
- Ученая степень
- кандидата биологических наук
- ВАК РФ
- 14.00.14
Оглавление диссертации Якобидзе, Вахтанг Эдуардович :: 1984 :: Москва
ВВЕДШИЕ.
Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1. Иммуноферментный метод.
2. Применение иммуноферментного метода.
3. Трофобластический б eTaj-глобулин.
Глава П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
1. Характеристика исследуемого материала
2. Иммунодиффузионный метод
3. Определение хорионического гонадотропина в моче
4. Определение альфа-фетопротеина в сыворотке крови
5. Радиоиммунологическое определение ТБГ в сыворотке крови.
Глава Ш. РАЗРАБОТКА МЕТОДА ИММУНОФЕРМЕНТНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРОФОБЛАСТИЧЕСКОГО БЕТAj-ГЛОБУЛИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ . .-.
1. Приготовление очищенного препарата ТБГ
2. Приготовление моноспецифической антисыворотки к ТБГ
3. Постановка и анализ надежности иммуноферментного метода определения ТБГ
Глава 1У. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ ЗНАЧИМОСТИ МЕТОДА
ИММУНОФЕРМЕНТНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРОФОБЛАСТИЧЕСКОГО БЕТАj -ГЛОБУЛИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ДОНОРОВ И БОЛЬНЫХ НЕКОТОРЫМИ ФОРМАМИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ
НОВООБРАЗОВАНИЙ.
I. Изучение ТБГ в сыворотке крови доноров
2. Иммуноферментное определение ТБГ в сыворотке крови больных с трофобластическими опухолями матки
3. Сравнительное изучение синтеза ТБГ в сыворотке крови больных с трофобластическими опухолями матки иммуноферментным и радиоиммунным методами
4. Изучение ТБГ в сыворотке крови больных с нетро-фобластическими опухолями
Глава У. ИММУНОФЕРМЕНТНОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТРОФОБЛАСТИЧЕСКОГО БЕТАj-ГЛОБУЛИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ С ГЕРМИНАТИВНЫМИ ОПУХОЛЯМИ ЯИЧКА.
1. Содержание ТБГ в сыворотке крови больных с опухолями яичка в зависимости от стадии заболевания
2. Содержание ТБГ в сыворотке крови больных с опухолями яичка в зависимости от их гистологического строения.
3. Определение АШ и ХГ у больных с опухолями яичка с ТБГ положительным уровнем
Глава У1. ОБСУВДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ.
УКАЗАТЕЛЬ ЛИТЕРАТУРЫ.
Введение диссертации по теме "Онкология", Якобидзе, Вахтанг Эдуардович, автореферат
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Трофобластический б ета-f-глобулин (ТБГ) является специфическим маркером беременности (22), который может синтезироваться и при некоторых опухолях, в частности, при трофобластических опухолях матки и опухолях яичка (11,20,22,70, 143). Роль ТБГ при трофобластических опухолях достаточно хорошо изучена, показана зависимость его экскреции от распространенности опухолевого процесса и проводимой терапии, а также его взаимосвязь с хорионическим гонадотропином (21).
Менее изучен синтез ТБГ при опухолях яичка. Единичные исследования по этой проблеме не позволяют судить о его значении как диагностического и прогностического критерия данного заболевания, хотя имеющиеся сведения указывают на значимость ТБГ как специфического маркера хориальной ткани, при хорионэпителиомах и неоднородных опухолях яичка с элементами хорионэпителиомы (11,82). Роль ТБГ при других гистологических формах опухолей яичка практически не исследована. Еще менее изучена корреляция ТБГ с другими маркерами опухолей яичка, с альфа-фетопротеином (АШ) и хорионическим гонадотропином (ХГ).
Поэтому важное значение приобретает изучение ТБГ как маркера при клиническом исследовании и лечении больных с опухолями яичка и выявление возможности использования его с диагностической и прогностической целью. Актуальность исследования синтеза ТБГ имеет еще более важное значение из-за трудностей, с которыми сталкиваются патологоанатомы при диагностике опухолей яичка в связи с их сложным морфологическим строением.
Существующие на данном этапе методы определения ТБГ в сыворотке крови человека характеризуются либо низкой чувствительностью, как иммунодиффузный и радиоиммуноавтографический, либо трудностями, связанными с использованием радиоактивных веществ -радиоиммунный анализ. Важным этапом исследования синтеза ТБГ является разработка простого и высокочувствительного метода определения белка, предназначенного для клинических нужд. В настоящее время все большее внимание уделяется иммуноферментным методам определения различных антигенов. Иммуноферментный метод является высокочувствительным методом, при постановке которого используются неизотопные метки (ферменты), и который отвечает всем требованиям, предъявляемым к современным методам клинического исследования.
ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью настоящего исследования явилась разработка иммуноферментного метода определения ТБГ в сыворотке крови человека и внедрение этого метода в онкологическую практику для диагностики и наблюдения за лечением больных с герминативными опухолями яичка.
Для достижения цели было необходимо:
1. Разработать иммуноферментный метод определения ТБГ в сыворотке крови человека.
2. Определить диагностическую ценность разработанного метода на больных с трофобластическими опухолями матки и сравнить полученные данные с результатами радиоиммунологического анализа.
3. Выявить возможную роль ТБГ как диагностического и прогностического маркера при опухолях яичка и исследовать зависимость его содержания от эффективности проводимой терапии.
4. Провести сравнительное изучение синтеза ТБГ с ХГ и АШ у больных с опухолями яичка.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Проведено изучение синтеза ТБГ у больных с герминативными опухолями яичка различного гистологического строения в динамике заболевания.
Показано значение ТБГ для диагностики и оценки прогноза у больных с данной нозологической формой злокачественных новообразований.
Исследована взаимосвязь продукции ТБГ с ХГ и АШ при герминативных опухолях яичка и выявлена необходимость совместного изучения этих маркеров.
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ. Разработан и внедрен в клиническую практику метод иммуноферментного определения ТБГ в сыворотке крови человека для диагностики, прогноза и наблюдения за лечением больных с опухолями яичка и трофобластическими опухолями матки.
ВНЕДРЕНИЕ В ПРАКТИКУ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ. Иммунофер-ментное определение ТБГ в сыворотке крови больных с опухолями яичка и трофобластическими опухолями матки успешно применяется в практической деятельности клинико-иммунологической лаборатории ВОНЦ АМН СССР и в НИИ им.Н.В.Склифосовского.
Заключение диссертационного исследования на тему "Иммуноферментный метод определения трофобластического бета1-глобулина в сыворотке крови человека и его применение при исследовании герминативных опухолей яичка"
выводы
1. Предложенная схема выделения ТБГ позволяет получать препараты высокой степени чистоты, а использование его для иммунизации животных позволяет приготовить высокоаффинные моноспецифические антисыворотки, которые с успехом применяются для иммуно-химического определения белка.
2. Создан метод иммуноферментного определения ТБГ в сыворотке крови для широкого клинического применения; анализ специфичности и воспроизводимости показал надежность данного метода.
3. Иммуноферментное определение ТБГ в сыворотке крови больных с герминативными опухолями яичка выявило повышенное содержание его в 29,2% случаев. Установлена ценность данного серологического теста для диагностики, прогноза и наблюдения за течением заболевания при опухолях яичка.
4. Установлено, что при опухолях яичка синтез ТБГ является признаком наличия элементов трофобласта как .в первичной опухоли, так и в метастазах.
5. При обследовании больных с опухолями яичка целесообразно проводить совместное исследование ТБГ, АФП и ХГ.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 1984 года, Якобидзе, Вахтанг Эдуардович
1. Абелев Г.И. Принципы иммунодиагностики опухолей. Иммунология, 1981, № 12, с.5-12.
2. Абелев Г.И. Иммунодиагностика опухолей. Вест.АМН СССР,1982, № 12, с.61-65.
3. Аксельсен Н., Крелль Й., Вееке Б. руководство по количественному иммуноэлектрофорезу. М.: Мир, 1977. - 216 с.
4. Афанасьева А.В., Володин М.А., Никулина Д.М., Меснянкина Н.В., Парфенова Л.А. Продукция бета^глобулина в условиях нормально развивающейся беременности и при поздних токсикозах. Акуш.и гинекол., 1976, № 6, с.22-24.
5. Бирюлина Т.Н. Модификация метода агрегат-гемагглютинации для определения оА-фетопротеина в сыворотках больных. Вопр. онкол., 1974, т.20, № 6, с.75-79.
6. Волощук С.Г. Иммунохимическое изучение эмбрионального преаль-бумина-1 (ЭПА-I) в эмбриональных, дефинитивных и опухолевых тканях человека. Дисс.на соиск.учен.степ.кацд.мед.наук. -М., 1982. 137 с.
7. Гаврилова Е.М. Гомогенный иммуноферментный анализ новое направление в иммунохимии. - Жур.Всес.хим.общ. им.Д.И.Менделеева, 1982, т.28, № 4, с.90-97.
8. Гаврилова Е.М., Дзантиев Б.Б., Егоров A.M. Получение и свойства иммунопероксидазных компонентов. Биохимия, 1979, № 44, с.1614-1618.
9. Дзантиев Б.Б., Егоров A.M. Современное состояние и перспективы развития иммуноферментного анализа. Жур.Всес.хим.общ.им. Д.И.Менделеева, 1982, т.28, № 4, с.82-89.
10. Жордания К.И. Клинико-экспериментальное изучение трофобластического бета^--глобулина у больных трофобластическими опухолями матки. Дисс.на соиск.учен.степ.канд.мед.наук. М,1983. -III с.
11. Калашников В.В., Фалалеева Д.М., Татаринов Ю.С. Количественный иммуноферментный метод в оценке специфического теста на бeTaj-глобулина при трофобластических опухолях. Бюлл.экс-пер.биол.мед., 1979, № 5, с.444-446.
12. Калашников В.В., Фалалеева Д.М., Татаринов Ю.С. Иммунофермент-ное определение эмбрионального альфа£-глобулина в тканевых экстрактах и биологических жидкостях человека. Зкспер.он-кол., 1982, т.4, № 5, с.47-50.
13. Калашников В.В., Соколов А.В., Фалалеева Д.М., Якобвдзе В.З. Использование Wheat germ Lectin-Sepharose для выделения специфического белка беременности. Бюлл.экспер.биол.мед., 1983, № 12, с.118-120.
14. Маурер Г. Диск-электрофорез. М.: Мир, 1971, 247 с.
15. Молодык А.А., Савинская А.П., Новикова Л.А. Определение хо-рионического гонадотропина при трофобластических опухолях: Методические рекомендации. М., 1978. - 18 с.
16. Никулина Д.М. Иммунохимическое, физико-химическое и клиническое исследование бета|-глобулина "зоны беременности". Дисс. на соиск.учен.степ.канд.мед.наук. Астрахань, 1977. - 171 с.
17. Никулина Д.М., Соколов А.В., Татаринов Ю.С. Физико-химическая характеристика специфического бета^-глобулина сыворотки крови беременных женщин. Вопр.мед.химии, 1977, № 3, с.324-326.
18. Ольховская И.Г. Опухоли яичка. В кн.: Патологоанатомичес-кая диагностика опухолей человека. М.: Медицина, 1982,с.296-310.
19. Соколов А.В. Выделение трофобластического бета|-глобулина иразработка радиоиммунного метода его определения в сыворотке для диагностики трофобластических опухолей. Дисс.на соиск. учен.степ.кадд.мед.наук. Москва, 1977. - 141 с.
20. Соколов А.В., Козляева Г.А., Меснянкина Н.В., Татаринов Ю.С. Выделение и очистка специфического бeTaj-глобулина. Вопр. мед.химии, 1978, № 2, с.240-244.
21. Соколов А.В., Иордания К.И., Ледян К.М. ТрофобластическиЙ/З-j-гликопротеин в сыворотке больных с трофобластическими опухолями. Мед.радиол., 1983, № 8, с.25-30.
22. Татаринов Ю.С., Масюкевич В.Н. Иммунохимическая идентификация нового бeTaj-глобулина в сыворотке крови беременных женщин. -Бюлл.экспер.биол.мед., 1970, № б, с.66-68.
23. Татаринов Ю.С., Меснянкина Н.В., Никулина Д.М. Иммунохимическая идентификация бета^—глобулина "зоны беременности" в сыворотке крови больных с пузырным заносом и хорионэпителио-мой. Акуш. и гинекол., 1974, № 5, с.67-68.
24. Татаринов Ю.С., Меснянкина Н.В., Никулина Д.М., Новикова
25. Л.А., Толокнов Б.О., Фалалеева Д.М. Иммунохимическое определение бeTaj-глобулина в сыворотке крови больных хорионэпите-лиомой. Бюлл.экспер.биол.мед., 1974, № 9, с.79-83.
26. Татаринов Ю.С., Никулина Д.М., Меснянкина Н.В. Иммунохимическая проба на бета|-глобулин для ранней диагностики беременности. Лаб.дело,, 1974, № 9, с.547-549.
27. Татаринов Ю.С., Фалалеева Д.М., Калашников В.В. Иммунофлюоре-сцентное изучение бeTaj-глобулина в плаценте в ранние и поздние сроки беременности. Акуш. и гинекол., 1975, № 7,с.63-64.
28. Татаринов Ю.С., Фалалеева Д.М., Эльгорт Д.А., Новикова Л.А., Толокнов Б.О. Иммуноауторадиографическое определение 6eTaj- но глобулина в сыворотке крови больных с трофобластическими опухолями. Бюлл.экспер.биол.мед., 1975, № 9, с.86-89.
29. Татаринов Ю.С., Фалалеева Д.М., Калашников В.В., Васильев М.Ю. Изучение биосинтеза и клеточной локализации бета-j--глобулина в плаценте человека. Вопр.мед.химии, 1977, № I,с.88-92.
30. Татаринов Ю.С., Никулина Д.М. Иммунохимический тест на 6eTaj-глобулин как новый показатель беременности: Методические рекомендации. Астрахань, 1977. - 16 с.
31. Фалалеева Д.М., Толокнов Б.О. Серологический тест на бета£-глобулин при трофобластических опухолях. В кн.: Иммунология опухолей. Киев, 1975, с.261.
32. Фалалеева Д.М., Козляева Г.А., Масенко В.П., Толокнов Б.О. Плацентарный бета£-глобулин и его связь с трофобластической болезнью. В кн.: Аспекты диагностики злокачественных опухолей, тезисы докладов Республиканского симпозиума. Таллин, 1976, с.92.
33. Хеддоу Дж.Е., Ритц Р.Ф. Иммуноферментный анализ. В кн.: Последние достижения в клинической иммунологии. - М.: Медицина, 1983, с.418-420.
34. Храмкова Н.И., Абелев Г.И. Предел чувствительности метода преципитации в агаре. Бншл.экспер.биол., 1961, № 12,с.107-109.
35. Avrameas S. Coupling of enzymes and proteins with glutaral-dehyde. Use of conjugate for detection of antigens and antibodies* — Immunochem., 1969» v. 6, p.43-59.
36. Avrameas S,m Ternink T. The cross-linking of protein with glutaraldehyde of immunoadsorbent. Immunochem., 1969, v.6, p.53-66.
37. Avrameas S., Ternink T. Peroxidase labelled antibody and Pab conjugates with enhanced intracellular penetration. Im-munochem., 1971, v.8, p.1175-1179.
38. Bagshaw K.D., Lequin R.M., Sigaret P.N., Tatarinov Yu.S. Pregnancy beta^-glycoprotein and chorionic gonadotropin in serum of patients with trofoblastic tumours. Eur.J. Cancer, 1978, v.14, p.1331-1335.
39. Behrman S., Yoshida T., Amano Y., Paine P. Rhesus and squirrel monkey placental specific antigen. Amer. J. Obstet. andGynecol., 1974, v.18, N 5, p.616-625.
40. Belanger L., Hamel D., Dufour D., Pouliot M. Antibody enzyme immunoassay applied human o(-foetoprotein. -Clin. Chem., 1976, v.22, p.198-204.
41. Belanger L., Sylvestre C., Dufour D. Enzyme-linked immunoassay for alpha-foetoprotein by competitive and sandwich procedures. Clin. Chim. Acta, 1973, v.48, p.15-18.
42. Belanger L. Enzyme immunoassay of human alpha-l^foetopro-tein. Meth. Enzymology, 1982, v.84, part D, p.19-31.
43. Boenisch T. Improved enzyme immunoassay for trace proteins. Proteides of the Biolog.Fluids, 1976, v.24, p.743-749.
44. Bohn H. Detection and characterization of pregnancy protein in the human placenta and their quantitative immunochemical determination in sera from pregnant women. Arch. Gynak., 1971, v.210, p.440-457.
45. Bohn H. Isolierung und Charakterisierung des schwanger-schaftsspezifischen beta^ -Glykoproteine. Blut, 1972, Bd.24, s.292-302.
46. Bohn H. Detection, charactrisation and diagnostic significance of human pregnancy-associated glycoproteins. Blut, 1973, v.26, p.205-207.
47. Bohn H. Studies on the pregnancy-specific beta^-glycopro-tein (SP-j), Arch.Gynak. , 1974, v.216, p.347-358.
48. Bohn H. Immunochemical determination of human pregnancy proteins. Arch. Gynak., 1974, v.217, p.219-231.
49. Bohn H. The protein antigens of human placenta as a basis for development of contraceptive vaccine. In: III International Symposium on immunology of reproduction, WHO session, Varna, 1975, p.111-125.
50. Bohn H., Schmidtberger R., Zild H. Isolierung des schwan-gerschafts-spezifischen beta^-Glykoproteins (SP^) und an-tigen-verwandter Protein durch Immunoadsorption. Blut, Bd.32, S.103-113.
51. Buchegger P., Mettraux C., Accola R.S. et al. Sandwich enzyme immunoassay using three monoclonal antibodies againstdifferent еруtopes of carcinoembryonic antigen (CEA). -Immunol. Lett., 1982, v.5, N 2, p.85-91.
52. Buchegger P., Phan M., Rivier D. et al. Monoclonal antibodies against carcinoembryonic antigen (CEA) used in solid-phase enzyme immunoassay. J. Immunol. Meth., 1982, v.49, N 2, p.129-139.
53. Burgett M.W., Kwas S. An enzyme-labelled immunoassay for the measurement of alpha-foetoprotein. Ric. Clin. Lab., 1982, v. 12, IT 1, p.299-306.
54. Dati P., Grenner G., Schmidtberger R. Quantitation of al-pha-foetoprotein by enzyme-linked immunosorbent assay. -J. Clin. Chem. and Clin. Biochem., 1981, v.19, N 4,P»216-221.
55. Dati P. Comparison of enzyme immunoassay for pregnancy-specific beta-glycoprotein and alpha-foetoprotein with other immunochemical methods. Ric. Clin. Lab., 1982, v.12, N 1, p.265-287.
56. Deelder A.M., Streefkerk J.G. Schistosoma mansoni: Immu-nodistoperoxidase procedure in defined antigen substrate spheres (DASS) system as serologic field test. Exper. parasit., 1975, v.37, N 3, p.405-410.
57. Dray P., Andrieu J.M., Renaud P. A sensitive immunoassay of progesterone using ^-galactosidase as label. Biochim. Biophys. Acta, 1975, v.403, p.131-138.
58. Douglass H.O., Chu T.M. Isolation, characterization and clinical evolution of a pancreas cancer-associated antigen.- Cancer, 1981, v.6, Suppl., p.1602-1613.
59. Ekins R. Correspondence: ELISA a replacement for radioimmunoassay. - Lancet, 1976, v. 2, p.569.
60. Engvall E., Perlmann P. Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). III. Quantitation of specific antibodies by enzyme-labelled anti-immunoglobulin in antigen coated tubes. J. Immunol., 1972, v.109, p.129-135.
61. Engvall E., Ljungstrom I. Detection of human antibodies to Trichinella spiralis by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Acta Path. Microbiol. Scand., 1975, Section C, v.83, p.231-237.
62. Engvall E., Perlmann P. ELISA automation. In : Microbiol. and Immunology.Ed. by C.G.Heden and T.Hieny, New York, 1975, p.529-542.
63. Engvall E., Pesce A.J. Quantitative enzyme immunoassay.- Scand. J. Immunol., 1978, Suppl.7» p.35-47.
64. Engvall E., Hayman E.G., Rouslahti E. Expression of pregnancy-specific beta .j-glycoprotein in cultured cells andcancer. VII Meeting of I.S.O.B.M., 1979, Abstracts, N.75.
65. Engvall E., Rouslahti E. Principles of ELISA and recent applications to the study of molecular interactions. -In: Immunoassays in the clinical laboratory (R.M.Naka-mura et al.,eds.). New York, 1979, p.89-97.
66. Engvall E., Miyshita M., Rouslahti E. Monoclonal antibodies in analysis of oncoplacental Sp^ in vivo and in vitro. Cancer Res., 1982, v.42, N 5, p.2028-2033
67. Prackelton A.R., Szaro R.P., Weltman J.E. A galactosidase immunosorbent test for carcinoembryonic antigen. Cancer Res., 1976, v.36, p.2845.
68. Fuccaro-Decaens C., Meriadec B., Buffe D.,Burtin P. Etude comparative: le dosage radioimmunologique et le dosage en-zymoimmunologique, appliques a la detection de l*alpha-2-H-globuline serique. Ann.Immunol., 1974, t.1250, p. 747-761.
69. Pukui H., Izumiya N. Simple enzyme immunoassay for car-cino-embryonic antigen. Mem. Рас. Sci. Kyushu Univ., 1981, v.13» N 1, p.149-154.
70. Gilman S.C., Docherty J.J. Detection of antibodies specific for herpes simplex virus in human sera by the enzyme linked immunosorbent assay. J. Infect. Dis., 1977, v.136, Suppl., p.286-293*
71. Grudzinskas J.G., Gordon Y.B., Jeffrey D., Chard T. Specific and sensitive determination of pregnancy-specific beta^-glycoprotein by radioimmunoassay. Lancet, 1977» v.1, p. 333-335.
72. Grudzinskas J.G., Lenton E.A., Gordon Y.B. et al. Circulating levels of pregnancy-specific beta^-glycoprotein in early pregnancy. Brit, J, Obstet. Gynecol., 1977, v.84, J "p.740-742.
73. Guesdon J.L., Avrameas S. Polyacrylamide agarose beads for the preparation of effective immunoabsorbents. - J. Immunol. Meth., 1976, v.11, N 2, p.129-133.
74. Hammarstrom S., Engvall Б., Johansson S.G.O. et al. Nature of the tumor associated determinants of CEA. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1975, v.72, p.1528-1536.
75. Hoffman D.R. Estimation of serum IgE by ELISA. J. Allergy Clin.Immunol., 1973, v.51, p.303-306.
76. Holmgren J., Svennerholm A.M. Enzyme linked immunosorbent assay for cholera serology. Infect, and Immunity, 1973» v.7, p.759-763.
77. Home C.N.W., Towler C.M., Fugh-Humphreys B. efc al. Pregnancy specific beta^-glycoprotein a product of the synctiotro-foblast. - Experiment, 1976, v.32, p.1197-1199.
78. Horne C.N.W., Bremmer R.D. Schwangerschafts-spezifisches ^-Glykoprotein (SP^)$ ein Tumormarker. Laboratoriumsbl. med. Diagn. (Pruher und Laboratoriumsblatter), 1982, Bd.32, N 2, S.81-82.
79. Joyce B.G., Read G.P., Pahmy D.R. A specific enzyme immunoassay for progesterone in human plasma. Steroids, 1977, v.29, p.761.
80. Kabakoff D.S. Application of protein conjugates. In: Enzyme-Immunoassay Ed. E.T.Maggio Boca Raton, Pla; CRS Press, 1980, p.71.
81. Kadagidze Z.G., Sokolov A.V., Tabagari D.Z. et al. TSBG immunosuppressive effect in embryonic antigens in oancer.- In: Embryonic antigens in cancer. Tallin, 1980, p.108.
82. Kaminska J., Calvent I., Rosen S.W. Radioimmunoassay of "pregnancy-specific" beta^-glycoprotein. Clin. Chem., 1979, v.25, p.577-580.
83. Kato K., Hamaguchi Y., Fukui H., Ishikawa E. Enzyme linked immunoassay, I, Novel method for synthesis of inculin $-D-galactosidase conjugate and its applicability for insulin assay. J. Biochem. (Tokyo), 1975, v.78, p.432-435.
84. Kato K., Hamaguchi Y., Fukui H., Ishikawa E. Enzyme linked immunosorbent conjugation of rabbit antibodies with ^-D-galactosidase. Eur. J. Biochem., 1976, v.62, p.285-287.
85. Kelsey D.E., Busch R.K., Busch H. An enzyme immunoassay for the detection of human tumor nuclear antigens. Cancer Lett., 1981, v.12, N4, p.295-303.
86. Kennedy J.H., Kricka L.J., Wilding P. Protein-protein coupling reactions and the applications of protein conjugates.- Clin. Chem. Acta, 1976, v.70, N 1, p.1-31.
87. Kirkpatrick A., Wepsic H.T., Nakamura R.M. Comparison of double antibody enzyme immunoassay for alpha-foetoprotein.- Clin. Chem., 1977, v.23, p.50-59.
88. Ishikawa E. Enzyme immunoassay of insulin by fluorometryof the insulin-glucoamylase complex. J. Biochem. (Tokyo), 1973, v.73, p.1319-1231.
89. Iwashita м. Клинические данные по измерению раково-эмбрионального антигена (РЭА) иммуноферментным методомг Jap.J.
90. Med. Technol., 1981, v.30, N 9, p.1133-1136. РЖ Онкология, 73, 1982, № 5, (Реф.) Збб.
91. Lin T.M., Halbert S.P., Kiefer D. Characterization and purification of human pregnancy-associated plasma proteins. -Bed. Proc., 1973, v.32, part 1.
92. Lin T.M., Halbert S.P., Kiefer D., Spelacy W.N. Three pregnancy-associated human plasma proteins: purification, monospecific antisera and immunological identification. Int. Arch. Allergy, 1974, v.47, p.35-53.
93. Lin T.M., Halbert S.P., Spelacy W.N. et al. Characterization of four human pregnancy-plasma proteins. Amer. J. Obstet. Gynecol., 1974, v.118, p.223-236.
94. Lin T.M., Halbert S.P., Spelacy W.N. Placental localization of human pregnancy-associated plasma protein. Science, 1976, v.193, p.1249-1252.
95. Lowry O.N., Rosenbrough N.I., Parr A.L., Raudall R.Y. Protein measurement with the folin phenol reagent. J. Biol. Chem., 1951, v.193, N 1, p.265-275.
96. Mac Donald P.J., Kelly A.M. The rapid quantitation of serum APP by two-side micro enzymoimmunoassay. Clin. Chem. Acta, 1978, v.78, p.367-372.
97. Maiolini R., Perrua В., Masseyeff R. Enzymoimmunoassay ofhuman alpha-foetoprotoln. J. Immunol. Meht., 1975, v.6, p.355-362.
98. Maiolini R., Masseyeff R. A sandwich method of enzymoim-munoassay. I. Application to rat and human alpha-protein. J. Immunol. Meth., 1975, v.8, p.223-234.
99. Maiolini R., Bagrei A., Chavans C. et al. Study of enzyme immunoassay kit for carcinoembryonic antigen. Clin. Chem. Acta, 1980, v.26, N 12, p.1718-1723.
100. Masseyeff R., Maiolini R., Perrua B. et al. Quantitation of alpha-foetoprotein by enzyme immunoassay. In: Pro-teides of the biological fluids. Ed. by H.Peeters, Oxford, 1976, v.24, p.605-612.
101. Mathiesen L.R., Peinstone S.M., Skinhoje P., Purcell R.M. Enzyme immunoassay for hepatitis A. In: 12th Meeting of the European Association for the study of liver, Ka-vouri, Greece, Sept. 1977, Abstr.11-4.
102. Mattiasson В., Borrebaeck C., Sanfridson B. et al. Thermo-metric enzyme linked immunosorbent assay: TELISA. Bio-chem. Biophys. Acta, 1977, v.483, N 2, p.221-227.
103. Mehta H.C., MacDonald D.J. A sensitivr enzyme immunoassay specific for human chorionic gonadotropin. Clin. Chim. Acta, 1982, v. 121, IT 2, p.245-250.
104. Kiyai K., Ishibashi K., Kumahara У. Enzyme linked immunoassay of thyrotropin. Clin. Chim. Acta, 1976, v.67,p.263-268.
105. Nakamura I. Evaluation of determination of plasma Cortisol concentration by enzyme immunoassay. Horumon to Ri-naho (Tokyo), 1982, v.30, N 6, p.639-643.
106. Nakane P.K., Pierce G.B. Enzyme-Labelled antibodies: Preparation and application for localisation of antigens. J. Histochem. Cytochem., 1966, v.14, p.929-937.
107. Nakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase labelled antibody. A new method of conjugation. J. Histochem. Cytochem., 1974, v.22, p. 1084-Ю91.
108. Nishida K., Sugiura M., Ioshikawa T. et al. Enzyme immunoassay of pancreatic oncofetal antigen (POA) in serum and pure pancreatic juice as a test for pancreatic cancer. Hepato-Gastroenterol., 1980, v.27, Suppl.,p.24«
109. Ogihara Т., Miyai K., Nishi K. et al. Enzyme labelled immunoassay for plasma Cortisol. J. Chem. Endocrin. Metob., 1982, v.23, N 2, p.204-210.
110. Olsvic 0. Detection of staphylococeal exterotoxin A,B,C. in milk by an ELISA procedure. Acta Veter. Scand., 1982, v.23, H 2, p.204-210.
111. Paone J.P., Baker R.R., Waalkes T.P., Shaper J.H. Sequential galactisyltransferase and carcinoembryonic antigen levels in advanced breast carcinoma. J. Surg. Res., 1981, v.31, N 4, p.269-273.
112. Perrot Y., de Certaines J., Ruelland A., Cloarec L. Dosage de la ferritine s^rique par immuno-enzymologieet radio-immunologie. Etude comparative de deux troussescommercialese Ann. Biol. Clin. (Paris), 1982, t.40, N 3, p.195-198.
113. Portsmann В., Portsmann Т., Gaede et al. Temperature dependent rise in activity of horseradish peroxidase caused by non-ionic detergents and its use in enzyme-im-munoassay. Clin. Chim. Acta, 1981, v.109, N 2, p.175-181.
114. Portsmann Т., Schmechta H., Lukowsky A. Enzymimmunoassay fur das schwangerschafts-assoziierte alpha-2 Glycoproteid (PAAG). Referenzbereich fur Manner, Dtsch. Gesundh.,1983» Bd. 38, N 3, S.123-126.
115. Rose S.P., Jolley M.E., Windle L.M. et la. A sensitive solid phase enzyme immunoassay for carcinoembryonic antigen. Ins Abstracts of the 6th Meeting. Intern* Research Group for Carcinoembryonic Proteins, Sept.,1978, p.206.
116. Rosen S.W., Javadpour N., Galvert I.S. et al. Increased "pregnancy-specific" beta^-glycoprotein in certain non-seminomatous germ cell tumors. J. Natl. Cancer Inst., 1979, v.62, p.1439-1441.
117. Schultz-Larsen P. Pregnancy specific beta^-glycoprotein refernce values and physiological variation in normal pregnancy. Scand. J. Immunol., 1978, v.8, N 8, Suppl., p.591-597.
118. Schultz-Larsen P., Hertz J. Pregnancy specific beta^-gly-coprotein in threatended abortion. Scand. J. Immunol., 1978, v.8, N 8, Suppl., p.599-602.
119. Schulze H., Schmechta H., Hallmann B. et al. Enzymimmuno-assay fur alpha-1-Fetoprotein bei Patienten mit Hoden-tumoren. Z. Urol, und Nephrol., 1983» Bd.76, N 3,1. S.137-144.
120. Schuurs A.H.W.M., Van Weemen B.K. Enzyme immunoassays. -Clin. Chim. Acta, 1977, v.81, p.1-40.
121. Seppala M., Rutanen E.M., Heikinheimo H. et al. Detection of trofoblastic tumor activity by pregnancy-specific beta^-glycoprotein. Int. J. Cancer, 1978, v.21, p.265-267.
122. Shimano Т., Loor R.M., Papsidero L.O. et al. Isolation, characterization and clinical evaluation of a pancreas cancer-associated antigen. Cancer, 1981, v.47, N 6, Suppl., p.1602-1613.
123. Sparacio R., Heney R.C., Bonacker L.U. An enzyme immunoassay for determination of human AFP. Fed. Pros.,1975, v.34, p.1024-1025.
124. Stimson W.N., Sinclair J.M. An immunoassay for a pregnancy associated alpha-macroglobulin using antibody enzymeconjugated. FEBS Letters, 1974, v.47, p.190-192.
125. Straube W., Rohde W., Hofman R., Klausch B. Untersuchun-gen zur Frage der Identitat schwangerschaftypischer Pro-teine mit HCJ und LN.LBI. Gynak., 1973, Bd.95, S.552-555.
126. Straub W., Hogmann R., Klausch B. et al. Immunochemische Untersuchungen zum Problem der "pregnancy zone". IX. Iso-lierung des Proteins der "pregnancy zone" durch Immuno-adsorption. Arch. Gynak., 1974, Bd.217, S.415-417.
127. Szymendara J., Zbrozil j., Sikorowa L. et al. Evaluation of five tumor markers (AFP, CEA, HCG and SP.j) in monitoring therapy and follow-up of patients with testicular germ cell tumors. Oncology, 1983, v.40, N 1, p.1-10.
128. Tanaka M. A sensitive enzyme immunoassay for the measurement of beta-thromboglobulin in plasma and urine. -Clin. Chim. Acta, 1982, v.123, N 1-2, p.111-119.
129. Talerman A. Alpha-fetoprotein and germ cell tumors. Crit. Eval. Tumor Markers. In: Proc. 2nd Int. Expert Meet. Germ. Found. Cancer Res., Bonn, May 11-14, 1979, Basel e.a., 1981, p.50-60.
130. Tarro G., Flaminio G., Maturo S. et al. Further studies on an immunoenzymatic assay for herpes simplex virus tumoiv-associated antigen. Clin. Immunol, and Immunopathol., 1982, v.25, N 1, p.126-132.
131. Tatarinov Yu.S., Mesnyakina N.V., Nikulina D.M. et al. Immunochemical identification of beta^globulin of the "pregnancy zone" in serum of patients with trofo-blastic tumors. Int. J. Cancer, 1974, v.14, p.548-554.
132. Tatarinov Yu.S., Falaleeva D.M., Kalashnikov V.V. et al. Immunofluorescent localization of human pregnancy-specific beta-globulin in placenta and choriоepithelioma.-Nature, 1976, v.260, p.263-264.
133. Tatarinov Yu.S., Falaleeva D.M., Kalashnikov V.V. Human pregnancy specific beta-globulin and its relations to choriоepithelioma. Int. J. Cancer, 1976, v.17, p.626-631.
134. Tatarinov Yu.S., Falaleeva D.M., Kozljaeva C.A. , Nikou-lina D.M. Human trofoblastic beta-globulin and chorio-epithelioma. In: Onco-developmental gene expression. New York, Academic Press, 1976, p.463-468.
135. Tatarinov Yu.S., Sokolov A.V. Development of radioimmunoassay for pregnancy-specific beta^-globulin and its measurement in serum of patients with trofoblastic and nontrofoblastic tumors. Int. J. Cancer, 1977, v.9, p.161-166.
136. Tatarinov Yu.S. Trofoblastic-specific. beta^-glycoprotein as a marker for pregnancy and malignancies. Gynecol. Obstet. Invest., 1978, v.9, p.65-97.
137. Tatra G., Breitenecker G., Gruber W. Serum concentrations of pregnancy-specific beta^-globulin (SP-j) in normal and pathological pregnancy. Arch. Gynaek., 1974, v.217, p.383-390.
138. Towler C.M., Glover R.G., Horne C.H.W. Problems encountered in the measurement of pregnancy-specific beta^-glycoprotein. Clin. Chim. Acta, 1978, v.87, p.289-296.
139. Ungar-Waron H., Davidson I., Trainin Z. A specific enzyme-linked immunosorbent assay for determination of bovine IgM: use in screening hybridoma cell lines. J. Immunol. Meth., 1982, v.53, N 2, p.175-182.
140. Uotila M., Reuslaliti E., Engvall E. Two-site sandwich enzyme immunoassay with monoclonal antibodies to human APP. J. Immunol. Meth., 1981, v.42, N 1, p.11-15.
141. Van Hell H., Boach A.M.G., Brands J.A.M. et al.Preg-nancy monitoring with enzyme enzyme-immunoassay for human placental lactogen and total oestrogens. Z. Analyt. Chem., 1976, v.279, p.143.
142. Van Weeman B.K., Schuurs A.H.W.M. Immunoassay using an-tibodyenzyme conjugates. PEBS Lett., 1974, v.43,p.215-218.
143. Van Weeman B.K., Schuurs A.H.W.M. The influence of heterologous combinations of antiserum and enzyme labelled oestrogen on the characteristics of oestrogen enzyme immunoassay, Immunochem., 1975» v.12, p.667.
144. Voller A., Bidwell D.E., Huldt G., Engvall E. A micro-plate method of enzyme linked immunosorbent assay and its application to malaria. Bull. Wld Hlth Org., 1974, v.51,p.209-211.
145. Voller A., Bidwell D.E., Bartlett A. Enzyme immunoassay in diagnostic medicine: Theory and Practice. Bull. WHO, 1976, v.53, p.55-65.
146. Voller A., Bidwell D.E., Bartlett A. Microplate enzyme immunoassays for the immunodiagnosis of virus infections. -In: Manual of Clinical Immunology, by N.Ross and H.Friedman, Washington, Ch. 69, 1976, p.506-512.
147. Voller A., Bartlett A., Bidwell D.E. Enzyme immunoassays with special reference to ELISA techniques. J. Clin. Path., 1978, v.31, p.507-520.
148. Wakenfield E.P. A quantitative ELISA for IgG in cell culture supernatants. Clin. Chim. Acta, 1982, v.123, N 3, p.303-310.
149. Wallen W.C., Mattson J.M., Levine P.H. Detection of soluble antigen of Epstein-Barr virus by the enzyme linked immunosorbent assay. J. Infect. Dis., 1977, v.136, Suppl., p.324-328.
150. Watson D. Correspondence. ELISA, a replacement for radioimmunoassay. Lancet, 1976, v.2, p.570.
151. Weissel M., Hofer R. Carcinoembryonic antigen (CEA) in thyroid cancer. Acta Endocrinol., 1983, v.102, Suppl., N 252, p.60-61.
152. WeItman J.K., Prackelton A.R., Szaro R.P., Rotmann B.
153. A galactosidase immunosorbent test for human immunoglobulin E. J. Allergy, 1976, v.58, p.426-431.
154. Wolters G., Kutjers I., Kasaki J., Schuurs A.H.W.M. Solid plase enzyme-immunoassay for detection of hepatitis В surface antigen. J. Clin. Path., 1976, v.29, p.873-879.
155. Wurz H. Serum concentration of SP1 (pregnancy-specific--beta-1-glycoprotein) in healthy nonpregnant individuals and patients with nontrofoblastic malignant neoplasms. -Arch. Gynaek.,1979, v.227, p.1-6.
156. Yalow R.S., Berson S.A. Assay of plasma insulin in human subjects by immunological methods. Nature, 1959, v.184, p.1648-1649.
157. Yolken R.H., Kim H.W., Clem T. et al. Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of human reovirus like agent of infantile gastroenteritis. Lancet, 1977, v.2, p.263-266.
158. Yord D.E., Sasse E.A., Wang T.Y., et al. Competitive enzyme linked with immunoassay with use of soluble enzyme antibody immune complexes for labelling. I. Measurementof human choriogonadotropin. Clin. Chem., 1976, v.22, p.1372-1377.
159. Zhao Jiaoi, Niu Puling, Yan Yanfang et al. Use of sandwich enzyme immunoassay with glass beads to detect lung cancer CEA and APP. Chim. Med. J., 1981, v.94, N 11, p.779-784.
160. Zotter V.St., Heidi G., Crossman H. et al. Microenzym-immunoassay zum Nachweis von karcinoembryonalen Antigen (CEA) unter Einsatz monoclonalen anti-CEA-Antikorpers. -Dtsch. Gesundheitsw., 1982, Bd.37, N 26^ S.1191-1192.